JPS63201131A - 経舌及び舌下経由投薬用の抗炎症性γ−グロブリンの新規ガレヌス製剤及びその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は経舌及び舌下経由投薬用のいわゆる抗炎症性γ
−グロブリンの新規なガレヌス軸ａ　ｆｅｎ　ｉｃ）製
剤に関する。

実際に、リューマチ性炎症性疾病及び自己免疫疾病の免
疫治療には二つの型の製剤が用いられている。

一方の型は（たとえばリューマチ類似の因子としての）
　）ＩＬＡ−Ｄ＾抗原に対して向けられた、免疫グロブ
リンの合成を遡及により抑制するヒト起源の抗１ｇＧで
ある。

これらのヒトの抗１ｇＧ（重鎮）はＣｅｎｔｒｅ　Ｆｒ
ａｎｃａｉｓｄｅ　Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ　Ｓａｎｇ
ｕｉｎｅ　　（仏画輸血センター）（＝　ＣＴＳ）から
供給されるウサギに注入されたかつ極めてきびしい取得
手順の対象をなすもののごときヒトのＩｇＧ　　（１６
，５％）から得られる。そのとき１００−につきヒトの
抗１ｇＧ抗体１ｇを含んでいる血漿母溶液を作ることが
できる。

他方の型の製剤は一つを除いてすべてのＨＬＡ標識が対
応のヒトの血清により被われているリンパ球から作られ
る抗ＨＬＡウサギ血清である。従って、かくして調製さ
れたリンパ球はもはや唯一の利用可能なＨＬＡ決定基が
あるにすぎない。従って得られた抗ＨＬＡ血清は特異性
とくにＢ２７．　ＤＲ４であると言うことができる。

これらの製剤は実際に皮肉径由で適用されるが、この苦
しい、しばしば局所的ならびに全身的反応を伴なう適用
法の呈する問題は公知である。

従って上記の不都合を呈しない特異性及び非特異性のγ
−グロブリンの新規なガレヌス製剤を利用できることが
重要となる。

本発明者らは絣究の結果、これら抗炎症性γ−グロブリ
ンの経舌及び舌下経由の適用を可能にする新規なガレヌ
ス製剤を調製することに成功した。

かくして全く無痛の、従って患者が容易に耐え得る適用
法が利用され、このことから以下で判明するとおり、こ
れらの製剤の治療上の使用の可能性を大きく拡大するこ
とができる。

従って本発明による抗炎症性γ−グロブリンの新規なガ
レヌス製剤は、該Ｔ−グロブリンが厳密に制御されたか
つ再現可能の量で、経舌及び舌下経由の有効成分の漸進
的放出を可能にする固体担体中に含まれていることを特
徴とする。

本発明による抗炎症性Ｔ−グロブリンの新規の形状のガ
レヌス製剤の調製を以下、二つの相異なる起源からのγ
−グロブリンの調製から初めて、詳細に記述する。

ヒトのｒ−■Ｇからの五　１ 免疫グロブリンが自己制御機構の対象であること及び哺
乳動物の免疫適格細胞からの免疫グロブリンの導入によ
り対応の免疫グロブリンの合成が抑制されることは公知
である。

従って免疫グロブリンの合成を抑制するにはこの免疫グ
ロブリンの利用できることを必要とする。

リューマチ性炎症性疾病の免疫治療の場合には、リュー
マチ様因子の合成を制御しようとするときは、該リュー
マチ様因子を調製して該当の分子を人体内へ導入し得る
ようにしかつ自己制御機構を用いることが必要である。

リューマチ様因子は抗−免疫グロブリンＧでありこれら
自体が三つの主要グループＩｇＭ　、　ＩｇＡ及びＩｇ
Ｇに属する。

従ってそれらの調製は下記手順に従ってウサギへ注入さ
れるヒトのＩｇＧから行なわれる：−ＩｇＧ注入：　Ｃ
ｅｎｔｒｅ　Ｆｒａｎｃａｉｓ　ｄｅ　Ｔｒａｎｓｆｕ
ｓｉｏｎＳａｎｇｕｉｎｅのヒト１６．５％ＩｇＧ−注
入の方式：皮肉０．０５ｄ　（“インシュリン”目盛の
２単位）を２５回づつの注入の反復−添加剤：　ＭＯＰ
　Ｐａ５ｔｅｕｒ −処置の回数：３回間隔１５日間 動物は引続いて１ケ月間休止させる 採血はウサギの中央耳動脈のレベルにおいて、耳をキシ
レンで擦った後１〇−注射器を用い動脈穿刺により行な
われる。穿刺の前に注射器内にヘパリン・カルシウム１
−を装入する。針は“皮肉”型である。動脈内圧により
ピストンを押し戻す。

血液の量は５−である。

採血点に親水性綿球により５分間圧迫包帯を施こすこと
により動物はこの穿刺に耐えて生存し得ることになり、
第２の採血をする場合反対側での実施が可能となる。

ヘパリンを加えた血液を遠心分離筒の壁にそって極めて
穏かに流しこみ、次に５０００回／分で５分間遠心分離
にかける。

ヘパリン含有血捉を集め、約Ｏ℃で保存する。

三つのクラスＩＢＭ　、　ＩｇＡ及びＩｇ（、の各々に
おいて免疫応答が行なわれる；ヘパリン含有血漿全量中
から回収すべきものはこれら三つのグループの抗−免疫
グロブリンである。

それを実施するためにフィブリノゲン及び血清アルブミ
ンを抽出し次に血漿残渣を利用することができる。

本発明者らはいわゆる抽出法すなわち全血漿中から所望
のフラクションを選別し他のプロティンを分離し得る方
法を特に利用した。この方法は実際に、もたらされる製
品の品質に関して極めてすぐれていることが判明した。

この抽出法は下記のとおりである： ヒトの赤血球をすすぎ、赤面標識なしで（０゜−ＲＨ−
）タンニン処理しく１／１００００００　、１／１００
０００のタンニン酸、３７＠で接触時間１５分）、ｐＨ
７，２に調節した生理的食塩水ですすぐ、遠心分離は絶
対に４５０回／分を超えてはならない（タンニン処理し
た赤血球の非可逆凝集の惧れ）。

これらの赤血球をＣＴＳの１６．５％ＩｇＧ溶液０．１
−（できればウサギの免疫に役立ったものと同じロフト
からのもの）を懸濁させたｐＨ６，４緩衝液中に懸濁さ
せて溶血管内に入れる。

緩慢な揺動装置（１０回／分）内で接触させ次に赤血球
を分離し、すすぐ。遠心分離は４５０回／分で行なわれ
る。

タンニン処理し、増感させた赤血球を再びｐＨ７，２緩
衝液中に懸濁させる。

次にヘパリン含有のウサギの血漿とタンニン処理し増感
させた赤血球とを接触させる。

ヘパリン含有血漿ｌａｄをｐＨ７，２緩衝液’Ｊｄで希
釈する。赤血球懸濁液を標準に合せる：　ｐＨ７，２緩
衝液９．９艷について残渣１／１０ｍ。

接触はビーカー内で行なわせ、溶液及び懸濁液を３７″
とする。両者を収容しているビーカーは極めて穏かに攪
拌し、５分間の接触後に４５０回／分で５分間遠心分離
にかけ上澄液を採取する。

赤血球を再び集め遠心分離管内に入れ、ｐＨ７，２緩衝
液ですすぎ水分を切る（４５０回／分で５分間）、上澄
液を吸引し、溶出用緩衝液（ｐＨ３，２）と置換える。

緩慢な１３動装置内によく栓をした管を置＜（１０回／
分で６分間）。

回収した上澄液は抗ＩｇＧを含んでおり、基準溶液を構
成する。これを以下に説明するとおり新規なガレヌス製
剤調製のために用いる。

血漿母溶液は１００−についてヒトの抗１ｇＧ抗体Ｉｇ
を含んでいる。

ＨＬ＾ウサギ血パの量　１ 動物にリンパ球の懸濁液の皮肉への注入を２０回づつ４
回行う。リンパ球のＨＬＡ　１ｍは一つを除いてすべて
対応の免疫血清により被われていた。こうして準備した
リンパ球はもはや利用できるＩＩＬＡ決定基のみしかな
い。

血清は第４回目の注入から１ケ月後に採取する。

同じ供給者のリンパ球に吸収させ、抗１１ＬＡ免疫グロ
ブリンはｐＨ３，２緩衝液で溶出する。従って溶出液は
ヒトのリンパ球Ｔの注入に対するウサギの免疫応答抗体
のすべてを含んでいる。

所望の抗ＨＬＡ抗体（９６％のケースにおいて８２７）
を分離するため、対応の抗ＨＬＡ血清で予備処理しＰＨ
７，２ですすいだ同じ供給者のリンパ球Ｂに抗リンパ球
抗体Ｔを吸収させる。

上澄液を集めウィルス及び細菌検査の後に１／１００に
希釈して母溶液を作り、これを以下に説明するとおり本
発明による新規なガレヌス製剤の調製に用いる。

この経舌及び舌下経由投薬用の新規ガレヌス製剤の調製
を以下詳細に記述する。

上記で得られた血清又は血漿母溶液を真空下で濃縮して
、含浸させる液体の容積を小さくする。

またこれらの溶液を凍結乾燥させることもできる。

引続いて所望の用薬量に応じて希釈液を調製する。これ
らの希釈は適当な溶媒とくに水又は生理的食塩水を用い
て行なわれる。実際に望ましい用薬量は新規ガレヌス製
剤中において抗１ｇＧ抗体含有量が０．１及び０．０１
−になるものである。

引続いてタービン内においてスプレードーザ−と呼ばれ
る型の注入器を用いて、希釈液又は再希釈液によって薬
理的に許容可能の固定担体と（にサッカロース−ラクト
ース混合物によりそれ自体公知のしかたで構成された小
球の含浸を行なう。

本発明の枠を離れることなくこれらの小球を同じく経舌
又は舌下経由の適用に適応させた粉末又は錠剤により代
替し得ることは自明である。

含浸法は均質な有効成分の完全な配分を保証するような
多重含浸法又は分別含浸法である。

各々の含浸を行う間に、強制乾燥空気を通過させること
によりその空気の通路と強力な排気機との間に存在する
流量の差によって減圧にされている室内において乾燥が
行なわれる。

本発明の重要な特徴によってこの乾燥操作は３０℃以下
の温度において行なわれる。

実際に、該方法の完成に導いた多数の試験中に温度が３
８−４０℃を超えるとその方法はもはや信頼できないこ
とが明かにされた。

最後の含浸は“糖衣”型の保護含浸である。

本発明による方法の別の実施形式によると、有効成分の
物理・化学的一体性が完全に維持されることを保証する
ため、含浸の諸段階は窒素雰囲気中で行なわれる。

最後の操作はか（して得られた小球をカプセル中に納め
るか又は場合によっては該小球又は粉末又は錠剤を定量
管中に納め、従来の方法（カプセルには透明ケース、定
量管には小箱使用）で、もちろん増大する用薬量のカプ
セルに番号を施こして、包装を終了することからなる。

これらの製剤は実際に０．１及び０．０１■の用薬量で
経世的に一使用され、ステロイド性及び非ステロイド性
の抗炎症性の治療種類の処置に属する炎症型の病理全体
の処置を可能にする。

ヒトのＩｇＧから得られる抗すューマチ様母製剤により
慢性リューマチ性多発性関節炎を含めて炎症性リューマ
チ全体の処置が可能である。

抗ＨＬＡウサギ血清から得られる製剤は関節硬直性を椎
関節炎の処置また同様に全体として関節炎の処置に適し
ている。

ＨＬＡ系の障害制御が遺伝的起源のものであり得る又は
あり得ないことを認めるなら、誘発される臨床的症状た
とえば関節の症状は、情報の門戸が細胞分裂の長い継続
に限られるとき、極めて速くはげしく極めて炎症性でか
つ極めて破壊的であり得ると考えるのが論理的であり、
別の方法によって自己免疫の到達が断片的にかつ分散し
て鳥かに遅く現われ得ることは明かであり、関節症に関
する、第２の型の製品は同じくこの適応症において注目
すべき結果をもたらす。

本発明による抗炎症性γ−グロブリンの新規なガレヌス
製剤の利点は明らかであり、そ主要な利点は患者がもは
や注入により処置を行なう際の弊害を受けないことであ
る。

他の利点はその製法が単純でありかつ大きな費用を要し
ないことである：これらの方法は、今日までＤａｎｇ　
ｈｅｒａｎｓ細胞上にもたらされた受容体を刺激するた
め皮肉注入経由適用法を考慮に入れて提案された希釈液
と類似の製品であるのに拘わらず量的及び質的に再現可
能な定量可能な製品を作ることができる。

本発明が限定的ではない例として上記で示した濃度、分
別又は希釈の方法に限られるべきでないことはもちろん
である；これらの濃度、分別及び希釈の方法はもちろん
要求に適応させることができる；同様にサッカロース−
ラクトース担体は他の薬理的に許容可能の担体によって
代替できる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、抗炎症性γ−グロブリンが経舌又は舌下経由での有
   効成分の漸進的放出を可能にする固体担体中に厳密に制
   御されたかつ再現可能の量で含まれていることを特徴と
   する、経舌及び舌下経由投薬用の抗炎症性γ−グロブリ
   ンの新規なガレヌス製剤。 ２、下記の工程： −血漿溶液又は抗ＨＬＡウサギ血清溶液の形の抗炎症性
   γ−グロブリン溶液を取得する工程； −上記の溶液を適応する溶媒により希釈して希釈液を調
   製する工程； −希釈液の各々を用いて、薬理学的に許容される固体担
   体を多重含浸又は分別含浸により含浸しかつ含浸の諸段
   階の各々に続いて３０℃以下の温度において強制乾燥空
   気により乾燥する工程；−糖衣型の最終保護含浸を行う
   工程； からなることを特徴とする、請求項１記載のガレヌス製
   剤の製造方法。 ３、γ−グロブリンは濃縮溶液の形をしている請求項２
   記載の方法。 ４、γ−グロブリンは凍結乾燥した形である請求項２又
   は３記載の方法。 ５、溶媒は水及び生理的食塩水のうちから選ばれる、請
   求項２又は３記載の方法。 ６、含浸の諸段階は窒素雰囲気中において行なわれる、
   請求項２乃至５の何れかに記載の方法。 ７、薬理学的に許容される固体担体はサッカロース−ラ
   クトース混合物である、請求項２乃至６の何れかに記載
   の方法。 ８、抗炎症性γ−グロブリン溶液はウサギへ注入したヒ
   トのＩｇＧから、続いてフィブリノゲン及び血清アルブ
   ミンを抽出しそして血漿残渣を回収して作られる、請求
   項２乃至７の何れかに記載の方法。 ９、抗炎症性γ−グロブリン溶液はウサギへ注入したヒ
   トのＩｇＧから、続いて全血漿中の所望のフラクション
   をヘパリンを加えた該血漿とヒトの赤血球との接触によ
   り抽出し、その他のプロテインを引き続いて分離して作
   られる、請求項２乃至７の何れかに記載の方法。 １０、抗炎症性γ−グロブリン溶液は、すべてのＨＬＡ
   標識が一つを除いて対応の免疫血清によって被われてい
   るリンパ球から得られる、特異性抗ＨＬＡウサギ血清で
   ある、請求項２乃至７の何れかに記載の方法。