KR101093062B1 - red ginseng residues fermented materials and manufacturing method thereof - Google Patents

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Abstract

본 발명은 홍삼 추출액 제조 공정 후 나오는 부산물인 홍삼박의 활용 방안에 관한 것으로, 홍삼박을 발효시켜 점질물을 비롯한 다양한 효소들을 함유하는 홍삼박 발효물 및 그 제조 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method of using the red ginseng bak as a by-product after the red ginseng extract manufacturing process, and relates to a red ginseng fermented product containing various enzymes including viscous by fermenting the red ginseng.

Description

홍삼박 발효물 및 그 제조방법{red ginseng residues fermented materials and manufacturing method thereof}Red ginseng residues fermented materials and manufacturing method

본 발명은 홍삼 추출액 제조 공정 후 나오는 부산물인 홍삼박의 활용 방안에 관한 것으로, 홍삼박을 고초균 바실러스(Bacillus sp.)에 의해 발효시켜 홍삼박 함유 발효물을 제조함으로서 점질물을 비롯한 펩타이드 등 다양한 효소들을 생산하여 기능성을 함유한 홍삼박 발효물의 제조 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method of utilizing red ginseng bak by-product after the red ginseng extract manufacturing process, by fermenting red ginseng bak by Bacillus sp. Bacillus sp. It relates to a method of producing red ginseng fermented product containing the functionality.

홍삼은 인삼을 증숙 또는 팽숙하거나 기타의 방법으로 인삼의 녹말을 호화한 것을 말한다. Red ginseng refers to steaming or swelling ginseng or gelatinizing starch of ginseng by other means.

고려인삼은 동양에서 일찍부터 여러 질병을 예방 및 치료하여 건강을 유지, 증진시키는 효과가 크다고 인정되어 영약으로 각광을 받아왔으며, 한방, 민간약, 식품재료 등에 광범위한 용도로 이용되어지고 있다. 최근에는 암을 예방하거나 항암을 목적으로 식생활에 관련된 식품 또는 천연식물로부터 식품학적인 연구가 점차 확대되어가고 있다. 인삼의 다당체는 약 20~30%를 차지하는 전분 외에 혈당 강하 성분인 Panaxan A-U등의 21종이 알려져 있고,생체방어기능 활성화 물질을 열수 추출물로부터 분리한 분획 PG-5-1(단백질 함유 다당체)이 있으며 그밖에 항보체 활성 다당체 등이 있다. Korean ginseng has been spotlighted as an elixir since it was recognized as having a great effect of preventing and treating various diseases in the East and maintaining health, and has been widely used in oriental medicine, folk medicine, and food ingredients. In recent years, food studies have gradually expanded from food-related foods or natural plants for the purpose of preventing cancer or preventing cancer. Ginseng polysaccharides are known to contain about 20-30% starch, 21 kinds, such as Panaxan AU, a hypoglycemic component, and fraction PG-5-1 (protein-containing polysaccharide) which separates bioprotective activator from hot water extract. In addition, there are anti-complement active polysaccharides.

홍삼은 중추신경에 대해서 진정작용과 흥분 작용이 있고, 순환계에 작용하여 고혈압이나 동맥경화를 예방하는 효과가 있는 것을 알려져 있으며, 홍삼에 함유되어 있는 산성 다당체는 분자량이 34,600da의 pectin 유사물질로서 주성분은 galacturonic acid(α-1,4 link-age)이며 그 외 rhamnose, glucose, arabinose 등으로 구성된 hetero polysaccharide이다. 이러한 활성을 가진 산성 다당체를 인삼으로부터 분리 정량하는 방법은 그 과정이 복잡하고 많은 시간이 소요되기 때문에 간편하고 신속, 정확한 정량방법을 연구한 결과도 보고되고 있다. Red ginseng is known to have sedative and excitatory effects on the central nervous system, and is effective in preventing hypertension and arteriosclerosis by acting on the circulatory system. Acidic polysaccharides contained in red ginseng are pectin-like substances with molecular weight of 34,600 da Is a galacturonic acid (α-1,4 link-age) and a heteropolysaccharide composed of rhamnose, glucose and arabinose. The method of separating and quantifying the acidic polysaccharide having such activity from ginseng is complicated and time consuming, and thus, a simple, rapid and accurate method of quantitative research has been reported.

홍삼 추출물로부터 생산되는 부산물인 홍삼박은 식이섬유가 풍부하며, 홍삼의 일부 성분 및 풍미를 함유하고 있는 소재이다. 그러나 이러한 홍삼박을 활용하여 섭취 등을 할 수 있는 수단은 부족한 실정이다. 또한 홍삼의 좋은 성분을 화장품 등을 통하여 제공하기 위해서는 원료의 단가가 높아지는 문제도 있다.By-product of red ginseng extract, red ginseng gourd is rich in dietary fiber and contains some ingredients and flavors of red ginseng. However, there is a lack of means for ingestion and the like using red ginseng meal. In addition, in order to provide good ingredients of red ginseng through cosmetics, there is also a problem that the unit price of the raw material is increased.

따라서 홍삼박을 식품이나 화장품 등에 활용한다면 홍삼의 성분 및 풍미를 제공하면서도 부산물을 재활용하게 되어 그 부가가치는 상당히 높아질 수 있다.Therefore, if red ginseng leaves are used in food or cosmetics, the added value can be significantly increased because the by-products are recycled while providing the ingredients and flavors of red ginseng.

본 발명은 홍삼박을 활용하여 점질물을 증진시킴으로써 식품 및 화장품의 소재로 활용할 수 있는 홍삼박 발효물 및 그 제조방법을 제공하고자 한다.The present invention is to provide a red ginseng gourd fermented product and a method of manufacturing the same that can be utilized as a material of food and cosmetics by improving the viscosity using red ginseng.

또한 본 발명은 홍삼박을 그대로 재활용함으로써 홍삼의 성능을 제공할 수 있는 홍삼박 발효물 및 그 제조방법을 제공하고자 한다.In another aspect, the present invention is to provide a red ginseng gourd fermented product and a method for producing the red ginseng by recycling the red ginseng as it is.

본 발명은 바람직한 제1구현예로서, 홍삼박을 건식분쇄하는 단계; 분쇄된 홍삼박 분말 및 상기 홍삼박 분말에 대하여 1~100중량%의 탈지대두분말을 포함하는 배지에 바실러스 스타터 배양액을 0.1~3% 접종하여 고체발효하는 단계를 포함하는 홍삼박 발효물의 제조방법을 제공한다.The present invention is a preferred first embodiment, the step of dry grinding red ginseng foil; Method of producing a red ginseng gourd product comprising the step of solid fermentation by inoculating 0.1 ~ 3% of Bacillus starter culture in a medium containing 1 to 100% by weight of skim soybean powder and crushed red ginseng meal powder to provide.

상기 구현예에서 분쇄하는 단계는 분쇄된 홍삼박 분말의 입도가 10~30㎛인 것일 수 있다.The pulverizing step in the embodiment may be the particle size of the pulverized red ginseng foil powder 10 ~ 30㎛.

상기 구현예에 의한 홍삼박 발효물의 제조방법은, 홍삼박을 분쇄하는 단계 전에 홍삼박을 수분함량이 5~15% 되도록 건조시키는 단계를 더 포함하는 것일 수 있다.The method of manufacturing the red ginseng foil fermented product according to the embodiment may further include a step of drying the red ginseng gourd so that the moisture content of the red ginseng gourd is 5 to 15%.

상기 구현예에 의한 홍삼박 발효물의 제조방법은, 발효하는 단계에서 배지는 글루탐산모노나트륨(monosodium glutamate)을 홍삼박 분말에 대하여 1~10중량% 및 사이클로덱스트린(cyclodextrin)을 홍삼박분말에 대하여 1~10중량%더 포함하는 것 일 수 있다.In the method of manufacturing red ginseng foil fermented product according to the embodiment, the medium in the fermentation step is 1-10% by weight of monosodium glutamate (monosodium glutamate) and red ginseng powder (cyclodextrin) 1 It may be to include more than 10% by weight.

상기 구현예에 의한 홍삼박 발효물의 제조방법은, 발효하는 단계에서 배지는 홍삼박 분말을 1~30중량% 포함하는 분산액 총 중량에 대하여 탈지대두분말을 0~50중량% 더 포함하며, 액체발효시키는 것일 수 있다. 이 경우 발효하는 단계에서 배지는 배지 총 중량에 대하여 글루탐산모노나트륨(monosodium glutamate)을 1~10중량% 및 사이클로덱스트린(cyclodextrin)을 1~10중량% 더 포함하는 것일 수 있다.In the method of manufacturing red ginseng foil fermented product according to the embodiment, the medium in the fermentation step further comprises 0 to 50% by weight of skim soybean powder relative to the total weight of the dispersion containing 1 to 30% by weight of red ginseng powder, liquid fermentation It may be to. In this case, in the step of fermentation, the medium may further include 1 to 10% by weight of monosodium glutamate and 1 to 10% by weight of cyclodextrin, based on the total weight of the medium.

상기 구현예에서 발효하는 단계는 37~45℃에서 20~48시간 동안 발효하는 것일 수 있다.Fermenting in the embodiment may be to fermentation for 20 to 48 hours at 37 ~ 45 ℃.

본 발명은 바람직한 제2구현예로서, 홍삼박을 습식분쇄하는 단계; 분쇄된 홍삼박 습식분쇄물을 포함하는 배지에 바실러스 스타터 배양액을 0.1~3% 접종하여 발효하는 단계를 포함하는 홍삼박 발효물의 제조방법을 제공한다.As a second preferred embodiment of the present invention, the step of wet grinding red ginseng foil; It provides a method for producing red ginseng gourd fermentation comprising the step of inoculating the culture medium containing the pulverized red ginseng soaked wet powder 0.1-3% fermentation.

상기 구현예에서, 분쇄하는 단계는 분쇄된 홍삼박 습식분쇄물의 입도가 50㎛이하인 것일 수 있다.In the above embodiment, the pulverizing step may be that the particle size of the pulverized red ginseng foil wet grinding is less than 50㎛.

상기 구현예에 의한 홍삼박 발효물의 제조방법은, 분쇄하는 단계에서 분쇄된 홍삼박 습식분쇄물은 수분함량이 90% 이상인 것임일 수 있다.The method of manufacturing red ginseng foil fermented product according to the embodiment may be that the red ginseng powder wet grind powder pulverized in the grinding step has a water content of 90% or more.

상기 구현예에 의한 홍삼박 발효물의 제조방법은, 발효하는 단계에서 배지는 홍삼박 습식분쇄물에 대하여 탈지대두분말을 0~50중량% 더 포함하며, 액체발효시키는 것일 수 있다.In the method of manufacturing the red ginseng foil fermented product according to the embodiment, the medium in the fermentation step further comprises 0 to 50% by weight of skim soybean powder with respect to the red ginseng wet milled product, and may be liquid fermentation.

상기 구현예에서, 발효하는 단계는 37~45℃에서 20~48시간 동안 발효하는 것일 수 있다.In this embodiment, the step of fermentation may be to fermentation for 20 to 48 hours at 37 ~ 45 ℃.

상기 구현예에 의한 홍삼박 발효물 제조방법은, 발효하는 단계에서 배지는 글루탐산모노나트륨(monosodium glutamate)을 홍삼박 습식분쇄물에 대하여 1~10중량% 및 사이클로덱스트린(cyclodextrin)을 홍삼박 습식분쇄물에 대하여 1~10 중량%더 포함하는 것일 수 있다.In the method of manufacturing the red ginseng foil fermented product according to the embodiment, the medium is 1-10 wt% of red ginseng wet grind powder and cyclodextrin (cyclodextrin) in the fermentation step of red ginseng wet grinding. It may be to include more 1 to 10% by weight relative to water.

본 발명은 바람직한 제3구현예로서 상기의 제조방법으로 제조된 홍삼박 발효물을 제공한다.The present invention provides a red ginseng gourd ferment produced by the above production method as a third preferred embodiment.

이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

본 발명의 홍삼박 발효물의 제조방법은 홍삼박을 분쇄하는 단계; 홍삼박 분말을 포함하는 배지에 바실러스 스타터 배양액을 0.1~3% 접종하여 발효하는 단계를 포함한다.Red ginseng gourd production method of the present invention comprises the steps of grinding red ginseng gourd; It comprises the step of fermenting by inoculating 0.1-3% Bacillus starter culture in the medium containing red ginseng foil powder.

상기 홍삼박을 분쇄하는 단계에서의 분쇄 방법은 건식 분쇄 방법 또는 습식 분쇄 방법을 사용할 수 있다. The grinding method in the step of grinding the red ginseng foil may be a dry grinding method or a wet grinding method.

습식 분쇄 방법을 사용하여 분쇄하는 경우 분쇄된 홍삼박 분쇄물은 수분함량이 90% 이상인 것일 수 있으며, 건식 분쇄 방법을 사용하여 분쇄하는 경우에는 홍삼박을 분쇄하는 단계 전에 홍삼박을 수분함량이 5~15% 되도록 건조시켜 분쇄하는 것일 수 있다.When pulverizing using the wet grinding method, the red ginseng pulverized product may be 90% or more moisture, and when using the dry pulverizing method, the red ginseng powder may be hydrated before the red ginseng leaf is pulverized. It may be to dry to grind to 15%.

분쇄된 홍삼박 건조분말은 입도가 10~30㎛이며, 습식분쇄시 홍삼박 습식분쇄물의 입도는 50㎛ 이하인 것일 수 있다.The red ginseng pulverized dry powder has a particle size of 10 ~ 30㎛, when wet grinding may be less than 50㎛ particle size of the wet ginseng pulverized.

상기의 분쇄된 홍삼박 분말을 포함하는 배지를 제조하여 바실러스 스타터 배양액을 0.1~3% 접종하여 발효하는 단계를 통하여 홍삼박 발효물을 제조할 수 있다.By preparing a medium containing the pulverized red ginseng gourd powder, red ginseng gourd fermented product may be prepared by inoculating the Bacillus starter culture with 0.1-3% of the fermentation.

전통 콩발효 식품의 주된 미생물인 고초균(Bacillus sp.)는 단백질, 탄수화물 등의 가수분해효소를 생산하면서, 발효 중에 기능성 펩타이드, 점질물 등의 생리활성물질의 생산에 기여하며, 유산균과 함께 프로바이오틱스(probiotics)로서 작용하면서 장 내 균총의 개선과 건강유지 등의 효과를 수행한다. 특히 고초균 발효시에 기질로서 글루타민산염(glutamate)을 이용하여 고분자 점질물인 감마폴리글루타민산(polyglutamic acid)을 생산하는 균주는 액체 및 고체배양에서 효과적으로 고분자 점질물을 생산할 수 있다. 따라서 상기 배지에는 글루탐산모노나트륨(monosodium glutamate)을 더 포함할 수 있다. 함량은 건식 분쇄된 홍삼박 분말 또는 습식 분쇄된 홍삼박 습식 분쇄물에 대하여 1~10중량%를 더 포함할 수 있으며, 건식 분쇄된 홍삼박 분말을 1~30중량% 포함하는 분산액을 배지로 하여 액체발효시키는 경우 배지 총 중량에 대하여 글루탐산모노나트륨(monosodium glutamate)을 1~10중량% 포함하는 것일 수 있다. Bacillus sp. , A major microorganism of traditional soybean fermented foods, produces hydrolytic enzymes such as proteins and carbohydrates, and contributes to the production of physiologically active substances such as functional peptides and viscous substances during fermentation. It acts as a) and improves the intestinal flora and maintains health. In particular, strains that produce polymer viscous gamma polyglutamic acid using glutamate as a substrate during Bacillus subtilis fermentation can effectively produce polymeric viscosities in liquid and solid cultures. Therefore, the medium may further comprise monosodium glutamate (monosodium glutamate). The content may further include 1 to 10% by weight relative to the dry pulverized red ginseng foil powder or wet pulverized red ginseng foil wet pulverized powder, and a dispersion containing 1 to 30% by weight of the dry pulverized red ginseng foil powder as a medium. When liquid fermentation may be to include 1 to 10% by weight of monosodium glutamate (monosodium glutamate) relative to the total weight of the medium.

한편, 상기 배지는 탈지대두분말을 더 포함하는 것일 수 있는데, 상기의 건식 분쇄방법에 따라 분쇄된 홍삼박 분말을 포함하여 고체발효시키는 경우에는 홍삼박 분말에 대하여 탈지대두분말을 1~100중량% 더 포함할 수 있다. 한편, 상기 홍삼박 분말을 1~30중량% 포함하는 분산액을 배지로 하여 액체발효시키는 경우, 상기 분산액 총 중량에 대하여 탈지대두분말을 0~50중량% 더 포함하는 것일 수 있다.On the other hand, the medium may be further comprising a skim soybean powder, when the solid fermentation including red ginseng foil powder pulverized according to the dry grinding method described above 1 to 100% by weight of skim soybean powder to red ginseng powder It may further include. On the other hand, when the liquid fermentation using a dispersion containing 1 to 30% by weight of the red ginseng powder as a medium, it may be to further include 0 to 50% by weight of the defatted soybean powder relative to the total weight of the dispersion.

또한, 상기의 습식 분쇄방법에 따라 분쇄된 홍삼박 습식분쇄물을 포함하여 액체발효시키는 경우, 상기 홍삼박 습식분쇄물에 대하여 탈지대두분말을 0~50중량% 더 포함하는 것일 수 있다.In addition, when the liquid fermentation, including the red ginseng foil wet ground powder pulverized according to the wet grinding method, it may be to further include 0 ~ 50% by weight of skim soybean powder with respect to the red ginseng foil wet ground.

이 외에도 상기 배지에는 사이클로덱스트린(cyclodextrin)을 홍삼박분말 또는 홍삼박 습식분쇄물에 대하여 1~10중량% 더 포함하는 것일 수 있으며, 건식 분쇄된 홍삼박 분말을 1~30중량% 포함하는 분산액을 배지로 하여 액체발효시키는 경우 배지 총 중량에 대하여 사이클로덱스트린(cyclodextrin)을 1~10중량% 포함하는 것일 수 있다.In addition, the medium may include cyclodextrin (cyclodextrin) 1 to 10% by weight based on the red ginseng powder or red ginseng powder wet grind, further comprising a dispersion containing 1 to 30% by weight of dry ground red ginseng powder. In the case of liquid fermentation as a medium, 1 to 10% by weight of cyclodextrin may be included based on the total weight of the medium.

상기 발효하는 단계는 37~45℃에서 20~48시간 동안 발효하는 것일 수 있다.The fermentation may be to ferment for 20 to 48 hours at 37 ~ 45 ℃.

이와 같이 제조된 홍삼박 발효물은 도 5와 같이 점질물을 형성하는 것일 수 있다.The red ginseng fermented product thus prepared may be to form a viscous substance as shown in FIG. 5.

이하, 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세히 설명하나, 본 발명의 범위가 하기 실시예로 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples, but the scope of the present invention is not limited to the following Examples.

홍삼박 분말 제조Red ginseng meal powder manufacture

<제조예 1> <Manufacture example 1>

홍삼 엑기스를 제조한 후 폐기되는 홍삼박의 수분함량은 87.2%로 높은 수분을 함유하고 있으며, 쉽게 미생물에 의해서 부패되는 성질을 갖고 있다. 이를 대형열풍건조기를 이용하여 60℃에서 24시간동안 건조시켜 수분함량을 10% 전후가 되도록 하였으며, 이때 건조 홍삼박의 식이섬유 함량은 20.01%였다. 건조된 홍삼박을 건식 초미세분쇄시스템(ACM) 기계를 이용하여 입도사이즈가 20㎛ 되도록 초미세 분말화하였다. The red ginseng extract contains 87.2% of high moisture and is easily rotted by microorganisms. This was dried for 24 hours at 60 ℃ using a large hot air dryer to the water content of about 10%, the dietary fiber content of dried red ginseng foil was 20.01%. The dried red ginseng foil was ultrafine powdered to have a particle size of 20 μm using a dry ultra fine grinding system (ACM) machine.

<제조예 2><Manufacture example 2>

수분함량이 87.87%인 홍삼박에 적당량의 수분을 첨가하여 초미세습식분쇄기(Colloid Mill)를 이용하여 초미세습식분쇄를 하였다. 습식분쇄 된 홍삼박은 죽과 같은 형태가 되었고 수분함량은 97.2%였다. 홍삼박 습식 분쇄물은 냉동시킨 후 발효의 원료로 사용하였다. A moderate amount of water was added to the red ginseng foil with a 87.87% moisture content, and ultrafine grinding was performed using a colloid mill. The wet crushed red ginseng leaf became porridge-like and the water content was 97.2%. The red ginseng wet milled product was frozen and used as a raw material for fermentation.

바실러스 스타터 종균 제조Bacillus starter spawn production

<제조예 3><Manufacture example 3>

바실러스 서브틸리스 (glutamate의존형 균주)를 MRS agar plate에서 42℃ 항온기를 이용하여 24시간 활성화시킨 후, 한 콜로니를 따서 121℃에서 15분간 멸균된 5% 콩분말용액에 접종한 후 42℃ 항온기에서 24시간 150rpm에서 진탕 배양시켜 스타터 종균으로 사용하였다.Bacillus subtilis (glutamate-dependent strains) were activated on a MRS agar plate for 24 hours using a 42 ° C incubator, followed by inoculation of one colony in a sterilized 5% soybean powder solution at 121 ° C for 15 minutes and then in a 42 ° C incubator. Shake incubation at 150 rpm for 24 hours was used as starter spawn.

<실시예 1~4><Examples 1-4>

제조예 1에서 제조된 홍삼박 분말 25g을 발효용기에 담은 다음 하기 표 1과 같이 탈지대두분말을 0,10,15,20g 투입하였으며, 35%의 mono sodium glutamate를 홍삼박분말에 대하여 3중량% 첨가하고 원료무게에 대비하여 물을 2배 첨가 한 후 반고체상태의 홍삼박 혼합물(수분함량 55%)에 제조예 3에서의 바실러스 스타터 배양액을 0.1~3% 중량%씩 접종한 후 37~45℃에서 20~48시간 고체 발효하여 홍삼박 발효물을 제조하였다.25 g of red ginseng powder prepared in Preparation Example 1 was placed in a fermentation vessel, and then 0,10,15,20 g of skim soybean powder was added as shown in Table 1 below, and 3% by weight of 35% mono sodium glutamate based on red ginseng powder After adding 2 times the amount of water to the raw material weight, inoculate 0.1-3% by weight of the Bacillus starter culture solution of Preparation Example 3 into the semi-solid red ginseng mixture (55% water content) and then 37-45 ° C. Solid ginseng was fermented by 20-48 hours in solid.

구분division 홍삼박분말(g)Red ginseng powder (g) 탈지대두분말(g) Defatted soybean powder (g) MSG(g)MSG (g) 실시예1Example 1 2525 -- 0.750.75 실시예2Example 2 2525 1010 0.750.75 실시예3Example 3 2525 1515 0.750.75 실시예4Example 4 2525 2020 0.750.75

제조된 홍삼박 발효물에 대하여 다음과 같이 물성을 측정하였다.The physical properties of the prepared red ginseng fermented product were measured as follows.

(1) 조직감(1) organization

홍삼박 발효물의 조직감은 'Texture analyser'를 이용하여 측정하였으며, 측정조건은 하기 표 2와 같다. The texture of red ginseng gourd ferment was measured using 'Texture analyser', and the measurement conditions are shown in Table 2 below.

Pre-test speedPre-test speed 5 mm/sec5 mm / sec Test speedTest speed 3 mm/sec3 mm / sec Post-test speedPost-test speed 5 mm/sec5 mm / sec DistanceDistance 5 mm5 mm TimeTime 3 sec3 sec Trigger forceTrigger force 5 g5 g

발효물을 일정한 크기의 용기에 담아 발효물을 일정하게 눌렀을 때 변형을 일으키는데 필요한 힘으로 hardness(견고성), adhesiveness(접착성), cohesiveness(응집성), gumminess(점착성), chewiness(씹힘성)을 측정하였다. Hardness, adhesiveness, cohesiveness, gumminess and chewiness were measured with the force necessary to cause deformation when the fermentation product was pressed in a constant size container. .

발효물의 조직감은 홍삼박 발효물을 3회 반복하여 측정한 평균값을 나타내었으며, 그 결과는 하기 표 3과 같다.The texture of the fermentation showed the average value measured by repeating the red ginseng gourd three times, the results are shown in Table 3.

구분division 견고성Robustness 접착성Adhesive 응집성Coherence 점착성Sticky 씹힘성Chewiness 실시예1Example 1 2981.8±4 07.52981.8 ± 4 07.5 -760.6±25.9-760.6 ± 25.9 0.2±0.010.2 ± 0.01 572.8±64.8572.8 ± 64.8 563.2±4.8563.2 ± 4.8 실시예2Example 2 1352.9±9.71352.9 ± 9.7 -783.1±53.5-783.1 ± 53.5 0.4±0.30.4 ± 0.3 566.0±330.2566.0 ± 330.2 508.9±24.3508.9 ± 24.3 실시예3Example 3 995.1±72.2995.1 ± 72.2 -970.7±203.2-970.7 ± 203.2 0.5±0.10.5 ± 0.1 456.9±7.5456.9 ± 7.5 431.5±25.9431.5 ± 25.9 실시예4Example 4 797.0±65.9797.0 ± 65.9 -808.6±78.9-808.6 ± 78.9 0.4±0.10.4 ± 0.1 284.2±44.8284.2 ± 44.8 268.6±39.1268.6 ± 39.1

홍삼박 발효물에 탈지 대두 분말의 함량을 달리하여 발효하였을 때 탈지 대두 분말의 함량이 높은 실시예 4가 가장 발효가 잘 진행되면서 발효물은 고점성의 부드러운 조직감을 나타내었다. 실시예 1에서는 발효 전과 차이가 없이 점성이 없는 홍삼박의 paste상태였다. 첨가되는 탈지 대두 분말의 함량이 높을수록 홍삼박 발효물의 점조성이 높아지는 경향을 보였으며, 끈적끈적한 부드러운 진흙 같아서 화장품 팩으로 사용이 가능하다고 판단된다. When fermented by varying the amount of skim soybean powder in the red ginseng gourd fermentation Example 4 having a high content of skim soybean powder fermented well showed a high viscosity soft texture. In Example 1, there was no difference in the paste state of the red ginseng foil without the difference before the fermentation. The higher the content of the skim soybean powder added, the more viscous the red ginseng meal fermentation was, and the more sticky and soft mud was, it could be used as a cosmetic pack.

홍삼박 고초균 발효시에 탈지대두 첨가량이 증가함에 따라서 홍삼박 발효물의 조직감 측정에서 견고성이 낮고 점착성과 씹힘성 값은 감소하지만, 접착성과 응집성을 증가되는 경향을 보이면서, 홍삼박 발효물이 높은 점질물을 함유하면서 부드러워 조직감을 갖는 것으로 나타났다. 실시예 4는 매우 점성이 높고 부드러운 조직감을 갖는 발효물로 전환되는 것을 특징으로 한다. As the amount of defatted soybeans increased during fermentation of red ginseng bacillus, the red ginseng fermented products contained high viscosities, although the firmness and low stickiness and chewiness decreased in the texture of red ginseng gourd fermentation. It appeared to have a soft texture. Example 4 is characterized in that it is converted to a fermentation having a very viscous and soft texture.

(2) 점질물 함량 측정(2) measuring the viscosity content

홍삼박 발효물 10g 증류수 100mL을 첨가하여 불용성 고형분을 여과시켜 제거한 후 원심분리하여 상등액을 회수하였다. 회수된 상등액에 2배의 isopropanol을 첨가하여 고형분을 침전시킨 후 회수하여 열풍 건조기를 이용하여 건조하여 무게를 측정하여 보았다. 홍삼박을 고초균을 이용하여 발효시 점질물 함량은 표 4 에 나타내었다. 점질물 함량은 실시예 4에서 2.67g%로 가장 높은 함량을 나타내었다.100 g of red ginseng gourd fermented distilled water was added to remove insoluble solids, followed by centrifugation to recover the supernatant. Two times isopropanol was added to the recovered supernatant to precipitate solids, which was recovered, dried using a hot air dryer, and weighed. The viscous content of red ginseng gourd using Bacillus subtilis is shown in Table 4. The viscosity content was the highest in Example 4, at 2.67 g%.

구분division 점질물 함량(g/ 발효물 100g)Viscous Content (g / Fermented 100g) 실시예1Example 1 2.092.09 실시예2Example 2 2.172.17 실시예3Example 3 2.412.41 실시예4Example 4 2.672.67

(3) 홍삼박 발효물의 점질물의 총당 함량 측정(3) Determination of Total Sugar Content of Viscosity of Red Ginseng Extract

점질물의 구성성분을 조사하기 위하여 총당 함량을 조사하였다. 총당 함량은 phenol-sulfate acid법으로 측정하였고, glucose를 표준으로 한 표준곡선으로부터 총 당 함량을 산출하였다. 홍삼박 발효물에서 생산된 점질물의 총당 함량은 표 5에 나타내었다. 그 결과 총당 함량은 실시예 1에서 가장 높은 함량을 나타내었으며, 실시예 2부터 탈지대두분이 첨가되면 발효가 진행되면서 원료에 존재하는 당은 소비되어 크게 감소하는 반면에 고초균에 의해서 생합성되는 점질물의 구성성분인 고분자 polyglutamic acid의 함량이 증가하는 것으로 사료된다.Total sugar content was investigated to investigate the composition of the viscous substance. The total sugar content was measured by phenol-sulfate acid method, and the total sugar content was calculated from the standard curve based on glucose. The total sugar content of the viscous product produced from the red ginseng gourd fermentation is shown in Table 5. As a result, the total sugar content showed the highest content in Example 1, and when the soybean flour was added from Example 2, the sugars present in the raw materials were consumed and greatly reduced while the fermentation proceeded, while the composition of the viscous biosynthesis was made by Bacillus subtilis. The content of polymer polyglutamic acid is believed to increase.

구분division 총당 함량(g%)Total sugar content (g%) 실시예1Example 1 87.8887.88 실시예2Example 2 62.6362.63 실시예3Example 3 39.5839.58 실시예4Example 4 38.6438.64

(4) HPLC를 이용한 홍삼박 발효물의 점질물의 성분 분석(4) Analysis of Components of Viscosity of Red Ginseng Extract Ferment by HPLC

가. 점질물의 정제end. Purification of slime

홍삼박 발효물로부터 생성된 발효물의 정제는 발효물 10g에 증류수 50mL을 첨가하여 균질화 시킨 후 액을 원심분리하여 균체 및 devris를 제거한 후 상등액을 회수하였다. 회수한 상등액의 2배 부피에 해당하는 isopropanol을 첨가하여 점질물을 침전시킨 후 회수하여 증류수에 녹인 다음 다시 2배 부피의 isopropanol을 첨가하여 점질물을 회수시켰다. 회수된 점질물은 진공건조기를 이용하여 유기용매를 제거한 후 2N HCl용액에 2%가 되게 녹인 다음 105℃에서 12시간 방치하였다.Purification of the fermentation product produced from the red ginseng gourd fermentation was homogenized by adding 50 mL of distilled water to 10 g of the fermented product and centrifuged to remove the cells and devris, and then the supernatant was recovered. The isopropanol corresponding to 2 times the volume of the recovered supernatant was added to precipitate the viscous substance, and then recovered and dissolved in distilled water. Then, the isopropanol was added again to recover the viscous substance. The recovered viscous material was removed by using a vacuum dryer to remove the organic solvent to 2% in 2N HCl solution and left for 12 hours at 105 ℃.

나. 당분석I. Sugar analysis

산 가수분해된 점질물을 원심분리 후 상층액 만을 0.45㎛ 실린지 필터(syringe filter)로 여과하여 dsCHROM system으로 분석하였다. 분석조건은 검출기로 RI(Waters 410, USA)를 이용하였으며, 컬럼(column)은 Shodex Asahipak NH2P 50 4E (Japan)를 이용하여 이동상을 75% acetonitril로 유속은 1.0 mL/min의 속도로 흘려주었다. 표준품으로는 단당류 중에서 육탄당인 glucose, galactose, mannose, fructose, rhamnose를 사용하였다. 실시예 1, 2, 3, 4, 모두에서 glucose와 Retention time(RT,분)이 일치되는 peak area가 나타났으나 나머지 육탄당들과 일치되는 peak area는 나타나지 않았다. glucose와 일치되는 peak area중 area값이 가장 큰 것은 실시예 1로 도 1에 나타내었다. 이는 홍삼박 자체에 함유된 산성다당체로부터 분해된 당성분이라 사료된다.Acid hydrolyzed viscous material was centrifuged and the supernatant was filtered with a 0.45 μm syringe filter, which was then analyzed by the dsCHROM system. Analytical conditions were RI (Waters 410, USA) as a detector, the column was a Shodex Asahipak NH 2 P 50 4E (Japan) using a mobile phase 75% acetonitril flow rate flows at a rate of 1.0 mL / min gave. Among the monosaccharides, hexose glucose (glucose, galactose, mannose, fructose, rhamnose) was used. In Examples 1, 2, 3, and 4, peak areas in which glucose and Retention time (RT, minute) were coincident were observed, but peak areas coinciding with the remaining hexasaccharides were not found. The largest area value among the peak areas consistent with glucose is shown in FIG. This is considered to be a sugar component decomposed from the acidic polysaccharide contained in the red ginseng gourd itself.

다. Glutamic acid 함량 측정All. Determination of Glutamic Acid Content

홍삼박 발효물의 점질물 구성성분으로 glutamic acid의 중합체인 Poly-γ-glutamic acid(PGA)의 함량을 결정하기 위하여 산 가수분해 된 점질물의 glutamic acid 함량을 HPLC로 측정하였다. 분석조건은 검출기로 UV(Young-in M720, Korea) 220nm에서 측정하였고, 컬럼(column)은 Zorbax ODS C18을 이용하였으며 이동상은 20mM K2HPO4을 1N HCL로 pH를 2.7로 조절한 용매와 acetonitril을 99:1비율로 혼합한 용매를 사용하여 유속을 0.8mL/min의 속도로 흘려주었다. Glutamic acid를 이용한 표준곡선으로부터 glutamic acid 함량을 산출하였다. 탈지대두첨가량에 첨가량에 따른 홍삼박 발효물의 포도당과 점질물의 구성물질인 glutamic acid 함량변화를 도 1에 나타내었고, 그 결과 점질물의 함량은 가장 높고, 당함량이 낮은 실시예 4에서 329.8mg/g으로 가장 많은 glutamic acid를 함유하고 있었다. In order to determine the content of Poly-γ-glutamic acid (PGA), a glutamic acid polymer, the glutamic acid content of acid-hydrolyzed viscous was measured by HPLC. The analytical conditions were measured at 220nm UV (Young-in M720, Korea) with a detector, and the column was Zorbax ODS C 18 and the mobile phase was 20mM K 2 HPO 4 with 1N HCL and the solvent was adjusted to pH 2.7. Using a solvent mixed with acetonitril in a ratio of 99: 1, the flow rate was flowed at a rate of 0.8 mL / min. The glutamic acid content was calculated from the standard curve using glutamic acid. Glucose and glutamic acid content of red ginseng gourd fermentation product according to the addition amount of skim soybean are shown in Figure 1, the result is the highest in the content of viscous substance, 329.8 mg / g in Example 4 with low sugar content Containing the most glutamic acid.

라. 점도측정la. Viscosity Measurement

홍삼박 발효물의 점도는 Rheometer System(HAAKE RheoStress 1,Germany)에 spindle을 장착하여 cone plate device (Platte PP35 Ti, 3.5㎝ diamete)를 사용하여 측정하였으며, 그 결과는 표 6과 같다. 홍삼박 발효물을 증류수로 2배 희석한 점질성 용액을 plate위에 올려놓고 구간 당 10초 동안의 평균값이 측정되어 얻은 값을 shear rate(1/s)와 shear stress(Pa)로 나타내어 점도가 높아짐에 따라 층밀림 변형력이 높아지는 효과를 측정하였다. 측정온도 20℃에서 전단속도는 1~100 s-1의 범위로 유동특성을 알아보았고, 점조도지수와 유동지수 값은 Power law model로 측정하였다. 탈지대두분말 함량이 증가하면서 홍삼박 발효물의 점조도는 증가하였으며, 실시예4에서 가장 높은 점조도 값을 보였다. The viscosity of the red ginseng gourd product was measured using a cone plate device (Platte PP35 Ti, 3.5 cm diamete) by mounting a spindle on a Rheometer system (HAAKE RheoStress 1, Germany), and the results are shown in Table 6. A viscous solution of 2 times diluted red ginseng fermented product with distilled water was put on a plate, and the average value for 10 seconds per section was measured. The value obtained was expressed as shear rate (1 / s) and shear stress (Pa). As a result, the effect of increasing the shear deformation force was measured. Shear velocity was measured in the range of 1 ~ 100 s -1 at 20 ℃, and the viscosity index and the flow index were measured by the power law model. As the amount of skim soybean powder increased, the viscosity of the red ginseng gourd ferment was increased, showing the highest consistency in Example 4.

구분division 점조도 consistency index (Pa·sn)Consistency consistency index (Pa · s n) 실시예1Example 1 0.150.15 실시예2Example 2 0.260.26 실시예3Example 3 1.381.38 실시예4Example 4 4.614.61

<실시예 5~11><Examples 5-11>

제조예 2에서 제조된 홍삼박 습식분쇄물(수분함량 97%)의 일정량을 발효용기에 담은 다음 하기 표 7과 같이, 홍삼박 습식분쇄물 50g에 탈지대두분말을 0, 0.25, 0.5, 1.5, 2.5, 3.5, 5g 을 각각 첨가하여 홍삼박 습식분쇄물에 0~10중량%로 첨가하였다. 또한 35%의 mono sodium glutamate를 홍삼박 습식분쇄물에 3중량%수준으로 첨가하였으며, 추가로 35%의 cyclodextrin을 각각 홍삼박 습식분쇄물에 3중량%씩 첨가하고 살균시킨 후 제조예 3에서의 바실러스 스타터 배양액을 0.1~3% 중량%씩 접종한 후 37~45℃에서 20~48시간 고체 발효하여 홍삼박 발효물을 제조하였다.After putting a certain amount of the red ginseng foil wet grinding product (water content 97%) prepared in Preparation Example 2 in a fermentation vessel, as shown in Table 7 below, 0 g, 0.25, 0.5, 1.5, degreasing soybean powder in 50 g red ginseng wet grinding material 2.5, 3.5, and 5 g were added, respectively, to 0 to 10% by weight of the red ginseng foil wet mill. In addition, 35% mono sodium glutamate was added to the red ginseng wet milled powder at a level of 3% by weight. In addition, 35% of cyclodextrin was added to the red ginseng dry wet milled by 3% by weight and sterilized, respectively. After inoculating the Bacillus starter culture 0.1 to 3% by weight, and solid fermentation at 37 ~ 45 ℃ 20 ~ 48 hours to prepare a red ginseng fermented product.

구분division 홍삼박 습식
분쇄물(g)
Red ginseng leaf wet
Crushed product (g)
탈지대두
분말(g)
Skim soybean
Powder (g)
M.S.G(g) M.S.G (g) C.D (g)C.D (g)
실시예5Example 5 5050 00 1.51.5 1.51.5 실시예6Example 6 5050 0.250.25 1.51.5 1.51.5 실시예7Example 7 5050 0.50.5 1.51.5 1.51.5 실시예8Example 8 5050 1.51.5 1.51.5 1.51.5 실시예9Example 9 5050 2.52.5 1.51.5 1.51.5 실시예10Example 10 5050 3.53.5 1.51.5 1.51.5 실시예11Example 11 5050 55 1.51.5 1.51.5

홍삼박의 습식분쇄물은 고초균 발효에 적합하도록 monosodium glutamate 및 cyclodextran을 일정량 첨가하여 고초균 발효를 수행할 수 있었다. 특히 소량의 탈지대두분말을 첨가함으로서 홍삼박 발효물의 점조성을 크게 증가시키는 효과를 보였으며, 고초균 발효에 기인한 청국장 특유의 냄새는 홍삼박 습식분쇄물 50g에 대해 탈지대두분말이 5g 이상 첨가되는 조건부터 일부 약하게 나타나는 것을 확인 할 수 있었다. 또한 탈지대두분말의 첨가는 홍삼박 습식분쇄물에 50중량% 첨가경우에 발효배지의 초기 수분함량이 65%정도로서 발효가 가능하다. 따라서 홍삼박 습식분쇄물에 탈지대두분말의 첨가량을 조절함으로서 홍삼박 습식분쇄물 발효물에서 점조성 생산이 가능하며, 고유한 홍삼의 냄새를 가지면서 청국장 냄새를 제거할 수 있는 효과가 가능하였다. Wet grinds of red ginseng gourd were fermented by adding a certain amount of monosodium glutamate and cyclodextran to be suitable for fermentation of Bacillus subtilis. In particular, the addition of a small amount of skim soybean powder greatly increased the consistency of red ginseng gourd fermentation. I was able to confirm that it appeared some weak. In addition, the addition of skim soybean powder can be fermented when the initial moisture content of the fermentation medium is about 65% when 50 wt% is added to the red ginseng soak powder. Therefore, by adjusting the amount of skim soybean powder added to the red ginseng wet milled product, it was possible to produce viscous composition from the red ginseng milled wet milled fermented product, and it was possible to remove the smell of the Cheonggukjang with the smell of red ginseng.

제조된 홍삼박 습식분쇄물 발효물에 대하여 다음과 같이 물성을 측정하였다.The physical properties of the prepared red ginseng leaf wet milled fermented product were measured as follows.

(1) 점도(1) viscosity

홍삼박 습식분쇄물 발효물의 점도는 Rheometer System(HAAKE RheoStress 1,Germany)에 spindle을 장착하여 cone plate device (Platte PP35 Ti, 3.5㎝ diamete)를 사용하여 측정하였으며, 그 결과는 표 8 및 도 2와 같다. 홍삼박 습식분쇄물 발효물 1.5ml정도를 plate위에 올려놓고 구간 당 10초 동안의 평균값이 측정되어 얻은 값을 shear rate(1/s)와 shear stress(Pa)로 나타내어 점도가 높아짐에 따라 층밀림 변형력이 높아지는 효과를 측정하였다. 측정온도 20℃에서 전단속도는 1~100 s-1의 범위로 유동특성을 알아보았고, 점조도지수와 유동지수 값은 Power law model로 측정하였다.Viscosity of the red ginseng seed wet milled fermentation product was measured using a cone plate device (Platte PP35 Ti, 3.5 cm diamete) mounted with a spindle on a Rheometer System (HAAKE RheoStress 1, Germany), and the results are shown in Table 8 and FIG. same. About 1.5ml of red ginseng leaf wet milled fermented product was put on the plate, and the average value for 10 seconds per section was measured and expressed as shear rate (1 / s) and shear stress (Pa). The effect of increasing the deformation force was measured. Shear velocity was measured in the range of 1 ~ 100 s -1 at 20 ℃, and the viscosity index and the flow index were measured by the power law model.

구분division Consistency index (Pa·sn)Consistency index (Pas n ) 실시예5Example 5 17.1417.14 실시예6Example 6 18.0318.03 실시예7Example 7 18.5518.55 실시예8Example 8 20.5520.55 실시예9Example 9 27.8927.89 실시예10Example 10 28.2228.22 실시예11Example 11 46.9246.92

(2) 티로신(tyrosine) 함량 측정(2) Tyrosine content measurement

홍삼박 발효물의 peptide 생성 정도를 측정하기 위하여 total phenol 측정법을 변형한 방법을 이용하여 tyrosine 함량을 측정하였다. 발효물 5g을 10ml증류수에 희석시킨 후 15,000 rpm에서 15분간 원심분리하여 얻은 상등액 0.7mL에 0.44M TCA 0.7mL을 첨가하여 37℃ 항온 수조에서 3O분간 반응시킨 후 다시 15,000rpm에서 15분간 원심분리 하여 침전물을 제거하였다. 이 상등액 1mL에 0.55M Na2CO3 2.5mL과 phenol reagent 0.5mL을 혼합하여 37℃ 항온 수조에서 30분간 반응시켜 실온으로 냉각시킨 후, 반응액의 흡광도를 L-tyrosine을 이용해 작성한 표준 곡선으로부터 spectrophotometer를 사용하여 660nm에서 측정하였다. 그 결과는 하기 표 9 및 도 3과 같다.In order to measure the degree of peptide production of red ginseng gourd fermentation, we measured the tyrosine content using a modified total phenol method. After diluting 5 g of the fermented product into 10 ml distilled water, 0.7 mL of supernatant obtained by centrifugation at 15,000 rpm for 15 minutes was added 0.44 M TCA 0.7 mL, and then reacted for 3 minutes in a 37 ° C. constant temperature water bath. The precipitate was removed. 2.5 mL of 0.55 M Na 2 CO 3 and 0.5 mL of phenol reagent were mixed with 1 mL of the supernatant, reacted in a constant temperature water bath at 37 ° C. for 30 minutes, cooled to room temperature, and the absorbance of the reaction solution was determined from a standard curve prepared using L-tyrosine. Was measured at 660 nm. The results are shown in Table 9 and FIG. 3.

구분division Tyrosine content (mg%)Tyrosine content (mg%) 실시예5Example 5 90.7 ± 7.190.7 ± 7.1 실시예6Example 6 131.6 ± 3.1131.6 ± 3.1 실시예7Example 7 259.6 ± 4.1259.6 ± 4.1 실시예8Example 8 378.7 ± 14.1378.7 ± 14.1 실시예9Example 9 573.3 ± 48.2573.3 ± 48.2 실시예10Example 10 640.9 ± 33.3640.9 ± 33.3 실시예11Example 11 897.8 ± 39.6897.8 ± 39.6

탈지대두분말이 첨가되면서 홍삼박 습식분쇄물의 발효시에 고초균이 생산하는 단백질분해효에 의해서 원료중의 단백질 가수분해물이 크게 증가되는 효과를 보였으며, 실시예 11의 경우처럼 10% 탈지대두분말이 첨가되는 경우에 첨가되지 않은 실시예 5에 비해서 10배정도 높은 tyrosine함량을 보였다. As the skim soybean powder was added, the protein hydrolyzate in the raw material was greatly increased by the proteolytic effect produced by Bacillus subtilis during the fermentation of the red ginseng soaked wet powder, and as in the case of Example 11, When added, the tyrosine content was about 10 times higher than that of Example 5 which was not added.

(3) 홍삼박 습식분쇄물 발효물의 가수분해효소 활성 측정(3) Determination of Hydrolase Activity of Red Ginseng Extract Wet Grinded Fermentation

효소 활성은 protease활성을 역가로 측정하였으며, 홍삼박 발효물 5g에 0.02M phosphate buffer(pH 7.0) 95mL을 첨가한 뒤 실온에서 진탕 후 원심분리(15,000rpm, 15min)하여 상등액으로부터 효소액을 조제한 다음 효소활성을 측정하였다. Protease의 활성도의 기질로는 0.6%의 casein용액 0.35mL과 효소액 0.35mL를 e-tube에 넣고 항온수조에서 반응(37℃, 10min)시킨 다음 0.44M TCA 용액 0.7mL을 넣어 반응을 정지시킨 후 37℃에서 30분간 정치시켰다. 이 반응액을 원심분리(15,000rpm, 15min)한 후 여액 1mL에 0.55M Na2CO3 2.5mL 과 3배 희석된 Folin reagent 0.5mL을 넣고 37℃에서 30분간 반응시킨 후 660nm에서 흡광도를 측정하였다. 이 반응조건 하에서 1분간에 tyrosine 1㎍을 유리시키는 효소량을 1 unit로 하였다. 그 결과는 도 3과 같다.The enzyme activity was measured by titer of protease activity. After adding 95 mL of 0.02M phosphate buffer (pH 7.0) to 5 g of red ginseng gourd fermentation, the enzyme was prepared from the supernatant by centrifugation (15,000 rpm, 15 min) after shaking at room temperature. Activity was measured. As a substrate of the activity of protease, 0.35 mL of 0.6% casein solution and 0.35 mL of enzyme solution were added to the e-tube and reacted in a constant temperature water bath (37 ° C, 10 min). Then, 0.7mL of 0.44M TCA solution was added to stop the reaction. It was left to stand at 30C for 30 minutes. The reaction solution was centrifuged (15,000 rpm, 15 min), and 1 mL of the filtrate was added with 2.5 mL of 0.55 M Na 2 CO 3 and 0.5 mL of 3 times diluted Folin reagent, and reacted at 37 ° C. for 30 minutes, and the absorbance was measured at 660 nm. . Under this reaction condition, the amount of enzyme that liberated 1 μg of tyrosine in 1 minute was 1 unit. The result is shown in FIG. 3.

(4) 혈전용해효소의 활성 측정(4) Determination of activity of thrombolytic enzymes

혈전용해효소 활성은 fibrin plate method의 방법을 사용하였다. Fibrin plate는 0.5% fibrinogen을 0.067M sodium phosphate buffer(pH 7.4)에 용해시켜서 직경 9cm인 petri dish에 10mL을 가하였다. 여기에 0.067 M sodium phosphate buffer(pH 7.4)에 용해된 thrombin (100 NIH/mL) 0.1mL을 가하여 신속하게 혼합한 후 실온에서 30분 방치하여 고형화시켰다. 혈전용해능 측정 시료는 홍삼박 발효물 1g에 0.1M phosphate buffer(pH 7.5) 9mL을 혼합한 후 15,000rpm에서 15분 동안 원심 분리하여 얻은 상등액을 이용하였다. Fibrin plate에 발효비지 추출액을 각 표시한 위치에 20㎕씩 점적하여 37℃에서 2시간 반응시킨 후 용해 면적으로 효소 활성을 구하였다. 표준 plasmin 효소활성의 표준곡선을 작성한 후 발효비지 중의 혈전용해효소는 표준곡선과 비교하여 plasmin unit로 환산하여 혈전용해활성(%)을 나타내었다. 대조구로서는 정제된 혈전용해효소인 plasmin(5 unit/mL)을 사용하여 계산하였다. 그 결과는 도 4와 같다.The thrombolytic enzyme activity was determined using the fibrin plate method. Fibrin plates were dissolved in 0.067M sodium phosphate buffer (pH 7.4) in 0.5% fibrinogen and 10mL was added to a petri dish with a diameter of 9 cm. 0.1 ml of thrombin (100 NIH / mL) dissolved in 0.067 M sodium phosphate buffer (pH 7.4) was added thereto, mixed quickly, and allowed to stand at room temperature for 30 minutes to solidify. The thrombolytic activity sample was mixed with 9 mL of 0.1 M phosphate buffer (pH 7.5) to 1 g of red ginseng fermentation, and then used for the supernatant obtained by centrifugation at 15,000 rpm for 15 minutes. Fermented biscuit extract was added to each marked position on a fibrin plate at 20 µl and reacted for 2 hours at 37 ° C. After preparing the standard curve of the standard plasmin enzyme activity, the thrombolytic enzyme in fermentation fermentation showed thrombolytic activity (%) in terms of plasmin unit compared to the standard curve. The control was calculated using plasmin (5 units / mL), a purified thrombolytic enzyme. The result is shown in FIG. 4.

<실시예 12~15><Examples 12-15>

제조예 1에서 제조된 홍삼박 분말 일정량(최종 배양액 100g에 대하여 5%)을 발효용기에 담은 다음 탈지대두분말을 하기 표 10과 같이 홍삼박 분말5%를 함유하는 배양액에 대하여 0,5,10,15% 첨가하였다. 여기에 35%의 monosodium glutamate용액을 1% 수준, 35% cyclo dextrin용액을 3% 수준으로 첨가한 후 최종 배양액의 무게를 100g으로 조정하여 액상 또는 죽상태의 배지를 제조한 후 제조예 3의 바실러스 스타터 배양액을 0.1~3% 중량%씩 접종하여37~45℃에서 20~48시간 발효하여 홍삼박 발효물을 제조하였다.A certain amount of red ginseng meal powder prepared in Preparation Example 1 (5% based on 100 g of the final culture solution) was placed in a fermentation vessel, and then skim soybean powder was added to the culture solution containing 5% red ginseng meal powder as shown in Table 10 below. , 15% was added. After adding 35% monosodium glutamate solution to 1% level and 35% cyclo dextrin solution to 3% level, the final culture was adjusted to 100 g to prepare a liquid or porridge medium. 0.1-3% by weight of the starter culture was inoculated by fermentation for 20-48 hours at 37 ~ 45 ℃ to prepare a red ginseng gourd fermented product.

구분division 홍삼박 분말(%)  Red ginseng powder (%) 탈지대두
분말(%)
Skim soybean
powder(%)
물(%)water(%) M.S.G(%)M.S.G (%) C.D(%)CD(%)
실시예12Example 12 55 00 9191 1One 33 실시예13Example 13 55 55 8686 1One 33 실시예14Example 14 55 1010 8181 1One 33 실시예15Example 15 55 1515 7676 1One 33

홍삼박 건조 미세분말을 습식분쇄물의 발효와 유사한 조건에서 발효실험을 위해서 홍삼박 분말 5% (w/v) 분산액에 탈지대두미세분말을 0~15% (w/v)수준으로 첨가하였다. 특히 고초균 발효에 의한 점질물 생산을 촉진시키기 위해서 생고분자 점질물 polyglutamic acid의 기질물질인 monosodium glutamate를 1%수준으로 소량으로 첨가하며, 동시에 탄소원으로 cyclodextrin 3%를 사용하여 홍삼박 분산액의 발효를 수행하였다. 5% 홍삼박 용액에 탈지대두분말이 첨가된 혼합물의 물성은 습식분쇄 홍삼박의 발효초기 조건과 유사하였으며, 고초균에 의한 발효후에 홍삼박 발효물은 점조성 증가 및 단백질분해효소를 함유하는 것으로 나타났다. 특히 5% 수준으로 탈지대두분말의 첨가는 청국장 특유의 냄새가 없는 점질물을 함유한 홍삼박의 발효물을 제조할 수 있었다. 따라서 홍삼박 분말 분산액에 탈지대두분말 첨가량을 조절함으로서 발효물의 점조성을 증가시키면서, 고유한 홍삼 냄새를 유지하면서, 청국장 냄새를 제거할 수 있는 효과를 보았다.Red ginseng powder dried fine powder was added to the red ginseng powder powder 5% (w / v) dispersion to 0 ~ 15% (w / v) level for the fermentation experiment under the conditions similar to the fermentation of the wet mill. In particular, in order to promote the production of viscous products by fermentation of Bacillus subtilis, a small amount of monosodium glutamate, a substrate material of the raw polymer viscous polyglutamic acid, was added in a small amount of 1%, and at the same time, fermentation of the red ginseng leaf dispersion using cyclodextrin 3% as a carbon source was performed. The physical properties of the mixtures containing skim soybean powder in 5% red ginseng meal were similar to the initial fermentation conditions of wet milled red ginseng meal. . In particular, the addition of skim soybean powder to the level of 5% was able to prepare a fermented product of red ginseng meal containing a viscous substance without the peculiar smell of Cheonggukjang. Therefore, by controlling the amount of defatted soybean powder added to the red ginseng powder powder dispersion, while increasing the consistency of the fermented product, while maintaining a unique red ginseng smell, it was able to remove the cheonggukjang odor.

제조된 홍삼박 발효물에 대하여 상기 측정방법과 같이 점도, 타이로신 함량 및 단백질분해효소 활성 측정하여, 하기 표 11 및 도 7에 나타내었다.For the prepared red ginseng fermented product, the viscosity, tyrosine content and protease activity were measured in the same manner as in the above measurement method, and are shown in Table 11 and FIG. 7.

점조도 consistency index (Pa·sn)Consistency consistency index (Pa · s n) 실시예12Example 12 0.040.04 실시예13Example 13 0.170.17 실시예14Example 14 18.2518.25 실시예15Example 15 141.2141.2

홍삼박 건조분말 5% 분산액에 탈지대두분말을 0~15% 수준으로 첨가하여 고초균을 이용한 발효에서 실시예 12에 비해서 탈지대두분말의 첨가량이 증가함에 따라서 발효물의 점조성이 크게 증가하는 경향을 보였다. 특히 탈지대두분말이 15% 수준으로 첨가되는 경우에 실시예 15에서처럼 발효물은 매우 높은 점조성을 나타내었다. 또한 단백질의 가수분해물이 tyrosine함량과 단백질분해효소의 활성이 크게 증가되었으며, 탈지대두분말이 10% 첨가된 실시예 14에서 단백질효소 및 tyrosine함량이 증가되었으며, 10%이상의 첨가에서는 거의 유사한 효과를 나타내었다. 따라서 홍삼박 건조분말을 5% 수준으로 사용하는 분산액에 탈지대두분말은 10% 이상으로 첨가하여 홍삼박용액을 발효시키는 경우 점질물의 효과적인 생산이 가능한 것으로 사료된다.In the fermentation using Bacillus subtilis, 0% to 15% level of skim soybean powder was added to the red ginseng dry powder 5% dispersion, and the viscosity of fermented products increased significantly as the amount of skim soybean powder increased. . In particular, when the skim soybean powder was added at a level of 15%, the fermented product showed a very high viscosity as in Example 15. In addition, the hydrolyzate of protein increased tyrosine content and protease activity significantly, and the proteinase and tyrosine content were increased in Example 14 where 10% of skim soybean powder was added. It was. Therefore, it is considered that the effective production of viscous materials is possible when fermented red ginseng solution by adding more than 10% of defatted soybean powder to the dispersion using red ginseng powder dry powder at 5% level.

도 1은 본 발명의 실시예 1 내지 4에서의 탈지대두첨가량에 첨가량에 따른 홍삼박 발효물의 포도당과 점질물의 구성물질인 glutamic acid 함량변화를 나타낸 그래프,1 is a graph showing the changes in glutamic acid content of glucose and viscous substances of red ginseng gourd according to the amount of skim soybean added in Examples 1 to 4 of the present invention;

도 2는 본 발명의 실시예 5 내지 11에서의 탈지대두분말 첨가에 따른 홍삼박 습식분쇄물 발효물의 점조성 값의 변화를 나타낸 그래프,Figure 2 is a graph showing the change in the viscosity value of the red ginseng powder wet milled fermentation product according to the addition of skim soybean powder in Examples 5 to 11 of the present invention,

도 3은 본 발명의 실시예 5 내지 11에서의 탈지대두분말 첨가에 따른 홍삼박 습식분쇄물 발효물의 타이로신 함량 변화를 나타낸 그래프,Figure 3 is a graph showing the change in tyrosine content of red ginseng pak wet wet milled fermentation according to the addition of skim soybean powder in Examples 5 to 11 of the present invention,

도 4는 본 발명의 실시예 5 내지 11에서의 홍삼박 습식분쇄물 발효물의 혈전분해효소 활성 비교결과를 나타낸 사진,Figure 4 is a photograph showing the results of the comparison of the thrombinase activity of the red ginseng pak wet milled fermentation product in Examples 5 to 11 of the present invention,

도 5는 본 발명의 점질물을 갖는 발효물 시료인 홍삼박 발효물을 나타낸 사진, Figure 5 is a photograph showing the red ginseng gourd fermentate sample of the fermented product having a viscous substance of the present invention,

도 6은 본 발명의 실시예 5 내지 11에서의 탈지대두첨가량에 따른 홍삼박 습식분쇄물 발효물의 혈전분해 및 단백질분해효소 활성을 나타낸 그래프,Figure 6 is a graph showing the thrombolysis and protease activity of the red ginseng soaked wet grind fermentation according to the amount of degreased soybean in Examples 5 to 11 of the present invention,

도 7은 본 발명의 실시예 12 내지 15에서의 탈지대두분말 첨가에 따른 홍삼박 건조분말의 분산액을 이용한 발효물의 타이로신 함량 및 단백질분해효소 활성을 나타낸 그래프이다.Figure 7 is a graph showing the tyrosine content and protease activity of fermented products using the dispersion of red ginseng powder dry powder according to the addition of skim soybean powder in Examples 12 to 15 of the present invention.

Claims (15)

홍삼박을 건식분쇄하는 단계;Dry grinding red ginseng leaf; 분쇄된 홍삼박 분말 및 상기 홍삼박 분말에 대하여 1~100중량%의 탈지대두분말을 포함하는 배지에 바실러스 스타터 배양액을 0.1~3% 접종하여 고체발효하는 단계를 포함하는 홍삼박 발효물의 제조방법.A method of producing red ginseng meal comprising the step of solid fermentation by inoculating 0.1 to 3% of Bacillus starter culture in a medium containing 1 to 100% by weight of skim soybean powder and red ginseng powder. 제 1 항에 있어서,The method of claim 1, 분쇄하는 단계는 분쇄된 홍삼박 분말의 입도가 10~30㎛인 것임을 특징으로 하는 홍삼박 발효물의 제조방법.The pulverizing step is a method for producing red ginseng foil fermented product, characterized in that the particle size of the pulverized red ginseng powder is 10 ~ 30㎛. 제 1 항에 있어서,The method of claim 1, 홍삼박을 분쇄하는 단계 전에 홍삼박을 수분함량이 5~15% 되도록 건조시키는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 홍삼박 발효물의 제조방법.A method of producing red ginseng gourd, characterized in that it further comprises the step of drying the red ginseng gourd so that the moisture content of the red ginseng gourd is 5 to 15%. 삭제delete 제 1 항에 있어서,The method of claim 1, 발효하는 단계에서 배지는 홍삼박 분말을 1~30중량% 포함하는 분산액 총 중 량에 대하여 탈지대두분말을 0~50중량% 더 포함하며, 액체발효시키는 것임을 특징으로 하는 홍삼박 발효물의 제조방법.In the step of fermentation, the medium further comprises 0 to 50% by weight of skim soybean powder with respect to the total weight of the dispersion containing 1 to 30% by weight red ginseng powder, red ginseng gourd fermentation, characterized in that the liquid fermentation. 제 1 항 내지 제 3 항 및 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 1 to 3 and 5, 발효하는 단계는 37~45℃에서 20~48시간 동안 발효하는 것임을 특징으로 하는 홍삼박 발효물의 제조방법.Fermentation step is a method for producing red ginseng foil fermentation, characterized in that the fermentation for 20 to 48 hours at 37 ~ 45 ℃. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서,4. The method according to any one of claims 1 to 3, 발효하는 단계에서 배지는 글루탐산모노나트륨(monosodium glutamate)을 홍삼박 분말에 대하여 1~10중량% 및 사이클로덱스트린(cyclodextrin)을 홍삼박분말에 대하여 1~10중량% 더 포함하는 것임을 특징으로 하는 홍삼박 발효물의 제조방법.In the step of fermentation, the medium is red ginseng foil, characterized in that it further comprises 1 to 10% by weight of monosodium glutamate (monosodium glutamate) and 1 to 10% by weight of cyclodextrin (cyclodextrin) to the red ginseng powder Method of producing fermented product. 제 5 항에 있어서,The method of claim 5, 발효하는 단계에서 배지는 배지 총 중량에 대하여 글루탐산모노나트륨(monosodium glutamate)을 1~10중량% 및 사이클로덱스트린(cyclodextrin)을 1~10중량% 더 포함하는 것임을 특징으로 하는 홍삼박 발효물의 제조방법.In the step of fermentation, the medium is 1-10% by weight of monosodium glutamate (monosodium glutamate) and 1 to 10% by weight of cyclodextrin (cyclodextrin) to the total weight of the medium, characterized in that the production method of fermented red ginseng. 홍삼박을 습식분쇄하는 단계;Wet grinding red ginseng leaf; 분쇄된 홍삼박 습식분쇄물을 포함하는 배지에 바실러스 스타터 배양액을 0.1~3% 접종하여 발효하는 단계를 포함하는 홍삼박 발효물의 제조방법.A method of producing red ginseng foil fermented product, comprising the step of inoculating a culture medium containing 0.1% to 3% of a Bacillus starter culture in a medium containing pulverized red ginseng leaf wet milled product. 제 9 항에 있어서,The method of claim 9, 분쇄하는 단계는 분쇄된 홍삼박 습식분쇄물의 입도가 50㎛이하인 것임을 특징으로 하는 홍삼박 발효물의 제조방법.The pulverizing step is a method of producing red ginseng foil fermented product, characterized in that the particle size of the pulverized red ginseng wet grinding. 제 9 항에 있어서,The method of claim 9, 분쇄하는 단계에서 분쇄된 홍삼박 습식분쇄물은 수분함량이 90% 이상인 것임을 특징으로 하는 홍삼박 발효물의 제조방법.Red ginseng pulverized wet pulverized in the grinding step is a method for producing a red ginseng foil fermented product, characterized in that the water content of more than 90%. 제 9 항에 있어서,The method of claim 9, 발효하는 단계에서 배지는 홍삼박 습식분쇄물에 대하여 탈지대두분말을 0~50중량% 더 포함하며, 액체발효시키는 것임을 특징으로 하는 홍삼박 발효물의 제조방법.In the step of fermentation, the medium further comprises 0 to 50% by weight of skim soybean powder with respect to the red ginseng soaked crushed powder, the method of producing red ginseng foil fermented product. 제 9 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 9 to 12, 발효하는 단계는 37~45℃에서 20~48시간 동안 발효하는 것임을 특징으로 하는 홍삼박 발효물의 제조방법.Fermentation step is a method for producing red ginseng foil fermentation, characterized in that the fermentation for 20 to 48 hours at 37 ~ 45 ℃. 제 9 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서,The method according to any one of claims 9 to 12, 발효하는 단계에서 배지는 글루탐산모노나트륨(monosodium glutamate)을 홍 삼박 습식분쇄물에 대하여 1~10중량% 및 사이클로덱스트린(cyclodextrin)을 홍삼박 습식분쇄물에 대하여 1~10중량%더 포함하는 것임을 특징으로 하는 홍삼박 발효물의 제조방법.In the step of fermentation, the medium is characterized in that it comprises 1 to 10% by weight of monosodium glutamate (monosodium glutamate) and 1 to 10% by weight of cyclodextrin (cyclodextrin) relative to the red ginseng wet milled product Method of producing red ginseng foil fermented product. 제 1 항 또는 제 9 항 중 어느 한 항의 제조방법으로 제조된 홍삼박 발효물.Red ginseng fermented product prepared by the method of any one of claims 1 to 9.
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