KR101173962B1 - 산화방지성 상처 드레싱 물질 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 산화방지성 염료로 염색된 생체 흡수성 고체 기질을 포함하는 상처 드레싱 물질에 관한 것이다. 당해 기질은 콜라겐, 키토산 또는 산화된 재생 셀룰로즈를 포함할 수 있으며, 염료는, 예를 들면, 아닐린 또는 아크리딘 염료일 수 있다. 당해 물질은 바람직하게는 은 염을 또한 포함함으로써, 염료가 은 염을 안정화시킨다. 또한 이러한 물질의 제조방법 및 당해 물질을 포함하는 상처 드레싱이 제공된다.
산화방지성 염료, 생체 흡수성 고체 기질, 상처 드레싱 물질, 은 염
Description
본 발명은 산화방지성 상처 드레싱 물질, 당해 물질의 제조에 적합한 방법 및 당해 상처 드레싱 물질의 용도에 관한 것이다.
반응성 산소 그룹[예: 하이드록실 라디칼(?OH), 단일 산소(1O2), 하이드로퍼옥실 라디칼(?OOH), 수퍼옥사이드 라디칼 음이온(?O2 -) 및 과산화수소(H2O2)]의 농도는 손상된 조직을 유발하여, 산화성 스트레스로서 공지된 상태를 발생시킬 수 있다. 낮은 수준의 반응성 산소 그룹의 존재는 세균을 빨아들여 죽이고, 사이토킨 및 성장 인자를 방출하는 대식세포를 끌어들이고 활성화함으로써 상처 치유의 초기 단계에 유용할 수 있다. 그러나, 장기간의 보다 심한 산화성 스트레스는 치유를 지연시킬 수 있는데, 이는 만성 염증을 유발하고, 조직 재구성을 희생하면서 이용가능한 에너지원을 산화방지제 방어로 전환하며, 조직 붕괴를 유발하는 매트릭스 메탈로프로테인아제의 수준을 증가시키기 때문이다. 보다 심한 경우에, 증가된 수준의 반응성 산소 그룹은 과산화수소 유도된 노화 또는 아폽토시스(즉, 프로그램화된 세포 사멸)나, 조직 괴사(즉, 제어되지 않은 세포 사멸 및 이에 따른 영구적 조직 손상)를 유발할 수 있다.
가벼운 산화성 스트레스하에, 과산화수소(H2O2)는 현존하는 압도적인 그룹으로, 효소 과산화물 디스뮤타제에 의해 과산화물로부터 신속히 형성되는 것으로 여겨진다. 이러한 효소 매개된 부동변화 반응(dismutation reaction)은 또한 과산화물이 너무 신속히 생성되어 효소 도움없이 자발적으로 부동변화하는 기회를 갖는 경우에 유발될 수 있는 단일 산소의 생성을 최소화한다. 과산화물의 신속한 효소-매개된 부동변화는 또한 과산화물의 이온화되지 않은 형태인 하이드로퍼옥실 라디칼의 수준을 최소화한다. 과산화수소의 수준은 또한 카탈라제 및 글루타티온 퍼옥시다제의 작용에 의해 낮게 유지된다. 따라서, 가벼운 산화성 스트레스하에 과산화수소 수준이 다소 상승되면(약 10-8 내지 10-4mol), 섬유아세포 배양물 중의 세포 증식 속도가 촉진되는 것으로 밝혀졌다.
따라서, 만성 상처의 치유는 상기 제시된 바와 같은 과량의 반응성 산소 그룹과 특히 반응시킴으로써, 산화성 스트레스의 수준을 감소시키는 산화방지성 상처 드레싱의 사용에 의해 도움받을 수 있다.
미국 특허 제5,667,501호는 디페닐피크릴하이드라질(DPPH) 시험에 의해 측정하는 경우에 산화방지제 활성을 부여하고, 또한 대식세포 활성 및 섬유아세포 증식을 촉진시키기 위하여 상처 베드에서 분자 산소와의 반응에 의해 낮은 수준의 과산화수소를 생성하는 화학 그룹으로 그래프트된 화학적으로 개질된 중합체를 포함하는 조성물을 기술하고 있다. 당해 조성물은 만성 상처의 치유를 촉진시키기 위하여 사용될 수 있다. 바람직하게는, 당해 중합체는 하이드록실, 카보닐 또는 아미 드 작용성 그룹을 함유하는 중합체이거나, 하이드록실 작용성 그룹을 함유하는 다당류이고, 상기 작용성 그룹은 지속성 유리 라디칼 또는 지속성 유리 라디칼의 전구체인 유도체로 전환된다, 즉 이들은 유리 라디칼 스캐빈저 산화방지제 그룹이다.
미국 특허 제5,612,321호는 다당류의 하나 이상의 하이드록실 그룹 상에서 산화방지제로 그래프트된 다당류를 포함하는 조성물을 기술하고 있다. 당해 조성물은 특히, 만성 상처의 치유를 촉진하는데 사용될 수 있다. 바람직하게는, 다당류는 히알루론산이고, 산화방지제 그룹은 페놀 그룹을 포함한다.
상기의 산화방지성 상처 드레싱 물질은, 다단계 화학 반응에 의해, 중합체성 기질 물질에 대해 산화방지제 잔기, 예를 들어, 하이드로퀴논 또는 벤즈이미다졸 유도체를 공유결합시킴으로써 제조된다. 산화방지성 상처 드레싱 물질에 대한 보다 간단하고 저렴한 경로에 대한 요구가 존재한다.
상처 감염을 치료하기 위한 항미생물제를 함유하는 상처 드레싱이 또한 공지되어 있다. 상처 드레싱에 사용하기에 통상 바람직한 항미생물제는 박층 필름, 나노 입자 또는 콜로이드성 은의 형태이든지 간에, 특정한 방부제, 예를 들어, 클로르헥시딘 및 트리클로산, 및 은이다. 은의 화학적 화합물도 또한 항미생물제로서 유용하다. 예를 들면, 다음의 착물 은 염이 민감하고 내성인 세균 균주에 대해 사용하기에 바람직하다: 은 설파디아진, 은 노르플록사시네이트, 은 피페미데이트, 카올린 은, 은 EDTA에이트, 은 티오살리실레이트 및 은 이미다졸륨 클로라이드.
국제 공개공보 제WO91/11206호는 상처 드레싱 중 은 알기네이트 염의 사용을 기술하고 있다. 국제 공개공보 제WO87/05517호는 항미생물 상처 드레싱으로서 또는 이에 사용될 수 있는 히알루론산의 은 염을 기술하고 있다. 이들 물질은 빛의 존재하에 안정하지 않은 경향이 있다. 은은 금속성 은으로 광화학적으로 환원되어 시간이 경과함에 따라 물질의 암화를 유발한다.
국제 공개공보 제WO02/43743호는 은 염이 암모늄 염, 티오설페이트, 금속 클로라이드 및 퍼옥사이드로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 광안정화제의 부가에 의해 안정화되는 광-안정화된 항미생물성 상처 드레싱 물질을 기술하고 있다. 국제 공개공보 제WO97/02038호는 은 염이 폴리에테르 중합체의 부가에 의해 안정화되는 광-안정화된 항미생물성 상처 드레싱 물질을 기술하고 있다. 이러한 광안정화제는 제한된 효과를 가지며, 상처 유체에 의해 드레싱 물질로부터 추출되려는 경향이 있다.
따라서, 광-안정화된 은 화합물을 함유하는 개선된 항미생물성 드레싱이 여전히 요구된다.
GB-A 제619165호는 상처 드레싱으로서 사용하기 위한 칼슘 알기네이트 섬유를 기술하고 있다. 정균성 또는 방부성 화합물, 예를 들어, 아크리딘 유도체 또는 유솔은 이들이 형성된 후에 필라멘트로 적용시키거나, 필라멘트가 연신되는 용액으로 가할 수 있다. 칼슘 알기네이트는 생체 흡수성이 아니다.
EP-A 제0368253호는 항미생물제와 함께 특정한 키토산 유도체의 용액 또는 혼합물로부터 제조되는 키토산 필름, 막대, 시트, 약품 첨가 붕대 및 패치 등을 기술하고 있다. 산화방지성 염료에 의한 생체 흡수성 상처 드레싱의 염색은 기술되고 있지 않다.
첫 번째 측면으로, 본 발명은 산화방지성 염료로 염색된 생체 흡수성 고체 기질을 포함하는 상처 드레싱 물질을 제공한다.
용어 "염색된"은 고체 상태에 있는 동안, 염료로 표면 처리되어, 이의 표면에 염료가 결합된 고체 물질을 의미한다. 즉, 고체 물질은 고화 후에 염료로 후처리된다. 생체 흡수성 기질 물질, 예를 들어, 산화된 재생 셀룰로즈는 산화방지성 염료, 예를 들어, 아닐린 및 아크리딘 염료에 대해 우수한 결합성 (avidity)을 갖는 것으로 밝혀졌다. 이는 조절된 양의 염료를 간단하고 저렴한 염색 단계로 기질 물질 위에 고정시킬 수 있도록 한다. 또한, 생성된 상기 염색 물질은 염료의 산화방지제 특성을 보유함으로써, 이들이 만성 상처 및 증가된 수준의 산소 유리 라디칼을 특징으로 하는 다른 상처의 치료에 우수한 효능제가 될 수 있도록 하는 것으로 밝혀졌다. 당해 물질은 또한 특히, 그램-양성 및 종종 그램-음성 세균에 대해 유용한 항미생물 특성을 갖는다. 상처에서 생체 흡수성 물질의 점진적 파괴로 유효량의 항미생물제의 서방출이 성취된다.
용어 "생체 흡수성 기질 물질"은 포유동물 신체의 생체내에서 완전 분해되고 흡수되는 고체 물질을 의미한다. 따라서, 당해 용어는 셀룰로즈 또는 통상의 텍스타일 물질을 포함하지 않는다. 기질 물질은 대개 수용성이 아니지만, 수팽윤성일 수 있다. 특정 양태로, 기질은 콜라겐,, 키토산, 생체 흡수성 셀룰로즈 유도체, 예를 들어, 산화된 셀룰로즈, 갈락토만난, 예를 들어, 구아/보레이트, 글리코스아미노글리칸, 예를 들어, 가교결합된 히알루로네이트, 폴리락티드/폴리글리콜리드, 폴리하이드록시부티레이트 및 이들의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 생체 흡수성 고체 물질을 포함한다(및 이들로 필수적으로 이루어질 수 있다).
특정 양태로, 기질은 콜라겐, 키토산, 산화된 재생 셀룰로즈 및 이들의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 생체 흡수성 고체 물질을 포함한다(및 이들로 필수적으로 이루어질 수 있다).
산화된 셀룰로즈는, 예를 들면, 사산화이질소에 의한 셀룰로즈의 산화에 의해 생성된다. 이 과정은 당 잔기 상의 1차 알콜 그룹을 카복실산 그룹으로 전환시켜, 셀룰로즈 쇄내에 우론산 잔기를 형성시킨다. 산화는 완전한 선택성으로 진행되지 않으며, 그 결과, 2번 및 3번 탄소 상의 하이드록실 그룹은 종종 케토 형태로 전환된다. 이들 케톤 단위는 알칼리-불안정 링크(link)를 도입하며, 이는 pH 7 또는 그 이상에서, 락톤의 형성 및 당 환 분해를 통해 중합체의 분해를 개시한다. 그 결과, 산화된 셀룰로즈는 생리학적 조건하에 생체 분해 가능하고, 생체 흡수 가능하다.
실제 적용을 위한 바람직한 산화된 셀룰로즈는 재생 셀룰로즈, 예를 들어, 레이온의 산화에 의해 제조되는 산화된 재생 셀룰로즈(ORC)이다. ORC는 지혈 특성(haemostatic property)을 가지며, ORC 직물의 적용은 복부 수술시 수술후 유착 정도를 감소시키는데 사용될 수 있는 것으로 종종 공지되어 왔다.
산화된 재생 셀룰로즈(ORC)는 전문이 본 명세서에 참조로 인용된 미국 특허 제3,122,479호에 기술된 방법에 의해 수득할 수 있다. 이 물질은 생체 적합하고, 생체 분해 가능하며, 비면역원성이고, 용이하게 시판중인 특성을 포함한 수많은 이점을 제공한다. ORC는 다양한 산화 정도 및 이에 따른 분해 속도로 이용가능하다. ORC는 직물, 부직포 및 편직물을 포함한 불용성 섬유 형태로 사용될 수 있다.
특정 양태로, 산화된 셀룰로즈는 바람직하게는 적절한 고체 또는 반고체 국소 약제 비히클에 분산된 섬유 입자 또는 분말 입자와 같은 입자 형태로 존재한다. 특히, 당해 물질은 바람직하게는 ORC 섬유를 함유하며, 이때 섬유의 80% 이상의 용적 분획은 길이가 20 내지 1000㎛의 범위이다. 이러한 크기 분포는, 예를 들면, ORC 천을 분쇄한 다음, 분쇄된 분말을 체질하여 당해 범위를 벗어나는 섬유를 제거함으로써 성취할 수 있다. 바람직하게는, ORC 섬유의 평균(용적 평균) 길이는 250 내지 450㎛의 범위이다. 이 범위에서의 ORC 섬유 길이의 선택으로, ORC와 다른 성분의 혼합이 쉬어지고, 상당히 균질한 생성물이 수득된다. ORC는 다른 성분과 보다 철저히 복합체를 형성하여, 개선된 치료학적 특성의 스폰지를 생성한다.
바람직하게는, 산화된 셀룰로즈의 평균 분자량은 50,000 이상이다. 이러한 산화된 셀룰로즈는 실질적으로 상처 유체에 불용성이지만, 생리학적 pH에서 생체 재흡수 가능한 단편으로 매우 서서히 파괴된다. 산화된 셀룰로즈는 이의 유리산 형태로 존재하거나, 중화될 수 있다. 예를 들면, 본 발명은 전문이 본 명세서에 참조로 인용된 EP-A 제0437095호에 기술된 부분 또는 완전 중화된 물질의 사용을 포함한다. 예를 들면, ORC는 하기에 보다 상세히 기술되는 바와 같은 약산의 은 염, 예를 들어, 은 아세테이트에 의해 부분적으로 중화시킬 수 있다.
본 발명의 특정 양태로, 산화된 셀룰로즈는 전문이 본 명세서에 참조로 인용된, 국제 공개공보 제WO98/00180호, 국제 공개공보 제WO98/00446호, EP-A 제1153622호 또는 국제 공개공보 제WO2004/026200호에 기술된 것과 같은 종류의 구조를 형성하기 위하여 콜라겐 및/또는 키토산과 복합체를 형성한다. 예를 들면, 산화된 셀룰로즈는 동결 건조된 콜라겐 스폰지에 분산되는 분쇄된 ORC 섬유의 형태로 존재할 수 있다. 이는 콜라겐과의 복합체화로부터 유발되는 특정한 치료 및 상승 효과를 제공한다.
사용되는 경우에, 본 발명의 물질 중 콜라겐은 형태 I, 형태 II 또는 형태 III 콜라겐, 천연 섬유상 콜라겐, 아텔로콜라겐(atelocollagen), 부분 가수분해된 콜라겐, 예를 들어, 젤라틴, 및 이들의 혼합물을 포함한 특정 콜라겐일 수 있다. 예를 들면, 소 기원의 천연 섬유상 콜라겐이 적합하다. 예를 들면, 소 가죽으로 제조된 콜라겐은 형태 I 콜라겐(85%)과 형태 III 콜라겐(15%)의 혼합물이다.
사용되는 경우에, 본 발명의 물질 중 키토산은 대개 키틴으로부터 유도된다. 키틴은 N-아세틸-D-글루코사민 단위로 구성된 천연 생체 중합체이다. 키틴은 공지된 방법으로 새우 및 게의 외부 껍질로부터 추출할 수 있다. 그 다음에, 키틴은, 예를 들면, 5 내지 15M NaOH에 의한 처리로 부분 탈아세틸화하여 키토산을 생성한다. 키틴의 완전 탈아세틸화는 실제 가능성이 없고, 바람직하게는 키토산은 50% 이상 탈아세틸화되며, 보다 바람직하게는 75% 이상 탈아세틸화된다. 키토산은 다양한 물리적 형태로, 예를 들면, 용액/겔, 필름/멤브레인, 스폰지, 분말 또는 섬유로서 상처 처리에 사용되어 왔다. 유리 염기 형태의 키토산은 팽윤성이지만, 키토산 쇄 상의 암모늄 그룹의 존재로 인하여 실질적으로 거의 중성 pH인 물에는 가용성이 아니지만, 산에는 가용성이다. 통상, 키토산의 평균 분자량은 겔 투과 크로마토그래피로 측정하는 경우 약 105 내지 약 106이다.
특별한 양태로, 기질은 (a) 콜라겐 및/또는 키토산과 (b) 산화된 재생 셀룰 로즈의 혼합물을, 예를 들면, 약 90:10 내지 약 10:90의 콜라겐/키토산:ORC, 바람직하게는 약 75:25 내지 약 25:75 및 특히, 약 60:40 내지 약 40:60의 무수 중량비 범위로 포함한다(및 필수적으로 이것들로 이루어질 수 있다).
본 발명에 따르는 상처 드레싱 물질은 또한 은 염을 함유할 수 있다. 은의 일부는 금속성 은으로서 존재할 수 있지만, 바람직하게는 은의 대부분은 은 염으로서, 바람직하게는 실질적으로 무색 은 염으로서 존재한다. 바람직하게는, 물질 중 은은 필수적으로 은 염, 보다 바람직하게는 실질적으로 무색 은 염으로 이루어진다. 바람직하게는, 본 발명에 따르는 물질 중 은(은 이온 및 금속성 은으로서)의 양은 약 0.01 내지 약 5중량%, 보다 바람직하게는 약 0.1 내지 약 2중량%, 가장 바람직하게는 약 0.1 내지 약 1중량%, 가장 바람직하게는 약 0.3중량%이다. 은의 양이 보다 적으면 불충분한 항미생물 효과를 제공할 수 있다. 은의 양이 보다 많으면 상처 치유 세포에 대해 항증식성 효과를 일으킬 수 있다.
은은, 예를 들면, 국제 공개공보 제WO02/43743호에 기술된 바와 같이, 생체 흡수성 기질 물질을 물 또는 유기 용매, 예를 들어, 에탄올에 용해되거나 분산된 은 염 또는 화합물로 처리하여 도입시킬 수 있다. 적절한 화합물에는 산화은, 크롬산은, 은 알란토이네이트, 붕산은, 은 글리세롤레이트, 질산은, 은 아세테이트, 염화은, 황산은, 은 락테이트, 브롬화은, 요오드화은, 탄산은, 은 시트레이트, 은 라우레이트, 은 데옥시콜레이트, 은 살리실레이트, 은 p-아미노벤조에이트, 은 p-아미노살리실레이트 및 이들의 혼합물이 포함된다. 바람직하게는, 은은 은 설파디아진으로서 존재하지 않는다.
바람직한 양태로, 은은 기질 물질에 착물화될 수 있다. 용어 "착물"은 바람직하게는 은과 중합체 사이에 이온 또는 공유결합을 갖는, 분자 규모에서 긴밀한 혼합물을 의미한다. 착물은 바람직하게는 음이온성 중합체와 Ag+ 사이에 형성된 염을 포함한다. 적합하게는, 음이온성 중합체는 폴리카복실레이트 또는 폴리설페이트화 다당류이다. 적합하게는, 음이온성 중합체는 음이온성 다당류를 포함한다. 적합한 음이온성 다당류는 히알루로네이트, 펙틴, 카라기난, 크산탄 고무, 설페이트화 다당류, 예를 들어, 데르마탄 설페이트 또는 설페이트화 덱스트란, 및 산화된 셀룰로즈를 포함한다.
음이온성 중합체와 은의 착물은 음이온성 중합체를 은 염의 용액으로 처리하는 단계를 포함하는 방법에 의해 제조할 수 있다. 바람직하게는, 용액은 수용액이다. 바람직하게는, 음이온성 중합체는 실질적으로 pH 7에서 물에 불용성이고, 따라서 처리는 고체 상태에서 중합체에 대해 수행한다. 예를 들면, 중합체는 고체 섬유, 시트, 스폰지 또는 직물의 형태로 존재할 수 있다. 특정 양태로, 음이온성 중합체는 염이므로, 처리는 이온 교환법으로서 간주될 수 있다. 다른 양태로, 음이온성 중합체는 적어도 부분적으로 유리산 형태로 존재하며, 이 경우에 은 염은 바람직하게는 약산의 염, 예를 들면, 은 아세테이트이므로, 음이온성 중합체는 은 염에 의해 적어도 부분적으로 중화된다. 유사한 방법이 전문이 본 명세서에 참조로 인용된 EP-A 제0437095호에 기술되어 있다.
중화 반응은 물 또는 알콜 단독에서 수행할 수 있지만, 바람직하게는 물과 알콜의 혼합물에서 수행한다. 물과 알콜의 혼합물을 사용함으로 물을 통해 약산 염에 대해 양호한 용해도를 제공하며, 알콜은 음이온성 중합체가 중화 도중 지나치게 팽윤되고, 파괴되고 약화되는 것을 방지한다. 따라서, 당해 물질의 물리적 특성이 유지된다. 메탄올은 상기 언급한 다수의 염이 물과 함께 이 알콜에서 양호한 용해도를 갖기 때문에 바람직한 알콜이다. 바람직하게는, 알콜 대 물의 비는 약 4:1 내지 1:4의 범위이다. 용액 중 알콜이 너무 풍부해진다면, 일부 염은, 특히 알콜이 메탄올이 아닌 다른 것인 경우 더이상 가용성일 수 없다. 용액 중 물이 너무 풍부해지면, 중화가 일어날 때 중합체의 일부 팽윤이 일어나고, 중합체의 인장 강도와 같은 물리적 특성이 다소 손실될 것이다. 다른 유용한 알콜에는, 예를 들면, 에틸 알콜, 프로필 알콜 및 이소프로필 알콜이 포함된다.
약한 중화제, 예를 들어, 은 아세테이트의 사용으로 중화도를 조절할 수 있다. 음이온성 중합체에 대한 화학양론적 및 화학적으로 등가량인 중화제 및 카복실산의 사용은 염기, 예를 들어, 수산화나트륨, 탄산나트륨, 중탄산나트륨 및 수산화암모늄과의 강한 비가역적 반응으로 생성되는 100% 중화된 중합체를 생성하지 못한다.
음이온성 중합체는 이온 교환제로서 작용하며, 이들을 통과하는 은 염의 은 양이온을 용액으로부터 유인할 것이다. 이 교환의 부산물은 염으로부터의 산이고, 약한 유기산의 염을 사용함으로써, 중합체에 손상을 주지않는 약산, 예를 들어, 아세트산이 생성된다. 강산의 염, 예를 들어, 염화나트륨 또는 황산나트륨을 사용하면, 염산 또는 황산 부산물이 각각 생성되며, 이들 강산은 중합체의 탈중합과 같은 손상을 유발할 수 있다.
약산의 은 염을 사용하면, 은 이온은 중합체 상의 양성자와 교환되고, 염의 일부는 약산으로 전환된다. 용액 중 산과 염의 혼합물은 완충액을 생성하여 적절하게 일정한 pH를 유지하고 중화도를 조절한다. 평형 반응이 일어남으로써, 은 이온은 중합체의 산 부분 및 또한, 염 분자에 결합된다. 은 이온의 이러한 분배로 중합체의 중화가 완결되는 것을 방지한다.
예를 들면, 화학양론적 양의 은 아세테이트를 사용하면 산화된 셀룰로즈 중합체 상의 카복실산 그룹의 약 65 내지 75% 중화도가 얻어진다. 자체 생성되는 완충액의 생성에 의한 pH의 이러한 조절 및 물질의 팽윤을 조절하기 위한 메탄올의 사용으로 부분 중화된 물질이 유도되며, 이때 다당류의 물리적 특성, 예를 들어, 인장 강도 및 형태는 유지된다.
사용되는 은 염의 양은 일반적으로 중합체 중의 산 함량의 화학양론적 양과 대략 동일하거나, 이의 2배 이하이다. 또는, 제1 충전이 일정한 pH에 이른 후에, 반응이 새로운 용매와 염으로 재충전되는 경우에 화학양론적 양의 은 염의 제2 충전이 사용될 수 있다. 그 다음에, pH가 증가되는 물질을 세척하여 이로부터 과량의 은 염 및 이온을 제거한다.
일부 양태로, 상처 드레싱 물질의 적어도 일부는 은과 착물화된 콜라겐을 포함한다. 이는 콜라겐을 은 염의 용액으로 처리하여 성취할 수 있다. 은 염은, 예를 들면, 약 0.01 내지 약 1mol 농도의 은 아세테이트 또는 질산은일 수 있다. 처리는 바람직하게는 pH 약 5 내지 약 9에서 수행한다. 은은 주로 콜라겐 아미노산, 특히 리신, 하이드록시리신, 아스파라긴, 글루타민 및 아르기닌의 질소 함유 측쇄 에 착물화되는 것으로 여겨진다. 은은 또한, 존재하는 경우에, 메티오닌과 시스테인 잔기의 설프하이드릴 그룹과 아스파르테이트와 글루타메이트의 카복실 그룹에 결합될 수 있다.
바람직하게는, 콜라겐 착물 중 은의 양은, 콜라겐의 중량을 기준으로 하여, 약 0.01 내지 약 30중량%, 보다 바람직하게는 약 0.1 내지 약 20중량%, 보다 바람직하게는 약 2 내지 약 10중량%이다. 바람직하게는, 상처 드레싱 물질 중 은-콜라겐 착물의 양은 약 0.1 내지 약 10중량%, 보다 바람직하게는 약 0.1 내지 약 2중량%이다. 몇몇 경우에, 상처 드레싱 물질 중 은의 전체 양은 일반적으로 상기 명시한 바와 같다.
상기 기술한 은과 기질 물질의 착물은 비교적 높은 함량의 은, 예를 들면, 5중량%보다 많은 양의 은을 사용하여 제조한 다음, 다른 기질 물질(동일하거나 상이한)로 희석하여 목적하는 전체 은 함량이 0.01 내지 5중량%, 바람직하게는 약 0.2 내지 약 2중량%가 되도록 할 수 있음을 알 수 있을 것이다.
본 발명에 따르는 물질은 비드, 플레이크, 분말 형태 및 바람직하게는, 필름, 섬유상 패드, 웹, 직물 또는 부직포, 동결 건조된 스폰지, 발포체 또는 이들의 조합 형태로 제공될 수 있다. 특정 양태로, 생체 흡수성 고체 기질은 직물, 편직물 및 부직포로 이루어진 그룹으로부터 선택되며, 이들 모두는 통상의 방법으로 제조될 수 있다. 다른 양태로, 생체 흡수성 고체 기질은, 예를 들면, 상기 기술한 바와 같이 동결 건조된 스폰지 또는 용매-건조된 스폰지를 포함할 수 있다(또는 이것으로 필수적으로 이루어질 수 있다).
생체 흡수성 고체 기질은 통상 시트 형태이며, 예를 들면, 면적이 약 1 내지 약 400㎠, 특히 약 2 내지 약 100㎠인 물질의 시트이다. 시트의 기본 중량은 통상 약 100 내지 약 5000g/㎡, 예를 들면, 약 400 내지 약 2000g/㎡이다.
생체 흡수성 고체 기질 물질은 상처 드레싱 물질의 50중량% 이상, 예를 들면, 약 75중량% 이상 또는 약 90중량% 이상을 차지할 수 있다.
용어 "염료(dyestuff)"는 직물 물질에 대한 착색제로서 유용한 물질, 즉 가시영역 400 내지 700㎚에서 강하게 빛을 흡수하는 유기 화합물을 의미한다. 특정 양태로, 산화방지성 염료는 아닐린 염료, 아크리딘 염료, 티오닌 염료, 비스-나프탈렌 염료, 티아진 염료, 아조 염료, 안트라퀴논 염료 및 이들의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 예를 들면, 산화방지성 염료는 젠티안 바이올렛, 아닐린 블루, 메틸렌 블루, 크리스탈 바이올렛, 아크리플라빈, 9-아미노아크리딘, 아크리딘 옐로우, 아크리딘 오렌지, 프로플라빈, 퀴나크린, 브릴리언트 그린, 트리판 블루, 트리판 레드, 말라키트 그린, 아자크린, 메틸 바이올렛, 메틸 오렌지, 메틸 옐로우, 에틸 바이올렛, 애시드 오렌지, 애시드 옐로우, 애시드 블루, 애시드 레드, 티오플라빈, 알파주린, 인디고 블루, 메틸렌 그린 및 이들의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택될 수 있다.
염료는 또한 물질 표면 근처의 빛을 흡수함으로써, 물질에 존재하는 은 염을 광화학적 분해로부터, 특히 금속성 은에 대한 광화학적 환원으로부터 안정화시킨다. 염료는 또한 은과 다르게 반응할 수 있는 광화학적으로 생성되는 유리 라디칼을 포획한다. 이 방법에서, 염료는 광화학적 탈감작제로서 작용할 수 있다. 상기 제시된 통상의 염료 이외에, 사진에 사용되는 종류의 의학적으로 허용되는 유기 탈감작제가 본 발명의 물질에 염료로서 사용되기에 적합할 수 있다.
염료는 본 발명에 따르는 상처 드레싱 물질에, 물질의 무수 중량을 기준으로 하여, 약 0.05 내지 약 5중량%, 통상 약 0.2 내지 약 2중량%의 양으로 존재할 수 있다.
상처 드레싱 물질은 또한 20중량% 이하, 바람직하게는 10중량% 미만의 물을 포함할 수 있다. 당해 물질은 또한 0 내지 40중량%, 바람직하게는 0 내지 25중량%의 가소제, 바람직하게는 다가 알콜, 예를 들어, 글리세롤을 함유할 수 있다. 당해 물질은 또한 0 내지 10중량%, 바람직하게는 0 내지 5중량%의 하나 이상의 치료학적 상처 치유제, 예를 들면, 비스테로이드계 소염제(예: 아세트아미노펜), 스테로이드, 항생제(예: 페니실린 또는 스트렙토마이신), 방부제(예: 은 설파디아진 또는 클로르헥시딘) 또는 성장 인자(예: 섬유아세포 성장 인자 또는 혈소판 유도 성장 인자)를 포함할 수 있다. 상기 모든 %는 무수 중량 기준이다.
본 발명에 따르는 상처 치유 물질은 바람직하게는 멸균되며, 미생물-불침투성 용기에 포장된다.
바람직하게는, 본 발명에 따르는 물질은 하기의 방법 1에서 다시 설명되는 바와 같이, 10-4M 디페닐피크릴하이드라질(DPPH) 중 다당류의 0.5%w/v 분산액의 4시간 후 524㎚에서의 흡광도의 감소율(%)로서 측정되는 DPPH 시험에서 약 15% 이상의 유리 라디칼 활성, 즉 산화방지제 활성을 갖는다. 바람직하게는, DPPH 시험(염료에 의한 흡광도의 보정 후) 중 흡광도의 감소율(%)은 약 25% 이상, 보다 바람직하 게는 약 50% 이상, 가장 바람직하게는 약 75% 이상이다.
이와 달리 또는 추가로, 본 발명에 따르는 물질은 퍼옥시다제에 의한 ABTS(2,2'-아지노-디-[3-에틸벤즈티아졸린 설포네이트])의 산화를 억제하는 이의 능력에 의해 측정되는 바와 같은 산화방지제 활성을 나타낼 수 있다.
바람직하게는, 본 발명에 따르는 물질은 물 또는 상처 유체를 흡수하여, 습윤되고, 팽윤되거나, 젤라틴성 덩어리로 되지만, 자발적으로 이에 용해되거나 분산되지는 않는다. 즉, 친수성이지만, 바람직하게는 25℃의 물에서 약 1g/ℓ 미만의 용해도를 갖는다. 낮은 용해도는 이러한 물질이 상처 유체로부터 반응성 산소 그룹을 제거하기 위한 상처 드레싱으로서 사용되기에 특히 적합하도록 만든다.
본 발명에 따르는 물질의 산화방지 및 항미생물 특성은 급성 수술 및 외상, 화상, 누공, 정맥성 궤양, 동맥성 궤양, 압박 궤양(달리, 욕창 궤양으로 공지됨), 당뇨성 궤양, 복합 병인론적 궤양 및 다른 만성이나 괴사성 상처 및 염증성 병변과 질환의 치료를 포함한 의학적 용도 범위에 적용을 제안한다. 본 발명에 따르는 물질은 감염 및 비감염성 상처(즉, 임상적인 감염 사인을 나타내지 않는 상처) 모두의 치료에 사용하고자 한다.
따라서, 두 번째 측면으로, 본 발명은 상처 치료를 위한 약제의 제조에 있어서의, 본 발명에 따르는 물질의 용도를 제공한다. 바람직하게는, 상처는 만성 상처이다. 보다 바람직하게는, 만성 상처는 정맥성, 동맥성 또는 복합 병인론적 궤양, 욕창 궤양 및 당뇨성 궤양으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 바람직하게는, 물질은 상처 환경에서 산화성 스트레스를 감소시킴으로써 상처 치유를 촉진시 키는 산화방지제로서 사용된다.
관련 측면으로, 본 발명은 치료학적 유효량의 본 발명에 따르는 물질을 상처에 적용시키는 단계를 포함하는, 포유동물의 상처 치료법을 제공한다. 바람직하게는, 상처는 만성 상처이다.
세 번째 측면으로, 본 발명은 본 발명에 따르는 산화방지성 상처 드레싱 물질을 포함하는 상처 드레싱을 제공한다.
상처 드레싱은 바람직하게는 시트 형태이며, 본 발명에 따르는 물질의 활성층을 포함한다. 활성층은 통상 사용시 상처 접촉층이 되지만, 일부 양태에서는 액체 투과성 상부 시트에 의해 상처와 분리될 수 있다. 바람직하게는, 활성층의 면적은 약 1 내지 약 400㎠, 보다 바람직하게는 약 4 내지 약 100㎠이다.
바람직하게는, 상처 드레싱은 활성층의 상처 대면층과 마주보는 활성층 위로 연장되는 배면 시트를 추가로 포함한다. 바람직하게는, 배면 시트는 너비의 가장자리 영역 1 내지 50㎜, 바람직하게는 5 내지 20㎜가 활성층 주위로 연장되어 소위 섬(island) 드레싱을 형성하도록 활성층보다 크다. 이러한 경우에, 배면 시트는 바람직하게는 적어도 이의 가장자리 영역에 감압성 의료 등급의 접착제로 피복시킨다.
바람직하게는, 배면 시트는 실질적으로 액체-불투과성이다. 배면 시트는 바람직하게는 반투과성이다. 즉, 배면 시트는 바람직하게는 수증기에 투과성이지만, 액체 물 또는 상처 침출물에 대해서는 투과성이 아니다. 바람직하게는, 배면 시트는 또한 미생물-불투과성이다. 적절한 연속적인 성형성 배면 시트는 바람직하게는 배면 시트 단독의 수증기 투과율(MVTR: moisture vapor transmission rate)이 37.5℃, 100 내지 10% 상대 습도차에서 300 내지 500g/㎡/24hr, 바람직하게는 500 내지 2000g/㎡/24hr이다. 배면 시트 두께는 바람직하게는 10 내지 1000㎛, 보다 바람직하게는 100 내지 500㎛의 범위이다. 이러한 수증기 투과율은 상처 주위 피부를 약화시키지 않고, 습한 조건하에 드레싱하에 있는 상처가 치유되도록 하는 것으로 밝혀졌다.
배면 시트를 형성하기 위한 적절한 중합체는 GB-A 제1280631호에 기술된 것과 같은, 폴리우레탄 및 폴리알콕시알킬 아크릴레이트 및 메타크릴레이트를 포함한다. 바람직하게는, 배면 시트는 주로 독립 기포인 고밀도 블록킹된 폴리우레탄 발포체의 연속층을 포함한다. 적절한 배면 시트 물질은 상표등록명 ESTANE 5714F로 시판중인 폴리우레탄 필름이다.
접착제 층(존재하는 경우에)은 수증기 투과성이고/이거나, 이를 통해 수증기가 통과될 수 있도록 패턴화되어야 한다. 접착제 층은 바람직하게는 섬-형태 상처 드레싱에 통상 사용되는 형태의 연속 수증기 투과성의 감압성 접착제 층, 예를 들면, GB-A 제1280631호에 기술된 바와 같은 아크릴레이트 에스테르 공중합체, 폴리비닐 에틸 에테르 및 폴리우레탄을 기본으로 하는 감압성 접착제이다. 접착제 층의 기본 중량은 바람직하게는 20 내지 250g/㎡이며, 보다 바람직하게는 50 내지 150g/㎡이다. 폴리우레탄계 감압성 접착제가 바람직하다.
다층 흡수성 제품의 추가의 층이 활성층과 보호 시트 사이에 형성될 수 있다. 예를 들면, 이들 층은 특히 드레싱이 침출성 상처에 사용하기 위한 경우, 활성층과 보호 시트 사이에 흡수성 층을 포함할 수 있다. 임의의 흡수성 층은 거즈, 부직포, 초흡수제, 하이드로겔 및 이들의 혼합물을 포함한, 상처 치유 분야에서 상처 유체, 혈청 또는 혈액을 흡수하는데 통상 사용되는 층일 수 있다. 바람직하게는, 흡수성 층은 전문이 본 명세서에 참조로 인용된 EP-A 제0541391호에 따라 제조되는 연속 기포 친수성 폴리우레탄 발포체와 같은 흡수성 발포체 층을 포함한다. 다른 양태로, 흡수성 층은 부직 섬유상 웹, 예를 들면, 비스코스 스테이플 (viscose staple) 섬유의 카딩 웹 (carded web)일 수 있다. 흡수성 층의 기본 중량은 50 내지 500g/㎡, 예를 들면, 100 내지 400g/㎡의 범위일 수 있다. 흡수성 층의 비압착 두께는 0.5 내지 10㎜, 예를 들면, 1 내지 4㎜의 범위일 수 있다. 생리 식염수에 대해 측정된 유리(비압착) 액체 흡수성은 25℃에서 5 내지 30g/g의 범위일 수 있다. 바람직하게는, 흡수성 층(들)은 실질적으로 활성층과 함께 연장된다.
드레싱의 상처 대면 표면은 바람직하게는 제거할 수 있는 커버 시트로 보호된다. 커버 시트는 통상 가요성 열가소성 물질로부터 형성된다. 적절한 물질에는 폴리에스테르 및 폴리올레핀이 포함된다. 바람직하게는, 커버 시트의 접착제 대면 표면은 박리성 표면이다. 즉, 배면 시트 위의 활성층과 접착제에 대해 단지 약하게 부착성인 표면은 커버 시트로부터 접착제 층을 박리하는 것을 돕는다. 예를 들면, 커버 시트는 비부착성 플라스틱, 예를 들어, 플루오로 중합체로부터 형성되거나, 박리성 피복물, 예를 들어, 실리콘 또는 플루오로 중합체 박리 피복물을 사용하여 제공할 수 있다.
통상, 본 발명에 따르는 상처 드레싱은 멸균되며, 미생물-불투과성 용기로 포장된다.
다른 측면으로, 본 발명은 생체 흡수성 기질 물질을 적절한 염료로 염색하는 단계를 포함하는, 산화방지성 상처 드레싱 물질의 제조방법을 제공한다. 본 방법은 바람직하게는 기질 물질을 물 또는 유기 용매에 용해되거나 분산된 은 염으로 처리하는 단계를 추가로 포함한다.
본 발명에 따르는 방법은 본 발명에 따르는 상처 드레싱을 제조하는데 사용될 수 있다.
본 발명의 방법은 시트 형태, 예를 들면, 직물, 부직포 또는 편직물인 기질 물질이나, 스폰지 시트의 기질 물질을 염욕에 침지시킨 다음, 세척하여 결합되지 않은 염료를 제거하고, 건조시킴으로써 염색하는 단계를 포함할 수 있다. 다른 양태로, 기질 물질은 섬유상 또는 미립자 형태에서 염색한 다음, 물질을 시트로 형성할 수 있다. 예를 들면, 기질 물질의 섬유 또는 입자의 슬러리는 염료로 처리한 다음, 동결 건조시켜 염색된 스폰지를 형성할 수 있다. 은 처리는 결합되지 않은 염료의 제거 단계 후에 수행할 수 있다.
본 발명의 한 측면과 관련하여 본 명세서에 기술된 임의의 특징 또는 양태는 본 발명의 다른 측면에 또한 동등하게 적용시킬 수 있음을 알 수 있을 것이다.
이제, 본 발명의 임의의 특정 양태는 하기의 실시예에서 다시 기술할 것이다.
실시예 1
콜라겐/ORC 동결 건조된 스폰지 물질을 기본으로 하는 산화방지성 상처 드레싱 물질은 다음과 같이 제조한다.
콜라겐 성분은 다음과 같이 소 진피로부터 제조한다. 소 진피를 소 가죽으로부터 분리하고, 문지른 다음, 차아염소산나트륨 용액(0.03% w/v)에 침지시켜 추가 처리 도중 미생물 활성을 억제한다. 그 다음에, 진피를 물로 세척하고, 수산화나트륨(0.2% w/v) 및 과산화수소(0.02% w/v)를 함유하는 용액으로 처리하여 주위 온도에서 진피를 팽윤시키고 멸균시킨다. 이어서, 진피 스플릿 (split)은 회전시키면서 0.24 mmol/g 미만의 아미드 질소 수준에 도달될 때 까지, 주위 온도에서 12.2 이상의 pH에서 10 내지 14일 동안 수산화나트륨, 수산화칼슘 및 중탄산나트륨(각각 0.4% w/v, 0.6% w/v 및 0.05% w/v)을 함유하는 용액에서 알칼리 처리 단계를 수행한다. 그 다음에, 진피 스플릿은 주위 온도 및 pH 0.8 내지 1.2에서 1% 염산으로 산처리 단계를 수행한다. 처리는 회전하에 진피 스플릿이 2.5 미만의 pH에 이르기에 충분한 산을 흡수할 때까지 계속한다. 이어서, 진피 스플릿의 pH 값이 3.0 내지 3.4에 이를 때까지 스플릿을 물로 세척한다. 그 다음에, 진피 스플릿을 먼저 거칠게 분쇄한 다음, 미세한 분쇄 세팅으로 보울 초퍼(chopper)에서 얼음과 함께 분쇄한다. 진피 스플릿 650g 대 얼음으로서의 물 100g의 비로 구성된 생성되는 페이스트를 공정의 다음 단계에 사용하기 전에 동결시켜 저장한다. 그러나, 콜라겐은 다음 단계에서 ORC 및 다른 성분과의 혼합 전에 동결 건조되지 않는다.
동결 건조된 패드의 ORC 성분은 다음과 같이 제조한다. SURGICEL 천(Johnson & Johnson Medical, Arlington)은 60℃ 미만의 온도를 유지하면서, 스크 린-플레이트를 통해 회전식 나이프 커터를 사용하여 분쇄한다.
산성 염료인 메틸렌 블루는 적절한 양의 염료를 0.05M 아세트산에 용해시키고, 분쇄된 ORC 분말과 함께 콜라겐 페이스트에 가하여 최종 고체 농도 1%를 수득함으로써 혼입시킨다. 염료가 슬러리 중 다음의 농도로 혼입된 샘플을 제조한다: 0%(참조예), 1㎎/㎖, 0.5㎎/㎖ 및 0.1㎎/㎖.
생성된 슬러리는 온도가 -40℃로 미리 세팅된 냉동기 선반 위에 놓인 깊이가 3㎜인 페트리 디시로 붓는다. 그 다음에, 동결 건조기 프로그램을 개시하여 콜라겐 및 ORC를 건조시키고, 탈열수작용으로 가교결합시켜 스폰지 패드를 형성한다. 사이클의 완결시, 진공을 제거하고, 스폰지 샘플을 충전시키고 코발트 60 감마-조사에 의해 멸균시킨다.
실시예 2
실시예 1의 방법을 따르되, 단 메틸렌 블루 염료를 염기성 염료인 크리스탈 바이올렛으로 대체한다. 크리스탈 바이올렛은 슬러리에 다음의 농도로 혼입시킨다: 0%(참조예), 1㎎/㎖, 0.5㎎/㎖ 및 0.1㎎/㎖.
실시예 3
실시예 1의 방법을 따르되, 단 메틸렌 블루 염료를 염기성 염료인 플라빈 3,6-디아미노아크리딘 헤미설페이트로 대체한다. 플라빈은 슬러리에 다음의 농도로 혼입시킨다: 0%(참조예), 1㎎/㎖, 0.5㎎/㎖ 및 0.1㎎/㎖.
실시예 4
실시예 1의 방법을 따르되, 단 메틸렌 블루 염료를 염기성 염료인 플라빈 3,6-디아미노아크리딘 헤미설페이트로 대체한다. 플라빈은 슬러리에 다음의 농도로 혼입시킨다: 0%(참조예), 1㎎/㎖, 0.5㎎/㎖ 및 0.1㎎/㎖.
실시예 5
실시예 1의 방법을 따르되, 단 메틸렌 블루 염료를 메틸렌 블루와 플라빈 3,6-디아미노아크리딘 헤미설페이트의 혼합물로 대체하고, 각 염료는 슬러리에 0.5㎎/㎖의 농도로 혼입시킨다.
실시예 6
실시예 1의 방법을 따르되, 단 메틸렌 블루 염료를 크리스탈 바이올렛과 플라빈 3,6-디아미노아크리딘 헤미설페이트의 혼합물로 대체하고, 각 염료는 슬러리에 0.5㎎/㎖의 농도로 혼입시킨다.
실시예 7
실시예 1의 방법을 따르되, 단 메틸렌 블루 염료를 크리스탈 바이올렛과 메틸렌 블루의 혼합물로 대체하고, 각 염료는 슬러리에 0.5㎎/㎖의 농도로 혼입시킨다.
실시예 8 내지 14
은은 은 아세테이트를 0.05M 아세트산에 용해시키고, 전체 고체 기준으로, 1중량%의 은을 함유하는 최종 슬러리를 생성하기에 충분한 양으로 용액을 ORC/콜라겐 슬러리에 가하여 실시예 1 내지 7에 기술된 바와 같이 제조된 상처 드레싱 물질에 혼입시킨다.
실시예 1 내지 14에서 수득된 본 발명에 따르는 스폰지는 모두 염료의 안정한 흡수성을 나타낸다. 스폰지는 다수의 염료에 대해 25℃에서 혈청에 침지되고, 항상 착색된 채로 유지된다. 부가되는 염료의 농도에 따라, 과량의 염료의 초기 방출에 이어서, 스폰지가 분해되기 시작하면 서서히 방출된다.
방법 1
유리 라디칼을 함유하는 산소와 반응하여 산소를 제거하는 상처 드레싱 물질의 능력은 전문이 본 명세서에 참조로 인용된 국제 공개공보 제WO94/13333호에 기술된 DPPH 시험으로 평가한다. 당해 시험은 문헌(참조: Blois M.S., Nature 181:1199 (1958) 및 Banda P.W. et al., Analytical Letters 7:41 (1974))에 기술된 것으로부터 채택한다.
요약하면, 시험하에 상처 드레싱 물질(2.5㎎; 5㎎ 및 25㎎ 샘플 크기)은 0.1M pH 7.0 인산염 완충액 2.5㎖에 현탁시킨다. 메탄올(10-4M) 중 디페닐피크릴하이드라질(DPPH)의 용액을 2.5㎖의 양으로 가하고, 혼합물을 교반시킨 다음, 20℃에서 어둡게 저장한다. 샘플은 대조군과 비교하여, 6시간 동안 524㎚에서의 흡광도 측정에 의해 평가하며, 4시간 후에 특징에 특히 주목한다. 4시간 후 대조군에 대한 흡광도의 감소율(%)은 DPPH 시험값을 제공하며, 재생성은 일반적으로 ±5%이다. 이 값은 편의상 대조군에 대한 흡광도 유닛(AU; absorbance unit)의 단순한 감소로 표현할 수 있다.
익히 공지된 산화방지제인 아스코르브산은 비교 목적을 위한 유용한 포지티브 대조군 물질을 제공한다. 키틴/키토산 및 하이드록시에틸 셀룰로즈의 동결 건조 스폰지는 네가티브 대조군으로서 사용된다.
실시예 1 내지 7의 본 발명에 따르는 물질에 대한 이 시험의 적용은 포지티브 대조군(10-4M)에 대해 80 내지 90%의 DPPH 시험값을 제공한다. 대조적으로, 네가티브 대조군 키틴/키토산 및 하이드록시에틸 셀룰로즈는 15% 미만의 훨씬 낮은 DPPH 값을 나타낸다. 부가 염료가 부재한 콜라겐/ORC는 DPPH 시험에서 일부 활성을 나타내며, 이는 ORC 자체가 산화방지 특성을 가짐을 나타내는 것이다. 본 발명에 따르는 염색된 물질은 DPPH 시험에서 염료의 산화방지 활성과 일치하는, 콜라겐/ORC 단독보다 상당히 더 높은 활성을 나타낸다.
방법 2
실시예 8 내지 14에서 제조된 스폰지의 살균 활성은 억제 영역을 관찰함으로써 슈도모나스 아에루기노사 (pseudomonas Aeruginosa) 및 스타필로코쿠스 아우레우스 (staphylococcus Aureus)에 대해 시험한다.
각 샘플의 6개 2㎝ x 2㎝ 정사각형을 멸균 상태로 절단한다. 실험 1일째, 슈도모나스 아에루기노사(ATCC 27853 및 다양한 PSI 균주) 및 스타필로코쿠스 아우레우스(제공자: the Dept of Clinical Microbiology and Pathology)의 배양물은 진단 감도 아가(DSA: Diagnostic Sensitivity Agar)에서 24시간 동안 37℃에서 호기성으로 배양한다. 24시간 후에, 시험 샘플을 각각 DSA 플레이트에 놓고, 완충액 0.5㎖로 즉시 습윤시킨다. 3개의 샘플 정사각형을 슈도모나스 아에루기노사로 접종시킨 플레이트 위에 놓고, 세 개는 스타필로코쿠스 아우레우스로 접종시킨 플레이트 위에 놓는다. 그 다음에, 플레이트를 37℃에서 24시간 동안 배양한다. 이어서, 샘플 주위의 억제된 성장 영역은 캘리퍼를 사용하여 측정하고, 시험 샘플은 새로이 접종한 DSA 플레이트 위에 놓는다. 스워브 (swab) 시험은 샘플이 살균성이 아닌 경우 DSA 플레이트 위에 스워브를 바름질하고, 이를 24시간 동안 배양한 다음, 성장을 측정함으로써 샘플이 정균성인지를 결정하기 위하여 샘플 바로아래 영역에서 수행한다. 샘플을 새로이 접종시킨 플레이트로 옮기고, 상기 방법을 샘플이 완전히 유지되는 한 72시간 동안 24시간 마다 수행한다.
네가티브 대조군으로서, 은 또는 염료없는 45% ORC/55% 콜라겐의 동결 건조된 스폰지를 시험한다. 시판중인 은-함유 항미생물 드레싱(ACTICOAT, 상표 등록마크: Smith & Nephew) 및 질산은 용액(0.5%)은 포지티브 대조군으로서 사용되며, 억제 영역은 시험 기간 동안 모두에서 관찰된다.
본 발명에 따르는 물질의 경우 스타필로코쿠스 아우레우스 및 슈도모나스 아에루기노사에 대해 상당한 살균 효과가 관찰되는 것으로 밝혀졌다. 1% 은 및 상기 를 함유하는 물질의 성능은 ACTICOAT 드레싱의 성능과 견줄만한 것으로 예상된다.
상기 양태는 단지 예로서 기술되었다. 첨부된 청구의 범위내에 속하는 많은 다른 양태가 숙련가에게 분명할 것이다.
Claims (19)
- 산화방지성 염료로 표면 처리되어 당해 산화방지성 염료가 표면에 결합되어 진, 산화된 재생 셀룰로즈인 생체 흡수성 고체 물질을 포함하는, 동결 건조된 스폰지 또는 용매 건조된 스폰지인, 생체 흡수성 고체 기질을 포함하는 상처 드레싱 물질로서, 10-4M 디페닐피크릴하이드라질(DPPH) 중 다당류의 0.5%w/v 분산액의 4시간 후 524㎚에서의 흡광도의 감소율(%)로서 측정되는 DPPH 시험에서 유리 라디칼 활성이 15% 이상임을 특징으로 하는 상처 드레싱 물질.
- 제1항에 있어서, 산화방지성 염료가 아닐린 염료, 아크리딘 염료, 티오닌 염료, 비스-나프탈렌 염료, 티아진 염료, 아조 염료, 안트라퀴논 및 이들의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 상처 드레싱 물질.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 산화방지성 염료가 젠티안 바이올렛, 아닐린 블루, 메틸렌 블루, 크리스탈 바이올렛, 아크리플라빈, 9-아미노아크리딘, 아크리딘 옐로우, 아크리딘 오렌지, 프로플라빈, 퀴나크린, 브릴리언트 그린, 트리판 블루, 트리판 레드, 말라키트 그린, 아자크린, 메틸 바이올렛, 메틸 오렌지, 메틸 옐로우, 에틸 바이올렛, 애시드 오렌지 (acid orange), 애시드 옐로우 (acid yellow), 애시드 블루 (acid blue), 애시드 레드 (acid red), 티오플라빈, 알파주린, 인디고 블루, 메틸렌 그린 및 이들의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 상처 드레싱 물질.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 산화방지성 염료가, 당해 물질의 무수 중량을 기준으로 하여, 0.2 내지 2중량%의 양으로 존재하는 상처 드레싱 물질.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 은 염을 추가로 포함함으로써, 염료가 은 염을 광안정화시키는 상처 드레싱 물질.
- 제5항에 있어서, 당해 물질이 산화된 재생 셀룰로즈를 포함하고, 은 염이 상기 산화된 재생 셀룰로즈와 Ag+의 염을 포함하는 상처 드레싱 물질.
- 제5항에 있어서, 당해 물질의 무수 중량을 기준으로 하여, 0.01 내지 5중량%의 은을 포함하는 상처 드레싱 물질.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 시트 형태의 상처 드레싱 물질.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 멸균되어 미생물-불투과성 용기로 포장되는 상처 드레싱 물질.
- 삭제
- 제1항 또는 제2항 중의 어느 한 항에 따르는 물질을 포함하는 상처 치료용 약제.
- 제11항에 있어서, 상처가 만성 상처인, 약제.
- 산화된 재생 셀룰로즈인 생체 흡수성 고체 물질을 포함하는, 동결 건조된 스폰지 또는 용매 건조된 스폰지인, 생체 흡수성 기질 물질을 산화방지성 염료로 표면 처리하여 표면에 당해 산화방지성 염료를 결합시키는 단계를 포함하는, 산화방지성 상처 드레싱 물질의 제조방법으로서, 여기서 상처 드레싱 물질이 10-4M 디페닐피크릴하이드라질(DPPH) 중 다당류의 0.5%w/v 분산액의 4시간 후 524㎚에서의 흡광도의 감소율(%)로서 측정되는 DPPH 시험에서 유리 라디칼 활성이 15% 이상임을 특징으로 하는 상처 드레싱 물질의 제조방법.
- 제13항에 있어서, 제2항에 따르는 상처 드레싱 물질을 제조하기 위한 방법.
- 제1항 또는 제2항에 따르는 산화방지성 상처 드레싱 물질을 포함하는 상처 드레싱.
- 제15항에 있어서, 물질이 멸균되어 미생물 불투과성 용기로 포장되는 상처 드레싱.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
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