KR101478110B1 - Ursolic acid having anti-bacterial activity against causative bacteria of porcine respiratory disease complex and uses thereof - Google Patents
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Abstract
본 발명은 우르솔산(ursolic acid)을 유효성분으로 함유하는 가축 병원성 세균 억제용 항균 조성물, 특히 돼지 호흡기 복합감염증을 유발하는 세균인 액티노바실러스 플루로뉴모니애(Actinobacillus pleuropneumoniae), 파스투렐라 물토시다(Pasteurella multocida) A 또는 파스투렐라 물토시다 D를 억제하는 항균 조성물 및 상기 조성물을 유효성분으로 함유하는 가축 사료첨가제 및 가축사료에 관한 것으로, 본 발명의 우르솔산을 유효성분으로 함유하는 가축 병원성 세균 억제용 항균 조성물은 대체 항생제로서 활용할 수 있고, 사과 또는 감 등의 가공제품 생산과정에서 대량으로 발생하지만 대부분 그냥 버려지는 부산물인 껍질로부터 우르솔산을 생산할 수 있으므로 산업적으로 매우 유용하게 이용될 수 있다.The present invention relates to an antimicrobial composition for the inhibition of livestock pathogenic bacteria containing ursolic acid as an active ingredient, in particular to a method for producing a microorganism capable of inhibiting the growth of actinobacillus ( Actinobacillus, pleuropneumoniae , < / RTI > Pasteurella The present invention relates to an antimicrobial composition for suppressing multocida A or passtralla mushroom D, and to a livestock feed additive and a livestock feed containing the composition as an effective ingredient. The present invention relates to a livestock feed additive for livestock pathogenic bacteria The antimicrobial composition can be utilized as an alternative antibiotic, and it can be very useful industrially because it can produce uric acid from a shell, which is a by-product, which is generated largely in the process of producing processed products such as apple or persimmon.
Description
본 발명은 돼지 호흡기 복합감염증 원인 세균에 대해 항균활성을 나타내는 우르솔산 및 이의 용도에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 우르솔산(ursolic acid) 또는 이의 염 또는 이를 포함하는 과일 부산물을 유효성분으로 함유하는 가축 병원성 세균 억제용 항균 조성물, 특히 돼지 호흡기 복합감염증을 유발하는 세균인 액티노바실러스 플루로뉴모니애(Actinobacillus pleuropneumoniae), 파스투렐라 물토시다(Pasteurella multocida) A 또는 파스투렐라 물토시다 D를 억제하는 항균 조성물 및 상기 조성물을 유효성분으로 함유하는 가축 사료첨가제 및 가축사료에 관한 것이다.The present invention relates to uronic acid which exhibits antimicrobial activity against bacteria causing porcine respiratory tract infections, and more particularly to a method for the treatment of livestock animals containing ursolic acid or a salt thereof or a fruit by- An antimicrobial composition for inhibiting pathogenic bacteria, particularly Actinobacillus pleuropneumoniae , a bacterium which causes a porcine respiratory complex infectious disease, Pasteurella The present invention relates to an antimicrobial composition for suppressing multocida A or pastelorrhizoida D and a livestock feed additive and a livestock feed containing the composition as an active ingredient.
돼지 호흡기 복합감염증(PRDC, porcine respiratory disease complex)은 10∼22주령의 주로 육돈 및 비육돈에 발생하며, 발육부진, 사료효율 저하, 무기력, 식욕부진, 발열, 기침, 호흡장애 등을 특징으로 한다. 돼지 호흡기 복합감염증은 돼지 호흡기 생식기 증후군 바이러스(PRRSV), 돼지 인플루엔자바이러스(SIV), 가성광견병바이러스(pseudorabies virus), 마이코플라스마 하이오뉴모니애(Mycoplasma hyopneumoniae), 액티노바실러스 플루로뉴모니애(Actinobacilus pleurpneumoniae) 및 파스투렐라 물토시다(Pasteurella Multocida) 등의 혼합감염에 의해 발생하며, 이들 원인체들 중 액티노바실러스 플루로뉴모니애(A. pleuropneumoniae) 및 파스투렐라 물토시다(P. Multocida)는 돼지 호흡기 복합감염증의 1차 감염균인 동시에 2차 감염으로 심각한 증상을 일으킨다. 액티노바실러스 플루로뉴모니애는 급성 및 만성 경과를 취하는 돼지흉막 폐렴의 원인균으로 섬유소성 흉막염, 출혈성 괴사성 병변을 동반한다. 이 균에 의한 호흡기전염병은 환경이 불량하거나 밀집 사육 상태에서 흔히 발병되며, 이 병에 감염된 돼지는 폐사를 비롯한 발육지연과 사료효율의 저하를 가져와 양돈업에 많은 경제적 손실을 주는 질병이다. 이 균은 돼지의 호흡기에 제 1차 감염균으로 작용하며, 한 동물당 104~105개의 균을 정맥 내로 인공감염시 폐사하며, 103개의 균을 정맥 내로 주사시 만성감염병 경과를 취한다고 한다. 파스투렐라 물토시다는 돼지에서 호흡기 내의 상재균인 동시에 호흡기 질환을 유발하는 병원체로서, 그람음성균으로 협막의 혈청형에 따라 A, B, D, E 및 F 형으로 분류된다. 145kDa의 독성 단백질을 암호화하는 toxA 유전자의 존재에 따라 독성이 결정이 되며 주로 A형이나 D형에서 나타나는 경향이 있다. A형은 돼지, 소 및 닭에서 기관지 폐렴을, B형은 소에서 출혈성 패혈증을, D형은 돼지에서 위축성비염(atropicrhinitis; AR)을 일으키는 것으로 알려져 있다.The PRDC (porcine respiratory disease complex) is characterized by developmental failure, poor feed efficiency, lethargy, anorexia, fever, cough, and respiratory distress, occurring mainly in pigs and finishing pigs between 10 and 22 weeks of age. Porcine respiratory tract complex infections include the respiratory tract syndrome virus (PRRSV), swine influenza virus (SIV), pseudorabies virus, Mycoplasma hyopneumoniae , Actinobacillus pleurpneumoniae and Pasteurella < RTI ID = 0.0 > Multicida ), among them, Actinobacillus A. pleuropneumoniae and P. multocida are the primary infectious agents of porcine respiratory syncytial virus infection Secondary infections cause severe symptoms. Actinobacillus pneumoniae is a causative organism of acute and chronic pneumothorax. It is associated with fibrosing pleurisy and haemorrhagic necrotizing lesions. The respiratory infectious disease caused by this bacterium is often caused by a poor environment or a dense breeding condition, and pigs infected with this disease cause a delay in development including mortality and a decrease in feed efficiency, thereby causing a great economic loss to the pigs. This strain acts as a primary infectious organism in the respiratory system of pigs. It is said that 10 4 to 10 5 bacteria per animal are killed intravenously during artificial infection, and 10 3 microorganisms are injected intravenously to take chronic infection . Pasteurla La Mortosida is a pathogen in the swine of the respiratory tract that induces respiratory disease. It is classified as A, B, D, E and F according to the serotype of the cavernous sinus. The toxicity is determined by the presence of the toxA gene, which encodes a 145 kDa toxin protein, and is predominantly expressed in type A or type D. Type A is known to cause bronchopneumonia in pigs, cattle, and chickens, hemorrhagic sepsis in cattle in type B, and atropic rhinitis (AR) in pigs.
돼지 호흡기 질병은 불현성 감염 또는 만성으로 내과하는 경우가 많으므로 양돈농가에서 병의 심각성을 제대로 알기란 쉽지 않으며, 현대의 양돈산업의 대규모화로 인해 돼지 호흡기 질병의 발생 가능성은 점점 증가되고 있으며, 이의 방제는 더욱 어려운 실정이다. 현재 가축에서의 항생제 및 항균제 사용은 축산물의 안전성 문제로 인해 규제가 날로 강화되고 있으며 특히 배합사료에 첨가되는 항생제 사용규제가 향후 더욱 강화될 것으로 보이며, 잔류검사 강화로 축산 농가들도 휴약 기간이 긴 항생제 사용을 기피하고 있다. 또한 항생제의 남용으로 항생제 내성 병원균들이 나타남으로써 대체 항균 물질의 개발이 필요한 상황이다.It is not easy to know the severity of disease in swine farms because swine respiratory diseases are often infectious or chronic. Therefore, the possibility of swine respiratory disease is increasing due to the large scale of modern swine industry. Is more difficult. Currently, the use of antibiotics and antibiotics in livestock is being strengthened due to the safety issue of livestock products. In particular, regulations on the use of antibiotics added to compound feeds will be strengthened in the future. Avoiding the use of antibiotics. In addition, the abuse of antibiotics causes the development of antibiotic resistant pathogens.
최근, 친환경 항생제 대체제에 대한 연구가 다양한 분야에서 이루어지고 있는데, 크게 병원성 미생물에 대하여 직접적인 길항작용을 나타내는 유용 미생물들을 중심으로 한 생균제(Probiotics) 분야와 식물자원 및 기타 천연물질로부터 항균활성을 나타내는 물질을 개발하여 상용화하는 추출물 분야가 있다. 식물자원에 존재하는 다양한 병원성 미생물에 대한 항균활성을 나타내는 항균성 물질을 항균소재로 이용하고자 하는 연구는 식품, 의약 및 생물공학산업 등에서 오래전부터 활발하게 연구되어 오고 있다(Shin. D.H et al., 1997. Korean J. Food SCI. TECHNOL. 29:808-816).Recently, studies on environmentally friendly antibiotic substitutes have been carried out in various fields. In particular, researches on probiotics, which are mainly useful microorganisms showing direct antagonistic action against pathogenic microorganisms, and substances showing antimicrobial activity from plant resources and other natural substances Has been developed and commercialized. Research on the use of antimicrobial agents, which exhibit antimicrobial activity against various pathogenic microorganisms present in plant resources, as antimicrobial agents has long been actively studied in food, medicine, and biotechnology industries (Shin, DH et al., 1997 J. Food Sci. Technol. 29: 808-816).
우르솔산(ursolic acid)은 트리테르펜계열(triterpenoid)의 화합물로서 다양한 형태로 식물계에 존재하는데, 특히, 사과, 배, 자두와 같은 과일이나 바질, 로즈마리 등과 같은 약용 허브에서 많이 발견되는 천연물 중 하나이다. 우르솔산이 포함된 추출물은 해독작용에 효과적이며, 항암, 항알레르기 및 항염 작용이 있으며(Liu et al., 1995, J. Ethnopharmacol. 49:57-68), 글루코코티코이드(glucocorticoid) 수용체의 전위(translocation)에 관여하여 세포외 기질(extracellular matrix)을 녹일 수 있는 매트릭스 메탈로프로테나제(matrix metalloproteinase)-9를 억제함으로써 암세포의 침윤을 억제할 수도 있다(Cha et al., 1998, Oncogene, 16:771-778). 또한 피부학적인 측면에서도 잔주름 개선효과, 섬유아세포(fibroblast) 활성효과 및 피부 탄력효과가 우수한 성분으로 밝혀져 화장품 산업에 많이 응용되고 있다.Ursolic acid is a compound of the triterpenoid, which is present in various forms in the plant. Especially, it is one of natural products found in medicinal herbs such as fruit, basil, rosemary and the like such as apple, pear and plum. The extract containing uronic acid is effective for detoxification, has anti-cancer, anti-allergic and anti-inflammatory effects (Liu et al., 1995, J. Ethnopharmacol. 49: 57-68), translocation of glucocorticoid receptor (Cha et al., 1998, Oncogene, 16: 771) by suppressing matrix metalloproteinase-9, which is capable of dissolving the extracellular matrix, -778). In addition, it has been applied to the cosmetic industry because it has been found out that it is an excellent ingredient in improving the fine wrinkles, fibroblast activity and skin elasticity.
한편, 한국공개특허 제2009-0022706호에는 '우르솔릭산 또는 2-α-하이드록시-우르솔릭산을 포함하는, 조골세포 분화 및 활성 촉진용 약학 조성물'이 개시되어 있고, 한국등록특허 제0693077호에는 '돼지 복합 호흡기 질환 예방 및 치료용 생물학적 조성물'이 개시되어 있으나, 본 발명의 돼지 호흡기 복합감염증 원인 세균에 대해 항균활성을 나타내는 우르솔산 및 이의 용도에 대해서는 기재된 바가 없다.Korean Patent Laid-Open Publication No. 2009-0022706 discloses a pharmaceutical composition for promoting differentiation and activity of osteoblast containing uronic acid or 2-alpha-hydroxy-uric acid, and Korean Patent No. 0693077 'Biological composition for prevention and treatment of combined respiratory disease of pigs' has been disclosed, but there is no description of uronic acid and its use showing antimicrobial activity against bacteria that cause porcine respiratory infections of the present invention.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 우르솔산을 돼지 호흡기 복합감염증을 유발하는 원인균인 액티노바실러스 플루로뉴모니애(Actinobacillus pleuropneumoniae), 파스투렐라 물토시다(Pasteurella multocida) A 및 파스투렐라 물토시다 D에 처리한 결과, 우르솔산이 상기 병원성 세균들의 생육을 억제하는 항균활성을 나타내는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.The present invention is derived by the request as described above, the causative agents of flu, a liquid Martino Bacillus pneumoniae (Actinobacillus for the ursolic acid causing swine respiratory infection compound pleuropneumoniae , Pasteurella multocida A, and Pasuterra la Martida D, the inventors have completed the present invention by confirming that urosolic acid exhibits an antimicrobial activity inhibiting the growth of pathogenic bacteria.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 우르솔산(ursolic acid) 또는 이의 염 또는 이를 포함하는 과일 부산물을 유효성분으로 함유하는 가축 병원성 세균 억제용 항균 조성물을 제공한다.In order to solve the above problems, the present invention provides an antimicrobial composition for inhibiting bacterial pathogenic bacteria comprising ursolic acid or a salt thereof or a fruit by-product containing the same as an active ingredient.
또한, 본 발명은 상기 가축 병원성 세균 억제용 항균 조성물을 가축에 처리하는 단계를 포함하는 가축의 병원성 세균 유래 질병의 예방 또는 치료방법을 제공한다.The present invention also provides a method of preventing or treating pathogenic bacterial diseases caused by livestock comprising the step of treating the above-described antimicrobial composition for inhibiting livestock pathogenic bacteria.
또한, 본 발명은 상기 가축 병원성 세균 억제용 항균 조성물을 유효성분으로 함유하는 가축 사료첨가제 및 가축사료를 제공한다.The present invention also provides a livestock feed additive and a livestock feed containing the antibacterial composition for inhibiting bacterial pathogenic bacteria as an active ingredient.
본 발명에서 우르솔산은 돼지 호흡기 복합감염증을 유발하는 원인균들에 대해 생육 저해 활성을 나타내어, 새로운 항생제 대체물질로의 가능성을 확인하였다. 사료 첨가용 항생제의 오남용으로 인한 항생제 내성균들의 발견이 큰 문제가 되고 있는 요즘, 항생제 대체의 천연 물질로 우르솔산을 가축의 질병 예방 및 치료에 활용할 수 있고, 또한 사과 또는 감 등의 가공제품 생산과정에서 대량으로 발생하지만 대부분 그냥 버려지는 부산물인 껍질로부터 우르솔산을 생산할 수 있으므로 산업적으로 매우 유용하게 이용될 수 있다.In the present invention, uricosan exhibited growth inhibitory activity against causative microorganisms causing porcine respiratory tract infections, confirming the possibility as a new antibiotic substitute. Recently, the discovery of antibiotic-resistant bacteria due to abuse of antibiotics for feed additives has become a big problem. As a natural substance to replace antibiotics, uric acid can be used for the prevention and treatment of diseases of livestock, But it can be very useful industrially because it can produce uronic acid from the shell, which is a by-product, which is mostly abandoned.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 우르솔산(ursolic acid) 또는 이의 염 또는 이를 포함하는 과일 부산물을 유효성분으로 함유하는 가축 병원성 세균 억제용 항균 조성물을 제공한다.In order to achieve the object of the present invention, the present invention provides an antimicrobial composition for inhibiting bacterial pathogenic bacteria comprising ursolic acid or a salt thereof or a fruit by-product containing the same as an active ingredient.
상기 염은 암모늄, 칼륨, 나트륨, 칼슘, 마그네슘 염 등을 예로 들 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.Such salts include, but are not limited to, ammonium, potassium, sodium, calcium, and magnesium salts.
본 발명의 일 구현 예에 따른 방법에서, 상기 과일 부산물은 과일의 껍질 또는 음료 착즙박 또는 추출물일 수 있고, 바람직하게는 사과 껍질, 사과쥬스 착즙박 또는 감 껍질일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In a method according to an embodiment of the present invention, the fruit byproduct may be a bark or beverage extract or extract of fruit, preferably, but not exclusively, an apple peel, an apple juice peel or a husk.
"항균(antimicrobial)"의 의미는 어떤 농도에서 미생물의 성장 또는 생존을 감소, 방지, 억제, 또는 제거하는 능력을 의미한다. 항균 조성물이란 항미생물제를 총칭하는 의미인 항생제와 같은 의미일 수 있고, 항균제, 살균제, 방부제, 보존제 또는 제균제와 같은 의미일 수 있으며, 바람직하게는 그람양성균, 그람음성균, 진균 (효모 및 곰팡이)으로 이루어진 군에서 선택된 1 종 이상의 미생물의 발육과 생활 기능을 저지 또는 억제할 수 있는 물질 즉, 항세균 및 항진균 효력이 있는 물질을 의미한다.By "antimicrobial" is meant the ability to reduce, prevent, inhibit, or eliminate microbial growth or survival at any concentration. The antimicrobial composition may have the same meaning as antibiotics, which is generically referred to as an antimicrobial agent, and may have the same meaning as an antimicrobial agent, a bactericide, an antiseptic, a preservative or a bactericide, and preferably a gram- Means a substance capable of inhibiting or inhibiting the development and function of living organisms of one or more microorganisms selected from the group consisting of bacteria, antifungal agents and antifungal agents.
본 발명의 "함유하는(comprising)" 용어는 포함하는 것에 한정되지 않으며, 일예로 다른 첨가제, 성분, 지수 또는 단계와 같은 것을 제외하지 않는다.The term " comprising "of the present invention is not limited to inclusive, and does not exclude, for example, other additives, ingredients, exponents, or steps.
상기 본 발명의 가축 병원성 세균은 돼지 호흡기 복합감염증(Porcine Respiratory Disease Complex)을 유발하는 세균으로, 맨하이미아 해모리티카(Mannheimia haemolytica), 파스투렐라 물토시다(Pasteurella multocida), 마이코플라스마 하이오뉴모니애(Mycoplasma hyopneumoniae) 또는 액티노바실러스 플루로뉴모니애(Actinobacillus pleuropneumoniae) 등일 수 있고, 바람직하게는 액티노바실러스 플루로뉴모니애(Actinobacillus pleuropneumoniae), 파스투렐라 물토시다(Pasteurella multocida) A 또는 파스투렐라 물토시다 D일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.The livestock pathogenic bacterium of the present invention is a bacterium that induces Porcine Respiratory Disease Complex, which is called Mannheimia haemolytica , Pasteurella multocida ), Mycoplasma hyopneumoniae or Actinobacillus < RTI ID = 0.0 > pleuropneumoniae ), and the like, preferably Actinobacillus < RTI ID = 0.0 > pleuropneumonia e), Pasteurella multocida A, or passthrough, but is not limited thereto.
본 발명의 우르솔산은 그람 양성균에 대한 항균 활성을 보이는 것으로 알려져 있으나 대장균(Escherichia coli) 및 슈도모나스 애루기노사(Pseudomonas aeruginosa)와 같은 그람 음성균에 대해서는 항균 활성이 없는 것으로 보고되고 있다(S. Fontanay et al., 2008, J. Entronopharm. 120:272-276). 또한, 본 발명의 우르솔산은 해모필러스 솜너스(Haemopilus somnus)와 같은 그람 음성균에 대해서도 항균 활성이 없었다(표 2 참고). 그러나, 우르솔산은 돼지 호흡기 복합감염증(Porcine Respiratory Disease Complex)을 유발하는 그람 음성 세균들인 액티노바실러스 플루로뉴모니애(Actinobacillus pleuropneumoniae), 파스투렐라 물토시다(Pasteurella multocida) A 또는 파스투렐라 물토시다 D에 대해서는 특이적으로 항균 활성을 보였다.Although the uricol acid of the present invention is known to exhibit antimicrobial activity against Gram-positive bacteria, Escherichia coli coli) and Pseudomonas Ke rugi labor (for gram-negative bacteria such as Pseudomonas aeruginosa) it has been reported to have no antimicrobial activity (S. Fontanay et al, 2008, J. Entronopharm 120:.. 272-276). In addition, the uricol acid of the present invention had no antimicrobial activity against Gram-negative bacteria such as Haemopilus somnus (see Table 2). However, the use of uronic acid has been associated with gram-negative bacteria such as Actinobacillus ( Actinobacillus ), which causes Porcine Respiratory Disease Complex pleuropneumonia e), Pasteurella multocida ) A or pustulare la water soda D showed antimicrobial activity specifically.
본 발명은 또한, 우르솔산을 유효성분으로 함유하는 가축 세균 억제용 항균 조성물을 가축에 처리하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 가축의 병원성 세균 유래 질병의 예방 또는 치료방법을 제공한다.The present invention also provides a method of preventing or treating pathogenic bacterial diseases caused by livestock, which comprises treating livestock with an antimicrobial composition for suppressing livestock bacteria containing uronic acid as an active ingredient.
본 발명의 일 구현 예에 따른 방법에서, 상기 가축은 소, 닭, 돼지, 말, 염소, 오리, 거위, 개, 고양이 또는 토끼일 수 있으며, 바람직하게는 돼지일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In the method according to one embodiment of the present invention, the animal may be a cow, a chicken, a pig, a horse, a goat, a duck, a goose, a dog, a cat or a rabbit, and preferably a pig.
본 발명의 방법에서, 상기 가축 병원성 세균은 돼지 호흡기 복합감염증(Porcine Respiratory Disease Complex)을 유발하는 세균으로, 맨하이미아 해모리티카(Mannheimia haemolytica), 파스투렐라 물토시다(Pasteurella multocida), 마이코플라스마 하이오뉴모니애(Mycoplasma hyopneumoniae) 또는 액티노바실러스 플루로뉴모니애(Actinobacillus pleuropneumoniae) 등일 수 있고, 바람직하게는 액티노바실러스 플루로뉴모니애(Actinobacillus pleuropneumoniae), 파스투렐라 물토시다(Pasteurella multocida) A 또는 파스투렐라 물토시다 D일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In the method of the present invention, the livestock pathogenic bacterium is a bacterium that induces Porcine Respiratory Disease Complex, which is Mannheimia haemolytica , Pasteurella multocida ), Mycoplasma hyopneumoniae or Actinobacillus < RTI ID = 0.0 > pleuropneumoniae ), and the like, preferably Actinobacillus < RTI ID = 0.0 > pleuropneumonia e, Pasteurella multocida A, or passthrough la water D, but the present invention is not limited thereto.
본 발명은 또한, 우르솔산을 함유하는 가축 세균 억제용 항균 조성물을 유효성분으로 함유하는 가축 사료첨가제 및 가축사료를 제공한다.The present invention also provides a livestock feed additive and a livestock feed containing an antimicrobial composition for suppressing livestock germs containing uronic acid as an effective ingredient.
본 발명의 상기 가축 사료첨가제는 원형 그대로 사용하거나 또는 추가적으로 가축에 허용되는 곡류 및 그 부산물 등의 공지된 담체, 안정제 등을 가할 수 있으며, 필요에 따라 구연산, 후말산, 아디픽산, 젖산, 사과산 등의 유기산이나 인산나트륨, 인산칼륨, 산성 피로인산염, 폴리인산염(중합인산염) 등의 인산염이나, 폴리페놀, 카테킨, 알파-토코페롤, 로즈마리 추출물, 비타민 C, 녹차 추출물, 감초 추출물, 키토산, 탄닌산, 피틴산 등의 천연 항산화제, 항생물질, 항균제 및 기타의 첨가제 등을 가할 수도 있으며, 그 형상으로서는 분체, 과립, 펠릿, 현탁액 등의 적당한 상태일 수 있으며, 상기 사료첨가제를 공급하는 경우는 가축 등에 대하여 단독으로 또는 사료에 혼합하여 공급할 수 있다.The livestock feed additive of the present invention can be used as it is in its original form, or additionally, known carriers such as cereal grains and by-products thereof, stabilizers and the like can be added, and if necessary, citric acid, fumaric acid, adipic acid, lactic acid, Such as polyphosphoric acid, catechin, alpha-tocopherol, rosemary extract, vitamin C, green tea extract, licorice extract, chitosan, tannic acid, phytic acid (phosphoric acid) Antibiotics, antimicrobial agents, and other additives may be added. The shape of the powder may be a proper state such as powder, granule, pellet, suspension, etc. When the feed additive is supplied, Or mixed with feed.
본 발명에서 가축사료를 제조하는 경우, 첨가제는 곡류, 예를 들면 연마되거나 분쇄된 밀, 귀리, 보리, 옥수수 및 쌀; 평지씨, 대두콩 및 해바라기 씨에 근거한 식물성 단백질 공급원; 동물성 단백질 공급원; 당밀; 및 우유 제품, 예를 들면 다양한 우유 분말 및 유장 분말로 구성된 건조 성분과 혼합될 수 있다. 모든 건조 성분과 혼합된 후, 액체 성분 및 가열 후 액체가 된 성분을 첨가할 수 있다. 액체 성분은, 선택적으로 가열에 의해 액화된 지질, 예를 들면 지방, 예를 들면 식물성 지방, 및/또는 카복실산, 예를 들면 지방산으로 구성될 수 있다. 완전히 혼합한 후, 성분의 연마도에 따라 가루 또는 입자상 농도가 수득된다. 저장하는 동안 분리되는 것을 방지하기 위해서, 물을 바람직하게는 동물 사료에 첨가해야만 하고, 이 사료는 후속적으로 종래의 펠렛화, 증량 또는 압출 공정으로 처리된다. 임의의 추가의 물을 건조에 의해 제거할 수 있다. 원하는 경우, 생성된 입자상 동물 사료를 더 작은 입자 크기로 분쇄할 수 있다.When preparing livestock feeds in the present invention, the additive may be selected from cereal crops such as ground or grinded wheat, oats, barley, corn and rice; Vegetable protein sources based on rapeseed, soybean and sunflower seeds; An animal protein source; molasses; And milk products, such as various milk powders and whey powders. After mixing with all the dry ingredients, the liquid ingredients and the ingredients that become liquid after heating can be added. The liquid component may optionally consist of lipids liquefied by heating, for example fats, for example vegetable fats, and / or carboxylic acids, for example fatty acids. After thorough mixing, a powder or particulate concentration is obtained depending on the degree of polishing of the component. In order to prevent separation during storage, water should preferably be added to the animal feed, which is subsequently treated with conventional pelletization, extrusion or extrusion processes. Any additional water can be removed by drying. If desired, the resulting particulate animal feed can be pulverized into smaller particle sizes.
본 발명의 일 구현 예에 따른 가축 사료첨가제 및 가축사료에서, 상기 가축은 바람직하게는 소, 닭, 돼지, 말, 염소, 오리, 거위, 개, 고양이 또는 토끼이며, 더욱 바람직하게는 돼지일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
In a livestock feed additive and a livestock feed according to an embodiment of the present invention, the livestock is preferably a cow, a chicken, a pig, a horse, a goat, a duck, a goose, a dog, a cat or a rabbit, But is not limited thereto.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail by way of examples. However, the following examples are illustrative of the present invention, and the present invention is not limited to the following examples.
실시예Example 1. One. 우르솔산(ursolic acid)의Ursolic acid 분리 detach
우르솔산은 주로 과일의 껍질 부위에서 추출할 수 있으며 본 발명에서는 사과의 껍질 및 감 껍질로부터 우르솔산을 분리·정제하였다. 우선 건조분말시료 1g에 100% 메탄올 10㎖을 첨가하여 1시간 동안 30℃ 항온수조에서 초음파처리하면서 얻은 추출물을 등량의 물과 에틸아세테이트로 분액여두해서 얻은 에틸아세테이트 층을 농축하여, 실리카겔 크로마토그래피와 고속 액체 크로마토그래피에 의하여 순수하게 분리하여 사용하였다. 하기 표 1은 사과 껍질과 감 껍질에서 우르솔산의 함량을 확인한 결과이다.Ursolic acid can be extracted mainly from the skin of the fruit. In the present invention, uric acid was separated and purified from the skin and persimmon of the apple. First, 10 ml of 100% methanol was added to 1 g of the dry powder sample, and the resulting extract was subjected to ultrasonic treatment in a constant temperature water bath at 30 ° C for 1 hour. The resulting ethyl acetate layer was separated by an equal volume of water and ethyl acetate. The ethyl acetate layer was concentrated and subjected to silica gel chromatography And then purely separated by high performance liquid chromatography. Table 1 below shows the results of confirming the content of uric acid in apple peels and persimmon peels.
실시예Example 2. 2. 우르솔산의Ursolic 최소저해농도 측정 Minimum inhibitory concentration measurement
항균활성이 있는 것으로 보고된 우르솔산에 대한 최소저해농도(MIC, Minimum Inhibitory Concentration)를 측정하였다. 최소저해농도 분석은 액체배지 희석법(broth dilution method)을 변형하여 수행하였다. 먼저 DMSO(dimethyl sulphoxide)를 사용하여 우르솔산을 희석하여 TSB, BHI 액체배지에 첨가하고, 총량은 300㎕로 맞추었다. 액티노바실러스 플루로뉴모니애(Actinobacillus pleuropneumoniae), 파스투렐라 물토시다(Pasteurella multocida) A, 파스투렐라 물토시다 D 및 해모필러스 솜너스(Haemopilus somnus) 균주를 각각 접종한 후, 30℃에서 24시간 배양한 후 관찰하였다. 음성 대조군으로 DMSO를 사용하였고, 항생제 암피실린(ampicillin)을 양성 대조군으로 사용하였다. 최소저해농도를 측정한 결과는 하기 표 2과 같다.The minimum inhibitory concentration (MIC) for uricosanic acid reported to have antimicrobial activity was measured. Minimal inhibition concentration analysis was performed by modifying the broth dilution method. First, uronic acid was diluted with dimethyl sulphoxide (DMSO) and added to TSB and BHI liquid medium, and the total amount was adjusted to 300 μl. Actinobacillus pleuropneumoniae , Pasteurella < RTI ID = 0.0 > multocida A, Passtellella la Tocida D and Haemopilus somnus strains were inoculated and cultured at 30 ° C for 24 hours. DMSO was used as a negative control, and ampicillin was used as a positive control. The results of the measurement of the minimum inhibitory concentration are shown in Table 2 below.
최소저해농도 측정 결과 우르솔산은 액티노바실러스 플루로뉴모니애, 파스투렐라 물토시다 A 및 파스투렐라 물토시다 D에 대한 항균활성이 뛰어난 것으로 확인되었다. 우르솔산의 액티노바실러스 플루로뉴모니애 균주에 대한 최소저해농도는 6.25㎍/㎖이며, 파스투렐라 물토시다 A와 D 균주에 대한 최소저해농도 역시 동일한 6.25㎍/㎖였다. 그러나, 돼지 호흡기 복합감염증 유발균 중 하나인 해모필러스 솜너스균에 대해서는 우르솔산이 항균활성을 보이지 않음을 확인하였다. 이의 결과를 토대로, 우르솔산이 돼지 호흡기 복합감염증 원인균들 중 액티노바실러스 플루로뉴모니애(A. pleuropneumoniae), 파스투렐라 물토시다(P. multocida) A 및 파스투렐라 물토시다 D균에 대해서 특이적으로 항균 활성을 나타냄을 알 수 있었다.As a result of the measurement of the minimum inhibitory concentration, it was confirmed that the uricosan has excellent antimicrobial activity against Actinobacillus flurogmoniea, Passtrella la waterosa A, and Passtrella la waterosa D. The minimum inhibitory concentration of Actinobacillus pluropneumoniae strain of uronic acid was 6.25 占 퐂 / ml, and the minimum inhibitory concentration for Pasuterra water strains A and D was also 6.25 占 퐂 / ml. However, it was confirmed that uricosan did not exhibit antimicrobial activity in Seongmophilus somnus, which is one of the causative bacteria of porcine respiratory complex infection. Based on the results, it was concluded that urosanic acid is specific for A. pleuropneumoniae , P. multocida A, and Passtella la Martida D, among the causative organisms of porcine respiratory complex infections It was found that the antimicrobial activity was exhibited.
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