KR101114690B1 - A composition comprising the extract of Gentiana scabra var. buergeri max for preventing and treating drug intoxication or withdrawal symptoms - Google Patents

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Abstract

본 발명은 초용담 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로 본 발명의 초용담 추출물은 약물 중독의 지표로 사용되는 행동적 민감화(Behavioral sensitization) 반응인 보행성 활동량의 감소효과 뿐만 아니라, 뇌의 측핵과 선조체에서의 신경활성 지표인 c-Fos 발현을 급격히 감소시킴을 확인함으로써, 상기 조성물은 약물 중독 및 금단증상의 예방 및 치료를 위한 약학조성물 또는 건강기능식품으로 유용하게 이용될 수 있다.The present invention relates to a composition containing a chodote extract as an active ingredient, specifically, the chodote extract of the present invention, as well as the effect of reducing the amount of walking activity which is a behavioral sensitization reaction used as an indicator of drug addiction By confirming the rapid decrease in c-Fos expression, which is an indicator of neuronal activity in the nucleus and striatum of the brain, the composition may be useful as a pharmaceutical composition or health functional food for the prevention and treatment of drug addiction and withdrawal symptoms. have.

초용담, 보행성 활동량, c-Fos, 코카인, 금단증상 Super gentian, ambulatory activity, c-Fos, cocaine, withdrawal symptoms

Description

초용담 추출물을 유효성분으로 함유하는 약물 중독 및 금단증상의 예방 및 치료용 조성물{A composition comprising the extract of Gentiana scabra var. buergeri max for preventing and treating drug intoxication or withdrawal symptoms}A composition comprising the extract of Gentiana scabra var. buergeri max for preventing and treating drug intoxication or withdrawal symptoms}

본 발명은 초용담 추출물을 유효성분으로 함유하는 약물 중독 및 금단증상의 예방 및 치료용 약학조성물 또는 건강기능식품에 관한 것이다. The present invention relates to a pharmaceutical composition or health functional food for the prevention and treatment of drug addiction and withdrawal symptoms containing choyong chok extract as an active ingredient.

[문헌 1] Kalivas PW, Duffy P. Time course of extracellular dopamine and behavioral sensitization to cocaine, Ⅰ. Dopamine axon terminals. J Neurosci. 13(1), pp.266-275, 1993Kalivas PW, Duffy P. Time course of extracellular dopamine and behavioral sensitization to cocaine, Ⅰ. Dopamine axon terminals. J Neurosci. 13 (1) , pp. 266-275, 1993

[문헌 2] Pettit HO et al., Extracelluar concentration of cocaine and dopamine are enhanced during chronic cocaine administration. J Neurochem. 55(3), pp.798-804, 1990Pettit HO et al., Extracelluar concentration of cocaine and dopamine are enhanced during chronic cocaine administration. J Neurochem. 55 (3) , pp. 798-804, 1990

[문헌 3] Hurd YL et al., Cocaine reinforcement and extracellular dopamine overflow in rat nucleus accumbens: an in vivo microdialysis study. Brain Res. 498(1), pp.199-203, 1989Hurd YL et al., Cocaine reinforcement and extracellular dopamine overflow in rat nucleus accumbens: an in vivo microdialysis study. Brain Res. 498 (1) , pp. 199-203, 1989

[문헌 4] Wiechman BE et al., Locomotor activity in morphine-treated rats:effects of and comparisons between cocaine, procaine, and lidocaine. Pharmacol.Biochem.Behav. 15(3), pp.425-433, 1981Wiechman BE et al., Locomotor activity in morphine-treated rats: effects of and comparisons between cocaine, procaine, and lidocaine. Pharmacol. Biochem. Behav. 15 (3) , pp. 425-433, 1981

[문헌 5] Einhorn, L.C., et al., Electrophysiological effect of cocaine in the mesoaccumbens dopamine system:studies in the ventral tegmental area, J Neurosci., 8(1), pp.100-112, 1988Einhorn, LC, et al., Electrophysiological effect of cocaine in the mesoaccumbens dopamine system: studies in the ventral tegmental area, J Neurosci., 8 (1) , pp. 100-112, 1988

[문헌 6] Parada A., et al., Neuropharmacology, 39(9), pp.1645-1652, 2000Parada A., et al., Neuropharmacology , 39 (9) , pp. 1645-1652, 2000

[문헌 7] Anderson SM et al., Administration of the D1-like dopmine receptor antagonist SCH-23390 into the medial nucleus accumbens shell attenuates cocaine priming-induced reinstatement of drug-seeking behavior in rats. Psychopharmacology (Berl). 168(1-2), pp.132-138, 2003Anderson SM et al., Administration of the D1-like dopmine receptor antagonist SCH-23390 into the medial nucleus accumbens shell attenuates cocaine priming-induced reinstatement of drug-seeking behavior in rats. Psychopharmacology (Berl). 168 (1-2) , pp. 132-138, 2003

[문헌 8] 박종희, 이정규. (상용) 약용식물도감. pp.306-308, 2000[Document 8] Park, Jong-hee, Lee, Jung-gyu. (Commercial) Illustration of medicinal plants. pp.306-308, 2000

[문헌 9] 文晟豪 外, 濃度別 草龍膽 水鍼이 膽石 誘發 생쥐에 미치는 影響, 大韓鍼灸學會誌, 8, pp.141-156, 1991[Document 9] 文 미치는 豪 外, The Effect of Ginseng Cultivated Water on the Induced Mice of Stones, Dae-Sung, J., 8 , pp.141-156, 1991

[문헌 10] 한상원, 용담초(龍膽草) 및 시호수침(柴胡水鍼)이 CCl4 로 유발된 흰쥐의 손상 간에 미치는 영향, 대한침구학회지, 10(1), pp.297-313, 1993[10] Effects of Han Sang-won, Yongdamcho and Shiho-su-acupuncture on CCl4-induced Injury in Rats, Journal of Korean Acupuncture and Moxibustion Society, 10 (1) , pp.297-313, 1993

[문헌 11] Karasinska JM., et al., Eur Neurosci., 22(7), pp.1741-1750, 2005[11] Karasinska JM., Et al., Eur Neurosci ., 22 (7) , pp.1741-1750, 2005

[문헌 12] NATHALIE THIRIET et al., Ann N Y Acad. Sci., 914, pp.46-57, 2000Document 12 NATHALIE THIRIET et al., Ann NY Acad. Sci ., 914 , pp. 46-57, 2000

[문헌 13] 이형철 외, 동의병리학회지, 15(4), pp.543-47, 2001[Reference Document 13] Hyung-Chul Lee et al., Journal of Oriental Medical Pathology , 15 (4) , pp.543-47, 2001

과학문명의 발달과 급진하는 경제사회에 따른 현대인들의 잇따른 스트레스로 인해 약물 중독의 확산은 가장 중요한 현대 사회문제 중의 하나이다. 약물이란 질병을 예방, 치료하는데 사용되는 물질을 지칭하며, 신체기능의 변화를 일으키는 물질을 말한다. 이러한 약물의 남용은 부정적인 측면에서 신체적, 정신적, 사회적으로 자기 파괴의 문제를 발생시킨다. 약물 중독은 아편이나 신경안정제 또는 알코올과 같은 약물에 대한 신체적인 반응을 지칭한다. 이러한 약물 중독은 내성, 금단증상 및 습관화의 현상을 가지는데, 약물의 사용으로 인한 통제력 상실을 의미하기도 한다. 최근의 약물남용은 청소년, 여성 약물남용자의 증가로 인한 세계적으로 심각한 정신질환중의 하나로서, 중독성 약물에 대한 치료제의 개발은 시급한 현실이다. The spread of drug addiction is one of the most important modern social problems due to the development of scientific civilization and the stress of modern people due to the rapid economic society. Drug refers to a substance used to prevent or treat a disease, and refers to a substance that causes a change in physical function. Abuse of these drugs raises the problem of self-destruction both physically, mentally and socially on the negative side. Drug addiction refers to a physical reaction to drugs such as opiates, neurostabilizers or alcohol. Drug addiction has symptoms of tolerance, withdrawal symptoms and habituation, which can mean loss of control due to drug use. Recent drug abuse is one of the world's most serious mental illnesses caused by the increasing number of adolescents and female drug abusers. The development of drugs for addictive drugs is urgently needed.

이러한 약물 중독의 해결책으로 여러 가지 사회정책 및 치료, 재활을 위한 프로그램이 이루어지고 있지만, 근본적인 치료대책으로서 한계점을 가지고 있다.As a solution of drug addiction, various social policies, treatments, and rehabilitation programs are being implemented, but they have limitations as a fundamental treatment measure.

코카인(cocaine), 암페타민(amphetamine), 모르핀(morphine), 니코틴(nicotine) 등과 같은 중독성 약물들은 행동방식 중 행동적 민감화(Behavioral sensitization)현상을 유발하는데 행동적 민감화란 적은 양의 중독성 약물을 반복적 또는 간헐적으로 투여하면 보행성 활동량(locomotor activity)과 상동적 행동(stereotypy)이 점진적으로 증가하는 현상으로, 활동량의 점차적인 증가가 유도발달되는 상태인 발달 단계(Development = induction of sensitization)와 일단 발달된 활동량이 비교적 장기간 유지되는 상태인 발현 단계(expression of sensitization)로 나타나게 되는데, 이러한 현상을 담당하는 신경적 근저(neural substrate)는 중추 신경계내 중뇌 변연 도파민계(mesolimbic dopamine pathway)로 도파민 신경세포와 그 표적영역인 측좌핵(NAc, nucleus accumbens)과 선조체(striatum)인 것으로 알려져 있으며(Kalivas PW, Duffy P. Time course of extracellular dopamine and behavioral sensitization to cocaine, Ⅰ. Dopamine axon terminals. J Neurosci. 13(1), pp.266-275, 1993), 중독성 약물들은 약물투여에 따른 보행성 활동량을 증가시킨다고 알려져 있어(Pettit HO et al., Extracelluar concentration of cocaine and dopamine are enhanced during chronic cocaine administration. J Neurochem. 55(3), pp.798-804, 1990; Hurd YL et al., Cocaine reinforcement and extracellular dopamine overflow in rat nucleus accumbens: an in vivo microdialysis study. Brain Res. 498(1), pp.199-203, 1989; Wiechman BE et al., Locomotor activity in morphine-treated rats:effects of and comparisons between cocaine, procaine, and lidocaine. Pharmacol.Biochem.Behav. 15(3), pp.425-433, 1981), 보행성 활동량은 주요한 약물 중독의 지표로 사용되고 있다. Addictive drugs, such as cocaine, amphetamine, morphine, and nicotine, cause behavioral sensitization in behaviors, which are called repeated or small amounts of addictive drugs. Intermittent administration results in a gradual increase in locomotor activity and homotypy. The developmental stage (Development = induction of sensitization) and the development once developed. The expression of sensitization, which is a relatively long-lasting state of activity, is represented by the neural substrate responsible for this phenomenon, which is the mesolimbic dopamine pathway in the central nervous system. It is known to be the target region of the nucleus accumbens (NAc) and striatum (Kalivas PW, D). uffy P. Time course of extracellular dopamine and behavioral sensitization to cocaine, I. Dopamine axon terminals.J Neurosci. 13 (1) , pp.266-275, 1993), suggests that addictive drugs increase the amount of gait activity following drug administration. (Pettit HO et al., Extracelluar concentration of cocaine and dopamine are enhanced during chronic cocaine administration.J Neurochem. 55 (3) , pp.798-804, 1990; Hurd YL et al., Cocaine reinforcement and extracellular dopamine overflow in rat nucleus accumbens: an in vivo microdialysis study. Brain Res. 498 (1) , pp. 199-203, 1989; Wiechman BE et al., Locomotor activity in morphine-treated rats: effects of and comparisons between cocaine, procaine, and lidocaine. Pharmacol. Biochem. Behav. 15 (3) , pp.425-433, 1981), the amount of gait activity is used as an indicator of major drug addiction.

코카인은 약물강화효과를 통하여 탐닉현상이 생기는데, 이러한 행동적 변화에 영향을 주는 요인이 도파민(Dopamine, DA) 신경전달계의 활성화로서, 특히 코카인 투여로 인한 보상 및 강화작용은 복측 피개 영역(Ventral tegmental area, VTA)의 A10 신경(A10 neuron)에서 기시하여 측핵(Nucleus accumbens)으로 투사되는 중뇌 변연계가 중요한 역할을 맡고 있다고 알려져 있다(Einhorn, L.C., et al., Electrophysiological effect of cocaine in the mesoaccumbens dopamine system:studies in the ventral tegmental area, J Neurosci., 8(1), pp.100-112, 1988).Cocaine is induced through drug-intensifying effects. The factor affecting this behavioral change is the activation of the dopamine (DA) neurotransmitter. In particular, cocaine administration compensates and strengthens the ventral tegmental area. The central brain limbic system, which originates in the A10 neuron in the area (VTA) and is projected to the nucleus accumbens, is known to play an important role (Einhorn, LC, et al., Electrophysiological effect of cocaine in the mesoaccumbens dopamine system). : studies in the ventral tegmental area, J Neurosci., 8 (1) , pp. 100-112, 1988).

최근의 연구들을 보면 코카인의 투여로 인하여 약물 중독과 관련이 있는 측핵 및 선조체 등의 도파민성 신경세포의 투사부위에서 신경활성의 지표라고 알려진 초기 유전자 c-Fos(Immediate early gene c-Fos)의 단백인 c-Fos발현이 증가되었다는 보고가 있다. 실험동물에 반복적으로 도파민 D1 수용체 효능제인 SKF-38393를 투여한 경우, 보행성 활동량과 신경활성도의 지표인 c-Fos 의 발현이 증가되었다. 또한 도파민의 길항물질인 SCH 23390을 투여한 결과, 코카인에 의한 보행성 활동량이 줄어들었다(Parada A., et al., Neuropharmacology, 39(9), pp.1645-1652, 2000; Anderson SM et al., Administration of the D1-like dopmine receptor antagonist SCH-23390 into the medial nucleus accumbens shell attenuates cocaine priming-induced reinstatement of drug-seeking behavior in rats. Psychopharmacology (Berl). 168(1-2), pp.132-138, 2003). 추가로 생체내(In vivo) 미세투석법(Microdialysis)을 이용하여 관찰한 실험에서 약물 중독과 관련있 는 부위인 선조체 및 측핵에서 코카인 투여로 인한 도파민의 농도는 현저하게 증가하였으며, 이는 보행성 활동량이 증가를 보임으로써, 생화학적인 측면인 도파민과 행동학적인 측면인 보행성 활동량이 상관관계가 있음을 보여주는 실험적인 증거를 제시하였다. In a recent study due to the administration of cocaine, known as indicators of neuronal activity in drug addiction and related cheukhaek and projected areas of the striatum, including dopaminergic neurons of the early gene cF os (Immediate early gene cF os ) protein, c of There are reports of increased fos expression. Repeated administration of SKF-38393, a dopamine D1 receptor agonist, increased the expression of c-Fos, an indicator of gait activity and neuronal activity. In addition, the administration of dopamine antagonist SCH 23390 resulted in decreased cocaine-induced gait activity (Parada A., et al., Neuropharmacology , 39 (9) , pp. 1645-1652, 2000; Anderson SM et al. ., Administration of the D1-like dopmine receptor antagonist SCH-23390 into the medial nucleus accumbens shell attenuates cocaine priming-induced reinstatement of drug-seeking behavior in rats.Psychopharmacology (Berl) .168 (1-2) , pp.132- 138, 2003). In addition, in the experiments observed using in vivo microdialysis, the concentration of dopamine due to cocaine administration in the striatum and the nucleus, which are related to drug intoxication, increased significantly. This increase suggests experimental evidence that correlates the biochemical side dopamine with behavioral side gait activity.

따라서 약물의 중독성에 관여하는 신경기전의 규명이야말로 약물중독치료에 궁극적인 해답을 줄 수 있을 것이다. Therefore, the identification of neural mechanisms involved in drug addiction may be the ultimate solution to drug addiction treatment.

초용담(Gentiana scabra var. buergeri max)은 용담과(Gentianaceae)에 속하는 Gentiana scabra Bunge var. buergeri Maxim 및 동속식물의 뿌리와 뿌리줄기를 건조한 것(박종희, 이정규. (상용) 약용식물도감. pp.306-308, 2000)으로, 뿌리에 고미배당체인 겐티오피린(Gentiopiacrin)과 삼당체인 gentianose를 함유하고 있어 건위와 해열, 소염, 담즙(文晟豪 外, 濃度別 草龍膽 水鍼이 膽石 誘發 생쥐에 미치는 影響, 大韓鍼灸學會誌, 8, pp.141-156, 1991)이 잘 나오게 하는 데에 효능과 함께 간 손상 회복의 효과가 있는 것으로 보고 된 바 있다(한상원, 용담초(龍膽草) 및 시호수침(柴胡水鍼)이 CCl4 로 유발된 흰쥐의 손상 간에 미치는 영향, 대한침구학회지, 10(1), pp.297-313, 1993). 상기 문헌 어디에도 초용담 추출물이 약물 중독 및 금단증상에 효과적이라는 어떠한 개시도 된 바가 없다. Gentiana scabra var.buergeri max is the gentiana scabra Bunge var. Buergeri Maxim and dried roots and rhizomes of the same plant (Park Jong-hee, Lee Jung-kyu. (Commercial) Illustrated by Medicinal Plants pp.306-308, 2000), Geniopiacrin, a trisaccharide, and gentianose, a trisaccharide. Good health, antipyretic, anti-inflammatory, bile (, 미치는 韓 鍼灸, 韓 鍼灸, 韓 鍼灸, 미치는, 大 韓 鍼灸 學會 誌, 8 , pp.141-156, 1991) It has been reported to be effective in repairing liver damage along with its efficacy in the emergence (Han Sang-won, Yongdamcho and Shiho-su-acupuncture between CCl4-induced damage of rats and Korean acupuncture Journal, 10 (1) , pp. 297-313, 1993). Neither of the above documents discloses that chondroitin extracts are effective in drug addiction and withdrawal symptoms.

이에 본 발명자들은 초용담 추출물이 약물 중독의 지표로 사용되는 행동적 민감화(Behavioral sensitization) 반응인 보행성 활동량의 감소효과뿐만 아니라, 뇌의 측핵과 선조체에서의 신경활성 지표인 c-Fos 발현을 급격히 감소시킴을 확인함으로써, 약물 중독 및 금단증상의 치료 효과를 확인하여 본 발명을 완성하였다.Therefore, the present inventors rapidly reduced c-Fos expression, which is an indicator of neuronal activity in the nucleus and striatum of the brain, as well as the effect of reducing gait activity, which is a behavioral sensitization reaction used as an index of drug addiction. By confirming the reduction, the present invention was completed by confirming the therapeutic effect of drug addiction and withdrawal symptoms.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 초용담 추출물을 유효성분으로 함유하는 약물 중독 및 금단증상의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention and treatment of drug addiction and withdrawal symptom containing the chodone extract as an active ingredient.

또한 본 발명은 초용담 추출물을 유효성분으로 함유하는 약물 중독 및 금단증상의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a health functional food for the prevention and improvement of drug addiction and withdrawal symptoms containing choyong chok extract as an active ingredient.

본원에서 정의되는 초용담 추출물은 물, C1 내지 C4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합 용매, 바람직하게는 물 및 에탄올 혼합용매, 보다 바람직하게는 60 내지 100% 에탄올 혼합용매, 가장 바람직하게는 90 내지 100% 에탄올에 가용한 추출물을 포함한다.Super eluted extracts as defined herein are water, lower alcohols of C 1 to C 4 or mixed solvents thereof, preferably water and ethanol mixed solvents, more preferably 60 to 100% ethanol mixed solvents, most preferably 90 To extracts soluble in 100% ethanol.

본원에서 정의되는 약물은 코카인(cocaine), (메스)암페타민((meth)amphetamine), 니코틴(nicotine), 모르핀(morphine), 알코올(alcohol), 대마초 또는 카페인(caffeine) 등이며, 바람직하게는 코카인임을 특징으로 포함한다.Drugs as defined herein are cocaine, (meth) amphetamine, nicotine, morphine, alcohol, cannabis or caffeine, and the like, preferably cocaine It is characterized by that.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명의 초용담 추출물은 하기와 같이 제조될 수 있다.The super eluting extract of the present invention can be prepared as follows.

초용담을 음건하여 세절한 후, 초용담 중량의 약 1 내지 40배, 바람직하게는 약 10 내지 20배 분량의 물, C1 내지 C4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합 용매, 바람 직하게는 물 및 에탄올 혼합용매, 보다 바람직하게는 60 내지 100% 에탄올 혼합용매로, 실온에서 약 10 내지 96시간, 바람직하게는 60 내지 80시간 동안 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 추출방법, 바람직하게는 냉침 추출한 후 수득한 추출액을 여과, 감압 농축 또는 건조하여 본 발명의 초용담 추출물을 수득할 수 있다.After drying by drying the super-dose, about 1 to 40 times the weight of the super-dose, preferably about 10 to 20 times the amount of water, C 1 to C 4 lower alcohol or a mixed solvent thereof, preferably water And an ethanol mixed solvent, more preferably 60 to 100% ethanol mixed solvent, extraction method such as hot water extraction, cold extraction, reflux cooling extraction or ultrasonic extraction for about 10 to 96 hours, preferably 60 to 80 hours at room temperature. Preferably, the extract obtained after cold extraction is filtered, concentrated under reduced pressure or dried to obtain the super-solvent extract of the present invention.

본 발명은 상기 제조방법으로 수득한 초용담 추출물을 유효성분으로 함유하는 약물 중독 및 금단증상의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공한다.The present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention and treatment of drug addiction and withdrawal symptom, which contains the super-drug extract obtained by the above method as an active ingredient.

본 발명의 조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 추출물을 0.01 내지 50% 중량으로 포함한다. The composition of the present invention comprises 0.01 to 50% by weight of the extract relative to the total weight of the composition.

그러나 상기와 같은 조성은 반드시 이에 한정되는 것은 아니고, 환자의 상태 및 질환의 종류 및 진행 정도에 따라 변할 수 있다.However, the composition is not limited thereto, and may vary depending on the condition of the patient, the type of disease, and the progress of the disease.

본 발명의 초용담 추출물을 포함하는 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. The composition comprising the super-solvent extract of the present invention may further include suitable carriers, excipients and diluents commonly used in the preparation of pharmaceutical compositions.

본 발명에 따른 추출물을 포함하는 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 추출물을 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히 드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다. Compositions comprising extracts according to the invention are formulated in the form of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols and the like, oral preparations, suppositories and sterile injectable solutions, respectively, according to conventional methods. Carriers, excipients and diluents which may be used in combination with the extract, and which may be included in the composition comprising the extract include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin , Calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil. When formulated, diluents or excipients such as fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrating agents, and surfactants are usually used. Solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like, and the solid preparations may include at least one excipient such as starch, calcium carbonate, sucrose in the extract. ) Or lactose, gelatin and the like are mixed. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium styrate talc are also used. Examples of the liquid preparation for oral use include suspensions, solutions, emulsions, and syrups. In addition to water and liquid paraffin, simple diluents commonly used, various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances, preservatives and the like may be included . Formulations for parenteral administration include sterilized aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations, and suppositories. As the non-aqueous solvent and suspending agent, propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, and the like can be used. As the base of the suppository, witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter, glycerogelatin and the like can be used.

본 발명의 추출물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 추출물은 1일 0.01 mg/kg 내지 10 g/kg으로, 바람직하게는 1 mg/kg 내지 1 g/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수 있다. 따라서 상기 투여량 은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.Preferred dosages of the extracts of the present invention vary depending on the condition and weight of the patient, the extent of the disease, the form of the drug, the route of administration and the duration, and may be appropriately selected by those skilled in the art. However, for the desired effect, the extract of the present invention is preferably administered at 0.01 mg / kg to 10 g / kg, preferably 1 mg / kg to 1 g / kg per day. The administration may be carried out once a day or divided into several doses. Therefore, the above dosage does not limit the scope of the present invention in any aspect.

본 발명의 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(Intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다. The composition of the present invention may be administered to mammals such as rats, mice, livestock, humans, and the like in various routes. All modes of administration can be expected, for example, by oral, rectal or intravenous, intramuscular, subcutaneous, intrauterine dural or Intracerebroventricular injection.

또한 본 발명은 초용담 추출물을 유효성분으로 함유하는 약물 중독 및 금단증상의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a health functional food for the prevention and improvement of drug addiction and withdrawal symptoms containing choyong chok extract as an active ingredient.

본원에서 정의되는 “건강기능식품”은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, “기능성”이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.As defined herein, "health functional food" means a food manufactured and processed using raw materials or ingredients having functional properties useful for the human body under the Health Functional Food Act No. 6767, and "functional" means It means ingestion for the purpose of obtaining useful effects on health use such as nutrient control or physiological action on structure and function.

본 발명의 추출물을 포함하는 조성물은 약물 중독 및 금단증상의 예방 및 개선을 위한 약제, 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 발명의 초용담 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐, 시럽제 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다.The composition comprising the extract of the present invention can be used in various ways, such as drugs, foods and drinks for the prevention and improvement of drug addiction and withdrawal symptoms. Examples of the food to which the chodose extract of the present invention may be added include various foods, beverages, gums, teas, vitamin complexes, health supplements, and the like, and are powders, granules, tablets, capsules, syrups or beverages. Available in form.

본 발명의 초용담 추출물 자체는 독성 및 부작용은 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 복용 시에도 안심하고 사용할 수 있는 약제이다.Chodoteul extract of the present invention is a drug that can be used safely even when taken for a long time for prevention purposes because there is little toxicity and side effects.

본 발명의 상기 추출물은 약물 중독 및 금단증상의 예방 및 치료를 위한 목 적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이 때, 식품 또는 음료 중의 상기 추출물의 양은 일반적으로 본 발명의 건강식품 조성물은 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 내지 10 g, 바람직하게는 0.3 내지 1 g의 비율로 가할 수 있다. The extract of the present invention may be added to food or beverage for the purpose of preventing and treating drug addiction and withdrawal symptoms. At this time, the amount of the extract in the food or beverage is generally added to the health food composition of the present invention to 0.01 to 15% by weight of the total food weight, the health beverage composition is 0.02 to 10 g based on 100 ml, preferably Can be added in a ratio of 0.3 to 1 g.

본 발명의 건강 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 추출물을 함유하는 것 외에 액체성분에는 특별한 제한점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등의 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등의 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.In addition to containing the extract as an essential ingredient in the indicated ratio, the health beverage composition of the present invention is not particularly limited in the liquid component and may contain various flavors or natural carbohydrates as additional ingredients, as in general beverages. Examples of the above-mentioned natural carbohydrates include monosaccharides such as disaccharides such as glucose and fructose such as maltose, sucrose and the like and polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like Sugar, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. As flavoring agents other than those mentioned above, natural flavoring agents (tauumatin, stevia extract (for example, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used. The proportion of natural carbohydrates is generally about 1-20 g, preferably about 5-12 g per 100 ml of the composition of the present invention.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합 하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.In addition to the above, the composition of the present invention includes various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavors such as synthetic flavors and natural flavors, coloring and neutralizing agents (such as cheese and chocolate), pectic acid and salts thereof, alginic acid and its Salts, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonation agents used in carbonated beverages, and the like. The compositions of the present invention may also contain pulp for the production of natural fruit juices and fruit juice beverages and vegetable beverages. These components can be used independently or in combination. The proportion of such additives is not so critical, but is generally selected in the range of 0 to about 20 parts by weight per 100 parts by weight of the composition of the present invention.

본 발명의 초용담 추출물은 약물 중독의 지표로 사용되는 행동적 민감화(Behavioral sensitization) 반응인 보행성 활동량의 감소효과 뿐만 아니라, 뇌의 측핵과 선조체에서의 신경활성 지표인 c-Fos 발현을 급격히 감소시키는 효과를 나타내는 바, 약물 중독 및 금단증상의 예방 및 치료용 약학조성물 또는 건강기능식품으로 유용하게 사용될 수 있다.Chodote extract of the present invention rapidly reduces the expression of c-Fos, which is an indicator of neuronal activity in the lateral nucleus and striatum of the brain, as well as a decrease in the amount of gait activity, a behavioral sensitization reaction used as an indicator of drug addiction. It can be usefully used as a pharmaceutical composition or health functional food for the prevention and treatment of drug addiction and withdrawal symptoms.

이하, 본 발명을 하기 참고예, 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by the following reference examples, examples and experimental examples.

단, 하기 참고예, 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 참고예, 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.However, the following reference examples, examples and experimental examples are merely to illustrate the invention, the content of the present invention is not limited by the following reference examples, examples and experimental examples.

참고예 1. 실험동물의 준비Reference Example 1. Preparation of Laboratory Animals

실험동물은 체중 250-260 g의 스프라그-다우리(Sprague-Dawley)계 수컷 랫트(효창사이언스)를 사용하였고, 대구한의대학교 동물사육실에서 일정한 조건(온도: 21± 2℃, 명암: 12시간 명암주기)에서, 사료와 음수의 자유로운 섭취가 가능하도록 하였으며, 실험시작 전까지 물과 먹이를 충분히 제공하며 실험시작 전에 실 험동물을 3일 동안 하루에 2분씩 사전취급(Handling)한다.The experimental animals used Sprague-Dawley male rats (Hyochang Science) weighing 250-260 g and were subjected to constant conditions (temperature: 21 ± 2 ℃, contrast: 12) in Daegu Haany University animal breeding room. In the time-contrast cycle, free intake of food and drinking water is allowed, and sufficient water and food are provided before the start of the experiment, and the test animals are pre-treated (handling) for 2 minutes a day for 3 days before the start of the experiment.

참고예 2.Reference Example 2. 통계처리Statistical processing

보행성 활동량은 박스 내에서 수평이동거리(㎝)로 측정하였으며, 통계적 유의성은 SPSS 프로그램(Version 11.01)의 포스트 훅 터키 테스트(post hoc Turkey test)로 검정하여 p값이 0.05이하인 경우에 유의한 것으로 인정하였다.Pedestrian activity was measured by horizontal movement distance (cm) in the box, and statistical significance was tested by the SPSS program (Version 11.01) post hoc Turkey test. Admitted.

실시예 1. 초용담 추출물의 제조 Example 1. Preparation of Choga Extract

대구광역시에 위치한 대원약업사에서 구입하여 음건 세절한 초용담 200 g에 4ℓ용량의 95% 에탄올을 가하고, 상온(24℃)에서 72시간 동안 추출하여 수득한 추출액을 여과한 후, 감압농축기(EYELA Co., Japan)로 감압 농축하여 초용담 추출물 380 g을 수득하여 하기 실험예의 시료로 사용하였다(이하, “GXBM”이라 함).Purchasing from Daewon Pharmaceutical Co., Ltd. located in Daegu Metropolitan City, 4 liters of 95% ethanol was added to 200 g of dry and finely prepared choga, and the extract was extracted for 72 hours at room temperature (24 ℃). , Japan) to give 380 g of super eluted extract, which was used as a sample of the following experimental example (hereinafter referred to as "GXBM").

실험예 1. 약물 투여 후 행동적 민감성에 대한 초용담 추출물의 효과Experimental Example 1.Effect of Cho-Dong extract on behavioral sensitivity after drug administration

급성 및 만성 약물 투여로 의한 행동적 민감성에 대한 상기 실시예 1의 초용담 추출물(GXBM)의 효과를 확인하기 위하여 하기와 같이 코카인 투여 후 랫트의 보행성 활동량 변화에 대한 실험을 문헌에 기재된 방법을 응용하여 하기와 같은 방법으로 수행하였다(Karasinska JM., et al., Eur Neurosci., 22(7), pp.1741-1750, 2005).In order to confirm the effect of the superfluid extract (GXBM) of Example 1 on behavioral sensitivity due to acute and chronic drug administration, the method described in the literature on the change in gait activity of rats after cocaine administration was as follows. Application was carried out in the following manner (Karasinska JM., Et al., Eur Neurosci ., 22 (7) , pp.1741-1750, 2005).

1-1. 보행성 활동량의 측정 방법1-1. How to measure amount of walking activity

실험동물의 활동량은 비디오트랙킹(videotracking)을 이용하여 에토비젼 프로그램(Ethovision program, Noldus Information Technology BV, Wageningen, Netherlands)으로 측정하였다. 상세하게는 가로, 세로, 높이가 40cm × 40cm × 45cm 인 검은색 무광택 아크릴 상자를 이용하여 실험동물의 수평 움직임을 추적하였으며, 9개 상자의 약 2.5 m 위에 디지털 카메라를 설치하여 이로부터 얻어진 화상을 컴퓨터에 전달하여 검은 배경에 흰색 피사체의 대조 원리를 이용함으로써 흰색 실험동물 상(Image)의 중심점을 초당 수 번 인식하는 방식으로 실험동물의 움직임을 따라 추적하여 실험동물 움직임의 궤적을 데이터화하여 움직인 거리를 정량화하였다.The amount of activity of the experimental animals was measured by video tracking (Ethovision program, Noldus Information Technology BV, Wageningen, Netherlands) using videotracking. In detail, the horizontal movement of the test animal was traced using a black matt acrylic box of 40 cm × 40 cm × 45 cm in height, width, height, and height. By using a contrasting principle of a white subject on a black background, it transfers it to a computer and recognizes the center point of a white experimental animal image several times per second. The distance was quantified.

1-2. 보행성 활동량의 측정1-2. Measurement of ambulatory activity

상기 참고예 1에서 준비한 실험동물을 사육장에서 외부소음이 차단된 실험실로 옮겨 각각 무게를 측정한 후, 9개의 활동량 측정상자에 개별적으로 넣었다. 상자 내에서 90분간의 적응시간을 거친 후, 초용담 추출물(GXBM) 25, 50 및 100 mg/kg을 각각 1회 경구 투여하였으며, 대조군으로 1 ml/kg의 vehicle[PEG+ Tween 80+ EtOH+ saline(7:1:1:1)]을 경구 투여하였다. Vehicle 또는 초용담 추출물을 경구투여하고, 60분 후 생리식염수 또는 코카인 20 mg/kg를 단회투여하고, 추가적으로 60분 동안 보행하여 박스 내에서 수평이동거리(cm)로 보행성 활동량을 측정하였다.The experimental animals prepared in Reference Example 1 were transferred to a laboratory where external noise was blocked in a kennel and weighed, respectively, and then placed in nine activity measuring boxes individually. After 90 minutes of adaptation in a box, 25 mg, 50 mg, and 100 mg / kg GXBM extracts were administered orally, respectively, and 1 ml / kg of vehicle [PEG + Tween 80+ EtOH + saline (control) 7: 1: 1: 1). Oral administration of a vehicle or super-dose extract, 60 minutes after a single dose of 20 mg / kg physiological saline or cocaine, and walking for an additional 60 minutes to measure the amount of walking activity in the horizontal moving distance (cm) in the box.

실험결과, 표 1 및 도 1에서 나타내는 바와 같이, 정상군(vehicle투여 후 생리식염수 처치군)에서는 5183.59±746.18 cm로, 대조군(vehicle 투여 후 코카인 처치군)에서 최고 24958.15±3594.84 cm 까지 증가한데 반하여, 초용담 추출물(GXBM) 25, 50, 100 mg/kg 투여군의 경우, 각각 28364.68±3551.95cm(p<0.951), 14862.08±2765.79 cm(p<0.109), 12804.90±2318.88 cm(p<0.035)로 나타나 대조군에 비하여 보행성 활동량이 감소하였으며, 특히 초용담 추출물(GXBM) 100 mg/kg 투여군은 대조군에 비해 유의하게 감소되었음을 확인할 수 있었다. As shown in Table 1 and FIG. 1, the normal group (physiological saline treated group after vehicle administration) increased to 5183.59 ± 746.18 cm, and increased to 24958.15 ± 3594.84 cm in the control group (cocaine treated group after vehicle administration). , GXBM 25, 50, 100 mg / kg administration group, 28364.68 ± 3551.95 cm (p <0.951), 14862.08 ± 2765.79 cm (p <0.109), 12804.90 ± 2318.88 cm (p <0.035), respectively The amount of gait activity was decreased compared to the control group, and especially, the group treated with 100 mg / kg of superolead extract (GXBM) was significantly reduced compared to the control group.

또한, 정상적인 상태에서 초용담 추출물(GXBM)을 투여한 후의 행동학적 변화가 일어나는지를 확인하기 위하여, 초용담 추출물(초용담 단독투여군) 100 mg/kg를 경구투여 한 후, 생리식염수를 처치하고 추가적으로 60분 동안 보행성 활동량을 측정한 결과, 도 2 및 표 1에서 나타내는 바와 같이, 5127.16 ± 1081.88 cm로 정상군과 비슷한 양상을 보여 정상상태에서는 별 다른 영향을 미치지 않은 것을 확인할 수 있었다.In addition, in order to determine whether behavioral changes occur after administration of GXBM in normal condition, 100 mg / kg of the super-dose extract (super-dose alone group) was administered orally, followed by treatment with saline solution. As a result of measuring the amount of walking activity for 60 minutes, as shown in Figure 2 and Table 1, 5127.16 ± 1081.88 cm showed a similar pattern to the normal group did not show a significant effect in the normal state.

실험군Experimental group 처리내용Processing contents 코카인 투여 후 After cocaine administration
1시간 보행성 활동량(cm)1 hour gait activity (cm)
정상군Normal vehicle 투여 후 생리식염수 처리군Saline treated group after vehicle administration 5183.59±746.185183.59 ± 746.18 대조군Control group vehicle 투여 후 코카인 처리cocaine treatment after vehicle administration 24958.15±3594.8424958.15 ± 3594.84 초용담 25 mg/kgSuper Gentian 25 mg / kg 초용담 25 mg/kg 투여 후 코카인 처리Cocaine treatment after 25 mg / kg 28364.68±3551.9528364.68 ± 3551.95 초용담 50 mg/kg Super Gentian 50 mg / kg 초용담 50 mg/kg 투여 후 코카인 처리Cocaine treatment after 50 mg / kg 14862.08±2765.7914862.08 ± 2765.79 초용담 100 mg/kgSuper Gentian 100 mg / kg 초용담 100 mg/kg 투여 후 코카인 처리Cocaine treatment after the super-dose 100 mg / kg 12804.90±2318.8812804.90 ± 2318.88 초용담 단독투여군Cho Yongdam alone group 초용담 100 mg/kg투여 후 생리식염수 처리Physiological saline treatment after administration of super-dose 100 mg / kg 5127.16 ± 1081.885127.16 ± 1081.88

실험예 2. 약물 투여에 의한 면역조직화학분석법을 이용한 c-Fos 발현에 대한 초용담 추출물의 효과Experimental Example 2. Effect of Chondroitin extract on c-Fos Expression by Immunohistochemical Assay by Drug Administration

상기 실시예 1에서 수득한 초용담 추출물(GXBM)의 약물 투여에 의한 초기유전자 c-Fos 발현을 확인하기 위하여 기존문헌에 기재된 방법을 응용하여 하기와 같은 실험을 하였다(NATHALIE THIRIET et al., Ann N Y Acad. Sci., 914, pp.46-57, 2000)In order to confirm the expression of the initial gene c-Fos by drug administration of the super eluted extract (GXBM) obtained in Example 1, the following experiment was applied by applying the method described in the existing literature (NATHALIE THIRIET et al., Ann NY Acad.Sci., 914 , pp. 46-57, 2000)

실험당일 검사단계에서 실험동물에 초용담 추출물(GXBM) 100 mg/kg 경구투여하고, 1시간 후 코카인 20 mg/kg을 복강 투여하여 그로부터 2 시간 뒤, 소듐펜토바르비탈(sodium phentobarbital, 100 mg/kg)로 마취시킨 후, 심장을 통해 500 ml의 4% 파라포름알데하이드(paraformaldehyde, PFA)로 혈액을 관류시켜 뇌 조직을 고정시켰다. 뇌 조직을 꺼낸 후 10% 수크로스(sucrose)/4% PFA에 약 2시간 동안 고정시킨 다음, 20% 수크로스(sucrose)/PBS(phosphate buffer solution) 용액에 담근 후 하루 동안 4℃ 냉장 상태로 유지하였다. -20℃상태에서 크라이오톰(cryotome; Shandon Cryotome, Thermo Fisher Scientific)으로 30 um두께로 뇌 조직을 절편하여 측핵 및 선조체 부위를 취하여 0.1% 아지드나트륨/완충용액(soduim azide/PBS)에 넣어 4℃에 보관하였다. On the day of the test, 100 mg / kg of superfluid extract (GXBM) was orally administered to the experimental animals, and 1 hour later, 20 mg / kg of cocaine was intraperitoneally administered and 2 hours thereafter, sodium phentobarbital (100 mg / kg). kg), followed by perfusion of blood through 500 ml of 4% paraformaldehyde (PFA) through the heart to fix brain tissue. After removing the brain tissue, it was fixed in 10% sucrose / 4% PFA for about 2 hours, soaked in 20% sucrose / phosphate buffer solution (PBS) solution and refrigerated at 4 ° C for one day. Maintained. Section brain tissue at 30 um thickness with cryotome (Shandon Cryotome, Thermo Fisher Scientific) at -20 ° C, take the nucleus and striatum, and place it in 0.1% sodium azide / PBS. Stored at ° C.

조직절편은 완충용액(PBS)에 3회 세척하여 2% Triton-X-100/PBS 용액에서 5분간 세포막의 지질을 제거하는 과정을 거친 후, 3% BSA/PBS 용액으로 블록킹(blocking)하였다. 그리고 0.1% BSA/PBS 용액에 1:1000으로 희석된 1차 rabbit anti-Fos antibody(Santa cruz, CA, USA)를 이용하여 4℃에서 20시간 동안 반응시킨 후, 발색제로 DAB를 사용하여 c-Fos 단백질을 발현시켰다.Tissue sections were washed three times in buffer (PBS) to remove lipids from the cell membrane in 2% Triton-X-100 / PBS solution for 5 minutes, and then blocked with 3% BSA / PBS solution. After reacting with a primary rabbit anti-Fos antibody (Santa cruz, CA, USA) diluted 1: 1000 in 0.1% BSA / PBS solution for 20 hours at 4 ° C., c- Fos protein was expressed.

실험결과, 도 3 및 도 4에서 나타내는 바와 같이, 대조군에 비해 초용담 추출물(GXBM) 100 mg/kg 투여군이 측핵과 선조체에서 신경활성지표인 c-Fos 유전자의 발현을 급격히 감소시켜 약물중독의 효과가 있음을 확인할 수 있었다. As shown in FIG. 3 and FIG. 4, compared to the control group, 100 mg / kg of super eluted extract (GXBM) significantly reduced the expression of c-Fos gene, which is a neuronal activity indicator, in the nucleus and striatum. It was confirmed that there is.

실험예 3. 급성독성실험Experimental Example 3. Acute Toxicity Test

상기 실시예 1에서 수득한 초용담 추출물(GXBM) 투여에 의한 독성을 확인하기 위하여 기존문헌에 기재된 방법을 응용하여 하기와 같은 실험을 하였다(이형철 외, 동의병리학회지, 15(4), pp.543-47, 2001).In order to confirm the toxicity by administering the supernatant extract (GXBM) obtained in Example 1, the following experiment was applied by applying the method described in the existing literature (Hyung-Chul Lee et al., Journal of the Korean Society of Pathology , 15 (4) , pp. 543-47, 2001).

6 주령의 특정병원체부재(Specific pathogen-free, SPF) SD계 랫트를 사용하여 급성독성실험을 실시하였다. 각 그룹당 2마리씩의 동물에 본 발명의 초용담 추출물(GXBM)을 500 ㎎/㎏의 용량으로 1회 경구투여 하였다. 실험물질 투여 후 동물의 폐사여부, 임상증상 및 체중변화를 관찰하고 혈액학적 검사와 혈액생화학적 검사를 실시하였으며, 부검하여 육안으로 강장기와 흉강 장기의 이상여부를 관찰하였다.Acute toxicity test was performed using 6-week-old specific pathogen-free (SPF) SD rats. Two animals of each group were orally administered with a supernatant extract (GXBM) of the present invention at a dose of 500 mg / kg. After administration of the test substance, mortality, clinical symptoms, and changes in body weight were observed, and hematological and hematological examinations were performed.

그 결과, 실험 물질을 투여한 모든 동물에서 특기할 만한 임상증상이나 폐사된 동물은 없었으며, 체중변화, 혈액검사, 혈액생화학 검사 및 부검 소견 등에서도 독성변화는 관찰되지 않았다. As a result, no significant clinical symptoms or dead animals were noted in all animals treated with the test substance, and no toxic changes were observed in weight changes, blood tests, blood biochemical tests, and autopsy findings.

또한, 본 발명의 초용담 추출물(GXBM)은 랫트에서 각각 500 ㎎/㎏ 까지도 독성변화를 나타내지 않았으며, 경구투여 최소치사량(LD50)은 500 ㎎/㎏ 이상인 안전한 물질로 판단되었다.In addition, the super eluted extract of the present invention (GXBM) did not show a toxicity change in rats up to 500 mg / kg, respectively, and the minimum lethal dose (LD 50 ) was determined to be a safe substance of 500 mg / kg or more.

하기에 본 발명의 초용담 추출물(GXBM)을 포함하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.Hereinafter, the preparation examples of the composition comprising the super-drug extract of the present invention (GXBM), but the present invention is not intended to limit it, but to explain in detail only.

제제예 1. 산제의 제조Formulation Example 1 Preparation of Powder

초용담 추출물(GXBM) 20 mgChoongdam extract (GXBM) 20 mg

유당 100 mgLactose 100 mg

탈크 10 mgTalc 10 mg

상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.The above ingredients are mixed and filled in an airtight cloth to prepare a powder.

제제예 2. 정제의 제조Formulation Example 2 Preparation of Tablet

초용담 추출물(GXBM) 10 mgChondroitin extract (GXBM) 10 mg

옥수수전분 100 mgCorn starch 100 mg

유당 100 mgLactose 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 mgMagnesium stearate 2 mg

상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.After mixing the above components and tableting according to the conventional tablet manufacturing method to prepare a tablet.

제제예 3. 캅셀제의 제조 Formulation Example 3 Preparation of Capsule

초용담 추출물(GXBM) 10 mgChondroitin extract (GXBM) 10 mg

결정성 셀룰로오스 3 mg3 mg of crystalline cellulose

락토오스 14.8 mgLactose 14.8 mg

마그네슘 스테아레이트 0.2 mgMagnesium Stearate 0.2 mg

통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.According to a conventional capsule preparation method, the above ingredients are mixed and filled into gelatin capsules to prepare capsules.

제제예 4. 주사제의 제조Formulation Example 4 Preparation of Injection

초용담 추출물(GXBM) 10 mgChondroitin extract (GXBM) 10 mg

만니톨 180 mg180 mg mannitol

주사용 멸균 증류수 2974 mgSterile sterilized water for injection 2974 mg

Na2HPO4,12H2O 26 mgNa 2 HPO 4 , 12H 2 O 26 mg

통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.According to the conventional method for preparing an injection, the amount of the above ingredient is prepared per ampoule (2 ml).

제제예 5. 액제의 제조Formulation Example 5 Preparation of Liquid

초용담 추출물(GXBM) 20 mgChoongdam extract (GXBM) 20 mg

이성화당 10 g10 g of isomerized sugar

만니톨 5 g5 g of mannitol

정제수 적량Purified water

통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.After dissolving each component in purified water according to the usual method of preparing a liquid solution, adding lemon flavor appropriately, mixing the above components, adding purified water, adjusting the whole to 100 ml by adding purified water, and then filling into a brown bottle. The solution is prepared by sterilization.

제제예 6. 건강 식품의 제조Formulation Example 6 Preparation of Healthy Food

초용담 추출물(GXBM) 1000 ㎎Choongdam extract (GXBM) 1000 mg

비타민 혼합물 적량Vitamin mixture proper amount

비타민 A 아세테이트 70 ㎍70 μg of Vitamin A Acetate

비타민 E 1.0 ㎎Vitamin E 1.0 mg

비타민 B1 0.13 ㎎Vitamin B1 0.13 mg

비타민 B2 0.15 ㎎Vitamin B2 0.15 mg

비타민 B6 0.5 ㎎Vitamin B6 0.5 mg

비타민 B12 0.2 ㎍0.2 μg of vitamin B12

비타민 C 10 ㎎Vitamin C 10 mg

비오틴 10 ㎍10 μg biotin

니코틴산아미드 1.7 ㎎Nicotinic Acid 1.7 mg

엽산 50 ㎍50 μg folic acid

판토텐산 칼슘 0.5 ㎎Calcium Pantothenate 0.5mg

무기질 혼합물 적량Mineral mixture quantity

황산제1철 1.75 ㎎Ferrous Sulfate 1.75 mg

산화아연 0.82 ㎎0.82 mg of zinc oxide

탄산마그네슘 25.3 ㎎Magnesium carbonate 25.3 mg

제1인산칼륨 15 ㎎15 mg of potassium phosphate monobasic

제2인산칼슘 55 ㎎Secondary calcium phosphate 55 mg

구연산칼륨 90 ㎎Potassium citrate 90 mg

탄산칼슘 100 ㎎100 mg of calcium carbonate

염화마그네슘 24.8 ㎎Magnesium chloride 24.8 mg

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.Although the composition ratio of the above-mentioned vitamin and mineral mixture is comparatively mixed with a composition suitable for health food as a preferred embodiment, the compounding ratio may be arbitrarily modified, and the above ingredients are mixed according to a conventional method for producing healthy foods , Granules can be prepared and used in the manufacture of health food compositions according to conventional methods.

제제예 7. 건강 음료의 제조Formulation Example 7 Preparation of Healthy Drink

초용담 추출물(GXBM) 1000 ㎎Choongdam extract (GXBM) 1000 mg

구연산 1000 ㎎Citric acid 1000 mg

올리고당 100 g100 g of oligosaccharide

매실농축액 2 gPlum concentrate 2 g

타우린 1 gTaurine 1 g

정제수를 가하여 전체 900 ㎖Purified water was added to a total of 900 ml

통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다. The above components were mixed according to a conventional health drink manufacturing method, and the mixture was heated at 85 DEG C for about 1 hour with stirring, and the solution thus prepared was filtered to obtain a sterilized 2-liter container, which was sealed and sterilized, &Lt; / RTI &gt;

상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.Although the composition ratio is a mixture of the components suitable for the preferred beverage as a preferred embodiment, the blending ratio may be arbitrarily varied according to the regional and national preferences such as the demand level, the demanding country, and the intended use.

[이 발명을 지원한 국가연구개발사업][National R & D project supporting this invention]

[과제고유번호][Task unique number]

B0009008B0009008

[부처명][Name of Buddha]

지식경제부Ministry of Knowledge Economy

[연구사업명][Name of research project]

한방생명자원연구센터Herbal Biotechnology Research Center

[연구과제명][Name of Research Project]

뇌질환치료를 위한 한방제제 및 천연물신약개발Development of Herbal Medicine and Natural Products for the Treatment of Brain Disease

[주관기관][Host]

대구한의대학교 산학협력단Daegu Haany University Industry-Academic Cooperation Foundation

[연구기관][Research Institute]

2009년 3월 ~ 2010년 2월March 2009-February 2010

도 1은 코카인 투여로 유도된 초용담 추출물(GXBM)의 보행성 활동량에 대한 효과를 나타낸 도이고,1 is a diagram showing the effect on the amount of gait activity of the supernatant extract (GXBM) induced by cocaine administration,

도 2은 초용담 추출물(GXBM)(100 mg/kg)의 단독 투여 시 보행성 활동량에 대한 효과를 나타낸 도이며,Figure 2 is a diagram showing the effect on the amount of gait activity when administered alone GXBM (100 mg / kg),

도 3은 코카인 투여로 유도한 초용담 추출물(GXBM)의 뇌의 측핵 내 c-Fos 발현에 대한 효과를 나타내는 도이며,Figure 3 is a diagram showing the effect on the expression of c-Fos in the nucleus of the brain of supercoated extract (GXBM) induced by cocaine administration,

도 4 은 코카인 투여로 유도한 초용담 추출물(GXBM)의 뇌의 선조체 내 c-Fos 발현에 대한 효과를 나타내는 도이다.Figure 4 is a diagram showing the effect of c-Fos expression in the striatum of the supernatant extract of cocaine (GXBM) induced by cocaine administration.

Claims (6)

초용담 추출물을 유효성분으로 함유하는 약물 중독 및 금단증상의 예방 및 치료용 약학조성물.A pharmaceutical composition for the prevention and treatment of drug addiction and withdrawal symptoms, which contains Choyongcho extract as an active ingredient. 제 1항에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합 용매에 가용한 추출물인 약학조성물.The pharmaceutical composition according to claim 1, wherein the extract is an extract available in water, C 1 to C 4 lower alcohols, or a mixed solvent thereof. 삭제delete 제 1항에 있어서, 조성물 총 중량에 대하여 상기 초용담 추출물을 0.01 내지 50 중량%로 포함됨을 특징으로 하는 약학조성물.The pharmaceutical composition according to claim 1, comprising 0.01-50% by weight of the superdissolved extract based on the total weight of the composition. 초용담 추출물을 유효성분으로 함유하는 약물 중독 및 금단증상의 예방 및 개선용 건강기능식품.Health functional food for the prevention and improvement of drug addiction and withdrawal symptom containing Chodopcho extract as an active ingredient. 제 5항에 있어서, 분말, 과립, 정제, 캡슐, 시럽제 또는 음료인 건강기능식품.6. The dietary supplement of claim 5 which is a powder, granule, tablet, capsule, syrup or beverage.
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