KR101212899B1 - 오메가-3 지방산을 함유하는 피부 외용제 조성물 - Google Patents

Abstract

오메가-3 지방산을 함유하는 안정한 제형이 개시되며, 오메가-3 지방산을 갖는 지질 나노입자의 피부 보호 효과 및 투과 증진 효과가 개시된다. 오메가-3지방산은 로즈비타 추출물 및 구리 펩타이드와 함께 작용하여 피부 보호 효과를 극대화시킬 수 있다.

Description

오메가-3 지방산을 함유하는 피부 외용제 조성물{Composition for skin external use containing omega-3 fatty acids}

본 발명은 오메가-3 지방산(w-3 지방산)을 유효성분으로 함유하는 피부 외용제에 관한 것이다.

피부는 체외의 외부환경과 체내의 살아있는 장기 사이에서 물리화학적 자극과 미생물의 침입에 대하여 방어역할을 하고 있다. 피부의 방어기능은 주로 피부의 최외층인 각질층이 수행하고 있으며 피부의 지방막이 보조적으로 도와 주고 있다. 각질층이 적당량의 수분을 유지하는 것은 피부의 탄력이나 유연성을 유지하는데 대단히 중요하며 정상적인 피부는 약 30 % 정도의 수분이나 수용성 성분을 함유하고 있다. 각질층의 수분 함량이 10 % 이하로 떨어지면 건성 피부 증세가 나타나며 피부가 갈라지거나 거칠어진다. 피부의 장벽 기능을 약화시키는 요인을 내적인 요인과 외적인 요인으로 나누어보면 내적 요인으로는 질병, 유전적인 결함, 노화 등이 있고 외적 요인으로는 비누나 세제 사용, UV 광선, 악조건의 온,습도 환경 속에서의 장기노출, 좋지 않은 식습관 등이 있다. 이러한 내외적 요인에 의해 장벽 역할을 하는 각질층이 구조적, 생리적으로 기능이 퇴화 되면서 방어기능이 약화된다. 그러므로, 각질층의 수분이 적정 이하로 떨어지지 않도록 적절한 수분을 유지하는 것은 피부의 생리에 기초적이면서도 필수적이다.

또한, 피부에서 일어나는 노화는 관찰이 용이하여 더욱 많은 관심의 대상이 되고 있다. 피부가 노화됨에 따라 나타나는 대표적인 징후는 피부의 주름이 증가하고 탄력이 감소하고 피부의 윤기가 감소하며 피부결이 거칠어지며 피부색이 황색화되고 부분적인 색소 침착 등이 나타나는 것이다. 이러한 피부 노화는 내재적 요인에 의한 자연 노화와 외부적 요인 특히 일광에 의한 광노화로 나눌 수 있다. 일광에 노출이 많은 안면이나 목덜미, 손등 등에서 나타나는 광 노화는 피부가 두꺼워지고 변성된 탄성섬유가 축적되며 반대로 햇빛에 노출되지 않은 부위는 자연 노화 과정에 의해 피부가 위축되고, 기능저하, 피부의 두께 감소 등이 관찰된다.

1970년대 초에 그린랜드에 사는 에스키모인들에게는 심장병과 암, 당뇨병 등 혈관관련의 병이 거의 없다는 것이 알려진 이래 그들이 먹는 식단을 연구하게 되었다. 그들은 주로 물개 고기와 작은 고래 등 깊은 바다의 고기를 매일 2회 이상 먹는다는 것을 발견하고 그 식품 속에 들어있는 omega-3 (w-3) 지방산에 대한 연구를 거듭하게 되었다. 1980년대에는 다가불포화지방산 (polyunsaturated fatty acids, PUFA)의 일반적인 영향과 특히 w-3 지방산에 대한 연구가 집중적으로 이루어졌으며, 요즘 들어서 불포화지방산이 정상적으로 성장하고 발달하는데 필수적이라는 것을 알게 되었으며, 관상동맥 질환 (coronary artery disease), 고혈압 (hypertension), 관절염 (arthritis), 자가면역질환 (autoimmune disorders), 암 (cancer)등의 예방과 치료에 중요한 역할을 한다.

위와 같이 몸에 좋은 성분으로 알려진 오메가-3 지방산은 지금까지 화장품에 사용된 예가 없었다. 그 이유는 오메가 3-지방산이 피부에 미치는 우수한 효과를 인지하지 못한 탓도 있지만, 오메가-3 지방산은 상온이나 제형 내에서 쉽게 변질되는 심각한 단점을 갖고 있기 때문이기도 하다. 따라서, 오메가 3-지방산을 상온이나 제형 내에서도 안정하게 유지할 수 있고 피부에 효과적으로 적용시키도록 할 수 있는 수단이 절실히 요구되었다.

본 발명의 일실시예의 목적은 상기한 문제점을 해결하는 것이다.

본 발명의 일실시예의 목적은 손상받고 무너진 피부 장벽을 복원하고 강화하며 지치고 고갈된 세포에 생명력을 불어 넣는 것이다.

본 발명의 또 다른 일실시예의 목적은 외부 유해 환경으로부터 피부를 보호하고 피부 수분을 외부로 빼앗기지 않도록 하는 것이다.

본 발명의 또 다른 일실시예의 목적은 피부 속의 유해 인자로부터 피부를 방어하며, 손상되고 부족한 피부 속의 콜라겐을 재생하는 것이다.

본 발명의 또 다른 일실시예의 목적은 유효성분들의 피부 흡수를 증가시키며 유효성분들이 피부 내의 타겟 부위에 정확히 전달되도록 하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 일실시예의 목적은 유효성분으로서 오메가-3 지방산을 함유한 안정한 제형을 제공하는 것이다.

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 오메가-3 지방산을 유효성분으로서 함유한다.

이하, 본 발명에 관하여 더욱 상세히 설명한다.

본 발명의 일실시예에 따른 피부 외용제 조성물은 수중유형 에멀젼 제형인 것이 바람직하다. 여기에서, 오메가-3 지방산은 상기 수중유형 에멀젼의 오일 상에 용해 또는 혼합되어 있을 수 있다. 또한, 상기 오메가-3 지방산은 상기 수중유형 에멀젼의 물 상에 첨가되는 지질 나노입자 내에 존재할 수도 있다.

본 발명의 일실시예에 따른 피부 외용제 조성물은 수중유형 에멀젼이며, 상기 수중유형 에멀전은 오메가-3 지방산을 함유하는 유적(oil droplet) 및 오메가-3 지방산을 함유하지 않는 지질 나노입자를 포함하는 수상으로 구성된 것일 수 있다.

본 발명의 일실시예에 따른 피부 외용제 조성물은 수중유형 에멀젼이며, 상기 수중유형 에멀전은 오메가-3 지방산을 함유하는 유적(oil droplet) 및 오메가-3 지방산을 함유하는 지질 나노입자를 포함하는 수상으로 구성된 것일 수 있다.

한편, 본 발명의 일실시예에 따른 피부 외용제 조성물은 오메가-3 지방산이 지질 나노입자에 함유되어 있고, 상기 지질 나노입자는 물에 분산되어 있는 것일 수 있다.

한편, 본 발명의 일실시예에 따른 피부 외용제 조성물은 상기 오메가-3 지방산이 물 또는 수성 매질에 분산된 리포좀 내에 함유되어 있는 것일 수 있다.

본 발명의 일실시예를 이용하면 손상받고 무너진 피부 장벽을 복원하고 강화하며 지치고 고갈된 세포에 생명력을 불어 넣을 수 있고, 외부 유해 환경으로부터 피부를 보호하고 피부 수분을 외부로 빼앗기지 않도록 할 수 있으며, 피부 속의 유해 인자로부터 피부를 방어하며, 손상되고 부족한 피부 속의 콜라겐을 재생할 수 있다. 더 나아가, 유효성분들의 피부 흡수를 증가시키며 유효성분들이 피부 내의 타겟 부위에 정확히 전달되도록 할 수 있다. 또한, 오메가-3 지방산을 유효성분으로 함유하는 안정한 제형을 제공할 수 있다.

도 1은 본 발명의 일실시예에 따른 입자로서, 오메가-3 지방산이 지질 입자 내에 분산되어 있는 복합체(나노 지질 캐리어)를 도식적으로 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 일실시예에 따라 제조된 지질 입자를 전자 현미경으로 촬영한 사진이다.
도 3은 오메가-3 지방산의 MMP-1 생성 저해 효과에 관한 실험 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명의 일실시예에 따른 피부 외용제 조성물을 도포하기 전과 후의 피부 수분 함유량을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 본 발명의 일실시예에 따른 피부 외용제 조성물을 도포하기 전과 후의 각질량을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 6는 본 발명의 일실시예에 따른 피부 외용제 조성물을 도포하기 전과 후의 피부 거칠기를 나타낸 것이다.
도 7은 본 발명의 일실시예에 따른 피부 외용제 조성물을 도포하기 전과 후의 진피 치밀도를 나타낸 것이다.
도 8은 본 발명의 일실시예에 따른 전달 시스템의 피부 투과성을 다른 시스템과 비교한 결과를 나타낸 것이다.
도 9는 본 발명의 일실시예에 따른 전달 시스템의 효과 지속성을 다른 시스템과 비교한 결과를 나타낸 것이다.
도 10은 본 발명의 일실시예에 따른 전달 시스템의 수분 보유량을 다른 시스템과 비교한 결과를 나타낸 것이다.
도 11은 오메가-3 지방산이 세라마이드 생성량을 증가시키는 효능이 있음을 입증하는 결과이다.
도 12는 오메가-3 지방산이 엘라스틴 생성량을 증가시키는 효능이 있음을 입증하는 결과이다.
도 13은 오메가-3 지방산이 MMP의 양을 감소시키는 효능이 있음을 입증하는 결과이다.

본 명세서에서 "오메가-3 지방산"이라 함은, 불포화지방산의 일종으로서, 지방산의 화학구조에서 COOH기의 끝인 메틸기를 그리스문자 "ω"로 표기하여 메틸기로부터 최초의 이중결합 위치에 따라 명명되었다. 오메가-3 지방산의 예로는 EPA(eicosapentanoic acid, C20:5ω-3), DPA(docosapentaenoic acid), DHA(docosahexanoic acid, C22:6ω-3), ALA(α-Linolenic acid, C18:3ω-3) 등을 들 수 있다.

본 발명의 일 실시예에서 바람직한 제형은 수중유형(o/w) 에멀젼과 지질 나노입자를 포함하는 에멀젼이다. 여기서, 지질 나노입자란 말 그대로 나노미터의 크기를 갖는 입자로서 그 입자 내부 매트릭스가 실온 및 인체 내에서 고형(solid)인 지질 또는 지질 혼합물로 구성된 입자를 말한다. 본 발명에 따른 피부 외용제의 유효성분인 오메가-3 지방산은 상기한 에멀젼의 오일에 용해되거나 아니면 상기 지질 나노입자의 입자 매트릭스 내에 삽입될 수 있다. 또한, 상기 에멀젼의 오일 상에 용해됨과 동시에 상기 지질 나노입자의 매트릭스 내에도 삽입될 수도 있다.

본 발명의 일실시예에서 오메가-3 지방산은 블랙 커런트 오일(Black Current Oil, BCO)의 형태로 사용될 수 있다. 상기 블랙 커런트 오일은 높은 함량의 오메가-3 지방산을 함유하고 있다. 그 외에도, 동물 유래의 공급원, 예컨대, 어류 유래의 오메가 3-지방산이 사용될 수도 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 바람직한 오메가-3 지방산의 형태는 블랙 커런트 오일의 형태이다. 즉, 오메가-3 지방산 대신 블랙 커런트 오일을 지질 나노입자에 로딩시키거나 수중유형 에멀젼의 유상에 혼합할 수 있다. 블랙 커런트는 유럽 북서부가 원산지이며, 그늘에서 잘 자라고 추위에도 강하다. 높이는 1m에 달한다. 꽃은 양성화이며 4～5월에 피고 총상꽃차례를 이루며 달린다. 열매는 장과이고 7～8월에 익는데, 열매의 색깔이 붉은 색이므로 붉은 커런트(red currant)라고도 한다. 블랙 커런트(black currant)는 유럽 및 중앙아시아가 원산지인 알. 니그룸(R. nigrum)이다. 블랙 커런트는 즙이 많고 신맛이 강해 유럽에서는 잼이나 주스 또는 젤리를 만들어 먹는다. 또한 블랙 커런트는 발효시키기도 하며 약용정제로 만들기도 한다. 커런트에는 비타민C가 특히 많이 들어 있고 칼슘, 인, 철 등도 많이 들어 있다. 커런트라는 말은 '씨 없는 작은 건포도'를 가리킬 때도 있다.　블랙 커런트는 칼륨, 마그네슘, 철, 칼슘, 비타민A, 비타민B, 비타민C과 미량 미네랄, 유기산, Poyphen이　타 과실보다 다량 함유되어 있어 "베리들의 왕"이라 불린다. 건강유지에 중요한 역할을 하는 천연활성 식물종합영양소(Phytonutrients)가 다량 함유되어 있다. 특히 안토시아닌의 함량이 타 과실과 비교하여 가장 높으며 오일에는 오메가-3와 오메가-5 필수 지방산이 풍부하다.

본 발명의 일실시예에서 오메가-3 지방산이 로딩된 수중유형(o/w) 에멀젼은, 블랙 커런트 오일을 에멀젼의 오일 상에 혼합한 후 물에서 에멀젼화시킴으로써 간단히 제조될 수 있다. 상기 오일 상을 분산시키기 위한 장비의 예로서, 고속 교반기, 정지 블렌더(static blender), 초음파 또는 고압 호모게나이저 등을 들 수 있다.

본 발명의 일실시예에 따른 피부 외용제에 있어서, 바람직한 오메가-3 지방산의 함량은 0.01 내지 50중량%, 더 바람직하게는 0.01 내지 10중량%, 더욱 더 바람직하게는 0.01 내지 5중량%이다. 가장 바람직하게는 0.5 내지 3중량%이다. 상기 범위보다 낮으면 효과가 미미하고, 상기 범위를 초과하더라도 효과가 많이 상승하지 않아 비경제적이며 제형을 불안정하게 할 수 있기 때문이다.

본 발명의 일실시예에 따른 오메가-3 지방산이 로딩된 지질 나노입자는, 지질을 그것의 융점 이상인 약 5℃에서 용융시키고 BCO를 동일 온도로 가열한 후 상기 용융된 지질 상에 혼합시킴으로써 제조될 수 있다. 상기 오메가-3 지방산 함유 지질 용융물은 동일 온도의 고온의 계면활성제 용액 중에 분산된다. 지질 용융물의 분산을 위해서는 50㎛ 미만, 바람직하게는 10㎛ 미만, 더 바람직하게는 5㎛ 미만, 가장 바람직하게는 1㎛ 미만인(즉, 지질 나노입자인) 입자 크기로 상기 용융된 상을 분산시키기에 충분한 에너지를 제공하는 수단이라면 어떤 방법이라도 사용될 수 있다. 상기 에멀젼 제조에서 언급하였던 것과 동일한 장비가 사용될 수도 있다. 특히 지질 나노입자의 제조를 위해서 초음파 및 고압 호모게나이저(예컨대, 피스톤-갭 호모게나이저, 제트 스트림 호모게나이저)가 가장 적합하다. 분산 공정의 결과 고온의 나노에멀젼이 얻어진다. 이를 냉각시키면 지질의 재결정화가 일어나고 고형(solid)의 지질 마이크로입자 또는 지질 나노입자가 형성된다.

오메가-3 지방산을 혼합하거나 또는 오메가-3 지방산 함유 오일을 혼합하기 위해 사용되는 지질은 한 종의 고형(solid) 지질일 수 있고, 한 종 이상의 고형 지질의 혼합물일 수도 있고, 하나 이상의 액상 지질과 고형 지질의 혼합물일 수도 있다. 지질로서 바람직한 것으로, 카나우바, 칸델릴라 왁스 같은 식물성 왁스나 세틸 팔미테이트(cetyl palmitate)와 같은 지방산 유도체, 세라마이드, 콜레스테롤, 포스파티딜콜린 같은 생물체에서 발견되는 지질을 들 수 있다.

계면활성제의 예로는 Tego Care 450(Goldschmidt GmbH, Germany) 및 Planta Care 2000(Cognis GmbH, Germany)을 들 수 있다.

최종 국소 제형을 제조하기 위해서 지질 입자 서스펜션은 실온에서 수중유형(o/w) 크림(또는 로션, 즉 오일 함량이 감소된 제형)으로 혼합된다. 바람직하게는 지질 입자 서스펜션은 상대적으로 높은 농도를 가져(예컨대, 30%, 50%), 수중유형 크림 또는 로션이 너무 강하게 희석되지 않도록 하는 것이 좋다.

본 발명의 일실시예에 따른 피부 외용제 조성물에 있어서, 오메가-3 지방산은 세포 막과 세포 간지질의 구성 성분이 되어 세포의 유연성과 내외부 물질 유입의 기능을 함으로써, 침대의 유연한 스프링과 같은 역할을 한다. 즉, 적정한 불포화 지방산은 피부에 유연성과 탄력을 부여하고 이것이 부족할 경우 피부는 딱딱하고 거칠어지며 쉽게 손상받는다. 피부에서 오메가-3 지방산은 피부 장벽 구성 및 보습, 유연 등 다양한 기능을 담당할 수 있다.

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물에서 지질 나노입자는 폐쇄 효과(occlusive effect)를 나타내어 활성 성분들의 투과를 증진시킨다. 이러한 효과를 달성하기 위해서, 오메가-3 지방산이 로딩되지 아니한 지질 나노입자가 오메가-3 지방산을 에멀젼 유적(droplet)에 함유한 수중유형 크림 또는 로션으로 혼합될 수 있다. 지질 나노입자의 이러한 폐쇄효과는 오메가-3 지방산이 수중유형 에멀젼 시스템으로부터 피부로 흡착하는 것을 증진시킨다.

본 발명의 일실시예에 따르면, 오메가-3 지방산은 리포좀, 다중 에멀젼, 마이크로스폰지 전달 시스템 또는 코클레아트(cochleate) 등과 같은 다른 피부 전달 시스템을 통해 피부에 전달될 수도 있다.

본 발명의 일실시예에 따른 피부 외용제 조성물에 따르면, 유효성분으로서 로즈비타 추출물(Rosevita extract) 및/또는 구리-펩타이드를 더 포함하는 것이 바람직하다.

로즈비타 추출물은 생열귀 추출물(Rosa Davurica Bud Extract)이라고도 한다. 생열귀는 들장미의 한 종류로서 백악기 말기의 헌화식물로, 3천5백만년전 화석이 발견된 것으로 보아 빙하기를 이겨내며 자생한 생명력이 강한 식물이다. 생열귀에는 열매와 잎에 레몬보다 함량이 20~60배 높은 비타민 C를 함유하며, 베타 카로틴도 다량 함유되어 있다. 특히 카테킨이 고농도로 함유되어 있어, 자외선 등 피부 내외 여러 유해요소의 산화적 스트레스에 의해 손상받은 피부를 복구시켜 주는 효과가 강력하다.

구리-펩타이드(Copper peptide)는 Cu가 함유된 저분자, 특히 분자량이 500이하, 즉 아미노산 개수는 5개 이하인 구리-펩타이드가 바람직하다. 예컨대, Copper Tripeptide-1(GHK 서열) (분자량 약 420정도임)을 들 수 있다. 구리-펩타이드는 체내 피부 세포의 콜라겐 생성을 촉진하고 피부 조직의 상처를 치유하는 효과를 나타낸다.

본 발명의 일실시예에 따른 피부 외용제 조성물에서, 유효성분인 오메가-3 지방산은 손상받고 무너진 피부 장벽을 복원하고 강화하는 기능과 지치고 고갈된 세포에 생명력을 불어넣는 영양 기능을 담당한다. 이러한 오메가-3의 기능은 치유(healing) 기능에 해당한다. 또한, 지질 나노입자는 오메가-3 지방산이 방출된 후에도 피부에 부착된 채로 남아 외부 유해 환경으로부터 피부를 보호하고 피부 수분을 외부로 빼앗기지 않도록 하는 보습 기능을 담당한다. 이러한 지질 나노입자의 기능은 실링(sealing) 기능에 해당한다. 부가적인 유효성분인 로즈비타 추출물은 피부 속의 유해 인자로부터 피부를 방어하는 기능을 담당하며, 구리-펩타이드는 손상되고 부족한 피부 속의 콜라겐을 재생하는 기능을 담당하게 된다. 이와 같이 본 발명의 일실시예에서, 중요한 4가지 성분은 각기 고유한 기능을 담당함으로써 전체적인 피부 보호가 가능하도록 시너지 효과를 발휘할 수 있게 된다.

본 발명의 일실시예에 따른 지질 나노입자는 유효성분들의 피부 흡수를 증가시키며 유효성분들이 피부 내의 타겟 부위에 정확히 전달되도록 하는 기능을 수행한다.

도 1은 본 발명의 일실시예에 따른 입자로서, 오메가-3 지방산과 같은 유효성분이 지질 나노입자 내에 분산되어 있는 복합체를 도시한 것이다. 상기 유효성분은 오메가-3 지방산과 로즈비타 추출물 및/또는 구리 펩타이드의 혼합물일 수 있다.

이하, 실시예를 들어 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하고자 하나, 본 발명이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

실시예

실시예 1: 오메가-3 지방산이 함유된 지질 나노입자의 제조

카나우바왁스를 융점에서 5℃ 이상인 온도에서 용융시키고 블랙 커런트 오일을 동일 온도로 가열한 후 상기 용융된 지질 상에 혼합시켰다. 상기 오메가-3 지방산 함유 지질 용융물을 동일 온도의 고온의 계면활성제(Tego Care 450) (Goldschmidt GmbH, Germany)용액 중에 분산시켰다. 입자 크기를 1㎛ 미만으로 형성시키기 위하여 제트 스트림 호모게나이저를 이용하여 분산시켰다. 그 결과 얻어진 고온의 나노 에멀젼을 냉각시켜 지질을 재결정화 시킴으로써 고형(solid)의 지질 나노입자를 제조하였다. 그 결과 제조된 지질 나노입자를 촬영한 사진을 도 2에 나타내었다.

실시예 2: 오메가-3 지방산이 함유되지 아니한 지질 나노입자의 제조

오메가-3 지방산을 넣지 않은 것을 제외하고는 상기 실시예 2와 같이 하여 지질 나노입자를 제조하였다.

실시예 3: 오메가-3 지방산을 함유하는 유적 및 오메가-3 지방산을 함유하지 않는 지질 나노입자를 포함하는 수상으로 구성된 수중유형 에멀젼 제형의 제조

하기 표 1의 조성대로 에멀젼 제형을 제조하였다. 유상 성분을 70℃이상에서 균질하게 용해 및 혼합하고, 수상 성분 1은 지질 나노입자를 제외한 원료들을 갖고 70℃이상에서 균질하게 용해 및 혼합한 후, 수상 성분을 담은 배치에 유상 성분을 천천히 투입하면서 호모게나이저로 믹싱해 주었다. 3분 믹싱 후 수상 성분 2를 천천히 투입하여 2차 유화(호모게나이저로 믹싱)하고 천천히 냉각시켰다. 에멀젼 온도가 50℃ 이하가 되었을 때 상기 실시예 2에 따라 제조된 지질 나노입자를 천천히 패들믹싱하면서 투입하였다.

실시예 4: 오메가-3 지방산을 함유하는 유적 및 오메가-3 지방산을 함유하는 지질 나노입자를 포함하는 수상으로 구성된 수중유형 에멀젼 제형의 제조

하기 표 1의 조성대로 에멀젼 제형을 제조하였다. 실시예 1에 따라 제조된 나노입자를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 3과 동일하게 실시하였다.

실시예 5: 오메가-3 지방산이 함유되어 있는 지질 나노입자가 물에 분산되어 있는 에멀젼 제형의 제조

하기 표 1의 조성대로 에멀젼 제형을 제조하였다. 블랙 커런트 오일(오메가-3 지방산)이 유상 성분에 포함되지 아니한 것을 제외하고는 상기 실시예 4와 동일하게 실시하였다.

실시예 6: 오메가-3 지방산이 물 또는 수성 매질에 분산된 리포좀 내에 함유되어 있는 제형의 제조

하기 표 1의 조성대로 에멀젼 제형을 제조하였다. 당업계에 널리 공지된 방법에 따라 에탄올에 오메가-3 지방산을 용해시키고, 수상에 리포좀을 형성하는 포스포리피드를 70℃이상에서 가온 용해한 후 에탄올 파트를 수상에 투입하면서 균질하게 혼합해주고 서서히 냉각하여 리포좀을 제조하였다. 지질 나노입자 분산 베이스 대신 오메가-3 함유 리포좀 베이스를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 5와 동일하게 실시하였다.

구분	원료명	실시예 3	실시예 4	실시예 5	실시예 6
유상 성분	스테아릭액시드	1.0	1.0	1.0	1.0
	세테아릴알코올	0.2	0.2	0.2	0.2
	하이드로제네이티드 오일	0.7	0.7	0.7	0.7
	친유형글리세릴스테아레이트	0.5	0.5	0.5	0.5
	하이드로제네이티드레시틴/C12-16알코올/팔미틱액시드	1.0	1.0	1.0	1.0
	방부제	0.3	0.3	0.3	0.3
	폴리데센	4.0	4.0	4.0	4.0
	메도우폼시드오일	1.0	1.0	1.0	1.0
	펜타에리스리틸테트라이소스테아레이트	3.0	3.0	3.0	3.0
	디메치콘	0.5	0.5	0.5	0.5
	세틸옥타노에이트	2.0	2.0	2.0	2.0
	블랙커런트 오일(BCO, ω-3)	1.0	1.0	-	-
	사이클로메치콘	3.0	3.0	3.0	3.0
	향	적량	적량	적량	적량
수상 성분 1	정제수	To 100	To 100	To 100	To 100
	글리세린	4.0	4.0	4.0	4.0
	부틸렌글리콜	5.0	5.0	5.0	5.0
	디소듐이디티에이	0.02	0.02	0.02	0.02
	티이에이(트리에탄올아민)	0.15	0.15	0.15	0.15
	방부제	0.2	0.2	0.2	0.2
	ω-3 미함유 지질 나노입자 분산 베이스	10.0	-	-	-
	ω-3 함유 지질 나노입자 분산 베이스	-	10.0	10.0	-
	ω-3 함유 리포좀 베이스	-	-	-	10.0
수상 성분2	카보머 1%수용액	12.0	12.0	12.0	12.0

(중량%)

실시예 7: 로즈비타 추출물 및 구리 펩타이드를 더 포함하는 제형의 제조

하기 표 2의 조성에 따라 유효성분으로서 오메가-3 지방산 뿐만 아니라 로즈비타 추출물 및 구리 펩타이드를 모두 포함하는 제형을 제조하였다. 하기 표 2 중에서 ω-3 함유 지질 나노입자 분산 베이스는 상기 실시예 1에 따라 제조된 지질 나노입자이다. 유상 성분과 수상 성분을 70℃이상에서 호모게나이저로 균질하게 혼합한 후, 냉각시키고, 50℃이하가 되면 ω-3 함유 지질 나노입자 분산 베이스, 로즈비타, 구리펩타이드를 투입하고 천천히 패들믹싱해 주어 제조하였다.

원료명	실시예 7
정제수	To 100
ω-3 함유 지질 나노입자 분산 베이스	10.0
로즈비타	3.0
구리 펩타이드	3.0
EDTA 2Na	0.02
글리세린	3.00
식물성 경화유	1.50
스테아린산	0.60
글리세릴 스테아레이트	1.00
세테아릴 알콜올	2.00
아라키딜/베헤닐 알코올&아라키딜글루코사이드	1.00
세틸아릴 알코올 & 세테아릴글루코사이드	2.00
액상파라핀	6.00
카프릴릭/카르릭 트리글리세라이드	6.00
카보머	0.05
트리에탄올아민	0.05
방부제, 향, 색소	적량

(중량%)

이하, 본 발명의 효과를 입증하기 위하여 본 발명자들은 다음과 같은 실험을 수행하였다.

실험예 1: 오메가-3 지방산의 MMP -1 생성 저해 효과에 관한 실험

NHF (Normal human fibroblast) 를 24웰-플레이트에 한 웰당 1 X 10⁵ 세포씩 분주하고, 10% 혈청이 들어있는 배지에서 24시간 키운 후에, 혈청이 없는 배지에서 24시간 더 키웠다. PBS로 1회 세척한 후, 100μL PBS를 첨가한 상태에서 UVB 30mJ J/cm²를 조사하였다. PBS를 제거한 후, 혈청이 없는 새로운 배지에 오메가-3 지방산을 0, 1, 5, 10 mM 의 농도별로 처리하여 각 웰에 1ml씩 넣어주었다. 오메가-3 지방산을 처리한지 48시간 경과한 후 상청액을 수거하여 일부는 MMP-1 발현 분석을 ELISA kit(amersharm pharmacia, cat. #; RPN 2610)를 이용하여 수행하였다. 각각 측정된 MMP-1의 양은 총 단백질(total protein) 양으로 보정하였다.

도 3에 나타난 바와 같이, 오메가-3 지방산이 UV에 의해 유도된 MMP-1(콜라겐을 분해하는 효소)의 발현을 농도 의존적으로 억제함을 알 수 있다. 이를 통해, 오메가-3 지방산은 콜라겐의 분해를 억제함으로써 피부 주름을 예방하고 나아가 노화를 예방할 수 있는 것이다. 오메가-3 지방산은 콜라겐의 생성을 촉진하고 이를 통해 주름을 개선하고 노화를 방지할 수 있는 것이다.

실험예 2: 임상 시험

본 시험은 병력 조사 및 피부 상태 진단을 통해 시험 목적에 적합한 피험자를 선정하고 4주간 실시예 5에 따라 제조된 제형을 제품의 사용법에 따라 정상적으로 사용하게 하였다. 사용 전과 사용 1주, 2주, 4주 후 시점에서 총 4회 피부 수분, 각질개선, 피부 거칠기 상태 및 진피치밀도 상태를 측정하였으며 이를 위해 이용된 측정 기기는 다음과 같다(표 3).

No	측정 항목	측정 기기	측정 부위
1	안면 촬영	Facial Stage DM-3 (MORITEX, Japan )	안면전체
2	피부 수분 상태	Corneometer CM825 (C+K, Germany)	우측 뺨
3	피부 각질 상태	D-SQUAME tape(Cuderm, USA) , Black tape (MORITEX, Japan)	좌우측 뺨
4	피부 거칠기 상태	D-SQUAME tape(Cuderm, USA)	좌측 뺨
5	진피 치밀도	DermaScan C(Cortex, Denmark)	우측 뺨

또한 제품 사용 1주, 2주, 4주 후 제품에 관한 효능 및 안전성에 관한 설문을 작성하도록 하였다.

기기 측정치에 대하여 제품 사용전과 사용 후 비교 시 통계적으로 유의한 변화 여부를 알아보기 위해서 SPSS Package Program의 Paired t-test방법을 이용하였다(유효편차<0.05).

총 21명의 피험자가 본 시험에 참여하였으나 1명이 개인사정으로 인해 자진 탈락하여 종료 시점까지 총 20명이 시험 전 과정을 성실히 수행하였다. 시험에 참여한 피험자 특징과 피부특성을 분석해 보면 다음과 같다(표 2, 3, 4). 시험에 참여한 피험자들의 평균연령은 39.1±5 였으며 이들의 피부 타입은 건성과 중건성이 각각 25.00%(5명), 중성이 20.00%(4명), 중지성 15.00%(3명), 나머지 지성 15.00%(3명)으로 나타났다.

피험자의 수분은 건조하다가 50.00%(10명)로 나타났고 45.00%(9명)는 보통에 속하였다. 유분 상태는 20.00%(4명)가 번들거림, 50.00%(10명)가 보통, 30.00%(6명)은 부족한 것으로 나타났다. 피험자의 피부 표면 상태는 15.00%(3명)이 부드러운 편에 속하였고 70.00%(14명)은 보통이었으며, 피부 두께는 70.00%(14명)가 보통이라고 응답하였다. 자외선 노출시간은 1시간 미만이 35.00%(7명), 1-3시간이 55.00%(11명), 3시간 이상이 10.00%(2명)이었다.

피부의 색소침착 정도에 대해서는 거의 생성 안됨이 10.00%(2명), 55.00%(11명)는 보통에 속하였고, 나머지 35.00%(7명)는 색소 침착이 잘되는 편으로 나타났다.

<피부가 생기 있는 편입니까> 항목에는 25.00%(5명)이 <예>, 75.00%(15명)이 아니오라고 답하였고, '피부가 밝은 편입니까' 항목과 '탄력이 좋습니까' 항목은 30.00%(6명)만 <예>라고 응답하였다. '피부 노화를 느끼십니까' 항목은 80.00%(16명)이 '예'라고 답하였다.

'자극감수성' 항목은 75.00%(15명)이 '아니요'라고 응답하였고 '따가움, 감수성' 항목은 80.00%(16명), '부작용 경험'은 95.00%(19명)이 '아니요' 라고 답하였다.

번호	이름	연령	성별	탈락여부
1	JSJ	37	F	-
2	HJH	38	F	-
3	HHE	38	F	-
4	CYK	36	F	-
5	SEY	34	F	-
6	JNS	37	F	-
7	KYS	37	F	-
8	CHK	44	F	-
9	SJH	39	F	-
10	KSA	40	F	-
11	KHJ	29	F	-
12	CJA	45	F	-
13	HKY	46	F	-
14	JJO	44	F	-
15	KKS	46	F	-
16	KMJ	44	F	-
17	SYW	34	F	-
18	HEY	38	F	-
19	LHK	39	F	-
20	KJM	37	F	-
21	KES	40	F	방문 불가

항 목	분 류	빈 도(수)	비 율(%)
연 령	20대	1	5.00
	30대	12	60.00
	40대	7	35.00
피부 타입	건성	5	25.00
	중건성	5	25.00
	중성	4	20.00
	중지성	3	15.00
	지성	3	15.00
	문제성 피부	0	0.00

항 목	분 류	빈 도(수)	비 율(%)
수분	촉촉	1	5.00
	보통	9	45.00
	건조	10	50.00
유분	번들거림	4	20.00
	보통	10	50.00
	부족	6	30.00
표면상태	부드러움	3	15.00
	보통	14	70.00
	거친편	3	15.00
피부두께	얇은편	4	20.00
	보통	14	70.00
	두꺼움	2	10.00
자외선 노출 시간	1시간 미만	7	35.00
	1-3시간	11	55.00
	3시간 이상	2	10.00
색소침착 정도	거의 안됨	2	10.00
	보통	11	55.00
	잘됨	7	35.00
생기	예	5	25.00
	아니오	15	75.00
피부 밝은편	예	6	30.00
	아니오	14	70.00
탄력	예	6	30.00
	아니오	14	70.00
노화	예	16	80.00
	아니오	4	20.00
자극감수성	예	5	25.00
	아니오	15	75.00
따가움감수성	예	4	20.00
	아니오	16	80.00
부작용경험	예	1	5.00
	아니오	19	95.00

(1) 피부 수분 측정

Corneometer CM 825 (C+K, Germany)를 이용해 피부 수분 함유량을 측정하였다. 측정 결과 제품 사용 전에 비해 제품 사용 1주 후, 2주 후와 4주 후 시점에서 피부의 수분 함유량이 유의하게 증가 하였다(표 7, 도 4).

시 점	Mean	S.D	SE.Mean	P-value
0주	51.33	1.9170	8.5732	-
1주	56.28	1.8673	8.3507	0.0002 *
2주	60.68	1.7228	7.7045	0.0000 *
4주	63.58	1.7341	7.7550	0.0000 *

(2) 각질량 측정

각질의 박리 정도와 피부 표면의 거칠기를 분석하기 위하여 Black tape(MORITEX, Japan)를 이용하여 각질을 채취하였다. 측정 부위를 좌우측 나누어서 좌(우)측 부위는 Black tape로, 우(좌)측 부위는 Cyanoacylate 를 바른 D-squame tape (Cuderm, USA)으로 각질층을 채취하였다.

Black tape 에 부착된 각질을 특수 제작된 Charmview scope(MORITEX, Japan) 를 이용하여 700배 디지털 사진을 촬영하여 bitmap image 로 변환하였고 이를 BMI image analysis software(WINaTech, USA)를 이용하여 각질의 면적(pixel number)를 구하였다. 분석값은 paired t-test을 이용하여 시료 사용전과 사용 2주, 4주 후 값을 비교 분석하였다. 분석 결과 제품 사용 전에 비해 제품 사용 1주 후부터 4주 후 시점까지 각질량이 유의하게 감소하였다(표 8, 도 5).

시점	Mean	S.D	SE.Mean	P-value
0주	15.4749	3.4806	0.7783	-
1주	12.4222	3.4042	0.7612	0.0015*
2주	10.6448	3.5272	0.7887	0.0002*
4 주	7.6750	2.6527	0.5932	0.0000*

(3) 피부 거칠기의 측정

Cyanoacrylate 를 D-squame tape에 떨어뜨린 후 측정부위에 1분간 부착하여 피부표면의 각질층을 채취하였다. 채취한 각질층을 ion sputter 에서 Pt/Pd로 코팅한 후 SEM (HITACHI S-4300)로 50배, 100배 관찰한 후 이미지를 저장하였다. 본 이미지를 숙련된 시험자 두 명이 각질이 일어난 정도와 정돈된 상태에 따라 기준 등급을 바탕으로 촬영한 각질층 샘플에 등급을 부여하였다. 분석 값은 paired t-test를 이용하여 시료 사용전과 사용 2주, 4주 후 값을 비교 분석하였고, 시료 도포 전 판정등급을 보정하여 피부 거칠기 개선율을 구하였다. 분석 결과 제품 사용 2, 4주 후, 통계적으로 유의하게 거칠기가 감소하였다(표 9, 표 10, 도 6).

판정등급	판정기준
1	각질이 일어나지 않음
2	작은 각질이 조금 일어남
3	작은 각질이 전체적으로 일어나기 시작
4	덩어리진 각질이 일어나기 시작
5	큰 덩어리의 각질이 전체적으로 일어남

시점	Mean	S.D	SE.Mean	P-value
0주	2.7750	0.7518	0.1681	-
2주	2.2500	0.6977	0.1560	0.0153*
4 주	1.9750	0.4993	0.1117	0.0006*

(4) 진피 치밀도

Cortex사의 DermaScanCㄾ를 이용해 초음파 촬영을 실시하여 진피층의 치밀도를 측정하였다. 측정 결과 제품 사용 전에 비해 제품사용 2주 후와 4주 후 시점에서 진피 치밀도가 유의하게 증가 하였다(표 11, 도 7).

시점	Mean	S.D	SE.Mean	P-value
0주	5.353	0.1245	0.5568	-
1주	5.468	0.1773	0.7930	0.2392
2주	5.715	0.1998	0.8935	0.0169*
4주	5.800	0.2056	0.9195	0.0071*

(4) 설문 평가

제품 사용 1주, 2주, 4주 후 시점에서 제품 사용성과 만족도를 설문 평가 한 것을 기초로 긍정적으로 응답한 결과를 평가 시점별로 정리하면 다음과 같다.

아래 표 12의 점수는 각 패널들이 1점에서 5점까지 부여한 점수를 통계화한 것이다. 점수가 높을수록 우수한 것이다.

항목	1주	2주	4주
촉촉해졌다	3.45	3.65 (▲ 5.80%)	4.10 (▲18.84%)
당김이 감소되었다	3.40	3.60 (▲ 5.88%)	4.25 (▲25.00%)
윤기가 난다	3.35	3.45 (▲ 2.99%)	3.75 (▲11.94%)
부드러워졌다	3.50	3.65 (▲ 4.29%)	3.95 (▲12.86%)
각질이 감소되었다	3.30	3.40 (▲ 3.03%)	3.65 (▲10.61%)
피부결이 고와졌다	3.50	3.80 (▲ 8.57%)	4.00 (▲14.29%)
(잔)주름이 감소되었다	2.95	3.10 (▲ 5.08%)	3.35 (▲13.56%)
탄력이 증가하였다	3.10	3.25 (▲ 4.84%)	3.60 (▲16.13%)
피부색이 밝아졌다	3.05	3.45 (▲13.11%)	3.80 (▲24.59%)
화장이 잘 받는다	3.40	3.80 (▲11.76%)	4.30 (▲26.47%)
피부가 건강해졌다	3.15	3.45 (▲ 9.52%)	3.75 (▲19.05%)
피부에 생기가 돈다	3.10	3.40 (▲ 9.68%)	3.75 (▲20.97%)

▲;(사용후-사용전)/사용전*100

아래 표 13의 점수는 시험자 20명 중에 만족한다고 답한 사람의 수(Frequency)이다.

항목	Frequency	%
색	18	90
향	13	65
발림성	19	95
흡수력	18	90
만족도	18	90

실험예 3: 전달 시스템 간의 비교 실험

(1) 피부 투과성

하기 표 14의 조성에 따라 수성 지질 나노입자 분산 베이스(1)와 수성 지질 마이크로입자 분산 베이스(2)를 각각 제조하였다. 조성은 테고케어(계면활성제)의 함량이 다른 것을 제외하고는 동일하였다. 1의 경우 고압유화기를 사용하여 입자를 나노크기로 잘게 쪼갰고 2의 경우 일반유화기를 사용하여 마이크로크기의 에멀젼을 제조하였다.

성분	1	2
블랙커런트오일	20.0	20.0
카나우바 왁스	20.0	20.0
테고케어 450	5.0	1.0
정제수	To 100	To 100
글리세린	20.0	20.0
페노닙(방부제)	0.1	0.1

(중량%)

피부 투과성은 다음과 같은 방법으로 측정하였다.

6-8주령 무모 생쥐 피부(hairless mouse skin)를 2 x 2 cm² 정도로 자른 후 프란츠 타입의 글래스 확산기구 (franz-type diffusion cell, 내경 9 mm)에 피부를 잘 덮은 후 캡을 씌우고 고정을 시켰다. 리셉터 부분에 0.01M 인산 완충용액 (pH 7.4)을 넣고 확산기구의 온도는 섭씨 37±0.1℃를 유지시켰다. 시험물질 50μl를 피부의 각질층 면에 적용한 다음, 리셉터 용액 (인산 완충용액)을 일정한 속도 (600 rpm)로 교반시켰다. 미리 정해진 시간(6, 24, 48시간)이 경과한 후 리셉터 부분의 용액을 0.5 ml 채취하고, 0.5 ml의 새로운 인산 완충용액을 보충해 주었다. 채취한 시료를 LSC(액체/고체 크로마토그래피)를 이용하여 농도를 측정하였다. 24시간 후 피부를 확산기구에서 떼어내어, 솜으로 4회 닦고, Transpore®(3M 테이프)를 이용하여 처음 1회 strip은 버리고 10회 연속 tape stripping을 수행하였다. 각각의 tape stripping한 것을 scintillation vial에 넣었다. 나머지 피부는 시험물질 도포부위를 잘라서 역시 scintillation vial에 넣었다. 각각의 vial에 scintillation cocktail 2.5ml을 가한 후 충분히 보텍싱한 후 LSC로 측정하였다. 그 결과는 도 8에 나타나 있다.

도 8에 나타난 바와 같이, 본 발명의 일실시예에 따른 전달 시스템의 피부 투과성이 현저히 우수하였다.

(2) 효과 지속성

하기 표 15의 조성에 따라 제형을 제조하였다. 1은 블랙 커런트오일을 단단한 카나우바 왁스 지질로 나노입자화했고, 2는 일반 미네랄 오일과 섞어 유화하였다. 그 후 1, 2에 대해서 유효 성분인 블랙 커런트 오일의 방출량을 측정하였다. 그 결과는 도 9에 나타나 있다. 도 9에 나타나 있듯이, 단단한 고상 지질로 입자화하여 약물의 방출을 늦췄고 따라서 효과가 더 오래 지속되는 것을 확인할 수 있었다.

성분	1	2
블랙커런트오일	20.0	20.0
카나우바 왁스	20.0	-
미네랄 오일	-	20.0
테고케어 450	5.0	5.0
정제수	To 100	To 100
글리세린	20.0	20.0
페노닙(방부제)	0.1	0.1

(중량%)

(3) 수분 보유량

하기 표 16의 조성에 따라 "1"은 w-3 지질 나노입자 베이스를 10% 처방(베이스는 (1) 피부 투과성의 표 14의 1과 동일, 베이스 내 유상성분이 40%이므로, 유상성분은 제형 총량 대비 4% 사용임)했고, 2는 이소프로판올을 4%, 3은 파라핀을 4% 처방하였습니다.(총 유상성분 함량 동량)

제조과정은 유상 파트를 별도 용기에서 70℃로 가열 용해시킨 후 균질화기로 분산시켜 친유형 혼합물을 제조한다. 수상 파트 역시 70℃로 가열 용해시킨 다음, 친유형 혼합물을 수상 파트에 천천히 첨가하여 70℃에서 유화를 한다. 유화 후 아이스 배스에서 급냉시키고 방부제를 투입한다. 마지막으로 에멀젼 조성물을 기밀 용기에 채우고 냉각기를 사용하여 실온으로 냉각시킨다.

구분	원료명	1	2	3
유상 성분	스테아릭액시드	1.0	1.0	1.0
	세테아릴알코올	0.2	0.2	0.2
	하이드로제네이티드 오일	0.7	0.7	0.7
	친유형글리세릴스테아레이트	0.5	0.5	0.5
	하이드로제네이티드레시틴/C1216알코올/팔미틱액시드	1.0	1.0	1.0
	방부제	0.3	0.3	0.3
	폴리데센	4.0	4.0	4.0
	메도우폼시드오일	1.0	1.0	1.0
	펜타에리스리틸테트라이소스테아레이트	3.0	3.0	3.0
	디메치콘	0.5	0.5	0.5
	세틸옥타노에이트	2.0	2.0	2.0
	이소프로판올	-	4.0	-
	파라핀	-	-	4.0
	사이클로메치콘	3.0	3.0	3.0
수상 성분 1	정제수	To 100	To 100	To 100
	글리세린	4.0	4.0	4.0
	부틸렌글리콜	5.0	5.0	5.0
	디소듐이디티에이	0.02	0.02	0.02
	티이에이(트리에탄올아민)	0.15	0.15	0.15
	방부제	0.2	0.2	0.2
	ω-3 함유 지질 나노입자 분산 베이스	10.0	-	-
수상 성분2	카보머 1%수용액	12.0	12.0	12.0

(중량%)

도 10에 나타난 바와 같이, 본 발명의 일실시예에 따른 전달 시스템의 수분 보유량이 가장 좋았다.

실험예 4: 세라마이드 생성량 측정

신생아 포피에서 얻은 피부세포(normal human keratinocyte, passage 3, 자체 제작)를 75T 배양플라스크에 KBM(0.03mM Ca^{2 +}, Clonetics, US) 배지에서 배양하였다. KBM배지에는 인슐린, 하이드로코티손, BPE(bovine pituitary extract), hEGF 등을 첨가하여 사용하였다(KGM). 3일간 배양한 후, 물질을 처리할 때, BPE를 뺀 배지에 시험 물질을 섞어서 세포에 처리하였다. 37℃(5% CO₂)에서 배양하면서 3, 6일째에 세포를 수확하여 -20℃ 냉동고에 보관하였다. 지질을 추출하여 TLC를 전개하여 발색한 후, CAMAG사의 densitometer를 이용하여 수치화 하였다. 그 결과는 도 11에 나타내었다. 도 11에 나타난 바와 같이, 본원 발명에 따른 오메가-3 지방산을 처리한 경우 세라마이드가 대조군에 비해 현저히 많이 생성된 것을 확인하였다. 세라마이드가 피부 장벽 기능의 복원 및 강화의 기능을 하므로, 오메가-3 지방산이 피부 장벽 기능의 복원 및 강화의 효능이 있음이 입증된 것이다.

실험예 5: 엘라스틴 변화 측정

본 발명의 조성물에 의한 피부 처짐 변화를 확인하기 위하여, 탄력성 감소로 인해 피부가 처지는 라이노(Rhino) 생쥐(암컷, 10주령)의 등부위에 대조군과 오메가-3 처치군을 14일동안 도포하였다. 피부 처짐 방지를 육안관찰로 하였으며, 진피층내의 엘라스틴의 양적인 변화를 수치화 하였다. 실시하여 측정하였다. 그 결과를 도 12에 나타내었다. 도 12에 나타난 바와 같이, 오메가-3 지방산을 처리한 경우 엘라스틴의 양이 증가한 것을 알 수 있었다.

실험예 6: UV 에 의한 피부 손상의 회복 또는 예방

본 발명의 조성물에 의한 자외선에 의한 피부손상의 변화를 확인하기 위하여, 무모생쥐의 등부위에 자외선을 조사하면서 시험물질을 도포하였다. 자외선이 증가할수록 피부내의 콜라겐 분해 효소인 매트릭스 메탈로 프로티아제(MMP) 증가로 인해 진피 내의 콜라겐 감소가 일어나고, 콜라겐의 감소로 인해 피부 표면에서 주름이 발생된다. 무모생쥐의 등부위에 상기 대조군과 오메가-3 처치군을 약 10주 동안 도포하였고 시험 물질은 자외선을 조사한 직후 도포하였다. 12주 후 조직을 생검하여 피부내의 MMP 양적변화를 변화를 수치화 하였다. 그 결과를 도 13에 나타내었다. 도 13에 나타난 바와 같이, MMP가 오메가-3 지방산에 의해 양이 감소된 것을 확인하였다.

Claims (9)

1. 주름 개선 또는 예방용 화장료 조성물로서,
   상기 조성물은 유효성분으로서 오메가-3 지방산을 함유하며,
   상기 조성물은 진피 치밀도를 증진시킴으로써 주름을 개선 또는 예방하는 주름 개선 또는 예방용 화장료 조성물.
2. 제1항에 있어서, 상기 오메가-3 지방산은, 오메가-3 지방산 함유 오일의 형태로 상기 피부 외용제에 함유되는 것을 특징으로 하는 주름 개선 또는 예방용 화장료 조성물.
3. 제2항에 있어서, 상기 오메가-3 지방산 함유 오일은 블랙 커런트 오일인 것을 특징으로 하는 주름 개선 또는 예방용 화장료 조성물.
4. 제1항에 있어서, 상기 오메가-3 지방산은 전체 조성물 중 0.5 내지 3중량%의 함량으로 함유된 것을 특징으로 하는 주름 개선 또는 예방용 화장료 조성물.
5. 제1항에 있어서, 상기 피부 외용제 조성물은 수중유형 에멀젼 제형인 것을 특징으로 하는 주름 개선 또는 예방용 화장료 조성물.
6. 제5항에 있어서, 상기 오메가-3 지방산은 상기 수중유형 에멀젼의 오일 상에 용해 또는 혼합되어 있는 것을 특징으로 하는 주름 개선 또는 예방용 화장료 조성물.
7. 제5항에 있어서, 상기 오메가-3 지방산은 상기 수중유형 에멀젼의 물 상에 첨가되는 지질 나노입자 내에 존재하는 것을 특징으로 하는 주름 개선 또는 예방용 화장료 조성물.
8. 제5항에 있어서, 상기 수중유형 에멀젼은 오메가-3 지방산을 함유하는 유적(oil droplet) 및 오메가-3 지방산을 함유하지 않는 지질 나노입자를 포함하는 수상으로 구성된 것을 특징으로 하는 주름 개선 또는 예방용 화장료 조성물.
9. 제5항에 있어서, 상기 수중유형 에멀젼은 오메가-3 지방산을 함유하는 유적(oil droplet) 및 오메가-3 지방산을 함유하는 지질 나노입자를 포함하는 수상으로 구성된 것을 특징으로 하는 주름 개선 또는 예방용 화장료 조성물.

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