KR101725048B1 - Carbohydrate and protein separation process from food waste - Google Patents

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Abstract

본 발명은 음식물 쓰레기에서의 탄수화물 및 단백질 분리 공정에 관한 것으로, 지질이 제거된 유기성 폐기물을 분쇄하는 단계(단계1); 상기 분쇄된 유기성 폐기물에 미생물 배양액을 첨가하는 단계(단계2); 상기 단계2에서 제조된 혼합물에 증류수를 첨가하는 단계(단계3); 및 상기 단계3에서 제조된 혼합물에서 탄수화물을 분리하는 단계(단계4)를 포함하는, 지질이 제거된 유기성 폐기물의 재활용 방법을 제공하며, 상기와 같은 방법을 통해 지질이 제거된 음식물 쓰레기로부터 탄수화물과 단백질을 분리하는 공정을 통하여 버려지는 유기물 없이 음식물 쓰레기를 완전히 재자원화 할 수 있다.The present invention relates to a process for separating carbohydrates and proteins in food wastes, comprising the steps of (1) crushing organic wastes from which lipid has been removed; Adding a microbial culture liquid to the pulverized organic waste (step 2); Adding distilled water to the mixture prepared in step 2 (step 3); And separating the carbohydrate from the mixture prepared in the step 3 (step 4). In the method of recycling organic waste from which lipid has been removed, the carbohydrate from the lipid- Food waste can be completely recycled without the organic matter being abandoned through the process of separating the protein.

Description

음식물 쓰레기에서의 탄수화물 및 단백질 분리 공정 {Carbohydrate and protein separation process from food waste}[0001] Carbohydrate and protein separation processes in food waste [0003]

본 발명은 음식물 쓰레기에서의 탄수화물 및 단백질 분리 공정에 관한 것으로, 구체적으로는 지방이 제거된 음식물 쓰레기에서 탄수화물과 단백질을 분리하는 방법 및 분리된 탄수화물과 단백질을 재활용하는 방법에 관한 것이다.
The present invention relates to a process for separating carbohydrates and proteins from food wastes, and more particularly, to a method for separating carbohydrates and proteins from food wastes from which fat is removed, and a method for recycling separated carbohydrates and proteins.

일반적으로 수거되어지는 음식물 쓰레기는 건조, 소각 및 퇴비화를 통해 처리되나, 이러한 처리 방법은 비용이 많이 들고, 소각으로 처리되는 경우 공해가 발생할 수 있어 소각보다는 비료나 사료 등으로 재자원화 하는 처리 방법이 선호되고 있는 추세이다.Generally, the food waste to be collected is processed through drying, incineration and composting. However, such a treatment method is costly, and when it is treated by incineration, pollution may occur. Therefore, a method of recycling to fertilizer or feed rather than incineration This trend is favored.

그러나 음식물 쓰레기로부터 재자원화 된 비료나 사료는 처리 비용에 비해 단가가 낮고 재순환의 경제 효율이 낮다는 문제가 있으며, 이러한 비료와 사료는 큰 수요가 없을 뿐만 아니라 도시 단위 지역에서는 수요를 기대하기 어렵다는 문제가 있다. However, fertilizers and feedstuffs recycled from food waste have a problem of low cost and low economic efficiency of recycling, and there is a problem that these fertilizers and feedstuffs are not in great demand and that demand is not expected in urban areas .

국내에서는 외국과 다르게 음식물 쓰레기를 모아서 버리기 때문에 국내 상황에 맞는 독자적인 기술과 음식물 쓰레기의 처리를 위한 공정의 단순화가 요구되고 있다.In Korea, unlike foreign countries, food waste is collected and discarded. Therefore, it is required to simplify the process for disposal of food waste and unique technology for domestic situation.

매립지 부족으로 인한 음식물 쓰레기 처리에 관한 환경 문제 및 에너지 문제의 해결이라는 측면에서 보았을 때 음식물 쓰레기의 처리와 활용에 관한 연구가 필요하며, 특히 화석 연료의 과다 사용에 따른 자원 고갈, 환경오염 및 온난화 문제를 해결하기 위해 화석 연료의 사용에 대한 규제 강화 및 신재생에너지의 보급을 확산하려는 트렌드를 고려해 볼 때에도 음식물 쓰레기 처리에 관한 다양한 연구가 필요하다.
From the viewpoint of solving environmental problems and energy problems related to the treatment of food waste due to the shortage of landfill, it is necessary to study the treatment and utilization of food waste. Especially, resource depletion due to excessive use of fossil fuel, environmental pollution and warming , It is necessary to study various aspects of food waste disposal in consideration of the trend of strengthening regulations on the use of fossil fuels and spreading of renewable energy.

본 발명의 목적은 지질이 제거된 음식물 쓰레기로부터 탄수화물 및 단백질을 분리하는 방법을 제공하는 데 있다.It is an object of the present invention to provide a method for separating carbohydrate and protein from lipid-removed food waste.

본 발명의 목적은 지질이 제거된 음식물 쓰레기를 이용하여 Zero-waste 자원 회수 방법을 제공하는 데 있다.An object of the present invention is to provide a method of recovering zero-waste resources by using food waste from which lipid is removed.

또한, 본 발명의 목적은 회수된 탄수화물 및 단백질을 이용하여 유용물질을 제조하는 방법을 제공하는 데 있다.
It is also an object of the present invention to provide a method for producing useful substances using recovered carbohydrates and proteins.

상기 과제를 해결하기 위하여 본 발명은 지질이 제거된 유기성 폐기물을 분쇄하는 단계(단계1); 상기 분쇄된 유기성 폐기물에 미생물 배양액을 첨가하는 단계(단계2); 상기 단계2에서 제조된 혼합물에 증류수를 첨가하는 단계(단계3); 상기 단계3에서 제조된 혼합물에서 탄수화물을 분리하는 단계(단계4)를 포함하는, 지질이 제거된 유기성 폐기물의 재활용 방법을 제공한다.In order to solve the above-mentioned problems, the present invention provides a method for treating organic wastes, comprising the steps of: (1) crushing organic wastes from which lipid has been removed; Adding a microbial culture liquid to the pulverized organic waste (step 2); Adding distilled water to the mixture prepared in step 2 (step 3); And separating the carbohydrate from the mixture produced in step 3 (step 4).

상기 미생물 배양액은 원심분리 된 Bacillus thuringiensis 배양액의 상층액일 수 있다.The microbial culture may be a supernatant of a centrifuged culture of Bacillus thuringiensis.

상기 단계4의 탄수화물을 분리하는 단계는 상기 단계3에서 제조된 혼합물의 상층액을 증발시키고 남은 잔유물을 회수하는 것일 수 있다.The step of separating the carbohydrate in step 4 may be to evaporate the supernatant of the mixture prepared in step 3 and to recover the remaining residue.

상기 단계4에서 분리된 탄수화물을 이용하여 유용물질을 생산하는 단계를 더 포함할 수 있다.The method may further include the step of producing a useful substance using the carbohydrate separated in the step 4.

상기 분리된 탄수화물을 이용하여 생산된 유용물질은 젖산 또는 알코올일 수 있다.The useful substance produced using the separated carbohydrate may be lactic acid or alcohol.

상기 분리된 탄수화물을 이용하여 유용물질을 생산하는 단계는 Lactobacillus를 이용하여 배양하는 것일 수 있으며, Yeast를 이용하여 발효하는 것일 수 있다.The step of producing a useful substance using the separated carbohydrate may be performed using Lactobacillus or may be performed using Yeast.

상기 단계4에서 탄수화물을 분리하고 남은 혼합액으로부터 단백질을 분리하는 단계(단계5)를 더 포함할 수 있다.Separating the carbohydrate from the step 4 and separating the protein from the remaining mixture (step 5).

상기 단백질을 분리하는 단계는 상기 탄수화물을 분리하고 남은 혼합액 하층의 잔유물을 회수하는 것일 수 있다.The step of separating the protein may be a step of separating the carbohydrate and recovering the remnant of the remaining mixed liquor.

상기 단계5에서 분리된 단백질을 이용하여 유용물질을 생산하는 단계를 더 포함할 수 있다.The method may further include a step of producing a useful substance using the protein separated in the step 5.

상기 분리된 단백질을 이용하여 생산된 유용물질은 지질, 알코올 또는 젖산인 것을 특징으로 하는 지질이 제거된 유기성 폐기물의 재활용 방법.Wherein the useful substance produced using the separated protein is a lipid, an alcohol, or a lactic acid.

상기 분리된 단백질을 이용하여 유용물질을 생산하는 단계는 Bacillus subtilis 또는 bacillus thurengensis를 이용하여 배양하는 것일 수 있으며, Lactobacillus를 이용하여 배양하는 것일 수 있고, Yeast를 이용하여 발효하는 것일 수 있다.The step of producing the useful substance using the separated protein may be carried out using Bacillus subtilis or bacillus thurengensis, or may be performed using Lactobacillus or may be performed using Yeast.

상기 지질이 제거된 유기성 폐기물은 수거된 분뇨 폐기물과 음식물 폐기물 등 지방을 포함한 유기성 폐기물을 분쇄기로 분쇄하고 협잡물을 분리한 후, 수분량을 감소시키고 용매를 공급하여 지방을 분리하는 단계를 통해 제조된 지질이 제거된 유기성 폐기물일 수 있다.
The organic waste from which the lipid has been removed is obtained by pulverizing organic wastes including fat such as manure waste and food wastes collected by a pulverizer, separating the impurities, separating the fat by supplying water and reducing the amount of water, May be removed organic wastes.

본 발명은 지질이 제거된 음식물 쓰레기로부터 탄수화물과 단백질을 분리하는 공정을 통하여 버려지는 유기물 없이 음식물 쓰레기를 완전히 재자원화 할 수 있다.The present invention can completely recycle food waste without organic matter abandoned through the process of separating carbohydrates and proteins from the food waste from which lipid has been removed.

본 발명은 음식물 쓰레기의 바이오매스 자원화를 제공하여 바이오 에너지, 바이오 화합물 등 다양한 유용물질 생산을 위한 재순환 공정시스템의 구축이 가능하며, 이를 통해 음식물 쓰레기로부터 유용한 자원을 획득할 수 있다.The present invention provides a biomass resource recovery of food waste, and it is possible to construct a recycling process system for producing various useful materials such as bio-energy, bio-compound, etc., thereby obtaining useful resources from food waste.

본 발명은 미생물을 이용한 공정을 통하여 유독성 폐기물이 생성되지 않는 음식물 쓰레기의 재자원화가 가능하여 친환경적이다.
The present invention is eco-friendly because it is possible to recycle food waste that does not generate toxic waste through the process using microorganisms.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 전체 공정의 개요도이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 탄수화물 회수 공정을 통해 얻어진 용액의 HPLC 분석 결과 그래프이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따라 생산된 수용성 탄수화물을 활용하여 젖산을 생산한 용액의 HPLC 분석 결과 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따라 생산된 수용성 탄수화물을 활용하여 에탄올을 발효한 용액의 HPLC 분석 결과 그래프이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따라 회수된 단백질과 Bacillus thurengensis를 이용하여 생상된 지질의 HPLC 분석 결과 그래프이다.
1 is a schematic diagram of an overall process according to an embodiment of the present invention.
FIG. 2 is a graph showing the HPLC analysis result of the solution obtained through the carbohydrate recovery process according to one embodiment of the present invention. FIG.
FIG. 3 is a graph showing HPLC analysis results of a lactic acid-producing solution using the water-soluble carbohydrate produced according to an embodiment of the present invention.
FIG. 4 is a graph showing an HPLC analysis result of a solution obtained by fermenting ethanol using a water-soluble carbohydrate produced according to an embodiment of the present invention.
FIG. 5 is a graph of HPLC analysis of lipids produced using the recovered protein and Bacillus thurengensis according to an embodiment of the present invention.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다. 본 명세서 및 특허 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적 의미로 한정되어 해석되지 아니하며, 본 발명의 기술적 사항에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야 한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the accompanying drawings. The terms and words used in the present specification and claims should not be construed as limited to ordinary or dictionary meanings and should be construed in accordance with the technical meanings and concepts of the present invention.

이하 본 발명의 실시예를 첨부도면에 따라 공정별로 상세히 설명하면 다음과 같다.
Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings.

본 발명은 지질이 제거된 유기성 폐기물로부터 탄수화물 및 단백질을 분리하는 방법을 제공한다.The present invention provides a method for separating carbohydrates and proteins from lipid-depleted organic wastes.

본 발명에 따라 유기성 폐기물로부터 탄수화물 및 단백질을 분리하는 방법은 유기성 폐기물로부터 탄수화물을 분리한 후 남은 혼합물로부터 단백질을 분리하는 단계를 포함한다.
A method for separating carbohydrates and proteins from organic wastes according to the present invention comprises separating carbohydrates from organic wastes and then separating the proteins from the remaining mixture.

먼저, 유기성 폐기물로부터 탄수화물을 분리하기 위하여 구체적으로 본 발명은 First, in order to separate carbohydrates from organic wastes,

지질이 제거된 유기성 폐기물을 분쇄하는 단계(단계1);Pulverizing the organic waste that has been degreased (step 1);

상기 분쇄된 유기성 폐기물에 미생물 배양액을 첨가하는 단계(단계2);Adding a microbial culture liquid to the pulverized organic waste (step 2);

상기 단계2에서 제조된 혼합물에 증류수를 첨가하는 단계(단계3); 및 Adding distilled water to the mixture prepared in step 2 (step 3); And

상기 단계3에서 제조된 혼합물에서 탄수화물을 분리하는 단계(단계4)를 포함하는, 지질이 제거된 유기성 폐기물의 재활용 방법을 제공한다.And separating the carbohydrate from the mixture produced in step 3 (step 4).

유기성 폐기물은 일반 또는 산업 폐기물 중 주로 유기물을 주체로 하는 폐기물로 음식물 쓰레기, 축산 폐기물, 하수 슬러지 등이 포함될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 재자원화 가능한 유기성 폐기물은 음식물 쓰레기인 것이 바람직하다.Organic wastes are mainly organic wastes mainly including organic wastes, but they are not limited thereto. The organic wastes that can be recycled according to the present invention are preferably food wastes .

본 발명에 사용되는 지질이 제거된 유기성 폐기물은 수거된 분뇨 폐기물과 음식물 폐기물 등 지방을 포함한 유기성 폐기물을 분쇄기로 분쇄하고 협잡물을 분리한 후, 수분량을 감소시키고 용매를 공급하여 지방을 분리하는 단계를 통해 제조된 지질이 제거된 유기성 폐기물일 수 있다.The organic waste from which the lipid is removed according to the present invention is obtained by pulverizing organic wastes including fat such as collected manure waste and food wastes by a pulverizer, separating the crude oil, reducing the water content, and supplying the solvent to separate the fat Lt; RTI ID = 0.0 > de-lipid < / RTI >

상기 지방 분리 단계는 유기성 폐기물로부터 지방을 분리처리하기 위해 이온성 액체를 이용하여 유기성 폐기물 중의 친수성 물질을 제거하고, 유기용매를 통해 지방을 용해시켜 상분리를 통해 분리하는 것일 수 있다.The lipid separation step may be to remove the hydrophilic material in the organic waste by using an ionic liquid to separate the fat from the organic waste, dissolve the fat through the organic solvent, and separate through the phase separation.

또한, 상기 지방 분리는 초임계유체를 이용하여 수행될 수 있으며, 초임계유체로는 예를 들어 이산화탄소가 사용될 수 있으며, 초임계 유체를 이용한 지방 분리는 유기성 폐기물을 분리단계로 지속적으로 공급하여 초임계 유체와 혼합시키면서 물질을 용해시키고 온도와 압력을 점차 감소시키면서 물질을 순차적으로 석출하는 공정일 수 있다.
In addition, the fat separation can be performed using a supercritical fluid, for example, carbon dioxide can be used as the supercritical fluid, and the fat separation using the supercritical fluid continuously supplies the organic waste to the separation step, It may be a process of sequentially dissolving the material while mixing with the critical fluid and gradually decreasing the temperature and pressure.

단계1은 지질이 제거된 유기성 폐기물을 분쇄기를 이용하여 분쇄하는 단계이다.
Step 1 is a step of crushing the organic wastes from which the lipid has been removed by using a crusher.

단계2는 분쇄된 유기성 폐기물에 미생물 배양액을 첨가하는 단계로, 상기 미생물 배양액으로는 본배양이 끝난 Bacillus thuringiensis 배양액을 원심분리하여 형성된 상층액을 사용할 수 있다.Step 2 is a step of adding a microorganism culture liquid to the pulverized organic waste. As the microorganism culture liquid, a supernatant formed by centrifuging the cultured Bacillus thuringiensis culture can be used.

미생물 균주로는 전분이나 섬유소 분해효소를 가지는 균주가 이용될 수 있으며, 예를 들어 Bacillus thuringinesis, Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Paenibacillus 등이 이용될 수 있으나, 다른 Bacillus 유래보다 성장속도가 빠르고 저온성장이 가능한 Bacillus thuringinesis를 사용하는 것이 바람직하다.For example, Bacillus thuringinesis, Bacillus subtilis, Bacillus cereus, and Paenibacillus may be used as the microorganism strain, but the growth rate is faster than that of other Bacillus-derived microorganisms, It is preferable to use Bacillus thuringinesis.

분쇄된 유기물 100 중량부에 대하여 상기 Bacillus thuringiensis 배양액의 상층액은 30 내지 60 중량부가 포함될 수 있으며, 상기 상층액이 30 중량부 미만으로 포함되면 전분 분해효소와 섬유소 분해효소인 아밀레이즈와 셀룰레이즈의 분비가 적어지게 되어 원활한 당화과정을 진행하기가 어려운 문제가 있고, 60 중량부를 초과하여 포함되면 배양액에 들어있는 균주의 양이 많아져 기질의 양이 부족해지므로, 당화과정을 통해 얻어지는 당의 수율이 감소하는 문제가 있다.The supernatant of the Bacillus thuringiensis culture solution may be contained in an amount of 30 to 60 parts by weight based on 100 parts by weight of the pulverized organic matter. When the supernatant is contained in an amount of less than 30 parts by weight, the starch degrading enzyme, amylase and cellulase There is a problem that it is difficult to carry out a smooth saccharification process. If it is contained in an amount exceeding 60 parts by weight, the amount of the strain contained in the culture liquid increases and the amount of the substrate becomes insufficient. There is a problem.

상기 상층액을 분쇄된 유기성 폐기물과 혼합한 후, 20℃ 내지 50℃의 배양기에서 30분 내지 3시간 동안 교반하는 단계를 포함하며, 상기 배양기는 진탕배양기(shaking incubator)일 수 있다. Mixing the supernatant with the pulverized organic waste, followed by stirring in an incubator at 20 ° C to 50 ° C for 30 minutes to 3 hours, wherein the incubator may be a shaking incubator.

반응 온도가 20℃ 미만이거나 50℃를 초과할 경우 미생물이 분비하는 아밀레이즈와 셀룰레이즈의 효소활성이 저해되는 문제가 있으며, 반응 시간이 30분 미만일 경우 반응이 덜 일어나게 되어 탄수화물 회수 수율이 낮아지고, 이로 인해 유기성 폐기물이 완전히 재자원화 되지 않는 문제가 있고, 반응 시간이 3시간을 초과할 경우 이미 반응이 완료된 상태이기 때문에 반응에 필요한 에너지를 낭비하게 되는 문제가 있으므로 20℃ 내지 50℃의 배양기에서 30분 내지 3시간 동안 교반하는 것이 바람직하다.
When the reaction temperature is less than 20 ° C or more than 50 ° C, there is a problem that the enzyme activity of amylase and cellulase secreted by the microorganism is inhibited. When the reaction time is less than 30 minutes, the reaction is less and the yield of carbohydrate recovery is lowered The organic waste is not fully recycled. If the reaction time exceeds 3 hours, the reaction has already been completed. Therefore, there is a problem that the energy required for the reaction is wasted. Therefore, in an incubator at 20 ° C to 50 ° C It is preferable to stir for 30 minutes to 3 hours.

단계3은 상기 단계2에서 제조된 혼합물에 증류수를 첨가하는 단계로, 증류수는 분쇄된 유기물 100 중량부에 대하여 20 내지 60 중량부가 포함될 수 있다.Step 3 is a step of adding distilled water to the mixture prepared in step 2, wherein distilled water may be included in an amount of 20 to 60 parts by weight based on 100 parts by weight of the pulverized organic material.

이 때, 증류수를 첨가한 단계 3의 혼합물을 30분 내지 90분 동안 방치하는 단계를 더 포함할 수 있으며, 이 방치 단계는 앞서 미처 침전되지 않았던 침전물의 침전을 유도하는 단계이다.At this time, it may further include the step of allowing the mixture of Step 3 to which distilled water has been added to be left for 30 minutes to 90 minutes, and this step of neglecting is a step of inducing precipitation of the precipitate which has not been previously precipitated.

증류수는 유기성 폐기물에서 침전물의 침전 효율을 높이는 효과가 있으나 분쇄된 유기물 100 중량부에 대하여 20 중량부 미만으로 첨가되면 침전 효율이 감소하고, 60 중량부를 초과하여 포함되면 탄수화물 회수 단계(단계4)에서 동결 건조시 건조에 필요한 에너지의 필요량이 증가하므로 20 내지 60 중량부로 포함되는 것이 바람직하며, 30 내지 50 중량부로 포함되는 것이 더욱 바람직하다.
The distilled water has an effect of increasing the sedimentation efficiency of organic wastes. However, when less than 20 parts by weight is added to 100 parts by weight of the ground organic material, the precipitation efficiency is decreased. When the organic matter is contained more than 60 parts by weight, the carbohydrate recovery step Since the amount of energy required for drying during lyophilization increases, it is preferably contained in an amount of 20 to 60 parts by weight, more preferably 30 to 50 parts by weight.

단계3을 통해 제조된 혼합물의 상층액은 탄수화물을 포함하고 있고, 하층액의 침전물은 단백질을 포함하고 있으므로 먼저 탄수화물을 분리하기 위하여 단계4를 수행한다.Since the supernatant of the mixture prepared in Step 3 contains carbohydrate and the precipitate of the supernatant contains protein, Step 4 is performed to separate the carbohydrate first.

단계4는 상기 단계3에서 제조된 혼합물에서 탄수화물을 분리하는 단계로, 단계3에서 제조된 혼합물의 상층액을 수거하여 건조하는 단계를 포함한다.Step 4 comprises separating the carbohydrate from the mixture prepared in step 3, and collecting the supernatant of the mixture prepared in step 3 and drying.

구체적으로, 단계3에서 제조된 혼합물의 상층액을 수거한 후, 건조기에서 20시간 내지 30시간 동안 건조시키고 남은 잔유물을 회수하는 단계일 수 있으며, 상기 잔유물이 유기성 폐기물로부터 회수된 탄수화물이다.Specifically, it may be a step of collecting the supernatant of the mixture prepared in step 3, drying in a drier for 20 to 30 hours, and recovering the remnant remnant, which is carbohydrate recovered from the organic waste.

건조는 자연건조, 동결건조, 진공건조, 열건조 중 어떠한 방법을 사용하여도 무방하나 본래의 성질을 그대로 유지하고, 장기간 보관이 가능하며 물에 대한 재용해성이 높은 건조물을 생성할 수 있는 동결건조법을 이용하는 것이 바람직하다.
Drying can be carried out by any method of natural drying, freeze drying, vacuum drying or thermal drying, but it is possible to keep the original properties intact, to freeze for a long time and to freeze-dry Is preferably used.

본 발명은 상기와 같은 방법으로 회수된 탄수화물을 탄소원(당화액)으로 사용하여 다른 유용물질을 생산하는 단계를 더 포함할 수 있으며, 이때의 유용물질은 예를 들어 젖산이나 에탄올일 수 있다.The present invention may further comprise the step of producing another useful substance by using the recovered carbohydrate as a carbon source (saccharified liquid), and the useful substance may be, for example, lactic acid or ethanol.

젖산을 생산하기 위해서 Lactobacillus를 이용하여 배양하는 공정을 수행할 수 있으며, 에탄올을 생산하기 위해서 이스트(Yeast)를 이용하여 발효하는 공정을 수행할 수 있다.In order to produce lactic acid, a process of culturing using Lactobacillus may be performed, and a process of fermentation using yeast may be performed to produce ethanol.

예를 들어, 젖산을 생산하기 위해서 당화액 1% 내지 5%가 첨가된 M9배지에 Lactobacillus를 1% 내지 3%의 농도로 첨가하고, 25℃ 내지 35℃에서 20 시간 내지 30시간 배양한 후, 상기 배양액을 원심분리하여 상층액을 수거하면 젖산을 생산할 수 있다.For example, in order to produce lactic acid, Lactobacillus is added to the M9 medium to which 1% to 5% of glycated solution is added at a concentration of 1% to 3%, and cultured at 25 to 35 ° C for 20 to 30 hours, The culture solution is centrifuged and the supernatant is collected to produce lactic acid.

상기 M9배지는 미생물이 성장할 수 있는 최소한의 영양분을 포함한 배지로, 탄소원이나 질소원이 포함되어 있지 않기 때문에 당화액을 탄소원으로 사용하여 미생물의 생장확인 및 유용물질 생산을 확인할 수 있는 배지이다.The M9 medium is a medium containing minimal nutrients to which microorganisms can grow. Since the M9 medium does not contain a carbon source or a nitrogen source, it can be used as a carbon source to confirm the growth of microorganisms and produce useful substances.

M9 배지는 일반적으로 알려진 조성을 가질 수 있으며, 예를 들어 CaCl2 0.015g/l, Na2HPO4 6g/l, KH2PO4 3g/l, NaCl 1g/l, MgSO4 0.5g/l일 수 있다.The M9 medium can have a generally known composition, for example, 0.015 g / l CaCl2, 6 g / l Na2HPO4, 3 g / l KH2PO4, 1 g / l NaCl and 0.5 g / l MgSO4.

한편, 에탄올을 생산하기 위해서 당화액 1% 내지 5%가 첨가된 M9배지에 이스트를 1% 내지 3%의 농도로 첨가하고, 35℃ 내지 45℃에서 혐기 조건으로 20시간 내지 30시간 발효한 후, 상기 발효액을 원심분리하여 상층액을 수거하면 에탄올을 생산할 수 있다.
On the other hand, in order to produce ethanol, yeast is added to the M9 medium to which 1% to 5% of glycated solution is added at a concentration of 1% to 3%, and the fermentation is carried out at 35 ° C to 45 ° C under anaerobic conditions for 20 hours to 30 hours , Ethanol is produced by centrifuging the fermentation broth and collecting the supernatant.

본 발명은 상기와 같은 과정에 의해 지질이 제거된 유기성 폐기물로부터 탄수화물을 회수한 후 단백질을 회수하는 공정을 더 포함할 수 있다.The present invention may further comprise a step of recovering the carbohydrate from the organic waste from which the lipid has been removed by the above process, and recovering the protein.

단계3을 통해 제조된 혼합물에서의 상층액은 탄수화물 회수공정에 이용되고, 하층에 침전된 잔유물을 이용하여 단백질을 회수할 수 있다.The supernatant in the mixture prepared in step 3 is used for the carbohydrate recovery process, and the protein can be recovered using the residue precipitated in the lower layer.

이 때, 단계3을 통해 상층액을 수거하고 남은 침전물이 곧 회수된 단백질이므로 별도의 단백질 회수 공정 없이도 단백질을 회수할 수 있다.
In this case, since the supernatant is collected through Step 3 and the remaining precipitate is the recovered protein, the protein can be recovered without a separate protein recovery process.

본 발명은 상기와 같은 방법으로 회수된 단백질을 질소원으로 사용하여 유용물질인 지질, 알코올 및 전산을 생산하는 공정을 더 포함할 수 있다.The present invention may further include a process for producing lipid, alcohol, and computer as useful materials by using the recovered protein as a nitrogen source.

먼저 지질을 생산하기 위하여 M9 배지에 상기와 같은 방법에 의해 회수된 단백질 0.1% 내지 2.0%를 첨가하고 탄소원 및 바실러스 균주를 첨가하여 25℃ 내지 35℃에서 24시간 내지 60시간동안 배양한다. First, 0.1% to 2.0% of the protein recovered by the above method is added to the M9 medium to produce lipid, and the carbon source and the strain of Bacillus are added, followed by culturing at 25 ° C to 35 ° C for 24 hours to 60 hours.

상기 탄소원으로는 예를 들어, 글루코스, 수크로스 등의 탄수화물 및 탄수화물 혼합물도 사용 가능할 뿐만 아니라 본 발명에 따른 방법에 의해 회수된 탄수화물(당화액)도 사용 가능하다.As the carbon source, for example, carbohydrates and carbohydrate mixtures such as glucose and sucrose can be used, as well as carbohydrates recovered by the method according to the present invention.

상기 바실러스 균주로는 Bacillus subtilis, Bacillus thurngensis가 사용될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.As the Bacillus strain, Bacillus subtilis and Bacillus thurngensis may be used, but are not limited thereto.

다음으로, 상기 배양액을 원심분리하고 1회 내지 3회 물로 세척한 후, 12시간 내지 24시간동안 동결 건조하여 지질을 생산할 수 있다.
Next, the culture solution is centrifuged, washed with water 1 to 3 times, and then lyophilized for 12 to 24 hours to produce lipid.

<실험예><Experimental Example>

1. 탄수화물 회수 공정1. Carbohydrate recovery process

지질이 제거된 음식물 쓰레기를 믹서기로 파쇄한 후 50ml 팔콘튜브에 담고, 본배양이 끝난 Bacillus thuringiensis 배양액을 원심분리 하여 상층액 10ml를 상기 팔콘튜브에 첨가하여 샘플을 제조하였다.The lipid-free food waste was crushed by a mixer and then placed in a 50 ml Falcon tube. The cultured Bacillus thuringiensis culture was centrifuged and 10 ml of the supernatant was added to the Falcon tube to prepare a sample.

상기 상층액을 첨가한 후 37℃ shaking incubator에서 2시간정도 교반하고, 증류수 10ml를 첨가하여 30분간 방치하였다. After the supernatant was added, the mixture was stirred for about 2 hours in a shaking incubator at 37 ° C, and 10 ml of distilled water was added and left for 30 minutes.

방치된 혼합액의 상층액을 수거하여 동결건조기에서 하루 동안 증발시켜 탄수화물을 회수하였다.The supernatant of the leftover mixture was collected and the carbohydrate was recovered by evaporation in a freeze dryer for one day.

회수된 탄수화물(당화액)을 HPLC (YL-9100, Korea)를 사용하여 분석하였으며, 유속 0.6ml/min, 온도 75℃에서 RI detector와 Hi splex pb 컬럼을 사용하였고, 용매로는 100% HPLC grade water를 사용하여 분석하였고, 이 결과는 도 2에 나타내었다.
The recovered carbohydrate was analyzed using HPLC (YL-9100, Korea). RI detector and Hi splex pb column were used at a flow rate of 0.6 ml / min and a temperature of 75 ° C. 100% HPLC grade water, and the results are shown in Fig.

2. 회수된 탄수화물을 이용한 유용물질 생산2. Production of useful substances using recovered carbohydrates

2-1. 젖산 생산2-1. Lactic acid production

M9 배지에 회수된 탄수화물(당화액) 2%, Lactobacillus 2%를 첨가하고, 30℃에서 24시간 배양한 후 원심분리한 상층액을 수거하였으며, 이를 이용하여 HPLC 분석한 결과를 도3에 나타내었다.2% of the recovered carbohydrate (saccharified liquid) and 2% of Lactobacillus were added to the M9 medium and cultured at 30 ° C for 24 hours. Then, the supernatant obtained by centrifugation was collected and analyzed by HPLC. The result is shown in FIG. .

이 때 사용된 M9 배지의 조성은 CaCl2 0.015g/l, Na2HPO4 6g/l, KH2PO4 3g/l, NaCl 1g/l, MgSO4 0.5g/l이다.
The composition of the M9 medium used herein was 0.015 g / l CaCl2, 6 g / l Na2HPO4, 3 g / l KH2PO4, 1 g / l NaCl and 0.5 g / l MgSO4.

2-2. 에탄올 생산2-2. Ethanol production

M9 배지에 회수된 탄수화물(당화액) 2%, 이스트 2%를 첨가하고, 37℃에서 24시간 혐기발효로 배양한 후 원심분리한 상층액을 수거하였으며, 이를 이용하여 HPLC 분석한 결과를 도4에 나타내었다.
2% of the recovered carbohydrate (saccharified liquid) and 2% of yeast were added to the M9 medium, cultured at 37 ° C for 24 hours by anaerobic fermentation, and centrifuged to collect the supernatant. Respectively.

3. 단백질 회수 공정3. Protein recovery process

상기 탄수화물 회수 공정 중 방치된 혼합액의 상층액을 수거하고 남은 침전물을 수거하였다.
The supernatant of the mixed solution left during the carbohydrate recovery process was collected and the remaining precipitate was collected.

4. 회수된 단백질을 이용한 유용물질 생산4. Production of useful substances by recovered proteins

4-1. 지질 생산4-1. Lipid production

M9 배지에 회수된 단백질 0.5%, 탄소원으로 글루코스 2%, Bacillus thurengensis 2%을 첨가하여 30℃에서 48시간 배양한 후 원심분리한 셀을 두 번 물로 세척하고 24시간동안 동결건조하였다.M9 medium supplemented with 0.5% of recovered protein, 2% of glucose as carbon source and 2% of Bacillus thurengensis were added and cultured at 30 ° C for 48 hours. The centrifuged cells were washed twice with water and lyophilized for 24 hours.

제조된 지질의 종류를 확인하기 위하여 GC-FID 분석을 수행하였다. 먼저, GC-FID를 이용하여 Standard 시료를 분석하고 Standard 시료에서의 fatty acid의 Retention time을 확인하였다. 다음으로, 제조된 시료에 methanol과 H2SO4, chloroform을 첨가한 후 100℃에서 2시간 30분 간 가열 및 냉각하여 FAME으로 변환하여 분석한 결과 다양한 지질을 생산할 수 있음을 확인하였으며, 분석 결과는 도5에 나타내었다.GC-FID analysis was performed to determine the type of lipid produced. First, the standard sample was analyzed using GC-FID and the retention time of fatty acid in the standard sample was confirmed. Next, methanol, H2SO4 and chloroform were added to the prepared samples, and the mixture was heated and cooled at 100 ° C for 2 hours and 30 minutes to convert to FAME. As a result, it was confirmed that various lipids could be produced. Respectively.

분석은 YL6100 GC System(Korea)으로 Supelco DB-1 column (30m×0.32㎜×10㎛)을 이용하였고, 주입구 온도는 250℃, 이동상은 He 3 ㎖/min, 오븐의 조건은 승온모드로 100℃에서 2분간 유지 후, 10℃/min로 300℃까지 상승시키고 300℃부터 20분간 온도를 유지하여 분석하였으며, Detector는 FID detector로 300℃, 발화 가스는 H2 30 mL/min와 Air 300 mL/min로 공급하였다.
For the analysis, a Supelco DB-1 column (30 m × 0.32 mm × 10 μm) was used as the YL6100 GC System (Korea), the inlet temperature was 250 ° C., the mobile phase was He 3 ml / min, And the temperature was maintained at 300 ° C for 20 minutes. The detector was operated at 300 ° C with a FID detector, with a gas mixture of H2 30 ml / min and Air 300 ml / min .

4-2. 알코올 생산4-2. Alcohol production

M9 배지에 회수된 단백질 0.5%, 글루코스 2%, Bacillus thurengensis 2%을 첨가한 후 30℃에서 24시간 배양한 후 원심분리한 상층액을 수거하고 필터링하여 알코올 생산을 확인하였다.
M9 medium supplemented with 0.5% protein, 2% glucose, and 2% Bacillus thurengensis was added and cultured at 30 ° C for 24 hours. The supernatant was collected and filtered to confirm the production of alcohol.

4-3. 젖산 생산4-3. Lactic acid production

M9 배지에 회수된 단백질 0.5%, 글루코스 2%, 이스트 2%를 첨가하고, 30℃에서 24시간 혐기발효로 배양한 후 원심분리한 상층액을 수거하고 필터링하여 젖산 생산을 확인하였다.
0.5% protein recovered in M9 medium, 2% glucose and 2% yeast were added and incubated at 30 ° C for 24 hours with anaerobic fermentation. The supernatant obtained by centrifugation was collected and filtered to confirm production of lactic acid.

이상에서 본 발명에 대한 기술사상을 첨부도면과 함께 설명하였으나, 이는 본 발명의 바람직한 실시예를 예시적으로 설명한 것이고 본 발명을 한정하는 것은 아니다. 또한, 이 기술분야의 통상의 지식을 가진 자라면 누구나 본 발명의 기술사상의 범주를 이탈하지 않는 범위 내에서 다양한 변형 및 모방이 가능함은 명백한 사실이다.While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the invention is not limited to the disclosed exemplary embodiments. In addition, it is a matter of course that various modifications and variations are possible without departing from the scope of the technical idea of the present invention by anyone having ordinary skill in the art.

Claims (15)

지질이 제거된 유기성 폐기물을 분쇄하는 단계(단계1);
상기 분쇄된 유기성 폐기물에 바실러스 튜링겐시스(Bacillus thuringiensis) 배양액의 상층액을 첨가하는 단계(단계2);
상기 단계2에서 제조된 혼합물에 증류수를 첨가하는 단계(단계3);
상기 단계3에서 제조된 혼합물에서 상기 상층액을 증발시키고 남은 잔유물을 회수하여 탄수화물을 분리하는 단계(단계4); 및
상기 단계4에서 탄수화물을 분리하고 남은 혼합액 하층의 잔유물을 회수하여 단백질을 분리하는 단계(단계5);
를 포함하는, 지질이 제거된 유기성 폐기물의 재활용 방법.
Pulverizing the organic waste that has been degreased (step 1);
Adding a supernatant of Bacillus thuringiensis culture to the pulverized organic waste (step 2);
Adding distilled water to the mixture prepared in step 2 (step 3);
Evaporating the supernatant from the mixture prepared in the step 3 and recovering the remaining residue to separate the carbohydrate (step 4); And
Separating the carbohydrate in step 4 and recovering the remaining residue of the lower layer of the mixed liquor to separate proteins (step 5);
&Lt; / RTI &gt; wherein the organic waste is recycled.
삭제delete 삭제delete 제 1항에 있어서,
상기 단계4에서 분리된 탄수화물을 이용하여 유용물질을 생산하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 지질이 제거된 유기성 폐기물의 재활용 방법.
The method according to claim 1,
Further comprising the step of producing a useful substance using the carbohydrate separated in step 4 above.
제 4항에 있어서,
상기 유용물질은 젖산 또는 알코올인 것을 특징으로 하는 지질이 제거된 유기성 폐기물의 재활용 방법.
5. The method of claim 4,
Wherein the useful substance is lactic acid or an alcohol.
제 4항에 있어서,
상기 유용물질을 생산하는 단계는 Lactobacillus를 이용하여 배양하는 것을 특징으로 하는 지질이 제거된 유기성 폐기물의 재활용 방법.
5. The method of claim 4,
Wherein the step of producing the useful substance is performed using Lactobacillus.
제 4항에 있어서,
상기 유용물질을 생산하는 단계는 Yeast를 이용하여 발효하는 것을 특징으로 하는 지질이 제거된 유기성 폐기물의 재활용 방법.
5. The method of claim 4,
Wherein the step of producing the useful substance comprises fermentation using yeast.
삭제delete 삭제delete 제 1항에 있어서,
상기 단계5에서 분리된 단백질을 이용하여 유용물질을 생산하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 지질이 제거된 유기성 폐기물의 재활용 방법.
The method according to claim 1,
The method of claim 1, further comprising the step of producing a useful substance by using the protein separated in step (5).
제 10항에 있어서,
상기 유용물질은 지질, 알코올 또는 젖산인 것을 특징으로 하는 지질이 제거된 유기성 폐기물의 재활용 방법.
11. The method of claim 10,
Wherein the useful substance is a lipid, an alcohol, or a lactic acid.
제 10항에 있어서,
상기 유용물질을 생산하는 단계는 Bacillus subtilis 또는 bacillus thurengensis를 이용하여 배양하는 것을 특징으로 하는 지질이 제거된 유기성 폐기물의 재활용 방법.
11. The method of claim 10,
Wherein the step of producing the useful substance is carried out using Bacillus subtilis or bacillus thurengensis.
제 10항에 있어서,
상기 유용물질을 생산하는 단계는 Lactobacillus를 이용하여 배양하는 것을 특징으로 하는 지질이 제거된 유기성 폐기물의 재활용 방법.
11. The method of claim 10,
Wherein the step of producing the useful substance is performed using Lactobacillus.
제 10항에 있어서,
상기 유용물질을 생산하는 단계는 Yeast를 이용하여 발효하는 것을 특징으로 하는 지질이 제거된 유기성 폐기물의 재활용 방법.
11. The method of claim 10,
Wherein the step of producing the useful substance comprises fermentation using yeast.
제 1항에 있어서,
상기 지질이 제거된 유기성 폐기물은 수거된 분뇨 폐기물과 음식물 폐기물 등 지방을 포함한 유기성 폐기물을 분쇄기로 분쇄하고 협잡물을 분리한 후, 수분량을 감소시키고 용매를 공급하여 지방을 분리하는 단계를 통해 제조된 지질이 제거된 유기성 폐기물인 것을 특징으로 하는 지질이 제거된 유기성 폐기물의 재활용 방법.
The method according to claim 1,
The organic waste from which the lipid has been removed is obtained by pulverizing organic wastes including fat such as manure waste and food wastes collected by a pulverizer, separating the impurities, separating the fat by supplying water and reducing the amount of water, Wherein the organic wastes are removed organic wastes.
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