KR101547587B1 - Producing method for anti-obesity composition using heat-treated ginseng extract and Garcinia Cambogiang and the same composition - Google Patents

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Abstract

본 발명은 열처리 인삼추출물과 가르시니아 캄보지아를 이용한 항비만 조성물 제조방법 및 이 방법으로 제조되는 항비만 조성물에 관한 것으로서, 좀 더 구체적으로는 인삼을 추출하는 공정, 인삼추출액을 감압농축하는 공정, 농축한 인삼을 pH를 조절하는 공정, pH를 조절한 인삼을 고온고압처리하는 공정; 고온고압처리한 인삼을 제당하는 공정, 제당한 인삼을 농축하여 농축액을 제조하는 공정, 인삼농축액에 가르시니아 캄보지아를 혼합하는 공정을 포함하는 열처리 인삼추출물과 가르시니아 캄보지아를 이용한 항비만 조성물 제조방법 및 이 방법으로 제조되는 항비만 조성물로 진세노사이드 Rg3의 함량은 증가시키며 간단하고 실용성에서 진보한 제조방법을 제공하고, 가르시니아 캄보지아의 부작용을 최소화한 항비만 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a method for preparing an anti-obesity composition using heat-treated ginseng extract and Garcinia cambogia, and an anti-obesity composition prepared by the method, more specifically, a process for extracting ginseng, a process for concentrating ginseng extract under reduced pressure, A process of controlling the pH of ginseng, a process of treating the ginseng with high pH and high pressure and high pressure; A method for preparing an anti-obesity composition using a heat-treated ginseng extract and a method for preparing an anti-obesity composition comprising a step of preparing a concentrated liquid by concentrating ginseng and a step of mixing a ginseng concentrate with a ginseng cambogia, The present invention relates to an anti-obesity composition which increases the content of ginsenoside Rg3 in an anti-obesity composition and provides a simple, practical and advanced production method and minimizes the side effects of Garcinia cambogia.

Description

열처리 인삼추출물과 가르시니아 캄보지아를 이용한 항비만 조성물 제조방법 및 이 방법으로 제조되는 항비만 조성물{Producing method for anti-obesity composition using heat-treated ginseng extract and Garcinia Cambogiang and the same composition}TECHNICAL FIELD The present invention relates to a method for producing an anti-obesity composition using heat-treated ginseng extract and Garcinia cambogia, and an anti-obesity composition using the same,

본 발명은 열처리 인삼추출물과 가르시니아 캄보지아를 이용한 항비만 조성물 제조방법 및 이 방법으로 제조되는 항비만 조성물에 관한 것으로서, 좀 더 구체적으로는 인삼을 추출하는 공정, 추출한 인삼을 감압농축하는 공정, 농축한 인삼을 pH를 조정하는 공정, pH를 조정한 인삼을 고온고압처리하는 공정; 고온고압처리한 인삼을 제당하는 공정, 제당한 인삼을 농축하여 농축액을 제조하는 공정, 상기 인삼농축액에 가르시니아 캄보지아를 혼합하는 공정을 포함하는 열처리 인삼추출물과 가르시니아 캄보지아를 이용한 항비만 조성물 제조방법 및 이 방법으로 제조되는 항비만 조성물로 진세노사이드 Rg3의 함량은 증가시키며 간단하고 실용적인 제조방법을 제공하고, 가르시니아 캄보지아의 부작용을 최소화한 항비만 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a method for preparing an anti-obesity composition using a heat-treated ginseng extract and a garcinia cambogia, and an anti-obesity composition prepared by the method, more specifically, a process for extracting ginseng, a process for concentrating the extracted ginseng under reduced pressure, A step of adjusting pH of ginseng, a step of treating ginseng with pH adjusted at high temperature and high pressure, A method for preparing an anti-obesity composition using a heat-treated ginseng extract comprising a step of preparing ginseng treated at high temperature and high pressure, a step of concentrating ginseng to prepare a concentrate, a step of mixing Garcinia cambogia with the ginseng concentrate, The present invention relates to an anti-obesity composition that increases the content of ginsenoside Rg3 in an anti-obesity composition produced by the method of the present invention, provides a simple and practical manufacturing method, and minimizes side effects of Garcinia cambogia.

2009년도 보건사회부 통계연보에 의하면 서양인의 50%정도가 비만환자이며 비만에 의한 사회적 손실은 14억 달러 이상으로 추정하고 있다. 또한, 2005년도 보건사회부 통계연보에 의하면 우리나라에서도 20세 이상 성인 비만 비율이 1995년도 14.8%이던 것이 2005년 31.8%로 10년 사이 2배의 증가 추세를 보이고 있다. 우리나라도 서구화된 식생활과 실내노동인구의 증가로 비만인구는 급증하여 사회적 문제로 대두되고 있으며, 국가에서는 비만인구를 30%이하로 유지하기 위해 노력하고 있다. According to the 2009 Statistical Yearbook of the Ministry of Health and Social Affairs, about 50% of Westerners are obese and the social loss due to obesity is estimated to be over $ 1.4 billion. According to the 2005 Statistical Yearbook of the Ministry of Health and Social Affairs, the obesity rate of adults over 20 years old in Korea was 14.8% in 1995 and 31.8% in 2005. In Korea, the westernized dietary habits and the increase of the indoor labor force have caused the obesity population to grow rapidly and become a social problem, and the state is trying to keep the obesity population below 30%.

비만은 고혈압, 심혈관질환, 당뇨병, 뇌졸중, 치매 등의 성인병으로 전이되기 때문에 심각한 문제로 대두되고 있다. 이와 같은 비만인구의 급증과 다이어트 인구의 급증에 따른 비만의 예방과 치료를 위한 범국가적인 정책 지원과 소비자의 관심 고조로 항비만 치료제의 시장이 주목받기 시작하였다. 따라서 많은 회사들이 항비만 치료제 개발과 상업화에 박차를 가하고 있다. Obesity is a serious problem because it is transmitted to adult diseases such as hypertension, cardiovascular disease, diabetes, stroke, and dementia. The market for anti - obesity treatment has been attracting attention due to the surge of obesity population and the increase of dieting population, and national policy support for prevention and treatment of obesity and consumer attention. Therefore, many companies are accelerating the development and commercialization of anti-obesity drugs.

상용화된 대표적인 제품으로 오르리스타트((orlistat), 시부트라민(sibutramine), 펜트민(phentermine) 등이 있다. 오르리스타트는 지방흡수억제, 시부트라민은 식욕억제, 펜트민은 향정신성의약품으로, 현재는 오르리스타트만 시판되고 있고, 다른 제품들은 심각한 부작용으로 판매가 금지되거나 주의를 요하는 상태에 있다.Orlistat, sibutramine, and phentermine are examples of commercially available products. Orrust is an inhibitor of fat absorption, sibutramine is an appetite suppressant, pentamin is a psychotropic medicine, and now Orrustat And other products are prohibited from selling due to serious side effects or are in a state requiring attention.

이러한 항비만제는 고혈압, 폐동맥, 심장질환 등의 부작용이 수반됨으로서 건강상 안정성에서 심각한 위험을 동반하는 것으로 보고되고 있다. 현재 가장 안전한 제품으로 인정되는 오르리스타트도 신장이나 췌장 등의 위장관의 부작용이 우려되는 약품으로 주의를 요하고 있다.Such anti-obesity agents have been reported to be accompanied by serious side effects such as hypertension, pulmonary artery, and heart disease, thus posing a serious risk to health stability. Orrestat, which is considered to be the safest product at present, is a drug that is concerned about side effects of the gastrointestinal tract such as the kidney or pancreas.

우리나라의 항비만 시장은 2010년 1,000억원 규모로 매년 급성장하고 있는 경향이다. 단지 2011년에는 650억 규모로 줄었는데, 이는 항비만제의 소비시장의 축소에 의한 것이 아니고, 심각한 부작용이 유발된 시부트라민의 판매금지 처분에 의한 일시적 현상으로 파악되고 있다.The Korean anti-obesity market is growing at a rapid pace in 2010, reaching W100bn. In 2011 alone, it was reduced to 65 billion, which is not a result of the contraction of the consumption market of anti-obesity drugs, but is a temporary phenomenon caused by the prohibition of sales of sibutramine, which caused serious side effects.

이러한 상황 속에서 다이어트를 원하는 다수의 소비자들이 시판되고 있는 수입용 항비만 약제에 대한 부정적인 정서를 가지면서, 안전하고 부작용이 없는 항비만물질의 요구도가 급증하고 있다. 이러한 이유로 국내외의 많은 연구자들은 안전한 항비만제의 개발을 천연생약재로부터 찾고 있으며, 이를 위해 많은 시간과 경비를 투여하고 있다. 그 중에서 녹차추출물, 운남타차, 카로틴류, 각종 허브류, 뽕잎, 보이차, 고추의 캡사이신 등의 연구가 많이 되고 있으나 실용화에는 어려움이 있다. In this situation, many consumers who want a diet have negative emotions about imported anti-obesity drugs, and the demand for anti-obesity substances that are safe and have no side effects is increasing rapidly. For this reason, many researchers at home and abroad are looking for safe antioxidants from natural herbal medicines, and they spend a lot of time and money on them. Among them, studies on green tea extract, Yunnan tea, carotene, various herbs, mulberry leaf, bocca, capsaicin of red pepper, and the like have been conducted, but they are difficult to put into practical use.

이런 중에서도 천연물로부터 개발된 감비제로 상당한 효과가 인정되고 있는 물질로는 가르시니아 캄보지아 추출물과 L-카르니틴을 들 수 있다. 이 물질들 중 가르시니아 캄보지아는 식약청이 “탄수화물이 지방으로 합성되는 것을 억제하여 체지방 감소에 도움을 줌”의 기능성을 인증한 물질이다.Among these substances, Garminia cambogia extract and L-carnitine are examples of substances that have been recognized as significant cost-effective agents developed from natural products. Of these substances, Garcia Cambogia is a substance that the KFDA has certified the functionality of "inhibiting the synthesis of carbohydrates into fat and helping to reduce body fat".

가르시니아 캄보지아 추출물은 일일섭취량에서 750∼2,800㎎으로 규정되어 있고, 심장, 신장, 간장이 좋지 않은 사람, 임산부와 수유기 여성, 성장기 어린이 등에는 부작용이 우려되므로 섭취에 주의를 요하고 있다. 또한 가르시니아 캄보지아 추출물은 개발단계의 결과와는 달리 실제 소비자들로부터 체중 감량에 대한 만족할 만한 결과가 확인되지 않고 있다.
Garcinia cambogia extracts are prescribed at 750-2,800 mg / day, and it is necessary to pay attention to ingestion because there are concerns about side effects such as heart, kidney, poor liver, pregnant women, lactating women and growing children. In addition, Garcinia cambogia extract has not been found satisfactory for weight loss from actual consumers, unlike the results from the developmental stage.

인삼의 저극성 진세노사이드는 지방세포분화를 억제하는 효능이 있는 것으로 알려져 있다. 특히 진세노사이드 Rg3는 지방세포분화를 억제하는 효능이 탁월한 것으로 알려져 있다. 진세노사이드 Rg3의 함량을 증가시키기 위해서는 구증구포에 의한 방법, 효소를 처리하는 생물전환법 등이 알려져 있다. 이러한 방법은 복잡하고 시간이 많이 걸리는 단점이 있고 실용화에 어려움이 따른다. 또한, 뿌리삼(수삼 혹은 홍삼)에 직접 고온고압을 가하여 증숙처리하는 방법이 있으나, 건조과정을 거쳐야 하는 불편함이 있으며, 건조과정에서 벤조피렌이 생성될 수 있는 위험성이 있다.
Low-polar ginsenosides of ginseng are known to have the ability to inhibit adipocyte differentiation. In particular, ginsenoside Rg3 is known to exert excellent inhibitory effects on adipocyte differentiation. In order to increase the content of ginsenoside Rg3, there are known methods such as a method using a horseshoe crab, a biotransformation method for treating an enzyme, and the like. This method is complicated and time consuming and has difficulties in practical use. In addition, there is a method in which high-temperature high-pressure is directly applied to roots ginseng (ginseng or red ginseng), but it is inconvenient to undergo a drying process and there is a risk that benzopyrene can be produced in the drying process.

따라서, 진세노사이드 Rg3의 함량을 증가시키면서 벤조피렌 생성은 억제시킬 수 있는 간편하고 실용적인 제조방법과 복용시 부작용이 없고, 체지방축적 억제력이 우수한 항비만 조성물의 개발이 필요한 실정이다.Therefore, there is a need for a simple and practical production method capable of inhibiting the production of benzopyrene while increasing the content of ginsenoside Rg3, and developing an anti-obesity composition which has no adverse effects upon administration and has an excellent ability to inhibit accumulation of body fat.

본 발명은 인삼 성분 중 진세노사이드 Rg3를 증대시키는 간편하고 실용적인 제조방법을 제공하려는 것을 목적으로 한다. It is an object of the present invention to provide a simple and practical production method for increasing ginsenoside Rg3 among ginseng components.

본 발명은 인삼에 함유되어 있는 탄수화물의 함량을 줄여서 칼로리 저감 인삼추출물 제조방법을 제공하려는 것을 목적으로 한다. It is an object of the present invention to provide a method for producing calorie-reduced ginseng extract by reducing the content of carbohydrates contained in ginseng.

또한, 본 발명은 감비(減肥) 효과는 우수하고, 부작용은 최소화하는 항비만 조성물을 제공하려는 것을 목적으로 한다. It is also an object of the present invention to provide an anti-obesity composition which is excellent in reducing fertility and minimizing side effects.

이에 본 발명자들은 그동안 인삼의 연구에서 인삼유래 특수성분이 동물 및 임상시험에서 성인병 중 가장 문제가 되는 혈관 내 중성지방의 제거효능과 항고지혈의 우수한 효능이 있음을 확인하였고(Tae Myoung Kim et . al Lab. Anim. Res.:24:67-75, 2008;. Ae-Jung Kim et al . Korean J. Food & Nutr. 25:99-104, 2012), 이러한 효능을 이용하면 우수한 체지방축적 억제용 식품개발, 기존에 시판되고 있는 항비만 제품의 체지방축적 억제력 증강 및 부작용 경감용 보조제 개발이 가능할 것으로 추정하였다.
The present inventors have far-derived ginseng ginseng research of peculiarities minutes, it was confirmed that the excellent efficacy of removal of intravascular triglycerides are the most problematic of illnesses in animals and clinical trials, efficacy and anti gojihyeol (Tae Myoung Kim et. Al Lab Ae-Jung Kim et al ., Anim. Res.:24: 67-75, 2008; al . Korean J. Food & Nutr. 25: 99-104, 2012). Using these effects, it was estimated that the development of a food for inhibiting the accumulation of body fat, the enhancement of the body fat accumulation inhibiting ability of commercially available anti-obesity products, and the development of adjuvant for reducing side effects.

가르시니아 캄보지아의 추출물은 항비만 식품으로 현재 소비시장을 장악하고 있다. 이 물질은 지방축적억제 작용이 확인되어, 식약청으로부터 지방억제 기능성이 부여되어 있는 물질이다. 그러나 가르시니아 캄보지아는 신장 및 췌장 등 위장관의 손상을 유발하는 부작용이 수반될 수 있어서, 임산부와 수유기 여성은 섭취를 피하도록 권장하고 있다.The extract of Garcinia cambogia is currently dominating the consumer market as an anti-obesity food. This substance has been shown to inhibit the accumulation of fat, has been given by the KFDA fat suppression function. However, Garcinia Cambogia encourages pregnant and lactating women to avoid ingestion, as they can be accompanied by side effects that cause damage to the gastrointestinal tract, including the kidneys and pancreas.

또한, 가르시니아 캄보지아 추출물을 복용한 소비자들을 모니터링한 결과 다수가 체중 감소가 되지 않았다고 하였으며, 일부에서 복용 초기에는 약간의 비만억제효과를 느낄 수 있으나 계속 복용할 때 지속적인 비만억제효과는 없었다는 답을 하였다.
In addition, many consumers who took Garminia cambogia extracts reported that they did not lose weight, and some of them answered that they had some obesity-suppressing effect at the beginning of taking them, but they did not have persistent obesity-suppressing effect when they continued taking them.

본 발명자들의 선행연구로부터 확인한 인삼 제조물질은 항고지혈능과 혈액 및 간세포의 포화지방산 감소에 우수한 효능을 보였고(Tae Myoung Kim et . al Lab. Anim. Res.:24:67-75, 2008;. Ae-Jung Kim et al . Korean J. Food & Nutr. 25:99-104, 2012), 암환자의 약물치료 중에 보조치료제로 동시에 사용할 때 암치료 효과는 상승하고, 부작용은 감소시키는 효능이 있음을 확인하였다(Goeun Yang et.al. Food Sci. Biotechnol. 20:1649-1653, 2011; Dongsun Park et.al. Environmental Toxicology & Pharmacology 31: 397-405, 2011).Ginseng prepared material confirmed from previous studies of the inventors of the present invention showed excellent efficacy in anti gojihyeol function and blood and reduction of the saturated fatty liver (Tae Myoung Kim et. Al Lab . Anim. Res.:24:67-75, 2008 ;. Ae-Jung Kim et al . Korean J. Food & Nutr. 25: 99-104, 2012), it was confirmed that cancer treatment efficacy is increased and side effects are reduced when used simultaneously as an adjuvant treatment during drug treatment of cancer patients (Goeun Yang et al. Food Sci. Biotechnol. 20: 1649-1653, 2011, Dongsun Park et al Environmental Toxicology & Pharmacology 31: 397-405, 2011).

이러한 결과로부터 가르시니아 캄보지아에 인삼 제조물을 혼합하여, 인비보 시험을 실시한 결과, 가르시니아 캄보지아의 약한 체지방축적 억제력을 강화하고, 간, 심장 등의 심혈관계의 부작용은 감소하며, 감비효능이 강화된 항비만 조성물이 가능할 것으로 기대되었다.
From these results, it was found that ginseng preparations were mixed with the ginseng preparations in Garcinia cambogia, and as a result, the effect of inhibiting the accumulation of weak body fat in Garcinia cambogia was enhanced, the side effects of cardiovascular diseases such as liver and heart were reduced, Compositions were expected to be possible.

본 발명은 열처리 인삼추출물과 가르시니아 캄보지아를 이용한 항비만 조성물 제조방법에 관한 것이다.
The present invention relates to a method for producing an anti-obesity composition using heat-treated ginseng extract and Garcinia cambogia.

좀 더 구체적으로는, More specifically,

인삼을 추출하는 공정;A step of extracting ginseng;

상기 추출한 인삼을 감압농축하는 공정;Concentrating the extracted ginseng under reduced pressure;

상기 농축한 인삼의 pH를 조정하는 공정;Adjusting the pH of the concentrated ginseng;

상기 pH를 조정한 인삼을 고온고압처리하는 공정;Treating the ginseng with the pH adjusted at high temperature and high pressure;

상기 고온고압처리한 인삼을 제당(除糖)하는 공정;A step of saccharifying the high-temperature high-pressure treated ginseng;

상기 제당한 인삼을 농축하여 농축액을 제조하는 공정:A step of concentrating the above-prepared ginseng to prepare a concentrated liquid;

상기 인삼농축액에 가르시나아 캄보지아를 혼합하는 공정;을 포함하는 열처리 인삼추출물과 가르시니아 캄보지아를 이용한 항비만 조성물 제조방법에 관한 것이다. The present invention relates to a method for preparing an anti-obesity composition using a heat-treated ginseng extract and a Garcinia cambogia, which comprises mixing the ginseng concentrate with a ginsenoside cambogia.

또한, 상기 pH를 조정하는 공정은 pH 3.0~6.5로 조정하는 것을 특징으로 한다.Further, the step of adjusting the pH is characterized by adjusting the pH to 3.0 to 6.5.

또한, 상기 제당하는 공정은 인삼 농축액에 에탄올을 혼합하여 용해한 다음, 정치하여 상당량의 당류가 침전되면 이 용액을 걸러주어 당류를 제거하는 것을 특징으로 한다.The saccharification step is characterized in that ethanol is mixed and dissolved in the concentrated ginseng solution, and then the saccharide is removed by filtering the solution when a significant amount of saccharide is precipitated.

또한, 상기 인삼은 백삼, 홍삼, 백미삼 및 홍미삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 한다.The ginseng may be at least one selected from the group consisting of white ginseng, red ginseng, white ginseng and red ginseng.

또한, 본 발명은 열처리 인삼추출물과 가르시니아 캄보지아를 함유하는 항비만 조성물을 제공한다.The present invention also provides an anti-obesity composition containing heat-treated ginseng extract and Garcinia cambogia.

본 발명의 열처리 인삼추출물과 가르시니아 캄보지아를 이용한 항비만 조성물 제조방법은 간편하여 실용성면에서 진보한 방법으로 진세노사이드 Rg3 함량은 증가시키며 벤조피렌 생성은 억제하고, 인삼 성분 중 당을 제거함으로써 칼로리를 저감하여 감비효능이 우수한 조성물을 제공한다.The method of preparing an anti-obesity composition using the heat-treated ginseng extract of the present invention and an anti-obesity composition using Garcinia cambogia is simple and convenient in terms of practicality, thereby increasing the content of ginsenoside Rg3, inhibiting the production of benzopyrene, reducing calories Thereby providing a composition having excellent cost-effectiveness.

또한, 본 발명의 항비만 조성물은 가르시니아 캄보지아가 가지는 감비효능을 상승시키며, 간지방, 체지방 총콜레스테롤 및 혈액의 ALT, AST, ALP, LDL-C, HDL-C 등의 수치 개선에 큰 효과를 나타낸다. In addition, the anti-obesity composition of the present invention raises the cost-effectiveness of Garcinia cambogia and has a great effect on the improvement of liver fat, total cholesterol of body fat, and blood ALT, AST, ALP, LDL-C and HDL-C .

또한, 본 발명의 항비만 조성물은 기존의 항비만 물질의 부작용을 감소시키는 효과를 나타낸다. In addition, the anti-obesity composition of the present invention has the effect of reducing side effects of existing anti-obesity substances.

도 1은 비만용 사료의 식이조성(Research Diets사)을 표시한 것이다.
도 2는 시험군(G1, G2, G3, G4, G5)의 6주간 체중변화를 나타낸 것이다. 각 값은 평균 ± 표준편차(N = 10)로 나타냈다. 정상 대조군과 현저한 차이, * P < 0.01. 비만 대조군과 현저한 차이, # P < 0.05(Tukey HSD-test).
도 3은 시험군(G1, G2, G3, G4, G5)의 6주간 체중증가량을 나타낸 것이다. 각 값은 평균 ± 표준편차(N = 10)로 나타냈다. 정상 대조군과 현저한 차이, * P < 0.01. 비만대조군과 현저한 차이, # P < 0.01(Tukey HSD-test).
도 4는 시험군(G1, G2, G3, G4, G5)의 6주간 식이효율을 나타낸 것이다. 정상대조군과 현저한 차이, * P < 0.01. 비만 대조군과 현저한 차이, # P < 0.01. 홍미삼농축액시험군과 현저한 차이, @ P < 0.01(Tukey HSD-test).
도 5는 시험군(G1, G2, G3, G4, G5)의 부고환 지방조직을 H&E 염색을 통하여 이미지분석기로 지방세포 크기를 측정한 것이다. 각 값은 평균 ± 표준편차(n=5)로 나타냈다. 정상 대조군과 현저한 차이 * P < 0.01. 비만 대조군과 현저한 차이, # P < 0.05. 비만 대조군과 현저한 차이, ## P < 0.01(Tukey HSD-test).
도 6은 시험군(G1, G2, G3, G4, G5)의 부고환 지방조직을 H&E 염색을 통하여 지방세포 크기 현미경으로 관찰한 것이다.
도 7은 시험군(G1, G2, G3, G4, G5)의 부검시 채취한 간을 현미경으로 관찰한 것이다.
Figure 1 shows the dietary composition of diets for obesity (Research Diets).
Fig. 2 shows the change in body weight of the test group (G1, G2, G3, G4, G5) for 6 weeks. Each value was expressed as mean ± standard deviation (N = 10). Significant difference from normal control, * P <0.01. Significant difference from obesity control, # P <0.05 (Tukey HSD-test).
Figure 3 shows the 6-week weight gain of the test group (G1, G2, G3, G4, G5). Each value was expressed as mean ± standard deviation (N = 10). Significant difference from normal control, * P <0.01. Significant difference from obesity control, # P <0.01 (Tukey HSD-test).
Figure 4 shows the 6-week dietary efficiency of the test group (G1, G2, G3, G4, G5). Significant difference from normal control, * P <0.01. Significant difference from obesity control group, # P <0.01. Significant difference from the red hot pepper concentrate test group, @ P <0.01 (Tukey HSD-test).
FIG. 5 shows the measurement of adipose tissue volume of the epididymal adipose tissue of the test group (G1, G2, G3, G4, and G5) by H & E staining using an image analyzer. Each value was expressed as mean ± standard deviation (n = 5). Significant difference from normal control * P <0.01. Significant difference from obesity control group, # P <0.05. Significant difference from obesity control, # P <0.01 (Tukey HSD-test).
Fig. 6 shows the epididymal adipose tissue of the test group (G1, G2, G3, G4, G5) observed by H & E staining with an adipocyte size microscope.
FIG. 7 is a microscopic view of the liver taken during the autopsy of the test groups (G1, G2, G3, G4 and G5).

이하, 구체적인 실시예를 통하여 본 발명의 구성을 좀더 자세히 설명한다. 그러나, 실시예는 본 발명을 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 실시예의 기재범위 내로 한정되는 것이 아님은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 자명하다.
Hereinafter, the configuration of the present invention will be described in detail with reference to specific examples. It is to be understood, however, that the invention is not limited to the disclosed embodiments, but, on the contrary, is intended to cover various modifications and equivalent arrangements included within the spirit and scope of the appended claims.

원료 선정Selection of raw materials

인삼추출물과 병용하여 사용할 부작용이 적은 감비용 기능성 물질을 선발하였다. 탄수화물이 지방으로 합성되는 것을 억제하여 체지방 감소에 도움이 되는 것으로 알려져 있는 물질로 가르시니아 캄보지아 추출물의 주성분은 소듐 하이드록시 시트레이트(sodium hydroxy citrate)이다. 현재까지는 부작용도 타 제품에 비하여 크지 않은 것으로 파악되어 본 발명자들은 가르시니아 캄보지아 추출물 분말을 본 발명의 원료로 선정하였다.Ginseng extracts were used in combination with low - cost functional materials with few side effects. As a substance known to help reduce body fat by inhibiting the synthesis of carbohydrates into fat, sodium hydroxy citrate is the main ingredient of Garcinia cambogia extract. The present inventors have selected the powder of Garcinia cambogia extract as a raw material of the present invention.

다음으로는 지방세포분화억제력이 우수한 가공인삼을 선발하였다.Next, processed ginseng with excellent inhibition of adipocyte differentiation was selected.

본 발명에 사용될 감비용 기능성 물질인 가르시니아 캄보지아와 혼합하였을 때, 항비만 효과는 증가시키면서 부작용은 감소시키는 인삼을 제조하는 것이 목적이다. 선행연구에서 홍삼 특히 진세노사이드 Rg3가 강화된 가공인삼, 예를 들면 흑삼 등에서 지방세포분화 억제력을 확인할 수 있었다. 다음 실시예 1~3에서는 항비만 조성물 제조에 가장 효과적인 가공 인삼, 자세히는 백삼과 홍삼 중에서 감비효능이 높은 인삼을 선발한 후, 선발된 인삼의 부위별로, 즉 본체와 미삼을 구분하여 감비효능에 적합한 부위인지를 판단하여, 본 발명에 사용할 인삼원료를 선발하였다. It is an object of the present invention to produce ginseng which, when mixed with Garminia cambogia, a cost effective functional substance to be used in the present invention, increases the anti-obesity effect and reduces side effects. Previous studies have shown that red ginseng, especially ginsenoside Rg3-fortified processed ginseng, such as black ginseng, inhibits adipocyte differentiation. In the following Examples 1 to 3, the processed ginseng, which is most effective for the production of anti-obesity composition, is selected from among white ginseng and red ginseng, which is effective for the control of the anti-obesity composition. And the ginseng raw material to be used in the present invention was selected.

실시예Example 1 : 백삼, 홍삼,  1: white ginseng, red ginseng, 백미삼White rice ginseng , , 홍미삼Hong Mi-sam 제조 Produce

백삼 제조방법 : 5년근 수삼을 금산시장으로부터 구입하여 수도수로 깨끗이 세척한 다음, 건조하여 백삼을 제조하였다.White ginseng production method: Five years old ginseng was purchased from Geumsan market, cleaned with tap water, and dried to produce white ginseng.

백미삼 제조 : 제조된 백삼의 중미 부분만 절단하여 백미삼 시료로 하였다.Preparation of white ginseng: Only the middle part of white ginseng was cut and used as white ginseng.

홍삼 제조방법 : 제조된 백삼을 이용하여 85~90℃의 증삼기에서 8시간 증삼후, 건조(건조온도: 50℃이하에서 10일간 건조)하여 홍삼을 제조하였다.Red ginseng preparation: Red ginseng was prepared by ginseng cultivation at 85 ~ 90 ℃ for 8 hours and dried at 50 ℃ for 10 days.

홍미삼 제조방법 : 제조된 홍삼의 중미 이하만을 절단하여 홍미삼 시료로 하였다.
Preparation method of red ginseng: The red ginseng was cut into red ginseng samples.

실시예Example 2 : 백삼농축액, 홍삼농축액,  2: white ginseng concentrate, red ginseng concentrate, 백미삼농축액White rice germ extract , , 홍미삼농축액Red hot pepper concentrate 제조 Produce

백삼, 백미삼, 홍삼, 홍미삼 각각 1kg을 계측하여 추출용기에 넣고 10배 중량의 50% 에탄올을 가한 뒤, 80℃ 항온수조에서 8시간 추출하였다. 이러한 추출과정을 3회 반복하여, 상등액을 모아 감압농축기로 농축하여 고형분 60%의 농축액을 제조하였다. 이렇게 제조된 시료를 백삼농축액, 홍삼농축액, 백미삼농축액, 홍미삼농축액으로 하였다. 제조된 농축액 각각을 지방세포분화 억제력 측정용 시험물질로 사용하였다.
1 kg of white ginseng, white ginseng, red ginseng, and red ginseng were weighed and placed in an extraction vessel, and 10 times by weight of 50% ethanol was added and then extracted for 8 hours in a constant temperature water bath at 80 ° C. This extraction procedure was repeated three times, and the supernatant was collected and concentrated with a vacuum concentrator to prepare a concentrate having a solid content of 60%. The samples were used as white ginseng concentrate, red ginseng concentrate, white rice germinated concentrate and red ginseng extract. Each of the concentrates thus prepared was used for measuring the inhibitory effect of adipocyte differentiation It was used as a test substance.

실시예Example 3 : 인 비트로 3: in vitro 지방세포분화억제물질 스크린 테스트Screening test for inhibitor of adipocyte differentiation

시험물질의 지방세포분화 억제력 측정은 3T3-L1 지방전구세포를 이용하여 실시예 2의 각각 농축액의 지질축적억제력을 측정하였다.The lipid accumulation inhibitory potency of each concentrate of Example 2 was measured by using 3T3-L1 lipid precursor cells to measure the inhibitory effect of the test material on adipocyte differentiation.

3T3-L1 지방전구세포의 배양은 1% 페니실린-스트렙토마이신(P/S Zenbio. Inc. NC USA)과 10% BCS(bovine calf serum)이 첨가된 DMEM을 사용하여 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다. 배양은 2일 간격으로 5~6일간 하면서, 세포는 플레이트 바닥에 80% 정도 융합되었을 때, 인산완충액식염수(phosphate buffered saline; PBS)로 세척한 후, 0.25% 트립신-EDTA 용액을 넣어 37℃, 5% CO2 조건에서 5분간 정치 후, 세포를 탈착시켜 계대배양하였다. 3T3-L1 지방전구세포를 분화유도하기 위하여 세포를 10% 우태혈청(fetal bovine serum; FBS)와 1% P/S가 첨가된 DMEM을 이용하여 96-웰 플레이트의 각 웰에 0.5x106cell/well로 분주하고 2일 간격으로, 배지를 교환하면서 세포가 완전히 융합될 때까지 4~5일간 배양하였다. 융합된 세포에 FBS와 MDI 용액(0.5mM 3-아이소부틸-1-메틸잔틴, 1 M 덱사메타손, 5g/㎖ 인슐린)을 처리하여 분화를 유도하였다. 이때 백삼농축액, 백미삼농축액, 홍삼농축액, 홍미삼농축액을 각각 농도 2.6㎍/ℓ를 처리하였다. 분화 2일 후, 배지를 시료 10% FBS, 1% P/S, 5g/ℓ 인슐린이 포함된 DMEM으로 교환하였고, 분화유도 4일째부터는 3일에 한번씩 10% FBS와 1% P/S가 포함된 DMEM으로 교환하여 세포를 분화시켰다. 분화를 7∼9일 유도한 후, 오일 레드 O 염색을 하여 흡광도를 측정함으로써 지방축적율을 조사하였다. 분화유도 완료 후, 10% FBS DMEM을 제거하고, 세포를 PBS로 2번 세척한 다음, 10% 포르말린으로 4℃에서 1시간 동안 고정하고 증류수로 3번 세척하였다. 세척된 세포는 세포내 생성된 지방구와 특이적으로 반응하는 오일 레드 O(Sigma Co. St. Louis, MO, USA)로 1시간 동안 염색하였다. 염색 후, 염색액을 제거하고, 증류수로 3번 세척한 다음, 증류수를 웰에 채우고 현미경으로 관찰을 하였다. 중성지방의 축적량은 증류수를 제거하고 완전히 마른 웰에 100% 이소프로필 알코올을 2㎖ 첨가하여 오일 레드 O를 다시 용출시킨 후, ELISA 판독기로 490nm에서 수학식 1에 의해 흡광도를 측정하였으며, 그 결과는 표 1과 같다.3T3-L1 preadipocytes are cultured in 1% penicillin-streptomycin (. P / S Zenbio Inc. NC USA) , and 10% BCS (bovine calf serum) is added using a DMEM 37 ℃, 5% CO 2 conditions Lt; / RTI &gt; Cells were washed with phosphate buffered saline (PBS), and then incubated at 37 ° C with 0.25% trypsin-EDTA solution for 5 ~ 6 days at 2-day intervals. 5% CO 2 After the cells were allowed to stand for 5 minutes under the condition, cells were desorbed and subcultured. To induce differentiation of 3T3-L1 adipose precursor cells, cells were inoculated into each well of a 96-well plate at a density of 0.5x10 &lt; 6 &gt; cells / well using DMEM supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS) well, and cultured for 4 to 5 days at 2-day intervals until the cells were completely fused with the medium. Fused cells were treated with FBS and MDI solution (0.5 mM 3-isobutyl-1-methyl xanthine, 1 M dexamethasone, 5 g / ml insulin) to induce differentiation. At this time, white ginseng concentrate, white rice germinated concentrate, red ginseng concentrate, and red ginseng concentrate were treated at a concentration of 2.6 μg / l respectively. After 2 days of differentiation, the medium was replaced with DMEM containing 10% FBS, 1% P / S and 5 g / L insulin, and 10% FBS and 1% P / S were included every 3 days from the induction of differentiation Lt; RTI ID = 0.0 &gt; DMEM &lt; / RTI &gt; After differentiation was induced for 7 to 9 days, the fat accumulation rate was investigated by measuring the absorbance by oil red O staining. After completion of induction of differentiation, 10% FBS DMEM was removed, cells were washed twice with PBS, fixed with 10% formalin at 4 ° C for 1 hour, and washed three times with distilled water. The washed cells were stained with oil red O (Sigma Co. St. Louis, Mo., USA) for 1 hour, which specifically reacted with intracellular lipids. After staining, the staining solution was removed, washed three times with distilled water, and then the wells were filled with distilled water and observed under a microscope. The accumulation of triglyceride was determined by removing the distilled water and adding 2 ml of 100% isopropyl alcohol to the completely dry well to elute the oil red O and then measuring the absorbance by using an ELISA reader at 490 nm according to Equation 1, Table 1 shows.

Figure 112013066485210-pat00001
Figure 112013066485210-pat00001

백삼농축액White ginseng concentrate 홍삼농축액Red ginseng concentrate 백미삼농축액White rice germ extract 홍미삼농축액Red hot pepper concentrate 지방축적율(%)Fat accumulation rate (%) 88±488 ± 4 86±586 ± 5 85±285 ± 2 82±482 ± 4

표 1과 같이, 실시예 2의 각각 농축액의 지방세포분화 억제능력은 백삼농축액, 홍삼농축액, 백미삼농축액 및 홍미삼농축액 모두 좋았으나, 백삼보다 홍삼이 높았고, 본삼보다 미삼이 더 높은 것을 알 수 있었다. 따라서, 본 실시예에서는 홍미삼을 원료로 선정하였다.
As shown in Table 1, the ability of each concentrate of Example 2 to inhibit adipocyte differentiation was found to be higher in white ginseng concentrate, red ginseng concentrate, white rice germ extract and red ginseng extract than in white ginseng. Therefore, in the present example, red ginseng was selected as a raw material.

실시예Example 4 : 지방세포분화 억제용  4: for inhibition of adipocyte differentiation 홍미삼 추출 및 농축Extraction and concentration of red ginseng

특허등록 제919134호에 의하면 인삼 사포닌 중에서 지방축적 억제력이 높은 진세노사이드는 저극성 진세노사이드, 이중에서도 진세노사이드 Rg3였다. 그러나 기존에 알려진 진세노사이드 Rg3 증대방법은 복잡하고 시간이 많이 걸리며, 때로는 벤조피렌이 생성되어 위험성이 존재한다. 따라서 본 실시예 4에서는 지방축적 억제력이 탁월하면서 제조공정이 간단하고 경제적인 제조방법을 시행하였다.
According to Patent Registration No. 919134, among the ginseng saponins, ginsenosides having a high fat accumulation inhibitory power were low-polar ginsenosides and ginsenosides Rg3. However, the previously known method of increasing ginsenoside Rg3 is complex and time consuming, and there is a risk that benzopyrene is sometimes produced. Therefore, in Example 4, the production process was simple and economical with excellent fat accumulation inhibiting ability.

홍미삼 1kg을 환류냉각기가 부착된 추출기에 넣고, 10배 분량의 70% 에탄올을 가하여 80℃에서 8시간 추출하였다. 이러한 추출을 2회 반복하여 상등액을 모았다.1 kg of red ginseng was added to an extractor equipped with a reflux condenser, and 10-fold amount of 70% ethanol was added thereto, followed by extraction at 80 ° C for 8 hours. This extraction was repeated twice to collect the supernatant.

70% 에탄올 추출이 끝난 홍미삼은 정제수를 10배 분량 가하여 100℃에서 8시간 추출을 3회 반복하여 상등액을 모았다. After the extraction of 70% ethanol, red hot water was added 10 times of purified water and the extraction was repeated 3 times at 100 ° C for 8 hours to collect the supernatant.

70% 에탄올 추출액과 물추출액을 모아 50~60℃에서 20°brix가 될 때까지 감압농축하여 홍미삼농축액으로 사용하였다. 본 과정에서 에탄올은 완전히 제거되었다.The 70% ethanol extract and the water extract were collected and concentrated under reduced pressure at 50 ~ 60 ° C until the temperature reached 20 ° brix. Ethanol was completely removed in this process.

농축액의 벤조피렌 함량을 측정한 결과 0.08ppb 이하로 거의 측정이 되지 않았다. 이 양은 특허등록 제1093899호(발명의 명칭:벤조피렌이 저감된 홍삼 및 흑삼의 제조방법)에서 제시하고 있는 미삼의 벤조피렌 생성량인 0.3ppb보다도 더 적은 양이다. 따라서 본 홍미삼농축액 제조방법은 벤조피렌이 거의 생성되지 않는 아주 안전한 제조방법이다.
The concentration of benzopyrene in the concentrate was measured to be 0.08 ppb or less. This amount is less than 0.3 ppb, which is the amount of benzopyran produced in Patent Registration No. 1093899 (the name of the invention: Red Ginseng and Red Ginseng Reduced Method). Therefore, it is a very safe production method in which benzopyrene is hardly produced.

실시예Example 5 :  5: pHpH 별 고온고압처리물질의 지방세포분화 억제력 시험(고온고압 공정)Test to inhibit adipocyte differentiation of high-temperature and high-pressure treated substances (high-temperature and high-pressure process)

상기 20°brix 홍미삼농축액 100g을 500㎖ 살균병에 넣었다. 시료병은 3개를 만들었다. 구연산을 사용하여 pH 3.0~3.5, 4.0~4.5, 6.0~6.5로 조정된 3종류의 시료병을 준비하였다. pH의 조정이 끝난 시료병을 오토클레이브에 설치하고 121℃ 고온, 고압에서 3시간 증기 열처리를 하였다. 고압고열처리가 끝난 시료는 실시예 3의 방법에 의하여 지방세포분화 억제력을 측정하였다. 그 결과는 표 2와 같다.100 g of the 20 [deg.] Brix red hot pepper concentrate was placed in a 500 ml sterilized bottle. Three sample bottles were made. Three kinds of sample bottles adjusted to pH 3.0 to 3.5, 4.0 to 4.5, and 6.0 to 6.5 using citric acid were prepared. The pH adjusted sample bottle was placed in an autoclave and subjected to steam heat treatment at 121 ° C for 3 hours at high temperature and high pressure. The high-pressure high-temperature treated samples were measured for inhibiting adipocyte differentiation by the method of Example 3. The results are shown in Table 2.

pHpH 3.0~3.53.0 to 3.5 4.0~4.54.0 to 4.5 6.0~6.56.0 to 6.5 지방축적율(%)Fat accumulation rate (%) 76±576 ± 5 78±878 ± 8 80±480 ± 4

표 2와 같이, 홍미삼농축액이 고온고압처리로 지방세포분화 축적율이 82%(표 1 참조)에서 80% 정도로 낮아졌고, pH 3.0~3.5 처리로 76%로 낮아졌다. 이에 pH 3~3.5로 조정된 홍미삼을 121℃ 고온고압에서 처리하면 지방세포분화 억제력이 가장 높아지는 것을 알 수 있었다.
As shown in Table 2, the accumulation rate of adipocyte differentiation was reduced to 80% in 82% (see Table 1) and 76% in 3.0-3.5 pH treatment at high temperature and high pressure treatment. It was found that the treatment of red ginseng adjusted to pH 3 ~ 3.5 at 121 ℃ and high temperature and pressure showed the highest inhibitory effect on adipocyte differentiation.

실시예Example 6 : 지방축적 억제용 저칼로리  6: Low calorie for fat accumulation inhibition 홍미삼농축액Red hot pepper concentrate 제조(제당 공정) Manufacturing (sugar production process)

인삼에는 탄수화물이 대략 60~70% 정도 함유되어 있으며, 이것이 인삼이 가지고 있는 열량의 근원이 된다(최신고려인삼, 성분 및 효능편, 한국인삼연초연구원, 1996년 12월). 홍미삼 100g의 열량은 약 330kcal 정도로 측정되었다.Ginseng contains about 60 to 70% of carbohydrates. This is the source of calories that ginseng has (Korean Ginseng and Tobacco Research Institute, December 1996). The amount of heat of red ginseng 100g was measured to about 330 kcal.

따라서 인삼의 탄수화물을 그대로 둔 채, 감비용 제조원료로 사용할 경우 감비효능에 큰 효과를 거두지 못할 것으로 추정된다.
Therefore, it is presumed that the carbohydrate of ginseng is left as it is, and when it is used as a raw material for the depilatory cost, it will not have a great effect on the cost effectiveness.

고온고압처리하여 제조된 상기 실시예 5의 홍미삼농축액 30㎖와 100% 에탄올 70㎖의 비율로 혼합하여 잘 섞어 용해한 다음, 정치하여 상당량의 당류가 침전되면 용액을 여과하여 당류를 제거하였다.The mixture was mixed at a ratio of 30 ml of the hot red ginseng extract of Example 5 and 70 ml of 100% ethanol prepared by the high temperature and high pressure treatment, and dissolved well. After the saccharide was precipitated in a considerable amount, the solution was filtered to remove the saccharide.

침전물이 제거된 용액은 70℃에서 감압농축하여 고형분이 60%인 홍미삼농축액을 제조하였다.The solution from which the precipitate was removed was concentrated under reduced pressure at 70 ° C to prepare a concentrated red ginseng extract having a solid content of 60%.

이렇게 제조된 홍미삼농축액의 잔여 탄수화물량을 측정하였다. 그 결과는 표3과 같다.The residual carbohydrate content of the prepared red ginseng extract was measured. The results are shown in Table 3.

고온고압처리 홍미삼농축액High-temperature high-pressure treated red ginseng concentrate 제당처리 홍미삼농축액Sugar-treated red hot pepper concentrate 탄수화물 함량(g/100g)Carbohydrate content (g / 100g) 45.845.8 27.627.6

표 3과 같이, 제당 공정 전후 시료의 탄수화물 함량은 각각 45.8%와 27.6%였다. 제당 공정을 거침으로써, 탄수화물은 18.2%가 줄었다. 이렇게 감소된 탄수화물의 열량을 계산해 보면 100g의 농축액 당 72.8kcal 만큼 줄어든 것을 알 수 있었다. As shown in Table 3, the carbohydrate contents of the samples before and after the sugar planting process were 45.8% and 27.6%, respectively. As a result of the sugar-processing process, carbohydrates decreased by 18.2%. Calculation of this reduced carbohydrate calorie was found to be reduced by 72.8 kcal per 100 g of concentrate.

탄수화물함량 시험법은 시료의 수분함량, 회분함량, 조지방함량(속시렉추출건조법) 및 조단백질함량(킬달질소정량법)을 측정한 뒤 수학식 2와 같이 계산하였다. The carbohydrate content test method was performed as shown in Equation (2) after measuring the moisture content, ash content, crude fat content (fast Rake extraction drying method) and crude protein content (Kjeldahl nitrogen determination method) of the sample.

Figure 112013066485210-pat00002
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본 실시예를 거치면서 홍미삼농축액 열량을 최소 70kcal에서 최고 110kcal까지 저감할 수 있었다. 이는 홍미삼 열량 330kcal의 1/5~1/3에 해당하는 수준이다.
It was possible to reduce the heat amount of the red hot pepper concentrated liquid from the minimum 70 kcal to the maximum 110 kcal. This is equivalent to one fifth to one third of the red ginseng heat of 330kcal.

실시예Example 7 :  7: 홍미삼농축액의Red hot pepper concentrate 처리 공정에 따른 제조물의  Of the product 진세노사이드의Ginenoside 패턴 변화 시험 Pattern change test

홍미삼농축액의 진세노사이드가 고온고압처리 공정, 제당공정을 거치는 동안 진세노사이드의 패턴 변화를 조사하였다.
Changes in the pattern of ginsenosides were investigated during the high temperature and high pressure treatment and the saccharification process of the ginsenoside of the red ginseng extract.

진세노사이드 분석은 식품의약품안전청 고시 제2008-12호(2008, 06, 01) 진세노사이드 분석법에 준하여 시험하였다. 분말시료인 경우 0.5~1g, 추출액 시료인 경우 2.0g~3.0g을 정확히 칭량하여 250㎖ 추출 용기에 넣고, 메탄올 50㎖을 첨가 후 50℃ 초음파분산욕조에서 20분간 추출을 하였다. 추출용액은 3000rpm에서 10분간 원심 분리 후, 상등액을 모았다. 이 과정을 3회 반복하였다. 여액을 모아 0.4㎛인 멤브레인 필터로 여과한 후, 50℃이하에서 감압 농축하였다. 감압 농축된 잔유물을 메탄올 5㎖에 녹여 HPLC/MS로서 진세노사이드를 분석하였다. 분석조건은 칼럼은 내경 2.1mm, 길이 150mm, 충진체 크기 3.5㎛ 규격의 XterraMS C18, 칼럼온도는 30℃, 유량은 0.25㎖/mim, 시료주입량은 5㎕/㎖이었고, 이동상 조성은 표 4, 질량 탐지기 조건은 표 5와 같다. 그 결과는 표 6과 같다. The ginsenoside analysis was conducted in accordance with the Korean Food and Drug Administration Notification No. 2008-12 (2008, 06, 01) ginsenoside method. 0.5 to 1 g for powder samples and 2.0 to 3.0 g for extract samples were precisely weighed and placed in a 250 ml extraction container. After adding 50 ml of methanol, extraction was carried out in a 50 ° C ultrasonic dispersing bath for 20 minutes. The extract solution was centrifuged at 3000 rpm for 10 minutes, and the supernatant was collected. This procedure was repeated three times. The filtrate was collected, filtered through a membrane filter of 0.4 mu m, and concentrated under reduced pressure at 50 DEG C or lower. The concentrated residue was dissolved in 5 ml of methanol and analyzed for ginsenoside by HPLC / MS. The column conditions were as follows: Xterra MS C18 with an inner diameter of 2.1 mm, a length of 150 mm, a filler size of 3.5 μm, a column temperature of 30 ° C., a flow rate of 0.25 ml / min, and a sample injection volume of 5 μl / The mass detector conditions are shown in Table 5. The results are shown in Table 6.

Figure 112013066485210-pat00003
Figure 112013066485210-pat00003

Figure 112013066485210-pat00004
Figure 112013066485210-pat00004

홍미삼농축액
(mg/g)
Red hot pepper concentrate
(mg / g)
고온고압처리 홍미삼 농축액(mg/g)High-temperature high-pressure treated red ginseng concentrate (mg / g) 고온고압처리 후 제당처리한 홍미삼농축액
(mg/g)
High-temperature high-pressure treatment,
(mg / g)
ginsenoside Rb1ginsenoside Rb1 6.8106.810 4.8804.880 6.9736.973 ginsenoside Rb2ginsenoside Rb2 2.2662.266 1.2381.238 7.3047.304 ginsenoside Rb3ginsenoside Rb3 0.7380.738 0.7570.757 1.0701.070 ginsenoside Rcginsenoside Rc 3.5353.535 1.8931.893 4.3854.385 ginsenoside Rdginsenoside Rd 1.0571.057 1.8731.873 3.8643.864 ginsenoside Reginsenoside Re 4.9514.951 0.6480.648 3.6273.627 ginsenoside Rfginsenoside Rf 1.1551.155 2.0132.013 4.9184.918 ginsenoside Rg1ginsenoside Rg1 2.8242.824 -- 1.1831.183 ginsenoside Rg2ginsenoside Rg2 0.6190.619 2.2182.218 5.9155.915 ginsenoside Rg3ginsenoside Rg3 0.6200.620 10.34810.348 16.58416.584 ginsenoside Rh1ginsenoside Rh1 0.4440.444 2.6182.618 6.6426.642 ginsenoside Rh2ginsenoside Rh2 -- -- -- totaltotal 25.01925.019 28.48628.486 63.09663.096

표 6과 같이, 홍미삼농축액을 pH 3으로 조정한 후, 121℃로 고온고압처리를 함으로서 진세노사이드 Rg2, Rg3, Rh1의 함량, 특히 Rg3 함량이 급격히 늘어났다.As shown in Table 6, the content of ginsenosides Rg2, Rg3 and Rh1, particularly the content of Rg3, increased sharply by adjusting the pH of the red peppermint concentrate to 3 and then treating it at 121 占 폚 under high temperature and high pressure.

이 결과로부터 고분자 진세노사이드(Rb, Rc, Re) 등이 고열에 의해 탈당과 구조전환이 되어 저급의 진세노사이드로 변화됨을 확인할 수 있었다.From these results, it was confirmed that the polymer ginsenosides (Rb, Rc, Re) and the like were converted into low-grade ginsenosides by desorption and structural conversion due to high heat.

또, 70% 에탄올을 처리하여 당의 일부를 제거함으로써 진세노사이드들의 함량이 늘어났다. 이것은 제당 된 당류의 양만큼 전체 중량이 줄어들었고, 따라서 진세노사이드 상대 중량은 늘어났기 때문이다.Also, the content of ginsenosides was increased by treating 70% ethanol to remove a portion of the sugar. This is because the total weight is reduced by the amount of saccharified saccharide, and therefore the relative weight of ginsenoside is increased.

결론적으로 홍미삼농축액은 고온고압처리 후 제당 공정을 거침으로써 열량은 1/3 줄었고, 진세노사이드 농도는 전체적으로 2.5배 늘어났으며, 감비효과가 있다고 알려진 진세노사이드 Rg3는 약 27배 가량 늘어났다.In conclusion, the red ginseng concentrate was subjected to high-temperature and high-pressure treatment, and the calories were reduced by one-third, the concentration of ginsenoside was increased by 2.5 times, and the ginsenoside Rg3, which is known to be effective in cost reduction, was increased by about 27 times.

그리고 본 실시예의 홍미삼농축액은 구증구포법이나 발효공법으로 제조된 흑삼의 진세노사이드 패턴과 유사하였다. 그러나 본 실시예의 홍미삼농축액의 진세노사이드 함량은 급격히 증가한 것이 특징적이었다.And the red hot ginseng concentrate of this example was similar to the ginsenoside pattern of black ginseng prepared by the cored bean gum or fermentation method. However, the ginsenoside content of the red ginseng concentrate of the present example was characterized by a sharp increase.

이러한 결과로부터 본 제조공정이 가장 효과적인 진세노사이드 Rg3 강화 인삼(흑삼)의 제조방법으로 판단되었다.
From these results, it was judged that the manufacturing process was the most effective method of producing ginsenoside Rg3 enhanced ginseng (black ginseng).

실시예Example 8 : 본 발명의  8: 항비만Anti-obesity 조성물 제조  Composition manufacturing

실시예 1~7의 결과를 조합하여 항비만 조성물을 제조하였다.The results of Examples 1 to 7 were combined to produce an anti-obesity composition.

홍미삼 1kg을 환류냉각기가 부착된 추출기에 넣고, 10배 분량의 70% 에탄올를 가하여 80℃에서 8시간 추출하였다. 이러한 추출을 2회 반복하여 상등액을 모았다. 70% 에탄올 추출이 끝난 홍미삼은 정제수를 10배 분량 가하여 100℃에서 8시간 추출을 3회 반복하여 상등액을 모았다. 70% 에탄올 추출액과 물추출액을 모아 50~60℃에서 20°brix가 될 때까지 감압농축하여 홍미삼농축액을 만들었다. 1 kg of red ginseng was added to an extractor equipped with a reflux condenser, and a 10-fold amount of 70% ethanol was added thereto, followed by extraction at 80 ° C for 8 hours. This extraction was repeated twice to collect the supernatant. After the extraction of 70% ethanol, red hot water was added 10 times of purified water and the extraction was repeated 3 times at 100 ° C for 8 hours to collect the supernatant. The 70% ethanol extract and the water extract were collected and concentrated under reduced pressure at 50 ~ 60 ° C until the temperature reached 20 ° brix.

상기 홍미삼농축액을 구연산을 사용하여 pH 3.0으로 조정하여 오토클레이브에서 121℃의 고온고압에서 3시간 증기 열처리를 하였다.The red ginseng condensate was adjusted to pH 3.0 with citric acid and subjected to steam heat treatment at 121 ° C and high temperature and high pressure for 3 hours in an autoclave.

상기 고온고압처리한 홍미삼농축액 30㎖와 100% 에탄올 70㎖ 비율로 혼합하여 잘 용해한 다음, 정치하여 상당량의 당류가 침전되면 용액을 여과하여 당류를 제거하였다. The mixture was mixed well at a ratio of 30 ml of the hot water high-pressure treated red hot-water extract solution to 70 ml of 100% ethanol, dissolved well, and then allowed to stand. When a significant amount of saccharide was precipitated, the solution was filtered to remove the saccharide.

침전물이 제거된 용액은 70℃에서 감압농축하여 고형분이 60%인 홍미삼농축액을 제조하였다. The solution from which the precipitate was removed was concentrated under reduced pressure at 70 ° C to prepare a concentrated red ginseng extract having a solid content of 60%.

상기에서 제조된 홍미삼농축액과 가르시니아 캄보지아는 2~3 : 1의 비율로 혼합하여 항비만 조성물을 제조하였다.
The red ginseng extract prepared above and Garcinia cambogia were mixed at a ratio of 2 to 3: 1 to prepare an anti-obesity composition.

실험예Experimental Example :  : 항비만Anti-obesity 조성물의 효능확인을 위한 동물시험 Animal testing for the efficacy of the composition

본 발명 실시예 8 항비만 조성물의 감비효능을 확인하기 위하여 동물시험을 수행하였다.Invention Example 8 In order to confirm the efficacy of the anti-obesity composition, animal tests were conducted.

고지방 식이로 비만이 유도된 C57BL/6J 쥐를 이용하여 실시예 8 항비만 조성물의 체중조절 및 지질대사개선에 미치는 영향을 조사하고자 고지방 식이를 6주간 경구투여한 후 체중과 사료섭취량 및 사료효율을 측정하였고, 부검 후 주요 장기무게, 부고환 지방함량 및 부고환 지방세포 크기, 혈중 지질함량을 측정하고 종합적으로 분석하여 항비만 기능의 효과를 조사하였다.To investigate the effect of the high fat diet-induced C57BL / 6J rats on body weight control and lipid metabolism improvement of the Example 8 anti-obesity composition, high fat diet was orally administered for 6 weeks and body weight, feed intake and feed efficiency We measured the major organ weight, epididymal fat content, epididymal adipocyte size and blood lipid content after autopsy and analyzed the effect of anti - obesity function comprehensively.

1. 시험방법1. Test Method

-시험계 - Test system

가. 종, 계통(공급처) : 마우스, C57BL/6N (Koatech, Pyeongtaek, Korea)end. Species, strain (supplier): mouse, C57BL / 6N (Koatech, Pyeongtaek, Korea)

나. 구입시 동물수(성별) 및 체중범위 : 5 주령 60 마리(수컷), 15 ± 10% gI. Number of animals (sex) and weight range at the time of purchase: 60 weeks (male), 15 ± 10% g

다. 투여시 동물수(성별) 및 체중범위 : 6 주령 60 마리(수컷), 20 ± 10% gAll. Number of animals (sex) and body weight at the time of administration: 60 weeks (male), 20 ± 10% g

라. 시험계 선정이유: 다수의 연구에서 고지방 식이를 통한 비만 모델이 체중조절이나 비만 기전연구에 적합한 모델이라고 알려져 있으며(Woods et al., 2003), C57BL/6N 쥐는 다른 계통에 비해 고지방 식이 섭취시 비만이나 고지혈증 등의 유도가 쉽고 비만 연구와 관련된 선행논문 보고가 많이 축적되어 있는 관계로 선택하였다(Choi et al., 2012; Min et al., 2012).
la. Reason for selection of the test system: In a number of studies, high-fat diet-induced obesity models are known to be suitable models for weight control and obesity studies (Woods et al., 2003), C57BL / 6N mice were selected as the relationship, which is easy and the induction of obesity and hyperlipidemia Ingestion high fat diet accumulate many leading articles and reports related to obesity research compared to other systems (Choi et al ., 2012; Min et al ., 2012).

-동물시험실 장소 및 조건- Animal laboratory room location and condition

가. 동물실 번호 - 구역 : 충북대학교 시험돌물연구센터 Conventional area, 호실 : 218end. Animal Room Number - Area: Chungbuk National University Test and Research Center Conventional area, Room: 218

나. 사용 사육케이지 종류 및 크기 : PSU, 223 × 267 ×145mmI. Use cage type and size: PSU, 223 × 267 × 145mm

다. 설정온도 : 20 ± 2 ℃ All. Setting temperature: 20 ± 2 ℃

라. 습도 : 50 ± 20 %la. Humidity: 50 ± 20%

마. 환기방식 및 회수 : 120회/5hr hemp. Ventilation system and recovery: 120 times / 5hr

바. 조명시간 및 명암주기 : 12hr/day/nightbar. Lighting time and contrast: 12hr / day / night

사. 조도 : 150~300/Lux
four. Illumination: 150 ~ 300 / Lux

- 시험물질 및 시약- Test substances and reagents

가. 비만 사료 및 시험물질end. Obesity feed and test substance

1) 고지방 식이는 도 1의 Research Diets사의 지방 45% kcal조성(D12451, Research Diets)을 사용하였다. 시험시 정상군은 설치류용 시판사료인 정상 펠렛 식이를 비만유도군 및 시험군은 고지방 식이를 자유 섭취시켰다.1) The fat 45% kcal composition (D12451, Research Diets) of Research Diets Co., Ltd. of Fig. 1 was used. In the test group, the normal pelleted diet, which is a commercially available feed for rodents, was fed free of obesity induction group and the test group was free of high fat diet.

2) 시험물질은 시험의뢰자가 제공한 시험물질을 멸균 증류수에 용해하여 사용하였다.2) The test substance was used by dissolving the test substance provided by the test applicant in sterilized distilled water.

3) 투여 당일 조제, 당일 투여 하였다.
3) On the day of administration, the preparation was administered on the same day.

- 시험군 구성- Test group composition

그룹c) Group c) 복용Taking 매개물medium 방법Way 식단 a) Diet a) 기간term 동물수Number of animals G1G1 NC(정상대조군)NC (normal control group) 10㎖/kg10 ml / kg D.W.D.W. OralOral 정상 펠렛 식이Normal pellet diet

6주d)



6 weeks d)

1010
G2G2 HF(비만대조군)HF (obesity control) 10㎖/kg10 ml / kg 고지방 식이


High fat diet


1010
G3G3 HFD + B(300)
(홍미삼농축액군)
HFD + B (300)
(Group of red hot pepper concentrate)
300㎎/kg/10㎖300 mg / kg / 10 ml 1010
G4G4 HFD + G(100)
(가르시나아 캄보지아군)
HFD + G (100)
(Garcinina, Cambodia)
100㎎/kg/10㎖100 mg / kg / 10 ml 1010
G5G5 HFD + BG(400)
(가르시니아 캄보지아 + 홍미삼농축액혼합물질군)
HFD + BG (400)
(Garcinia cambogia + mixture of red hot pepper concentrate)
400㎎/kg/10㎖400 mg / kg / 10 ml 1010

a) G1군(정상대조군)의 공급사료는 실험동물용 쥐사료(Agribrands Purina Korea Inc. Analysis Service of Central Laboratory; 경기도 평택시 장당동 627)를 급이하였다. a) Feeds from the G1 group (normal control group) were fed to experimental animal rats (Agribrands Purina Korea Inc. Analysis Service of Central Laboratory, 627 Jangdang-dong, Pyeongtaek, Gyeonggi).

b) 고지방 식이(45kcal% 지방)는 상업적으로 시판되는 D12451 식이(Research Diets, Inc., New Brunswick, NJ)을 사용하였다. b) High- fat diets (45 kcal% fat) were purchased from commercially available D12451 diet (Research Diets, Inc., New Brunswick, NJ).

c) NC(정상대조군), HF(비만대조군), HFD + B(300)(비만대조군에게 홍미삼농축액 300mg/kg을 투여함), HFD + G(100)(비만대조군에게 가르시니아 캄보지아 100mg/kg을 투여함), HFD + BG(400)(비만대조군에게 홍미삼농축액 300mg/kg 및 가르시니아 추출액 100mg/kg을 투여함) c) HFD + G (100) (obesity control group), HF (obesity control group), HFD + B (300) HFD + BG (400) (administered to obesity control group, 300 mg / kg of red ginseng extract and 100 mg / kg of galsinia extract)

d) 입고 시 동물은 1주간 순화과정을 거쳐 군분리한 후 6주간 본 시험과정을 거쳤다.
d) At the time of receipt, animals were subjected to a purification process for one week and then separated for 6 weeks.

-시험방법-Test Methods

가. 검역 및 순화end. Quarantine and purification

1) 동물입수시 모든 동물의 일반 건강상태에 대한 수의학적 검역을 실시하였다. 1) Veterinary quarantine was conducted for general health status of all animals when animals were obtained.

2) 시험을 실시하는데 적합하고 건강한 동물을 선별하기 위하여 1주간의 순화기간을 두었다.
2) One week of purifying period was set up to select healthy animals to be suitable for the test.

나. 군 분리 I. Group separation

검역상 이상이 없는 동물만을 사용하여 체중을 기준으로 Z배열법에 따라 분리하며, 군 분리 완료 후 각각의 사육상자에 개체 식별카드(시험명, 시험군, 개체번호, 성별, 시험개시일 등 기재)를 부착하였다.
Using an animal that has no abnormality in quarantine, the animals are separated according to the Z-arrangement method based on their body weight. After completion of the group separation, an individual identification card (test name, test group, individual number, sex, Respectively.

다. 투여방법 및 시험기간All. Method of administration and duration of the test

1) 입고시 모든 동물은 1주간 순화과정을 거치며, 군분리 후 6주동안 그룹별로 정상펠렛사료(G1)와 비만사료(G2, G3, G4, G5)로 식이를 나누어 급이하되 식이와 식수는 자유롭게 섭취(ad libitum) 하도록 하였다. 1) All animals were subjected to a 1-week purifying procedure at the time of arrival, and the animals were divided into two groups with normal pellet diet (G1) and obese diet (G2, G3, G4 and G5) Free ingestion ( ad libitum ).

2) 투여시 시험군(G3, G4, G5)에는 시험물질을 10㎖/kg의 투여량으로 증류수로 용해시켜 매일 일정시간대에 1회씩 6주간 경구 투여하며, 정상대조군(G1) 및 비만대조군(G2)에는 동량의 D.W.를 1회/1일 6주간 경구 투여하였다.(G1, G4, and G5) were dissolved in distilled water at a dose of 10 ml / kg, and the test substance was orally administered once a day for 6 weeks, G2) were orally administered with the same amount of DW once a day for 6 weeks.

라. 개체식별 및 사육관리la. Object identification and breeding management

1) 사육상자에는 개체식별카드를 부착하고 개체식별은 꼬리 표지법을 사용한다. 사육실의 환경은 항온 20 ± 2oC), 항습(50 ± 20%), 12시간 간격(08:00~20:00)의 광주기로 일정한 조건을 유지하고 검역 및 순화기간에는 폴리술폰 케이지에 5마리, 시험기간에는 3마리의 사육밀도로 수용하여 관리하였다. 1) Attach an individual identification card to the breeding box, and use tail marking to identify the individual. The environment of the breeding room is maintained at a constant temperature of 20 ± 2 ° C, humidity (50 ± 20%) and 12 hours interval (08: 00 ~ 20: 00). In quarantine and purification period, The animals were housed and maintained at a density of 3 animals during the test period.

2) 깔짚은 실험동물 전용 연질깔짚을 사용하였으며, 주 1회 사육상자를 교환하며, 사육실 내에서 사용되는 모든 기자재 및 깔짚은 121℃에서 20분간 고압 증기멸균하여 사용하였다.
2) Litter was used for experimental animal soft litter. The breeding box was changed once a week. All equipment and litter used in the room were sterilized by high pressure steam sterilization at 121 ℃ for 20 minutes.

마. 체중측정 및 음수·사료 섭취량 측정hemp. Weight measurement and measurement of water intake and feed intake

1) 시험기간 중 체중 변화를 관찰하기 위하여 시험 시작 후 매주 2회 일정시각에 측정하였다. 1) To observe the change in body weight during the test period, the test was performed twice a week at the start of the test.

2) 음수 · 사료 섭취량을 측정하기 위하여 시험 시작 후 매주 1회(체중 측정 시) 일정시각에 측정한 후 24시간 경과 후 익일 급여량에서 잔량을 감하여 계산하였다(Lee et al., 2011).
2) after the start of the test to measure the negative, feed intake measured after a certain time once a week (measured weight) after 24 hours was calculated by subtracting the residual amount from the next day geupyeoryang (Lee et al ., 2011).

-평가항목- Evaluation items

가. 체중 증가량 및 사료효율 계산 end. Calculation of weight gain and feed efficiency

1) 시험개체별로 초기 체중과 시험종료 시의 체중을 통하여 총 시험기간동안의 체중 증가량을 계산하고 각 시험그룹간 평균값을 산출하였다.
1) The body weight gain during the total test period was calculated from the initial body weight and the body weight at the end of the test for each test subject, and the average value among the test groups was calculated.

2) 사료식이효율(Food efficiency ratio, FER)은 총 사료섭취량에 대한 체중 증가량의 비를 백분율로 환산하였다(Lee et al., 2011).
2) The food efficiency ratio (FER) was calculated as the ratio of body weight gain to total feed intake as a percentage (Lee et al. al ., 2011).

FER(Food efficiency ratio) = (시험기간 동안 체중증가(g/day)) / (시험기간 동안 음식섭취(g/day))
FER (food efficiency ratio) = (weight gain during the test period (g / day)) / (food intake during the test period (g / day))

나. 혈액생화학적 검사I. Blood biochemical test

1) 실험종료일에 12시간 절식시키고 물만 제공하였으며 부검시 에테르 흡입마취 하에서 개복하여 각각의 복대정맥에서 채취한 혈액을 SST 튜브에 넣고, 채혈 후 2시간 이내에 4℃에서 3000rpm으로 10분간 원심분리하여 혈청을 분리한 후 -70℃에 보관하였다.
1) After the end of the experiment, the blood was fasted for 12 hours. The blood was taken under ether inhalation and the blood collected from each of the abdominal veins was placed in the SST tube and centrifuged at 3000 rpm for 10 minutes at 4 ° C within 2 hours after the blood collection. And then stored at -70 ° C.

2) 분리된 혈청은 지질농도로서 TG(triglyceride), TC(total cholesterol), LDL(low-density lipoprotein cholesterol), HDL(high-density lipoprotein cholesterol)을 측정하고 혈액생화학적지표인 ALT(alanine transaminase), AST(aspartate transaminase), ALP(Alkaline phosphatase)를 자동혈액생화학분석기 (HITACHI 7080)를 이용하여 측정하였다.
2) Serum levels of triglyceride, total cholesterol, low-density lipoprotein cholesterol (HDL) and high-density lipoprotein cholesterol (HDL) were measured and serum biochemical markers such as ALT (alanine transaminase) , Aspartate transaminase (AST), and alkaline phosphatase (ALP) were measured using an automatic hematology biochemical analyzer (HITACHI 7080).

다. 장기중량 측정All. Long-term weighing

1) 혈액 채취 후 육안검사를 통해 내부 장기의 이상 유무를 확인하고 부고환 지방조직, 간을 적출하여 생리식염수로 세척하고 여과지로 수분을 제거한 후 전자저울로 절대 중량을 측정한다. 적출한 해당 장기는 부검전 절식된 체중에 대한 각각의 상대중량을 산출하였다.
1) After blood collection, check the internal organs for abnormalities, remove epididymal adipose tissue and liver, wash with physiological saline, remove moisture with filter paper, and measure the absolute weight with electronic scales. The extracted organs calculated the respective relative weights of the fasted body weight before autopsy.

2) 상대 장기 중량(%) = 장기무게(g) / 부검전 절식 체중(g) × 100(Han et al., 2006)
2) Relative organ weight (%) = organ weight (g) / fasting body weight before autopsy (g) × 100 (Han et al ., 2006)

라. 부고환 주위 지방세포 크기측정 la. Measurement of fat cells around epididymis

1) 부고환 지방조직을 적출하여 10% 중성 완충액 포르말린 용액에 충분한 고정과정을 거친 후 파라핀으로 포매한 후 마이크로톰으로 파라핀블록을 4㎛ 두께로 박절하였다. 이후 크실렌을 사용하여 파라핀을 제거시키고, 100%, 95%, 90%, 80%, 70% 알코올로 친수화 시킨 다음 H&E(hematoxylin & eosin)으로 염색하고 다시 계열 알코올로 탈수과정을 거쳐 봉입하고 광학현미경(Olympus, Japan)으로 관찰하였다(Lee et al., 2011.)
1) Epididymal adipose tissue was extracted and fixed in 10% neutral buffered formalin solution. After embedding in paraffin, paraffin block was cut into 4 ㎛ thickness with a microtome. After that, paraffin was removed using xylene, and then hydrophilized with 100%, 95%, 90%, 80%, 70% alcohol and then stained with H & E (hematoxylin and eosin) Were observed with a microscope (Olympus, Japan) (Lee et &lt; RTI ID = 0.0 &gt; al ., 2011.)

2) 지방세포 크기의 측정은 항비만 효능을 입증할 수 있는 효과적인 방법으로 잘 알려져 있으며(Park et al., 2005), 각 시험그룹별로 무작위적으로 선택한 5 개체에 대하여 염색된 슬라이드 샘플(1샘플/마리)을 통해, 샘플당 6개의 지방세포 크기를 광학현미경 하에서 영상 분석 시스템(IPKR-1003, Saramsoft Co., Ltd., Korea)으로 측정하여 그룹별 평균 지방구 사이즈를 산출하였다(Yun et al., 2007, Seo et al., 2009).
2) Measurement of adipocyte size is well known as an effective method to demonstrate anti-obesity efficacy (Park et al al ., 2005), six adipocyte sizes per sample were determined by light microscopy in an image analysis system (IPKR-1003, Saramsoft Co., Ltd., Korea) to calculate the average lip size of each group (Yun et al ., 2007, Seo et al., 2009).

마. 간의 조직병리학적 검사 및 지질 침착도 검사hemp. Histopathologic examination of liver and lipid deposition

시험그룹별 무작위로 선택한 5 개체에 대하여 부검시 얻어진 간조직을 대상으로 H&E 염색을 실시하여 조직병리학적 소견을 관찰한다. H&E 염색과정은 상기 기술한 부고환주위 지방 염색법을 따랐다.
Histopathologic findings of hepatocytes obtained at the time of autopsy are examined by H & E staining for 5 randomly selected test groups. The H & E staining procedure followed the liposuction method described above.

사. 통계학적 분석four. Statistical analysis

모든 실험 결과는 평균치 ± 표준편차로 표시하고 모든 자료들에 대해 분산의 동질성을 비교하기 위한 Levene's test를 실시하며, 분산이 동질성을 갖는 경우 ANOVA(one-way analysis of variance)를 실시하여 유의성이 관찰되면 대조군과의 유의차가 있는 시험군을 알아내기 위하여 Dunnett's t-test를 실시하였다.
All experimental results are expressed as mean ± standard deviation, and Levene's test is used to compare variance homogeneity for all data. ANOVA (one-way analysis of variance) Dunnett's t-test was performed to determine the test group with significant differences from the control group.

2. 시험결과 및 고찰2. Test Results and Considerations

1) 일반증상 및 체중변화1) General symptoms and weight changes

(1) 일반증상 : 시험기간 중 체중증가 외의 증상은 발견되지 않았다.(1) General symptoms: No symptoms other than weight gain were observed during the study.

(2) 체중변화 : 도 2와 같다.(2) Change in body weight: as shown in Fig.

6주 동안 실험동물의 체중을 측정한 결과는 도 2와 같이 비만대조군인 HF군에서 정상대조군인 NC군과 비교하여 체중이 유의하게 높게 측정되어 비만이 유발되었음을 확인할 수 있었다(p < 0.01). As shown in FIG. 2, the body weight of the experimental animals was measured for 6 weeks, and it was confirmed that obesity was induced in the obesity control group HF compared with the NC group ( p <0.01).

HF군은 7일차부터 실험 종료시인 41일차까지 NC군대비 식이에 의한 현저한 평균체중의 증가가 유지됨이 확인되었다(p < 0.01). The HF group showed a significant increase in mean body weight from the 7th day to 41 days after the end of the experiment ( p <0.01).

반면 투여 3일차 경과시 BG(400)군의 평균체중은 21.23 ± 0.34g로 HF군의 22.58 ± 0.33g대비 유의적인 체중증가 억제가 확인되었고 시험종료시까지 이러한 체중감소가 유의성 있게 유지되는 것이 확인되었다(p<0.01). On the other hand, the mean body weight of BG (400) group was 21.23 ± 0.34g at the 3rd day after administration, and 22.58 ± 0.33g of HF group showed significant weight gain inhibition compared with that of HF group. ( p < 0.01).

B(300)군과 G(100)군의 투여 10일차 평균체중은 각각 22.69 ± 0.40g, 22.62 ± 0.30g로 HF군의 24.63 ± 0.46g대비 유의적인 체중증가 억제가 확인되었고 이후 시험종료시인 41일까지 체중감소가 유의성 있게 유지되었다(p<0.01). The mean daily body weight of the B (300) and G (100) groups was 22.69 ± 0.40g and 22.62 ± 0.30g, respectively, which was significantly lower than the 24.63 ± 0.46g of HF group. Body weight loss was significantly maintained by day ( p <0.01).

시험그룹에서 비만대조군인 HF군 대비 유의적인 체중증가 억제를 보인 개 시 시점은 각각 B(300)군과 G(100군)에서 투여 10일차, BG(400)군에서 투여 3일차로 확인되어 본 발명 조성물 투여시 체중저하효과의 발현이 더 빠르게 진행됨을 확인할 수 있었다.
BG (400) and BG (400) groups showed a significant inhibition of body weight gain compared to the HF group in the test group in the B (300) and G (100) It was confirmed that the expression of the weight-lowering effect progressed more rapidly when the inventive composition was administered.

2) 체중 증가량 2) Weight gain

6주 동안의 시험군(G1, G2, G3, G4, G5)의 체중 증가량을 비교하였다. 그 결과는 도 3과 같다. We compared the body weight gain of the test group (G1, G2, G3, G4, G5) for 6 weeks. The results are shown in FIG.

NC군과 HF군을 비교하면 HF군에서 유의성 있게 체중증가량을 보였다(p<0.01).Compared with the NC group and the HF group, the HF group showed significant weight gain ( p <0.01).

HF군과 시험물질투여군간을 비교하면 시험전반에 걸쳐 시험물질투여군에서 체중증가율이 유의성 있게 낮아졌다(p<0.01).Compared with the HF group and the test substance administration group, the body weight gain rate was significantly lower in the test substance-administered group throughout the test ( p <0.01).

시험물질투여군은 가르시니아 캄보지아와 홍미삼농축액의 혼합물질군(BG(400)), 카르시니아 캄보지아군(G(100)), 홍미삼농축액군(B(300))순으로 체중증가율이 낮아지는 경향을 보였다. In the test substance group, the body weight gain rate tended to decrease in the order of B (400), G (100) and B (300) in the order of mixture group of Garcinia cambogia and red ginseng extract It looked.

HF군과 시험물질투여군의 시험종료일인 42일째의 체중을 비교하였을 때, B(300), G(100), BG(400)군에서 각각 39.63%, 51.34%, 55.37%의 체중이 감소하였다.Body weight of 39.63%, 51.34% and 55.37% in B (300), G (100) and BG (400) groups were decreased when the body weight of the HF group and the test substance administration group were compared at the 42nd day of the test.

본 시험에 사용한 3종류의 시험물질은 HF과 비교함으로써, 모두 항비만 효능이 있음이 확인되었고 그것들의 항비만 효과의 세기는 가르시니아 캄보지아와 홍미삼농축액의 혼합물질군(BG(400)), 가르시니아 캄보지아군(G(100)), 홍미삼농축액군(B(300)) 순으로 높았다. The three test substances used in this study were found to have anti-obesity effects by comparison with HF. The intensity of their anti-obesity effect was found to be a mixed substance group (BG (400)) of Gardiania cambogia and red hot pepper concentrate, Garcinia cambogia (G (100)) and red ginseng concentrate (B (300)).

이상의 결과로부터 본 연구의 최종 제조물인 가르시니아 캄보지아와 홍미삼농축액의 혼합조성물은 가르시니아 캄보지아추출물을 단독으로 사용할 때보다 높은 체중감소를 보임으로 홍미삼농축액이 가르시니아 캄보지아의 감비효능을 상승적으로 작용하게 하는 보완적 효능이 확인되었다.
From the above results, it can be concluded that the mixed composition of the final product of the present invention, Garnia cambogia and the red ginseng extract, shows a weight loss higher than that of the case of using the extract of Garcinia cambogia alone, so that the concentration of the red ginseng extract increases the complementary efficacy .

3) 평균 일주일 식이섭취량 3) Average weekly dietary intake

6주 동안의 시험군(G1, G2, G3, G4, G5)의 평균 일주일 식이섭취량을 비교하였다. 그 결과는 표 8과 같다. The average weekly dietary intake of the test group (G1, G2, G3, G4, G5) for 6 weeks was compared. The results are shown in Table 8.

Figure 112013066485210-pat00005
Figure 112013066485210-pat00005

** P < 0.01 정상 식이군과 비교한 것 ** P <0.01 compared with normal diet group

## P < 0.01 고지방 식이군과 비교한 것
## P <0.01 compared with high fat diet group

시험군 모두에서 NC군과 비교시 평균사료 섭취량에서 유의한 감소를 보였다(p<0.01). 또한 HF군과 비교시 B(300)군에서의 2주차, 6주차의 사료섭취량을 제외하고 모든 시험군에서 HF군 대비 유의성 있는 차이는 확인되지 않았다. NC군이 고지방 식이를 섭취한 HF군보다 섭취량이 높은 것으로 나타난 것은 고지방 식이가 상대적으로 열량이 높아서인 것으로 판단되었다.
Compared with the NC group, there was a significant decrease in mean feed intake in both groups ( p <0.01). There was no significant difference between HF group and HF group in all test groups except for feed intake at 2 and 6 weeks in group B (300). The NC group showed higher intake than the HF group consuming the high fat diet because the high fat diet was relatively high in calories.

4) 식이효율 4) Dietary efficiency

6주 동안 시험군(G1, G2, G3, G4, G5)의 식이효율을 비교하였다. 그 결과는 도 4와 같다.The dietary efficiency of the test group (G1, G2, G3, G4, G5) was compared for 6 weeks. The result is shown in Fig.

식이효율(FER)은 1일 체중증가량을 1일 식이섭취량으로 나눈 것이다. 식이효율이 낮은 것은 높은 것에 비하여 사료섭취량에 비해 체중증가량이 적음을 나타내는 지표이다.Dietary efficiency (FER) is the daily weight gain divided by the daily dietary intake. Low dietary efficiency is an indicator of lower body weight gain compared to high feed intake.

계산한 식이효율은 HF군, B(300)군, G(100)군, BG(400)군 모두에서 NC군 대비 유의적으로 높은 경향을 보였다(p<0.01).The calculated dietary efficiency was significantly higher in the HF, B (300), G (100) and BG (400) groups than the NC group ( p <0.01).

시험군의 경우 비만유도군인 HF군에 비해 약 1/2 수준의 낮은 식이효율을 나타내었다(p<0.01).( P <0.01) in the test group compared to the HF group, which is an inducer of obesity.

각 군별 식이효율을 살펴보면 NC군 0.025 ± 0.002, HF군 0.101 ± 0.005, B(300)군 0.064 ± 0.005, G(100)군 0.049 ± 0.005, BG(400)군 0.044 ± 0.003을 나타내어 HF군은 NC군대비 75.2%, 증가된 식이 효율을 보임으로서 비만사료의 급여는 체중증가의 원인으로 판정되었다.The HF group showed the highest efficiency in the NC group (0.025 ± 0.002), the HF group (0.101 ± 0.005), the B group (0.03 ± 0.005), the B group (0.04 ± 0.005) As a result of the increased dietary efficiency of 75.2% compared to the army, the obesity feed was judged to be the cause of weight gain.

HF군대비 항비만물질투여군의 식이효율은 B(300)군이 36.6%, G(100)군이 51.5%, BG(400)군이 56.4%의 감소한 결과를 보였다(p<0.01).Feed efficiency of the HF group compared to anti-obesity material group is B (300) the group is 36.6%, G (100) the group is 51.5%, BG (400) group showed a decrease results in 56.4% (p <0.01).

이러한 결과는 3종류의 항비만 물질 모두에서 체중증가 억제능이 있는 것이 확인되었다. 특히 가르시니아 캄보지아와 홍미삼농축액의 혼합조성물 처치군에서 가장 높은 체중증가 억제율을 나타내어 홍미삼농축액이 가르시니아 캄보지아의 체중증가 억제력의 증가에 상승적으로 기여하고 있음이 확인되었다.
These results confirmed that all three anti - obesity substances have the ability to inhibit weight gain. Especially, the highest inhibition rate of weight gain was observed in the mixed composition treatment group of Garcinia cambogia and red ginseng extract. Therefore, it was confirmed that the red ginseng concentrate contributes synergistically to the increase of weight gain suppression of Garcinia cambogia.

5) 상대장기 중량측정5) Relative organ weight measurement

6주 경과 후 시험군(G1, G2, G3, G4, G5)의 상대장기 중량을 측정하여 비교하였다. 그 결과는 표 9와 같다.After 6 weeks, the relative organ weights of the test groups (G1, G2, G3, G4, and G5) were measured and compared. The results are shown in Table 9.

Figure 112013066485210-pat00006
Figure 112013066485210-pat00006

* P < 0.05 정상 식이군과 비교한 것 * P <0.05 compared with normal diet group

** P < 0.01 정상 식이군과 비교한 것 ** P <0.01 compared with normal diet group

# P < 0.05 고지방 식이군과 비교한 것 # P <0.05 compared with high fat diet group

## P < 0.01 고지방 식이군과 비교한 것
## P <0.01 compared with high fat diet group

부고환주위 지방축적량 : 많은 연구에서 에너지 섭취량보다는 식이조성 특히 지방의 섭취비율이 체지방 축적에 더 영향을 미친다고 보고되었다(Miller et al., 1990). 본 연구결과에서도 체중대비 부고환주위 지방의 상대중량(%)은 HF군의 경우 5.55 ± 0.61%으로 NC군의 1.50 ± 0.99%에 비하여 270.0% 증가한 것으로 나타났다, B(300)군 4.09 ± 0.91%, G(100)군 3.33 ± 1.27%, BG(400)군 3.19 ± 0.75%은 HF군의 부고환 주위 지방의 상대중량과 비교시 각각 35.7%, 66.7%, 74.0% 감소한 것으로 확인되었다. 고지방 식이를 섭취한 모든 군(HF군, B(300)군, G(100)군, BG(400)군)은 NC군대비 유의적으로 높은 결과를 보이긴 하였으나(p<0.01), 시험물질투여군(B(300)군, G(100)군, BG(400)군)은 HF군대비 유의적으로 낮은 결과를 나타내었다(p<0.01). 내장지방 축적은 여러 대사질환을 일으키는 중요한 요소로 알려져 있으므로 본 시험물질 특히 홍미삼농축액과 가르시니아 캄보지아 혼합조성물이 부고환 지방축적억제, 넓게는 내장지방 축적 억제능이 우수하여, 고지방 식이로 인한 대사 장애를 효과적으로 예방할 수 있을 것으로 사료되었다.Fat accumulation around the epididymis: Many studies have reported that dietary composition, especially fat intake, has a greater effect on body fat accumulation than energy intake (Miller et al ., 1990). In the present study, the relative weight (%) of epididymal fat around the body weight was 5.55 ± 0.61% in the HF group and 270.0% in the NC group, compared with 1.50 ± 0.99% in the NC group and 4.09 ± 0.91% 3.33 ± 1.27% in the G (100) group and 3.19 ± 0.75% in the BG (400) group were decreased by 35.7%, 66.7% and 74.0%, respectively, when compared with the relative weights of the epididymal fat around the HF group. All groups (HF, B (300), G (100), and BG (400)) consumed high fat diets were significantly higher than the NC group ( p <0.01) (Group B (300), group G (100), group BG 400) were significantly lower than those of HF group ( p <0.01). Since the accumulation of visceral fat is known to be an important factor causing various metabolic diseases, the test compound, especially the mixture of the red ginseng extract and the garnia cambogia, has an excellent inhibitory effect on epididymal fat accumulation and broadly inhibits visceral fat accumulation and effectively prevents the metabolic disorder caused by the high fat diet .

간의 상대 중량 : 간의 상대 중량이 높아지는 이유는 콜레스테롤과 지방이 간에 집적된 결과이다. 본 연구에서도 HF군이 NC군대비 간의 상대중량이 높게 나타나고 있다. 이는 고지방 식이의 급여에 따른 결과와 일치한다. HF군과 시험물질투여군을 비교하였을 때 시험물질 투여군에서 BG(400)군, G(100)군, B(300)군 순으로 간의 상대중량이 낮아졌다. 이 결과로부터 본 연구에 사용된 항비만물질 3종류 모두 간지방축적에 억제능력이 있으며 특히 가르시니아 캄보지아와 홍미삼농축액의 혼합조성물이 가장 효과적인 간지방축적 억제능을 보였다.Relative Weight of Liver: The reason that the relative weight of liver increases is the result of accumulation of cholesterol and fat in the liver. The relative weight of the HF group versus the NC group is also high in this study. This is consistent with the results of the high fat dietary allowance. The relative weight of BG (400) group, G (100) group and B (300) group was lower in the test substance administration group when HF group and test substance administration group were compared. From these results, all three kinds of anti-obesity substances used in this study were able to inhibit liver fat accumulation. In particular, a composition of Garcinia cambogia and red hot pepper concentrate showed the most effective inhibitory effect on liver fat accumulation.

신장의 상대 중량 : 신장의 상대중량은 고지방식이 섭취로 작아졌고 이는 체중의 증가에 비해 신장의 크기 증가는 없었기 때문으로 사료되었다. 시험물질간의 신장의 무게차이는 나타나지 않았으나 전체적으로 HF군보다는 신장의 상대중량이 높게 측정되었다.Relative weight of the kidneys: The relative weight of the kidneys was lowered by the high fat diet, which was thought to be due to the absence of height increase compared to the increase in body weight. There was no significant difference in kidney weight among the test materials, but the relative height of the kidneys was higher than that of the HF group as a whole.

비장의 상대 중량 : 비장의 상대 중량은 NC군과 HF군 간, HF군과 시험물질투여군간에 의미 있는 결과를 찾을 수 없었다.Relative weight of spleen: The relative weight of the spleen was not significant between the NC group and the HF group, and between the HF group and the test substance administration group.

결론적으로 시험물질을 처리함으로서 부고환지방 상대중량, 간 상대중량치를 낮추고 신장의 상대중량을 높여주는 우수한 효과를 보여줌으로써 지방축적 억제능이 우수함을 간접적으로 입증하였으며, 특히 이런 효능은 BG(400)군에서 가장 높게 측정되어 개발물질의 감비효능이 우수함을 확인할 수 있었다.
In conclusion, it was proved indirectly by the test substance treatment that the excellent effect of lowering the relative weight of epididymal fat, relative weight of liver and relative weight of kidney, And it was confirmed that the cost-effectiveness of the developed material is excellent.

6) 혈액 생화학적 지수 검사6) Blood biochemical exponential test

각 시험군(G1, G2, G3, G4, G5) 혈장내의 ALP, AST, ALT 및 지방 프로파일(HDL, LDL, TC, TG)의 함량을 측정한 결과는 표 10과 같았다. The contents of ALP, AST, ALT and lipid profiles (HDL, LDL, TC, TG) in plasma of each test group (G1, G2, G3, G4 and G5) were measured.

Figure 112015010791985-pat00016
Figure 112015010791985-pat00016

* P < 0.05 정상 식이군과 비교한 것 * P <0.05 compared with normal diet group

** P < 0.01 정상 식이군과 비교한 것 ** P <0.01 compared with normal diet group

# P < 0.05 고지방 식이군과 비교한 것 # P <0.05 compared with high fat diet group

## P < 0.01 고지방 식이군과 비교한 것 ## P <0.01 compared with high fat diet group

@ P < 0.05 홍미삼농축액시험군과 비교한 것 @ P < 0.05 Compared with test group of red ginseng extract

@@ P < 0.01 홍미삼농축액시험군과 비교한 것
@@ P <0.01 Compared with test group of red hot pepper concentrate

간 효소치 관련하여 혈청 중 AST와 ALT 활성은 고지방식이, 고콜레스테롤식이, 알코올 등으로 간세포의 독성이 생기면 간 실질세포의 장애가 발생하여 간세포가 파괴되고 혈액 중으로 이들 효소의 방출이 항진되어 활성이 증가한다고 보고되었고(Plaa and Charbonneau, 1994), 또한 급성 신부전증, 고지혈증 및 폐경색증이 있을 경우에도 간세포 장애가 고도로 진행되면 혈청중 ALT, AST 및 ALP 활성 수치가 동시에 높아져 간장의 담즙산 배설장애가 유발되고 이로 인해 혈청 콜레스테롤 함량이 상승되는 것으로 알려져 있다(Kim, 1990).AST and ALT activities in serum are related to hepatic enzymes. When hepatocellular toxicity is caused by high fat diet, high cholesterol diet, alcohol, etc., hepatic cell damage occurs and hepatic cells are destroyed and the release of these enzymes into blood is enhanced. (Plaa and Charbonneau, 1994), and even in the presence of acute renal failure, hyperlipidemia and pulmonary infarction, elevated levels of ALT, AST and ALP levels in the serum result in elevated levels of bile acid excretion in the liver, It is known that the serum cholesterol content is increased (Kim, 1990).

ALP 활성 : NC군대비 HF군은 42.3%의 유의성 있는 활성증가를 보였다(p<0.01). 시험군의 경우 B(300)군, G(100)군과 BG(400)군의 활성은 각각 262.89 ± 34.67IU/l, 254.91 ± 16.72IU/l, 240.34 ± 33.14IU/측정되어, HF대비 16.4, 19.0, 23.6%의 유의성 있는 감소를 하였다(p<0.01).ALP activity: HF group compared with NC group showed a significant increase of activity (42.3%) ( p <0.01). In the test group, activities of B (300), G (100) and BG (400) were 262.89 ± 34.67 IU / l, 254.91 ± 16.72 IU / l and 240.34 ± 33.14 IU / , 19.0, and 23.6%, respectively ( p <0.01).

AST와 ALT 활성 : HF군대비 시험물질군의 AST와 ALT의 활성은 ALP와 유사한 경향을 보이면서 수치가 낮아졌으나, 유의성은 BG(400)군에서만 인정되었다(AST: p<0.01, ALT: p<0.05).AST and ALT activity: The AST and ALT activities of the test substance group were similar to those of the HF group, but the significance was only observed in the BG (400) group (AST: p <0.01, ALT: p < 0.05).

총콜레스테롤(T-CHO) 함량 : 총콜레스테롤(T-CHO)은 NC군의 93.52 ± 3.87 mg/dL과 비교시 HF군에서 156.48 ± 8.41mg/dL으로 67.3% 증가하여 가장 유의적으로 높게 확인되어, 고콜레스테롤 식이 급여는 혈중콜레스테롤 증가와 직결됨을 확인할 수 있었다(p<0.01). HF군과 비교시 시험물질투여군 B(300)군, G(100)군과 BG(400)군에서 각각 138.12 ± 16.96mg/dl, 133.71 ± 17.29mg/dl, 120.32 ± 13.05mg/dl로 11.7%, 14.6%, 23.1% 수준으로 유의적으로 감소하였으며(p<0.01), 이 중 BG(400)군의 경우 B(300)군대비 유의적으로 감소를 보여 시험물질 처치군 중 가장 우수한 T-CHO 증가 저해효과를 보였다(p<0.05). Total cholesterol (T-CHO) content: Total cholesterol (T-CHO) was the highest in the HF group compared with the NC group (93.52 ± 3.87 mg / dL, 156.48 ± 8.41 mg / dL, 67.3% , And high cholesterol diet ( p <0.01). In the comparison with the HF group, it was 138.12 ± 16.96 mg / dl, 133.71 ± 17.29 mg / dl, and 120.32 ± 13.05 mg / dl in the group B (300), G (100) ( P <0.001), but the BG (400) group showed a significant decrease compared to the B (300) group, indicating that the highest T-CHO ( P <0.05), respectively.

TG 함량 : TG 함량은 NC군의 21.16 ± 2.82mg/dl과 비교시 HF군에서 43.56 ± 4.45mg/dl으로 105.9%의 높은 증가를 나타내었다(p<0.01). HF군과 비교시 B(300)군, G(100)군, BG(400)군은 각각 30.09 ± 4.16mg/dl, 28.73 ± 4.31mg/dl, 25.31 ± 3.61mg/dl으로 30.92%, 34.04%, 41.9%의 유의성 있는 감소를 보였다(P<0.01). 이러한 결과는 T-CHO에서의 결과와 동일한 경향으로 시험물질이 지질의 축적을 효과적으로 억제함을 확인할 수 있다. TG의 축적억제 효과의 순서는 BG(400), G(100), B(300)으로 BG(400)에서 가장 높았다.TG content: The TG content was 43.56 ± 4.45mg / dl in the HF group (105.9%) compared with 21.16 ± 2.82mg / dl in the NC group (p <0.01). In comparison with HF group, B (300), G (100) and BG (400) groups were 30.09 ± 4.16mg / dl, 28.73 ± 4.31mg / dl and 25.31 ± 3.61mg / , And 41.9%, respectively (P <0.01). These results confirm that the test substance effectively inhibits lipid accumulation with the same tendency as in T-CHO. BG (400), G (100) and B (300) showed the highest inhibitory effect of TG on BG (400).

LDL-C 함량 : 총콜레스테롤 결과와 동일한 패턴으로 NC군의 2.52 ± 1.57mg/dl과 비교시 HF군에서 7.05 ± 0.48mg/dl으로 179.8% 증가하여 가장 유의적으로 높게 확인되었다(p<0.01). HF군과 비교시 B(300)군, G(100)군과 BG(400)군은 각각 5.78 ± 1.04mg/dl, 5.04 ± 1.29mg/dl, 4.21 ± 1.13mg/dl로 18.0%, 28.5%, 40.3% 수준으로 유의적으로 감소하였으며(p<0.01), 이 중 BG(400)군의 경우 B(300)군대비 유의적으로 감소를 보여 시험물질 처치군 중 가장 우수한 LDL-C 증가 억제효과를 보였다(p<0.01). LDL-C content: Total cholesterol in the same pattern as the result of increased 179.8% to 7.05 ± 0.48mg / dl in comparison HF group and 2.52 ± 1.57mg / dl in the NC group was confirmed by the highly significant (p <0.01) . In the HF group, B (300), G (100), and BG (400) groups were 5.78 ± 1.04 mg / dl, 5.04 ± 1.29 mg / dl and 4.21 ± 1.13 mg / , And 40.3% ( p <0.01), respectively. The BG (400) group showed a significant decrease compared to the B group (300) ( P <0.01), respectively.

HDL-C함량 : HDL-C의 경우는 NC군의 73.68 ± 5.40mg/dl과 비교시 HF군에서 51.43 ± 4.09mg/dl으로 유의적으로 낮게 확인되었다(p<0.01). HF군과 비교시 B(300)군, G(100)군, BG(400)군에서 각각 58.01 ± 6.72mg/dl, 63.61 ± 4.02mg/dl, 70.71 ± 10.62mg/dl로 12.8%, 23.7%, 37.5%의 유의성 있는 증가를 보였다(p<0.01).
HDL-C content was significantly lower in HDL-C group than in NC group (73.68 ± 5.40mg / dl, 51.43 ± 4.09mg / dl in HF group) ( p <0.01). Dl, 63.61 ± 4.02 mg / dl and 70.71 ± 10.62 mg / dl in the B (300), G (100) and BG (400) , And 37.5%, respectively ( p <0.01).

혈청 중 지질 함량(HDL-C, LDL-C, T-CHO, TG) 결과 분석 결과로부터 고지방식이에 의해 높아진 혈중 지질수치에 대한 개선효과는 BG(400)군, G(100)군, B(300)군 순으로 확인되었다. 이러한 결과는 간효소활성 지표결과와 동일한 경향을 보였으며, 이 중 복합조성물질 처치군인 BG(400)군의 경우 모든 시험그룹 중 HF군대비 가장 개선된 수치를 보였다. 이상의 혈액 생화학적 지표로부터 본 연구에 사용된 3종류의 시험물질이 혈액 생화학적 지수의 개선효과를 보이며, 이 중에서도 BG(400)군이 가장 좋은 수치를 보였다. 이것은 항비만 소재로 가르시니아 캄보지아 만을 사용할 때보다 홍미삼농축액을 혼합처리함으로써 여러 가지의 혈액의 생화학적 지표를 개선할 수 있는 있고, 비만에 의해 유발되는 심혈관계 질환의 위험성을 줄여 줄 주는 효과를 얻을 수 있음을 확인하였다.
Serum Lipid Levels (HDL-C, LDL-C, T-CHO, TG) were analyzed by BG (400) (300), respectively. These results were similar to those of hepatic enzyme activity index. Among them, BG (400) group showed the most improved value compared to HF group among all test groups. From the above biochemical markers, three kinds of test materials used in this study showed improvement of blood biochemical index, among which BG (400) group showed the best value. It is possible to improve the biochemical indicators of various blood by mixing the red ginseng extract with the mixture of the red ginseng extract rather than using Garcinia cambogia alone as an anti-obesity material, and it can reduce the risk of obesity-induced cardiovascular diseases Respectively.

7) 부고환 지방조직 크기 및 조직학적 검사7) Epididymal adipose tissue size and histological examination

각 시험군(G1, G2, G3, G4, G5)의 지방세포 크기를 측정한 결과는 도 5, 도 6 및 표 11과 같다. The fat cell sizes of the test groups (G1, G2, G3, G4 and G5) were measured, and the results are shown in FIG. 5, FIG. 6 and Table 11.

Figure 112013066485210-pat00008
Figure 112013066485210-pat00008

각 값은 평균 ± 표준 편차로 나타낸다(n=5).Each value is expressed as mean ± standard deviation (n = 5).

** P < 0.01 정상 식이군과 비교한 것 ** P <0.01 compared with normal diet group

# P < 0.05 고지방 식이군과 비교한 것 # P <0.05 compared with high fat diet group

## P < 0.01 고지방 식이군과 비교한 것
## P <0.01 compared with high fat diet group

장기간의 고지방 섭취는 지방세포의 증대를 유도하는 것으로 알려져 있으며 (DeFronzo 2004), 지방세포 크기의 측정은 항비만 효능을 입증할 수 있는 효과적인 방법으로 알려져 있다(Park et al., 2005). Long-term high-fat intake is known to induce adipocyte proliferation (DeFronzo 2004), and measurement of adipocyte size is known to be an effective method to demonstrate anti-obesity efficacy (Park et al al ., 2005).

흰색 지방조직에 속하는 부고환 지방조직을 H&E 염색을 통하여 현미경으로 관찰 소견과 영상 분석기를 이용하여 지방세포의 크기를 측정한 결과를 도 5, 6과 표 4에 표시하였다.The epididymal adipose tissue belonging to white adipose tissue was observed under a microscope through H & E staining and the results of measurement of adipocyte size using an image analyzer were shown in FIGS. 5, 6 and 4.

고지방식이를 섭취한 HF군의 지방세포의 크기는 일반식이를 섭취한 NC군과 비교하여 현저히 증가하였고(p<0.01), 고지방 식이에 의한 지방세포의 크기 증가는 시험물질(B(300)군, G(100)군, BG(400)군) 투여에 의해 억제되는 것을 확인하였다(도 5 및 6). The adipocyte size of the HF group consuming the high fat diet increased significantly ( p <0.01) compared to that of the NC group consuming the normal diet, (100) group and BG (400) group) (Figs. 5 and 6).

각 군별 부고환 지방조직의 지방세포 크기를 상대적으로 비교한 결과 HF군의 상대적인 지방세포 크기를 1.0로 환산하였을 시 NC군에서 0.09배로서 HF군에서 부고환주위 지방조직의 축적이 가장 많이 이루어진 것이 확인이 되었다. 반면 시험물질 처치군인 B(300)군, G(100)군, BG(400)군은 각각 0.68배, 0.63배, 0.56배로 유의적으로 감소한 결과를 보였으며, 시험그룹 중 BG(400)군에서 가장 효과적인 지방세포 증대억제를 보였다(p<0.01, 표 4).
The relative fat cell size of the epididymal adipose tissue of each group was compared to 1.0 in the HF group and 0.09 in the NC group. It was confirmed that the accumulation of epididymal adipose tissue was most abundant in the HF group . In contrast, BG (400), BG (400), and BG (400) groups were significantly decreased by 0.68, 0.63, and 0.56 times, respectively. The most effective inhibition of adipocyte proliferation was observed ( p <0.01, Table 4).

8) 간 조직학적 평가8) Histopathological evaluation

각 시험군(G1, G2, G3, G4, G5) 부검하여 간의 조직을 평가하였다. 그 결과는 도 7과 같다.Each test group (G1, G2, G3, G4, G5) was autopsied and the liver tissue was evaluated. The results are shown in FIG.

부검시 채취한 간의 조직학적 소견은 NC군에 비해 HF군에서 공포가 많이 발견되었다. 이는 간세포내 지질이 침윤되어 생겨난 것으로 비만환자의 지방간 유발시에 많이 나타난다. 이러한 결과는 HF의 간의 상대중량의 증가와 잘 부합한다.Histopathologic findings of the liver during autopsy were more common in the HF group than in the NC group. This is caused by the infiltration of lipids in hepatocytes, which is frequently observed in fatty liver of obese patients. These results are in agreement with the increase in the relative weight of HF.

시험물질투여군(B(300)군, G(100)군, BG(400)군)에서 지질축적 소견들이 관찰은 되고 있으나 감소하여 관찰되었다. 일부 관찰되기는 하였으나 HF군에서 관찰되는 큰 공포들은 관찰되지 않았다. Lipid accumulation was observed in the experimental group (group B (300), group G (100), group BG (400)). Although some observations were made, no significant fear was observed in the HF group.

BG(400)군에서는 지질의 침윤이 거의 관찰되지 않아 비만에 의한 지방간이 현저하게 완화되었음을 확인할 수 있었다. In the BG (400) group, lipid infiltration was hardly observed and it was confirmed that fatty liver caused by obesity was remarkably alleviated.

이상의 시험결과로부터 비만대조군(HF)대비 시험물질군의 각종 측정결과의 상대적 증감율(%)을 정리하면 표 12와 같다.From the above test results, the relative increase / decrease rate (%) of various measurement results of the test substance group relative to the obesity control group (HF) is summarized in Table 12.

B(300)B (300) G(100)G (100) BG(400)BG (400) 체중weight -39.6-39.6 -51.3-51.3 -55.4-55.4 식이효율Dietary efficiency -36.6-36.6 -51.5-51.5 -56.4-56.4 부고환주위 지방량Fat around epididymis -35.7-35.7 -66.7-66.7 -74.0-74.0 ALPALP -16.4-16.4 -19.0-19.0 -23.6-23.6 ASTAST -15.5-15.5 -15.8-15.8 -24.2-24.2 ALTALT -5.9-5.9 -7.0-7.0 -13.3-13.3 HDL-CHDL-C +12.8+12.8 +23.7+23.7 +37.5+37.5 LDL-CLDL-C -18.0-18.0 -28.5-28.5 -40.3-40.3 T-CHOT-CHO -11.0-11.0 -14.6-14.6 -23.1-23.1 TGTG -30.9-30.9 -34.0-34.0 -41.9-41.9

3) 결론 3) Conclusion

상기의 결과를 종합해보면 비만 유도군인 HF군은 일반 식이군인 NC군과 비교시 지방사료에 포함된 과잉에너지의 장기적인 섭취에 의하여 체내에 지방축적이 이루어지면서 비만이 효과적으로 유도된 것으로 확인되었다. In conclusion, obesity induction group, HF group, was proved to induce obesity by accumulation of fat in body by long-term intake of excess energy included in fat diet as compared with NC group, which is a general diet group.

시험물질투여군인 B(300)군, G(100)군, BG(400)군은 시험초기 및 시험종료 시의 체중, 체중증가량, 일일사료 섭취량과 식이효율, 혈액생화학수치, 상대장기중량, 조직염색상 등의 모든 시험평가 항목에서 비만 유도군인 HF군과 비교시 개선된 결과를 보였다. BG (300), G (100), and BG (400) groups were divided into three groups according to body weight, weight gain, daily feed intake and dietary efficiency, blood biochemical data, relative organ weight, And color were improved in comparison with HF group, which is an inducer of obesity.

시험군 모두에서 6주기간 동안 유의적으로 경시적인 체중 증가량의 감소 및 식이효율 저하를 보임으로써, 체중증가 억제력이 있음을 증명하여 주었다. 혈액생화학 검사결과에서도 HF군과 비교시 장기간의 고지방사료 섭취로 인하여 상승된 혈중 지질수치(HDL, LDL, T-CHO, TG)를 개선과 간수치(ALP, AST, ALT)의 개선소견을 나타내었다. In both groups, significant reductions in body weight gain and decreased dietary efficiency over a 6 - week period were demonstrated, demonstrating the ability to inhibit weight gain. Blood biochemical tests showed improved serum lipid levels (HDL, LDL, T-CHO, TG) and improved liver function (ALP, AST, ALT) due to long-term high fat intake compared to HF .

시험물질은 주요장기인 부고환 지방조직 크기와 간 조직학적 평가 결과에서 부고환 주위지방세포의 평균크기 감소를 동반한 간의 지방성 변성을 완화시켜 주는 것으로 확인되었다. The test substance was found to alleviate liver fatty degeneration accompanied by a decrease in the average size of epididymal adipocytes in epididymal adipose tissue size and histologic evaluation results.

종합적으로 시험물질 모두에서 감비효능이 확인되었으며 지방간, 부고환주위의 지방세포크기, 혈액의 생화학 지표 등에서 개선효능이 탁월하였다. Overall, the efficacy of the test was confirmed in all test substances, and the improvement effect was excellent in the fatty liver, the fat cell size around the epididymis, and the biochemical index of the blood.

개선정도는 BG(400)군, G(100)군, B(300)군 순으로 높았다.The degree of improvement was higher in BG (400) group, G (100) group and B (300) group.

특히 홍미삼농축액과 가르시니아 캄보지아를 혼합하여 처리할 경우, 가르시니아 캄보지아 혹은 홍미삼농축액을 단독으로 사용하는 것보다 감비효능이 높았으며, 간지방 수치, 부고환의 지방 축적량, 혈액의 T-CHO, ALP< AST. ALT, LDL-C수치를 낮추어 주고, HDL-C는 높여주는 부수적인 효과도 있었다.Especially, when mixed with red ginseng concentrate and Garcinia cambogia, it was more effective than Garcinia cambogia or red ginseng extract alone, and liver fat level, epididymal fat accumulation, blood T-CHO, ALP <AST. ALT, LDL-C levels, and HDL-C levels.

따라서 본 연구에서 개발된 BG(400)은 가르시니아 캄보지아의 감비효능을 능가하는 효능을 가진 것으로 판명되었다.Therefore, the BG (400) developed in this study proved to have an efficacy exceeding the potency efficacy of Garcinia cambogia.

또한, 칼로리 저감 및 진세노사이드 Rg3강화 홍미삼농축액은 본 개발물질의 주요 물질로 사용된 가르시니아 캄보지아의 감비효과를 상승시키며, 간이나 혈액 등의 심혈관계 건강지표를 개선함으로써 부작용 경감에 우수한 물질로 판단되었다.
In addition, calorie reduction and Ginsenoside Rg3 enriched red ginseng concentrate are considered to be excellent substances for reducing side effects by improving cardiovascular health indicators such as liver and blood, and improving the cost-effectiveness of Garcinia cambogia used as a main material of the present development material. .

제조예Manufacturing example

가. 원료를 엄선 구입 후 선별하여 세척한다.end. After purchasing the raw materials carefully selected, they are cleaned.

나. 복분자추출액-원료의 50배 상당의 정제수를 넣은 다음, 90~95℃에서 48시간 추출한다.I. Bokbunja extract - Purified water equivalent to 50 times of the raw material is added, and then extracted at 90 to 95 ° C for 48 hours.

감초추출액-원료의 100배 상당의 정제수를 넣은 다음, 90~95℃에서 48시간 추출한다.Licorice extract - Purified water equivalent to 100 times of the raw material is added, and then extracted at 90 to 95 ° C for 48 hours.

다. 홍미삼농축액 All. Red hot pepper concentrate

1) 홍미삼 제조공정 : 수삼의 중미 이하만을 수집하여 수도수로 깨끗이 세척한 후, 85~90℃에서 4~8시간 증숙한 다음, 30℃~35의 열풍 건조기에서 2~3일 건조후 10일간 태양광하에서 건조한다(벤조피렌검사에서 0.2ppb이하를 합격품으로 한다).      1) Hongmisam manufacturing process: Only the middle and lower fruits of ginseng were collected, washed thoroughly with tap water, boiled for 4-8 hours at 85 ~ 90 ℃, dried for 2 ~ 3 days in 30 ℃ ~ 35 hot air dryer, Dry in sunlight (less than 0.2 ppb in the benzopyrene test).

2) 홍미삼추출단계 : 홍미삼 10배수의 50%-에탄올를 넣고, 50~70℃에서 8시간식 3회추출한다. 그 후에 10배수의 정제수를 넣고 90~95℃에서 3회추출한다. 6회분의 추출액을 모두 모아 50℃에서 감압농축하여 20°brix용액이 되도록 한다. 이때 에탄올는 완전히 제거되어야 한다.      2) Extraction step of red ginseng: 50% ethanol of red ginseng 10 times is added and extracted three times for 8 hours at 50 ~ 70 ℃. After that, 10 times more purified water is added and extracted three times at 90 to 95 ° C. Six batches of extracts are collected and concentrated under reduced pressure at 50 ° C to give a 20 ° brix solution. At this time, ethanol should be completely removed.

3) 진세노사이드 Rg3가 증폭된 홍미삼추출액 제조 단계: 추출액을 구연산으로 pH 3~3.5가 되도록 조정한 다음, 121℃ 오토클레이브에 설치하고 2~3시간 증숙한다.      3) Preparation of red ginseng extract with ginsenoside Rg3 amplification: Adjust the extract to pH 3 ~ 3.5 with citric acid, then place in 121 ℃ autoclave and boil for 2-3 hours.

4) 카로리 저감 홍미삼농축액 제조단계: 121℃ 증숙이 끝난 홍미삼추출액에 50㎖에 100% 에탄올 100㎖ 비율로 혼합하여 잘 저어 홍미삼농축액을 균질화한 다음, 2~3시간 정취한 뒤, 원심분리나 필터를 통해 침전물을 제거한다. 침전물이 제거된 용액을 모아 50℃ 정도에서 감압농축하여 고형분이 60~65%가 되도록 하여 칼로리저감 진세노사이드Rg3가 강화된 홍미삼농축액을 제조한다.      4) Preparation stage of red peppermint concentrate with Karori reduction: 50 ml and 100 ml of ethanol were added to the red pepper extract at 121 ° C. After homogenizing the red pepper concentrate, it was matured for 2 ~ 3 hours and centrifuged or filtered To remove the precipitate. The precipitated solution is collected and concentrated under reduced pressure at about 50 ° C to give a solid content of 60 to 65%, thereby preparing a red hot ginseng concentrate having enhanced calorie-reduced ginsenoside Rg3.

라. 원료를 표 13의 배합비율로 교반탱크에 넣은 후, 충분히 교반한다.la. The raw materials are put into a stirring tank at a mixing ratio shown in Table 13, and then stirred sufficiently.

원료명Raw material name 비율(%)ratio(%) 복분자추출액(고형분 2% 이상)Bokbunja extract (solids content over 2%) 47.8047.80 감초추출액(고형분 1% 이상)Licorice extract (solids content 1% or more) 47.8047.80 홍미삼농축액(고형분 60% 이상)Red hot pepper concentrate (solid content more than 60%) 2.962.96 가르시니아 캄보지아Garcinia Cambogia 1.301.30 구연산Citric acid 0.140.14 합계Sum 100100

마. 87℃에서 1시간이상 살균한다.hemp. Sterilize at 87 캜 for 1 hour or more.

바. 교반탱크에서 필터처리 후, 충진한다.bar. After the filter is treated in a stirring tank, it is filled.

사. 충진이 완료된 제품을 70㎖로 폴리에칠렌필름파우치 포장한다.four. Pack the finished product into a polyethylene film pouch with 70 ml.

아. 포장된 제품을 기준 및 규격에 따라 시험하여 적합여부를 확인한 후, 출하한다.
Ah. Test the packaged product according to the standards and specifications, and confirm the suitability before shipment.

Claims (6)

인삼을 추출하는 공정;
상기 추출한 인삼을 농축하는 공정;
상기 농축한 인삼 추출물을 pH 3.0~6.5로 pH 조정하는 공정;
상기 pH 조정한 인삼 농축액을 고온고압처리하는 공정;
상기 고온고압처리한 인삼 농축액의 당류를 제거하는 제당(除糖) 공정;
상기 제당한 인삼을 농축하여 농축액을 제조하는 공정:
상기 인삼농축액에 가르시나아 캄보지아를 혼합하는 공정;을 포함하는 열처리 인삼추출물과 가르시니아 캄보지아를 이용한 항비만 조성물 제조방법.
A step of extracting ginseng;
Concentrating the extracted ginseng;
Adjusting the pH of the concentrated ginseng extract to pH 3.0 to 6.5;
Subjecting the pH-adjusted ginseng concentrate to high-temperature high-pressure treatment;
A saccharification step of removing the saccharide of the ginseng concentrate treated at high temperature and high pressure;
A step of concentrating the above-prepared ginseng to prepare a concentrated liquid;
And mixing the ginseng concentrate with a ginsenoside cambogia; and a method for producing an anti-obesity composition using the ginseng cambogia.
삭제delete 청구항 1에 있어서,
상기 제당 공정은 인삼 농축액에 에탄올을 혼합하여 용해한 다음, 정치하여 당류가 침전되면 이 용액을 걸러주어 당류를 제거하는 것을 특징으로 하는 열처리 인삼 추출물과 가르시니아 캄보지아를 이용한 항비만 조성물 제조방법.
The method according to claim 1,
The method for producing an anti-obesity composition using the heat-treated ginseng extract and the Garcinia cambogia, wherein the saccharification process comprises mixing and dissolving ethanol in a ginseng concentrate, and then allowing the saccharide to settle and then filtering out the saccharide.
청구항 1에 있어서,
상기 인삼은 백삼, 홍삼, 백미삼 및 홍미삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는 열처리 인삼추출물과 가르시니아 캄보지아를 이용한 항비만 조성물 제조방법.
The method according to claim 1,
Wherein the ginseng is at least one selected from the group consisting of white ginseng, red ginseng, white ginseng, and red ginseng, and a method for preparing an anti-obesity composition using Garcinia cambogia.
청구항 1, 청구항 3 및 청구항 4 중 어느 한 항의 방법에 의하여 제조되어 당류가 저감된 열처리 인삼추출물과 가르시니아 캄보지아를 함유하는 비만 개선용 식품 조성물.A food composition for improving obesity comprising a heat-treated ginseng extract and a Garcinia cambogia prepared by the method of claim 1, claim 3 and claim 4, wherein the saccharide is reduced. 삭제delete
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR100854688B1 (en) 2008-01-16 2008-08-27 주식회사 한국인삼공사 Functional beverages composing ginseng steamed red concentrated solution
KR100856678B1 (en) * 2007-04-12 2008-09-04 금산인삼약초 영농조합법인 Red ginseng beverage composition
KR100919134B1 (en) * 2008-10-22 2009-09-25 (주)해나천연물연구소 Extract of antiobestic ginseng with anti-obesity effect comprising high concentration of less polar ginsenoid and method of preparing the same

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