KR101628180B1 - Anti-Bacterial Composition Against Salmonella spp. Comprising Extract from Acer ginnala Max as Active Ingredient - Google Patents

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Abstract

본 발명은 신나무(Acer ginnala Maxim.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 신나무 추출물은 살모넬라증(salmonellosis), 패혈증, 급성 위장염, 장티푸스증, 장티푸스성 발열 등을 일으키는 인수공통 전염병균인 살모넬라균(Salmonella spp.)에 대해 우수한 항균활성을 나타내어, 항균용 기능성 식품 또는 의약품의 활성성분으로 개발될 수 있다. The present invention relates to an antimicrobial composition comprising an Acer ginnala Maxim. Extract as an active ingredient. The extract of Shinki of the present invention exhibits excellent antibacterial activity against Salmonella sp. (Salmonella spp.), Which is a common infectious disease causing infectious diseases such as salmonellosis, sepsis, acute gastroenteritis, typhoid fever, typhoid fever, It can be developed as an active ingredient in medicines.

Description

신나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 살모넬라균에 대한 항균용 조성물{Anti-Bacterial Composition Against Salmonella spp. Comprising Extract from Acer ginnala Max as Active Ingredient} Anti-Bacterial Composition Against Salmonella spp. ≪ RTI ID = 0.0 > (Salmonella spp.) ≪ / RTI > Comprising Extract from Acer ginnala Max as Active Ingredient}

본 발명은 신나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 살모넬라균에 대한 항균용 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a composition for antimicrobial use against Salmonella comprising an extract of Sinkius as an active ingredient.

신나무(Acer ginnala Maxim.)는 단풍나무과 단풍나무속 식물로서 우리나라 전국 각지의 해발 1,500m 이하의 산기슭 양지바른 떨기나무 숲에서 흔히 잘 자라며, 낙엽소교목 또는 관목으로 식물체의 높이 2-8m 이다. 신나무를 민간 또는 한방에서는 안질에 약으로 쓰거나 상처 치유 및 지사제로 이용되어 왔다(1-2). 신나무(Acer ginnala Maxim.) 성분 연구로는 잎과 줄기로부터 플라보노이드(flavonoid) 류 (quercetin, quercitrin, isoquercitrin, rutin, quercetin-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-2''-O-gallate etc.), 탄닌(tannin)류 (acertannin, polygagallin, ginnalin B,C, gallic acid, ethyl gallate, methyl gallate, gallicin etc.), 사포니(saponin) (ilexoside O,K) 등이 보고되었다(3-8). Acer ginnala Maxim. Is a maple and maple plant. It grows well in the forests of sunny bushes at the foot of 1,500m below sea level. It is a deciduous arboreous tree or shrub with a plant height of 2-8m. It has been used either as a medicinal product in the civilian or oriental medicine, or as a wound healing agent (1-2). Acer ginnala Maxim. Ingredient studies include flavonoids (quercetin, quercitrin, isoquercitrin, rutin, quercetin-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-2 "-O-gallate etc. from leaves and stems. ), Tannins (acertannin, polygagallin, ginnalin B, C, gallic acid, ethyl gallate, methyl gallate and gallicin etc.) and saponin (ilexoside O, K) ).

신나무(Acer ginnala Maxim.)로부터 분리된 성분 연구 중 다른 천연물유래 성분 연구와 비교하여 보면 가장 큰 특징은 갈로탄닌(gallotannin)이라고 할 수 있는데, 신나무(Acer ginnala Maxim.)로 부터 분리되는 갈로탄닌(gallotannin)은 글루코오스(glucose)가 아닌 1,5-안하이드로글루시톨(1,5-anhydroglucitol)에 갈로일(galloyl)기가 결합한 점이 독특한 점이라고 할 수 있다. 일반적인 갈로탄닌은 유기산이나 당을 모핵으로 갈로일기가 에스테르(ester) 결합해 있는 가수분해형 탄닌으로 잘 알려져 있다. 신나무(Acer ginnala Maxim.)로부터 분리된 갈로탄닌으로서 가장 큰 특징적인 화합물로는 다음과 같이 5종의 갈로탄닌이 있으며, 세부적으로는 6-갈로일-1,5-안하이드로글루시톨(ginnalin B), 3,6-다이갈로일-1,5-안하이드로글루시톨(acertannin), 메틸갈레이트, 2,6-다이갈로일-1,5-안하이드로글루시톨(acertannin), 갈산(gallic acid)가 잘 알려져 있다. 특히, 1,5-안하이드로글루시톨을 모핵으로 갈로일기가 결합되어 있는 갈로일 글루시톨 화합물인 지날린 B(ginnalin B), 아세르탄닌(acertannin) 류가 다른 식물에서는 발견되기 쉽지 않은 신나무(Acer ginnala Maxim.)가 함유하고 있는 특징적인 폴리페놀이라고 할 수 있다(3-8). The most distinguishing feature of this study is that it is gallotannin which is separated from Acer ginnala Maxim. The most distinguishing feature is gallotannin which is isolated from Acer ginnala Maxim. gallotannin is a unique point that 1,5-anhydroglucitol, which is not glucose, is bound to a galloyl group. A common galotannine is known as a hydrolyzable tannin in which an organic acid or a sugar is linked to a galactooligosaccharide ester bond. Among the galantanin isolated from the ginseng (Acer ginnala Maxim.), The most characteristic compounds are the following five kinds of galantanin, specifically, 6-galloyl-1,5-anhydroglucitol (ginnalin B), 3,6-digalloyl-1,5-anhydroglycitol, methyl gallate, 2,6-digalloyl-1,5-anhydroglycitol, , And gallic acid are well known. In particular, galoisoglucytol compounds, such as ginnalin B and acertannin, which have 1,5-anhydroglucitol linked to the galactosyl group by galactosylation, are not easily found in other plants It is a characteristic polyphenol contained in the ginseng (Acer ginnala Maxim.) (3-8).

또한, 신나무 (Acer ginnala Maxim.)의 생리활성 연구로서는 주로 잎으로 부터 전추출물과 그로부터 분리된 갈로일 글루시톨(galloyl glucitol) 화합물들을 활용하여 강력한 자유라디칼(free radical) 소거능을 기반으로 한 항산화능과 항암 및 항돌연변이 등의 활성 등이 알려져 있다. 기존에 보고된 연구에 의하면 신나무 (Acer ginnala Maxim.)로부터 분리된 갈로일 글루시톨 화합물들은 양성대조군으로 사용된 L-아스코르빈산(L-ascorbic acid), BHA, α-토코페롤(α-Tocopherol) 등과 비교하였을때 대부분 우수하거나 오히려 뛰어난 항산화 활성을 나타났다는 점이 가장 큰 특징임을 알 수 있다(9-10). 신나무 (Acer ginnala Maxim.) 잎 추출물과 그로부터 분리된 갈로일 글루시톨(galloyl glucitol) 화합물을 이용한 항균활성으로는 Staphylococcus spp. 와 Streptococcus spp. 를 비롯한 그람양성균과 Pseudomonas spp.를 포함한 일부 그람음성균에 대한 항균활성을 양성대조군인 Ketoconazole과 Ampicillin과 비교하였을때, 전반적으로 우수하거나 혹은 일부 균종에 대해서는 양성대조군보다 더욱 강력한 항균활성을 나타내었다(10). 또한, 최근 신나무 (Acer ginnala Maxim.) 잎 추출물을 아토피 유사병변 유발 NC/Nga 마우스에 국소도포를 수행하였을때, 피부 병변 및 혈청 총 IgE 증가 억제효과와 Th2 사이토카인 중 아토피피부염 환자에게 특징적으로 증가되는 IL-4, IL-5, IL-13을 효율적으로 감소 및 억제하는 효과가 규명되어 난치성 피부질환인 아토피피부염 치료 신기능성 소재로서의 가능성이 보고되었다(11). 신나무(Acer ginnala Maxim.) 잎은 매우 많은 연구가 활발히 이루어진 반면에 신나무(Acer ginnala Maxim.) 수피 및 가지를 이용한 생리활성 연구가 아직까지 보고된 바가 매우 미비하고, 특히 신나무(Acer ginnala Maxim.) 수피 및 가지를 활용한 항균활성 연구에 대한 보고가 많이 되어 있지 않았다. In addition, studies on the physiological activity of Acer ginnala Maxim. Have been carried out mainly by using extracts from leaves and galloyl glucitol compounds separated therefrom and using antioxidant activity based on strong free radical scavenging ability And anticancer and antimutagenic activities are known. Previously reported studies have shown that galoisylglycitol compounds isolated from Acer ginnala Maxim can be used as positive control for L-ascorbic acid, BHA, α-Tocopherol ), Which is superior or superior to antioxidant activity (9-10). The antimicrobial activity of Acer ginnala Maxim. Leaf extract and galloyl glucitol compound isolated therefrom is Staphylococcus spp. And Streptococcus spp. And Gram-positive bacteria including Pseudomonas spp., And some gram-negative bacteria were compared with the positive control groups, Ketoconazole and Ampicillin, ). In addition, when topical application of Acer ginnala Maxim. Leaf extract to NC / Nga mice inducing atopy-like lesions was performed, the skin lesion and serum total IgE inhibitory effect and the increase in the number of patients with atopic dermatitis among Th2 cytokines (IL-4), IL-5 (IL-13), and IL-13 (IL-13) have been reported to be effective as a new functional material for treating atopic dermatitis. The Acer ginnala Maxim. Leaf has been studied extensively, while the Acer ginnala Maxim. Bark and branches have not been reported yet. Especially, Acer ginnala Maxim. There have been few reports on antimicrobial activity studies using bark and eggplant.

살모넬라(Salmonella)는 1885년 미국에서 돼지콜레라에 걸린 돼지로부터 처음 분리를 시작으로 1888년 독일에서 집단 식중독 사망자로부터 장염의 원인균으로 살모넬라를 분리 및 보고 하였다. 살모넬라균에 의한 질병의 특징은 장염, 고열, 균혈증, 급성 위장염, 병소감염, 티푸스증 등을 일으킨다. 살모넬라의 감염 및 통로는 위장관을 통해 숙주에 침입하며 전신조직으로 이동한다. 살모넬라 감염은 가축에게 주요한 문제가 되며, 오염된 식육과 계란은 인체 질환의 주요 병원소가 된다. 살모넬라 감염증의 원인체인 살모넬라균(Salmonella spp.)은 운동성이 있는 간균으로 그람 음성균이며 특히 탐식세포 및 비탐식세포 내에서 증식이 가능한 세균이기 때문에 치료가 상당히 어려운 대표적인 난치성 질병 중 하나이다(12-14). 한편, 최근 급격하게 증가하고 있는 항생제 내성 균주는 세계 각지에서 보고되고 있으며, 매년 수많은 인원이 항생제 내성 균주로 인해 사망하고 있는 심각한 상황이다. 이렇게 항생제 내성 균주에 의한 감염이 전 세계적으로 문제가 되면서 신규 항생제 개발에 많은 노력이 이루어지고 있지만, 신약의 개발 속도는 현저히 느린 실정이다(15-16). 따라서 효과적인 신규 항생제의 개발만큼 기존의 항생제의 적절한 활용과 내성을 최소화 할 수 있는 노력이 필요한 상황이다. 이와 관련하여 많은 연구자들이 천연물 유래 항균활성 신소재를 발굴하려는 연구가 꾸준히 진행되고 있다.
Salmonella was first isolated in 1885 from swine chickens in the United States, and in 1888, Salmonella was isolated and reported as a causative organism of colitis from a group of food poisoning deaths in Germany. Salmonella disease is characterized by enteritis, high fever, bacteremia, acute gastroenteritis, lesions, and typhus. Salmonella infections and pathways enter the host through the gastrointestinal tract and migrate to the whole body. Salmonella infection is a major problem for livestock, and contaminated meat and eggs are the main hospital for human disease. Salmonella spp., A motile bacterium, is one of the most refractory diseases that are difficult to treat because it is a Gram-negative bacterium and is particularly capable of proliferation in phagocytic and non-phagocytic cells (12-14) . On the other hand, antibiotic-resistant strains which are increasing rapidly in recent years have been reported all over the world, and a great number of people die every year due to antibiotic-resistant strains. Although a lot of efforts have been made to develop new antibiotics as a result of the worldwide problem of infection by the antibiotic-resistant strains, the development rate of new drugs is remarkably slow (15-16). Therefore, the development of effective new antibiotics is required to minimize the use of existing antibiotics and minimize resistance. In this regard, many researchers are constantly researching new materials for antimicrobial activity derived from natural products.

본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 논문 및 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 논문 및 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.
Numerous papers and patent documents are referenced and cited throughout this specification. The disclosures of the cited papers and patent documents are incorporated herein by reference in their entirety to better understand the state of the art to which the present invention pertains and the content of the present invention.

1. Kim TJ: Wild flowers and resources plants in Korea (Vol.3), Seoul: Seoul national university press; 2008, p. 202-203. 1. Kim TJ: Wild flowers and resources in Korea (Vol.3), Seoul: Seoul national university press; 2008, p. 202-203. 2. Im RJ: Flora medica coreana (Vol. 1), Pyongyang: Agricultural publishing house; 1999, p. 249. 2. Im RJ: Flora medica coreana (Vol. 1), Pyongyang: Agricultural publishing house; 1999, p. 249. 3. Woo LK: The chemical structure of acertannin. Yakhak Hoeji. 1962;6: 11-16.3. Woo LK: The chemical structure of acertannin. Yakhak Hoeji. 1962; 6: 11-16. 4. Bock K, LaCour N, F Jensen, SR, Nielsen BJ: The structure of acertannin. Phytochemistry. 1980;19:2033. 4. Bock K, LaCour N, F Jensen, SR, Nielsen BJ: The structure of acertannin. Phytochemistry. 1980; 19: 2033. 5. Han KD: Structural study on new tannin, polygagallin, from Acer ginnala Max. Yakhak Hoeji. 1962;6:1-4.5. Han KD: Structural study on new tannin, polygagallin, from Acer ginnala Max. 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Kim JY, Jeong MS, Choi SE, Kim JY, Park KY, Park KH, Lee DI, Joo SS, Lee CS, Bang H, Lee MK, Choi YW, Lee MW, Seong Seo SJ: The Effects of Acer ginnala Leaves Extraction on the Atopic Dermatitis-like Skin Lesions in NC/Nga Mice. Korean Journal of Dermatology. 2010; 48(11): 913-918.The effects of Acer ginnala were investigated. The results are summarized as follows: 1. The effects of Acer ginnA Leaves Extraction on the Atopic Dermatitis-like Skin Lesions in NC / Nga Mice. Korean Journal of Dermatology. 2010; 48 (11): 913-918. 12. 박석기: 살모넬라, 숙주 그리고 미생물총. 한국과학기술정보연구원. 2012a; 1-5. 12. Park Suk-ki: Salmonella, a host and a microorganism gun. Korea Institute of Science and Technology Information. 2012a; 1-5. 13. 박석기: 살모넬라 존속과 전파 전략. 한국과학기술정보연구원. 2012b; 1-5.13. Pak Suk-ki: Salmonella survival and propagation strategy. Korea Institute of Science and Technology Information. 2012b; 1-5. 14. 박석기: 살모넬라 보균자의 균 살포 진실. 한국과학기술정보연구원. 2012c; 1-5. 14. 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Cho HY, Choi SE: Anti-bacterial Effect of Stems of Acer ginnala Maxim. against MRSA. The Korean Society for Aesthetics and Cosmetology. submitted.17. Cho HY, Choi SE: Anti-bacterial Effect of Stems of Acer ginna Maxim. against MRSA. The Korean Society for Aesthetics and Cosmetology. submitted. 18. Jeon YH, Sun X, Kim M: Antimicrobial Activity of the Ethanol Extract from Rubus coreanum against Microorganisms Related with Foodborne Illness. Korean Journal of Food & Cookery Science. 2012; 20(1): 9-15. 18. Jeon YH, Sun X, Kim M: Antimicrobial Activity of the Ethanol Extract from Rubus coreanum against Microorganisms Related with Foodborne Illness. Korean Journal of Food & Cookery Science. 2012; 20 (1): 9-15. 19. Yoon MS, Yoo JS, Lee KK, Kim MK: A Study on Biological Activities of Opuntia humifusa Cladode Extracts. Journal of Applied Biological Chemistry. 2012;55(2): 117-121. 19. Yoon MS, Yoo JS, Lee KK, Kim MK: A Study on Biological Activities of Opuntia humifusa Cladode Extracts. Journal of Applied Biological Chemistry. 2012; 55 (2): 117-121.

본 발명자들은 안정성이 확보된 천연물 유래 항균물질을 개발하기 위해 연구 노력하였다. 그 결과, 본 발명자들은 신나무(Acer ginnala Maxim.)의 줄기로부터 추출한 추출물과 분획물이 인수공통 전염병균인 살모넬라균(Salmonella spp.)에 대해 매우 우수한 항균활성을 갖는다는 것을 실험적으로 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.The present inventors have made efforts to develop antimicrobial substances derived from natural materials with stability. As a result, the present inventors have experimentally confirmed that the extract and the fraction extracted from the stem of Acer ginnala Maxim. Have an excellent antimicrobial activity against Salmonella spp. Completed.

따라서, 본 발명의 목적은 신나무(Acer ginnala Maxim.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 살모넬라균(Salmonella spp.)에 대한 항균용 조성물을 제공하는데 있다.
Accordingly, an object of the present invention is to provide an antimicrobial composition for Salmonella spp. Comprising an Acer ginnala Maxim. Extract as an active ingredient.

본 발명의 목적 및 장점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구의 범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.
The objects and advantages of the present invention will become more apparent from the following detailed description of the invention, claims and drawings.

본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 신나무(Acer ginnala Maxim.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물을 제공한다. According to one aspect of the present invention, there is provided an antimicrobial composition comprising an Acer ginnala Maxim. Extract as an active ingredient.

본 발명은 신나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to an antimicrobial composition comprising an extract of Sinkiu as an active ingredient.

본 발명에서 신나무 추출물은 천연물로부터 추출물을 추출하는 당업계의 공지된 통상적인 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도, 압력의 조건 하에서 통상적인 용매를 사용하여 추출할 수 있다. In the present invention, the Shiney extract can be extracted using conventional solvents known in the art for extracting an extract from a natural product, that is, under ordinary temperature and pressure conditions, using a conventional solvent.

본 발명에서 사용되는 신나무 추출물은 신나무의 전체의 추출물, 또는 줄기, 뿌리, 잎, 꽃, 열매, 및 씨앗으로 구성된 군에서 선택된 신나무 일부의 추출물이며, 가장 바람직하게는 신나무의 줄기 부분으로부터 얻은 추출물이다. The extract of Shin wood selected from the group consisting of whole stem, root, leaf, flower, fruit, and seed is an extract obtained from the trunk portion of Shin wood .

본 발명에서 신나무 추출물을 얻기 위해 사용할 수 있는 추출용매는 천연물 추출 공정에서 일반적으로 사용할 수 있는 용매이며, 둘 이상의 서로 다른 용매를 혼합하여 사용하거나 순차적으로 사용할 수도 있다. 바람직하게는, 본 발명의 추출용매는 물, 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급 알코올(메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올), 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄(CH2Cl2), 클로로포름, 헥산(Hexane) 및 1,3-부틸렌 글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 사용할 수 있다. 보다 바람직하게는, 메탄올, 에탄올, 아세톤, n-헥산, 디클로로메탄, 에틸아세테이트, 또는 물을 사용할 수 있며, 가장 바람직하게는 물, 메탄올, 에탄올 또는 아세톤이다. 한편, 본 발명에서 추출물은 상기한 추출용매에 의해 얻은 추출물 뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여 얻은 추출물도 실질적으로 동일한 효과를 나타낸다는 것은 당업자에게 자명하다. 추출공정은 추출용매를 부분적으로 또는 완전히 제거하는 단계를 통해 완성되며, 부분적 제거는 상당한 양의 유기용매가 없는 수성 농축물이 얻어질 때까지 농축하는 것을 의미하며, 완전한 제거에 의해서는 건조 잔류물을 얻을 수 있다. The extraction solvent which can be used for obtaining the Shinki extract in the present invention is a solvent which can be generally used in a natural material extraction process, and two or more different solvents may be mixed or used sequentially. Preferably, the extraction solvent of the present invention is selected from the group consisting of water, an anhydrous or a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms (methanol, ethanol, propanol, butanol), acetone, ethyl acetate, butyl acetate, dichloromethane (CH 2 Cl 2 ) , Hexane (Hexane), and 1,3-butylene glycol. More preferably, methanol, ethanol, acetone, n-hexane, dichloromethane, ethyl acetate, or water may be used, and most preferred is water, methanol, ethanol or acetone. It is apparent to those skilled in the art that the extract of the present invention has substantially the same effect as the extract obtained by using the above-mentioned extraction solvent as well as the extract obtained by using other extraction solvent. The extraction process is completed by partially or completely removing the extraction solvent and partial removal means concentrating until an aqueous concentrate free of a significant amount of organic solvent is obtained, Can be obtained.

본 명세서에서 사용되는 용어 "추출물" 은 상술한 바와 같이 당업계에서 조추출물(crude extract)로 통용되는 의미를 갖지만, 광의적으로는 추출물을 추가적으로 분획(fractionation)한 분획물도 포함한다. 즉, 신나무 추출물은 상술한 추출용매를 이용하여 얻은 것뿐만 아니라, 여기에 정제과정을 추가적으로 적용하여 얻은 분획물도 포함한다. 예컨대, 상기 추출물을 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 얻은 분획, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 추출물에 포함되는 것이다. As used herein, the term "extract" has the meaning conventionally used in the art as a crude extract, but broadly includes fractions obtained by further fractionation of the extract. That is, not only the extract obtained from the above-described extraction solvent but also fractions obtained by further applying a purification process thereto. For example, a fraction obtained by passing the above extract through an ultrafiltration membrane having a constant molecular weight cut-off value, and a separation by various chromatography (manufactured for separation according to size, charge, hydrophobicity or affinity) The fraction obtained by the purification method is also included in the extract of the present invention.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 추출물은 상기 추출용매에 의한 추출물을 추가적으로 컬럼 크로마토그래피(column chromatography) 또는 박막 크로마토그래피(thin layer chromatography)에 의해 분리하여 얻은 분획물을 포함한다. According to a preferred embodiment of the present invention, the extract includes a fraction obtained by further separating the extract by the extraction solvent by column chromatography or thin layer chromatography.

본 발명의 다른 바람직한 구현예에 의하면, 상기 신나무 추출물은 살모넬라균(Salmonella spp.)에 대해 항균 활성을 갖는다. 상기 항균활성을 나타내는 살모넬라균(Salmonella spp.)은 바람직하게는 살모넬라 엔테리카(S. enterica) 및 살모넬라 본고리(S. bongori)을 포함하며, 예를 들어, 살모넬라 엔테리티디스(S. enteritidis), 살모넬라 헤이델베르그(S. heidelberg), 장티푸스균(S. Typhi), 파라티푸스 A균, B균, C균(S. paratyphi A, B, C), 및 가금티푸스균(S. gallinarum)등을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. According to another preferred embodiment of the present invention, the Sinnea extract has antibacterial activity against Salmonella spp. Salmonella spp. Exhibiting the above-mentioned antibacterial activity preferably contains Salmonella enterica and Salmonella spp., For example, Salmonella spp., Such as Salmonella enteritidis, , S. heidelberg, S. Typhi, Paratyphi A, B, C paratyphi A, B, C, and S. gallinarum. But are not limited thereto.

본 발명의 조성물은 항균 활성을 갖는 기능성 식품 조성물의 형태로 제공될 수 있다. 본 발명의 조성물이 식품 조성물 형태로 제공되는 경우, 본 발명의 조성물은 상기 유효성분인 신나무 추출물 이외에, 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함할 수 있다. 상술한 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서 천연 감미제 (타우마틴, 스테비아 추출물, 레바우디오시드 A, 글리시리진 등) 및 합성 감미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다. 예컨대, 본 발명의 식품 조성물이 드링크제로 제조되는 경우에는 본 발명의 유효성분인 신나무 추출물 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 두충 추출액, 대추 추출액, 감초 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다. The composition of the present invention may be provided in the form of a functional food composition having antimicrobial activity. When the composition of the present invention is provided in the form of a food composition, the composition of the present invention may contain, in addition to the above-mentioned effective ingredients, a cinnamon extract, a component ordinarily added during the manufacture of a food such as protein, carbohydrate, fat , Nutrients, flavoring agents, and flavoring agents. Examples of the above-mentioned carbohydrates include, but are not limited to, monosaccharides such as disaccharides such as glucose and fructose such as maltose, sucrose, oligosaccharides and the like and polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like And sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol. Natural sweeteners (tau Martin, stevia extract, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic sweetening agents (saccharin, aspartame, etc.) can be used as sweeteners. For example, when the food composition of the present invention is prepared as a drink, citric acid, liquid fructose, sugar, glucose, acetic acid, malic acid, juice, mulberry extract, jujube extract, licorice extract, Can be included.

본 발명의 다른 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 상기 항균용 조성물은 약제학적 조성물의 형태로 제공된다. 상기 본 발명의 약제학적 조성물은 (a) 신나무(Acer ginnala Maxim.) 추출물의 약제학적 유효량; 및 (b) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 세균 감염성 질환의 치료 또는 예방용 약제학적 조성물이다. According to another preferred embodiment of the present invention, the antimicrobial composition of the present invention is provided in the form of a pharmaceutical composition. The pharmaceutical composition of the present invention comprises (a) a pharmaceutically effective amount of Acer ginnala Maxim. Extract; And (b) a pharmaceutically acceptable carrier.

상기 약제학적 조성물에서 신나무 추출물에 대한 내용은 상기 항균용 조성물에서 설명된 내용과 동일하므로 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위해 중복하여 설명하지 않는다. The contents of the extracts of Cinnamomum cassia L. extract in the above pharmaceutical composition are the same as those described in the above-mentioned antimicrobial composition, and thus are not duplicated in order to avoid excessive complexity of the specification.

본 발명의 바람직한 구현예에 의하면, 본 발명의 신나무 추출물은 살모넬라균(Salmonella spp.)에 대한 항균활성을 가지므로, 살모넬라균에 의한 감염성 질환의 치료 또는 예방 용도로 사용될 수 있다. 상기 살모넬라균(Salmonella spp.)은 바람직하게는 살모넬라 엔테리카(S. enterica) 및 살모넬라 본고리(S. bongori)을 포함하며, 예를 들어, 살모넬라 엔테리티디스(S. enteritidis), 장티푸스균(S. Typhi), 파라티푸스 A균, B균, C균(S. paratyphi A, B, C), 및 가금티푸스균(S. gallinarum)등을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 상기 살모넬라균에 의한 감염성 질환은 상기 살모넬라균이 감염되어 발생되는 질환으로서 예를 들어 살모넬라증(salmonellosis), 패혈증, 급성 위장염, 장티푸스증, 장티푸스성 발열을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. According to a preferred embodiment of the present invention, the extract of Sinney of the present invention has antimicrobial activity against Salmonella spp., And thus can be used for the treatment or prevention of infectious diseases caused by Salmonella. The Salmonella spp. Preferably includes Salmonella enterica and Salmonella spp., For example, Salmonella spp., Such as S. enteritidis, S. typhi), Paratyphoid A, B, C paratyphi A, B, C, and S. gallinarum. The infectious diseases caused by Salmonella include, but are not limited to, salmonellosis, sepsis, acute gastroenteritis, typhoid fever, typhoid fever, and the like, as diseases caused by infection with Salmonella.

본 발명의 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 본 발명의 약제학적 조성물에 포함되는 약제학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. The pharmaceutical composition of the present invention includes a pharmaceutically acceptable carrier. The pharmaceutically acceptable carriers to be contained in the pharmaceutical composition of the present invention are those conventionally used in the present invention and include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, starch, acacia rubber, calcium phosphate, alginate, gelatin, But are not limited to, calcium silicate, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, cellulose, water, syrups, methylcellulose, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil. It is not.

본 발명의 약제학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약제학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다. The pharmaceutical composition of the present invention may further contain a lubricant, a wetting agent, a sweetening agent, a flavoring agent, an emulsifying agent, a suspending agent, a preservative, etc. in addition to the above components. Suitable pharmaceutically acceptable carriers and formulations are described in detail in Remington ' s Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995).

본 발명의 약제학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물의 일반적인 투여량은 성인 기준으로 0.001-1000 ㎎/kg 범위 내이다. The pharmaceutical composition of the present invention can be administered orally or parenterally. The appropriate dosage of the pharmaceutical composition of the present invention may vary depending on factors such as the formulation method, administration method, age, body weight, sex, pathological condition, food, administration time, administration route, excretion rate, . Typical dosages of the pharmaceutical compositions of the present invention are in the range of 0.001-1000 mg / kg on an adult basis.

본 발명의 약제학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액, 시럽제 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 산제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
The pharmaceutical composition of the present invention may be formulated into a unit dose form by formulating it using a pharmaceutically acceptable carrier and / or excipient according to a method which can be easily carried out by a person having ordinary skill in the art to which the present invention belongs. Or by intrusion into a multi-dose container. The formulations may be in the form of solutions, suspensions, syrups or emulsions in oils or aqueous media, or in the form of excipients, powders, powders, granules, tablets or capsules, and may additionally contain dispersing or stabilizing agents.

본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다. The features and advantages of the present invention are summarized as follows.

(i) 본 발명은 신나무(Acer ginnala Maxim.) 추출물의 항균 용도에 관한 것이다. (i) The present invention relates to the antibacterial use of Acer ginnala Maxim. extract.

(ⅱ) 본 발명의 신나무 추출물은 특히 살모넬라균(Salmonella spp.)에 대해 우수한 항균활성을 나타낸다. (Ii) The extract of Sinney of the present invention exhibits excellent antibacterial activity particularly against Salmonella spp.

(ⅲ) 본 발명의 천연물 유래의 신나무 추출물은 항균용 기능성 식품 또는 의약품의 활성성분으로 개발될 수 있다. (Iii) The extract of Shineko derived from natural products of the present invention can be developed as an active ingredient of a functional food for antibiosis or a pharmaceutical product.

본 발명은 신나무(Acer ginnala Maxim.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 신나무 추출물은 살모넬라증(salmonellosis), 패혈증, 급성 위장염, 장티푸스증, 장티푸스성 발열 등을 일으키는 인수공통 전염병균인 살모넬라균(Salmonella spp.)에 대해 우수한 항균활성을 나타내어, 항균용 기능성 식품 또는 의약품의 활성성분으로 개발될 수 있다.
The present invention relates to an antimicrobial composition comprising an Acer ginnala Maxim. Extract as an active ingredient. The extract of Shinki of the present invention exhibits excellent antibacterial activity against Salmonella sp. (Salmonella spp.), Which is a common infectious disease causing infectious diseases such as salmonellosis, sepsis, acute gastroenteritis, typhoid fever, typhoid fever, It can be developed as an active ingredient in medicines.

도 1은 신나무(Acer ginnala) 줄기(stem)로부터 TLC 추출물 및 분획물을 분리하는 과정을 보여주는 모식도이다.
도 2는 신나무 줄기 추출물과 분획물에 대한 TLC 크로마토그램의 비교 결과를 보여준다. ①: 신나무 줄기의 80％ 아세톤 추출물, ② : 분획-1(Fr-1), ③: 분획-2(Fr-2), ④: 분획-3(Fr-3), ⑤: 분획-4(Fr-4), ⑥: 분획-5(Fr-5), ⑦: 분획-6(Fr-6), ⑧: 분획-7(Fr-7), ⑨: 분획-8(Fr-8). BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS Figure 1 is a schematic diagram showing the process of separating TLC extract and fractions from Acer ginnala stem.
Figure 2 shows the results of a comparison of TLC chromatograms for the extracts and fractions of Shinray stem. (1): 80% acetone extract, 2: Fr-1, 3: Fr-2, 4: Fr-3, (Fr-5), ⑦: fraction-6 (Fr-6), ⑧: fraction-7 (Fr-7), and ⑨: fraction-8 (Fr-8).

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood by those skilled in the art that these embodiments are only for describing the present invention in more detail and that the scope of the present invention is not limited by these embodiments in accordance with the gist of the present invention .

실시예 Example

실험 방법 및 재료 Experimental Methods and Materials

1. 재료 및 방법 1. Materials and Methods

1-1. 실험 재료1-1. Experimental material

신나무(Acer ginnala Maxim.)는 2009년 8월 경기도 포천시에 위치한 국립수목원에서 제공받아 식물학적 감정한 후 사용하였으며, 표준품은 중앙대학교 약학대학 생약학 연구실에 보관되어 있다(AGM2009-08).
Acer ginnala Maxim. Was obtained from the National Arboretum in Pocheon, Gyeonggi Province in August 2009 and used for botanical evaluation. The reference material is stored in the Department of Pharmacology, Chung Ang University (AGM2009-08).

1-2. 기기 및 시약1-2. Instruments and reagents

컬럼 크로마토그래피(Column chromatography)용 충진제는 Sephadex LH-20 (10-25 um, GE Healthcare Bio-Science AB, Uppsala, Sweden)을 사용하였으며, 박층크로마토그래피(Thin layer chromatography, TLC) 플레이트는 pre-coated silica gel 60 F254 plate (Merck, Darmstadt, Germany)를 사용하였다.
Thin layer chromatography (TLC) plates were pre-coated using a Sephadex LH-20 (10-25 um, GE Healthcare Bio-Science AB, Uppsala, Sweden) as a filler for column chromatography. silica gel 60 F 254 plate (Merck, Darmstadt, Germany) was used.

1-3. 추출 및 분획 1-3. Extraction and fractionation

신선한 재료 5.5 kg을 절단한 후 80％ 아세톤(acetone)으로 실온에서 3회 추출하여 여과하였다. 그 추출액을 감압 농축하여 387.87g의 추출물을 H2O에 현탁하여 여과한 142.87g을 Sephadex LH-20 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 활성추적분획법(activity guided fractionation)에 이용하였다. 용매는 H2O-MeOH을 0％-100％ 까지 농도를 높였으며, TLC 모니터링을 실시하여 8개의 분획[Fr. 1(27.18g), Fr. 2(2.3g), Fr. 3(4.60g), Fr. 4(13.86g), Fr. 5(6.07g), Fr. 6(5.54g), Fr. 7(14g), Fr. 8(13.45g)]을 각각 얻었다(도 1 참조).
5.5 kg of fresh material was cut and then extracted three times at room temperature with 80% acetone and filtered. The extract was concentrated under reduced pressure to give 387.87 g of the extract, which was suspended in H 2 O and filtered. 142.87 g of the extract was used for activity guided fractionation using Sephadex LH-20 column chromatography. The solvent increased the concentration of H 2 O-MeOH from 0% to 100% and was subjected to TLC monitoring to give 8 fractions [Fr. 1 (27.18 g), Fr. 2 (2.3 g), Fr. 3 (4.60 g), Fr. 4 (13.86 g), Fr. 5 (6.07 g), Fr. 6 (5.54 g), Fr. 7 (14 g), Fr. 8 (13.45 g)], respectively (see Fig. 1).

2. 박층크로마토그래피(Thin Layer Chromatography, TLC) 테스트 2. Thin Layer Chromatography (TLC) test

신나무(Acer ginnala Maxim.) 가지의 구성 성분을 추정과 효율적인 분획을 분리하기 위하여 TLC를 통한 분석을 실시하였다. 먼저 신나무 수피를 80％ 아세톤(acetone)으로 추출하여 신나무(Acer ginnala Maxim.) 가지의 원액, 그리고 Sephadex LH-20로 분획하여 각각 신나무(Acer ginnala Maxim.) 가지 추출물(extract)과, 하위 분획물(sub fraction) (1-8)로 9가지 샘플을 만들고 TLC 테스트를 실시하였다. 전개용매는 CHCl3: MeOH: H2O=6:4:1로 혼합된 것을 사용하였으며, 전개 시킨 뒤에는 FeCl3과 10％ H2SO4, 아니스-알데히드(anis-aldehyde)를 분무한 후 열판에 가열하는 방법을 이용하여 발색시켰다. TLC 결과 각 분획이 효율적으로 나누어졌음을 알 수 있었다(도 2 참조)(17).
Analysis of the components of the Acer ginnala Maxim. Branch was carried out by TLC in order to separate the estimation and efficient fractionation. First, the bark bark was extracted with 80% acetone, and the extracts were divided into Acer ginnala Maxim. Broth and Sephadex LH-20. The extracts of Acer ginnala Maxim. sub-fraction (1-8), and TLC test was performed. The developing solvent was a mixture of CHCl 3 : MeOH: H 2 O = 6: 4: 1. After development, FeCl 3 and 10% H 2 SO 4 were sprayed with anis-aldehyde, Was used for heating. TLC showed that each fraction was efficiently divided (see FIG. 2) (17).

3. 항균력 실험 3. Antimicrobial activity

3-1. 사용 균주 3-1. Used strain

장티푸스균(Salmonella Typhi) (ATCC19943), 파라티푸스 A균(Salmonella paratyphi A), 가금티푸스균(Salmonella gallinarum)(ATCC9184)는 국립수의과학 검역원에서 분양 받아 사용하였다. 계대 배양 활성시 배지는 Mueller Hinton Agar (MHA, Difco, USA), Mueller Hinton Broth (MHB, Difco, USA) 를 사용하였다. Salmonella Typhi (ATCC19943), Salmonella paratyphi A (Salmonella paratyphi), and Salmonella gallinarum (ATCC9184) were purchased from the National Veterinary Research and Quarantine Service. Mueller Hinton agar (MHA, Difco, USA) and Mueller Hinton broth (MHB, Difco, USA) were used for the subculture.

3-2. 배양조건 3-2. Culture conditions

사용한 배지와 모든 기구는 오토클레이브(autoclave) (온도 121℃, 1.3 기압에서 15 분)을 사용하여 멸균시켜 사용하였으며, 균주는 -70℃에서 보관할 수 있도록 처리하여 보관하였다.
The medium and all instruments used were sterilized using an autoclave (temperature: 121 ° C, 1.3 atm for 15 minutes), and the strain was stored and stored at -70 ° C.

3-3. 액체배지 희석법에 의한 항균력 측정 3-3. Measurement of antimicrobial activity by liquid medium dilution method

최소억제농도는(MIC)는 Clinical and Laboratory Standards Institute의 기준에 따라 실시하였다. 장티푸스균(S. typhi) (ATCC 19943), 가금티푸스균 (S.gallinarum) (ATCC9184), 파라티푸스 A균(S. paratyphi A) 각 1종을 Muller-Hinton Broth에 현탁 후 표준탁도액(0.5 Mcfarland standard)과 같은 탁도로 조정된 균액을 제조하여 균의 농도가 약 1 X 108 CFU/㎖가 되게 만들어서 액체 배지 희석법에 의한 항균력 실험에 사용하였다. 생약시료를 DMSO (dimethylsulfoxide)을 용매로 하여 최고 농도 2 ㎎/㎖에서 최저농도 100 ㎍/㎖에 이르도록 단계적으로 희석하여 96 웰 플레이트(well plate)의 각 웰에 10 ㎕씩 주입한 후 균액을 100 ㎕, 배지 90 ㎕씩 첨가하였다. 이것을 배양기(incubator)에서 37℃ 조건에서 24시간 배양한 후, 육안으로 관찰하여 균의 생장이 억제된 최저농도를 최소억제농도(MIC, minimal inhibitory concentration)로 정하였다. 암피실린(ampicillin)은 최고 농도 250 ㎍/㎖에서 최저농도 0.06 ㎍/㎖에 이르도록 단계적으로 희석하여 생약시료들과 같은 조건에서 배양하였다. 사용한 용매와 DMSO가 시료의 항균력에 영향을 미치지 않았음을 대조실험을 통해 확인하였다.
The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined according to the criteria of the Clinical and Laboratory Standards Institute. One of each of S. typhi (ATCC 19943), S. gallinarum (ATCC9184) and S. paratyphi A was suspended in Muller-Hinton Broth, and a standard turbidity liquid (0.5 Mcfarland standard) was used to make the bacterial concentration to be about 1 × 10 8 CFU / ㎖ and used for the test of antibacterial activity by liquid medium dilution method. The herbal medicine sample was diluted stepwise with DMSO (dimethylsulfoxide) as the solvent at a maximum concentration of 2 ㎎ / ㎖ to the lowest concentration of 100 ㎍ / ㎖, and 10 ㎕ of each was injected into each well of a 96-well plate. 100 [mu] L, and 90 [mu] L of medium. After incubation at 37 ° C in an incubator for 24 hours, the minimum inhibitory concentration (MIC) was determined by visual observation. Ampicillin was diluted stepwise to a minimum concentration of 250 ㎍ / ㎖ at the lowest concentration of 0.06 ㎍ / ㎖ and cultured under the same conditions as the herbal samples. A control experiment confirmed that the solvent used and DMSO did not affect the antibacterial activity of the sample.

실험결과 Experiment result

신나무(Acer ginnala Maxim.) 가지의 항균작용을 검색하기 위해 액체 배지 희석법을 이용하여 시료의 최소억제농도(MIC)를 측정하였다. 장티푸스균(S. typhi)(ATCC 19943), 가금티푸스균(S. gallinarum)(ATCC9184), 파라티푸스 A균(S. paratyphi A)에 대하여 항균활성을 측정해본 결과 신나무 (Acer ginnala Maxim.) 가지 추출물은 장티푸스균(S. typhi)(ATCC 19943), 가금티푸스균(S.gallinarum)(ATCC9184), 파라티푸스 A균(S. paratyphi A)의 균주에 대해서 2000 ㎍/㎖로 측정되어 양성 대조군인 암피실린(ampicillin, 0.97 - > 2,000 ㎍/㎖)과 비교하였을 때 우수한 항균효과를 나타내었다(표 1 참조). 하기 표 1에서 MIC는 최소억제농도, AG는 신나무 가지의 80% 아세톤 추출물, AMP는 암피실린이다. The minimum inhibitory concentration (MIC) of the sample was measured by liquid medium dilution method to detect the antimicrobial activity of Acer ginnala Maxim. Antimicrobial activity of S. typhi (ATCC 19943), S. gallinarum (ATCC9184) and S. paratyphi A was measured. The results showed that Acer ginnala Maxim. Was measured at a concentration of 2000 占 퐂 / ml for strains of S. typhi (ATCC 19943), S. gallinarum (ATCC9184) and S. paratyphi A, and the positive control group, ampicillin ampicillin, 0.97 -> 2,000 ㎍ / ㎖) (Table 1). In Table 1 below, MIC is the minimum inhibitory concentration, AG is the 80% acetone extract of Shin branches, and AMP is ampicillin.

항균활성(추출물 수준)Antibacterial activity (extract level) 균주Strain MIC (μg/ml) MIC (μg / ml) AG AG AMPAMP S. Typhi (ATCC 19943) S. Typhi (ATCC 19943) 2,0002,000 0.970.97 S. paratyphi A S. paratyphia 2,0002,000 1.971.97 S. gallinarum (ATCC 9784) S. gallinarum (ATCC 9784) 2,0002,000 >2,000> 2,000

신나무(Acer ginnala Maxim.) 가지 분획 물질에서는 장티푸스균(S. typhi) (ATCC 19943), 가금티푸스균(S. gallinarum) (ATCC9184), 파라티푸스 A균(S. paratyphi A)의 균주에 대해서 250 - >2,000 ㎍/㎖ 농도로 측정되어 우수한 항균효과를 나타냈으며, 특히 분획 물질 Fr. 5번 및 Fr. 6번은 전반적으로 추출물과 다른 분획 물질과 비교하여 가장 우수한 항균활성을 나타냈다. 더욱 중요한 결과로서는 분획 물질 Fr. 5번 및 Fr. 6번이 가금티푸스균(S. gallinarum) (ATCC9184) 균주에 대해서 1,000 ㎍/㎖로 측정되었으며, 양성대조군으로 사용된 암피실린의 항균력인 >2,000㎍/㎖ 농도 보다 더욱 우수한 항균력을 나타냈다. TLC 모니터링에 추정되는 페놀성 화합물을 포함함에 따라서 분획물 Fr. 6번이 가장 우수한 항균력이 250 - 1,000 ㎍/㎖으로 확인이 되었으며, 그다음 강력한 항균활성은 분획물 Fr.5이 500 - 1,000 ㎍/㎖으로 측정이 되어 우수한 항균 활성을 나타내었다(표 2 참조). 하기 표 2에서 MIC는 최소억제농도, AMP는 암피실린이다. For the strains of Acer ginnala Maxim. Branch, the strains of S. typhi (ATCC 19943), S. gallinarum (ATCC9184) and S. paratyphi A were 250 - > 2,000 ㎍ / ㎖, and showed excellent antimicrobial effect. 5 and Fr. 6 showed the best antimicrobial activity compared with the extract and other fraction materials. More importantly, the fraction material Fr. 5 and Fr. 6 was measured at 1,000 ㎍ / ㎖ for S. gallinarum (ATCC9184) strain and showed better antimicrobial activity than the concentration of 2,000 ㎍ / ㎖, the antimicrobial activity of the ampicillin used as a positive control. Including the phenolic compounds estimated for TLC monitoring, fractions Fr. 6 showed the best antimicrobial activity of 250 - 1,000 ㎍ / ㎖, and the strong antimicrobial activity showed excellent antimicrobial activity by measuring fraction Fr.5 of 500 - 1,000 ㎍ / ㎖ (see Table 2). In Table 2 below, MIC is the minimum inhibitory concentration and AMP is the ampicillin.

항균활성 (소분획 수준)Antibacterial activity (small fraction level) 균주Strain MIC (μg/ml) MIC (μg / ml) Fr-1Fr-1 Fr-2Fr-2 Fr-3Fr-3 Fr-4Fr-4 Fr-5Fr-5 Fr-6Fr-6 Fr-7Fr-7 Fr-8Fr-8 AMPAMP S. Typhi
(ATCC 19943) S. Typhi
(ATCC 19943) >2,000> 2,000 >2,000> 2,000 >2,000> 2,000 >2,000> 2,000 500500 500500 >2,000> 2,000 >2,000> 2,000 0.970.97 S. paratyphi A S. paratyphia >2,000> 2,000 >2,000> 2,000 >2,000> 2,000 >2,000> 2,000 500500 250250 >2,000> 2,000 >2,000> 2,000 1.971.97 S.gallinarum
ATCC 9784 S. gallinarum
ATCC 9784 >2,000> 2,000 >2,000> 2,000 >2,000> 2,000 >2,000> 2,000 1,0001,000 1,0001,000 >2,000> 2,000 >2,000> 2,000 >2,000> 2,000

신나무(Acer ginnala Maxim.) 가지 추출물과 컬럼 크로마토그래피(column chromatography)를 이용한 8개의 분획물들의 그람음성균인 3종의 살모넬라균(Salmonella spp.)을 대상으로 MIC법에 의한 항균력 결과를 최근에 천연 추출물을 이용하여 항균력을 보고한 연구논문과의 비교 및 검토해 보면, 본 연구결과가 의미 있는 결과라는 것을 알 수 있음을 시사한다. 구체적으로 살펴보면, 복분자 에탄올 추출물을 식중독 유발 관련 7종의 세균을 대상으로 MIC법을 활용한 항균력 실험 결과에서는 복분자 에탄올 추출물을 500-4000 ppm 농도를 사용하였을때, 살모넬라균(Salmonella spp.)을 제외한 6종의 세균에 대해서는 완전한 생육 저해 효과를 나타냈다. 복분자 에탄올 추출물 사용 농도 최고 4000 ppm에서도 살모넬라(Salmonella spp.) 균종에 대해서는 항균력을 나타내지 않았다(18). 또한, 손바닥 선인장 줄기의 열수 추출물과 75％ 에탄올 추출물을 4종의 그람양성 및 그람음성 세균을 대상으로 항균활성을 측정해 본 결과에서는 살모넬라(Salmonella spp.) 균종에 대한 영향에서는 항균효과가 확인이 되지 않았으며, 오히려 처리 농도에 비례하여 생장을 증가시키는 것으로 나타났다(19). 이와 같이 유사한 연구 논문과 비교하였을 때 본 발명에서 나타난 신나무(Acer ginnala Maxim.) 가지 추출물과 분획물에서 확인된 살모넬라(Salmonella spp.) 균종에 대한 항균력 결과가 추출물 레벨에서는 2000 ㎍/㎖로 항균력을 확인이 되었으며, 분획물 레벨에서는 250 - >2,000 ㎍/㎖ 농도에서 항균력이 확인이 되어 매우 우수한 항균력을 나타냈음을 알 수 있었다.
The results of antimicrobial activity of three gram - negative Salmonella spp. (Salmonella spp.) Of eight fractions by the extracts of Acer ginnala maxim. And column chromatography using MIC method were compared with those of natural extract The results of this study suggest that the results of this study are meaningful results. Specifically, when the bacterium ethanol extract was used in seven antibiotics related to food poisoning, the results of the antimicrobial activity test using the MIC method showed that when the bacterium ethanol extract was used at a concentration of 500-4000 ppm, the antimicrobial activity of Salmonella spp. And showed complete growth inhibition effect on six kinds of bacteria. No antimicrobial activity against salmonella (Salmonella spp.) Was detected at up to 4000 ppm of bokbunja ethanol extract (18). In addition, the antimicrobial activity of Salmonella spp. Was determined by examining the antimicrobial activity of four kinds of gram-positive and gram-negative bacterium, which were hydrothermal extract and 75% ethanol extract of Opuntia ficus-indica , But rather increased the growth rate in proportion to the treatment concentration (19). The results of the antimicrobial activity against salmonella (Salmonella spp.) Strains identified in the extracts and fractions of Acer ginnala Maxim. Branch obtained in the present invention when compared with the similar research papers showed the antimicrobial activity to 2000 ㎍ / ㎖ at the extract level . At the fraction level, the antimicrobial activity was confirmed at the concentration of 250 -> 2,000 ㎍ / ㎖.

결론conclusion

본 발명의 실험결과는 장염 및 식중독의 유해 원인균으로 알려진 대표적인 살모넬라균에 대한 신나무 (Acer ginnala Maxim.) 가지 추출물과 분획물의 항균력을 검증하였다. 신나무 (Acer ginnala Maxim.) 가지를 80％ 아세톤(acetone)으로 추출하고 Sephadex LH-20 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 활성추적분획법(activity guided fractionation)을 이용하여 총 8개의 분획물(fr. 1-8)으로 나누었으며, 준비된 생약시료들과 양성대조군인 암피실린(ampicillin)을 3종류의 살모넬라 균종인 장티푸스균(S. typhi) (ATCC 19943), 가금티푸스균(S. gallinarum) (ATCC9184), 파라티푸스 A균(S. paratyphi A)을 대상으로 MIC법에 의해 항균력을 측정하였다. 그 결과 신나무(Acer ginnala Maxim.) 가지 추출물과 분획물 Fr.5번과 Fr.6번은 양성대조군인 암피실린(ampicillin)과 비교하였을 때 전반적으로 우수한 항균활성을 나타냈으며, 특정 살모넬라 균종인 가금티푸스균(S. gallinarum) (ATCC9184)에 대해서는 양성대조군보다 우수한 항균 활성이 확인되었다. 이와 같은 결과로 볼 때 신나무(Acer ginnala Maxim.) 가지 추출물과 분획물은 강력한 항균 활성을 나타내어 앞으로 다양한 기능성 식품과 의약품 소재로의 개발을 기대할 수 있을 것이다.
The experimental results of the present invention confirmed the antibacterial activity of the extracts and fractions of Acer ginnala Maxim. Branch of salmonella, which is known as a causative agent of enteritis and food poisoning. Acer ginnala Maxim. Branches were extracted with 80% acetone and analyzed by the activity guided fractionation method using Sephadex LH-20 column chromatography. Total 8 fractions (fr. 1-8 ), And the prepared herbal medicine samples and positive control ampicillin were divided into three kinds of salmonella species, S. typhi (ATCC 19943), S. gallinarum (ATCC9184), and paratyphoid A The antimicrobial activity of S. paratyphi was measured by MIC method. As a result, the extracts of Acer ginnala Maxim. And fractions Fr.5 and Fr.6 showed excellent antimicrobial activity as compared with the positive control group, ampicillin, and the antimicrobial activity of Salmonella typhimurium Antibacterial activity of S. gallinarum (ATCC9184) was confirmed to be superior to that of the positive control. These results suggest that the extracts and fractions of Acer ginnala Maxim. Branch showed strong antimicrobial activity and could be expected to be developed into various functional foods and pharmaceutical materials in the future.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현 예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다. While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the same is by way of illustration and example only and is not to be construed as limiting the scope of the present invention. Accordingly, the actual scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.

Claims (6)

신나무(Acer ginnala Maxim.)의 줄기 추출물을 유효성분으로 포함하는 가금티푸스균(Salmonella gallinarum)에 대한 항균용 조성물.
An antimicrobial composition for Salmonella gallinarum comprising stem extract of Acer ginnala Maxim. As an active ingredient.
삭제delete 제 1 항에 있어서, 상기 신나무 줄기 추출물은 물, 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄(CH2Cl2), 클로로포름, 헥산(Hexane) 및 1,3-부틸렌 글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 용매에 의한 추출물인 것을 특징으로 하는 조성물.
2. The method according to claim 1, wherein the extract is selected from the group consisting of water, an anhydrous or a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms, acetone, ethyl acetate, butyl acetate, dichloromethane (CH 2 Cl 2 ), chloroform, hexane, ≪ / RTI > 3-butylene glycol.
삭제delete 제 1 항에 있어서, 상기 조성물은 기능성 식품 조성물 형태인 것을 특징으로 하는 조성물.
The composition of claim 1, wherein the composition is in the form of a functional food composition.
제 1 항에 있어서, 상기 조성물은 약제학적 조성물 형태인 것을 특징으로 하는 조성물.
The composition of claim 1, wherein the composition is in the form of a pharmaceutical composition.
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