KR101323769B1 - 정제봉독과 비텍신을 유효성분으로 포함하는 동물용 기능성 천연 항생제 조성물 - Google Patents

정제봉독과 비텍신을 유효성분으로 포함하는 동물용 기능성 천연 항생제 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 천연 동물용 항생제 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 정제봉독과 비텍신을 유효성분으로 포함하는 동물용 천연 항생제 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 조성물은 정제봉독 및 비텍신(vitexin)을 일정한 비율로 혼합하여 우수한 항염증 효과, 면역 강화 효과, 항균 능력 및 항산화 능력을 나타내어 고부가가치의 동물용 천연 항생제 조성물로 널리 활용될 수 있을 것으로 기대된다.

Description

정제봉독과 비텍신을 유효성분으로 포함하는 동물용 기능성 천연 항생제 조성물 {A factional natural antibiotic composition of bee venom and vitexin}
본 발명은 봉침액의 유효성분을 함유한 정제봉독 및 비텍신을 포함하는 동물용 천연 항생제 조성물에 관한 것이다.
봉독(봉침액)이란 벌이 가지고 있는 독으로 항균작용, 항산화작용 및 항염증 작용에 관여한다고 알려져 있으며, 사람에게는 관절염, 요통, 동맥경화 치료의 목적으로 사용되고 있다. 또한 봉독은 면역기능 활성화에 관여하여 질병을 치료하는 효과를 나타내기 때문에 몇몇 농가에서는 시범적으로 생봉침액을 이용하여 가축의 질병 예방을 시도하고 있다. 봉독은 펩티드와 아미노산, 활성 아민 등을 포함하여 40가지 이상의 물질로 구성되어 있으며, 이들 성분은 진통억제, 소염, 항균작용과 함께 뇌하수체 호르몬 분비 촉진, 혈액순환 촉진 등의 효과가 있다고 알려져 있다.
최근 합성 항생제의 경우 사용 시 가축에 항생제가 잔류할 뿐만 아니라, 항생제 내성 균주의 발생이라는 심각한 문제를 일으키고 있어, 전 세계적으로 합성 항생제 사용에 대한 규제가 강화되고 있다. 그러나 합성 항생제 사용에 대한 규제만을 강화한다면 가축 증체율 감소, 사료 효율 저하 및 폐사율 증가로 인해 생산성이 감소될 것으로 판단되기 때문에 합성 항생제를 대체하기 위한 친환경적이며, 안전한 천연 항생제의 개발이 필요한 실정이다.
이에 본 발명자들은 기존 합성 항생제를 천연 항생제로 대체하고 봉독의 활성 효과를 제고하기 위하여, 정제된 봉독과 비텍신(vitexin)을 일정비율로 배합하여 사용한 결과, 항균, 항산화, 항염증 작용 및 면역 활성화 효과가 한층 증가되어, 기존 합성 항생제를 대체할 친환경적 천연 항생제로 활용될 수 있다는 사실을 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서 본 발명은 정제봉독 및 비텍신(vitexin)을 유효성분으로 포함하는 동물용 천연 항생제 조성물을 제공하는 것을 그 목적으로 한다.
상기 과제를 해결하기 위해,
본 발명은 정제봉독 및 비텍신(vitexin)을 유효성분으로 포함하는 동물용 천연 항생제 조성물을 제공한다.
본 발명은 정제봉독 및 비텍신(vitexin)을 일정한 비율로 혼합하여 우수한 항염증 효과, 면역 강화 효과, 항균 능력 및 항산화 능력을 나타낸다. 또한 세포 독성이 매우 낮으며, 우수한 라디칼 제거 효과를 나타내어 고부가가치의 동물용 천연 항생제 조성물로 널리 활용될 수 있을 것으로 기대된다. 또한 경구 투여용 약제, 산제, 주사제 등 다양한 형태로 제조가 가능하여 다양한 적용이 가능하다는 장점이 있다.
도 1은 본 발명의 동물치료용 천연 항생제 조성물의 라디칼(radical)제거효과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 동물치료용 천연 항생제 조성물의 총 페놀의 함량을 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 동물치료용 천연 항생제 조성물의 총 플라보노이드의 함량을 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 동물치료용 천연 항생제 조성물의 살모넬라 티피무리움 균에 대한 항생 효과를 나타낸 사진이다.
도 5는 본 발명의 동물치료용 천연 항생제 조성물의 C2C12 muscle 세포에 대한 독성 효과를 확인한 그래프이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 정제봉독 및 비텍신(vitexin)을 유효성분으로 포함하는 동물용 천연 항생제 조성물을 제공한다.
이하에서 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다.
봉독이란 벌이 가지고 있는 독으로 항균 작용, 항산화 작용 및 항염증 작용에 관여하며, 관절염, 요통, 동맥경화 등의 질병 치료의 목적으로 사용이 가능하다. 또한 봉독은 면역 기능 활성화에 관여하여 질병에 대한 저항력을 길러주는 효과를 나타낸다. 봉독은 펩티드, 아미노산, 활성 아민 등을 포함하여 40여 가지 이상의 물질로 구성되어 있으며, 이들 성분은 진통억제, 소염, 항균 작용과 함께 뇌하수체 호르몬 분비 촉진, 혈액순환 촉진 등의 효과를 나타낸다.
비텍신(Vitexin)은 아피제닌 플라본 글루코시드(apigenin flavone glucoside) 화학물질이며, 단풍나무(Acer palmatum Thunb), 부처꽃(Lythrum anceps), 산사나무(Crataegus pinnatifida Bge.)등의 자연식물에 존재하고, 포도상구균, 티푸스균, 대장균 등에 대한 항균작용이 있다, 또한 플라본류 화학물질 때문에 강한 항산화 특성을 갖고 있으며, 염증과 산화 스트레스 억제 및 탄수화물 대사를 증진하는 효과를 나타낸다.
본 발명은 천연 봉침액으로부터 이물질을 제거하고, 제균 및 동결건조 과정을 거쳐 정제된 봉독과, 천연식물인 홍 단풍나무으로부터 추출한 에틸아세테이트 파티션에서 분리된 유효 활성물질인 비텍신(vitexin)을 일정한 비율로 혼합하여 항염증 효과, 면역강화 효과, 항균력 및 항산화 능력이 강화된 동물용 천연 항생제 조성물을 제공한다.
본 발명에서 상기 정제봉독은 꿀벌 등으로부터 채취한 봉독을 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올 또는 이들의 혼합용매로 녹인 후 여과 및 불순물을 제거하고 동결건조하여 수득할 수 있다.
본 발명의 정제봉독은 예를 들어 다음과 같은 방법을 통해 제조할 수 있다. 서양종 꿀벌(Apis Mellifera)의 봉침액으로부터 봉독(Bee venom)을 분리하고 증류수에 용해시킨 후 여과지(filter paper)와 진공펌프를 이용한 진공여과방법을 통하여 이물질을 제거하며, 막 여과법(membrane filtration) 등을 수행하여 제균한 후 동결 건조하여 분말 상태의 정제봉독을 수득할 수 있다. 본 발명의 정제봉독은 분말 형태인 것이 바람직하며, 상기 정제 과정을 통해 얻은 정제봉독은 바람직하게는 멜리틴 30 ~ 90 중량%, 포스포리파제A2 1 ~ 60 중량% 및 아파민 0.1 ~ 30 중량%를 포함하고 있으며, 또한 상기 정제봉독을 포함하는 본 발명의 동물치료용 조성물의 경우 멜리틴 18 ~ 81 중량%, 포스포리파제A2 36 ~ 90 중량% 및 아파민 0.6 ~ 27 중량%를 포함하는 것이 우수한 항균 및 항산화 효과를 나타내기 때문에 바람직하다.
본 발명에서 사용되는 비텍신(vitexin)은 제한되지는 않지만 바람직하게는 홍 단풍나무(Acer palmatum var . amoenum)에 추출된 것을 사용하는 것이 우수한 항산화 효과를 가지며, 독성을 나타내지 않아 바람직하다. 본 발명에서는 용매의 극성 차이를 이용하여 상기 단풍나무로부터 바이오 활성물질을 추출하고, 이를 정제봉독과 일정한 비율로 혼합하여 동물용 천연 항생제 조성물로 활용한다.
본 발명에서 상기 비텍신은 다음과 같은 과정을 거쳐 얻을 수 있다. 먼저 홍 단풍나무의 잎을 물, 유기용매 또는 물과 유기용매의 혼합용매를 이용하여 추출한다. 이때 상기 유기용매로 바람직하게는 100 부피%의 알콜 혹은 100 부피% 물을 사용하는 것이 좋고, 보다 바람직하게는 70 ~ 80 부피%의 에탄올 용매를 사용하는 것이 좋다. 상기 얻어진 추출물에 n-헥산, 클로로폼, 에틸아세테이트 및 부탄올을 순차적으로 가하여 얻은 각각의 분획물 중 에틸아세테이트 분획 층을 재결정방법 등을 통하여 정제하고 수득할 수 있다.
본 발명에서 상기 정제봉독 및 비텍신(vitexin)은 100:1 ~ 1:100의 중량비로 혼합하여 사용하는 것이 바람직하며, 보다 바람직하게는 10:1 ~ 1:1의 중량비로 혼합하여 사용하는 것이 좋고, 가장 바람직하게는 5:1 내지 2:1 중량비로 사용하는 것이 좋다. 상기 정제봉독의 중량비가 100:1 보다 높은 경우 본 발명 조성물의 항균 및 항산화 효과가 떨어진다는 문제점이 있고, 정제봉독의 중량비가 1:100 보다 낮은 경우 조성물의 항균효과 및 비텍신(vitexin)의 용해가 잘 이루어지지 않는다는 문제점이 발생하므로 상기 범위를 유지하는 것이 바람직하다.
본 발명의 정제봉독 성분을 함유한 조성물은 DPPH 라디칼 제거 효과 및 항균, 항염 능력이 우수하며, 페놀 및 총 플라보노이드 함량이 높아 우수한 천연 항생제로써 이용될 수 있다.
본 발명에 따른 정제봉독 및 비텍신 성분을 함유한 동물용 천연 항생제 조성물은 특별히 제한되는 것은 아니지만 예를 들어, 서방형 제제, 주사제, 산제, 연고제 등의 다양한 형태로 제제화하여 사용할 수 있다.
이하 본 발명을 아래 실시예에서 상세히 설명하지만, 본 발명의 보호범위가 하기 실시시예에만 한정되는 것은 아니다.
제조예 1: 정제봉독의 준비
서양종 꿀벌(Apis Mellifera)의 봉침액으로부터 봉독(Bee venom)을 여과 및 재결정방법을 사용하여 분리하고, 증류수에 용해시킨 후 11 ㎛의 여과지(filter paper)와 진공펌프를 이용한 진공여과방법을 통하여 흙, 먼지 등의 이물질을 제거하였다. 이후 공극 크기(pore size)가 0.2 ㎛인 막 여과(membrane filtration)를 수행하여 제균한 후 -80 ℃에서 동결 건조하여 분말상태의 정제봉독을 얻었다.
제조예 2: 비텍신(vitexin)의 준비
홍 단풍나무 잎을 5 kg 수집하여 찬물로 세척하고 그늘에서 자연풍에 48 ~ 72 시간 동안 건조시켰다. 건조된 잎을 분쇄기를 이용하여 가루로 분쇄하고 80 부피% 에탄올 수용액으로 초음파장치 통하여 2 시간 동안 추출하여 홍 단풍나무 잎 추출물을 제조하였다. 상기 추출물을 n-헥산(n-Hexane), 클로로폼(Chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 부탄올(butyl alcohol) 용매를 이용하여 용매의 극성순서로 파티션을 분별 분리하였다. 이를 통해 얻어진 에틸아세테이트(ethyl acetate)층 추출물 200.95 g(13.22 중량%)을 99.5 부피% 에탄올을 이용하여 용해석출방법을 통해 활성물질인 비텍신(vitexin)을 석출하였다. 석출된 비텍신(vitexin) 화합물을 -15 ℃에서 99.5 부피% 에탄올로 반복 석출하고 재결정방법을 통하여 정제된 비텍신(vitexin)을 수집하였다.
실시예 1 ~ 7: 정제봉독 및 비텍신(vitexin)을 포함하는 동물용 천연 항생제 조성물의 제조
상기 제조예 1에 따른 분말상태의 정제봉독과 상기 제조예 2에 따른 비텍신을 일정한 중량비(10:1(실시예 1), 5:1(실시예 2), 2:1(실시예 3), 1:1(실시예 4), 1:2(실시예 5), 1:5(실시예 6), 1:10(실시예 7))로 혼합하여 제조한 항생제 조성물을 활성실험에 사용하였다.
실험예 1: 항산화 효과 측정실험
본 발명에서 얻어진 상기 실시예 1 ~ 7의 천연 항생제 조성물, 홍 단풍나무 추출물, 비텍신, 정제봉독 및 표준물질의 항산화 효과를 비교하기 위해 DPPH 및 총 페놀함량 측정 실험과 환원력 측정 실험(reductive power assay)을 하였고, 결과를 표 1 및 2에 나타내었다.
- 자유라디칼 소거 작용
각 추출물의 자유라디칼 소거 작용은 DPPH(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl)를 사용하는 시마다(Shimada) 방법으로 측정하였다. 에탄올에 녹인 0.5 mM DPPH 용액 1 mL에 0.05 M Tris-HCl 완충액(pH 7.4) 1 mL와 에탄올 1 mL를 가하였다. 위 혼합물에 여러 가지 농도(0.5 ppm ~ 250 ppm)의 각 추출물 또는 에탄올(대조액) 1 mL를 가하고 실온에서 격렬하게 흔들었다. 30 분 동안 반응시킨 후 분광광도계(spectrophotometer)를 이용하여 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료의 상대 효과를 보기 위해 일반적인 항산화 물질로 알려진 BHA, BHT 및 알파-토코페롤(α-Tocopherol)의 항산화 효과를 측정하여 비교하였다. 반응 혼합물의 흡광도가 낮은 것은 자유라디칼의 소거활성, 즉 산화 저해율(inhibition)이 큰 것을 의미한다. DPPH 소거활성을 %저해율로 다음식 (1)에 나타내었다.
저해율% = A1/A0× 100 .............. (1)
여기서 A0는 대조반응의 흡광도를 나타내고, A1은 시료존재하의 흡광도이다.
항산화효과 비교
구분 시료 DPPH(IC50)
μg/mL
실시예 1 정제봉독 : 비텍신
= 10 : 1		 > 300
실시예 2 정제봉독 : 비텍신
= 5 : 1		 15.63 ± 0.40
실시예 3 정제봉독 : 비텍신
= 2 : 1		 7.82 ± 0.21
실시예 4 정제봉독 : 비텍신
= 1 : 1		 4.65 ± 0.28
실시예 5 정제봉독 : 비텍신
= 1 : 2		 4.43 ± 0.35
실시예 6 정제봉독 : 비텍신
= 1 : 5		 4.01 ± 0.31
실시예 7 정제봉독 : 비텍신
= 1 : 10		 3.92 ± 0.24
조추출물 APV.a1 ) 24.85 ± 0.03
화합물 쿼세틴-3-o-글루코시드
(Quercetin-3-o-glucoside)		 2.65 ± 0.17
5-O-페룰로일퀴닉산
(5-O-Feruloylquinic acid)		 19.39 ± 1.04
비텍신
(Vitexin)		 3.76 ± 0.38
표준물질 BHA 6.77 ± 0.34
BHT 9.64 ± 0.52
a-토코페롤
(a-Tocopherol)		 13.58 ± 2.41
정제봉독 정제봉독 50 ± 0.10
1) APV.a : 홍 단풍 조추출물
상기 표 1에서도 확인할 수 있듯이, 본원발명 조성물의 DPPH(IC50) 측정값은 4.65 μg/mL(실시예 4), 7.82 μg/mL(실시예 3), 15.63 μg/mL(실시예 2) 등으로 나타났으며, 본원발명의 실시예의 경우가 단순한 봉독(DPPH농도 = 0.5 mM에서 IC50 = 50 μg/mL) 등의 경우보다 라디칼(radical) 제거 효과가 월등히 우수함을 확인할 수 있었다. 각 조성에 따른 라디칼 제거 효율을 도 1에 나타내었다.
- 총 페놀 및 플라보노이드 함량( Total phenol and Total flavonids )
총 페놀과 총 플라보노이드 함량을 측정하였다(표 2). 총 페놀(Total phenol)의 측정은 Folin-Cioca lteau(Osawa1981)방법을 사용하였다. 이 방법은 산화/환원 반응에 의한 색 변화를 분광기로 측정하는 것으로, 총 페놀의 함량을 측정하는 방법이다. Folin-Ciocalteau 시약은 몰리브덴산 나트륨, 텅스텐산 나트륨, 인산으로 만들어지며, 환원제와 반응하여 복잡한 착제인 인몰리브덴산 블루를 형성하여 청색으로 변화를 나타내고 표준물질 갈릭산(gallic acid)의 표준곡선을 통하여 총 페놀의 양을 정량할 수 있다. 1 ㎖ Na2CO3(2%)용액과 시료(표준물: gallic acid) 1 ㎖ 3 분간 반응 후 폴린(Folin) 시약 200 를 첨가하여 30 분간 반응시켰다. 30 분 후 750 ㎚에서 흡광도를 측정하였다.
총 플라보노이드 함량은 AlCl3 colorimetric assay(D. Marinova2005)방법에 의해 측정하였다. 여러 농도범위(0 ~ 40 mg/mL)의 표준물질 켐훼롤(kaempferol) 1 mL에 4 mL 증류수를 넣고, 0.3 mL 5 % NaNO3를 추가한 후 5 분 동안 반응시킨다. 5 분 후 0.3 mL AlCl3를(10%) 넣고 1 분 동안 반응시키고. 마지막으로 2 mL NaOH 1 M 용액을 추가하고, UV-Visibl를 통해서 510 nm에서 흡광도를 측정한다. 시료는 0.1 mg/mL, 1 mg/mL 및 10 mg/mL 농도로 측정용액 만들고, 위 표준물질 켐훼롤(kaempferol)의 측정방법과 일치하며, 시료의 총플라보노이드 함량을 표준물질의 표준곡선을 이용하여 계산한다.
구분 시료 총 페놀
mgGAE/g1 ) 		총 플라보노이드
mgKE/100g2 )
실시예 1 정제봉독 : 비텍신
= 10 : 1		 45.51 ± 0.21 2.39 ± 0.116
실시예 2 정제봉독 : 비텍신
= 5 : 1		 61.44 ± 0.47 2.98 ± 0.122
실시예 3 정제봉독 : 비텍신
= 2 : 1		 96.00 ± 0.39 3.48 ± 0.142
실시예 4 정제봉독 : 비텍신
= 1 : 1		 114.15 ± 0.52 4.87 ± 0.155
실시예 5 정제봉독 : 비텍신
= 1 : 2		 132.46 ± 0.46 5.36 ± 0.121
조추출물 APV.a 132.51 ± 0.03 448.86 ± 0.14
화합물 비텍신
(Vitexin)		 164.76 ± 4.86 11.20 ± 0.102
쿼세틴-3-o-글루코시드
(Quercetin-3-o-glucoside))		 248.31 ± 3.69 12.38 ± 0.012
5-O-페룰로일퀴닉산
(5-O-Feruloylquinic acid)		 63.99 ± 1.84 3.23 ± 0.013
1) GAE: 갈릭산
2) KE: 켐훼롤(kaempferol)
상기 표 2에서도 확인할 수 있듯이, 측정값은 비텍신(vitexin)의 함량의 따라서 증가되지만 실험예 1(표 1)의 결과를 참고하면 정제봉독과 비텍신(vitexin)의 조합비가 1:2 이하이면 항산화 효과에는 큰 차이를 없음을 확인할 수 있었다, 또한 비텍신(vitexin)의 함량이 증가함에 따라 비텍신의 용해도가 줄어드는 문제가 발생하게 되므로, 상기 표 2의 측정값 중 TP= 61.44 mgGAE/g, TF = 2.98 mgKE/100g(실시예 2); TP = 96.0 mgGAE/g, TF = 3.48 mgKE/100g(실시예 3) 등이 우수한 항산화 및 항균 효과를 나타내는 적절한 범위로 확인되었다. 각 조합비에 따른 결과를 도 2 및 3에 나타내었다.
실험예 2: C2C12 muscle 세포에 대한 독성효과( MTT assay )
본 발명의 동물치료용 기능성 천연항생제의 독성효과는 3-(4,5-dimethyl thiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT,Sigma) 분석방법을 통하여 살아있는 C2C12 muscle세포 내 미토코드리아아의 탈수소화효소(dehydrogenase)에 생성되는 포마잔(fromazan)을 분광광도계(spectrophotometer)를 이용하여 측정하였다(도 5). 봉독-vitexin구성물을 최종농도가 0,3,10,30 및 100 μg/mL의 농도가 되도록 배지에 첨가하고 세포(cell)를 24 시간 배양 후 분석 당일 조제한 MTT 용액 20 ㎕를 첨가하고, 동 배양조건에서 4 시간 더 배양하였다. 배양 후 배양액을 버리고 1 M HCl-이소프로판올(isopropanol) 150 ㎕를 넣어 30 분간 방치 후 MTT 포마잔(formazan)을 용해하여 570 nm에서 흡광도를 측정하였다. 결과를 도 1에 나타내었다.
상기 결과에서 볼 수 있듯이, C2C12 muscle 세포에 대한 독성실험(MTT test)통하여 시료농도 3 ~ 10 μg/mL에서 세포의 생존율 60 % 이상인 것을 확인하였고 조합물의 C2C12 세포에 대한 독성은 비텍신의 함량에 따라 세포의 생존율을 상승하는 것을 확인할 수 있었다.
실험예 3: 살모넬라 티피무리움( Salmonella.typhimurium )균에 대한 항생효과
실시예 1에 따른 동물치료용 구성물의 항균효과를 검증하기 위하여 한국미생물보존센터로부터 지시균 4 종을 분양받아 실험에 사용하였으며 본 발명에 따른 항생구성물의 우수성을 검증하기 위하여 시그마(Sigma)사에서 제조된 봉독과 구주제약의 아피톡신을 비교군으로 사용하였다. 실험에 그람음성균인 살모넬라 티피무리움(Salmonella . typhimurium)을 이용하였으며, 사용 전 배지에 균을 각각 이식하여 24 시간 배양하여 지시균을 활성화하였다. 멸균한 디스크(disc)에 각각의 시료와 화장료 조성물을 도포하고 디스펜서(dispenser)를 이용하여 지시균이 활성화된 평판에 접종하였다.
균 억제대의 크기를 비교하였으며, 본원발명의 항생제 조성물의 균 억제 효과를 단순한 봉독 수용액의 결과와 비교하였다(단순한 봉독의 효과를 1로 기준). 정제봉독과 비텍신의 조성비가 10:1인 조성물의 효과는 1.07, 5:1인 조성물의 효과는 1.11, 2:1인 조성물의 효과는 1.15, 1:1인 조성물의 효과는 1.02인 것으로 나타났다. 상기 결과를 통해 정제봉독 및 비텍신의 조성비가 5:1 및 2:1에서 가장 우수한 항균 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다. 상기 결과를 도 4에 나타내었다.
제제예 1: 주사제의 제조
조제탱크에 프로필렌글리콜 디카프릴레이트/디카프레이트과 정제수를 투입하였다. 상기 구성물 유효성분인 정제봉독 및 비텍신 각 20 mg과 10 mg 씩을 투입하고 교반하여 완전하게 분산시켰다. 프로필렌글리콜 디카프릴레이트/디카프레이트를 가지고 최종 무게를 맞춘 다음 교반하여 완전하게 분산시켰다.
<항생제 조성물 중량/ 전체 1000 mL중>
정제봉독 및 비텍신 ................................. 30 mg
프로필렌글리콜 디카프리레이트/디카프레이트 수용액.. to 1000.0 ml
제제예 2: 산제(powder)의 제조
원료를 칭량한 후 원료 운반기를 이용하여 리본형 혼합기로 모든 원료를 운반 한 다음 계산된 원료 글루코스 언하이드로스(Glucose anhydrous)의 1/2분량을 20호 체에 통과시키면서 리본형 혼합기에 투입하고, 나머지 원료 정제봉독, 비텍신, 클루코스 언하이드로스를 20호체에 통과시키면서 순서대로 리본형 혼합기에 투입하였다.
모든 원료의 투입을 확인한 후 30 분간 혼합한 다음 반제품의 혼합도를 확인한 후 리본형 혼합기의 배출구를 통하여 반제품 저장 용기로 이송하였다.
<항생제 조성물 중량/ 전체 1 g 중>
정제봉독 ........................................20 mg
비텍신 ........................................ 10 mg
글루코스 언하이드로스 ..................... to 1g
제제예 3: 연고제의 제조
원료 바세린과 소이빈 오일을 칭량한 후 160 ℃에서 1 시간 건열 멸균을 실시하고 혼합한 다음 조제 탱크에 투입하여 50 ℃로 냉각시켰다. 이때 별도의 비닐용기에 원료 정제봉독, 비텍신을 넣고 충분하게 혼합한 다음 멸균된 원료 바세린, 소이빈 오일에 혼합된 원료 정제봉독, 비텍신을 투입하고 교반하여 균질하게 분산시켰다.
<항생제 조성물 중량/ 본제 1 Syringe(8 g) 중>
정제봉독 ............................... 160.0 ㎍
비텍신 .................................. 80.0 ㎍
바세린 ..................................... 1.4 g
소이빈 오일 ............................. to 8.0 g

Claims (3)

  1. 삭제
  2. 정제 봉독과 홍 단풍나무 잎의 추출물을 포함하되, 멜리틴 30 ~ 90 중량%, 포스포리파제 A2 1 ~ 60 중량% 및 아파민 0.1 ~ 30 중량%를 포함하는 정제 봉독과 홍 단풍나무의 잎에서 추출된 비텍신(vitexin)이 5:1 내지 2:1의 중량비로 혼합된 것을 특징으로 하는 동물용 천연 항생제 조성물.
  3. 제 2 항에 있어서, 상기 항생제는 주사제, 산제 또는 연고제로 제형화된 것을 특징으로 하는 동물용 복합 항생제 조성물.
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