KR101728384B1 - Composition for enhancing immune activity comprising milk protein with high content of organic copper or iron as an active ingredient and preparation method thereof - Google Patents

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Abstract

유청 분말과 수용성 구리 또는 철 분말을 혼합한 혼합 분말에 물을 혼합하여 가열처리한 유기태화 구리 강화 유단백질 또는 유기태화 철 강화 유단백질은 단순히 미네랄의 생체 이용율을 증진시킬 뿐만 아니라, 이들 중 하나를 경구 투여함으로써, 혈액 내에서 대식세포(macrophage), 호중구(neutrophil), 단핵구(monocyte) 등과 같은 병원성 미생물의 침입에 1차적으로 저항하는 면역세포 및 자연살해(NK) 세포의 수를 증대시키고, 림프절에서 CD4 양성인 TH 세포(helper T-cell)와 CD8 양성인 TC 세포(cytotoxic T-cell)의 수를 증진시키며, 활성화된 대식세포(activated macrophage)에서 분비되는 면역 관련 사이토카인인 종양괴사인자-α(TNF-α) 및 인터류킨-1β(IL-1β)의 분비를 증진시켜 면역 증강 활성을 나타내므로, 면역 증강용 식품 조성물 또는 면역 증강용 약학 조성물의 유효성분으로 활용될 수 있다It has been found that the addition of water to a mixed powder of whey powder and water-soluble copper or iron powder to heat-treat the copper-enriched copper-rich or iron-enriched iron-rich protein not only enhances the bioavailability of the mineral, Thereby increasing the number of immune cells and natural killer (NK) cells that are primarily resistant to the entry of pathogenic microorganisms such as macrophages, neutrophils, and monocytes in the blood, H-positive T cells (helper T-cell) and CD8-positive sikimyeo increase the number of T C cells (cytotoxic T-cell), activated macrophages (activated macrophage) tumor immune-related cytokines secreted by necrosis factor -α ( TNF-α) and interleukin-1β (IL-1β), thereby exhibiting an immunostimulating activity. Therefore, the active ingredient of the immunoconjugation food composition or the immunomodulating pharmaceutical composition Can be used as

Figure 112014114029646-pat00012
Figure 112014114029646-pat00012

Description

유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질을 유효성분으로 하는 면역 증강용 조성물 및 그 제조방법{Composition for enhancing immune activity comprising milk protein with high content of organic copper or iron as an active ingredient and preparation method thereof}TECHNICAL FIELD The present invention relates to an immunoconjugate composition comprising an organic copper-copper or iron-enriched milk protein as an active ingredient and a method for preparing the same,

본 발명은 유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질을 유효성분으로 하는 면역 증강용 조성물에 관한 것으로, 상기 면역 증강용 조성물은 면역 증강용 식품 조성물 또는 면역 증강용 약학 조성물의 유효성분으로 활용될 수 있다.
The present invention relates to a composition for enhancing an immune response comprising an active ingredient of copper-on-iron or iron-enriched milk protein as an active ingredient. The composition for enhancing immunity can be used as an active ingredient of a food composition for immunity enhancement or a pharmaceutical composition for enhancing immunity.

한국등록특허 제1025272호는 가수분해 세리신 및 이와 결합된 미네랄을 포함하는 칼슘, 철분, 셀레늄, 아연 등의 유기태화 미네랄의 생체 이용율이 무기태 미네랄에 비해 현저히 우수함을 개시하고 있다.Korean Patent No. 1025272 discloses that the bioavailability of organic minerals such as calcium, iron, selenium and zinc, including hydrolyzed sericin and its associated minerals, is significantly better than that of inorganic minerals.

또한 한국등록특허 제1306931호는 살균처리되지 않은 유청과 수용성 칼슘을 혼합하여 가열처리한 유기태화 칼슘 강화 유단백질이 생체 이용율이 뛰어나 골다공증 예방 및 치료 효과를 나타냄을 개시하고 있다.Korean Patent No. 1306931 discloses that an organic calcium-enriched milk protein obtained by heat-treating a mixture of non-sterilized whey and water-soluble calcium has excellent bioavailability and thus exhibits osteoporosis prevention and therapeutic effects.

그러나 유청 분말과 수용성 구리 또는 철 분말을 혼합한 후 가열처리하여 제조한 본 발명의 유기태화 구리 강화 유단백질 또는 유기태화 철 강화 유단백질이 단순히 미네랄의 생체 이용율을 증진시키는 것뿐만 아니라, 이들 중 하나를 경구 투여함으로써, 혈액 내에서 대식세포(macrophage), 호중구(neutrophil), 단핵구(monocyte) 등과 같은 병원성 미생물의 침입에 1차적으로 저항하는 면역세포 및 자연살해(NK) 세포의 수를 증대시키고, 림프절에서 CD4 양성인 TH 세포(helper T-cell)와 CD8 양성인 TC 세포(cytotoxic T-cell)의 수를 증진시키며, 활성화된 대식세포(activated macrophage)에서 분비되는 면역 관련 사이토카인인 종양괴사인자-α(TNF-α) 및 인터류킨-1β(IL-1β)의 분비를 증진시켜 면역 증강 활성을 나타냄을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
However, it has been found that the inventive copper oxyapatite or iron-enriched hardened protein of the present invention prepared by mixing whey powder with water-soluble copper or iron powder and then heat-treating the present invention not only improves bioavailability of minerals, The number of immune cells and natural killer (NK) cells that primarily resist the invasion of pathogenic microorganisms such as macrophage, neutrophil and monocyte in the blood is increased and the number of lymphocytes in the lymph nodes CD4-positive T H cells (helper T-cells) and CD8-positive T C cells (cytotoxic T-cells), and the immune-related cytokine secreted from activated macrophages, tumor necrosis factor- (TNF-α) and interleukin-1β (IL-1β), and thus the present invention has been completed.

본 발명의 목적은 유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질을 유효성분으로 하는 면역 증강용 조성물을 제공하는 데 있다.It is an object of the present invention to provide a composition for enhancing immunity comprising an organotinized copper or iron-fortified milk protein as an active ingredient.

본 발명의 다른 목적은 면역증강 활성을 갖는 유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질의 제조방법을 제공하는 데 있다.
It is another object of the present invention to provide a method for producing an organochlorine copper or iron-enriched milk protein having an immunostimulating activity.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 유청 분말과 수용성 구리 또는 철 분말을 혼합한 혼합 분말에 물을 첨가하고 70 내지 100 ℃에서 10 분 내지 40 시간 가열처리하여 제조한 유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질을 유효성분으로 하는 면역 증강용 조성물을 제공한다.In order to attain the above object, the present invention relates to a method for producing a fermented milk of copper or iron-enriched hardwood produced by adding water to a mixed powder obtained by mixing whey powder and water-soluble copper or iron powder and heating at 70 to 100 ° C for 10 minutes to 40 hours As an effective ingredient.

상기 유청 분말은 비탈염 유청 분말 또는 탈염 유청 분말일 수 있다.The whey powder may be a non-demineralized whey powder or a demineralized whey powder.

상기 수용성 구리 또는 철 분말은 구리 또는 철의 황산염 또는 염화물일 수 있다.The water-soluble copper or iron powder may be a sulfate or a chloride of copper or iron.

상기 면역 증강용 조성물은 면역 증강용 식품 조성물 또는 면역 증강용 약학 조성물일 수 있다.The composition for enhancing immunity may be a food composition for enhancing immunity or a pharmaceutical composition for enhancing immunity.

또한 본 발명은 유청 분말과 수용성 구리 또는 철 분말을 혼합하는 단계; 및 상기 혼합 분말에 물을 첨가하여 70 내지 100 ℃에서 10 분 내지 40 시간 가열처리하는 단계;를 포함하는 면역증강 활성을 갖는 유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질의 제조방법을 제공한다.
The present invention also relates to a method for producing a fermented milk, comprising the steps of: mixing whey powder with aqueous copper or iron powder; And adding water to the mixed powder and heating the mixture at 70 to 100 ° C for 10 minutes to 40 hours. The present invention also provides a method for producing an iron-enriched copper or iron-rich protein having an immunostimulatory activity.

본 발명의 유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질은 혈액 내에서 대식세포(macrophage), 호중구(neutrophil), 단핵구(monocyte) 등과 같은 병원성 미생물의 침입에 1차적으로 저항하는 면역세포 및 자연살해(NK) 세포의 수를 증대시키고, 림프절에서 CD4 양성인 TH 세포(helper T-cell)와 CD8 양성인 TC 세포(cytotoxic T-cell)의 수를 증진시키며, 활성화된 대식세포(activated macrophage)에서 분비되는 면역 관련 사이토카인인 종양괴사인자-α(TNF-α) 및 인터류킨-1β(IL-1β)의 분비를 증진시켜 면역 증강 활성을 나타낸다.
The organotinized copper or iron fortified milk protein of the present invention is useful as an immunocompetent and natural killer (NK) cell primarily resistant to the invasion of pathogenic microorganisms such as macrophage, neutrophil, monocyte, increasing the number of and, CD4-positive T H cells (helper T-cell) and CD8-positive T C cells sikimyeo increase the number of (cytotoxic T-cell), activated macrophages (activated macrophage) immune secretion in the relevant in the lymph nodes (TNF-a) and interleukin-l [beta] (IL-l [beta]) which are cytokines and exhibit immune enhancing activity.

도 1a는 유기태화 칼슘 강화 유단백질(Ca-WPS)를 투여한 마우스의 혈액에서 대식세포, 호중구 및 단핵구 분포를 유세포분석기(FACS)로 확인한 그래프이다.
도 1b는 유기태화 칼슘 강화 유단백질(Ca-WPS)를 투여한 마우스의 혈액에서 NK세포 및 NKT세포 분포를 유세포분석기(FACS)로 확인한 그래프이다.
도 1c는 유기태화 칼슘 강화 유단백질(Ca-WPS)를 투여한 마우스의 림프절에서 대식세포, 호중구 및 단핵구 분포를 유세포분석기(FACS)로 확인한 그래프이다.
도 1d는 유기태화 칼슘 강화 유단백질(Ca-WPS)를 투여한 마우스의 림프절에서 CD8 T세포의 분포를 유세포분석기(FACS)로 확인한 그래프이다.
도 1e는 유기태화 칼슘 강화 유단백질(Ca-WPS)를 투여한 마우스의 림프절에서 CD4 T세포의 분포를 유세포분석기(FACS)로 확인한 그래프이다.
도 1f는 유기태화 칼슘 강화 유단백질(Ca-WPS)를 투여한 마우스의 대식세포에서 발현하는 사이토카인인 TNF-a와 IL-1b의 분비량을 무기 칼슘 및 유청 분말(WPS)과 비교한 그래프이다.
도 2a는 유기태화 구리 강화 유단백질(Cu-WPS)를 투여한 마우스의 혈액에서 대식세포, 호중구 및 단핵구 분포를 유세포분석기(FACS)로 확인한 그래프이다.
도 2b는 유기태화 구리 강화 유단백질(Cu-WPS)를 투여한 마우스의 혈액에서 NK세포 및 NKT세포 분포를 유세포분석기(FACS)로 확인한 그래프이다.
도 2c는 유기태화 구리 강화 유단백질(Cu-WPS)를 투여한 마우스의 림프절에서 대식세포, 호중구 및 단핵구 분포를 유세포분석기(FACS)로 확인한 그래프이다.
도 2d는 유기태화 구리 강화 유단백질(Cu-WPS)를 투여한 마우스의 림프절에서 CD8 T세포의 분포를 유세포분석기(FACS)로 확인한 그래프이다.
도 2e는 유기태화 구리 강화 유단백질(Cu-WPS)를 투여한 마우스의 림프절에서 CD4 T세포의 분포를 유세포분석기(FACS)로 확인한 그래프이다.
도 2f는 유기태화 구리 강화 유단백질(Cu-WPS)를 투여한 마우스의 대식세포에서 발현하는 사이토카인인 TNF-a와 IL-1b의 분비량을 무기 구리 및 유청 분말(WPS)과 비교한 그래프이다.
도 3a는 유기태화 철 강화 유단백질(Fe-WPS)를 투여한 마우스의 혈액에서 대식세포, 호중구 및 단핵구 분포를 유세포분석기(FACS)로 확인한 그래프이다.
도 3b는 유기태화 철 강화 유단백질(Fe-WPS)를 투여한 마우스의 혈액에서 NK세포 및 NKT세포 분포를 유세포분석기(FACS)로 확인한 그래프이다.
도 3c는 유기태화 철 강화 유단백질(Fe-WPS)를 투여한 마우스의 림프절에서 대식세포, 호중구 및 단핵구 분포를 유세포분석기(FACS)로 확인한 그래프이다.
도 3d는 유기태화 철 강화 유단백질(Fe-WPS)를 투여한 마우스의 림프절에서 CD8 T세포의 분포를 유세포분석기(FACS)로 확인한 그래프이다.
도 3e는 유기태화 철 강화 유단백질(Fe-WPS)를 투여한 마우스의 림프절에서 CD4 T세포의 분포를 유세포분석기(FACS)로 확인한 그래프이다.
도 3f는 유기태화 철 강화 유단백질(Fe-WPS)를 투여한 마우스의 대식세포에서 발현하는 사이토카인인 TNF-a와 IL-1b의 분비량을 무기 철 및 유청 분말(WPS)과 비교한 그래프이다.
FIG. 1A is a graph showing the distribution of macrophages, neutrophils and mononuclear cells in blood of a mouse administered with calcium-enriched milk protein (Ca-WPS) by a flow cytometer (FACS).
FIG. 1B is a graph showing the distribution of NK cells and NKT cells in blood of a mouse administered with calcium-enriched calcium-rich milk (Ca-WPS) by a flow cytometer (FACS).
1C is a graph showing the distribution of macrophages, neutrophils and mononuclear cells in a lymph node of a mouse administered with calcium-enriched milk protein (Ca-WPS) by a flow cytometer (FACS).
FIG. 1D is a graph showing the distribution of CD8 T cells in a lymph node of a mouse administered with calcium-enriched milk protein (Ca-WPS) by a flow cytometer (FACS).
FIG. 1E is a graph showing the distribution of CD4 T cells in a lymph node of a mouse administered with calcium-enriched milk protein (Ca-WPS) by a flow cytometer (FACS).
FIG. 1F is a graph comparing secretion amounts of TNF-a and IL-1b, which are cytokines expressed in macrophages of mice treated with calcium-enriched calcium-rich milk (Ca-WPS), with inorganic calcium and whey powder (WPS).
FIG. 2A is a graph showing the distribution of macrophages, neutrophils, and mononuclear cells in the blood of a mouse treated with copper-enriched copper-rich protein (Cu-WPS) by a flow cytometer (FACS).
FIG. 2B is a graph showing the distribution of NK cells and NKT cells in blood of a mouse administered with copper-enriched copper-rich protein (Cu-WPS) by a flow cytometer (FACS).
FIG. 2C is a graph showing the distribution of macrophages, neutrophils and mononuclear cells in a lymph node of a mouse administered with copper-enriched copper-rich protein (Cu-WPS) by a flow cytometer (FACS).
FIG. 2d is a graph showing the distribution of CD8 T cells in a lymph node of a mouse treated with copper-enriched copper-rich protein (Cu-WPS) by a flow cytometer (FACS).
FIG. 2E is a graph showing the distribution of CD4 T cells in a lymph node of a mouse administered with copper-enriched copper-rich protein (Cu-WPS) by a flow cytometer (FACS).
FIG. 2f is a graph comparing secretion amounts of TNF-a and IL-1b, which are cytokines expressed in macrophages of mice treated with copper-enriched copper-rich protein (Cu-WPS), with inorganic copper and whey powder (WPS).
FIG. 3A is a graph showing the distribution of macrophages, neutrophils, and mononuclear cells in the blood of a mouse administered with an iron-rich iron-rich protein (Fe-WPS) by a flow cytometer (FACS).
FIG. 3B is a graph showing the distribution of NK cells and NKT cells in the blood of a mouse to which iron oxide-enriched milk protein (Fe-WPS) was administered by flow cytometry (FACS).
FIG. 3c is a graph showing the distribution of macrophages, neutrophils and mononuclear cells in a lymph node of a mouse administered with an iron-rich iron-rich protein (Fe-WPS) by a flow cytometer (FACS).
FIG. 3D is a graph showing the distribution of CD8 T cells in a lymph node of a mouse administered with an iron oxide-enriched milk protein (Fe-WPS) by a flow cytometer (FACS).
FIG. 3E is a graph showing the distribution of CD4 T cells in a lymph node of a mouse administered with an iron-rich iron-rich protein (Fe-WPS) by a flow cytometer (FACS).
FIG. 3f is a graph comparing the secretion amounts of TNF-a and IL-1b, which are cytokines expressed in macrophages of mice administered with the iron oxide-enriched milk protein (Fe-WPS), with that of inorganic iron and whey powder (WPS).

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 유청 분말과 수용성 구리 또는 철 분말을 혼합한 혼합 분말에 물을 첨가하고 70 내지 100 ℃에서 10 분 내지 40 시간 가열처리하여 제조한 유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질을 유효성분으로 하는 면역 증강용 조성물에 관한 것이고, 또한 본 발명은 유청 분말과 수용성 구리 또는 철 분말을 혼합하는 단계; 및 상기 혼합 분말에 물을 첨가하여 70 내지 100 ℃에서 10 분 내지 40 시간 가열처리하는 단계;를 포함하는 면역증강 활성을 갖는 유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for improving immunity using an organochlorine-containing copper or iron-reinforced milk protein prepared by adding water to a mixed powder obtained by mixing whey powder and water-soluble copper or iron powder and heating the mixture at 70 to 100 ° C for 10 minutes to 40 hours The present invention also relates to a method for producing a fermented milk, comprising mixing a whey powder and an aqueous copper or iron powder; And adding water to the mixed powder and heating at 70 to 100 DEG C for 10 minutes to 40 hours. BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a method for producing an iron-enriched copper or iron-

상기 유청 분말은 비탈염 유청 분말 또는 탈염 유청 분말일 수 있다. 상기 유청 분말의 유단백 함량은 10 내지 20 중량%이다. 예를 들어, 원료의 종류, 제조방법 및 제조사에 따라 유단백 함량은 변화할 수 있으나, 일반적으로 비탈염 유청 분말은 12 내지 15 중량%, 탈염 유청 분말은 14 내지 17 중량%의 유단백을 포함한다.The whey powder may be a non-demineralized whey powder or a demineralized whey powder. The milk protein content of the whey powder is 10 to 20% by weight. For example, the milk protein content may vary depending on the kind of the raw material, the manufacturing method and the manufacturer, but generally 12 to 15% by weight of the non-desalted whey powder and 14 to 17% by weight of the demineralized whey powder are included.

상기 수용성 구리 또는 철 분말은 구리 또는 철의 황산염 또는 염화물일 수 있다. 예를 들어 수용성 구리 분말은 황산구리 분말, 수용성 철 분말은 황산제1철 분말일 수 있다.The water-soluble copper or iron powder may be a sulfate or a chloride of copper or iron. For example, the water-soluble copper powder may be a copper sulfate powder, and the water-soluble iron powder may be a ferrous sulfate powder.

상기 수용성 구리 또는 철 분말로 염화물 또는 황산염을 사용하는 경우 유기태화 구리 또는 철이 증가함에 따라 염소 이온 또는 황산 이온의 함량이 증가한다. 이러한 증가된 염소 이온 또는 황산 이온은 물로 세척하는 공정으로 간단히 제거될 수 있다. 예를 들어 황산구리를 용해하기 위해 사용된 물의 부피의 0.5 내지 10 배의 물, 바람직하게는 1 내지 2 배의 물을 사용하여 1 내지 5회 반복 세척을 통해 황산 이온의 농도를 무해한 수준으로 낮출 수 있다. 상기 세척은 적절한 양의 물을 첨가한 후 원심분리하여 상등액을 제거하는 방식, 예를 들어 500 내지 50,000 rpm에서 1 내지 60 분 원심분리할 수 있고, 이러한 원심분리과정은 온도 조건 설정없이 실온에서 수행될 수 있으나, 25 ℃ 이하로 온도를 일정하게 설정하여 수행될 수 있다.When chlorides or sulfates are used as the water-soluble copper or iron powder, the content of chlorine ions or sulfate ions increases as the amount of copper or iron organocarbons increases. These increased chlorine ions or sulfate ions can be simply removed by washing with water. For example, the concentration of the sulfate ion may be lowered to a harmless level by repeating 1-5 times using 0.5 to 10 times of the volume of water used to dissolve the copper sulfate, preferably 1 to 2 times of water have. The washing can be carried out by adding a suitable amount of water and centrifuging to remove the supernatant, for example, centrifuging at 500 to 50,000 rpm for 1 to 60 minutes. The centrifugation is carried out at room temperature without setting a temperature condition , But can be performed by setting the temperature constant to 25 DEG C or lower.

상기 유청 분말과 수용성 구리 또는 철 분말의 혼합 비율은 제조하려는 유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질에서의 유기태화 구리 또는 유기태화 철의 함량에 따라 그 함량을 조절할 수 있다. 예를 들어 유청 분말 100 중량부에 대하여, 수용성 구리 또는 철 분말을 1 내지 100 중량부 혼합할 수 있다.The mixing ratio of the whey powder and the water-soluble copper or iron powder can be adjusted depending on the content of copper oxides or organo-iron oxides in the copper or iron-enriched milk protein to be produced. For example, 1 to 100 parts by weight of water-soluble copper or iron powder may be mixed with 100 parts by weight of the whey powder.

상기 유청 분말과 수용성 구리 또는 철 분말의 혼합 분말에 혼합하는 물의 양은 상기 혼합 분말을 용해시키기에 필요한 양으로 조절할 수 있고, 예들 들어 유청 분말 100 중량부에 대하여, 200 내지 1500 중량부를 혼합할 수 있다.The amount of water to be mixed into the mixed powder of the whey powder and the water-soluble copper or iron powder may be adjusted to an amount necessary for dissolving the mixed powder, and for example, 200 to 1500 parts by weight may be mixed with 100 parts by weight of the whey powder .

상기 혼합 분말에 물을 첨가한 후 5 내지 60 분 동안 100 내지 500 rpm으로 교반하여 용해시킨 후, 70 내지 100 ℃, 바람직하게는 80 내지 90 ℃에서 10 분 내지 40 시간, 바람직하게는 15 분 내지 60 분 가열하여 유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질을 제조한다.After adding water to the mixed powder, the mixture is stirred at 100 to 500 rpm for 5 to 60 minutes to dissolve, and then the mixture is heated at 70 to 100 ° C, preferably at 80 to 90 ° C for 10 minutes to 40 hours, And heated for 60 minutes to produce an organochlorine-rich copper or iron-rich milk protein.

상기 면역 증강용 조성물은 면역 증강용 식품 조성물 또는 면역 증강용 약학 조성물일 수 있다.The composition for enhancing immunity may be a food composition for enhancing immunity or a pharmaceutical composition for enhancing immunity.

한편, 본 명세서에서 용어 '유효성분으로 포함하는'이란 본 발명의 유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질이 면역 증강 활성을 나타내는데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다. 본 발명의 면역 증강용 조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질을 0.1 내지 50 중량%로 포함하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.As used herein, the term " comprising as an active ingredient " means that the inventive copper or iron-enriched hardened protein of the present invention contains an amount sufficient to exhibit immunostimulatory activity. The composition for immunity enhancement of the present invention preferably comprises 0.1 to 50% by weight of the above-described copper or iron-enriched protein of iron ore on the basis of the total weight of the composition, but is not limited thereto.

본 발명의 면역 증강용 약학 조성물은 면역요법이 필요한 암질환 치료용 또는 백신용 면역증강제(adjuvant) 등으로 활용될 수 있다.The pharmaceutical composition for enhancing immunity of the present invention can be utilized as an adjuvant for treating cancer diseases or vaccines for immunization which is required for immunotherapy.

상기 약학 조성물은 약제의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.The pharmaceutical compositions may further comprise suitable carriers, excipients and diluents conventionally used in the manufacture of medicaments.

상기 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화 하여 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.The pharmaceutical compositions may be formulated in the form of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols and the like, oral preparations, suppositories and sterilized injection solutions according to conventional methods. Examples of carriers, excipients and diluents that can be included in the composition of the present invention include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, Cellulose, methylcellulose, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil.

제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘(calcium carbonate), 슈크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤젤라틴 등이 사용될 수 있다.In the case of formulation, a diluent or excipient such as a filler, an extender, a binder, a wetting agent, a disintegrant, or a surfactant is usually used. Solid formulations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules and the like, which may be formulated into the compositions of the present invention with at least one excipient such as starch, calcium carbonate, (sucrose), lactose, gelatin and the like. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc are also used. Examples of the liquid preparation for oral use include suspensions, solutions, emulsions, and syrups. In addition to water and liquid paraffin, simple diluents commonly used, various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances, preservatives and the like may be included . Formulations for parenteral administration include sterilized aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations, and suppositories. Examples of the suspending agent include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, and the like. As a suppository base, witepsol, macrogol, tween 61, cacao paper, laurin, glycerol gelatin and the like can be used.

상기 약학 조성물은 경구 또는 비경구로 투여될 수 있으며, 비경구 투여법이라면 어느 것이나 사용 가능하고, 전신 투여 또는 국소 투여가 가능하나, 전신 투여가 더 바람직하며, 정맥 내 투여가 가장 바람직하다.The pharmaceutical composition may be administered orally or parenterally. Any parenteral administration method may be used, and systemic administration or topical administration is possible, but systemic administration is more preferable, and intravenous administration is most preferable.

상기 약학 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 상기 약학 조성물은 유기태화 구리 또는 철 함량을 기준으로 1일 0.01 내지 200 ㎍/kg으로, 바람직하게는 구리 또는 철의 권장량을 고려하여 1 내지 20 ㎍/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.The preferred dosage of the pharmaceutical composition will vary depending on the condition and the weight of the patient, the degree of disease, the type of drug, the route of administration and the period of time, but can be appropriately selected by those skilled in the art. However, for the desired effect, the pharmaceutical composition may be administered at a dose of 0.01 to 200 占 퐂 / kg per day, preferably 1 to 20 占 퐂 / kg, based on the recommended amount of copper or iron, based on the content of copper or iron good. The administration may be carried out once a day or divided into several times. The dose is not intended to limit the scope of the invention in any way.

또한, 본 발명의 조성물은 면역 증강 활성이 필요한 노약자를 포함한 일반인은 물론 암질환자의 보조식이를 위한 식품 조성물로 이용될 수 있다.In addition, the composition of the present invention can be used as a food composition for an assisted diet of a cancer patient as well as a general person including an elderly person who needs immunity enhancing activity.

상기 식품 조성물에서, 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 드링크제, 육류, 소시지, 빵, 비스킷, 떡, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 알코올 음료 및 비타민 복합제, 유제품 및 유가공 제품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.In the above food composition, there is no particular limitation on the kind of food. Examples of foods to which the above substances can be added include dairy products including dairy products, meat, sausage, bread, biscuits, rice cakes, chocolate, candies, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gums, ice cream, Beverages, alcoholic beverages and vitamin complexes, dairy products, and dairy products, all of which include health functional foods in a conventional sense.

상기 유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강식품 중의 상기 화합물의 양은 전체 식품 중량의 0.1 내지 90 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.The organotinized copper or iron fortified milk protein may be added directly to the food or used with other food or food ingredients, and may be suitably used according to conventional methods. The amount of the active ingredient to be mixed can be suitably determined according to the intended use (for prevention or improvement). Generally, the amount of the compound in the health food may be 0.1 to 90 parts by weight of the total food. However, in the case of long-term intake intended for health and hygiene purposes or for the purpose of controlling health, the amount may be less than the above range, and since there is no problem in terms of safety, the active ingredient may be used in an amount exceeding the above range.

음료를 제조하는 경우 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다.In the case of producing a beverage, there are no particular restrictions on the other components other than those containing the above-mentioned organotitanated copper or iron-fortified milk protein as an essential ingredient at the indicated ratio, and various flavors or natural carbohydrates, . Examples of the above-mentioned natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose and the like; And polysaccharides, for example, conventional sugars such as dextrin, cyclodextrin and the like, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol. Natural flavors (tau martin, stevia extracts (e.g., rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavors (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used as flavors other than those described above The ratio of the natural carbohydrate is generally about 1 to 20 g, preferably about 5 to 12 g per 100 of the composition of the present invention.

상기 외에 본 발명의 유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
In addition to the above, the organotinized copper or iron fortified milk protein of the present invention can be used as a flavoring agent such as various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors and natural flavors, coloring agents and thickening agents (cheese, chocolate, etc.) Alginic acid and its salts, organic acids, protective colloid thickening agents, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonating agents used in carbonated drinks and the like. In addition, the organotinized copper or iron fortified milk protein of the present invention may contain natural fruit juice and pulp for the production of fruit juice drinks and vegetable drinks.

이하 본 발명을 실시예, 실험예 및 제조예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예, 실험예 및 제조예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예, 실험예 및 제조예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to Examples, Experimental Examples and Preparation Examples. However, the following Examples, Experimental Examples and Preparation Examples are merely illustrative of the present invention, and the content of the present invention is not limited to the following Examples, Experimental Examples and Production Examples.

제조예 1: 유기태화 미네랄의 제조Preparation Example 1: Preparation of organotinized minerals

유청 분말은 락토코리아(주)의 비탈염 유청 분말(이하 'WPS'라 함, 단백질 14 중량%)을 이용하였고, 무기 미네랄은 식용이 가능한 것으로 유기태화 칼슘 제조를 위해 염화칼슘(CaCl₂·2H₂O), 유기태화 철 제조를 위해 황산제1철(FeSO₄·7H₂O), 유기태화 구리 제조를 위해 황산구리(CuSO₄·7H₂O)를 이용하였다. The non-desalted whey powder (hereinafter referred to as "WPS", 14% by weight protein) of Lacto Korea was used as the whey powder, and calcium chloride (CaCl 2 .H 2 O), calcium chloride Ferrous sulfate (FeSO4 · 7H₂O) was used for the production of organic iron (FeSO4 · 7H₂O), and copper sulfate (CuSO₄ · 7H₂O) was used for the production of organic copper.

상기 WPS와 무기 미네랄은 5:1 중량비로 잘 섞이도록 혼합하였다. 이후 WPS 중량의 2배 중량의 증류수를 4회에 걸쳐 투입하며 격렬히 30분간 반응 후 80 ℃로 가온시켜 다시 30분간 150rpm에서 반응시켰다. 반응이 끝나면 상온에서 냉각시킨 후 25 ℃에서 20분 동안 4000rpm으로 원심분리하고 상등액을 제거한 후 침전물의 약 3배 부피의 물을 투입하여 침전물을 세척하는 것을 3회 반복하였다. 세척된 침전물은 분무건조하여 분말화하였다. 각각 제조된 유기태화 칼슘 강화 유단백질은 Ca-WPS, 유기태화 구리 강화 유단백질은 Cu-WPS, 유기태화 철 강화 유단백질은 Fe-WPS로 명명하였다.
The WPS and inorganic minerals were mixed in a weight ratio of 5: 1 so as to be mixed well. Then, distilled water having twice the weight of WPS was added thereto four times, followed by vigorous reaction for 30 minutes, followed by heating to 80 DEG C and reaction at 150 rpm for 30 minutes. After the reaction was completed, the reaction mixture was cooled at room temperature, centrifuged at 4000 rpm for 20 minutes at 25 ° C, and the supernatant was removed. The precipitate was washed three times with water of about 3 times the volume of the precipitate. The washed precipitate was spray dried and pulverized. The organotinized calcium-fortified milk protein and Ca-WPS, respectively, were named as Cu-WPS and Fe-WPS, respectively.

실험예 1: 유기태화 미네랄 강화 유단백질의 미네랄 분석Experimental Example 1: Mineral analysis of organic-mineralized milk-fortified milk protein

제조예 1의 미네랄 함량을 ICP 방법을 통해 분석하여 표 1에 나타내었다.The mineral content of Preparation Example 1 was analyzed by ICP method and shown in Table 1.

구분division WPSWPS Ca-WPSCa-WPS Fe-WPSFe-WPS Cu-WPSCu-WPS 칼슘(ppm)Calcium (ppm) 3,1113,111 38,88038,880 10,99010,990 5,7575,757 구리(ppm)Copper (ppm) NDND 0.440.44 1010 49,89049,890 철(ppm)Iron (ppm) 1.31.3 2525 19,12019,120 3535 아연(ppm)Zinc (ppm) NDND 3.553.55 7.47.4 2121 셀렌(ppm)Selenium (ppm) NDND NDND 1111 2.482.48

*ND는 불검출* ND is not detected

실험예 2: 동물실험을 통한 면역증강 효과 확인EXPERIMENTAL EXAMPLE 2: Confirmation of Immune Enhancement Effect by Animal Experiment

1. 실험동물의 사육 및 군의 분류1. Breeding and classification of experimental animals

5주령 Balb/C 수컷생쥐(ORIENTBIO Inc., Korea)를 구입하여 1주일간 순화시킨 후 체중을 측정하고 사용하였으며, 평균체중이 균등하도록 군당 5마리씩 WPS군 및 유기태화 미네랄 강화 유단백질 군으로 나누었다. 유기태화 미네랄 강화 유단백질 군은 농도별로 고농도, 중농도, 저농도로 나누었다. 사육조건으로는 3~4마리씩 사육하였으며, 온도는 20.0~25.0℃, 상대습도는 41.2~58.5%, 조도는 150~300Lux로 오전 7시부터 오후 7시까지 12시간 명암주기(조명시간)로 사육하였으며, 전남대학교 의과대학 사육가이드라인을 준수하여 사육하였다.Five week old Balb / C male rats (ORIENTBIO Inc., Korea) were purchased and weighed and weighed. The body weight was divided into five groups, WPS group and organically fortified mineral fortified milk protein group. Organic mineralized fortified milk protein was divided into high concentration, medium concentration and low concentration by concentration. 3 ~ 4 rabbits were kept at 20.0 ~ 25.0 ℃ temperature, 41.2 ~ 58.5% relative humidity and 150 ~ 300Lux light intensity. And they were kept in accordance with the Guideline for Breeding of Chonnam National University Medical School.

2. 유기태 미네랄 강화 유단백질 투여량 결정2. Organic mineral fortified milk protein dosage determination

식품의약품안전처 고시 기준에 따른 1일 미네랄 섭취량을 표 2에 나타내었다.The daily intake of minerals according to the Food and Drug Administration's safety standards is shown in Table 2.

구분division 성인(60kg 기준)Adult (based on 60kg) 마우스(20g 기준)Mouse (based on 20g) 칼슘calcium 210-800 mg210-800 mg 70-266 ㎍70-266 [mu] g 구리Copper 0.45-7.5 mg0.45-7.5 mg 0.15-2.5 ㎍0.15-2.5 [mu] g iron 4.5-45 mg4.5-45 mg 1.5-5 ㎍1.5-5 [mu] g

상기 식약처 고시 기준을 초과하지 않는 범위에서 표 1의 유기태화 미네랄 강화 유단백질의 미네랄 함량을 고려하여 각각 고농도, 중농도, 저농도를 계산하고, 마우스 1일 섭취량은 60kg인 사람을 기준으로 kg당 섭취량을 산정한 후 마우스의 몸무게 20g을 기준으로 하루 섭취량을 역계산하여 마우스의 1일 투여량을 표 3과 같이 결정하였다.The high concentration, medium concentration and low concentration were calculated in consideration of the minerals content of the organo-mineralized milk-derived milk protein of Table 1 within the range not exceeding the standard of the above-mentioned food service administration, and the intake per kg per kg , The daily intakes of the mice were calculated on the basis of the body weight of 20 g, and the daily dose of the mice was determined as shown in Table 3.

구분division WPSWPS Ca-WPSCa-WPS Cu-WPSCu-WPS Fe-WPSFe-WPS 고농도High concentration 260 ㎍260 [mu] g 260 ㎍260 [mu] g 2.32 ㎍2.32 [mu] g 5 ㎍5 [mu] g 중농도Medium concentration -- 168 ㎍168 [mu] g 1.2 ㎍1.2 [mu] g 3.1 ㎍3.1 [mu] g 저농도Low concentration -- 70 ㎍70 [mu] g 0.8 ㎍0.8 [mu] g 1.2 ㎍1.2 [mu] g

3. 실험방법3. Experimental Method

1) 사료1) Feed

사료는 실험동물용 고형사료(Rodent diet 2918C; Harlan Teklad, Indianapolis, IN, USA)으며, 식이와 음료는 자유급식을 하였다. 체중측정은 투여시작전과 6주 투여 후 2회 측정하였다.Feeds were fed with animal feed (Rodent diet 2918C; Harlan Teklad, Indianapolis, IN, USA) and diet and beverages were fed free. Body weights were measured twice before the start of treatment and after 6 weeks.

2) 혈액채취 및 조직적출2) Blood collection and tissue extraction

각 군별로 isoflurane으로 마취하고 개복하여 복대정맥으로부터 혈액을 채취하였다. 혈액을 채취한 후 림프절을 채취하였다.Each group was anesthetized with isoflurane and the blood was collected from the abdominal vein. Blood was collected and lymph nodes were collected.

3) 혈액의 면역세포학적 분석3) Immunocytochemical analysis of blood

채취된 혈액은 500 x g에서 5분간 원심분리함으로써 혈청을 분리하고, hemacytometer를 이용하여 각각 1x106세포씩 나누어 염색하지 않은 대조군, CD3, CD122, CD8a, CD4 마커 항체로 염색하고 유세포분석기(FACSAria)를 이용하여 면역세포학적 분석을 실시하였다. 유세포분석 시 살아있는 세포를 gating하여 살아있는 세포 내 마커 항체로 염색된 세포를 측정하였다. 대식세포, 호중구 및 단핵구 분포는 염색하지 않은 시료(unstained)에서 붉은색 화살표로 나타낸 부위이다. The blood sample is by 5 minutes centrifugation at 500 xg separate the serum, the control did not stain by dividing each one by 1x10 6 cells using a hemacytometer, CD3, CD122, CD8a, and stained with CD4 marker antibodies and flow cytometry (FACSAria) Were used for immunocytochemical analysis. During flow cytometry, living cells were gated to measure cells stained with live intracellular marker antibodies. The macrophage, neutrophil and mononuclear cell distribution is the area indicated by the red arrow in the unstained sample.

또한 NK세포 및 NKT세포는 염색하지 않은 시료(unstained)에 표시된 P4를 gate하여 분석하였다. NK세포는 좌측 상부면에 분포하고, NKT세포는 우측 상부면에 분포한다.In addition, NK cells and NKT cells were analyzed by gating P4 labeled on unstained samples. NK cells are distributed on the upper left side, and NKT cells are on the upper right side.

4) 림프절의 면역세포학적 분석4) Immunocytochemical analysis of lymph nodes

채취된 림프절은 100 pore size의 mesh에서 조심스럽게 으깨어 세포를 분리하였다. 분리된 세포는 원심분리 후 hemacytometer로 세포수를 확인하고 각각 1x106세포씩 나누어 염색하지 않은 대조군, CD3, CD122, CD8a, CD4 마커 항체로 염색하고 유세포분석기(FACSAria)를 이용하여 면역세포학적 분석을 실시하였다.유세포분석 시 살아있는 세포를 gating하여 살아있는 세포 내 마커 항체로 염색된 세포를 측정하였다.The collected lymph nodes were carefully dissected from the mesh of 100 pore size to separate the cells. The cells were separated by centrifugation and counted with a hemacytometer. The cells were stained with 1 × 10 6 cells in each well and stained with non-stained control, CD3, CD122, CD8a, CD4 marker antibody and analyzed by immunocytochemistry using a flow cytometer (FACSAria) In flow cytometry, living cells were gated to measure cells stained with a living intracellular marker antibody.

5) 사이토카인 분비능 측정5) Measurement of cytokine secretion ability

무기 미네랄, WPS 및 유기태화 미네랄 강화 유단백질을 각각 경구 투여한 마우스의 복강 내 대식세포를 추출하여 배양시킨 다음 배양 상층액으로부터 분비되는 사이토카인 (IL-1β,TNF-α) 분비량을 각각 측정하였다. 비부착성 세포를 제거하고 부착성 세포만을 얻은 후, 10%-FBS RPMI 1640, 37℃, 5% CO2 incubator (Sanyo)에서 48시간 배양하였다. 배양 상층액을 분리하여 배양액에 축적된 IL-1β, TNF-α의 양을 ELISA 사이토카인 kit (R&Dsystem, USA)를 이용하여 측정하였다.
(IL-1β, TNF-α) secreted from the culture supernatant were measured after the intraperitoneal macrophages were orally administered to the mice, which were orally administered with the mineral minerals, WPS, and the organo-mineralized milk protein. Non-adherent cells were removed and only adherent cells were obtained and cultured in 10% -FBS RPMI 1640, 37 ° C, 5% CO2 incubator (Sanyo) for 48 hours. The amount of IL-1β and TNF-α accumulated in the culture supernatant was measured by ELISA cytokine kit (R & Dsystem, USA).

4. 실험결과4. Experimental results

1) 혈액의 대식세포, 호중구 및 단핵구 분포1) Distribution of macrophages, neutrophils and mononuclear cells in blood

유기태화 칼슘 강화 유단백질(Ca-WPS)을 투여한 마우스의 혈액에서 macrophage, neutrophil, monocyte population을 조사한 결과 WPS만을 투여한 마우스에 비해 현저한 차이를 나타내지 않았으며, 농도별로도 차이가 없었다(도 1a). The macrophage, neutrophil, and monocyte populations in the blood of mice treated with calcium-enriched calcium-rich milk (Ca-WPS) did not show any significant difference compared to mice administered with WPS only, .

유기태화 구리 강화 유단백질(Cu-WPS)를 투여한 군에서는 WPS만을 투여한 마우스에 비해 macrophage, neutrophil, monocyte population에서 현저한 차이를 나타내었으며, 1.2 ㎍을 투여한 군에서 특별히 높았다(도 2a).In the Cu-WPS-treated group, there was a significant difference in the macrophage, neutrophil and monocyte populations compared with the WPS-only mice, and it was particularly high in the group administered with 1.2 μg (FIG. 2a).

유기태화 철 강화 유단백질(Fe-WPS)을 투여한 마우스의 혈액에서 macrophage, neutrophil, monocyte population 을 조사한 결과 WPS만을 투여한 마우스에 비해 현저한 차이를 나타내었으며, 1.2 ug을 투여한 군에서 약간 높았다(도 3a).
The macrophage, neutrophil, and monocyte populations of the mice treated with the iron-rich iron-rich milk protein (Fe-WPS) were significantly different from those of the WPS-only mice and slightly higher in the 1.2 μg 3a).

2) 혈액의 NK세포 분포2) NK cell distribution of blood

유기태화 칼슘 강화 유단백질(Ca-WPS)을 투여한 마우스의 혈액에서 NK세포 및 NKT세포의 분포를 조사한 결과 WPS만을 투여한 마우스에 비해 현저한 차이를 나타내지 않았으며, 농도별로도 차이가 없었다(도 1b).The distribution of NK cells and NKT cells in the blood of mice treated with calcium-enriched Ca-enhanced milk (Ca-WPS) showed no significant difference compared to mice administered with WPS alone, ).

유기태화 구리 강화 유단백질(Cu-WPS)를 투여한 군에서는 WPS만을 투여한 마우스에 비해 NKT cell에서는 현저한 차이를 나타내지 않았으나, NK cell population에서는 증가하였다(도 2b).In the Cu-WPS-treated group, the NKT cells did not show a significant difference compared to the WPS-treated mice, but increased in the NK cell population (FIG. 2B).

유기태화 철 강화 유단백질(Fe-WPS)을 투여한 군에서는 NKT cell에서는 현저한 차이를 나타내지 않았으나, NK cell population에서는 증가하였다(도 3b).
In the group treated with the iron-rich iron-rich protein (Fe-WPS), there was no significant difference in the NKT cells, but it was increased in the NK cell population (FIG.

3) 림프절의 대식세포, 호중구 및 단핵구 분포3) Distribution of macrophages, neutrophils and monocytes in lymph nodes

유기태화 칼슘 강화 유단백질(Ca-WPS)을 투여한 마우스의 림프절에서도 혈액과 마찬가지로 macrophage, neutrophil, monocyte population 을 조사한 결과 WPS만을 투여한 마우스에 비해 현저한 차이를 나타내지 않았다(도 1c).The macrophage, neutrophil, and monocyte populations of the lymphocytes treated with calcium-enriched Ca-enhanced milk protein (Ca-WPS), as well as blood, did not show a significant difference compared to mice administered with WPS only (FIG.

유기태화 구리 강화 유단백질(Cu-WPS)를 투여한 군에서는 WPS만을 투여한 마우스에 비해 현저히 증가하였다(도 2c).(Cu-WPS) group than in the group treated with WPS only (Fig. 2C).

유기태화 철 강화 유단백질(Fe-WPS)을 투여한 군에서는 WPS만을 투여한 마우스에 비해 현저히 증가하였다(도 3c).
(Fe-WPS) group significantly increased compared to mice administered only WPS (FIG. 3c).

4) 림프절의 CD8 및 CD4 양성 T세포의 분포4) Distribution of CD8 and CD4-positive T cells in lymph nodes

유기태화 칼슘 강화 유단백질(Ca-WPS)을 투여한 마우스의 림프절에서 CD8+ T cell population을 조사한 결과 WPS만을 투여한 마우스에 비해 감소하는 경향을 나타내었고(도 1d), CD4+ cell population을 조사한 결과 WPS만을 투여한 마우스에 비해 CD4+ T cell population에서는 감소하였다(도 1e).The CD8 + T cell population in the lymph nodes of the mice treated with the calcium-enriched Ca-enhanced milk protein (Ca-WPS) showed a tendency to decrease compared to the mice treated with WPS only (Fig. 1d) (FIG. 1e) in the CD4 + T cell population.

유기태화 구리 강화 유단백질(Cu-WPS)를 투여한 군에서는 CD8+ T cell population을 조사한 결과 WPS만을 투여한 마우스에 비해 증가하는 경향을 나타내었고(도 2d), CD4+ T cell population도 증가하였다(도 2e).In the group administered with Cu-WPS, the CD8 + T cell population showed a tendency to increase as compared to the group treated with WPS only (Fig. 2d), and the CD4 + T cell population also increased (Fig. 2e ).

유기태화 철 강화 유단백질(Fe-WPS)을 투여한 군에서 CD8+ T cell population을 조사한 결과 WPS만을 투여한 마우스에 비해 증가하는 경향을 나타내었고(도 3d), CD4+ T cell population도 증가하였다(도 3e).
The CD8 + T cell population in the group treated with the iron-rich iron-rich milk protein (Fe-WPS) showed an increase tendency as compared with the group treated with the WPS alone (FIG. 3D) ).

5) 대식세포의 IL-1β 및 TNF-α 분비량5) IL-1β and TNF-α secretion of macrophages

유기태화 칼슘 강화 유단백질(Ca-WPS)을 투여한 마우스의 대식세포에서 발현하는 사이토카인인 TNF-a와 IL-1b의 분비량을 조사한 결과, 유기태화 칼슘 강화 유단백질을 투여한 마우스가 무기 칼슘이나 WPS만을 투여한 마우스보다 사이토카인의 분비량이 증가하는 경향을 보였으나, WPS만을 투여한 군에 비해 유의적인 증가는 보이지 않았다(도 1f).As a result of the secretion amount of TNF-a and IL-1b, which are cytokines expressed in macrophages of mice administered with calcium-enriched calcium-enriched milk protein (Ca-WPS), mice treated with calcium- The amount of cytokine secretion tended to be higher than that of the group administered only WPS, but did not show a significant increase (Fig. 1f).

유기태화 구리 강화 유단백질(Cu-WPS)를 투여한 군에서 무기 구리나 WPS만을 투여한 마우스보다 사이토카인 TNF-a와 IL-1b의 분비량이 현저히 증가하였다(도 2f).The amount of cytokine TNF-a and IL-1b secretion was significantly increased in mice treated with copper-enriched copper-rich milk protein (Cu-WPS) or mice treated with WPS only (FIG. 2f).

유기태화 철 강화 유단백질(Fe-WPS)를 투여한 군에서 무기 철이나 WPS만을 투여한 마우스보다 사이토카인 TNF-a와 IL-1b의 분비량이 현저히 증가하였다(도 3f).
The secretion of cytokines TNF-a and IL-1b was significantly increased in the group treated with the iron-rich iron-rich milk protein (Fe-WPS) and the group treated with WPS alone (FIG.

아래에 본 발명의 제제예를 설명하나, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하기 위한 것이다.The formulation examples of the present invention are described below, but are for the purpose of illustration only and not for purposes of limitation of the present invention.

<제제예 1> 약학적 제제의 제조 &Lt; Formulation Example 1 > Preparation of pharmaceutical preparation

1-1. 산제의 제조1-1. Manufacture of Powder

제조예 1의 유기태화 구리 강화 유단백질 500 ㎎500 mg of the organotin-coated copper-enriched milk protein of Preparation Example 1

유당 100 ㎎Lactose 100 mg

탈크 10 ㎎10 mg of talc

상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
The above components are mixed and filled in airtight bags to prepare powders.

1-2. 정제의 제조1-2. Manufacture of tablets

제조예 1의 유기태화 철 강화 유단백질 500 ㎎500 mg of the organo-iron-enriched milk protein of Preparation Example 1

옥수수전분 100 ㎎Corn starch 100 mg

유당 100 ㎎Lactose 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 ㎎2 mg of magnesium stearate

상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
After mixing the above components, tablets are prepared by tableting according to the usual preparation method of tablets.

1-3. 캅셀제의 제조1-3. Manufacture of capsules

제조예 1의 유기태화 구리 강화 유단백질 500 ㎎500 mg of the organotin-coated copper-enriched milk protein of Preparation Example 1

옥수수전분 100 ㎎Corn starch 100 mg

유당 100 ㎎Lactose 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 ㎎2 mg of magnesium stearate

통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
The above components are mixed according to a conventional capsule preparation method and filled in gelatin capsules to prepare capsules.

제조예2: 건강기능식품(분말형)의 제조Production Example 2: Preparation of health functional food (powder type)

제조예 1의 유기태화 철 강화 유단백질 1000 ㎎1000 mg of the organotin-iron-fortified milk protein of Preparation Example 1

비타민 혼합물 적량Vitamin mixture quantity

비타민 A 아세테이트 70 ㎍70 [mu] g of vitamin A acetate

비타민 E 1.0 ㎎Vitamin E 1.0 mg

비타민 0.13 ㎎0.13 mg of vitamin

비타민 B2 0.15 ㎎0.15 mg of vitamin B 2

비타민 B6 0.5 ㎎0.5 mg of vitamin B 6

비타민 B12 0.2 ㎍Vitamin B 12 0.2 g

비타민 C 10 ㎎10 mg vitamin C

비오틴 10 ㎍Biotin 10 μg

니코틴산아미드 1.7 ㎎Nicotinic acid amide 1.7 mg

엽산 50 ㎎50 mg of folic acid

판토텐산 칼슘 0.5 ㎎Calcium pantothenate 0.5 mg

무기질 혼합물 적량Mineral mixture quantity

황산제1철 1.75 ㎎1.75 mg of ferrous sulfate

산화아연 0.82 ㎎0.82 mg of zinc oxide

탄산마그네슘 25.3 ㎎Magnesium carbonate 25.3 mg

제1인산칼륨 15 ㎎15 mg of potassium phosphate monobasic

제2인산칼슘 55 ㎎Secondary calcium phosphate 55 mg

구연산칼륨 90 ㎎Potassium citrate 90 mg

탄산칼슘 100 ㎎100 mg of calcium carbonate

염화마그네슘 24.8 ㎎24.8 mg of magnesium chloride

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
Although the composition ratio of the above-mentioned vitamin and mineral mixture is comparatively mixed with a composition suitable for health food as a preferred embodiment, the compounding ratio may be arbitrarily modified, and the above ingredients are mixed according to a conventional method for producing healthy foods , Granules can be prepared and used in the manufacture of health food compositions according to conventional methods.

제조예 3: 건강기능식품(음료형)의 제조Production Example 3: Preparation of health functional foods (beverage type)

제조예 1의 유기태화 구리 강화 유단백질 1000 ㎎1000 mg of the organotin-coated copper-enriched milk protein of Preparation Example 1

구연산 1000 ㎎Citric acid 1000 mg

올리고당 100 g100 g of oligosaccharide

매실농축액 2 gPlum concentrate 2 g

타우린 1 gTaurine 1 g

정제수를 가하여 전체 900 ㎖Purified water was added to a total of 900 ml

통상의 건강 음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2l 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 건강 음료 조성물 제조에 사용하였다.The above components were mixed according to a conventional health drink manufacturing method, and the mixture was stirred and heated at 85 for about 1 hour. The resulting solution was filtered and sterilized in a sterilized 2 liter container, And used for manufacturing.

상기 조성비는 비교적 기호 음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호 도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
Although the composition ratio is relatively mixed with the ingredient suitable for the favorite drink, it is also possible to arbitrarily modify the blending ratio according to the regional or national preference such as the demand class, demand country, use purpose, and the like.

제조예 4: 건강기능식품(츄잉검)의 제조Production Example 4: Preparation of health functional foods (chewing gum)

껌베이스 20 %Gum base 20%

설탕 76.36~76.76 %Sugar 76.36 ~ 76.76%

제조예 1의 유기태화 철 강화 유단백질 0.24~0.64 %The iron oxide-enriched milk protein of Production Example 1 0.24 to 0.64%

후르츠향 1 %Fruit flavor 1%

물 2 %Water 2%

상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 츄잉껌을 제조하였다.
Chewing gum was prepared using the above-mentioned composition and content by a conventional method.

제조예 5: 건강기능식품(밀가루 식품)의 제조Preparation Example 5: Preparation of health functional foods (wheat flour foods)

제조예 1의 유기태화 구리 강화 유단백질 0.5 내지 5 중량부를 밀가루 100 중량부에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.
0.5 to 5 parts by weight of the organotin-modified copper-enriched milk protein of Preparation Example 1 was added to 100 parts by weight of wheat flour, and bread, cake, cookies, crackers and noodles were prepared using this mixture to prepare health improving foods.

제조예Manufacturing example 6: 건강기능식품(유제품)의 제조 6: Manufacture of functional foods (dairy products)

제조예 1의 유기태화 철 강화 유단백질 5 내지 10 중량부를 우유 100 중량부에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.5 to 10 parts by weight of the iron oxide-enriched milk protein of Preparation Example 1 were added to 100 parts by weight of milk and various dairy products such as butter and ice cream were prepared using the milk.

Claims (5)

삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 유청 분말과 수용성 구리 또는 철의 황산염 또는 염화물 분말을 분말혼합하는 단계; 및 상기 혼합 분말에 물을 첨가하여 70 내지 100 ℃에서 10 분 내지 40 시간 가열처리하는 단계;를 포함하는 면역증강 활성을 갖는 유기태화 구리 또는 철 강화 유단백질의 제조방법.Powder mixing the whey powder and the aqueous sulfate or chloride powder of iron or iron; And adding water to the mixed powder and heating the mixture at 70 to 100 ° C for 10 minutes to 40 hours to prepare an iron-enriched copper or iron-rich protein having immunity enhancing activity.
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[지역경제]영광군, 식품 가공기업 메티뉴트롤과 투자협약 체결. NSP통신, [online], 2014.11.10., 인터넷: <URL: http://www.nspna.com/news/?mode=view&newsid=104472>*

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