KR101413096B1 - 노루궁뎅이 버섯으로부터 추출된 에르고스테롤 퍼옥시드 함유 조성물 제조방법 - Google Patents
노루궁뎅이 버섯으로부터 추출된 에르고스테롤 퍼옥시드 함유 조성물 제조방법 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 에르고스텔류를 함유하는 기능성 껌에 관한 것이다. 껌에 에르고스테롤 퍼옥시드를 포함하므로써, 에르고스테롤 퍼옥시드에 의한 항암활성을 기대할 수 있고, 동물성 지방의 섭취가 많은 현대인에게 동물성 콜레스테롤 대신에 에르고스테롤을 공급하여 건강에 도움이 된다.
에르고스테롤, 껌
Description
도 1은 항암활성을 가지고 있는 분리된 에르고스테롤 퍼옥시드의 매스데이타를 보인다. 매스데이타 안쪽에는 에르고스테롤 퍼옥시드의 구조를 보였다.
도 2 는 은빛박쥐나방동충하초 (Cordyceps sinensis)의 GC 데이터 및 매스분석결과를 보인다.
도 3 는 노루궁뎅이 (Hericium erinaceum)의 GC 데이터 및 매스분석결과를 보인다.
도 4 는 표고 (Lentinula edodes)의 GC 데이터 및 매스분석결과를 보인다.
도 5 는 신령버섯 (Agaricus blazei )의 GC 데이터 및 매스분석결과를 보인다.
도 6 는 저령 (Grifola umbellata)의 GC 데이터 및 매스분석결과를 보인다.
도 7 는 영지 (Ganoderma lucidum)의 GC 데이터 및 매스분석결과를 보인다.
도 8 는 구름송편버섯 (Trametes versicolor)의 GC 데이터 및 매스분석결과를 보인다.
도 9 는 말굽버섯 (Fomes fomentarius)의 GC 데이터 및 매스분석결과를 보인다.
도 10 는 차가버섯 (Inonotus obliquus)의 GC 데이터 및 매스분석결과를 보인다.
도 11 는 장수진흙버섯 (Phellinus baumii)의 GC 데이터 및 매스분석결과를 보인다.
1945년 낙엽버섯으로부터 마라스믹산(marasmic acid)이 항생물질로 보고된 이래(Kavanagh, 1949) 지금까지 140종 이상의 담자균류 생물활성물질이 보고되어 있다. 항생물질 외에도 혈당 강하물질, 콜레스테롤 감소물질, 항혈전물질, 신경계 작용물질, 보체 및 거대식세포 활성물질, 항염증 활성물질, 렉틴 등 다양한 생체기능 조절 물질들이 보고되고 있으며(Chang, 1989; 水野 등, 1992; Hikno 등, 1985, 1989). 최근에는 버섯에 분포하는 β-글루칸의 다당류가 면역활성을 증진시켜 항암작용을 일으키는 것으로 발표되고 있다(Franz, 1989). 에르고스테롤은 균류에만 특이적으로 존재하며 아직 항암활성을 지닌 에르고스테롤에 대한 연구는 초기단계에 있으나 최근에 보고된 중국동충하초의 연구에서 세 종류의 항암활성 스테롤 유도체가 분리되었으며(Jin Woo Bok 등, 1999), 눈꽃동충하초의 에르고스테롤 퍼옥시드는 인간의 위암세포주, 간암세포주, 설치류의 sarcoma-180에 대하여 세포독성을 지니고 있는 것으로 확인되었다(Nam 등, 2001). 민주름버섯목의 버섯 중에는 말굽잔나비버섯에서 에르고스테롤과 그 유도체 그리고 소나무잔나비버섯에서 에르고스테롤 성분이 밝혀졌으며 다른 종류의 잔나비버섯에도 에르고스테롤 성분이 함유되어 있는 것으로 알려져 있다.
동물성 지방의 섭취가 많은 현대인은 혈중내 높은 콜레스텔로로 인한 성인병의 발생이 빈번하다. 이와 같은 문제를 해결하고자 최근에는 식물성 스테롤인 파이트스테롤(Phytosterol)이 식품첨가제로 이용되고 있다. 따라서, 균계의 스테롤인 에르고스테롤을 식품에 첨가하여도 이와 비슷한 효과가 예상이 된다. 이와 같은 관점에서 본 발명자들은 균계의 에르고스테롤류에 관심을 두었으며, 특히 항암활성을 가진 에르고스테롤 퍼옥시드의 균계내의 분포를 확인하여, 균계로부터 유용한 식품의 원재료를 확보하고, 이용하고자 하였다.
본 발명자들는 노루궁뎅이, 표고, 신령, 저령, 운지, 말굽버섯, 장수진흙버섯에서 에르고스테롤 퍼옥시드가 존재하고 있는 것을 최초로 발견하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 항암성 에르고스테롤류를 함유하는 기능성 껌을 제공하고자 한다.
버섯으로부터 추출된 에르고스테롤 퍼옥시드를 함유하는 기능성 껌을 제공한다. 상기 버섯은 노루궁뎅이, 표고, 신령, 저령, 운지, 말굽버섯, 장수진흙버섯 및 차가버섯에서 선택되어진다. 본 발명은 껌 베이스, 연화제, 향료, 감미료 및 첨가제로 이루어진 껌 조성물에 있어서, 상기 조성에 에르고스테롤류를 포함하는 것을 특징으로 한다. 보다 바람직하게는 껌베이스 21 ∼ 29 중량%, 연화제 0.1 ∼ 0.6 중량%, D-솔비톨 40 ∼ 55 중량%, 이소말트 2 ∼ 10 중량%, 자일리톨 5 ∼ 20 중량%, 에르고스테롤류 2 ∼ 4 중량%, 아스파탐 0.001 ∼ 0.002 중량%, 향료 1 ∼ 2.5 중량%, 제3인산칼슘 0.1 ∼ 2 중량%, 덱스트라나아제 0.04 ∼ 0.2 중량%, 색소 1 ∼ 2 중량%로 제조 될 수 있다. 본 발명에서 에르고스테롤류라 함은 균계(fungi)에서 분리되어지는 스테롤류로서 에르고스테롤로부터 유도되어지거나, 에르고스테롤 생합성의 전구체로서 스테롤구조를 가지고 있는 물질을 말한다. 보다 구체적으로 에르고스테롤 퍼옥시드(Ergosterol peroxide), 네오에르고스테롤(Neoergosterol), 에르고스타-5,7,22-트리엔올(Ergosta-5,7,22 trienol), 에르고스타-7,22- 디엔올(Ergosta-7,22 dienol), 에르고스트-8(14)-엔올(Ergosta-8(14)-enol) 및 란노스타-8,24-디엔올(Lanosta-8,24-dienol), 및 24-메틸렌란노스타-8-엔올(24-methylenelanosta-8-enol) 등을 포함한다.
이와같은 본 발명을 실시예에 의거하여 설명하면 다음과 같은 바, 본 발명이 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
[실시예 1] 에르고스테롤의 추출
스테롤 분석을 위하여, 500mg의 동결건조 되어진 버섯시료(또는 균사체)를 70℃에서 1시간 동안 60% KOH 2ml,메탄올에 녹아있는 0.5%의 파이로갈롤(pyrogallol) 2ml과 메탄올 3ml을 사용하여서 비누화해 준다. 비누화가 되지 않은 지방(스테롤)은 5ml의 헥산을 이용하여서 3번 추출하였다. 얻어진 헥산용액을 모두 모으고, 질소가스로 헥산을 증발시켜서 에르고스테롤류를 얻었다. 얻어진 에르고스테롤류는 사용 전에 -20℃에 보관하였다(Dannaoui et al 2001).
[실시예 2] 에르고스테롤류의 성분분석
(1) 에르고스테롤의 유도체화
500㎕의 헥산을 이용하여 에르고스테롤류 추출물을 용해한 후, 이중 100㎕만을 취하고 여기에 콜레스테롤(시그마)이 헥산 1ml에 1mg이 녹아 있는 표준액 100㎕을 섞어서 전체 부피가 200㎕가 되도록 하여 GC-MS 용 5ml 바이얼(vial) 에 담았다. 상기 vial에 질소가스를 가하여서 헥산을 모두 증발시켜 제거하고, N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluoroacetamide (Aldrich)를 200㎕ 가하여주고 뚜껑을 닫아 완전히 밀봉하였다. 밀봉을 완벽하게 하기 위해서 테트라하이드로 필름을 이용해서 vial을 다시 한번 밀봉하여주었다. 밀봉되어진 vial을 70℃에서 20분동안 반응하여 에르고스테롤류을 TMS(Trimethyl silyl) 유도체화 해주었다. GC-MS를 찍기까지는 -5℃에서 빛이 들어가지 않도록 하면서 보관하였다.
(2) GC-MS 분석
스테롤은 trimethylsilyl(TMS) ether 유도체를 만들어서 HP 5970 장치의 가스 크로마토-질량 스펙트럼를 이용하여 분석되었다. 가스크로마토그램은 Capillary column(30 mm x 0.25 mm)은 DB-XLP(J.W. Scientific, Folsom, Calif.)로 덮여져 있고, 주입(1-2㎕)은 splitless injector를 이용하여 280℃에서 이루어진다. 운반 가스는 100kPa에서 헬률을 사용하고, 오븐온도는 1분 동안 200℃에서 맞추어지고,200℃에서 260℃ 분당 8℃씩 증가되고, 260℃에서 320℃까지 분당 2℃식 증가된다.전자 충격 스펙트라는 70 eV에서 얻어진다. 결과는 면적의 퍼센트로 표현된다. 스테롤은 대조구 및 이미 발표된 데이터(Loeffler 1990, 1992; Quail et al. 1993)와 비교하여 분쇄 데이타와 비교하여 동정하였다(Dannaoui et al 2001).
(4) 결과 및 고찰
버섯류에 들어있는 에르고스테롤유의 종류
GC-MS 분석을 통하여 확인되어진 에르고스테롤류의 종류는 Cholesta-5,24 dienol, Ergosterol peroxide, Neoergosterol, Ergosta-5,7,22 trienol, Ergosta-7,22 dienol, Ergosta-8(14)-enol, Lanosta-8,24-dienol, 24-methylenelanosta-8-enol 및 10종류의 밝혀지지 않은 스테롤류를 가지고 있었다.
GC-MS분석을 통해 얻어진 에르고스테롤 퍼옥시드의 매스 데이터는 칼로스(Kahlos et al, Myoological Research Vol 100 (1) 23-26)에서 기술과 일치되었다. 에르고스테롤 퍼옥시드는 466 [M+-(2 x O, 2 H+,8] 376(23), 251(100), 195(24), 129(25), 69(51), 55(42)의 피크를 보였다. 에르고스테롤 퍼옥시드의 매스 데이터 및 이의 화학적 구조를 도 1에 나타내었다. 노루궁뎅이, 표고, 신령, 저령, 운지, 말굽버섯, 장수진흙버섯는 에르고스테롤 퍼옥시드를 가지고 있었다(도 2내지 11 및 표 1 참조)
[표 1] 버섯류에 분포하는 에로고스테롤류의 분포
[실시예 3]
껌 베이스 200 g, 연화제 6 g, D-솔비톨 440 g, 이소말트 60 g, 자일리톨 90 g, 에르고스테롤 퍼옥시드 30 g, 아스파탐 0.01 g, 제3인산칼슘 11 g, 덱스트라나아제 0.4 g, 색소 20 g을 예비 가열한 믹서에 넣어 혼합한 후, 믹서 내부온도를 55 ℃로 유지하면서 향료 20 g을 첨가한 후 20 분 동안 혼합하고 추출하여 압연하였다. 그리고나서 24 ∼ 48 시간 숙성시킨 후 재단하고 포장하여 본 발명의 껌을 제조하였다.
본 발명에 따른 기능성 껌은 에르고스테롤 퍼옥시드를 함유하여서, 항암활성이 예상되는 기능성 껌이다. 또한 에르고스테롤을 함유하고 있어서, 동물성지방의 흡수가 많은 현대인에게 콜레스테롤과 유사한 구조인 에르고스테롤류를 섭취하게 하여서, 콜레스테롤의 수치 저하를 가져와서 성인병 예방에 효율적일 것으로 예상이 된다.
Claims (3)
- (a) 노루궁뎅이 버섯을 동결건조시키는 단계;(b) 상기 동결건조된 버섯시료를 파이로갈롤(pyrogallol)과 메탄올을 처리하여 지방을 비누화하여 주는 단계;(c) 상기 (b) 단계에서 비누화시킨 반응물에 헥산을 이용하여 비누화 되지 않은 지방을 포함하는 헥산추출물을 제조하는 단계; 및(d) 상기 (c)단계에서 얻어진 헥산추출물을 질소가스를 이용하여 헥산을 증발시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 노루궁뎅이 버섯으로부터 에르고스테롤 퍼옥사이드 함유 조성물 제조방법.
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