JPWO2021035181A5 - - Google Patents

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本発明は、例えば、以下の項目を提供する。 The present invention provides, for example, the following items.
(項目１)(Item 1)
ユビキチンタンパク質リガーゼＥ３Ａ（Ｕｂｅ３ａ）ポリペプチドもしくはタンパク質またはその生物学的等価物をコードする組換えポリヌクレオチドであって、前記Ｕｂｅ３ａポリペプチドもしくはタンパク質またはその生物学的等価物が、１個または複数の天然に存在するまたは天然に存在しないグリコシル化部位を含む、組換えポリヌクレオチド。 A recombinant polynucleotide encoding a ubiquitin protein ligase E3A (Ube3a) polypeptide or protein or biological equivalent thereof, wherein said Ube3a polypeptide or protein or biological equivalent thereof comprises one or more naturally occurring A recombinant polynucleotide that includes a glycosylation site that is present in a glycosylation or non-naturally occurring glycosylation site.
(項目２)(Item 2)
前記グリコシル化が、Ｎ結合型グリコシル化であり、前記グリコシル化部位が、ＮＸａａＴまたはＮＸａａＳ（式中、Ｘａａは、プロリン（Ｐ）を必要に応じて除く任意のアミノ酸残基である）のコンセンサス配列を含む、項目１に記載の組換えポリヌクレオチド。 said glycosylation is N-linked glycosylation and said glycosylation site is a consensus sequence of NXaaT or NXaaS, where Xaa is any amino acid residue, optionally excluding proline (P) The recombinant polynucleotide of item 1, comprising:
(項目３)(Item 3)
前記グリコシル化部位が、次の： said glycosylation sites are:
配列番号１４のａａ６２～ａａ６４、配列番号１４のａａ９６～ａａ９８、配列番号１４のａａ１０２～ａａ１０４、配列番号１４のａａ２１９～ａａ２２１、配列番号１４のａａ３５４～ａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１～ａａ５９３、配列番号１４のａａ６２２～ａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５～ａａ８０７； aa62 to aa64 of SEQ ID NO: 14, aa96 to aa98 of SEQ ID NO: 14, aa102 to aa104 of SEQ ID NO: 14, aa219 to aa221 of SEQ ID NO: 14, aa354 to aa356 of SEQ ID NO: 14, aa591 to aa593 of SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: aa622-aa624 of 14, aa805-aa807 of SEQ ID NO: 14;
配列番号１６のａａ８５～ａａ８７、配列番号１６のａａ１１９～ａａ１２１、配列番号１６のａａ１２５～ａａ１２７、配列番号１６のａａ２４２～ａａ２４４、配列番号１６のａａ３７７～ａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４～ａａ６１６、配列番号１６のａａ６４５～ａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８～ａａ８３０； aa85 to aa87 of SEQ ID NO: 16, aa119 to aa121 of SEQ ID NO: 16, aa125 to aa127 of SEQ ID NO: 16, aa242 to aa244 of SEQ ID NO: 16, aa377 to aa379 of SEQ ID NO: 16, aa614 to aa616 of SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 16 aa645-aa647 of 16, aa828-aa830 of SEQ ID NO: 16;
配列番号１８のａａ８２～ａａ８４、配列番号１８のａａ１１６～ａａ１１８、配列番号１８のａａ１２２～ａａ１２４、配列番号１８のａａ２３９～ａａ２４１、配列番号１８のａａ３７４～ａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１～ａａ６１３、配列番号１８のａａ６４２～ａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５～ａａ８２７； aa82 to aa84 of SEQ ID NO: 18, aa116 to aa118 of SEQ ID NO: 18, aa122 to aa124 of SEQ ID NO: 18, aa239 to aa241 of SEQ ID NO: 18, aa374 to aa376 of SEQ ID NO: 18, aa611 to aa613 of SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: aa642-aa644 of SEQ ID NO: 18, aa825-aa827 of SEQ ID NO: 18;
配列番号２６もしくは２８のａａ８３～ａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１７～ａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ１２３～ａａ１２５、配列番号２６もしくは２８のａａ２３７～ａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７２～ａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９～ａａ６１１、配列番号２６もしくは２８のａａ６４０～ａａ６４２、配列番号２６もしくは２８のａａ８２３～ａａ８２５； aa83 to aa85 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa117 to aa119 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa123 to aa125 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa237 to aa239 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa372 to aa374 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa609-aa611 of SEQ ID NO:26 or 28, aa640-aa642 of SEQ ID NO:26 or 28, aa823-aa825 of SEQ ID NO:26 or 28;
配列番号３０のａａ６２～ａａ６４、配列番号３０のａａ９６～ａａ９８、配列番号３０のａａ１０２～ａａ１０４、配列番号３０のａａ２１６～ａａ２１８、配列番号３０のａａ３５１～ａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８～ａａ５９０、配列番号３０のａａ６１９～ａａ６２１、または配列番号３０のａａ８０２～ａａ８０４ aa62 to aa64 of SEQ ID NO: 30, aa96 to aa98 of SEQ ID NO: 30, aa102 to aa104 of SEQ ID NO: 30, aa216 to aa218 of SEQ ID NO: 30, aa351 to aa353 of SEQ ID NO: 30, aa588 to aa590 of SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: aa619-aa621 of 30 or aa802-aa804 of SEQ ID NO:30
から選択される位置のうちの１種または複数に対応する、前記ポリペプチド、タンパク質またはその等価物のアミノ酸（ａａ）位置にあり、at an amino acid (aa) position of said polypeptide, protein or equivalent thereof corresponding to one or more of the positions selected from
必要に応じて、前記グリコシル化部位のうちの少なくとも１個におけるいずれか１個またはいずれか２個または３個全てのアミノ酸残基が、野生型Ｕｂｅ３ａポリペプチドまたはタンパク質と比較して変異され、これにより、前記グリコシル化部位を構成する、Optionally, any one or any two or all three amino acid residues in at least one of said glycosylation sites are mutated relative to the wild-type Ube3a polypeptide or protein, comprising said glycosylation site by
項目１または２に記載の組換えポリヌクレオチド。3. The recombinant polynucleotide of item 1 or 2.
(項目４)(Item 4)
前記Ｕｂｅ３ａポリペプチド、タンパク質またはその生物学的等価物が、次の（ａ）～（ｅ）： Said Ube3a polypeptide, protein or biological equivalent thereof comprises (a)-(e):
（ａ）配列番号１４のａａ６２～ａａ６４、配列番号１４のａａ９６～ａａ９８、配列番号１４のａａ１０２～ａａ１０４、配列番号１４のａａ２１９～ａａ２２１、配列番号１４のａａ３５４～ａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１～ａａ５９３、配列番号１４のａａ６２２～ａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５～ａａ８０７；(a) aa62 to aa64 of SEQ ID NO: 14, aa96 to aa98 of SEQ ID NO: 14, aa102 to aa104 of SEQ ID NO: 14, aa219 to aa221 of SEQ ID NO: 14, aa354 to aa356 of SEQ ID NO: 14, aa591 to aa593 of SEQ ID NO: 14 , aa622-aa624 of SEQ ID NO:14, aa805-aa807 of SEQ ID NO:14;
（ｂ）配列番号１６のａａ８５～ａａ８７、配列番号１６のａａ１１９～ａａ１２１、配列番号１６のａａ１２５～ａａ１２７、配列番号１６のａａ２４２～ａａ２４４、配列番号１６のａａ３７７～ａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４～ａａ６１６、配列番号１６のａａ６４５～ａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８～ａａ８３０；(b) aa85 to aa87 of SEQ ID NO: 16, aa119 to aa121 of SEQ ID NO: 16, aa125 to aa127 of SEQ ID NO: 16, aa242 to aa244 of SEQ ID NO: 16, aa377 to aa379 of SEQ ID NO: 16, aa614 to aa616 of SEQ ID NO: 16 , aa645-aa647 of SEQ ID NO:16, aa828-aa830 of SEQ ID NO:16;
（ｃ）配列番号１８のａａ８２～ａａ８４、配列番号１８のａａ１１６～ａａ１１８、配列番号１８のａａ１２２～ａａ１２４、配列番号１８のａａ２３９～ａａ２４１、配列番号１８のａａ３７４～ａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１～ａａ６１３、配列番号１８のａａ６４２～ａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５～ａａ８２７；(c) aa82 to aa84 of SEQ ID NO: 18, aa116 to aa118 of SEQ ID NO: 18, aa122 to aa124 of SEQ ID NO: 18, aa239 to aa241 of SEQ ID NO: 18, aa374 to aa376 of SEQ ID NO: 18, aa611 to aa613 of SEQ ID NO: 18 , aa642-aa644 of SEQ ID NO:18, aa825-aa827 of SEQ ID NO:18;
（ｄ）配列番号２６もしくは２８のａａ８３～ａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１７～ａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ１２３～ａａ１２５、配列番号２６もしくは２８のａａ２３７～ａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７２～ａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９～ａａ６１１、配列番号２６もしくは２８のａａ６４０～ａａ６４２、配列番号２６もしくは２８のａａ８２３～ａａ８２５；(d) aa83-aa85 of SEQ ID NO:26 or 28, aa117-aa119 of SEQ ID NO:26 or 28, aa123-aa125 of SEQ ID NO:26 or 28, aa237-aa239 of SEQ ID NO:26 or 28, aa372 of SEQ ID NO:26 or 28 ~aa374, aa609-aa611 of SEQ ID NO:26 or 28, aa640-aa642 of SEQ ID NO:26 or 28, aa823-aa825 of SEQ ID NO:26 or 28;
（ｅ）配列番号３０のａａ６２～ａａ６４、配列番号３０のａａ９６～ａａ９８、配列番号３０のａａ１０２～ａａ１０４、配列番号３０のａａ２１６～ａａ２１８、配列番号３０のａａ３５１～ａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８～ａａ５９０、配列番号３０のａａ６１９～ａａ６２１、または配列番号３０のａａ８０２～ａａ８０４(e) aa62 to aa64 of SEQ ID NO: 30, aa96 to aa98 of SEQ ID NO: 30, aa102 to aa104 of SEQ ID NO: 30, aa216 to aa218 of SEQ ID NO: 30, aa351 to aa353 of SEQ ID NO: 30, aa588 to aa590 of SEQ ID NO: 30 , aa619-aa621 of SEQ ID NO:30, or aa802-aa804 of SEQ ID NO:30
のうちのいずれか１種において同定されるとおりの８個のアミノ酸（ａａ）位置に対応するａａ位置における８個のグリコシル化部位を含む、項目１～３のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド。4. The recombination of any one of items 1-3, comprising 8 glycosylation sites at aa positions corresponding to the 8 amino acid (aa) positions as identified in any one of Polynucleotide.
(項目５)(Item 5)
前記Ｕｂｅ３ａポリペプチド、タンパク質またはその生物学的等価物が、次の： Said Ube3a polypeptide, protein or biological equivalent thereof is:
配列番号１４のａａ６４、配列番号１４のａａ９８、配列番号１４のａａ１０４、配列番号１４のａａ２２１、配列番号１４のａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１、配列番号１４のａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５、配列番号１４のａａ８０６； aa64 of SEQ ID NO:14, aa98 of SEQ ID NO:14, aa104 of SEQ ID NO:14, aa221 of SEQ ID NO:14, aa356 of SEQ ID NO:14, aa591 of SEQ ID NO:14, aa624 of SEQ ID NO:14, aa805 of SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:14 14 aa806;
配列番号１６のａａ８７、配列番号１６のａａ１２１、配列番号１６のａａ１２７、配列番号１６のａａ２４４、配列番号１６のａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４、配列番号１６のａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８、配列番号１６のａａ８２９； aa87 of SEQ ID NO:16, aa121 of SEQ ID NO:16, aa127 of SEQ ID NO:16, aa244 of SEQ ID NO:16, aa379 of SEQ ID NO:16, aa614 of SEQ ID NO:16, aa647 of SEQ ID NO:16, aa828 of SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:16 16 aa829;
配列番号１８のａａ８４、配列番号１８のａａ１１８、配列番号１８のａａ１２４、配列番号１８のａａ２４１、配列番号１８のａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１、配列番号１８のａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５、配列番号１８のａａ８２６； aa84 of SEQ ID NO: 18, aa118 of SEQ ID NO: 18, aa124 of SEQ ID NO: 18, aa241 of SEQ ID NO: 18, aa376 of SEQ ID NO: 18, aa611 of SEQ ID NO: 18, aa644 of SEQ ID NO: 18, aa825 of SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 18 aa826;
配列番号２６もしくは２８のａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ１２５、配列番号２６もしくは２８のａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９、配列番号２６もしくは２８のａａ６１０、配列番号２６もしくは２８のａａ６４２、配列番号２６もしくは２８のａａ８２３； aa85 of SEQ ID NO:26 or 28, aa119 of SEQ ID NO:26 or 28, aa125 of SEQ ID NO:26 or 28, aa239 of SEQ ID NO:26 or 28, aa374 of SEQ ID NO:26 or 28, aa609 of SEQ ID NO:26 or 28, SEQ ID NO:28 aa610 of 26 or 28, aa642 of SEQ ID NO:26 or 28, aa823 of SEQ ID NO:26 or 28;
配列番号３０のａａ６４、配列番号３０のａａ９８、配列番号３０のａａ１０４、配列番号３０のａａ２１８、配列番号３０のａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８、配列番号３０のａａ５８９、配列番号３０のａａ６２１、または配列番号３０のａａ８０２ aa64 of SEQ ID NO:30, aa98 of SEQ ID NO:30, aa104 of SEQ ID NO:30, aa218 of SEQ ID NO:30, aa353 of SEQ ID NO:30, aa588 of SEQ ID NO:30, aa589 of SEQ ID NO:30, aa621 of SEQ ID NO:30, or a sequence number 30 aa802
から選択される位置のうちの１種または複数に対応するａａ位置における変異したアミノ酸残基のうちの１個または複数を含み、これにより、グリコシル化部位のうちの１個または複数を形成する、項目１～４のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド。one or more of the mutated amino acid residues at the aa positions corresponding to one or more of the positions selected from thereby forming one or more of the glycosylation sites; A recombinant polynucleotide according to any one of items 1-4.
(項目６)(Item 6)
前記Ｕｂｅ３ａポリペプチド、タンパク質またはその生物学的等価物が、次の（ａ）～（ｅ）： Said Ube3a polypeptide, protein or biological equivalent thereof comprises (a)-(e):
（ａ）配列番号１４のａａ６４、配列番号１４のａａ９８、配列番号１４のａａ１０４、配列番号１４のａａ２２１、配列番号１４のａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１、配列番号１４のａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５および配列番号１４のａａ８０６；（ｂ）配列番号１６のａａ８７、配列番号１６のａａ１２１、配列番号１６のａａ１２７、配列番号１６のａａ２４４、配列番号１６のａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４、配列番号１６のａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８および配列番号１６のａａ８２９；(a) aa64 of SEQ ID NO: 14, aa98 of SEQ ID NO: 14, aa104 of SEQ ID NO: 14, aa221 of SEQ ID NO: 14, aa356 of SEQ ID NO: 14, aa591 of SEQ ID NO: 14, aa624 of SEQ ID NO: 14, aa805 of SEQ ID NO: 14 and aa 806 of SEQ ID NO: 14; aa647, aa828 of SEQ ID NO:16 and aa829 of SEQ ID NO:16;
（ｃ）配列番号１８のａａ８４、配列番号１８のａａ１１８、配列番号１８のａａ１２４、配列番号１８のａａ２４１、配列番号１８のａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１、配列番号１８のａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５および配列番号１８のａａ８２６；(c) aa84 of SEQ ID NO: 18, aa118 of SEQ ID NO: 18, aa124 of SEQ ID NO: 18, aa241 of SEQ ID NO: 18, aa376 of SEQ ID NO: 18, aa611 of SEQ ID NO: 18, aa644 of SEQ ID NO: 18, aa825 of SEQ ID NO: 18 and aa826 of SEQ ID NO: 18;
（ｄ）配列番号２６もしくは２８のａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ１２５、配列番号２６もしくは２８のａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９、配列番号２６もしくは２８のａａ６１０、配列番号２６もしくは２８のａａ６４２および配列番号２６もしくは２８のａａ８２３；または(d) aa85 of SEQ. , aa610 of SEQ ID NO:26 or 28, aa642 of SEQ ID NO:26 or 28 and aa823 of SEQ ID NO:26 or 28; or
（ｅ）配列番号３０のａａ６４、配列番号３０のａａ９８、配列番号３０のａａ１０４、配列番号３０のａａ２１８、配列番号３０のａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８、配列番号３０のａａ５８９、配列番号３０のａａ６２１および配列番号３０のａａ８０２(e) aa64 of SEQ ID NO:30, aa98 of SEQ ID NO:30, aa104 of SEQ ID NO:30, aa218 of SEQ ID NO:30, aa353 of SEQ ID NO:30, aa588 of SEQ ID NO:30, aa589 of SEQ ID NO:30, aa621 of SEQ ID NO:30 and aa802 of SEQ ID NO:30
のうちのいずれか１種において同定される位置に対応するａａ位置における９個の変異したアミノ酸残基を含み、これにより、８個のグリコシル化部位を形成する、項目１～５のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド。any one of items 1-5, comprising 9 mutated amino acid residues at the aa positions corresponding to the positions identified in any one of , thereby forming 8 glycosylation sites Section 3. Recombinant Polynucleotide.
(項目７)(Item 7)
前記Ｕｂｅ３ａポリペプチド、タンパク質またはその生物学的等価物が、次の（ａ）～（ｅ）： Said Ube3a polypeptide, protein or biological equivalent thereof comprises (a)-(e):
（ａ）配列番号１４のａａ６４、配列番号１４のａａ９８、配列番号１４のａａ２２１、配列番号１４のａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１、配列番号１４のａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５および配列番号１４のａａ８０６；(a) aa64 of SEQ ID NO:14, aa98 of SEQ ID NO:14, aa221 of SEQ ID NO:14, aa356 of SEQ ID NO:14, aa591 of SEQ ID NO:14, aa624 of SEQ ID NO:14, aa805 of SEQ ID NO:14 and aa806 of SEQ ID NO:14 ;
（ｂ）配列番号１６のａａ８７、配列番号１６のａａ１２１、配列番号１６のａａ２４４、配列番号１６のａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４、配列番号１６のａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８および配列番号１６のａａ８２９；(b) aa87 of SEQ ID NO:16, aa121 of SEQ ID NO:16, aa244 of SEQ ID NO:16, aa379 of SEQ ID NO:16, aa614 of SEQ ID NO:16, aa647 of SEQ ID NO:16, aa828 of SEQ ID NO:16 and aa829 of SEQ ID NO:16 ;
（ｃ）配列番号１８のａａ８４、配列番号１８のａａ１１８、配列番号１８のａａ２４１、配列番号１８のａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１、配列番号１８のａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５および配列番号１８のａａ８２６；(c) aa84 of SEQ ID NO:18, aa118 of SEQ ID NO:18, aa241 of SEQ ID NO:18, aa376 of SEQ ID NO:18, aa611 of SEQ ID NO:18, aa644 of SEQ ID NO:18, aa825 of SEQ ID NO:18 and aa826 of SEQ ID NO:18 ;
（ｄ）配列番号２６もしくは２８のａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９、配列番号２６もしくは２８のａａ６１０、配列番号２６もしくは２８のａａ６４２および配列番号２６もしくは２８のａａ８２３；または(d) aa85 of SEQ. , aa642 of SEQ ID NO:26 or 28 and aa823 of SEQ ID NO:26 or 28; or
（ｅ）配列番号３０のａａ６４、配列番号３０のａａ９８、配列番号３０のａａ２１８、配列番号３０のａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８、配列番号３０のａａ５８９、配列番号３０のａａ６２１および配列番号３０のａａ８０２(e) aa64 of SEQ ID NO:30, aa98 of SEQ ID NO:30, aa218 of SEQ ID NO:30, aa353 of SEQ ID NO:30, aa588 of SEQ ID NO:30, aa589 of SEQ ID NO:30, aa621 of SEQ ID NO:30 and aa802 of SEQ ID NO:30
のうちのいずれか１種において同定される位置に対応するａａ位置に８個の変異したアミノ酸残基を含み、これにより、７個のグリコシル化部位を形成する、項目１～５のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド。any one of items 1-5, comprising 8 mutated amino acid residues at the aa positions corresponding to the positions identified in any one of , thereby forming 7 glycosylation sites Section 3. Recombinant Polynucleotide.
(項目８)(Item 8)
前記形成されたグリコシル化部位が、ＮＸａａＴまたはＮＸａａＳ（式中、Ｘａａは、プロリン（Ｐ）を必要に応じて除く任意のアミノ酸残基である）のコンセンサス配列を含む、項目５～７のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド。 Any of items 5-7, wherein said formed glycosylation site comprises a consensus sequence of NXaaT or NXaaS, wherein Xaa is any amino acid residue, optionally excluding proline (P). A recombinant polynucleotide according to paragraph 1.
(項目９)(Item 9)
前記変異したアミノ酸残基が、 The mutated amino acid residue is
配列番号１４のａａ６４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ９８に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ１０４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ２２１に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ３５６に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ５９１に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号１４のａａ６２４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ８０５に対応するａａ位置におけるＮ、および配列番号１４のａａ８０６に対応するａａ位置におけるＮ； T or S at the aa position corresponding to aa64 of SEQ ID NO:14, T or S at the aa position corresponding to aa98 of SEQ ID NO:14, T or S at the aa position corresponding to aa104 of SEQ ID NO:14, aa221 of SEQ ID NO:14 T or S at the aa position corresponding to SEQ ID NO: 14, T or S at the aa position corresponding to aa356 of SEQ ID NO: 14, N at the aa position corresponding to aa591 of SEQ ID NO: 14, T at the aa position corresponding to aa624 of SEQ ID NO: 14 or S, N at the aa position corresponding to aa805 of SEQ ID NO:14, and N at the aa position corresponding to aa806 of SEQ ID NO:14;
配列番号１６のａａ８７に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ１２１に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ１２７に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ２４４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ３７９に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ６１４に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号１６のａａ６４７に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ８２８に対応するａａ位置におけるＮ、および配列番号１６のａａ８２９に対応するａａ位置におけるＮ； T or S at the aa position corresponding to aa87 of SEQ ID NO:16, T or S at the aa position corresponding to aa121 of SEQ ID NO:16, T or S at the aa position corresponding to aa127 of SEQ ID NO:16, aa244 of SEQ ID NO:16 T or S at the aa position corresponding to SEQ ID NO: 16, T or S at the aa position corresponding to aa379 of SEQ ID NO: 16, N at the aa position corresponding to aa614 of SEQ ID NO: 16, T at the aa position corresponding to aa647 of SEQ ID NO: 16 or S, N at the aa position corresponding to aa828 of SEQ ID NO:16, and N at the aa position corresponding to aa829 of SEQ ID NO:16;
配列番号１８のａａ８４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ１１８に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ１２４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ２４１に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ３７６に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ６１１に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号１８のａａ６４４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ８２５に対応するａａ位置におけるＮ、および配列番号１８のａａ８２６に対応するａａ位置におけるＮ； T or S at the aa position corresponding to aa84 of SEQ ID NO:18, T or S at the aa position corresponding to aa118 of SEQ ID NO:18, T or S at the aa position corresponding to aa124 of SEQ ID NO:18, aa241 of SEQ ID NO:18 T or S at the aa position corresponding to SEQ ID NO: 18, T or S at the aa position corresponding to aa376 of SEQ ID NO: 18, N at the aa position corresponding to aa611 of SEQ ID NO: 18, T at the aa position corresponding to aa644 of SEQ ID NO: 18 or S, N at the aa position corresponding to aa825 of SEQ ID NO:18, and N at the aa position corresponding to aa826 of SEQ ID NO:18;
配列番号２６もしくは２８のａａ８５に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ１１９に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ１２５に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ２３９に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ３７４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号２６もしくは２８のａａ６１０に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号２６もしくは２８のａａ６４２に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、および配列番号２６もしくは２８のａａ８２３に対応するａａ位置におけるＮ；または T or S at the aa position corresponding to aa85 of SEQ ID NO:26 or 28, T or S at the aa position corresponding to aa119 of SEQ ID NO:26 or 28, T or S at the aa position corresponding to aa125 of SEQ ID NO:26 or 28 , T or S at the aa position corresponding to aa239 of SEQ ID NO:26 or 28, T or S at the aa position corresponding to aa374 of SEQ ID NO:26 or 28, N at the aa position corresponding to aa609 of SEQ ID NO:26 or 28, N at the aa position corresponding to aa610 of SEQ ID NO:26 or 28, T or S at the aa position corresponding to aa642 of SEQ ID NO:26 or 28, and N at the aa position corresponding to aa823 of SEQ ID NO:26 or 28; or
配列番号３０のａａ６４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ９８に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ１０４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ２１８に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ３５３に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ５８８に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号３０のａａ５８９に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号３０のａａ６２１に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、および配列番号３０のａａ８０２に対応するａａ位置におけるＮ T or S at the aa position corresponding to aa64 of SEQ ID NO:30, T or S at the aa position corresponding to aa98 of SEQ ID NO:30, T or S at the aa position corresponding to aa104 of SEQ ID NO:30, aa218 of SEQ ID NO:30 T or S at the aa position corresponding to SEQ ID NO:30, T or S at the aa position corresponding to aa353 of SEQ ID NO:30, N at the aa position corresponding to aa588 of SEQ ID NO:30, N at the aa position corresponding to aa589 of SEQ ID NO:30 , T or S at the aa position corresponding to aa621 of SEQ ID NO:30, and N at the aa position corresponding to aa802 of SEQ ID NO:30
のうちの１種または複数から選択される、項目５～８のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド。Recombinant polynucleotide according to any one of items 5-8, selected from one or more of:
(項目１０)(Item 10)
前記Ｕｂｅ３ａポリペプチド、タンパク質またはその生物学的等価物が、１個または複数の天然に存在しないグリコシル化部位を含む、項目１～６および８～９のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド。 10. The recombinant polynucleotide of any one of items 1-6 and 8-9, wherein said Ube3a polypeptide, protein or biological equivalent thereof comprises one or more non-naturally occurring glycosylation sites. .
(項目１１)(Item 11)
前記Ｕｂｅ３ａポリペプチド、タンパク質またはその生物学的等価物が、次の： Said Ube3a polypeptide, protein or biological equivalent thereof is:
配列番号１４のａａ２１～ａａ８７２、配列番号１６のａａ２１～ａａ８９５、配列番号１８のａａ２１～ａａ８９２、配列番号２６のａａ２１～ａａ８９０、配列番号２８のａａ２１～ａａ８９０、配列番号３０のａａ２１～ａａ８６９、またはそれらのそれぞれに対して少なくとも約９０％、もしくは少なくとも約９５％、もしくは少なくとも約９９％同一性を有する配列 aa21 to aa872 of SEQ ID NO: 14, aa21 to aa895 of SEQ ID NO: 16, aa21 to aa892 of SEQ ID NO: 18, aa21 to aa890 of SEQ ID NO: 26, aa21 to aa890 of SEQ ID NO: 28, aa21 to aa869 of SEQ ID NO: 30, or them sequences having at least about 90%, or at least about 95%, or at least about 99% identity to each of
から選択されるアミノ酸配列を含む、項目１～１０のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド。A recombinant polynucleotide according to any one of items 1 to 10, comprising an amino acid sequence selected from
(項目１２)(Item 12)
シグナルペプチドをコードするポリヌクレオチドをさらに含む、項目１～１１のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド。 12. The recombinant polynucleotide of any one of items 1-11, further comprising a polynucleotide encoding a signal peptide.
(項目１３)(Item 13)
前記シグナルペプチドが、分泌シグナルである、項目１２に記載の組換えポリヌクレオチド。 13. The recombinant polynucleotide of item 12, wherein said signal peptide is a secretory signal.
(項目１４)(Item 14)
次の：抗体重鎖／軽鎖分泌シグナル、ツインアルギニン輸送タンパク質分泌シグナル、インターロイキン－２（ＩＬ２）分泌シグナル、インターロイキン－４（ＩＬ４）分泌シグナル、インターロイキン－１０（ＩＬ１０）分泌シグナル、インターロイキン－３（ＩＬ３）分泌シグナル、インターロイキン－７（ＩＬ７）分泌シグナル、ヒトＩＬ２分泌シグナル、ヒトＯＳＭ分泌シグナル、ＶＳＶ－Ｇ分泌シグナル、マウスＩｇカッパ分泌シグナル、ヒトＩｇＧ２ Ｈ分泌シグナル、ＢＭ４０分泌シグナル、セクレコン分泌シグナル、ヒトＩｇＫＶＩＩＩ分泌シグナル、ＣＤ３３分泌シグナル、ｔＰＡ分泌シグナル、ヒトキモトリプシノーゲン分泌シグナル、ヒトトリプシノーゲン－２分泌シグナル、ガウシアｌｕｃ分泌シグナル、アルブミン（ＨＳＡ）分泌シグナル、インフルエンザ赤血球凝集素分泌シグナル、ヒトインスリン分泌シグナルまたはカイコフィブロインＬＣから選択されるシグナルペプチドまたは分泌シグナルをコードする、項目１２または１３に記載の組換えポリヌクレオチド。 Next: antibody heavy/light chain secretion signal, twin arginine transport protein secretion signal, interleukin-2 (IL2) secretion signal, interleukin-4 (IL4) secretion signal, interleukin-10 (IL10) secretion signal, interleukin-10 (IL10) secretion signal, Leukin-3 (IL3) secretion signal, interleukin-7 (IL7) secretion signal, human IL2 secretion signal, human OSM secretion signal, VSV-G secretion signal, mouse Ig kappa secretion signal, human IgG2 H secretion signal, BM40 secretion signal , secreton secretion signal, human IgKVIII secretion signal, CD33 secretion signal, tPA secretion signal, human chymotrypsinogen secretion signal, human trypsinogen-2 secretion signal, Gaussia luc secretion signal, albumin (HSA) secretion signal, influenza hemagglutinin secretion signal, 14. A recombinant polynucleotide according to items 12 or 13, encoding a signal peptide or secretory signal selected from human insulin secretory signal or silkworm fibroin LC.
(項目１５)(Item 15)
前記シグナルペプチドまたは前記分泌シグナルが、配列番号１４のａａ１～ａａ２０のアミノ酸配列を含む、項目１２～１４のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド。 15. The recombinant polynucleotide of any one of items 12-14, wherein said signal peptide or said secretory signal comprises the amino acid sequence aa1-aa20 of SEQ ID NO:14.
(項目１６)(Item 16)
前記Ｕｂｅ３ａポリペプチド、タンパク質またはその生物学的等価物が、配列番号１４、１６、１８、２６、２８および３０、またはそれらのそれぞれに対して少なくとも約９０％、もしくは少なくとも約９５％、もしくは少なくとも約９９％同一性を有する配列のうちのいずれか１種から選択されるアミノ酸配列を含む、項目１～１５のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド。 The Ube3a polypeptide, protein or biological equivalent thereof is at least about 90%, or at least about 95%, or at least about SEQ ID NOS: 14, 16, 18, 26, 28 and 30, or each 16. Recombinant polynucleotide according to any one of items 1 to 15, comprising an amino acid sequence selected from any one of the sequences with 99% identity.
(項目１７)(Item 17)
次の： next:
配列番号１３のｎｔ６１～ｎｔ２６１９、配列番号１５のｎｔ６１～ｎｔ２６８８、配列番号１７のｎｔ６１～ｎｔ２６７９、配列番号２５のｎｔ６１～ｎｔ２６７３、配列番号２７のｎｔ６１～ｎｔ２６７３、配列番号２９のｎｔ６１～ｎｔ２６１０；配列番号１３、配列番号１５、配列番号１７、配列番号２５、配列番号２７、配列番号２９、またはそれらのそれぞれに対して少なくとも約９０％、もしくは少なくとも約９５％、もしくは少なくとも約９９％同一性を有する配列 nt61-nt2619 of SEQ ID NO:13, nt61-nt2688 of SEQ ID NO:15, nt61-nt2679 of SEQ ID NO:17, nt61-nt2673 of SEQ ID NO:25, nt61-nt2673 of SEQ ID NO:27, nt61-nt2610 of SEQ ID NO:29; 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, or sequences having at least about 90%, or at least about 95%, or at least about 99% identity to each of them
のうちのいずれか１種から選択されるヌクレオチド（ｎｔ）配列を含む、項目１～１６のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド。17. The recombinant polynucleotide of any one of items 1-16, comprising a nucleotide (nt) sequence selected from any one of
(項目１８)(Item 18)
前記Ｕｂｅ３ａポリペプチド、タンパク質またはその生物学的等価物が、野生型ヒトＵｂｅ３ａタンパク質または野生型マウスＵｂｅ３ａタンパク質に由来する、項目１～１７のいずれかに記載の組換えポリヌクレオチド。 18. The recombinant polynucleotide of any of items 1-17, wherein said Ube3a polypeptide, protein or biological equivalent thereof is derived from a wild-type human Ube3a protein or a wild-type mouse Ube3a protein.
(項目１９)(Item 19)
前記野生型ヒトＵｂｅ３ａタンパク質が、配列番号８、１０または１２のうちのいずれか１種のアミノ酸配列を含み、前記野生型マウスＵｂｅ３ａタンパク質が、配列番号２０、２２または２４のうちのいずれか１種のアミノ酸配列を含む、項目１８に記載の組換えポリヌクレオチド。 wherein said wild-type human Ube3a protein comprises the amino acid sequence of any one of SEQ ID NOs: 8, 10 or 12, and said wild-type mouse Ube3a protein is any one of SEQ ID NOs: 20, 22 or 24 19. The recombinant polynucleotide of item 18, comprising the amino acid sequence of
(項目２０)(Item 20)
前記Ｕｂｅ３ａポリペプチド、タンパク質またはその生物学的等価物の発現を方向付ける調節配列をさらに含む、項目１～１９のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド。 20. The recombinant polynucleotide of any one of items 1-19, further comprising regulatory sequences directing the expression of said Ube3a polypeptide, protein or biological equivalent thereof.
(項目２１)(Item 21)
前記調節配列が、次の：プロモーター、イントロン、エンハンサー、ポリアデニル化シグナル、ターミネーター、サイレンサー、ＴＡＴＡボックスまたはウッドチャック肝炎ウイルス（ＷＨＰ）転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）のうちの１種または複数を含む、項目２０に記載の組換えポリヌクレオチド。 wherein said regulatory sequences comprise one or more of the following: promoters, introns, enhancers, polyadenylation signals, terminators, silencers, TATA boxes or woodchuck hepatitis virus (WHP) post-transcriptional regulatory elements (WPREs). 20. The recombinant polynucleotide according to 20.
(項目２２)(Item 22)
前記プロモーターが、次の：ＭＮＤＵ３プロモーター、ＣＭＶプロモーター、ＰＧＫプロモーター、ＭＮＤＵプロモーターまたはＥＦ１アルファプロモーターから選択される、項目２１に記載の組換えポリヌクレオチド。 22. The recombinant polynucleotide of item 21, wherein said promoter is selected from the following: MNDU3 promoter, CMV promoter, PGK promoter, MNDU promoter or EF1 alpha promoter.
(項目２３)(Item 23)
前記プロモーターが、ＭＮＤＵ３プロモーターである、項目２１または２２に記載の組換えポリヌクレオチド。 23. The recombinant polynucleotide of item 21 or 22, wherein said promoter is the MNDU3 promoter.
(項目２４)(Item 24)
前記ＭＮＤＵ３プロモーターが、配列番号３の配列を含み、前記ＣＭＶプロモーターが、配列番号１、２または３４から選択される配列を含み、前記ＰＫＧプロモーターが、配列番号４の配列を含み、前記ＭＮＤＵプロモーターが、配列番号５の配列を含み、前記ＥＦ１アルファプロモーターが、配列番号６の配列を含む、項目２２または２３に記載の組換えポリヌクレオチド。 The MNDU3 promoter comprises the sequence of SEQ ID NO: 3, the CMV promoter comprises a sequence selected from SEQ ID NO: 1, 2 or 34, the PKG promoter comprises the sequence of SEQ ID NO: 4, the MNDU promoter comprises , wherein said EF1 alpha promoter comprises the sequence of SEQ ID NO:6.
(項目２５)(Item 25)
次の： next:
ポリプリントラクト配列（ＰＰＴ）、セントラルＰＰＴ（ｃＰＰＴ）、Ｒ領域、Ｕ５、カプシド形成シグナル（Ｐｓｉ）、Ｒｅｖ応答性エレメント（ＲＲＥ）、全長Ｕ３またはその断片、 polypurine tract sequence (PPT), central PPT (cPPT), R region, U5, encapsidation signal (Psi), Rev responsive element (RRE), full-length U3 or fragments thereof,
検出可能もしくは選択マーカー、検出可能もしくは選択ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、前記検出可能もしくは選択ポリペプチドの発現を方向付ける調節配列、または前記検出可能もしくは選択ポリペプチドのためのコード配列と前記Ｕｂｅ３ａポリペプチドもしくはタンパク質またはその生物学的等価物をコードする配列との間に配置された自己切断ペプチドのためのコード配列 a detectable or selectable marker, a polynucleotide encoding a detectable or selectable polypeptide, a regulatory sequence directing expression of said detectable or selectable polypeptide, or a coding sequence for said detectable or selectable polypeptide and said Ube3a polypeptide; A coding sequence for a self-cleaving peptide interposed with a sequence encoding a peptide or protein or biological equivalent thereof
のうちの１種または複数をさらに含む、項目１～２４のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド。25. The recombinant polynucleotide of any one of items 1-24, further comprising one or more of:
(項目２６)(Item 26)
項目１～２５のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチドに対して逆または相補体または逆相補体である、組換えポリヌクレオチド。 A recombinant polynucleotide which is the reverse or complement or reverse complement to the recombinant polynucleotide of any one of items 1-25.
(項目２７)(Item 27)
項目１～２６のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチドを含むベクター。 A vector comprising a recombinant polynucleotide according to any one of items 1-26.
(項目２８)(Item 28)
ウイルスベクターまたは非ウイルスベクターである、項目２７に記載のベクター。 28. The vector of item 27, which is a viral vector or a non-viral vector.
(項目２９)(Item 29)
前記ウイルスベクターが、レトロウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクターまたはヘルペスウイルスベクターから選択される、項目２８に記載のベクター。 29. The vector of item 28, wherein said viral vector is selected from a retroviral vector, an adenoviral vector, an adeno-associated viral vector or a herpes viral vector.
(項目３０)(Item 30)
前記レトロウイルスベクターが、レンチウイルスベクターである、項目２９に記載のベクター。 30. The vector of item 29, wherein said retroviral vector is a lentiviral vector.
(項目３１)(Item 31)
前記レンチウイルスベクターが、ＴＡＴＡボックス、および必要に応じて転写因子結合部位のうちの１個または複数を欠如するＵ３領域を必要に応じて有する自己不活型レンチウイルスベクターである、項目３０に記載のベクター。 31. According to item 30, wherein said lentiviral vector is a self-inactivating lentiviral vector optionally having a U3 region lacking a TATA box and optionally one or more of transcription factor binding sites. vector.
(項目３２)(Item 32)
前記レンチウイルスベクターが、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）に由来する、項目３０または３１に記載のベクター。 32. The vector of items 30 or 31, wherein said lentiviral vector is derived from human immunodeficiency virus (HIV).
(項目３３)(Item 33)
非ウイルスベクターが、プラスミドである、項目３２に記載のベクター。 33. The vector of item 32, wherein the non-viral vector is a plasmid.
(項目３４)(Item 34)
前記組換えポリヌクレオチドに動作可能に連結され、前記組換えポリヌクレオチドの複製を方向付ける調節配列をさらに含む、項目２７～３３のいずれか一項に記載のベクター。 34. The vector of any one of items 27-33, further comprising regulatory sequences operably linked to said recombinant polynucleotide and directing replication of said recombinant polynucleotide.
(項目３５)(Item 35)
１個もしくは複数の、または２個もしくはそれよりも多い、または３個もしくはそれよりも多い、または４個もしくはそれよりも多い、または５個もしくはそれよりも多い、または６個もしくはそれよりも多い、または７個もしくはそれよりも多い、または８個もしくはそれよりも多い、または９個もしくはそれよりも多い、または１０個もしくはそれよりも多い、または１１個もしくはそれよりも多い天然に存在するまたは天然に存在しないグリコシル化部位を含む、組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物であって、前記組換えＵｂｅ３ａタンパク質もしくはポリペプチドまたはその生物学的等価物が、野生型Ｕｂｅ３ａタンパク質ではない、組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物。 one or more, or two or more, or three or more, or four or more, or five or more, or six or more or 7 or more, or 8 or more, or 9 or more, or 10 or more, or 11 or more naturally occurring or A recombinant Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent thereof comprising a non-naturally occurring glycosylation site, wherein said recombinant Ube3a protein or polypeptide or biological equivalent thereof comprises a wild-type Ube3a protein non-recombinant Ube3a proteins, polypeptides or biological equivalents thereof.
(項目３６)(Item 36)
前記グリコシル化が、Ｎ結合型グリコシル化であり、前記グリコシル化部位が、ＮＸａａＴまたはＮＸａａＳ（式中、Ｘａａは、プロリン（Ｐ）を必要に応じて除く任意のアミノ酸残基である）のコンセンサス配列を含む、項目３５に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物。 said glycosylation is N-linked glycosylation and said glycosylation site is a consensus sequence of NXaaT or NXaaS, where Xaa is any amino acid residue, optionally excluding proline (P) 36. A recombinant Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent thereof according to item 35, comprising:
(項目３７)(Item 37)
前記グリコシル化部位が、次の： said glycosylation sites are:
配列番号１４のａａ６２～ａａ６４、配列番号１４のａａ９６～ａａ９８、配列番号１４のａａ１０２～ａａ１０４、配列番号１４のａａ２１９～ａａ２２１、配列番号１４のａａ３５４～ａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１～ａａ５９３、配列番号１４のａａ６２２～ａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５～ａａ８０７； aa62 to aa64 of SEQ ID NO: 14, aa96 to aa98 of SEQ ID NO: 14, aa102 to aa104 of SEQ ID NO: 14, aa219 to aa221 of SEQ ID NO: 14, aa354 to aa356 of SEQ ID NO: 14, aa591 to aa593 of SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: aa622-aa624 of 14, aa805-aa807 of SEQ ID NO: 14;
配列番号１６のａａ８５～ａａ８７、配列番号１６のａａ１１９～ａａ１２１、配列番号１６のａａ１２５～ａａ１２７、配列番号１６のａａ２４２～ａａ２４４、配列番号１６のａａ３７７～ａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４～ａａ６１６、配列番号１６のａａ６４５～ａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８～ａａ８３０； aa85 to aa87 of SEQ ID NO: 16, aa119 to aa121 of SEQ ID NO: 16, aa125 to aa127 of SEQ ID NO: 16, aa242 to aa244 of SEQ ID NO: 16, aa377 to aa379 of SEQ ID NO: 16, aa614 to aa616 of SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 16 aa645-aa647 of 16, aa828-aa830 of SEQ ID NO: 16;
配列番号１８のａａ８２～ａａ８４、配列番号１８のａａ１１６～ａａ１１８、配列番号１８のａａ１２２～ａａ１２４、配列番号１８のａａ２３９～ａａ２４１、配列番号１８のａａ３７４～ａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１～ａａ６１３、配列番号１８のａａ６４２～ａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５～ａａ８２７； aa82 to aa84 of SEQ ID NO: 18, aa116 to aa118 of SEQ ID NO: 18, aa122 to aa124 of SEQ ID NO: 18, aa239 to aa241 of SEQ ID NO: 18, aa374 to aa376 of SEQ ID NO: 18, aa611 to aa613 of SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: aa642-aa644 of SEQ ID NO: 18, aa825-aa827 of SEQ ID NO: 18;
配列番号２６もしくは２８のａａ８３～ａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１７～ａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ１２３～ａａ１２５、配列番号２６もしくは２８のａａ２３７～ａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７２～ａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９～ａａ６１１、配列番号２６もしくは２８のａａ６４０～ａａ６４２、配列番号２６もしくは２８のａａ８２３～ａａ８２５； aa83 to aa85 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa117 to aa119 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa123 to aa125 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa237 to aa239 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa372 to aa374 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa609-aa611 of SEQ ID NO:26 or 28, aa640-aa642 of SEQ ID NO:26 or 28, aa823-aa825 of SEQ ID NO:26 or 28;
配列番号３０のａａ６２～ａａ６４、配列番号３０のａａ９６～ａａ９８、配列番号３０のａａ１０２～ａａ１０４、配列番号３０のａａ２１６～ａａ２１８、配列番号３０のａａ３５１～ａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８～ａａ５９０、配列番号３０のａａ６１９～ａａ６２１、または配列番号３０のａａ８０２～ａａ８０４ aa62 to aa64 of SEQ ID NO: 30, aa96 to aa98 of SEQ ID NO: 30, aa102 to aa104 of SEQ ID NO: 30, aa216 to aa218 of SEQ ID NO: 30, aa351 to aa353 of SEQ ID NO: 30, aa588 to aa590 of SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: aa619-aa621 of 30 or aa802-aa804 of SEQ ID NO:30
から選択される位置のうちの１種または複数に対応する、前記ポリペプチドまたはタンパク質のアミノ酸（ａａ）位置にある、項目３５または３６に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物。37. The recombinant Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent thereof of item 35 or 36, at an amino acid (aa) position of said polypeptide or protein corresponding to one or more of the positions selected from thing.
(項目３８)(Item 38)
前記Ｕｂｅ３ａポリペプチドもしくはタンパク質またはその生物学的等価物が、次の（ａ）～（ｅ）： wherein said Ube3a polypeptide or protein or biological equivalent thereof comprises the following (a)-(e):
（ａ）配列番号１４のａａ６２～ａａ６４、配列番号１４のａａ９６～ａａ９８、配列番号１４のａａ１０２～ａａ１０４、配列番号１４のａａ２１９～ａａ２２１、配列番号１４のａａ３５４～ａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１～ａａ５９３、配列番号１４のａａ６２２～ａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５～ａａ８０７；(a) aa62 to aa64 of SEQ ID NO: 14, aa96 to aa98 of SEQ ID NO: 14, aa102 to aa104 of SEQ ID NO: 14, aa219 to aa221 of SEQ ID NO: 14, aa354 to aa356 of SEQ ID NO: 14, aa591 to aa593 of SEQ ID NO: 14 , aa622-aa624 of SEQ ID NO:14, aa805-aa807 of SEQ ID NO:14;
（ｂ）配列番号１６のａａ８５～ａａ８７、配列番号１６のａａ１１９～ａａ１２１、配列番号１６のａａ１２５～ａａ１２７、配列番号１６のａａ２４２～ａａ２４４、配列番号１６のａａ３７７～ａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４～ａａ６１６、配列番号１６のａａ６４５～ａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８～ａａ８３０；(b) aa85 to aa87 of SEQ ID NO: 16, aa119 to aa121 of SEQ ID NO: 16, aa125 to aa127 of SEQ ID NO: 16, aa242 to aa244 of SEQ ID NO: 16, aa377 to aa379 of SEQ ID NO: 16, aa614 to aa616 of SEQ ID NO: 16 , aa645-aa647 of SEQ ID NO:16, aa828-aa830 of SEQ ID NO:16;
（ｃ）配列番号１８のａａ８２～ａａ８４、配列番号１８のａａ１１６～ａａ１１８、配列番号１８のａａ１２２～ａａ１２４、配列番号１８のａａ２３９～ａａ２４１、配列番号１８のａａ３７４～ａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１～ａａ６１３、配列番号１８のａａ６４２～ａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５～ａａ８２７；(c) aa82 to aa84 of SEQ ID NO: 18, aa116 to aa118 of SEQ ID NO: 18, aa122 to aa124 of SEQ ID NO: 18, aa239 to aa241 of SEQ ID NO: 18, aa374 to aa376 of SEQ ID NO: 18, aa611 to aa613 of SEQ ID NO: 18 , aa642-aa644 of SEQ ID NO:18, aa825-aa827 of SEQ ID NO:18;
（ｄ）配列番号２６もしくは２８のａａ８３～ａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１７～ａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ１２３～ａａ１２５、配列番号２６もしくは２８のａａ２３７～ａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７２～ａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９～ａａ６１１、配列番号２６もしくは２８のａａ６４０～ａａ６４２、配列番号２６もしくは２８のａａ８２３～ａａ８２５；(d) aa83-aa85 of SEQ ID NO:26 or 28, aa117-aa119 of SEQ ID NO:26 or 28, aa123-aa125 of SEQ ID NO:26 or 28, aa237-aa239 of SEQ ID NO:26 or 28, aa372 of SEQ ID NO:26 or 28 ~aa374, aa609-aa611 of SEQ ID NO:26 or 28, aa640-aa642 of SEQ ID NO:26 or 28, aa823-aa825 of SEQ ID NO:26 or 28;
（ｅ）配列番号３０のａａ６２～ａａ６４、配列番号３０のａａ９６～ａａ９８、配列番号３０のａａ１０２～ａａ１０４、配列番号３０のａａ２１６～ａａ２１８、配列番号３０のａａ３５１～ａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８～ａａ５９０、配列番号３０のａａ６１９～ａａ６２１、または配列番号３０のａａ８０２～ａａ８０４(e) aa62 to aa64 of SEQ ID NO: 30, aa96 to aa98 of SEQ ID NO: 30, aa102 to aa104 of SEQ ID NO: 30, aa216 to aa218 of SEQ ID NO: 30, aa351 to aa353 of SEQ ID NO: 30, aa588 to aa590 of SEQ ID NO: 30 , aa619-aa621 of SEQ ID NO:30, or aa802-aa804 of SEQ ID NO:30
のうちのいずれか１種において同定されるとおりの８個のアミノ酸（ａａ）位置に対応するａａ位置における８個のグリコシル化部位を含む、項目３５～３７に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物。38. The recombinant Ube3a protein, polypeptide according to items 35-37, comprising 8 glycosylation sites at the aa positions corresponding to the 8 amino acid (aa) positions as identified in any one of or its biological equivalent.
(項目３９)(Item 39)
次の： next:
配列番号１４のａａ６４、配列番号１４のａａ９８、配列番号１４のａａ１０４、配列番号１４のａａ２２１、配列番号１４のａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１、配列番号１４のａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５、配列番号１４のａａ８０６； aa64 of SEQ ID NO:14, aa98 of SEQ ID NO:14, aa104 of SEQ ID NO:14, aa221 of SEQ ID NO:14, aa356 of SEQ ID NO:14, aa591 of SEQ ID NO:14, aa624 of SEQ ID NO:14, aa805 of SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:14 14 aa806;
配列番号１６のａａ８７、配列番号１６のａａ１２１、配列番号１６のａａ１２７、配列番号１６のａａ２４４、配列番号１６のａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４、配列番号１６のａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８、配列番号１６のａａ８２９； aa87 of SEQ ID NO:16, aa121 of SEQ ID NO:16, aa127 of SEQ ID NO:16, aa244 of SEQ ID NO:16, aa379 of SEQ ID NO:16, aa614 of SEQ ID NO:16, aa647 of SEQ ID NO:16, aa828 of SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:16 16 aa829;
配列番号１８のａａ８４、配列番号１８のａａ１１８、配列番号１８のａａ１２４、配列番号１８のａａ２４１、配列番号１８のａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１、配列番号１８のａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５、配列番号１８のａａ８２６； aa84 of SEQ ID NO: 18, aa118 of SEQ ID NO: 18, aa124 of SEQ ID NO: 18, aa241 of SEQ ID NO: 18, aa376 of SEQ ID NO: 18, aa611 of SEQ ID NO: 18, aa644 of SEQ ID NO: 18, aa825 of SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 18 aa826;
配列番号２６もしくは２８のａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ１２５、配列番号２６もしくは２８のａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９、配列番号２６もしくは２８のａａ６１０、配列番号２６もしくは２８のａａ６４２、配列番号２６もしくは２８のａａ８２３； aa85 of SEQ ID NO:26 or 28, aa119 of SEQ ID NO:26 or 28, aa125 of SEQ ID NO:26 or 28, aa239 of SEQ ID NO:26 or 28, aa374 of SEQ ID NO:26 or 28, aa609 of SEQ ID NO:26 or 28, SEQ ID NO:28 aa610 of 26 or 28, aa642 of SEQ ID NO:26 or 28, aa823 of SEQ ID NO:26 or 28;
配列番号３０のａａ６４、配列番号３０のａａ９８、配列番号３０のａａ１０４、配列番号３０のａａ２１８、配列番号３０のａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８、配列番号３０のａａ５８９、配列番号３０のａａ６２１、または配列番号３０のａａ８０２ aa64 of SEQ ID NO:30, aa98 of SEQ ID NO:30, aa104 of SEQ ID NO:30, aa218 of SEQ ID NO:30, aa353 of SEQ ID NO:30, aa588 of SEQ ID NO:30, aa589 of SEQ ID NO:30, aa621 of SEQ ID NO:30, or a sequence number 30 aa802
から選択される位置のうちの１種または複数に対応するａａ位置における変異したアミノ酸残基のうちの１個または複数を含み、これにより、グリコシル化部位のうちの１個または複数を形成し、one or more of the mutated amino acid residues at the aa positions corresponding to one or more of the positions selected from, thereby forming one or more of the glycosylation sites;
必要に応じて、前記グリコシル化部位のうちの少なくとも１個におけるいずれか１個またはいずれか２個または３個全てのアミノ酸残基が、野生型Ｕｂｅ３ａポリペプチドまたはタンパク質と比較して変異され、これにより、前記グリコシル化部位を構成する、Optionally, any one or any two or all three amino acid residues in at least one of said glycosylation sites are mutated relative to the wild-type Ube3a polypeptide or protein, comprising said glycosylation site by
項目３５～３８のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物。39. A recombinant Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent thereof according to any one of items 35-38.
(項目４０)(Item 40)
次の（ａ）～（ｅ）： (a) to (e) below:
（ａ）配列番号１４のａａ６４、配列番号１４のａａ９８、配列番号１４のａａ１０４、配列番号１４のａａ２２１、配列番号１４のａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１、配列番号１４のａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５および配列番号１４のａａ８０６；（ｂ）配列番号１６のａａ８７、配列番号１６のａａ１２１、配列番号１６のａａ１２７、配列番号１６のａａ２４４、配列番号１６のａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４、配列番号１６のａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８および配列番号１６のａａ８２９；(a) aa64 of SEQ ID NO: 14, aa98 of SEQ ID NO: 14, aa104 of SEQ ID NO: 14, aa221 of SEQ ID NO: 14, aa356 of SEQ ID NO: 14, aa591 of SEQ ID NO: 14, aa624 of SEQ ID NO: 14, aa805 of SEQ ID NO: 14 and aa 806 of SEQ ID NO: 14; aa647, aa828 of SEQ ID NO:16 and aa829 of SEQ ID NO:16;
（ｃ）配列番号１８のａａ８４、配列番号１８のａａ１１８、配列番号１８のａａ１２４、配列番号１８のａａ２４１、配列番号１８のａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１、配列番号１８のａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５および配列番号１８のａａ８２６；(c) aa84 of SEQ ID NO: 18, aa118 of SEQ ID NO: 18, aa124 of SEQ ID NO: 18, aa241 of SEQ ID NO: 18, aa376 of SEQ ID NO: 18, aa611 of SEQ ID NO: 18, aa644 of SEQ ID NO: 18, aa825 of SEQ ID NO: 18 and aa826 of SEQ ID NO: 18;
（ｄ）配列番号２６もしくは２８のａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ１２５、配列番号２６もしくは２８のａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９、配列番号２６もしくは２８のａａ６１０、配列番号２６もしくは２８のａａ６４２および配列番号２６もしくは２８のａａ８２３；または(d) aa85 of SEQ. , aa610 of SEQ ID NO:26 or 28, aa642 of SEQ ID NO:26 or 28 and aa823 of SEQ ID NO:26 or 28; or
（ｅ）配列番号３０のａａ６４、配列番号３０のａａ９８、配列番号３０のａａ１０４、配列番号３０のａａ２１８、配列番号３０のａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８、配列番号３０のａａ５８９、配列番号３０のａａ６２１および配列番号３０のａａ８０２(e) aa64 of SEQ ID NO:30, aa98 of SEQ ID NO:30, aa104 of SEQ ID NO:30, aa218 of SEQ ID NO:30, aa353 of SEQ ID NO:30, aa588 of SEQ ID NO:30, aa589 of SEQ ID NO:30, aa621 of SEQ ID NO:30 and aa802 of SEQ ID NO:30
のうちのいずれか１種において同定される位置に対応するａａ位置における９個の変異したアミノ酸残基を含み、これにより、８個のグリコシル化部位を形成する、項目３５～３９のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物。any one of items 35-39, comprising 9 mutated amino acid residues at the aa positions corresponding to the positions identified in any one of , thereby forming 8 glycosylation sites A recombinant Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent thereof according to paragraphs.
(項目４１)(Item 41)
次の（ａ）～（ｅ）： (a) to (e) below:
（ａ）配列番号１４のａａ６４、配列番号１４のａａ９８、配列番号１４のａａ２２１、配列番号１４のａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１、配列番号１４のａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５および配列番号１４のａａ８０６；(a) aa64 of SEQ ID NO:14, aa98 of SEQ ID NO:14, aa221 of SEQ ID NO:14, aa356 of SEQ ID NO:14, aa591 of SEQ ID NO:14, aa624 of SEQ ID NO:14, aa805 of SEQ ID NO:14 and aa806 of SEQ ID NO:14 ;
（ｂ）配列番号１６のａａ８７、配列番号１６のａａ１２１、配列番号１６のａａ２４４、配列番号１６のａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４、配列番号１６のａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８および配列番号１６のａａ８２９；(b) aa87 of SEQ ID NO:16, aa121 of SEQ ID NO:16, aa244 of SEQ ID NO:16, aa379 of SEQ ID NO:16, aa614 of SEQ ID NO:16, aa647 of SEQ ID NO:16, aa828 of SEQ ID NO:16 and aa829 of SEQ ID NO:16 ;
（ｃ）配列番号１８のａａ８４、配列番号１８のａａ１１８、配列番号１８のａａ２４１、配列番号１８のａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１、配列番号１８のａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５および配列番号１８のａａ８２６；(c) aa84 of SEQ ID NO:18, aa118 of SEQ ID NO:18, aa241 of SEQ ID NO:18, aa376 of SEQ ID NO:18, aa611 of SEQ ID NO:18, aa644 of SEQ ID NO:18, aa825 of SEQ ID NO:18 and aa826 of SEQ ID NO:18 ;
（ｄ）配列番号２６もしくは２８のａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９、配列番号２６もしくは２８のａａ６１０、配列番号２６もしくは２８のａａ６４２および配列番号２６もしくは２８のａａ８２３；または(d) aa85 of SEQ. , aa642 of SEQ ID NO:26 or 28 and aa823 of SEQ ID NO:26 or 28; or
（ｅ）配列番号３０のａａ６４、配列番号３０のａａ９８、配列番号３０のａａ２１８、配列番号３０のａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８、配列番号３０のａａ５８９、配列番号３０のａａ６２１および配列番号３０のａａ８０２(e) aa64 of SEQ ID NO:30, aa98 of SEQ ID NO:30, aa218 of SEQ ID NO:30, aa353 of SEQ ID NO:30, aa588 of SEQ ID NO:30, aa589 of SEQ ID NO:30, aa621 of SEQ ID NO:30 and aa802 of SEQ ID NO:30
のうちのいずれか１種において同定される位置に対応するａａ位置における８個の変異したアミノ酸残基を含み、これにより、７個のグリコシル化部位を形成する、項目３５～３９のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物。any one of items 35-39, comprising 8 mutated amino acid residues at the aa positions corresponding to the positions identified in any one of , thereby forming 7 glycosylation sites A recombinant Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent thereof according to paragraphs.
(項目４２)(Item 42)
前記形成されたグリコシル化部位が、ＮＸａａＴまたはＮＸａａＳ（式中、Ｘａａは、プロリン（Ｐ）を必要に応じて除く任意のアミノ酸残基である）のコンセンサス配列を含む、項目３９～４１のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物。 Any of items 39-41, wherein said formed glycosylation site comprises a consensus sequence of NXaaT or NXaaS, wherein Xaa is any amino acid residue, optionally excluding proline (P). Recombinant Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent thereof according to one of the paragraphs.
(項目４３)(Item 43)
前記変異したアミノ酸残基が、 The mutated amino acid residue is
配列番号１４のａａ６４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ９８に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ１０４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ２２１に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ３５６に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ５９１に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号１４のａａ６２４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ８０５に対応するａａ位置におけるＮ、および配列番号１４のａａ８０６に対応するａａ位置におけるＮ； T or S at the aa position corresponding to aa64 of SEQ ID NO:14, T or S at the aa position corresponding to aa98 of SEQ ID NO:14, T or S at the aa position corresponding to aa104 of SEQ ID NO:14, aa221 of SEQ ID NO:14 T or S at the aa position corresponding to SEQ ID NO: 14, T or S at the aa position corresponding to aa356 of SEQ ID NO: 14, N at the aa position corresponding to aa591 of SEQ ID NO: 14, T at the aa position corresponding to aa624 of SEQ ID NO: 14 or S, N at the aa position corresponding to aa805 of SEQ ID NO:14, and N at the aa position corresponding to aa806 of SEQ ID NO:14;
配列番号１６のａａ８７に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ１２１に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ１２７に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ２４４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ３７９に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ６１４に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号１６のａａ６４７に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ８２８に対応するａａ位置におけるＮ、および配列番号１６のａａ８２９に対応するａａ位置におけるＮ； T or S at the aa position corresponding to aa87 of SEQ ID NO:16, T or S at the aa position corresponding to aa121 of SEQ ID NO:16, T or S at the aa position corresponding to aa127 of SEQ ID NO:16, aa244 of SEQ ID NO:16 T or S at the aa position corresponding to SEQ ID NO: 16, T or S at the aa position corresponding to aa379 of SEQ ID NO: 16, N at the aa position corresponding to aa614 of SEQ ID NO: 16, T at the aa position corresponding to aa647 of SEQ ID NO: 16 or S, N at the aa position corresponding to aa828 of SEQ ID NO:16, and N at the aa position corresponding to aa829 of SEQ ID NO:16;
配列番号１８のａａ８４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ１１８に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ１２４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ２４１に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ３７６に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ６１１に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号１８のａａ６４４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ８２５に対応するａａ位置におけるＮ、および配列番号１８のａａ８２６に対応するａａ位置におけるＮ； T or S at the aa position corresponding to aa84 of SEQ ID NO:18, T or S at the aa position corresponding to aa118 of SEQ ID NO:18, T or S at the aa position corresponding to aa124 of SEQ ID NO:18, aa241 of SEQ ID NO:18 T or S at the aa position corresponding to SEQ ID NO: 18, T or S at the aa position corresponding to aa376 of SEQ ID NO: 18, N at the aa position corresponding to aa611 of SEQ ID NO: 18, T at the aa position corresponding to aa644 of SEQ ID NO: 18 or S, N at the aa position corresponding to aa825 of SEQ ID NO:18, and N at the aa position corresponding to aa826 of SEQ ID NO:18;
配列番号２６もしくは２８のａａ８５に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ１１９に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ１２５に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ２３９に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ３７４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号２６もしくは２８のａａ６１０に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号２６もしくは２８のａａ６４２に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、および配列番号２６もしくは２８のａａ８２３に対応するａａ位置におけるＮ；または T or S at the aa position corresponding to aa85 of SEQ ID NO:26 or 28, T or S at the aa position corresponding to aa119 of SEQ ID NO:26 or 28, T or S at the aa position corresponding to aa125 of SEQ ID NO:26 or 28 , T or S at the aa position corresponding to aa239 of SEQ ID NO:26 or 28, T or S at the aa position corresponding to aa374 of SEQ ID NO:26 or 28, N at the aa position corresponding to aa609 of SEQ ID NO:26 or 28, N at the aa position corresponding to aa610 of SEQ ID NO:26 or 28, T or S at the aa position corresponding to aa642 of SEQ ID NO:26 or 28, and N at the aa position corresponding to aa823 of SEQ ID NO:26 or 28; or
配列番号３０のａａ６４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ９８に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ１０４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ２１８に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ３５３に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ５８８に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号３０のａａ５８９に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号３０のａａ６２１に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、および配列番号３０のａａ８０２に対応するａａ位置におけるＮ T or S at the aa position corresponding to aa64 of SEQ ID NO:30, T or S at the aa position corresponding to aa98 of SEQ ID NO:30, T or S at the aa position corresponding to aa104 of SEQ ID NO:30, aa218 of SEQ ID NO:30 T or S at the aa position corresponding to SEQ ID NO:30, T or S at the aa position corresponding to aa353 of SEQ ID NO:30, N at the aa position corresponding to aa588 of SEQ ID NO:30, N at the aa position corresponding to aa589 of SEQ ID NO:30 , T or S at the aa position corresponding to aa621 of SEQ ID NO:30, and N at the aa position corresponding to aa802 of SEQ ID NO:30
のうちの１種または複数から選択される、項目３９～４２のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物。43. A recombinant Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent thereof according to any one of items 39-42, selected from one or more of:
(項目４４)(Item 44)
１個または複数の天然に存在しないグリコシル化部位を含む、項目３５～４３のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物。 44. A recombinant Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent thereof according to any one of items 35-43, comprising one or more non-naturally occurring glycosylation sites.
(項目４５)(Item 45)
次の： next:
配列番号１４のａａ２１～ａａ８７２、配列番号１６のａａ２１～ａａ８９５、配列番号１８のａａ２１～ａａ８９２、配列番号２６のａａ２１～ａａ８９０、配列番号２８のａａ２１～ａａ８９０、配列番号３０のａａ２１～ａａ８６９、またはそれらのそれぞれに対して少なくとも約９０％、もしくは少なくとも約９５％、もしくは少なくとも約９９％同一性を有する配列 aa21 to aa872 of SEQ ID NO: 14, aa21 to aa895 of SEQ ID NO: 16, aa21 to aa892 of SEQ ID NO: 18, aa21 to aa890 of SEQ ID NO: 26, aa21 to aa890 of SEQ ID NO: 28, aa21 to aa869 of SEQ ID NO: 30, or them sequences having at least about 90%, or at least about 95%, or at least about 99% identity to each of
から選択されるアミノ酸配列を含む、項目３５～４４のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物。45. A recombinant Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent thereof according to any one of items 35-44, comprising an amino acid sequence selected from:
(項目４６)(Item 46)
シグナルペプチドをさらに含む、項目３５～４５のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物。 46. A recombinant Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent thereof according to any one of items 35-45, further comprising a signal peptide.
(項目４７)(Item 47)
前記シグナルペプチドが、分泌シグナルである、項目４６に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物。 47. The recombinant Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent of item 46, wherein said signal peptide is a secretory signal.
(項目４８)(Item 48)
前記シグナルペプチドまたは前記分泌シグナルが、次の：抗体重鎖／軽鎖分泌シグナル、ツインアルギニン輸送タンパク質分泌シグナル、インターロイキン－２（ＩＬ２）分泌シグナル、インターロイキン－４（ＩＬ４）分泌シグナル、インターロイキン－１０（ＩＬ１０）分泌シグナル、インターロイキン－３（ＩＬ３）分泌シグナル、インターロイキン－７（ＩＬ７）分泌シグナル、ヒトＩＬ２分泌シグナル、ヒトＯＳＭ分泌シグナル、ＶＳＶ－Ｇ分泌シグナル、マウスＩｇカッパ分泌シグナル、ヒトＩｇＧ２ Ｈ分泌シグナル、ＢＭ４０分泌シグナル、セクレコン分泌シグナル、ヒトＩｇＫＶＩＩＩ分泌シグナル、ＣＤ３３分泌シグナル、ｔＰＡ分泌シグナル、ヒトキモトリプシノーゲン分泌シグナル、ヒトトリプシノーゲン－２分泌シグナル、ガウシアｌｕｃ分泌シグナル、アルブミン（ＨＳＡ）分泌シグナル、インフルエンザ赤血球凝集素分泌シグナル、ヒトインスリン分泌シグナルまたはカイコフィブロインＬＣから選択される、項目４６または４７に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物。 wherein said signal peptide or said secretory signal comprises: antibody heavy/light chain secretion signal, twin arginine transport protein secretion signal, interleukin-2 (IL2) secretion signal, interleukin-4 (IL4) secretion signal, interleukin -10 (IL10) secretion signal, interleukin-3 (IL3) secretion signal, interleukin-7 (IL7) secretion signal, human IL2 secretion signal, human OSM secretion signal, VSV-G secretion signal, mouse Ig kappa secretion signal, Human IgG2 H secretion signal, BM40 secretion signal, secreton secretion signal, human IgKVIII secretion signal, CD33 secretion signal, tPA secretion signal, human chymotrypsinogen secretion signal, human trypsinogen-2 secretion signal, Gaussia luc secretion signal, albumin (HSA) secretion 48. A recombinant Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent thereof according to item 46 or 47, selected from a signal, influenza hemagglutinin secretory signal, human insulin secretory signal or silkworm fibroin LC.
(項目４９)(Item 49)
前記シグナルペプチドまたは前記分泌シグナルが、配列番号１４のａａ１～ａａ２０のアミノ酸配列を含む、項目４６～４８のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物。 49. The recombinant Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent thereof according to any one of items 46-48, wherein said signal peptide or said secretory signal comprises the amino acid sequence aa1-aa20 of SEQ ID NO:14.
(項目５０)(Item 50)
前記Ｕｂｅ３ａポリペプチドもしくはタンパク質またはその生物学的等価物が、配列番号１４、１６、１８、２６、２８および３０、またはそれらのそれぞれに対して少なくとも約９０％、もしくは少なくとも約９５％、もしくは少なくとも約９９％同一性を有する配列のうちのいずれか１種から選択されるアミノ酸配列を含む、項目３５～４９に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物。 said Ube3a polypeptide or protein or biological equivalent thereof is at least about 90%, or at least about 95%, or at least about 50. A recombinant Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent thereof according to items 35-49, comprising an amino acid sequence selected from any one of the sequences with 99% identity.
(項目５１)(Item 51)
必要に応じた自己切断ペプチド、および検出可能または選択ポリペプチドをさらに含む、項目３５～５０に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質もしくはポリペプチドまたはその生物学的等価物。 51. A recombinant Ube3a protein or polypeptide or biological equivalent thereof according to items 35-50, further comprising an optionally self-cleaving peptide and a detectable or selectable polypeptide.
(項目５２)(Item 52)
次の：項目１～２６のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド、項目２７～３４のいずれか一項に記載のベクター、または項目３５～５１のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドもしくはその生物学的等価物のうちの１種または複数を含み、これにより、項目３５～５１のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質もしくはポリペプチドまたはその生物学的等価物を発現および分泌する、単離または操作された細胞。 The following: a recombinant polynucleotide according to any one of items 1-26, a vector according to any one of items 27-34, or a recombinant Ube3a according to any one of items 35-51 A recombinant Ube3a protein or polypeptide according to any one of items 35 to 51 or a biological equivalent thereof, comprising one or more of the proteins, polypeptides or biological equivalents thereof, thereby isolated or engineered cells that express and secrete
(項目５３)(Item 53)
哺乳動物細胞である、項目５２に記載の単離または操作された細胞。 53. The isolated or engineered cell of item 52, which is a mammalian cell.
(項目５４)(Item 54)
前記哺乳動物細胞が、マウス細胞またはヒト細胞である、項目５３に記載の単離または操作された細胞。 54. The isolated or engineered cell of item 53, wherein said mammalian cell is a mouse cell or a human cell.
(項目５５)(Item 55)
幹細胞、前駆細胞、人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）、胚性幹細胞、成体もしくは体性幹細胞、間葉系幹細胞、神経幹細胞、またはそれらのそれぞれの後代から選択される、項目５２～５４のいずれか一項に記載の単離または操作された細胞。 Any of items 52-54 selected from stem cells, progenitor cells, induced pluripotent stem cells (iPSCs), embryonic stem cells, adult or somatic stem cells, mesenchymal stem cells, neural stem cells, or their respective progeny. An isolated or engineered cell according to paragraph 1.
(項目５６)(Item 56)
造血幹細胞またはその後代である、項目５２～５５のいずれか一項に記載の単離または操作された細胞。 56. The isolated or engineered cell of any one of items 52-55, which is a hematopoietic stem cell or its progeny.
(項目５７)(Item 57)
ＣＤ３４＋である、項目５６に記載の単離または操作された細胞。 57. The isolated or engineered cell of item 56, which is CD34+.
(項目５８)(Item 58)
検出可能なマーカーをさらに含む、項目５２～５７のいずれか一項に記載の単離または操作された細胞。 58. The isolated or engineered cell of any one of items 52-57, further comprising a detectable marker.
(項目５９)(Item 59)
項目５２～５８のいずれか一項に記載の細胞、またはその後代を含む、単離された細胞集団。 An isolated cell population comprising the cells of any one of items 52-58, or their progeny.
(項目６０)(Item 60)
ＣＤ４、ＣＤ１４およびＨＬＡＤＲを発現する、項目５９に記載の単離された細胞集団。 60. The isolated cell population of item 59, which expresses CD4, CD14 and HLADR.
(項目６１)(Item 61)
前記集団における前記細胞の少なくとも９０％が、ＣＤ４＋であり、前記集団における前記細胞の少なくとも９５％が、ＣＤ１４＋であり、前記集団における前記細胞の少なくとも９５％が、ＨＬＡＤＲ＋である、項目６０に記載の単離された細胞集団。 61. The claim of item 60, wherein at least 90% of said cells in said population are CD4+, at least 95% of said cells in said population are CD14+, and at least 95% of said cells in said population are HLADR+. Isolated cell populations.
(項目６２)(Item 62)
適した条件下でマクロファージを誘導する、項目５９～６１のいずれか一項に記載の単離された細胞集団。 62. The isolated cell population of any one of items 59-61, which induces macrophages under suitable conditions.
(項目６３)(Item 63)
実質的にマクロファージを含む、項目５９～６２のいずれか一項に記載の単離された細胞集団。 63. The isolated cell population of any one of items 59-62, comprising substantially macrophages.
(項目６４)(Item 64)
実質的に均一である、項目５９～６３のいずれか一項に記載の単離された細胞集団。 64. The isolated cell population of any one of items 59-63, which is substantially homogeneous.
(項目６５)(Item 65)
前記集団の前記細胞が、検出可能なマーカーをさらに含む、項目５９～６４のいずれか一項に記載の単離された細胞集団。 65. The isolated cell population of any one of items 59-64, wherein said cells of said population further comprise a detectable marker.
(項目６６)(Item 66)
欠損Ｕｂｅ３ａ対立遺伝子を保有する対象におけるアンジェルマン症候群を処置、予防、停止または逆転する方法であって、次の：項目１～２６のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド、項目２７～３４のいずれか一項に記載のベクター、項目３５～５１のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドもしくはその生物学的等価物、項目５２～５８のいずれか一項に記載の細胞、または項目５９～６５のいずれか一項に記載の細胞集団のうちの１種または複数を前記対象に局所的または全身的に投与し、これにより、前記対象におけるアンジェルマン症候群を処置するステップを含む方法。 A method of treating, preventing, abrogating or reversing Angelman's Syndrome in a subject carrying a defective Ube3a allele comprising: the recombinant polynucleotide of any one of items 1-26, items 27-34 the vector of any one of items 35-51, the recombinant Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent thereof of any one of items 35-51, the cell of any one of items 52-58. or one or more of the cell populations of any one of items 59-65, locally or systemically to said subject, thereby treating Angelman's syndrome in said subject. How to include.
(項目６７)(Item 67)
対象においてＵｂｅ３ａタンパク質もしくはポリペプチドまたはその生物学的等価物を発現させる方法であって、次の：項目１～２６のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド、項目２７～３４のいずれか一項に記載のベクター、項目３５～５１のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドもしくはその生物学的等価物、項目５２～５８のいずれか一項に記載の細胞、または項目５９～６５のいずれか一項に記載の細胞集団のうちの１種または複数を前記対象に投与し、これにより、前記対象においてＵｂｅ３ａを発現させるステップを含む方法。 A method of expressing an Ube3a protein or polypeptide or biological equivalent thereof in a subject, comprising: the recombinant polynucleotide of any one of items 1-26; any one of items 27-34; the vector of any one of items 35 to 51, the recombinant Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent thereof of any one of items 35 to 51, the cell of any one of items 52 to 58, or item 59 administering one or more of the cell populations of any one of claims 1-65 to said subject, thereby expressing Ube3a in said subject.
(項目６８)(Item 68)
前記対象が、欠損Ｕｂｅ３ａ遺伝子を保有する、項目６７に記載の方法。 68. The method of item 67, wherein the subject carries a defective Ube3a gene.
(項目６９)(Item 69)
前記細胞または細胞集団が、前記対象の体重１ｋｇあたり約１．０×１０ The cell or cell population is about 1.0 x 10 per kg body weight of the subject ４4 ～約１×１０~ about 1 x 10 １５15 個の細胞の用量で投与される、項目６６～６８のいずれか一項に記載の方法。69. The method of any one of items 66-68, administered in a dose of one cell.
(項目７０)(Item 70)
前記対象が、アンジェルマン症候群について症候性または無症候性である、項目６６～６９のいずれか一項に記載の方法。 70. The method of any one of items 66-69, wherein the subject is symptomatic or asymptomatic for Angelman's syndrome.
(項目７１)(Item 71)
前記対象が、哺乳動物である、項目６６～７０のいずれか一項に記載の方法。 71. The method of any one of items 66-70, wherein the subject is a mammal.
(項目７２)(Item 72)
前記対象が、ヒトである、項目６６～７１のいずれか一項に記載の方法。 72. The method of any one of items 66-71, wherein the subject is a human.
(項目７３)(Item 73)
前記対象が、胎児である、項目６６～７２のいずれか一項に記載の方法。 73. The method of any one of items 66-72, wherein the subject is a fetus.
(項目７４)(Item 74)
前記対象が、乳児または思春期前対象である、項目６６～７２のいずれか一項に記載の方法。 73. The method of any one of items 66-72, wherein the subject is an infant or prepubescent subject.
(項目７５)(Item 75)
前記対象が、成体である、項目６６～７２のいずれか一項に記載の方法。 73. The method of any one of items 66-72, wherein the subject is an adult.
(項目７６)(Item 76)
次の：項目１～２６のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド、項目２７～３４のいずれか一項に記載のベクター、項目３５～５１のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物のうちの１種または複数を含み、これにより、前記ポリヌクレオチド、前記ベクター、または前記組換えＵｂｅ３ａタンパク質もしくはポリペプチドまたはその生物学的等価物を産生する、単離または操作された細胞。 The following: a recombinant polynucleotide according to any one of items 1-26, a vector according to any one of items 27-34, a recombinant Ube3a protein according to any one of items 35-51 , a polypeptide or biological equivalent thereof, thereby producing said polynucleotide, said vector, or said recombinant Ube3a protein or polypeptide or biological equivalent thereof; Isolated or manipulated cells.
(項目７７)(Item 77)
真核または原核細胞である、項目７６に記載の単離または操作された細胞。 77. The isolated or engineered cell of item 76, which is a eukaryotic or prokaryotic cell.
(項目７８)(Item 78)
哺乳動物細胞である、項目７６または７７に記載の単離または操作された細胞。 78. An isolated or engineered cell according to items 76 or 77, which is a mammalian cell.
(項目７９)(Item 79)
項目７６～７８のいずれか一項に記載の細胞のクローン集団。 A clonal population of cells according to any one of items 76-78.
(項目８０)(Item 80)
（ａ）項目２７～３４のいずれか一項に記載のベクターと、（ｂ）パッケージングプラスミドと、（ｃ）エンベローププラスミドとを含むウイルスパッケージングシステム。 A viral packaging system comprising (a) the vector of any one of items 27-34, (b) a packaging plasmid, and (c) an envelope plasmid.
(項目８１)(Item 81)
（ｄ）パッケージング細胞系をさらに含む、項目８０に記載のウイルスパッケージングシステム。 (d) The viral packaging system of item 80, further comprising a packaging cell line.
(項目８２)(Item 82)
前記パッケージング細胞系が、ＨＥＫ－２９３細胞系である、項目８１に記載のウイルスパッケージングシステム。 82. The viral packaging system of item 81, wherein said packaging cell line is the HEK-293 cell line.
(項目８３)(Item 83)
ウイルス粒子を産生するための方法であって、前記ウイルス粒子をパッケージングするのに適した条件下で、パッケージング細胞系に項目８０に記載のシステムを形質導入するステップを含む方法。 81. A method for producing viral particles, comprising transducing a packaging cell line with the system of item 80 under conditions suitable for packaging said viral particles.
(項目８４)(Item 84)
前記パッケージング細胞系が、ＨＥＫ－２９３細胞系である、項目８３に記載の方法。 84. The method of item 83, wherein said packaging cell line is the HEK-293 cell line.
(項目８５)(Item 85)
分泌されるＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドまたはその生物学的等価物を発現させる方法であって、前記組換えＵｂｅ３ａタンパク質もしくはポリペプチドまたはその生物学的等価物の発現を可能にする条件下で、項目５２～５８および７６～７８のいずれか一項に記載の細胞を成長させるステップを含む方法。 52. A method of expressing a secreted Ube3a protein, polypeptide or biological equivalent thereof, under conditions permitting expression of said recombinant Ube3a protein or polypeptide or biological equivalent thereof, in item 52. A method comprising growing a cell according to any one of paragraphs -58 and 76-78.
(項目８６)(Item 86)
前記細胞が、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏにある、項目８５に記載の方法。 86. The method of item 85, wherein said cell is in vitro or in vivo.
(項目８７)(Item 87)
担体と、項目１～２６のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド、項目２７～３４のいずれか一項に記載のベクター、項目３５～５１のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドもしくはその生物学的等価物、項目５２～５８および７６～７８のいずれか一項に記載の細胞、項目５９～６５のいずれか一項に記載の細胞集団、または項目７９に記載のクローン集団のうちの１種または複数とを含む組成物。 a carrier, the recombinant polynucleotide of any one of items 1 to 26, the vector of any one of items 27 to 34, and the recombinant Ube3a protein of any one of items 35 to 51 , a polypeptide or a biological equivalent thereof, a cell according to any one of items 52-58 and 76-78, a cell population according to any one of items 59-65, or a cell population according to item 79 A composition comprising one or more of the clonal populations.
(項目８８)(Item 88)
前記担体が、薬学的に許容される担体である、項目８７に記載の組成物。 88. The composition of item 87, wherein said carrier is a pharmaceutically acceptable carrier.
(項目８９)(Item 89)
項目１～２６のいずれか一項に記載の組換えポリヌクレオチド、項目２７～３４のいずれか一項に記載のベクター、項目３５～５１のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａタンパク質、ポリペプチドもしくはその生物学的等価物、項目５２～５８および７６～７８のいずれか一項に記載の細胞、項目５９～６５のいずれか一項に記載の細胞集団、または項目７９に記載のクローン集団のうちの１種または複数と、必要に応じて使用のための指示とを含むキット。 The recombinant polynucleotide according to any one of items 1 to 26, the vector according to any one of items 27 to 34, the recombinant Ube3a protein and polypeptide according to any one of items 35 to 51 or a biological equivalent thereof, a cell according to any one of items 52-58 and 76-78, a cell population according to any one of items 59-65, or a clonal population according to item 79 A kit comprising one or more of the same and optionally instructions for use.

Claims (89)

ユビキチンタンパク質リガーゼＥ３Ａ（Ｕｂｅ３ａ）ポリペプチドまたはその生物学的等価物をコードするポリヌクレオチドであって、そのアミノ酸配列は野生型Ｕｂｅ３ａタンパク質と、１つまたはそれよりも多いグリコシル化部位の付加により少なくとも異なる、ポリヌクレオチド。 A polynucleotide encoding a ubiquitin protein ligase E3A (Ube3a) polypeptide or biological equivalent thereof, the amino acid sequence of which comprises a wild-type Ube3a protein and one or more glycosylation sites. Polynucleotides that differ at least by additions . 前記グリコシル化が、Ｎ結合型グリコシル化であり、前記グリコシル化部位が、ＮＸａａＴまたはＮＸａａＳ（式中、Ｘａａは、プロリン（Ｐ）を必要に応じて除く任意のアミノ酸残基である）のコンセンサス配列を含む、請求項１に記載のポリヌクレオチド。 said glycosylation is N-linked glycosylation and said glycosylation site is a consensus sequence of NXaaT or NXaaS, where Xaa is any amino acid residue, optionally excluding proline (P) 2. The polynucleotide of claim 1, comprising: 前記グリコシル化部位が、次の： said glycosylation sites are:
配列番号１４のａａ６２～ａａ６４、配列番号１４のａａ９６～ａａ９８、配列番号１４のａａ１０２～ａａ１０４、配列番号１４のａａ２１９～ａａ２２１、配列番号１４のａａ３５４～ａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１～ａａ５９３、配列番号１４のａａ６２２～ａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５～ａａ８０７； aa62 to aa64 of SEQ ID NO: 14, aa96 to aa98 of SEQ ID NO: 14, aa102 to aa104 of SEQ ID NO: 14, aa219 to aa221 of SEQ ID NO: 14, aa354 to aa356 of SEQ ID NO: 14, aa591 to aa593 of SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: aa622-aa624 of 14, aa805-aa807 of SEQ ID NO: 14;
配列番号１６のａａ８５～ａａ８７、配列番号１６のａａ１１９～ａａ１２１、配列番号１６のａａ１２５～ａａ１２７、配列番号１６のａａ２４２～ａａ２４４、配列番号１６のａａ３７７～ａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４～ａａ６１６、配列番号１６のａａ６４５～ａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８～ａａ８３０； aa85 to aa87 of SEQ ID NO: 16, aa119 to aa121 of SEQ ID NO: 16, aa125 to aa127 of SEQ ID NO: 16, aa242 to aa244 of SEQ ID NO: 16, aa377 to aa379 of SEQ ID NO: 16, aa614 to aa616 of SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 16 aa645-aa647 of 16, aa828-aa830 of SEQ ID NO: 16;
配列番号１８のａａ８２～ａａ８４、配列番号１８のａａ１１６～ａａ１１８、配列番号１８のａａ１２２～ａａ１２４、配列番号１８のａａ２３９～ａａ２４１、配列番号１８のａａ３７４～ａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１～ａａ６１３、配列番号１８のａａ６４２～ａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５～ａａ８２７； aa82 to aa84 of SEQ ID NO: 18, aa116 to aa118 of SEQ ID NO: 18, aa122 to aa124 of SEQ ID NO: 18, aa239 to aa241 of SEQ ID NO: 18, aa374 to aa376 of SEQ ID NO: 18, aa611 to aa613 of SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: aa642-aa644 of SEQ ID NO: 18, aa825-aa827 of SEQ ID NO: 18;
配列番号２６もしくは２８のａａ８３～ａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１７～ａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ１２３～ａａ１２５、配列番号２６もしくは２８のａａ２３７～ａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７２～ａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９～ａａ６１１、配列番号２６もしくは２８のａａ６４０～ａａ６４２、配列番号２６もしくは２８のａａ８２３～ａａ８２５； aa83 to aa85 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa117 to aa119 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa123 to aa125 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa237 to aa239 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa372 to aa374 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa609-aa611 of SEQ ID NO:26 or 28, aa640-aa642 of SEQ ID NO:26 or 28, aa823-aa825 of SEQ ID NO:26 or 28;
配列番号３０のａａ６２～ａａ６４、配列番号３０のａａ９６～ａａ９８、配列番号３０のａａ１０２～ａａ１０４、配列番号３０のａａ２１６～ａａ２１８、配列番号３０のａａ３５１～ａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８～ａａ５９０、配列番号３０のａａ６１９～ａａ６２１、または配列番号３０のａａ８０２～ａａ８０４ aa62 to aa64 of SEQ ID NO: 30, aa96 to aa98 of SEQ ID NO: 30, aa102 to aa104 of SEQ ID NO: 30, aa216 to aa218 of SEQ ID NO: 30, aa351 to aa353 of SEQ ID NO: 30, aa588 to aa590 of SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: aa619-aa621 of 30 or aa802-aa804 of SEQ ID NO:30
から選択される位置のうちの１種または複数に対応する、前記ポリペプチドまたはタンパク質のアミノ酸（ａａ）位置にある、請求項１または２に記載のポリヌクレオチド。3. The polynucleotide of claim 1 or 2, at an amino acid (aa) position of said polypeptide or protein corresponding to one or more of the positions selected from: 前記Ｕｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物が、次の（ａ）～（ｅ）： Said Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof comprises the following (a)-(e):
（ａ）配列番号１４のａａ６２～ａａ６４、配列番号１４のａａ９６～ａａ９８、配列番号１４のａａ１０２～ａａ１０４、配列番号１４のａａ２１９～ａａ２２１、配列番号１４のａａ３５４～ａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１～ａａ５９３、配列番号１４のａａ６２２～ａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５～ａａ８０７；(a) aa62 to aa64 of SEQ ID NO: 14, aa96 to aa98 of SEQ ID NO: 14, aa102 to aa104 of SEQ ID NO: 14, aa219 to aa221 of SEQ ID NO: 14, aa354 to aa356 of SEQ ID NO: 14, aa591 to aa593 of SEQ ID NO: 14 , aa622-aa624 of SEQ ID NO:14, aa805-aa807 of SEQ ID NO:14;
（ｂ）配列番号１６のａａ８５～ａａ８７、配列番号１６のａａ１１９～ａａ１２１、配列番号１６のａａ１２５～ａａ１２７、配列番号１６のａａ２４２～ａａ２４４、配列番号１６のａａ３７７～ａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４～ａａ６１６、配列番号１６のａａ６４５～ａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８～ａａ８３０；(b) aa85 to aa87 of SEQ ID NO: 16, aa119 to aa121 of SEQ ID NO: 16, aa125 to aa127 of SEQ ID NO: 16, aa242 to aa244 of SEQ ID NO: 16, aa377 to aa379 of SEQ ID NO: 16, aa614 to aa616 of SEQ ID NO: 16 , aa645-aa647 of SEQ ID NO:16, aa828-aa830 of SEQ ID NO:16;
（ｃ）配列番号１８のａａ８２～ａａ８４、配列番号１８のａａ１１６～ａａ１１８、配列番号１８のａａ１２２～ａａ１２４、配列番号１８のａａ２３９～ａａ２４１、配列番号１８のａａ３７４～ａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１～ａａ６１３、配列番号１８のａａ６４２～ａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５～ａａ８２７；(c) aa82 to aa84 of SEQ ID NO: 18, aa116 to aa118 of SEQ ID NO: 18, aa122 to aa124 of SEQ ID NO: 18, aa239 to aa241 of SEQ ID NO: 18, aa374 to aa376 of SEQ ID NO: 18, aa611 to aa613 of SEQ ID NO: 18 , aa642-aa644 of SEQ ID NO:18, aa825-aa827 of SEQ ID NO:18;
（ｄ）配列番号２６もしくは２８のａａ８３～ａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１７～ａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ１２３～ａａ１２５、配列番号２６もしくは２８のａａ２３７～ａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７２～ａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９～ａａ６１１、配列番号２６もしくは２８のａａ６４０～ａａ６４２、配列番号２６もしくは２８のａａ８２３～ａａ８２５；(d) aa83-aa85 of SEQ ID NO:26 or 28, aa117-aa119 of SEQ ID NO:26 or 28, aa123-aa125 of SEQ ID NO:26 or 28, aa237-aa239 of SEQ ID NO:26 or 28, aa372 of SEQ ID NO:26 or 28 ~aa374, aa609-aa611 of SEQ ID NO:26 or 28, aa640-aa642 of SEQ ID NO:26 or 28, aa823-aa825 of SEQ ID NO:26 or 28;
（ｅ）配列番号３０のａａ６２～ａａ６４、配列番号３０のａａ９６～ａａ９８、配列番号３０のａａ１０２～ａａ１０４、配列番号３０のａａ２１６～ａａ２１８、配列番号３０のａａ３５１～ａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８～ａａ５９０、配列番号３０のａａ６１９～ａａ６２１、または配列番号３０のａａ８０２～ａａ８０４(e) aa62 to aa64 of SEQ ID NO: 30, aa96 to aa98 of SEQ ID NO: 30, aa102 to aa104 of SEQ ID NO: 30, aa216 to aa218 of SEQ ID NO: 30, aa351 to aa353 of SEQ ID NO: 30, aa588 to aa590 of SEQ ID NO: 30 , aa619-aa621 of SEQ ID NO:30, or aa802-aa804 of SEQ ID NO:30
のうちのいずれか１種において同定されるとおりの８個のアミノ酸（ａａ）位置に対応するａａ位置における８個のグリコシル化部位を含む、請求項１～３に記載のポリヌクレオチド。4. The polynucleotide of claims 1-3, comprising eight glycosylation sites at aa positions corresponding to the eight amino acid (aa) positions as identified in any one of . 前記Ｕｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物が、次の： Said Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof is:
配列番号１４のａａ６４、配列番号１４のａａ９８、配列番号１４のａａ１０４、配列番号１４のａａ２２１、配列番号１４のａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１、配列番号１４のａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５、配列番号１４のａａ８０６； aa64 of SEQ ID NO:14, aa98 of SEQ ID NO:14, aa104 of SEQ ID NO:14, aa221 of SEQ ID NO:14, aa356 of SEQ ID NO:14, aa591 of SEQ ID NO:14, aa624 of SEQ ID NO:14, aa805 of SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:14 14 aa806;
配列番号１６のａａ８７、配列番号１６のａａ１２１、配列番号１６のａａ１２７、配列番号１６のａａ２４４、配列番号１６のａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４、配列番号１６のａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８、配列番号１６のａａ８２９； aa87 of SEQ ID NO:16, aa121 of SEQ ID NO:16, aa127 of SEQ ID NO:16, aa244 of SEQ ID NO:16, aa379 of SEQ ID NO:16, aa614 of SEQ ID NO:16, aa647 of SEQ ID NO:16, aa828 of SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:16 16 aa829;
配列番号１８のａａ８４、配列番号１８のａａ１１８、配列番号１８のａａ１２４、配列番号１８のａａ２４１、配列番号１８のａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１、配列番号１８のａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５、配列番号１８のａａ８２６； aa84 of SEQ ID NO: 18, aa118 of SEQ ID NO: 18, aa124 of SEQ ID NO: 18, aa241 of SEQ ID NO: 18, aa376 of SEQ ID NO: 18, aa611 of SEQ ID NO: 18, aa644 of SEQ ID NO: 18, aa825 of SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 18 aa826;
配列番号２６もしくは２８のａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ１２５、配列番号２６もしくは２８のａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９、配列番号２６もしくは２８のａａ６１０、配列番号２６もしくは２８のａａ６４２、配列番号２６もしくは２８のａａ８２３； aa85 of SEQ ID NO:26 or 28, aa119 of SEQ ID NO:26 or 28, aa125 of SEQ ID NO:26 or 28, aa239 of SEQ ID NO:26 or 28, aa374 of SEQ ID NO:26 or 28, aa609 of SEQ ID NO:26 or 28, SEQ ID NO:28 aa610 of 26 or 28, aa642 of SEQ ID NO:26 or 28, aa823 of SEQ ID NO:26 or 28;
配列番号３０のａａ６４、配列番号３０のａａ９８、配列番号３０のａａ１０４、配列番号３０のａａ２１８、配列番号３０のａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８、配列番号３０のａａ５８９、配列番号３０のａａ６２１、または配列番号３０のａａ８０２ aa64 of SEQ ID NO:30, aa98 of SEQ ID NO:30, aa104 of SEQ ID NO:30, aa218 of SEQ ID NO:30, aa353 of SEQ ID NO:30, aa588 of SEQ ID NO:30, aa589 of SEQ ID NO:30, aa621 of SEQ ID NO:30, or a sequence number 30 aa802
から選択される位置のうちの１種または複数に対応するａａ位置における変異したアミノ酸残基のうちの１個または複数を含み、これにより、グリコシル化部位のうちの１個または複数を形成し、one or more of the mutated amino acid residues at the aa positions corresponding to one or more of the positions selected from, thereby forming one or more of the glycosylation sites;
必要に応じて、前記グリコシル化部位のうちの少なくとも１個におけるいずれか１個またはいずれか２個または３個全てのアミノ酸残基が、野生型Ｕｂｅ３ａポリペプチドまたはタンパク質と比較して変異され、これにより、前記グリコシル化部位を構成する、Optionally, any one or any two or all three amino acid residues in at least one of said glycosylation sites are mutated relative to the wild-type Ube3a polypeptide or protein, comprising said glycosylation site by
請求項１～４のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。A polynucleotide according to any one of claims 1-4. 前記Ｕｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物が、次の（ａ）～（ｅ）： Said Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof comprises the following (a)-(e):
（ａ）配列番号１４のａａ６４、配列番号１４のａａ９８、配列番号１４のａａ１０４、配列番号１４のａａ２２１、配列番号１４のａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１、配列番号１４のａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５および配列番号１４のａａ８０６；(a) aa64 of SEQ ID NO: 14, aa98 of SEQ ID NO: 14, aa104 of SEQ ID NO: 14, aa221 of SEQ ID NO: 14, aa356 of SEQ ID NO: 14, aa591 of SEQ ID NO: 14, aa624 of SEQ ID NO: 14, aa805 of SEQ ID NO: 14 and aa806 of SEQ ID NO: 14;
（ｂ）配列番号１６のａａ８７、配列番号１６のａａ１２１、配列番号１６のａａ１２７、配列番号１６のａａ２４４、配列番号１６のａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４、配列番号１６のａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８および配列番号１６のａａ８２９；(b) aa87 of SEQ ID NO: 16, aa121 of SEQ ID NO: 16, aa127 of SEQ ID NO: 16, aa244 of SEQ ID NO: 16, aa379 of SEQ ID NO: 16, aa614 of SEQ ID NO: 16, aa647 of SEQ ID NO: 16, aa828 of SEQ ID NO: 16 and aa829 of SEQ ID NO: 16;
（ｃ）配列番号１８のａａ８４、配列番号１８のａａ１１８、配列番号１８のａａ１２４、配列番号１８のａａ２４１、配列番号１８のａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１、配列番号１８のａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５および配列番号１８のａａ８２６；(c) aa84 of SEQ ID NO: 18, aa118 of SEQ ID NO: 18, aa124 of SEQ ID NO: 18, aa241 of SEQ ID NO: 18, aa376 of SEQ ID NO: 18, aa611 of SEQ ID NO: 18, aa644 of SEQ ID NO: 18, aa825 of SEQ ID NO: 18 and aa826 of SEQ ID NO: 18;
（ｄ）配列番号２６もしくは２８のａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ１２５、配列番号２６もしくは２８のａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９、配列番号２６もしくは２８のａａ６１０、配列番号２６もしくは２８のａａ６４２および配列番号２６もしくは２８のａａ８２３；または(d) aa85 of SEQ. , aa610 of SEQ ID NO:26 or 28, aa642 of SEQ ID NO:26 or 28 and aa823 of SEQ ID NO:26 or 28; or
（ｅ）配列番号３０のａａ６４、配列番号３０のａａ９８、配列番号３０のａａ１０４、配列番号３０のａａ２１８、配列番号３０のａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８、配列番号３０のａａ５８９、配列番号３０のａａ６２１および配列番号３０のａａ８０２(e) aa64 of SEQ ID NO:30, aa98 of SEQ ID NO:30, aa104 of SEQ ID NO:30, aa218 of SEQ ID NO:30, aa353 of SEQ ID NO:30, aa588 of SEQ ID NO:30, aa589 of SEQ ID NO:30, aa621 of SEQ ID NO:30 and aa802 of SEQ ID NO:30
のうちのいずれか１種において同定される位置に対応するａａ位置における９個の変異したアミノ酸残基を含み、これにより、８個のグリコシル化部位を形成する、請求項１～５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。comprising 9 mutated amino acid residues at the aa positions corresponding to the positions identified in any one of , thereby forming 8 glycosylation sites. 1. Polynucleotide according to item 1. 前記Ｕｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物が、次の（ａ）～（ｅ）： Said Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof comprises the following (a)-(e):
（ａ）配列番号１４のａａ６４、配列番号１４のａａ９８、配列番号１４のａａ２２１、配列番号１４のａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１、配列番号１４のａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５および配列番号１４のａａ８０６；(a) aa64 of SEQ ID NO:14, aa98 of SEQ ID NO:14, aa221 of SEQ ID NO:14, aa356 of SEQ ID NO:14, aa591 of SEQ ID NO:14, aa624 of SEQ ID NO:14, aa805 of SEQ ID NO:14 and aa806 of SEQ ID NO:14 ;
（ｂ）配列番号１６のａａ８７、配列番号１６のａａ１２１、配列番号１６のａａ２４４、配列番号１６のａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４、配列番号１６のａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８および配列番号１６のａａ８２９；(b) aa87 of SEQ ID NO:16, aa121 of SEQ ID NO:16, aa244 of SEQ ID NO:16, aa379 of SEQ ID NO:16, aa614 of SEQ ID NO:16, aa647 of SEQ ID NO:16, aa828 of SEQ ID NO:16 and aa829 of SEQ ID NO:16 ;
（ｃ）配列番号１８のａａ８４、配列番号１８のａａ１１８、配列番号１８のａａ２４１、配列番号１８のａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１、配列番号１８のａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５および配列番号１８のａａ８２６；(c) aa84 of SEQ ID NO:18, aa118 of SEQ ID NO:18, aa241 of SEQ ID NO:18, aa376 of SEQ ID NO:18, aa611 of SEQ ID NO:18, aa644 of SEQ ID NO:18, aa825 of SEQ ID NO:18 and aa826 of SEQ ID NO:18 ;
（ｄ）配列番号２６もしくは２８のａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９、配列番号２６もしくは２８のａａ６１０、配列番号２６もしくは２８のａａ６４２および配列番号２６もしくは２８のａａ８２３；または(d) aa85 of SEQ. , aa642 of SEQ ID NO:26 or 28 and aa823 of SEQ ID NO:26 or 28; or
（ｅ）配列番号３０のａａ６４、配列番号３０のａａ９８、配列番号３０のａａ２１８、配列番号３０のａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８、配列番号３０のａａ５８９、配列番号３０のａａ６２１および配列番号３０のａａ８０２(e) aa64 of SEQ ID NO:30, aa98 of SEQ ID NO:30, aa218 of SEQ ID NO:30, aa353 of SEQ ID NO:30, aa588 of SEQ ID NO:30, aa589 of SEQ ID NO:30, aa621 of SEQ ID NO:30 and aa802 of SEQ ID NO:30
のうちのいずれか１種において同定される位置に対応するａａ位置における８個の変異したアミノ酸残基を含み、これにより、７個のグリコシル化部位を形成する、請求項１～６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。8 mutated amino acid residues at the aa positions corresponding to the positions identified in any one of claims 1 to 6, thereby forming 7 glycosylation sites. 1. Polynucleotide according to item 1. 前記形成されたグリコシル化部位が、ＮＸａａＴまたはＮＸａａＳ（式中、Ｘａａは、プロリン（Ｐ）を必要に応じて除く任意のアミノ酸残基である）のコンセンサス配列を含む、請求項５～７のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。 8. Any of claims 5-7, wherein the formed glycosylation site comprises a consensus sequence of NXaaT or NXaaS, wherein Xaa is any amino acid residue, optionally excluding proline (P). or the polynucleotide according to claim 1. 前記変異したアミノ酸残基が、 The mutated amino acid residue is
配列番号１４のａａ６４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ９８に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ１０４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ２２１に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ３５６に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ５９１に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号１４のａａ６２４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ８０５に対応するａａ位置におけるＮ、および配列番号１４のａａ８０６に対応するａａ位置におけるＮ； T or S at the aa position corresponding to aa64 of SEQ ID NO:14, T or S at the aa position corresponding to aa98 of SEQ ID NO:14, T or S at the aa position corresponding to aa104 of SEQ ID NO:14, aa221 of SEQ ID NO:14 T or S at the aa position corresponding to SEQ ID NO: 14, T or S at the aa position corresponding to aa356 of SEQ ID NO: 14, N at the aa position corresponding to aa591 of SEQ ID NO: 14, T at the aa position corresponding to aa624 of SEQ ID NO: 14 or S, N at the aa position corresponding to aa805 of SEQ ID NO:14, and N at the aa position corresponding to aa806 of SEQ ID NO:14;
配列番号１６のａａ８７に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ１２１に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ１２７に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ２４４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ３７９に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ６１４に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号１６のａａ６４７に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ８２８に対応するａａ位置におけるＮ、および配列番号１６のａａ８２９に対応するａａ位置におけるＮ； T or S at the aa position corresponding to aa87 of SEQ ID NO:16, T or S at the aa position corresponding to aa121 of SEQ ID NO:16, T or S at the aa position corresponding to aa127 of SEQ ID NO:16, aa244 of SEQ ID NO:16 T or S at the aa position corresponding to SEQ ID NO: 16, T or S at the aa position corresponding to aa379 of SEQ ID NO: 16, N at the aa position corresponding to aa614 of SEQ ID NO: 16, T at the aa position corresponding to aa647 of SEQ ID NO: 16 or S, N at the aa position corresponding to aa828 of SEQ ID NO:16, and N at the aa position corresponding to aa829 of SEQ ID NO:16;
配列番号１８のａａ８４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ１１８に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ１２４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ２４１に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ３７６に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ６１１に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号１８のａａ６４４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ８２５に対応するａａ位置におけるＮ、および配列番号１８のａａ８２６に対応するａａ位置におけるＮ； T or S at the aa position corresponding to aa84 of SEQ ID NO:18, T or S at the aa position corresponding to aa118 of SEQ ID NO:18, T or S at the aa position corresponding to aa124 of SEQ ID NO:18, aa241 of SEQ ID NO:18 T or S at the aa position corresponding to SEQ ID NO: 18, T or S at the aa position corresponding to aa376 of SEQ ID NO: 18, N at the aa position corresponding to aa611 of SEQ ID NO: 18, T at the aa position corresponding to aa644 of SEQ ID NO: 18 or S, N at the aa position corresponding to aa825 of SEQ ID NO:18, and N at the aa position corresponding to aa826 of SEQ ID NO:18;
配列番号２６もしくは２８のａａ８５に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ１１９に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ１２５に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ２３９に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ３７４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号２６もしくは２８のａａ６１０に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号２６もしくは２８のａａ６４２に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、および配列番号２６もしくは２８のａａ８２３に対応するａａ位置におけるＮ；または T or S at the aa position corresponding to aa85 of SEQ ID NO:26 or 28, T or S at the aa position corresponding to aa119 of SEQ ID NO:26 or 28, T or S at the aa position corresponding to aa125 of SEQ ID NO:26 or 28 , T or S at the aa position corresponding to aa239 of SEQ ID NO:26 or 28, T or S at the aa position corresponding to aa374 of SEQ ID NO:26 or 28, N at the aa position corresponding to aa609 of SEQ ID NO:26 or 28, N at the aa position corresponding to aa610 of SEQ ID NO:26 or 28, T or S at the aa position corresponding to aa642 of SEQ ID NO:26 or 28, and N at the aa position corresponding to aa823 of SEQ ID NO:26 or 28; or
配列番号３０のａａ６４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ９８に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ１０４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ２１８に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ３５３に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ５８８に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号３０のａａ５８９に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号３０のａａ６２１に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、および配列番号３０のａａ８０２に対応するａａ位置におけるＮ T or S at the aa position corresponding to aa64 of SEQ ID NO:30, T or S at the aa position corresponding to aa98 of SEQ ID NO:30, T or S at the aa position corresponding to aa104 of SEQ ID NO:30, aa218 of SEQ ID NO:30 T or S at the aa position corresponding to SEQ ID NO:30, T or S at the aa position corresponding to aa353 of SEQ ID NO:30, N at the aa position corresponding to aa588 of SEQ ID NO:30, N at the aa position corresponding to aa589 of SEQ ID NO:30 , T or S at the aa position corresponding to aa621 of SEQ ID NO:30, and N at the aa position corresponding to aa802 of SEQ ID NO:30
のうちの１種または複数から選択される、請求項５～８のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。Polynucleotide according to any one of claims 5 to 8, selected from one or more of: 前記Ｕｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物が１個または複数の天然に存在しないグリコシル化部位を含む、請求項１～９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。 10. The polynucleotide of any one of claims 1-9, wherein said Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof comprises one or more non-naturally occurring glycosylation sites. 前記Ｕｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物が、次の： Said Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof is:
配列番号１４のａａ２１～ａａ８７２、配列番号１６のａａ２１～ａａ８９５、配列番号１８のａａ２１～ａａ８９２、配列番号２６のａａ２１～ａａ８９０、配列番号２８のａａ２１～ａａ８９０、配列番号３０のａａ２１～ａａ８６９、またはそれらのそれぞれに対して少なくとも約９０％、もしくは少なくとも約９５％、もしくは少なくとも約９９％同一性を有する配列 aa21 to aa872 of SEQ ID NO: 14, aa21 to aa895 of SEQ ID NO: 16, aa21 to aa892 of SEQ ID NO: 18, aa21 to aa890 of SEQ ID NO: 26, aa21 to aa890 of SEQ ID NO: 28, aa21 to aa869 of SEQ ID NO: 30, or them sequences having at least about 90%, or at least about 95%, or at least about 99% identity to each of
から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１～１０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。The polynucleotide of any one of claims 1-10, comprising an amino acid sequence selected from: 前記Ｕｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物がシグナルペプチドをさらに含む、請求項１～１１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。 The polynucleotide of any one of claims 1-11, wherein said Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof further comprises a signal peptide. 前記シグナルペプチドが、分泌シグナルである、請求項１２に記載のポリヌクレオチド。 13. The polynucleotide of claim 12, wherein said signal peptide is a secretory signal. 前記シグナルペプチドが、次の：抗体重鎖／軽鎖分泌シグナル、ツインアルギニン輸送タンパク質分泌シグナル、インターロイキン－２（ＩＬ２）分泌シグナル、インターロイキン－４（ＩＬ４）分泌シグナル、インターロイキン－１０（ＩＬ１０）分泌シグナル、インターロイキン－３（ＩＬ３）分泌シグナル、インターロイキン－７（ＩＬ７）分泌シグナル、ヒトＩＬ２分泌シグナル、ヒトＯＳＭ分泌シグナル、ＶＳＶ－Ｇ分泌シグナル、マウスＩｇカッパ分泌シグナル、ヒトＩｇＧ２ Ｈ分泌シグナル、ＢＭ４０分泌シグナル、セクレコン分泌シグナル、ヒトＩｇＫＶＩＩＩ分泌シグナル、ＣＤ３３分泌シグナル、ｔＰＡ分泌シグナル、ヒトキモトリプシノーゲン分泌シグナル、ヒトトリプシノーゲン－２分泌シグナル、ガウシアｌｕｃ分泌シグナル、アルブミン（ＨＳＡ）分泌シグナル、インフルエンザ赤血球凝集素分泌シグナル、ヒトインスリン分泌シグナルまたはカイコフィブロインＬＣから選択される、請求項１２または１３に記載のポリヌクレオチド。 Said signal peptide comprises: antibody heavy/light chain secretion signal, twin arginine transport protein secretion signal, interleukin-2 (IL2) secretion signal, interleukin-4 (IL4) secretion signal, interleukin-10 (IL10 ) secretion signal, interleukin-3 (IL3) secretion signal, interleukin-7 (IL7) secretion signal, human IL2 secretion signal, human OSM secretion signal, VSV-G secretion signal, mouse Ig kappa secretion signal, human IgG2 H secretion signal, BM40 secretion signal, secreton secretion signal, human IgKVIII secretion signal, CD33 secretion signal, tPA secretion signal, human chymotrypsinogen secretion signal, human trypsinogen-2 secretion signal, Gaussia luc secretion signal, albumin (HSA) secretion signal, influenza erythrocytes 14. Polynucleotide according to claim 12 or 13, selected from agglutinin secretion signal, human insulin secretion signal or silkworm fibroin LC. 前記シグナルペプチドが、配列番号１４のａａ１～ａａ２０のアミノ酸配列を含む、請求項１２～１４のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。 15. The polynucleotide of any one of claims 12-14, wherein the signal peptide comprises the amino acid sequence aa1-aa20 of SEQ ID NO:14. 前記Ｕｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物が、配列番号１４、１６、１８、２６、２８および３０、またはそれらのそれぞれに対して少なくとも約９０％、もしくは少なくとも約９５％、もしくは少なくとも約９９％同一性を有する配列のうちのいずれか１種から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１～１５に記載のポリヌクレオチド。 said Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof is at least about 90%, or at least about 95%, or at least about 99% relative to SEQ ID NOS: 14, 16, 18, 26, 28 and 30, or each thereof 16. The polynucleotide of claims 1-15, comprising an amino acid sequence selected from any one of the sequences with which it shares identity. 前記Ｕｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物が自己切断ペプチド、および検出可能または選択ポリペプチドをさらに含む、請求項１～１６に記載のポリヌクレオチド。 The polynucleotide of claims 1-16, wherein said Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof further comprises a self-cleaving peptide and a detectable or selectable polypeptide. 次の：
配列番号１３のｎｔ６１～ｎｔ２６１９、配列番号１５のｎｔ６１～ｎｔ２６８８、配列番号１７のｎｔ６１～ｎｔ２６７９、配列番号２５のｎｔ６１～ｎｔ２６７３、配列番号２７のｎｔ６１～ｎｔ２６７３、配列番号２９のｎｔ６１～ｎｔ２６１０；配列番号１３、配列番号１５、配列番号１７、配列番号２５、配列番号２７、配列番号２９、またはそれらのそれぞれに対して少なくとも約９０％、もしくは少なくとも約９５％、もしくは少なくとも約９９％同一性を有する配列
のうちのいずれか１種から選択されるヌクレオチド（ｎｔ）配列を含む、請求項１～１７のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。 next:
nt61-nt2619 of SEQ ID NO:13, nt61-nt2688 of SEQ ID NO:15, nt61-nt2679 of SEQ ID NO:17, nt61-nt2673 of SEQ ID NO:25, nt61-nt2673 of SEQ ID NO:27, nt61-nt2610 of SEQ ID NO:29; 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, or sequences having at least about 90%, or at least about 95%, or at least about 99% identity to each of them Polynucleotide according to any one of claims 1 to 17 , comprising a nucleotide (nt) sequence selected from any one of 前記Ｕｂｅ３ａポリペプチド、またはその生物学的等価物が、野生型ヒトＵｂｅ３ａタンパク質または野生型マウスＵｂｅ３ａタンパク質に由来する、請求項１～１８のいずれかに記載のポリヌクレオチド。 19. The polynucleotide of any of claims 1-18, wherein said Ube3a polypeptide , or biological equivalent thereof, is derived from wild-type human Ube3a protein or wild-type mouse Ube3a protein. 前記野生型ヒトＵｂｅ３ａタンパク質が、配列番号８、１０または１２のうちのいずれか１種のアミノ酸配列を含み、前記野生型マウスＵｂｅ３ａタンパク質が、配列番号２０、２２または２４のうちのいずれか１種のアミノ酸配列を含む、請求項１９に記載のポリヌクレオチド。 wherein said wild-type human Ube3a protein comprises the amino acid sequence of any one of SEQ ID NOs: 8, 10 or 12, and said wild-type mouse Ube3a protein is any one of SEQ ID NOs: 20, 22 or 24 20. The polynucleotide of claim 19 , comprising the amino acid sequence of 前記Ｕｂｅ３ａポリペプチド、またはその生物学的等価物の発現を方向付ける調節配列をさらに含む、請求項１～２０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。 21. The polynucleotide of any one of claims 1-20 , further comprising regulatory sequences that direct expression of said Ube3a polypeptide , or biological equivalent thereof. 前記調節配列が、次の：プロモーター、イントロン、エンハンサー、ポリアデニル化シグナル、ターミネーター、サイレンサー、ＴＡＴＡボックスまたはウッドチャック肝炎ウイルス（ＷＨＰ）転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）のうちの１種または複数を含む、請求項２１に記載のポリヌクレオチド。 wherein said regulatory sequences comprise one or more of the following: promoters, introns, enhancers, polyadenylation signals, terminators, silencers, TATA boxes or woodchuck hepatitis virus (WHP) post-transcriptional regulatory elements (WPREs). Item 22. The polynucleotide of Item 21 . 前記プロモーターが、次の：ＭＮＤＵ３プロモーター、ＣＭＶプロモーター、ＰＧＫプロモーター、ＭＮＤＵプロモーターまたはＥＦ１アルファプロモーターから選択される、請求項２２に記載のポリヌクレオチド。 23. The polynucleotide of claim 22 , wherein said promoter is selected from the following: MNDU3 promoter, CMV promoter, PGK promoter, MNDU promoter or EF1 alpha promoter. 前記ＭＮＤＵ３プロモーターが、配列番号３の配列を含み、前記ＣＭＶプロモーターが、配列番号１、２または３４から選択される配列を含み、前記ＰＫＧプロモーターが、配列番号４の配列を含み、前記ＭＮＤＵプロモーターが、配列番号５の配列を含み、前記ＥＦ１アルファプロモーターが、配列番号６の配列を含む、請求項２３に記載のポリヌクレオチド。 The MNDU3 promoter comprises the sequence of SEQ ID NO: 3, the CMV promoter comprises a sequence selected from SEQ ID NO: 1, 2 or 34, the PKG promoter comprises the sequence of SEQ ID NO: 4, the MNDU promoter comprises , wherein the EF1 alpha promoter comprises the sequence of SEQ ID NO: 6 . 次の：
ポリプリントラクト配列（ＰＰＴ）、セントラルＰＰＴ（ｃＰＰＴ）、Ｒ領域、Ｕ５、カプシド形成シグナル（Ｐｓｉ）、Ｒｅｖ応答性エレメント（ＲＲＥ）、全長Ｕ３またはその断片、
検出可能もしくは選択マーカー、検出可能もしくは選択ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、前記検出可能もしくは選択ポリペプチドの発現を方向付ける調節配列、または前記検出可能もしくは選択ポリペプチドのためのコード配列と前記Ｕｂｅ３ａポリペプチドまたは前記その生物学的等価物をコードする配列との間に配置された自己切断ペプチドのためのコード配列
のうちの１種または複数をさらに含む、請求項１～２４のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。 next:
polypurine tract sequence (PPT), central PPT (cPPT), R region, U5, encapsidation signal (Psi), Rev responsive element (RRE), full-length U3 or fragments thereof,
a detectable or selectable marker, a polynucleotide encoding a detectable or selectable polypeptide, a regulatory sequence directing expression of said detectable or selectable polypeptide, or a coding sequence for said detectable or selectable polypeptide and said Ube3a polypeptide 25. Any one of claims 1 to 24, further comprising one or more of the coding sequences for a self-cleaving peptide interposed between the sequence encoding the peptide or said biological equivalent thereof . The polynucleotide according to paragraph. 請求項１～２５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドに対して逆または相補体または逆相補体である、ポリヌクレオチド。 A polynucleotide that is the reverse or complement or reverse complement to the polynucleotide of any one of claims 1-25. 請求項１～２６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。 A vector comprising a polynucleotide according to any one of claims 1-26. ウイルスベクターまたは非ウイルスベクターである、請求項２７に記載のベクター。 28. The vector of claim 27, which is a viral vector or a non-viral vector. 前記ウイルスベクターが、レトロウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクターまたはヘルペスウイルスベクターから選択される、請求項２８に記載のベクター。 29. The vector of claim 28, wherein said viral vector is selected from a retroviral vector, an adenoviral vector, an adeno-associated viral vector or a herpes viral vector. 前記レトロウイルスベクターが、レンチウイルスベクターである、請求項２９に記載のベクター。 30. The vector of claim 29, wherein said retroviral vector is a lentiviral vector. 前記レンチウイルスベクターが、ＴＡＴＡボックス、および必要に応じて転写因子結合部位のうちの１個または複数を欠如するＵ３領域を必要に応じて有する自己不活型レンチウイルスベクターである、請求項３０に記載のベクター。 31. The lentiviral vector of claim 30, wherein the lentiviral vector is a self-inactivating lentiviral vector optionally having a U3 region lacking a TATA box and optionally one or more of transcription factor binding sites. Vector described. 前記レンチウイルスベクターが、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）に由来する、請求項３０または３１に記載のベクター。 32. The vector of claim 30 or 31, wherein said lentiviral vector is derived from human immunodeficiency virus (HIV). 非ウイルスベクターが、プラスミドである、請求項３２に記載のベクター。 33. The vector of Claim 32, wherein the non-viral vector is a plasmid. 前記ポリヌクレオチドに動作可能に連結され、前記ポリヌクレオチドの複製を方向付ける調節配列をさらに含む、請求項２７～３３のいずれか一項に記載のベクター。 34. The vector of any one of claims 27-33, further comprising a regulatory sequence operably linked to said polynucleotide and directing replication of said polynucleotide. 組換えユビキチンタンパク質リガーゼＥ３Ａ（Ｕｂｅ３ａ）ポリペプチドまたはその生物学的等価物であって、そのアミノ酸配列は野生型Ｕｂｅ３ａタンパク質と、１つまたはそれよりも多いグリコシル化部位の付加により少なくとも異なる、組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物。 A recombinant ubiquitin protein ligase E3A ( Ube3a ) polypeptide or biological equivalent thereof, wherein the amino acid sequence differs from the wild-type Ube3a protein at least by the addition of one or more glycosylation sites. Ube3a polypeptides or biological equivalents thereof. 前記グリコシル化が、Ｎ結合型グリコシル化であり、前記グリコシル化部位が、ＮＸａａＴまたはＮＸａａＳ（式中、Ｘａａは、プロリン（Ｐ）を必要に応じて除く任意のアミノ酸残基である）のコンセンサス配列を含む、請求項３５に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物。 said glycosylation is N-linked glycosylation and said glycosylation site is a consensus sequence of NXaaT or NXaaS, where Xaa is any amino acid residue, optionally excluding proline (P) 36. The recombinant Ube3a polypeptide of claim 35, or a biological equivalent thereof, comprising: 前記グリコシル化部位が、次の：
配列番号１４のａａ６２～ａａ６４、配列番号１４のａａ９６～ａａ９８、配列番号１４のａａ１０２～ａａ１０４、配列番号１４のａａ２１９～ａａ２２１、配列番号１４のａａ３５４～ａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１～ａａ５９３、配列番号１４のａａ６２２～ａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５～ａａ８０７；
配列番号１６のａａ８５～ａａ８７、配列番号１６のａａ１１９～ａａ１２１、配列番号１６のａａ１２５～ａａ１２７、配列番号１６のａａ２４２～ａａ２４４、配列番号１６のａａ３７７～ａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４～ａａ６１６、配列番号１６のａａ６４５～ａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８～ａａ８３０；
配列番号１８のａａ８２～ａａ８４、配列番号１８のａａ１１６～ａａ１１８、配列番号１８のａａ１２２～ａａ１２４、配列番号１８のａａ２３９～ａａ２４１、配列番号１８のａａ３７４～ａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１～ａａ６１３、配列番号１８のａａ６４２～ａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５～ａａ８２７；
配列番号２６もしくは２８のａａ８３～ａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１７～ａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ１２３～ａａ１２５、配列番号２６もしくは２８のａａ２３７～ａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７２～ａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９～ａａ６１１、配列番号２６もしくは２８のａａ６４０～ａａ６４２、配列番号２６もしくは２８のａａ８２３～ａａ８２５；
配列番号３０のａａ６２～ａａ６４、配列番号３０のａａ９６～ａａ９８、配列番号３０のａａ１０２～ａａ１０４、配列番号３０のａａ２１６～ａａ２１８、配列番号３０のａａ３５１～ａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８～ａａ５９０、配列番号３０のａａ６１９～ａａ６２１、または配列番号３０のａａ８０２～ａａ８０４
から選択される位置のうちの１種または複数に対応する、前記ポリペプチドまたはタンパク質のアミノ酸（ａａ）位置にある、請求項３５または３６に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物。 said glycosylation sites are:
aa62 to aa64 of SEQ ID NO: 14, aa96 to aa98 of SEQ ID NO: 14, aa102 to aa104 of SEQ ID NO: 14, aa219 to aa221 of SEQ ID NO: 14, aa354 to aa356 of SEQ ID NO: 14, aa591 to aa593 of SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: aa622-aa624 of 14, aa805-aa807 of SEQ ID NO: 14;
aa85 to aa87 of SEQ ID NO: 16, aa119 to aa121 of SEQ ID NO: 16, aa125 to aa127 of SEQ ID NO: 16, aa242 to aa244 of SEQ ID NO: 16, aa377 to aa379 of SEQ ID NO: 16, aa614 to aa616 of SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 16 aa645-aa647 of 16, aa828-aa830 of SEQ ID NO: 16;
aa82 to aa84 of SEQ ID NO: 18, aa116 to aa118 of SEQ ID NO: 18, aa122 to aa124 of SEQ ID NO: 18, aa239 to aa241 of SEQ ID NO: 18, aa374 to aa376 of SEQ ID NO: 18, aa611 to aa613 of SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: aa642-aa644 of SEQ ID NO: 18, aa825-aa827 of SEQ ID NO: 18;
aa83 to aa85 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa117 to aa119 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa123 to aa125 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa237 to aa239 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa372 to aa374 of SEQ ID NO: 26 or 28, aa609-aa611 of SEQ ID NO:26 or 28, aa640-aa642 of SEQ ID NO:26 or 28, aa823-aa825 of SEQ ID NO:26 or 28;
aa62 to aa64 of SEQ ID NO: 30, aa96 to aa98 of SEQ ID NO: 30, aa102 to aa104 of SEQ ID NO: 30, aa216 to aa218 of SEQ ID NO: 30, aa351 to aa353 of SEQ ID NO: 30, aa588 to aa590 of SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: aa619-aa621 of 30 or aa802-aa804 of SEQ ID NO:30
37. The recombinant Ube3a polypeptide of claim 35 or 36, or a biological equivalent thereof, at an amino acid (aa) position of said polypeptide or protein corresponding to one or more of the positions selected from thing. 前記Ｕｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物が、次の（ａ）～（ｅ）：
（ａ）配列番号１４のａａ６２～ａａ６４、配列番号１４のａａ９６～ａａ９８、配列番号１４のａａ１０２～ａａ１０４、配列番号１４のａａ２１９～ａａ２２１、配列番号１４のａａ３５４～ａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１～ａａ５９３、配列番号１４のａａ６２２～ａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５～ａａ８０７；
（ｂ）配列番号１６のａａ８５～ａａ８７、配列番号１６のａａ１１９～ａａ１２１、配列番号１６のａａ１２５～ａａ１２７、配列番号１６のａａ２４２～ａａ２４４、配列番号１６のａａ３７７～ａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４～ａａ６１６、配列番号１６のａａ６４５～ａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８～ａａ８３０；
（ｃ）配列番号１８のａａ８２～ａａ８４、配列番号１８のａａ１１６～ａａ１１８、配列番号１８のａａ１２２～ａａ１２４、配列番号１８のａａ２３９～ａａ２４１、配列番号１８のａａ３７４～ａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１～ａａ６１３、配列番号１８のａａ６４２～ａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５～ａａ８２７；
（ｄ）配列番号２６もしくは２８のａａ８３～ａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１７～ａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ１２３～ａａ１２５、配列番号２６もしくは２８のａａ２３７～ａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７２～ａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９～ａａ６１１、配列番号２６もしくは２８のａａ６４０～ａａ６４２、配列番号２６もしくは２８のａａ８２３～ａａ８２５；
（ｅ）配列番号３０のａａ６２～ａａ６４、配列番号３０のａａ９６～ａａ９８、配列番号３０のａａ１０２～ａａ１０４、配列番号３０のａａ２１６～ａａ２１８、配列番号３０のａａ３５１～ａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８～ａａ５９０、配列番号３０のａａ６１９～ａａ６２１、または配列番号３０のａａ８０２～ａａ８０４
のうちのいずれか１種において同定されるとおりの８個のアミノ酸（ａａ）位置に対応するａａ位置における８個のグリコシル化部位を含む、請求項３５～３７に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物。 Said Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof comprises the following (a)-(e):
(a) aa62 to aa64 of SEQ ID NO: 14, aa96 to aa98 of SEQ ID NO: 14, aa102 to aa104 of SEQ ID NO: 14, aa219 to aa221 of SEQ ID NO: 14, aa354 to aa356 of SEQ ID NO: 14, aa591 to aa593 of SEQ ID NO: 14 , aa622-aa624 of SEQ ID NO:14, aa805-aa807 of SEQ ID NO:14;
(b) aa85 to aa87 of SEQ ID NO: 16, aa119 to aa121 of SEQ ID NO: 16, aa125 to aa127 of SEQ ID NO: 16, aa242 to aa244 of SEQ ID NO: 16, aa377 to aa379 of SEQ ID NO: 16, aa614 to aa616 of SEQ ID NO: 16 , aa645-aa647 of SEQ ID NO:16, aa828-aa830 of SEQ ID NO:16;
(c) aa82 to aa84 of SEQ ID NO: 18, aa116 to aa118 of SEQ ID NO: 18, aa122 to aa124 of SEQ ID NO: 18, aa239 to aa241 of SEQ ID NO: 18, aa374 to aa376 of SEQ ID NO: 18, aa611 to aa613 of SEQ ID NO: 18 , aa642-aa644 of SEQ ID NO:18, aa825-aa827 of SEQ ID NO:18;
(d) aa83-aa85 of SEQ ID NO:26 or 28, aa117-aa119 of SEQ ID NO:26 or 28, aa123-aa125 of SEQ ID NO:26 or 28, aa237-aa239 of SEQ ID NO:26 or 28, aa372 of SEQ ID NO:26 or 28 ~aa374, aa609-aa611 of SEQ ID NO:26 or 28, aa640-aa642 of SEQ ID NO:26 or 28, aa823-aa825 of SEQ ID NO:26 or 28;
(e) aa62 to aa64 of SEQ ID NO: 30, aa96 to aa98 of SEQ ID NO: 30, aa102 to aa104 of SEQ ID NO: 30, aa216 to aa218 of SEQ ID NO: 30, aa351 to aa353 of SEQ ID NO: 30, aa588 to aa590 of SEQ ID NO: 30 , aa619-aa621 of SEQ ID NO:30, or aa802-aa804 of SEQ ID NO:30
38. The recombinant Ube3 a polypeptide of claims 35-37, comprising 8 glycosylation sites at aa positions corresponding to the 8 amino acid (aa) positions as identified in any one of or its biological equivalent. 次の：
配列番号１４のａａ６４、配列番号１４のａａ９８、配列番号１４のａａ１０４、配列番号１４のａａ２２１、配列番号１４のａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１、配列番号１４のａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５、配列番号１４のａａ８０６；
配列番号１６のａａ８７、配列番号１６のａａ１２１、配列番号１６のａａ１２７、配列番号１６のａａ２４４、配列番号１６のａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４、配列番号１６のａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８、配列番号１６のａａ８２９；
配列番号１８のａａ８４、配列番号１８のａａ１１８、配列番号１８のａａ１２４、配列番号１８のａａ２４１、配列番号１８のａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１、配列番号１８のａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５、配列番号１８のａａ８２６；
配列番号２６もしくは２８のａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ１２５、配列番号２６もしくは２８のａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９、配列番号２６もしくは２８のａａ６１０、配列番号２６もしくは２８のａａ６４２、配列番号２６もしくは２８のａａ８２３；
配列番号３０のａａ６４、配列番号３０のａａ９８、配列番号３０のａａ１０４、配列番号３０のａａ２１８、配列番号３０のａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８、配列番号３０のａａ５８９、配列番号３０のａａ６２１、または配列番号３０のａａ８０２
から選択される位置のうちの１種または複数に対応するａａ位置における変異したアミノ酸残基のうちの１個または複数を含み、これにより、グリコシル化部位のうちの１個または複数を形成し、
必要に応じて、前記グリコシル化部位のうちの少なくとも１個におけるいずれか１個またはいずれか２個または３個全てのアミノ酸残基が、野生型Ｕｂｅ３ａポリペプチドまたはタンパク質と比較して変異され、これにより、前記グリコシル化部位を構成する、
請求項３５～３８のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物。 next:
aa64 of SEQ ID NO:14, aa98 of SEQ ID NO:14, aa104 of SEQ ID NO:14, aa221 of SEQ ID NO:14, aa356 of SEQ ID NO:14, aa591 of SEQ ID NO:14, aa624 of SEQ ID NO:14, aa805 of SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:14 14 aa806;
aa87 of SEQ ID NO:16, aa121 of SEQ ID NO:16, aa127 of SEQ ID NO:16, aa244 of SEQ ID NO:16, aa379 of SEQ ID NO:16, aa614 of SEQ ID NO:16, aa647 of SEQ ID NO:16, aa828 of SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:16 16 aa829;
aa84 of SEQ ID NO: 18, aa118 of SEQ ID NO: 18, aa124 of SEQ ID NO: 18, aa241 of SEQ ID NO: 18, aa376 of SEQ ID NO: 18, aa611 of SEQ ID NO: 18, aa644 of SEQ ID NO: 18, aa825 of SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 18 aa826;
aa85 of SEQ ID NO:26 or 28, aa119 of SEQ ID NO:26 or 28, aa125 of SEQ ID NO:26 or 28, aa239 of SEQ ID NO:26 or 28, aa374 of SEQ ID NO:26 or 28, aa609 of SEQ ID NO:26 or 28, SEQ ID NO:28 aa610 of 26 or 28, aa642 of SEQ ID NO:26 or 28, aa823 of SEQ ID NO:26 or 28;
aa64 of SEQ ID NO:30, aa98 of SEQ ID NO:30, aa104 of SEQ ID NO:30, aa218 of SEQ ID NO:30, aa353 of SEQ ID NO:30, aa588 of SEQ ID NO:30, aa589 of SEQ ID NO:30, aa621 of SEQ ID NO:30, or a sequence number 30 aa802
one or more of the mutated amino acid residues at the aa positions corresponding to one or more of the positions selected from, thereby forming one or more of the glycosylation sites;
Optionally, any one or any two or all three amino acid residues in at least one of said glycosylation sites are mutated relative to the wild-type Ube3a polypeptide or protein, comprising said glycosylation site by
A recombinant Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof according to any one of claims 35-38. 次の（ａ）～（ｅ）：
（ａ）配列番号１４のａａ６４、配列番号１４のａａ９８、配列番号１４のａａ１０４、配列番号１４のａａ２２１、配列番号１４のａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１、配列番号１４のａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５および配列番号１４のａａ８０６；（ｂ）配列番号１６のａａ８７、配列番号１６のａａ１２１、配列番号１６のａａ１２７、配列番号１６のａａ２４４、配列番号１６のａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４、配列番号１６のａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８および配列番号１６のａａ８２９；
（ｃ）配列番号１８のａａ８４、配列番号１８のａａ１１８、配列番号１８のａａ１２４、配列番号１８のａａ２４１、配列番号１８のａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１、配列番号１８のａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５および配列番号１８のａａ８２６；
（ｄ）配列番号２６もしくは２８のａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ１２５、配列番号２６もしくは２８のａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９、配列番号２６もしくは２８のａａ６１０、配列番号２６もしくは２８のａａ６４２および配列番号２６もしくは２８のａａ８２３；または
（ｅ）配列番号３０のａａ６４、配列番号３０のａａ９８、配列番号３０のａａ１０４、配列番号３０のａａ２１８、配列番号３０のａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８、配列番号３０のａａ５８９、配列番号３０のａａ６２１および配列番号３０のａａ８０２
のうちのいずれか１種において同定される位置に対応するａａ位置における９個の変異したアミノ酸残基を含み、これにより、８個のグリコシル化部位を形成する、請求項３５～３９のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物。 (a) to (e) below:
(a) aa64 of SEQ ID NO: 14, aa98 of SEQ ID NO: 14, aa104 of SEQ ID NO: 14, aa221 of SEQ ID NO: 14, aa356 of SEQ ID NO: 14, aa591 of SEQ ID NO: 14, aa624 of SEQ ID NO: 14, aa805 of SEQ ID NO: 14 and aa 806 of SEQ ID NO: 14; aa647, aa828 of SEQ ID NO:16 and aa829 of SEQ ID NO:16;
(c) aa84 of SEQ ID NO: 18, aa118 of SEQ ID NO: 18, aa124 of SEQ ID NO: 18, aa241 of SEQ ID NO: 18, aa376 of SEQ ID NO: 18, aa611 of SEQ ID NO: 18, aa644 of SEQ ID NO: 18, aa825 of SEQ ID NO: 18 and aa826 of SEQ ID NO: 18;
(d) aa85 of SEQ. , aa610 of SEQ ID NO:26 or 28, aa642 of SEQ ID NO:26 or 28 and aa823 of SEQ ID NO:26 or 28; aa218 of SEQ ID NO:30, aa588 of SEQ ID NO:30, aa589 of SEQ ID NO:30, aa621 of SEQ ID NO:30 and aa802 of SEQ ID NO:30
any one of claims 35-39, comprising 9 mutated amino acid residues at the aa positions corresponding to the positions identified in any one of , thereby forming 8 glycosylation sites A recombinant Ube3a polypeptide or a biological equivalent thereof according to claim 1. 次の（ａ）～（ｅ）：
（ａ）配列番号１４のａａ６４、配列番号１４のａａ９８、配列番号１４のａａ２２１、配列番号１４のａａ３５６、配列番号１４のａａ５９１、配列番号１４のａａ６２４、配列番号１４のａａ８０５および配列番号１４のａａ８０６；
（ｂ）配列番号１６のａａ８７、配列番号１６のａａ１２１、配列番号１６のａａ２４４、配列番号１６のａａ３７９、配列番号１６のａａ６１４、配列番号１６のａａ６４７、配列番号１６のａａ８２８および配列番号１６のａａ８２９；
（ｃ）配列番号１８のａａ８４、配列番号１８のａａ１１８、配列番号１８のａａ２４１、配列番号１８のａａ３７６、配列番号１８のａａ６１１、配列番号１８のａａ６４４、配列番号１８のａａ８２５および配列番号１８のａａ８２６；
（ｄ）配列番号２６もしくは２８のａａ８５、配列番号２６もしくは２８のａａ１１９、配列番号２６もしくは２８のａａ２３９、配列番号２６もしくは２８のａａ３７４、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９、配列番号２６もしくは２８のａａ６１０、配列番号２６もしくは２８のａａ６４２および配列番号２６もしくは２８のａａ８２３；または
（ｅ）配列番号３０のａａ６４、配列番号３０のａａ９８、配列番号３０のａａ２１８、配列番号３０のａａ３５３、配列番号３０のａａ５８８、配列番号３０のａａ５８９、配列番号３０のａａ６２１および配列番号３０のａａ８０２
のうちのいずれか１種において同定される位置に対応するａａ位置における８個の変異したアミノ酸残基を含み、これにより、７個のグリコシル化部位を形成する、請求項３５～３９のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物。 (a) to (e) below:
(a) aa64 of SEQ ID NO:14, aa98 of SEQ ID NO:14, aa221 of SEQ ID NO:14, aa356 of SEQ ID NO:14, aa591 of SEQ ID NO:14, aa624 of SEQ ID NO:14, aa805 of SEQ ID NO:14 and aa806 of SEQ ID NO:14 ;
(b) aa87 of SEQ ID NO:16, aa121 of SEQ ID NO:16, aa244 of SEQ ID NO:16, aa379 of SEQ ID NO:16, aa614 of SEQ ID NO:16, aa647 of SEQ ID NO:16, aa828 of SEQ ID NO:16 and aa829 of SEQ ID NO:16 ;
(c) aa84 of SEQ ID NO:18, aa118 of SEQ ID NO:18, aa241 of SEQ ID NO:18, aa376 of SEQ ID NO:18, aa611 of SEQ ID NO:18, aa644 of SEQ ID NO:18, aa825 of SEQ ID NO:18 and aa826 of SEQ ID NO:18 ;
(d) aa85 of SEQ. or (e) aa64 of SEQ ID NO:30, aa98 of SEQ ID NO:30, aa218 of SEQ ID NO:30, aa353 of SEQ ID NO:30, aa588 of SEQ ID NO:30 , aa589 of SEQ ID NO:30, aa621 of SEQ ID NO:30 and aa802 of SEQ ID NO:30
any one of claims 35 to 39, comprising 8 mutated amino acid residues at the aa positions corresponding to the positions identified in any one of , thereby forming 7 glycosylation sites A recombinant Ube3a polypeptide or a biological equivalent thereof according to claim 1. 前記形成されたグリコシル化部位が、ＮＸａａＴまたはＮＸａａＳ（式中、Ｘａａは、プロリン（Ｐ）を必要に応じて除く任意のアミノ酸残基である）のコンセンサス配列を含む、請求項３９～４１のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物。 42. Any of claims 39-41, wherein said formed glycosylation site comprises a consensus sequence of NXaaT or NXaaS, wherein Xaa is any amino acid residue, optionally excluding proline (P). A recombinant Ube3a polypeptide according to claim 1 or a biological equivalent thereof. 前記変異したアミノ酸残基が、
配列番号１４のａａ６４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ９８に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ１０４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ２２１に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ３５６に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ５９１に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号１４のａａ６２４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１４のａａ８０５に対応するａａ位置におけるＮ、および配列番号１４のａａ８０６に対応するａａ位置におけるＮ；
配列番号１６のａａ８７に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ１２１に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ１２７に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ２４４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ３７９に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ６１４に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号１６のａａ６４７に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１６のａａ８２８に対応するａａ位置におけるＮ、および配列番号１６のａａ８２９に対応するａａ位置におけるＮ；
配列番号１８のａａ８４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ１１８に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ１２４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ２４１に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ３７６に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ６１１に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号１８のａａ６４４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号１８のａａ８２５に対応するａａ位置におけるＮ、および配列番号１８のａａ８２６に対応するａａ位置におけるＮ；
配列番号２６もしくは２８のａａ８５に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ１１９に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ１２５に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ２３９に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ３７４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号２６もしくは２８のａａ６０９に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号２６もしくは２８のａａ６１０に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号２６もしくは２８のａａ６４２に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、および配列番号２６もしくは２８のａａ８２３に対応するａａ位置におけるＮ；または
配列番号３０のａａ６４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ９８に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ１０４に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ２１８に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ３５３に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、配列番号３０のａａ５８８に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号３０のａａ５８９に対応するａａ位置におけるＮ、配列番号３０のａａ６２１に対応するａａ位置におけるＴもしくはＳ、および配列番号３０のａａ８０２に対応するａａ位置におけるＮ
のうちの１種または複数から選択される、請求項３９～４２のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物。 The mutated amino acid residue is
T or S at the aa position corresponding to aa64 of SEQ ID NO:14, T or S at the aa position corresponding to aa98 of SEQ ID NO:14, T or S at the aa position corresponding to aa104 of SEQ ID NO:14, aa221 of SEQ ID NO:14 T or S at the aa position corresponding to SEQ ID NO: 14, T or S at the aa position corresponding to aa356 of SEQ ID NO: 14, N at the aa position corresponding to aa591 of SEQ ID NO: 14, T at the aa position corresponding to aa624 of SEQ ID NO: 14 or S, N at the aa position corresponding to aa805 of SEQ ID NO:14, and N at the aa position corresponding to aa806 of SEQ ID NO:14;
T or S at the aa position corresponding to aa87 of SEQ ID NO:16, T or S at the aa position corresponding to aa121 of SEQ ID NO:16, T or S at the aa position corresponding to aa127 of SEQ ID NO:16, aa244 of SEQ ID NO:16 T or S at the aa position corresponding to SEQ ID NO: 16, T or S at the aa position corresponding to aa379 of SEQ ID NO: 16, N at the aa position corresponding to aa614 of SEQ ID NO: 16, T at the aa position corresponding to aa647 of SEQ ID NO: 16 or S, N at the aa position corresponding to aa828 of SEQ ID NO:16, and N at the aa position corresponding to aa829 of SEQ ID NO:16;
T or S at the aa position corresponding to aa84 of SEQ ID NO:18, T or S at the aa position corresponding to aa118 of SEQ ID NO:18, T or S at the aa position corresponding to aa124 of SEQ ID NO:18, aa241 of SEQ ID NO:18 T or S at the aa position corresponding to SEQ ID NO: 18, T or S at the aa position corresponding to aa376 of SEQ ID NO: 18, N at the aa position corresponding to aa611 of SEQ ID NO: 18, T at the aa position corresponding to aa644 of SEQ ID NO: 18 or S, N at the aa position corresponding to aa825 of SEQ ID NO:18, and N at the aa position corresponding to aa826 of SEQ ID NO:18;
T or S at the aa position corresponding to aa85 of SEQ ID NO:26 or 28, T or S at the aa position corresponding to aa119 of SEQ ID NO:26 or 28, T or S at the aa position corresponding to aa125 of SEQ ID NO:26 or 28 , T or S at the aa position corresponding to aa239 of SEQ ID NO:26 or 28, T or S at the aa position corresponding to aa374 of SEQ ID NO:26 or 28, N at the aa position corresponding to aa609 of SEQ ID NO:26 or 28, N at the aa position corresponding to aa610 of SEQ ID NO:26 or 28, T or S at the aa position corresponding to aa642 of SEQ ID NO:26 or 28, and N at the aa position corresponding to aa823 of SEQ ID NO:26 or 28; or T or S at the aa position corresponding to aa64 of SEQ ID NO:30, T or S at the aa position corresponding to aa98 of SEQ ID NO:30, T or S at the aa position corresponding to aa104 of SEQ ID NO:30, aa218 of SEQ ID NO:30 T or S at the corresponding aa position, T or S at the aa position corresponding to aa353 of SEQ ID NO:30, N at the aa position corresponding to aa588 of SEQ ID NO:30, N at the aa position corresponding to aa589 of SEQ ID NO:30, T or S at the aa position corresponding to aa621 of SEQ ID NO:30 and N at the aa position corresponding to aa802 of SEQ ID NO:30
43. The recombinant Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof of any one of claims 39-42, selected from one or more of: １個または複数の天然に存在しないグリコシル化部位を含む、請求項３５～４３のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物。 44. The recombinant Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof of any one of claims 35-43, comprising one or more non-naturally occurring glycosylation sites. 次の：
配列番号１４のａａ２１～ａａ８７２、配列番号１６のａａ２１～ａａ８９５、配列番号１８のａａ２１～ａａ８９２、配列番号２６のａａ２１～ａａ８９０、配列番号２８のａａ２１～ａａ８９０、配列番号３０のａａ２１～ａａ８６９、またはそれらのそれぞれに対して少なくとも約９０％、もしくは少なくとも約９５％、もしくは少なくとも約９９％同一性を有する配列
から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項３５～４４のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物。 next:
aa21 to aa872 of SEQ ID NO: 14, aa21 to aa895 of SEQ ID NO: 16, aa21 to aa892 of SEQ ID NO: 18, aa21 to aa890 of SEQ ID NO: 26, aa21 to aa890 of SEQ ID NO: 28, aa21 to aa869 of SEQ ID NO: 30, or them 45. The recombinant of any one of claims 35-44, comprising an amino acid sequence selected from sequences having at least about 90%, or at least about 95%, or at least about 99% identity to each of Ube3a polypeptides or biological equivalents thereof. シグナルペプチドをさらに含む、請求項３５～４５のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物。 46. The recombinant Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof of any one of claims 35-45, further comprising a signal peptide. 前記シグナルペプチドが、分泌シグナルである、請求項４６に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物。 47. The recombinant Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof of claim 46, wherein said signal peptide is a secretory signal. 前記シグナルペプチドが、次の：抗体重鎖／軽鎖分泌シグナル、ツインアルギニン輸送タンパク質分泌シグナル、インターロイキン－２（ＩＬ２）分泌シグナル、インターロイキン－４（ＩＬ４）分泌シグナル、インターロイキン－１０（ＩＬ１０）分泌シグナル、インターロイキン－３（ＩＬ３）分泌シグナル、インターロイキン－７（ＩＬ７）分泌シグナル、ヒトＩＬ２分泌シグナル、ヒトＯＳＭ分泌シグナル、ＶＳＶ－Ｇ分泌シグナル、マウスＩｇカッパ分泌シグナル、ヒトＩｇＧ２ Ｈ分泌シグナル、ＢＭ４０分泌シグナル、セクレコン分泌シグナル、ヒトＩｇＫＶＩＩＩ分泌シグナル、ＣＤ３３分泌シグナル、ｔＰＡ分泌シグナル、ヒトキモトリプシノーゲン分泌シグナル、ヒトトリプシノーゲン－２分泌シグナル、ガウシアｌｕｃ分泌シグナル、アルブミン（ＨＳＡ）分泌シグナル、インフルエンザ赤血球凝集素分泌シグナル、ヒトインスリン分泌シグナルまたはカイコフィブロインＬＣから選択される、請求項４６または４７に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物。 Said signal peptide comprises: antibody heavy/light chain secretion signal, twin arginine transport protein secretion signal, interleukin-2 (IL2) secretion signal, interleukin-4 (IL4) secretion signal, interleukin-10 ( IL10) secretion signal, interleukin-3 (IL3) secretion signal, interleukin-7 (IL7) secretion signal, human IL2 secretion signal, human OSM secretion signal, VSV-G secretion signal, mouse Ig kappa secretion signal, human IgG2 H secretion signal, BM40 secretion signal, secreton secretion signal, human IgKVIII secretion signal, CD33 secretion signal, tPA secretion signal, human chymotrypsinogen secretion signal, human trypsinogen-2 secretion signal, Gaussia luc secretion signal, albumin (HSA) secretion signal, influenza 48. The recombinant Ube3a polypeptide of claim 46 or 47, or a biological equivalent thereof, selected from a hemagglutinin secretory signal, a human insulin secretory signal or a silkworm fibroin LC. 前記シグナルペプチドが、配列番号１４のａａ１～ａａ２０のアミノ酸配列を含む、請求項４６～４８のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物。 49. The recombinant Ube3a polypeptide or biological equivalent of any one of claims 46-48, wherein said signal peptide comprises the amino acid sequence aa1-aa20 of SEQ ID NO:14. 前記Ｕｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物が、配列番号１４、１６、１８、２６、２８および３０、またはそれらのそれぞれに対して少なくとも約９０％、もしくは少なくとも約９５％、もしくは少なくとも約９９％同一性を有する配列のうちのいずれか１種から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項３５～４９に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物。 said Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof is at least about 90%, or at least about 95%, or at least about SEQ ID NOs: 14, 16, 18, 26, 28 and 30, or each 50. The recombinant Ube3a polypeptide or biological equivalent of claims 35-49, comprising an amino acid sequence selected from any one of the sequences with 99% identity. 自己切断ペプチド、および検出可能または選択ポリペプチドをさらに含む、請求項３５～５０に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物。 51. The recombinant Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof of claims 35-50, further comprising a self -cleaving peptide, and a detectable or selectable polypeptide. 次の：請求項１～２６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、請求項２７～３４のいずれか一項に記載のベクター、または請求項３５～５１のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドもしくはその生物学的等価物のうちの１種または複数を含み、これにより、請求項３５～５１のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物を発現および分泌する、単離または操作された細胞であって、必要に応じて、前記組換えＵｂｅ３ａポリペプチドの前記グリコシル化部位の少なくとも１つまたはそれより多くが、前記単離または操作された細胞においてグリコシル化されている、単離または操作された細胞。 of: a polynucleotide according to any one of claims 1-26, a vector according to any one of claims 27-34, or a combination according to any one of claims 35-51 comprising one or more of the recombinant Ube3a polypeptides or biological equivalents thereof, whereby the recombinant Ube3a polypeptide or biological equivalents thereof according to any one of claims 35-51 wherein optionally at least one or more of said glycosylation sites of said recombinant Ube3a polypeptide are isolated or engineered to express and secrete An isolated or engineered cell that is glycosylated in the cell. 哺乳動物細胞である、請求項５２に記載の単離または操作された細胞。 53. The isolated or engineered cell of claim 52, which is a mammalian cell. 前記哺乳動物細胞が、マウス細胞またはヒト細胞である、請求項５３に記載の単離または操作された細胞。 54. The isolated or engineered cell of claim 53, wherein said mammalian cell is a mouse cell or a human cell. 幹細胞、前駆細胞、人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）、胚性幹細胞、成体もしくは体性幹細胞、間葉系幹細胞、神経幹細胞、またはそれらのそれぞれの後代から選択される、請求項５２～５４のいずれか一項に記載の単離または操作された細胞。 55. Any of claims 52-54, selected from stem cells, progenitor cells, induced pluripotent stem cells (iPSC), embryonic stem cells, adult or somatic stem cells, mesenchymal stem cells, neural stem cells, or their respective progeny. or the isolated or engineered cell of claim 1. 造血幹細胞またはその後代である、請求項５２～５５のいずれか一項に記載の単離または操作された細胞。 56. The isolated or engineered cell of any one of claims 52-55, which is a hematopoietic stem cell or its progeny. ＣＤ３４＋である、請求項５６に記載の単離または操作された細胞。 57. The isolated or engineered cell of claim 56, which is CD34+. 検出可能なマーカーをさらに含む、請求項５２～５７のいずれか一項に記載の単離または操作された細胞。 58. The isolated or engineered cell of any one of claims 52-57, further comprising a detectable marker. 請求項５２～５８のいずれか一項に記載の細胞、またはその後代を含む、単離された細胞集団。 An isolated cell population comprising the cells of any one of claims 52-58, or their progeny. ＣＤ４、ＣＤ１４およびＨＬＡＤＲを発現する、請求項５９に記載の単離された細胞集団。 60. The isolated cell population of claim 59, which expresses CD4, CD14 and HLADR. 前記集団における前記細胞の少なくとも９０％が、ＣＤ４＋であり、前記集団における前記細胞の少なくとも９５％が、ＣＤ１４＋であり、前記集団における前記細胞の少なくとも９５％が、ＨＬＡＤＲ＋である、請求項６０に記載の単離された細胞集団。 61. The method of claim 60, wherein at least 90% of said cells in said population are CD4+, at least 95% of said cells in said population are CD14+, and at least 95% of said cells in said population are HLADR+. of isolated cell populations. 適した条件下でマクロファージを誘導する、請求項５９～６１のいずれか一項に記載の単離された細胞集団。 62. The isolated cell population of any one of claims 59-61, which induces macrophages under suitable conditions. 実質的にマクロファージを含む、請求項５９～６２のいずれか一項に記載の単離された細胞集団。 63. The isolated cell population of any one of claims 59-62, which substantially comprises macrophages. 実質的に均一である、請求項５９～６３のいずれか一項に記載の単離された細胞集団。 64. The isolated cell population of any one of claims 59-63, which is substantially homogeneous. 前記集団の前記細胞が、検出可能なマーカーをさらに含む、請求項５９～６４のいずれか一項に記載の単離された細胞集団。 65. The isolated cell population of any one of claims 59-64, wherein said cells of said population further comprise a detectable marker. 欠損Ｕｂｅ３ａ対立遺伝子を保有する対象におけるアンジェルマン症候群を処置、予防、停止または逆転するための組成物であって、次の：請求項１～２６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、請求項２７～３４のいずれか一項に記載のベクター、請求項３５～５１のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドもしくはその生物学的等価物、請求項５２～５８のいずれか一項に記載の細胞、または請求項５９～６５のいずれか一項に記載の細胞集団のうちの１種または複数を含み、前記組成物が前記対象に局所的または全身的に投与され、これにより、前記対象におけるアンジェルマン症候群を処置することを特徴とする、組成物。 A composition for treating, preventing, arresting or reversing Angelman's Syndrome in a subject carrying a defective Ube3a allele, comprising: the polynucleotide of any one of claims 1-26, claim A vector according to any one of claims 27-34, a recombinant Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof according to any one of claims 35-51, any one of claims 52-58 Said composition comprising one or more of the cells according to claim or the cell population according to any one of claims 59-65, said composition being administered locally or systemically to said subject, whereby , a composition for treating Angelman's Syndrome in said subject. 対象においてＵｂｅ３ａタンパク質もしくはポリペプチドまたはその生物学的等価物を発現させるための組成物であって、次の：請求項１～２６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、請求項２７～３４のいずれか一項に記載のベクター、請求項３５～５１のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドもしくはその生物学的等価物、請求項５２～５８のいずれか一項に記載の細胞、または請求項５９～６５のいずれか一項に記載の細胞集団のうちの１種または複数を含む、組成物。 A composition for expressing an Ube3a protein or polypeptide or a biological equivalent thereof in a subject, comprising: a polynucleotide according to any one of claims 1-26, claims 27-34 a recombinant Ube3a polypeptide or a biological equivalent thereof according to any one of claims 35-51; a vector according to any one of claims 52-58; A composition comprising one or more of the cells or cell populations of any one of claims 59-65. 前記対象が、欠損Ｕｂｅ３ａ遺伝子を保有する、請求項６７に記載の組成物。 68. The composition of claim 67, wherein said subject carries a defective Ube3a gene. 前記細胞または細胞集団が、前記対象の体重１ｋｇあたり約１．０×１０４～約１×１０１５個の細胞の用量で投与される、請求項６６～６８のいずれか一項に記載の組成物。 69. The composition of any one of claims 66-68, wherein said cell or cell population is administered at a dose of about 1.0 x 104 to about 1 x 1015 cells per kg body weight of said subject. things . 前記対象が、アンジェルマン症候群について症候性または無症候性である、請求項６６～６９のいずれか一項に記載の組成物。 The composition of any one of claims 66-69, wherein the subject is symptomatic or asymptomatic for Angelman's syndrome. 前記対象が、哺乳動物である、請求項６６～７０のいずれか一項に記載の組成物。 The composition of any one of claims 66-70, wherein the subject is a mammal. 前記対象が、ヒトである、請求項６６～７１のいずれか一項に記載の組成物。 72. The composition of any one of claims 66-71, wherein the subject is a human. 前記対象が、胎児である、請求項６６～７２のいずれか一項に記載の組成物。 73. The composition of any one of claims 66-72, wherein the subject is a fetus. 前記対象が、乳児または思春期前対象である、請求項６６～７２のいずれか一項に記載の組成物。 The composition of any one of claims 66-72, wherein the subject is an infant or prepubescent subject. 前記対象が、成体である、請求項６６～７２のいずれか一項に記載の組成物。 The composition of any one of claims 66-72, wherein the subject is an adult. 次の：請求項１～２６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、請求項２７～３４のいずれか一項に記載のベクター、請求項３５～５１のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物のうちの１種または複数を含み、これにより、前記ポリヌクレオチド、前記ベクター、または前記組換えＵｂｅ３ａタンパク質もしくはポリペプチドまたはその生物学的等価物を産生する、単離または操作された細胞であって、必要に応じて、前記産生された組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物の前記グリコシル化部位の少なくとも１つまたはそれより多くが、前記単離または操作された細胞においてグリコシル化されている、単離または操作された細胞。 of the following: a polynucleotide according to any one of claims 1-26, a vector according to any one of claims 27-34, a recombination according to any one of claims 35-51 one or more of Ube3a polypeptides or biological equivalents thereof, thereby producing said polynucleotide, said vector, or said recombinant Ube3a protein or polypeptide or biological equivalents thereof , the isolated or engineered cell, optionally wherein at least one or more of said glycosylation sites of said produced recombinant Ube3a polypeptide, or biological equivalent thereof, comprises said single An isolated or engineered cell that is glycosylated in the isolated or engineered cell . 真核または原核細胞である、請求項７６に記載の単離または操作された細胞。 77. The isolated or engineered cell of claim 76, which is a eukaryotic or prokaryotic cell. 哺乳動物細胞である、請求項７６または７７に記載の単離または操作された細胞。 78. The isolated or engineered cell of claim 76 or 77, which is a mammalian cell. 請求項７６～７８のいずれか一項に記載の細胞のクローン集団。 A clonal population of cells according to any one of claims 76-78. （ａ）請求項２７～３４のいずれか一項に記載のベクターと、（ｂ）１つまたはそれより多くのパッケージングプラスミドと、（ｃ）エンベローププラスミドとを含むウイルスパッケージングシステム。 A viral packaging system comprising (a) the vector of any one of claims 27-34, (b) one or more packaging plasmids, and (c) an envelope plasmid. （ｄ）パッケージング細胞系をさらに含む、請求項８０に記載のウイルスパッケージングシステム。 81. The viral packaging system of claim 80, further comprising (d) a packaging cell line. 前記パッケージング細胞系が、ＨＥＫ－２９３細胞系である、請求項８１に記載のウイルスパッケージングシステム。 82. The viral packaging system of claim 81, wherein said packaging cell line is the HEK-293 cell line. ウイルス粒子を産生するための方法であって、前記ウイルス粒子をパッケージングするのに適した条件下で、パッケージング細胞系に請求項８０に記載のシステムを形質導入するステップを含む方法。 81. A method for producing viral particles, comprising transducing a packaging cell line with the system of claim 80 under conditions suitable for packaging said viral particles. 前記パッケージング細胞系が、ＨＥＫ－２９３細胞系である、請求項８３に記載の方法。 84. The method of claim 83, wherein said packaging cell line is the HEK-293 cell line. 分泌されるＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物を発現させる方法であって、前記組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物の発現を可能にする条件下で、請求項５２～５８および７６～７８のいずれか一項に記載の細胞を成長させるステップを含み、必要に応じて、前記発現された組換えＵｂｅ３ａポリペプチドまたはその生物学的等価物の前記グリコシル化部位の少なくとも１つまたはそれより多くが、請求項５２～５８および７６～７８のいずれか一項に記載の細胞においてグリコシル化されている、方法。 A method of expressing a secreted Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof, under conditions permitting expression of said recombinant Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof, according to claims 52- 58 and 76-78, optionally comprising at least the glycosylation site of said expressed recombinant Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof. A method, wherein one or more are glycosylated in the cell of any one of claims 52-58 and 76-78. 前記細胞が、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏにある、請求項８５に記載の方法。 86. The method of claim 85, wherein said cell is in vitro or in vivo. 担体と、請求項１～２６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、請求項２７～３４のいずれか一項に記載のベクター、請求項３５～５１のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドもしくはその生物学的等価物、請求項５２～５８および７６～７８のいずれか一項に記載の細胞、請求項５９～６５のいずれか一項に記載の細胞集団、または請求項７９に記載のクローン集団のうちの１種または複数とを含む組成物。 A carrier and a polynucleotide according to any one of claims 1 to 26, a vector according to any one of claims 27 to 34, and a recombination according to any one of claims 35 to 51 Ube3a polypeptide or biological equivalent thereof, a cell according to any one of claims 52-58 and 76-78, a cell population according to any one of claims 59-65, or a claim 79. A composition comprising one or more of the clonal populations described in 79. 前記担体が、薬学的に許容される担体である、請求項８７に記載の組成物。 88. The composition of claim 87, wherein said carrier is a pharmaceutically acceptable carrier. 請求項１～２６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、請求項２７～３４のいずれか一項に記載のベクター、請求項３５～５１のいずれか一項に記載の組換えＵｂｅ３ａポリペプチドもしくはその生物学的等価物、請求項５２～５８および７６～７８のいずれか一項に記載の細胞、請求項５９～６５のいずれか一項に記載の細胞集団、または請求項７９に記載のクローン集団のうちの１種または複数と、必要に応じて使用のための指示とを含むキット。
 The polynucleotide according to any one of claims 1 to 26, the vector according to any one of claims 27 to 34, the recombinant Ube3a vector according to any one of claims 35 to 51, a polypeptide or a biological equivalent thereof, a cell according to any one of claims 52-58 and 76-78, a cell population according to any one of claims 59-65, or according to claim 79 and optionally instructions for use.
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