KR100511215B1 - 신규한비-일시방출형서방성폴리(락타이드/글리콜라이드)마이크로캡슐 - Google Patents

Abstract

본 발명은 수성 생리학적 환경에서 1 내지 100일의 범위의 다양한 기간 동안 활성 코어를 방출하도록 계획할 수 있는 신규한 비-일시방출형의 지효성 생적합성 및 생분해성 마이크로캡슐에 관한 것이다. 마이크로캡슐은, 100/0 내지 1/99의 비의 범위인 비-캡핑형(유리카복실 말단 그룹) 및 말단-캡핑형의 혼합으로서의 폴리(락타이드/글리콜라이드) 공중합체의 매트릭스 중에 캡슐화된 폴리펩타이드 또는 기타 생물학적 활성 물질의 코어로 구성된다.

Description

신규한 "비-일시방출" 서방형 폴리(락타이드/글리콜라이드) 마이크로스피어

본 발명은 수성 생리학적 환경에서 100일 이하 정도의 기간에 걸쳐 비-일시방출형의 계획된대로 서방출되도록 고안된, 폴리펩타이드를 포함하는 생리학적 활성 물질의 신규한 생적합성 및 생분해성 마이크로스피어체를 제공한다.

젤라틴, 알부민, 덱스트란, 펙틴, 폴리비닐 피롤리돈, 폴리에틸렌 글리콜, 슈가 등과 같은 충전제/첨가제의 사용에 의존하고 여전히 저-봉입효율과 "일시방출" 효과를 갖는 통상의 입수가능한 방출 시스템과는 달리, 본 발명은 어떠한 첨가제를 사용하지 않으면서도 고도의 봉입효율 및 "비-일시방출형" 방출을 성취한다. 본 발명에서, 비-일시방출형의 계획된 서방출은 폴리(락타이드/글리코라이드) 중합체의 '비-캡핑형' 및 말단-캡핑형의 균일한 혼합에 의해 성취된다.

"비-캡핑형" 형태는 일반적으로 말단-캡핑형 형태를 사용하는 것에 비하여 중합체를 보다 더 친수성이도록 하는 "유리 카복실 말단 그룹을 갖는 폴리(락타이드/글리콜라이드)"를 의미한다. 현재, "말단-캡핑형" 중합체는 분자량에 따라서 4 내지 12주 동안 수화되며 이로써 중간에 "전혀 방출하지 않음" 또는 "지체상태(lag phase)"를 유발한다. 비-캡핑형 중합체는 통상적으로 분자량에 따라서 5 내지 60동안 수화되며, 따라서 지체상태 없이 연속적으로 그 코아를 방출시킨다. 두 가지 형태의 주의 깊은 혼합 및 적합한 분자량 및 L/G 비율로 1 내지 100일 동안 연속 방출을 유도한다. 또한, 상기 기간 동안의 방출은 중합체 농도, 펩타이드 농도 및 수성/유상 비율과 같은 공정 변수를 현명하게 선택하여 계획할 수 있다.

본 발명의 공중합체는 분자량 2,000 내지 60,000 달톤, 락타이드/글리콜라이드 비율 90/10 내지 40/60 및 100/0 내지 1/99 비율의 비-캡핑형/캡핑형 혼합을 포함한다. 폴리펩타이드의 분자량은 1000 내지 250,000달톤이고, 다른 생물학적 활성 물질의 분자량은 100 내지 100,000달톤일 수 있다.

본 발명에 기술된 마이크로캡슐은, 우수한 구형 형태, 구형 보존성 및 고른 크기 분포를 제공하기 위해 비-캡핑형 중합체에 대해 개발된 독특한 수성 유화 기술에 의해 제조한다. 이는 우선 내부 유중수(w/o)를 제조한 다음, 유기 용매(예: 메틸렌 클로라이드)에 용해된 중합체 용액과 물에 용해된 생물학적 활성 물질을 혼합함으로써 달성된다. 그 다음에 폴리비닐 알콜과 같은 o/w 유화제를 함유하는 용매-포화 수용액 중에서 w/o 유제를 안정화시킨다. 0.25 내지 1%w/v의 농도로 상기와 동일한 유화제를 함유하는 외부 수상 중에서 w/o 유제를 유화시켜 3원 유제를 형성시킨다. 용매를 증발 제거시켜 마이크로캡슐을 경화시키고, 세정하여 잔류 유화제를 제거한 다음, 동결 건조시킨다. 제1 유화(w/o 유제 형성) 및 최종 w/o/w 유제의 형성 동안 저온을 사용하여 안정한 유제 및 우수한 구형 특성을 수득한다.

본 발명에서, 생물학적 활성 물질은 수용성 호르몬 약물, 항생제, 항종양제, 소염제, 해열제, 진통제, 진해제, 거담제, 진정제, 근육 이완제, 항간질제, 항궤양제, 항우울제, 항알러지제, 강심제, 항부정맥제, 혈관확장제, 항고혈압제, 이뇨제, 항응고제, 항마취제 등이다.

보다 정확하게, 본 발명자들은 다음의 양태를 갖는 약제학적 조성물 및 방법을 발견하였다.

1. 활성 물질 및 비-캡핑형과 말단-캡핑형 생분해성 폴리(락타이드/글리콜리드) 혼합물을 포함하고 1 내지 100일간 생물학적 활성 물질이 일시방출되지 않고 계획된대로 서방출되는 방출 제어형 마이크로캡슐 약제학적 제형.

2. 생분해성 폴리(락타이드/글리콜리드)가, 100/0 내지 1/99 비의 비-캡핑형 및 캡핑된 형태의 혼합물인 상기 1)의 약제학적 제형.

3. 비-캡핍형 및 말단-캡핑형 중합체에 대한 공중합체(락타이드/글리콜리드, L/G)의 비가 52/48 내지 48/52인 상기 1) 또는 2)의 마이크로캡슐.

4. 비-캡핑형 및 말단-캡핑형 중합체에 대한 공중합체 L/G 비가 90/10 내지 10/90인 상기 1) 또는 2)의 마이크로캡슐.

5. 공중합체의 분자량이 2000 내지 60000달톤인 상기 1) 또는 2) 또는 3) 또는 4)의 마이크로캡슐.

6. 생물학적 활성 물질이 펩타이드 또는 폴리펩타이드인 상기 1) 또는 2) 또는 3) 또는 4) 또는 5)의 마이크로캡슐.

7. 폴리펩타이드가 12개의 아미노산으로 이루어진 히스타틴이고, 분자량이 1563인 상기 6)의 마이크로캡슐.

8. L/G의 비가 48/52 내지 52/48이고 분자량이 15000인 비-캡핑형 및 말단-캡핑형 폴리(락타이드/글리콜라이드)의 100/0 혼합을 갖는 1 내지 35일간의 수성 생리 환경에서 히스타틴의 완전 방출 용량에 의해 특징화되는 상기 1) 또는 2) 또는 3) 또는 4) 또는 5) 또는 6)의 마이크로캡슐.

9. 48/52 내지 52/48의 L/G비율 및 28,000 내지 40,000의 분자량 범위를 갖는 비-캡핑형 및 말단-캡핑형 폴리(락타이드/글리콜라이드)의 100/0 혼합물과 함께 18 내지 40일 동안 생리 용액 중에서 히스타틴을 완전히 방출할 수 있는 용량에 의해 특징화되는 품목 1 또는 2 또는 3 또는 4 또는 5 또는 6의 마이크로캡슐.

10. 48/52 내지 52/48의 L/G 비율 및 10,000 내지 40,000 달톤의 분자량 범위를 갖는 비-캡핑형 및 말단-캡핑형 폴리(락타이드/글리콜라이드)의 0/100 혼합물과 함께 28 내지 70일 동안 생리용액 중에서 히스타틴을 90%까지 방출할 수 있는 용량에 의해 특징화되는 품목 1 또는 2 또는 3 또는 4 또는 5 또는 6의 마이크로캡슐.

11. 75/25의 L/G 비율 및 15,000 돌턴 미만의 분자량 범위를 갖는 비-캡핑형 및 말단-캡핑형 폴리(락타이드/글리콜라이드)의 0/100 혼합물과 함께 56 내지 100일 동안 생리적 용액 중에서 히스타틴을 완전히 방출할 수 있는 용량에 의해 특징화되는 품목 1 또는 2 또는 3 또는 4 또는 5 또는 6의 마이크로캡슐.

12. 분자량 1,500-3,000 달톤의 11 내지 24개의 아미노산의 쇄 길이를 가진 히스타틴의 동족체를 갖고 하기의 구조에 의해 특징되는 품목 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11의 마이크로캡슐.

13. 생물학적 활성 물질이 아세테이트 형태로 분자량 1182의 데카펩타이드인 폴리펩타이드 황체화 호르몬 방출 호르몬(LHRH)이고 하기의 구조를 갖는 품목 1 또는 2 또는 3 또는 4 또는 5의 마이크로캡슐.

14. 분자량 1,000 내지 250,000을 갖는 품목 6 또는 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11 또는 12 또는 13의 마이크로캡슐.

15. 다양한 방출비 및 지속시간이 다양한 양의 칵테일로서 비-캡핑형 및 캡핑된 마이크로스피어를 혼합시킴으로서 성취되는 품목 6 또는 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11 또는 12 또는 13 또는 14의 마이크로캡슐.

16. 다양한 방출비 및 지속시간이 동일한 마이크로스피어내에서 상이한 비율로 비-캡핑된 것과 캡핑된 마이크로스피어를 혼합시킴으로서 성취되는 품목 6 또는 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11 또는 12 또는 13 또는 14의 마이크로캡슐.

17. 봉입된 폴리펩타이드가 CFA/I, CFA/II, CS1, CS3, CS6 및 CS17 및 또 다른 ETEC-연관된 엔테로톡신과 같은 엔테로톡신성 이. 콜라이(ETEC)에 대한 백신 제제중에 하나인 품목 6 또는 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11 또는 12 또는 13 또는 14 또는 15 또는 16의 마이크로캡슐.

18. 봉입된 폴리펩타이드가 엔테로톡신성 이. 콜라이(ETEC)에 대한 면역화를 위해 약 800 내지 5000 달톤의 분자량의 펩타이드 항원으로 구성되는 6 또는 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11 또는 12 또는 13 또는 14 또는 15 또는 16 또는 17의 마이크로캡슐.

19. 상기 생물학적 활성 물질이 수용성 호르몬 약체, 항생제, 항암제, 소염제, 해열제, 진통제, 진해제, 거담제, 진정제, 근육 이완제, 항간질제, 항궤양제, 항우울제, 항알러지제, 강심제, 항부정맥제, 혈관확장제, 항고혈압제, 이뇨제, 항응고제, 항마취제로 구성되는 그룹중에서 선택되는, 분자량이 100 내지 100,000 달톤인 품목 1 또는 2 또는 3 또는 4 또는 5의 마이크로캡슐.

20. 상기 생분해되는 폴리(락타이드/글리콜라이드)가 유상에 있고 약 1 내지 50%로 존재하는 품목 1 또는 2 또는 3 또는 4 또는 5 또는 6 또는 7 또는 8의 마이크로캡슐.

21. 활성 물질의 농도가 0.1 내지 약 60%(W/W)인 품목 1 또는 2 또는 3 또는 4 또는 5 또는 6 또는 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11 또는 12 또는 13 또는 14 또는 15 또는 16 또는 17의 마이크로캡슐.

22. 내부 수상액 대 유상의 비가 약 1/4 내지 1/40(v/v)인 품목 1 또는 2 또는 3 또는 4 또는 5 또는 6 또는 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11 또는 12 또는 13 또는 14 또는 15 또는 16 또는 17의 마이크로캡슐.

23. 비캡핑형 생분해 폴리(락타이드/글리콜라이드)를 메틸렌 클로라이드중에 용해시키고 물중에 생물학적 활성 물질 또는 활성 코어를 용해시켜, 수층을 중합체 용액에 첨가하고 유화시켜 내부 유중수(w/o) 유제를 수득하고 수중유(o/w)유화제를 포함하는 용매-포화된 액상중에서 w/o 유제를 안정화시키며, 상기 w/o 유제를 수중유 유화제를 포함하는 외부 수층에 첨가하여 3원 유제를 형성하고 수득한 수중유중수(o/w)을 충분한 시간동안 교반시켜 상기 용매를 제거하며 경화된 마이크로캡슐을 물로 세척하고 상기 경직된 마이크로캡슐을 동결건조시키는 것을 포함하여, 비-일시방출성의 계획된 서방형 생물학적 활성 물질의 방출에 의해 특징화되는 방출 제어 마이크로캡슐 제제를 제조하기위한 방법.

24. 말단-캡핑형 생분해 폴리(락타이드/글리콜라이드)를 메틸렌 클로라이드중에 용해시키고 물중에 생물학적 활성 물질 또는 활성 코어를 용해시키며 액상층을 중합체 용액에 첨가하고 유화시켜 내부 w/o 유제를 수득하고 o/w유화제를 포함하는 용매 포화된 액상중에서 w/o 유제를 안정화시키며 상기 w/o 유제를 o/w 유화제를 포함하는 외부 액상층으로 첨가하여 3원 유제를 형성하고 수득한 w/o/w를 충분한 시간동안 교반시켜 상기 용매를 제거하며 경화된 마이크로캡슐을 물로 세척하고 상기 경직된 마이크로캡슐을 동결건조시키는 것을 포함하는, 비-일시방출형의 계획된 서방형 생물학적 활성 물질의 방출에 의해 특징되는 방출제어 마이크로캡슐 제제를 제조하기 위한 방법.

25. 용매 포화된 외부 액상을 첨가하여 외부 액상 층의 첨가전에 내부 w/o 유제를 유화시켜 0.05 내지 500㎛사이의 고른 크기 분배 범위의 마이크로캡슐을 수득하는 것을 특징으로하는 품목 23 또는 24의 방법.

26. 약 0℃ 내지 4℃의 낮은 온도가 내부 w/o 유제의 제조 동안에 제공되고 약 4 내지 20℃의 낮은 온도가 w/o/w 유제의 제조동안에 제공되어 안정한 유제 및 높은 봉입 효율이 제공되는 품목 23 또는 24의 방법.

27. 비-캡핑형과 말단-캡핑형 중합체의 100/0의 혼합이 지체상태(lag phase)없이 연속식 및 서방식으로 활성 코어의 방출을 제공하는데 사용되는 품목의 방법.

28. 봉입된 폴리펩타이드가 LHRH, 아드레노코르티코트로픽 호르몬, 상피 성장 인자와 같이 낮은 pH에서 활성이고 칼시토닌 방출 폴리펩타이드가 생활성인 품목 6의 마이크로캡슐.

29. 히스타틴과 같은 봉입된 펩타이드가 낮은 pH에서 불활성이고 무기염의 pH 안정화제가 내부 액상으로 첨가되어 방출되는 펩타이드의 생물학적 활성을 유지하는 품목 6 또는 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11의 마이크로캡슐.

30. 제6항 내지 제11항중 어느 한 항에 있어서, 히스타틴과 같은 봉입된 폴리펩타이드가 낮은 pH에서 불활성이고, 폴리옥시에틸렌 솔비탄 지방산 에스테르(트윈 80, 트윈 60 및 트윈 20) 및 폴리옥시에킬렌-폴리옥시프로필렌 차단 공중합체(Pluronics)가 내부 수상에 가해져서 방출된 폴리펩타이드의 생물학적 활성을 유지시키는 마이크로캡슐.

31. 제29항에 있어서, 산성 pH 민감성 폴리펩타이드를 성공적으로 봉입하는데 있어 내부 수상내의 pH-안정화제의 첨가가 바람직하지 않은 경우, pH-안정화제가 함유된, 위약스피어(pleceboshere)를 폴리펩타이드-함유 스피어와 함께 투여함으로써 마이크로캡슐 주변 용액의 pH를 유지시키고 방출된 펩타이드의 생물학적 활성을 보존시키는 마이크로캡슐.

32. 제30항에 있어서, 산성 pH 민감성 폴리펩타이드를 성공적으로 봉입하는데 있어 내부 수상내의 비-이온성 계면활성 물질의 첨가가 바람직하지 않은 경우, 비-이온성 계면활성 물질을 함유한 위약 스피어가 폴리펩타이드-함유 스피어와 함께 투여되어, 방출된 폴리펩타이드의 생물학적 활성을 유지시키는 마이크로캡슐.

33. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항 또는 제8항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 비-캡핑형 중합체 및 캡핑형 중합체의 혼합물(여기서, 공중합체의 완전한 용해로 인하여 투여 부위에 중합체가 잔류하지 않으며 봉입된 물질의 완전한 방출이 동시에 이루어진다)을 포함하는 마이크로캡슐.

34. 근육내 및 피하내와 같은 비경구 경로를 통한 사람 투여용으로써, 제1항 내지 제20항중 어느 한 항에 따른 마이크로캡슐을 사용하는 방법.

35. 국소 경로를 통한 사람 투여용으로써, 제1항 내지 제20항중 어느 한 항에 따른 마이크로캡슐을 사용하는 방법.

36. 경구를 통한 사람 투여용으로써, 제1항 내지 제20항중 어느 한 항에 따른 마이크로캡슐을 사용하는 방법.

37. 비강, 경피, 직장 및 질내 경로를 통한 사람 투여용으로써, 제1항 내지 제20항중 어느 한 항에 따른 마이크로캡슐을 사용하는 방법.

폴리펩타이드 생활성의 보존

중합체가 빠르게 분해되면, 미세환경에서의 가용성 올리고머의 방출에 의해 수반되어 급격히 pH가 낮아지며, 이는 산 pH-민감성 펩타이드/단백질의 생물학적 활성에 영향을 미칠 수 있다. 이러한 예로서, 생물학적 활성은 펩타이드가 함께 용해된 불활성 수성중에서 무기염 또는 완충제를 사용하여 유지될 수 있다.

하기의 독특한 잇점이 본 발명의 특징이다:

1. 코어내에 첨가제의 사용 없이, 수성 생리적 환경에서 폴리펩타이드 및 기타 생적합성 및 생분해성 마이크로캡슐의 최대 100일간의 일시방출성이 아닌, 장시간의 서방성 방출.

2. 상이한 분자량 및 공중합체 비를 갖는 비-캡핑 및 캡핑된 중합체의 혼합물을 사용하고, 공정 파라미터를 조정함에 의한 1 내지 100일에 걸친 다양한 기간 동안의 활성 코어의 계획된 방출.

3. 특히 비-캡핑/캡핑된 중합체의 100/0 혼합물을 사용하는 경우에, 락트산 및 글리콜산과 같은 무독성 성분에 항체 중합체를 완전히 용해시키는 것과 동시에 활성 성분이 완전히 방출된다. 1 내지 30일간의 전달을 위해 현재 사용되어지는 대부분의 생분해 가능한 중합체는 의도된 방출 기간의 말기까지도 완전히 분해되지 않으므로, 이는 해당 관형이 투여 부위에서의 잔류 중합체의 영향에 관해 깊은 관심을 보일 정도로 상당히 중요하다.

4. 여러 경로, 예를 들면 비경구(근육내 및 피하내), 경구, 국소, 경비, 질 등을 통한 다양한 투여형으로 마이크로캡슐이 용이하게 투여된다.

D,L-락테이드 및 글리콜라이드를 기본으로하는 친수성 단일중합체 및 공중합체는 하기 화학식에 의해 특정된다.

폴리(D,L-락테이드-공-글리콜라이드) 50:50

상기 식에서, Z는 분자량/130이다; 예를 들면 분자량이 12,000인 경우 Z=92이고 분자량이 34,000인 경우 Z=262이다.

글리콜라이드에 대한 락테이트의 몰비는 다양한 반면, 락테이트 대 글리콜라이드 공중합체 비는 50:50이 가장 바람직하다.

현재, 대조군이 도 1로 작성되었으며, 도 1은 이상적 방출 제어 시스템에 비교되는, 일련의 용량을 사용하는 종래의 약을 투여를 보여주는 혈액-약물 농도 대 시간의 그래프이다. 불행하게도, 많은 약물은 치료 범위를 갖는데, 치료 범위 이상인 경우 독성이 있고, 치료 범위 미만인 경우 비효과적이다. 전신 투여후 통상적으로 관찰되는 약물 농도의 변동은 효과없는 시기와 독성 시기의 교차를 유발한다. 실제로, 지효성 캡슐화된 생물학적 활성 물질 또는 폴리펩타이드 제제는 도 1의 치료 범위(방출제어의 이상적인 경우가 도시되어 있다)에 도시된 바와 같이 단일 용량에 의해 목적하는 치료 범위에서 약물을 유지할 것이다.

도 2는 평균 분자량 8 내지 12k 달톤의 50/50 비캡핑된 중합체를 사용하여 제조된 PLGA 마이크로스피어의 주사 전자 현미경 사진을 도시한다. 비캡핑된 중합체는 고형의 부드러운 구형 표면을 가지고, "비-일시방출형" 방출 시스템을 제공하는데 적합하다.

표 1은 1 내지 100일에 걸쳐 방출제어된 펩타이드 시스템(히스타틴 펩타이드)을 제조하기 위한 마이크로스피어 처리 기술의 요약이다.

방출 프로파일은 별도의 마이크로스피어 또는 동일한 마이크로스피어에서 비캡핑된 중합체와 캡핑된 중합체의 명백한 혼합물에 의해 변형된다. 표 1에 수록된 마이크로캡슐 제형 1 내지 21로부터의 방출은 서로 독립적으로 발생하므로 이들 제형의 혼합물의 누적 방출은 부가적된다. 비캡핑된 마이크로스피어 및 말단-캡핑된 마이크로스피어 몇몇 제형을 혼합함으로써, 모든 목적하는 기간의 방출 곡선을 교정될 수 있다. 또한, 비캡핑된 중합체와 말단-캡핑된 중합체의 방출 특성에 기초하여, 캡핑된 중합체에 대한 비캡핑된 중합체의 비율이 상이한 단일 제형에서의 두가지 형태의 혼합은 중합체 수화에 현저한 영향을 미칠 것이므로 이에 의해 활성 코어의 방출은 모든 목적하는 패턴의 방출 곡선을 제공한다. 활성 코어의 방출을 변화시키는 중합체 수화 및 퇴화의 조작은 1% 내지 100%의 양으로 말단-캡핑된 중합체에 비캡핑된 중합체를 가함으로써 달성된다.

[표 1]

약어:

L/G 비 : 락타이드/글리콜라이드의 공중합체 조성

DCM : 메틸렌 클로라이드

Mw : 분자량(달톤)

A : 유제 안정화 중간 단계가 없는 w/o/w 유화

B : 유제 안정화 중간 단계가 있는 w/o/w 유화

U : 비-캡핑형 중합체

도 3과 함께 표 1을 참조하면, 50/50 및 75/25의 비-캡핑형 중합체 및 말단-캡핑형 중합체를 사용하여 제조한 수개의 배취로 부터 제조된 PLGA 마이크로스피어로부터의 축적된 히스타틴 방출은 공정 파라미터를 변화시킴으로써 1 내지 100일간에 걸친 방출을 조절함을 알 수 있다. 1 내지 35일 동안에는 캡핑되지 않은 50/50에 의해, 18 내지 56일 동안에는 캡핑된 50/50에 의해, 그리고 56일 내지 100일 동안에는 캡핑된 75/25에 의해 조절된다.

도 4는 분자량 30 내지 40킬로달톤의 말단-캡핑형 중합체에 의해 제조된, 1 내지 2개월 방출 시스템으로 고안된 PLGA 마이크로스피어의 주사 전자 현미경 사진을 도시한 것이다.

도 5는 PLGA 마이크로스피어로부터의 축적된 히스타틴 방출을 도시한 것이며 방출 프로필은 50/50의 비-캡핑형 및 캡핑된 중합체를 사용하여 제조한 수개의 배취로 부터의 공정 파라미터를 변화시킴에 의한 28 내지 60일간에 걸친 방출 조절이다.

도 6은 PLGA 마이크로스피어로부터의 축적된 히스타틴 방출을 도시한 것이며 합성한 방출 프로필들은 50/50의 비-캡핑형 중합체 및 캡핑된 중합체를 사용하여 제조한 수개의 뱃치로부터의 공정 파라미터를 변화시킴에 의한 1 내지 60일간에 걸친 방출 제어이다.

본 발명 명세서에서 생리학적 활성 물질은 모든 수용성 항균제, 항암제, 해열제, 진통제, 항염제, 진해제, 거담제, 진정제, 근육 이완제, 간질치료제, 궤양치료제, 우울증 치료제, 알러지 치료제, 강심제, 부정맥 치료제, 혈관확장제, 고혈압 치료제, 이뇨제, 항응고제, 호르몬제, 항마취제 등이다.

일반적으로, 본 발명에서의 PLGA 마이크로스피어로부터의 생리학적 활성 물질의 "비-일시방출형" 서방성 전달은 90/10 내지 40/60의 몰비 및 말단-캡핑형 중합체에 대한 비-캡핑형 중합체의 비 100/0 내지 1/99에 의해 성취된다.

일반적으로, 빈 캡슐에 봉입시킨 생물학적 활성 물질을 고안하는 방법 및 빈 캡슐/말단-캡된 PLGA 마이크로스피어 및 이들 봉입제제의 특징은 아래에 간단히 기술되었다.

1. 도 2 및 도 4에 도시한 바와 같은 분자량이 8,000 내지 40,000 달톤인 비-캡핑형 중합체/캡핑형 중합체(50/50)를 이용하여 PLGA 마이크로스피어의 표면 형태를 제공한다.

2. 시험관내에서 분자량이 8,000 내지 40,000 달톤이고 몰비가 75/25인 비-캡핑형 중합체/캡핑형 중합체(50/50)를 이용하여 도 3 및 5에 도시한 바와 같은 PLGA 마이크로스피어로부터 폴리펩타이드, 히스타틴의 방출을 제공한다.

예를 들면, 1 내지 12주 생활성 화합물의 방출 시스템의 디자인은, 하기 특성을 갖는 PLGA를 이용하고, 하기 파라미터내에서 현명하게 조합되고 본 발명에 기재된 적절한 수성 유화 방법에 의해 성취한다:

1. 중합체 분자량: 약 2,000 내지 60,000달톤

2. 공중합체 몰비(L/G): 90/10 내지 40/60

3. 중합체 말단 그룹: 비-캡핑형 및/또는 말단-캡핑형

4. 중합체 농도: 5 내지 50%

5. 유상에 대한 내부 수상의 비: 1:5 내지 1:20(v/v)

6. 펩타이드 중량: 2 내지 약 40%(중합체 w/w)

발명의 특이성 및 신규성은 통상 하기와 같이 간단히 요약된다:

1. 생물학적 활성 물질의 붕괴되지 않고 비-일시방출형 지속성 계획방출을 성취하기 위해 1 내지 100일에 걸친 비-캡핑형 폴리(락타이드/글리콜라이드)의 사용.

2. 균일한 구형 형태 및 고른 크기 분포와 같은 보다 우수한 형태 특성을 성취하기 위해 적절한 수성 유화 시스템의 사용.

3. 내부 코아에 첨가제를 사용하지 않고서도, 수성 생리 환경에서 100일 동안 생적합성 및 생분해성 마이크로캡슐로부터 폴리펩타이드 및 다른 생물학적 활성 물질이 일시방출되지 않고 장기간 지속되는 방출.

4. 상이한 분자량 및 공중합체 비율을 갖는 캡핑된 중합체와 비-캡핑형 중합체의 혼합물을 사용하고 공정 파라미터를 조작함으로써 1 내지 100일에 걸쳐 변화되는 기간 동안 계획성 있는 활성 코어의 방출.

5. 특히 캡핑된 중합체/바-캡핑형 중합체의 혼합물(100/0)을 이용하는 경우, 락트산 및 글리콜산과 같은 무해한 성분으로 담체 중합체가 완전한 용해되는 것과 활성 코어의 완전한 방출이 동시에 일어날 것. 이는 상당히 중요한데, 현재 1 내지 30일 운반용으로 사용되는 대부분의 생분해성 중합체들은 의도된 방출기간이 끝날때가지 완전히 분해되지 않아서 투여부위에 잔류하는 중합체의 영향에 대해 관계 당국의 심각한 염려를 유발한다.

6. 비경구(근육내 및 피하), 경구, 국소, 비후, 질 등과 같은 여러 경로를 통해 다양한 형태로 마이크로캡슐의 용이한 투여.

다음 실시예는 본 발명의 마씨크로캡슐 조성물을 설명하지만, 본 발명이 이로써 한정되지는 않는다.

실시예 1

비-캡핑형 중합체를 사용하여 우수한 구 형태(sphere), 구 강도 및 고른 크기 분포를 얻을 수 있도록 개발된 독특한 수성 유화 기술을 사용하여 폴리락타이드/글리콜라이드(PLGA) 마이크로캡슐을 제조한다(도 2와 도 2a 참조). 이러한 제조를 위해, 먼저 중합체를 메틸렌 클로라이드와 같은 염소화 탄화수소 용매에 용해시키고 생물학적 활성 물질을 물에 용해시킨다. 그 다음, 중합체 용액과 활성 물질을 초음파를 사용해 혼합하여 w/o 유제를 제조한 후, 이를 용매(폴리비닐 알콜을 함유하는 포화 수용액) 속에서 안정화시킨다. 그 다음, w/o 유제를 폴리비닐 알콜(1.25 내지 1% w/v)을 함유하는 미리 냉각된(pre-cooled) 외부 수상에 유화시키 3원 유제를 형성시킨다. 용매를 증발시켜 마이크로캡슐을 경화시키고, 세척하여 잔류하는 유화제를 제거한 후, 동결 건조한다.

표 1에는, 이렇게 제조된, 생물학적 활성 폴리펩타이드, 히스타틴(12개의 아미노산으로 이루어지고 분자량이 1563이다) 및 100/0 내지 1/99의 비-캡핑형 중합체와 캡핑형 중합체와의 혼합물을 포함하고 락타이드/글리콜라이드 비가 90/10 내지 40/60이며 분자량이 2000 내지 60,000달톤인 마이크로캡슐 조성물이 열거되어 있다.

실시예 2

마이크로캡슐 조성물을 실시예 1에서 언급한 바와 동일하게 제조하는데, 공중합체 L/G비는 48/52 내지 52/48이고 비-캡핑형 중합체/캡핑형 중합체의 비는 100/0이다. 활성 코어는 히스타틴(Mw 1563)이고 중합체 분자량은 15,000 미만이며 중합체 농도는 7 내지 40중량%로 다양하다. 조성물 1, 2, 4, 12 내지 14 및 16 내지 18을 표 1에 열거한다.

37±1℃에서 pH 7.0로 유지되는 인산 완충된 염수와 같은 수성 생리학적 환경에서 조성물로부터의 활성 코어의 방출 프로파일을 누적 방출 % 대 시간으로서 플롯하고 도 2에 나타낸다.

오일상 속에서의 중합체 농도를 7 내지 40중량%로 다양화함으로써 1 내지 35일의 비-일시방출형의 다양한 방출을 달성한다.

실시예 3

마이크로캡슐 조성물을 실시예 2에서 언급한 바와 동일하게 제조하는데, 수성/오일 비는 1/4 내지 1/20(v/v)로 다양하다. 조성물 1, 2, 4 및 12를 표 1에 열거한다.

실시예 2에서 언급한 수성 생리 환경에서 조성물로부터의 활성 코어의 방출 프로파일을 누적 방출 % 대 시간으로서 플롯하고 도 2에 나타낸다.

내부 코어 속의 w/o비를 상이하게 선택함으로써 개시 시간과 종결 시간이 상이한 1 내지 35일 동안의 비-일시방출형 연속 방출을 달성한다.

실시예 4

마이크로캡슐 조성물을 실시예 2에서 언급한 바와 동일하게 제조하는데, 중합체 분자량은 28,000 내지 40,000이고 중합체 농도는 5 내지 15중량%로 다양하다. 조성물 19 내지 21을 표 1에 열거한다.

실시예 2에서 언급한 수성 생리 환경에서 조성물로부터의 활성 코어의 방출 프로파일을 누적 방출 % 대 시간으로서 플롯하고 도 3에 나타낸다.

중합체 농도를 다양화함으로써 18 내지 40일의 다양한 비-일시방출형 방출을 달성한다.

실시예 5

비-캡핑형 또는 캡핑형 중합체의 비율이 1/99이고 중합체 농도가 5 내지 12중량/중량%로 다양하게 마이크로캡슐 조성물을 실시예 2에서 기술한 바와 같이 제조한다. 조성물 10 및 11을 표 1에 기재하였다.

수성 생리 환경에서 조성물로부터의 활성 코어의 방출 플로파일은 실시예 2에 기술되어 있으며, 시간에 대한 방출 누적 백분율로서 플롯팅한 것을 도 2로 나타내었다.

오일상에서 중합체 농도를 다양하게 함으로써 28 내지 70일 동안의 다양한 비-일시방출형 방출을 달성된다.

실시예 6

중합체 분자량이 28,000 내지 40,000이고 중합체 농도가 5 내지 12중량/중량%로 다양한 마이크로캡슐 조성물을 실시예 5에 기술한 바와 같이 제조한다. 조성 5 및 6을 표 1에 나타내었다.

수성 생리 환경에서 조성물로부터의 활성 코어의 방출 플로파일은 실시예 2에 기술되어 있으며, 시간에 대한 방출 누적 백분율로서 플롯팅한 것을 도 3으로 나타내었다.

중합체 농도를 다양하게 함으로써 28 내지 70일 동안의 다양한 비-일시방출형 방출을 달성된다.

실시예 7

수성/오일 비율이 1/5 내지 1/25로 다양한 마이크로캡슐 조성물을 실시예 6에 기술한 바와 같이 제조한다. 조성물 3 및 7을 표 1에 나타내었다.

수성 생리 환경에서 조성물로부터의 활성 코어의 방출 플로파일은 실시예 2에 기술되어 있으며, 시간에 대한 방출 누적 백분율로서 플롯팅한 것을 도 3으로 나타내었다.

수성/오일 비율을 다양하게 함으로써 28 내지 70일 동안의 다양한 비-일시방출형 방출을 달성된다.

실시예 8

공중합체 비율이 75/25이고 중합체 농도가 5 내지 25중량/중량%로 다양한 마이크로캡슐 조성물을 실시예 5에 기술한 바와 같이 제조한다. 조성물 8 및 9를 표 1에 나타내었다.

수성 생리학적 환경에서 조성물로부터의 활성 코어의 방출 플로파일은 실시예 2에 기술되어 있으며, 시간에 대한 방출 누적 백분율로서 플롯팅한 것을 도 2로 나타내었다.

오일상에서 중합체 농도를 다양하게 함으로써 56 내지 90일 동안의 다양한 비-일시방출형 방출을 달성된다.

실시예 9

활성 코어가 황체형성 호르몬 방출 호르몬(LHRH, 분자량 1182의 데카펩타이드)이며 중합체 농도가 40중량/중량%인 마이크로캡슐 조성물은 실시예 2에 기술되어 있다. 수성 생리 환경에서 조성물로부터의 활성 코어의 방출 플로파일은 실시예 2에 기술되어 있으며, 시간에 대한 방출 누적 백분율로서 플롯팅한 것을 도 4로 나타내었다.

비-일시방출형의 연속적이며 완전한 방출은 히스타틴 아세테이트와 동일하게 35일 이내에 달성된다.

실시예 10

실시예 2에서 기술한 바와 같이 마이크로캡슐 조성물을 제조하되, 이때 방출되는 폴리펩타이드의 생물학적 활성을 유지시키기 위해 나트륨염(탄산염 또는 중탄산염)과 같은 첨가제를 1 내지 10중량/중량%의 농도로 내부 수상에 가한다.

실시예2 및 3에서와 마찬가지로 비-일시방출성이 없이, 1 내지 28일 동안 다양한 방출이 달성되고, 방출된 폴리펩타이드는 나트륨염으로 인해 30일까지 생물학적 활성이 유지된다.

실시예 11

실시예 2에 기술되어 있는 바와 같이 마이크로캡슐 조성물을 제조하되, 비이온성 계면활성 물질, 폴리옥시에틸렌/폴리옥시메프로필렌 블록 공중합체(Pluronics F68 및 F127)와 같은 첨가제를 내부 유상 또는 수상에 10 내지 100%(w/w)의 농도로 가하여, 방출된 폴리펩타이드의 생물학적 활성을 유지시킨다.

실시예 2 및 3에서와 같이 1 내지 35일에 걸쳐 비-일시방출형으로 연속적으로 방출되며, 방출된 플리펩타이드는 계면활성 물질의 존재로 인해 생활성이다.

실시예 12

제2도 및 제3도에 플롯팅된, 실시예 1 내지 11에 기술되어 있는 마이크로캡슐 조성물로부터의 축적 히스타틴 방출도 및 방출 프로파일은, 펩타이드가 1 내지 100일에 걸친 기간 동안 비-일시방출형으로 계획성 있게 방출됨을 입증한다. 실제로, 상기한 도면에 도시되어 있는 바와 같은 각종 조성물을 적절하게 혼합함으로써 임의의 축적 방출 패턴을 100일간에 걸쳐 달성할 수 있다.

Ⅰ. 정부의 권리

본 발명은 정부의 목적에 의해 또는 정부의 목적을 위해 본 발명자에게 어떠한 사용료도 지불하지 않고 제조, 허가 및 사용될 수 있다.

Ⅱ. 관련 출원

본원은 1995년 5월 22일에 출원된 미국 특허원 제08/446,149호의 일부 계속출원이다.

Ⅲ. 발명의 분야

본 발명은 수성 생리환경에서 한꺼번에 일시방출되지 않고(burst free) 100일 동안 계획성 있게 서서히 방출되는 폴리펩타이드 등의 생물학적 활성 물질을 포함하는 생적합성 및 생분해성 마이크로스피어에 관한 것이다.

Ⅳ. 발명의 배경

생분해성 중합체, 특히 폴리(락타이드/글리콜라이드)(PLGA)로부터 활성 물질이 방출되는 기술에 관한 문헌과 특허가 다수 존재한다. 선행기술에서는 PLGA가, 폴리펩타이드의 방출제어를 위해, 20,000 초과 분자량을 위해 75/25 내지 100/0 몰비의 락타이드/글리콜라이드로 사용되었다. PLGA에 관한 다른 선행기술 제조방법에서는 충전제 또는 첨가제를 내부 수층에 사용하여 안정성과 봉입 효율을 개선시키고/거나 수층의 점성을 증가시켜 중합체 가수분해 및 생물학적 활성 물질 또는 폴리펩타이드 방출을 조절하였다.

또한, PLGA 공중합체의 선행기술에서의 사용은 말단을 캡핑시키는 것인데, 이 기술에서 말단의 카복실그룹이 차단된다. 이러한 말단-캡핑형 공중합체에서 마이크로캡슐 제제는 수성 생리환경에 둘 때 처음 24시간 동안 활성 물질로 포함된 폴리펩타이드가 약 10 내지 40% 정도의 낮은 내지 중간 정도의 일시 방출을 나타낸다. 이러한 특성은 어느 정도 내부 수상에 사용된 충전제에 기인한다. 또한, 분자량 20,000 미만의 PLGA의 75/25 공중합체를 사용하면 폴리펩타이드가 1개월간 방출한다고 공지되어 있다.

특히 폴리(락타이드/글리콜라이드)를 사용한 생물학적 활성 물질 또는 폴리펩타이드에 대한 1 내지 2개월 전달 시스템을 수득하기 위해 방출제어 연구 조사가 진행되어 왔다. 그러나 이러한 시스템의 대부분은 하나 이상의 다음 문제를 갖는다: 불량한 봉입 효율, 중합체가 분해될 때까지 중간에 '비방출'되거나 일정 '시간이(lag time) 경과한 후, 대량의' 일시 방출. 보통, 이러한 중합체로부터의 방출은 약 4주 내지 대략 수개월 동안 일어난다. 또한, 이렇게 방출시키기 위해서 분자량>30,000의 50/50 공중합체 또는 분자량>10,000의 75/25 공중합체를 사용하는데, 이는 종종 활성 코어가 방출된 후에도 오래동안 투여 부위에 중합체가 잔류되도록 한다.

V. 발명의 요약

본 발명은, 폴리펩타이드를 포함하는 생리학적 활성 물질을 포함하고, 수성 생리환경에서 100일 동안 일시에 방출되지 않도록 고안된 신규한 생적합성 및 생분해성 마이크로스피어를 제공한다.

젤라틴, 알부민, 덱스트란, 펙틴, 폴리비닐 피롤리돈, 폴리에틸렌 글리콜, 슈가 등과 같은 충전제/첨가제의 사용에 의존하고 여전히 봉입효율이 낮고 "일시방출" 효과를 갖는 통상의 입수가능한 방출 시스템과는 달리, 본 발명은 어떠한 첨가제를 사용하지 않으면서도 고도의 봉입화 및 "비-일시방출형" 방출을 성취한다. 본 발명에서, 비-일시방출형의 계획성 있는 서방출은 분자량 2,000 내지 60,000 달톤 범위의 '비-캡핑형' 및 '말단-캡핑형' 균일한 혼합체인 폴리(락타이드/글리콜라이드) 중합체를 사용하여 달성한다.

일반적으로, 본 발명에서 기술된 마이크로스피어는 균일한 유화 기술에 의해 제조하는데, 내부 유중수(w/o) 유제를 유화 안정화제를 함유하는 용매-포화된 수상에 분산시킴으로써 안정화시킨다. o/w 유화제를 함유하는 미리 식힌 외부 수상에 상기 w/o 유제를 유화시켜 w/o/w 3원 유제를 형성한다. 내부 w/o 유제는, 필수적으로, 봉입된 활성 물질 2 내지 20%(w/w)를 함유하는 수층 및 5 내지 약 50%(w/w 유상)의 폴리(락타이드/글리콜라이드) 공중합체를 함유하는 유층으로 이루어진다. 이 공중합체는, 90/10 내지 40/60의 락타이드/글리콜라이드 몰조성 및 이의 비-캡핑형 및 말단-캡핑형을 100/0 내지 1/99의 비로 함유하면서, 2,000 내지 약 60,000 달톤 범위의 분자량을 포함한다. 중합체 분자량 및 구조 형태에 따라 약 80 내지 100%의 고도의 캡슐화 효율성이 성취된다.

1 내지 100일의 변화 가능한 기간에 걸친 활성 코어의 계획적인 방출은 중합체 농도, 펩타이드 농도 및 수성/유상 비와 같은 공정 파라미터의 현명한 선택에 의해 달성한다.

본 발명은, 특히 분자량 1,000 내지 약 250,000 달톤 분자량의 폴리펩타이드의 봉입화 고효율성 및 비-일시방출형, 계획적이고도 지속적인 방출, 및 기타 생리학적 활성 물질의 1 내지 100일간에 걸친 방출에 적합하다. 본 발명의 특이성은 비-캡핑형 및 캡핑형 중합체의 100/0 혼합을 사용할 경우, 활성 코어 방출의 최종 단계에서는 락트산 및 글리콜산과 같은 중합체의 완전한 용해성을 수반한다는 것이다. 이는 통상적으로 구입할 수 있는 방출 시스템에 비하여 중요한 잇점 인데, 통상적인 방출 시스템에서는 제어의 주요 관심이 활성 코어의 방출 후 투여 부위에서 잔류하는 중합체의 장기 독성에 관한 것이다.

본 발명에 기술된 마이크로캡슐은 비경구(근육내, 피하내), 경구, 국소, 비강, 직장 및 질과 같은 여러 경로를 통한 투여에 적합하다.

Ⅵ. 도면의 간단한 설명

도 1은 통상적인 시스템 대 방출제어 시스템으로부터 약물 방출을 비교한 것이다. 통상적인 투여에서의 피크(peak) 및 골(valley)에서의 농도는, 방출제어 투여에서 보이는 안정된 치료수준과는 대조적으로 나타난다.

도 2는 본 발명의 방법에 따라서 Mw 8 내지 12k 달톤의 50/50 비-캡핑형 중합체를 사용하여 제조된 PLGA 마이크로스피어체의 전자 주사 조직 사진을 도시한 것으로서 우수한 구 형태, 구 보존성 및 고른 크기 분포를 도시한다.

도 2a는 Mw 8 내지 12k 달톤의 50/50 12k 비-캡핑형 중합체를 사용하여 통상의 용매 증발법에 따라서 제조된 PLGA 마이크로스피어체의 전자 주사 조직 사진을 도시한다.

도 3은 PLGA 마이크로스피어체로부터의 누적 히스타틴 방출을 도시하는 것으로서, 몇몇 뱃치로부터의 방출 프로파일은 50/50 비-캡핑형 중합체(Mw 8 내지 12k 달톤)를 사용하여 제조되고, 공정 변수는 방출을 조정하기 위해 1 내지 35일로 변한다.

도 4는 본 발명의 방법에 따라서 50/50 말단-캡핑된 중합체(Mw 30 내지 40k 달톤)를 사용하여 제조된 PLGA 마이크로스피어체의 고체의 평활한 구 표면의 전자 주사 조직 사진을 도시한다.

도 5는 PLGA 마이크로스피어로부터의 누적 히스타틴 방출을 도시하는 것으로서, 몇몇 뱃치로부터의 방출 프로파일은 Mw 30 내지 40k 달톤인 50/50 비-캡핑형 및 말단-캡핑형 중합체를 사용하여 제조되고, 공정 변수는 방출을 조정하기 위해 28 내지 60일로 변한다.

도 6은 PLGA 마이크로스피어로부터의 누적 히스타틴 방출을 도시하는 것으로서, 몇몇 뱃치로부터 합해진 방출 프로파일은 Mw 8 내지 40k 달톤의 50/50 비-캡핑형 및 말단-캡핑형 중합체(Mw 8 내지 12k 달톤)를 사용하여 제조되고, 공정 변수는 방출을 조정하기 위해 1 내지 60일로 변한다.

도 7은 Mw 8 내지 12k 달톤의 비-캡핑형 중합체를 사용하여 제조된 PLGA 마이크로스피어로부터의 LHRH의 누적 방출율을 도시한다.

Claims (35)

1. 비-캡핑형 대 말단-캡핑형의 몰비가 100/0 내지 1/99이고 폴리락타이드 대 폴리글리콜라이드의 몰비가 90/10 내지 40/60인 비-캡핑형 및 말단-캡핑형 생분해성 폴리(락타이드/글리콜라이드) 혼합물에 봉입된 활성 물질을 포함하는, 생물학적 활성 물질을 1 내지 100일간에 걸쳐 비-일시방출형(burst-free)으로 지속적이고도 계획성 있게 방출시키기 위한 방출 제어형 마이크로캡슐 제제.
2. 제1항에 있어서, 비-캡핑형 및 말단-캡핑형 중합체의 락타이드 대 글리콜라이드(L/G) 공중합체 몰비가 52/48 내지 48/52인 마이크로캡슐 제제.
3. 제2항에 있어서, 공중합체의 분자량이 2,000 내지 60,000달톤인 마이크로캡슐 제제.
4. 제1항에 있어서, 생물학적 활성 물질이 펩타이드 또는 폴리펩타이드인 마이크로캡슐 제제.
5. 제4항에 있어서, 폴리펩타이드가 12개의 아미노산으로 이루어진 분자량 1563의 히스타틴인 마이크로캡슐 제제.
6. 제5항에 있어서, 히스타틴이, L/G의 몰비가 48/52 내지 52/48이고 분자량이 15,000 미만이며 비-캡핑형 및 말단-캡핑형 폴리(락타이드/글리콜라이드)의 몰비가 100/0 내지 1/99 혼합물에 의해, 수성 생리환경내에서 1 내지 35일에 걸쳐 완전히 방출됨을 특징으로 하는 마이크로캡슐 제제.
7. 제5항에 있어서, 히스타틴이, L/G의 몰비가 48/52 내지 52/48이고 분자량이 28,000 내지 40,000 미만이며 비-캡핑형 및 말단-캡핑형 폴리(락타이드/글리콜라이드)의 몰비가 100/0 내지 1/99인 혼합물에 의해, 수성 생리환경내에서 18 내지 40일에 걸쳐 완전히 방출됨을 특징으로 하는 마이크로캡슐 제제.
8. 제5항에 있어서, L/G 몰비가 48/52 내지 52/48이고 분자량 범위가 10,000 내지 40,000달톤인 비-캡핑형 폴리(락타이드/글리콜라이드)와 말단-캡핑형 폴리(락타이드/글리콜라이드)의 몰비가 100/0 내지 1/99인 혼합물에 의해 수성 생리 환경내에서 28 내지 70일에 걸쳐 방출된 히스타틴의 용량이 90중량% 이하임을 특징으로 하는 마이크로캡슐 제제.
9. 제5항에 있어서, L/G 몰비가 75/25이고 분자량이 15,000달톤 미만인 비-캡핑형 폴리(락타이드/글리콜라이드)와 말단-캡핑형 폴리(락타이드/글리콜라이드)의 몰비가 100/0 내지 1/99인 혼합물에 의해 수성 생리학적 환경에서 56 내지 100일에 걸쳐 방출된 히스타틴의 방출 용량이 80중량% 이하임을 특징으로 하는 마이크로캡슐 제제.
10. 제5항 내지 제9항 중의 어느 한 항에 있어서, 분자량이 1,500 내지 3,000달톤이고 쇄 길이가 아미노산 11 내지 24인 다음과 같은 구조의 히스타틴 유사체를 갖는 마이크로캡슐 제제.

    
11. 제4항에 있어서, 생물학적 활성 물질이, 아세테이트 형태의 폴리펩타이드 황체화 호르몬 방출 호르몬(LHRH)으로서 아세테이트 형태의 분자량이 1182이고 데카펩타이드이며 구조가 다음과 같은 마이크로캡슐 제제.

    
12. 제4항에 있어서, 폴리펩티드의 분자량이 1,000 내지 250,000달톤인 마이크로캡슐 제제.
13. 제4항 내지 제9항, 제11항 및 제12항 중의 어느 한 항에 있어서, 봉입된 폴리펩타이드가 CFA/I, CFA/II, CS1, CS3, CS6 및 CS17과 같은 엔테로독소성 이. 콜라이(ETEC) 및 기타 ETEC 관련 엔테로독소에 대한 백신인 마이크로캡슐 제제.
14. 제4항 내지 제9항, 제11항 및 제12항 중의 어느 한 항에 있어서, 봉입된 폴리펩티드가, 분자량 범위가 800 내지 5000 달톤이고 장독소 생성 이. 콜라이(ETEC)에 대한 면역을 위한 펩타이드 항원으로 이루어진 마이크로캡슐 제제.
15. 제1항, 제2항 또는 제3항 중의 어느 한 항에 있어서, 생물학적 활성 물질이, 분자량이 100 내지 100,000달톤인 수용성 호르몬 약물, 항생제, 항종양제, 항소염제, 해열제, 진통제, 항해소제, 거담제, 진정제, 근육 완화제, 항간질발작제, 항궤양제, 항우울증제, 항알레르기약, 강심제, 항부정맥약, 혈관확장약, 항고혈압제, 이뇨제, 항응고제 및 항마취제로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 마이크로캡슐 제제.
16. 제1항, 제2항, 제3항, 제4항, 제5항 또는 제6항 중의 어느 한 항에 있어서, 생분해성 폴리(락타이드/글리콜라이드)가 유상 중에 1 내지 50%(w/w)로 존재하는 마이크로캡슐 제제.
17. 제1항, 제2항, 제3항, 제4항, 제5항, 제6항 내지 제9항, 제11항 및 제12항 중의 어느 한 항에 있어서, 활성 물질의 농도 범위가 0.1 내지 60%(w/w)인 마이크로캡슐 제제.
18. 제1항, 제2항, 제3항, 제4항, 제5항, 제6항 내지 제9항, 제11항 및 제12항 중의 어느 한 항에 있어서, 수상 대 유상의 비가 1/4 내지 1/40(v/v)인 마이크로캡슐 제제.
19. 생분해성 폴리(락타이드/글리콜라이드)를 비-캡핑형으로 메틸렌 클로라이드에 용해시키고, 생물학적 활성 물질 또는 활성 코어를 물 속에 용해시키는 단계,

    수층을 중합체 용액에 가하고 유화시켜 내부에 유중수(w/o) 유화제를 제공하는 단계,

    수중유(o/w) 유화제를 함유하는 용매 포화 수상 속에서 w/o 유화액을 안정화시키는 단계,

    w/o 유화액을 수중유 유화제를 함유하는 외부 수성에 가하여 3원 유화액(w/o/w)을 형성하는 단계,

    수중유중수(w/o/w) 유화액을 충분한 시간동안 교반하여 용매를 제공하는 단계 및 경화된 마이크로캡슐을 물로 세척하고 이를 동결건조시키는 단계를 포함하는, 생물학적 활성 물질이 비-일시방출형의 계획성 있게 서방출되는 것을 특징으로 하는 방출 제어형 마이크로캡슐 제제를 제조하는 방법.
20. 생분해성 폴리(락타이드/글리콜라이드)를 메틸렌 클로라이드에 말단-캡핑형 형태로 용해시키고, 생분해성 활성 물질 또는 활성 코어를 물에 용해시키고; 수층을 중합체 용액에 가하고 유화시켜 내부 유중수 유제를 제공하고; 수중유(o/w) 유화제를 포함하는 용매-포화 수용액에서 w/o 유제를 안정화시키고; w/o 유제를 수중유 유화제를 포함하는 외부 수성층에 가하여 3원(w/o/w)유제를 형성시키고; 생성된 수유중수(w/o/w)를 충분한 시간 동안 교반하여 용매를 제거하고; 경화된 마이크로캡슐을 물로 세척한 다음; 경화된 마이크로캡슐을 동결건조시킴을 포함하는, 비-일시방출형의 계획성 있게 서방출되는 것을 특징으로 하는, 방출 제어형 마이크로캡슐 제제의 제조방법.
21. 제19항 또는 제20항에 있어서, 용매 포화된 외부 수상이 내부 w/o 유제를 유화시킨 다음 외부 수층을 가하여 0.05 내지 500㎛의 고른 크기 분포 범위의 마이크로캡슐을 제공하는 제조방법.
22. 제19항 또는 제20항에 있어서, 내부 w/o 유제의 제조 동안 약 0 내지 4℃의 저온이 제공되고, w/o/w 유제의 제조 동안 약 4 내지 20℃의 저온이 제공되어 안정한 유제 및 높은 봉입 효율을 제공하는 제조방법.
23. 제19항에 있어서, 비-캡핑형 및 말단-캡핑형 중합체의 100% 혼합체를 사용하여 지체상태(lag phase)없이 지속형 및 서방형으로 활성 코어가 방출되도록 하는 제조방법.
24. 제4항에 있어서, 봉입된 폴리펩타이드가 낮은 pH에서 활성인 경우, LHRH, 아드레노크로티코프로픽 호르몬, 상피 성장 인자, 칼시토닌 방출된 폴리펩타이드가 생활성인 마이크로캡슐 제제.
25. 제4항 내지 제9항 중의 어느 한 항에 있어서, 방출된 펩타이드의 생활성이 유지되도록 내부 수상에 무기 염의 pH 안정화제를 더 포함하는 마이크로캡슐 제제.
26. 제4항 내지 제9항 중의 어느 한 항에 있어서, 방출된 펩타이드의 생활성이 유지되도록 내부 수상에 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르 또는 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 블록 공중합체와 같은 비이온성 계면활성 물질을 더 포함하는 마이크로캡슐 제제.
27. 제25항에 있어서, 내부 수상에 pH 안정화제를 첨가하는 것이 산성 pH 민감성 폴리펩타이드를 성공적으로 봉입하는데 있어서 바람직하지 않은 경우, 상기 pH 안정화제가 위약 스피어에 함유된 형태로 폴리펩타이드 함유-스피어와 함께 포함되는 마이크로캡슐 제제.
28. 제26항에 있어서, 내부 수상에 비이온성 계면활성 물질을 첨가하는 것이 산성 pH 민감성 폴리펩타이드를 성공적으로 캡슐화하는데 있어서 바람직하지 않은 경우, 상기 비이온성 계면활성 물질이 위약 스피어에 함유된 형태로 폴리펩타이드 함유-스피어와 함께 포함되는 마이크로캡슐 제제.
29. 제1항, 제3항 내지 제9항, 제11항 및 제12항 중의 어느 한 항에 있어서, 봉입물질이 완전히 방출되는 것과 공중합체가 완전히 가용화되는 것이 동시에 일어나서 투여 부위에 중합체가 전혀 잔류하지 않는, 캡핑 또는 비캡핑 중합체를 포함하는 마이크로캡슐 제제.
30. 제1항, 제2항, 제3항 내지 제8항, 제11항 및 제12항 중의 어느 한 항에 있어서, 사람에게 비경구 투여되는 마이크로캡슐 제제.
31. 제1항, 제2항, 제3항 내지 제9항, 제11항 및 제12항 중의 어느 한 항에 있어서, 사람에게 국소 투여되는 마이크로캡슐 제제.
32. 제1항, 제2항, 제3항 내지 제9항, 제11항 및 제12항 중의 어느 한 항에 있어서, 사람에게 경구 투여되는 마이크로캡슐 제제.
33. 제1항, 제2항, 제3항 내지 제9항, 제11항 및 제12항 중의 어느 한 항에 있어서, 사람에게 경비, 경피, 직장 또는 질내 투여되는 마이크로캡슐 제제.
34. 제26항에 있어서, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르가 트윈 80, 트윈 60 또는 트윈 20인 마이크로캡슐 제제.
35. 제26항에 있어서, 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 블록공중합체가 플루로닉스(Pluronics)인 마이크로캡슐 제제.

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