【発明の詳細な説明】[Detailed description of the invention]
〔〕 発明の背景
技術分野
本発明は、新規化合物およびその用途に関す
る。さらに具体的には、本発明は、新規なベンゼ
ンスルホンアミド誘導体およびそれを有効成分と
する植物病害防除剤に関する。
現在、紋枯病防除薬剤として広範囲に使用され
ている抗生物質剤は、残効性が少ないため薬効不
足が指摘され、耐性菌の出現が懸念されている。
また一方、有機砒素剤も、紋枯病防除剤として使
用されているが、有効成分の中に重金属が含まれ
ているため、人畜に対する毒性ならびに環境汚染
の点から問題があるなど、既存防除薬剤には多く
の難点があり、新しい型の防除薬剤の開発が各界
から強く要望されている。
〔〕 発明の概要
要 旨
本発明は、新規なベンゼンスルホンアミド誘導
体を提供することによつて上記の点に解決を与え
ようとするものである。
従つて、本発明による２−シアノベンゼンスル
ホンアミド誘導体は、一般式
（式中、Ｒはそれぞれエチル基またはイソプロピ
ル基を示す）で示されるものである。
また、本発明による植物病害防除剤は、一般式
（式中、Ｒはそれぞれエチル基またはイソプロピ
ル基を示す）で示される化合物を有効成分とする
ものである。
効 果
本発明による新規化合物は一般に広範囲の農園
芸作物病害に防除活性を示すが、特にイネ紋枯病
ならびにトマトおよびきうりの立枯病にすぐれた
防除効果を有している。
この新規化合物は重金属を含まない極めて低毒
性の合成化合物であつて、人畜ならびに魚類に対
する毒性は実用上全くなく、また作物に対する薬
害も認められない。従つて、この化合物は、前記
した既存薬剤の欠点を補なうに充分な作用性を有
するものと考えられる。
〔〕 発明の具体的説明
１ 化合物
本発明による化合物は、一般式（）で示さ
れる。
（式中、Ｒはそれぞれエチル基またはイソプロ
ピル基を示す。以下の各々の式についても同
じ）
一般式（）の化合物のうち、Ｒがともにエ
チル基およびイソプロピル基であるもの、すな
わち下記の化合物(1)および(2)が代表的である。
化合物(1)
２−シアノ−Ｎ−（2′・6′−ジエチルフエニ
ル）ベンゼンスルホンアミド
化合物(2)
２−シアノ−Ｎ−（2′・6′−ジイソプロピル
フエニル）ベンゼンスルホンアミド
２ 化合物の製造
本発明化合物は、式（）中の希望の置換基
ないし結合の導入ないし形成に合目的的な任意
の方法によつて合成することができる。
適当な合成法の一つは、下記の反応式に示さ
れる反応によるものであつて、２−シアノベン
ゼンスルホン酸の水酸基に関しての反応性誘導
体、たとえばハロゲニド、特にクロリド、と
２・６−ジアルキルアニリン（）とを反応さ
せて、目的物（）を得る方法である。
化合物（）と（）との反応はハロゲン化
水素の発生を併なうものであるから、種々の有
機塩基ないし無機塩基の酸補捉剤の存在下に行
なうのが好ましい。また、反応は、化合物
（）〜（）および場合により使用する酸捕
捉剤の少なくともいずれかを所望濃度に溶解な
いし分散させることができ、しかもこの反応を
実質的に阻害しない溶媒ないし分散媒の存在下
に行なうことができる。その場合に、過剰量の
化合物（）を酸捕捉剤兼溶媒ないし分散媒と
して利用することができる。
この反応を行なうときの具体的な反応条件そ
の他は、後記実験例の記載およびJ.Am.Chem.
Soc.82、1594（1960）（文献１）または
Beilstein Handbuch der organischen Chemie
XI、376（文献２）記載の方法に準じて適宜
選定すればよい。なお、原料の一つである化合
物（）は、たとえば、上記J.A.C.Sまたは
Beilstein（文献１または文献２）の記載の方法
に準じて合成することができる。
３ 化合物の有用性−植物病害防除剤
本発明による植物病害防除剤は、活性成分が
前記の化合物（）であることに留意すべきこ
とを除けば、農園芸用薬剤、特に殺菌剤、とし
て採用しうる任意の形態ないし使用態様をとる
ことができる。
具体的には、たとえば、本発明の化合物をそ
のまま、または水、固体粉末、その他の適当な
担体を用いて稀釈し、必要に応じて展着剤等の
補助剤を加えて使用するか、あるいは農薬製造
に一般的に使用されている方法によつて各種の
液体または固体担体を混合し、必要ならば湿展
剤、展着剤、分散剤、乳化剤、固着剤などの補
助剤を加えて、水和剤、液剤、乳剤、粉剤、粒
剤などの製剤形態にして使用することができ
る。
これらの製剤を製造するに当つて、液体担体と
しては、本発明の化合物に対して溶剤となるもの
または補助剤によつて分散もしくは溶解させ得る
もの、が用いられる。たとえば、ケロシン、ジオ
キサン、アセトン、ジメチルスルホキサイド、動
植物油、および界面活性剤など、固体担体として
は粘土、カオリン、タルク、珪藻土、シリカ、炭
酸カルシウム、重炭酸カルシウムなどが用いられ
る。
このようにして得られる製剤中の有効成分の含
量は、広い範囲で変更することができる。たとえ
ば、液剤として使用する場合の液中濃度は
10ppm〜500ppm程度が適当であり、粉剤あるい
は粒剤の場合は本発明の化合物を１％〜20％程度
の範囲で含有することが望ましい。このような濃
度よりも高濃度に製剤化して、使用時に稀釈する
ようにすることができることはいうまでもない。
また、事情が許せば、製剤化に際しては両立性の
他の農園芸用薬剤または肥料を混合することもで
きる。
本発明による防除剤は、作物の茎葉に散布して
用いることができるほか、水面や水中あるいは土
壤表面や土壤中に施用して用いることもできる。
その場合に、両立性の農園芸用薬剤ないし肥料を
混用することができる。そのような農園芸用薬剤
には、たとえば、殺菌剤、殺虫剤、除草剤、植物
生長調整剤などがある。
施用量は、対象病害の種類および程度、対象作
物の種類、施用態様その他によつて変化するが、
土壤に施す場合の例を挙げれば10アール当り0.1
Kg〜10Kg程度の施用量が一般に適当である。
４ 実施例
(1) 化合物の合成
合成例 １
化合物(1)の合成
２−シアノベンゼンスルホン酸クロリド2.01ｇ
と２・６−ジエチルアニリン3.0ｇとを混合し、
撹拌しながら150℃に加熱した。発熱して反応
し、透明な溶液は間をなく固化した。直ちに加熱
をやめて放冷し、メタノールを加え、析出する結
晶を過し、少量のメタノールで洗つて、２−シ
アノ−Ｎ−（2′・6′−ジエチルフエニル）−ベンゼ
ンスルホンアミド（一般式（）に於てＲ＝エチ
ル基の化合物）1.3ｇを得た。
(1) 融点 131.5〜133℃（再結晶溶媒メタノー
ル）。
(2) 赤外吸収スペクトル（Nujol）（cm-1）
3230（NH）、2260（Ｃ≡Ｎ）、1660、1586、
1406、1334、1264、1192、1158、1132、1068、
1038、971、946、684、606
(3) NMRスペクトル（DMSO−d6−TMS）δ
8.05〜6.78（7H、多重線、芳香環プロトン）、
2.30（4H、四重線、Ｊ＝７Hz、−ＣH2 −CH3×
２）、0.93（6H、三重線、Ｊ＝７Hz、−CH2−Ｃ
H3 ×２）
(4) Massスペクトル ｍ／ｅ 314（M+）
(5) 元素分析値（％） C17H18N2O2S（314.4）
計算値 Ｃ 64.95、Ｈ 5.77、Ｎ 8.91
分析値 Ｃ 64.87、Ｈ 5.80、Ｎ 8.88
合成例 ２
化合物(2)の合成
２・６−ジイソプロピルアニリン6.48ｇと２−
シアノ−ベンゼンスルホン酸クロリド4.2ｇとを
混合し、浴温140℃で撹拌しながら加熱した。透
明な溶液は、次第に固化した。内温120℃に達し
て内容物が完全に固化したときに加熱をやめ、放
冷し、メタノール30ml、を加えてスラリー状と
し、析出している無色の結晶を過し、冷メタノ
ールで洗つて、2.8ｇの２−シアノ−Ｎ−（２・６
−ジイソプロピルフエニル）−ベンゼンスルホン
アミドの結晶が得られた。
(1) 融点 175〜176.5（分解）、（再結晶溶媒メタ
ノール）。
(2) 赤外吸収スペクトル（Nujol）（cm-1）
3240（NH）、2260（Ｃ≡Ｎ）、1589、1408、
1339、1260、1185、1161、1131、1104、1066、
928、804、773、756、703、688、625、600、
571
(3) NMRスペクトル（DMSO−d6−TMS）δ
8.05〜6.82（7H、多重線、芳香環プロトン）、
2.97（2H、七重線、Ｊ＝6.5Hz、−ＣＨ（CH3）2
×２）、0.91（12H、二重線、Ｊ＝6.5Hz、−CH
（ＣH3 ）×２）。
(4) 元素分析値（％） C19H22N2O2S（342.46）
計算値 Ｃ 66.63、Ｈ 6.48、Ｎ 8.18
分析値 Ｃ 66.56、Ｈ 6.52、Ｎ 8.13
(5) Massスペクトル ｍ／ｅ
342（M+）、299（M+−CH（CH3）2）、176
(2) 製剤化
製剤例 １
水和剤
２−シアノ−Ｎ−（2′・6′−ジエチルフエニル）
ベンゼンスルホンアミド 20重量部
クレー 10〃
珪藻土 65〃
リグニンスルホン酸 ３〃
ポリオキシエチレンアルキルアリルエーテル２〃
上記の成分物質を均一に混合粉砕して、水和剤
組成物をつくり、所定濃度で10アール当り100〜
150リツトル散布する。
製剤例 ２
粉 剤
２−シアノ−Ｎ−（2′・6′−ジイソプロピルフエ
ニル）ベンゼンスルホンアミド ３重量部
ステアリン酸カルシウム １〃
無水珪酸粉末 １〃
クレー 48〃
タルク 47〃
上記の成分を混合粉砕して得た粉剤組成物を、
10アール当り４Kg散布する。
製剤例 ３
粒 剤
２−シアノ−Ｎ−（2′・6′−ジエチルフエニル）
ベンゼンスルホンアミド ８重量部
クレー 89〃
カルボキシメチルセルローズ ３〃
上記の成分物質を混合し、適当量の水を加えて
練合成型ののち乾燥してなる粉剤組成物を、10ア
ール当り３Kg散粒する。
(3) 薬効試験
試験例 １
イネ紋枯病の防除効果試験
1/5000アールのワグネルポツトで栽培した穂孕
期の水稲（品種＋石）に、前記製剤例１により製
造した水和剤を所定濃度の散布液に調整したもの
を、薬剤散布装置スプレーガン（３Kg／cm2）を使
用して、70ml／３ポツトの割合で散布した。
当日接種区は、風乾後ただちに、ペプトン加用
馬鈴薯煎汁寒天培地に48時間平面培養して得た紋
枯病菌を径0.5cmのコルクボーラーで打抜いた含
菌糸寒天片を株の中心、地表面から15cmのところ
へ挿入して接種を行なつた。また、侵入の予防効
果をみるため行なつた散布後７日目接種区は、薬
液散布風乾後、７日間ガラス温室内に静置したの
ちに、上記当日接種区に準じた方法で接種を行な
つた。
接種後は、当日接種区および７日後接種区の両
区とも、紋枯病菌の侵入進展を助長するためポツ
ト毎にビニル円筒で覆い、日中30℃および夜間24
℃のガラス温室に静置して発病させ、接種処理10
日後に発病茎の病斑長を測定し、次式に従つて防
除価を算出した。また薬害の発生状況は、同時に
肉眼観察によつて行なつた。
防除価＝（１−処理区の平均病斑長／無処理区の平均病
斑長）×100
結果は、下表に示す通りであつた。
[] BACKGROUND OF THE INVENTION Technical Field The present invention relates to novel compounds and their uses. More specifically, the present invention relates to a novel benzenesulfonamide derivative and a plant disease control agent containing the same as an active ingredient. Antibiotics, which are currently widely used to control sheath blight, are said to lack efficacy due to their low residual efficacy, and there are concerns about the emergence of resistant bacteria.
On the other hand, organic arsenic agents are also used as sheath blight control agents, but as the active ingredients contain heavy metals, there are problems with toxicity to humans and livestock as well as environmental pollution. However, there are many drawbacks to this, and there is a strong demand from various fields for the development of new types of pest control agents. [] Summary of the Invention Summary The present invention seeks to solve the above-mentioned problems by providing novel benzenesulfonamide derivatives. Therefore, the 2-cyanobenzenesulfonamide derivative according to the invention has the general formula (wherein R represents an ethyl group or an isopropyl group, respectively). Furthermore, the plant disease control agent according to the present invention has the general formula (In the formula, R represents an ethyl group or an isopropyl group, respectively) as an active ingredient. Effects The novel compound according to the present invention generally exhibits control activity against a wide range of agricultural and horticultural crop diseases, but has particularly excellent control effects against rice sheath blight and damping-off of tomatoes and cucumbers. This new compound is an extremely low-toxic synthetic compound that does not contain heavy metals, has no practical toxicity to humans, livestock, or fish, and has no phytotoxicity to crops. Therefore, this compound is considered to have sufficient activity to compensate for the drawbacks of the existing drugs mentioned above. [] Detailed Description of the Invention 1 Compound The compound according to the present invention is represented by the general formula (). (In the formula, each R represents an ethyl group or an isopropyl group. The same applies to each of the following formulas.) Among the compounds of general formula (), those in which R is both an ethyl group and an isopropyl group, that is, the following compounds ( 1) and (2) are typical. Compound (1) 2-cyano-N-(2',6'-diethylphenyl)benzenesulfonamide compound (2) 2-cyano-N-(2',6'-diisopropylphenyl)benzenesulfonamide 2 Compound Production of the compound of the present invention can be synthesized by any method suitable for introducing or forming a desired substituent or bond in formula (). One suitable synthesis method is by the reaction shown in the reaction scheme below, in which a reactive derivative with respect to the hydroxyl group of 2-cyanobenzenesulfonic acid, such as a halide, especially a chloride, and a 2,6-dialkylaniline are combined. () to obtain the target product (). Since the reaction between compounds () and () involves the generation of hydrogen halide, it is preferably carried out in the presence of an acid scavenger of various organic or inorganic bases. The reaction also requires the presence of a solvent or dispersion medium that can dissolve or disperse at least one of the compounds () to () and the optionally used acid scavenger to a desired concentration and that does not substantially inhibit this reaction. It can be done below. In that case, an excess amount of the compound () can be used as an acid scavenger and also as a solvent or a dispersion medium. Specific reaction conditions and other details for carrying out this reaction are described in the experimental examples below and in J.Am.Chem.
Soc. 82 , 1594 (1960) (Reference 1) or
Beilstein Handbuch der organischen Chemie
XI , 376 (Reference 2). In addition, the compound (), which is one of the raw materials, is, for example, the JACS or
It can be synthesized according to the method described by Beilstein (Reference 1 or Reference 2). 3. Usefulness of Compound - Plant Disease Control Agent The plant disease control agent according to the present invention is employed as an agricultural and horticultural agent, especially a fungicide, except that the active ingredient is the above-mentioned compound (). It can take any possible form or usage mode. Specifically, for example, the compound of the present invention may be used as it is, or diluted with water, solid powder, or other suitable carrier, and if necessary, an auxiliary agent such as a spreading agent may be added thereto. Various liquid or solid carriers are mixed according to methods commonly used in agricultural chemical production, and if necessary, auxiliary agents such as wetting agents, spreading agents, dispersing agents, emulsifying agents, and fixing agents are added. It can be used in the form of formulations such as wettable powders, liquids, emulsions, powders, and granules. In producing these preparations, the liquid carrier used is one that serves as a solvent for the compound of the present invention or one that can be dispersed or dissolved with the aid of an adjuvant. For example, kerosene, dioxane, acetone, dimethyl sulfoxide, animal and vegetable oils, and surfactants, and solid carriers such as clay, kaolin, talc, diatomaceous earth, silica, calcium carbonate, calcium bicarbonate, and the like are used. The content of active ingredient in the preparations thus obtained can be varied within a wide range. For example, when used as a liquid agent, the concentration in the liquid is
Approximately 10 ppm to 500 ppm is appropriate, and in the case of powders or granules, it is desirable to contain the compound of the present invention in a range of approximately 1% to 20%. It goes without saying that the formulation can be formulated at a higher concentration than this and diluted at the time of use.
In addition, if circumstances permit, other compatible agricultural and horticultural chemicals or fertilizers may be mixed into the formulation. The pesticidal agent according to the present invention can be used by spraying on the foliage of crops, and can also be applied to the surface of water, in water, on the surface of soil, or in soil.
In this case, compatible agricultural and horticultural chemicals or fertilizers may be used. Such agricultural and horticultural chemicals include, for example, fungicides, insecticides, herbicides, and plant growth regulators. The amount of application varies depending on the type and severity of the target disease, type of target crop, application mode, etc.
For example, when applying to clay pots, it is 0.1 per 10 ares.
An application rate of about 10 kg to 10 kg is generally suitable. 4 Example (1) Synthesis of compound Synthesis example 1 Synthesis of compound (1) 2-cyanobenzenesulfonic acid chloride 2.01g
and 3.0 g of 2,6-diethylaniline,
It was heated to 150°C with stirring. The reaction was exothermic and the clear solution quickly solidified. Immediately stop heating and allow to cool, add methanol, filter the precipitated crystals, wash with a small amount of methanol, and prepare 2-cyano-N-(2',6'-diethylphenyl)-benzenesulfonamide (general formula: (in parentheses) 1.3 g of a compound in which R=ethyl group was obtained. (1) Melting point 131.5-133℃ (recrystallization solvent methanol). (2) Infrared absorption spectrum (Nujol) (cm -1 ) 3230 (NH), 2260 (C≡N), 1660, 1586,
1406, 1334, 1264, 1192, 1158, 1132, 1068,
1038, 971, 946, 684, 606 (3) NMR spectrum (DMSO-d6-TMS) δ 8.05-6.78 (7H, multiplet, aromatic ring proton),
2.30 (4H, quartet, J=7Hz, -CH 2 -CH 3 ×
2), 0.93 (6H, triple line, J=7Hz, -CH 2 -C
H 3 ×2) (4) Mass spectrum m/e 314 (M + ) (5) Elemental analysis value (%) C 17 H 18 N 2 O 2 S (314.4) Calculated value C 64.95, H 5.77, N 8.91 Analysis Values C 64.87, H 5.80, N 8.88 Synthesis example 2 Synthesis of compound (2) 6.48 g of 2,6-diisopropylaniline and 2-
4.2 g of cyano-benzenesulfonic acid chloride was mixed with the mixture and heated with stirring at a bath temperature of 140°C. The clear solution gradually solidified. When the internal temperature reaches 120℃ and the contents are completely solidified, stop heating, let it cool, add 30ml of methanol to make a slurry, filter out the colorless crystals that have precipitated, and wash with cold methanol. , 2.8 g of 2-cyano-N-(2.6
-diisopropylphenyl)-benzenesulfonamide crystals were obtained. (1) Melting point 175-176.5 (decomposition), (recrystallization solvent methanol). (2) Infrared absorption spectrum (Nujol) (cm -1 ) 3240 (NH), 2260 (C≡N), 1589, 1408,
1339, 1260, 1185, 1161, 1131, 1104, 1066,
928, 804, 773, 756, 703, 688, 625, 600,
571 (3) NMR spectrum (DMSO-d6-TMS) δ 8.05-6.82 (7H, multiplet, aromatic ring proton),
2.97 (2H, septet, J=6.5Hz, -CH (CH 3 ) 2
×2), 0.91 (12H, double line, J=6.5Hz, -CH
(C H 3 )×2). (4) Elemental analysis value (%) C 19 H 22 N 2 O 2 S (342.46) Calculated value C 66.63, H 6.48, N 8.18 Analysis value C 66.56, H 6.52, N 8.13 (5) Mass spectrum m/e 342 (M + ), 299 (M + -CH(CH 3 ) 2 ), 176 (2) Formulation Example 1 Wettable powder 2-cyano-N-(2'·6'-diethylphenyl)
Benzene sulfonamide 20 parts by weight Clay 10〃 Diatomaceous earth 65〃 Lignosulfonic acid 3〃 Polyoxyethylene alkyl allyl ether 2〃 The above ingredients are uniformly mixed and pulverized to make a wettable powder composition, and 10 ares are mixed at a predetermined concentration. 100~
Spread 150 liters. Formulation example 2 Powder 2-Cyano-N-(2',6'-diisopropylphenyl)benzenesulfonamide 3 parts by weight Calcium stearate 1. Anhydrous silicic acid powder 1. Clay 48. Talc 47. The above ingredients were mixed and ground. The powder composition obtained by
Spray 4 kg per 10 ares. Formulation example 3 Granules 2-cyano-N-(2',6'-diethylphenyl)
Benzenesulfonamide 8 parts by weight Clay 89〃 Carboxymethyl cellulose 3〃 Mix the above ingredients, add an appropriate amount of water, knead into a mold, and then dry to obtain a powder composition, which is powdered at 3 kg per 10 ares. . (3) Medicinal efficacy test test example 1 Rice sheath blight control efficacy test A predetermined concentration of the hydrating powder produced in Formulation Example 1 was applied to paddy rice (variety + stone) at the heading stage grown in a 1/5000 are Wagner pot. The spray solution prepared was sprayed at a rate of 70 ml/3 pots using a chemical spray gun (3 kg/cm 2 ). On the day of inoculation, immediately after air-drying, the sheath blight bacteria obtained by flat culture on a peptone-added potato decoction agar medium for 48 hours was punched out with a cork borer with a diameter of 0.5 cm. Inoculation was performed by inserting the tube 15 cm from the ground surface. In addition, the inoculated areas on the 7th day after spraying, which were carried out to check the effectiveness of preventing invasion, were sprayed with the chemical solution, air-dried, and then allowed to stand in a glass greenhouse for 7 days, and then inoculated in the same manner as the inoculated areas on the same day. Summer. After inoculation, each pot was covered with a vinyl cylinder and kept at 30°C during the day and 24°C at night in both the same-day and 7-day post-inoculation areas to encourage the invasion of sheath blight bacteria.
Let stand in a glass greenhouse at ℃ and inoculate 10
Days later, the length of the lesion on the diseased stem was measured, and the control value was calculated according to the following formula. At the same time, the occurrence of drug damage was also visually observed. Control value = (1 - average lesion length of treated area/average lesion length of untreated area) x 100 The results were as shown in the table below.
【表】
試験例 ２
苗立枯病防除試験
苗立枯病菌（リゾクトニア菌Ａ型菌）を馬鈴
薯煎汁寒天培地上で培養し、３倍量の米糠ととも
に混合磨砕して、接種源をつくつた。供試作物と
してトマト（品種ひかり）ならびにキユウリ（品
種さつきみどり）を用い、殺菌畑土壤をつめた1/
５０００アールワグネルポツトに20粒／ポツトの芽出
し種子を播種および覆土し、上記の接種源と殺菌
畑土とを等量混合したものをその上に均一に散布
して接種を行なつた。接種後、28℃の恒温室に48
時間静置したのち、製剤例１の本発明の化合物を
所定濃度に調製して潅注液とし、ポツト当り100
mlのこの薬液をピペツトで地表面に均一に注下施
用した。その後、接種菌の侵入進展を容易にする
ため、30℃〜28℃のガラス温室に搬入し、ポツト
内土壤の湿度をやゝ乾燥気味の状態で経過させて
発病させた。調査は、播種３週間後までの発芽数
および健全菌数を調べて、播種粒数に対する発芽
率および発芽数に対する健全菌率を算出した。
結果は、下表に示す通りであつた。[Table] Test example 2 Seedling damping-off control test Seedling damping-off fungus (Rhizoctonia type A fungus) was cultured on a potato decoction agar medium and mixed and ground with three times the amount of rice bran to prepare an inoculum. Ivy. Tomatoes (variety: Hikari) and cucumbers (variety: Satsuki Midori) were used as test crops.
20 sprouted seeds per pot were sown in a 5,000 Ahl Wagner pot and covered with soil, and a mixture of equal amounts of the above-mentioned inoculum and sterilized field soil was uniformly spread over the pot for inoculation. After inoculation, store in a constant temperature room at 28℃ for 48 hours.
After standing for a period of time, the compound of the present invention of Formulation Example 1 was prepared to a predetermined concentration and used as an irrigating solution.
ml of this chemical solution was poured uniformly onto the ground surface using a pipette. Thereafter, in order to facilitate the invasion of the inoculated bacteria, the plants were transported to a glass greenhouse at a temperature of 30°C to 28°C, and the humidity of the soil in the pot was kept slightly dry to allow the disease to develop. In the investigation, the number of germination and the number of healthy bacteria were examined up to three weeks after sowing, and the germination rate relative to the number of sown grains and the ratio of healthy bacteria relative to the number of germination were calculated. The results were as shown in the table below.
【表】【table】