KR101192280B1 - The preparing method of candy for young children using nano-encapsulated Angelica gigas for enhancing immune activity, and the candy - Google Patents

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Abstract

본 발명은 참당귀(Angelica gigas) 수용성 추출물의 나노입자화를 이용한 소아용 면역 증진용 캔디류 제조방법에 관한 것이다.
본 발명에 따른, 참당귀 수용성 추출물의 나노입자화를 이용한 소아용 면역 증진용 캔디의 제조방법은, 젤라틴으로 참당귀의 열수추출물을 나노입자화하여 제조하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따를 경우 나노입자화한 참당귀 추출물의 효과적인 세포 투과 기능으로 인해 적은 농도의 추출물로도 높은 활성을 기대할 수 있으므로 비용과 시간 면에서 경제적이다. 또한 쓴맛을 가지는 당귀를 젤라틴으로 포집하여 캔디로 만듦으로써 고유의 진한 냄새를 줄이고 향미를 증진시켜 어린이들도 쉽게 섭취할 수 있다.
The present invention Angelica ( Angelica) gigas ) relates to a method for preparing immune-promoting candy for children using nanoparticles of water-soluble extracts.
According to the present invention, a method for preparing a pediatric immune-promoting candy using nanoparticles of water-soluble extract of Angelica gigas is characterized in that it is produced by gelatinizing the hydrothermal extract of Angelica gigas.
According to the present invention, due to the effective cell permeation function of the nanoparticle granulated Angelica extract, high activity can be expected even with a small concentration of extract, which is economical in terms of cost and time. In addition, the bitter Angelica is collected by gelatin and made into a candy, which can be easily consumed by children by reducing the inherent odor and enhancing flavor.

Description

참당귀 열수 추출물의 나노입자화를 이용한 소아용 면역 증진용 캔디류 제조방법 및 그 캔디{The preparing method of candy for young children using nano-encapsulated Angelica gigas for enhancing immune activity, and the candy}The preparation method of candy for young children using nano-encapsulated Angelica gigas for enhancing immune activity, and the candy}
본 발명은 참당귀(Angelica gigas) 수용성 추출물의 나노입자화를 이용한 소아용 면역 증진용 캔디류 제조방법에 관한 것이다.The present invention Angelica ( Angelica) gigas ) relates to a method for preparing immune-promoting candy for children using nanoparticles of water-soluble extracts.
최근 한약재의 효율적인 체내 전달에 대한 관심이 높아짐에 따라 한방소재에 대한 연구 범위가 넓어지고, 당뇨병, 비만, 고지혈증, 암 등 각종 면역질병(immune diseases)에 대비하여 체내 면역 증진에 대한 관심이 증폭되고 있는바, 본 발명은 한약재 유용성분을 아동에게 효과적으로 전달하도록 참당귀를 적절한 방법과 수단으로 나노입자화 한 기술임을 특징으로 한다.Recently, as interest in efficient body delivery of herbal medicines has increased, the scope of research on herbal materials has expanded, and interest in improving immune system in the body in preparation for various immune diseases such as diabetes, obesity, hyperlipidemia, and cancer has been amplified. As it is, the present invention is characterized in that the nano-particles in the appropriate method and means to nanoparticles to effectively deliver the useful herbal medicine to children.
즉 본 발명은 기존의 캔디 제조법과 차별화하여 식용소재인 젤라틴 소재를 이용하여 참당귀 추출물을 100~200nm로 나노입자화 하여 첨가함으로써, 면역 증진 식품으로서의 캔디의 가치를 증진시키고자 한다. 한약재를 이용한 본 캔디 조성물은 젤라틴 나노입자화를 통해 적은 추출물로도 체내에 큰 활성을 나타낼 수 있게 되는 체내 전달 경로의 이점이 있기 때문에, 기존에 추출물의 양을 늘려서 체내에 공급해야 하는 경제적 문제점을 개선하며 젤라틴 고유의 생리활성과 상승효과를 가져 면역 활성이 효과적으로 증진된다. 또한 나노입자화 함으로써 추출물이 양극성(polarity)을 띄게 되어 체내 소화기관에 안정적으로 침투할 수 있다.
In other words, the present invention is to differentiate the conventional candy manufacturing method by using the gelatin material as an edible material, and added by adding nano-particles of the Angelica Angelica extract to 100 ~ 200nm, to enhance the value of the candy as an immune-enhancing food. Since the present candy composition using the herbal medicine has the advantage of the intracellular delivery route through which gelatin nanoparticles can show great activity in the body even with a small extract, the existing economic problem of supplying the body by increasing the amount of the extract is known. It has improved physiological and synergistic effects of gelatin, effectively enhancing immune activity. In addition, the nanoparticles make the extract polarized (polarity) can be stably penetrated into the digestive system.
참당귀(Angelica gigas)는 미나리과에 속하는 다년생 초본으로 면역 조절 효능이 있어 허약한 체질에 효과적으로 작용하는 한약재이다. 예로부터 진정, 진통, 빈혈 및 월경통, 냉대하증 등의 부인과 질환에 보혈, 청혈약으로 널리 사용되어 왔다.Angelica Angelica gigas ) is a perennial herb belonging to the family Apiaceae, which has an immunomodulatory effect and is an effective herbal medicine for fragile constitution. Since ancient times, it has been widely used as a blood donor and a blood pill for gynecological diseases such as sedation, analgesic, anemia and dysmenorrhea and hypothermia.
당귀는 깊은 산속에서 자생하나 주로 재배되며, 줄기는 높이가 1~2m 정도이고 뿌리를 약물로 사용하는데, 뿌리는 길이가 20~25㎝ 정도이고 지름이 1~5㎝ 정도로서 유즙을 함유하고 향기가 강하다. 대한약전에는 당귀의 약성으로서 '특이한 냄새가 나고 맛은 약간 쓰면서 달다'는 점을 소개하고 있으나, 이는 중국당귀와 왜당귀에서만 느낄 수 있다.Angelica is native to deep mountains but is cultivated mainly. Stems are about 1 ~ 2m high and roots are used as drugs. Roots are about 20 ~ 25㎝ long and 1 ~ 5㎝ in diameter, containing milk and fragrance. strong. The Korean Pharmacopoeia introduces the fact that as a weakness of donkey, 'it smells sweet and tastes slightly sweet', but it can be felt only in Chinese donkey and Korean donkey.
참당귀는 단맛은 나지 않고 약간 쓴맛만 난다. 성분으로는 coumarin 유도체인 decusin, decursinol과 umbelliferon 등이 보고되어 있으며, 최근 항돌연변이 활성, 암세포 생육억제활성, 간해독 활성 등이 보고되어 있다. 최근 기능성 식품 소재의 원료로서 타블렛, 파우치 등으로 개발되고 있으며, 그 새로운 이용에 대하여 많은 연구가 이루어지고 있다.Champagne don't taste sweet, only bitter. The coumarin derivatives decusin, decursinol and umbelliferon have been reported. Recently, antimutagenic activity, cancer cell growth inhibitory activity, and liver detoxification activity have been reported. Recently, as raw materials of functional food materials, tablets, pouches, and the like have been developed, and a lot of researches have been made on the new use thereof.
참당귀는 면역 증진 기능을 가지는 유효성분을 많이 함유하고 있으나, 내복을 통해서는 그 활성성분들이 소화 기작 등에 의해 효과적으로 흡수되지 못한다는 점과, 단맛은 나지 않고 약간 쓴맛만 난다는 점이 단점이다. 이 때문에 어린이들의 섭취가 제한적으로 이루어지고 있다. 본 발명에서는 이를 개선하고자 식용 젤라틴을 이용하여 참당귀 수용성 추출물을 나노입자화 하여 면역증진용 생체활용성 증진이 가능한 캔디 조성물을 제조하는 방법을 제공하고자 한다.
Champagne Angelica contains a lot of active ingredients that have an immune enhancing function, but its disadvantages are that its active ingredients are not effectively absorbed through digestive mechanisms, and have a bitter taste without a sweet taste. Because of this, children's intake is limited. The present invention is to provide a method for producing a candy composition capable of enhancing bioavailability for immuno-promoting by nano-particles of water-soluble Angelica extract using edible gelatin to improve this.
사탕(candy)은 설탕을 끓여서 여러 가지 모양으로 만든 과자로 둥근 모양의 알사탕, 엿이나 설탕을 넣고 끓여서 굳힌 눈깔사탕, 설탕에 과일즙이나 향료를 섞어서 졸여 여러 가지 모양과 빛깔로 굳힌 드롭스 따위가 있다. 보통은 설탕을 체에 거르고 틀에 넣어 열을 가해서 만든 음식으로, 다른 식품들에 비해 비교적 단순하고 제조가 손쉬워 최근 홈메이드 음식으로도 인기가 높다. 그러나 쉬운 제조공정에 비해 시럽의 종류 및 재료의 구성에 따라서 상당히 큰 물성의 차이를 보이며, 조합과 제조 방법에 따라 캔디 유통 중 품질 열화의 원인이 되는 이수현상(syneresis)이 일어나기도 하므로 이를 방지하기 위한 여러 가지 방법이 연구되고 있다. 국내에도 과육을 함유하는 캔디, 다이어트 식품으로 제조한 캔디, 무설탕의 경질 캔디, 수분 함량도가 증가한 캔디, 한약 진탕액 아로마 캔디 등이 개시되어 있다.
Candy is a candy made by boiling sugar in various shapes, such as round egg shaped candy, candy or sugar, boiled hard candy, and sugar mixed with fruit juice or spices and boiled in various shapes and colors. . It is usually made by sifting sugar into a mold and applying heat to it, which is relatively simple and easy to manufacture compared to other foods. However, compared to the easy manufacturing process, the syrup type and the composition of the material show a considerable difference in physical properties, and the combination and manufacturing method may cause syneresis, which causes quality deterioration during candy distribution, to prevent this. Several methods are being studied. Also disclosed in the country are candy containing pulp, candy prepared with diet foods, hard candy without sugar, candy with increased moisture content, herbal shake aroma candy, and the like.
본 발명자들이 주목한 나노 기술은 10억분의 1m 크기로의 원자, 분자 단위의 조작을 통해 새로운 신소재를 창출할 수 있는 기술이다. 최근 들어 나노 기술은 나노입자를 이용한 요구르트, 나노 화장품, 은 나노 가전, 나노 농약과 같은 상품들이 대량 출시되면서 누구나 쉽게 접할 수 있는 기술로 주목받고 있다. 특히 나노입자는 우리 인체의 세포보다 수백 배 더 작아서 나노 기술을 천연추출물에 접목할 경우 기존의 전통 식품과학이 간과해 왔던 양자역학적 접근이 가능해지며, 체내에 안정적으로 유용물질을 전달할 수 있게 된다.Nanotechnology of the present inventors is a technology that can create a new new material through the manipulation of atomic and molecular units to a size of 1 billion / 1m. Recently, nano technology has attracted attention as a technology that anyone can easily access as products such as yogurt, nano cosmetics, silver nano appliances, and nano pesticides using nano particles are released in large quantities. In particular, nanoparticles are hundreds of times smaller than our human cells, so when we combine nanotechnology with natural extracts, quantum-mechanical approaches that traditional food science has overlooked are possible, and we can deliver useful substances stably.
본 발명자들이 소재로 선택한 젤라틴은 생체 내에서 독성을 띠지 않고 소화가 잘되는 순수한 단백질 식품으로 현재 각종 기능성 식품, 화장품, 연고, 정제, 혈장에 관한 제품을 생산하는 제약업 등에 이용되고 있다. 젤라틴은 수용성, 지용성의 생리활성 물질을 쉽게 포집할 수 있으며, 내용제, 외용제로 모두 이용이 가능하다는 장점이 있다. 첨가물을 넣지 않은 과립 형태의 젤라틴은 거의 맛과 냄새가 없으며, 색은 아주 엷은 노랑 빛을 띤다. 젤라틴은 과립 형태로 만들어 설탕?향미료?산?색소와 혼합하여 이용하며, 상온에서 밀봉된 용기 안에 건조시킨 상태로 보관하면 장기간 안정하다.
The gelatin selected by the inventors of the present invention is a pure protein food which is not toxic in vivo and is easily digested, and is currently used in various functional foods, cosmetics, ointments, tablets, and pharmaceutical industries for producing products related to plasma. Gelatin can easily collect water-soluble, fat-soluble physiologically active substances, has the advantage that it can be used as a solvent, external preparation. Gelatin in the form of granules without additives has almost no taste and odor, and the color is very pale yellow. Gelatin is used in the form of granules and mixed with sugar, flavor, acid and pigment, and it is stable for a long time when stored in a sealed container at room temperature.
본 발명은 참당귀의 젤라틴 나노입자화를 통해 면역 활성 증진 기능을 갖는 소아용 캔디를 제조하는 방법을 제공하는 데 목적이 있다.It is an object of the present invention to provide a method for preparing a pediatric candy having immune function enhancing function through gelatin nanoparticles of Angelica gigas.
더 구체적으로 본 발명은 식용소재인 젤라틴 소재를 이용하여 한방에서 널리 사용되는 참당귀를 나노입자화 함으로써, 그 쓴맛 때문에 소아들이 참당귀를 섭취하기 어려운 점을 극복하고 섭취 후에도 체내에서 유효성분이 잘 흡수될 수 있도록 하는 데 그 목적이 있다.
More specifically, the present invention by nano-particles of Angelica gigas widely used in herbal medicine by using gelatin material, which is an edible material, overcomes the difficulty of children ingesting Angelica Angelica due to its bitter taste and absorbs the active ingredient well in the body even after ingestion. The purpose is to make it possible.
본 발명에서는 기존 천연 추출물을 함유하는 캔디가 가지고 있던 문제점을 개선하여 나노입자화를 통해 캔디의 온도, pH, 체내 흡수 안정성을 높이고자 한다. 또한 나노 약물 전달체 관련 기술의 일부를 생약재인 참당귀에 접목시켜 기존 추출물의 세포 전달 체계 수준에서의 장벽을 극복하며, 캔디의 면역 증진용 기능성 식품으로서의 효과를 재평가하고자 한다. 나노입자화한 참당귀 추출물의 효과적인 세포 투과 기능은 적은 농도의 추출물로도 높은 활성을 기대할 수 있으므로 비용과 시간 면에서 경제적이다. 또한 쓴맛을 가지는 당귀를 젤라틴으로 포집하여 캔디로 만듦으로써 고유의 진한 냄새를 줄이고 향미를 증진시켜 어린이들도 쉽게 섭취할 수 있다. 젤라틴으로 포집한 천연 약재의 생체 면역 증진 효과를 가지는 나노 식품으로의 연구는 진행되지 않았기 때문에 이 기술은 본 연구진이 국내에서 유일하게 보유하고 있는 기술이라고 할 수 있다.
In the present invention, by improving the problems that the candy containing the existing natural extract has to improve the temperature, pH, body absorption stability of the candy through nanoparticles. In addition, by incorporating some of the technologies related to nano drug carriers into the Chinese herbal medicine, Angelica, it is intended to overcome barriers at the level of cell delivery system of existing extracts, and to re-evaluate the effects of candy as a functional food for immune enhancement. The effective cell permeation function of nanoparticle granulated Angelica extract is economical in terms of cost and time since high activity can be expected even with a small concentration of extract. In addition, the bitter Angelica is collected by gelatin and made into a candy, which can be easily consumed by children by reducing the inherent odor and enhancing flavor. This research is the only technology possessed by the researchers in Korea because no research has been conducted on nano-foods that have bioimmune enhancing effects of natural medicines collected with gelatin.
본 발명에 따른, 참당귀 수용성 추출물의 나노입자화를 이용한 소아용 면역 증진용 캔디의 제조방법은, 젤라틴으로 참당귀의 열수추출물을 나노입자화하여 제조하는 것을 특징으로 한다.According to the present invention, a method for preparing a pediatric immune-promoting candy using nanoparticles of water-soluble extract of Angelica gigas is characterized in that it is produced by gelatinizing the hydrothermal extract of Angelica gigas.
더 구체적으로 본 발명의 제조방법은,More specifically, the manufacturing method of the present invention,
(1) 참당귀를 분쇄하는 단계;(1) crushing the Angelica Angelica;
(2) 분쇄된 참당귀를 10배수의 증류수를 용매로 하여 100℃에서 24시간 동안 저온 열수 추출하는 단계;(2) extracting the pulverized Angelica Angelica using low-temperature hot water for 24 hours at 100 ° C. using 10-fold distilled water as a solvent;
(3) 위 열수 추출물을 감압여과장치로 여과?농축한 다음, 동결건조를 하여 파우더로 만드는 단계;(3) filtering and concentrating the hot water extract with a vacuum filter, and then lyophilizing the powder into powder;
(4) 위 파우더를 1mg/ml의 농도로 증류수에 녹이는 단계;(4) dissolving the above powder in distilled water at a concentration of 1 mg / ml;
(5) 전술한 단계들과는 별도로 용기에서 파우더상의 젤라틴을 증류수에 녹인 후 감압기를 이용하여 증류수는 증발시켜 멀티레이어(multilayer)를 형성하는 단계;(5) dissolving the powdered gelatin in distilled water in a container separately from the above-mentioned steps, and then distilled water is evaporated using a pressure reducer to form a multilayer;
(6) 완전히 건조되어 레이어가 형성된 (5)의 용기에 (4)의 액상 참당귀 추출시료를 넣고, 초음파 분산기로 균일화시켜 수용성 나노입자를 제조하는 단계; 및(6) putting the liquid Angelica extract sample of (4) into a container of (5), which was completely dried and layered, and homogenized with an ultrasonic disperser to prepare water-soluble nanoparticles; And
(7) 상기와 같이 제조한 참당귀 나노입자 7중량%에, 올리고당 80중량%, 자일리톨 11중량%, 구연산 2중량%를 혼합하고 교반하고 굳히는 단계로 이루어지는 것을 특징으로 한다.(7) 7 wt% of Angelica gigas nanoparticles prepared as described above, 80 wt% oligosaccharide, 11 wt% xylitol, 2 wt% citric acid, characterized in that the step of mixing and stirring.
본 발명은 또한 상기 각 제조방법에 의해 제조되는 소아용 면역 증진용 캔디임을 특징으로 한다.The present invention is also characterized in that the pediatric immunity enhancing candy produced by each of the above production methods.
본 발명에서는 젤라틴을 이용하여 참당귀 추출물을 100~200 nm 크기의 리포솜 형태의 미세한 나노입자로 제조함으로써 체내 장관에서 투과 및 잔류가 용이하게 하고 200 nm 크기의 세포 간극에 의한 투과 장벽을 극복할 수 있게 하고자 한다. In the present invention, by using gelatin to prepare the extract of Angelica Angelica as a fine nanoparticles in the form of liposomes of 100-200 nm size, it is easy to permeate and remain in the intestinal tract and can overcome the permeation barrier caused by the cell gap of 200 nm size. I want to be.
이를 위해 가당 제조한 시럽을 주원료로 하는 캔디 조성물에 젤라틴으로 나노입자화 한 참당귀 추출물을 전체 중량 대비 7중량% 투여한다.To this end, 7% by weight of the Angelica extract nanoparticles gelatinized in gelatin in a candy composition containing the syrup prepared sweetened as the main ingredient is administered.
사탕을 만들 때 보통은 설탕을 틀에 넣어 열을 가해서 만들지만 본 발명에서는 설탕 대신 올리고당을 이용하였다. 올리고당은 설탕처럼 단맛을 내면서도 칼로리는 설탕의 1/4 정도라 비만 예방에 효과적이다. 따라서 기존 캔디 제조 공정에 사용되는 설탕은 혈관으로 바로 흡수되어 인체를 급속도로 고혈당 상태로 만드는 반면, 본 발명에서 사용한 올리고당은 체내 흡수가 느려 인슐린 분비를 안정시킨다. 또한 표백과정이 문제가 되는 물엿과 달리 장내 유해물질 생성을 억제시켜 정장작용을 하며 충치 예방 효과도 있다. 올리고당은 설탕의 50% 정도의 단맛을 내기 때문에 본 발명에서는 전체 중량 대비 80중량%를 캔디 조성물에 가해주었다.
When making a candy is usually made by adding sugar to the mold heat is used in the present invention oligosaccharides instead of sugar. Oligosaccharides are sweet like sugar, but only about a quarter of the calories are effective in preventing obesity. Therefore, the sugar used in the conventional candy manufacturing process is directly absorbed into the blood vessels to make the human body rapidly hyperglycemic state, while the oligosaccharide used in the present invention stabilizes insulin secretion due to slow absorption in the body. In addition, unlike starch syrup, which causes the bleaching process to be a problem, it inhibits the production of harmful substances in the intestine and acts as a suit and prevents tooth decay. Since oligosaccharides have a sweet taste of about 50% of the sugar, in the present invention, 80% by weight of the total weight was added to the candy composition.
본 발명에 따를 경우 나노입자화한 참당귀 추출물의 효과적인 세포 투과 기능으로 인해 적은 농도의 추출물로도 높은 활성을 기대할 수 있으므로 비용과 시간 면에서 경제적이다. 또한 쓴맛을 가지는 당귀를 젤라틴으로 포집하여 캔디로 만듦으로써 고유의 진한 냄새를 줄이고 향미를 증진시켜 어린이들도 쉽게 섭취할 수 있다.
According to the present invention, due to the effective cell permeation function of the nanoparticle granulated Angelica extract, high activity can be expected even with a small concentration of extract, which is economical in terms of cost and time. In addition, the bitter Angelica is collected by gelatin and made into a candy, which can be easily consumed by children by reducing the inherent odor and enhancing flavor.
본 발명자들은 식용 젤라틴으로 참당귀를 나노입자화 하여 종래의 추출 공정을 통한 참당귀 추출물과 비교하여 나타내는 차이를, 몇 가지 면역 실험과 관능평가 실험을 통해 알아보았다. 또한 기존의 당귀 추출물이 가지는 pH 불안정성, 적정온도 이상에서 당으로 인해 끈적거리는 물성의 문제점, 쓴맛으로 인해 어린이들이 즐겨 섭취할 수 없었던 문제점 등을 개선하여 좀 더 즐겁게 섭취할 수 있는 식품으로 발전시킬 가능성 여부를 파악하였다.The inventors of the present invention have examined the difference between nano-particles of edible donkeys with edible gelatin and compared with the extracts of conventional donkeys through a conventional extraction process, through several immunological and sensory evaluation experiments. In addition, by improving the pH instability of the existing Angelica extract, problems of sticky physical properties due to sugar at an appropriate temperature, and problems that children could not enjoy due to bitter taste, it can be developed into a more pleasant food Determined whether or not.
이하, 본 발명의 각 공정을 대략적으로 설명한 뒤에 실시예를 통해 상세히 설명한다.
Hereinafter, the process of the present invention will be described in detail through the following Examples.
[제1공정 : 시료 전처리 공정][Step 1: Sample Preparation Process]
추출하고자 하는 생 또는 건조 국내산 참당귀를 적당한 크기로 분쇄하여 수직 환류 냉각기에 부착된 추출 플라스크에서 일정 중량비(통상 10배)의 증류수에 침지시켜 100℃로 열수추출을 한다.The raw or dried domestic Angelica gigas to be extracted are ground to an appropriate size and immersed in distilled water at a predetermined weight ratio (usually 10 times) in an extraction flask attached to a vertical reflux cooler to extract hot water at 100 ° C.
추출이 완료되면 용매와 추출물을 분리하고 여과 및 감압농축 등으로 추출물을 분말 상태로 수득한다. 분말 상의 시료를 1㎎/㎖의 농도로 증류수에 녹인다.
After the extraction is completed, the solvent and the extract are separated, and the extract is obtained as a powder by filtration and concentration under reduced pressure. The powdery sample is dissolved in distilled water at a concentration of 1 mg / ml.
[제2공정 : 나노입자화 공정][Step 2: Nanoparticles]
나노입자화 한 참당귀의 생체활용성 증진효과의 탐색을 위해 면역 증진 효과가 기대되는 참당귀 추출물과 생체적합성 젤라틴 소재로 나노입자(nanoparticle)를 제조한다.In order to explore the bioavailability enhancing effect of nanoparticles, the Angelica gigas extracts are prepared with nanocomposite extract and biocompatible gelatin material.
둥근바닥플라스크에 식용소재인 파우더 상의 젤라틴을 40~50℃의 따뜻한 증류수에 녹여 감압기를 사용해 멀티레이어(multilayer)를 형성시킨다. 완전히 건조되어 레이어(layer)가 형성된 둥근바닥플라스크에 제1공정에서 만든 액상의 참당귀 추출시료를 넣고, 초음파 분산기를 이용하여 상온에서 2시간 동안 25~27℃의 온도에서 균일화시켜 수용성 나노입자를 제조한다.In a round bottom flask, gelatin on powder, an edible material, is dissolved in warm distilled water at 40 ~ 50 ℃ to form a multilayer using a pressure reducer. The liquid donkey extract sample prepared in the first step was put into a round bottomed flask formed with a layer completely dried and homogenized at 25-27 ° C. for 2 hours at room temperature using an ultrasonic disperser to obtain water-soluble nanoparticles. Manufacture.
나노입자 생성이 완료되면 전하 차에 의해 나노입자의 변성이 일어나지 않도록 유리로 된 병에 보관한다.
Once the nanoparticles are produced, they are stored in a glass jar to prevent denaturation of the nanoparticles due to the charge difference.
[제3공정 : 추출물 수득 및 나노입자 크기 측정][Step 3: Obtaining Extract and Measuring Nanoparticle Size]
액상의 식용 가능한 참당귀 나노입자의 생성 여부와 크기를 DLS(dynamic light scattering)을 이용하여 측정한다.
The production and size of liquid edible true Angelica nanoparticles are measured using dynamic light scattering (DLS).
[제4공정 : 캔디 베이스와 참당귀 나노입자의 혼합 후 캔디 제조][Step 4: Preparation of Candy after Mixing Candy Base and Angelica Nanoparticles]
상기와 같은 본 발명의 목적은 캔디 베이스에 제2, 3공정을 통해 제조한 나노입자를 혼합함으로써 달성될 수 있다. 캔디 베이스 93중량%에 참당귀 나노입자 시료 7중량%를 100~120℃에서 1시간 동안 교반을 하며 혼합한다. 캔디 베이스는 중량 대비 80%의 올리고당, 11%의 자일리톨(폴리올), 2%의 구연산이다. 이와 같은 성분과 함량으로 함으로써, 올리고당과 자일리톨이 결정화(crystallization) 효과를 내어 캔디의 코팅속도를 증가시킬 수 있다. 혼합 후에는 진공농축, 냉각 등의 과정을 거친다(아래 표 1 참조).
The object of the present invention as described above can be achieved by mixing the nanoparticles prepared by the second and third processes in the candy base. 93 wt% of candy base is mixed with 7 wt% of Angelica gigas nanoparticles with stirring at 100-120 ° C. for 1 hour. Candy base is 80% oligosaccharide by weight, 11% xylitol (polyol), 2% citric acid. By such a component and content, oligosaccharides and xylitol can have a crystallization effect and increase the coating speed of the candy. After mixing, vacuum concentration, cooling, etc. are performed (see Table 1 below).
Figure 112010014908838-pat00001
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표 1. 공정의 전체적인 흐름표Table 1. Overall flow table of the process
이하, 구체적인 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to specific examples.
실시예 1. Example 1.
본 실험의 실시예를 위하여 분쇄시켜 얻은 생 또는 건조 국내산 당귀를 수직 환류 냉각기에 부착된 추출 플라스크(flask)에 시료 중량 50g에 대하여 10배(w/v)의 증류수에 침지시켜 100℃에서 24시간 동안 열수 추출하였다. 참당귀 시료를 10배수의 증류수를 용매로 하여 얻어진 추출물을 감압여과장치(Rotary Vacuum Evaporator N-N series, EYELA)로 여과하여 농축한 다음, 동결건조를 하여 파우더를 얻었다.Raw or dried domestic Angelica obtained by grinding for the examples of this experiment was immersed in 10 times (w / v) distilled water with respect to 50g of sample weight in an extraction flask attached to a vertical reflux condenser for 24 hours at 100 ℃. During hydrothermal extraction. An extract obtained by using 10 times of distilled water as a solvent was concentrated on a Angelica Angelica sample, and concentrated by filtration with a rotary vacuum evaporator (N-N series, EYELA), followed by lyophilization to obtain a powder.
식용소재이자 각종 생리활성이 알려진 젤라틴으로 나노입자화 한 시료의 생체활용성 증진효과의 탐색을 위해, 면역 활성이 기대되는 참당귀 추출물을 이용해 나노입자(nanoparticle)를 제조하였다. 이를 위해 100℃ 증류수 추출 시료 50㎎을 1㎎/㎖의 농도로 증류수에 녹였다. 그와 별도로, 둥근바닥플라스크에 젤라틴을 40~50℃의 따뜻한 증류수에 녹여 감압기를 사용해 멀티레이어(multilayer)를 형성시켰다. 완전히 건조되어 레이어가 형성된 둥근바닥플라스크에 액상의 당귀 추출시료를 넣고, 초음파 분산기를 이용하여 26 ℃ 에서 2시간 동안 Amp 38%, 펄스 7 : 5 의 조건으로 균일화시켜 수용성 나노입자를 제조하였다.
In order to explore the bioavailability enhancement effect of the sample nanoparticles gelatin gelatin edible food and various physiological activities, nanoparticles (nanoparticles) were prepared using the extract of Angelica gigas. To this end, 50 mg of 100 ° C. distilled water extract sample was dissolved in distilled water at a concentration of 1 mg / ml. Separately, gelatin was dissolved in warm distilled water at 40-50 ° C. in a round bottom flask to form a multilayer using a pressure reducer. A liquid donkey extract sample was placed in a round bottomed flask having a completely dried layer, and homogenized under conditions of Amp 38% and pulse 7: 5 for 2 hours at 26 ° C. using an ultrasonic disperser to prepare water-soluble nanoparticles.
실시예 2.Example 2.
본 발명자들은 형성된 나노입자의 구조를 파악하기 위해, 대상 시료에 전자선을 쏘여 전자선이 통과해서 나온 전자를 확대하여 관찰하는 원리인 투과전자현미경을 이용하여 관찰하였다. 그 결과, 젤라틴으로 포집한 참당귀 나노입자가 액상에서 안정적으로 분포함을 확인하였다. 체내에 효과적으로 흡수될 수 있는 크기의 나노입자 제조를 위해서 DLS(dynamic light scattering)로 생성된 각각의 크기를 측정하였다.In order to grasp the structure of the formed nanoparticles, the present inventors observed using a transmission electron microscope, which is a principle of enlarging and observing electrons passing through an electron beam by shooting an electron beam onto a target sample. As a result, it was confirmed that the Angelica nanoparticles collected with gelatin were stably distributed in the liquid phase. In order to prepare nanoparticles of a size that can be effectively absorbed into the body, each size generated by dynamic light scattering (DLS) was measured.
나노입자의 크기 분석을 통해 식용 젤라틴 소재로 나노입자화 했을 때 피부 세포 투과에 가장 최적의 조건이 될 수 있는 평균 116.9 nm 의 나노입자가 생성되었음을 알 수 있다. 또한 상기 TEM 사진을 통해 젤라틴으로 나노입자화 했을 때 참당귀 추출물을 많은 양 포집하여 체내 장관 투과 시 효과적일 것으로 생각된다(이상 사진 1, 그래프 1, 표 2 참조).
The size analysis of the nanoparticles shows that when nanoparticles are made of edible gelatin, an average particle size of 116.9 nm is produced, which can be the most optimal condition for skin cell permeation. In addition, when the nanoparticles are gelatinized by gelatin through the TEM image, it is thought to be effective in collecting a large amount of Angelica gigas extract in the intestinal tract (see above picture 1, graph 1, table 2).
Figure 112010014908838-pat00002

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Figure 112010014908838-pat00003

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Figure 112010014908838-pat00004

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실시예 3. Example 3.
본 발명자들은 본 발명으로 인한 추출물의 수율 증진을 통한 생리활성 증진 효과를 알아보기 위하여 앞의 실시예를 통해 얻은 두 개의 참당귀 추출물(① 증류수를 용매로 한 100℃ 열수추출물, ② 젤라틴으로 포집한 나노입자)을 이용하여 추출물의 세포 독성 실험을 실시하였다. 본 실험에서는 1㎎/㎖의 시료의 첨가를 통한 인간 정상 신장 세포인 HEK293 (normal, Human, KCLB, KOREA)의 정상세포 독성을 알아보았다. 세포독성 측정을 위해서 SRB assay를 이용하였다. HEK293 cell의 생육도를 측정하고 무처리한 대조군과 비교함으로써 시료의 정상세포 독성을 측정하였다.The inventors of the present invention in order to examine the effect of improving the physiological activity through the increase of the yield of the extract according to the present invention, the two Angelica extract (① 100 ℃ hot water extract with distilled water as a solvent, ② collected by gelatin) Nanoparticles) was used for the cytotoxicity test of the extract. In this experiment, normal cytotoxicity of HEK293 (normal, human, KCLB, KOREA), human normal kidney cells, was investigated by the addition of 1 mg / mL sample. SRB assay was used for cytotoxicity measurement. Normal cell toxicity of the samples was measured by measuring the growth of HEK293 cells and comparing with the untreated control.
그 결과, 열수 추출에 의한 참당귀 추출물에 비해 젤라틴으로 포집한 나노입자의 정상 신장 세포 독성이 낮게 기록되었다. 생체에 무해한 기능성 소재인 젤라틴으로 나노입자로 리포솜화 하였을 때 최고 농도인 1mg/ml에서 세포 독성이 12% 이하로 나타났으며, 보통 추출물과 대조했을 때 인체에 무해한 수준을 나타냈기 때문에 체내 면역 활성 증진을 위한 기능성 캔디 조성물의 소재로서 생체에 적합할 것으로 사료된다(그래프 2).
As a result, the normal renal cytotoxicity of gelatin-collected nanoparticles was recorded lower than that of Angelica gigas extract by hot water extraction. When liposome liposomes were formed with gelatin, a functional material that is harmless to living organisms, cytotoxicity was less than 12% at the highest concentration of 1mg / ml. It is believed to be biocompatible as the material of the functional candy composition for promotion (graph 2).
Figure 112010014908838-pat00005

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실시예 4.Example 4.
인간의 면역체계와 항암에 중요한 역할을 하는 B cell에 대하여 면역 증진효과를 확인하기 위해 참당귀 추출물(① 증류수를 용매로 한 100℃ 열수추출물, ② 젤라틴으로 포집한 나노입자)의 첨가에 따른 6일 동안의 면역세포의 생육촉진효과를 알아보았다.In order to confirm the immune-promoting effect on B cells, which play an important role in the human immune system and anticancer, 6, according to the addition of true Angelica extract (① 100 ℃ hot water extract using distilled water, ② nanoparticles collected with gelatin) The effect of promoting the growth of immune cells during the day was examined.
그 결과 젤라틴으로 포집한 나노입자가 면역 B 세포의 생육촉진 면에서 12배 이상 증가하였음을 확인하였다(그래프 3). 나노입자화를 통해 세포 내로의 침투속도가 빨라져 높은 생육도가 나타난 것으로 생각되며, 젤라틴 소재 자체에 면역세포의 생육을 증진 시키는 성분이 함유되어 있어 효과적으로 B cell 생육이 일어난 것으로 생각된다.
As a result, it was confirmed that gelatin-collected nanoparticles increased more than 12 times in terms of promoting growth of immune B cells (Graph 3). It is thought that high growth rate appeared due to the rapid penetration into the cell through nanoparticles, and B cell growth occurred effectively because the gelatin material itself contains components that enhance the growth of immune cells.
Figure 112010014908838-pat00006

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실시예 5.Example 5.
나노입자 캔디의 첨가수준별 텍스처 특성을 파악하기 위해 경도, 열 안정성, 색 등의 물성 테스트를 실시하였다.In order to understand the texture characteristics according to the level of addition of nanoparticle candy, physical property tests such as hardness, thermal stability, and color were conducted.
주원료로 전체 중량 대비 올리고당 80%, 자일리톨 11%, 구연산 2%로 구성된 캔디원료의 혼합물을 100℃에서 계속 교반 가열하면서 1시간 동안 균일한 양이 첨가될 수 있도록 fraction collector를 이용해 제조한 참당귀 젤라틴 나노입자를 전체 중량의 7%가 되도록 첨가해주었다. 이때 당귀 나노입자의 농도를 0.2mg/ml, 1mg/ml, 1.8mg/ml(파우더 시료를 증류수에 녹일 때의 농도만 다르고 나머지 제조공정은 모두 동일)와 같이 세 가지로 다르게 설정하여 텍스처 평가를 실시하였다. 1시간 동안의 교반을 통해 만들어진 혼합물을 상온에서 냉각시켜 천연 참당귀 나노입자 캔디를 제조하였다. 대조군으로는 베이스의 비율은 올리고당 80%, 자일리톨 11%, 구연산 2%로 하고 나노시료 대신 증류수 7%를 첨가하였으며, 그 외 다른 조건은 동일하게 조제한 캔디를 이용하였다.A mixture of candy raw materials consisting of 80% oligosaccharide, 11% xylitol, and 2% citric acid as the main raw materials, was added using a fraction collector so that a uniform amount was added for 1 hour while continuously stirring and heating at 100 ° C. Nanoparticles were added to 7% of the total weight. At this time, the concentration of donkey nanoparticles was set to three different values, such as 0.2mg / ml, 1mg / ml, and 1.8mg / ml (only when the powder samples were dissolved in distilled water and all other manufacturing processes were the same). Was carried out. The mixture was prepared by stirring for 1 hour at room temperature to prepare a natural Angelica nanoparticle candy. As a control, the ratio of the base was 80% oligosaccharide, 11% xylitol, 2% citric acid, and 7% distilled water was added instead of the nanosample, and other conditions were prepared using the same candy.
텍스처 평가 결과 1mg/ml의 나노시료 첨가 캔디가 경도 3.7kg, 60℃ 이상의 고온에서도 안정성을 보임을 확인했다.As a result of texture evaluation, it was confirmed that the 1 mg / ml nano-sampled candy showed stability even at a hardness of 3.7 kg and a high temperature of 60 ° C or higher.
또한 냄새와 맛의 강도를 1~5점으로 하여 30명의 성인에게 향미를 평가하도록 하였다. 그 결과, 1mg/ml 나노 시료 첨가군에서 평균 2점이 나와 어린이들도 당귀 고유의 쓴 맛이나 강한 냄새를 느끼지 못하고 캔디 섭취를 할 수 있을 것으로 사료된다.In addition, thirty adults were evaluated for the flavor by using the intensity of smell and taste as 1-5 points. As a result, the average score of 2 points in the 1mg / ml nano sample addition group is expected to allow children to consume candy without feeling the bitterness or strong smell of Dongguk.
주요 소화기관과 유사한 조건인 pH 2~8에서 캔디가 보이는 안정성을 평가하였다. 그 결과, pH 2에서도 나노입자가 깨지지 않고 안정적인 크기로 유지되는 것을 그림 6에서 확인하였다. 나노입자의 크기의 차이가 pH 2에서 30 nm 이하의 차이를 보이기 때문에 분포 및 크기가 안정적이라고 할 수 있다.The stability of the candy was evaluated at pH 2-8, similar to the main digestive system. As a result, it was confirmed in Fig. 6 that the nanoparticles remained stable without breaking even at pH 2. Since the difference in size of the nanoparticles shows a difference of 30 nm or less at pH 2, the distribution and size can be said to be stable.
또한 1mg/ml 나노 시료 첨가군에서는 당귀 고유의 천연 색이 캔디에 들어가 은은한 빛을 냈다(이상 표 3 및 그래프 4 참조).
In addition, in the 1mg / ml nano sample addition group, Angelica's unique natural color entered the candy and was soft (see Table 3 and Graph 4 above).
Figure 112010014908838-pat00007

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Claims (3)

  1. 젤라틴으로 참당귀의 열수 추출물을 나노입자화하여 제조하는 것을 특징으로 하는,
    참당귀 열수 추출물의 나노입자화를 이용한 소아용 면역 증진용 캔디의 제조방법.
    Characterized in that by preparing the nanoparticles of hydrothermal extract of Angelica gigas with gelatin,
    Method for producing immunosuppressive candy for children using nanoparticles of Angelica gigas hot water extract.
  2. (1) 참당귀를 분쇄하는 단계;
    (2) 분쇄된 참당귀를 10배수의 증류수를 용매로 하여 100℃에서 24시간 동안 저온 열수 추출하는 단계;
    (3) 위 열수 추출물을 감압여과장치로 여과?농축한 다음, 동결건조를 하여 파우더로 만드는 단계;
    (4) 위 파우더를 1mg/ml의 농도로 증류수에 녹이는 단계;
    (5) 전술한 단계들과는 별도로 용기에서 파우더상의 젤라틴을 증류수에 녹인 후 감압기를 이용하여 증류수는 증발시켜 멀티레이어(multilayer)를 형성하는 단계;
    (6) 완전히 건조되어 레이어가 형성된 (5)의 용기에 (4)의 액상 참당귀 추출시료를 넣고, 초음파 분산기로 균일화시켜 수용성 나노입자를 제조하는 단계; 및
    (7) 상기와 같이 제조한 참당귀 나노입자 7중량%에, 올리고당 80중량%, 자일리톨 11중량%, 구연산 2중량%를 혼합하고 교반하고 굳히는 단계로 이루어지는 것을 특징으로 하는,
    참당귀 열수 추출물의 나노입자화를 이용한 소아용 면역 증진용 캔디의 제조방법.
    (1) crushing the Angelica Angelica;
    (2) extracting the pulverized Angelica Angelica using low-temperature hot water for 24 hours at 100 ° C. using 10-fold distilled water as a solvent;
    (3) filtering and concentrating the hot water extract with a vacuum filter, and then lyophilizing the powder into powder;
    (4) dissolving the above powder in distilled water at a concentration of 1 mg / ml;
    (5) dissolving the powdered gelatin in distilled water in a container separately from the above-mentioned steps, and then distilled water is evaporated using a pressure reducer to form a multilayer;
    (6) putting the liquid Angelica extract sample of (4) into a container of (5), which was completely dried and layered, and homogenized with an ultrasonic disperser to prepare water-soluble nanoparticles; And
    (7) characterized in that the step of mixing, stirring and solidifying 80% by weight of oligosaccharide, 11% by weight of xylitol, 2% by weight of citric acid to 7% by weight of Angelica gigas nanoparticles prepared as described above,
    Method for producing immunosuppressive candy for children using nanoparticles of Angelica gigas hot water extract.
  3. 제1항 또는 제2항의 제조방법에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는,
    참당귀 열수 추출물의 나노입자화를 이용한 소아용 면역 증진용 캔디.
    It is produced by the manufacturing method of claim 1 or 2,
    Pediatric Immune Enhancement Candy Using Nanoparticles of Angelica gigas Hot Water Extract.
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