KR101626589B1 - Brownie with an improved quality and method of preparing the same - Google Patents

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KR101626589B1
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이승미
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Abstract

The present invention relates to a composition for making a brownie having improved quality and smooth texture, a method for preparing the composition, paste for making a brownie prepared by mixing the composition, and a brownie made using the composition for making a brownie. The composition for making a brownie contains, on the basis of 100 parts by weight of the total solid content, 30-60 parts by weight of wheat flour, 10-30 parts by weight of edible oil, 3-15 parts by weight of cocoa powder, and 10-50 parts by weight of sugar. The present invention provides a brownie which has smooth and moist texture by increasing the moisture retention power, has increased stability with respect to microorganism growth by having low moisture activity and reducing the content of fermented sugar, and realizes low calories.

Description

품질이 개량된 브라우니 및 이의 제조방법{Brownie with an improved quality and method of preparing the same}[0001] The present invention relates to a brownie having improved quality and a method for preparing the brownie,

본 발명은 품질이 개량된 부드러운 식감을 갖는 브라우니 제조용 조성물, 상기 조성물의 제조방법, 상기 조성물을 혼합하여 제조된 브라우니 제조용 반죽물, 및 상기 조성물을 이용하여 제조한 브라우니에 관한 것이다.
The present invention relates to a composition for making a brownie having a soft texture with improved quality, a method for producing the composition, a kneaded product for making brownies produced by mixing the composition, and a brownie made using the composition.

베이커리 식품에 있어서도 부드러운 식감을 갖는 제품이 다수 출시되고 있다.브라우니(Brownie)는 사각 형태로 잘린 진한 초콜릿 케익의 일종으로서, 맛의 농도, 견과류, 아이싱, 크림 치즈, 초콜릿 칩 등 재료의 포함 등에 따라 다양한 형태의 브라우니가 만들어지고 있다. 일반적으로 브라우니는 초콜릿과 버터를 녹인 후 밀가루를 섞어 제조된 것으로서, 진한 단맛, 크림같이 부드러운 맛, 버터맛, 초콜릿 맛과 특유의 식감이 있어 디저트로 널리 알려져 있다. Brownie is a kind of dark chocolate cake that is cut in a square shape and it is a kind of dark chocolate cake which is made with a variety of ingredients such as taste concentration, nuts, icing, cream cheese, chocolate chips and so on. Various types of brownies are being made. Generally, brownies are made by mixing chocolate and butter and then flour. They are widely known as desserts because of their sweetness, soft creamy taste, buttery taste, chocolate taste and unique texture.

브라우니는 통상 버터와 초콜릿을 중탕으로 함께 녹여 식힌 다음, 계란과 소금을 넣어 거품을 올리듯 젓고, 이후 설탕을 넣어 크림 상태가 되도록 계속 저어낸 다음, 밀가루를 넣어 재료가 엉길 만큼만 섞어서 네모난 팬에 담아 오븐에 구운 뒤 식혀서 만든다. 이는 디저트로서 단독으로 먹거나 아이스크림과 함께 먹는 것이 일반적이다. Brownies are usually melted with butter and chocolates in a hot water bath, then mixed with eggs and salt to bubble up. Afterwards, sugar is poured into the cream, then flour is added to the flour to mix the ingredients. It is baked in the oven and cooled. It is common to eat alone or with ice cream as a dessert.

브라우니는 진한 단맛, 크림같이 부드러운 맛, 버터맛, 초콜릿 맛과 특유의 식감을 얻고자 대체로 칼로리가 높은 재료를 사용하고, 버터가 많이 들어가므로 포화지방이 높은 편이다. Brownie uses a high calorie material to obtain a deep sweetness, a creamy soft taste, a buttery taste, a chocolate taste and a unique texture, and the saturated fat is high because it contains a lot of butter.

또한, 브라우니를 제조하기 위해서는 단맛 성분으로서 설탕을 사용하며, 설탕은 감미가 높고, 과량 사용시 오히려 부드러운 식감은 저하되고 바삭한 식감이 증가하는 문제가 있다.
Sugar is used as a sweet component to produce brownies, sugar has a high sweetness, and when it is used in an excessive amount, a smooth texture is deteriorated and a crunchy texture is increased.

본 발명은 수분 보유력을 증가시켜 부드럽고 촉촉한 식감을 가지며, 수분 활성도가 낮고 발효성 당류의 함량을 감소시켜 미생물 발육에 따른 안정성을 증가시킨 브라우니 제조용 조성물, 상기 조성물의 제조방법, 상기 조성물을 혼합하여 제조된 브라우니 제조용 반죽물, 및 브라우니 제조용 조성물을 이용하여 제조한 브라우니에 관한 것이다. The present invention relates to a composition for preparing brownies, which has a soft and moist texture by increasing water retention, a low water activity and a reduced fermentable saccharide content, thereby improving the stability of the microorganism during development, a process for producing the composition, And a brownie prepared by using the composition for making brownie.

본 발명은 고칼로리를 갖는 당류의 사용량을 감소시킬 수 있으며, 아울러 저칼로리를 구현한 브라우니 제조용 조성물, 상기 조성물의 제조방법, 상기 조성물을 혼합하여 제조된 브라우니 제조용 반죽물, 및 브라우니 제조용 조성물을 이용하여 제조한 브라우니에 관한 것이다. The present invention relates to a composition for preparing brownies which can reduce the amount of saccharides having high calories and which is low in calorie content, a method for producing the composition, a kneading composition for preparing brownies mixed with the composition, and a composition for preparing brownie ≪ / RTI >

본 발명의 추가 목적은 코코아 또는 초콜릿의 사용량을 줄이거나 사용하지 않더라도 초콜릿 색상을 구현하고 저칼로리를 구현한 브라우니 제조용 조성물, 상기 조성물의 제조방법, 상기 조성물을 혼합하여 제조된 브라우니 제조용 반죽물, 및 브라우니 제조용 조성물을 이용하여 제조한 브라우니에 관한 것이다.
It is a further object of the present invention to provide a composition for preparing brownies which realizes a chocolate color and low calorie without reducing or using the amount of cocoa or chocolate, a method for producing the composition, a paste for preparing brownies, The present invention relates to a brownie prepared by using a composition for manufacture.

본 발명은 품질이 개량된 부드러운 식감을 갖는 브라우니 제조용 조성물, 상기 조성물의 제조방법, 상기 조성물을 혼합하여 제조된 브라우니 제조용 반죽물, 및 상기 조성물을 이용하여 제조한 브라우니에 관한 것이다. The present invention relates to a composition for making a brownie having a soft texture with improved quality, a method for producing the composition, a kneaded product for making brownies produced by mixing the composition, and a brownie made using the composition.

브라우니는 촉촉하고 부드러운 식감에 더하여, 진한 단맛, 버터맛, 초콜릿 맛과 같은 특유의 식감이 필요하다. 이러한 브라우니 특유의 식감을 제공하기 위해서는, 다량의 설탕과 버터 등을 사용하여 칼로리가 높으며, 단맛이 지나치게 강하고, 설탕을 과량 사용시 오히려 부드러운 식감은 저하되고 바삭한 식감이 증가하는 문제가 있다. 따라서, 본 발명은 설탕의 함량을 감소시키거나 사용하지 아니하여 단맛 및 칼로리를 낮추고 부드러운 식감을 달성할 수 있으며, 수분 보유력을 증가시켜 부드럽고 촉촉한 식감을 가지며, 수분 활성도가 낮고 발효성 당류의 함량을 감소시켜 미생물 발육에 따른 안정성을 증가시킨 브라우니 제조용 조성물, 상기 조성물의 제조방법, 상기 조성물을 혼합하여 제조된 브라우니 제조용 반죽물, 및 상기 조성물을 이용하여 제조한 브라우니를 제공한다. In addition to a moist and soft texture, the brownie requires a unique texture such as a deep sweet taste, a buttery taste, and a chocolate taste. In order to provide such a brownie-specific texture, a large amount of sugar and butter is used, and the calories are high, and the sweetness is excessively strong. When the sugar is used in an excess amount, the soft texture decreases and the crispy texture increases. Therefore, the present invention can reduce the sweetness and calorie by reducing or not using the sugar content, achieving a smooth texture, increasing the water holding power to have a soft and moist texture, a low water activity and a fermentable saccharide content , A method for producing the composition, a kneaded product for preparing brownies mixed with the composition, and a brownie prepared using the composition.

본 발명에 따른 브라우니는 수분 함량이 15% 이상이고 수분활성도가 0.78 내지 0.8 범위인 것이 바람직하다. 본 발명에 따른 브라우니는 상기 수치범위의 수분 및 수분활성도를 나타냄으로써, 보습력이 우수하고 촉촉한 식감을 제공하면서도, 미생물 발육에 따른 안정성을 증가시킨 특성을 갖는다. The brownie according to the present invention preferably has a moisture content of 15% or more and a water activity of 0.78 to 0.8. The brownie according to the present invention exhibits moisture and water activity in the above-mentioned numerical range, and thus has an excellent moisture-retaining ability, moist texture, and increased stability due to microbial growth.

수분은 음식물에 포함된 함수량을 의미하며, 식품중의 수분은 주위의 환경조건에 따라 항상 변동하고 있어, 대기중의 상대습도까지 고려한 수분활성도를 표시한다. 수분 활성도는 미생물의 생장과 식품의 풍미, 색, 향을 변화시키는 식품 내 화학적, 생물리학적, 물리적 반응들과 관계되어 있으므로 식품에 있어서 매우 중요한 특성이다. 따라서 수분활성도는 전체 수분함량보다 식품안정성에 있어서 더 중요한 의미를 갖는다. 식품이 나타내는 수중기압에 대한 순수한 수증기압이 수분활성도의 정의이다. Moisture refers to the water content contained in the food, and the moisture in the food is always fluctuating according to the surrounding environmental conditions, and indicates the water activity considering the relative humidity in the atmosphere. Water activity is a very important feature in food because it is related to the chemical, biophysical, and physical reactions in foods that change microbial growth and flavor, color, and flavor of food. Therefore, water activity has more significance in food stability than total moisture content. The pure water vapor pressure to the water pressure that the food represents is the definition of water activity.

수분활성도와 식품의 저장성은 미생물 성장과 화학 반응 속도와 관련이 깊다. 미생물은 최소 수분활성도에서는 더 이상 성장할 수 없고, 균의 수가 증가할지라도 그 균수가 매우 미미하므로 수분활성도는 가장 쉽게 미생물을 컨트롤 할 수 있는 변수이다. 미생물의 종류에 따라서도 수분활성도에 대한 민감성에 상당한 차이가 있으며 곰팡이나 효모는 낮은 수분활성도에서도 주의를 기울여야 하는 미생물들이다. 식품 내 수분 또는 수분 활성도에 따라, 식품의 미생물에 의한 변질(발효&부패), 효소의 활성도, 갈변현상(특히, 비효소적 갈변현상)에 영향을 미치며 일정범위에서 이들 반응은 수분활성도에 비례하는 경향을 나타낸다. Water activity and food shelf life are related to microbial growth and chemical reaction rate. Microorganisms can no longer grow at the minimum water activity, and even if the number of microorganisms increases, the number of microorganisms is very small, so water activity is the most easily controllable microorganism. Depending on the type of microorganism, there is a considerable difference in sensitivity to water activity, and fungi and yeast are microorganisms that should pay attention to low water activity. Depending on the moisture or water activity in the food, it affects the degradation (fermentation & decay), enzymatic activity and browning (especially non-enzymatic browning) of microorganisms in the food and these reactions are proportional to the water activity .

본 발명의 일 구현예는 소맥분, 식용 유지 및 당류를 포함하는 브라우니 제조용 조성물로서, 상기 당류는 사이코스를 포함하는, 브라우니 제조용 조성물에 관한 것이다.One embodiment of the present invention relates to a composition for making brownie comprising wheat flour, edible fats and saccharides, wherein the saccharide comprises a psicose.

본 발명의 브라우니 제조용 조성물은 브라우니 조성물의 전체 고형분 함량 100 중량부를 기준으로, 당류로서 사이코스를 2 내지 50 중량부로 포함할 수 있다. 상기 브라우니 제조용 조성물은 당류로서 사이코스 단독으로 포함하거나, 사이코스에 더하여 설탕, 과당 및 물엿으로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 당류를 추가로 포함할 수도 있다. The composition for preparing brownie of the present invention may contain 2 to 50 parts by weight of a saccharide as a sugar based on 100 parts by weight of the total solid content of the brownie composition. The composition for preparing brownies may contain, as a saccharide, a monosaccharide alone or in addition to a monosaccharide, at least one saccharide selected from the group consisting of sugar, fructose, and starch syrup.

본 발명의 브라우니 조성물에 있어서, 설탕은 백설탕, 황설탕, 흑설탕 및 설탕 대체제로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 바람직하게는 백설탕을 사용할 수 있다. 본 발명의 브라우니 조성물 100 중량부 기준으로, 설탕은 10 내지 40 중량부, 바람직하게는 15~30 중량부가 포함될 수 있다. 상기 설탕 함량은 브라우니가 입안에 달라붙는 식감 및 부드러운 식감을 고려하려 적절히 조절할 수 있다.  In the brownie composition of the present invention, the sugar may be at least one selected from the group consisting of white sugar, yellow sugar, brown sugar, and sugar replacer, preferably white sugar. The sugar may be contained in an amount of 10 to 40 parts by weight, preferably 15 to 30 parts by weight based on 100 parts by weight of the brownie composition of the present invention. The sugar content can be appropriately adjusted to take into consideration the texture and soft texture of the brownie sticking to the mouth.

상기 사이코스는 분말, 사이코스 시럽, 또는 다른 당류와의 혼합당 형태로 추가될 수도 있다. 다만, 분말과 달리 시럽의 경우 이미 물을 다량 포함하고 있으므로, 반죽이 너무 질어지기 때문에 반죽 물성을 고려하여 설탕을 일부 포함할 수 있다.Saikosu may be added in the form of a mixture with powders, psicose syrups, or other saccharides. However, unlike powders, since syrup contains a large amount of water, since the dough is excessively cured, some of the sugar may be included in consideration of the physical properties of the dough.

본 발명에 따른 브라우니 제조용 조성물, 반죽물 또는 브라우니에 포함된 사이코스는 사이코스 분말, 예컨대 순도 90% 이상의 사이코스를 분말로 사용되거나, 또는 사이코스 분말을 이용하여 다양한 농도로 제조한 용액일 수 있다. 또한, 상기 사이코스는 사이코스 단독 또는 추가의 다른 당류를 포함하는 혼합당일 수 있으며, 혼합당의 예는 과당, 포도당, 및 올리고당으로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상을 추가로 포함할 수 있다. 상기 혼합당은, 전체 고형분 함량 100 중량부를 기준으로 1 내지 99.9 중량부의 사이코스를 함유할 수 있으며, 추가적으로 과당, 포도당, 및 올리고당으로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상을 추가로 포함할 수 있다.The composition of the present invention for preparing brownie, the psicose contained in the kneaded product or the brownie may be a solution prepared by using a psicose powder such as a psicose powder having a purity of 90% or more as a powder or using a psicose powder at various concentrations have. In addition, the above-mentioned cyclosaccharide may be a mixed saccharide containing cyclosaccharide alone or an additional saccharide. Examples of the saccharide saccharide may further include at least one selected from the group consisting of fructose, glucose, and oligosaccharide. The mixed sugar may contain 1 to 99.9 parts by weight of a viscose based on 100 parts by weight of the total solid content, and may further include one or more selected from the group consisting of fructose, glucose, and oligosaccharides.

상기 사이코스 함유 혼합당의 구체적인 예는, 혼합당의 전체 고형분 함량 100 중량부를 기준으로, 사이코스 2 내지 55 중량부, 과당 30 내지 80 중량부 및 포도당 2 내지 60 중량부, 및 올리고당 0 내지 15 중량부를 포함하는 것일 수 있으며, 올리고당은 포함하지 않을 수도 있다. 상기 사이코스, 과당 및 포도당은 바람직하게는 모두 D형-이성질체인 것이다.Specific examples of the saccharide-containing mixed sugar include 2 to 55 parts by weight of psicose, 30 to 80 parts by weight of fructose, 2 to 60 parts by weight of glucose and 0 to 15 parts by weight of oligosaccharide based on 100 parts by weight of the total solid content of the mixed sugar And may not include oligosaccharides. Saikos, fructose and glucose are preferably both D-isomer.

상기 사이코스는 화학적 합성, 또는 사이코스 에피머화 효소를 이용한 생물학적 방법으로 수행할 수 있으며, 바람직하게는 생물학적 방법으로 수행할 수 있다. 이에, 상기 사이코스는 사이코스 에피머화 효소, 상기 효소를 생산하는 균주의균체, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 및 상기 파쇄물 또는 배양물의 추출물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 사이코스 생산용 조성물을, 과당-함유 원료와 반응하여 제조된 것일 수 있다. Saikosu can be carried out by chemical synthesis, or by biological methods using a cyclic epimerase, preferably by a biological method. Thus, the above-mentioned psicose includes at least one selected from the group consisting of psicose epimerase, cells of the strain producing the enzyme, culture of the strain, lysate of the strain, and extracts of the lysate or the culture The composition for producing psicose may be one prepared by reacting with a fructose-containing raw material.

본 발명의 일예에서, 생물학적 방법에 따라 사이코스를 제조하는 방법으로는 사이코스 에피머화 효소를 생산하는 균주 또는 사이코스 에피머화 효소를 암호화하는 유전자가 도입된 재조합 균주를 배양하고, 이로부터 얻어진 사이코스 에피머화 효소를 과당-함유 원료와 반응하여 생산할 수 있다. 상기 사이코스 에피머화 효소는 액상 반응 또는 고정화 효소를 이용한 고상 반응으로 수행될 수 있다. In one embodiment of the present invention, a method for producing a scikos according to a biological method includes a method of culturing a strain producing a < RTI ID = 0.0 > cytokine < / RTI > epimerizing enzyme or a recombinant strain into which a gene encoding a scikos epimerase has been introduced, The course epimerase can be produced by reacting with a fructose-containing raw material. The above-mentioned cyclic epimerase can be carried out as a solid phase reaction using a liquid phase reaction or an immobilized enzyme.

또는, 사이코스 에피머화 효소를 생산하는 균주 또는 사이코스 에피머화 효소를 암호화하는 유전자가 도입된 재조합 균주를 얻고, 균주의 균체, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 및 상기 파쇄물 또는 배양물의 추출물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 사이코스 생산용 조성물을, 과당-함유 원료와 반응하여 제조될 수 있다. 사이코스 에피머화 효소를 생산하는 균주의 균체를 이용하여 사이코스를 제조하는 경우 액상 반응 또는 고정화 균체를 이용한 고상 반응으로 수행될 수 있다.Alternatively, a strain producing a cytomegalovirus or a recombinant strain into which a gene encoding a cytomegalovirus is introduced is obtained, and the culture of the strain, the culture of the strain, the lysate of the strain, and the lysate of the lysate or the culture Extract of the present invention can be produced by reacting a composition for producing a scorch, which comprises at least one member selected from the group consisting of a fructose-containing raw material, and a fructose-containing raw material. In the case of producing the cytosine using bacterial strains producing the Escherichia epimerase, the reaction can be carried out in the solid phase reaction using a liquid reaction or immobilized cells.

본 발명의 구체적 일예에서, 사이코스 에피머화 효소를 생산하는 균주로는 높은 안정성을 가지면서도 고수율로 사이코스 에피머화 효소를 생산할 수 있는 균주일 수 있으며. 상기 재조합 균주는 다양한 숙주세포, 예컨대 대장균, 바실러스속 균주, 살모넬라속 균주 및 코리네박테리움속 균주 등을 사용할 수 있으나, 바람직하게는 GRAS 균주인 코리네박테리움속 균주일 수 있으며, 코리네박테리움 글루타리쿰일 수 있다. In a specific example of the present invention, as a strain producing a psicose epimerase, it may be a strain capable of producing a psicose epimerase at a high yield while having high stability. The recombinant strain may be a variety of host cells such as Escherichia coli, Bacillus sp., Salmonella sp., And Corynebacterium sp., Preferably, a strain of the genus Corynebacterium, which is a GRAS strain, Lt; / RTI > glutaricum.

재조합 균주를 이용한 경우 사이코스 에피머화 효소는 다양한 균주에서 유래된 효소의 암호화 유전자를 사용할 수 있으며, 예를 들면 한국특허공개 2014-0021974에 기재된 트리포네마 프리미티아 유래 효소, 한국특허공개 2014-0080282에 기재된 루미노코코스 토르크 유래 효소 및 한국등록특허 10-1318422호에 기재된 클로스티리디움 신댄스 유래 효소일 수 있으며, 또한 엔시퍼 아드해렌스 유래 효소일 수 있다. 구체적인 일예에서, 본 발명에 따른 사이코스 에피머화 효소는 클로스티리디움 신댄스 유래 효소일 수 있으며, 예를 들면 서열번호 7의 아미노산 서열을 가지며, 서열번호 8 또는 서열번호 9의 핵산서열을 포함한다. 서열번호 8의 핵산서열은 대장균 최적화 핵산서열이고, 서열번호 9은 코리네박테리움에 적합하게 변형된 핵산서열이다.In the case of using a recombinant strain, the gene encoding an enzyme derived from various strains can be used as a cytomegalic epimerase. For example, an enzyme derived from trifoneme primitia described in Korean Patent Publication No. 2014-0021974, Korean Patent Publication No. 2014-0080282 Or an enzyme derived from Clostridials dans according to Korean Patent No. 10-1318422, and may also be an enzyme derived from enciphered Halsen. In a specific example, the cytosine epimerase according to the present invention may be an enzyme derived from a clostridial synthase, for example, having the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7, and the nucleic acid sequence of SEQ ID NO: 8 or SEQ ID NO: 9 . The nucleic acid sequence of SEQ ID NO: 8 is an E. coli optimized nucleic acid sequence and the SEQ ID NO: 9 is a nucleic acid sequence modified appropriately to Corynebacterium.

본 발명의 일예에 따른 재조합 균주의 제조에 있어서, 상기 사이코스 에피머화 효소를 암호화하는 핵산서열의 상부에 위치하는 조절 서열을 사용하여 효소의 발현을 조절할 수 있으며, 조절서열은 전사 프로모터를 필수적으로 포함하며, 추가로 리보솜 결합 영역 및/또는 스페이서 서열 등을 포함할 수 있다. 상기 조절 서열을 구성하는 요소들은 직접 연결되거나 1개 내지 100개의 염기, 예를 들면 5개 내지 80 염기를 가지는 핵산서열의 링커를 하나 이상 포함하여 연결될 수 있다.In the production of the recombinant strain according to an embodiment of the present invention, the expression of the enzyme may be regulated using a regulatory sequence located on the upper side of the nucleic acid sequence encoding the above-mentioned cyclic epimerase, and the regulatory sequence is essentially a transcription promoter And may further include ribosome binding regions and / or spacer sequences, and the like. The elements constituting the regulatory sequence may be directly linked or linked by including one or more linkers of the nucleic acid sequence having 1 to 100 bases, for example, 5 to 80 bases.

일 구체예에서, 상기 전사 프로모터는 코리네박테리움속 균주에서 사이코스 에피머화 효소를 암호화하는 핵산서열을 발현하는 핵산분자일 수 있으나, tac1, tac2, trc, sod 프로모터일 수 있다. sod 프로모터는 코리네박테리움 글루타리쿰에서 유래된 것이며, 바람직하게는 서열번호 1의 핵산서열을 코어영역으로 포함한다. trc프로모터는 대장균 유래 프로모터로서 trp프로모터과 lac UV5 프로모터의 조합으로 제조된 것이다. Tac1 프로모터는 대장균 유래 프로모터로서, trp프로모터과 lac UV5 프로모터의 조합으로 제조된 것이다. Tac2 프로모터는 대장균 유래 프로모터로서 trp 프로모터와 lac UV5 프로모터의 조합으로 제조된 것으로서 상기 Tac1 프로모터의 서열을 변형하여 최적화한 형태이다. In one embodiment, the transcriptional promoter may be a nucleic acid molecule that expresses a nucleic acid sequence encoding a cyclic epimerase in a Corynebacterium sp. Strain, but may be a tac1, tac2, trc, or sod promoter. The sod promoter is derived from Corynebacterium glutaricum, and preferably comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1 as a core region. The trc promoter is an Escherichia coli -derived promoter produced by a combination of the trp promoter and the lac UV5 promoter. The Tac1 promoter is an Escherichia coli-derived promoter, which is produced by a combination of the trp promoter and the lac UV5 promoter. The Tac2 promoter is an E. coli -based promoter, which is prepared by a combination of the trp promoter and the lac UV5 promoter, and is optimized by modifying the sequence of the Tac1 promoter.

상기 리보좀 결합 영역과 스페이서는 화학적으로 직접 연결되거나 그 중간에 링커 핵산서열을 개재하여 간적접으로 연결될 수 있다. 본 발명의 일예에서 리보좀 결합 영역(ribosome binding region) 및 스페이서 서열은 5'부터 3'순으로 순차적으로 연결된 하나의 올리고뉴클레오타이드를 포함할 수 있다. 본 발명의 일예에 따른 프로모터 서열, 리보좀 결합 영역(ribosome binding region) 및 스페이서 서열의 핵산서열을 하기 표 1에 나타낸다. 표 1에서 이탤릭체 진하게 밑줄로 표시된 부분은 조절서열중, 리보솜 결합 영역, 스페이서 서열, 링커 서열등을 나타낸다.The ribosome binding region and the spacer may be chemically linked directly or indirectly via a linker nucleic acid sequence in between. In an embodiment of the present invention, the ribosome binding region and the spacer sequence may include one oligonucleotide sequentially connected in 5 'to 3' order. The nucleotide sequences of the promoter sequence, the ribosome binding region and the spacer sequence according to an embodiment of the present invention are shown in Table 1 below. In Table 1, italic and boldly underlined parts indicate the ribosome binding region, the spacer sequence, the linker sequence, and the like in the regulatory sequence.

서열
번호
order
number
서열(5'--> 3')Sequences (5 '-> 3') 명명denomination
1One aagcgcc tcatcagcgg taaccatca cgggttcgggt gcgaaaaacc atgccataac aggaatgttc ctttcgaaaa ttgaggaagc cttatgccct tcaaccctac ttagctgcca attattccgg gcttgtgacc cgctacccgataaataggtc ggctgaaaaa tttcgttgca atatcaacaa aaaggcctat cattgggaggtgtcgcacca agtacttttg cgaagcgcca tctgacggat tttcaaaaga tgtatatgct cggtgcggaa acctac
gaaagga ttttttaccc atggctg tatacgaact cccagaactc gactacgcat acgac
gaaagga ttacaaa
aagcgcc tcatcagcgg taaccatca cgggttcgggt gcgaaaaacc atgccataac aggaatgttc ctttcgaaaa ttgaggaagc cttatgccct tcaaccctac ttagctgcca attattccgg gcttgtgacc cgctacccgataaataggtc ggctgaaaaa tttcgttgca atatcaacaa aaaggcctat cattgggaggtgtcgcacca agtacttttg cgaagcgcca tctgacggat tttcaaaaga tgtatatgct cggtgcggaa acctac
gaaagga ttttttaccc atggctg tatacgaact cccagaactc gactacgcat acgac
gaaagga ttacaaa
Sod promoter
Sod promoter
22 tgacaattaatcatcggctcgtatattgt gtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagaattcccggg gaaagga ttacaaa tgacaattaatcatcggctcgtatattgt gtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagaattcccggg gaaagga ttacaaa tac1 promoter
tac1 promoter
33 Tgacaattaatcatccggctcgtataatgt taacaatttgtggaattgtgagcggacacacaggaaacagaccatggaattcgagctcggtacccggg gaaagga ttacaaa Tgacaattaatcatccggctcgtataatgt taacaatttgtggaattgtgagcggacacacaggaaacagaccatggaattcgagctcggtacccggg gaaagga ttacaaa Tac2 promoter
Tac2 promoter
44 TgacaattaatcatcggcctcgtataatgtTgacaattaatcatcggcctcgtataatgt trc promoter
trc promoter
55 GaaaggaGaaagga Ribosome binding regionRibosome binding region 66 TtacaaaTtacaaa Spacer sequenceSpacer sequence

본 발명에 따른 사이코스 에피머화 효소는 효소활성 및 열안정성이 우수한 것이 바람직하고, 이에 본 발명의 구체예에서, 전사 프로모터 또는 조절서열은 사이코스 에피머화 효소를 코딩하는 유전자와의 조합이 중요하며, 본 발명에 사용된 사이코스 에피머화 효소와는 tac1, tac2, trc, sod 프로모터 모두 적정 이상의 단백질 발현을 제공할 수 있으며, sod 프로모터를 사용한 경우에는 단백질의 폴딩(folding)이 견고하여 열안정성이 높게 나타나는 결과를 얻을 수 있어 더욱 바람직하다.It is preferable that the cyclic epimerase according to the present invention is excellent in enzyme activity and thermal stability. Accordingly, in the embodiment of the present invention, the combination of the transcriptional promoter or the regulatory sequence with the gene encoding the cyclic epimerase is important , The tac1, tac2, trc, and sod promoters used in the present invention can provide more than adequate titers of protein expression, and when the sod promoter is used, folding of the protein is robust, It is more preferable to obtain a result which is high.

재조합 균주를 이용한 사이코스 생산방법 등은 한국특허공개 2014-0021974, 한국특허공개 2014-0080282 및 한국등록특허 10-1318422호에 기재된 방법에 따라 수행될 수 있으나 특별히 한정되지 않는다. 상기 사이코스 생산 방법에 있어서, 효율적인 사이코스 생산을 위하여, 기질로서 사용되는 과당의 농도는 전체 반응물 기준으로 40 내지 75%(w/v), 예컨대, 50 내지 75%(w/v)일 수 있다. 과당의 농도가 상기 범위보다 낮으면 경제성이 낮아지고, 상기 범위보다 높으면 과당이 잘 용해되지 않으므로, 과당의 농도는 상기 범위로 하는 것이 좋다. 상기 과당은 완충용액 또는 물(예컨대 증류수)에 용해된 용액 상태로 사용될 수 있다. The method of producing a psicos using a recombinant strain can be carried out according to the method described in Korean Patent Publication Nos. 2014-0021974, 2014-0080282 and Korean Patent No. 10-1318422, but is not particularly limited. In the above-mentioned method of producing a scicos, the concentration of fructose used as a substrate may be 40 to 75% (w / v), for example, 50 to 75% (w / v) have. When the concentration of fructose is lower than the above range, economical efficiency is lowered. When the concentration of fructose is higher than the above range, fructose is not dissolved well, so that the concentration of fructose is preferably within the above range. The fructose may be used in the form of a solution dissolved in a buffer solution or water (e.g., distilled water).

본 발명에 따른 브라우니 제조용 조성물은 소맥분, 당류 및 식용유지를 포함한다. 본 발명에 따른 브라우니 제조용 조성물은 소맥분, 당류 및 식용 유지이외에, 계란릉 포함하는 다양한 성분을 추가로 포함할 수 있다. 예를 들면, 상기 조성물의 전체 고형분 함량 100 중량부 기준으로, 소맥분 30~60 중량부, 식용유지 10~30 중량부 및 당류 10~50 중량부를 포함할 수 있다. 계란은 상기 조성물의 전체 고형분 함량 100 중량부 기준으로, 2 내지 20 중량부로 포함될 수 있다.The composition for making brownie according to the present invention includes wheat flour, saccharides and cooking oil. The composition for preparing brownie according to the present invention may further comprise various ingredients including egg yolk, in addition to wheat flour, saccharide and edible oil. For example, 30 to 60 parts by weight of wheat flour, 10 to 30 parts by weight of edible oil, and 10 to 50 parts by weight of saccharides may be contained based on 100 parts by weight of the total solid content of the composition. The eggs may be included in an amount of 2 to 20 parts by weight, based on 100 parts by weight of the total solid content of the composition.

상기 첨가성분의 예로는 초콜릿, 코코아 분말, 유화제, 팽창제 (중조, 산성피로인산 나트륨 등), 난소화성 덱스트린, 탈지분유, 단백분말, 비타민, 미네랄류, 견과류, 향료 및 식염으로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상을 추가로 포함할 수 있다. Examples of the additive component include one selected from the group consisting of chocolate, cocoa powder, emulsifier, swelling agent (sodium bicarbonate, acidic sodium pyrophosphate, etc.), indigestible dextrin, skim milk powder, protein powder, vitamins, minerals, nuts, Or more.

소맥분은 중력분, 강력분 및 박력분 밀가루로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 바람직하게는 글루텐 형성에 의해 식감이 질겨지는 것을 방지하기 위해서는 박력분을 사용할 수 있다. 본 발명의 브라우니 조성물 100 중량부에는 밀가루 30~60 중량부가 포함되며, 바람직하게는 40~60 중량부가 포함된다. 브라우니 조성물 100 중량부 당 밀가루 함량이 30 중량부 미만이면 브라우니 반죽의 결합력이 부족하여 성형이 잘 이루어지지 않고, 바람직한 식감 구현이 어렵다는 문제가 있고, 60 중량부를 초과하면 입안에 달라붙는 현상이 발생한다는 문제가 있다. The wheat flour may be at least one kind selected from the group consisting of gravitational force, strong and powdery flour, and preferably, the powder may be used to prevent the texture from being formed due to the formation of gluten. 100 parts by weight of the brownie composition of the present invention contains 30 to 60 parts by weight of wheat flour, preferably 40 to 60 parts by weight. When the wheat flour content is less than 30 parts by weight per 100 parts by weight of the brownie composition, there is a problem that the binding force of the brownie dough is insufficient and molding is not performed well and a preferable texture is difficult to implement. When the wheat flour content exceeds 60 parts by weight, there is a problem.

본 발명에 포함되는 식용유지로는 식물성 유지, 동물성 유지, 마가린, 버터, 쇼트닝 및 이들의 혼합물로부터 선택된 것을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 마가린, 버터, 쇼트닝 및 이들의 혼합물로부터 선택된 것을 사용할 수 있다. 상기 식물성 유지는 팜유, 채종유, 대두유, 야자유, 해바라기유, 현미유, 및 상기 유지의 에스테르 교환유지 및 분별 액체유로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 상기 동물성 유지는 돈지, 우지 및 어유로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. The edible oil included in the present invention may be selected from vegetable oil, animal oil, margarine, butter, shortening, and mixtures thereof, preferably selected from margarine, butter, shortening, and mixtures thereof. The vegetable oil may be at least one selected from the group consisting of palm oil, vegetable oil, soybean oil, palm oil, sunflower oil, sunflower oil, ester-exchanged oil and fractionated liquid oil of the oil, and the animal fat is composed of lard, , But the present invention is not limited thereto.

본 발명의 브라우니 조성물 100 중량부에는 식용유지가 10~30 중량부, 바람직하게는 15~25 중량부가 포함될 수 있다. 상기 식용유지 함량이 10 중량부 미만이면 유화가 잘 이루어지지 않아 부드러운 식감의 브라우니를 제조하기 어렵고, 브라우니 풍미가 낮아지는 문제가 있고, 30 중량부를 초과하면 지방함량 및 칼로리가 증가하는 문제가 있고 성형 시 반죽이 퍼져서 성형성이 좋지 못하게 되는 문제가 발생하게 된다.The 100 parts by weight of the brownie composition of the present invention may contain 10 to 30 parts by weight, preferably 15 to 25 parts by weight of an edible oil. If the amount of the edible oil is less than 10 parts by weight, it is difficult to produce a brownie with a soft texture due to poor emulsification. In addition, there is a problem that brownie flavor is lowered. When the amount is more than 30 parts by weight, There is a problem that the dough is spread and the formability is poor.

본 발명의 브라우니 제조용 조성물은 추가로 상기 조성물은 전란 (whole egg), 난백, 또는 난황 등을 추가로 포함할 수 있으며, 조성물의 전체 고형분 100 중량부 기준으로 2 내지 20 중량부로 포함될 수 있다. The composition for preparing a brownie of the present invention may further comprise a whole egg, egg white, egg yolk or the like, and may be included in an amount of 2 to 20 parts by weight based on 100 parts by weight of the total solid content of the composition.

본 발명의 브라우니 제조용 조성물은 추가로 코코아 분말을 사용할 수 있으며 코코아 분말은 브라우니의 색깔 및 풍미를 주는 원료로서, 브라우니 제조용 조성물의 총고형분 100 중량부를 기준으로 3 내지 15 중량부로 포함될 수 있다. The composition for preparing brownies of the present invention may further contain cocoa powder. The cocoa powder is a raw material for imparting the color and flavor of brownie, and may be contained in an amount of 3 to 15 parts by weight based on 100 parts by weight of the total solid content of the composition for preparing brownie.

또한, 브리우니 제조용 조성물은 초콜릿칩 및/또는 견과류를 추가로 포함할 수 있으며, 코코아 파우더로 내기 힘든 초코릿 풍미를 더 부여할 수 있으며, 견과류는 브라우니의 맛을 더 향상시킬 수 있다. 초콜릿칩 또는 견과류는 기호에 따라 적절히 부가할 수 있다. 상기 초콜릿은 브라우니 제조용 조성물의 총고형분 100 중량부를 기준으로 3 내지 15 중량부로 포함될 수 있다. In addition, the composition for producing briquette may further include chocolate chips and / or nuts, and may further impart a chocolate flavor hard to be obtained with cocoa powder, and the nuts may further improve the taste of brownies. Chocolate chips or nuts can be added as appropriate. The chocolate may be contained in an amount of 3 to 15 parts by weight based on 100 parts by weight of the total solid content of the composition for preparing brownie.

본 발명에 따른 브라우니 제조용 조성물은 추가로 유화제를 포함할 수 있다. 상기 유화제는 브라우니 조성물에 통상적으로 사용되는 것이라면 제한 없이 사용가능하며, 바람직하게는 레시틴, 글리세린지방산 에스테르 및 자당지방산 에스테르로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 브라우니 제조용 조성물 100 중량부에는 유화제가 0.1~5 중량부, 바람직하게는 0.3~3 중량부가 포함될 수 있다. 상기 유화제 함량이 0.1 중량부 미만이면 유화가 충분하게 되지 않아 시간 경과에 따른 제품 품질의 저하가 있을 수 있고, 5 중량부를 초과하면 유화제 특유의 맛이 나타나는 문제가 있다.The composition for preparing brownie according to the present invention may further comprise an emulsifier. The emulsifying agent can be used without limitation as long as it is commonly used in the brownie composition. Preferably, the emulsifying agent may be at least one selected from the group consisting of lecithin, glycerin fatty acid esters and sucrose fatty acid esters, but is not limited thereto. 100 parts by weight of the composition for preparing brownie of the present invention may contain 0.1 to 5 parts by weight, preferably 0.3 to 3 parts by weight, of an emulsifying agent. If the content of the emulsifier is less than 0.1 parts by weight, sufficient emulsification may not be obtained, resulting in a deterioration of product quality with time. If the amount of the emulsifier is more than 5 parts by weight, there is a problem that a taste peculiar to the emulsifier appears.

상기 전분은 브라우니 조성물에 통상적으로 사용되는 것이라면 제한 없이 사용가능하며, 바람직하게는 소맥전분, 감자전분, 옥수수전분 및 고구마전분으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 전분이나, 변성전분, 난소화성 덱스트린 등을 포함할 수 있다. 본 발명의 브라우니 조성물 100 중량부 기준으로 전분이 1~10 중량부, 바람직하게는 3~8 중량부가 포함될 수 있다. 상기 전분 함량이 1 중량부 미만이면 부드러운 식감을 나타내기 어렵고 브라우니가 입안에 달라붙는 현상이 발생하는 문제가 있고, 10 중량부를 초과하면 반죽이 성글거려져서 성형을 방해하는 문제가 있다.The starch can be used without limitation as long as it is commonly used in the brownie composition. Preferably, the starch is at least one starch selected from the group consisting of wheat starch, potato starch, cornstarch and sweet potato starch, modified starch, indigestible dextrin, . The starch may be contained in an amount of 1 to 10 parts by weight, preferably 3 to 8 parts by weight based on 100 parts by weight of the brownie composition of the present invention. If the starch content is less than 1 part by weight, a soft texture may not be exhibited and a brownie may stick to the mouth. If the starch content is more than 10 parts by weight, the dough may become stiff and hinder molding.

상기 난소화성 덱스트린, 예를 들면 난소화성 말토덱스트린은 식이섬유의 일종으로 부드러운 식감 향상에도 도움을 줄 수 있다. 난소화성 말토덱스트린을 사용할 수 있다. 본 발명의 브라우니 조성물에 난소화성 말토덱스트린이 포함되는 경우, 브라우니 조성물 100 중량부 당 바람직한 난소화성 말토덱스트린 함량은 1 내지 5 중량부, 바람직하게는 1~3 중량부이다.The indigestible dextrin, for example, indigestible maltodextrin, is a type of dietary fiber, which can also help improve a smooth texture. An indigestible maltodextrin may be used. When the brownish composition of the present invention contains the indigestible maltodextrin, the indigestible maltodextrin content is preferably 1 to 5 parts by weight, and more preferably 1 to 3 parts by weight per 100 parts by weight of the brownie composition.

본 발명의 브라우니 제조용 조성물은 필수성분들 및 임의로 추가성분(들)을 포함하는 분말 형태의 조성물일 수도 있고, 이들 조성물을 그대로 또는 물을 첨가하여 배합한 반죽물일 수도 있다. 본 발명의 브라우니 조성물이 물을 추가로 포함하는 경우, 그 함량은 물을 제외한 성분들의 총합 100 중량부당 바람직하게는 5~15 중량부, 보다 바람직하게는 8~12 중량부일 수 있다. 상기 성분들을 적어도 2단계(예컨대 2~3단계, 바람직하게는 3단계)로 나누어 혼합되는 경우, 물은 두번째 단계 또는 그 이후에 투입되는 것이 바람직하다.The composition for making a brownie of the present invention may be a powdery composition comprising essential ingredients and optionally further ingredient (s), or may be a kneaded product prepared by mixing these compositions directly or by adding water. When the brownie composition of the present invention further comprises water, its content may preferably be 5 to 15 parts by weight, more preferably 8 to 12 parts by weight, per 100 parts by weight of the total components excluding water. When the components are mixed by dividing into at least two stages (e.g., two to three stages, preferably three stages), it is preferred that the water is introduced at the second stage or thereafter.

브라우니의 제조 방법은 당 기술분야에서 알려진 방법으로 제조할 수 있으며 특별히 한정되지 않는다. 예를 들면, 식유용지, 예컨대 마가린을 섞은 다음 설탕을 넣고 가볍게 섞는다. 어느 정도 섞이면 다른 분말 원료 및 계란을 넣어서 살짝 섞은 다음 성형 팬에서 구워 제조한 180℃ 온도에서 25분간 굽는다. 마지막으로 적당한 크기로 절단하여 포장할 수 있다. The method for producing brownies can be produced by a method known in the art and is not particularly limited. For example, mix margarine, sugar, and lightly mix. If mixed to a certain extent, add other powdered raw materials and eggs, mix gently, and bake in a forming pan and bake at 180 ℃ for 25 minutes. Finally, it can be cut and packed into a suitable size.

본 발명의 일측면은 상기 브라우니 프리믹스 조성물을 사용하여 제조한 브라우니를 제공한다. 상기 브라우니는 우수한 물성, 부드러운 식감 및 풍미를 가진다.One aspect of the present invention provides brownies prepared using the brownie premix composition. The brownies have excellent physical properties, soft texture and flavor.

본 발명의 일예에서, 상기 브라우니 제조용 조성물을 균질하게 배항하여 제조된 반죽물을 성형하고 소성하여 제조된 브라우니를 제공하며, 상기 브라우니의 수분 함량이 15% 이상이고 수분활성도가 0.78 내지 0.8 범위일 수 있다.
According to an embodiment of the present invention, there is provided a brownie prepared by molding and baking a kneaded product prepared by homogenizing the composition for making brownie, wherein the brownie has a water content of 15% or more and a water activity of 0.78 to 0.8 have.

본 발명은 브라우니에 사용되던 설탕 등의 당류를 전부 또는 일부를 사이코스로 대체함으로써, 품질이 개량된 부드러운 식감을 갖는 브라우니 제조용 조성물, 상기 조성물의 제조방법, 상기 조성물을 혼합하여 제조된 브라우니 제조용 반죽물, 및 상기 조성물을 이용하여 제조한 브라우니를 제공하고자 하며, 또한 본 발명의 부드러운 식감을 갖는 브라우니 제조용 조성물 또는 이로부터 제조되는 반죽물 또는 브라우니는 촉촉한 식감, 저칼로리 및 빠른 색도 달성 등이 우수한 효과를 달성한다.
The present invention relates to a composition for preparing a brownie having a soft texture with improved quality by replacing all or a part of saccharides such as sugar used in brownie with a sauce, a process for producing the composition, a dough for making brownies Water, and brownies produced using the composition. Also, the composition for preparing brownie having a soft texture of the present invention or the kneaded product or brownie produced therefrom has excellent effects such as moist texture, low calorie and fast coloring .

도 1은 본 발명 사용되는 사이코스 시럽 제조를 위한 발현 재조합 벡터(pCES_sodCDPE)의 일예를 도시한 도면이다.1 is a view showing an example of an expression recombinant vector (pCES_sodCDPE) for producing a psicose syrup used in the present invention.

본 발명을 하기 실시예를 들어 더욱 자세히 설명할 것이나, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예로 한정되는 의도는 아니다.
The present invention will be described in more detail with reference to the following examples, but the scope of the present invention is not limited to the following examples.

제조예Manufacturing example 1:  One: 사이코스의Saikos 제조 Produce

1-1: 1-1: 사이코스Saikos 생산 균주의 제조 Production of production strains

크로스트리디움 신댄스(Clostridiuim scindens ATCC 35704)로부터 유래된 사이코스 에피머화 효소의 암호화 유전자(DPE gene; Gene bank: EDS06411.1)를, 대장균에 최적화하여 변형한 형태의 폴리뉴클리오티드로 합성하고 CDPE라 명명하다. 대장균에 최적화된 폴리뉴클리오티드(서열번호 2)와 pET21a 벡터로부터 확보한 sod 프로모터와 T7 터미네이터를 피씨알을 통해 각각의 주형으로 확보하였고, 이를 오버랩 피씨알(PCR) 법으로 하나의 주형으로 연결하여 T-vector cloning을 통해 pGEM T-easy vector에 클로닝하여, sod 프로모터(서열번호 1), 서열번호 8의 최적화 CDPE 서열 및 T7-터미네이터를 포함하는 폴리뉴클레오티드의 서열을 확인하였다. The DPE gene (Gene bank: EDS06411.1) derived from Clostridium scindens ATCC 35704 was synthesized as modified polynucleotides by optimizing E. coli for the Escherichia coli To name it CDPE. The polynucleotide optimized for Escherichia coli (SEQ ID NO: 2) and the sod promoter and T7 terminator obtained from the pET21a vector were obtained through PCR using each template, which was then ligated into a template by overlap PCR (PCR) And cloned into pGEM T-easy vector through T-vector cloning to confirm the sequence of the polynucleotide including the sod promoter (SEQ ID NO: 1), the optimized CDPE sequence of SEQ ID NO: 8 and the T7-terminator.

상기 확인된 전체 폴리뉴클레오티드를 제한효소 NotI과 XbaI(NEB)을 사용하여 발현벡터인 pCES208(J. Microbiol. Biotechnol., 18:639-647, 2008)의 동일한 제한효소 부위에 삽입하여 재조합 벡터 pCES208/사이코스 에피머화 효소(pCES_sodCDPE)를 제조하였다. 상기 제조된 재조합 벡터(pCES_sodCDPE)의 개열지도를 도 1에 개시하였다.The entire confirmed polynucleotide was inserted into the same restriction enzyme site of the expression vector pCES208 (J. Microbiol. Biotechnol., 18: 639-647, 2008) using restriction enzymes NotI and XbaI (NEB) to obtain a recombinant vector pCES208 / (PCES_sodCDPE) was prepared. A cleavage map of the prepared recombinant vector (pCES_sodCDPE) is shown in Fig.

상기 제조된 재조합 벡터(pCES_sodCDPE) 플라스미드를 전기천공법(electroporation)을 사용하여 코리네박테리움 글루타리쿰을 형질전환시켰다. 콜로니를 picking하여 카나마이신(Kanamycin)을 최종농도 15ug/ml로 첨가한 LB 배지(트립톤 10g/L, NaCl 10g/L, 효모 추출물 5g/L) 4ml에 접종한 후, 배양조건 30? 및 250rpm에서 약 16시간 동안 배양하였다. 그리고 나서 상기 배양액 중 1ml을 수득하여 15ug/ml의 카나마이신을 포함하고 있는 100ml LB 배지에 접종하여 본 배양을 16시간 이상 진행하였다. Beadbeater를 이용하여 배양한 세포를 용해(lysis)시킨 후 상등액만 취득하여 샘플버퍼와 1 : 1로 혼합 후 100?에서 5분간 가열한다. 준비한 샘플은 12% SDS-PAGE gel (조성: running gel - 3.3 ml H2O, 4.0 ml 30% acrylamide, 2.5 ml 1.5M Tris buffer(pH 8.8), 100 ㎕ 10% SDS, 100 ㎕, 10% APS, 4 ㎕ TEMED / stacking gel - 1.4 ml H2O, 0.33 ml 30% acrylamide, 0.25 ml 1.0M Tris buffer(pH 6.8), 20 ㎕ 10% SDS, 20 ㎕ 10% APS, 2 ㎕ TEMED)에 180V로 약 50 분 동안 전기영동하여 단백질 발현을 확인하였다. CDPE의 발현을 SDS-PAGE gel상에서 확인 후 정확한 발현량의 측정을 위해 Ni-NTA resin을 이용한 His-tag정제 진행하여, 계산식(발현율(%) = (Purified protein(mg) / Total soluble protein(mg)) * 100)을 이용하여 발현율 계산하였다. 상기 제조된 형질전환 코리네박테리움 글루타리쿰은 전체 수용성 단백질을 16.62 mg 및 정제된 효소 단백질 1.74 mg을 생산하였다.
The prepared recombinant vector (pCES_sodCDPE) plasmid was transformed into Corynebacterium glutaricum using electroporation. Colonies were picked and inoculated into 4 ml of LB medium (10 g / L of tryptone, 10 g / L of NaCl, 5 g / L of yeast extract) supplemented with kanamycin at a final concentration of 15 ug / And 250 rpm for about 16 hours. Then, 1 ml of the culture was obtained and inoculated into 100 ml of LB medium containing 15 ug / ml kanamycin, and the cultivation was continued for 16 hours or more. After lysis of cells cultured with Beadbeater, only the supernatant is obtained, mixed with sample buffer 1: 1, and heated at 100? For 5 minutes. The prepared sample was subjected to electrophoresis on a 12% SDS-PAGE gel (composition: running gel - 3.3 ml H2O, 4.0 ml 30% acrylamide, 2.5 ml 1.5 M Tris buffer (pH 8.8) 20 μl 10% SDS, 20 μl 10% APS, 2 μl TEMED) at 180 V for about 50 minutes at room temperature The protein expression was confirmed by electrophoresis. After the expression of CDPE was confirmed on SDS-PAGE gel, the His-tag purification was performed using Ni-NTA resin to determine the precise expression level. The expression (%) = (Purified protein (mg) / Total soluble protein )) * 100). The transformed Corynebacterium glutaricum prepared above produced 16.62 mg of total soluble protein and 1.74 mg of purified enzyme protein.

1-2: 1-2: 사이코스Saikos 시럽의 제조 Manufacture of syrups

제조예 1-1에서 얻어진 사이코스 에피머화 효소를 생산하는 재조합 균주를 이용하여 과당으로부터 사이코스를 제조하고자, 균주 배양에서 원심분리로 세포를 회수하였다. Cells were recovered by centrifugation in a strain culture in order to produce a scissors from fructose using the recombinant strain producing the scuche epimerase obtained in Production Example 1-1.

그런 후에 상기 세포 현탁액에 최종 부피에 유화제(M-1695)를 0.05% (w/v) 처리하여 35℃(± 5℃)에서 60 분간 처리하였다. 반응이 완료된 균체는 다시 원심분리기를 이용하여 유화제가 포함된 상등액은 제거한 뒤 균체를 회수하였다.The cell suspension was then treated with 0.05% (w / v) of an emulsifier (M-1695) in a final volume at 35 ° C (± 5 ° C) for 60 minutes. After the completion of the reaction, the supernatant containing the emulsifier was removed using a centrifuge, and the cells were recovered.

고정화 비드 제조를 위하여, 상기 회수된 균체는 D.W.와 혼합하여 최종 균체 농도 5% (w/v)로 맞추고, 물에 용해된 4% (w/v) 알긴산과 회수된 균체 5%(w/v)를 1:1로 혼합하고, 혼합시 생성된 기포를 제거하기 위해 4 ℃에서 냉장 보관하였다. 상기 냉장 보관된 혼합액은 Neddle (내경 0.20~0.30mm)을 통해 혼합액이 사출되어 방울 형태로 형성되며 무게에 의해 낙하하게 되며, 낙하 된 혼합액은 미리 제조된 100mM 염화칼슘 (CaCl2) 용액으로 떨어뜨려 경화시켜 구형 또는 타원형의 비드를(지름 2.0~2.2mm) 형성하였다. 상기 형성된 비드들은 100mM 염화칼슘 용액에 담그어 교반기에 의해 골고루 섞어지면서 더욱 경화되도록 하였다. For the preparation of the immobilized beads, the recovered cells were mixed with DW to a final cell concentration of 5% (w / v), mixed with 4% (w / v) alginic acid dissolved in water and 5% ) Were mixed at a ratio of 1: 1, and the mixture was stored at 4 ° C in order to remove the bubbles generated during mixing. The refrigerated mixture was injected through a Neddle (inner diameter: 0.20 to 0.30 mm) to form droplets. The mixture was dropped by weight. The dropped mixture was dropped into a 100 mM calcium chloride (CaCl 2 ) To form spherical or elliptical beads (diameter 2.0 to 2.2 mm). The formed beads were soaked in a 100 mM calcium chloride solution and mixed evenly by a stirrer so as to be further cured.

상기 혼합액이 모두 사출된 후에, 4~6시간 냉장 보관하면서 비드를 더욱 경화시킨 뒤에 새로운 100mM 염화칼슘 용액과 교체하여 냉장 상태에서 약 6시간 정도 경화를 시켰다. 경화가 완료된 비드는 걷어내 물기를 완전히 제거한 후, 비드 부피 대비 3배 부피의 물을 투입한 후 10분간 교반하고, 이러한 과정을 3회 처리하여 염화칼슘 용액을 제거하였다. 세척된 비드들은 망간 소킹을 위하여 물기를 완전 제거한 후, 10mM 망간이 포함된 40 brix (%) 반응 기질을 비드 부피 대비 3 배 부피로 투입한 후 10분간 교반하고, 이러한 처리를 3회 이상 처리하여 10mM 망간이 포함된 반응 기질로 교체하였다. 반응 기질은 pH 6.8~7.2로 3N NaOH에 의해 조절되며, 생산물의 종류에 따라 액상 과당 또는 결정 과당이 반응 기질이 될 수 있다. 10mM 망간이 포함된 반응 기질로 교체된 비드들은 반응조로 옮겨진 뒤, 반응 온도 50?에서 약 30~60분간 반응하여 망간 및 과당으로 비드의 소킹 작업을 완료하였다. 소킹이 완료된 비드는 지름이 약 1.6~1.8mm로 줄어들며 강도 또한 증가하게 된다. 소킹이 완료된 비드들의 기질을 제거 후 고정화 반응 컬럼에 충진 후 사이코스 시럽 생산에 이용하였다. After all of the mixed solution was injected, the beads were further cured while refrigerated for 4 to 6 hours, and then replaced with a fresh 100 mM calcium chloride solution, and cured in a refrigerated state for about 6 hours. The hardened beads were completely removed from the beads, and then water having a volume three times the bead volume was added thereto. The beads were then stirred for 10 minutes. This process was repeated three times to remove the calcium chloride solution. The washed beads were completely removed for manganese soaking, and then a 40-brix (%) reaction substrate containing 10 mM of manganese was added thereto in a volume three times as large as the bead volume, followed by stirring for 10 minutes. And replaced with a reaction substrate containing 10 mM manganese. The reaction substrate is adjusted to pH 6.8 ~ 7.2 with 3N NaOH. Depending on the type of product, liquid fructose or crystalline fructose can be the reaction substrate. The beads were replaced with a reaction substrate containing 10 mM manganese. The beads were transferred to the reaction tank and reacted at a reaction temperature of 50 ° C for about 30 to 60 minutes to complete the sorbing of beads with manganese and fructose. The diameter of the finished bead decreases to 1.6 ~ 1.8mm and the strength also increases. The substrate of the beads which had been soaked was removed and the immobilized reaction column was filled and used for the production of the viscose syrup.

<고정화 컬럼 반응조건>&Lt; Immobilization column reaction conditions >

반응 온도: 컬럼 자켓 내부 온도 50?Reaction temperature: Column jacket internal temperature 50?

기질 유속: 0.5 SV (space velocity L. h-1)Substrate flow rate: 0.5 SV (space velocity L. h-1)

반응 기질: 결정 과당 40brix, pH 6.8~7.2Reaction Substrate: Crystalline fructose 40brix, pH 6.8 to 7.2

비드 제조: 2.5%(w/w) 균체, 2%(w/w) 알긴산 혼합 및 10mM Mn2 + soakingBead preparation: 2.5% (w / w) cells, 2% (w / w) alginic acid mixture and 10 mM Mn 2 + soaking

상기 고정화 반응 컬럼에, 원료 용액이 75 %의 고형분을 포함하고, 전체 고형분 함량이 100 중량부일 때, 과당의 함량이 92 중량부로 포함하는 원료를 제공하여 두 가지 조성의 혼합당인 사이코스 시럽을 제조하였다. 즉, 상기 반응액으로부터 포도당:과당:사이코스:올리고당의 중량비로 포도당:과당:사이코스:올리고당=6:67:25:2인 25(w/w)% 사이코스 시럽을 수득하여 하기 실시예에 사용하였다.
The immobilization reaction column was provided with a raw material containing 92% by weight of fructose when the raw material solution contained 75% of solid content and 100% by weight of total solid content, Respectively. That is, 25 (w / w)% of psicose syrup of glucose: fructose: sucrose: oligosaccharide = 6: 67: 25: 2 was obtained from the reaction solution in the weight ratio of glucose: fructose: Lt; / RTI &gt;

1-3: 1-3: 사이코스Saikos 분말의 제조 Preparation of powder

제조예 1-2에서 얻어진 사이코스 시럽을 유색 및 이온 성분 등의 불순물을 제거하기 위해 양이온 교환수지, 음이온 교환수지 및 양이온과 음이온교환수지가 6혼합된 수지로 충진된 상온의 컬럼에 시간당 이온교환수지 2배 부피의 속도로 통액 시켜 탈염시킨 후, 칼슘(Ca2+) 타입의 이온교환수지로 충진된 크로마토그래피를 이용하여 고순도의 사이코스 용액으로 분리 수득하였다. 상기 고순도 사이코스 시럽을 82Bx 농도로 농축시키고, 과포화 상태가 되는 온도 35 ℃에서 서서히 온도 10 ℃까지 냉각시켜 결정을 생성시켰다. 상기 결정화 단계에서 수득된 사이코스 결정은 원심 탈수에 의해 모액을 제거하고 결정을 냉각수로 세척한 후, 건조하여 회수하였다. To remove impurities such as color and ion components, the psicose syrup obtained in Preparation Example 1-2 was subjected to ion-exchange per hour in a column packed with a cation exchange resin, an anion exchange resin, and a resin mixed with six cation and anion exchange resins The resin was passed through at a rate of 2 times the volume of the resin, desalted, and then separated into a high-purity scorch solution by chromatography packed with a calcium (Ca 2+ ) type ion exchange resin. The high-purity cicos syrup was concentrated to a concentration of 82 Bx, and the solution was cooled to a supersaturated temperature of 35 캜 and then gradually cooled to a temperature of 10 캜 to form crystals. The mother liquor obtained in the crystallization step was centrifugally dehydrated to remove the mother liquor, and the crystal was washed with cooling water, followed by drying and recovering.

실시예Example 1 내지 4:  1 to 4: 사이코스를Saikos 함유한  Containing 브라우니brownie 제조  Produce

하기 표 2에 기재된 성분 및 조성으로 혼합하여 브라우니 제조를 위한 반죽을 제조하였다. 실시예 1는 설탕 22.5 중량%와 사이코스 분말 7.5 중량을 사용하여 설탕과 사이코스 분말(순도 99%) 의 총중량을 기준으로 사이코스 25중량%를 사용하고, 실시예 2는 설탕 15 중량%와 사이코스 분말 15 중량을 사용하여 설탕과 사이코스 분말(순도 99%) 의 총중량을 기준으로 사이코스 50중량%를 사용하고, 실시예 3은 설탕 7.5 중량%와 사이코스 분말 22.5 중량을 사용하여 설탕과 사이코스 분말(순도 99%) 의 총중량을 기준으로 사이코스 75중량%를 사용하고, 실시예 4에서는 설탕을 전혀 사용하지 않고 사이코스 30 중량%를 사용하였다. The components and compositions shown in Table 2 below were mixed to prepare a dough for making brownies. In Example 1, 25% by weight of sucrose was used based on the total weight of sugar and cicose powder (purity of 99%) using 22.5% by weight of sugar and 7.5% by weight of cicose powder, Using Sikos powder 15 weight, 50 weight% of Sikos was used based on the total weight of sugar and Sikos powder (purity 99%), Example 3 was prepared using 7.5 weight% of sugar and 22.5 weight of Sikos powder, (75% by weight) was used as a basis of the total weight of the powder of cypress (purity of 99%). In Example 4, 30% by weight of Sikos was used without using any sugar.

브라우니의 제조 방법은 초콜릿을 중탕으로 녹이고, 마가린을 섞어준 다음 설탕을 넣고 가볍게 혼합하였다. 표 2에 기재된 다른 분말 원료 및 계란을 넣어서 살짝 섞어준 다음 성형 팬에서 180℃온도 및 25분간 구웠다. Brownies were prepared by dissolving chocolate in hot water, mixing margarine, adding sugar, and mixing lightly. The other powder ingredients and eggs listed in Table 2 were added and mixed gently, and then baked at 180 ° C for 25 minutes in a molding pan.

원료(단위: 중량%)Raw material (unit:% by weight) 비교예 1Comparative Example 1 실시예1Example 1 실시예2Example 2 실시예 3Example 3 실시예4Example 4 박력분weak flour 19.5419.54 19.5419.54 19.5419.54 19.5419.54 19.5419.54 정백당Jungbang 30.0030.00 22.522.5 15.015.0 7.57.5 00 사이코스 분말 Saikosu powder 00 7.57.5 15.015.0 22.522.5 30.030.0 초콜릿chocolate 4.654.65 4.654.65 4.654.65 4.654.65 4.654.65 마가린margarine 9.909.90 9.909.90 9.909.90 9.909.90 9.909.90 전란분An exorcism 3.503.50 3.503.50 3.503.50 3.503.50 3.503.50 코코아파우더Cocoa powder 6.506.50 6.506.50 6.506.50 6.506.50 6.506.50 탈지분유Skim milk powder 4.304.30 4.304.30 4.304.30 4.304.30 4.304.30 레시틴lecithin 0.400.40 0.400.40 0.400.40 0.400.40 0.400.40 중조baking soda 0.250.25 0.250.25 0.250.25 0.250.25 0.250.25 정제소금Refined salt 0.360.36 0.360.36 0.360.36 0.360.36 0.360.36 옥수수전분Corn starch 7.507.50 7.507.50 7.507.50 7.507.50 7.507.50 덱스트린dextrin 13.0013.00 13.0013.00 13.0013.00 13.0013.00 13.0013.00 구아검Guar gum 0.100.10 0.100.10 0.100.10 0.100.10 0.100.10 합계Sum 100.00100.00 100.00100.00 100.00100.00 100.00100.00 100.00100.00

비교예Comparative Example 1: 설탕을 이용한  1: Using sugar 브라우니brownie 제조 Produce

실시예 1과 실질적으로 동일한 방법으로, 반죽 및 브라우니를 제조하였다. 다만 실시예 1에서 사용한 설탕 22.5 중량%와 사이코스 분말 7.5 중량 대신에, 비교예 1은 설탕 30 중량%를 사용하였다. 반죽 제조를 위해 사용한 구체적 성분 및 조성을 표 2에 나타냈다.
In substantially the same manner as in Example 1, dough and brownies were prepared. However, in place of 22.5% by weight of sugar and 7.5% by weight of Sicose powder used in Example 1, 30% by weight of sugar was used as Comparative Example 1. The specific ingredients and composition used for the preparation of the dough are shown in Table 2.

시험예Test Example 1:  One: 브라우니의Brownie 수분 및 수분활성도 평가 Assessment of water and water activity

수분은 음식물에 포함된 함수량을 의미하며, 식품중의 수분은 주위의 환경조건에 따라 항상 변동하고 있어, 대기중의 상대습도까지 고려한 수분활성도를 표시한다. 수분 활성도는 미생물의 생장과 식품의 풍미, 색, 향을 변화시키는 식품 내 화학적, 생물리학적, 물리적 반응들과 관계되어 있으므로 식품에 있어서 매우 중요한 특성이다. Moisture refers to the water content contained in the food, and the moisture in the food is always fluctuating according to the surrounding environmental conditions, and indicates the water activity considering the relative humidity in the atmosphere. Water activity is a very important feature in food because it is related to the chemical, biophysical, and physical reactions in foods that change microbial growth and flavor, color, and flavor of food.

실시예 1 내지 4 및 비교예 1에서 제조한 브라우니에 대해서 하기와 같은 방법으로 수분 및 수분 활성도를 평가하였다. 수분 활성도는 식품의 본질적인 특성이고, 평형 상대습도는 식품과 평형을 이루는 환경에서의 특성이다. 브라우니중 수분(%)함량은 수분 분석기(Satoriuns,Germany) 이용하여 시료 2g을 칭량하였고 온도는 105℃, 시간은 자동모드로 설정하여 수분함량을 측정하였다. 수분활성도 측정기(LG전자, 국산)를 이용하여 수분활성도를 측정하였다. The water and moisture activity of the brownies prepared in Examples 1 to 4 and Comparative Example 1 were evaluated by the following methods. Water activity is an intrinsic property of food, and equilibrium relative humidity is a property in an environment that equilibrates with food. The moisture content (%) in the brownies was measured by using a moisture analyzer (Satoriuns, Germany) and weighed 2 g of the sample. The moisture content was measured by setting the temperature to 105 ° C. and the time to the automatic mode. Water activity was measured using a water activity meter (LG Electronics, Korea).

원료Raw material 수분(%)moisture(%) 수분 활성도Water activity 비교예 1Comparative Example 1 14.0214.02 0.7760.776 실시예 1Example 1 15.5315.53 0.7860.786 실시예 2Example 2 16.6716.67 0.7880.788 실시예 3Example 3 18.5518.55 0.7870.787 실시예 4Example 4 19.2719.27 0.7890.789

표 3의 결과에 나타낸 바와 같이, 설탕만을 사용한 비교예 1에 비해, 실시예 1 내지 4의 경우 사이코스의 함량이 증가할수록, 수분 함량은 비례하여 증가하나 수분활성도는 거의 동등한 수준을 유지하였다. 통상 케익제품의 부드러운 식감은 수분함량이 높을수록 좋으나 높은 수분 함량은 수분활성도 또한 높게 되어 미생물 증식 등의 우려가 있으나, 본 발명에 따른 실시예 제품은 사이코스 함량에 따라 수분 함량은 증가하나 수분활성도가 유의적 차이를 나타내지 않으므로 부드러운 식감을 구현하면서도 미생물에 대한 안정성을 갖는 장점이 있다. 이러한 실험결과는, 본 발명에 따른 사이코스 함유 반죽 및 브라우니가 설탕에 비해 보습효과가 우수하다는 것을 보여주며, 또한 사이코스가 설탕보다 브라우니의 소프트감을 증진하는 데 더 좋은 결과가 있는 것으로 나타났다. 따라서, 설탕을 포함하지 않고 사이코스만을 포함하는 실시예 4의 경우, 설탕만을 포함하는 비교예 1에 비해 보습성 및 식감에서 월등하게 좋은 결과를 나타냈다.
As shown in the results of Table 3, in the case of Examples 1 to 4, water content increased proportionally, but water activity remained almost the same level as the content of psicose increased in comparison with Comparative Example 1 using only sugar. Generally, the soft texture of the cake product is better as the moisture content is higher, but the higher moisture content also increases the water activity, which may cause microbial growth. However, the product according to the present invention has an increased water content Is not a significant difference, it has the advantage of having a smooth texture and stability against microorganisms. The results of this experiment show that the dicalcium silicate and brownies according to the present invention have better moisturizing effect than the sugar, and also have a better result in enhancing the softness of the brownie than the sugar. Thus, in Example 4 containing no sugar but containing only psicose, the results were superior to those in Comparative Example 1 containing only sugar, in terms of moisturizing property and texture.

시험예Test Example 2: 경도(부드러운 정도) 평가 2: Evaluation of hardness (softness)

실시예 1 내지 4 및 비교예 1에서 제조한 브라우니에 대해서 하기와 같은 방법으로 경도를 측정하여 부드러운 식감정도를 평가하였다. 텍스쳐 분석기(Texture analyzer)를 이용하여 하기 측정조건에 따라 시료의 경도를 측정하였다. 경도 측정은 5회 반복하여 평균값을 하기 표 4에 나타냈다.The hardness of the brownies prepared in Examples 1 to 4 and Comparative Example 1 was measured by the following method to evaluate the degree of soft texture. The hardness of the sample was measured according to the following measurement conditions using a texture analyzer. The hardness measurement was repeated five times and the average value was shown in Table 4 below.

Test SpeedTest Speed 2.0mm/s2.0 mm / s Post SpeedPost Speed 10.0mm/s10.0 mm / s DistanceDistance 5.0mm5.0mm Trig.ForceTrig.Force 5g5g ProbeProbe HDP/LKB LIGHT KNIFE BLADE PERSPEXHDP / LKB LIGHT KNIFE BLADE PERSPEX

원료Raw material 경도Hardness 비교예 1Comparative Example 1 780780 실시예 1Example 1 730730 실시예 2Example 2 710710 실시예 3Example 3 680680 실시예 4Example 4 620620

상기 표 5에 나타낸 바와 같이, 설탕만을 사용한 비교예 1의 브라우니가 가장 경도가 높았으며, 실시예 제품에서 사이코스 함량이 증가할수록 브라우니의 경도가 점진적으로 감소하여 부드러운 정도가 증가함을 알 수 있었다.
As shown in Table 5, it was found that the brownie of Comparative Example 1 using only sugar had the highest hardness, and the hardness of the brownie gradually decreased and the degree of softness increased as the content of the cicos was increased in the products of the Examples .

시험예Test Example 3:  3: 브라우니의Brownie 팽창정도Degree of expansion 평가 evaluation

실시예 1 내지 4에서 제조한 브라우니와, 비교예 1(설탕만 사용)에서 제조한 브라우니의 높이를 측정하여 팽창도가 적절한 지 확인하였다. 측정방법은 평평한 판에 완제품을 올려 놓은 후 버니어 캘리퍼스 이용하여 높이를 측정하였다. The height of the brownies prepared in Examples 1 to 4 and brownies prepared in Comparative Example 1 (using only sugar) was measured to confirm that the degree of swelling was appropriate. Measurements were made by placing the finished product on a flat plate and measuring the height using a vernier caliper.

원료Raw material 높이 (mm)Height (mm) 비교예 1Comparative Example 1 29.0729.07 실시예 1Example 1 30.430.4 실시예 2Example 2 30.230.2 실시예 3Example 3 30.230.2 실시예 4Example 4 29.929.9

브라우니의 팽창도를 실험한 결과, 설탕만을 사용한 비교예 1의 제품과 동등한 정도의 팽창도를 나타냄을 확인하였다.
The swelling degree of the brownie was confirmed to be equivalent to that of the product of Comparative Example 1 using only sugar.

시험예Test Example 4:  4: 브라우니의Brownie 관능평가 Sensory evaluation

브라우니의 촉촉한 느낌, 구용성, 풍미, 형상 및 단맛의 관능물성을 평가하기 위해, 실시예 1-4 및 비교예 1의 브라우니를 입 안에 넣고 20초간 구강 표피를 골고루 자극한 후 뱉어내고, 한 시료의 평가를 마칠 때마다 물로 입안을 세척하고 10분이 경과된 후 다음 시료를 평가하여, 상기 관능 요소들을 10점 척도(10-point box scale)로 표시하였다. 관능평가요원은 맛과 향미 평가에 대해 훈련된 패널 10명으로 구성되었으며, 10점 척도로 표시하였다. 상기 항목의 평가기준은 다음과 같으며, 그 결과를 하기 표 7에 기재하였다.In order to evaluate the moist feelings, usability, flavor, shape and sweetness of the brownie, the brownies of Examples 1-4 and Comparative Example 1 were placed in the mouth, stimulated evenly for 20 seconds and then spit out, After the mouth was washed with water at the end of the evaluation, the next sample was evaluated after 10 minutes passed, and the sensory elements were expressed on a 10-point box scale. The sensory evaluation staff consisted of 10 panel members who were trained on taste and flavor evaluation, and were rated on a 10-point scale. The evaluation criteria of the above items are as follows, and the results are shown in Table 7 below.

[평가기준] [Evaluation standard]

촉촉한 식감 입안에서 부드럽게 씹히는 정도, 딱딱함 정도를 기준으로 촉촉한 느낌이 없음에 대해 0점, 최대값을 10점으로 설정함Moist texture Based on the degree of softness and hardness in the mouth, it is set to 0 points for no moist feeling and 10 points for the maximum value.

풍미: 고소함 및 이취의 정도를 기준으로 고소함이 적고 이취가 많은 것을 0점으로, 고소함이 최대치 및 이취가 최소치가 되는 척도를 10점으로 설정함Flavor: Based on the degree of high and low odor, it is set to 10 points with low degree of smell, high odor with zero point, high smell with maximum value and minimum odor value.

형상: 외관의 선호도를 기준으로 최저 0점 및 최대 10점으로 설정함Geometry: It is set as minimum 0 point and maximum 10 point based on appearance preference.

단맛: 단맛의 정도를 기준으로, 최저 0점 및 최대 10점으로 설정함Sweetness: Based on the degree of sweetness, set to a minimum of 0 points and a maximum of 10 points.

전체적인 맛 선호도: 주관적인 기준으로 최저 0점 및 최대 10점으로 설정함 Overall taste preference: set as minimum 0 point and maximum 10 point as subjective criteria

구분division 촉촉함Moistness 풍미zest 형상shape 단맛sweetness 전체적인
맛선호도
Overall
Taste preference
비교예 1Comparative Example 1 5.25.2 5.95.9 7.37.3 6.76.7 6.86.8 실시예 1Example 1 5.55.5 6.06.0 7.57.5 6.56.5 6.26.2 실시예 2Example 2 6.86.8 6.36.3 7.27.2 7.07.0 6.96.9 실시예 3Example 3 7.67.6 7.47.4 7.67.6 7.17.1 7.77.7 실시예 4Example 4 8.38.3 7.77.7 7.57.5 6.96.9 7.37.3

상기 표 7에 나타낸 바와 같이, 비교예1의 브라우니에 비해서, 사이코스를 사용한 브라우니가 촉촉한 느낌, 풍미가 우수한 것으로 나타났다. 형상과 단맛은 큰 유의차가 없는 것으로 나타났다.As shown in Table 7, the brownies using the sauces were superior to the brownies of the Comparative Example 1 in terms of moist feel and flavor. Shape and sweetness were not significantly different.

<110> SAMYANG GENEX CORPORATION <120> Brownie with an improved quality and method of preparing the same <130> DPP20150660KR <160> 9 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 356 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sod promoter (6) <400> 1 aagcgcctca tcagcggtaa ccatcacggg ttcgggtgcg aaaaaccatg ccataacagg 60 aatgttcctt tcgaaaattg aggaagcctt atgcccttca accctactta gctgccaatt 120 attccgggct tgtgacccgc tacccgataa ataggtcggc tgaaaaattt cgttgcaata 180 tcaacaaaaa ggcctatcat tgggaggtgt cgcaccaagt acttttgcga agcgccatct 240 gacggatttt caaaagatgt atatgctcgg tgcggaaacc tacgaaagga ttttttaccc 300 atggctgtat acgaactccc agaactcgac tacgcatacg acgaaaggat tacaaa 356 <210> 2 <211> 93 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Tac1 promoter (4) <400> 2 tgacaattaa tcatcggctc gtatattgtg tggaattgtg agcggataac aatttcacac 60 aggaaacaga attcccgggg aaaggattac aaa 93 <210> 3 <211> 112 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Tac2 promoter (4) <400> 3 tgacaattaa tcatccggct cgtataatgt taacaatttg tggaattgtg agcggacaca 60 caggaaacag accatggaat tcgagctcgg tacccgggga aaggattaca aa 112 <210> 4 <211> 30 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Trc promoter (1) <400> 4 tgacaattaa tcatcggcct cgtataatgt 30 <210> 5 <211> 7 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Ribosome binding region <400> 5 gaaagga 7 <210> 6 <211> 7 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Spacer sequence <400> 6 ttacaaa 7 <210> 7 <211> 289 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> amino acid sequence of an enzyme protein originated from Clostridium scindens <400> 7 Met Lys His Gly Ile Tyr Tyr Ala Tyr Trp Glu Gln Glu Trp Ala Ala 1 5 10 15 Asp Tyr Lys Arg Tyr Val Glu Lys Ala Ala Lys Leu Gly Phe Asp Ile 20 25 30 Leu Glu Val Gly Ala Ala Pro Leu Pro Asp Tyr Ser Ala Gln Glu Val 35 40 45 Lys Glu Leu Lys Lys Cys Ala Asp Asp Asn Gly Ile Gln Leu Thr Ala 50 55 60 Gly Tyr Gly Pro Ala Phe Asn His Asn Met Gly Ser Ser Asp Pro Lys 65 70 75 80 Ile Arg Glu Glu Ala Leu Gln Trp Tyr Lys Arg Leu Phe Glu Val Met 85 90 95 Ala Gly Leu Asp Ile His Leu Ile Gly Gly Ala Leu Tyr Ser Tyr Trp 100 105 110 Pro Val Asp Phe Ala Thr Ala Asn Lys Glu Glu Asp Trp Lys His Ser 115 120 125 Val Glu Gly Met Gln Ile Leu Ala Pro Ile Ala Ser Gln Tyr Gly Ile 130 135 140 Asn Leu Gly Met Glu Val Leu Asn Arg Phe Glu Ser His Ile Leu Asn 145 150 155 160 Thr Ser Glu Glu Gly Val Lys Phe Val Thr Glu Val Gly Met Asp Asn 165 170 175 Val Lys Val Met Leu Asp Thr Phe His Met Asn Ile Glu Glu Ser Ser 180 185 190 Ile Gly Asp Ala Ile Arg His Ala Gly Lys Leu Leu Gly His Phe His 195 200 205 Thr Gly Glu Cys Asn Arg Met Val Pro Gly Lys Gly Arg Thr Pro Trp 210 215 220 Arg Glu Ile Gly Asp Ala Leu Arg Glu Ile Glu Tyr Asp Gly Thr Val 225 230 235 240 Val Met Glu Pro Phe Val Arg Met Gly Gly Gln Val Gly Ser Asp Ile 245 250 255 Lys Val Trp Arg Asp Ile Ser Lys Gly Ala Gly Glu Asp Arg Leu Asp 260 265 270 Glu Asp Ala Arg Arg Ala Val Glu Phe Gln Arg Tyr Met Leu Glu Trp 275 280 285 Lys <210> 8 <211> 870 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> modified nucleic acid sequence (1) of the enzyme protein of SEQ ID NO: 7 <400> 8 atgaaacacg gtatctacta cgcgtactgg gaacaggaat gggcggcgga ctacaaacgt 60 tacgttgaaa aagcggcgaa actgggtttc gacatcctgg aagttggtgc ggcgccgctg 120 ccggactact ctgcgcagga agttaaagaa ctgaaaaaat gcgcggacga caacggtatc 180 cagctgaccg cgggttacgg tccggcgttc aaccacaaca tgggttcttc tgacccgaaa 240 atccgtgaag aagcgctgca gtggtacaaa cgtctgttcg aagttatggc gggtctggac 300 atccacctga tcggtggtgc gctgtactct tactggccgg ttgacttcgc gaccgcgaac 360 aaagaagaag actggaaaca ctctgttgaa ggtatgcaga tcctggcgcc gatcgcgtct 420 cagtacggta tcaacctggg tatggaagtt ctgaaccgtt tcgaatctca catcctgaac 480 acctctgaag aaggtgttaa attcgttacc gaagttggta tggacaacgt taaagttatg 540 ctggacacct tccacatgaa catcgaagaa tcttctatcg gtgacgcgat ccgtcacgcg 600 ggtaaactgc tgggtcactt ccacaccggt gaatgcaacc gtatggttcc gggtaaaggt 660 cgtaccccgt ggcgtgaaat cggtgacgcg ctgcgtgaaa tcgaatacga cggtaccgtt 720 gttatggaac cgttcgttcg tatgggtggt caggttggtt ctgacatcaa agtttggcgt 780 gacatctcta aaggtgcggg tgaagaccgt ctggacgaag acgcgcgtcg tgcggttgaa 840 ttccagcgtt acatgctgga atggaaataa 870 <210> 9 <211> 870 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> modified nucleic acid sequence(2) of the enzyme protein of SEQ ID NO:7 <400> 9 atgaagcacg gcatctacta cgcatactgg gagcaggagt gggcagcaga ctacaagcgc 60 tacgttgaga aggcagcaaa gctgggcttc gacatcctgg aggttggcgc agcaccactg 120 ccagactact ccgcacagga ggttaaggag ctgaagaagt gcgcagacga caacggcatc 180 cagctgaccg caggctacgg cccagcattc aaccacaaca tgggctcctc cgacccaaag 240 atccgcgagg aggcactgca gtggtacaag cgcctgttcg aggttatggc aggcctggac 300 atccacctga tcggcggcgc actgtactcc tactggccag ttgacttcgc aaccgcaaac 360 aaggaggagg actggaagca ctccgttgag ggcatgcaga tcctggcacc aatcgcatcc 420 cagtacggca tcaacctggg catggaggtt ctgaaccgct tcgagtccca catcctgaac 480 acctccgagg agggcgttaa gttcgttacc gaggttggca tggacaacgt taaggttatg 540 ctggacacct tccacatgaa catcgaggag tcctccatcg gcgacgcaat ccgccacgca 600 ggcaagctgc tgggccactt ccacaccggc gagtgcaacc gcatggttcc aggcaagggc 660 cgcaccccat ggcgcgagat cggcgacgca ctgcgcgaga tcgagtacga cggcaccgtt 720 gttatggagc cattcgttcg catgggcggc caggttggct ccgacatcaa ggtttggcgc 780 gacatctcca agggcgcagg cgaggaccgc ctggacgagg acgcacgccg cgcagttgag 840 ttccagcgct acatgctgga gtggaagtaa 870 <110> SAMYANG GENEX CORPORATION <120> Brownie with an improved quality and method of preparing the same <130> DPP20150660KR <160> 9 <170> Kopatentin 1.71 <210> 1 <211> 356 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> The sod promoter (6) <400> 1 aagcgcctca tcagcggtaa ccatcacggg ttcgggtgcg aaaaaccatg ccataacagg 60 aatgttcctt tcgaaaattg aggaagcctt atgcccttca accctactta gctgccaatt 120 attccgggct tgtgacccgc tacccgataa ataggtcggc tgaaaaattt cgttgcaata 180 tcaacaaaaa ggcctatcat tgggaggtgt cgcaccaagt acttttgcga agcgccatct 240 gacggatttt caaaagatgt atatgctcgg tgcggaaacc tacgaaagga ttttttaccc 300 atggctgtat acgaactccc agaactcgac tacgcatacg acgaaaggat tacaaa 356 <210> 2 <211> 93 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> The Tac1 promoter (4) <400> 2 tgacaattaa tcatcggctc gtatattgtg tggaattgtg agcggataac aatttcacac 60 aggaaacaga attcccgggg aaaggattac aaa 93 <210> 3 <211> 112 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> The Tac2 promoter (4) <400> 3 tgacaattaa tcatccggct cgtataatgt taacaatttg tggaattgtg agcggacaca 60 caggaaacag accatggaat tcgagctcgg tacccgggga aaggattaca aa 112 <210> 4 <211> 30 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> The Trc promoter (1) <400> 4 tgacaattaa tcatcggcct cgtataatgt 30 <210> 5 <211> 7 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Ribosome binding region <400> 5 gaaagga 7 <210> 6 <211> 7 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Spacer sequence <400> 6 ttacaaa 7 <210> 7 <211> 289 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> amino acid sequence of an enzyme protein originated from          Clostridium scindens <400> 7 Met Lys His Gly Ile Tyr Tyr Ala Tyr Trp Glu Gln Glu Trp Ala Ala   1 5 10 15 Asp Tyr Lys Arg Tyr Val Glu Lys Ala Ala Lys Leu Gly Phe Asp Ile              20 25 30 Leu Glu Val Gly Ala Ala Pro Leu Pro Asp Tyr Ser Ala Gln Glu Val          35 40 45 Lys Glu Leu Lys Lys Cys Ala Asp Asp Asn Gly Ile Gln Leu Thr Ala      50 55 60 Gly Tyr Gly Pro Ala Phe Asn His Asn Met Gly Ser Ser Asp Pro Lys  65 70 75 80 Ile Arg Glu Glu Ala Leu Gln Trp Tyr Lys Arg Leu Phe Glu Val Met                  85 90 95 Ala Gly Leu Asp Ile His Leu Ile Gly Gly Ala Leu Tyr Ser Tyr Trp             100 105 110 Pro Val Asp Phe Ala Thr Ala Asn Lys Glu Glu Asp Trp Lys His Ser         115 120 125 Val Glu Gly Met Gln Ile Leu Ala Pro Ile Ala Ser Gln Tyr Gly Ile     130 135 140 Asn Leu Gly Met Glu Val Leu Asn Arg Phe Glu Ser His Ile Leu Asn 145 150 155 160 Thr Ser Glu Glu Gly Val Lys Phe Val Thr Glu Val Gly Met Asp Asn                 165 170 175 Val Lys Val Met Leu Asp Thr Phe His Met Asn Ile Glu Glu Ser Ser             180 185 190 Ile Gly Asp Ala Ile Arg His Ala Gly Lys Leu Leu Gly His Phe His         195 200 205 Thr Gly Glu Cys Asn Arg Met Val Pro Gly Lys Gly Arg Thr Pro Trp     210 215 220 Arg Glu Ile Gly Asp Ala Leu Arg Glu Ile Glu Tyr Asp Gly Thr Val 225 230 235 240 Val Met Glu Pro Phe Val Arg Met Gly Gly Gln Val Gly Ser Asp Ile                 245 250 255 Lys Val Trp Arg Asp Ile Ser Lys Gly Ala Gly Glu Asp Arg Leu Asp             260 265 270 Glu Asp Ala Arg Arg Ala Val Glu Phe Gln Arg Tyr Met Leu Glu Trp         275 280 285 Lys     <210> 8 <211> 870 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> Modified nucleic acid sequence (1) of the enzyme protein of SEQ          ID NO: 7 <400> 8 atgaaacacg gtatctacta cgcgtactgg gaacaggaat gggcggcgga ctacaaacgt 60 tacgttgaaa aagcggcgaa actgggtttc gacatcctgg aagttggtgc ggcgccgctg 120 ccggactact ctgcgcagga agttaaagaa ctgaaaaaat gcgcggacga caacggtatc 180 cagctgaccg cgggttacgg tccggcgttc aaccacaaca tgggttcttc tgacccgaaa 240 atccgtgaag aagcgctgca gtggtacaaa cgtctgttcg aagttatggc gggtctggac 300 atccacctga tcggtggtgc gctgtactct tactggccgg ttgacttcgc gaccgcgaac 360 aaagaagaag actggaaaca ctctgttgaa ggtatgcaga tcctggcgcc gatcgcgtct 420 cagtacggta tcaacctggg tatggaagtt ctgaaccgtt tcgaatctca catcctgaac 480 acctctgaag aaggtgttaa attcgttacc gaagttggta tggacaacgt taaagttatg 540 ctggacacct tccacatgaa catcgaagaa tcttctatcg gtgacgcgat ccgtcacgcg 600 ggtaaactgc tgggtcactt ccacaccggt gaatgcaacc gtatggttcc gggtaaaggt 660 cgtaccccgt ggcgtgaaat cggtgacgcg ctgcgtgaaa tcgaatacga cggtaccgtt 720 gttatggaac cgttcgttcg tatgggtggt caggttggtt ctgacatcaa agtttggcgt 780 gacatctcta aaggtgcggg tgaagaccgt ctggacgaag acgcgcgtcg tgcggttgaa 840 ttccagcgtt acatgctgga atggaaataa 870 <210> 9 <211> 870 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> Modified nucleic acid sequence (2) of the enzyme protein of SEQ ID          NO: 7 <400> 9 atgaagcacg gcatctacta cgcatactgg gagcaggagt gggcagcaga ctacaagcgc 60 tacgttgaga aggcagcaaa gctgggcttc gacatcctgg aggttggcgc agcaccactg 120 ccagactact ccgcacagga ggttaaggag ctgaagaagt gcgcagacga caacggcatc 180 cagctgaccg caggctacgg cccagcattc aaccacaaca tgggctcctc cgacccaaag 240 atccgcgagg aggcactgca gtggtacaag cgcctgttcg aggttatggc aggcctggac 300 atccacctga tcggcggcgc actgtactcc tactggccag ttgacttcgc aaccgcaaac 360 aaggaggagg actggaagca ctccgttgag ggcatgcaga tcctggcacc aatcgcatcc 420 cagtacggca tcaacctggg catggaggtt ctgaaccgct tcgagtccca catcctgaac 480 acctccgagg agggcgttaa gttcgttacc gaggttggca tggacaacgt taaggttatg 540 ctggacacct tccacatgaa catcgaggag tcctccatcg gcgacgcaat ccgccacgca 600 ggcaagctgc tgggccactt ccacaccggc gagtgcaacc gcatggttcc aggcaagggc 660 cgcaccccat ggcgcgagat cggcgacgca ctgcgcgaga tcgagtacga cggcaccgtt 720 gttatggagc cattcgttcg catgggcggc caggttggct ccgacatcaa ggtttggcgc 780 gacatctcca agggcgcagg cgaggaccgc ctggacgagg acgcacgccg cgcagttgag 840 ttccagcgct acatgctgga gtggaagtaa 870

Claims (16)

브라우니 제조용 조성물의 전체 고형분 함량 100 중량부 기준으로, 소맥분 30~60 중량부, 식용유지 10~30 중량부, 코코아 분말 3 내지 15 중량부 및 당류 10~50 중량부를 포함하는 브라우니 제조용 조성물로서,
상기 당류는 혼합당 시럽, 또는 상기 혼합당 시럽으로부터 제조되는 분말이며, 상기 혼합당 시럽은 사이코스 에피머화 효소, 상기 효소를 생산하는 균주의 균체, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 및 상기 파쇄물 또는 배양물의 추출물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 사이코스 생산용 조성물을, 과당-함유 원료와 반응하여 제조된 혼합당의 총고형분 함량 100 중량부 기준으로 사이코스 2 내지 55 중량부, 과당 30 내지 80 중량부, 포도당 2 내지 60 중량부 및 올리고당 0 내지 15 중량부로 포함하는 혼합당인, 브라우니 제조용 조성물.
A composition for preparing brownie comprising 30 to 60 parts by weight of wheat flour, 10 to 30 parts by weight of edible oil, 3 to 15 parts by weight of cocoa powder and 10 to 50 parts by weight of saccharide based on 100 parts by weight of the total solid content of the composition for preparing brownies,
Wherein the saccharide is a mixed sugar syrup or a powder produced from the mixed sugar syrup, and the mixed sugar syrup is a mixture of a sucrose epimerase, a strain of the strain producing the enzyme, a culture of the strain, Wherein the composition for the production of a sciatica comprising at least one member selected from the group consisting of the above-mentioned crushed product or an extract of the cultured product is used in an amount of 2 to 55 parts by weight, based on 100 parts by weight of the total solid content of the mixed sugar, , 30 to 80 parts by weight of fructose, 2 to 60 parts by weight of glucose and 0 to 15 parts by weight of oligosaccharide.
삭제delete 제 1 항에 있어서, 상기 당류는 사이코스를 포함하고,
그리고 설탕, 과당 및 물엿으로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 당류를 추가로 포함하는 것인 조성물.
The method of claim 1, wherein the saccharide comprises psicose,
And at least one saccharide selected from the group consisting of sugar, fructose, and starch syrup.
삭제delete 삭제delete 삭제delete 제 1 항에 있어서, 상기 조성물은 전란 (whole egg), 난백 및 난황으로 이루어지는 군에서 선택된 계란성분을 추가로 포함하는 조성물.The composition of claim 1, wherein the composition further comprises an egg component selected from the group consisting of whole egg, egg white, and egg yolk. 제 1 항에 있어서, 상기 브라우니 제조용 조성물로 제조된 브라우니는, 수분 함량이 15% 이상이고 수분활성도가 0.78 내지 0.8 범위인 조성물. The composition according to claim 1, wherein the brownie made from the composition for making brownie has a moisture content of 15% or more and a water activity of 0.78 to 0.8. 제 1 항에 있어서, 상기 브라우니 제조용 조성물을 배합 및 성형하고 소성하여 제조된 성형 브라우니를 제조하기 위한 조성물인, 조성물.The composition according to claim 1, which is a composition for producing a molded brownie prepared by compounding, molding and firing the composition for making brownie. 삭제delete 제 1 항에 있어서, 상기 조성물은 계란, 유화제, 팽창제, 초콜릿, 코코아 분말, 난소화성 덱스트린, 단백분말, 비타민, 미네랄류, 식염 및 향료로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 성분을 추가로 포함하는 것인 조성물. The composition according to claim 1, wherein the composition further comprises at least one component selected from the group consisting of eggs, emulsifiers, swelling agents, chocolate, cocoa powder, indigestible dextrin, protein powder, vitamins, minerals, Composition. 제 1 항에 있어서, 상기 소맥분은 박력, 중력, 강력, 통밀분 및 이들의 혼합으로 이루어지는 것에서 선택된 1종 이상인 조성물.The composition according to claim 1, wherein the wheat flour is at least one selected from the group consisting of force, gravity, strength, millability, and a mixture thereof. 제 1 항에 있어서, 상기 식용유지는 식물성 유지, 동물성 유지, 마가린, 버터, 쇼트닝 및 이들의 혼합물로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상인 조성물. The composition according to claim 1, wherein the edible oil is at least one selected from the group consisting of vegetable oil, animal oil, margarine, butter, shortening, and mixtures thereof. 제1항, 제3항, 제7항 내지 제9항, 그리고 제11항 내지 제13항중 어느 한 항에 따른 브라우니 제조용 조성물을 균질하게 배합하여 제조된 브라우니 제조용 반죽물. A kneaded product for preparing brownies, which is prepared by uniformly blending the composition for preparing brownies according to any one of claims 1, 3, 7 to 9, and 11 to 13. 제1항, 제3항, 제7항 내지 제9항, 그리고 제11항 내지 제13항중 어느 한 항에 따른 브라우니 제조용 조성물을 균질하게 배합하여 제조된 반죽물을 성형하고 소성하여 제조된 브라우니. A brownie prepared by molding and firing a kneaded product prepared by uniformly blending the composition for making brownie according to any one of claims 1 to 13, and a kneading composition according to any one of claims 11 to 13. 제 15 항에 있어서, 상기 브라우니의 수분 함량이 15% 이상이고 수분활성도가 0.78 내지 0.8 범위인 브라우니.
16. The brownie according to claim 15, wherein the brownie has a moisture content of 15% or more and a water activity of 0.78 to 0.8.
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