JPWO2020227016A5 - - Google Patents

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Claims (22)

2つ以上の非交差反応性捕捉オリゴヌクレオチドのセット(「捕捉セット」)であって、前記捕捉セットが、親捕捉オリゴヌクレオチドのセットのサブセット(「親捕捉セット」)であり、前記捕捉セット内の捕捉オリゴヌクレオチドが、a)前記親捕捉セットからのヌクレオチド配列の少なくとも20個の連続したヌクレオチドを含むヌクレオチド配列、又はb)前記親捕捉セットからのヌクレオチド配列に対する少なくとも95%の同一性を有するヌクレオチド配列を含み、前記親捕捉セットが、
(a)配列番号1~64から選択されるヌクレオチド配列を有する捕捉オリゴヌクレオチドを含む、捕捉セット1と、
(b)配列番号65~122から選択されるヌクレオチド配列を有する捕捉オリゴヌクレオチドを含む、捕捉セット2と、
(c)配列番号123~186から選択されるヌクレオチド配列を有する捕捉オリゴヌクレオチドを含む、捕捉セット3と、
(d)配列番号187~250から選択されるヌクレオチド配列を有する捕捉オリゴヌクレオチドを含む、捕捉セット4と、
(e)配列番号251~308から選択されるヌクレオチド配列を有する捕捉オリゴヌクレオチドを含む、捕捉セット5と、
(f)配列番号309~372から選択されるヌクレオチド配列を有する捕捉オリゴヌクレオチドを含む、捕捉セット6と、
(g)配列番号373~436から選択されるヌクレオチド配列を有する捕捉オリゴヌクレオチドを含む、捕捉セット7と、
(h)配列番号437~494から選択されるヌクレオチド配列を有する捕捉オリゴヌクレオチドを含む、捕捉セット8と、
(i)配列番号495~558から選択されるヌクレオチド配列を有する捕捉オリゴヌクレオチドを含む、捕捉セット9と、
(j)配列番号559~662から選択されるヌクレオチド配列を有する捕捉オリゴヌクレオチドを含む、捕捉セット10と、
(k)配列番号623~680から選択されるヌクレオチド配列を有する捕捉オリゴヌクレオチドを含む、捕捉セット11と、
(l)配列番号681~744から選択されるヌクレオチド配列を有する捕捉オリゴヌクレオチドを含む、捕捉セット12と、から選択される、2つ以上の非交差反応性捕捉オリゴヌクレオチドのセット。
A set of two or more non-cross-reactive capture oligonucleotides (“capture set”) , said capture set being a subset of the set of parent capture oligonucleotides (“parent capture set”) , said Each capture oligonucleotide in a capture set has: a) a nucleotide sequence comprising at least 20 contiguous nucleotides of a nucleotide sequence from said parental capture set , or b) at least 95% of a nucleotide sequence from said parental capture set. wherein said parental capture set comprises a nucleotide sequence having the identity of
(a) a parent capture set 1 comprising capture oligonucleotides having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOs: 1-64;
(b) parental capture set 2, comprising capture oligonucleotides having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOS: 65-122;
(c) parental capture set 3, comprising capture oligonucleotides having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOs: 123-186;
(d) parental capture set 4, comprising capture oligonucleotides having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOS: 187-250;
(e) parental capture set 5, comprising capture oligonucleotides having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOS: 251-308;
(f) parental capture set 6, comprising capture oligonucleotides having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOS: 309-372;
(g) parental capture set 7, comprising capture oligonucleotides having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOS: 373-436;
(h) a parent capture set 8 comprising capture oligonucleotides having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOS: 437-494;
(i) a parent capture set 9 comprising capture oligonucleotides having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOS: 495-558;
(j) a parent capture set 10 comprising capture oligonucleotides having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOs:559-662;
(k) a parent capture set 11 comprising capture oligonucleotides having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOS: 623-680;
(l) a set of two or more non-cross-reactive capture oligonucleotides selected from a parent capture set 12 comprising capture oligonucleotides having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOs:681-744;
前記捕捉セット内の捕捉オリゴヌクレオチドが、
(a)配列番号1~64から選択される配列の少なくとも20個の連続したヌクレオチドを有する捕捉オリゴヌクレオチドと、
(b)配列番号1~64から選択される配列に対する少なくとも95%の同一性を有する配列を含む捕捉オリゴヌクレオチドと、
(c)配列番号1~64から選択される配列に対する少なくとも95%の同一性を有する配列の少なくとも20個の連続したヌクレオチドを有する捕捉オリゴヌクレオチドと、
(d)配列番号1~64から選択される配列を含む捕捉オリゴヌクレオチドと、
(e)(a)~(d)のうちのいずれかから選択される捕捉オリゴヌクレオチドと、から選択される、請求項1に記載の捕捉セット。
each capture oligonucleotide in the capture set comprising:
(a) a capture oligonucleotide having at least 20 contiguous nucleotides of a sequence selected from SEQ ID NOs: 1-64;
(b) a capture oligonucleotide comprising a sequence having at least 95 % identity to a sequence selected from SEQ ID NOs: 1-64;
(c) a capture oligonucleotide having at least 20 contiguous nucleotides of a sequence having at least 95 % identity to a sequence selected from SEQ ID NOs: 1-64;
(d) a capture oligonucleotide comprising a sequence selected from SEQ ID NOs: 1-64;
(e) a capture oligonucleotide selected from any of (a ) -(d).
前記セット内の捕捉オリゴヌクレオチドが、
(a)配列番号1~10から選択される配列の少なくとも20個の連続したヌクレオチドを有する配列を含む捕捉オリゴヌクレオチドと、
(b)配列番号1~10から選択される配列に対する少なくとも95%の同一性を有する配列を含む捕捉オリゴヌクレオチドと、
(c)配列番号1~10から選択される配列に対する少なくとも95%の同一性を有する配列の少なくとも20個の連続したヌクレオチドを有する捕捉オリゴヌクレオチドと、
(d)配列番号1~10から選択される配列を含む捕捉オリゴヌクレオチドと、
(e)(a)~(d)のうちのいずれかから選択される捕捉オリゴヌクレオチドと、から選択される、請求項1又は2に記載の捕捉セット。
each capture oligonucleotide in the set comprising:
(a) a capture oligonucleotide comprising a sequence having at least 20 contiguous nucleotides of a sequence selected from SEQ ID NOs: 1-10;
(b) a capture oligonucleotide comprising a sequence having at least 95 % identity to a sequence selected from SEQ ID NOs: 1-10;
(c) a capture oligonucleotide having at least 20 contiguous nucleotides of a sequence having at least 95 % identity to a sequence selected from SEQ ID NOS: 1-10;
(d) a capture oligonucleotide comprising a sequence selected from SEQ ID NOs: 1-10;
(e) a capture oligonucleotide selected from any of (a)-( d ).
前記捕捉セット内の1つ以上の捕捉オリゴヌクレオチドが、反応性官能基を含む、請求項1~のいずれか一項に記載の捕捉セット。 The capture set of any one of claims 1-3 , wherein one or more capture oligonucleotides in the capture set comprises a reactive functional group. 前記反応性官能基が、リンカーを介して前記捕捉オリゴヌクレオチドに付着している、
請求項に記載の捕捉セット。
said reactive functional group is attached to said capture oligonucleotide via a linker;
5. The capture set of claim 4 .
前記反応性官能基が、チオール基を含む、請求項またはに記載の捕捉セット。 6. A capture set according to claim 4 or 5 , wherein said reactive functional group comprises a thiol group. 前記捕捉オリゴヌクレオチドが、前記反応性官能基を介して表面に固定化されている、請求項のいずれか一項に記載の捕捉セット。 A capture set according to any one of claims 4 to 6 , wherein said capture oligonucleotides are immobilized on a surface via said reactive functional groups. 前記表面が、電極表面を含む、請求項に記載の捕捉セット。 8. The capture set of Claim 7 , wherein the surface comprises an electrode surface. 前記電極が、カーボンベースの電極を含む、請求項に記載の捕捉セット。 9. The capture set of claim 8 , wherein said electrodes comprise carbon-based electrodes. 前記電極が、カーボンインク電極を含む、請求項に記載の捕捉セット。 10. The capture set of claim 9 , wherein said electrodes comprise carbon ink electrodes. 1つ以上の非反応性捕捉オリゴヌクレオチドが、少なくとも24ヌクレオチド長である、請求項1~1のいずれか一項に記載の捕捉セット。 A capture set according to any one of claims 1 to 10 , wherein the one or more non-reactive capture oligonucleotides is at least 24 nucleotides in length. 1つ以上の捕捉オリゴヌクレオチドが、少なくとも36ヌクレオチド長である、請求項1~1のいずれか一項に記載の捕捉セット。 The capture set of any one of claims 1-11 , wherein the one or more capture oligonucleotides is at least 36 nucleotides in length. 請求項1~1のいずれか一項に記載の捕捉セットを含む、キット。 A kit comprising a capture set according to any one of claims 1-12 . 請求項1~1のいずれか一項に記載の少なくとも2から64個の非交差反応性捕捉オリゴヌクレオチドのセットを含む、キット。 A kit comprising a set of at least 2 to 64 non-cross-reactive capture oligonucleotides according to any one of claims 1-12 . 請求項1~1のいずれか一項に記載の少なくとも10個の捕捉オリゴヌクレオチドの捕捉セットを含む、キット。 A kit comprising a capture set of at least 10 capture oligonucleotides according to any one of claims 1-12 . 2つ以上の非交差反応性オリゴヌクレオチドタグのセット(「タグセット」)であって、前記オリゴヌクレオチドタグのセットが、親オリゴヌクレオチドタグのセットのサブセット(「親タグセット」)であり、前記タグセット内のオリゴヌクレオチドが、a)前記親タグセットからのヌクレオチド配列の少なくとも20個の連続したヌクレオチドを含むヌクレオチド配列、又はb)前記親タグセットからのヌクレオチド配列に対して少なくとも95%の同一性を有するヌクレオチド配列を含み、前記親タグセットが、
(a)配列番号745~808から選択されるヌクレオチド配列を有するオリゴヌクレオチドタグを含む、タグセット1と、
(b)配列番号809~866から選択されるヌクレオチド配列を有するオリゴヌクレオチドタグを含む、タグセット2と、
(c)配列番号867~930から選択されるヌクレオチド配列を有するオリゴヌクレオチドタグを含む、タグセット3と、
(d)配列番号931~994から選択されるヌクレオチド配列を有するオリゴヌクレオチドタグを含む、タグセット4と、
(e)配列番号995~1052から選択されるヌクレオチド配列を有するオリゴヌクレオチドタグを含む、タグセット5と、
(f)配列番号1053~1116から選択されるヌクレオチド配列を有するオリゴヌクレオチドタグを含む、タグセット6と、
(g)配列番号1117~1180から選択されるヌクレオチド配列を有するオリゴヌクレオチドタグを含む、タグセット7と、
(h)配列番号1181~1238から選択されるヌクレオチド配列を有するオリゴヌクレオチドタグを含む、タグセット8と、
(i)配列番号1239~1302から選択されるヌクレオチド配列を有するオリゴヌクレオチドタグを含む、タグセット9と、
(j)配列番号1303~1366から選択されるヌクレオチド配列を有するオリゴヌクレオチドタグを含む、タグセット10と、
(k)配列番号1367~1424から選択されるヌクレオチド配列を有するオリゴヌクレオチドタグを含む、タグセット11と、
(l)配列番号1425~1488から選択されるヌクレオチド配列を有するオリゴヌクレオチドタグを含む、タグセット12と、から選択される、2つ以上の非交差反応性オリゴヌクレオチドタグのセット。
A set of two or more non-cross-reactive oligonucleotide tags ("tag set") , said set of oligonucleotide tags being a subset of the set of parent oligonucleotide tags ("parent tag set") , said each oligonucleotide in the tag set has: a) a nucleotide sequence comprising at least 20 contiguous nucleotides of a nucleotide sequence from said parent tag set ; or b) at least 95 nucleotide sequences from said parent tag set. % identity , the parent tag set comprising:
(a) parent tag set 1, comprising oligonucleotide tags having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOS: 745-808;
(b) parent tag set 2, comprising oligonucleotide tags having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOs:809-866;
(c) parent tag set 3, comprising oligonucleotide tags having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOS:867-930;
(d) parent tag set 4, comprising oligonucleotide tags having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOS: 931-994;
(e) parent tag set 5, comprising oligonucleotide tags having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOs:995-1052;
(f) parent tag set 6, comprising oligonucleotide tags having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOS: 1053-1116;
(g) parent tag set 7, comprising oligonucleotide tags having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOS: 1117-1180;
(h) parent tag set 8, comprising oligonucleotide tags having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOs: 1181-1238;
(i) parent tag set 9, comprising oligonucleotide tags having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOs: 1239-1302;
(j) a parent tag set 10 comprising oligonucleotide tags having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOs: 1303-1366;
(k) parent tag set 11, comprising oligonucleotide tags having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOS: 1367-1424;
(l) a set of two or more non-cross-reactive oligonucleotide tags selected from a parent tag set 12 comprising oligonucleotide tags having nucleotide sequences selected from SEQ ID NOs: 1425-1488.
チオール基を含むオリゴヌクレオチドをカーボンベースの支持体表面に固定化する方法であって、前記方法が、
(a)前記オリゴヌクレオチドを含む1つ以上の液滴を前記カーボンベースの支持体表面に印刷することと、
(b)前記液滴を前記表面に広げることを可能にすることと、
(c)前記液滴を乾燥させて乾燥液滴を形成することと、
(d)前記チオール基を介して前記オリゴヌクレオチドを前記カーボンベースの支持体表面に固定化することと、
(e)前記乾燥液滴を、チオール含有化合物を含む洗浄溶液で洗浄して、固定化されていないオリゴヌクレオチドを除去することと、を含む、方法。
A method of immobilizing oligonucleotides containing thiol groups to a carbon-based support surface, said method comprising:
(a) printing one or more droplets comprising said oligonucleotide onto said carbon-based support surface;
(b) allowing the droplet to spread over the surface;
(c) drying the droplets to form dried droplets;
(d) immobilizing the oligonucleotide to the carbon-based support surface via the thiol group;
(e) washing the dried droplets with a wash solution comprising a thiol-containing compound to remove non-immobilized oligonucleotides.
前記支持体表面上の複数の結合ドメイン上に前記捕捉オリゴヌクレオチドを含む液滴のアレイを印刷することを含む、請求項17に記載の方法。 18. The method of claim 17 , comprising printing an array of droplets containing said capture oligonucleotides onto a plurality of binding domains on said support surface. 1つ以上のカーボンベースの電極の表面上に捕捉オリゴヌクレオチドのアレイを固定化する方法であって、前記方法が、
(a)前記1つ以上のカーボンベースの電極の表面上の複数の結合ドメイン上に1つ以上の捕捉オリゴヌクレオチドを含む液滴のアレイを印刷することであって、1つ以上の捕捉オリゴヌクレオチドが、チオール基を含む、印刷することと、
(b)前記液滴を前記表面に広げることを可能にすることと、
(c)前記液滴を乾燥させて乾燥液滴を形成することと、
(d)1つ以上のオリゴヌクレオチドを、前記チオール基を介して前記カーボンベースの電極の前記表面に固定化するのに十分な時間、前記乾燥液滴をインキュベートすることと、
(e)前記乾燥液滴を、チオール含有化合物を含む洗浄溶液で洗浄して、過剰な固定化されていないオリゴヌクレオチドを除去することと、を含む、方法。
A method of immobilizing an array of capture oligonucleotides on the surface of one or more carbon-based electrodes, said method comprising:
(a) printing an array of droplets comprising one or more capture oligonucleotides on a plurality of binding domains on the surface of said one or more carbon-based electrodes, said one or more capture oligonucleotides comprises a thiol group; and
(b) allowing the droplet to spread over the surface;
(c) drying the droplets to form dried droplets;
(d) incubating the dried droplets for a time sufficient to immobilize one or more oligonucleotides to the surface of the carbon-based electrode via the thiol groups;
(e) washing the dried droplets with a wash solution comprising a thiol-containing compound to remove excess non-immobilized oligonucleotides.
(a)1つ以上の支持体表面と、
(b)請求項1~1のいずれか一項に記載の捕捉セットであって、前記捕捉セットが、1つ以上の支持体表面に固定化されている、捕捉セットと、
を含む、キット。
(a) one or more substrate surfaces;
(b) a capture set according to any one of claims 1-12 , wherein said capture set is immobilized on one or more support surfaces;
kit, including
(a)1つ以上の表面を有する1つ以上のカーボンベースの電極と、
(b)請求項1~1のいずれか一項に記載の捕捉セトであって、前記捕捉セットが、前記カーボンベースの電極の1つ以上の表面に固定化されている、捕捉セットと、
を含む、キット。
(a) one or more carbon-based electrodes having one or more surfaces;
(b) The capture set of any one of claims 1-12 , wherein said capture set is immobilized on one or more surfaces of said carbon-based electrode . and
kit, including
サンプル中の標的分析物を同定、検出、または定量化する方法であって、前記方法が
(a
(i)1つ以上の表面を有する1つ以上のカーボンベースの電極と、
(ii)請求項1~12のいずれか一項に記載の捕捉セットであって、前記捕捉セットが、前記カーボンベースの電極の1つ以上の表面に固定化されている、捕捉セットと、
を含む、アレイを、1つ以上の標的分析物を含む組成物と接触させることであって、
前記1つ以上の標的分析物が、前記支持体表面および標識に固定化された捕捉オリゴヌクレオチドの少なくとも一部に相補的である標識およびオリゴヌクレオチドタグに会合する、接触させることと、
)前記オリゴヌクレオチドタグがそれらの対応する相補的捕捉オリゴヌクレオチドにハイブリダイズしてハイブリダイゼーション複合体を形成する条件下で、1つ以上の標的分析物の前記組成物をインキュベートすることと、
)アレイ位置における前記標識の存在または非存在に基づいて、前記標的分析物を同定、検出、または定量化することと、
を含む、方法。
A method of identifying, detecting, or quantifying a target analyte in a sample, said method comprising :
(a )
(i) one or more carbon-based electrodes having one or more surfaces;
(ii) a capture set according to any one of claims 1-12, wherein said capture set is immobilized on one or more surfaces of said carbon-based electrode;
contacting the array with a composition comprising one or more target analytes comprising
associating and contacting said one or more target analytes with labels and oligonucleotide tags that are complementary to at least a portion of capture oligonucleotides immobilized on said support surface and labels;
( b ) incubating said composition of one or more target analytes under conditions in which said oligonucleotide tags hybridize to their corresponding complementary capture oligonucleotides to form hybridization complexes;
( c ) identifying, detecting, or quantifying said target analyte based on the presence or absence of said label at array locations;
A method, including
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