JPWO2006068041A1 - Composition having an action of promoting the decomposition of body fat, and a food or food compound containing the same - Google Patents

Composition having an action of promoting the decomposition of body fat, and a food or food compound containing the same Download PDF

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Abstract

体内脂肪の分解促進作用を有する組成物及びそれを含有する食品又は食品配合剤を提供する。米ぬか、こんにゃく、小麦、とうもろこし、牛脳などの植物、真菌、酵母、茸、動物、水生生物、昆虫から抽出されるセラミド（２）を主成分とする組成物（１）及びこれを含有する食品または食品配合剤を経口摂取することによって体内脂肪及び糖の産生を促進させる。この組成物（１）が、標的細胞（４）の表面にある甲状腺ホルモン受容体β（５）の遺伝子発現量を増加させ、脂肪分解を促進し、かつ、β酸化（１３）の脂質代謝関連酵素であるカルニチンアセチルトランスフェラーゼ（１５）の遺伝子発現量を増加させることにより標的細胞４内の脂肪及び糖のエネルギー産生を促進させる。セラミド（２）を含有する食品及び又は食品配合剤を経口摂取すれば、体重、体内脂肪の減少、所謂ダイエット効果を発現させることができる。Provided are a composition having an action of promoting the decomposition of body fat, and a food or a food compound containing the composition. Ceramide (2)-derived composition (1) extracted from plants such as rice bran, konjac, wheat, corn, beef brain, fungi, yeast, mushrooms, animals, aquatic organisms and insects, and foods containing the same Alternatively, by ingesting a food compound orally, production of body fat and sugar is promoted. This composition (1) increases the gene expression level of thyroid hormone receptor β (5) on the surface of target cells (4), promotes lipolysis, and is associated with β-oxidation (13) lipid metabolism. By increasing the gene expression level of the enzyme carnitine acetyltransferase (15), energy production of fat and sugar in the target cell 4 is promoted. Oral ingestion of foods and/or food blends containing ceramide (2) can reduce body weight and body fat, which is a so-called diet effect.

Description

本発明は、体内脂肪の分解促進作用を有する組成物及びそれを含有する食品又は食品配合剤に関する。   TECHNICAL FIELD The present invention relates to a composition having an action of promoting the decomposition of body fat and a food or a food compound containing the composition.

ヒトをはじめとしてほ乳類などの動物は、体内に蓄積された脂肪を酸化分解して生命活動のエネルギー源とする。
図４は一般的な細胞中でのエネルギー代謝経路を模式的に説明する図である。図示するように、甲状腺３から分泌される甲状腺ホルモン３Ａは、標的細胞４の表面にある甲状腺ホルモン受容体β５に到達すると、細胞内情報伝達物質６が解糖系７を活性化させて、代謝を促進する。図中の解糖系７における左部の経路は、脂肪や糖などが水と二酸化炭素にまで酸化分解する過程を示したものである。即ち、脂肪や糖などが、アセチルＣｏＡ（コエンザイムＡ）８と呼ばれる物質（補酵素）を経て、標的細胞４内のミトコンドリア９で、ＴＣＡ（トリカルボン酸）サイクル１０及び電子伝達系１１で代謝を受け、水と二酸化炭素にまで酸化分解する。この一連の反応により、生命活動に必要なエネルギーが、ＡＴＰ（アデノシン−５' −三リン酸）１２の形で生産される。
一方、図の解糖系７において右部に示す経路は、脂肪のβ酸化１３の分解経路である。この脂肪のβ酸化１３による分解には、カルニチン１４と呼ばれる物質（ミトコンドリア９内にアセチルＣｏＡ（アシルＣｏＡ８）を導入する輸送物質）が、関与していることが広く知られている。このためカルニチン１４は、脂肪酸化分解促進用、いわゆるダイエット用食品配合剤などとして広く使用されている（例えば、特許文献１参照）。Humans and other animals such as mammals oxidize and decompose fat accumulated in the body and use it as an energy source for life activity.
FIG. 4 is a diagram schematically illustrating a general energy metabolism pathway in cells. As shown in the figure, when the thyroid hormone 3A secreted from the thyroid gland reaches the thyroid hormone receptor β5 on the surface of the target cell 4, the intracellular signal transmitter 6 activates the glycolytic system 7 to metabolize it. Promote. The route on the left side in the glycolysis system 7 in the figure shows a process in which fat and sugar are oxidatively decomposed into water and carbon dioxide. That is, fats and sugars are metabolized at the TCA (tricarboxylic acid) cycle 10 and the electron transfer system 11 at the mitochondria 9 in the target cell 4 through a substance (coenzyme) called acetyl CoA (coenzyme A) 8. , Oxidatively decomposes to water and carbon dioxide. Through this series of reactions, energy required for life activity is produced in the form of ATP (adenosine-5'-triphosphate) 12.
On the other hand, the pathway shown on the right side in the glycolysis system 7 in the figure is the degradation pathway of fat β-oxidation 13. It is widely known that a substance called carnitine 14 (a transport substance that introduces acetyl CoA (acyl CoA8) into mitochondria 9) is involved in the decomposition of fat by β-oxidation 13. Therefore, carnitine 14 is widely used as a food blending agent for promoting fatty acid decomposition and so-called diet (see, for example, Patent Document 1).

ところで、近年、セラミドと呼ばれる一連の同族体としての化学物質が広く知られるようになった。これは人体の皮膚中にも含有されていて、皮膚の保護物質である角質の間に存在し、皮膚を通しての体内からの水分の蒸発や体外からの有害物質の侵入を防ぐ機能があり、このため近年、保湿剤などとしての目的で皮膚や毛髪用の化粧品に配合されている（例えば、特許文献２参照）。また、特許文献３には、この成分を内服し、経口摂取することによって皮膚表面に同様の効果をもたらす技術が開示されている。
このように、セラミドは天然の皮膚中に含有されて保護保湿機能を有し、これに着目して皮膚化粧品に配合し、あるいは経口摂取して同様の機能を求める商品が広く開発されている。By the way, in recent years, chemical substances as a series of homologues called ceramide have become widely known. It is also contained in the skin of the human body and exists between the keratin, which is a skin protective substance, and has the function of preventing evaporation of water from the body through the skin and invasion of harmful substances from outside the body. Therefore, in recent years, it has been blended in cosmetics for skin and hair for the purpose of a moisturizing agent and the like (see, for example, Patent Document 2). Further, Patent Document 3 discloses a technique in which the same effect is exerted on the skin surface by orally ingesting this component.
As described above, ceramide is contained in natural skin and has a protective and moisturizing function, and attention has been paid to this fact to widely develop products which are incorporated into skin cosmetics or ingested to obtain the same function.

セラミドは、一般式（１）に示す化学式及びその誘導体で表される同族体としての化学物質である。さらに、この分子にグルコースなどの糖質が結合した一般式（２）に示す化学式で表される物質はスフィンゴ糖脂質と呼ばれて、これも広義のセラミドと見なされている。
ここで、Ｒ1 は長鎖アルキル基又は長鎖アルケニル基であり、Ｒ2 は長鎖アルキル基又は長鎖アルケニル基であり、ＺはＨ又はＯＨである。
ここで、Ｒ3 は長鎖アルキル基又は長鎖アルケニル基であり、Ｇｌｕはグルコースである。Ceramide is a chemical substance as a homologue represented by the chemical formula (1) and its derivatives. Furthermore, a substance represented by the chemical formula shown in the general formula (2) in which a sugar such as glucose is bound to this molecule is called a glycosphingolipid, which is also regarded as a ceramide in a broad sense.
Here, R 1 is a long-chain alkyl group or a long-chain alkenyl group, R 2 is a long-chain alkyl group or a long-chain alkenyl group, and Z is H or OH.
Here, R 3 is a long-chain alkyl group or a long-chain alkenyl group, and Glu is glucose.

セラミドおよびセラミド類似物質は各種の簡易な構造の前駆物質から種々の反応経路で合成もされるが（例えば、特許文献４参照）、各種天然原料から抽出などの工程によって製造される。この天然原料としては、米ぬか、こんにゃく、とうもろこし、小麦、牛脳などがある。   Ceramide and ceramide-like substances can be synthesized from various precursors having a simple structure by various reaction routes (see, for example, Patent Document 4), but are produced from various natural raw materials by a process such as extraction. Examples of this natural raw material include rice bran, konjac, corn, wheat and beef brain.

最近、セラミドは皮膚の保護保湿機能の他に、癌細胞を死亡させる所謂細胞死機能（アポトーシス）を有するという発表がされている（例えば、非特許文献１参照）。   Recently, it has been announced that ceramide has a so-called cell death function (apoptosis) that kills cancer cells, in addition to the skin's protective moisturizing function (see Non-Patent Document 1, for example).

特開２０００−１６９１６号公報JP 2000-16916 A 特開２００３−１８３１４８号公報JP, 2003-183148, A 特開２００４−３５４５６号公報JP 2004-35456 A 特開平７−１７９４１０号公報JP-A-7-179410 木下 幹郎 他７名、「スフィンゴイド塩基による大腸ガン細胞死の誘導とその機能」、日本農芸化学会大会講演要旨集、３Ａ１７ｐ１３、ｐ．２１２、２００３年Mikio Kinoshita and 7 others, “Induction of colorectal cancer cell death by sphingoid base and its function”, Proceedings of the Annual Meeting of the Japanese Society of Agricultural Chemistry, 3A17p13, p. 212, 2003 杉田陸海 他、新生化学実験講座 ４、脂質 III−糖脂質、ｐｐ．８１〜９２、ｐｐ．１０９〜１１１、日本生化学会編、株式会社東京化学同人発行、１９９０年Rikukai Sugita et al., Laboratory for New Chemistry 4, Lipid III-Glycolipid, pp. 81-92, pp. 109-111, edited by The Biochemical Society of Japan, published by Tokyo Kagaku Dojin, 1990

従来、セラミドは専ら皮膚の保護保湿機能に着目されており、他の生理機能に及ぼす効果が殆ど知られていない。   Heretofore, ceramide has been focused solely on the skin's protective and moisturizing function, and its effect on other physiological functions has been hardly known.

本発明は、上記課題に鑑み、細胞の解糖系における体内脂肪及び糖のエネルギー産生を促進させる効果を有する、体内脂肪の分解促進作用を有する組成物及びそれを含有する食品又は食品配合剤を提供することを目的としている。   In view of the above problems, the present invention has an effect of promoting energy production of body fat and sugar in the glycolysis system of cells, a composition having a function of promoting the decomposition of body fat, and a food or a food compound containing the same. It is intended to be provided.

本発明者らは、セラミドをマウスに経口投与してその生体内への作用を詳細に研究した。その結果、セラミドが従来知られていなかった体内の脂肪や糖のエネルギー産生の促進機能を有することを見出し、本発明に想到したものである。   The present inventors orally administered ceramide to mice and studied the effect on the body in detail. As a result, they have found that ceramide has a previously unknown function of promoting energy production of fat and sugar in the body, and have conceived the present invention.

上記目的を達成するため、本発明の体内脂肪の分解促進作用を有する組成物は、セラミドを主成分として含有し、体内の脂肪及び糖のエネルギー産生を促進させることを特徴とする。
上記構成において、セラミドは、植物、真菌、酵母、茸、動物、水生生物、昆虫の何れかによる抽出工程によって得られるものであり、好ましくは、米ぬかからの抽出工程によって製造される。また、セラミドは、こんにゃく、小麦、とうもろこし、牛脳の何れかによる抽出工程によっても製造され得る。好ましくは、上記セラミドは、本発明の体内脂肪の分解促進作用を有する組成物として、５５重量％以上含有される。
セラミドを主成分として含有する組成物は、好ましくは、標的細胞の甲状腺ホルモン受容体βの遺伝子発現量を増加させることによって脂肪分解を促進し、かつ、β酸化の脂質代謝関連酵素であるカルニチンアセチルトランスフェラーゼの遺伝子発現量を増加させることによって体内の脂肪及び糖のエネルギー産生を促進させる。In order to achieve the above object, the composition of the present invention having an action of promoting the decomposition of body fat is characterized by containing ceramide as a main component and promoting the energy production of fat and sugar in the body.
In the above-mentioned constitution, ceramide is obtained by an extraction step using any of plants, fungi, yeasts, mushrooms, animals, aquatic organisms, and insects, and is preferably produced by an extraction step from rice bran. Ceramide can also be produced by an extraction process using any of konjac, wheat, corn, and bovine brain. Preferably, the ceramide is contained in an amount of 55% by weight or more as the composition having the action of promoting the decomposition of body fat of the present invention.
A composition containing ceramide as a main component preferably promotes lipolysis by increasing the gene expression level of thyroid hormone receptor β in target cells, and carnitine acetyl which is a lipid metabolism-related enzyme for β-oxidation. By increasing the gene expression level of transferase, it promotes energy production of fat and sugar in the body.

上記構成によれば、植物、真菌、酵母、茸、動物、水生生物、昆虫の何れか、例えば、植物のうち、米ぬか、小麦、とうもろこし、こんにゃくなどから抽出などの工程を経て製造されセラミドを主成分として含有する組成物により、標的細胞の甲状腺ホルモン受容体βの遺伝子発現量を増加させることによって脂肪分解を促進し、かつ、β酸化の脂質代謝関連酵素であるカルニチンアセチルトランスフェラーゼの遺伝子発現量を増加させることによって体内の脂肪及び糖のエネルギー産生を促進させることができる。   According to the above configuration, any of plants, fungi, yeast, mushrooms, animals, aquatic organisms, insects, for example, among plants, rice bran, wheat, corn, mainly ceramide manufactured through a process such as extraction from konjac and the like. The composition containing as a component promotes lipolysis by increasing the gene expression level of thyroid hormone receptor β in target cells, and increases the gene expression level of carnitine acetyltransferase, which is a lipid metabolism-related enzyme of β-oxidation. By increasing the amount, energy production of fat and sugar in the body can be promoted.

また、本発明の食品または食品配合剤は、セラミドを主成分とする組成物を含有し、体内脂肪及び糖のエネルギー産生を促進することを特徴とする。上記構成において、好ましくは、さらに、カルニチンを含有している。
本発明によれば、米ぬかや小麦、とうもろこし、こんにゃくなどの植物、或いは真菌、酵母、茸、動物、水生生物、昆虫の何れかに由来するセラミドを主成分とする組成物を、食品または食品配合剤に添加することにより、食品から摂取することができるので摂取が容易となる。Further, the food or food compound of the present invention is characterized by containing a composition containing ceramide as a main component and promoting energy production of body fat and sugar. In the above constitution, preferably, carnitine is further contained.
According to the present invention, rice bran and wheat, corn, plants such as konjac, or fungi, yeast, mushrooms, animals, aquatic organisms, a composition containing ceramide as a main component derived from any of insects, foods or food blends. When added to the agent, it can be ingested from foods, which facilitates ingestion.

本発明の米ぬかなどに由来するセラミドを主成分とする組成物や、これを含有する食品又は食品配合剤によれば、体内脂肪の分解および糖、エネルギー代謝が促進されるので、体内脂肪、体重の増加を防止することができ、所謂ダイエット効果が得られる。   A composition containing ceramide as a main component derived from rice bran or the like of the present invention, and a food or a food compound containing the same promotes decomposition of body fat and sugar, and energy metabolism. Can be prevented and a so-called diet effect can be obtained.

本発明のセラミドを主成分とする体内脂肪及び糖のエネルギー産生を促進する作用を有する組成物の作用機序を説明する模式的図である。FIG. 3 is a schematic diagram illustrating the action mechanism of the composition having an action of promoting energy production of body fat and sugar containing ceramide as the main component of the present invention. 実施例及び比較例のマウスの各群の肝臓細胞のマイクロアレイスキャンナーによるｍＲＮＡ発現パターンを示す図であり、それぞれ、（ａ）は実施例１のＲ群、 （ｂ）は実施例２のＫ群、（ｃ）は比較例のＤ群の場合を示している。It is a figure which shows the mRNA expression pattern by the microarray scanner of the liver cell of each group of the mouse|mouth of an Example and a comparative example, (a) is R group of Example 1, (b) is K group of Example 2, respectively. , (C) show the case of the D group of the comparative example. 図２の蛍光強度から計算される実施例及び比較例のｍＲＮＡ発現量の相対比を示す表である。It is a table which shows the relative ratio of the mRNA expression level of the Example and the comparative example calculated from the fluorescence intensity of FIG. 一般的な細胞中でのエネルギー代謝経路を模式的に説明する図である。It is a figure which illustrates typically the energy metabolic pathway in a cell.

符号の説明Explanation of symbols

１：セラミドを主成分とする組成物
２：セラミド
３：甲状腺
３Ａ：甲状腺ホルモン
４：標的細胞
５：甲状腺ホルモン受容体β
６：細胞内情報伝達物質
７：解糖系
８：アセチルＣｏＡ
９：ミトコンドリア
１０：ＴＣＡサイクル
１１：電子伝達系
１２：ＡＴＰ
１３：β酸化
１４：カルニチン
１５：カルニチンアセチルトランスフェラーゼ1: Composition containing ceramide as a main component 2: Ceramide 3: Thyroid 3A: Thyroid hormone 4: Target cell 5: Thyroid hormone receptor β
6: intracellular signal transmitter 7: glycolysis system 8: acetyl CoA
9: Mitochondria 10: TCA cycle 11: Electron transfer system 12: ATP
13: β-oxidation 14: carnitine 15: carnitine acetyltransferase

以下、図面に基づいて本発明の実施の形態を詳細に説明する。
先ず、本発明のセラミドを主成分とする、体内脂肪及び糖のエネルギー産生を促進する作用を有する組成物について説明する。なお、本発明の組成物は、後述するように体内の脂肪及び糖のエネルギー産生を促進する作用を有する組成物であるが、適宜、体内脂肪の分解促進作用を有する組成物と呼ぶ。
本発明のセラミドを主成分とする、体内脂肪及び糖のエネルギー産生の促進作用を有する組成物は、上記した一般式（２）の化学式で表わされるセラミド中のグルコースを含むスフィンゴ糖脂質、又は下記一般式（３）の化学式で表わされるガラクトースを含むスフィンゴ糖脂質である。
ここで、Ｒ3 は長鎖アルキル基又は長鎖アルケニル基であり、Ｇａｌはガラクトースである。この化学式（３）で表わされるセラミドは、一般式（２）で表わされるセラミド中のグルコース（Ｇｌｕ）をガラクトース（Ｇａｌ）に置き換えた構造となっている。Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the drawings.
First, a composition containing the ceramide of the present invention as a main component and having an action of promoting energy production of body fat and sugar will be described. The composition of the present invention is a composition having an action of promoting energy production of fat and sugar in the body as described later, but is appropriately referred to as a composition having an action of promoting decomposition of body fat.
The composition containing ceramide as a main component and having an action of promoting energy production of body fat and sugar is a glycosphingolipid containing glucose in ceramide represented by the chemical formula of the general formula (2), or It is a glycosphingolipid containing galactose represented by the chemical formula (3).
Here, R 3 is a long-chain alkyl group or a long-chain alkenyl group, and Gal is galactose. The ceramide represented by the chemical formula (3) has a structure in which glucose (Glu) in the ceramide represented by the general formula (2) is replaced with galactose (Gal).

上記セラミドは、各種天然原料から抽出工程や発酵工程などの製造工程によって製造される。このような天然原料としては、植物、真菌、酵母、茸、動物、水生生物、昆虫が挙げられる。
植物由来の天然原料としては、陸上及び海洋における植物が挙げられ、とくに、米ぬかや、こんにゃく、小麦、とうもろこしなどが挙げられる。動物由来の天然原料としては、牛脳やブタ脳などの家畜動物の組織が挙げられる。
水生生物由来の天然原料としては、川や海洋に生息する生物であり、例えば、貝類、魚類、ウニやヒトデなどの棘皮動物などが挙げられる（非特許文献２参照）。さらに、昆虫由来の天然原料としては、イナゴなどが挙げられる。
この組成物中のセラミドの純度としては、５０％以上が好ましい。純度が５０％以下では、例えば脂肪酸等を不純物として含むので好ましくない。The ceramide is produced from various natural raw materials by a production process such as an extraction process and a fermentation process. Examples of such natural raw materials include plants, fungi, yeasts, mushrooms, animals, aquatic organisms, and insects.
Examples of the natural raw material derived from plants include terrestrial and marine plants, and particularly rice bran, konjac, wheat, corn and the like. Examples of animal-derived natural raw materials include tissues of livestock animals such as bovine brain and porcine brain.
Natural raw materials derived from aquatic organisms are organisms that live in rivers and oceans, and include, for example, shellfish, fish, and echinoderms such as sea urchins and starfish (see Non-Patent Document 2). Furthermore, locusts and the like can be cited as natural raw materials derived from insects.
The purity of ceramide in this composition is preferably 50% or more. When the purity is 50% or less, for example, fatty acids are contained as impurities, which is not preferable.

上記抽出処理は、原料を低沸点有機溶剤で抽出処理した後、この抽出液から不溶固形分を除去し、適宜ろ過などにより不純分を除く処理を行い、最後に残留溶液からの析出結晶化によって行われる。
ここで、低沸点有機溶剤としては、ベンゼン，ヘプタン，ヘキサン，シクロヘキサンなどの炭化水素、メタノールやエタノールなどのアルコール、アセトンやメチルエチルケトン（ＭＥＫ）などのケトン、酢酸メチルや酢酸エチルなどのエステルなどが挙げられる。これら一部の溶剤の中には、水分を含む方が有効である場合もある。この場合には水分として、例えば、０．５乃至３０％の範囲とすることができる。The above extraction treatment, after the raw material is subjected to an extraction treatment with a low boiling point organic solvent, the insoluble solids are removed from this extract, and the impurities are removed by appropriate filtration, etc., and finally by precipitation crystallization from the residual solution. Done.
Here, examples of the low boiling point organic solvent include hydrocarbons such as benzene, heptane, hexane, and cyclohexane, alcohols such as methanol and ethanol, ketones such as acetone and methyl ethyl ketone (MEK), and esters such as methyl acetate and ethyl acetate. Be done. In some of these solvents, it may be more effective to contain water. In this case, the water content may be, for example, 0.5 to 30%.

原料が米ぬかの場合には、精米工程から副生する米ぬかを用いることができる。上記工程で製造される米由来のセラミドを主成分とする組成物は、その色が淡褐色から褐色を呈し僅かに特異臭があり、そのセラミド純度が６５〜８５％であり、遊離脂肪酸等をほとんど含有しないという特徴がある。なお、上記セラミドの定量分析は、主として糖脂質の定量に供される光散乱検出機能を備えるＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）によっている。   When the raw material is rice bran, rice bran produced as a by-product from the rice polishing process can be used. The composition containing rice-derived ceramide as the main component produced in the above step has a light brown to brown color with a slight peculiar odor, its ceramide purity is 65 to 85%, and free fatty acids etc. It has a characteristic that it is rarely contained. The quantitative analysis of the ceramide is mainly performed by HPLC (high performance liquid chromatography) having a light scattering detection function used for quantitative determination of glycolipids.

同様の工程で、こんにゃく由来のセラミドは、こんにゃく芋からこんにゃくを製造する工程で副生し、通常は廃棄物となる芋皮から、米ぬか由来の組成物と同様の工程で製造される。同様にして、とうもろこし、小麦のふすま、牛脳やブタ脳からは、それぞれ、とうもろこし、小麦、牛脳、ブタ脳由来のセラミドが得られる。   In the same step, konjac-derived ceramide is produced as a byproduct in the step of producing konjac from konjac potato, and is usually produced from potato skin, which is a waste, in the same step as the composition derived from rice bran. Similarly, corn, wheat, bovine brain, and porcine brain-derived ceramides are obtained from corn, wheat bran, bovine brain, and porcine brain, respectively.

また、本発明の体内脂肪及び糖のエネルギー産生の促進作用を有する組成物を含有する食品又は食品配合剤は、米ぬか、こんにゃく、とうもろこし、小麦、牛脳、ブタ脳などの植物、真菌、酵母、茸、動物、水生生物、昆虫などからの抽出工程などによって製造されるセラミドを主成分とする組成物を含有している。
この組成物の食品または食品配合剤への含有率は、例えば食味を損なわない程度とすれば、食品から摂取することができるので、摂取が容易となる。この組成物を含有する食品としては、例えば米飯、パン、そば、うどん、菓子などにこの組成物を直接配合したものでよい。この組成物を飲料（ドリンク）に添加したり、錠剤やカプセル剤としてもよい。さらに、この組成物を、例えば、サイクロデキストリン（別名：シクロデキストリン、環状オリゴ糖）、澱粉などの希釈粉体に適切な配合比で配合した食品配合剤として用意し、この粉体を上記食品製造時に配合してもよい。セラミドの摂取量は、成人の場合には、１日につき０．０６ｍｇ〜１０００ｍｇ程度であればよい。
上記食品又は食品配合剤には、カルニチンが含有されていてもよい。カルニチンの添加量は、成人の場合には１日につき３０ｍｇ〜１０００ｍｇ程度であればよい。Further, the food or food compound containing the composition having an action of promoting energy production of body fat and sugar of the present invention, rice bran, konjac, corn, wheat, bovine brain, plants such as pig brain, fungus, yeast, It contains a composition containing ceramide as a main component, which is produced by an extraction process from mushrooms, animals, aquatic organisms, insects and the like.
The content of this composition in a food or a food blending agent is, for example, if the content is not impaired, it can be taken from the food, and thus the intake becomes easy. The food containing this composition may be, for example, rice, bread, soba, udon, confectionery, etc., which is directly blended with this composition. This composition may be added to beverages (drinks) or used as tablets or capsules. Further, this composition is prepared as a food compounding agent prepared by mixing cyclodextrin (also known as: cyclodextrin, cyclic oligosaccharide), a diluted powder of starch or the like in an appropriate mixing ratio, and the powder is prepared as the above food product. You may mix at any time. In the case of an adult, the intake amount of ceramide may be about 0.06 mg to 1000 mg per day.
Carnitine may be contained in the food or food compound. In the case of an adult, the amount of carnitine added may be about 30 mg to 1000 mg per day.

次に、本発明のセラミドを主成分とする組成物及びこの組成物を含有する食品又は食品配合剤が体内に摂取された後、体内脂肪の分解及び糖のエネルギー産生を促進させる機能について説明する。
図１は、本発明のセラミドを主成分とする体内脂肪及び糖のエネルギー産生を促進する作用を有する組成物の作用機序を説明する模式的図である。本発明の組成物１は、セラミド２を主成分としている。体内脂肪の分解促進作用を有する組成物１は、セラミド２の摂取によって、標的細胞４の甲状腺ホルモン受容体β５の遺伝子発現を増加させる。このため、細胞内情報伝達物質６によって活性化を受けた解糖系７の代謝を促進する。
上記組成物１は、解糖系７におけるアセチルＣｏＡ８の代謝経路として、標的細胞４内のミトコンドリア９におけるＴＣＡサイクル１０ではなく、カルニチン１４の作用による、所謂β酸化１３を促進させる。β酸化１３は、その脂質代謝関連酵素であるカルニチンアセチルトランスフェラーゼ１５の遺伝子発現量の増加により、体内の脂肪及び糖のエネルギー産生を促進させる。
なお、図において、セラミド２の摂取によってβ酸化１３が進む経路を実線の矢印Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄで示している。一方、脂肪酸合成及びＴＣＡサイクル１０の反応は減少するので、点線矢印で示している。
これにより、本発明の体内脂肪の分解促進作用を有する組成物１は、体内脂肪分解と、糖やエネルギーの代謝促進作用を有している。Next, the function of accelerating the decomposition of body fat and the energy production of sugar after the composition containing the ceramide of the present invention as a main component and the food or food compound containing the composition is ingested will be described. ..
FIG. 1 is a schematic diagram illustrating the mechanism of action of the composition of the present invention, which contains ceramide as a main component and has an action of promoting energy production of body fat and sugar. Composition 1 of the present invention contains ceramide 2 as a main component. The composition 1, which has the action of promoting the decomposition of body fat, increases the gene expression of the thyroid hormone receptor β5 in the target cells 4 by ingesting ceramide 2. Therefore, the metabolism of the glycolytic system 7 activated by the intracellular signal transmitter 6 is promoted.
The above composition 1 promotes not the TCA cycle 10 in the mitochondria 9 in the target cell 4 but the so-called β-oxidation 13 by the action of carnitine 14 as the metabolic pathway of acetyl CoA8 in the glycolytic system 7. β-oxidation 13 promotes energy production of fat and sugar in the body by increasing the gene expression level of carnitine acetyltransferase 15, which is its lipid metabolism-related enzyme.
In the figure, solid-line arrows A, B, C, and D indicate the pathways through which β-oxidation 13 proceeds by ingestion of ceramide 2. On the other hand, the fatty acid synthesis and the reaction of TCA cycle 10 are decreased, and are shown by the dotted arrows.
As a result, the composition 1 of the present invention, which has the action of promoting the decomposition of body fat, has the action of promoting the decomposition of body fat and the metabolism of sugar and energy.

本発明のセラミドを主成分とする組成物１を含有する食品又は食品配合剤を経口摂取することで、上記セラミド２の作用によって、標的細胞４の甲状腺ホルモン受容体β５の遺伝子発現は増加し、細胞内情報伝達物質６によって活性化合物を受けた解糖系７の代謝を促進する。そして、カルニチン１４の作用によるβ酸化１３を促進させる。また、本発明のセラミドを主成分とする組成物１を含有する食品又は食品配合剤にカルニチン１４が添加されている場合には、さらに、β酸化１３が促進される。
これにより、セラミドを主成分とする組成物１を含有する食品又は食品配合剤を経口摂取することで、体内の脂肪や糖のエネルギー産生が促進される。これによって、所謂ダイエット効果を発現させることができる。By orally ingesting a food or a food mixture containing the composition 1 containing ceramide as a main component of the present invention, the gene expression of the thyroid hormone receptor β5 in the target cells 4 is increased by the action of the ceramide 2. It promotes the metabolism of glycolytic system 7 that has received the active compound by intracellular signaling substance 6. Then, β-oxidation 13 due to the action of carnitine 14 is promoted. Further, when carnitine 14 is added to the food or food compound containing the composition 1 containing ceramide as the main component of the present invention, β-oxidation 13 is further promoted.
Thereby, energy production of fat and sugar in the body is promoted by orally ingesting a food or a food compound containing the composition 1 containing ceramide as a main component. With this, a so-called diet effect can be exhibited.

以下、実施例によって本発明をさらに詳細に説明する。
実施例１のセラミドを主成分として含有する組成物１として、米ぬかから製造した。精米工程から副生した米ぬか２００ｇに、ｎ−ヘキサンを５００ｃｍ3 加え、ソックスレー装置によってｎ−ヘキサン可溶成分を抽出した。この抽出液からｎ−ヘキサンを留去し、適宜水を添加して不溶物を得る。不溶物を分取したのち、苛性ソーダによって加水分解した。
次に、酸により中和し、ｎ−ヘキサンとさらに水を添加した。この水からなる水相中にヘキサン不溶分及び塩を溶解させて、ｎ−ヘキサン相からヘキサン不溶分及び塩を取り除いた。限外ろ過膜によるろ過装置を用いて、ｎ−ヘキサン相をろ過した。この工程で、ｎ−ヘキサン相中の脂肪酸及び色素等の大部分を取り除いた。
次に、限外ろ過膜不通過の溶液を回収し、ｎ−ヘキサンを留去し、残分を５０ｃｍ3 の９５％含水エタノールに一旦溶解させた後、析出再結晶化を行った。この析出再結晶化を数回繰り返して行い、乾燥後に米ぬか由来のセラミド２を含有する組成物２２０ｍｇを得た。この得られた組成物１の外観は淡褐色であり、僅かに特異臭のある粉末状結晶であった。Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples.
A composition 1 containing the ceramide of Example 1 as a main component was produced from rice bran. To 200 g of rice bran by-produced from the rice polishing process, 500 cm 3 of n-hexane was added, and the n-hexane soluble component was extracted by a Soxhlet apparatus. N-Hexane is distilled off from this extract, and water is appropriately added to obtain an insoluble matter. The insoluble matter was separated and hydrolyzed with caustic soda.
Next, the mixture was neutralized with an acid, and n-hexane and water were added. The hexane-insoluble matter and salt were dissolved in the water phase consisting of this water, and the hexane-insoluble matter and salt were removed from the n-hexane phase. The n-hexane phase was filtered using a filtration device with an ultrafiltration membrane. In this step, most of fatty acids and pigments in the n-hexane phase were removed.
Next, the solution that did not pass through the ultrafiltration membrane was recovered, n-hexane was distilled off, and the residue was once dissolved in 50 cm 3 of 95% water-containing ethanol, followed by precipitation recrystallization. This precipitation recrystallization was repeated several times to obtain 220 mg of a composition containing ceramide 2 derived from rice bran after drying. The appearance of the obtained composition 1 was light brown, and it was a powdery crystal with a slight peculiar odor.

実施例１のセラミド２を主成分として含有する組成物を、光散乱検出器を有するＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）により定量分析を行ったところ、セラミドの純度は８３％であることが分かった。
さらに、シリカゲル薄層クロマトグラフィー（展開液、クロロホルム：メタノール：水＝６５：１６：２）による分析を行い、上記実施例１の組成物２には、脂肪酸が含有されていないこことが分かった。Quantitative analysis of the composition containing ceramide 2 of Example 1 as a main component by HPLC (high performance liquid chromatography) having a light scattering detector revealed that the purity of ceramide was 83%.
Furthermore, analysis by silica gel thin layer chromatography (developing solution, chloroform:methanol:water=65:16:2) revealed that composition 2 of Example 1 did not contain a fatty acid. ..

実施例２の組成物１として、米ぬかの代わりに、こんにゃく製造工程においてこんにゃく芋から剥ぎ取られ、通常は廃棄される芋皮を裁断して乾燥した材料を用いた以外は、実施例１の組成物１と同じ製造方法を用いて本発明のこんにゃく由来の実施例２の組成物１を製造した。芋皮２００ｇから淡黄色の組成物１６０ｍｇが得られた。
そして、実施例１と同様に、ＨＰＬＣ及びシリカゲル薄層クロマトグラフィーによる分析を行った。その結果、実施例２の組成物１のセラミド純度は６１％であり、この組成物１には若干の脂肪酸成分が含有されていることが分かった。As the composition 1 of Example 2, the composition of Example 1 was used, except that instead of the rice bran, a material obtained by cutting and drying the potato skin that was peeled from the konjac potato in the konjac manufacturing process and normally discarded Composition 1 of Example 2 derived from konjac of the present invention was manufactured by using the same manufacturing method as that of Material 1. From 200 g of potato, 160 mg of a pale yellow composition was obtained.
Then, in the same manner as in Example 1, analysis by HPLC and silica gel thin layer chromatography was performed. As a result, it was found that the ceramide purity of the composition 1 of Example 2 was 61%, and the composition 1 contained some fatty acid components.

実施例３のセラミドを主成分として含有する組成物１を、ブタ（豚）脳から製造した。具体的には、ブタ脳１００ｇをクロロホルムとメタノールの混合溶液（クロロホルム：メタノール＝２：１）で均一化し、ろ過した。このろ過液に１ｍｏｌ／１０００ｃｍ3 の水酸化カリウムとエタノール溶液を加えて、リン脂質を分解した。
次に、酢酸を加えて中和し、Ｆｏｌｃｈ分配法の下層を取り出し、ロータリーエバポレータを用いて溶媒を留去し、セラミドを含有する組成物を得た。
最後に、上記組成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、ブタ脳由来の実施例３の白色の組成物１５００ｍｇを得た。
そして、実施例１と同様に、ＨＰＬＣ及びシリカゲル薄層クロマトグラフィーによる分析を行った。その結果、実施例３の組成物１のセラミド純度は９８％であり、この組成物１には脂肪酸が含有されていないことが分かった。Composition 1 containing the ceramide of Example 3 as a main component was produced from pig brain. Specifically, 100 g of pig brain was homogenized with a mixed solution of chloroform and methanol (chloroform:methanol=2:1) and filtered. To this filtrate, 1 mol/1000 cm 3 of potassium hydroxide and an ethanol solution were added to decompose phospholipids.
Next, acetic acid was added for neutralization, the lower layer of the Folch partition method was taken out, the solvent was distilled off using a rotary evaporator, and a composition containing ceramide was obtained.
Finally, the above composition was purified by silica gel column chromatography to obtain 1500 mg of a porcine brain-derived white composition of Example 3.
Then, in the same manner as in Example 1, analysis by HPLC and silica gel thin layer chromatography was performed. As a result, it was found that the ceramide purity of the composition 1 of Example 3 was 98%, and this composition 1 did not contain a fatty acid.

実施例４のセラミドを主成分として含有する組成物１を、米ぬかから製造した。具体的には、米ぬか由来のガム油１００ｇに１ｍｏｌ／１０００ｃｍ3 の水酸化カリウムとエタノール溶液を加えて、リン脂質を分解した。
次に、酢酸を加えて中和し、Ｆｏｌｃｈ分配法の下層を取り出し、ロータリーエバポレータを用いて溶媒を留去し、セラミドを含有する組成物を得た。この組成物をアセチル化し、組成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離した。
上記組成物を脱アセチル化し、透析により塩を取り除き、さらに、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、米ぬか由来のガム油から実施例４の白色の組成物１０００ｍｇを得た。
そして、実施例１と同様に、ＨＰＬＣ及びシリカゲル薄層クロマトグラフィーによる分析を行った。その結果、実施例４の組成物１のセラミド純度は９９％であり、脂肪酸が含有されていないことが分かった。Composition 1 containing the ceramide of Example 4 as a main component was produced from rice bran. Specifically, 1 mol/1000 cm 3 of potassium hydroxide and an ethanol solution were added to 100 g of rice bran-derived gum oil to decompose phospholipids.
Next, acetic acid was added for neutralization, the lower layer of the Folch partition method was taken out, and the solvent was distilled off using a rotary evaporator to obtain a composition containing ceramide. The composition was acetylated and the composition was separated by silica gel column chromatography.
The above composition was deacetylated, salts were removed by dialysis, and further purified by silica gel column chromatography to obtain 1000 mg of the white composition of Example 4 from gum oil derived from rice bran.
Then, in the same manner as in Example 1, analysis by HPLC and silica gel thin layer chromatography was performed. As a result, it was found that the composition 1 of Example 4 had a ceramide purity of 99% and contained no fatty acid.

米ぬか由来のガム油の代わりに、とうもろこし由来のガム油ｇを用いた以外は、実施例４の組成物１と同じ製造方法を用いて、本発明のとうもろこし由来の実施例５の組成物１を製造した。ガム油１００ｇから白色の組成物１１００ｍｇが得られた。
そして、実施例１と同様に、ＨＰＬＣ及びシリカゲル薄層クロマトグラフィーによる分析を行った。その結果、実施例５の組成物１のセラミド純度は９８％であり、この組成物１には脂肪酸が含有されていないことが分かった。Composition 1 of Example 5 derived from corn of the present invention was prepared using the same production method as that of Composition 1 of Example 4 except that gum oil g derived from corn was used instead of gum oil derived from rice bran. Manufactured. 1100 mg of white composition was obtained from 100 g of gum oil.
Then, in the same manner as in Example 1, analysis by HPLC and silica gel thin layer chromatography was performed. As a result, it was found that the ceramide purity of the composition 1 of Example 5 was 98%, and the composition 1 did not contain a fatty acid.

実験動物としてＣ５７ＢＬ／６Ｊマウス（オス６週齢）を使用し、ＡＩＮ−９３Ｇ組成飼料で１週間の予備飼育した後、実施例のマウスには、飼料として、ＡＩＮ−９３Ｇ組成飼料に上記米ぬか由来の実施例１の組成物１を０．５％添加した飼料及びイオン交換水を自由摂取させた（以下、Ｒ群と呼ぶ）。
また、別のマウスには、飼料として、上記実施例２のこんにゃく由来の組成物１を０．５％添加した飼料及びイオン交換水を自由摂取させた（以下、Ｋ群と呼ぶ）。
比較例のマウス（以下、Ｄ群と呼ぶ）には、ＡＩＮ−９３Ｇ組成飼料とイオン交換水を自由摂取させた。予備飼育の後、上記飼料を２週間投与後、屠殺して肝臓を摘出した。
ここで、実施例１及び２の飼料のセラミド濃度を同じにするために、実施例２の飼料には、適量のβサイクロデキストリンを添加した。また、比較例の飼料にも、βサイクロデキストリンを添加した。C57BL/6J mice (male 6 weeks old) were used as experimental animals and preliminarily reared for 1 week with the AIN-93G composition feed. The diet containing 0.5% of the composition 1 of Example 1 and ion-exchanged water were freely ingested (hereinafter, referred to as R group).
In addition, another mouse was allowed to freely ingest a feed containing 0.5% of the composition 1 derived from konjac of Example 2 and ion-exchanged water as feed (hereinafter, referred to as group K).
The mice of Comparative Examples (hereinafter referred to as group D) were allowed to freely take the AIN-93G composition feed and ion-exchanged water. After preliminary breeding, the above feed was administered for 2 weeks, and then the animals were sacrificed and the liver was excised.
Here, in order to make the ceramide concentrations of the feeds of Examples 1 and 2 the same, an appropriate amount of β-cyclodextrin was added to the feed of Example 2. In addition, β cyclodextrin was also added to the feed of the comparative example.

次に、本発明の体内脂肪の分解促進作用を有する組成物の体内脂肪の分解促進作用を、遺伝子により測定した結果について説明する。
２週間の実験飼料投与後、各群のマウスから肝臓を摘出してトリゾール試薬（インビトロ社製、商品名ＴＲＩＺＯＬ）で全ＲＮＡを抽出し、その後ターゲットｃＲＮＡを調整し、遺伝子発現用プレアレイスライド（Ｍｏｕｓｅ Ｂｉｏａｒｒａｙ社、商品名：ＣｏｄｅＬｉｎｋ及びＵｎｉｓｅｔ）にハイブリダイゼーションを行った。この際、蛍光標識となる蛍光体として、Ｓｔｒａｐｔａｖｉｄｉｎ−Ｃｙ５を用い、その蛍光強度をマイクロアレイスキャンナー（Ａｘｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製、モデルＧｅｎｅ Ｐｉｘ ４０００Ｂ Ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ Ｓｃａｎｎｅｒ）で検出し、ＲＮＡによる発現遺伝子の定量を行なった。Next, the results of gene measurement of the action of promoting the degradation of body fat of the composition having the action of promoting the degradation of body fat of the present invention will be described.
After the administration of the experimental feed for 2 weeks, the liver was extracted from each group of mice, total RNA was extracted with Trizol reagent (Invitro Co., trade name TRIZOL), and then the target cRNA was adjusted and pre-array slide for gene expression ( Hybridization was performed with Mouse Bioarray, trade name: CodeLink and Uniset). At this time, Straptavidin-Cy5 was used as a fluorophore to be a fluorescent label, and its fluorescence intensity was detected by a microarray scanner (Model Gene Pix 4000B Microarray Scanner, manufactured by Axon Instruments) to quantify the expressed gene by RNA. ..

実施例１のＲ群及び実施例２のＫ群のｍＲＮＡ発現パターンを、比較例のＤ群を基準にして、その発現パターンを調べた。
図２は、実施例及び比較例のマウスの各群の肝臓細胞のマイクロアレイスキャンナーによるｍＲＮＡ発現パターンを示す図であり、それぞれ、（ａ）は実施例１のＲ群、（ｂ）は実施例２のＫ群、（ｃ）は比較例のＤ群の場合を示している。図２から明らかなように、Ａ及びＥの発現遺伝子部位のデータから、Ｒ群及びＫ群の遺伝子発現は、Ｄ群のそれよりも多いことが分かる。Ｂの発現遺伝子部位のデータから、Ｒ群の遺伝子発現は、Ｄ群のそれよりも多いが、Ｋ群では発現しないことが分かる。Ｃ及びＧの発現遺伝子部位のデータから、Ｒ及びＫ群の遺伝子発現は、Ｄ群のそれよりも少ないことが分かる。上下に示すＤの発現遺伝子部位のデータから、Ｒ群及びＫ群の遺伝子発現はＤ群のそれよりも多くなったり、低下したりしていることが分かる。Ｆの発現遺伝子部位のデータから、Ｒ群の遺伝子発現はＤ群のそれよりも著しく少なく、Ｋ群の遺伝子発現はＣ群のそれよりも多いことが分かる。The mRNA expression patterns of the R group of Example 1 and the K group of Example 2 were examined with reference to the D group of the comparative example.
FIG. 2 is a diagram showing an mRNA expression pattern of a liver cell of each group of mice of Examples and Comparative Examples by a microarray scanner, (a) is the R group of Example 1, and (b) is the Example. 2 shows the group K, and (c) shows the case of the comparative group D. As is clear from FIG. 2, the data of the expressed gene sites of A and E show that the gene expression of R group and K group is higher than that of D group. From the data of the expressed gene region of B, it can be seen that the gene expression in the R group is higher than that in the D group, but not in the K group. From the data of the expressed gene sites of C and G, it can be seen that the gene expression of the R and K groups is less than that of the D group. From the data of the expressed gene region of D shown at the top and bottom, it can be seen that the gene expression of the R group and the K group is higher or lower than that of the D group. From the data of the expressed gene region of F, it can be seen that the gene expression of the R group is significantly lower than that of the D group, and the gene expression of the K group is higher than that of the C group.

図３は、図２の蛍光強度から計算される実施例及び比較例のｍＲＮＡ発現量の相対比を示す表である。なお、実施例１のＲ群及び実施例２のＫ群の値は、Ｄ群を１としたときの、ｍＲＮＡ発現量である。図から明らかなように、実施例１の組成物１によるＲ群及び実施例２の組成物１によるＫ群の甲状腺ホルモン受容体β５のｍＲＮＡ（メッセンジャーＲＮＡ）発現量が、それぞれ、１．２１７８、１．１１５６であり、比較例のＤ群よりも増加し、そして、実施例１のＲ群のほうが実施例２のＫ群よりも大きいことが分かった。
これにより、実施例の組成物１によるＲ群及びＫ群の主成分であるセラミド２が、標的細胞４の甲状腺ホルモン受容体β５の遺伝子発現を促進し、標的細胞４内の解糖系７の代謝を活性化させ、代謝促進を促すことが明らかとなった。FIG. 3 is a table showing relative ratios of mRNA expression levels of Examples and Comparative Examples calculated from the fluorescence intensity of FIG. The values of the R group of Example 1 and the K group of Example 2 are mRNA expression levels when the D group is 1. As is clear from the figure, the thyroid hormone receptor β5 mRNA (messenger RNA) expression levels of the R group by composition 1 of Example 1 and the K group by composition 1 of Example 2 were 1.2178, It was found to be 1.1156, which was higher than the D group of the comparative example, and was larger in the R group of Example 1 than in the K group of Example 2.
As a result, the ceramide 2 which is the main component of the R group and the K group according to the composition 1 of Example promotes the gene expression of the thyroid hormone receptor β5 in the target cell 4, and the glycolytic system 7 in the target cell 4 It became clear that it activates metabolism and promotes metabolism promotion.

標的細胞４内の糖代謝関連酵素のうち、実施例のＫ、Ｒ群において、ヘキソキナーゼ、ホスホフルクトキナーゼのｍＲＮＡ発現量はＤ群に比べて増加している。一方、実施例のＫ、Ｒ群において、糖代謝関連酵素であるフルクトースビスホスファターゼのｍＲＮＡ発現量は、Ｄ群に比べて減少している。
このため、解糖系７が亢進している可能性が考えられるが、ＴＣＡサイクル１０の律速酵素のｍＲＮＡ発現量は、Ｋ及びＲ群がＤ群とは顕著な差を示さないので、解糖系７で産生されたアセチルＣｏＡ８の代謝経路はＴＣＡサイクル１０以外にあると推定した。Among the glucose metabolism-related enzymes in the target cells 4, the mRNA expression levels of hexokinase and phosphofructokinase in the K and R groups of the example are higher than those in the D group. On the other hand, in the K and R groups of the example, the mRNA expression level of fructose bisphosphatase, which is a sugar metabolism-related enzyme, is lower than that in the D group.
Therefore, it is possible that glycolysis system 7 is enhanced, but the mRNA expression level of the rate-limiting enzyme of TCA cycle 10 is not significantly different between the K and R groups and the D group. It was presumed that the metabolic pathway of acetyl-CoA8 produced in system 7 is outside TCA cycle 10.

上記アセチルＣｏＡ８は脂肪酸の合成に必要な成分である。そこで、脂肪酸合成の経路を解析した結果、脂肪酸合成に関与する酵素のｍＲＮＡ量には、実施例１，２及び比較例において大きな変動はなかった。   The acetyl CoA8 is a component required for fatty acid synthesis. Therefore, as a result of analyzing the pathway of fatty acid synthesis, there was no large change in the mRNA amount of the enzyme involved in fatty acid synthesis in Examples 1 and 2 and Comparative Example.

次に、細胞内のβ酸化１３についての解析を行った。
細胞内のミトコンドリア９内に脂肪酸が取り込まれるためには、アセチルＣｏＡ８に、カルニチン１４が結合する必要がある。カルニチンアセチルトランスフェラーゼ１５は、このカルニチン１４の受け渡しに関与している酵素である。
図３から明らかなように、β酸化１３の代謝関連酵素であるカルニチンアセチルトランスフェラーゼ１５のｍＲＮＡ発現量は、実施例のＲ群、Ｋ群において、それぞれ、１．４６２９、１．３８０６であり、比較例のＤ群よりも増加し、Ｒ群のほうがＫ群よりも大きいことが分かった。Next, intracellular β-oxidation 13 was analyzed.
Carnitine 14 needs to bind to acetyl CoA8 in order for fatty acid to be taken into intracellular mitochondria 9. Carnitine acetyltransferase 15 is an enzyme involved in the delivery of carnitine 14.
As is clear from FIG. 3, the mRNA expression levels of carnitine acetyltransferase 15, which is a metabolism-related enzyme of β-oxidation 13, are 1.4629 and 1.3806 in the R group and K group of the example, respectively. It was found that the increase was larger than that of the D group, and that the R group was larger than the K group.

実施例３〜５の組成物１の場合にも、上記実施例１及び２と同様の遺伝子測定の結果が得られた。   In the case of the composition 1 of Examples 3 to 5, the same gene measurement results as in Examples 1 and 2 were obtained.

これにより、実施例の組成物１によるＲ群及びＫ群の主成分であるセラミド２が、標的細胞４内のβ酸化１３の代謝関連酵素であるカルニチンアセチルトランスフェラーゼ１５の遺伝子発現を促進し、脂肪酸のβ酸化１３を亢進し、エネルギー産生を促進することが明らかとなった。   As a result, the ceramide 2 which is the main component of the R group and the K group by the composition 1 of Example promotes the gene expression of the carnitine acetyltransferase 15 which is a metabolism-related enzyme of the β-oxidation 13 in the target cell 4, and the fatty acid It was clarified that β-oxidation 13 was promoted to promote energy production.

上記実施例から分かるように、実施例の組成物１の主要成分であるセラミド２を摂取させることで、標的細胞４の甲状腺ホルモン受容体β５の遺伝子発現を促進させ、細胞内の解糖系７及びβ酸化１３を促進し、脂肪や糖のエネルギー産生が亢進することが見出された。   As can be seen from the above examples, ingestion of ceramide 2 which is the main component of composition 1 of the examples promotes the gene expression of thyroid hormone receptor β5 in target cells 4 to induce intracellular glycolysis 7 And β-oxidation 13 were promoted, and energy production of fats and sugars was found to be enhanced.

本発明は、上記実施例に限定されることなく、特許請求の範囲に記載した発明の範囲内で種々の変形が可能であり、それらも本発明の範囲内に含まれることはいうまでもない。例えば、本発明のセラミド２の抽出方法などは、上記実施例に限らないことはいうまでもない。   The present invention is not limited to the above embodiments, and various modifications are possible within the scope of the invention described in the claims, and it goes without saying that they are also included in the scope of the present invention. .. For example, it goes without saying that the method for extracting ceramide 2 of the present invention is not limited to the above-mentioned examples.

【０００３】
牛脳などがある。
［０００６］
最近、セラミドは皮膚の保護保湿機能の他に、癌細胞を死亡させる所謂細胞死機能（アポトーシス）を有するという発表がされている（例えば、非特許文献１参照）。
［０００７］
【特許文献１】特開２０００−１６９１６号公報
【特許文献２】特開２００３−１８３１４８号公報
【特許文献３】特開２００４−３５４５６号公報
【特許文献４】特開平７−１７９４１０号公報
【非特許文献１】木下 幹郎 他７名、「スフィンゴイド塩基による大腸ガン細胞死の誘導とその機能」、日本農芸化学会大会講演要旨集、３Ａ１７ｐ１３、ｐ．２１２、２００３年
【非特許文献２】杉田陸海 他、新生化学実験講座 ４、脂質ＩＩＩ−糖脂質、ｐｐ．８１〜９２、ｐｐ．１０９〜１１１、日本生化学会編、（株）東京化学同人発行、１９９０年
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
［０００８］
従来、セラミドは專ら皮膚の保護保湿機能に着目されており、他の生理機能に及ぼす効果が殆ど知られていない。
［０００９］
本発明は、上記課題に鑑み、細胞の解糖系における体内脂肪及び糖のエネルギー産生を促進させる効果を有する、体内脂肪の分解促進作用を有する組成物及びそれを含有する食品又は食品配合剤を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
［００１０］
本発明者らは、セラミドをマウスに経口投与してその生体内への作用を詳細に研究した。その結果、セラミドが従来知られていなかった体内の脂肪や糖のエネルギー産生の促進機能を有することを見出し、本発明に想到したものである。
［００１１］
上記目的を達成するため、本発明の体内脂肪の分解促進作用を有する組成物は、下記一般式（２）又は（３）の化学式で表わされ、植物、真菌、酵母、茸、動物、昆虫の何れかを由来とするセラミドを主成分とし、上記セラミドが５５重量％以上含有され、セラミドを主成分として含有する組成物が、標的細胞の甲状腺ホルモン受容体βの遺伝子発現量を増加させることによって脂肪分解を促進し、かつ、β酸化の脂質代謝関連酵素であるカルニチンアセチルトランスフェラーゼの遺伝子発現量を増加させることによって体内の脂肪及び糖のエネルギー産生を促進させることを特徴とする。
【化２】
【化３】
ここで、Ｒ２，Ｒ３は長鎖アルキル基又は長鎖アルケニル基であり、Ｇｌｕはグルコースであり、Ｇａｌはガラクトースである。
上記構成において、セラミドは、好ましくは、米ぬかからの抽出工程によって製造される。また、セラミドは、こんにゃく、小麦、とうもろこしの何れか[0003]
There is a cow brain.
[0006]
Recently, it has been announced that ceramide has a so-called cell death function (apoptosis) that kills cancer cells, in addition to the skin's protective moisturizing function (see, for example, Non-Patent Document 1).
[0007]
[Patent Document 1] JP-A 2000-16916 [Patent Document 2] JP-A 2003-183148 [Patent Document 3] JP-A 2004-35456 [Patent Document 4] JP-A 7-179410 [Non-Patent Document 1] Patent Document 1: Mikiro Kinoshita and 7 others, "Induction of colorectal cancer cell death by sphingoid base and its function", Proc. 212, 2003 [Non-patent Document 2] Rikukai Sugita et al., New Chemistry Laboratory 4, Lipid III-glycolipids, pp. 81-92, pp. 109-111, edited by The Japanese Biochemical Society, published by Tokyo Kagaku Dojin, 1990 [Disclosure of Invention]
[Problems to be Solved by the Invention]
[0008]
Heretofore, ceramide has been paid attention to the protective and moisturizing function of the skin, and its effect on other physiological functions is hardly known.
[0009]
In view of the above problems, the present invention has an effect of promoting energy production of body fat and sugar in the glycolysis system of cells, a composition having a function of promoting decomposition of body fat, and a food or food blend containing the same. It is intended to be provided.
[Means for Solving the Problems]
[0010]
The present inventors orally administered ceramide to mice and studied the effect on the body in detail. As a result, they have found that ceramide has a conventionally unknown function of promoting energy production of fat and sugar in the body, and have conceived the present invention.
[0011]
In order to achieve the above object, the composition of the present invention having an action of promoting the decomposition of body fat is represented by the chemical formula of the following general formula (2) or (3), and is used for plants, fungi, yeasts, mushrooms, animals and insects. A composition containing ceramide derived from any of the above as a main component, containing 55% by weight or more of the above ceramide, and containing ceramide as the main component, increases the gene expression level of thyroid hormone receptor β in target cells. Is characterized by promoting lipolysis and increasing the gene expression level of carnitine acetyltransferase, which is an enzyme involved in lipid metabolism of β-oxidation, thereby promoting energy production of fat and sugar in the body.
[Chemical 2]
[Chemical 3]
Here, R 2 and R 3 are long-chain alkyl groups or long-chain alkenyl groups, Glu is glucose, and Gal is galactose.
In the above constitution, the ceramide is preferably produced by an extraction process from rice bran. Ceramide is either konjac, wheat, or corn.

Claims (8)

セラミドを主成分として含有し、体内の脂肪及び糖のエネルギー産生を促進させることを特徴とする、体内脂肪の分解促進作用を有する組成物。   A composition containing ceramide as a main component, which promotes energy production of fat and sugar in the body, and which has an action of promoting decomposition of body fat. 前記セラミドが、植物、真菌、酵母、茸、動物、水生生物、昆虫の何れかによる抽出工程によって製造されることを特徴とする、請求項１に記載の体内脂肪の分解促進作用を有する組成物。   The composition having an action of promoting the decomposition of body fat according to claim 1, wherein the ceramide is produced by an extraction process using any one of plants, fungi, yeasts, mushrooms, animals, aquatic organisms, and insects. .. 前記セラミドが、米ぬかからの抽出工程によって製造されることを特徴とする、請求項１に記載の体内脂肪の分解促進作用を有する組成物。   The composition having an action of promoting the decomposition of body fat according to claim 1, wherein the ceramide is produced by an extraction process from rice bran. 前記セラミドが、こんにゃく、小麦、とうもろこし、牛脳の何れかによる抽出工程によって製造されることを特徴とする、請求項１に記載の体内脂肪の分解促進作用を有する組成物。   The composition having an action of promoting the decomposition of body fat according to claim 1, wherein the ceramide is produced by an extraction step using any one of konjac, wheat, corn, and bovine brain. 前記セラミドが、５５重量％以上含有されることを特徴とする、請求項１に記載の体内脂肪の分解促進作用を有する組成物。   The composition having an action of promoting the decomposition of body fat according to claim 1, wherein the ceramide is contained in an amount of 55% by weight or more. 前記セラミドを主成分として含有する組成物が、標的細胞の甲状腺ホルモン受容体βの遺伝子発現量を増加させることによって脂肪分解を促進し、かつ、β酸化の脂質代謝関連酵素であるカルニチンアセチルトランスフェラーゼの遺伝子発現量を増加させることによって体内の脂肪及び糖のエネルギー産生を促進させることを特徴とする、請求項１に記載の体内脂肪の分解促進作用を有する組成物。   A composition containing the ceramide as a main component promotes lipolysis by increasing the gene expression level of thyroid hormone receptor β in target cells, and of carnitine acetyltransferase, which is a lipid metabolism-related enzyme of β-oxidation. The composition having the action of promoting the decomposition of body fat according to claim 1, which promotes energy production of fat and sugar in the body by increasing the gene expression level. 請求項１〜６の何れかに記載の体内脂肪の分解促進作用を有する組成物を含有し、体内脂肪及び糖のエネルギー産生を促進することを特徴とする、食品又は食品配合剤。   A food or a food compound, comprising the composition having the action of promoting the decomposition of body fat according to any one of claims 1 to 6, and promoting energy production of body fat and sugar. さらに、カルニチンを含有していることを特徴とする、請求項７に記載の食品または食品配合剤。   Furthermore, the food or food compound according to claim 7, characterized in that it contains carnitine.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009084275A1 (en) * 2007-12-28 2009-07-09 Unitika Ltd. Composition for oral administration
JP5981088B2 (en) * 2010-07-12 2016-08-31 花王株式会社 Energy consumption promoter
CN104522632B (en) * 2014-12-05 2017-01-04 湖北金鹰生物科技有限公司 A kind of fat-reducing nutrient meals
KR102041852B1 (en) * 2017-06-30 2019-11-07 한국 한의학 연구원 Composition for preventing, improving or treating fatty liver disease comprising Oxya chinensis extract as effective component
WO2019004734A2 (en) * 2017-06-30 2019-01-03 한국 한의학 연구원 Composition for preventing, alleviating, or treating fatty liver disease, comprising oxya chinensis extract as active ingredient
CN111317129A (en) * 2020-03-21 2020-06-23 湖南共创时代电子商务有限公司 Composition and granules for decomposing oil
CN116462605A (en) * 2023-03-09 2023-07-21 四川晗晨生物科技有限公司 Extraction method of plant-derived ceramide

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH059193A (en) * 1990-11-08 1993-01-19 Kirin Brewery Co Ltd New glycosphingolipid, its production and use thereof
JPH0559081A (en) * 1991-08-29 1993-03-09 Kirin Brewery Co Ltd New sphingoglycolipid, its production and use
JP2002275072A (en) * 2001-03-21 2002-09-25 Snow Brand Milk Prod Co Ltd Lipid metabolism ameliorant
JP2004035456A (en) * 2002-07-03 2004-02-05 Pola Chem Ind Inc Promoter for keratinocyte maturation and oral administration composition containing the same

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2700788A (en) * 1987-12-18 1989-06-22 City Of Hope Inhibition of lipogenesis
US4952567A (en) * 1988-05-09 1990-08-28 City Of Hope Inhibition of lipogenesis
JP3814419B2 (en) * 1998-06-29 2006-08-30 花王株式会社 Lipolysis promoter and slimming skin cosmetics
JP2004329047A (en) * 2003-05-01 2004-11-25 Occ:Kk Dietary supplement
JP2005245419A (en) * 2004-03-04 2005-09-15 Hideyo Sasaya Healthy food

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH059193A (en) * 1990-11-08 1993-01-19 Kirin Brewery Co Ltd New glycosphingolipid, its production and use thereof
JPH0559081A (en) * 1991-08-29 1993-03-09 Kirin Brewery Co Ltd New sphingoglycolipid, its production and use
JP2002275072A (en) * 2001-03-21 2002-09-25 Snow Brand Milk Prod Co Ltd Lipid metabolism ameliorant
JP2004035456A (en) * 2002-07-03 2004-02-05 Pola Chem Ind Inc Promoter for keratinocyte maturation and oral administration composition containing the same

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