JPWO2015016238A1 - 電子伝達システム及びその用途 - Google Patents
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Abstract
Description
以下に示す発明は、主として、以上の知見ないし成果に基づく。
[1]電子伝達媒体としての金属腐植酸複合体と、電子供与手段と、電子受容体としての微生物と、を含む、電子伝達システム。
[2]前記金属腐植酸複合体を構成する金属が遷移金属、或いはマグネシウム、亜鉛又はセレンである、[1]に記載の電子伝達システム。
[3]前記遷移金属がマンガン、鉄又はコバルトである、[2]に記載の電子伝達システム。
[4]前記金属腐植酸複合体を構成する金属が、酸化還元電位を複数有する金属である、[1]に記載の電子伝達システム。
[5]前記電子供与手段が、還元性有機化合物と、該還元性有機化合物から電子の供与を受けて前記金属腐植酸複合体を還元する還元微生物との組合せからなる、[1]〜[4]のいずれか一項に記載の電子伝達システム。
[6]前記還元性有機化合物が、糖、アミノ酸、有機酸、有機酸塩、アルコール、芳香族化合物及び生分解性プラスチックからなる群より選択される一又は二以上の有機化合物である、[5]に記載の電子伝達システム。
[7]前記電子供与手段がカソード電極である、[1]〜[4]のいずれか一項に記載の電子伝達システム。
[8]前記カソード電極に電気的に接続されるアノード電極に対して、微生物を介して還元性有機化合物から電子が供給される、[7]に記載の電子伝達システム。
[9]前記カソード電極に電気的に接続されるアノード電極に対して、還元性有機化合物と該還元性有機化合物から電子の供与を受けて金属腐植酸複合体を還元する還元微生物との組合せからなる電子供与手段により電子が供給される、[7]に記載の電子伝達システム。
[10]電子受容体としての前記微生物が脱ハロゲン化微生物、鉄還元能を有する細菌又は硝酸還元能を有する細菌である、[1]〜[9]のいずれか一項に記載の電子伝達システム。
[11]電子受容体としての前記微生物が、細胞外固相との間で電子授受が可能な微生物である、[1]〜[9]のいずれか一項に記載の電子伝達システム。
[12]電子受容体としての前記微生物が、ジオバクター属細菌、シュワネラ属細菌、デハロバクター属細菌、デサルフィトバクテリウム属細菌、デスルフロモナス属細菌、クロストリジウム属細菌、バクテロイデス属細菌、デサルフォビブリオ属細菌、セディメンティバクター属細菌及びスルフロスピリラム属細菌からなる群より選択される一又は二以上の細菌である、[1]〜[9]のいずれか一項に記載の電子伝達システム。
[13][10]に記載の電子伝達システムによって、汚染環境中の有機ハロゲン化合物を分解することを特徴とする、環境浄化方法。
[14]金属腐植酸複合体を汚染環境に添加するステップ、を含む環境浄化方法。
[15]更に、電子供与体としての還元性有機化合物を汚染環境に添加するステップを含む、[14]に記載の環境浄化方法。
[16]更に、電子供与手段として、還元性有機化合物と、該還元性有機化合物から電子の供与を受けて前記金属腐植酸複合体を還元する還元微生物を汚染環境に添加するステップを含む、[14]に記載の環境浄化方法。
[17]更に、電子供与手段としてのカソード電極を汚染環境中に設置するステップを含む、[14]に記載の環境浄化方法。
[18]更に、電子受容体としての脱ハロゲン化微生物を汚染環境に添加するステップを含む、[14]〜[17]のいずれか一項に記載の環境浄化方法。
[19]電子伝達媒体としての金属腐植酸複合体と、電子供与体としての還元性有機化合物と、を含む、環境浄化用キット。
[20]電子伝達媒体としての金属腐植酸複合体と、電子供与手段としての、還元性有機化合物と、該還元性有機化合物から電子の供与を受けて前記金属腐植酸複合体を還元する還元微生物の組合せと、を含む、環境浄化用キット。
[21]電子伝達媒体としての金属腐植酸複合体と、カソード電極と、を含む、環境浄化用キット。
[22]更に、電子受容体としての脱ハロゲン化微生物を含む、[19]〜[21]のいずれか一項に記載の環境浄化用キット。
[23]金属腐植酸複合体と電子供与体の存在下で微生物含有試料を培養するステップ、を含む、微生物の選択的培養法。
[24]金属腐植酸複合体からなる電子伝達媒体。
本発明の第1の局面は電子伝達システムに関する。本発明の電子伝達システムは電子受容体として機能する微生物(以下、説明の便宜上、「電子受容微生物」と呼ぶ)を利用するものであり、電子伝達媒体として金属腐植酸複合体を用いる点に最大の特徴がある。本発明の電子伝達システムは、電子伝達媒体としての金属腐植酸複合体、電子供与手段、及び電子受容体としての微生物(電子受容微生物)を含み、電子供与手段からの電子が金属腐植酸複合体を介して電子受容微生物へと受け渡される。このように、本発明の電子伝達システムは、細胞外で電子の授受が生ずるものであり、細胞内における電子伝達系と峻別される。
土壌や堆積物の成分の一つである腐植物質は、アルカリと酸に対する溶解性に基づき、腐植酸、フルボ酸及びヒューミンの3種類に分類される。腐植酸はフミン酸とも呼ばれる。腐植酸は天然の腐植酸(天然フミン酸)と、天然材料の酸化分解等によって工業的に生産される再生腐植酸(再生フミン酸)に大別される。腐植酸は、土壌又は堆積物をアルカリ抽出した後、酸性にすることで沈殿する成分である。即ち、アルカリ性水溶液に可溶で酸性水溶液に不溶の高分子有機酸である。腐植酸は基本骨格に芳香族環を多数有し、芳香族環にはカルボキシル基や水酸基が結合している。このような構造的な特徴によって腐植酸は緩衝作用、界面活性作用、イオン保持作用等を示す。なお、フルボ酸はアルカリ性水溶液にも酸性水溶液にも可溶な高分子有機酸、ヒューミンはアルカリ性水溶液にも酸性水溶液にも不溶な腐植物質である。
図7を参照しながら、本発明に用いられる電子供与手段を説明する。図7には4つの態様が示されている。尚、説明の便宜上、図7では、電子受容微生物として脱ハロゲン化微生物(微生物B)を使用している。
本発明の電子伝達システムでは、電子受容体として微生物が用いられる。「電子受容体としての微生物」とは、外部から電子を受け取り、受け取った電子を生育、増殖、機能の発揮などに利用する微生物をいう。電子受容体としての微生物には、例えば、ジオバクター属細菌、シュワネラ属細菌、デハロバクター属細菌、デサルフィトバクテリウム属細菌、デスルフロモナス属細菌、クロストリジウム属細菌、バクテロイデス属細菌、デサルフォビブリオ属細菌、セディメンティバクター属細菌及びスルフロスピリラム属細菌等が用いられる。二種類以上の微生物を併用してもよい。また、電子受容体として機能する微生物を一種類以上含む微生物群ないし微生物群集を用いることにしてもよい。ここでの微生物群ないし微生物群集は、電子受容体として機能しない微生物を含んでいてもよい。
本発明の第2の局面は、本発明の電子伝達システムの代表的な用途である環境浄化方法に関する。本発明の環境浄化方法では本発明の電子伝達システムを利用する。より具体的には、本発明の電子伝達システムを汚染環境中に構築し、電子受容体としての脱ハロゲン化微生物の働きによって、汚染物質である有機ハロゲン化合物を分解・除去する。汚染環境の例として土壌、底質、地下水、河川水、湖沼水、海水、排水/排液(生活排水、工業排水、工業廃液など)を挙げることができる。
本発明は更なる局面として微生物の選択的培養法を提供する。本発明の方法は微生物が混在する試料の中から、特定の微生物を集積ないし単離することに利用できる。また、特定の微生物またはそれを含む微生物群を安定的に培養・維持することにも利用可能である。後述の実施例に示した実験で裏づけられるように、金属腐植酸複合体はその構成に応じて特定の酸化還元電位を示すことが可能である。本発明ではこの特性を利用し、特定の酸化還元電位に親和性の高い微生物を選択的に培養する。具体的な操作として、本発明の方法では金属腐植酸複合体と電子供与手段の存在下で微生物含有試料を培養する。典型的には、目的とする微生物が存在する試料、又は目的とする微生物の存在が期待される試料を微生物含有試料として用いる。この条件を満たす限り、各種土壌(例えば、畑、水田、森林など)、河川水、湖沼水、河川堆積物、海洋堆積物など、各種試料を用いることができる。また、一又は二以上の処理(例えば、特定の成分の除去、培養など)を得た試料を用いることもできる。
(1)鉄腐植酸複合体(鉄腐植酸複合体)の製造方法
鉄腐植酸複合体(鉄腐植酸複合体)を合成するため、まずAldrich腐植酸(AHA、Aldrich Chemical Company, USA)を1.5 g/Lの濃度に超純水で溶解した。不溶性部分を除去するために15分間15,000 gで遠心分離した。回収した上澄み(精製腐植酸)に5 mMの硫酸第一鉄を加え、混合と同時に撹拌した。pHを7.0に調整し、30℃で1週間保持した。続いて、この溶液を15分間15,000 gで遠心分離し、得られた沈殿物、つまり鉄腐植酸複合体を凍結乾燥した。AHAのみを使用し、同様の手順で調製した対照試料(コントロール腐植酸)と、硫酸第一鉄のみを使用し、同様の手順で調製した試料(コントロール鉄)を用意した。
鉄腐植酸複合体中に含まれる鉄相に関する情報を提供するため、及び電子媒介機能を担う鉄画分を調べるため、鉄の逐次抽出を行った。以下に示す、異なる3種類の抽出剤を使用した。
(i) MgCl2 (1 M, pH=7):鉄腐植酸複合体に交換可能な鉄画分を除去する
(ii) 酢酸ナトリウム (1 M, 酢酸でpH 5に調整):酸可溶性画分を除去する
(iii) アルカリ溶液(0.1M NaOH又はNa4P2O7):有機物と結合している鉄画分を除去する
表1に示した手順に従い、20 mLの抽出剤と50 mgの凍結乾燥した鉄腐植酸複合体を使用して逐次抽出法(3ステップ)を室温で行った。各処理の後、抽出物を遠心分離により分離した。鉄画分は各上清を誘導結合プラズマ発光分光分析装置(ICP-AES)によって測定した。また、鉄腐植酸複合体の全鉄含有量については、過塩素酸と硝酸で処理した後、ICP-AESによって分析した。
部分的な鉄抽出のために上記の抽出剤を使用した。鉄腐植酸複合体0.5 gを100 mLの抽出剤に添加し、150 rpmで24時間、振とうした後、遠心分離(15,000 g, 10分)により回収した。この抽出プロセスを2回繰り返し、回収した沈殿物を中和するまで蒸留水で洗浄した後、凍結乾燥した。抽出処理した鉄腐植酸複合体は、処理方法に応じてそれぞれ、MgCl2処理鉄腐植酸複合体、NaOAc処理鉄腐植酸複合体、NaOH処理鉄腐植酸複合体及びNa4P2O7処理鉄腐植酸複合体と命名した。
嫌気PCP-フェノール脱塩素ヒューミン培養物を接種源として使用した。当該培養物は、元もと土壌依存性でPCPをフェノールまで脱塩素する嫌気微生物群からなる培養物であり、後に土壌の代わりにヒューミン懸濁物を用いて脱塩素活性の維持した培養物で、5%ずつ継代培養したものである。嫌気ヒューミン懸濁培地は、20 mlの無機塩培地に0.3 gの凍結乾燥ヒューミン、0.2μmの孔径のフィルターでろ過した10 mMのギ酸、ビタミン溶液及び20μMのPCPを添加したものであり、培養物を接種する前に窒素ガスで置換したものである。20 mL無機培地と5 g L-1ヒューミン懸濁物を含む容器に10 mMギ酸及び20μM PCPを加えたものに、5%接種量で培養物を移すことにより、PCP−フェノール脱塩素ヒューミン培養物としてPCPをフェノールまで脱塩素する嫌気微生物群を維持した(参考文献15)。培養時間は10〜25日間とし、30℃で静置培養した。無機培地の組成(L-1)は次の通りである: 1.0 g NH4Cl; 0.05 g CaCl2×2H2O; 0.1 g MgCl2×6H2O; 0.4 g K2HPO4; 1 mL 微量元素 SL-10 溶液(参考文献20); 1 mL Se/W 溶液(参考文献20); 15 mM MOPS(3-(N-モルフォリノ)プロパンスルホン酸)緩衝液(pH 7.2)。PCP及びその代謝物はガスクロマトグラフ質量分析計QP2010(島津、京都)(DB-5MSキャピラリーカラム,J&W Science, Folsom, CA)を用いて分析した(参考文献21)。
鉄腐植酸複合体を添加(2.5 g/L)又は無添加の20 mL無機培地を含む60 mLのボトルに、PCPとフェノールを5μM、10μM又は20μMの濃度で添加し、上記の培養実験と同様の条件で5日間培養した。鉄腐植酸複合体を遠心分離により除去し、上清中のPCPとフェノールの濃度を分析した。
鉄(III)酸化物の微生物的還元に対する鉄腐植酸複合体の影響をシュワネラ・プトレファシエンス(Shewanella putrefaciens)CN-32株を用いて行った。Tryptic soy broth (Becton Dickinson,Sparks, USA)液体培地を用い、30℃、好気条件でS. putrefaciens CN-32株を培養し、遠心分離機を用いて洗浄集菌した。鉄(III)酸化物還元の実験は、30 mLのNaHCO3緩衝液(30 mM, pH 6.8)に鉄腐植酸複合体(2.5 g L-1)、乳酸(20 mM)及び合成した鉄(III)酸化物(10 mM)を加え、洗浄したS. putrefaciens CN-32株(109 cells mL-1)を接種し、還元した鉄(II)濃度を比較した。その対照実験として、二つの対照サンプル、即ち、鉄(III)酸化物を添加して鉄腐植酸複合体を添加せずにS. putrefaciens CN-32株を接種した対照サンプル、及び鉄(III)酸化物は無添加で鉄腐植酸複合体を添加しS. putrefaciens CN-32株を接種した対照サンプルを用意した。鉄(III)酸化物は過去に報告された方法で合成した(参考文献22)。培地は、N2/CO2(80%/20%)の混合ガスを通気することにより無酸素状態にした。
鉄腐植酸複合体の電子受容能力(EAC)を計算するため、以前に報告されたプロトコルに従って嫌気性チャンバーで微生物還元アッセイおよび化学的還元アッセイを実施した(参考文献2、23)。微生物的還元アッセイでは、乳酸塩(20 mM)及び合成した鉄(III)酸化物(10 mM)を添加した30 mLのNaHCO3緩衝液(30 mM, pH 6.8)に鉄腐植酸複合体(2.5 g L-1)又は対照サンプル(即ちコントロール鉄(2.5 g L-1)又はコントロールHA(1.5 g L-1))を加え、そこに洗浄したS. putrefaciens CN-32株(109 cells mL-1)を接種した。化学的還元アッセイでは、10 mMのPIPES緩衝液(pH6.8)中に5粒のパラジウムコーティングした酸化アルミニウム(Pd-coated aluminium oxide)ペレットを入れ、2.5 g L-1 サンプル(コントロールHAでは1.5 g L-1)を添加し、100% H2雰囲気下で、150 rpmで振とうしながら、5日間保温した。
電気化学的実験には生物電気化学セルを備えたポテンショスタット(HSV-110、北斗電工社、大阪、日本)を用い、三電極法(グラファイト作用極(5 mm×15 cm、東海カーボン、東京、日本);白金対極(0.8 mm×1 m、ニラコ、東京、日本)、およびAg/AgCl参照極(飽和塩化カリウムHX-R8,北斗電工、大阪)を使用)で測定した。生物電気化学セルは、各チャンバー200 mLの有効容積と、プロトン交換膜(ナフィオン117、デュポン、USA)で区切られた2つのチャンバーで構成した。サイクリックボルタンメトリーの測定条件は、電位掃引速度100 mV s-1、鉄腐植酸複合体濃度2.5 g L-1、電位範囲-0.8 V〜0.6 V(対 Ag/AgCl)、電解液として無機培地を用いた。鉄腐植酸複合体の試料一組は、あらかじめ-500 mV(対 標準水素電極)の電位での18時間印加(電解液は無機培地)によって電気化学的に還元してから測定した。
構造解析と電子媒介特性の解析には、元素分析(C、H、N、灰分)と官能基分析(フーリエ変換赤外吸収スペクトル(FTIRスペクトル)、電子スピン共鳴スペクトルとサイクリックボルタンモグラム)を用いた。
硝酸塩の微生物的還元(NO3-(硝酸塩)→NO2-(亜硝酸塩)→NH4+(アンモニウム))における鉄腐植酸複合体の効果を検討した。実験方法は、上記(4)に準じた(20μM PCPに代えて5mM 硝酸塩を使用したこと以外、同一の実験方法とした)。
(1)鉄腐植酸複合体の物理化学的特性
精製したAHAは、炭素を約52.8%、水素を約3.9%、窒素を約1.0%、灰分を約0.8%含んでいる。その一方で鉄腐植酸複合体には約23.2%の炭素、約2.8%の水素、約0.4%の窒素及び約33.6%の灰分が含有されていた。ICP-AES分析では、鉄腐植酸複合体が149.6±13.8 g kg-1の鉄量を有することが示された。逐次抽出からの結果は、鉄腐植酸複合体には交換可能な鉄画分4.6%、酸可溶性画分9.6%、有機物と結合している鉄画分52.7%及び不完全に利用可能な(poorly available)鉄画分33.1%が含有されていることが明らかになった。0.50〜0.65 g不溶性の鉄腐植酸複合体(冷凍乾燥パウダーとして)は、水溶液中の1.39 gの硫酸鉄と1.5 gの精製AHAを錯体形成させることにより得た。17.3%〜22.5%の回収率であった。
土壌から固相画分として抽出されたヒューミンがPCP及びテトラブロモビスフェノールA(TBBPA)の微生物的脱ハロゲン反応に関して非常に安定な電子伝達能力を示すと以前に報告した(参考文献15、30)。同じ土壌から抽出された腐植酸の可溶形態での媒介能力は不安定であり、継代培養後には脱ハロゲン活性が失われた。不溶性鉄腐植酸複合体は、硫酸第一鉄と腐植酸の錯体形成反応で合成され、微生物のPCP-フェノール脱塩素活性に関する安定な電子伝達活性を示した(図1a)。一方、AHAにはPCP脱塩素活性は認められなかった(図1c)。PCP−フェノール脱塩素ヒューミン培養物のPCP脱塩素反応に必要な電子伝達能力が、AHAには無いものと考えられる。
PCPの微生物的還元的脱塩素における腐植酸の電子伝達特性を活性化および安定化させるために、硫酸第一鉄との錯体形成によって不溶性鉄腐植酸複合体を調製した。鉄腐植酸複合体について鉄画分の除去の影響及び鉄画分の割合の変化を調べた結果、微生物の還元的PCP脱塩素に鉄腐植酸複合体が重要な役割を果たすことが示唆された。
鉄腐植酸複合体の添加および無添加条件での、S. putrefaciens CN-32株による不溶性鉄(III)酸化物の微生物的還元の経時的変化を図3に示す。還元した結果生ずる水溶性鉄(II)イオンの濃度は時間の経過に従って増加したが、鉄腐植酸複合体の添加の有無に関わらず、細胞の接種なしのボトルにも少量の鉄(II)イオンが検出された。鉄腐植酸複合体(2.5g/L)を添加した場合、培養菌を添加しなかったものと比べて酸化鉄(III)の微生物還元が促進された。5.1 mMもの高濃度の鉄(II)イオンが鉄腐植酸複合体とS. putrefaciens CN-32株を加えた場合に検出されたのに対して、鉄(III) 酸化物の添加の無い対照サンプルでは、鉄腐植酸複合体から還元されて鉄になる鉄(II)イオンは1.7 mM生じただけだった。還元溶解した鉄(II)イオン 濃度の差3.4 mMは、鉄腐植酸複合体を添加しなかった条件での培養終了時の濃度差(1.8 mM)よりも1.9倍高い値となった。鉄(III)酸化物の微生物還元が鉄腐植酸複合体により促進されたことが示された。
電子受容能力(EAC)は、鉄腐植酸複合体を微生物的(S.putrefaciens CN-32株)及び化学的(H2/Pd)に還元し(5日間)、その電気当量を測定・評価した(図4)。微生物還元実験では、EAC値は0.98 mEq/g−乾重 に達した。微生物還元実験の場合のコントロール鉄のEAC値は0.14 mEq/g−乾重、コントロール腐植酸のEAC値は0.10 mEq/g−乾重であった(図4a)。一方、鉄腐植酸複合体を化学的に還元した場合は、EAC値は0.36 mEq/g dryであった(図4b)。化学的還元実験でのコントロール鉄のEAC値は0.13 mEq/g−乾重、コントロール腐植酸は0.07 mEq/g−乾重となった。
鉄腐植酸複合体(図5a)のFTIRスペクトルは、AHA及びコントロール鉄と比較して、明確な差を示した(図5b)。AHAは腐植物質に典型的なスペクトルバンドを示した。AHAは硫酸第一鉄と錯体を形成すると、明らかな変化が1750〜1200 cm-1の波長で観察され、いくつかの鮮明な新しいピークが1735 cm-1、1700 cm-1、1235 cm-1で出現し、また小さなピークが1500〜1377 cm-1、1605〜1500 cm-1及び1735〜1605 cm-1に現れた。一方、微生物的PCP脱塩素反応で不安定な媒介活性を示したNa4P2O7処理鉄腐植酸複合体では、1750〜1200 cm-1の範囲におけるピークが減少または消失した。
電気化学的分析によって鉄腐植酸複合体の酸化還元特性が特徴付けた。分析結果を図6に示す。鉄腐植酸複合体(図6a)とコントロール腐植酸(コントロール−HA、図6b)の両方のサイクリックボルタモグラム(CV)が明らかなピークを示さなかった。一般に腐植物質及びその金属錯体は、電極活性が欠如しているため(参考文献24)、CVに明確なピークが観察されないことが多い。しかし、-500 mV(対 標準水素電極)で18時間電気的に還元した後に鉄腐植酸複合体のCVには、明確なピークが得られた。ピーク電位から、鉄腐植酸複合体の酸化還元電位は0.10 V (対 標準水素電極)と推定された、これに対し、コントロール鉄の酸化還元電位は0.08 Vと推定された。一方、電気的還元を行ってもNa4P2O7処理鉄腐植酸複合体には不規則な形状のCVが観察された(酸化還元対が観察できなかった)(図6C)。
鉄腐植酸複合体が存在する場合には、速やかに硝酸塩が亜硝酸に代謝され始め、亜硝酸はアンモニウムへと代謝された(図8)。一方、鉄腐植酸複合体が存在しない場合には、硝酸塩から亜硝酸への代謝は緩やかであり、亜硝酸からアンモニウムの代謝はごく微量にとどまった(図8)。
以上の実験の結果、不溶性鉄腐植酸複合体(硫酸第一鉄と市販の腐植酸との錯体形成による)を利用すれば、安定な微生物的PCP脱塩素化反応を実現できることを発見した(図1a)。また、自然に存在する腐植酸を使用して調製した複合体、即ちFe-KMHA及びFe-YAHAについてもPCPの微生物脱塩素活性があることが示された(結果は図示せず)。つまり、様々な環境中でPCP脱塩素を維持する際に固相鉄腐植酸複合体が有効であった。さらに、鉄腐植酸複合体が鉄(III)酸化物の微生物的還元も促進することが証明され(図3)、鉄腐植酸複合体における多様な酸化還元伝達機能の存在が示唆された。更なる検討によって、鉄腐植酸複合体は、微生物的PCB脱塩素化、鉄の微生物的還元のみならず、硝酸塩の微生物還元をも促進することが示された(図8)。
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Claims (24)
- 電子伝達媒体としての金属腐植酸複合体と、電子供与手段と、電子受容体としての微生物と、を含む、電子伝達システム。
- 前記金属腐植酸複合体を構成する金属が遷移金属、或いはマグネシウム、亜鉛又はセレンである、請求項1に記載の電子伝達システム。
- 前記遷移金属がマンガン、鉄又はコバルトである、請求項2に記載の電子伝達システム。
- 前記金属腐植酸複合体を構成する金属が、酸化還元電位を複数有する金属である、請求項1に記載の電子伝達システム。
- 前記電子供与手段が、還元性有機化合物と、該還元性有機化合物から電子の供与を受けて前記金属腐植酸複合体を還元する還元微生物との組合せからなる、請求項1〜4のいずれか一項に記載の電子伝達システム。
- 前記還元性有機化合物が、糖、アミノ酸、有機酸、有機酸塩、アルコール、芳香族化合物及び生分解性プラスチックからなる群より選択される一又は二以上の有機化合物である、請求項5に記載の電子伝達システム。
- 前記電子供与手段がカソード電極である、請求項1〜4のいずれか一項に記載の電子伝達システム。
- 前記カソード電極に電気的に接続されるアノード電極に対して、微生物を介して還元性有機化合物から電子が供給される、請求項7に記載の電子伝達システム。
- 前記カソード電極に電気的に接続されるアノード電極に対して、還元性有機化合物と該還元性有機化合物から電子の供与を受けて金属腐植酸複合体を還元する還元微生物との組合せからなる電子供与手段により電子が供給される、請求項7に記載の電子伝達システム。
- 電子受容体としての前記微生物が脱ハロゲン化微生物、鉄還元能を有する細菌又は硝酸還元能を有する細菌である、請求項1〜9のいずれか一項に記載の電子伝達システム。
- 電子受容体としての前記微生物が、細胞外固相との間で電子授受が可能な微生物である、請求項1〜9のいずれか一項に記載の電子伝達システム。
- 電子受容体としての前記微生物が、ジオバクター属細菌、シュワネラ属細菌、デハロバクター属細菌、デサルフィトバクテリウム属細菌、デスルフロモナス属細菌、クロストリジウム属細菌、バクテロイデス属細菌、デサルフォビブリオ属細菌、セディメンティバクター属細菌及びスルフロスピリラム属細菌からなる群より選択される一又は二以上の細菌である、請求項1〜9のいずれか一項に記載の電子伝達システム。
- 請求項10に記載の電子伝達システムによって、汚染環境中の有機ハロゲン化合物を分解することを特徴とする、環境浄化方法。
- 金属腐植酸複合体を汚染環境に添加するステップ、を含む環境浄化方法。
- 更に、電子供与体としての還元性有機化合物を汚染環境に添加するステップを含む、請求項14に記載の環境浄化方法。
- 更に、電子供与手段として、還元性有機化合物と、該還元性有機化合物から電子の供与を受けて前記金属腐植酸複合体を還元する還元微生物を汚染環境に添加するステップを含む、請求項14に記載の環境浄化方法。
- 更に、電子供与手段としてのカソード電極を汚染環境中に設置するステップを含む、請求項14に記載の環境浄化方法。
- 更に、電子受容体としての脱ハロゲン化微生物を汚染環境に添加するステップを含む、請求項14〜17のいずれか一項に記載の環境浄化方法。
- 電子伝達媒体としての金属腐植酸複合体と、電子供与体としての還元性有機化合物と、を含む、環境浄化用キット。
- 電子伝達媒体としての金属腐植酸複合体と、電子供与手段としての、還元性有機化合物と、該還元性有機化合物から電子の供与を受けて前記金属腐植酸複合体を還元する還元微生物の組合せと、を含む、環境浄化用キット。
- 電子伝達媒体としての金属腐植酸複合体と、カソード電極と、を含む、環境浄化用キット。
- 更に、電子受容体としての脱ハロゲン化微生物を含む、請求項19〜21のいずれか一項に記載の環境浄化用キット。
- 金属腐植酸複合体と電子供与体の存在下で微生物含有試料を培養するステップ、を含む、微生物の選択的培養法。
- 金属腐植酸複合体からなる電子伝達媒体。
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