KR101083426B1 - Antidiabetic composition containing the extract of Lycium chinense, Cordyceps sinensis and Acanthopanax senticosus Harms - Google Patents

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Abstract

본 발명은 지골피 추출물의 건조분말 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물의 건조분말 및 동충하초 추출물의 건조분말을 각각 1~6 중량부 혼합한 혼합물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 항당뇨 조성물에 관한 것으로, 글루코키나제(glucokinase)와 피루베이트 디하이드로게나제(pyruvate dehydrogenase) 및 아세틸-코에이 카르복시라제(Acetyl-CoA carboxylase)의 활성을 증가시키면서 α-글루코시다제(α-glucosidase)의 활성은 억제하는 실질적인 항당뇨 효과를 발휘하고, 소재들의 배합비를 적절히 한정하여 경제적이면서 효율적인 항당뇨 조성물을 제공할 수 있다.The present invention relates to an antidiabetic composition comprising a mixture of 1 to 6 parts by weight of a dry powder of prickly pear extract and a dry powder of Cordyceps sinensis extract with respect to 1 part by weight of a dry powder of a phalanx extract. Inhibits the activity of α-glucosidase while increasing the activity of glucokinase and pyruvate dehydrogenase and acetyl-CoA carboxylase. It is possible to exert substantial anti-diabetic effect and to properly limit the blending ratio of the materials to provide an economical and effective anti-diabetic composition.

가시오가피, 글루코키나제, 당뇨, 동충하초, 아세틸-코에이 카르복시라제, 알파-글루코시다제, 조성물, 지골피, 피루베이트 디하이드로게나제, 혈당 Spinocopi, Glucokinase, Diabetes, Cordyceps Sinensis, Acetyl-Coei Carboxylase, Alpha-Glucosidase, Composition, Phalanx, Pyruvate Dehydrogenase, Blood Sugar

Description

지골피, 동충하초, 가시오가피의 추출물을 함유하는 항당뇨 조성물{Antidiabetic composition containing the extract of Lycium chinense, Cordyceps sinensis and Acanthopanax senticosus Harms}Antidiabetic composition containing the extract of Lycium chinense, Cordyceps sinensis and Acanthopanax senticosus Harms

본 발명은 항당뇨 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 지골피, 동충하초, 가시오가피의 추출물을 함유하는 항당뇨 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to an anti-diabetic composition, and more particularly, to an anti-diabetic composition containing the extract of phalanges, cordyceps, thorny stems.

당뇨병은 인슐린량의 부족으로 정상인보다 혈액 중의 포도당(혈당) 농도가 높아져 소변으로 포도당이 배출되는 만성질환으로, 췌장의 랑게르한스섬의 B 세포에서 분비되는 인슐린의 부족, 뇌하수체전엽 · 부신(副堅) · 갑상선 등의 내분비선 기능항진(機能元進), 중추신경 특히 시상하부(視床下部)의 병변 등을 원인으로 들 수 있는데, 이들 인자가 합쳐져서 발병하는 것으로 생각되고 있다. Diabetes is a chronic disease in which glucose is released into the urine due to higher glucose (blood sugar) levels in the blood due to a lack of insulin, and the lack of insulin secreted by B cells of the island of Langerhans in the pancreas, anterior pituitary gland, adrenal gland Endocrine glands, such as the thyroid gland, and the central nervous system, especially the hypothalamus, such as the cause of the cause, combined with these factors are thought to occur.

당뇨의 원인으로는 유전적 소인(素因)이 중요한데, 특히 소아나 나이 어린 환자의 경우에는 대부분이 유전과 관계가 있다고 볼 수 있고, 식생활도 발병과 밀접한 관계가 있다. 이것은 총칼로리 · 고단백 · 고지방식이 관계하는 것으로 추 측되며, 더욱이 환자의 1/3에서 반수 가까이 비만증이라는 점에서 비만과의 관계가 주목되고 있다.Genetic predisposition is important as a cause of diabetes. Especially in children and young patients, most of them may be related to heredity, and diet is closely related to the onset. It is estimated that total calorie, high protein, and high fat diet are related, and the relationship with obesity is attracting attention because it is almost one-half to half of patients.

당뇨병의 초기 주요 증세는 다뇨(多尿), 갈증, 나른함, 다식(多食) 및 체중감소 등이 있고, 장기간 고혈당증은 심혈관계 질환, 망막병증 (시각상실), 신장병증 (신부전증) 및/또는 신경병증 (족부 궤양, 절단 등)을 일으킨다. Early major symptoms of diabetes include polyuria, thirst, drowsiness, multi-diet, and weight loss, and long-term hyperglycemia is associated with cardiovascular disease, retinopathy (loss of vision), nephropathy (renal failure), and / or Causes neuropathy (foot ulcers, amputations, etc.).

2002년의 질환 조절 및 예방 센터(Center for Disease Control and Prevention (CDC))의 조사에 따르면, 미국인 중 6.3%가 당뇨병을 앓고 있고(성인 집단의 21.1%), 약 130만 신규 사례(20 살 이상)가 매년 보고되고 있는데, 이는 현재 당뇨병이 있는 사람들 중 약 절반만 진단된 것으로 추정되고 있다. According to a 2002 Center for Disease Control and Prevention (CDC) survey, 6.3% of Americans have diabetes (21.1% of the adult population) and about 1.3 million new cases (over 20 years old). ) Is reported annually, which is estimated to be diagnosed in only about half of people with diabetes.

상기의 당뇨병을 예방 또는 치료하는 방법으로 인슐린이나 경구 혈당 강하제의 투여가 이루어지고 있는데, 경제적 부담과 더불어 부작용의 위험도 수반하고 있기 때문에 근래에 와서는 천연식물 등의 약리물질을 이용한 식이요법 및 자연 요법이 시도되고 있다. In order to prevent or treat the above diabetes, insulin or oral hypoglycemic agents are administered, but since they are accompanied by economic burden and risk of side effects, in recent years, diet and natural therapy using pharmacological substances such as natural plants are used. This is being tried.

그러나 상당수는 과학적 근거가 희박하여 실질적으로 항당뇨 효과가 있는지 의문점이 들고, 첨가되는 소재들의 구체적인 배합비를 산정하지 않아 경제성 및 효율성이 떨어지는 것이 사실이다. However, many of them lack the scientific evidence and question whether the anti-diabetic effect is practical, and the fact that they do not calculate the specific compounding ratio of the added materials is not economical and efficient.

이에 본 발명은 단계적인 실험을 통하여 소재들이 어떠한 작용을 통해 항당뇨 효과를 발휘하는지 알아보고 소재들의 적절한 배합비를 한정함으로써 경제적이면서 실질적인 항당뇨 효과를 발휘하는 항당뇨 조성물을 개발하여 제공하는데 그 목적이 있다. Therefore, the present invention aims to develop and provide an antidiabetic composition exhibiting economical and practical antidiabetic effect by finding out how the materials exert antidiabetic effect through a stepwise experiment and limiting an appropriate blending ratio of the materials. .

상기의 목적을 달성하기 위해 본 발명은 지골피 추출물의 건조분말 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물의 건조분말 및 동충하초 추출물의 건조분말을 각각 1~6 중량부 혼합한 혼합물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 항당뇨 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention is characterized by containing a mixture of 1 to 6 parts by weight of the dry powder of prickly thorn extract and dried powder of Cordyceps sinensis extract with respect to 1 part by weight of the dry powder of the Gigolpi extract as an active ingredient. It provides an antidiabetic composition.

이하, 본 발명의 과제 해결 수단에 대해 상세히 설명하고자 한다.Hereinafter, the problem solving means of the present invention will be described in detail.

지골피는(Lycium chinense)는 구기자 나무 뿌리껍질로, 일반 및 무기성분 외에 베타인, 루틴, 구꼬아민 A, 베타시세트롤 등과 불포화 지방산 및 아미노산이 풍부하다. 무기성분에는 칼륨, 마그네슘, 칼슘, 철분, 아연이 함유되어있다. 지골피는 열을 식혀 혈을 서늘하게 하는 청열양혈(淸熱凉血) 작용과 폐장기 열을 식히는 청폐열(淸肺熱) 작용을 하며, 폐열로 인한 해수, 천식, 토혈, 코피, 소변출혈, 골증노열(骨蒸勞熱; 결핵같은 소모성 질환) 등에 유효하다. Lycium chinense is a goji tree root bark, which is rich in unsaturated fatty acids and amino acids such as betaine, rutin, gucoamine A, betacicetrol, etc. in addition to general and inorganic components. Inorganic ingredients include potassium, magnesium, calcium, iron and zinc. Phalanges blood fever cools the blood to cool the fever (淸 熱 凉血) action and lung lung heat fever to cool the lungs (淸 肺熱) action, due to lung fever, sea water, asthma, hemostasis, nosebleeds, urine hemorrhage, It is effective for osteopathic fever (consumable disease such as tuberculosis).

동충하초(Cordyceps sinensis)는 곰팡이의 일종인 동충하초균이 주로 온도, 습도가 높아지는 시기에 살아있는 곤충의 몸속으로 들어가 발육증식하면서 기주곤충을 죽이고 얼마 후 자실체를 곤충의 표피에 형성하는 일종의 약용버섯이다. 동충하초의 약리작용으로 중추신경진정, 체온강하, 면역기능항진, 항암, 심장혈류량증가, 기관지확장, 부신피질호르몬작용증가, 항피로, 항노화, 항염증, 항미생물작용 등이 보고되었다. Cordyceps sinensis ) is a type of medicinal mushroom that forms a fruiting body on the epidermis of insects after some time when the fungus Cordyceps fungi enters the body of living insects at the time of high temperature and humidity. The pharmacological action of Cordyceps sinensis has been reported in the central nervous system, temperature lowering, immune function, anti-cancer, increased cardiac blood flow, bronchodilation, increased adrenal cortex hormone, anti-fatigue, anti-aging, anti-inflammatory, anti-microbial action.

가시오가피(Acanthopanax senticosus Harms, Eleutherocosis maxim)는 한반도와 시베리아 및 중국의 고지대에 자생하는 Araliaceae에 속하는 다년생 낙엽관목으로서 내건성 및 내한성 식물이다. 주성분은 트리테르페노이드계의 배당체 7종류로, 에레우테로사이드 A, B, C, D, E, F, G 이며 그 밖에 글루코오스, 갈락토오스 등의 당류 및 다당의 카로틴, 비타민 B1, B2, C, 미네랄을 풍부하게 함유하고 있다.일명 “시베리아 인삼”이라고 불리는 가시오가피는 강장제로서 기관지 천식, 치료, 체력증진, 근골격 증진, 항암, 항노화, 항피로, 그리고 인삼에 버금가는 신진대사작용이 있다고 알려져 있다. Acanthopanax senticosus Harms, Eleutherocosis maxim ) is a perennial deciduous shrub belonging to the Araliaceae, which grows in the highlands of the Korean Peninsula, Siberia and China. Its main components are seven types of triterpenoid glycosides, ereuterosides A, B, C, D, E, F, and G. Other sugars such as glucose and galactose, carotene, vitamin B 1 and B 2 It is rich in minerals, C and minerals. Also known as “Siberian ginseng”, thorny ginseng is a tonic, bronchial asthma, treatment, stamina, musculoskeletal enhancement, anti-cancer, anti-aging, anti-fatigue, and metabolism that is comparable to ginseng. It is known.

한편, 상기의 지골피의 추출물과 동충하초의 추출물 및 가시오가피의 추출물을 포함하는 항당뇨 조성물은 이미 제조되고 있지만, 각 소재들이 어떠한 작용을 통해 항당뇨 효과가 발휘되는지 과학적인 근거가 미약하고, 소재들의 배합비가 고려되지 않아 경제성 및 효율성이 떨어지는 것이 사실이다. 이와 같은 문제점을 해결하기 위해 본 발명은 단계적인 실험을 통해 지골피와 동충하초 및 가시오가피 추 출물의 건조분말이 당뇨가 유발된 쥐에서 어떠한 작용을 하는지 알아보았고, 소재들의 배합비를 한정하여 경제적이면서도 효율적인 항당뇨 조성물을 개발하여 제공한다.On the other hand, although the anti-diabetic composition comprising the extract of the phalanx, the extract of Cordyceps sinensis and the extract of thorny ogapi has already been produced, the scientific basis for how the anti-diabetic effect is exerted through the action of each material is weak, and the combination ratio of the materials It is true that economics and efficiency fall because it is not taken into account. In order to solve such a problem, the present invention has been conducted through a step-by-step experiment to find out what the dry powder of the phalanx and Cordyceps Sinensis and Prickly Pear extract acts on the diabetes-induced rats. Develop and provide a composition.

한편, 당뇨병은 인슐린의 부족으로 혈액 중 포도당(혈당) 농도가 정상인에 비해 높아져 소변으로 포도당이 배출되는 만성질환으로, 본 발명에서는 이를 예방 및 치료하는 항당뇨 조성물을 개발하여 제공하고자, 소재별로 세포 내 당을 분해하여 에너지 대사의 기질로 사용하는데 관여하는 효소인 글루코키나제(glucokinase) 및 피루베이트 디하이드로게나제(pyruvate dehydrogenase)의 활성 증가 정도와 에너지를 생성하고 남은 잉여의 당을 지방으로 전환하는데 관여하는 효소인 아세틸-코에이 카르복시라제(Acetyl-CoA carboxylase)의 활성 증가 정도 및 α-글루코시다제(α-glucosidase)의 활성 억제 정도를 측정하였다. On the other hand, diabetes is a chronic disease in which glucose is released into the urine due to a high level of glucose (blood glucose) in the blood due to lack of insulin, and in the present invention, to develop and provide an antidiabetic composition for preventing and treating the same, cells by material Glycokinase and pyruvate dehydrogenase, enzymes involved in breaking down sugars and using them as substrates for energy metabolism, generate energy and convert surplus sugar into fat. Increasing activity of the enzyme acetyl-CoA carboxylase (Acetyl-CoA carboxylase) and inhibition of the activity of α-glucosidase (α-glucosidase) was measured.

상기의 효소들에 대해 더욱 상세히 설명하면 글루코키나제(glucokinase)는 세포 내 당 이용 대사에 관여하는 첫 단계 효소로, 당이 세포 내에 유입되면 당을 분해하여 세포 내 당 농도가 저하되는데, 세포 내 당 농도가 저하되면 혈액으로부터 당이 유입되어 결국 혈당을 저하된다.The enzymes described in more detail, glucokinase (glucokinase) is the first step involved in the metabolism of intracellular sugar, and when sugar enters the cell, it breaks down the sugar and decreases the intracellular sugar concentration. When the concentration is lowered, sugar enters from the blood and eventually lowers blood sugar.

피루베이트 디하이드로게나제(pyruvate dehydrogenase)는 상기 글루코키나제(glucokinase) 등에 의해 세포 내 당의 분해 과정 중 생성되는 피루베이트(pyruvate)를 아세틸 코에이(acetyl CoA)로 비가역적으로 전환시키는 효소이다. 피루베이트 디하이드로게나제를 거친 당 대사물은 다시 당으로 가역적 생성이 불가능하기 때문에 세포 내 당 농도를 저하시킬 수 있는데, 세포 내 당 농도가 저하되 면 혈당이 세포로 유입되어 결국 혈당이 저하된다.Pyruvate dehydrogenase is an enzyme that irreversibly converts pyruvate, which is produced during the decomposition of intracellular sugars by glucokinase and the like, into acetyl CoA. Pyruvate dehydrogenase-treated sugar metabolism can reduce the intracellular sugar concentration because it is impossible to produce reversible sugar again. When the intracellular glucose concentration decreases, blood sugar enters the cell and eventually lowers the blood sugar. .

아세틸-코에이 카르복시라제(Acetyl-CoA carboxylase)는 동물 조직의 지방산 생합성에 대해 속도를 제한하는 효소로, 세포 내에서 당이 TCA cycle를 통해 에너지를 생성하는데, 이때 남은 잉여의 당을 지방으로 전환시키는 것에 관여하는 효소이다. Acetyl-CoA carboxylase is an enzyme that limits the rate of fatty acid biosynthesis in animal tissues. In the cell, sugar produces energy through the TCA cycle, converting the surplus of sugar into fat. It is an enzyme involved in making.

α-글루코시다제(α-glucosidase)는 탄수화물을 분해하여 포도당으로 전환시키는 효소로, 식후 혈당상승에 크게 기여하는 효소이다. 따라서, α-글루코시다제의 활성을 저해시킴으로써, 식후 탄수화물의 소화와 흡수가 지연되어 혈당이 현저히 감소되고 이에 혈중 인슐린(insulin) 농도도 감소되므로, 점차적으로 공복 시 혈당을 감소시키는 효과를 발휘한다.α-glucosidase is an enzyme that breaks down carbohydrates and converts them into glucose, and is an enzyme that contributes significantly to post-prandial blood sugar rise. Therefore, by inhibiting the activity of α-glucosidase, the post-prandial carbohydrate digestion and absorption is delayed, thereby significantly reducing blood sugar and reducing insulin levels in the blood, thereby gradually reducing the fasting blood sugar. .

지골피, 가시오가피, 동충하초 추출물의 건조분말을 농도별로 시료로 제조하여 상기 효소들의 활성을 각각 측정한 결과, 글루코키나제, 피루베이트 디하이드로게나제, 아세틸-코에이 카르복시라제의 활성을 증가시키면서 α-글루코시다제의 활성을 억제시켰는데, 특히, 지골피 추출물은 글루코키나제의 활성을, 가시오가피 추출물은 피루베이트 디하이드로게나제의 활성을, 동충하초는 아세틸-코에이 카르복시라제의 활성을 크게 증가시켰고, α-글루코시다제의 활성은 가시오가피 추출물이 가장 크게 억제시켰다. As a result of measuring the activity of the enzymes by preparing dried powders of the phalanges, thorns, and Cordyceps sinensis extracts by concentration, the activity of glucokinase, pyruvate dehydrogenase, and acetyl-coei carboxylase was increased. In particular, the zigolpi extract significantly increased the activity of glucokinase, the pterygium extract increased the activity of pyruvate dehydrogenase, and the cordyceps sinensis significantly increased the activity of acetyl-Coei carboxylase. The activity of glucosidase was the most inhibited by prickly pear extract.

한편, 본 발명의 항당뇨 조성물은 특징적으로 지골피 추출물의 건조분말 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물의 건조분말 및 동충하초 추출물의 건조분말을 각각 1~6 중량부로 혼합한 혼합물을 유효성분으로 함유하는데, 지골피 추출물의 건조 분말 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물의 건조분말이 1 중량부 미만으로 함유되는 경우, 피루베이트 디하이드로게나제의 활성을 증가시키기 어려울 뿐만 아니라, α-글루코시다제의 활성을 억제하기 어렵고, 가시오가피 추출물의 건조분말이 6 중량부를 초과하는 경우에는, 재료 투입량 대비 경제성이 떨어진다. 지골피 추출물 1 중량부에 대해 동충하초 추출물의 건조분말이 1 중량부 미만으로 함유되는 경우에는 아세틸-코에이 카르복시라제의 활성을 증가시키기 어렵고, 동충하초 추출물의 건조분말이 6 중량부를 초과하는 경우에는 재료 투입량 대비 경제성이 떨어진다.On the other hand, the anti-diabetic composition of the present invention is characterized by containing a mixture of 1 to 6 parts by weight of the dry powder of prickly pear skin extract and the dry powder of Cordyceps sinensis extract with respect to 1 part by weight of the dry powder of the phalanx extract as an active ingredient. When less than 1 part by weight of the dry powder of prickly pear extract is contained per 1 part by weight of the dry powder of the extract, not only is it difficult to increase the activity of pyruvate dehydrogenase, but also it is difficult to inhibit the activity of α-glucosidase. , If the dry powder of the thorn extract is more than 6 parts by weight, economic efficiency is inferior to the material input amount. It is difficult to increase the activity of acetyl-Coei carboxylase when the dry powder of Cordyceps sinensis extract is contained less than 1 part by weight with respect to 1 part by weight of the phalanx extract, and when the dry powder of Cordyceps sinensis extract exceeds 6 parts by weight Contrast economy is low.

한편, 지골피 추출물의 건조분말 또는 가시오가피 추출물의 건조분말 또는 동충하초 추출물의 건조분말의 제조방법은 특정 방법에 한정되는 것은 아니나, 바람직하게 지골피, 가시오가피 및 동충하초 중 선택되는 어느 하나의 건체 시료 1 중량부에 증류수 8.7~12.7 중량부를 가하고 50~70℃에서 20~28시간 쉐이킹 인큐베이션(shaking incubation)을 한 후, 5000~7000rpm으로 50~70분 동안 원심분리를 하고 0.35~0.55㎛로 여과하여 수득한 여과액을 동결건조함으로써 제조되는 것이 좋다.On the other hand, the dry powder of the phalanx extract or dry powder of prickly pear extract or dry powder of Cordyceps sinensis extract is not limited to a specific method, preferably 1 weight part of any one dry sample selected from the phalanges, psyllium stem and cordyceps. Filtrate obtained by adding 8.7 to 12.7 parts by weight of distilled water and shaking incubation at 50 to 70 ° C. for 20 to 28 hours, centrifugation at 5000 to 7000 rpm for 50 to 70 minutes, and filtering to 0.35 to 0.55 μm. It is preferably prepared by lyophilization.

한편, 본 발명의 항당뇨 조성물은 바람직하게 지골피 추출물의 건조분말 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물의 건조분말 및 동충하초 추출물의 건조분말을 각각 3 중량부 혼합한 혼합물을 유효성분으로 함유하는 것이 좋은데, 글루코키나제, 피루베이트 디하이드로게나제, 아세틸-코에이 카르복시라제의 활성 증가 효과가 가장 우수하면서 α-글루코시다제의 활성억제 효과도 우수하기 때문이다. On the other hand, the anti-diabetic composition of the present invention preferably contains a mixture of 3 parts by weight of the dry powder of prickly thorn extract and dried powder of Cordyceps sinensis extract with respect to 1 part by weight of the dry powder of the phalanx extract as an active ingredient, gluco This is because the kinase, pyruvate dehydrogenase, and acetyl-CoA carboxylase have the most excellent effect of increasing the activity, and the α-glucosidase has an excellent activity inhibitory effect.

상기에서 살펴본 바와 같이 본 발명의 항당뇨 조성물은 글루코키나제(glucokinase)와 피루베이트 디하이드로게나제(pyruvate dehydrogenase) 및 아세틸-코에이 카르복시라제(Acetyl-CoA carboxylase)의 활성을 증가시키면서 α-글루코시다제(α-glucosidase)의 활성은 억제하는 실질적인 항당뇨 효과를 발휘하고, 소재들의 배합비를 적절히 한정하여 효율적이면서 경제적이다.As described above, the anti-diabetic composition of the present invention is α-glucose while increasing the activity of glucokinase, pyruvate dehydrogenase, and acetyl-CoA carboxylase. The activity of the α-glucosidase exerts a substantial anti-diabetic effect that inhibits and is effective and economical by appropriately limiting the compounding ratio of the materials.

또한, 본 발명은 천연 소재로부터 유래된 것으로 일반 소비자로부터 거부감 및 불쾌감을 주지 않는 장점도 있다. In addition, the present invention is derived from a natural material has the advantage of not rejection and discomfort from the general consumer.

이하, 본 발명의 구성 및 작용에 대해 하기 실시예에서 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 이와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.Hereinafter, the configuration and operation of the present invention will be described in more detail with reference to the following examples, but the scope of the present invention is not limited to the following examples, and includes modifications of equivalent technical spirit.

<< 제조예Manufacturing example 1> 시료 제조 1> Sample Preparation

지골피, 동충하초, 가시오가피 각각의 건체 20g에 증류수 214ml을 첨가한 후, 60℃에서 24시간 쉐이킹 인큐베이션한 다음, 6,000rpm에서 1시간 동안 원심분리하였다. 원심분리하여 수득된 추출물을 0.45㎛로 여과한 후 동결건조하여 각각의 분말을 수득하였다. 수득된 분말 각각을 50ppm, 100ppm, 250ppm, 500ppm, 1000ppm, 5000ppm, 10000ppm이 되도록 증류수와 혼합하여 추출물 시료를 제조하였다. After adding 214 ml of distilled water to 20 g of each of the phalanges, Cordyceps sinensis and Prickly Pear, each was incubated at 60 ° C for 24 hours, and then centrifuged at 6,000 rpm for 1 hour. The extract obtained by centrifugation was filtered to 0.45 mu m and then lyophilized to obtain each powder. Each of the powders obtained was mixed with distilled water to be 50 ppm, 100 ppm, 250 ppm, 500 ppm, 1000 ppm, 5000 ppm, 10000 ppm, thereby preparing an extract sample.

<< 실험예Experimental Example 1>  1> 지골피Phalanges , 동충하초, 가시오가피 추출물의 건조분말 각각에 대한 항당뇨 효과 측정Antidiabetic Effects of Dried, Cordyceps Sinensis and Prickly Pear Extracts on Dry Powder

상기 제조예 1에서 수득된 지골피, 동충하초, 가시오가피 추출물의 시료 각각에 의한 세포 내 당 이용대사에 관련된 효소로 글루코키나제(glucokinase) 및 피루베이트 디하이드로게나제와 당의 소화효소인 α-글루코시다제(α-glucosidase), 아세틸-코에이 카르복시라제(Acetyl-CoA carboxylase)의 활성을 측정하여 어떠한 작용을 통해 항당뇨 효과를 발휘하는지 확인하였다. Glucokinase and pyruvate dehydrogenase and α-glucosidase, which are enzymes involved in glucose utilization metabolism by each of the samples of the phalanges, Cordyceps sinensis and Prickly Ophitus extracts obtained in Preparation Example 1 α-glucosidase) and acetyl-CoA carboxylase (Meetyl-CoA carboxylase) activity was measured to determine the anti-diabetic effect through the action.

Wister계 쥐에서 경구 당부하시험으로 내당능 불량의 지표로 선택교배에 의해 확립된 계통인 2형 당뇨 유발 쥐인 GK(Goto-Kakizaki)로부터 심장조직 및 간장조직을 채취하여 세포 분획물을 제조한 후, 그에 존재하는 상기 효소들의 활성을 지골피, 동충하초, 가시오가피의 추출물 시료에 대해 측정하였다. Cell fractions were prepared by collecting cardiac tissue and liver tissue from GK (Goto-Kakizaki), a type 2 diabetes-induced rat, which was established by selective mating as an indicator of poor glucose tolerance in Wister rats by oral glucose tolerance test. The activity of the enzymes present was measured on the extract samples of phalanges, Cordyceps sinensis, Prickly Pear.

이때, 세포 분획물은 채취한 2형 당뇨 유발 쥐인 GK의 심장조직 및 간장 조직으로부터 수득(참고문헌: 생화학, 고문사, 강윤세 외 14인, 1996)하였는데, 간장 조직은 복부 절개 후 간장으로 들어가는 정맥을 절단하고 간장을 들어냄으로써 채취하였으며, 심장 조직은 심장과 연결되어 있는 동맥을 절단하고 혈액을 제거한 후, 채취하였다.At this time, the cell fraction is collected Cardiac and hepatic tissues of GK, a type 2 diabetes-induced rat (Ref .: Biochemistry, Torturer, Kang Yun-se et al., 1996, 1996). Heart tissue was harvested after cutting the artery connected to the heart and removing blood.

<< 실험예Experimental Example 1-1>  1-1> 글루코키나제Glucokinase (( GlucokinaseGlucokinase ) 활성 조절 정도의 조사Investigation of the degree of activity regulation

글루코키나제(Glucokinase)는 세포 내 당 이용대사에 관여하는 첫 단계 효소 로, 세포 내 당 농도를 저하시킴으로써 혈액으로부터 당이 유입되어 혈당을 낮추는 역할을 한다. 따라서 본 실험예 1-1에서는 상기 제조예 1에서 수득된 지골피, 동충하초, 가시오가피의 추출물 시료가 글루코키나제의 활성을 증가시키는지 확인하기 위해 실시하였다. Glucokinase is the first enzyme involved in intracellular glucose metabolism. Glucokinase lowers glucose levels in the blood and lowers blood sugar by lowering glucose levels in the cells. Therefore, this Experimental Example 1-1 was carried out to determine whether the extract samples of phalanges, Cordyceps sinensis, Prickly Ogapi obtained in Preparation Example 1 increases the activity of glucokinase.

지골피의 추출물, 동충하초 추출물, 가시오가피 추출물 시료 각각의 글루코키나제(Glucokinase) 활성 조절 정도를 2형 당뇨 유발 쥐인 GK의 간조직 세포 분획물로부터 측정하였다.Glucokinase Activity of Extracts from Cordyceps, Cordyceps Sinensis, and Prickly Pear Extract The degree of control was measured from hepatic cell fractions of GK, type 2 diabetes induced mice.

측정 방법은 44mM 소디움 글리실글리시네이트(sodium glycylglycinate; pH 7.5), 3mM NADP+, 3mM MgCl2, 30mM ATP, 0.2U G-6-PDH, 500mM 글루코스(glucose)을 첨가하여 28℃에서 인큐베이션(incubation)한 후, 각 소재 추출물 시료와 시토졸(cytosol)을 넣은 다음, 340nm에서 3분간 측정하여 NADPH의 산화를 통해 글루코키나제의 활성을 측정하였다.The measurement method was incubated at 28 ° C. by adding 44 mM sodium glycylglycinate (pH 7.5), 3 mM NADP + , 3 mM MgCl 2 , 30 mM ATP, 0.2 U G-6-PDH, 500 mM glucose (glucose). After incubation), each extract sample and cytosol were added, and then measured at 340 nm for 3 minutes to measure the activity of glucokinase through oxidation of NADPH.

글루코키나제의 활성도(대조군 대한 %로 나타냄)를 측정한 결과(도 1), 지골피, 동충하초, 가시오가피 추출물의 시료 모두 글루코키나제의 활성을 증가시켰는데, 특히, 지골피 추출물 시료는 농도의존적으로 글루코키나제의 활성이 급격히 증가시켜 10000ppm에서 최대치를 나타냈다. As a result of measuring the activity of glucokinase (in% of the control group) (FIG. 1), all samples of the phalanx, Cordyceps sinensis and prickly pear extracts increased the activity of glucokinase. The activity increased sharply and reached a maximum at 10000 ppm.

<< 실험예Experimental Example 1-2> 1-2> 피루베이트Pyruvate 디하이드로게나제Dehydrogenase (( pyruvatepyruvate dehydrogenasedehydrogenase )) 활성 조절 정도의 조사Investigation of the degree of active regulation

피루베이트 디하이드로게나제(pyruvate dehydrogenase)는 글루코키나제 등의 효소에 의해 세포 내 당이 분해되는 과정 중 생성되는 피루베이트를 아세틸코에이로 비가역적으로 전환시키는 효소이다. 이때 당의 가역적 생성이 불가능하기 때문에 세포 내 당은 저하되고, 세포 내 당이 저하되면 혈당이 세포로 유입되어 혈당이 저하되는 것이다.Pyruvate dehydrogenase is an enzyme that irreversibly converts pyruvate, which is produced during the breakdown of intracellular sugars by enzymes such as glucokinase, to acetylcoei. At this time, since the reversible production of sugar is impossible, the intracellular sugar is lowered, and when the intracellular sugar is lowered, blood sugar is introduced into the cell, thereby lowering the blood sugar.

따라서 본 실험예 1-2에서는 지골피, 동충하초, 가시오가피의 각각 추출물 시료가 피루베이트 디하이드로게나제 활성을 증가시키는지 확인하였다.  Therefore, in Experimental Example 1-2, it was confirmed whether the extract samples of phalanges, Cordyceps sinensis, and Prickly Pear increased the pyruvate dehydrogenase activity.

지골피, 동충하초, 가시오가피의 각각 추출물 시료에 의한 피루베이트 디하이드로게나제(pyruvate dehydrogenase) 활성 조절 정도를 2형 당뇨 유발 쥐인 GK의 심장조직 세포 분획물로부터 측정하였다Activity of pyruvate dehydrogenase by extract samples of phalanx, Cordyceps sinensis and Prickly Pear The degree of control was measured from cardiac tissue fractions of GK, type 2 diabetes-induced rats.

측정방법은 Flora H. 등의 방법에 따라 측정하였다. 150mM MOPS(pH 7.4), 12mM MgCl2, 0.6mM CaCl2 , 20mM NAD+, 0.72mM CoA, 18mM 티아민 피루포스페이트(thiamin pyrophosphate), 15.6mM L-시스테인(L-cystein), 75mM 피루베이트(pyruvate)를 첨가한 다음, 30℃에서 3분간 인큐베이션(incubation) 시킨 후 각각의 추출물과 피루베이트 디하이드로게나제(pyruvate dehydrogenase)를 넣고 340nm에서 2분간 측정하여 NADH의 산화를 통해 피루베이트 디하이드로게나제(pyruvate dehydrogenase)의 활성을 측정하였다.The measuring method was measured according to the method of Flora H. et al. 150 mM MOPS (pH 7.4), 12 mM MgCl 2 , 0.6 mM CaCl 2 , 20 mM NAD + , 0.72 mM CoA, 18 mM thiamine pyrophosphate, 15.6 mM L-cysteine, 75 mM pyruvate After incubation at 30 ° C. for 3 minutes, each extract and pyruvate dehydrogenase were added and measured at 340 nm for 2 minutes to determine pyruvate dehydrogenase (oxidation of NADH). The activity of pyruvate dehydrogenase was measured.

피루베이트 디하이드로게나제의 활성도(대조군 대한 %로 나타냄)를 측정한 결과(도 2), 지골피, 동충하초, 가시오가피 추출물 시료 모두 피루베이트 디하이드 로게나제의 활성을 증가시켰는데, 특히, 가시오가피 추출물의 시료는 낮은 농도에서도 피루베이트 디하이드로게나제의 활성이 높게 나타났다. As a result of measuring the activity of pyruvate dehydrogenase (expressed in% of the control group) (FIG. 2), all of the phalanges, cordyceps, and bark extracts increased the activity of pyruvate dehydrogenase, in particular, The sample showed high activity of pyruvate dehydrogenase even at low concentrations.

<< 실험예Experimental Example 1-3> 아세틸- 1-3> Acetyl- 코에이Koei 카르복시라제Carboxylase (( Acetyl-CoAAcetyl-CoA carboxylasecarboxylase )) 활성 조절 정도의 조사Investigation of the degree of active regulation

아세틸-코에이 카르복시라제(Acetyl-CoA carboxylase)는 동물 조직의 지방산 생합성에 대한 속도를 제한하는 효소로, 세포 내에서 'TCA cycle'을 통해 에너지를 생성하고 남은 잉여의 당을 지방으로 전환되는데 관여한다. 따라서 본 실험예 1-3은 지골피, 동충하초, 가시오가피의 추출물 시료 각각이 아세틸-코에이 카르복시라제의 활성을 증가시키는지 확인하기 위해 실시하였다. Acetyl-CoA carboxylase is an enzyme that limits the rate of fatty acid biosynthesis in animal tissues, and is involved in the production of energy through the 'TCA cycle' in cells and the conversion of excess sugar to fat. do. Therefore, Experimental Example 1-3 was carried out to determine whether each of the extract samples of phalanges, Cordyceps sinensis, Prickly Ogapi increases the activity of acetyl-Coei carboxylase.

지골피, 동충하초, 가시오가피의 추출물 시료에 의한 아세틸-코에이 카르복시라제(Acetyl-CoA carboxylase) 활성 조절 정도를 2형 당뇨 유발 쥐인 GK의 간조직 세포 분획물로부터 측정하였다.Acetyl-CoA Carboxylase Activity by Extract Samples of Phalanx, Cordyceps Sinensis, Prickly Pear The degree of control was measured from hepatic cell fractions of GK, type 2 diabetes induced mice.

아세틸-코에이 카르복시라제(Acetyl-CoA carboxylase)의 활성 측정은 'Tadashi' 등의 'spectrophotometric' 방법을 이용하여 지골피, 동충하초, 가시오가피 각각의 추출물 시료의 혈당조절 기능을 규명하였다. 250mM Tris-HCl (pH 7.5), 50mM MgCl2, 18.75mM 글루타치온(glutathione), 0.625mM pH 8.0 NADH, 0.625mM acetyl-CoA, 2.5mM 포타시움 포스포에놀피루베이트(potassium phosphoenolpyruvate), 10U 락테이트 디하이드로게나제(lactate dehydrogenase), 10U 피루베이트 키나제(pyruvate kinase)와 각각의 추출물, 시토졸(cytosol)을 첨가하여 37℃에서 1분간 인큐베이션(incubatiom) 시킨 후, 37.5mM ATP와 250mM KHCO3을 넣고, 340nm에서 2분간 측정하여 NADH가 NAD+로 환원되는 것을 통해 아세틸-코에이 카르복시라제(acetyl-CoA carboxylase)의 활성을 측정하였다.Acetyl-CoA carboxylase activity was measured using the 'spectrophotometric' method such as 'Tadashi' to determine the glycemic control function of each extract samples of the phalanx, Cordyceps sinensis, thorn stem. 250 mM Tris-HCl (pH 7.5), 50 mM MgCl 2 , 18.75 mM glutathione, 0.625 mM pH 8.0 NADH, 0.625 mM acetyl-CoA, 2.5 mM potassium phosphoenolpyruvate, 10 U lactate di Hydrogenase (lactate dehydrogenase), 10U pyruvate kinase, each extract, and cytosol were added and incubated at 37 ° C for 1 minute, then 37.5 mM ATP and 250 mM KHCO 3 were added. 2 minutes at 340 nm, NADH was reduced to NAD + to determine the activity of acetyl-CoA carboxylase (acetyl-CoA carboxylase).

아세틸-코에이 카르복시라제의 활성 증가(대조군 대한 %로 나타냄) 정도를 측정한 결과(도 3), 지골피, 동충하초, 가시오가피의 각각의 추출물 시료에 의해 아세틸-코에이 카르복시라제의 활성이 증가하였는데, 특히 동충하초의 추출물 시료는 아세틸-코에이 카르복시라제의 활성을 농도의존적으로 증가시키는 것을 확인하였다. As a result of measuring the increase of acetyl-Coei carboxylase activity (expressed in% of the control group) (FIG. 3), the acetyl-Coei carboxylase activity was increased by the respective extract samples of the phalanges, Cordyceps sinensis, P. In particular, the extract sample of Cordyceps sinensis was confirmed to increase the concentration-dependent activity of acetyl-Coei carboxylase.

<< 실험예Experimental Example 1-4> α- 1-4> α- 글루코시다제Glucosidase (α-(α- glucosidaseglucosidase )) 활성 조절 정도의 조사Investigation of the degree of active regulation

α-글루코시다제(α-glucosidase)는 탄수화물의 소화를 담당하여 식후 혈당상승에 크게 기여하는 효소로, α-글루코시다제의 활성을 억제할 수 있는 소재는 당의 소화흡수를 저해하여 식후 혈당의 급격한 상승을 억제할 수 있다. 따라서 본 실험예 1-4는 α-글루코시다제의 활성을 억제하는 소재를 선발하기 위해 실시하였다. α-glucosidase is an enzyme that contributes to the post-prandial blood sugar increase by responsible for the digestion of carbohydrates. A material capable of inhibiting the activity of α-glucosidase inhibits the digestion and absorption of glucose by post-prandial blood sugar Sudden rise can be suppressed. Therefore, Experimental Example 1-4 was carried out to select a material that inhibits the activity of α-glucosidase.

α-글루코시다제의 활성억제 측정은 in vitro에서 기질과의 반응역학분석 (kinetic analysis) 방법으로 억제율을 측정하여 지골피, 동충하초, 가시오가피 각각의 추출물 시료의 혈당조절 기능을 규명하였다. 'Synthetic substrate'인 2.5mM p-니트로페닐 α-D- 글루코스피라노사이드(p-nitrophenyl α-D-glucospyranoside)를 포스페이트 버퍼(phosphate buffer; pH 6.8)에 첨가한 후, α-글루코시다제(α-glucosidase) 활성 억제 실험을 할 각각의 추출물 시료를 넣고 그 혼합액에 효소용액(enzyme solution)을 첨가하였다. 효소용액을 첨가한 후, 37℃에서 20분간 반응시키고 0.1M NaOH를 첨가하여 반응을 종결시켜 기질(substrate)인 pNPG로부터 유리되어 나오는 반응 생성물인 p-니트로페놀(p-nitrophenol)을 스펙트로메터(spectrometer) 기기로 405㎚에서 측정하여 α-글루코시다제 활성의 억제 정도를 확인하였다. Activity inhibition measurement of α-glucosidase is in Inhibition rate was measured by kinetic analysis method with substrate in vitro to determine the glycemic control function of each extract of phalanx, Cordyceps sinensis, Prickly Pear. 'Synthetic substrate' 2.5mM p-nitrophenyl α-D-glucospyranoside (p-nitrophenyl α-D-glucospyranoside) was added to the phosphate buffer (pH 6.8), and then α-glucosidase ( Each extract sample to be subjected to the α-glucosidase activity inhibition experiment was put, and an enzyme solution was added to the mixed solution. After the addition of the enzyme solution, the reaction was completed at 37 ° C. for 20 minutes and the reaction was terminated by adding 0.1 M NaOH to spectrometer (p-nitrophenol), which is a reaction product released from the substrate pNPG. The degree of inhibition of α-glucosidase activity was confirmed by measuring at 405 nm with a spectrometer).

α-글루코시다제의 활성 억제 정도(대조군에 대한 %로 나타냄)를 측정한 결과(도 4), 가시오가피 추출물 시료에 의한 α-글루코시다제의 활성 억제 정도가 높은 것을 확인할 수 있었다. As a result of measuring the degree of inhibition of activity of the α-glucosidase (expressed in% of the control group) (FIG. 4), it was confirmed that the degree of inhibition of activity of the α-glucosidase by the barberry extract sample was high.

한편, 각 추출물 시료에 대한 세포 생존률을 측정한 결과(도 5), 각 추출물시료에 대한 세포 생존률이 우수한 것을 확인할 수 있었다. On the other hand, as a result of measuring the cell survival rate for each extract sample (Fig. 5), it was confirmed that the cell survival rate for each extract sample is excellent.

<< 실시예Example 1 내지  1 to 실시예Example 5>  5> 항당뇨Anti-diabetic 조성물 제조 Composition manufacturing

상기 실험예 1을 통해 지골피, 동충하초, 가시오가피 각각의 추출물 시료가 어떠한 작용을 통해 항당뇨 효과를 발휘하는지 확인하였고, 본 실시예 1 내지 실시예 5에서는 지골피, 동충하초, 가시오가피 각각의 추출물 시료를 혼합한 항당뇨 조성물을 상기 제조예 1과 같은 방법으로 추출하여 제조하였다.Experimental Example 1 confirmed the anti-diabetic effect of the extract samples of each of the phalanges, Cordyceps sinensis, prickly gingigar through the action, in Examples 1 to 5 mixed the extract samples of each phalanx, Cordyceps sinus The antidiabetic composition was prepared by extracting in the same manner as in Preparation Example 1.

각 추출물 시료의 혼합시 효율적으로 항당뇨 효과를 발휘할 수 있는 배합비 를 결정하기 위해 배합비에 차이를 두어 항당뇨 조성물을 제조하였으며, 배합비에 따른 항당뇨 효과를 하기 실험예에서 확인하였다. Anti-diabetic composition was prepared by varying the blending ratio to determine the blending ratio that can effectively exhibit the anti-diabetic effect when mixing each extract sample, the anti-diabetic effect according to the blending ratio was confirmed in the following experimental example.

항당뇨 조성물에 함유된 각 추출물 시료의 농도는 각 효소별 활성 조절 기능과 세포독성 실험 결과를 바탕으로 글로코키나제의 활성을 최대로 증가시키는 10,000ppm의 지골피 추출물 시료, 피루베이트 디하이드로게나제의 활성을 최대화시키는 100ppm의 가시오가피 추출물 시료, 아세틸-코에이 카르복시나제의 활성을 최대화시키는 5,000ppm의 동충하초 추출물 시료로 제조하였다. The concentration of each extract sample contained in the anti-diabetic composition was determined based on the activity control function of each enzyme and the results of cytotoxicity test. 100 ppm of the thorny oga extract extract to maximize the activity, 5,000 ppm of Cordyceps sinensis extract sample to maximize the activity of acetyl-Coei carboxynase was prepared.

상기와 같은 농도를 갖는 각각의 추출물 시료들의 배합비는 하기 표 1과 같다.Formulation ratio of each extract sample having the concentration as described above is shown in Table 1 below.

항당뇨
조성물
Antidiabetic
Composition
배합비(중량비)Compounding ratio (weight ratio)
지골피 추출물 시료Phalanx Extract Sample 가시오가피 추출물 시료Prickly Pear Extract Sample 동충하초 추출물 시료Cordyceps Sinensis Extract Sample 실시예 1Example 1 1One 1One 1One 실시예 2Example 2 1One 22 22 실시예 3Example 3 1One 33 33 실시예 4Example 4 1One 55 55 실시예 5Example 5 1One 66 66

<< 실험예Experimental Example 2>  2> 글루코키나제Glucokinase (( GlucokinaseGlucokinase ) 활성 조절 정도의 측정Measurement of the degree of active regulation

상기 실시예 1 내지 실시예 5에서 제조된 항당뇨 조성물 의한 글루코키나제(Glucokinase) 활성 조절 정도를 실험예 1-1과 같은 방법으로 측정하였다.The degree of glucokinase activity control by the antidiabetic composition prepared in Examples 1 to 5 was measured by the same method as Experimental Example 1-1.

글루코키나제의 활성 조절 정도(대조군에 대한 %로 나타냄)를 측정한 결과(도 6), 실시예 1 내지 실시예 5 모두 글루코키나제의 활성을 대조군에 비해 증가시켰고, 특히, 실시예 3은 206.5%로 대조군에 비해 약 21배 이상 높은 활성을 나타냈으며, 이는 지골피 추출물 시료를 단독으로 측정하였을 때보다 높은 활성을 나타낸 것이다. As a result of measuring the degree of activity regulation (expressed in% of the control group) of glucokinase (FIG. 6), all of Examples 1 to 5 increased the activity of glucokinase compared to the control group, and in particular, Example 3 was 206.5% As compared to the control group showed about 21 times higher activity, which indicates higher activity than when measuring the phalanges extract samples alone.

상기의 결과로부터, 본 발명의 항당뇨 조성물은 세포 내 당 이용대사에 관여하는 글루코키나제 활성을 증가시킴으로써 당뇨병을 예방 및 치료할 수 있다고 추론할 수 있었다.From the above results, it can be inferred that the antidiabetic composition of the present invention can prevent and treat diabetes by increasing the glucokinase activity involved in intracellular glucose metabolism.

<< 실험예Experimental Example 3>  3> 피루베이트Pyruvate 디하이드로게나제Dehydrogenase (( pyruvatepyruvate dehydrogenasedehydrogenase )) 활성 조절 정도의 측정Determination of the degree of active regulation

상기 실시예 1 내지 실시예 5에서 제조된 항당뇨 조성물에 의한 피루베이트 디하이드로게나제(pyruvate dehydrogenase) 활성 조절 정도를 실험예 1-2와 같은 방법으로 측정하였다. The degree of pyruvate dehydrogenase activity control by the antidiabetic composition prepared in Examples 1 to 5 was measured by the same method as Experimental Example 1-2.

피루베이트 디하이드로게나제의 활성 조절 정도(대조군에 대한 %로 나타냄)를 측정한 결과(도 7), 실시예 3이 167.9%로 가장 높은 활성을 나타냈는데, 이는 가시오가피 추출물 시료를 단독으로 측정한 것보다 높은 활성을 나타낸 것이다. As a result of measuring the degree of activity regulation of pyruvate dehydrogenase (expressed in% of the control group) (FIG. 7), Example 3 exhibited the highest activity of 167.9%, which was measured alone. Higher activity than that.

상기의 결과로부터 본 발명의 항당뇨 조성물은 세포 내 당이 분해되는 과정 중 생성되는 피루베이트를 아세틸코에이로 비가역적으로 전환시키는 효소인 피루베이트 디하이드로게나제의 활성을 증가시킴으로써 당뇨병을 예방 및 치료할 수 있다고 추론할 수 있었다.From the above results, the anti-diabetic composition of the present invention prevents diabetes by increasing the activity of pyruvate dehydrogenase, an enzyme that irreversibly converts pyruvate produced during the breakdown of intracellular sugar into acetylcoa and It could be deduced that it could be cured.

<< 실험예Experimental Example 4> 아세틸- 4> Acetyl 코에이Koei 카르복시라제Carboxylase (( AcetylAcetyl -- CoACoA carboxylasecarboxylase )) 활성 조절 정도의 조사Investigation of the degree of active regulation

상기 실시예 1 내지 실시예 5에서 제조된 항당뇨 조성물에 의한 아세틸-코에이 카르복시라제(Acetyl-CoA carboxylase) 활성 억제 정도를 실험예 1-3과 같은 방법으로 측정하였다. The degree of inhibition of acetyl-CoA carboxylase activity by the antidiabetic composition prepared in Examples 1 to 5 was measured by the same method as Experimental Example 1-3.

아세틸-코에이 카르복시라제(Acetyl-CoA carboxylase)의 활성 조절 정도를 측정한 결과(도 8), 실시예 1 내지 실시예 5 모두 대조군에 비해 높은 활성을 나타냈는데, 특히, 실시예 3은 169.6%로 가장 높게 측정되었다. 이는 동충하초 추출물을 단독으로 측정하였을 때보다 높은 활성을 나타낸 것이다.As a result of measuring the degree of activity regulation of acetyl-CoA carboxylase (FIG. 8), all of Examples 1 to 5 showed higher activity than the control group, in particular, Example 3 was 169.6% It was measured highest as. This shows higher activity than when the Cordyceps sinensis extract was measured alone.

상기의 결과로부터 본 발명의 항당뇨 조성물은 아세틸-코에이 카르복시라제의 활성을 증가시킴으로써 당뇨병을 예방 및 치료할 수 있다고 추론할 수 있었다.From the above results, it can be inferred that the antidiabetic composition of the present invention can prevent and treat diabetes by increasing the activity of acetyl-Coei carboxylase.

<< 실험예Experimental Example 5> α- 5> α- 글루코시다제Glucosidase (α-(α- glucosidaseglucosidase )) 활성 억제 정도의 측정Determination of Activity Inhibition

상기 실시예 1 내지 실시예 5에서 제조된 실시예 3의 항당뇨 조성물에 의한 α-글루코시다제(α-glucosidase)활성 억제 정도를 측정하기 위해 실험예 1-4와 같은 방법으로 실시하였다. In order to measure the degree of inhibition of α-glucosidase activity by the anti-diabetic composition of Example 3 prepared in Examples 1 to 5 was carried out in the same manner as in Experimental Example 1-4.

α-글루코시다제(α-glucosidase)의 활성 억제 정도를 측정한 결과(도 9), 실시예 3의 α-글루코시다제(α-glucosidase)의 활성 억제율이 23.3%로, 아카르보스와 비교하였을 경우, 아카르보스 500ppm(23.8%)와 유사한 억제율을 나타냈다. As a result of measuring the degree of activity inhibition of α-glucosidase (FIG. 9), the activity inhibition rate of α-glucosidase of Example 3 was 23.3%, compared to acarbose. In this case, the inhibition rate was similar to that of Acarbose 500 ppm (23.8%).

상기의 결과로부터 본 발명의 항당뇨 조성물은 탄수화물의 소화를 담당하여 식후 혈당상승에 크게 기여하는 효소인 α-글루코시다제의 활성을 억제함으로써 당뇨병을 예방 및 치료할 수 있다고 추론할 수 있었다.From the above results, it can be inferred that the anti-diabetic composition of the present invention can prevent and treat diabetes by inhibiting the activity of α-glucosidase, an enzyme that is responsible for digesting carbohydrates and contributes significantly to postprandial blood sugar rise.

도 1은 지골피, 동충하초, 가시오가피의 각각 추출물 농도에 의한 글루코키나제 활성을 대조군에 대한 %로 나타낸 도이다.1 is a diagram showing the glucokinase activity by the concentration of each extract of Phalanx, Cordyceps sinensis, Prickly Ogapi in% of the control group.

도 2는 지골피, 동충하초, 가시오가피의 각각 추출물 농도에 의한 피루베이트 디하이드로게나제 활성을 대조군에 대한 %로 나타낸 도이다.2 is a diagram showing the pyruvate dehydrogenase activity by the concentration of each extract of the phalanx, Cordyceps sinensis, Prickly Ogapi as a percentage of the control group.

도 3은 지골피, 동충하초, 가시오가피의 각각 추출물 농도에 의한 아세틸-코에이 카르복시라제 활성을 대조군에 대한 %로 나타낸 도이다.Figure 3 is a diagram showing the acetyl-Coei carboxylase activity in% of the control group by the extract concentration of phalanx, Cordyceps sinensis, Prickly Ogapi, respectively.

도 4는 지골피, 동충하초, 가시오가피의 각각 추출물 농도에 의한 α-글루코시다제 활성의 억제 정도를 대조군에 대한 %로 나타낸 도이다.4 is a diagram showing the degree of inhibition of α-glucosidase activity by the concentration of each extract of Phalanx, Cordyceps sinensis, Prickly Ogapi in% of the control group.

도 5는 지골피, 동충하초, 가시오가피의 각각 추출물 농도에 따른 세포생존률을 나타낸 도이다. Figure 5 is a diagram showing the cell survival rate according to the concentration of each extract of phalanx, Cordyceps sinensis, Prickly Ogapi.

도 6은 10000ppm의 지골피 추출물, 100ppm의 가시오가피 추출물, 5000ppm의 동충하초 추출물을 지골피 추출물 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물과 동충하초 추출물을 각각 1 중량부씩 혼합하여 제조된 실시예 1, 지골피 추출물 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물과 동충하초 추출물을 각각 2 중량부씩 혼합하여 제조된 실시예 2, 지골피 추출물 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물과 동충하초 추출물을 각각 3 중량부씩 혼합하여 제조된 실시예 3, 지골피 추출물 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물과 동충하초 추출물을 각각 5 중량부씩 혼합하여 제조된 실시예 4, 지골피 추출물 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물과 동충하초 추출물을 각각 6 중량부씩 혼합하여 제조된 실시예 5에 의한 글루코키나제 활성을 대조군에 대한 %로 나타낸 도이다.Figure 6 is 10000ppm phalanx extract, 100ppm prickly gingival extract, 5000ppm Cordyceps sinensis extract 1 Example by weight of Pleurotussis extract and Cordyceps sinensis extract for 1 part by weight of Example 1, about 1 part by weight of phalanges extract Example 2 prepared by mixing 2 parts by weight of prickly pear skin extract and Cordyceps sinensis extract, Example 1 prepared by mixing 3 parts by weight of prickly pear skin extract and Cordyceps extract each 1 part by weight The glucokinase activity according to Example 5 prepared by mixing 5 parts by weight of the thorny gingival extract and Cordyceps sinensis extract, respectively, and 6 parts by weight of the thorny gingigar extract and Cordyceps sinensis extract, respectively, was added to the control group. The figure is expressed in%.

도 7은 10000ppm의 지골피 추출물, 100ppm의 가시오가피 추출물, 5000ppm의 동충하초 추출물을 지골피 추출물 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물과 동충하초 추출물을 각각 1 중량부씩 혼합하여 제조된 실시예 1, 지골피 추출물 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물과 동충하초 추출물을 각각 2 중량부씩 혼합하여 제조된 실시예 2, 지골피 추출물 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물과 동충하초 추출물을 각각 3 중량부씩 혼합하여 제조된 실시예 3, 지골피 추출물 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물과 동충하초 추출물을 각각 5 중량부씩 혼합하여 제조된 실시예 4, 지골피 추출물 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물과 동충하초 추출물을 각각 6 중량부씩 혼합하여 제조된 실시예 5에 의한 피루베이트 디하이드로나제 활성을 대조군에 대한 %로 나타낸 도이다.Figure 7 is 10000ppm phalanx extract, 100ppm prickly gingival extract, 5000ppm Cordyceps sinensis extract 1 Example by weight, respectively, 1 kg by weight of prickly pear skin extract and Cordyceps sinensis extract prepared by mixing 1 part by weight, respectively about 1 part by weight Example 2 prepared by mixing 2 parts by weight of prickly pear skin extract and Cordyceps sinensis extract, Example 1 prepared by mixing 3 parts by weight of prickly pear skin extract and Cordyceps extract each 1 part by weight Pyruvate dehydronase activity according to Example 4 prepared by mixing 5 parts by weight of the thorny ogapi extract and Cordyceps sinensis extract, respectively, and 6 parts by weight of the thorny thorn stem extract, Cordyceps sinensis extract, 1 part by weight Is the figure in% of the control.

도 8은 10000ppm의 지골피 추출물, 100ppm의 가시오가피 추출물, 5000ppm의 동충하초 추출물을 지골피 추출물 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물과 동충하초 추출물을 각각 1 중량부씩 혼합하여 제조된 실시예 1, 지골피 추출물 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물과 동충하초 추출물을 각각 2 중량부씩 혼합하여 제조된 실시예 2, 지골피 추출물 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물과 동충하초 추출물을 각각 3 중량부씩 혼합하여 제조된 실시예 3, 지골피 추출물 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물과 동충하초 추출물을 각각 5 중량부씩 혼합하여 제조된 실시예 4, 지골피 추출물 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물과 동충하초 추출물을 각각 6 중량부씩 혼합하여 제조된 실시예 5에 의한 아세틸-코에이 카르복시라제 활성을 대조 군에 대한 %로 나타낸 도이다.Figure 8 is 10000ppm phalanx extract, 100ppm prickly gingival extract, 5000ppm Cordyceps sinensis extract for Example 1 prepared by mixing 1 kg by weight of psyllium extract and Cordyceps sinensis extract by 1 part by weight, respectively, about 1 part by weight of phalanges extract Example 2 prepared by mixing 2 parts by weight of prickly pear skin extract and Cordyceps sinensis extract, Example 1 prepared by mixing 3 parts by weight of prickly pear skin extract and Cordyceps extract each 1 part by weight Acetyl-Coei Carboxylase according to Example 4 prepared by mixing 5 parts by weight of the thorny ogapi extract and Cordyceps sinensis extract, respectively, and 6 parts by weight of the thorny Ogapi extract and Cordyceps sinensis extract per 1 part by weight of the phalanx extract Figures show activity in% of the control group.

도 9는 10000ppm의 지골피 추출물, 100ppm의 가시오가피 추출물, 5000ppm의 동충하초 추출물을 지골피 추출물 1 중량부에 대해 가시오가피 추출물과 동충하초 추출물을 각각 3 중량부씩 혼합하여 제조된 실시예 3에 의한 α-글루코시다제 활성의 억제 정도를 나타낸 도이다.9 is α-glucosidase activity according to Example 3 prepared by mixing 3 parts by weight of each of the thorn stem extract and Cordyceps sinensis extract per 100 parts by weight of 10000ppm phalanx extract, 100ppm prickly pear extract, 5000ppm Cordyceps sinensis extract Is a diagram showing the degree of inhibition.

Claims (2)

10,000 ppm의 지골피 추출물 1 중량부, 100 ppm의 가시오가피 추출물 3중량부 및 5,000 ppm의 동충하초 추출물 3중량부를 혼합한 혼합물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 항당뇨 조성물.An antidiabetic composition comprising a mixture of 10,000 parts by weight of the phalanges extract of 10,000 ppm, 3 parts by weight of 100 ppm thorn stem extract and 3 parts by weight of 5,000 ppm Cordyceps sinensis extract as an active ingredient. 제1항에 있어서,The method of claim 1, 지골피 추출물 또는 가시오가피 추출물 또는 동충하초 추출물은,Phalanx Extract or Prickly Pear Extract or Cordyceps Sinensis Extract, 지골피, 가시오가피 및 동충하초 중 선택되는 어느 하나의 건체 시료 1 중량부에 증류수 8.7~12.7 중량부를 가하고 50~70℃에서 20~28시간 쉐이킹 인큐베이션(shaking incubation)을 한 후, 5000~7000rpm으로 50~70분 동안 원심분리를 하고 0.35~0.55㎛로 여과하여 수득한 여과액을 동결건조하여 분말로 제조한 후 수득된 분말을 증류수와 혼합함으로써 제조된 것을 특징으로 하는 항당뇨 조성물.8.7-12.7 parts by weight of distilled water is added to 1 part of any dry sample selected from phalanges, prickly pears, and Cordyceps sinensis, followed by shaking incubation at 50-70 ° C. for 20-28 hours, and then 50-70 at 5000-7000 rpm. The antidiabetic composition, which is prepared by mixing the obtained powder with distilled water after the filtrate obtained by centrifugation for 10 minutes and filtered to 0.35 ~ 0.55㎛ lyophilized to prepare a powder.
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