KR100306968B1 - 성감염질환의예방또는치료를위한방법및조성물 - Google Patents

Abstract

성 감염 질환(STD) 의 예방 및/또는 치료를 위한 방법과 조성물이 개시되어 있는데 미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제와 같은 할로퍼옥시다제와 정액 기질- 특이적 옥시다제의 일정량이 성 감염 액체의 환경에 있는 사람이나 동물에 투여된다. 정액의 존재하에 정액 기질- 특이적 옥시다제는 과산화수소의 생성을 촉매하고 이것은 다시 할로퍼옥시다제에 의해 이용되어 성 감염 액체에 존재하는 병원성 미생물을 선택적으로 억제한다. 고농도 수준에서 조성물은 부가적으로 살정제 특성을 나타낸다.

Description

[발명의 명칭]

성감염질환의 예방 또는 치료를 위한 방법 및 조성물

[발명의 상세한 설명]

[발명의 분야]

본 출원은 1991. 2. 21 에 출원된 미합중국 출원 일련 No. 07/660,994의 부분 계속 출원이다.

본 발명은 성감염질환의 예방이나 치료를 위한 방법과 조성물에 관한 것이다. 더 구체적으로 본 발명은 정액에 존재하는 기질에 의해 활성화되는 옥시다제- 할로퍼옥시다제 살균 활성을 이용하는 방법과 조성물에 관한 것이다. 이 시스템은 살균작용에 필요한 2 원 성분, 즉 옥시다계- 할로퍼옥시다제와 옥시다제의 정액 기질이 성행위시에 결합된다는 점에서 상당히 효과적이고 직접적이다.

[발명의 배경]

성감염질환(STD) 은 지구상에서 가장 보편적인 전염병으로 분류된다. 대중을 교육시키는 조직적인 시도에도 불구하고 STD - 비특이적 요도염, 클라미도성 감염, 생식기와 항문직장의 헤르페스 및 우췌, 매독, 임질, 연성 하감, 그리고 서헤부 육아종과 같은 -는 계속하여 중요한 대중 건강 문제를 대표한다. 임질에 있어서는 전세계 2 억 5 천만명 이상의 사람과 미합중국에서 3 백만명에 가까운 사람이 매년 감염되는 것으로 추정된다. 매독에 있어서 매년 전 세계의 발생빈도는 미합중국에서 매년 치료를 필요로 하는 400,000 과 함께 5 천만명으로 추정된다. 살모넬라증, 시겔로증, 캄필로박터, 간염 A, B 및 C, 그리고 시토메갈로바이러스 감염을 포함한 다른 감염은 때로 성감염된다. 경부암과 헤르페스 바이러스 및 유두종 바이러스간의 강한 연관이 발견되어 왔다. 더 최근에는 치명적인 후천성 면역 결핍증(AIDS)을 일으키는 사람 면역 결핍 바이러스(HIV) 의 만연이 동성연애집단과 이성연애집단에서 신속하게 퍼져 있다.

STD 발생빈도는 이들 질환의 진단과 치료에서의 진보에도 불구하고 증가하고 있다. 이러한 경향에 원인이 되는 요인들은 성행위의 변화, 예를 들면 피임약과 장치의 광범위한 이용; 구강생식과 항문직장 접촉을 포함하는 더 다양해진 성행위; 항생제에 덜 민감한 생물체 균주의 출현; 감염 인자의 무증상 담체; 많은 유동 인구; 다수의 파트너와 관계하는 고수준의 성행위; 의사와 대중에 의한 사실들의 무지; 치료를 구하는 환자의 침묵을 포함한다.

STD 의 종래 치료는 일반적으로 STD 의 감염과 진단이 행하여진 후 테트라시클린, 페니실린, 메트로니다졸, 니스타틴, 미코나졸, 설파메톡사졸 및 아시클로비르와 같은 항생제, 항곰팡이 약제 또는 항바이러스 약제의 투여에 제한되어 왔다. STD 의 종래 예방은 일반적으로 콘돔과 같이 성교동안 체액의 교환을 방지하거나 감소시키는 물리적 경계의 사용에 제한되어 왔다. STD 의 진단과 치료에서 일정한 진보가 이루어졌지만 성행위 동안과 성행위 직후 병원성 미생물에 의한 감염을 방지하는 새로운 방법과 조성물에 대한 강한 필요가 있다. 심지어 치료가능한 STD 인 경우에도 예방은 증상 진단과 치료에 대해서 매우 바람직하다.

[발명의 개요]

본 발명자는 이제 성감염질환은 정액의 존재하에 성행위감염액체에 존재하는 병원성 미생물의 감염과 콜로니화를 억제하는데 효과적인 일정량의 할로옥시다제와 정액 기질- 특이적 옥시다제를 성행위감염액체의 환경에 있는 사람이나 동물에 투여하여 예방되거나 치료될 수 있다는 것을 발견하였다. 정액의 존재하에 정액 기질- 특이적 옥시다제는 과산화수소의 생성을 촉매하는데 이것은 다시 할로퍼옥시다제에 의해 이용되어 정상적인 질 세균상의 파괴없이 성감염액체에 존재하는 병원성 미생물을 선택적으로 억제한다. 이와 같이 본 발명은 성행위에 의해 활성화되는 성감염 병원성 미생물에 대해 효과적인 항미생물 시스템을 제공한다. 본 발명의 할로퍼옥시다제/ 정액 기질- 특이적 옥시다제 시스템은 선택적으로 살정 특성을 얻기 위해 비교적 고농도 수준으로 이용될 수도 있다.

본 발명의 방법과 조성물의 이용에 적당한 할로퍼옥시다제는 미엘로퍼옥시다제(MPO) 와 호산구 퍼옥시다제(EPO) 를 포함하는 반면 적당한 정액 기질- 특이적 옥시다제는 콜린옥시다제, 콜레스테롤 옥시다제, ℓ-아미노산 옥시다제, 폴리아민 옥시다제, 요산염 옥시다제 (유리카제), 피루브산염 옥시다제 및 젖산염 옥시다제를 포함한다.

[바람직한 실시예의 상세한 설명]

본 발명은 정액의 존재하에서 병원성 미생물의 감염과 콜로니화를 억제하는데 효과적인 일정량의 할로퍼옥시다제와 정액 기질- 특이적 옥시다제의 사람이나 동물에 투여에 의해 성감염질환을 억제해서 사람이나 동물을 치료하기 위한 방법과 조성물에 방향지어져 있다. 본 발명의 실행에서 할로퍼옥시다제와 정액 기질- 특이적 옥시다제는 감염된 정액 액체의 환경에서 옥시다제- 할로퍼옥시다제 시스템의 항미생물 특성이 정액의 존재에 의해 생기는 양상으로 제공된다. 이 결과 최대 살균작용은 일시적으로 최대 감염 노출시기에 결합된다.

본 발명에 유용한 할로퍼옥시다제는 할로겐화물: 과산화수소 옥시도리덕타제 (예를 들면 국제 생화학협회에서의 EC No. 1.11.1.7 과 EC No. 1.11.1.10) 로 정의되는데 여기에서 할로겐화물은 전자공여체나 환원제이고 과산화물은 전자수용체나 산화제이다. 명세서가 여기에서 참고 문헌으로 삽입되어 있는 PCT 국제 공개 No. WO 92/14484 의 상세한 설명에서 기술되어 있는 바와 같이 미엘로퍼옥시다제(MP0) 와 호산구 퍼옥시다제(EPO) 와 같은 포유류 할로퍼옥시다제는 선택적으로 표적 미생물에 결합하고 과산화물과 할로겐화물의 존재하에 표적 미생물의 환경에서 원하는 미생물을 제거하거나 숙주세포와 같은 다른 성분을 심각하게 손상시키지 않고 표적 미생물의 성장을 억제하는데 이용될 수 있다. 표적 미생물 (예를 들면 병원성 세균, 곰팡이 또는 바이러스) 이 원하는 미생물 (예를 들면 정상적인 세균상의 구성원) 이나 정상 숙주세포의 할로퍼옥시다제에 대한 결합능력보다 더 큰 결합능력을 가질때 표적 미생물은 정상세균상이나 정상 숙주세포에는 거의 또는 전혀 결합하지 않는 할로퍼옥시다제에 선택적으로 결합한다.

과산화물과 할로겐화물의 존재하에 표적- 결합된 할로퍼옥시다제는 다음 반응:

H₂O₂+ HCl -할로퍼옥시다제H₂O + HOCl (1a)

H₂O₂+ HOClH₂O + HCl +¹O₂(1b)

에 따라 할로겐화물의 산화를 촉매하고 과산화물의 불균등화 반응을 촉진하여 단일중항 산소분자를 표적 미생물의 표면에 생성한다. 단일중항 산소분자의 수명은 이것의 반응성과 연관된 손상을 할로퍼옥시다제 발생기의 0.2 미크론 반경내로 제한된다. 이와 같이 손상은 표적 미생물의 표면에 제한된다. 따라서 원하는 미생물이나 정상 숙주세포에 대한 부수적 손상을 최소로 하여 표적 미생물을 선택적으로 죽일 수 있다.

할로퍼옥시다제의 항균 활성은 과산화물의 존재를 필요로 하기 때문에 할로퍼옥시다제가 옥시다제나 하나 이상의 정액의 성분에 작용하여 과산화물을 생성하는 옥시다제와 함께 존재할 때 항균 활성이 성행위와 관련되어 있고 성행위에 의해 야기될 수 있다는 것을 발견하였다. 이와 같이 본 발명의 실행은 감염 미생물에 대한 최대 노출시기동안 최대 살균작용을 제공한다. 따라서 운반되는 체액 (즉, 정액) 중의 한 화합물이 본 발명의 조성물에 존재하는 옥시다제의 속도제한 기질이기 때문에 성행위는 살균작용에 효과적으로 결합된다. 옥시다제에 의해 생성된 과산화물은 할로퍼옥시다제가 조정하는 살균 작용에 대한 속도제한 기질이다.

본 발명의 실행에 유용한 정액 기질- 특이적 옥시다제는 감염된 정액 액체와 정액의 환경에서 직접적이거나 또는 간접적인 과산화수소의 생성시에 정액의 한 성분을 기질로 이용할 수 있는 어떠한 옥시다제일 수 있다. 정액이나 사정액은 정소, 부정소, 수정관, 저정낭, 전립선, 쿠퍼선, 및 리트레선을 포함하는 부생식선의 분비물에 현탁된 정자로 구성된 남성 생식관의 복합 점액성 액체이다. 사정액은 중요한 세부분으로 나눌 수 있다. 첫번째 부분은 정자가 없는 전립선 분비물이고 산 포스파타제의 고함량을 특징으로 한다. 두번째 또는 중간 부분은 정자, 정소의 생성물 및 부정소 분비물을 포함한다. 최종 부분은 저정낭의 점액성 분비물을 포함한다.

저정낭으로부터의 피브리노겐- 유사 단백질에 작용하는 전립선 프로티나제는 사정 직후에 따르는 정액의 응고에 필요하다. 약 10분의 기간 후 이 응고액은 플라스민- 유사 전립선 효소의 작용에 의해 액화되고, 덩어리 단편은 키모트립신- 유사 효소의 작용에 의해 펩티드와 아미노산으로 더 가수분해된다.

전체 사정액 부피는 3.4 ±1.6 ml 이다. 사정액의 13-33%는 전립선으로부터, 46∼80%는 저정낭으로부터 그리고 약 10% 는 부정소로부터 기원한다. 전체 사정액의 pH는 6.9 내지 7.4 범위내이고 염화물 농도는 28 내지 57 mEq/L의 범위이다.

사정액은 본 발명에 관련하여 관심의 몇몇 질소함유 유기 화합물을 포함한다. 전체 사정액의 콜린 함량은 사정 후 2 분에 결정될 때 5.8 mM (즉 0.7 mg/ml)로 비교적 높다. 더 중요하게는 콜린의 농도는 계속하여 사정 후 몇몇 시간동안 증가한다. 추가 콜린은 전립선 부분의 한 성분인 산 포스파타제의 포스포릴콜린에 대한 작용에 의해 생성된다. 클리세릴포스포릴콜린은 또한 2.1 내지 3.5 mM의 범위내에 존재하지만 가수분해에 비교적 안정하다 (Arrata et al., 1978, Fert Ster 30: 329-333).

아미노산은 프로테아제의 작용에 의해 생성된다. 사정 후 4 내지 6 시간정도에 아미노산 농도는 약 12 mg/ml로 증가하였다. 전립선 분비물에서 기원하는 몇몇 폴리아민은 사정액에서 존재한다. 스퍼민 농도는 0.3 내지 7 mM의 범위이다. 푸트레신과 스퍼미딘도 또한 저농도로 존재한다. 퓨린 물질대사의 최종산물인 요산은 약 0.4 mM의 농도로 존재한다.

사정액은 본 발명에 관련하여 관심있는 탄수화물과 대사산물의 스펙트럼을 포함한다. 이들은 시트르산염 (∼18 mM), 프럭토스 (∼13mM), 시알산 (∼3 mM), 푸코스 (∼3 mM), 피루브산염 (3 mM), 젖산염 (∼3mM), 및 글루코스 (∼0.3 mM) 를 포함한다. 갈락토스와 소르비톨도 또한 존재한다. 아스코르브산은 0.1 내지 0.4 mM의 범위에서 존재한다. 본 발명과 관련하여 관심있는 리피드인 콜레스테롤은 1.6 mM의 농도로 사정액에 존재한다.

사정액은 정상적으로 성교동안 질 주변으로 전달된다. 피부와 같이 질의 표면은 심부 결합조직 위에 놓여 있는 편평 상피조직으로 층지어 있지만 정상적인 피부와는 달리 모낭, 피지선 또는 한선이 없다. 용어 "질점막"은 이 표면이 점액을 분비하지 않는다는 점에서 옳지 않다. 그러나 누출액- 유사 점액성 액체의 작은 방울들이 성적 흥분동안 질의 상피조직 표면에서 나타난다. 이들 작은 방울들은 합쳐져서 성교를 용이하게 하는 미끄러운 윤활 표면을 형성한다. 성적 자극은 질을 감싸는 정맥총내의 울혈을 일으킨다. 이 혈관울혈은 윤활 누출액의 원인으로 여겨진다.

질 상피조직은 기초막에 근접한 배 상피조직의 기저층으로 구성된다. 이 기저층은 ∼10 미크론 두께이다. 이 위는 ∼14 미크론 두께의 부기저층이다. 중간층은 약 10 세포 두께이고 배란동안에는 상피조직의 가장 두꺼운 층 (∼100 미크론) 이다. 또한 약 10 세포 두께 (∼80 미크론) 인 전이층의 세포들은 난형에서 편평한 형태로의 변화를 보여준다. 표면층은 약 10층의 편평세포로 구성된다. 이들 상피조직의 외층은 할로퍼옥시다제에 의해 생성된 짧은 수명의 반응물에 대한 보호경계로 이용된다.

이들 편평세포는 Doderlein 간균, 질 누출액 그리고 경부점액과 혼합하여 응고된 우유와 유사한 산성 액체를 생성하는 질에서 최종적으로 각질화, 퇴화, 박리 및 축적된다. 이 액체는 질의 정상적인 분비물이다. 전체 질벽을 닦아내어 흡수된 물지의 무게를 담아 추정된 분비물의 양은 0.76±0.04g (Stone & Gable, 1959) 이다. 손상되지 않은 난소를 가진 자궁절제된 6 여성으로부터 탐폰(tampon)에 의해 수집된 1 일 질 분비물의 무게는 1.9±0.1 g/24 시간이었다.

질의 액체는 탄수화물, 지방족산, 단백질, 펩티드, 아미노산 그리고 박리된 상피조직세포의 분해에 의해 방출되는 다른 화합물을 포함한다. 세포막의 구성성분인 콜레스테롤도 또한 존재한다 (Preti et al., 1977). 상피조직의 글리코겐은 당류와 지방족산의 중요한 재료이다. 숙주세포나 세균에 의한 글리코겐 분해는간균에 의해 최종적으로 젖산으로 물질대사되는 글루코스를 생성한다. "간균"은 실제로 Lactobacillus acidophilus, L.casei, L.fermentum, L.cellobiosus 및 Leuconostoc mesenteroides 를 포함하는 그람- 포지티브 젖산균의 집합체이다. 이들 생물체는 시토크롬을 합성하지 않고 플라보효소- 기초 산화환원 물질대사에 의존한다. 젖산간균 물질대사의 젖산산물은 대개 건강하고 성숙한 질의 산도, 즉 pH 4 내지 5 에 필요하다. 본 발명에 관련하여 또한 중요한 것은 이들 젖산간균은 또한 과산화수소(H₂O₂) 를 생성한다.

정상적인 질 세균상의 존재하에서 미엘로퍼옥시다제와 호산구 퍼옥시다제는 효과적으로 살균적이다. 이들 젖산균은 충분한 산과 과산화물을 생성하여 표적 세균, 곰팡이 및 바이러스에 대해 동적인 할로퍼옥시다제- 기초한 살균작용을 확실하게 한다. 그러나 세균상을 변경시키고 산도와 과산화물의 생성 둘다를 감소시키는 질염과 같은 이상은 미엘로퍼옥시다제와 호산구 퍼옥시다제의 작용을 감소시킬 수 있다. 최종적으로 미엘로퍼옥시다제/ 호산구 퍼옥시다제는 정상 세균상의 성장과 재확립을 지지하지만 정상 세균상의 회복에 필요한 시간간격동안 미엘로퍼옥시다제/ 호산구 퍼옥시다제의 최적 살균작용은 과산화물의 이용능력에 의해 제한된다.

본 발명의 실행에서 할로퍼옥시다제, 바람직하게는 미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제는 할로퍼옥시다제의 항살균 활성을 일으켜서 감염된 액체에 존재하는 미생물에 의해 기인한 질환의 감염을 방지할 수 있는 정액 기질- 특이적 옥시다제와 함께 감염된 정액성 액체나 정액의 주변에 제공된다. 정액 기질- 특이적 옥시다제는 감염된 정액성 액체나 정액의 주변에서 직접적으로나 아니면 간접적으로 과산화수소의 생성시에 정액의 한 성분을 기질로 이용할 수 있는 어떠한 옥시다제일 수 있다. 상기에서 기술된 바와 같이 정액의 조성물과 질 환경의 특성에 기인하여 현재까지 가장 바람직한 정액 기질- 특이적 옥시다제는 콜린 옥시다제, 콜레스테롤 옥시다제, ℓ- 아미노산 옥시다제, 폴리아민 옥시다제, 요산염 옥시다제(유리카제), 피루브산염 옥시다제 및 젖산염 옥시다제로 이루어진 군으로부터 선택된다.

본 발명의 실행에서 감염된 정액성 액체나 정액의 주변에서의 과산화물 생성율은 본 발명의 조성물에 포함된 옥시다제의 활성을 조정하여 조절될 수 있다. 옥시다제의 유니트 활성의 실제 유효성은 기질의 이용능력과 pH와 같은 환경조건에 따라 의존한다. 옥시다제 활성의 1 유니트는 분당 약 1μmol 의 과산화수소를 생성할 것이다.

성감염 질환의 억제나 치료 이외에도 본 발명의 방법과 조성물은 조성물의 살정특성을 증강시키거나 감소시키도록 디자인될 수 있다. 정자의 생존능력에 관심이 있는 경우 옥시다제와 할로퍼옥시다제의 농도는 정자에 대한 부수적 손상을 최소화하기 위해서 효과적인 살균작용에 필요한 최소수준으로 감소될 수 있다. 정자의 생존능력을 원하지 않는 경우 옥시다제와 할로퍼옥시다제의 농도는 결과의 과산화물 생성이 살균뿐만 아니라 할로퍼옥시다제- 의존 살정작용에 대해 충분하게 증가될 수도 있다. 산화활성의 접근과 강도는 심지어 할로퍼옥시다제의 정자 결합이 최소인 경우에도 정자를 죽이는 것을 확실하게 하는데 충분할 것이다. 단일중항 산소분자의 짧은 반응수명은 숙주 손상에 대한 가능성을 제한한다. 편평상피조직의 두께는 산화의 손상으로부터 생존가능한 질의 조직을 보호한다. 미엘로퍼옥시다제의 크기 (약 140,000 달톤) 와 호산구 퍼옥시다제의 크기 (약 74,000 달톤) 는 이들 할로퍼옥시다제의 직접적인 질 흡수에 대한 물리적인 크기의 경계를 나타낸다.

본 발명의 할로퍼옥시다제 조성물의 방부제 활성은 상기에서 기술된 바와 같이 히포할라이트(hypohalite)를 형성하는 과산화물과 할로겐화물의 반응 및 단일중항 산소분자를 형성하는 과산화물과 히포할라이트의 반응을 수반하기 때문에 본 발명의 조성물의 활성은 감염 부위에서 적당한 할로겐화물의 존재에 따라 의존한다. 본 발명의 방법과 조성물에서의 이용에 적당한 할로겐화물은 브롬화물이거나 염화물일 수도 있다. 특정한 적용에 이용되는 할로겐화물의 사용, 선택 및 양은 방부제 조성물에 이용되는 할로퍼옥시다제, 원하는 치료효과, 과산화물의 이용능력 그리고 다른 요인과 같은 다양한 요인에 따라 의존할 것이다. 할로퍼옥시다제가 미엘로퍼옥시다제일 경우 할로겐화물은 브롬화물이거나 염화물일 수도 있다. 염화물은 실제로 모든 생리적 매체에 할로겐화물의 보조인자로 제한없이 충분한 수준으로 존재하기 때문에 외부의 염화물원은 일반적으로 필요하지 않아서 현재까지 이용에 가장 바람직한 할로겐화물은 염화물이다. 외부의 염화물원을 원할 경우 이용되는 염화물의 양은 바람직하게는 생리조건에 가까운 용액 ㎖당 약 10μmol 염화물 내지 약 150μmol 염화물의 범위내이다. 할로퍼옥시다제가 호산구 퍼옥시다제인 경우 염화물은 보조인자로서 비교적 비효과적이고 따라서 바람직한 할로겐화물은 브롬화물이다. 국부이용을 위한 액체 조성물에 포함될 경우 본 발명의 조성물은 액체 조성물 ㎖당 약 1 nmol 브롬화물 내지 약 20 μmol 브롬화물, 더 바람직하게는 액체 조성물 ㎖당 약 10 nmol 브롬화물 내지 10μmol 브롬화물 그리고 가장 바람직하게는 액체 조성물 ㎖당 약 100 nmol 브롬화물 내지 약 1μmol 브롬화물을 포함할 수도 있다.

과산화물에 대한 할로겐화물의 비율은 효과적인 살균환경을 형성하는데 중요한 고려 사항이다. 따라서 상기에서 기술된 바와 같이 미생물 공격 부위에서 할로겐화물과 과산화물의 효과적인 수준을 확실하게 하는 것 이외에 최적의 살균활성을 제공하는 할로겐화물: 과산화물 비율로 본 발명의 방법을 실행하는 것이 바람직하다. 할로겐화물: 과산화물의 고비율은 할로퍼옥시다제 활성의 속도를 느리게 하는 경향이 있지만 시스템의 살균효과는 비교적 잘 유지된다. 그러나 상당한 저비율은 할로퍼옥시다제의 작용을 손상시키고 살균활성을 감소시킨다.

본 발명의 방법과 조성물은 정상적인 세균상의 파괴없이 병원성 미생물에 의한 광범위한 성감염질환을 치료하는데 이용될 수 있다. 여기서 사용될 때 "병원성 미생물" 은 병원성 세균, 곰팡이, 바이러스 파티클, 효모, 클라미디아 또는 원생동물을 포함하는 의도인데, 이들은 정상적으로 숙주에서 살지 않거나 숙주이상을 일으킬 수 있고 여기에서 상세하게 기술된 바와 같이 할로퍼옥시다제에 특이적 및 선택적으로 결합될 수 있고 할로퍼옥시다제에 의해 죽는다. 숙주의 병원성 감염을 일으킬 수 있는 성감염 미생물이 잘 알려져 있다. 따라서 본 발명의 방법과 조성물은 예를들면 임균성 요도염, 비특이성 요도염, 점액농성 자궁경관염, 비특이성 생식기 감염, 클라미드성 감염, 매독, 생식기 칸디다증, 연성하감, 성병성 임파육아종, 생식기 헤르페스, 후천성 면역결핍증(AIDS) 등을 포함하는 성감염질환의 치료나 예방에서 이용될 수 있다.

본 발명의 조성물은 일반적으로 약학적으로 허용가능한 담체나 부형제와 함께 정액의 존재하에서 병원성 미생물의 감염과 콜로니화를 억제하는데 효과적인 할로퍼옥시다제와 정액 기질- 특이적 옥시다제의 양으로 이루어진다. 정액 기질- 특이적 옥시다제와 할로퍼옥시다제는 유리, 즉 조성물의 분리된 성분일 수 있다. 또한 옥시다제와 할로퍼옥시다제는 서로 공유결합이나 비- 공유결합될 수 있고 그렇지 않으면 옥시다제와 할로퍼옥시다제에 의해 생성된 과산화물간의 가까운 물리적 접근을 확실하게 하기 위해서 착체될 수도 있다. 약학적으로 허용가능한 담체나 부형제는 일반적으로 담체가 할로과산화물의 선택적인 결합능력 또는 할로퍼옥시다제나 옥시다제 활성을 현저하게 방해하지 않는다는 전제에서 옥시다제- 할로퍼옥시다제 시스템을 혼합하는데 이용될 수도 있다. 바람직하게는 약학적으로 허용가능한 담체나 부형제는 액체, 젤리, 좌약, 거품, 스폰지, 트로키제 또는 충분한 할로겐화물을 더하여 할로퍼옥시다제와 옥시다제를 포함하는 것과 같은 형태이고 최적 살균작용을 확실히 하기에 충분한 pH로 조정된다. 옥시다제- 할로퍼옥시다제 시스템은 (a) 연고와 젤리, (b) 삽입제 (좌약, 스폰지, 트로키제 등), (c) 거품 및 (d) 세척제로 포함될 수 있다. 물질은 바람직하게는 약 성교시, 바람직하게는 성교 이전에 여성의 질 또는 정액이나 정액성 액체의 다른 전염환경으로 도입될 수 있다. 조제물의 강도에 따라 비특이성 질염의 치료, 성감염질환에 대한 보호 그리고 임신의 방지에도 이용될 수 있다. 투여방법은 바람직하게는 방부제 조성물과 성감염 미생물의 직접적인 접촉을 획득하도록 디자인될 것이다.

국부 이용을 위해 약학적으로 허용가능한 담체는 윤활제, 거품, 액체, 크림, 로숀 또는 겔의 형태를 취할 수 있고 부가적으로 유기용제, 유화제, 젤링제, 수분제, 안정제, 계면활성제, 습윤제, 방부제, 서방제 그리고 소량의 연석제, 봉쇄제, 염료, 향료 그리고 국부 투여를 위해서 약학조성물에 일반적으로 이용되는 다른 성분으로 구성된다. 본 발명의 조성물은 성교 동안이나 성교 후 사정된 정액성 액체나 정액의 주변으로 조성물을 전달하기 위하여 스폰지와 같은 흡수제로 주입되거나 콘돔과 같은 고체상 물질의 표면상에 코팅될 수도 있다. 이 유형의 다른 전달 시스템은 이 기술분야의 전문가에게 용이하게 명백할 것이다.

국부 투여를 위한 고체 조제물의 형태는 좌약, 분말 및 과립을 포함한다. 고체 조제물 형태에서 조성물은 수크로스, 젖당 또는 녹말과 같은 적어도 한가지의 불활성 희석제와 혼합될 수도 있고 부가적으로 윤활제, 완충제 그리고 이 기술분야의 전문가에게 잘 알려져 있는 다른 성분을 포함할 수도 있다.

본 발명의 조성물에서 할로퍼옥시다제와 정액- 기질 특이적 옥시다제의 실제 투여량 수준은 특정 할로퍼옥시다제와 투여의 방법에 대해 원하는 치료 또는 예방 반응을 얻기 위해 성감염액체의 부위에서 할로퍼옥시다제와 옥시다제의 양을 얻도록 변화될 수도 있다. 따라서 선택된 투여량 수준은 감염의 특성과 수준, 원하는 치료 반응, 투여의 경로, 원하는 치료 기간 및 다른 요인에 따라 의존할 것이다. 일반적으로 할로퍼옥시다제가 미엘로퍼옥시다제인 경우 국부, 질, 항문 또는 구강 투여를 위한 액체 조제물 형태는 액체 조성물 ㎖당 약 0.1 picomole (pmol) 내지 약 500 pmol의 미엘로퍼옥시다제, 더 바람직하게는 액체 조성물 ㎖당 약 1 pmol 약 200 pmol의 미엘로퍼옥시다제, 가장 바람직하게는 액체 조성물 ㎖당 약 1 pmol 내지 약 50 pmol 의 미엘로퍼옥시다제를 포함할 것이다. 호산구 퍼옥시다제의 유사한 투여량이 이용될 수 있다. 비- 액체 조성물에 대해서는 둘중 어느 하나의 할로퍼옥시다제의 투여량은 일반적으로 조성물 그람당 약 1 pmol 내지 약 1 nmol의 할로퍼옥시다제 (미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제), 더 바람직하게는 조성물 그람당 약 10 pmol 내지 약 500 pmol의 할로퍼옥시다제 그리고 가장 바람직하게는 조성물 그람당 약 50 pmol 내지 약 250 pmol의 할로퍼옥시다제를 포함할 것이다. 상술한 일반 범위내에서 밀리리터당 약 0.1 pmol 내지 약 20 pmol 의 할로퍼옥시다제 (미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제)는 살균작용에 바람직한 반면 약 20 pmol 내지 약 500 pmol의 할로퍼옥시다제는 살균작용과 살정작용 둘다의 경우에 바람직하다. 상술한 투여량 범위는 일반 지침과 본 바람직한 실시예를 나타내지만 시스템의 실제 살균과 살정 활성은 과산화물을 생성하는 옥시다제, 이용 환경 및 다른 요인에 따라 상당히 의존적이다.

옥시다제 투여량은 활성의 관점에서 기술되고 유니트로 표현된다. 1 유니트는 분당 1 μmol 의 과산화수소를 생성하는 옥시다제의 양으로 정의된다. 정액중에 있는 기질의 이용능력이 제한되지 않는 경우 과산화물의 생성율은 조제물에서의 옥시다제 활성을 조절하여 조정될 수 있다. 옥시다제 활성은 이용가능한 기질의 유형과 양, 온도와 pH와 같은 환경 요인, 그리고 조제물에 존재하는 포함성분에 따라 의존적이다. 일반적으로 액체 (또는 비- 액체) 조제물 형태는 정액의 존재하에서 분당 ㎖ (또는 그람) 당 약 1 nmol 내지 약 2μmol 의 과산화물, 더 바람직하게는 분당 ㎖ (또는 그람) 당 약 10 nmol 내지 약 500 nmol의 과산화물을 생성하기에 충분한 양의 정액 기질- 특이적 옥시다제로 구성될 것이다. 상술한 양은 각각 약 1 밀리유니트 내지 2 유니트의 옥시다제 활성과 약 10 밀리유니트 내지 500 밀리유니트의 옥시다제 활성에 일치한다. 예를 들면 분당 약 1 nmol 내지 약 100 nmol의 과산화물의 저생성율은 일반적으로 살균작용에 효과적인 반면 분당 약 100 nmol 내지 약 2μmol 의 과산화물의 고생성율은 살균활성과 살정활성 둘다를 원할때 바람직하다.

여기에서 이용될 때 용어 "정상 세균상"은 건강한 숙주안이나 체표면에 공생수준으로 정상적으로 살고 있는 세균을 의미한다. 예를 들면 정상 세균상은 사람 환자의 구강이나 질내의 젖산세균 군, 예를 들면 구강내의 Streptococcus (viridans) 와 모유를 먹인 유아의 장, 외부 생식기, 전면 요도 및 질내의 Lactobacillus sp. (예를 들면 Tissier 간균과간균) 을 포함한다. 숙주의 정상 세균상을 구성하는 미생물은 잘 알려져 있다 (예를 들면 감염 질환의 원리와 실제, 상기책, New York, pp. 34-36 및 161 참조). 본 발명의 할로퍼옥시다제는 정상 세균상에 비해 선호적으로 많은 병원성 미생물에 선택적으로 결합한다는 것이 알려져 있다. 사람이나 동물은 바람직하게는 본 발명에 따라 사람이나 동물로부터 정상 세균상을 제거하는데 비효과적인 할로퍼옥시다제와 정액 기질- 특이적 옥시다제의 양으로 치료한다.

[실시예]

[실시예 1]

콜린 옥시다제와 할로퍼옥시다제의 이용

상기에서 기술된 바와 같이 정액은 약 6 mM (6μmol/㎖) 콜린을 포함한다. 평균 사정액 부피는 3.5 ㎖이기 때문에 약 21 μmol 의 콜린이 사정액내에서 전달된다.

콜린은 콜린 옥시다제 (콜린 : O₂옥시도리덕타제 EC 1.1.3.17)의 기질이다.

콜린 + O₂-콜린 옥시다제베타인 알데히드 + H₂O₂(2a)

베타인 알데히드 + O₂-콜린 옥시다제베타인 + H₂O₂(2b)

베타인으로 산화되는 콜린당 두 과산화물이 형성된다는 것을 주목해야 한다. 세균의 콜린 옥시다제는 상업적으로 이용가능하다. Alcaligenes 로부터의 콜린 옥시다제는 약 70,000 달톤 분자량의 플라빈 아데닌 디뉴클레오티드 효소이다. 이것의 미하엘리스 상수(Km)은 콜린에 대해서는 0.9 mM이고 베타인 알데히드에 대해서는 6.2 mM이다(Ohta-Fukuyama et al., 1980, J Biochem 88: 197-203). Arthrobacter로부터의 콜린 옥시다제는 4.5 의 등전점(pI)을 갖는 약 75,000 달톤의 플라보 효소이다. 이것의 Km은 콜린에 대해서는 1.2 mM이고 베타인 알데히드에 대해서는 8.7 mM이다 (Ikuta et al., 1977, J Biochem 82: 1741-7149).

콜린 이외에도 정액은 산 포스파타제의 작용에 의해 콜린으로 전환되는 약 14 mM 의 포스포릴콜린을 포함한다.

포스포릴콜린 -산 포스파타제콜린 + 인산염 (3)

정액 포스포릴콜린의 가수분해는 필수적으로 1 시간내에 완성된다. 이와 같이 콜린의 이용능력은 계속하여 사정 후 1 시간내 증가한다 (Arrata et al., 1978, Fertil Steril 30: 329-333). 사정 후 1 시간내의 이용가능한 전체 콜린, 즉 초기 콜린에 가수분해되는 포스포릴콜린을 더한 전체 콜린은 정액의 약 20 μmol/㎖이거나 전체 약 70 μmol 이다.

콜린 옥시다제에 의한 전체 콜린의 전환은 140 μmol 과산화수소를 생성할 것이다. 이것은 비교적 다량의 과산화물이지만 과산화물로의 콜린 전환은 조제물중의 콜린 옥시다제의 활성에 따라 의존하므로 과산화물 생성속도가 조제물중의 콜린 옥시다제의 양을 조절하여 조정될 수 있다. 콜린 옥시다제는 살균작용에는 충분하지만 살정 작용에는 불충분한 퍼옥시다제 생성율을 생성하는 농도에 조정될 수 있다. 원한다면 콜린 옥시다제의 농도는 살균작용과 살정작용 둘다에 충분한 과산화물 생성율을 생산하기 위해서 증가될 수 있다. 콜린은 질 액체의 주요한 성분이 아니기 때문에 산화활성에 의존적인 콜린의 산화는 정액 콜린의 고갈로 종결할 것이다.

세균, 효모 및 곰팡이 포자의 콜린 옥시다제- 미엘로퍼옥시다제와 콜린 옥시다제- 호산구퍼옥시다제 시스템의 살균 능력을 다음과 같이 증명하였다: 100mEq/L Cl^-, 1 mEq/L Br^-및 1 mM ℓ- 알라닌을 포함하는 50 mM 아세트산염 완충액에 Alcaligenes sp. (존재할 때 지시된 바와 같이) 로부터의 0.2 유니트 (즉 20㎍)의 콜린 옥시다제, 20 pmol (2.8 ㎍)의 돼지 미엘로퍼옥시다제 (Lot#1899201, ExOxEmis Inc., San Antonio, Texas) 나 20 pmol (1.5㎍)의 돼지 호산구 퍼옥시다제 (Lot#1929201, ExOxEmis Inc., San Antonio, Texas) 를 포함하는 반응 혼합물을 제조하였다. pH를 50 mM MOPS 완충액의 첨가에 의해 7 로 조정하였다. 콜린의 최종농도는 150 mM (150 μmol/ml) 이었다. 최종부피는 1 ㎖ 이었다. 혼합물을 S. aureus, C. albicans 또는 A. fumigatus 포자의 ∼10⁶내지 10⁷포자 형성 유니트(CFU) 로 접종하였고 22℃에서 4 시간동안 배양하였다.

S. aureus 를 트립티카제 콩 한천 배지상에 도말하였다. C. albicans 와 A. fumigatus 를 사부로 덱스트로스 한천 배지상에 도말하였다. 결과를 표 1에 35℃에서 배양 ∼48시간 후 측정된 CFU 로서 나타내었다.

[표 1]

Staphylococcus aureus, Candida albicans, 그리고 Aspergillus fumigatus 에 대한 콜린 옥시다제- 할로퍼옥시다제의 살균 작용

표 1에서 알 수 있는 바와 같이 기질 (즉, 콜린) 이 제한되지 않을 경우 (예를 들면 150 Mm), 콜린 옥시다제 0.2 유니트 (20㎍)에 20 pmol (2.8㎍)의 미엘로퍼옥시다제나 아니면 20 pmol (1.5㎍)의 호산구 퍼옥시다제를 더한 것은 Aspergillus fumagatus 포자뿐만 아니라 Staphylococcus aureus, Candida albicans 를 완전히 죽이는데 충분하다. 효과적인 살균작용에 필요한 콜린 옥시다제- 할로퍼옥시다제의 양은 이 시스템을 이용하는 각 유형의 조제물에 대해 실험적으로 결정되어야 한다.

Staphylococcus aureus 에 대한 살균활성에 미치는 콜린 옥시다제의 다양한 직접적인 효과를 다음과 같이 결정하였다. 콜린 옥시다제의 필수조건을 측정하기 위해서 콜린 ( 40μmol/㎖) 과 할로퍼옥시다제 (10 pmol/㎖) 의 양이 더 작지만 비- 속도제한 농도내로 결정하고 콜린 옥시다제를 변화시킨 것을 제외하고 상술한 방법을 따랐다.

각 테스트는 100 mEq/L Cl^-, 1mEq/L Br^-및 1 mM ℓ- 알라닌을 포함하는 50 mM 아세트 아세트산염 완충액에 Alcaligenes sp. 으로부터의 콜린 옥시다제의 지시된 양 (0.1 유니트는 10㎍ 과 같다), 10 pmol (1.4 ㎍)의 돼지 미엘로퍼옥시다제 (Lot#1899201)나 10 pmol (0.7 ㎍)의 돼지 호산구 퍼옥시다제 (Lot#1929201)를 포함하였다. pH는 50 mM MOPS 완충액을 첨가하여 6.7 에 조정하였다. 콜린의 최종농도는 40 mM (40 μmol/㎖) 이었다. 최종부피는 1 ㎖이었다. 2 시간 배양 (37℃) 후 미생물을 트립티카제 콩 한천배지상에 도말하였다. 결과를 측정된 콜로니 형성 유니트(CFU) 로 표 2에 나타내었다.

[표 2]

Staphylococcus aureus 에 대한 콜린 옥시다제- 할로퍼옥시다제의 살균 작용에 미치는 콜린 옥시다제 농도의 효과

표 2에서 알 수 있는 바와 같이 Staph. aureus 가 옥시다제의 0.05 유니트로 완전히 죽는 것이 관찰되었고 옥시다제의 0.025 유니트로는 불완전하지만 현저하게 죽는 것이 관찰되었다. 최적 반응 필수조건이 충족된다는 것을 전제로 하면 50 밀리유니트 (0.05 유니트) 의 옥시다제는 분당 약 50 nmol 의 과산화수소를 생성해야 한다. Staph. aureus 가 호산구 퍼옥시다제 단독으로는 약간, 콜린 옥시다제 단독으로는 더 적은 범위로 죽는 것이 관찰되었다.

[실시예 2]

콜레스테롤 옥시다제와 할로퍼옥시다제의 이용

정액의 콜레스테롤 농도는 약 1.6 mM이었다. 3.5 ㎖ 부피를 추정하여 사정액당 약 5.6 μmol 의 콜레스테롤이 있다. 정량화하기는 어렵지만 콜레스테롤은 또한 질액체의 주요한 성분이다 (Stone & Gable, 1959).

콜레스테롤과 다른 3-히드록시 스테로이드는 플라보 효소의 콜레스테롤 옥시다제( 콜레스테롤 : O₂옥시도리덕타제 EC 1.1.3.6) 의 기질이다:

콜레스테롤 + O₂-콜레스테롤 옥시다제4-콜레스텐-3- 온

+ H₂O₂(4)

광범위하게 다양한 미생물 콜레스테롤 옥시다제가 상업적으로 이용가능하다. 본 실시예에 있어서 Norcardia erythropolis 콜레스테롤 옥시다제가 이용되었다. 이 플라보효소는 상당히 안정하고 광범위한 pH 범위에 걸쳐서 활성이 있으며 콜레스테롤에 대해 14 mM 의 Km을 갖는다 (Richmond, 1973, Clin Chem 19: 1350-1356).

콜레스테롤 옥시다제- 할로퍼옥시다제 시스템은 옥시다제의 기질인 콜레스테롤이 정액에 노출되기 전 질 액체에 존재한다는 점에서 이미 기술된 콜린 옥시다제- 할로퍼옥시다제 시스템과는 다르다. 콜레스테롤 옥시다제- 할로퍼옥시다제 활성은 대개 정액에 독립적이므로 살균작용은 적용시기에 개시된다. 성교의 결과 정액의 사정은 ∼5.6 μmol 의 콜레스테롤을 콜레스테롤 옥시다제- 할로퍼옥시다제의 기질로서 질에 있는 조제물로의 동시 유입을 일으킨다.

콜레스테롤 옥시다제는 비교적 강한 효소이고 표 3의 데이타에 의해 증명되는 바와 같이 콜레스테롤 옥시다제-할로퍼옥시다제 시스템은 세균, 효모 및 곰팡이 포자에 대한 강력한 살균작용을 나타낸다. 심지어 정액의 콜레스테롤을 더하여 결합된 질 콜레스테롤이 전에 6 μmol 을 초과하지 않아도 이 시스템은 성감염질환에 대해 충분한 보호를 제공한다. 이 시스템은 또한 강력하게 살정적이지만 기질의 제한은 이 관점에서 콜린 옥시다제- 할로퍼옥시다제 시스템보다 덜 강력할 것이라는 것을 암시한다.

정액- 특이적 옥시다제로서 콜레스테롤 옥시다제를 이용하는 본 발명의 조성물의 유효성을 증명하기 위해서 실시예 1의 방법을 다음과 같이 콜레스테롤 옥시다제를 이용하여 반복하였다. 지시된 경우 반응 혼합물은 100 mEq/L Cl^-, 1 mEq/L Br^-및 1 mM ℓ- 알라닌을 포함하는 50 mM 아세트산염 완충액에 Norcardia erythropolis로부터의 콜레스테롤 옥시다제 0.1 유니트 (즉, 4㎍), 20 pmol (2.8㎍)의 돼지 미엘로퍼옥시다제 (Lot#1899201, ExOxEmis, Inc., San Antonio, Texas) 나 20 pmol (1.5㎍)의 돼지 호산구 퍼옥시다제 (Lot#1929201, ExOxEmis, Inc., San Antonio, Texas)를 포함하였다. pH는 50 mM MOPS 완충액의 첨가에 의해 7 로 조정하였다. 콜레스테롤의 최종 농도는 7 mM (7 μmol/㎖) 이었다. 최종 부피는 1 ㎖이었다. 4 시간 배양 후 미생물을 도말하였다. S. aureus를 트립티카제 콩 한천배지상에서 도말하였다. C.ablicans 와 A. fumigatus를 사부르 덱스트로스 한천배지상에 도말하였다. 결과는 측정된 콜로니 형성 유니트(CFU) 로 표 3에 나타내었다.

[표 3]

Staphylococcus aureus, Candida albicans, 및 Aspergillus fumigatus 에 대한 콜레스테롤 옥시다제- 할로퍼옥시다제의 살균 작용

[실시예 3]

다른 옥시다제와 할로퍼옥시다제의 이용

정액은 과산화물을 생성하는 옥시다제의 기질이거나 기질로 이용되도록 변화될 수 있는 많은 다른 화합물을 포함한다. 더 명백한 화합물은 ℓ- 아미노산, 폴리아민, 요산염, 젖산염, 피루브산염, 글루코스 및 갈락토스를 포함한다. 정액중의 이들 화합물의 농도는 옥시다제- 할로퍼옥시다제의 살균작용을 일으키기에 충분하다. ℓ- 아미노산과 폴리아민 같은 이들의 일정한 화합물은 비교적 고농도로 존재한다는 관점에서 잇점을 갖는다.

강력한 많은 기질은 추가 효소가 조제물에 포함되어 있는 경우에도 또한 존재한다. 예를 들면 이성질체가 프럭토스를 글루코스로 전환하는 것으로 알려져 있다면 글루코스 옥시다제- 할로퍼옥시다제 조제물로의 이러한 효소의 삽입은 프럭토스 (∼13μmol/㎖ 정액)를 글루코스 옥시다제에 의한 과산화물 생성의 간접적인 기질로 이용되게 할 것이다. 더욱이 정자에서 중요 영양물인 프럭토스를 제거하는 것은 이러한 시스템의 살정능력에 더 도움이 되는 것 같다.

글루코스는간균의 중요 영양물이기 때문에 글루코스는 옥시다제- 할로퍼옥시다제의 살균 시스템의 최상의 기질은 아니다. 글루코스의 효소에 의한 고갈은 정상 세균상에 불리하게 작용할 것이다. "간균이 직접적으로 글루코스를 젖산과 과산화물로 물질대사하게 하는 것이 더 좋다. 그러나 정상 세균상의 물질대사의 젖산염 산물은 젖산염 옥시다제- 할로퍼옥시다제 살균 시스템의 기질로 이용할 수 있다.

젖산염은 플라보효소 젖산염 옥시다제 (젖산염 : O₂옥시도리덕타제) 의 기질이다.

젖산염 + O₂-젖산염 옥시다제피루브산염 + H₂O₂(5)

Pediococcus sp. 로부터 제조된 시판용 젖산염 옥시다제를 이 실시예에서 이용하였다(Mizutani et al., 1983, Anal Chem 55: 35-38). 표 4의 데이타에 의해 예시된 바와 같이 이 젖산염 옥시다제- 할로퍼옥시다제 시스템은 우수한 살균 활성을 증명하였다. 그러나 곰팡이 방지제 활성은 테스트되는 다른 옥시다제- 할로퍼옥시다제 시스템과 비교하여 부족하다.

실시예 1의 과정은 젖산염 옥시다제를 정액- 기질 특이 옥시다제로 이용하여 다음과 같이 반복하였다. 지시된 경우 반응 혼합물은 100 mEq/L Cl^-, 1 mEq/L Br^-및 1 mM ℓ- 알라닌을 포함하는 50 mM 아세트산염 완충액에 Pediococcus sp. 로부터의 젖산염 옥시다제 0.2 유니트 (즉 5 ㎍), 20 pmol (2.8㎍)의 돼지 미엘로퍼옥시다제 (Lot#1899201, ExOxEmis, Inc., San Antonio, Texas) 나 20 pmol (1.5㎍)의 돼지 호산구 퍼옥시다제 (Lot#1929201, ExOxEmis, Inc., San Antonio, Texas)를 포함하였다. pH는 50 mM MOPS 완충액의 첨가에 의해 7 로 조정하였다. 젖산염의 최종 농도는 150 mM (150 μmol/㎖) 이었다. 최종 부피는 1 ㎖이었다. 4 시간 배양 후 미생물을 도말하였다. S. aureus를 트립티카제 콩 한천배지상에서 도말하였다. C. ablicans 와 A. fumigatus를 사부르 덱스트로스 한천배지상에 도말하였다. 결과를 측정된 콜로니 형성 유니트(CFU) 로 표 4에 나타내었다.

[표 4]

Staphylococcus aureus, Candida albicans, 및 Aspergillus fumigatus 에 대한 젖산염 옥시다제- 할로퍼옥시다제의 살균 작용

본 발명의 바람직한 실시예가 예시되고 기술되어 있으나 본 발명의 기술사상과 범위로부터 벗어나지 않고 다양한 변경이 행해질 수 있다는 것이 이해될 것이다.

Claims (30)

1. 병원성 세균, Chlamydia 또는 효모의 성장을 억제하기 위한 약의 제조방법으로서, 약학적으로 허용가능한 담체와 함께 콜린 옥시다제, 콜레스테롤 옥시다제, ℓ- 아미노산옥시다제, 폴리아민 옥시다제, 요산염 옥시다제, 피루브산염 옥시다제 및 젖산염 옥시다제로 구성되는 군으로부터 선택되는 옥시다제와 할로퍼옥시다제의 조성물의 사용을 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
2. 제 1항에 있어서, 할로퍼옥시다제는 미엘로퍼옥시다제와 호산구 퍼옥시다제로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 제조방법.
3. 제 2항에 있어서, 병원성 세균, Chlamydia 또는 효모가 약학적으로 허용가능한 액체 담체 ㎖당 0.1 pmol의 미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제 내지 500 pmol의 미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제와 접촉되도록 하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
4. 제 2항에 있어서, 병원성 세균, Chlamydia 또는 효모가 약학적으로 허용가능한 액체 담체 ㎖당 1 pmol의 미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제 내지 200 pmol의 미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제와 접촉되도록 하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
5. 제 2항에 있어서, 병원성 세균, Chlamydia 또는 효모가 약학적으로 허용가능한 비-액체 담체 그램당 1 pmol의 미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제 내지 1 nmol의 미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제와 접촉되도록 하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
6. 제 2항에 있어서, 병원성 세균, Chlamydia 또는 효모가 약학적으로 허용가능한 비-액체 담체 그램당 10 pmol 의 미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제 내지 500 pmol의 미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제와 접촉되도록 하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
7. 제 1항에 있어서, 옥시다제는 정액의 존재시 분당 ㎖당 1 nmol 내지 1μmol의 과산화물을 생성하는데 효과적인 것을 특징으로 하는 제조방법.
8. 제 1항에 있어서, 옥시다제는 정액의 존재시 분당 ㎖당 10 nmol 내지 500 nmol의 과산화물을 생성하는데 효과적인 것을 특징으로 하는 제조방법.
9. 제 1항에 있어서, 옥시다제는 콜린 옥시다제, 콜레스테롤 옥시다제, 및 젖산염 옥시다제로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 제조방법.
10. 제 9항에 있어서, 병원성 세균, Chlamydia 또는 효모가 약학적으로 허용가능한 액체 담체 ㎖당 1 밀리유니트 내지 2 유니트의 콜린 옥시다제나 콜레스테롤 옥시다제와 접촉되는 것을 특징으로 하는 제조방법.
11. 제 9항에 있어서, 병원성 세균, Chlamydia 또는 효모가 약학적으로 허용가능한 비-액체 담체 그램당 1 밀리유니트 내지 2 유니트의 콜린 옥시다제나 콜레스테롤 옥시다제와 접촉되는 것을 특징으로 하는 제조방법.
12. 제 9항에 있어서, 병원성 세균, Chlamydia 또는 효모가 약학적으로 허용가능한 액체 담체 ㎖당 10 밀리유니트 내지 500 밀리유니트의 콜린 옥시다제나 콜레스테롤 옥시다제와 접촉되는 것을 특징으로 하는 제조방법.
13. 제 9항에 있어서, 병원성 세균, Chlamydia 또는 효모 약학적으로 허용가능한 비-액체 담체 그램당 10 밀리유니트 내지 500 밀리유니트의 콜린 옥시다제나 콜레스테롤 옥시다제와 접촉되는 것을 특징으로 하는 제조방법.
14. 제 1항에 있어서, 병원성 세균, Chlamydia 또는 효모가 약학적으로 허용가능한 연고, 젤리, 거품, 세척제 또는 질 삽입물중의 할로퍼옥시다제와 옥시다제와 접촉되는 것을 특징으로 하는 제조방법.
15. 여성 숙주의 질에서 성감염질환을 일으키는 병원성 세균, Chlamydia 또는 효모의 성장을 억제하는 약학 조성물에 있어서, 약학적으로 허용가능한 담체와 함께, 정액성 액체나 정액의 존재하에 병원성 세균, Chlamydia 또는 효모의 성장을 억제하는 데 효과적인 양의 콜린 옥시다제, 콜레스테롤 옥시다제, ℓ- 아미노산 옥시다제, 폴리아민 옥시다제, 요산염 옥시다제, 피루브산염 옥시다제 및 젖산염 옥시다제로 구성되는 군으로부터 선택되는 옥시다제와 할로퍼옥시다제를 포함하는 약학 조성물.
16. 제15항에 있어서, 할로퍼옥시다제는 미엘로퍼옥시다제와 호산구 퍼옥시다제로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
17. 제16항에 있어서, 약학적으로 허용가능한 액체 담체 ㎖당 0.1 pmol의 미엘로 퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제 내지 500 pmol의 미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
18. 제16항에 있어서, 약학적으로 허용가능한 비-액체 담체의 그램당 1 pmol 의 미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제 내지 1 nmol의 미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
19. 제16항에 있어서, 약학적으로 허용가능한 액체 담체 ㎖당 1 pmol의 미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제 내지 200 pmol의 미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
20. 제16항에 있어서, 약학적으로 허용가능한 비-액체 담체의 그램당 10 pmol 의 미엘로퍼옥시다제는 호산구 퍼옥시다제 내지 500 pmol의 미엘로퍼옥시다제나 호산구 퍼옥시다제를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
21. 제15항에 있어서, 약학적으로 허용가능한 액체 담체 ㎖당 1 밀리유니트 내지 2 유니트의 정액 기질-특이적 옥시다제를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
22. 제15항에 있어서, 질에서 약학적으로 허용가능한 비-액체 담체 그램당 1 밀리유니트의 정액 기질-특이적 옥시다제 내지 2 유니트의 정액 기질-특이적 옥시다제를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
23. 제15항에 있어서, 정액 기질-특이적 옥시다제는 콜린 옥시다제, 콜레스테롤 옥시다제, 및 젖산염 옥시다제로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
24. 제23항에 있어서, 약학적으로 허용가능한 액체 담체 ㎖당 약 1 밀리유니트 내지 약 2 유니트의 콜린 옥시다제 또는 콜레스테롤 옥시다제를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
25. 제23항에 있어서, 약학적으로 허용가능한 비-액체 담체 그램당 1 밀리유니트 내지 2 유니트의 콜린 옥시다제 또는 콜레스테롤 옥시다제를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
26. 제23항에 있어서, 약학적으로 허용가능한 액체 담체 ㎖당 10 밀리유니트 내지 500 밀리유니트의 콜린 옥시다제 또는 콜레스테롤 옥시다제를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
27. 제23항에 있어서, 약학적으로 허용가능한 비-액체 담체 그램당 10 밀리유니트 내지 500 밀리유니트의 콜린 옥시다제 또는 콜레스테롤 옥시다제를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
28. 제15항에 있어서, 약학적으로 허용가능한 담체는 연고, 젤리, 거품, 세척제 또는 질 삽입물의 형태인 것을 특징으로 하는 조성물.
29. 제15항에 있어서, 할로퍼옥시다제는 옥시다제에 공유 결합되어 있는 것을 특징으로 하는 조성물.
30. 제15항에 있어서, 할로퍼옥시다제는 옥시다제에 비공유 결합되어 있는 것을 특징으로 하는 조성물.