JPS6379596A - ヒトα↓２−プラスミンインヒビタ−のアミノ酸配列及び遺伝子断片 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ａ、産業上の利用分野 本発明はヒトα、−フラスミンインヒビター（ａ、　−
ｐｌａ＠ｍｉｎ　１ｎｈｉｂｉｔｏｒ　；　ａ鵞−ａｎ
ｔｉｐｌａｓｍｉｎ　）を構成するアミノ酸配列及びそ
れをコードする遺伝子断片に関するものである。

ｂ、従来技術 ヒトのα、−プラスミンインヒビターハ、宵木と緒井に
よつ又最初に単離・１裂され、線りｔ素溶解酵素のプラ
スミン（ｐｌａｓｍｉｎ　）のエステラーゼ活性を瞬間
的に阻害する強力なプラスミンインヒビタ−であり、１
１．７％の概鎖を含む分子を約６７．０００の１本鎖の
糖蛋白質であることが知られている（　ＭｏＭｏｒｏｉ
　＆　Ｎ、　Ａｏｋｌ　；　ＴｈｅＪｏｕｒｎａｌ　ｏ
ｆ　ｔｌｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　、
　２５１　。

５９５６−５９６５（１９７６）５照〕。

一方、ヒトのα２−プラスミンインヒビターには３種類
の活性部位があることが知られている。

第１は、プラスミンの綽維素浴解作用阻害部位（以下こ
れを１リアクテイブサイト′　ということがある）〔Ｈ
０〜Ｖｉｍａｎ　＆　Ｄ、　Ｃｏ１１ｅｎ　；　Ｔｈｅ
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈｅ
ｍｔｓｔｒｙ　ｒ　　２５４　。

９２９１−９２９７（１９７９）＃照〕であり、第２は
カルボキシ末端儒のプラスミン結合部位（Ｂ、Ｗｉｍａ
ｎ　＆　Ｄ、ｅｏｌｌｅｎ　；　Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｊ
ｏｕｒｎａｌｏｆ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　、　８
４．５７３−５７８　（１９７８）参照〕であり、第３
はアミノ末端側のフィブリン結合部位である［　Ｙ、５
ａｋａｔａ　ｅｔ　ａｌ、　；Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ　
Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　＊　１６ｅ　２７９−２８２（１９
７９）参照〕。

ヒトαオープラスミンインヒビタ−におけるこれら３オ
・ｉ類の活性部位のうち、フィブリン結合部位はヒトα
オープラスミンインヒビターの７５／末端より２番目の
７ｊノ酸であるＧｌｎであることが確かめられ℃いろ〔
Ｔ、Ｔａｍａｋｉ　＆　Ｎ、Ａｏｋｉ；　Ｔｈｅ　Ｊｏ
ｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉ
ｓｔｒｙ　。

２５７、１４７６７−１４７７２（１９８２）β照〕。

また、プラスミン結合部位を含む２６アミノ醒かも成る
ペプチド断片も知られ℃おり、このペプチド断片ｒよ、
ヒトαオープラスミンインヒビタ−のカルボキシ末端近
くに存在する事も報告され℃いる（　’ｒ、Ｓａａａｋ
ｉｗ　ｅｔ　ａｌ、　；　Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏ
ｆＢｉｏｅｈｅｍ１ｇｔｒｙ＋　９Ｌ　１６９９−１７
０５（１９８６）参照〕が、その位置は明らかではない
。またヒトαオープラスミンインヒビターのり７クテイ
ブサイトに関し又は、Ｌｅｕ　−Ｍｅｔであるという報
告ＣＢ、ＷＩｍａｎ　＆　Ｄ、Ｃｏ１１ｅｎ　；　Ｔｈ
ｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈ
ｅｍｉｓｔｒｙ　、　２５４．９２９１−９２９７（１
９７９）参照〕或ｒｉＡｒｇ　−Ｍｅｔであるという記
１ａ　（Ｈ，Ｒ，Ｌｔｊｎｅｎ　＠ｔ　ａｌ、　；　Ｔ
ｈｒｏｍｂｏｓｉｓＲｅｓｅａｒｃｈ　、　３９．６２
５−６３０　（１９８５）参照〕はあるもののその位置
は明らかとはなっていない。これらプラスミン結合部位
、及びリアクチ・ｆプサイトの構造、その周辺の摘遺１
位置が明らかとなればヒトαオープラスミンインヒビタ
−との醜争剤（Ｃｏｍｐｅｔｉｔｏｒ　）としての利用
及び開発等に関し、非常に有益であり、興味のあること
である。

一方、ヒトα、−フラスミンインヒビターの一部あるい
は全部をフードする遺伝子（断片）は取られ℃いない。

この遺伝子もしくはその断片が得られれば、ヒトαオー
プラスミンインヒビタ−の一部、あるいは全部を遺伝子
操作手法により生産することも可能となる。また、この
遺伝子もしくはその断片を利用し℃、ヒトα、−プラス
ミンインヒビター欠損症の診断も可能となると思われる
。

Ｃ０本発明の構成 本発明者らは、ヒトαオープラスミンインヒビタ−遺伝
子につい℃研究をおこなった結果、ヒトαオープラスミ
ンインヒビタ−のカルボキシ末端より２７４個のアミノ
酸配列をコードする８　２２１Ｗのヌクレオチドを含む
ヒトαアープラスきンインヒビターの相４ＤＮＡ（以下
ＣＤＮＡと略記する）を単離し、その塩基配列の解析に
よってヒトαオープラスミンインヒビタ−のカルボキシ
端側の詳細な構造が明らかとなり本発明に到達した。

すなわち、本発明は添付第１図における第１番目（Ｇｌ
ｕ　）から第２７４番目（Ｌｙｓ　）までのアミノ酸配
列で示されたヒトαツープラスミンインヒビタ−断片を
コードした遺伝子断片であり、また該遺伝子断片が添付
第１１罠おける第１：ｆｌｉ目（Ｇ）から第８２２着目
ＣＧ）までの塩基配列で示されたものである遺伝子断片
であり、また添付第１図における第１着目（ａｌｕ　）
から第２７４番目（Ｌｙｓ　）までのアミノ酸配列で示
されたヒトαオープラスミンインヒビタ−のアミノ酸配
列であり、また添付第１図のアミノ酸配列における第１
８７ｉ目（Ｓａｒ）、Ｍ１８６番目（Ａｒｇ）。

第１８７ｉ目（Ｍ＠ｔ　）または第１８７ｉ目（Ｓｓｒ
　）のいずれかのアミノ酸を７ミノ末端とし、第２７４
番目（Ｌｙｓ　）までのアミノ酸をカルボキシ末端とす
るアミノ酸配列である。

前記本発明の２７４１固のアミノ酸配列中に：はヒトα
、−フラスミンインヒビターのプラスミン結合部位及び
リアクティブサイトが含まれる。

特にプラスミン結合部位を含む２６アミノ酸（添付第１
図にアンダーラインで示す）は、ヒトαオープラスミン
インヒビタ−の最もカルボキシｎ側に見出された。また
、リアクティブサイトは、カルボキシ端より９１番目よ
り８７７番目でのＭ＠ｔ　−Ａｒｇ　−Ｍｅｔ　−Ｓｅ
ｒの中に見出される。また本宛明は、プラスミンとヒト
αオープラスミンインヒビタ−が反応してプラスミン−
ヒトαオープラスミンインヒビタ−複合体を形成した時
に遊離される低分子ベブ枡ド（分子量約１０．０００）
である。すなわち、この低分子ペプチドの７ミノ末端は
第１図に示されたアミノ酸配列の１８５番目のＳｅｒ　
、或は１８６番目のＡｒｇ　、或は１８７番目のＭｅｔ
或は１８８番目のＳｅｔのいずれかを７ミ／末端とし、
２７４番目のＬｙｓをカルボキシ末端とする９０〜８７
アミ７ｆ１！より成るペプチドである。

以下実施例を掲げてヒト肝細胞よりメツセンジャーＲＮ
Ａ　（以下’　ｍＲＮＡ　’と記す）の単離。

ｅＤＮＡライブラリーの作製、ヒトαオープラスミンイ
ンヒビタ−のスクリーニング、ヒトαｆ−プラスミンイ
ンヒビタ−ｃＤＮＡの制限エンドヌクレアーゼ（以下１
制＠ｅ＃索１と記す９切断地図の作製、ヒトαオープラ
スミンインヒビタ−ｃＤＮＡのリクローニング、ヒトα
オープラスミンインヒビタ−ｃＤＮＡの塩基配列の決定
について詳細に説明する。

なお、本明細書及び図面におい℃、アミノ酸。

ポリペプチドはＩＵＰＡＣ−ＩυＢ生化学安員会（ＣＢ
Ｓ）で採用された方法により略記するものとし、たとえ
ば下記の略号を用いる。

Ａｌａ　　Ｌ−アラニン Ａｒｇ　　Ｌ−フルギニン Ａａｎ　　Ｌ−アスパラギン Ａｓｐ　　Ｌ−アスパラギン酸 Ｃｙａ　　Ｌ−システィン Ｇｉｎ　　Ｌ−グルタミン Ｇｌｕ　　Ｌ−グルタミン酸 Ｇ１７　　グリシン Ｈｉｓ　　Ｌ−ヒスチジン ＩＩｓ　　Ｌ−インクイシン Ｌｓｕ　　Ｌ−ロイシン Ｌｙｓ　　Ｌ−リジン Ｆｉｔｅｔ　　Ｌ−メチオニン Ｐｈｅ　　Ｌ−フェニルアラニン Ｐｒｏ　　Ｌ−プロリン Ｓｅｒ　　Ｌ−セリフ Ｔｈｒ　　Ｌ−スレオニン Ｔｒｐ　　Ｌ−トリプトファン Ｔｙｒ　　Ｌ−チロシン Ｖａｔ　　Ｌ−バリン また、ＤＮＡの配列はそれを構成する各デオキシリボヌ
クレオチドに含まれる塩基のα類で略記するものとし、
たとえば下記の略号を用いる。

Ａ　アラニン（デオキシアデニル酸を示す。）Ｃシトシ
ン（デオキシシチジル酸な示す。）Ｇ　グアニン（デオ
キシグアニル酸を示す。）Ｔ　チミン　（デオキシチミ
ジル酸を示す。）噸施例１　ヒト肝細胞よりｒｎＲＮＡ
の単離ヒト肝細胞よりｍＲＮＡの単離は、グアニジンチ
オシアネート法（Ｊ、Ｍ、Ｃｈｉｒｇｗｉｎ　ｅＬ　ｍ
ｌ、；Ｂｉｏｅｈｓｍｉｓｔｒｙ、　１８．５２９４−
５２９９（１９７９）参照〕に従った。ヒト肝細胞２Ｘ
１０’個に５ｄのＧＴＣ？Ｊｌ［（６Ｍグアニジンイン
チオシアネート、５ｍＭクエン酸ナトリウム、０，１Ｍ
２−メルカプトエタノール、０．５％Ｎ−ラウロイルザ
ルフンン酸ナトリウム）を加え、ホモゲナイズした。３
．８Ｌｔの５．７　Ｍ　　ＣａＣＡ！　、　　０．Ｉ　
Ｍ　Ｅ　Ｄ　Ｔ　Ａ水溶板の上に１層し、これをＲＰＳ
−４０Ｔローｐ−（ＨＩＴＡＣＨＩ）を用い”Ｃ１３５
，０００ｒＰで１５時間、２５℃で超遠心した。超遠心
麦注意Ｒ＜　ｍ叡を皐り除いた後、エタノール約１ａＺ
で３回リンスし、１．４ａｊの水に溶ｙｊ４後エタノー
ル沈澱させた。この沈澱を０．５　Ｍ　　ＮａＣ６、１
０ｍＭＴｒｉｓ　　ＨＣｌ　（ｐＨ７，５）　、　　１
　ｍ１ｖｌ　ＥＤＴＡ、　　０．０５％ＳＤＳの組成の
洗浄液０．５　Ｌｔに洛博し、０．５ａｊのＯｌｌｇｏ
　（ｄＴ　）セルロースカラムを通した。

このカラムを上記先浄液で洗った麦、ｌ　ＯｍＭＴｒｉ
ｇ　−［ｌＣＪ　　（ｐＨ７，５）、　　１　　ｍＭ　
ＥＤＴＡ。

０．０５％ＳＤＳの組成の溶出液で溶出し、約３１　μ
／のｐｏｌｙ　Ａ　　ｍＲＮＡを得た。

実施例２　　ｃＤＮＡライブラリーの作製ヒト肝細胞由
来ｐｏｌｙ　Ａ　ｍＲＮＡよりｃＤＮＡの合成は、Ｇｕ
ｂｌｓｒとＨｏｆｆｍａｎの方法（Ｕ、Ｇｕｂｌｅｒ＆
　Ｂ、Ｊ、Ｈｏｆｆｍａｎ　；　Ｇｅｎ５　ｅ　２Ｌ　
２６３−２６９（１９８３）参照〕Ｋ従い、アマージャ
ム製ｃＤＮＡ合成キットを用いておこなった。

Ｓ　ｔｔＭのｐｏｌｙ　Ａ　ｍＲＮＡ　　に５０ユニツ
トのヒト胎盤由来ＲＮａｓｅ阻ＭｍｌＡ　ｌｐａ■）の
存在下５　ｐＪｌのＯｌｉｇｏ　（ｄＴ）　１２−１８
を加え１００ユニツトの逆転写酵素を４２℃で１．５時
間働かせて約３０％の収率で１重鎖ｃ　Ｄ　ＮＡを合成
した。

この反応液に４ユニツトの大腸菌リボヌクレアーゼＨと
１１５ユニツトの大ＭＪ［ＤＮＡポリメラーゼエを加え
１２℃で１時間、２２℃で１時間反応させた後７０℃で
１０分間放置して酵素を失活させた。その後１０ユニツ
トのＴ　４　ＤＮＡポリメラーゼを加え３７℃で１ｏ分
間反応させて、約９５％の収率で２　＊　ｆ　ｅＤＮＡ
を得た。この２本領ｃｌ）ＮＡを２０ユニツトのＥｅｏ
ＲＩメチラーゼを３７℃で１時間反応させた後、Ｅｅｏ
ＲＩ　！Ｊンカー（宝ｆｉ造ａ）を結合させた。これに
１６ユニツトのＥｃｏＲＩ　（宝酒造装）を加え３７℃
で２時間反応させた後、５ｅｐｈａｒｏｓｅ　ＣＬ　−
４Ｂカラムを通し、純化し約０．８７ｚ／のｅ　Ｄ　Ｎ
　Ａ　を得た。

久にこのｅＤＮＡ　Ｏ，４ｔＪとλｇｔ　１０７−Ａ　
　１．１）μ９（ベクタークローニングシステムズ製）
との連結をおこない、ヒト肝ａｔ胞由来のｃＤＮＡが挿
入されたへイブリッドＤＮＡを得た。得られたハイブリ
ッドＤＮＡ　Ｋつぃ１　ｔｎ　ｖｌｔｒｏ　　パッケー
ジング（Ａ、Ｂｅｃｋｅｒ　＆　Ｍ、Ｇｏｌｄ　；　Ｐ
ｒｏｃ、　Ｎａｔｌ。

Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡ、７２−．５８１（１９７５
）参照〕をおこない、ヒト肝細胞由来ｃＤＮＡライブラ
リーを得た。

実施例３　ヒトαオープラスミンインヒビタ−のス…１
記実施例２で得られたヒト肝細抱山米ｃ　Ｄ　Ｎ　Ａラ
イブラリーを大ｉ菌Ｃ６００ｈｆＪ−株に感染させ、プ
ラークな形成させた。ヒトαオープラスミンインヒビタ
−遺伝子を含むククーンは、（”Ｐ）　で［！した＆ｆ
ｆＤＮＡ　Ｐ−１及びＰ−２をプローグとして用いＢｅ
ｎｔｏｎとＤａｖｉ８　　のプラークハイブリダイゼー
ション法（Ｗ、Ｄ、Ｂｅｎｔｏｎ＆　Ｒ３Ｗ、Ｄａｖｉ
ｓ　；　５ｃｉｅｎｃｅ　＊　１９　Ｌ　１８０−（１
９７７）参照〕に従って選別した。プローブとして用い
た合成り　Ｎ　Ａ　ＦｉＣｏｌｌｅｎ　　らによって報
告されていたしトα２−プラスミンインヒビターの部分
アミノ酸配列ＣＤ、Ｃｏ１１ｅｎ　ｅｔ　ａｌ、　；Ｔ
ｈｒｏｍｂｏｓｉｓ　ａｎｄ　Ｈａｅｍｏｓｔａｓｉｓ
　＊　４　Ｌ　３１１−３１４（１９８２）＃照〕と対
応するＤＮＡ配列をＤＮＡシンセサイザー（アプライド
・バイオシステムズ製）を用いて合成した。

（Ｐ−１）　　Ｍｅｔ　　Ｇｌｕ　　Ｇｌｕ　　Ａｓｐ
　　Ｔｙｒ　　Ｐｒ。

（）’　　２）　　　Ｖ＆ｌ　　Ｇｌｕ　　Ｍ＠ｔ　　
Ｍｅｔ　　Ｇｉｎ　　Ａｌａ′ｒ ヒトαオープラスミンインヒビタ−遺伝子を含むλｇｔ
　ｌ　Ｏ７アージからのＬ）ＮＡの調製は、Ｔｈｏｍａ
ａとＤａｖｌｓ　　の方法ＣＭ、Ｔｈｏｍａａ　＆　Ｒ
ｌＷ。

Ｄａｖｉｍ　；　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｏ１ｅｃｕ
ｌａｒ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　。

９１．３１５（１９７４）参照〕Ｋよりおこなった。

実施例３で得られたヒトαオープラスミンインヒビｐ　
−ｅＤＮＡを含むλｇｔｌＯＤＮＡをＥｃｏＲＩで消化
し、挿入されていたヒトαオープラスミンインヒビタ−
ｃＤＮＡを切り出し、０．８％アガロースゲル″ＲＬ気
泳動によって単離した。このヒトα、−プラスミンイン
ヒビターｃＤＮＡ断片０．１μｙ　を制限酵素消化用バ
ッファー［ＥｃｏＲＩ消化では１００ｍ〜Ｉ　ＮａＣ１
，５０ｍＭ　Ｔｒｉｓ　−ＨＣＩ（ｐＨ７，５）　、　
　ｌ　ＯｍＭ　ＭｇＣ４，１ｍＭ　　ジチオスレイトー
ル水浴版を、ＢａｍＨＩ　＋　　Ｐｓｔ　Ｉ　、　Ｈｉ
ｎｄ■消化では５０　ｍＭ　ＮａＣ１、１０ｍＭ　Ｔｒ
ｉｓ　−ｋｌＣｌ　（ｐＩＩ　７．５　）　、　　１０
　ｍＭ　ＭｇＣ１ｍ、　　ｌ　ｍＭジチオスレイトール
水％　ｆｌを、Ｓｍａ　Ｉ消化では２０ｍＭ　ＫＣｌ、
　　ｌ　ｔ）ｍＭ　Ｔｒｉｓ−ＨｃＡ’　（ｐ）１８．
０　）−１０ｍＭ　ＭｇＣｌ、、　　１　ｍＭジチオス
レイトール水溶液をそれぞれ用いた。〕１０μｌに溶解
させ、制限酵素（宝酒２製）２ユニツトを６加して３７
℃で１時間消化した。なお、二種類の制限酵素による消
化をおこなう場合には、まず低塩濃度で作用する制限酵
素で処理し、次に所定濃度まで塩濃度を上げてから、よ
り高塩濃度で作用する制限博識で処理した。制限＃素（
よる消化後、１μｌの０．２５％プロ七フェノールブル
ー、　５０％グリセロール水溶液を加え１μ＆／ｌＬｌ
のエチジウムブロマイドを含む０．８％〜１．２％アガ
ロースでゲル電気泳動なおこなった。この電気泳動の際
、ＤＮＡ断片の分子黛マーカーとしてλファージのＤＮ
ＡをＨｌｎｄ　ｍで消化したものを用いた。電気泳動後
、このゲルに対して紫外線を照射して消化パターンを観
察した。各種制限酵素単独による消化、及び二種の制御
ａ＃累の組合わせＫよる消化での消化パターンを解析し
℃後述する各制限酵素切断点の相対位置関係を決定した
。かくし℃得られた約１．７ｋｂのヒトαツープラスミ
ンインヒビタ−ｅＤＮＡの制限酵素地図を第２図に示し
た。

大腸菌用プラスミドｐＵｃ８　２μｇを実施例４に準じ
て制限＃素ＥｃｏＲＩで消化したものに対してアルカリ
性ホスファターゼ（Ｅ、ｃｏｌｔ　Ｃ７５）（寞酒造８
１）を１．０ユニット加えて５８℃で２時間反応させた
。反応終了後、反応へ中のアルカリ性フォスファターゼ
を失活・除去するためにフェノール抽出を３回様返した
。このようにして得られたｐＵＣ８のＥｃｏＲＩ／アル
カリ性７オスフアターゼ処理欣に、実施例４で得たヒト
α。

−プラスミンインヒビターＥｅｏＲＩｆｉ化ｃＤＮＡ断
片を加え、２ユニツトのＴ４−ＤＮＡリガーゼを１２℃
で１６時間反工６させて連結させた。

大腸菌ＬＥ３９２株の形質転換は、通常の（：ａＣ４法
ＣＭ、Ｖ、Ｎｏｒｇａｒｄ　ｅｔ　ａｌ、　；　Ｇｅｎ
ｅ　＊　３゜２９７（１９７８）参照〕に従い調製し、
前記のｐＵＣ８にヒトα、−プラスミンインヒビターＥ
ｃｏＲＩ消化ｃＤＮＡ　ｌｆｒ片を連結させたへイブリ
ッド１）ＮＡを形質転換した。形質転換した大腸菌ＬＥ
３９２を５０μｙ／ｄの濃度のアンピシリンを含んだＬ
−プロスプレートに接種した。このプレートを３７℃で
１晩培養して形質転換株を生育させた。得られたコロニ
ーより公知の方法を用いてＤＮＡを調製し、アガロース
ゲル電気泳動により目的のハイブリッドＤＮＡを確認し
、この１つをｐＰＩ３９と命名した。

実施例６　ヒトαオープラスミンインヒビタ−ヒトα！
−プラスミンインヒビタ−ｃＤＮＡ塩基配列はＳａｎｇ
ｅｒ　のジテオキシシーケンス法ＣＦ。

Ｓａｎｇｅｒ　ｅｔ　ａｌ、　；　Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ
、Ａｃａｄ、　Ｓｅｔ、　ＵＳＡ７４．５４６３−５４
６７（１９７７）参照〕により決定した。

たとえばヒトαツープラスミンインヒビタ−ｃＤＮＡの
ＥｃｏＲＩ消化断片を公知の方法に従ってＭ１３ｍｐ１
ｇ又はＭ１３ｍｐ１９ベクターのＥｅｏＲＩサイトに押
入し、大腸ＩＪｆＶ１１０５株に形質転換させる。形質
転換させたＪＭＩ０５株によって生産される一本ｊｄｌ
　へイブリッドＤ　Ｎ　Ａを公知の方法に従って祠製し
た。この−軍ｄＤＮＡを用い’Ｃ１Ｍ１３シーケンスキ
ット（７マーシヤム製）を用いてシーケンス反２をおこ
ない、７Ｍ尿素を含む６％ポリアクリルアミドゲル℃気
泳動で分離した。ゲルを乾燥後−８０℃で一晩オートラ
ジオグラフイーをおこなった後、分離パターンの解８？
をおこない、ヒトα、−プラスミンインヒビターの塩基
配列決定のための資料とした。

か（し”〔第１図に示されたヒトαオープラスミンイン
ヒビタ−をフードする塩基配列が決定された。

【図面の簡単な説明】

添付第１図は、本発明によるヒトαオープラスミンイン
ヒビタ−のアミノ酸配列及び遺伝子断片を示すものであ
り、第２図はヒトαオープラスミンインヒビタ−のｃＤ
ＮＡの制限酵素地図を示したものであり、ｌｂ１第２図
において白い部分は本発明のアミノ酸配列のコード領域
であり、黒い部分は非コード領域である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、添付第１図における第１番目（Ｇｌｕ）から第２７
   ４番目（Ｌｙ＿３）までのアミノ酸配列で示されたヒト
   α＿２プラスミンインヒビター断片をコードした遺伝子
   断片。 ２、該遺伝子断片が添付第１図における第１番目（Ｇ）
   から第８２２番目（Ｇ）までの塩基配列で示されたもの
   である第１項記載の遺伝子断片。 ３、添付第１図における第１番目（Ｇｌｕ）から第２７
   ４番目（Ｌｙ＿３）までのアミノ酸配列で示されたヒト
   α＿２−プラスミンインヒビターのアミノ酸配列。 ４、添付第１図のアミノ酸配列における第１８５番目（
   Ｓｅｒ）、第１８６番目（Ａｒｇ）、第１８７番目（Ｍ
   ｅｔ）または第１８８番目 （Ｓｅｒ）のいずれかのアミノ酸をアミノ末端とし、第
   ２７４番目（Ｌｙ＿３）までのアミノ酸をカルボキシ末
   端とするアミノ酸配列。