KR101723084B1 - 노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 주름 개선 또는 피부 탄력 증진용 화장료 조성물 - Google Patents
노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 주름 개선 또는 피부 탄력 증진용 화장료 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 주름개선 또는 피부 탄력 증진이라는 신규 용도에 관한 것이다. 본 발명의 조성물은 화장료, 약학 또는 건강기능식품 조성물의 형태로 제공될 수 있다.
Description
본 발명은 피부 주름 개선 또는 피부 탄력 증진을 위한 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로는 피부의 주름을 예방 또는 개선하거나 피부 탄력을 증진시키는 방법에 관한 것이다.
피부는 외부로부터 신체를 보호하고 체온 조절 및 피지 분비 등의 항상성 유지에 필요한 기능을 담당하고 있다.
외부의 화학적·물리적 자극, 스트레스 및 영양상태, 노화 등에 의해 피부의 기능이 불균형하게 되면 피부에 존재하는 세포의 활성이 저하되고 피부의 구성 성분들이 본래의 안정된 구조를 유지하지 못하게 되어 주름이 생기게 된다.
피부 진피를 구성하는 성분으로는 섬유아세포 및 내피세포 등의 세포들과 콜라겐, 엘라스틴 및 파이브로넥틴 등과 같은 세포 외 기질(extracellular matrix)을 구성하는 물질들이 있다. 이들 세포 외 기질 구성 물질들은 진피의 구조를 형성하고 안정화시키는데, 이들이 비정상적으로 생성되거나 분해되면 피부 전체의 구조에 영향을 주어 피부에 주름이 생기고 피부탄력이 저하된다.
종래에는 콜라겐의 피부 보습효과로부터 화장품에 콜라겐을 배합하는 제품들이 출시되어 있으나, 이들 화장품은 콜라겐을 피부 표면에 도포하는 것으로, 고분자인 콜라겐의 경피 흡수에 의한 보습작용을 기대할 수 없으므로 본질적인 피부 기능 개선이라고 말할 수 없다. 이에 따라 근래에는 콜라겐 주름의 생성을 억제하고 개선하기 위해 사용하는 유효성분의 기능을 다음의 두 가지 관점에서 접근하고 있다. 즉, 첫 번째는 세포 외 기질의 주요 구성성분이 콜라겐을 섬유아세포로부터 생성을 촉진시키는 방법이며, 두 번째는 콜라겐 분해효소의 활성을 억제하여 콜라겐의 분해를 막는 것이다.
콜라겐의 생합성을 촉진시킬 수 있는 소재에 대한 연구는 이전부터 활발히 진행 중이다. 기존에 주름 제거에 효과적인 것으로 알려진 물질로는 비타민-A와 그 유도체(레티노이드, Retinoids), 비타민 C(Vitamin C), 발암증식 인자(transforming growth factor, TGF), 동물 태반 유래의 단백질, 베툴린산(Betulinic acid) 등을 들 수 있다. 그 중 레티노이드(Retinoids)는 레티노익 애씨드(Retinoic acid), 레티날(Retinal), 레티닐 아세테이트(Retinyl acetate), 레티닐 프로피오네이트(Retinyl propionate), 레티닐 팔미테이트(Retinyl palmitate), 레티닐 리놀리에이트(Retinyl linoleate) 등의 비타민-A 또는 그 유도체를 총칭하는데, 피부의 세포재생촉진, 콜라겐 합성증진 등을 통하여 주름제거의 효능을 발휘하는 것으로 알려져 있다. 그러나, 레티노이드는 피부적용 시 자극과 발적 등의 안전성의 문제 및 열 및 광에 극히 불안정하여 제품 적용에 어려움을 초래하고 있는 실정이다. 따라서 기존의 피부외용제 조성물보다 생체에 안전하고 안정하며 효과가 높은 새로운 피부외용제 조성물의 개발이 절실히 요망되고 있다.
따라서 본 발명은 위와 같은 문제점을 해결하고, 주름 예방 또는 개선 효과 또는 피부 탄력 증진 효과를 갖는 조성물을 제공하고자 한다.
상기 조성물을 이용하여 피부의 주름을 개선 또는 예방하는 방법을 제공하고자 한다.
또한 본 발명은 노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 주름 예방 또는 개선 효과 또는 피부 탄력 증진 효과라는 새로운 용도를 제공하는 것을 목적으로 한다.
그리고 본 발명은 노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 콜란겐 합성 증진이라는 새로운 용도를 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 노밀린(nomilin) 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 피부 주름 예방 또는 개선 또는 피부 탄력 증진용 화장료 조성물을 제공한다.
상기 노밀린은 화학식 C28H34O9로 나타낼 수 있으며, 514.56의 분자량을 갖고, 감귤과실의 쓴맛성분의 하나로 알려져 있다.
상기 노밀린의 항비만 효과 등에 대해서는 알려져 있으나, 아직까지 노밀린이 피부의 콜라겐 합성 또는 피부 탄력도 개선에 효과가 있다는 연구는 보고되지 않았다.
상기 노밀린은 하기 화학식 1로 대표될 수 있다.
[화학식 1]
본 발명은 상기 노밀린의 획득 방법에 특별히 한정되지 않으며, 당 업계에 공지된 방법으로 화학적으로 합성하거나, 시판되는 물질을 사용할 수 있다.
본 발명의 조성물의 유효성분으로 상기 노밀린은 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 사용될 수 있다.
본 발명의 "약학적으로 허용 가능한 염"은 독성이 없거나 적은 산 또는 염기로 제조된 염들을 말한다. 본 발명의 화합물이 상대적으로 산성일 경우 염기(base) 부가 염들은 충분한 양의 원하는 염기와 적당한 비활성(inert) 용매로 그러한 화합물의 중성 형태를 접촉하여 얻을 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 염기 부가 염은 나트륨, 칼륨, 칼슘, 암모늄, 마그네슘 또는 유기 아미노로 이루어진 염을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 화합물이 상대적으로 염기성일 경우 산(acid) 부가 염들은 충분한 양의 원하는 산과 적당한 비활성 용매로 그러한 화합물들의 중성 형태를 접촉하여 얻을 수 있다. 본 발명의 화합물이 상대적으로 염기성일 경우 산(acid) 부가 염들은 충분한 양의 원하는 산과 적당한 비활성 용매로 그러한 화합물들의 중성 형태를 접촉하여 얻을 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 산 부가 염은 프로피온산, 이소부틸산, 옥살산, 사과산, 말론산, 안식향산, 호박산, 수버릭(suberic), 푸마르산, 만데릭산, 프탈릭산, 벤젠설폰산, p-토릴설폰산, 구연산, 주석산, 메탄설폰산, 염산, 브롬산, 질산, 탄산, 일수소탄산 (monohydrogencarbonic), 인산, 일수소인산, 이수소인산, 황산, 일수소황산, 요오드화수소, 아인산(phosphorous acid) 등으로 형성된 염을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 또한 알지네이트(arginate) 같은 아미노산의 염 및 글루쿠로닉(glucuronic) 또는 갈락투노릭(galactunoric) 산들과 같은 유기산의 유사체를 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 언급된 산 부가염은 a) 상기 화학식 1의 화합물 및 산을 직접 혼합하거나, b) 이들 중 한 가지를 용매 또는 함수 용매 중에 용해시키고 혼합시키거나, 또는 c) 화학식 1의 화합물을 용매 또는 수하 용매 중의 산에 위치시키고 이들을 혼합하는 일반적인 염 제조방법으로 제조된다.
위와는 별도로 추가적으로 염이 가능한 형태는 가바염, 가바펜틴염, 프레가발린염, 니코틴산염, 아디페이트염, 헤미말론산염, 시스테인염, 아세틸시스테인염, 메티오닌염, 아르기닌염, 라이신염, 오르니틴염, 아스파르트산염 등이 있다. 본 발명의 노밀린은 수화물, 에탄올화물 등의 형태를 포함하는 용매화된 형태뿐만 아니라 비-용매화된(unsolvated) 형태로 존재할 수도 있다. 본 발명의 노밀린은 결정형 또는 무정형 형태로 존재할 수 있으며, 이러한 모든 물리적 형태는 본 발명의 범위에 포함된다.
본 발명에서 사용된 용어 "주름"이란, 피부가 쇠하여 생긴 잔줄을 의미하는데, 유전자에 의한 원인, 피부 진피에 존재하는 콜라겐과 엘라스틴의 감소, 외부환경 등에 의해 유발될 수 있다.
본 발명에서 "주름개선"이란, 피부에 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나, 이미 생성된 주름을 완화시키는 것을 말한다.
본 발명에서 용어, "피부 탄력"이란, 진피층에 존재하는 엘라스틴(elastin)으로 구성된 탄력섬유에 의해 나타나는데, 이러한 탄력섬유는 고무와 같이 매우 낮은 탄성계수를 가지고 있어서, 작은 힘에 의해서도 쉽게 변형되고, 또 그 힘이 제거되었을 때는 쉽게 원형으로 되돌아온다. 또한, 탄력섬유는 엘라스틴이라는 무정형의 기질에 미원섬유(microfibrils)들이 박혀 있는 형태를 띠고 있으며, 엘라스틴은 라이신에서 유래한 데스모신(desmosine)과 아이소데스모신(isodesmosine)이라는 탄력섬유에서만 발견되는 아주 톡특한 아미노산으로 구성된 단백질이다. 이러한 데스모신과 아이소데스모신 등은 긴 펩타이드사슬안에서 가교(cross-links)를 형성하고 있는데, 이러한 구조가 엘라스틴으로 하여금 고무와 같은 성질을 갖게 한다.
본 발명에서 "피부 탄력 증진"이란 엘라스틴으로 구성된 탄력섬유가 콜라겐(collagen)이라고 하는 교원섬유와 함께 존재하는데, 엘라스틴과 콜라겐이 충분히 존재하는 상태에서 피부 탄력이 유지되는 것을 말한다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알콜, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용가능한 담체는 제형에 따라 다양하다. 본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 비누인 경우에는 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알콜, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 조성물에는 피부 주름개선 또는 피부 탄력 증진 기능을 갖는 물질을 1종 이상 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시예들에 따르면, 본 발명은 상기 조성물을 개체의 피부에 도포하는 단계를 포함하는, 피부의 주름을 예방 또는 개선하거나 피부 탄력을 증진시키는 방법을 제공한다.
상기 개체는, 쥐, 가축, 인간 등을 포함하는 포유동물을 제한 없이 포함한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "예방"이란 주름의 발생을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 말한다. 본 발명에서 사용되는 용어, "개선"은 주름 상태가 호전되거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 말한다. 본 발명에서 사용되는 "증진"이란 피부의 탄력이 이전보다 강해지거나, 피부의 탄력 소실의 속도를 늦추는 모든 행위를 말한다.
또한, 본 발명의 상기 노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 의약품으로 사용하는 경우, 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 예컨대, 공지의 주름 개선 및 피부 탄력 증진 성분을 포함할 수 있을 것이다. 추가적인 주름 개선 및 피부 탄력 증진 성분을 포함하게 되면 본 발명의 조성물의 주름 개선 및 피부 탄력 증진 효과는 더욱 향상될 수 있을 것이다. 상기 성분 추가 시에는 복합 사용에 따른 피부 안전성, 제형화의 용이성, 유효성분들의 안정성을 고려할 수 있다. 본 발명의 한 구체예에서, 상기 조성물은 당업계에 공지된 주름 개선 및 피부 탄력 증진 성분으로서, 레티노산, TGF, 동물 태반 유래의 단백질, 베튤린산 및 클로렐라 추출물 및 이들의 유도체와 각종 식물 추출물로 구성되는 군으로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상의 성분을 추가로 포함할 수 있다. 추가의 성분은 전체 조성물 중량에 대하여 0.0001 중량% 이상 내지 10 중량% 이하로 포함될 수 있다. 예를 들어, 0.0001 중량% 이상 내지 1 중량% 이하, 0.0001중량% 이상 내지 0.1중량% 이하, 0.0001 중량% 이상 내지 0.001 중량% 이하, 0.001중량% 이상 내지 10중량% 이하, 0.001중량% 이상 내지 1중량% 이하, 0.001 중량% 이상 내지 0.1중량% 이하, 0.01 중량% 이상 내지 10중량% 이하, 0.01중량% 이상 내지 1 중량% 이하일 수 있다. 상기 함량 범위는 피부 안전성, 상기 화학식 1의 화합물 또는 그 화합물의 염의 제형화 시의 용이성 등의 요건에 따라 조절될 수 있을 것이다.
또한, 본 발명의 주름 예방 또는 개선 및 피부 탄력 증진용 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 더 포함할 수 있다. 약학적으로 허용되는 담체는 완충액, 주사용 멸균수, 일반 식염수 또는 인산염 완충 식염수, 슈크로스, 히스티딘, 염 및 폴리솔베이트 등과 같은 여러 성분을 함유할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있으며, 일반 의약품 제제의 형태, 예를 들어, 임상 투여 시 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 약학적 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(Calcium carbonate), 수크로스(Sucrose) 또는 락토오스(Lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌 글리콜(Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 유효량의 노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함할 때 바람직한 주름 개선 및 피부 탄력 증진 효과를 제공할 수 있다. 본 발명에 있어서, ‘유효량’이라 함은 손상된 피부의 재생을 촉진하거나, 주름 개선 효과를 나타낼 수 있는 화합물의 양을 의미한다. 본 발명의 조성물에 포함되는 상기 노밀린의 유효량은 조성물이 제품화되는 형태, 상기 화합물이 피부에 적용되는 방법 및 피부에 머무르는 시간 등에 따라 달라질 것이다. 예컨대, 상기 조성물이 의약품으로 제품화되는 경우에는 일상적으로 피부에 적용하게 되는 화장품으로 제품화되는 경우에 비해 높은 농도로 상기 노밀린을 포함할 수 있을 것이다. 따라서, 일일 투여량은 상기 화학식 1의 화합물의 양을 기준으로 0.1 내지 100 ㎎/㎏이고, 바람직하게는 30 내지 80 ㎎/㎏이고, 더욱 바람직하게는 50 내지 60 mg/kg이며, 하루 1 ∼ 6 회 투여될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
본 발명은 또한 상기 노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 주름 개선 또는 피부 탄력 증진용 피부 외용제의 제형으로 제공할 수 있다.
상기 노밀린을 피부외용제로 사용하는 경우, 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 피부용 외용제에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 또한 상기 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다. 상기 노밀린이 피부 외용제 제형으로 제공될 경우, 이에 제한되는 것은 아니나, 연고, 패취, 겔, 크림 또는 분무제와 같은 제형을 가질 수 있다.
본 발명은 또한 상기 노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 주름 개선 또는 피부 탄력 증진 건강식품에 관한 것이다.
본 명세서에서 ‘건강식품’이란, 상기 노밀린을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있다. 이와 같이 하여 얻어지는 본 발명의 건강식품은, 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 높은 주름 개선 또는 피부 탄력 증진 효과를 기대할 수 있어 매우 유용하다. 상기 노밀린을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 노밀린을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 발명의 조성물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다. 상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다. 본 발명의 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 mL 당 일반적으로 약 0.01 ∼ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ∼ 0.03 g 이다. 상기 외에 본 발명의 건강식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강식품은 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본 발명에 따른 노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 화장료, 약학 또는 건강기능식품 조성물은 피부 주름 예방 또는 개선 효과, 또는 피부 탄력 증진 효과를 기대할 수 있다.
본 발명은 노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 피부 주름 개선 또는 예방 및 주름 개선 이라는 신규한 용도를 제공한다.
본 발명에 따른 노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 피부의 콜라겐 생성량 증가를 기대할 수 있다.
도 1은 Human keratinocyte cell인 HaCaT에서 노밀린의 세포 독성을 평가하여 나타낸 그래프이다.
도 2는 Human fibroblast cell인 HDFn에서의 노밀린 세포 독성을 평가하여 나타낸 그래프이다.
도 3은 elastase 저해물질로 알려진 oleanolic acid을 첨가한 경우 와 노밀린을 농도별로 첨가한 경우, elastase 활성 저해 효과를 확인한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 Human fibroblast cell인 HDFn에 노밀린을 농도별로 처리한 후 procollagen type I의 생산량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 2는 Human fibroblast cell인 HDFn에서의 노밀린 세포 독성을 평가하여 나타낸 그래프이다.
도 3은 elastase 저해물질로 알려진 oleanolic acid을 첨가한 경우 와 노밀린을 농도별로 첨가한 경우, elastase 활성 저해 효과를 확인한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 Human fibroblast cell인 HDFn에 노밀린을 농도별로 처리한 후 procollagen type I의 생산량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
1. 세포독성 평가
세포독성 평가는 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl- tetrazolium bromide) 분석 방법을 사용하였다. 24-well plate에 1 X 105 cell/mL Human fibroblast cell인 HDFn과 Human keratinocyte cell인 HaCaT을 24시간 배양 후, 시료(노밀린)를 농도별로 처리하였다. Sample을 여러 농도별로 처리한 후 2일간 배양 후 500μg/ml의 MTT를 well 당 20㎕를 첨가하였다. MTT 시약을 처리하여 5시간 동안 37℃에서 배양하고, DMSO (dimethylsulfoxid)를 처리하여 formazan을 녹여낸 후 570 nm 에서 흡광도 값을 측정하였다.
도 1 및 2에 나타난 바와 같이 HDFn 및 HaCaT에서의 노밀린의 세포독성을 평가한 결과 상기 세포들에 20의 노밀린을 처리한 경우까지는 세포 독성이 나타나지 않았다.
2.
Elastase
inhibition
활성 검색
Elastase inhibition 활성 검색은 James27법을 사용하였다. 엘라스타아제 (porcine pancereatic elastase; PPE, sigma, Type Ⅳ)에 의해 합성된 기질인 N-Suc-(Ala)3-nitroanilide의 가수분해에 근거한 실험법으로 405 nm에서 p-nitroaniline의 방출량을 엘라스타아제의 활성값으로 하였다. 0.2 M Tris-Hcl (pH 8.0)에 0.2 mM N-Suc-(Ala)3-nitroanilide, 다양한 농도의 시료를 섞고 0.104 unit elastase 넣어 25 ℃에서 10 분간 반응 시킨 후 p-nitroaniline 의 생성량을 405 nm 에서 측정 하였다. Elastase 저해율은 50 % 감소 할 때 나타나는 시료의 농도 (IC50)로 표시하였으며, 각 시료는 3회 반복하여 실험을 실시하여 평균값을 구하였다. 이때 사용된 대조군으로는 oleanolic acid를 사용하였다.
Elastase inhibiton (%) = {(A-B)(C-D)/(A-B)} X 100
A: sample 대신 solvent를 넣고 효소를 첨가하여 반응한 후의 흡광도
B: sample 대신 solvent를 넣고 효소를 첨가하지 않은 상태로 반응한 후의 흡광도
C: 효소를 첨가하여 반응한 후의 sample의 흡광도
D: 효소를 넣지 않은 상태로 반응한 후의 sample의 흡광도
elastase 억제 활성을 확인한 결과, 노밀린을 첨가한 경우, 농도가 증가할 수록 elastase 억제 활성이 더욱 크게 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 특히, elastase 저해물질로 알려진 oleanolic acid 200을 첨가한 경우와 비교하여 훨씬 더 적은 양인 20을 첨가하였지만 elastase 저해 활성은 비슷하게 나타났다.
따라서 본 발명의 노밀린은 우수한 elastase 억제 활성을 가진다는 것을 확인할 수 있었으며, 이러한 결과는 도 3에 나타냈다.
3. 세포 배양
human fibroblast cell인 HDFn과 keratinocyte cell인 HaCaT cell은 penicillin-streptomycin 100 units/mL과 10% fetal bovine serum (FBS)이 함유된 DMEM 배지(GIBCO, Grand Island, NY, USA)를 사용하여 37℃, 5% CO2 항온기에서 배양하였으며, 3일에 한 번씩 계대 배양을 시행하였다.
4. procollagen 측정
Human fibroblast cell인 HDFn을 1x 105/ml이 되도록 24 well plate에 접종한 후 24시간 후 FBS가 포함되지 않은 DMEM 배지로 교환 후 nomilin을 농도별로 처리한다. 처리 후 24시간 후 배양액의 procollagen 양을 측정하여 collagen 합성을 측정한다. procollagen의 양은 Takara의 procollagen typeI C-peptide EIA kit를 사용하여 측정하였다.
도 4에 나타난 바와 같이, HDFn에 노밀린을 농도별로 처리한 결과, 콜라겐의 전구물질인 procollagen typeI의 합성율이 농도 의존적으로 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 본 발명의 노밀린은 주름 개선 효과 및 피부 탄력 증진 효과와 밀접한 관련이 있는 콜라겐의 전구물질인 procollagen 합성율을 증가킬 수 있음을 확인하였다.
5. 통계분석
모든 실험은 3회 이상 반복으로 이루어졌으며, 실험결과는 각 항목에 따라 평균치 ± 표준편차 (SD)를 구하여 신뢰수준 95% (p<0.05)에서 통계적 유의차를 평가하였다.
Claims (6)
- 노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는, 콜라겐의 생합성을 촉진하여 주름 개선 또는 피부 탄력을 증진하는, 주름개선 또는 피부 탄력 증진용 화장료 조성물.
- 노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 콜라겐 합성 증진용 화장료 조성물.
- 노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는, 콜라겐의 생합성을 촉진하여 주름 개선 또는 피부 탄력을 증진하는, 주름개선 또는 피부 탄력 증진용 약학 조성물.
- 삭제
- 노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는, 콜라겐의 생합성을 촉진하여 주름 개선 또는 피부 탄력을 증진하는, 주름개선 또는 피부 탄력 증진용 건강기능식품 조성물.
- 노밀린 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 콜라겐 합성 증진용 건강기능식품 조성물.
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|---|---|---|---|
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| JP2006514657A (ja) | 2002-12-31 | 2006-05-11 | エイボン プロダクツ インコーポレーテッド | しわ、細かいすじ及び発汗過多の治療のための組成物及び伝達方法 |
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| JP2009000014A (ja) * | 2007-06-19 | 2009-01-08 | Sony Corp | 反応処理装置 |
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- 2014-06-23 KR KR1020140076593A patent/KR101723084B1/ko active IP Right Grant
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Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Food Chemistry 93(4) pp.599-605 (2005)* |
| J Agric Food Chem. 2005 Mar 23;53(6):2009-14. |
| 대한화장품학회지, 25(2), pp.77-127 (1999)* |
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