KR100450688B1

KR100450688B1 - Production method of adventitious root of ginseng by using an impulsive current of electricity

Info

Publication number: KR100450688B1
Application number: KR10-2002-0003972A
Authority: KR
Inventors: 손성호
Original assignee: 손성호
Priority date: 2002-01-23
Filing date: 2002-01-23
Publication date: 2004-10-01
Also published as: KR20030063723A

Abstract

본 발명은 전기충격에 의한 인삼류(인삼, 장뇌삼 및 산삼 등)의 부정근(不定根) 유도 및 증식방법, 좀더 상세하게는 포지 혹은 산에서 자란 인삼류의 조직을 영양분이 함유된 용기에서 무균적으로 배양할 때 특정 전류로 배양 조직을 자극하므로써 부정근을 유도시킨 다음, 전기 충격 처리된 부정근을 용액상태의 영양배지에서 생장시키는 방법에 관한 것이다.The present invention is a method of inducing and propagating the root of ginseng (Ginseng, camphor ginseng and wild ginseng, etc.) by electric shock, and more specifically, the tissues of ginseng grown in Forge or acid can be aseptically cultured in a container containing nutrients. The present invention relates to a method of inducing root muscles by stimulating culture tissues with a specific current and then growing the electroshock treated root muscles in a nutrient medium in solution.

Description

Production method of adventitious root of ginseng by using an impulsive current of electricity}

본 발명은 인삼류의 부정근을 대량 생산하는 방법, 더욱 상세하게는 전기적 자극을 이용하여 인삼류 조직으로부터 부정근을 직접 얻는 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for mass production of ginseng roots of ginseng, and more particularly, to a method of directly obtaining the root muscles from ginseng tissues using electrical stimulation.

본 발명에 의하면, 생물공학기법 중의 하나인 식물의 조직배양 기술을 이용하여 인삼류의 부정근을 배양하였을 경우, 그 수확한 배양산물을 식용으로 사용할 수 있도록 하기 위하여 인체에 치명적인 것으로 알려진 2,4-D (2,4-dichloro -phenoxy acetic acid)를 사용하는 대신 전기적인 자극에 의해 부정근을 얻을 수 있다.According to the present invention, when cultured ginseng roots of ginseng are cultured using a tissue culture technique of a plant, which is one of biotechnology techniques, 2,4-D, which is known to be fatal to the human body, in order to use the harvested culture product for food. Instead of using (2,4-dichloro-phenoxy acetic acid), the root can be obtained by electrical stimulation.

본 발명은 야외에서 자란 인삼류(인삼, 장뇌삼 및 산삼 등)를 이용하여 무균적으로 조직배양을 할 때, 특정한 전기충격을 배양조직에 처리함으로써 배양조직 내에 존재하고 있던 내성 식물호르몬(endogeneous plant hormone)을 배양조직의 상처 난 부위로 이동시켜, 배양조직에서 직접 부정근을 내리도록 하는 방법 및 전기충격에 의해 생산된 부정근을 플라스틱 등의 용기에 배양함으로써 생산성을 높일 수 있을 뿐만 아니라 그 안전성을 확보할 수 있는 방법에 관한 것이다.In the present invention, when culturing aseptically using ginseng (ginseng, camphor and wild ginseng) grown outdoors, resistant plant hormones (endogeneous plant hormone) that were present in the cultured tissue by treating a specific electric shock to the cultured tissue Can be moved to the wounded area of the culture tissue to directly lower the root muscle of the cultured tissue, and by culturing the root muscle produced by the electric shock in a container such as plastic, the productivity can be increased as well as the safety thereof. It is about how.

지금까지 인삼류의 세포 및 부정근 유도나 배양 방법에 대한 연구와 그 결과에 대한 특허가 수없이 출원된 바 있으며, 조직 배양에 의해 인삼 바이오메스를 생산한 후, 이를 직접 이용하거나 유효성분을 추출하여 이용하는 연구는 주로 일본과 한국에서 이루어지고 있다.일본의 경우 인삼 배상체 조직(Embryogenic tissue)를 배양하여 사포닌을 생산한 예가 있으나(Asaka 등 Biotechnology Letters 1993, 15(12) 1259-1264), 대체로 인삼의 세포배양 방법을 이용하고 있으며(일본특허출원 JP1983179836, JP1983043725, JP1983043727, JP1985178058, JP1995046089 참조), 산업화에 성공한 일동전공의 경우에도(Ushiyama, Nitto Tech. Res 1984, 22:1-7) IBA 형태의 오옥신을 이용한 세포배양법을 이용하고 있다.국내에서는 손성호 등(Biotechnolol Bioprocess Eng. 1999, 4:119-123)과 산림청 임업연구원에서 이루어진 산삼부정근 배양에 관한 특허(특허등록 318091, 318090)가 그 효시이며, 이어 백기엽(특허등록 353636) 등 몇몇 연구가에 의해 유사한 특허가 등록된 바 있다.이러한 특허의 특징은 모두 인삼류의 특정 조직에서 캘러스를 형성한 다음 이로부터 부정근을 유도하여 이용하는 방법을 사용함으로써, 캘러스 유도 단계에서 2,4-D 라는 유해한 합성호르몬 사용이 불가피 하였다. 그러나, 식물조직 배양에 있어서 전기충격에 의해 부정근을 직접 유도한 경우는 지금까지 전세계적으로 보고된 바가 없으며, 전기충격으로 얻은 인삼류의 부정근을 밀폐된 용기에서 배양하는 경우는 본 발명이 최초이다.There have been many patents on the research and results of ginseng cell induction and cultivation methods and results, and after producing ginseng biomass by tissue culture, it is used directly or by extracting the active ingredient The research is mainly conducted in Japan and Korea. In Japan, saponins are produced by culturing ginseng embryonic tissues (Asaka et al., Biotechnology Letters 1993, 15 (12) 1259-1264). Cell culture methods are used (see Japanese patent applications JP1983179836, JP1983043725, JP1983043727, JP1985178058, JP1995046089), and even in the case of Japanese-made majors (Ushiyama, Nitto Tech.Res 1984, 22: 1-7) Cell culture method using cultivation is carried out.In Korea, Sansambujeong was made by Son Sung-ho et al. (Biotechnolol Bioprocess Eng. 1999, 4: 119-123) and Korea Forestry Research Institute. Patents related to culture (patent registrations 318091 and 318090) are effective, and similar patents have been registered by several researchers, including Baek Ki-yeop (patent registration 353636). All of these features form callus in specific tissues of ginseng. Then, by using the method to induce the roots from it, the use of harmful synthetic hormone called 2,4-D in the callus induction step was inevitable. However, the case of directly inducing the root muscle by electric shock in plant tissue culture has not been reported so far worldwide, and the present invention is the first when the root of ginseng obtained by the electric shock is cultured in a sealed container.

일반적으로 인삼류를 조직배양하여 부정근을 얻는 방법으로써, 인삼류를 생장시킬 수 있는 배양배지에 2,4,-D라는 인공 식물호르몬을 1∼10ppm 내외로 넣어주고 있는데, 그러한 방법으로 수확된 배양 인삼류의 부정근을 식품으로 사용하는데 있어서 그 안정성은 아직까지 확보되어 있지 않다. 특히 2,4-D는 월남전에 미군이 사용한 고엽제로 잘 알려져 있는 물질로써, 그 독성이 인체에 치명적인 것으로 보고되고 있다. 그 예로써 콩나물을 빨리 생장시키기 위해 2,4-D를 사용할 경우 식품허가를 받을 수 없을 뿐만 아니라, 형사 처벌을 받는 것도 2,4-D의 독성에 연유한 것으로 생각된다.In general, as a method of obtaining ginseng roots by tissue culture of ginseng, artificial plant hormone called 2,4, -D is put in about 1 ~ 10ppm in a culture medium capable of growing ginseng. The stability of the root of the roots in food is not yet secured. In particular, 2,4-D is a substance well known as a defoliant used by the US military before Vietnam, and its toxicity is reported to be fatal to the human body. For example, if 2,4-D is used to grow soybean sprouts quickly, not only a food permit will be granted, but also criminal penalties are thought to be due to the toxicity of 2,4-D.

식물의 조직을 영양분 배지에서 배양을 할 때 2,4-D를 배양배지에 넣어 줄 경우 두 가지 형태로 반응을 하게 되는데 첫째, 2,4-D가 배양세포의 리셉터 (receptor)에 붙어서 그 시그날이 세포질(cytosol)에 존재하는 조절단백질( reguratory protein)에 전달되면, 조절단백질이 핵 속의 유전자를 발현시켜서 형태형성(예를 들면, 세포분열이나 부정근 형성과 같은) 반응을 일으키는데, 이 경우에도 2,4-D라는 인공 식물호르몬이 형태형성 이외에 어떤 미지의 단백질을 만들어내는지에 대해 알려져 있지 않으며, 그 미지의 단백질이 인체에 유해한지 무해한지도 검증된 바 없다. 따라서 2,4-D를 처리한 경우는 유전자 조작된 식품(GMO)과 같은범주에서 취급되어야 할 지도 모른다. 특히 지금까지 2,4-D는 식물의 세포질로 흡수되어 2,4-D가 직접 혹은 조절단백질을 매체로 하여 형태형성 반응을 주도하는 것으로 알려져 있는데 이 경우 인체에 치명적일 수 있다.When cultivating plant tissues in nutrient medium, 2,4-D reacts in two forms. First, 2,4-D is attached to the receptor of the culture cell and the signal When delivered to the reguratory protein present in the cytosol, the regulatory protein expresses genes in the nucleus, leading to morphogenesis (e.g., cell division or abscess formation). It is not known what unknown proteins produce phytohormones, other than morphogenesis, and whether they are harmful to humans. Thus, treatment with 2,4-D may need to be handled in categories such as genetically engineered foods (GMOs). In particular, until now, 2,4-D is absorbed into the cytoplasm of the plant and 2,4-D is known to drive the morphogenesis reaction directly or using a regulatory protein as a medium, which can be fatal to the human body.

그럼에도 불구하고 인삼류의 부정근을 얻기 위해 2,4-D를 사용하는 것은 배양조직에서 캘러스를 얻은 다음, 이로부터 부정근을 쉽게 얻을 수 있다는 이점도 있지만 2,4-D를 사용하지 않고 배양조직에서 직접 부정근을 대량으로 얻을 수 있는 기술이 지금까지 인삼류에서 개발되지 않았기 때문으로 생각된다.Nevertheless, the use of 2,4-D to obtain ginseng roots of ginseng also has the advantage that it is easy to obtain callus from cultured tissues and then obtain the roots from them. It is thought that the technology that can obtain a large amount of is not developed in ginseng until now.

본 발명의 목적은 인체에 유해한 것으로 알려진 2,4-D를 사용하지 않고, 전기 충격에 의해 배양조직으로부터 부정근을 직접 얻음으로써, 그 배양산물을 안전한 식품으로 사용할 수 있는 방법을 제공하는데 있다.An object of the present invention is to provide a method that can use the culture product as a safe food by directly obtaining the root muscle from the culture tissue by electric shock without using 2,4-D known to be harmful to the human body.

본 발명의 다른 목적은 전기충격 방법을 이용하여 캘러스 단계를 거치지 않고도 배양조직으로부터 직접 부정근을 유도함으로써 생산성을 극대화시키는 것으로, 이는 인삼류 뿐만 아니라, 부가가치가 높은 식물들의 배양조직에서 2,4-D를 사용하지 않고 직접 부정근을 유도한 후 그 부정근을 밀폐된 용기에 배양하여 식품으로 사용할 수 있는 방법을 제공하는데 있다.Another object of the present invention is to maximize the productivity by inducing negative root directly from the culture tissue without going through the callus step by using the electric shock method, which is not only ginseng, but also 2,4-D in the culture tissue of high value-added plants It is to provide a method that can be used as food by inducing the indirect root muscle without using and then culturing the root muscle in a closed container.

제1도는 간접방식의 전기충격을 줄 수 있는 장치에 대한 설계도면으로,1 is a design drawing for a device that can give an indirect electric shock,

도1a는 정면도를 나타내고, 도1b는 측면도를 나타낸다.1A shows a front view and FIG. 1B shows a side view.

제2도는 직접방식의 전기충격을 줄 수 있는 장치에 대한 설계도면으로,2 is a design drawing for a device that can give direct electric shock,

도2a는 정면도를 나타내고, 도2b는 측면도를 나타낸다.Figure 2a shows a front view and Figure 2b shows a side view.

제3도는 전기충격 후 영양배지 내에서 생장시킨 부정근의 모습이다3 is a view showing the growth of roots in nutrient medium after electric shock

*도면의 주요 부분에 대한 부호의 설명** Description of the symbols for the main parts of the drawings *

1 : 220V D.C. 전원장치 6 : 스테인레스 전극판1: 220V D.C. Power Supply 6: Stainless Electrode Plate

2 : 10 메가오옴 저항기 7 : PTFE 재질의 고정대2: 10 megaohm resistor 7: PTFE holder

3 : PTFE 재질의 sealer 8 : 인삼류의 표면 소독된 조직3: PTFE sealer 8: Surface disinfected tissue of ginseng

4 : 전선 9 : 고체 배양배지4: front 9: solid culture medium

5 : 10 cm 의 페트리-디쉬5: Petri-dish 10 cm

본 발명은 인삼류(인삼, 장뇌삼 및 산삼 등)의 부정근을 대량 증식시키는 방법에 관한 것으로, 특히 야외에서 자란 인삼류를 2,4-D가 함유되지 않은 배양배지에서 특수하게 고안된 전기충격장치를 이용하여 전기자극을 주어 부정근을 유도하는 단계를 그 특징으로하며, 이후 수확한 부정근을 밀폐된 용기에서 생장시키는 배양단계를 포함할 수 있다.The present invention relates to a method of mass propagation of the root of ginseng (ginseng, camphor ginseng, wild ginseng, etc.), in particular, using a specially designed electric shock device in a culture medium containing 2,4-D grown ginseng Characterized by the step of inducing the root muscles by giving an electrical stimulation, and may include a culture step of growing the harvested roots in a closed container.

이하 본 발명을 상세히 설명하면 다음과 같다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명에서는 전기 충격 시 배양배지 내에 함유되어있는 식물호르몬을 조직으로 전이시켜 줌으로써 그 영향에 의해 부정근을 유도하도록 한다. 이때 배양배지에 넣어주는 식물 호르몬은 뿌리 유도에 결정적인 역할을 하면서도 인체에는 무해한 것으로 이미 일본 등에서 임상실험을 통해 검정된 IBA(indole-3-butric acid)나 NAA(1-naphtalene acetic acid)를 사용하였다. 배양조직의 전기충격 효율을 증진시키기 위하여 0.75% 식용 한천을 배양액에 넣은 다음 그 영양배지는 121℃에서 약 30분간 증기 멸균한 후, 영양배지의 온도가 50℃ 정도로 식은 뒤 전기충격장치가 설치된 배양접시에 분주하여 실온에서 굳힌 다음 사용하였다. 이때 전기 충격장치는 무균상 내에서 70% 에탄올로 1시간 소독 후, 약 2시간 동안 무균상 내에서 건조한 다음 다시 U.V. 하에 24시간 소독 후 사용하였다. 무균상 내에서 일반적인 조직배양방법에 따라 소독된 인삼류의 조직을 분리하여 배양배지가 들어있는 전기충격 장치에 접종하였다. 순간적인 전기충격을 받은 조직을 동일한 배양배지에 넣은 후 암상태에서 배양하여 부정근을 얻을 수 있었다. 이후 수확한 부정근을 소독된 믹서기에서 가루로 만든 후, 동일한 액체 배양액이 들어있는 플라스틱 배양기에 넣고 배양을 한다. 이때 플라스틱 배양기와 액체배양 배지는 역시 고온에서 소독된 것을 사용한다.In the present invention, by transferring the plant hormone contained in the culture medium to the tissue during the electric shock to induce the root muscle by its effect. At this time, the plant hormones put into the culture medium are harmless to the human body while playing a decisive role in the root induction, and IBA (indole-3-butric acid) or NAA (1-naphtalene acetic acid), which has already been tested in Japan, has been used. . In order to enhance the electric shock efficiency of cultured tissue, 0.75% edible agar was added to the culture medium, and the nutrient medium was steam sterilized at 121 ° C. for about 30 minutes, and the temperature of the nutrient medium was cooled to about 50 ° C., followed by an electric shock device. The dish was aliquoted and hardened at room temperature before use. At this time, the electric shock device was sterilized with 70% ethanol in the aseptic phase for 1 hour, dried in the aseptic phase for about 2 hours, and then U.V. Used after 24 hours disinfection under. In the sterile phase, the tissues of the sterilized ginseng were isolated according to the general tissue culture method and inoculated into the electroshock device containing the culture medium. The tissues subjected to the instantaneous electric shock were placed in the same culture medium, and then cultured in a cancerous state to obtain the root muscle. The harvested roots are then pulverized in a sterile blender and placed in a plastic incubator containing the same liquid cultures. The plastic incubator and the liquid culture medium are also sterilized at high temperature.

이하 실시예는 본 발명을 보다 상세히 설명하기 위한 것으로, 본 발명이 이들 실시예에 제한되는 것은 아니다.The following examples are intended to illustrate the present invention in more detail, but the present invention is not limited to these examples.

[실시예 1] 전기충격 장치의 설계Example 1 Design of an Electroshock Device

전기충격 장치는 메디랜드에서 제작되어 시판되고 있는 무균 배양접시 (100×20mm) 내부에 설치하였는데, 직접 전기 충격 방식의 경우 도 1에서 보여지는 것처럼 양전극과 음전극 판은 각각 스테인레스 스틸(SUS 316)을 두께 1mm, 길이 0.5×5cm 판으로 만든 다음 전기 충전 시 배양조직에 전기가 고르게 전달되도록 하기 위해 조직과 일정한 거리를 주도록 굽혀서 설치하였다(6). 이 경우 배양접시(5)는 E.O. 가스로 소독된 것을 사용하였고, 전기충격장치는 에탄올과 U.V.로 소독한 후 무균상에서 충분히 건조시켜 사용하였다.The electric shock device was installed inside a sterile culture plate (100 × 20mm) manufactured and marketed by Mediland. In the case of the direct electric shock method, the positive electrode and the negative electrode plate are made of stainless steel (SUS 316), respectively, as shown in FIG. The plate was made of 1mm thick and 0.5 × 5cm long, and then bent to give a constant distance from the tissue so that the electricity was evenly transferred to the culture tissue during the electrical charging (6). In this case, the culture plate (5) is E.O. The sterilized gas was used, and the electric shock device was sterilized with ethanol and U.V. and then dried sufficiently in aseptic phase.

[실시예 2] 전기충격장치 내 배양배지의 조제Example 2 Preparation of Culture Medium in Electric Shock Device

배양배지는 식물조직배양에 일반적으로 사용되는 MS(Murashige and Skoog) 배지에 IBA혹은 NAA를 1∼5ppm 그리고 식용 한천을 0.75% 넣은 후, 고온(약 121℃∼131℃)하에서 약 15분간 증기 소독하였다. 무균상 내에서 소독된 배지를 실시예 1에서 준비해 둔 전기충격장치에 넣어주는데 이때 배지온도는 약 50℃가 되도록 하였다.The culture medium is steam sterilized for 15 minutes at high temperature (about 121 ℃ to 131 ℃) after adding 1 ~ 5ppm of IBA or NAA and 0.75% of edible agar to MS (Murashige and Skoog) medium which is commonly used for plant tissue culture. It was. The sterilized medium in the sterile phase is placed in an electric shock device prepared in Example 1, wherein the medium temperature is about 50 ℃.

[실시예 3] 전기충격 장치 내 인삼류 조직의 접종Example 3 Inoculation of Ginseng Tissues in an Electroshock Device

실시예 2와 같이 조제된 배양배지가 무균상에서 완전히 식은 후 야외에서 자란 인삼류 조직을 접종하였는데, 인삼류의 조직은 일반적으로 식물조직 배양에 사용되는 방법, 즉 70% 알코올에 30초간 침지 후, 2% 차아염소산 용액(NaOCI)을 이용하거나, 조직으로부터 미생물 유도에 사용되는 화염 처리에 의해 조직의 표면에 있는 균들을 제거시켰다. 이때 조직은 인삼류 뿌리를 횡방향으로 절단하여 둥글게 절편화 한 다음 접종하였다.The culture medium prepared as in Example 2 was inoculated with ginseng tissue grown outdoors after sterile cooling completely, and the ginseng tissue was generally used for cultivating plant tissue, that is, after immersing in 70% alcohol for 30 seconds, 2% The bacteria on the surface of the tissue were removed using hypochlorous acid solution (NaOCI) or by flame treatment used to induce microorganisms from the tissue. At this time, the tissues were cut in the transverse direction of the ginseng roots, rounded and inoculated.

[실시예 4] 전기충격 방법Example 4 Electric Shock Method

실시예 3과 같이 무균의 인삼류 절편이 전기충격 장치 내에 접종되면 곧바로 전기충격을 가했다. 이때 두 가지 방식으로 전기충격을 주었는데, 제1도에서 보여 준 것처럼 전기가 배양배지를 통과해서 조직에 전달되는 간접 방식과, 제 2도에서 보여지는 바와 같이 조직의 중앙에 전선을 꼽은 후 다른 한쪽의 스텐일레스 스텐 판으로부터 각각 전기가 가해지는 직접 전달 방식을 이용하였다. 전압은 100V에서As in Example 3, as soon as the sterile ginseng slices were inoculated in the electric shock device, an electric shock was immediately applied. At this time, the electric shock was applied in two ways. As shown in FIG. 1, an indirect method in which electricity was passed through the culture medium to the tissue, and as shown in FIG. The direct transfer method in which electricity is applied from the stainless steel plate of each is used. Voltage at 100V

1000V까지 구배를 주었고(바람직하게는 220V이상), 전류는 배양조직 자체가 약 5000 오옴(Ω)의 저항을 가지고 있는 것을 감안하여 다양한 저항체를 이용하여 1∼100 마이크로 암페아(μA)가 흐르도록 하였으며, 전기충격 시간은 1∼100 마이코로 세컨드 (μS)로 하며, 더욱 바람직하게는 10∼50 μS 를 하여, 각각의 전기충격 시간에 대해 한 번에서 길게는 5번까지 처리를 해 주었다. 이 실험 결과 배양배지 내에 IBA와 NAA가 함유되어 있지 않은 처리에서도 20∼50μA의 전류를 약 30μS처리하였을 때 부정근 발생이 촉진되는 것을 관찰할 수 있었으며, 배지에 IBA와 NAA 처리 시에는 전기 충격을 주지 않고도 낮은 빈도의 부정근 발생을 관찰 할 수 있었다.Graded up to 1000V (preferably 220V or more), and the current flows 1-100 microamps (μA) using various resistors, considering that the culture tissue itself has a resistance of about 5000 Ohms. The electric shock time was 1-100 microseconds (μS), more preferably 10-50 μS, and the treatment was performed from one to five times for each electric shock time. As a result of this experiment, even when IBA and NAA were not contained in the culture medium, it could be observed that spontaneous muscle development was promoted when 20 ~ 50μA current was treated about 30μS, and the medium was not affected by IBA and NAA treatment. Low frequency of involuntary incidence could be observed.

[실시예 5] 전기충격이나 IBA 혹은 NAA 처리에의해 발생된 부정근의 배양Example 5 Cultivation of Abdominal Muscle Generated by Electric Shock or IBA or NAA Treatment

실시예 4와 같은 방법에 의하여 얻은 부정근은 소독된 믹서기에 무균적으로 조제된 액체 배양액을 부정근 부피의 약 10배 정도 넣어준 후 1분 간 갈아서 부정근의 길이가 약 1∼5mm 정도로 갈리면 이를 동일한 배양액이 든 소독된 플라스틱 용기에 넣어 암상태에서 배양한 결과 제3도에서 보여지는 것 과 같은 부정근을 다수 얻을 수 있었다.The root canal obtained by the same method as in Example 4 was put into a sterilized blender, and the liquid culture solution aseptically added about 10 times the volume of the root of root and ground for 1 minute. As a result of incubating in a sterilized plastic container containing the culture solution in the dark, a large number of the root muscles as shown in FIG. 3 were obtained.

상기의 본 발명과 같은 방법으로 인삼류(인삼, 장뇌삼 및 산삼 등)의 배양 조직에 전기전 자극을 주는 경우, 캘러스 단계를 거치지 않고도 직접 부정근을 얻음으로써 인삼류 부정근의 생산 효율을 극대화 할 수 있다.When electrical stimulation is applied to culture tissues of ginseng (Ginseng, camphor ginseng, and wild ginseng) by the same method as the present invention, the production efficiency of ginseng root muscle can be maximized by directly obtaining the root muscle without going through the callus step.

특히, 인체에 유해한 2,4-D 을 사용하지 않고도 전기자극을 이용하여 부정근을 유도함으로써, 인체에 안전하고도 부가가치가 높은 부정근을 생산할 수 있다.In particular, by using the electrical stimulation to induce the root muscle without using 2,4-D, which is harmful to the human body, it is possible to produce a safe and high value added negative root.

Claims

A method of inducing arrhythmia using ginseng as a material, the method comprising producing an arrhythmia from the cultured tissue by giving an electric shock to the cultured tissue indirectly or directly on the culture medium.

The method of claim 1, wherein the culture medium used is a ginseng root muscle production method characterized in that it comprises IBA or NAA.

The method of claim 1, wherein the voltage initially supplied during the electric shock is 100V or more and less than 1000V.

According to claim 1, The ginseng root muscle production method characterized in that for supplying a current of 1-100 μA at the time of the electric shock.

The method of claim 1, wherein the ginseng root muscle production method characterized in that the instantaneous electricity of about 1-100 μS during the electric shock once or repeatedly.

The method according to any one of claims 1 to 5, further comprising the step of cutting the generated negative root with a mixer or the like and culturing it in a liquid culture medium.