KR100492916B1 - Lactobacillus for improving weight gain and environmental condition in brolier - Google Patents
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Abstract
본 발명은 육계 증체향상과 사육환경 개선에 효과가 있는 유산균 및 급여방법에 관한 것으로서, 5주령 육계의 맹장에서 분리한 유산균 락토바실러스 류테리 아비브로투(Lactobacillus reuteri avibro2)를 제공하기 위한 것이다. The present invention relates to lactic acid bacteria and feeding method effective for improving broiler breeding and improving the breeding environment, and to provide lactobacillus Lactobacillus reuteri avibro2 isolated from the caecum of 5 week old broilers.
상기 본 발명의 유산균은, 가금소화기관에서 유래하였기 때문에 내산성 및 내담즙성이 우수하여 소화기관내 생존이 용이한 것을 나타났다. Since the lactic acid bacteria of the present invention are derived from a poultry digestive organ, it has been shown to be excellent in acid resistance and bile resistance, thereby making it easy to survive in the digestive organ.
특히, 이를 동일축종인 육계의 사료에 첨가하여 급여하였을 때 사료 섭취량이 증가하며 증체량증가 및 사료요구율이 개선되어 생산성을 향상시킬 수 있는 이점이 있다. In particular, when the feed is added to the feed of broiler chickens of the same breed, feed intake is increased, weight gain and feed rate is improved to improve the productivity.
또한, 연변 발생을 억제시켜 바닥깔짚의 수분함량을 감소시킴으로서 닭고기의 품질이 개선되어지며, 계분내 암모니아 발생량을 감소시켜 호흡기성 질병 등 소모성 질병을 억제할 수 있게되는 것이다. In addition, the quality of the chicken is improved by reducing the moisture content of the bottom litter by inhibiting the occurrence of stool, it is possible to suppress the exhaustive diseases such as respiratory diseases by reducing the amount of ammonia in the system.
Description
본 발명은 유산균에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 유산을 생성하여 유해세균의 발육억제 및 정상적인 대사작용을 유지시킴으로서 육계사료에 급여하였을때 육계의 증체향상에 기여할 수 있는 신규한 유산균의 제공 및 사료급여방법에 관한 것이다. The present invention relates to lactic acid bacteria, and more particularly, to provide a novel lactic acid bacteria that can contribute to the enhancement of broilers when fed to broiler feed by maintaining the growth and normal metabolism of harmful bacteria by producing a lactic acid, and feed It is about a method.
일반적으로, 가금(家禽)의 경우 부화후 주위환경과 사료를 섭취하면서 소화기관에 미생물이 존재하게 된다. 육계의 경우 7∼10일경에 성계와 비슷한 일정한 미생물상이 성립되며, 각각의 미생물은 공생 혹은 경쟁적 배타작용을 하면서 여러 가지 역할을 수행하게 된다. 숙주동물에게 유용한 미생물은 병원성 유기물의 집락 방지, 면역반응 발달 강화, 비타민 생산, 영양소 소화작용 등에 관여한다. Generally, in the case of poultry, the microorganisms are present in the digestive tract while ingesting the environment and feed after incubation. In broilers around 7-10 days, a certain microorganism similar to the stellar system is established, and each microorganism plays a role in symbiosis or competitive exclusion. Microorganisms useful for host animals are involved in preventing colonization of pathogenic organisms, enhancing immune response development, producing vitamins, and digesting nutrients.
한편, 닭은 사육과정중에 여러 가지 스트레스를 받게되는 데 스트레스 요인으로는 이동, 유해가스, 불량사료, 소음, 과밀, 예방접종, 추위, 더위 등이다. 이러한 스트레스로 인하여 장내 미생물은 균형을 잃게 되며 체내의 방어체계는 약화되는데 이러한 이유로 현재 육계사료는 항생제를 이용하고 있다. On the other hand, chickens are subject to a variety of stress during the breeding process, the stress factors are movement, harmful gas, poor feed, noise, overcrowding, vaccination, cold, heat and the like. This stress causes intestinal microbes to lose balance and weakens the body's defenses. For this reason, broiler feed currently uses antibiotics.
그러나 가축에서 항생제의 사용은 생산물의 잔류문제를 제기하며, 인체에서는 약물에 대한 저항성 유기체의 생성문제를 야기하는 문제로 인하여 유럽과 미국 등 축산선진국에서는 항생제 대치용으로 생균제를 이용하므로써 위생적인 축산물생산과 소비자의 기호성을 높이려는 방향으로 연구가 진행되고 있다. However, the use of antibiotics in livestock raises the problem of residues in the production, and the human body causes problems in the production of drug-resistant organisms, and in developed countries such as Europe and the United States, it is possible to produce hygienic livestock products by using probiotics for antibiotic replacement. Research is underway to increase the preference of consumers and consumers.
생균제(Probotics)는 생균 및 생균 증식촉진물로 동물뿐만 아니라 식물이나 음식물 고유의 세균총에 유익한 영향을 나타내는 것으로 정의되며, 세균 (Bacteria), 곰팡이(Fungi), 효모(Yeast)가 포함된다. 유산균은 현재 가장 많이 이용되는 생균제의 하나로 비피더스균( Bifidobacterium ), 유산구균( Streptococcus ), 유산간균( Lactobacillus )이 있다. 유산균은 소화기관 전체에 걸쳐 존재하는 균으로써 유산을 생성하여 유해세균의 발육억제 및 정상적인 대사작용을 유지시켜 주며 엑시도필린, 락토바실린, 락토시린, 애시플린, 류테린 등의 항생물질을 생산하기도 한다.Probotics are probiotics and proliferation promoters that are defined as having a beneficial effect on bacterial flora inherent to plants or food as well as animals, and include bacteria (Bacteria), fungi, and yeasts. Lactobacillus is one of the most widely used probiotics are Bifidobacterium , Streptococcus , Lactobacillus . Lactobacillus is a bacterium that exists throughout the digestive tract, producing lactic acid to inhibit the growth of harmful bacteria and maintain normal metabolic activity. Sometimes.
한편, 생균제가 가축의 소화기관에서 생존하기 위해서는 기본적으로 위의 낮은 pH와, 십이지장의 담즙에 대한 저항성이 있어야 한다. 또한 사료에 의해서 생존에 영향을 받지 않아야 한다. On the other hand, in order for probiotics to survive in the digestive tract of livestock, it must basically have low pH of stomach and resistance to bile of duodenum. It should also not be affected by survival by the feed.
가축에 생균제로 이용되는 유산균의 유래가 과거에는 토양, 동물에서 유래한 것을 이용하였으나, 현재는 소나 돼지와 같은 동물에서 분리한 것이 대부분이며 가금소화기관에서 유래한 유산균제는 아직 보고되지 않았고, 가금용 유산균제 역시 국내에서 생산되지 않고 있다. Origin of lactic acid bacteria used as a probiotic in livestock originated from soil and animals However, at present, most of them are separated from animals such as cows and pigs, and lactic acid bacteria derived from poultry digestive organs have not yet been reported, and poultry lactic acid bacteria have not been produced in Korea.
그러나 동일축종에서 유래한 미생물은 비슷한 환경하에서 생존을 하였기 때문에 동일축종에 급여시 타 균주보다는 생존이 용이하다는 측면과 반추가축이나 돼지와 같은 포유동물에 비하여 조류인 닭은 소화기관이 약간 차이가 있기 때문에 가금전용 생균제의 필요성이 제기되었다. However, because microorganisms derived from the same livestock survived under similar conditions, it is easier to survive than other strains when fed to the same livestock, and birds of chickens have a slightly different digestive organs than mammals such as ruminants or pigs. This raises the need for probiotics for poultry.
따라서, 본 발명은 가금소화기관에서 유래한 가금용 유산균제 및 사료급여방법을 제공함으로서, 이를 동일 축종인 육계의 사료에 첨가하였을때 타 균주에 비해 사료섭취량 및 증체량을 증가시킬 수 있도록 하는데 목적이 있다. Accordingly, the present invention provides a poultry lactic acid bacterium derived from a poultry digestive organ and a feed feeding method, and when added to a feed of broilers of the same breeding animal, the purpose of the present invention is to increase feed intake and weight gain compared to other strains. have.
상기 목적은, 5주령 육계의 맹장에서 분리한 유산균 락토바실러스 류테리 아비브로투( Lactobacillus reuteri avibro2)를 통해 이룰 수 있게된다.The object can be achieved through Lactobacillus reuteri avibro2 isolated from the caecum of a 5 week old broiler.
이하, 본 발명을 첨부도면을 참조하여 보다 상세히 살펴보기로 한다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the accompanying drawings.
본 발명에서는 소화기관내 유산균중 가장 우수하다고 인정되는 맹장에서 유산균을 11주를 분리하여 내산성과 내담즙성이 우수한 2가지 균주를 분리 동정하였다. In the present invention, 11 strains of lactic acid bacteria were isolated from the cecum recognized to be the best among the lactic acid bacteria in the digestive tract, and two strains having excellent acid resistance and bile resistance were identified.
분리, 동정된 개발유산균 락토바실러스 류테리 아비브로투( Lactobacillus reuteri avibro 2 : 수탁번호 KFCC-11196)의 특징은 다음과 같다. Lactobacillus reuteri avibro 2 (Accession No. KFCC-11196) was isolated and identified as Lactic acid bacterium Lactobacillus ruteri abibrotu.
가. 균의 형태 end. Morphology
ㆍ로고사(Rpgoas)아가배지 37℃, 2일간 배양했을 때 균의 형태 ㆍ Rpgoas agar medium at 37 ° C for 2 days
- 세포의 형태 : 간균 Cell type: bacilli
- 운동성 : 없음 Mobility: None
- 포자형성능 : 없음 -Spore Formability: None
- 그람(Gram) 염색 : 양성 Gram staining: positive
나. 생리적 성질 I. Physiological properties
1) 최적생장온도 : 37∼39℃ 1) Optimum growth temperature: 37 ~ 39 ℃
2) 최적생육 pH : 6.3 ∼ 6.7 2) Optimum growth pH: 6.3 ~ 6.7
3) 산소에 대한 영향 : 통성혐기성 3) Effects on Oxygen: Breathable Anaerobic
4) 젖산생산유무 : + 4) Lactic acid production status: +
다. 균주의 동정결과(16S rRNA sequencing) All. Identification result of strain (16S rRNA sequencing)
① Pyrogenic tree ① Pyrogenic tree
도 1 참조 See Figure 1
상기의 결과에서 avibor2는 락토바실러스 류테리와 가장 근접한 것으로 나타났다. In the above results, avibor2 was found to be closest to the Lactobacillus rutheri.
위의 유산균에 대한 특성실험 결과를 이하에서 상세히 살펴보기로 한다. The characteristics test results for the above lactic acid bacteria will be described in detail below.
<실시예 1. 내산성 및 내담즙성 결과> Example 1 Acid Resistance and Bile Resistance Results
실험방법) 내산성 조사에서 맹장유래 유산생성균 11종 각각의 균을 37℃에서 24시간 MRS broth에 배양하고, 2000g로 원심분리 후 바닥에 있는 pellet을 멸균된 PBS로 2회 세척하였다. pH가 1, 2, 3, 4로 조정된 PBS 2ml에 0.1ml씩 접종하여 37℃에서 4시간동안 성장을 관찰하였다. 내담즙성 조사는 37℃에서 24시간동안 MRS broth에 배양된 균배양액을 Bile salt 0.3%, 0.5% 첨가된 10ml의 MRS broth에 접종하였다. 접종된 배양액을 37℃에서 6시간동안 보관하며 매 시간 660nm 상태에서 비색계로 흡광도를 측정하였다. Experimental method) In the acid resistance investigation, each of the 11 strains of cecum-derived lactic acid-producing bacteria was incubated in MRS broth at 37 ° C for 24 hours, and centrifuged at 2000g to sterilize pellets at the bottom. Wash twice with PBS. 0.1 ml was inoculated in 2 ml of PBS adjusted to pH 1, 2, 3, 4, and growth was observed at 37 ° C. for 4 hours. Bile resistance was inoculated with 10 ml of MRS broth added 0.3%, 0.5% Bile salt in culture culture in MRS broth for 24 hours at 37 ℃. The inoculated culture was stored at 37 ° C. for 6 hours and absorbance was measured with a colorimeter at 660 nm every hour.
결과) 하기 [표 1]은 내산성 결과를 나타낸 것인데 맹장유래 유산균 11주중 개발균주와 미동정 유산균 9주중 1주를 비교하였다. 미동정 유산균은 [표 1]의 미동정균주와 비슷한 결과를 보였다. Results) [Table 1] shows the acid resistance results, and compared the development strains among the 11 weeks of the cecal-derived lactic acid bacteria and one of the 9 unidentified lactic acid bacteria. The unidentified lactic acid bacteria showed similar results to the unidentified strains of [Table 1].
<표 1>TABLE 1
육계 맹장내 유산균과 개발균주와의 내산성 비교 Comparison of Acid Resistance of Lactic Acid Bacteria and Developmental Strains in Broiler Caecum
상기 결과에서, 모든 유산균은 pH 1과 2에서는 대부분의 유산균주가 배양즉시 모두 사멸하였으나 Lactobacillus reuteri avibro 2는 1시간까지 견디는 것으로 나타났다. pH 3에서는 Lactobacillus reuteri avibro 2는 계속적으로 생존이 가능한 것으로 나타났으며 나머지 균주는 배양후 1∼2시간 이내에 사멸하는 것으로 나 타났다. pH4에서는 대부분의 균주가 생존이 가능한 것으로 나타났다.In the above results, all of the lactic acid bacteria at pH 1 and 2, most of the lactic acid bacteria were killed immediately upon incubation, but Lactobacillus reuteri avibro 2 was found to withstand up to 1 hour. At pH 3, Lactobacillus reuteri avibro 2 was shown to be viable and the remaining strains were killed within 1 to 2 hours after incubation. At pH 4, most strains were found to be viable.
하기 [표 2]에서는 개발균주와 일반균주의 내담즙성을 비교한 것이다. In Table 2 below, the bile resistance of the developed and general strains is compared.
내담즙성 결과 개발균주인 Lactobacillus reuteri avibro 2는 담즙에 대한 저항성이 일반 유산균보다 강한 것으로 나타났다.As a result of biliary resistance, the developmental strain Lactobacillus reuteri avibro 2 was found to be more resistant to bile than normal lactic acid bacteria.
<표 2>TABLE 2
육계 맹장내 유산균과 개발균주와의 내담즙성 비교 Comparison of Bile Resistance between Lactic Acid Bacteria and Developmental Strains in Broiler Caecum
상기 실험결과에서 육계 소화기관중 가장 낮은 pH를 나타내는 곳이 선위인데 일반적으로 사료 섭취시 pH가 4∼5정도이므로 맹장유래 대부분의 유산균은 사료에 첨가되어 위를 통과하더라도 생존이 가능한 것으로 나타났다. 그러나 담즙에 대한 저항성은 균주마다 심한 차이를 보였다. 담즙은 섭식물이 선위를 통과하고 십이지장에 도달할 때 접하게 되는데 유산균의 생존에 가장 큰 영향을 미친다. 그것은 유산균은 유산을 생성하는 균이기 때문에 산에 대한 적응력이 더 높기 때문이다. 개발균주는 대부분의 일반균주에 비하여 담즙에 대한 저항성이 우수하여 생균제적 가치가 입증되었다. In the above experimental results, the lowest pH of broiler digestive organs is located in the stomach, and in general, since the pH is about 4-5 when feed is ingested, most of the lactobacillus derived from caecum is added to the feed and survived even if it passes through the stomach. However, the resistance to bile showed a severe difference between strains. Bile is encountered when feeding plants reach the stomach and reach the duodenum, which has the greatest impact on the survival of lactic acid bacteria. This is because lactic acid bacteria have higher adaptability to acid because they are lactic acid bacteria. The developed strains proved to have probiotic value because they had better resistance to bile than most common strains.
<실시예 2. 육계 사양실험> <Example 2. Broiler Specification Test>
실험방법) 개발 유산균을 육계사료에 g당 10 4 ∼10 7 cfu 수준으로 첨가하여 평사에서 5주간 사양 시험이 실시되었다. 비교예는 유산균 무첨가구이며, 실험예는 Lactobacillus reuteri avibro 2를 상기 수준으로 육계사료에 첨가한 것이다. 실험사료는 비교예와 실험예 공히 1∼3주령까지 대사에너지 3,106 kcal/kg, 조단백질 22.02% 수준을, 3∼5주령까지는 각각 3,102kcal/kg, 20.01% 함유된 사료였다. 계사내 환경상태를 조사하기 위하여 바닥깔짚의 수분함량과 분내 암모니아 발생량을 측정하였다. 바닥깔짚은 사양시험 직전과 사육과정중 1,3,5주령에 시료를 채취하여 조사하였으며 분내 암모니아는 신선계분을 채취하여 가스포집통에 담아 호기조건으로 상온에서 보관하면서 가스검지관을 이용하여 7일간 측정하였다.Experimental Method) The five weeks feeding trial was conducted in the stereographic by the addition of lactic acid bacteria in the development 10 4 ~10 7 cfu per g level in broiler feed. Comparative Example is a lactobacillus-free addition, Experimental Example is the addition of Lactobacillus reuteri avibro 2 to broiler feed at this level. The experimental feeds contained 3,106 kcal / kg of metabolic energy and 22.02% of crude protein up to 1 to 3 weeks of age, and 3,102 kcal / kg and 20.01% of 3 to 5 weeks of age, respectively. The moisture content of the litter and the amount of ammonia in the litter were measured to investigate the environmental conditions in the house. The bottom litter was sampled at 1, 3 and 5 weeks of age immediately before the specification test and during the breeding process. The ammonia in the powder was collected from fresh ginseng and stored in a gas collection container at room temperature under aerobic conditions. Measured daily.
결과) [표 3]에서는 주령별 체중변화를 나타낸 것인데, 1주령부터 실험예가 비교예에 비하여 발육속도가 빨랐으며 5주령시 1수당 체중이 비교예에 비하여 실험예는 85g이 더 높았다. Results) [Table 3] shows the change in weight by age, the experimental example from 1 week of age was faster growth rate than the comparative example, the weight per 1 at 5 weeks of the experimental example was 85g higher than the comparative example.
<표 3>TABLE 3
비교예와 본 발명 실험예의 체중변화 비교 (단위 : g) Comparison of weight change between the comparative example and the experimental example of the present invention (unit: g)
하기 [표 4]는 사료효율을 나타내었는데 수당 사료섭취량이 비교예에 비하여 실험예가 54g정도 더 섭취하였으며 사료요구율은 실험예가 확연히 개선되는 결과를 보였다. [Table 4] shows the feed efficiency, but the amount of feed intake was increased by about 54g compared to the comparative example, and the feed rate was significantly improved.
<표 4>TABLE 4
비교예와 본 발명 실험예의 사료효율 비교 Feed Efficiency Comparison between Comparative Example and Experimental Example of the Invention
하기 [표 5]는 바닥깔짚의 수분함량을 비교한 것인데 사육기간이 3주를 경과하면서 실험예가 비교예에 비하여 수분함량이 감소한 것으로 나타났다. [Table 5] is a comparison of the moisture content of the bottom litter, the experimental period was found to decrease the moisture content as compared to the comparative example as the breeding period is over three weeks.
<표 5>TABLE 5
비교예와 본 발명 실험예의 깔짚내 수분함량 비교 (단위 %) Comparison of moisture content in litter between Comparative Example and Experimental Example of the present invention (unit%)
[표 6]은 계분의 암모니아 가스 발생량을 비교한 것인데 4일째까지 발생량을 보면 비교예에 비하여 실험예가 2∼4.6배 정도 낮게 나타났다. [Table 6] is a comparison of the amount of ammonia gas generated by the system powder, and when the amount is generated up to 4 days, the experimental example is 2 to 4.6 times lower than the comparative example.
<표 6>TABLE 6
비교예와 본 발명 실험예의 계분 암모니아 발생량 비교 (단위 : ppm) Comparison of Ammonia Generation Amount in Comparative Example and Experimental Example of the Invention (Unit: ppm)
개발균주 첨가 사양시험에서 사료섭취량의 증가는 사료의 기호성 및 소화기능이 개발균주로 인하여 증진되었고 따라서 체중증가 및 사료효율 등 생산성이 개선되었다. 또, 육계는 일반적으로 대부분이 평사에서 사육되기 때문에 바닥깔짚의 수분함량이 높으면 흉부수종 증가로 닭고기 품질이 저하되는 경우가 많으며 친수성인 암모니아가 배출되지 않아 폐사율 및 소모성 질병 증가로 생산성 저하의 원인이 된다. 개발균주는 장내 유익 세균의 증가로 대장균성 설사 등 연변발생을 감소하여 바닥깔짚의 수분함량을 감소시켰으며, 질소화합물 소화율 개선 및 분내 미생물의 증가로 암모니아 가스발생량을 비교예에 비하여 크게 감소 시켜 계사 환기 개선에 효과가 큰 것으로 나타났다. The increase in feed intake in the specification test of the development strain increased the palatability and digestive function of the feed due to the development strain, thus improving productivity such as weight gain and feed efficiency. In addition, broiler chickens are generally raised in plain sand, so if the water content of the bottom litter is high, chicken breast quality is often lowered due to increased thoracic edema, and hydrophilic ammonia is not released, causing mortality and increased consumption. do. The developmental strain reduces the incidence of stool, such as E. coli diarrhea due to the increase of gut beneficial bacteria. The moisture content of the bottom litter was reduced, and the ammonia gas generation was greatly reduced compared to the comparative example due to the improvement of nitrogen compound digestibility and the increase of microorganisms in the powder.
이상에서 살펴본 바와같은 본 발명의 유산균은, 가금소화기관에서 유래하였기 때문에 내산성 및 내담즙성이 우수하여 소화기관내 생존이 용이한 것으로 나타났다. As described above, the lactic acid bacteria of the present invention are derived from a poultry digestive organ, and thus have excellent acid resistance and bile resistance, and thus, survival in the digestive organs is easy.
특히, 이를 동일축종인 육계의 사료에 첨가하여 급여하였을 때 사료 섭취량이 증가하며 증체량증가 및 사료요구율이 개선되어 생산성을 향상시킬 수 있는 이점이 있다. In particular, when the feed is added to the feed of broiler chickens of the same breed, feed intake is increased, weight gain and feed rate is improved to improve the productivity.
또한, 연변 발생을 억제시켜 바닥깔짚의 수분함량을 감소시킴으로서 닭고기의 품질이 개선되어지며, 계분내 암모니아 발생량을 감소시켜 호흡기성 질병 등 소모성 질병을 억제하는 효과를 나타내게되는 것이다. In addition, the quality of the chicken is improved by reducing the moisture content of the bottom litter by inhibiting the generation of stool, and by reducing the amount of ammonia in the system, it will have the effect of suppressing consumable diseases such as respiratory diseases.
도 1은 본 발명 유산균(락토바실러스 류테리 아비브로투)의 Pyrogenic tree 모식도. 1 is a schematic diagram of a Pyrogenic tree of the present invention lactic acid bacteria (Lactobacillus ruteri abibrotu).
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