KR101171716B1 - 티오레독신 １을 유효성분으로 하는 난소암 또는 폐렴 진단용 조성물 및 이의 이용 - Google Patents

티오레독신 １을 유효성분으로 하는 난소암 또는 폐렴 진단용 조성물 및 이의 이용 Download PDF

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Abstract

본 발명은 티오레독신 1을 유효성분으로 하는 난소암 또는 폐렴 진단용 조성물 및 이의 이용에 관한 것이다. 구체적으로 본 발명은 티오레독신 1을 유효성분으로 하는 난소암, 폐렴, 또는 난소암 및 폐렴 진단용 조성물, 상기 조성물을 포함하는 진단용 키트 등에 관한 것이다. 본 발명의 혈액으로부터 티오레독신 1을 측정하여 난소암 및 폐렴을 진단하는 방법은 비교적 채취가 용이한 혈액을 검체로 하기 때문에, 생검을 대상으로 하는 기존의 난소암 진단방법과는 달리 환자에게 부담을 주지 않고 매우 간편하게 난소암을 진단할 수 있을 뿐만 아니라 진단의 민감도 및 선별도가 높아 난소암의 조기 진단에 유용하게 사용될 수 있다. 또한 폐렴 진단의 경우, 폐렴 혈액에서 티오레독신 1의 농도가 감소되는 특징으로 인하여 다른 암 및 비암 질병과 쉽게 구별할 수 있는 선별성이 높은 유용한 폐렴 진단 마커로 사용될 수 있다.

Description

티오레독신 １을 유효성분으로 하는 난소암 또는 폐렴 진단용 조성물 및 이의 이용 {Composition for diagnosis of Ovarian cancer or Pneumonia comprising thioredoxin 1 and the use thereof}
본 발명은 티오레독신 1을 유효성분으로 하는 난소암 또는 폐렴 진단용 조성물 및 이의 이용에 관한 것이다.
티오레독신(thioredoxin, Trx)은 대장균의 DNA 합성에 필수적인 효소인 리보뉴클레오티드 환원 효소에 수소 이온을 공여하는 조효소로서 발견되었다. 티오레독신은 -Cys-Gly-Pro-Cys-라고 하는 활성 부위를 갖고 있어 2개의 시스테인 잔기의 사이에서 디술피드(S-S) 결합을 만드는 산화형과 디티올(-SH-SH)을 만드는 환원형이 존재하는 세포 내의 산화환원 제어 인자이다. 또한, 티오레독신(thioredoxin, Trx)는 12 kDa 정도의 작은 단백질로서, 포유류 티오레독신 1(Trx1) 및 티오레독신 2(Trx2)를 포함한다. 티오레독신은 많은 생물학적 활성을 가지는데 몇 가지 예를 들어보면, 티오레독신은 생장인자로서 작용하며, 세포 내에 독성을 미치는 과산화수소를 제거하며, 진핵세포에서 전사관련 요소인 NF-kB(nuclear transcription factor kB)의 활성에 영향을 미치게 되는데, 이와 관련있는 세포사멸과 종양에 영향을 주며 산화된 다른 단백질의 이황화결합을 끊어주어 다시 환원상태의 활성을 가지게 도와준다. 이런 생물학적인 활성 때문에, 최근에는 티오레독신을 이용하여 항암 치료제 뿐 만 아니라, 세포의 손상을 보호하는 항산화 단백질 치료제로 관심의 대상이 되고 있다.
난소암은 난소에 발생하는 악성 종양으로 50~70세 사이에 제일 많이 발생한다. 2002년 우리나라 통계에 의하면 매년 약 1,000~1,200명 정도가 새로 발병하고 있으며, 자궁 경부암에 이어 두번째로 흔한 부인과 암이다.
난소암의 약 90%를 차지하는 상피성 난소암은 대부분 3기 이상의 진행된 상태에서 발견되기 때문에 5년 생존율이 매우 나빠 40%가 채 되지 않는다. 난소암의 발병원인은 다른 암과 마찬가지로 정확히 밝혀져 있지는 않지만, 첫째, 가족 중에 난소암 환자가 있는 경우 난소암에 걸릴 위험이 높아진다. 이는 난소암에 유전성이 있다는 뜻으로 유전자(BRCA) 검사에서 양성일 경우 음성인 경우보다 난소암에 걸릴 확률이 10배 이상 높아지므로, 반드시 정기적인 조기 검진이 필요하다. 그러나, 95% 이상의 대다수 난소암은 이러한 가족력이 없는 환자에서 발생하고 있다. 둘째로는 본인이나 가족이 유방암, 자궁 내막암, 직장암 등의 과거 병력이 있는 경우 난소암에 걸릴 위험이 높아진다. 특히, 유방암과 난소암은 밀접하게 연관되어 있어서, 유방암이 생기면 난소암이 생길 가능성이 2배 높아지고 난소암이 있으면 유방암이 생길 가능성이 3~4배 많아진다고 알려져 있다. 셋째, 배란 횟수가 적을수록 난소암에 걸릴 위험은 낮아진다. 이러한 대표적인 경우로 임신을 들 수 있다. 임신은 난소암 발생을 방지하는 경향이 있어서, 출산 횟수가 한 번이면 출산을 전혀 하지 않은 여성에 비해 약 10%가량 위험이 감소하고, 세 번 출산을 하게 된다면, 난소암 위험도가 무려 50%나 줄어든다. 또한 출산 후 수유를 하는 경우에도 배란을 억제하여 월경을 지연시키기 때문에 난소암의 위험이 감소한다. 마찬가지로 먹는 피임약을 복용하는 경우에도 피임약이 배란을 억제시키기 때문에 난소암의 위험을 감소시킨다. 넷째, 고지방, 고단백 식품을 섭취하는 식습관, 비만, 석면과 활석 등 환경적 유발 물질 등도 난소암의 위험을 증가시킨다.
난소암은 증상이 미미하여 약 60%정도가 이미 상당히 진행된 상태에서 병원을 찾게 되므로, 증상이 없더라도 1년에 한 번 정도는 반드시 정기적인 부인암 검진을 받는 것이 조기진단의 지름길이다. 산부인과 의사가 내진을 하여 난소가 커져 있는지 혹이 만져지는지 등을 확인하고 필요하다고 여겨지면 초음파 검사로 난소의 혹을 검사한다. 또한 단순한 양성 물혹인지 암인지를 감별하기 위해 혈액검사로 CA 125라는 종양 표지인자를 확인하기도 한다. 그러나, 초음파나 혈액검사 모두 완벽한 검사는 아니므로 두 검사를 병행하는 것이 현재로서는 가장 일찍 난소암을 발견할 수 있는 방법이다. 의사는 환자의 나이, 현 병력 및 과거력, 가족의 과거력, 초음파 검사 및 혈액 검사, 필요 시 일정기간의 경과관찰 등 모든 자료를 종합하여 판단하게 되고, 암이 의심되면 컴퓨터 단층촬영(CT), 자기공명영상법(MRI) 등을 시행한 다음 수술을 하게 되는데, 암은 종양을 제거한 후 조직검사를 시행해야만 확진할 수 있다.
헵토글로빈(Haptoglobin, Hp)은 IgG, 알부민등과 함께 혈액내에 다량으로 존재하는 혈청단백질로서, 주로 간, 피부, 허파 및 신장 세포에서 합성되어 혈액내로 분비된다. 2개의 chain과 2개의 chain이 이황화결합(disulfide bond)으로 연결되어 있는 4합체 단백질(tetrameric protein)로 존재하며 적혈구에서 유리된 헤모글로빈과 결합하여 결국 항산화 기능을 혈액 내에서 수행한다고 알려져 있다(Wassell J.(2002) Haptoglobin: function and polymorphism. Clin Lab. 46, 547-552 / Langlois M.R. & Delanghe J.R. (1996) Biological and clinical significance of haptoglobin polymorphism in humans. Clinical Chemistry 42, 1589-1600). 최근의 프로테오믹스 연구보고에 따르면 매우 소량이기는 하지만 피하 및 복부 지방세포에서도 헵토글로빈이 만들어져 분비된다고 한다. 성인의 간에서는 합성되지만, 태아의 간에서는 합성되지 않는다. 헵토글로빈은 생체 내에서 감염이나 염증에 반응하여 혈중농도가 급격히 증가하는 급성기 단백질(acute phase protein, APP) 중의 하나이다.
헵토글로빈(Haptoglobin, Hp)은 2개의 allelic form (Hp1, Hp2) 및 3종의 Genotype가 있고(Hp1-1, Hp2-1, Hp2-2) (Maeda N, McEvoy SM, Harris HF, Huisman TH, Smithies O. (1986) Polymorphisms in the human haptoglobin gene cluster: chromosomes with multiple haptoglobin-related (Hpr) genes. Proc Natl Acad Sci U S A. 83, 73957399 / Patzelt D, Geserick G, Schroder H. (1988) The genetic haptoglobin polymorphism: relevance of paternity assessment. Electrophoresis 9, 393397), Hp 알파 체인(Hpα)에는 알파 1 및 알파 2가 존재하고, 상기 알파 단백질들은 여러 종으로 존재한다(Sadrzadeh SM, Bozorgmehr J. (2004) Haptoglobin phenotypes in health and disorders. Am J Clin Pathol. 121 Suppl:S97-104).
상기 단백질의 유전자와 연관된 질병들로 당뇨병성 신장질환(diabetic nephropathy), 크론병(Crohn's disease)들이 있고, 급성기 단백질로 감염(infection), 과도한 스트레스(extreme stress), 화상(burns), 심한 으깸손상(major crush injury), 및 알레르기(allergy) 등의 요인에 의해 그 혈액 농도가 증가되고, 근간에 Hp의 혈액 농도는 난소암 등 다수 암에서 증가된다는 보고가 있다.
상기와 같은 알려진 보고에 기인하여, 헵토글로빈은 폐렴 진단용 마커로서의 특이성 결여라는 약점을 지니고 있다. 또한 Hp는 난소암 등 다수의 암에서 그 혈중 농도가 증가되기 때문에 암 마커로서 유용성이 있으나 폐렴과의 구별성의 문제점이 존재한다. 따라서 암과 구별할 수 있는 폐렴의 진단 또는 예후를 예측할 수 있는 폐렴 특이적 진단용 마커의 필요성이 요구되고 있는 실정이다. 마찬가지로 대부분의 암 마커는 염증과 반응하여 증가되기 때문에, 암에 반응하여 증가되고 염증에 증가되지 않는 특성을 동시에 갖춘 암 마커의 필요성이 절실히 요구되고 있다.
본 발명자는 상기와 같은 문제를 해결하기 위해 비교적 채취가 용이한 혈액을 검체로 하여 간편하게 선별성이 높은 난소암 또는 폐렴을 진단할 수 있는 방법에 대해 연구하던 중, 혈액 내에서 티오레독신 1이 정상과 비교했을 때 발현의 차이가 있다는 것을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 티오레독신 1을 유효성분으로 하는 난소암, 폐렴, 또는 난소암 및 폐렴 진단용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 난소암, 폐렴, 또는 난소암 및 폐렴 진단용 키트를 제공한다.
또한, 본 발명은 티오레독신 1에 특이적으로 결합하는 항체를 포함하는 난소암, 폐렴, 또는 난소암 및 폐렴 진단용 키트를 제공한다.
또한, 본 발명은 난소암, 폐렴, 또는 난소암 및 폐렴의 진단에 필요한 정보를 제공하기 위하여, 시료로부터 항원-항체 반응을 통해 티오레독신 1의 농도를 측정하는 방법을 제공한다.
본 발명의 일 실시예에서 상기 시료는 조직, 추출물, 세포 용해물, 전혈, 혈장, 혈청, 침, 안구액, 뇌척수액, 땀, 뇨, 젖, 복수액, 활액, 및 복막액으로 이루어진 군에서 선택되는 하나인 것을 특징으로 한다.
본 발명의 혈액으로부터 티오레독신 1을 측정하여 난소암 및/또는 폐렴을 진단하는 방법은 비교적 채취가 용이한 혈액을 검체로 하기 때문에, 생검을 대상으로 하는 기존의 난소암 진단방법과는 달리 환자에게 부담을 주지 않고 매우 간편하게 난소암을 진단할 수 있을 뿐만 아니라 진단의 민감도 및 선별도가 높아 난소암의 조기 진단에 유용하게 사용될 수 있다. 또한 폐렴 진단의 경우, 폐렴 혈액에서 티오레독신 1의 농도가 감소되는 특징으로 인하여 다른 암 및 비암 질병과 쉽게 구별할 수 있는 선별성이 높은 유용한 폐렴 진단 마커로 사용될 수 있다.
도 1은 남녀 정상군 혈액에서 ELISA를 이용하여 티오레독신 1의 농도를 측정한 결과를 나이에 따른 상관성을 나타낸 도이다.
도 2은 난소암 환자군의 혈액에서 ELISA를 이용하여 티오레독신 1의 농도를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 3은 난소암의 진행도에 따른 티오레독신 1의 농도를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 4는 난소암과 염증성 질병인 폐렴(communication aquired pneumonia, CAP), 관절염 (Arthritis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis), 아토피성 피부염 (Atopic Dermatitis), 및 심혈관계 질병 (Cardiovasicular Disease) 환자군들의 혈액에서 ELISA를 이용하여 티오레독신 1의 농도를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 5는 폐렴 환자군의 혈액에서의 티오레독신 1 및 헵토글로빈 (Haptoglobin, HP)의 농도를 비교한 결과를 나타낸 도이다.
도 6은 남녀 정상군 및 폐렴 환자군의 혈액에 존재하는 티오레독신 1과 폐렴 마커인 헵토글로빈의 농도 상관성을 나타낸 도이다.
본 발명자는 비교적 채취가 용이한 혈액을 검체로 하여 간편하게 선별성이 높은 난소암 또는 폐렴을 진단할 수 있는 방법에 대해 연구하던 중, 혈액 내에서 티오레독신 1이 정상과 비교했을 때 발현의 차이가 있다는 것을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
이하 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 티오레독신 1을 유효성분으로 하는 난소암 또는 폐렴 진단용 조성물 및 이의 이용에 관한 것이다.
본 발명은 티오레독신 1을 유효성분으로 하는 난소암, 폐렴, 또는 난소암 및 폐렴 진단용 조성물 및 진단용 키트를 제공하고, 티오레독신 1에 특이적으로 결합하는 항체를 포함하는 난소암, 폐렴, 또는 난소암 및 폐렴 진단용 키트를 제공한다.
또한, 본 발명은 난소암, 폐렴, 또는 난소암 및 폐렴의 진단에 필요한 정보를 제공하기 위하여, 시료로부터 항원-항체 반응을 통해 티오레독신 1의 농도를 측정하는 방법을 제공한다. 상기 시료에는 제한이 없다. 상기 시료는 조직, 추출물, 세포 용해물, 전혈, 혈장, 혈청, 침, 안구액, 뇌척수액, 땀, 뇨, 젖, 복수액, 활액, 및 복막액 등을 포함한다.
본 발명에 따른 티오레독신 1의 농도를 ELISA를 통해 정상군 및 난소암 환자군의 혈액을 대상으로 관찰한 결과, 티오레독신 1은 정상군에서보다 난소암 환자군의 혈액에서 현저히 높은 농도를 나타내었다. 또한, 난소암 환자군 및 비암 질병인 염증성 질병과 심혈관계 질병 환자군의 혈액에서의 티오레독신 1의 농도를 관찰한 결과, 난소암에 비하여 비암 환자의 혈액에서 현저히 낮은 티오레독신 1의 농도를 나타내고, 더욱이 암의 진행도에 따라 티오레독신 1의 농도는 비례적으로 증가하는 상관관계를 나타내었다. 또한 초기 난소암 환자군에서도 티오레독신 1의 농도는 정상군에 비해 현저히 높았고, 현재 난소암 마커로 사용되는 CA125 대한 음성판정 난소암 환자군에서도 티오레독신 1의 농도는 CA125 양성 판정환자군과 유사한 높은 수치를 나타내었다. 따라서, 본 발명의 티오레독신 1은 암 진단용 마커로 이용할 수 있다.
또한, 비암 질병인 염증성 질병군에서의 티오레독신 1의 농도는 오히려 정상군에 비해 낮았고, 특히 폐렴의 경우 정상군에 비해 티오레독신 1의 농도가 현저히 낮아 비암 질병과의 판별력이 매우 우수하다는 점을 보여주고 있다.
상기한 바와 같이, 본 발명에 따른 혈액으로부터 티오레독신 1을 측정하여 난소암을 진단하는 방법은 비교적 채취가 용이한 혈액을 검체로 하기 때문에 생검을 대상으로 하는 기존의 난소암 진단방법과는 달리 환자에게 부담을 주지 않고 매우 간편하게 난소암을 진단할 수 있을 뿐만 아니라 진단의 민감도 및 선별도가 높아 난소암의 조기 진단에 유용하게 사용될 수 있다. 또한 동시에 폐렴 진단 마커로 티오레독신 1을 사용될 수 있다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
[ 실시예 ]
연구대상
본 발명에 사용된 정상인(normal control) 및 환자의 혈청(serum)은 백인(White Caucasian)으로부터 얻었다. 모든 serum 및 그에 따른 임상정보는 Asterand사(미국) 및 Bioserve사(미국)로부터 제공받았고, 이에 대한 관련한 정보를 표 1 및 표 2에 나타내었다.
[표 1]
Figure 112011099481603-pat00001
[표 2]
Figure 112011099481603-pat00002

ELISA 를 이용한 혈액 내 단백질 분석
본 발명자는 혈액 내의 단백질의 양을 측정하기 위해, ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay)를 이용하여 수행하였다.
각 항체를 이용한 ELISA kit(토끼 항체용 미국 GenScript 회사의 Express ELISA kit)를 사용하여 혈청 내에 존재하는 단백질의 양을 측정하였다. 사용한 티오레독신 1(Trx1) 및 헵토글로브린 (Haptoglobin, HP)에 대한 항체는 정제된 단백질을 토끼에 주입시킨 항혈청(Antiserum)을 단백질 A 컬럼(Protein A Column)을 이용하여 순수정제한 뒤 사용하였다.
단백질 양은 450 nm 흡광에서 측정하고, 측정값은 3번 측정한 평균값을 사용하였으며, 통계 처리는 GraphPad Software사(미국) 제품인 GraphPad Prism (ver 5.04)에 포함되어 있는 통계 프로그램을 사용하였다.
실시예 1. 난소암 환자에서의 티오레독신 1 농도 측정
본 발명자는 혈액 내 단백질 측정을 통해 난소암 환자 및 정상인에서 티오레독신 1 농도의 차이를 확인하고자 하였다.
구체적으로, 나이가 고루 분포된 49명의 여성 정상군(나이분포: 41세-85세) 및 112명의 난소암 환자군과의 혈액내의 티오레독신 1의 농도를 측정하고, 이를 ROC(receiver operating characteristic) Curve 분석을 하였다.
농도 측정 결과의 값을 도 1에 나타내고, 그 측정 통계 값을 표 3에 나타내었다. 또한, ROC Curve 분적에서 도출한 AUC (Area under the ROC Curve) 값, 민감도 (Sensitivity) 값 및 선별도 (Specificity)값을 표 4에 정리하였다.
[표 3]
Figure 112011099481603-pat00003
[표 4]
Figure 112011099481603-pat00004
도 1 및 표 3에 나타난 바와 같이, 여성 정상군(NF, female nomal control)의 티오레독신 1의 평균 농도는 0.459 이고, 난소암 군(OC, ovarian cancer)의 평균 농도는 0.677 로서, 난소암군의 티오레독신 1 농도는 정상군의 티오레독신 1 농도보다 약 48% 높음을 알 수 있다. 한편, 난소암 마커인 CA125 음성군의 티오레독신 1의 농도는 0.705로 양성군의 농도인 0.711과 거의 유사 하였다.
상기와 같이, CA125 음성 및 양성 판정 난소암 환자에서 모두 정상군 보다 훨씬 높은 티오레독신 1 농도를 나타내는 결과는, 티오레독신 1이 기존에 사용되고 있는 CA125 보다 탁월한 난소암 진단 마커임을 제시하고 있다.
또한, 난소암 초기인 표 1에 표기된 Stage I 및 Grade 1에 해당되는 환자군의 티오레독신 1의 농도 값은 각각 0.630 및 0.684로 정상치인 0.459 보다 37% 및 49% 높았다(표 4 참조).
표 4에 나타난 바와 같이, 표 1에 표기된 Stage I 및 Grade 1 환자군의 AUC 값은 각각 0.904 및 0.964로 전체 난소암 환자군으로 부터 도출된 AUC 값인 0.93과 유사했다. 또한, 도 2에 나타난 바와 같이, 티오레독신 1의 혈청 농도는 암의 진행정도에 따라 증가된다는 것을 확인하였다. 또한, 암의 발견 확률을 나타내는 AUC 값 뿐만 아니라, 정상군 판별력 지표인 선별도(Specificity) 값과 암 환자 탐지력 지표인 민감도(Sensitivity) 값을 비교했을 때, 모든 경우에 있어서 AUC 값은 0.9 이상이고, 선별도(Specificity) 값은 약 80%, 민감도(Sensitivity) 값은 81% 이상임을 알 수 있었다.
실시예 2. 난소암 환자 및 다른 비암 환자의 혈청에서 티오레독신 1 농도 측정
본 발명자는 혈액 내 단백질 측정을 통해 난소암 환자 외의 다른 비암 환자의 혈청에서 티오레독신 1 농도의 차이를 확인하고자 하였다.
난소암 환자(OC, ovarian cancer)이외에 남녀 정상군, 비암인 폐렴 (CAP), 관절염 (Arthritis), 심혈관계 질병 (cardiovasicular disease), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis), 및 아토피성 피부염 (atopic dermatitis) 환자군의 혈청 내에서의 티오레독신 1의 농도를 ELISA를 이용하여 측정하였고, 이에 대한 결과를 도 4에 나타내고, 이 측정치의 통계값을 표 5에 나타내었다. 또한 측정치를 이용한 ROC curve 분석에서 도출한 AUC, Sensitivity, Specificity 및 Cut-off 값들을 표 6에 나타내었다.
[표 5]
Figure 112011099481603-pat00005

[표 6]
Figure 112011099481603-pat00006
표 5에 나타난 바와 같이, 남녀 정상군 및 비암군의 혈액내의 티오레독신 1 농도 측정값은 0.4-0.5 내에 분포되어 있고 이 값들은 난소암군의 측정치 인 0.667 (표 3) 보다 현저히 낮았다. 도 4에서 보여 주듯이 정상군과 난소암군의 판별 수치인 Cut-off 값인 0.5527이하 값에 거의 모든 비암 측정치가 산재되어 있다. 이 결과를 더 확인하기 위해 남녀 정상군, 각종 비암군의 티오레독신 1의 측정치를 대조수치로 사용하여 난소암군의 수치를 대상으로 ROC Curve 분석을 하였다. 그 결과 표 6에서 알 수 있듯이 정상군을 포함한 비암군에 대한 ROC분석치는 거의 유사 하였다. 이 결과는 티오레독신 1은 난소암 환자를 비암 질병의 유무에 관계없이 확연히 구별할 수 있는 이상적인 난소암 마커임을 제시하고 있다. 각각의 Cut-off값을 비교해 보면, 전부 약 0.54-0.57 범위 안에 있다는 점으로 티오레독신 1의 난소암 마커로서의 탁월성을 다시 한 번 확인 할 수 있다.
상기 결과는 티오레독신 1은 여성 정상군과 난소암군을 약 93% 확률로 구별할 수 있는 혈액 측정용 난소암 마커이고, 더욱이 환자의 비암 질병에 관계없이 난소암에 대한 우수한 민감도 (Sensitivity) 및 선별도 (Selectivity)를 지닌 혈액 측정용 난소암 마커로 사용 가능하다는 것을 보여주고 있다.
실시예 3. 폐렴 환자 혈청에서 티오레독신 1 농도 측정
또한, 티오레독신 1의 난소암 마커로의 유용성을 증명하기 위해, 본 발명자는 감염성 염증질환이고, 감염부위가 비교적 큰 장기인 폐렴 환자 혈청에서 티오레독신 1 농도를 측정하고자 하였다. 이는 티오레독신 1이 산화스트레스에 반응하여 세포내의 합성이 증가되기 때문에, 동시에 폐렴같은 염증질환에도 반응하여 증가될 수 있어 난소암 진단 마커로서의 이용성에 제한이 있을 수 있기 때문이다.
폐렴 환자 혈청에서 티오레독신 1 농도를 측정한 결과, 도 4에 나타난 바와 같이, 티오레독신 1은 다양한 비암 환자 혈액 중에서 폐렴 환자 군에서만 현저하게 낮게 존재함을 알 수 있었다. 따라서 티오레독신 1 및 폐렴 진단 마커로 알려진 헵토글로빈 (Haptoglobin, HP)에 대한 폐렴 마커로서의 유의성을 비교하기 위해 남성(n=50) 및 여성(n=49)정상군과 남성(n=40) 및 여성(n=40) 폐렴 환자 군(CAP_M, CAP_F. CAP_MF)에서 두 단백질(티오레독신 1 및 헵토글로빈)의 농도를 측정하고, 그 결과를 도 5에 나타내었다. 또한 두 단백질(티오레독신 1 및 헵토글로빈)의 폐암 마커로서의 유용성을 비교하기 위해 각 측정치들을 ROC curve 분석을 이용하여 분석하고, 그 분석 결과를 표 7에 나타내었다.
[표 7]
Figure 112011099481603-pat00007
표 7에 나타난 바와 같이, 남녀 정상군 및 남녀 폐렴군에서 도출된 각 ROC curve 지표들을 나열해 보면 남녀 정상군 및 폐렴 환자군의 경우에는 티오레독신 및 헵토글로빈 마커의 AUC 값은 각각 0.756, 및 0.882를 나타내었고, 민감도(Specificioty)는 각각 52.2%, 및 81.2%를 나타내었으며, 특이도(Specificity)는 각각 92.9%, 및 83.8%를 나타내었다. 이 결과는 티오레독신 1은 특이도(Specificity)에서 우수하고, 헵토글로빈은 민감도(Specificioty)에서 우수한 결과를 나타낸다는 것을 보여주고 있다.
상기 분석 결과, 헵토글로빈은 남녀 폐렴 환자군에서 우수한 마커임을 알 수 있으나 티오레독신 1은 여성 폐렴군에서는 헵토글로빈과 유사한 성능을 보이고 있음을 알 수 있었다. 헵토글로빈 및 티오레독신 1의 특징적 차이점은 헵토글로빈은 정상군보다 폐렴군에서 높은 수치를 보이지만, 티오레독신 1은 오히려 정상군보다 폐렴군에서 낮은 수치를 보인다는 것이다. 이와 같은 상반적 결과를 확인하기 위하여 폐렴군에서 측정한 티오레독신 수치 및 헵토글로빈 수치의 상관성을 분석하고, 그 결과를 도 6에 나타내었다.
도 6에 나타난 바와 같이, 티오레독신 수치 및 헵토글로빈 수치는 서로 역 비례성이 있음을 확인 할 수 있었다. 더욱이 이 현상은 여성 폐렴군에서는 더욱 더 확연한 차이를 보였다 (도 5 및 표 7 참조).
상기의 결과를 바탕으로, 티오레독신 1은 정상군보다 폐렴군에서 그 농도가 감소되는 특징을 지닌 폐렴 진단마커로 사용될 수 있다. 이 특징은 폐렴 환자를 선별하는데 헵토글로빈 보다 유리한 점을 가진다. 그 이유는 헵토글로빈은 폐렴 뿐만 아니라 난소암을 포함한 각종 암 및 비암군에서 그 농도가 증가되는 비특이성을 보인다고 알려져 있기 때문이다.
따라서 티오레독신 1은 여성 정상군과 난소암군을 약 93% 확률로 구별할 수 있는 혈액 측정용 난소암 마커로 이용 가능한 동시에 폐렴 마커로도 사용 될 수 있다. 난소암의 경우, 햅토글로빈과 달리 티오레독신 1은 대조군에 비해서 현저하게 증가하고, 더욱이 환자의 비암 질병에 관계없이 난소암에 대한 우수한 민감도 (Sensitivity) 및 선별도 (Selectivity)를 지닌 혈액 측정용 난소암 마커로 사용 가능하다는 것을 보여주고 있다.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해되어야 한다.

Claims (5)

  1. 티오레독신 1을 유효성분으로 하는 난소암, 폐렴, 또는 난소암 및 폐렴 진단용 조성물.
  2. 제 1항의 조성물을 포함하는 난소암, 폐렴, 또는 난소암 및 폐렴 진단용 키트.
  3. 티오레독신 1에 특이적으로 결합하는 항체를 포함하는 난소암, 폐렴, 또는 난소암 및 폐렴 진단용 키트.
  4. 난소암, 폐렴, 또는 난소암 및 폐렴의 진단에 필요한 정보를 제공하기 위하여, 시료로부터 항원-항체 반응을 통해 티오레독신 1의 농도를 측정하는 방법.
  5. 제 4항에 있어서,
    상기 시료는 조직, 추출물, 세포 용해물, 전혈, 혈장, 혈청, 침, 안구액, 뇌척수액, 땀, 뇨, 젖, 복수액, 활액, 및 복막액으로 이루어진 군에서 선택되는 하나인 것을 특징으로 하는, 방법.
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