KR101560331B1 - Manufacturing method for fermentained beverage fermented by using the extract of Zizyphus jujuba and Cervi Parvum Cornu - Google Patents

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Abstract

본 발명은 대추 및 녹용 추출물을 이용한 유산균 발효 음료의 제조방법에 관한 것으로, 본 발명은 대추 및 녹용 추출물을 유산균으로 발효시킴으로써 우수한 항산화 효과를 지니며, 기호도가 우수한 발효 음료의 제조방법을 제공한다.The present invention relates to a process for producing fermented beverages of lactic acid bacteria using jujube and deer antler extracts. The present invention provides a fermented beverage having excellent antioxidative effects by fermenting jujube and antler extracts with lactic acid bacteria, and having excellent taste.

Description

대추 및 녹용 추출물을 이용한 유산균 발효 음료의 제조방법{Manufacturing method for fermentained beverage fermented by using the extract of Zizyphus jujuba and Cervi Parvum Cornu}Technical Field [0001] The present invention relates to a fermented beverage comprising fermented beverage, fermented beverage, fermented beverage, fermented beverage, fermented beverage, fermented beverage,

본 발명은 대추 및 녹용 추출물을 이용한 유산균 발효 음료의 제조방법에 관한 기술로, 구체적으로는 대추 및 녹용 추출물을 유산균으로 발효시켜 항산화 효과가 우수하고 기호성이 뛰어난 유산균 발효 음료의 제조방법에 관한 기술이다.
TECHNICAL FIELD The present invention relates to a process for producing a fermented beverage of lactic acid bacteria using a jujube and a deer antler, and more particularly, to a process for producing a fermented beverage of lactic acid bacteria having excellent antioxidative effect and excellent palatability by fermenting jujube and deer antler with lactic acid bacteria .

대추(Zizyphus jujuba var . inermis Rehder)는 갈매나무과(Ramnace)의 지지퍼스(Zizyphus)속, 낙엽, 활엽향목의 열매로서 현재 40여종의 품종과 400여종의 변종이 있는 것으로 알려져 있다. 예로부터 대추는 자양강장의 효과가 있고 이뇨제, 견이통 완화제, 만성기관지염, 거담제, 결핵, 위의 허한증을 치료하는 효능 등 46가지 약리효과가 있어 우리나라 사람 대부분 약을 달일 때나 물을 끓일 때 대추 한두 알씩은 넣어서 끓이는 풍습이 있다. 뿐만 아니라 대추는 소화완화, 강장, 항알레르기, 간 보호 작용이 있으며 그 밖에 대장암과 같은 성인병 예방, 결핵, 기관지염 및 신경쇠약에 치료효과가 있는 것으로 알려져 있다.Jujube ( Zizyphus) jujuba there is . inermis Rehder is a fruit of Zizyphus , a deciduous and leafy aroma of Ramnace, which is now known to contain 40 varieties and 400 varieties. There are 46 pharmacological effects such as diuretic, emollient, chronic bronchitis, expectorant, tuberculosis, and the efficacy of treating gastrointestinal stomach. Most people in Korea have jujube One or two eggs each have a custom of boiling. In addition, jujube has anti-digestion, tonic, anti-allergic and liver protective effects, and it is known to have a therapeutic effect in prevention of adult diseases such as colon cancer, tuberculosis, bronchitis and nervous breakdown.

대추의 성분으로는 당질과 아스코르브산(ascorbic acid)이 다량 함유되어 있고, 약용 성분으로는 과실 중 각종 스테롤(sterols), 알카로이드(alkaloids), 사포닌(saponins), 비타민(vitamins), 유기산류, 아미노산류 등이 보고되고, 종자의 성분으로는 주로 올레익 애씨드(oleic acid), 리노레익 애씨드(linoleic acid)의 불포화 지방산으로 이루어진 지방유와 사포닌(saponin), 에블린(eblin), 락톤(lacton) 등이 보고되었고, 잎에서는 플라보노이드(flavonoids), 알카로이드(alkaloids), 비타민 C(vitamin C), 루틴(rutin) 등의 성분이 보고되었으며, 가시수피에는 알카로이드(alkaloids) 성분이 그리고 뿌리에는 사포닌(saponin) 등이 함유되어 있다고 보고되어 있다.The jujube contains a large amount of carbohydrate and ascorbic acid and the medicinal ingredient is various sterols, alkaloids, saponins, vitamins, organic acids, amino acids And the like. Seed ingredients are mainly fatty oil and unsaturated fatty acids such as oleic acid, linoleic acid, saponin, eblin, lactone and the like. In the leaves, flavonoids, alkaloids, vitamin C and rutin were reported. Alkaloids were found in the bark of bark and saponins were found in the roots. Has been reported to be contained.

한편, 녹용(Antler, Cervi Parvum Cornu)은 사슴과(Cervidae)에 속하는 사슴의 각질화되지 않은 어린 뿔을 건조한 것으로서 우리나라를 비롯한 동북아 지역에서 약용 및 식용으로 널리 이용되어 왔다. 현재까지 녹용의 약리작용으로는 면역강화, 조혈기능의 촉진, 간의 대사작용 촉진, 신경계의 강화 등이 있으며 임상적으로는 강심작용, 강장작용, 중추신경 및 자율신경계의 진정작용, 근육의 피로회복, 세포 재생 및 대사 촉진, 신경계의 강화 등이 알려져 있다.On the other hand, Antler, Cervi Parvum Cornu is a dried deer horn of deer belonging to Cervidae and has been widely used for medicinal and edible purposes in Northeast Asia including Korea. Until now, pharmacological actions of antler include immunity enhancement, promotion of hematopoietic function, promotion of hepatic metabolism, strengthening of the nervous system, etc. Clinically there are clinically significant effects such as arteriosclerosis, tonic action, sedation of central nervous system and autonomic nervous system, , Promotion of cell regeneration and metabolism, and strengthening of the nervous system.

또한, 녹용은 보혈 강장제로 널리 사용되어 왔고, 오메가-3(ω-3) 계열의 도코사헥사엔산(docosahexaenoic acid)이 풍부하여 항혈전 효과를 유도할 수 있으며, 전자공여 작용, 지질과산화 억제효과 등의 다양한 항산화효과와 아질산염 소거효과, 티로시나아제(tyrosinase) 저해효과 그리고 혈소판응집 활성억제와 함께 민간에서는 활력 강화 및 성장 촉진 효과가 있는 것으로 전해지고 있다. 그러나 이와 같은 기능성 효과에 대하여 체내에서 모노아민산화효소(monoamine oxidase)의 활성억제와 지질과산화 방어효과, SOD 활성 및 ACE 억제 등에 대하여 보고되었을 뿐 녹용성분의 체내 흡수 및 성분의 활성 메커니즘 규명에 대한 연구는 미비한 실정이다. In addition, antler antler has been widely used as a tonic tonic, and it can induce anti-thrombotic effects by abundant omega-3 (docosahexaenoic acid) omega-3 (omega-3) And inhibition of platelet aggregation activity. In addition, it has been reported that there is an effect of enhancing vitality and promoting growth in the private sector, along with various antioxidative and nitrite scavenging effects, tyrosinase inhibition effect and platelet aggregation activity inhibition. However, there have been reports on the effect of monoamine oxidase, lipid peroxidation protection, SOD activity and ACE inhibition in the body against such functional effects. .

대추를 이용한 식품의 경우 대부분 알코올발효를 통한 대추술 제조 및 열수 추출하여 제조한 대추즙, 그리고 다른 기능성 성분을 첨가하여 제조한 대추 젤리 등으로 국한되어 있다. 그리고 녹용은 현재 소비자에게 대중화된 홍삼, 흑마늘 등과 함께 약리효능이 높다고 알려져 있음에도 대중화되지 못한 실정이다. 이는 녹용이 일반적으로 약재로 알려져 식품으로서 소비자의 인식 부족과 기호성을 충족시키지 못하기 때문이라고 볼 수 있다. 따라서 대추를 이용한 식품의 다양화와 녹용의 대중화를 위하여 녹용 및 대추 추출물의 기호성 및 기능성을 향상시켜 기능성 건강식품으로 소비자가 쉽게 구매하여 섭취할 수 있는 음료형태의 제품화 개발 연구가 필요하다. Most of the foods using jujube are confined to jujube juice prepared by making jujube juice through alcohol fermentation and hot water extraction, and jujube juice made by adding other functional ingredients. In addition, antler is known to have high pharmacological efficacy together with red ginseng and black gins popularized by consumers, but it is not popularized. This is because deer antler is generally known as a medicinal product and can not satisfy consumers' lack of awareness and palatability as a food. Therefore, in order to diversify foods and popularize deer antler by using jujube, it is necessary to develop commercial products of beverages which can be easily purchased and consumed as functional health food by improving the palatability and functionality of antler and jujube extracts.

비피도박테리움(Bifidobacterium ), 락토바실러스(Lactobacillus), 스트렙토코쿠스(Streptococcus) 균 등의 유산균은 다양한 발효 기작으로 젖산 및 초산과 같은 유기산을 생성하여 정장효과, 항콜레스테롤, 항비만, 장내 개선, 유해균의 억제 작용 등의 기능성을 유도하며, 또한 장내에서 섭취 식품의 미네랄 흡수 촉진 효과도 알려져 있다. 이러한 다양한 기능성을 유도할 수 있는 유산균을 이용하여 대추의 발효에 대한 연구는 시도되고 있지만, 대추와 함께 녹용을 유산균 발효하여 제조한 제품에 관한 연구는 전무한 실정이다.
Bifidobacterium (Bifidobacterium), Lactobacillus bacteria (Lactobacillus), Streptococcus (Streptococcus) Lactic acid bacteria such as lactic acid bacteria produce various organic acids such as lactic acid and acetic acid by various fermentation mechanisms to induce functional effects such as effect of sugar, anti-cholesterol, anti-obesity, improvement of intestines and inhibition of harmful bacteria and promotion of absorption of minerals The effect is also known. Studies on the fermentation of jujubes using lactic acid bacteria capable of inducing these various functions have been attempted, but there have been no studies on products produced by fermenting lactic acid bacteria with antler juice together with jujube.

대한민국 등록특허 제10-0856330호에는 '녹용 엑기스를 첨가하여 제조한 과일 열매 음료 및 그 제조방법'이 기재되어 있다.Korean Patent No. 10-0856330 describes a 'fruit fruit drink prepared by adding antler extract, and a process for producing the same. 대한민국 등록특허 제10-0429244호에는 '녹용 및 기타 한약재를 포함하는 한방음료'가 기재되어 있다.Korean Patent No. 10-0429244 describes a " herbal drink containing antler and other herbal medicines ".

본 발명은 대추 및 녹용 추출물을 유산균으로 발효시킴으로써 기능성 강화 및 소비자의 기호성을 향상시키는 발효 음료를 개발하고자 한다.
The present invention aims to develop a fermented beverage which enhances functionalities and enhances palatability of consumers by fermenting jujube and antler extracts with lactic acid bacteria.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 녹용에 5~10배의 물을 가한 후, 이것의 무게 대비 1~5%의 대추를 첨가한 다음 90~110℃에서 9~11시간 동안 추출하는 단계 (A); 상기 단계 (A) 후, 유산균을 접종하고 35~37℃에서 20~25시간 동안 발효시키는 단계 (B);로부터 제조되는 것을 특징으로 하는 대추 및 녹용 추출물을 이용한 유산균 발효 음료의 제조방법을 제공한다.In order to attain the above object, the present invention provides a method for producing an antler, which comprises adding 5 to 10 times of water to antler, adding 1 to 5% of jujube to the weight of the antler, and then extracting it at 90 to 110 ° C for 9 to 11 hours A); And (B) a step (B) of inoculating the lactic acid bacterium after the step (A) and fermenting the mixture at 35 to 37 ° C for 20 to 25 hours, wherein the fermented beverage comprises a jujube and a deer antler .

이하, 본 발명의 발효 음료에 대하여 자세히 설명하고자 한다.
Hereinafter, the fermented beverage of the present invention will be described in detail.

단계 (A): 녹용에 5~10배의 물을 가한 후, 이것의 무게 대비 1~7%의 대추를 첨가한 다음 90~110℃에서 9~11시간 동안 추출하는 단계Step (A): adding 5 to 10 times of water to the antler, adding 1 to 7% of jujube to the weight of the antler, and then extracting it at 90 to 110 DEG C for 9 to 11 hours

본 단계는 녹용에 5~10배의 물을 가한 후, 이것의 무게 대비 1~7%의 대추를 첨가한 다음 90~110℃에서 9~11시간 동안 추출하여 대추 첨가 녹용 추출물을 제조하는 단계이다.In this step, 5 to 10 times of water is added to the antler, then 1 to 7% of jujube is added thereto, and then the mixture is extracted at 90 to 110 ° C for 9 to 11 hours to prepare a jujube extract .

더욱 구체적으로는 녹용의 5배의 물을 가한 후, 이것의 무게 대비 5%의 대추를 첨가한 다음 100℃에서 10시간 동안 추출하는 것이 좋다. 반응표면분석법에 의하여 항산화 효과(총 폴리페놀 함량, DPPH 라디칼 소거능 및 ABTS 라디칼 소거능)에 대한 추출 조건을 최적화한 결과, 상기와 같은 조건이 확립되었기 때문이다. 또한, 하기 관능평가에 의하면, 5%의 대추가 첨가될 경우, 녹용의 향이 유지되면서 대추의 향도 조화롭게 어울려져 관능평가 점수가 우수하였다.More specifically, it is preferable to add 5 times water of antler, add 5% of jujube to the weight of the antler, and then extract it at 100 占 폚 for 10 hours. As a result of optimizing the extraction conditions for the antioxidative effect (total polyphenol content, DPPH radical scavenging ability and ABTS radical scavenging ability) by the reaction surface analysis method, the above conditions were established. In addition, according to the sensory evaluation, when 5% of jujube was added, the scent of the antler was maintained, and the jujube flavor was harmoniously matched to the sensory evaluation score.

한편, 본 발명은 녹용에 대추를 첨가하여 추출물을 제조함으로써, 항산화 효과가 증진된 추출물을 제조할 수 있다. On the other hand, the present invention can produce an extract having enhanced antioxidative effect by preparing an extract by adding jujube to antler.

한편, 본 발명에 있어서, 상기 추출의 재료가 되는 녹용 및 대추는 이를 건조하여 사용하거나 또는 그대로 사용할 수 있으며, 바람직하게는 건조하여 사용하는 것이다.
On the other hand, in the present invention, antler and jujube, which are the materials of the above extraction, can be dried or used as such, and preferably dried.

단계 (B): 상기 단계 (A) 후, 유산균을 접종하고 35~37℃에서 20~25시간 동안 발효시키는 단계Step (B): After step (A), lactic acid bacteria are inoculated and fermented at 35 to 37 DEG C for 20 to 25 hours

본 단계는 상기 단계 (A) 후, 유산균을 접종하고 35~37℃에서 20~25시간 동안 발효시켜 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물을 제조하는 단계이다. 더욱 구체적으로는 상기 단계 (A) 후, 유산균을 접종하고 37℃에서 24시간 동안 발효시켜 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물을 제조하는 것이 좋다. 발효시간이 그 이상 지속되면 경제적이지 못하며, 그 이하로는 충분히 발효되지 않기 때문이다. In this step, lactic acid bacteria are inoculated after the step (A) and fermented at 35 to 37 ° C for 20 to 25 hours to prepare a fermented jujube fermented jujube extract. More specifically, after the step (A), the lactic acid bacteria are inoculated and fermented at 37 DEG C for 24 hours to produce a fermented jujube fermented jujube extract. If the fermentation time is longer than that, it is not economical, and below that, fermentation is not enough.

한편, 본 발명에 있어서, 상기 유산균은 바람직하게 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 스트렙토코커스 서머필러스( Streptococcus thermophilus) 및 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)로 이루어진 군에서 선택된 균주인 것이 좋다. 하기 본 발명의 실험예에 의하면 상기 3종의 유산균이 대추 첨가 녹용 추출물에서 우수한 생장률을 나타냈기 때문이다. 또한, 관능평가에 의하면, 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)를 이용하여 발효시킨 음료가 관능 점수가 매우 좋게 나타났다.On the other hand, in the present invention, the lactic acid bacteria are preferably Lactococcus lactis lactis), Streptococcus's Summer filler (Streptococcus thermophilus and leuconostoc mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides ). According to the experimental examples of the present invention, the three kinds of lactic acid bacteria showed excellent growth rate in the antler juice-containing antler extract. According to the sensory evaluation, the beverage fermented with Streptococcus thermophilus showed a very good sensory score.

한편, 본 발명은 대추 첨가 녹용 추출물을 유산균으로 발효시킴으로써 더욱 우수한 항산화 효과를 가지는 발효 음료를 제공한다. 하기 본 발명의 실험예에 의하면, 유산균으로 발효 전 대추 첨가 녹용 추출물의 폴리페놀 함량은 0.585 mg/㎖, DPPH 라디칼 소거능은 0.250 mg AA eq/㎖, ABTS 라디칼 소거능은 0.260 mg AA eq/㎖임에 반해, 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물의 폴리페놀 함량은 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)및 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 차례대로 0.790 mg/㎖, 0.779 mg/㎖, 0.829 mg/㎖, DPPH 라디칼 소거능은 0.272 mg AA eq/㎖, 0.269 mg AA eq/㎖, 0.277 mg AA eq/㎖, ABTS 라디칼 소거능은 0.281 mg AA eq/㎖, 0.296 mg AA eq/㎖, 0.316 mg AA eq/㎖를 나타냈다.Meanwhile, the present invention provides a fermented beverage having a more excellent antioxidative effect by fermenting a jujube antler extract with lactic acid bacteria. According to the Experimental Example of the present invention, the polyphenol content, the DPPH radical scavenging activity, and the ABTS radical scavenging activity of the jujube extract containing fermented jujube before fermentation are 0.585 mg / ml, 0.250 mg AA eq / ml and 0.260 mg AA eq / On the contrary, the content of polyphenols in the antler extract containing lactic acid fermented jujube was lower than that of Lactococcus lactis , Streptococcus thermophilus and Leuconostoc The results are shown in Table 2. The inhibitory activities of DPTS radical scavenging activity were 0.272 mg AA eq / ㎖, 0.269 mg AA eq / ㎖, 0.277 mg AA eq / ㎖, and ABTS radical scavenging activity was 0.281 mg / ml, 0.777 mg / ml, 0.829 mg / AA eq / ml, 0.296 mg AA eq / ml, and 0.316 mg AA eq / ml.

한편, 본 발명에 있어서, 상기 유산균 발효 음료는 전제 조성물에 대하여 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물이 1~100중량% 첨가된 음료일 수도 있다.In the present invention, the lactic acid bacteria fermented beverage may be a beverage in which 1 to 100% by weight of a fermented jujube fermented jujube antler extract is added to the total composition.

또한, 본 발명에 있어서, 유산균의 생육을 촉진시키고, 음료의 단맛을 내기 위해 당 또는 감미료를 첨가할 수 있다. 예를 들어 글루코스(glucose)인 것이 좋다.
In the present invention, a sugar or a sweetener may be added to promote the growth of lactic acid bacteria and sweeten the beverage. For example, glucose.

본 발명에 의할 경우, 대추 첨가 녹용 추출물을 유산균으로 발효시킴으로써 항산화 효과가 더욱 우수해진 발효 음료를 제공할 수 있다.According to the present invention, a fermented beverage having an antioxidative effect can be provided by fermenting a jujube antler extract with lactic acid bacteria.

또한, 본 발명에 의할 경우, 녹용의 향이 유지되면서 대추 향이 가미되어 기호도 좋은 발효 음료를 제공할 수 있다.
In addition, according to the present invention, the flavor of antler can be maintained while the flavor of jujube is added to provide a fermented beverage having good taste.

도 1은 추출 조건 따라 추출된 녹용 추출물의 총 폴리페놀 함량을 각 조건(추출온도, 추출시간, 추출용매량)에 따라 3D로 나타낸 그래프이다.
도 2는 추출 조건 따라 추출된 녹용 추출물의 DPPH 라디칼 소거능을 각 조건(추출온도, 추출시간, 추출용매량)에 따라 3D로 나타낸 그래프이다.
도 3은 추출 조건 따라 추출된 녹용 추출물의 ABTS 라디칼 소거능을 각 조건(추출온도, 추출시간, 추출용매량)에 따라 3D로 나타낸 그래프이다.
도 4는 대추 첨가량에 따른 대추 첨가 녹용 추출물의 총 폴리페놀 함량을 나타낸 그래프이다.
도 5는 대추 첨가량에 따른 대추 첨가 녹용 추출물의 DPPH 라디칼 소거능을 나타낸 그래프이다.
도 6은 대추 첨가량에 따른 대추 첨가 녹용 추출물의 ABTS 라디칼 소거능을 나타낸 그래프이다.
도 7은 대추 첨가량에 따른 대추 첨가 녹용 추출물의 당 성분을 분석한 결과이다.
도 8은 대추 첨가량에 따른 대추 첨가 녹용 추출물의 pH 변화를 나타낸 그래프이다.
도 9는 대추 첨가량에 따른 대추 첨가 녹용 추출물의 산도 변화를 나타낸 그래프이다.
도 10은 대추 첨가 녹용 추출물의 유산균 발효 균주별 생장 곡선을 나타낸 그래프이다.
도 11은 대추 첨가 녹용 추출물을 이용한 유산균 발효 음료의 총 폴리페놀 함량을 나타낸 결과이다.
도 12는 대추 첨가 녹용 추출물을 이용한 유산균 발효 음료의 DPPH 라디칼 소거능을 나타낸 결과이다.
도 13은 대추 첨가 녹용 추출물을 이용한 유산균 발효 음료의 ABTS 라디칼 소거능을 나타낸 결과이다.
도 14는 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물의 당성분을 분석한 결과이다{A: 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), B: 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus), C: 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)}.
도 15는 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물의 pH 변화를 나타낸 그래프이다.
도 16은 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물의 산도 변화를 나타낸 그래프이다.
FIG. 1 is a graph showing the total polyphenol content of the antler extract extracted according to extraction conditions in 3D according to each condition (extraction temperature, extraction time, extraction solvent amount).
FIG. 2 is a graph showing the DPPH radical scavenging ability of the antler extract extracted according to extraction conditions in 3D according to each condition (extraction temperature, extraction time, extraction solvent amount).
FIG. 3 is a graph showing the ABTS radical scavenging ability of the antler extract extracted according to extraction conditions in 3D according to each condition (extraction temperature, extraction time, extraction solvent amount).
FIG. 4 is a graph showing the total polyphenol contents of the antler juice-containing antler extract according to the amount of jujube.
FIG. 5 is a graph showing the DPPH radical scavenging ability of the jujube antler extract according to the amount of jujube.
6 is a graph showing the ABTS radical scavenging ability of the jujube antler extract according to the amount of jujube.
FIG. 7 is a result of analyzing the sugar content of the jujube-containing antler extract according to the amount of jujube.
8 is a graph showing the pH change of the jujube antler extract according to the amount of jujube.
9 is a graph showing changes in acidity of the jujube antler extract according to the amount of jujube.
FIG. 10 is a graph showing the growth curves of the fermentation strains of lactic acid bacteria of the jujube antler extract.
11 is a graph showing the total polyphenol contents of fermented beverages of lactic acid bacteria using jujube antler extract.
12 shows DPPH radical scavenging activity of fermented beverages of lactic acid bacteria using jujube antler extract.
13 shows the ABTS radical scavenging activity of the fermented beverage of lactic acid bacteria using the jujube antler extract.
Fig. 14 is a result of analysis of the sugar content of the antler extract added with lactic acid bacteria fermented jujuba (A: Lactococcus lactis , B: Streptococcus thermophilus , C: leuconostoc mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides )}.
15 is a graph showing the pH change of the antler extract added with lactic acid bacteria fermented jujube.
16 is a graph showing changes in acidity of the antler extract added with lactic acid fermented jujube.

이하, 본 발명의 내용을 하기 실시예를 들어 더욱 상세히 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 그와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the following examples. However, the scope of the present invention is not limited to the following embodiments, and includes modifications of equivalent technical ideas.

실험예Experimental Example 1: 녹용  1: antler 열수Heat number 추출물 최적 추출 조건 확립 Establish optimum extraction condition of extract

본 실험예에서는 녹용 추출물에 대하여 최대 항산화 효과에 따른 최적 추출 조건을 확립하기 위해 반응표면분석법(RSM, Response Surface Methodology)을 사용하였다. 실험 계획은 중심 합성 계획(central composite design)을 적용하였다. 독립변수는 하기 표 1과 같이 녹용을 열수 추출하기 위한 추출온도(X1), 추출시간(X2), 가수량(X3)으로 설정하고, -1, 0, 1의 수준으로 부호화하였다. 종속 변수인 총 폴리페놀 함량(Y1)과, DPPH 라디칼 소거능(Y2)과 ABTS 라디칼 소거능(Y3)은 독립변수(Xi)인 추출온도(X1), 추출시간(X2), 가수량(X3)에 의하여 영향을 받으므로 하기 표2와 같이 중심 합성 계획에 따라 27군으로 구분하였으며, 3번의 반복 실험을 실시하고 평균값으로 회귀 분석을 실시하였다. 이때, 각각의 독립변수에 대한 2차 회귀 모형식은 하기 회귀 모형식 1 내지 3과 같다.In this experiment, Response Surface Methodology (RSM) was used to establish the optimum extraction conditions for the antioxidant effect of the antler extract. The experimental design applied the central composite design. Independent variables were set at the extraction temperature (X 1 ), extraction time (X 2 ), and amount of water (X 3 ) for hot water extraction of the antler, as shown in Table 1 below. Total polyphenol content of the dependent variable (Y 1) and, DPPH radical scavenging activity (Y 2) and ABTS radical scavenging activity (Y 3) is an independent variable, the extraction temperature (X 1), the extraction time (X 2) (X i) , (X 3 ). Therefore, it was classified into 27 groups according to the central synthesis plan as shown in Table 2, and the regression analysis was carried out by performing the average of 3 repeated experiments. In this case, the second-order regression model for each independent variable is as shown in the following regression models 1 to 3.

[회귀 모형식 1][Regression model 1]

(총 폴리페놀 함량 최적화)(Total polyphenol content optimization)

Y1= b0+b1X1+b2X2+b3X3+b12X1X2+b13X1X3+b23X2X3+b11X1 2+b22X2 2+b33X3 2 Y 1 = b 0 + b 1 X 1 + b 2 X 2 + b 3 X 3 + b 12 X 1 X 2 + b 13 X 1 X 3 + b 23 X 2 X 3 + b 11 X 1 2 + b 22 X 2 2 + b 33 X 3 2

[회귀 모형식 2][Regression model 2]

(DPPH 라디칼 소거능 최적화)(DPPH radical scavenging ability optimization)

Y2= b0+b1X1+b2X2+b3X3+b12X1X2+b13X1X3+b23X2X3+b11X1 2+b22X2 2+b33X3 2 Y 2 = b 0 + b 1 X 1 + b 2 X 2 + b 3 X 3 + b 12 X 1 X 2 + b 13 X 1 X 3 + b 23 X 2 X 3 + b 11 X 1 2 + b 22 X 2 2 + b 33 X 3 2

[회귀 모형식 3][Regression model 3]

(ABTS 라디칼 소거능 최적화)(Optimizing ABTS radical scavenging ability)

Y3= b0+b1X1+b2X2+b3X3+b12X1X2+b13X1X3+b23X2X3+b11X1 2+b22X2 2+b33X3 2 Y 3 = b 0 + b 1 X 1 + b 2 X 2 + b 3 X 3 + b 12 X 1 X 2 + b 13 X 1 X 3 + b 23 X 2 X 3 + b 11 X 1 2 + b 22 X 2 2 + b 33 X 3 2

여기서 Y는 종속 변수이고 X1, X2, X3는 독립 변수, b0는 절편, bn은 회귀 계수이며, 회귀 분석에 의한 모델 식의 예측에는 SAS(Statistical Analysis System) 프로그램을 이용하였다. 또한, 제조 조건의 다중회귀분석, 분산분석, F 검정 및 t 검정을 통하여 종속변량의 최적화를 확인하고, 3차원 분석(3-D plot)을 통하여 추출 조건을 최적화하였다. Here, Y is a dependent variable, X 1 , X 2 , X 3 are independent variables, b 0 is intercept and bn is regression coefficient, and SAS (Statistical Analysis System) program is used to predict the model equation by regression analysis. In addition, optimization of dependent variables was confirmed through multiple regression analysis, dispersion analysis, F-test and t-test of the manufacturing conditions, and the extraction conditions were optimized through 3-D analysis (3-D plot).

VariablesVariables CodedCoded Coded levelCoded level ΔXΔX XiXi -1-One 00 1One 추출온도 (℃)Extraction temperature (캜) X1 X 1 8080 9090 100100 1010 추출시간 (hr)Extraction time (hr) X2 X 2 55 7.57.5 1010 2.52.5 추출용매량 (times)Extraction solvent amount (times) X3 X 3 55 7.57.5 1010 2.52.5

Run numberRun number Coded variablesCoded variables Process variablesProcess variables X1 X 1 X2 X 2 X3 X 3 X1 X 1 X2 X 2 X3 X 3 1One -1-One -1-One -1-One 8080 55 55 22 -1-One -1-One 00 8080 55 7.57.5 33 -1-One -1-One 1One 8080 55 1010 44 -1-One 00 -1-One 8080 7.57.5 55 55 -1-One 00 00 8080 7.57.5 7.57.5 66 -1-One 00 1One 8080 7.57.5 1010 77 -1-One 1One -1-One 8080 1010 55 88 -1-One 1One 00 8080 1010 7.57.5 99 -1-One 1One 1One 8080 1010 1010 1010 00 -1-One -1-One 9090 55 55 1111 00 -1-One 00 9090 55 7.57.5 1212 00 -1-One 1One 9090 55 1010 1313 00 00 -1-One 9090 7.57.5 55 1414 00 00 00 9090 7.57.5 7.57.5 1515 00 00 1One 9090 7.57.5 1010 1616 00 1One -1-One 9090 1010 55 1717 00 1One 00 9090 1010 7.57.5 1818 00 1One 1One 9090 1010 1010 1919 1One -1-One -1-One 100100 55 55 2020 1One -1-One 00 100100 55 7.57.5 2121 1One -1-One 1One 100100 55 1010 2222 1One 00 -1-One 100100 7.57.5 55 2323 1One 00 00 100100 7.57.5 7.57.5 2424 1One 00 1One 100100 7.57.5 1010 2525 1One 1One -1-One 100100 1010 55 2626 1One 1One 00 100100 1010 7.57.5 2727 1One 1One 1One 100100 1010 1010

실험예Experimental Example 1-1: 녹용 추출물의 총 폴리페놀 함량에 따른 추출 조건 최적화 1-1: Optimization of extraction conditions according to total polyphenol content of antler extract

본 실험예에서는 녹용 추출물의 총 폴리페놀 함량에 따른 추출 조건 최적화를 위하여 Dewanto 등의 방법을 이용하였다. 이 방법은 Folin-Ciocalteu reagent가 추출물의 폴리페놀성 화합물에 의해 환원된 결과 몰리브덴 청색으로 발색하는 것을 이용하는 분석 방법이다. 조건별 녹용 추출물 100 ㎕에 2% Na2CO3 용액 2 ㎖를 가한 후, 3분간 방치한 다음 50% Folin-Ciocalteu reagent 100 ㎕를 가한 후, 30분 반응시켜 반응액의 흡광도 값을 750 nm에서 측정하였다. 한 분자 내에 2개 이상의 페놀릭 하이드록시{phenolic hydroxyl(OH)}기를 가지며 다양한 생리활성을 가지는 대표적인 폴리페놀계 물질인 갈산(gallic acid)을 표준물질로 사용하여 검량선을 작성하였으며, 총 폴리페놀 함량은 시료 100 g 중의 mg gallic acid로 나타내었다. 그 결과는 하기 표 3에 나타내었다.In this experiment, Dewanto et al. Were used to optimize the extraction conditions according to the total polyphenol content of the antler extract. This method is an analytical method that utilizes that Folin-Ciocalteu reagent is reduced to molybdenum blue as a result of reduction by the polyphenolic compound of the extract. Add 100 μl of 2% Na 2 CO 3 solution to 100 μl of each antler of the condition, leave for 3 minutes, add 100 μl of 50% Folin-Ciocalteu reagent, and react for 30 minutes. Respectively. A calibration curve was prepared by using gallic acid, a representative polyphenolic substance having two or more phenolic hydroxyl (OH) groups in one molecule and having various physiological activities, as a standard substance, and the total polyphenol content Was expressed as mg gallic acid in 100 g of sample. The results are shown in Table 3 below.

[회귀 분석식 1][Regression Equation 1]

Y1=0.133+0.038X1+0.020X2-0.048X3+0.011X1X2-0.018X1X3+0.012X3 2 Y 1 = 0.133 + 0.038X 1 + 0.020X 2 -0.048X 3 + 0.011X 1 X 2 -0.018X 1 X 3 + 0.012X 3 2

VariablesVariables Coded valueCoded value Uncoded valueUncoded value Predicted valuePredicted value 추출온도 (℃)Extraction temperature (캜) 0.990.99 99.899.8 0.278 mg/㎖
(0.259 mg/㎖)
0.278 mg / ml
(0.259 mg / ml)
추출시간 (hour)Extraction time (hour) 0.990.99 9.889.88 추출용매량 (fold, v/v)The amount of extracted solvent (fold, v / v) -0.99-0.99 5.135.13

실험결과, 각각의 조건에서 추출된 녹용 추출물의 총 폴리페놀 함량을 각 조건에 따른 3D 그래프는 도 1과 같았다. 또한, 최적 추출 조건에 대한 회귀 분석식은 상기 회귀 분석식 1과 같이 나타났으며, 이에 최적 조건은 추출온도는 99.8℃, 추출시간은 9.88시간, 추출용매량은 5.13배로 나타났다. 또한, 상기 조건의 기대값이 0.278 mg gallic acid eq/㎖이었는데, 실제 실험값에서는 0.259 mg gallic acid eq/㎖으로 조금 낮게 나타났다(표 3).
As a result, the total polyphenol content of the antler extract extracted under the respective conditions was as shown in FIG. The regression equation for the optimal extraction condition was as shown in the regression equation 1, and the optimum conditions were 99.8 ° C for extraction temperature, 9.88 hours for extraction time, and 5.13 times for extraction solvent. The expected value of the above condition was 0.278 mg gallic acid eq / ml, which was slightly lower at 0.259 mg gallic acid eq / ml in the experimental data (Table 3).

실험예Experimental Example 1-2: 녹용 추출물의  1-2: Antler extract DPPHDPPH 라디칼Radical 소거능에On the offensive 대한 추출 조건 최적화 Optimization of extraction conditions

본 실험예에서는 녹용 추출물의 DPPH 라디칼 소거능 측정을 위하여 Blois등의 방법을 이용하여 분석하였다. DPPH용액(1,1’-diphenyl-2-picrylhydrazyl)을 0.005 g/100 ㎖로 99.9% 에탄올(etanol)에 희석한 후, 520 nm에서 흡광도를 1.5 nm로 보정하였다. 조건별 녹용 추출물 0.2 ㎖에 DPPH용액 0.8 ㎖를 넣고 30분간 실온에 반응시킨 후, 520 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 시료의 색 보정을 위해 시료 0.2 ㎖ 에 99.9% 에탄올 0.8 ㎖를 가하여 520 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준물질로서 L-아스코르브산(L-ascorbic acid)을 동량(v/v) 첨가하여 사용하였다. 총 항산화력은 아스코르브산(ascorbic acid)에 해당하는 항산화력(AEAC, L-ascorbic acid equivalent antioxidant capacity, mg AA eq/㎖)으로 나타내었다. 결과값 계산은 하기 수학식 1을 사용하였고, 그 결과는 하기 표 4에 나타내었다.In this experiment, the DPPH radical scavenging ability of the antler extract was analyzed by Blois et al. The DPPH solution (1,1'-diphenyl-2-picrylhydrazyl) was diluted with 0.005 g / 100 ml of 99.9% ethanol and the absorbance was corrected to 1.5 nm at 520 nm. The absorbance of the sample was measured at 520 nm and 0.8 ml of 99.9% ethanol was added to 0.2 ml of the sample to correct the color of the sample. The absorbance at 520 nm Were measured. L-ascorbic acid (v / v) was added as a standard substance. The total antioxidant capacity was expressed as ascorbic acid (AEAC, L-ascorbic acid equivalent antioxidant capacity, mg AA eq / ml). The results were calculated using the following equation (1), and the results are shown in Table 4 below.

Figure 112014001589934-pat00001
Figure 112014001589934-pat00001

ΔA : 추출물을 넣었을 때의 O.D.의 변화ΔA: Change in OD when the extract is added

ΔAaa : A.A. Std. Soln.이 추출물 대신 동량 들어갔을 때의 O.D. 변화ΔAaa: A.A. Std. Sol.O.D. when the same amount of this extract was used instead of this extract. change

Caa : A.A. Std. Soln.의 농도(mg/㎖)Caa: A.A. Std. Concentration of Soln. (Mg / ml)

[회귀 분석식 2][Regression Equation 2]

Y2= 0.063+0.029X1+0.028X2-0.013X3-0.008X3 2 Y 2 = 0.063 + 0.029 X 1 + 0.028 X 2 -0.013 X 3 -0.008 X 3 2

VariablesVariables Coded valueCoded value Uncoded valueUncoded value Predicted valuePredicted value 추출온도 (℃)Extraction temperature (캜) 0.990.99 99.899.8 0.132 mg AA eq/㎖
(0.132 mg AA eq/㎖)
0.132 mg AA eq / ml
(0.132 mg AA eq / ml)
추출시간 (hour)Extraction time (hour) 0.980.98 9.759.75 추출용매량 (fold, v/v)The amount of extracted solvent (fold, v / v) -0.98-0.98 5.255.25

실험결과, 각각의 조건에서 추출된 녹용 추출물의 DPPH 라디칼 소거능을 각 조건에 따른 3D 그래프는 도 2와 같았다. 또한, 최적 추출 조건에 대한 회귀 분석식은 상기 회귀 분석식 2와 같이 나타났으며, 이에 최적 조건은 추출온도는 99.8℃, 추출시간은 9.75시간, 추출용매량은 5.25배로 나타났다. 또한, 상기 조건의 기대값과 실제 실험값이 0.132 mg ascorbic acid eq/㎖로 동일하게 나타났다(표 4).
As a result, the DPPH radical scavenging ability of the antler extract extracted under the respective conditions was shown in FIG. 2 as a 3D graph according to each condition. The regression equation for the optimal extraction condition was as shown in the regression equation 2, and the optimum conditions were 99.8 ° C for the extraction temperature, 9.75 hours for the extraction time, and 5.25 times for the extraction solvent. In addition, the expected value of the above condition and the actual experimental value were the same as 0.132 mg ascorbic acid eq / ml (Table 4).

실험예Experimental Example 1-3: 녹용 추출물의  1-3: Antler Extract ABTSABTS 라디칼Radical 소거능에On the offensive 대한 추출 조건 최적화 Optimization of extraction conditions

본 실험예에서는 녹용 추출물의 ABTS 라디칼 소거능 활성을 측정하기 위하여 Kim 등의 방법에 의하여 ABTS 케이션 디컬러리제이션 어세이(cation decolorization assay)를 수행하였다.In this experimental example, the ABTS radical decolorization assay was performed by Kim et al. To measure the ABTS radical scavenging activity of the antler extract.

ABTS(2,2’-Azino-bis-(3-ethylbenzo thiazoline-6-sulfonic acid)) 7.4mM과 포타슘 퍼설페이트(Potassium persulphate) 2.6mM을 1:1로 혼합한 뒤, 암소에 방치하여 양이온 형성하였다. 상기 용액을 735 nm에서 흡광도 값이 1.5 nm가 되도록 증류수로 희석하였다. 그 후, 조건별 녹용 추출물 50 ㎕를 희석된 ABTS 용액 1 ㎖에 가하여 60분간 반응시키고 735 nm에서 흡광도를 측정하였다. 또한, 시료의 색 보정을 위해 시료 50 ㎕에 증류수 1 ㎖를 가하여 735 nm에서 흡광도를 측정하였다. 또한, 표준물질로서 L-아스코르브산(L-ascorbic acid)을 동량(v/v) 첨가하여 사용하였고, 총 항산화력은 아스코르브산(ascorbic acid)에 해당하는 항산화력(AEAC, L-ascorbic acid equivalent antioxidant capacity, mg AA eq/㎖)으로 나타내었다. 결과값의 계산은 상기 수학식 1을 사용하였고, 그 결과는 하기 표 5에 나타내었다.After mixing 7.4 mM of ABTS (2,2'-Azino-bis- (3-ethylbenzo thiazoline-6-sulfonic acid)) and 2.6 mM of potassium persulphate in a ratio of 1: 1, Respectively. The solution was diluted with distilled water to an absorbance value of 1.5 nm at 735 nm. Then, 50 μl of the perennial antler extract was added to 1 ml of the diluted ABTS solution, reacted for 60 minutes, and absorbance was measured at 735 nm. In order to correct the color of the sample, 1 ml of distilled water was added to 50 μl of the sample, and the absorbance was measured at 735 nm. L-ascorbic acid (v / v) was added as a standard substance and the total antioxidant activity was determined by measuring the antioxidant capacity (AEAC, L-ascorbic acid equivalent) of ascorbic acid antioxidant capacity, mg AA eq / ml). The calculation of the resultant value was performed using Equation 1 above, and the results are shown in Table 5 below.

[회귀 분석식 3][Regression Equation 3]

Y3= 0.119+0.035X1+0.019X2-0.031X3+0.005X2X3-0.010X1 2+0.008X3 2 Y 3 = 0.119 + 0.035X 1 + 0.019X 2 -0.031X 3 + 0.005X 2 X 3 -0.010X 1 2 + 0.008X 3 2

VariablesVariables Coded valueCoded value Uncoded valueUncoded value Predicted valuePredicted value 추출온도 (℃)Extraction temperature (캜) 0.990.99 99.899.8 0.195 mg AA eq/㎖
(0.203 mg AA eq/㎖)
0.195 mg AA eq / ml
(0.203 mg AA eq / ml)
추출시간 (hour)Extraction time (hour) 0.990.99 9.889.88 추출용매량 (fold, v/v)The amount of extracted solvent (fold, v / v) -0.97-0.97 5.385.38

실험결과, 각각의 조건에서 추출된 녹용 추출물의 ABTS 라디칼 소거능을 각 조건에 따른 3D로 그래프는 도 3과 같았다. 또한, 최적 추출 조건에 대한 회귀 분석식은 상기 회귀 분석식 3과 같이 나타났으며, 이에 최적 조건은 추출온도는 99.8℃, 추출시간은 9.88시간, 추출용매량은 5.38배로 나타났다. 또한, 이 조건에서 기대값으로 0.195 mg ascorbic acid eq/㎖를 나타내었는데, 실제 실험값에서는 0.203 mg ascorbic acid eq/㎖으로 좀 더 높게 나타났다(표 5).
As a result, the ABTS radical scavenging ability of the antler extract extracted under the respective conditions was shown in FIG. 3 in 3D according to each condition. Regression analysis for optimum extraction condition was as shown in the regression equation 3, and the optimum conditions were 99.8 ° C for extraction temperature, 9.88 hours for extraction time, and 5.38 times for extraction solvent. The expected value of 0.195 mg ascorbic acid eq / ㎖ was found under this condition, but it was 0.203 mg ascorbic acid eq / ㎖ in actual experimental value (Table 5).

실시예Example 1: 대추 첨가 녹용 추출물 제조 1: Preparation of jujube antler extract

녹용 시료 50 g에 녹용시료의 5배의 증류수를 가한 후, 총 무게의 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%의 보은대추를 첨가한 후, 항온 진탕 수조(shaking water bath, BS-21, JEIO TECH. CO., LTD., SEOUL, KOREA)에서 100℃로 10시간 동안 추출하여 각 농도별 대추 첨가 녹용 추출물을 제조하였다.
5% of the total weight of the antler juice was added to 50 g of the antler sample, and then 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6% (shaking water bath, BS-21, JEIO TECH CO., LTD., SEOUL, KOREA) at 100 ° C for 10 hours. .

실험예Experimental Example 2: 대추 첨가 녹용 추출물의 항산화 능력 분석 2: Antioxidant capacity analysis of jujube antler extract

본 실험예에서는 상기 실시예 1에서 제조된 농도별 대추 첨가 녹용 추출물의 항산화 효과를 확인하고자 하였다.In this Experimental Example, the antioxidant effect of the jujube-containing antler extract according to the concentration prepared in Example 1 was examined.

실험방법은 상기 실험예 1-1 내지 실험예 1-3과 동일한 방법을 이용하여 총 폴리페놀 함량, DPPH 라디칼 소거능 및 ABTS 라디칼 소거능을 분석하였다.The total polyphenol content, DPPH radical scavenging activity and ABTS radical scavenging activity were analyzed by the same method as Experimental Examples 1-1 to 1-3.

총 폴리페놀 함량 측정 결과, 대추 첨가량이 증가할수록 대추 첨가 녹용 추출물의 총 폴리페놀 함량이 증가하는 것으로 나타났다. 대추 첨가 비율이 5%까지 증가할수록 총 폴리페놀 함량은 유의적으로 증가하였으나, 이후 7%까지는 총 폴리페놀 함량의 유의적인 차이가 없었다. 또한, 녹용 추출물의 총 폴리페놀 함량이 0.259 mg/㎖이었음에 반해, 7% 대추 첨가 녹용 추출물의 총 폴리페놀 함량은 0.632 mg/㎖를 나타내었다. 상기 결과로부터, 대추 첨가량이 증가할수록 녹용 추출물의 총 폴리페놀 함량이 증가함을 확인할 수 있었다(도 4).The total polyphenol contents of jujubes of jujubes were increased with increasing of jujubes. Total polyphenol content was increased significantly as the proportion of jujube was increased up to 5%, but there was no significant difference in total polyphenol content until 7%. In addition, the total polyphenol content of the antler extract was 0.259 mg / ml, while the total polyphenol content of the 7% jujube antler extract was 0.632 mg / ml. From the above results, it was confirmed that the total polyphenol content of the antler extract increases as the jujuba content increases (FIG. 4).

DPPH 라디칼 소거능 측정 결과, 대추 첨가량이 증가할수록 대추 첨가 녹용 추출물의 DPPH 라디칼 소거능이 증가하는 것으로 나타났다. 대추 첨가 비율이 7%까지 증가할수록 DPPH 라디칼 소거능은 유의적으로 증가하였다. 또한, 녹용 추출물의 DPPH 라디칼 소거능이 0.132 mg AA eq/㎖이었음에 반해, 7% 대추 첨가 녹용 추출물의 DPPH 라디칼 소거능은 0.302 mg AA eq/㎖를 나타내었다. 상기 결과로부터 대추 첨가량이 증가할수록 녹용 추출물의 DPPH 라디칼 소거능이 증가함을 확인할 수 있었다(도 5).As a result of DPPH radical scavenging activity, DPPH radical scavenging activity of jujube extract was increased with increasing jujube content. The DPPH radical scavenging activity was significantly increased as the proportion of jujube was increased to 7%. In addition, DPPH radical scavenging activity of the antler extract was 0.132 mg AA eq / ㎖, whereas DPPH radical scavenging activity of 7% jujube extract was 0.302 mg AA eq / ㎖. From the above results, it was confirmed that the DPPH radical scavenging ability of the antler extract was increased as the jujuba content was increased (FIG. 5).

ABTS 라디칼 소거능 측정 결과, 대추 첨가량이 증가할수록 대추 첨가 녹용 추출물의 ABTS 라디칼 소거능이 증가하는 것으로 나타났다. 대추 첨가 비율이 7%까지 증가할수록 ABTS 라디칼 소거능은 유의적으로 증가하였다. 또한, 녹용 추출물의 ABTS 라디칼 소거능은 0.203 mg AA eq/㎖이었음에 반해, 7% 대추 첨가 녹용 추출물의 ABTS 라디칼 소거능은 0.277 mg AA eq/㎖를 나타내었다. 상기 결과로부터, 대추 첨가량이 증가할수록 녹용 추출물의 ABTS 라디칼 소거능이 증가함을 확인할 수 있었다(도 6).
The results of ABTS radical scavenging test showed that the ABTS radical scavenging ability of jujube antler extract increased with increasing jujube content. The ABTS radical scavenging activity was significantly increased as the percentage of jujube increased to 7%. In addition, the ABTS radical scavenging activity of the antler extract was 0.203 mg AA eq / ㎖, whereas that of the 7% jujube - containing antler extract was 0.277 mg AA eq / ㎖. From the above results, it was confirmed that the ABTS radical scavenging ability of the antler extract was increased as the jujube content was increased (FIG. 6).

실험예Experimental Example 3: 대추 첨가 녹용 추출물의 당 분석 3: Sugar analysis of jujube extract

본 실험예에서는 대추 첨가량에 따른 대추 첨가 녹용 추출물의 당성분 변화를 분석하고자 하였다.In this experiment, we tried to analyze the change of sugar content of jujube antler extract according to the amount of jujube.

대추 첨가 녹용 추출물의 당 분석은 TLC(thin layer chromatography)를 이용하여 분석하였다. 실리카겔 TLC 플레이트(Silica gel TLC plate, 20×10 cm, Whatman) 하단에서부터 1.5 cm 위에 스탠다드{1%의 프룩토스(fructose), 글루코스(glucose), 갈락토스(galactose), 수크로스(sucrose), 말토스(maltose)}와 1~6% 대추 첨가 녹용 추출물을 각각 1 ㎕씩 찍어 아세톤트라일:물(85:15-v/v) 전개용매에서 3회 전개시킨 후, 발색시약{0.5% 알파-나프탈(α-naphtal), 5% H2SO4 in 에탄올 솔루션)을 이용하여 발색시켜 추출물 중의 당을 정성 분석하였다.The sugar content of jujube extract was analyzed by thin layer chromatography (TLC). (1% fructose, glucose, galactose, sucrose, maltose) on a silica gel TLC plate (20 x 10 cm, Whatman) (0.5% alpha-naphthol) and 1 ~ 6% jujube extracts (1%) were prepared and diluted three times in acetone: water (85: Ethanol solution of? -Naphthal, 5% H 2 SO 4 in) to qualitatively analyze the sugar in the extract.

실험결과, 대추 첨가 녹용 추출물 모두 프룩토스(fructose), 갈락토스(glucose) 및 수크로스(sucrose)를 함유하는 것으로 나타났다. 또한, 대추 첨가 비율이 높아짐에 따라 프룩토스(fructose), 갈락토스(glucose) 및 수크로스(sucrose)의 함량이 증가하는 것을 알 수 있었다(도 7).
Experimental results showed that all of the jujube antler extracts contained fructose, galactose and sucrose. In addition, the contents of fructose, galactose and sucrose were increased as the proportion of jujube increased (Fig. 7).

실험예Experimental Example 4: 대추 첨가 녹용 추출물의  4: Jujube extract of jujube pHpH 및 산도 측정 And pH measurement

본 실험예에서는 대추 첨가량에 따른 대추 첨가 녹용 추출물의 pH 및 산도를 측정하고자 하였다.In this experiment, the pH and acidity of the jujube extract of jujube were investigated according to the amount of jujube.

대추 첨가 녹용 추출물의 pH측정은 pH 미터(DOCU-pH meter, Sartorius, USA)를 pH 버퍼(pH4, pH7, pH10)로 pH 보정을 한 후, 농도별 대추 첨가 녹용 추출물 10 ㎖를 채취하여 상온(25℃)에서 측정하였다. 또한, 산도는 식품공전에 기재된 실험방법을 이용하여 실험하였다.The pH value of the jujube extract was measured by pH meter (DOCU-pH meter, Sartorius, USA) with pH buffer (pH4, pH7, pH10) and 10 ml of jujube extract was taken at room temperature 25 < 0 > C). In addition, the acidity was tested using the experimental method described in the Food Code.

대추 첨가 녹용 추출물의 pH 측정 결과, 녹용 추출물은 pH 7.63으로 중성에 가까웠으나, 대추가 7% 첨가된 대추 첨가 녹용 추출물은 pH 5.16을 나타냈다. 상기 결과로부터 대추 첨가 비율이 증가할수록 대추 첨가 녹용 추출물의 pH는 유의적으로 낮아짐을 확인할 수 있었다(도 8). The pH value of the antler extract was similar to that of the antler extract at pH 7.63, but the antler juice containing 7% of jujube showed a pH of 5.16. From the above results, it was confirmed that the pH of the jujube extract of jujubes with jujube was significantly lower as the proportion of jujube was increased (Fig. 8).

또한, 대추 첨가 녹용 추출물의 산도 측정 결과, 녹용 추출물의 산도는 0.04%를 나타냈고, 대추가 7% 첨가된 대추 첨가 녹용 추출의 산도는 0.31%를 나타냈다. 상기 결과로부터, 대추 첨가 비율이 증가할수록 대추 첨가 녹용 추출물의 산도는 유의적으로 높아지는 것을 확인할 수 있었다(도 9).
The acidity of the jujube extract was 0.04% and the acidity of the jujube extract containing jujube (7%) was 0.31%. From the above results, it was confirmed that the acidity of the jujube antler extract was significantly increased as the proportion of jujube was increased (FIG. 9).

실험예Experimental Example 5: 대추 첨가 녹용 추출물의 색도 측정 5: Chromaticity measurement of antler extract

본 실험예에서는 대추 첨가량에 따른 대추 첨가 녹용 추출물의 색도를 측정하고자 하였다.In this experiment, we tried to measure the color of the jujube antler extract according to the amount of jujube.

대추 첨가 녹용 추출물의 색도를 분석하기 위하여 농도별 대추 첨가 녹용 추출물 시료 10 ㎖를 채취한 후, 색도색차계(Model CR-300, Minolta, Osaka, Japan)를 사용하여, 표준 색판(L: 97.10, a: +0.17 b: +1.99)으로 보정한 후, 헌터스케일(Hunter scale)의 L(lightness), a(redness) 및 b(yellowness) 값으로 나타내었다. 또한, 색도는 Duncan’s multiple range test를 이용하여 유의성을 검정 하였다(p=0.05). 그 결과는 하기 표 6에 나타내었다.In order to analyze the chromaticity of the jujube antler extract, 10 ml of the jujube extract containing the jujube was collected and the standard plate (L: 97.10, a (redness) and b (yellowness) values of the Hunter scale after the correction was made to a: +0.17 b: +1.99). In addition, the chromaticity was tested using Duncan's multiple range test (p = 0.05). The results are shown in Table 6 below.


녹용 추출물에 첨가되는 대추 첨가량(%)The amount of jujube added to the antler extract (%)
00 1One 22 33 44 55 LL 46.38±0.08c 46.38 0.08 c 46.36±0.16c 46.36 ± 0.16 c 47.89±0.49b 47.89 + - 0.49 b 48.25±0.57b 48.25 ± 0.57 b 49.01±0.53a 49.01 ± 0.53 a 49.34±0.12a 49.34 ± 0.12 a aa 1.41±0.14a 1.41 + - 0.14 a 1.25±0.03ab 1.25 ± 0.03 ab 1.07±0.13b 1.07 + - 0.13 b 0.76±0.16c 0.76 ± 0.16 c 0.72±0.01c 0.72 ± 0.01 c 0.48±0.17d 0.48 ± 0.17 d bb 10.52±0.31a 10.52 ± 0.31 a 10.06±0.59a 10.06 ± 0.59 a 9.15±0.49b 9.15 ± 0.49 b 9.06±0.45bc 9.06 ± 0.45 bc 8.60±0.26bc 8.60 ± 0.26 bc 8.34±0.10c 8.34 + - 0.10 c

실험결과(표 6), L 값의 경우, 녹용 추출물이 46.38±0.08을 나타내었고, 대추 첨가 비율 5%의 대추 첨가 녹용 추출물의 L 값이 49.34±0.12로 가장 높게 나타나, 대추 첨가 비율이 증가할수록 명도가 유의적으로 증가하는 것을 알 수 있었다.The results of the experiment (Table 6) showed that the L-value of the antler extract was 46.38 ± 0.08, the L value of the antler extract of the jujube with the jujube content of 5% was the highest at 49.34 ± 0.12, And the brightness increased significantly.

a 값의 경우, 녹용 추출물이 1.41±0.14를 나타내었고, 대추 첨가 비율 5%의 대추 첨가 녹용 추출물의 a 값이 0.48±0.17로 가장 낮게 나타나, 대추 첨가 비율이 증가할수록 적색도가 감소하는 것을 알 수 있었다.a value of 1.00 ± 0.14 was obtained for the antler extract, and a value of the antler juice extract of 5% of the jujube was lowest at 0.48 ± 0.17, and the degree of redness decreased as the proportion of the jujube was increased there was.

b 값의 경우, 녹용 추출물이 10.52±0.31을 나타내었고, 대추 첨가 비율 5%의 대추 첨가 녹용 추출물의 b 값은 8.34±0.10으로 가장 낮게 나타나, 대추 첨가 비율이 증가할수록 황색도가 감소하는 것을 알 수 있었다.
b value showed 10.52 ± 0.31, and the b value of the jujube extract with 5% jujube content was the lowest at 8.34 ± 0.10, indicating that the yellow color decreased with increasing jujube content I could.

실험예Experimental Example 6: 대추 첨가 녹용 추출물의 관능평가 6: Sensory evaluation of antler extract

본 실험예에서는 대추 첨가량에 따른 대추 첨가 녹용 추출물의 관능평가를 하고자 하였다.In this experiment, we investigated the sensory evaluation of jujube antler extract according to the amount of jujube.

대추 첨가 녹용 추출물의 관능적 품질평가는 충북대학교 식품공학과 대학원생을 대상으로 맛(taste), 향(flavor), 색(color), 전체적인 풍미(overall)에 대하여 조건별 대추 첨가 녹용 추출물을 5점 평점법(1 : 매우 나쁘다, 2 : 나쁘다, 3 : 보통이다, 4 : 좋다, 5 : 매우 좋다)으로 평가하였다.Sensory evaluation of sensory quality of jujube jujube extracts was carried out by the graduate students of Chungbuk National University. The juvenile jujube extracts were evaluated by 5 point scale method for flavor, flavor, color, (1: very bad, 2: bad, 3: normal, 4: good, 5: very good).

flavor incense color 전체적인 풍미Overall flavor 녹용 추출물Antler extract 1.6±0.9c 1.6 ± 0.9 c 1.3±0.9f 1.3 ± 0.9 f 1.4±0.6c 1.4 ± 0.6 c 1.3±0.6c 1.3 ± 0.6 c 대추 1% 첨가 녹용 추출물Jujube extract with 1% jujube 1.6±0.9c 1.6 ± 0.9 c 1.4±0.8ef 1.4 ± 0.8 ef 1.5±0.9c 1.5 ± 0.9 c 1.4±0.7c 1.4 ± 0.7 c 대추 2% 첨가 녹용 추출물Jujube extract with 2% jujube 2.4±1.0b 2.4 ± 1.0 b 1.9±0.9de 1.9 ± 0.9 de 2.8±1.0b 2.8 ± 1.0 b 2.3±1.0b 2.3 ± 1.0 b 대추 3% 첨가 녹용 추출물Jujube extract with 3% jujube 2.8±1.0ab 2.8 ± 1.0 ab 2.3±1.0cd 2.3 ± 1.0 cd 2.9±1.1ab 2.9 ± 1.1 ab 2.8±0.9a 2.8 ± 0.9 a 대추 4% 첨가 녹용 추출물Jujube extract with 4% jujube 3.1±1.1a 3.1 ± 1.1 a 2.7±1.1bc 2.7 ± 1.1 bc 3.1±1.1ab 3.1 ± 1.1 ab 3.2±1.0a 3.2 ± 1.0 a 대추 5% 첨가 녹용 추출물5% of jujube-containing antler extract 2.9±0.9a 2.9 ± 0.9 a 2.9±1.2b 2.9 ± 1.2 b 3.4±1.2a 3.4 ± 1.2 a 3.3±1.1a 3.3 ± 1.1 a 대추 6% 첨가 녹용 추출물Jujube extract with 6% jujube 3.1±0.4a 3.1 ± 0.4 a 3.1±1.1a 3.1 ± 1.1 a 3.2±1.0ab 3.2 ± 1.0 ab 3.3±1.3a 3.3 ± 1.3 a

평가결과, 녹용 추출물은 맛, 향, 색, 전체적인 기호도 모두 가장 낮은 점수를 받았으며, 대추 첨가 비율이 증가할수록 대추 첨가 녹용 추출물의 맛, 향, 색, 전체적인 풍미 점수가 증가하였다. 대추 첨가 비율 6%에서 맛, 향, 색, 전체적인 풍미 모두 가장 높은 점수를 받았으나, 녹용의 향과 맛이 느껴지지 않는 것으로 나타났다. 상기 결과로부터 대추가 5% 첨가될 때, 가장 우수한 관능평가를 나타냄을 확인할 수 있었다(표 7).
As a result, the taste, flavor, color and overall flavor score of the jujube antler extract increased as the proportion of jujube was increased. The highest score of taste, aroma, color, and overall flavor was obtained at 6% of jujube, but the flavor and taste of antler was not felt. From the above results, it was confirmed that when 5% of jujube was added, the highest sensory evaluation was shown (Table 7).

실시예Example 2: 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물 제조 2: Manufacture of antler extract with lactic acid fermented jujube

멸균된 MRS 브로스(broth)에서 생장시킨 하기 표 8의 5종 유산균 균주를 멸균식염수로 균 현탁액을 만들어 660 nm에서 광학 밀도(optical density) 값을 0.4가 되게 한 시험균액 1 ㎖를 상기 실시예 1에서 제조한 대추 5% 첨가 대추 첨가 녹용 추출물 400 ㎖에 각각 가하여 37℃에서 24시간 동안 배양하여 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물을 제조하였다.1 ml of the test strain in which the optical density of the 5 kinds of the lactic acid bacteria strains in Table 8 below grown in the sterilized MRS broth was made into sterile saline at 660 nm to 0.4, Were added to each of 400 ml of the jujube-containing antler juice (5%), and the mixture was incubated at 37 ° C for 24 hours to prepare a fermented jujube fermented jujube extract.

균주Strain 기탁기관Depositor 기탁번호Accession number 락토바실러스 아시도필루스
(Lactobacillus acidophilus)
Lactobacillus acidophilus
( Lactobacillus acidophilus )
KCTCKCTC 31643164
락토바실러스 브레비스
(Lactobacillus brevis)
Lactobacillus brevis
( Lactobacillus brevis )
KCTCKCTC 34983498
락토바실러스 락티스
(Lactococcus lactis)
Lactobacillus lactis
( Lactococcus lactis )
KCTCKCTC 39263926
스트렙토코커스 서머필러스
(Streptococcus thermophilus)
Streptococcus thermophilus
( Streptococcus thermophilus )
KCTCKCTC 36583658
류코노스톡 메센테로이데스
(Leuconostoc mesenteriodes)
Ryukono Stock Methenseeroides
( Leuconostoc mesenteriodes )
KCTCKCTC 37333733

실험예Experimental Example 7: 유산균 균주 선정 7: Selection of lactic acid bacteria strain

본 실험예에서는 상기 실시예 2에서 제조된 각각의 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물의 시간에 따른 균주 생장률을 확인하였다.In this Experimental Example, the growth rate of the antler extract of fermented jujube fermented jujube prepared in Example 2 over time was confirmed.

균의 증식 정도는 분광광도계(spectrophotometer, UV-1650PC, Shimadzu, Kyoto, Japan)를 이용하여 660 nm에서 4시간 간격으로 24시간 동안 O.D.값을 측정하면서 관찰하였다.The degree of proliferation of the bacteria was measured using a spectrophotometer (UV-1650PC, Shimadzu, Kyoto, Japan) at an interval of 4 hours at 660 nm for 24 hours while measuring the OD value.

실험결과, 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)는 4시간 이후부터 생균수가 급격하게 증가하였고, 이후 24시간까지 생균수의 유의적 차이를 보이지 않았다. 또한, 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)는 8시간부터 16시간까지 생균수가 서서히 증가하였고, 이후 24시간까지 생균수의 유의적 차이를 보이지 않았다. 또한, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)는 8시간부터 20시간까지 생균수가 급격히 증가하였고, 이후 24시간까지 생균수의 유의적 차이를 나타내지 않았다. 락토바실러스 아시도필루스(Lactobacillus acidophilus)와 바실루스 브레비스(Lactobacillus Brevis)는 8시간까지 약간 증가하는 곡선을 보였으나, 그 후 생장곡선이 증가하지 않았다. 상기 결과로부터 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus) 및 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)가 대추 첨가 녹용 추출물의 유산균 발효 균주로 적합하다는 것을 알 수 있었다(도 10).
As a result, Lactococcus lactis showed a rapid increase in viable cell counts after 4 hours, and there was no significant difference in viable cell counts up to 24 hours. Also, Streptococcus thermophilus gradually increased the number of viable cells from 8 hours to 16 hours, but did not show any significant difference in viable cell count until 24 hours. Also, Leuconostoc mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides ) increased rapidly from 8 hrs to 20 hrs, but did not show any significant difference in viable counts until 24 hrs. Lactobacillus < RTI ID = 0.0 > acidophilus) and Bacillus brevis (Lactobacillus Brevis) has not increased after a slight increase and showed a curve, the growth curve for up to 8 hours. From the above results, Lactococcus lactis lactis), Streptococcus's Summer filler (Streptococcus thermophilus and Leuconostoc mesenteroides were found to be suitable as lactic acid fermentation strains of the antler juice-containing antler extract (Fig. 10).

실험예Experimental Example 8: 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물의 항산화 능력 분석 8: Antioxidant capacity analysis of antler extract of lactic acid fermented jujube

본 실험예에서는 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물의 총 폴리페놀 함량, DPPH 라디칼 소거능, ABTS 라디칼 소거능을 측정하여 항산화 능력을 분석하고자 하였다. In this experiment, antioxidative capacity of the fermented jujube fermented jujube extract was investigated by measuring total polyphenol content, DPPH radical scavenging activity and ABTS radical scavenging activity.

실험방법은 상기 실험예 1-1 내지 1-3과 동일하였으며, 상기 실시예 2에서 제조한 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus), 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)로 각각 발효시킨 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물을 시료로 하였다. 또한, 하기에는 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)로 발효시킨 대추 첨가 녹용 추출물을 '락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)'로, 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)로 발효시킨 대추 첨가 녹용 추출물을 '스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)'로, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)로 발효시킨 대추 첨가 녹용 추출물을 '류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)'로 지칭하였다. Experimental method was the same as the Experimental Example 1-1 to 1-3, Example 2, a Lactococcus lactis (Lactococcus lactis) prepared in Streptococcus Summer pillar's (Streptococcus thermophilus , and Leuconostoc mesenteroides , respectively, were used as samples. In addition, the preferred way to Lactococcus lactis (Lactococcus lactis) was added to the jujube antler extract, fermented with Lactococcus lactis (Lactococcus lactis), to, Streptococcus Summer pillar's (Streptococcus thermophilus) that the addition of jujube antler extract fermented with "Streptococcus Summer pillar's (Streptococcus thermophilus) ", the flow Pocono stock mesen teroyi des (Leuconostoc mesenteroides) was added jujube antler extract fermented with" flow Pocono stock mesen teroyi des (Leuconostoc mesenteroides ) '.

총 폴리페놀 함량의 실험 결과, 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)의 경우 8시간부터 16시간까지 폴리페놀 함량이 증가하였고, 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)는 8시간부터 20시간까지 폴리페놀 함량이 증가하였으며, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)는 12시간부터 20시간까지 폴리페놀 함량이 증가하였다. 유산균으로 발효 전 대추 첨가 녹용 추출물의 폴리페놀 함량이 0.585 mg/㎖ 였음에 반해, 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)는 0.790 mg/㎖, 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)는 0.779 mg/㎖, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)는 0.829 mg/㎖로 모두 폴리페놀 함량이 증가하였음을 확인할 수 있었다. 특히, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)가 가장 높은 수준으로 폴리페놀 함량이 증가하였음을 알 수 있었다(도 11).The experimental results of the total polyphenol content, Lactococcus lactis were the polyphenol content is increased from 8 hours to 16 hours for (Lactococcus lactis), Streptococcus's Summer filler (Streptococcus thermophilus ) increased polyphenol contents from 8 hours to 20 hours, and Leuconostoc mesenteroides ) increased polyphenol contents from 12 hours to 20 hours. Lactococcus lactis was found to have a polyphenol content of 0.585 mg / ml in the jujube extract before fermentation, 0.790 mg / ml , Streptococcus thermophilus ) 0.779 mg / ml, leuconostoc mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides ) And 0.829 mg / ㎖, respectively. In particular, Leuconostoc mesenteroides showed the highest level of polyphenol content (FIG. 11).

DPPH 라디칼 소거능 실험 결과, 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)는 4시간부터 8시간까지 자유 라디칼 소거능이 증가하였고, 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)는 4시간부터 16시간까지 자유 라디칼 소거능이 증가하였으며, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)는 4시간부터 20시간까지 자유 라디칼 소거능이 증가하였다. 발효 전 대추 첨가 녹용 추출물의 자유 라디칼 소거능이 0.250 mg AA eq mg/㎖ 였음에 반해, 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)는 0.272 AA eq mg/㎖, 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus) 0.269 AA eq mg/㎖, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)는 0.277 AA eq mg/㎖로 모두 자유 라디칼 소거능이 증가하였음을 확인할 수 있었다. 특히, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)가 가장 높은 수준으로 자유 라디칼 소거능이 증가하였음을 알 수 있었다(도 12).DPPH radical scavenging test results, Lactococcus lactis (Lactococcus lactis) were free-radical scavenging activity increased from 4 hours to 8 hours, Streptococcus's Summer filler (Streptococcus Thermophilus ) increased free radical scavenging ability from 4 hours to 16 hours, and Leuconostoc mesenteroides ) increased free radical scavenging ability from 4 hours to 20 hours. The free radical scavenging activity of the jujube extract before fermentation was 0.250 mg AA eq mg / ml, while that of Lactococcus lactis lactis ) 0.272 AA eq mg / ml , Streptococcus thermophilus ) 0.269 AA eq mg / ml, Leuconostoc mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides ) 0.277 AA eq mg / ㎖, indicating that free radical scavenging activity was increased. In particular, Leuconostoc mesenteroides showed the highest level of free radical scavenging activity (Fig. 12).

ABTS 라디칼 소거능의 실험 결과, 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)는 4시간부터 24시간까지 자유 라디칼 소거능이 증가하였고, 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)는 4시간부터 16시간까지 자유 라디칼 소거능이 증가하였으며. 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)는 4시간부터 24시간까지 자유 라디칼 소거능이 증가하였다. 유산균으로 발효하기 전 대추 첨가 녹용 추출물의 자유 라디칼 소거능은 0.260 mg AA eq mg/㎖ 였음에 반해, 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)는 0.281 AA eq mg/㎖, 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)는 0.296 AA eq mg/㎖, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)는 0.316 AA eq mg/㎖로 모두 자유 라디칼 소거능이 증가하였음을 확인할 수 있었다. 특히, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)가 가장 높은 수준으로 자유 라디칼 소거능이 증가하였음을 알 수 있었다(도 13).
The experimental results of the ABTS radical scavenging activity, Lactococcus lactis (Lactococcus lactis) were free-radical scavenging activity increased from 4 hours to 24 hours, Streptococcus's Summer filler (Streptococcus Thermophilus ) increased free radical scavenging ability from 4 hours to 16 hours. Leuconostoc mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides ) increased free radical scavenging ability from 4 hours to 24 hours. The free radical scavenging activity of the jujube extract was 0.260 mg AA eq mg / ㎖, while Lactococcus lactis 0.281 AA eq mg / ml , Streptococcus thermophilus ) 0.296 AA eq mg / ml, Leuconostoc mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides ) 0.316 AA eq mg / ml all Free radical scavenging ability was increased. In particular, leuconostoc mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides ) showed the highest level of free radical scavenging activity (FIG. 13).

실험예Experimental Example 9: 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물의 당 분석 9: Sugar analysis of antler extract added with lactic acid fermented jujube

본 실험예에서는 각 균주별 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물의 당을 분석하고자 하였다. In this experiment, the sugar content of the fermented jujube fermented antler extract of each strain was analyzed.

실험방법은 상기 실험예 3과 동일하였으며, 상기 실시예 2에서 제조된 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus), 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)로 각각 발효시킨 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물을 시료로 하였다.The experimental method was the same as that of Experimental Example 3, and the Lactococcus lactis prepared in Example 2 lactis ), Streptococcus thermophilus , Leuconostoc mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides ) were used as samples.

실험결과, 각각의 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물 모두 프룩토스(fructose), 글루코스(glucose) 및 스쿠로스(sucrose)를 함유하는 것으로 나타났다. 초기 0시간 이후부터 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus), 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 모두 24시간까지 프룩토스(fructose)와 스쿠로스(sucrose)의 함량은 유의적인 변화가 없었고, 글루코스(glucose)의 함량이 유의적으로 감소하는 것으로 나타났다. 상기 결과로부터 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus), 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)가 글루코스(glucose)를 이용하여, 대추 첨가 녹용 추출물에서 생육하였음을 확인할 수 있었다(도 14).
Experimental results showed that each of the fermented jujube fermented jujube extracts contained fructose, glucose and sucrose. Since the initial 0 hour, Lactococcus lactis ), Streptococcus thermophilus ), The contents of fructose and sucrose were not significantly changed in all of the Leuconostoc mesenteroides until 24 hours, and the content of glucose was significantly decreased in the leuconostoc mesenteroides . From the above results, Lactococcus lactis , Streptococcus thermophilus ), It was confirmed that Leuconostoc mesenteroides was grown in the antler juice-containing antler extract using glucose (Fig. 14).

실험예Experimental Example 10: 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물의  10: Fermented lactic acid bacteria jujube extract containing jujube pHpH 및 산도 측정 And pH measurement

본 실험예에서는 각 균주별 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물의 pH 및 산도를 측정하고자 하였다. In this experiment, the pH and acidity of the antler extract of fermented jujube Respectively.

실험방법은 상기 실험예 4와 동일하였으며, 상기 실시예 2에서 제조된 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus), 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)로 각각 발효시킨 유산균 대추 첨가 녹용 추출물을 시료로 하였다. 또한, 산도는 식품공전에 기재된 실험방법을 이용하여 실험하였다.The experimental method was the same as that of Experimental Example 4, and the Lactococcus lactis prepared in Example 2 lactis ), Streptococcus thermophilus , Leuconostoc mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides ) were used as samples. In addition, the acidity was tested using the experimental method described in the Food Code.

pH 측정 결과, 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)는 초기부터 24시간까지 pH가 점차 감소하였고, 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)는 12시간까지 pH의 유의적인 차이를 보이지 않았으나, 이후 24시간까지 pH가 유의적으로 감소하였으며, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)는 초기부터 12시간까지 pH가 감소하였으나, 이후 pH의 유의적인 변화는 없었다. 유산균으로 발효 전 대추 첨가 녹용 추출물은 pH 6.01 이였음에 반해, 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)는 pH 4.92, 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)는 pH 5.32, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)는 pH 3.99로 pH가 낮아졌음을 확인할 수 있었다. 특히, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)가 pH 3.99로 가장 낮은 pH를 나타내었다(도 15). As a result of pH measurement, the pH of Lactococcus lactis gradually decreased until 24 hours from the beginning, and Streptococcus thermophilus showed no significant difference in pH until 12 hours. The pH was significantly decreased. The pH of Leuconostoc mesenteroides decreased from the beginning to 12 hours, but there was no significant change in pH afterwards. Lactococcus lactis was found to have a pH of 6.01, while the jujube extract with jujube before fermentation had a pH of 6.01 pH 4.92 , Streptococcus thermophilus ) pH 5.32, Leuconostoc mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides ) It was confirmed that the pH was lowered to pH 3.99. In particular, leuconostoc mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides ) showed the lowest pH at pH 3.99 (Fig. 15).

산도 측정 결과, 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)는 초기부터 24시간까지 산도가 증가하였고, 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus) 4시간부터 24시간까지 산도가 증가하였으며, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)는 8시간부터 24시간까지 산도가 증가하였다. 유산균으로 발효 전 대추 첨가 녹용 추출물은 산도는 0.22% 였음에 반해, 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)는 0.59%, 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)는 0.33%, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)는 0.43%로 모두 산도가 증가하였음을 확인할 수 있었다. 특히, 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)가 0.59%로 가장 높은 산도를 나타내었다(도 16).
PH measurement, Lactococcus lactis (Lactococcus lactis) were increased up to 24 hours from the initial acidity, Streptococcus's Summer filler (Streptococcus thermophilus ) increased from 4 hours to 24 hours, and Leuconostoc mesenteroides ) increased from 8 hours to 24 hours. Lactococcus lactis was found to have an acidity of 0.22%, while the jujube extract containing jujube before fermentation was 0.22% 0.59% , Streptococcus thermophilus 0.33%, Leuconostoc mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides ) And 0.43%, respectively. In particular, Lactococcus lactis showed the highest acidity at 0.59% (Fig. 16).

실험예Experimental Example 11: 11: 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물의 색도 분석Analysis of color of antler extract added with lactic acid fermented jujube

본 실험예에서는 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물의 색도 분석을 하고자 하였다.In this experiment, we tried to analyze the color of the antler extract of lactic acid fermented jujube.

실험방법은 상기 실험예 5와 동일하였으며, 상기 실시예 2에서 제조된 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus), 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)로 각각 발효시킨 유산균 대추 첨가 녹용 추출물을 시료로 하였다. 그 결과는 하기 표 9에 나타내었다.The experimental method was the same as in Experimental Example 5, except that Lactococcus lactis prepared in Example 2, Streptococcus thermophilus , Leuconostoc mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides ) were used as samples. The results are shown in Table 9 below.

Figure 112014001589934-pat00002
Figure 112014001589934-pat00002

실험결과, L 값의 경우, 유산균으로 발효 전 대추 첨가 녹용추출물은 49.34±0.12, 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)는 47.36±0.06, 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)는 47.71±0.07, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)는 46.23±0.54를 나타내어, 유산균 발효가 진행될수록 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물의 명도가 감소함을 확인할 수 있었다. As a result of the experiment, it was found that the L - value was 49.34 ± 0.12 for the jujube extract and the Lactococcus lactis for the jujube fermented before fermentation 47.36 + 0.06 , Streptococcus thermophilus 47.71 + 0.07, Leuconostoc mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides ) 46.23 ± 0.54. As the lactic acid fermentation progressed, the brightness of the fermented jujube fermented jujube extract decreased.

a 값의 경우, 유산균으로 발효 전 대추 첨가 녹용추출물은 0.48±0.17, 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)는 0.64 ±0.07, 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)는 0.60±0.09, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)는 1.04±0.18을 나타내어 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)와 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)는 유산균 발효가 진행될수록 적색이 감소하고, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)는 적색이 증가함을 확인할 수 있었다.a value of 0.48 ± 0.17, and Lactococcus lactis in the jujube extract before fermentation, 0.64 ± 0.07, Streptococcus thermophilus ) was 0.60 ± 0.09, Leuconostoc mesenteroides ) showed 1.04 ± 0.18, indicating that Lactococcus lactis and Streptococcus thermophilus has a decreased red color as the fermentation of lactic acid bacteria progresses, and Leuconostoc thermophilus mesenteroides ) showed an increase in red color.

b 값의 경우, 유산균으로 발효 전 대추첨가 녹용추출물은 8.34±1.0, 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)는 8.66±0.34, 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)는 9.26±0.31, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)는 8.87±0.31을 나타내어 유산균 발효가 진행될수록 유산균 발효 대추첨가 녹용추출물의 황색이 증가함을 확인할 수 있었다.
b value, the jujube extract with jujube before fermentation was 8.34 ± 1.0, Lactococcus lactis lactis ) 8.66 ± 0.34 , Streptococcus thermophilus ) 9.26 + -0.31, Leuconostoc mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides ) 8.87 ± 0.31. As the fermentation of lactic acid bacteria progressed, the yellow color of the fermented jujube fermented jujube extract increased.

실험예Experimental Example 12: 12: 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물의 관능평가Sensory evaluation of antler extract added with lactic acid fermented jujube

본 실험예에서는 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물의 관능평가를 하고자 하였다.In this experiment, we tried to evaluate the sensory evaluation of the antler extract of lactic acid fermented jujube.

평가 방법은 상기 실험예 6과 동일하였고, 녹용 추출물, 대추 5% 첨가 녹용 추출물 및 상기 실시예 2에서 제조된 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus), 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides)로 각각 발효시킨 유산균 대추 첨가 녹용 추출물을 시료로 하였다. The evaluation method was the same as in Experimental Example 6, except that the antler extract, the antler extract with 5% of jujube and the lactococcus lactis prepared in Example 2 lactis ), Streptococcus thermophilus ), Leuconostoc mesenteroides ( Leuconostoc mesenteroides ) were used as samples.

flavor incense color 전체적인 풍미Overall flavor 녹용 추출물Antler extract 1.5±0.6b 1.5 ± 0.6 b 1.6±0.7f 1.6 ± 0.7 f 1.7±0.9c 1.7 ± 0.9 c 1.4±0.5b 1.4 ± 0.5 b 대추 5% 첨가 녹용 추출물5% of jujube-containing antler extract 2.6±1.1a 2.6 ± 1.1 a 2.1±0.9abc 2.1 ± 0.9 abc 2.1±1.0bc 2.1 ± 1.0 bc 2.3±1.1a 2.3 ± 1.1 a 락토코커스 락티스
(Lactococcus lactis)
Lactococcus lactis
( Lactococcus lactis )
2.1±1.1ab 2.1 ± 1.1 ab 2.3±1.1ab 2.3 ± 1.1 ab 3.2±1.0a 3.2 ± 1.0 a 2.5±1.1a 2.5 ± 1.1 a
스트렙토코커스 서머필러스
(Streptococcus thermophilus)
Streptococcus thermophilus
( Streptococcus thermophilus )
2.6±1.0a 2.6 ± 1.0 a 2.5±1.1a 2.5 ± 1.1 a 3.1±0.7a 3.1 ± 0.7 a 2.8±0.8a 2.8 ± 0.8 a
류코노스톡 메센테로이데스
(Leuconostoc mesenteroides)
Ryukono Stock Methenseeroides
( Leuconostoc mesenteroides )
2.5±1.1a 2.5 ± 1.1 a 1.8±0.7bc 1.8 ± 0.7 bc 2.7±1.0ab 2.7 ± 1.0 ab 2.5±1.9a 2.5 ± 1.9 a

평가 결과, 녹용 추출물은 맛, 향, 색, 전체적인 풍미 모두 가장 낮은 점수를 받았다. 또한, 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)가 맛, 향, 전체적인 풍미에서 가장 높은 점수를 받았고, 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)가 색에서 가장 높은 점수를 받았다. 상기 결과로부터 맛, 향, 전체적인 풍미에서 가장 높은 점수를 받은 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus)가 유산균 발효 대추 첨가 녹용 추출물의 조건에서 관능적으로 가장 적합한 것으로 나타났다(표 10).As a result, the antler extract had the lowest score in taste, flavor, color, and overall flavor. In addition, Streptococcus thermophilus The highest score in taste, flavor and overall flavor was obtained, and Lactococcus lactis received the highest score in color. From the above results, Streptococcus thermophilus , which received the highest score in taste, flavor and overall flavor, was found to be the most sensory most suitable for the fermented jujube fermented jujube extract-containing extracts (Table 10).

Claims (2)

녹용에 무게 대비 5~10배의 물을 가한 후, 이것의 무게 대비 1~7%의 대추를 첨가한 다음 90~110℃에서 9~11시간 동안 추출하는 단계 (A);
상기 단계 (A) 후, 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 스트렙토코커스 서머필러스(Streptococcus thermophilus) 또는 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 중 어느 하나의 유산균을 접종하고 35~37℃에서 20~25시간 동안 발효시키는 단계 (B);로부터 제조되는 것을 특징으로 하는 대추 및 녹용 추출물을 이용한 유산균 발효 음료의 제조방법.
(A) adding 5 to 10 times of water to the antler, adding 1 to 7% of jujube to the weight of the antler and then extracting it at 90 to 110 ° C for 9 to 11 hours;
After step (A), lactic acid bacteria of any one of Lactococcus lactis , Streptococcus thermophilus or Leuconostoc mesenteroides are inoculated and cultured at 35 to 37 ° C for 20 (B) fermenting the fermented beverage for about 25 hours. The method for producing fermented beverages of lactic acid bacteria using jujube and deer antler extracts.
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