KR0139567B1 - Method for producing xy of oreochromis niloticus using xx - Google Patents

Method for producing xy of oreochromis niloticus using xx

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KR0139567B1 KR1019950006840A KR19950006840A KR0139567B1 KR 0139567 B1 KR0139567 B1 KR 0139567B1 KR 1019950006840 A KR1019950006840 A KR 1019950006840A KR 19950006840 A KR19950006840 A KR 19950006840A KR 0139567 B1 KR0139567 B1 KR 0139567B1
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Abstract

본 발명은 양식 대상종으로 각광받고 있는 나일 틸라피아의 전수컷 집단을 생산하는 방법 및 이에 사용되는 틸라피아 초암컷(YY)에 관한 것이다. 나일 틸라피아(Oreochromis niloticus)의 수컷(XY)을 성전환시키고, 이로부터 자성발생성 이배체를 유도하여 초수컷(YY)을 생산하고, 이를 성전환시켜 초암컷(YY)을 얻고, 초암컷(YY)과 초수컷(YY)을 교배시켜 초수컷(YY)을 생산하고, 초수컷(YY)과 정상 암컷(XX)을 교배시켜 전수컷(XY) 집단을 생산하는 방법에 의하면, 단순 교배 만으로 전수컷 집단을 생산할 수 있으므로 경제적으로 생산성을 배가시킬 수 있을 뿐 아니라, 종내 교배에 의하기 때문에 항상 성공적으로 우수한 전수컷 자손 집단 만을 생산할 수 있으며, 호르몬 사용에 따른 부작용 및 환경 파괴 등 여러가지 문제를 야기하지 않는다.The present invention relates to a method for producing a whole male population of Nile tilapia, which has been spotlighted as a farming target species, and a tilapia super female (YY) used therein. The male (XY) of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) is sexually transduced, from which a female embryonic diploid is induced to produce a super male (YY), which is transgenic to obtain a super female (YY), super female (YY) and According to a method of producing a male (YY) by crossing the males (YY), and producing a male (XY) population by crossing the male (YY) and the normal female (XX), the whole male group by simple breeding alone Because it can be produced, not only can it economically double the productivity, but because of intra-breeding, it can always produce only a good population of all male offspring successfully, and does not cause various problems such as side effects and environmental damage caused by hormone use.

Description

틸라피아 초암컷을 이용한 전수컷 집단의 생산방법Production Method of Whole Male Population Using Tilapia Super-females

제 1도는 초암컷(YY)의 생산을 통하여 틸라피아의 전수컷 집단을 생산하는 방법을 모식적으로 나타낸 구조도이다.1 is a structural diagram schematically showing a method for producing a whole male population of tilapia through the production of ultra-female (YY).

본 발명은 양식 대상종으로 각광받고 있는 나일 틸라피아(niletilapia, 학명 ; Oreochromis niloticus, 상품명; 역돔)를 대상으로, 단순히 교배만을 통하여 성장이 빠른 전수컷 집단을 생산하는 방법 및 이에 사용되는 틸라피아 초암컷에 관한 것이다.The present invention targets nile tilapia (Oreochromis niloticus, trade name; reverse dome), which has been spotlighted as a cultured species, and a method for producing a fast-growing whole male population by simply breeding and tilapia super-females used therein It is about.

틸라피아는 열대 및 아열대 지역에서 전세계적으로 활발히 양식되고 있는 대형 어류종으로, 우리나라에서도 중요한 양식대상으로 각광받고 있다. 이러한 틸라피아를 암컷과 수컷을 함께 양식하는 경우에는 조기 성숙 및 불필요한 번식 등으로 인해 생산성이 감소하는 문제점이 있으며, 특히 본 종의 경우는 암컷에 비해 수컷의 성장이 월등히 빠르기 때문에 양식 산업 현장에서는 전수컷 집단 만을 양식하여 생산성을 높이는 방법이 절대적으로 요구되고 있는 실정이다.Tilapia is a large fish species that is actively farmed around the world in tropical and subtropical areas. In the case of farming the tilapia together with females and males, there is a problem that productivity decreases due to early maturation and unnecessary breeding. Especially, in the case of this species, males grow much faster than females, so all males are grown in the aquaculture industry. There is an absolute demand for a method of raising productivity by farming only groups.

이와 같이, 틸라피아의 전수컷 집단 만을 양식하기 위한 방법으로는 암수 선별 방법, 종간 교배 방법 및 호르몬 처리를 통한 생리학적 성전환 방법 등이 있다.As such, a method for farming the entire male population of tilapia includes a male and female selection method, a cross-breeding method, and a physiological sex conversion method through hormone treatment.

먼저 암수 선별 방법은 교배를 통하여 생산된 종묘(aquaticseed)를 5개월 이상 사육한 다음 생식기 관찰을 통하여 암컷과 수컷을 판별한 후에 수컷 만을 선별하여 선택적으로 양식하는 방법인데, 생식소를 기준으로 성별을 판단하기 위해서는 장기간의 사육이 필요할 뿐 아니라, 각 개체를 일일히 사람이 판단해야 하므로 인건비 등 경제적 손실이 크면서도, 종묘 생산량의 절반을 차지하는 암컷을 제거하기 때문에 오히려 생산성이 저하된다는 문제점이 있다.First, the male and female selection method is to breed the aquaticseed produced through the mating for 5 months or more, and then to identify the male and the male through genital observation, and then select only the males and selectively breed the sex. In order to do this, not only long-term breeding is required, but each individual must be judged by each person, so there is a problem in that productivity is lowered because economic losses such as labor costs are eliminated and females occupying half of the seedling production are removed.

종간 교배 방법은 성결정 메카니즘을 이용하여 암컷과 수컷 친어의 종을 달리하는 타종과의 교배를 통하여 수컷 자손만을 생산하는 방법인데, 실제 교배에 사용되는 친어가 유전적으로 순수하지 못하기 때문에 항상 성공적인 결과를 기대할 수 만은 없을 뿐 아니라, 전수컷 집단이 생산된다 하더라도 성장이 늦거나 체색이 나빠 상품성이 떨어진다는 문제점이 있다.Cross-breeding is a method in which only male offspring are produced by cross-breeding between females and other males using sex crystallization mechanisms. Not only can not expect, even if the whole male population is produced, there is a problem that the growth is slow or the body color is poor and the commerciality is lowered.

호르몬 처리를 통한 생리학적 성전환 방법은 개체 발생 과정중 성호르몬(sex steroids)을 사료 등에 섞어 일정기간 동안 공급하는 등의 호르몬 처리를 통해 성전환시키는 방법인데, 사료 제조방법이 번거롭고 보관상 문제점이 있고, 개체간 사료의 섭취량이 달라 모든 개체에 동일한 호르몬 처리 효과를 기대할 수는 없다는 문제가 있다. 게다가, 소실된 사료가 자연수계로 유출되면서 자연 생태계를 혼란시키는 등 환경 오염 문제가 수반될 뿐 아니라(Gall, A.E., 1983, Genetics of Fish: A Summary of Discussion, Aquaculture, 33(1983), 383-394) 어체에 잔류된 성호르몬이 이들 어류를 섭취한 인간의 체내에서 발암 물질로 작용 할 수 있기 때문에(Murad, F. and Haynes, R.C., Jr., 1985, Androgens. In., Goodman and Gilman's, The Pharmacological Basis of Therapeutics, 7th edition, pp1440-1458), 산업화하기에는 인체에 대한 안전성이 확보되어 있지 않으며, 게다가 스테로이드 호르몬에 대해서는 일반인에 대한 판매가 전면 금지되어 있다는 문제점도 있다.The physiological sex conversion method through hormone treatment is a method of sex conversion through the treatment of hormones, such as supplying sex hormones (sex steroids) to the feed during a period of individual development during a period of time, feed manufacturing method is cumbersome and storage problems, There is a problem that it is not possible to expect the same hormonal treatment effect on all individuals because the intake of feed between individuals is different. In addition, the loss of fodder spills into the natural waters, which not only entails environmental pollution problems (Gall, AE, 1983, Genetics of Fish: A Summary of Discussion, Aquaculture, 33 (1983), 383-). 394) Sex hormones that remain in fish can act as carcinogens in the human body of these fish (Murad, F. and Haynes, RC, Jr., 1985, Androgens. In., Goodman and Gilman's, The Pharmacological Basis of Therapeutics, 7th edition, pp1440-1458), is not safe for humans to industrialize, and there is also a problem that the sale of steroid hormones to the general public is completely prohibited.

한편, 나일틸라피아는 정상 암컷의 인자형이 XX 이고 정상 수컷의 인자형이 XY로 되는데, Scott, A.G. 등은 인자형 YY인 초수컷(supermale)과 정상암컷의 교배를 통하여 전수컷 집단을 생산할 수 있음을 보여주면서, 인자형 YY의 초수컷을 대량 생산하는 것이 문제임을 언급하고 있다.(Scott, A.G., Penman, D.J., Beardmore, J.A. and Skibinski, D.O.F., The 'YY' Supermale in Oreochromis niloticus (L.) and its Potential in Aquaculture, Aquaculture, 78 (1989( 237-251).Nile tilapia, on the other hand, has a genotype of XX for normal females and XY for normal males. Scott, A.G. Et al. Show that it is possible to produce whole male populations through the crossing of genotype YY with supermales and normal females, and mentions that mass production of genotype YY is problematic (Scott, AG, Penman). , DJ, Beardmore, JA and Skibinski, DOF, The 'YY' Supermale in Oreochromis niloticus (L.) and its Potential in Aquaculture, Aquaculture, 78 (1989 (237-251).

본 발명의 목적은 상기와 같은 종래의 문제점을 야기하지 않으면서 틸라피아의 생산성을 향상시키고 생산량을 증대시키기 위하여, 초암컷(super female; YY)의 생산을 통하여 인자형 YY의 초수컷을 생산하고 이어서 성장이 빠른 전수컷 종묘(all male progeny)만을 생산하는 경제적이고도 효율적인 방법을 제공하는 것이다.An object of the present invention is to produce a super male of type YY through the production of a super female (YY) in order to improve the productivity and increase the yield of tilapia without causing the conventional problems as described above, and then the growth is It is an economical and efficient way of producing only all male progeny.

본 발명의 다른 목적은 상기와 같이 틸라피아의 전수컷 집단을 생산하는데 사용되는 인자형 YY의 초암컷 및 이를 생산하는 방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a super female of the genotype YY used to produce the whole male population of tilapia as described above and a method of producing the same.

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명에서는, 나일 틸라피아(nile tilapia, 학명;Oreochromis niloticus)의 수컷(XY)을 성전환시키고, 이로부터 자성발생성 이배체를 유도하여 초수컷(YY)을 생산하고, 이를 성전환시켜 초암컷(YY)을 얻고, 초암컷(YY)과 초수컷(YY)을 교배시켜 초수컷(YY)을 생산하고, 초수컷(YY)과 정상 암컷(XX)을 교배시켜 전수컷(XY) 집단을 생산하는 방법을 제공한다.In order to achieve the above object, in the present invention, male (XY) of nile tilapia (Oreochromis niloticus) is sex-transformed, from which agonogenic diploids are induced to produce supermale (YY), To obtain super females (YY), cross breeding super females (YY) and super males (YY) to produce super males (YY), and cross breeding super males (YY) and normal females (XX) to total males (XY). Provide a way to produce a population.

상기 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명에서는, 나일 틸라피아(nile tilapia, 학명;Oreochromis niloticus)의 수컷(XY)을 성전환시키고, 이로부터 자서발생성 이배체를 유도하여 초수컷(YY)을 생산하고, 이를 성전환시켜 인자형 YY인 나일 틸라피아의 초암컷을 생산하는 방법 및 이에 의하여 생산된 인자형 YY인 나일 틸라피아의 초암컷을 제공한다.In order to achieve the above object, in the present invention, male (XY) of nile tilapia (Oreochromis niloticus) is transgenic, and autologous diploids are induced therefrom to produce supermale (YY). Provided is a method of producing transgenic females of Nile tilapia of genotype YY and ultra-females of Nile tilapia of genotype YY produced thereby.

이하 제 1 도를 참고하여 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to FIG. 1.

제 1 도는 초암컷(YY)의 생산을 통하여 틸라피아의 전수컷 집단을 생산하는 방법을 모식적으로 나타낸 구조도이다.1 is a structural diagram schematically showing a method for producing a whole male population of tilapia through the production of super females (YY).

나일틸라피아는 성결정 메카니즘이 암컷 동형 접합성으로 정상 암컷의 인자형은 XX이고 정상 수컷의 인자형은 XY로 된다. 먼저 교배를 통하여 생산된 정상 수컷(XY)에 자성화 호르몬을 사료에 섞어 경구투여하여 생리학적인 성전환을 유도하여 성전환 암컷(pseudofemale, △XY)을 생산한다(1), 여기에서 자성화 호르몬으로는 17 β-에스트라디올(17 β-estradiol)을 사용하는데, 사료에 480 ppm의 농도로 섞어 부화후 7일 부터 30일 동안 경구투여하는 것이 바람직히다.In Nile tilapia, the sex determination mechanism is female homozygous, with the normal female genotype XX and the normal male genotype XY. First, normal males (XY) produced through cross-breeding are mixed with oral magnetization hormone to feed to induce physiological sex conversion to produce sex females (pseudofemale, △ XY) (1) 17 β-estradiol is used, and it is preferable to mix the feed at a concentration of 480 ppm for oral administration for 7 to 30 days after incubation.

교배를 통하여 나온 자손의 성비를 조사하여 암컷의 인자형을 역추적하는 것을 자손검정(progeny test)이라 한다. 상기 성전환 암컷(XY)과 정상 수컷(XY)의 교배에서 나온 자손의 성비가 암컷:수컷=1:3이 되는 것을 이용하여, 인자형이 XY인 암컷을 선별해 낸다(2).Traceback of female genotypes by examining the sex ratio of offspring through mating is called the progeny test. Females having a genotype of XY are selected using a sex ratio of progeny resulting from the crossover of the transgenic female (XY) and the normal male (XY) (female: male = 1: 3) (2).

정자의 유전물질을 불활성화시켜 암컷의 유전물질 만이 자손에 전달되도록 하고 수정후 제2극체의 방출을 억제하여 이배체화하는 것을 자성발생성 이배체(gynogenetic diploid) 유도라고 한다. 즉, 상기에서 선별한 암컷(XY)으로부터 얻은 난자와 자외선 조사에 의해 유전적으로 불활성화시킨 정자를 수정시킨 후, 저온 처리하여 제2극체의 배출을 억제시켜 자성발생성 이배체를 유도하면, 그의 자손들은 인자형이 XX 인 암컷과 YY인 초수컷(super male, YY)이 생산된다(3).Inactivating the sperm's genetic material so that only the female's genetic material is transferred to the offspring, and after fertilization, inhibiting the release of the second pole is called induction of gynegenetic diploid. That is, after fertilization of eggs obtained from the above-selected females (XY) and sperm genetically inactivated by ultraviolet irradiation, and low-temperature treatment, the release of the second polar body is suppressed to induce a magnetically generated diploid. They produce females with genotype XX and super males (YY) with YY (3).

상기 자성발생성 이배체 자손(gynogenetic diploid progeny)을 앞서와 마찬가지로 성전환 처리후 자손 검정을 실시하여 YY 인자형을 갖는 초암컷(super female, YY)을 선별한다(4). 수컷(XY)과 교배시 정상 암컷(XX)의 경우는 암컷:수컷=1:1이 되고, 초암컷(YY)의 경우는 암컷:수컷=0:1 이 된다.The gynegenetic diploid progeny is subjected to the progeny assay after the sex transformation treatment as before, to select super females (YY) having the YY genotype (4). When mating with male (XY), the normal female (XX) is female: male = 1: 1, and the ultra-female (YY) is female: male = 0: 1.

상기 (4)에서 선별한 초암컷(YY)을 상기 (3)에서 생산한 초수컷(YY)과 교배시켜 전 초수컷(YY)의 자손을 대량생산한다(5).The super females (YY) selected in (4) are crossed with the super males (YY) produced in the above (3) to mass-produce the offspring of the former super males (YY) (5).

상기 초수컷(YY)은 정상 암컷(XX)과 교배시킬 경우 항상 전수컷(XY) 자손을 생산하게 된다(6).The supermale (YY) will always produce all male (XY) offspring when crossed with normal female (XX) (6).

이하 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명한다. 단, 하기의 실시예는 단순한 예시일 뿐, 본 발명을 이로서 한정하는 것은 아니다.The present invention will be described in more detail with reference to the following examples. However, the following Examples are merely illustrative and do not limit the present invention thereto.

(실시예)(Example)

(1) 교배를 통하여 생산된 자손을 대상으로 17-β-에스트라디올(17-β-estradiol)을 480 ppm의 농도로 사료에 섞어, 부화후 7일 부터 30일 동안 경구처리하여 암컷으로 성전환시켰다.(1) 17-β-estradiol (17-β-estradiol) was added to the offspring produced through cross-breeding at a concentration of 480 ppm. .

(2) 상기 개체들을 일정 기간동안 사육하여 성숙되면 정상수컷(XY)과 교배시켜 그의 자손의 성비를 조사하여 인자형이 XY인 암컷을 선별하였다.(2) When the individuals were bred for a certain period of time and matured, they were crossed with normal males (XY) to examine the sex ratios of their offspring, and females with genotype XY were selected.

(3) 상기에서 선별한 암컷(XY)으로부터 얻은 난자와, 초당 4,050 erg/mm2의 자외선을 조사하여 유전적으로 불활성화시킨 틸라피아 정자를 수정시킨 후, 25℃에서 3분 동안 인큐베이션한 다음 11℃의 물에서 60분 동안 저온처리하여 제2극체의 배출을 억제시킴으로써, 자성 발생성 이배체를 유도하였다. 이 때 자손들은 인자형이 XX인 암컷과 YY인 초수컷이 생산되었다.(3) The eggs obtained from the above-selected females (XY) and fertilized genetically inactivated tilapia sperm by irradiating 4,050 erg / mm 2 of ultraviolet light per second, and then incubated at 25 ° C. for 3 minutes, and then 11 ° C. The magnetically generating diploid was induced by suppressing the discharge of the second polar body by low temperature treatment in water for 60 minutes. The offspring produced females of type XX and supermales of YY.

(4) 상기 자성발생성 이배체 자손의 생식소가 분화되기 전에, 이들의 일부를 앞서(1)에서와 동일한 방법으로 성전환 처리하였다. 일정 기간 사육후 이들이 성숙하면 정상 수컷(XY)과 교배시켜 전수컷을 생산하는 암컷, 즉 XY 인자형을 갖는 초암컷을 선별하였다.(4) Before the gonads of the agonogenic diploid progeny were differentiated, some of them were transgenic in the same manner as in the preceding (1). After breeding for a certain period of time, when they matured, females producing all males by mating with normal males (XY) were selected, ie super females with XY genotype.

(5) 상기 (4)에서 선별한 초암컷(YY)을 상기 (3)에서 생산한 초수컷(YY)과 교배시켜 전 초수컷(YY)의 자손을 대량 생산하였다.(5) The super females (YY) selected in (4) were crossed with the super males (YY) produced in the above (3) to mass produce offspring of the former super males (YY).

(6) 상기 (5)에서 생산한 초수컷(YY)을 정상 암컷(XX)과 단순히 교배시키는 것에 의하여 전수컷(XY) 자손을 생산하였다.(6) All male (XY) progeny were produced by simply crossing the supermale (YY) produced in the above (5) with the normal female (XX).

본 발명의 방법에 의하면 다음과 같은 장점이 있다.:The method of the present invention has the following advantages:

(1) 초수컷(XY)과 정상 암컷(XX)을 단순히 교배시키는 것에 의하여 전수컷(XY) 자손을 생산하므로, 성별 판별을 위하여 암컷을 수컷과 함께 장기간 사육할 필요가 없고, 따라서 이에 따르는 제반 유지비 및 성별 판별에 요하는 인건비 등 지출이 불필요할 뿐 아니라, 생산된 모든 종묘를 양성할 수 있기 때문에, 생산성 배가의 효과가 있다.;(1) Since all male (XY) offspring are produced by simply breeding the supermale (XY) and normal female (XX), it is not necessary to breed the female for a long time with the male for sex discrimination, and therefore, accordingly Not only is it unnecessary to spend maintenance costs and labor costs required for gender discrimination, but also it can cultivate all the seedlings produced, thereby increasing the productivity.

(2) 종내 교배에 의한 방법이기 때문에, 항상 성공적으로 전수컷 자손 집단 만을 생산할 수 있으며, 체색도 친어와 동일하므로 상품성이 저하되는 일이 없다: 그리고(2) Because of the method by intra-breeding, it is always possible to successfully produce only all male offspring, and the body color is the same as the parent fish, so that the merchandise is not deteriorated: and

(3) 최종적으로 전수컷 집단을 생산하는 단계에서는 호르몬을 사용하지 않기 때문에, 호르몬 사용에 따른 부작용 및 환경 파괴 등 여러가지 문제를 야기하지 않는다.(3) Since the hormone is not used in the final production of the male population, it does not cause various problems such as side effects and environmental destruction caused by the use of the hormone.

Claims (4)

나일 틸라피아(nile tilapia, 학명; Oreochromis niloticus)의 수컷(XY)을 성전환시키고, 이로부터 자성발생성 이배체를 유도하여 초수컷(YY)을 생산하고, 이를 성전환시켜 초암컷(YY)을 얻고, 초암컷(YY)과 초수컷(YY)을 교배시켜 초수컷(YY)을 생산하고, 초수컷(YY)과 정상 암컷(XX)을 교배시켜 전수컷(XY) 집단을 생산하는 방법.The male (XY) of the nile tilapia (Or. Oreochromis niloticus) is transgenic, and the male embryonic diploid is induced to produce the supermale (YY), which is transsexual to obtain the super female (YY), A method of producing a total male (XY) population by crossing the female (YY) and the male (YY) to produce a male (YY), and crossing the male (YY) and the normal female (XX). 제 1 항에 있어서,The method of claim 1, 상기 성전환이 자성화 호르몬의 투여에 의한 것임을 특징으로 하는 방법.Wherein said sex reversion is by administration of a magnetizing hormone. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,The method according to claim 1 or 2, 상기 성전환이 17-β-에스트라디올(17-β-estradiol)을 480 ppm의 농도로 사료에 섞어, 부화후 7일 부터 30일 동안 경구처리 하는 것에 의한 것임을 특징으로 하는 방법.The sex reversal is characterized in that by mixing 17-β- estradiol (17-β-estradiol) in the feed at a concentration of 480 ppm, oral treatment for 7 to 30 days after hatching. 나일 틸라피아(nile tilapia, 학명; Oreochromis niloticus)의 수컷(XY)을 성전환시키고, 이로부터 자성발생성 이배체를 유도하여 초수컷(YY)을 생산하고, 이를 성전환시켜 인자형 YY의 초암컷을 생산하는 방법.A method of sexually transducing males (XY) of nile tilapia (orthochromis niloticus), and inducing agonogenic diploids to produce supermales (YY), and transducing them to produce super females of genotype YY .
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