JPS62202808A - クロマトグラフイ−用ハイドロキシアパタイト結晶粒子の製造方法 - Google Patents
クロマトグラフイ−用ハイドロキシアパタイト結晶粒子の製造方法Info
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- JPS62202808A JPS62202808A JP61018868A JP1886886A JPS62202808A JP S62202808 A JPS62202808 A JP S62202808A JP 61018868 A JP61018868 A JP 61018868A JP 1886886 A JP1886886 A JP 1886886A JP S62202808 A JPS62202808 A JP S62202808A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
イ、発明の目的
〔産業上の利用分野〕
本発明はハイドロキシアパタイト結晶粒子を固定相剤と
するカラムクロマトグラフィーにおける該ハイドロキシ
アパタイト結晶粒子の製造方法に関する。
するカラムクロマトグラフィーにおける該ハイドロキシ
アパタイト結晶粒子の製造方法に関する。
ハイドロキシアパタイト結晶（Ｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔ
ｉ ｔｅ）は通常、化学組成Ｃａ＋ｏ （ＰＯ４）
ｂ （ＯＨ）２ 、六方品系弔位格子： ａＡ ｂＪ
２Ｏ’ 、 ａＡ ｃ ＝ ｂへＣ＝９０°、 １ａ
ｌ＝ｌｂｌ＝ ９．４２人、 １ｃｌ＝ ８．８８λに
よって特徴づけられるリン酸カルシウムの一種である。
ｉ ｔｅ）は通常、化学組成Ｃａ＋ｏ （ＰＯ４）
ｂ （ＯＨ）２ 、六方品系弔位格子： ａＡ ｂＪ
２Ｏ’ 、 ａＡ ｃ ＝ ｂへＣ＝９０°、 １ａ
ｌ＝ｌｂｌ＝ ９．４２人、 １ｃｌ＝ ８．８８λに
よって特徴づけられるリン酸カルシウムの一種である。
以下このハイドロキシアパタイト結晶粒子を）ＩＡ粒子
と略記する。
と略記する。
ＨＡ顆粒子カラムクロマトグラフィーのカラム内充填固
定相剤として優れたクロマト分離能（物質分離展開能）
を有し、該）ＩＡ粒子をカラム内充填固定相剤とするク
ロマトグラフィー（）ＩＡクロマトグラフィー）は、他
の固定相剤例えばイオン交換樹脂・活性アルミナφ炭酸
カルシウムなどを用いる場合には困難であった、微細な
構造差を有する物質量の相互分離、例えば分子量１０４
〜１０９ダルトンの生態関連高分子（免疫グロブリン・
インターフェロン拳酵素類等の蛋白質類、ＲＮＡ−ＤＮ
Ａ・プラスミド類の核醸類、ウィルス類など）について
も鋭敏ｅ高精度に分取操作することが可俺であり、例え
ばバイオテクノロジー分野での遺伝子組換え、細胞融合
、細胞大量培養法等により合成された各種の目的有用物
質の高純度分離精製等に不可欠な手段として活用される
に至っている。
定相剤として優れたクロマト分離能（物質分離展開能）
を有し、該）ＩＡ粒子をカラム内充填固定相剤とするク
ロマトグラフィー（）ＩＡクロマトグラフィー）は、他
の固定相剤例えばイオン交換樹脂・活性アルミナφ炭酸
カルシウムなどを用いる場合には困難であった、微細な
構造差を有する物質量の相互分離、例えば分子量１０４
〜１０９ダルトンの生態関連高分子（免疫グロブリン・
インターフェロン拳酵素類等の蛋白質類、ＲＮＡ−ＤＮ
Ａ・プラスミド類の核醸類、ウィルス類など）について
も鋭敏ｅ高精度に分取操作することが可俺であり、例え
ばバイオテクノロジー分野での遺伝子組換え、細胞融合
、細胞大量培養法等により合成された各種の目的有用物
質の高純度分離精製等に不可欠な手段として活用される
に至っている。
従来一般にクロマトグラフィー用ＨＡ粒子はＨＡクロマ
トグラフィーの開発者であるチゼリウス等により開発さ
れた手法（Ａ、〒１ｓｅｌｉｕ＋、 Ｓ、 Ｈｊｅｒｔ
ｅｎ。
トグラフィーの開発者であるチゼリウス等により開発さ
れた手法（Ａ、〒１ｓｅｌｉｕ＋、 Ｓ、 Ｈｊｅｒｔ
ｅｎ。
ａｎｄ″’０． Ｌｅｖｉｎ、 Ａｒｃｈ、 Ｂｉｏｃ
ｈｅ嘗、 Ｂｉａｐｈｙｓ、、８５，１３２（１９５Ｂ
）） 、即ちブルスハイト結晶粒子（Ｂｒｕｓｈｉｔｅ
：ＣａＨＰＯａ ・２Ｈ２Ｏ）を出発物質として該結晶
を水中に懸濁してアルカリを作用させることによりＨＡ
顆粒子生成させ、該生Ｊ＆、ＨＡ粒子を固定相剤として
カラムに充填して使用している。
ｈｅ嘗、 Ｂｉａｐｈｙｓ、、８５，１３２（１９５Ｂ
）） 、即ちブルスハイト結晶粒子（Ｂｒｕｓｈｉｔｅ
：ＣａＨＰＯａ ・２Ｈ２Ｏ）を出発物質として該結晶
を水中に懸濁してアルカリを作用させることによりＨＡ
顆粒子生成させ、該生Ｊ＆、ＨＡ粒子を固定相剤として
カラムに充填して使用している。
上記のチゼリウス式製造法において、出発物質たるブル
スハイトは通常は厚さ１〜３Ｂｍ、平均直径（長軸方向
）数１０ｐｍの板状もしくは鱗片状結晶粒子であり、こ
れにアルカリを作用させることにより生成生産されるＨ
Ａ顆粒子、その形状につき出発物質たるブルスハイトの
上記形状をそのまま受は継いだものである。即ち厚さ１
〜３ＩＬｍ、平均直径数１１０７Ｌの板状もしくは鱗片
状のものである。第２図及び第３図はその電子顕微鏡写
真である。それ等の写真の下辺側に写し込まれている左
右方向の白抜き破線は長さ目安線であり、その白抜き破
線の一単位線分の長さ文が第２図写真では１０ｇｍに、
第３図ではＩＱＱＩＬｍに夫々対応する。
スハイトは通常は厚さ１〜３Ｂｍ、平均直径（長軸方向
）数１０ｐｍの板状もしくは鱗片状結晶粒子であり、こ
れにアルカリを作用させることにより生成生産されるＨ
Ａ顆粒子、その形状につき出発物質たるブルスハイトの
上記形状をそのまま受は継いだものである。即ち厚さ１
〜３ＩＬｍ、平均直径数１１０７Ｌの板状もしくは鱗片
状のものである。第２図及び第３図はその電子顕微鏡写
真である。それ等の写真の下辺側に写し込まれている左
右方向の白抜き破線は長さ目安線であり、その白抜き破
線の一単位線分の長さ文が第２図写真では１０ｇｍに、
第３図ではＩＱＱＩＬｍに夫々対応する。
ところでカラムクロマトグラフィーにおいて高精度・能
率的なりロマト分離を安定に実行させるには、カラムに
固定相剤として充填する粒子物質それ自体のクロマト分
離能の優秀性の他に、ａ、粒子体を充填したカラム内に
試料流体・キャリヤ流体を導入流通させたとき、充填粒
子個々の相互間隙を流通する流体の流れ速度がカラム横
断面内各部に関して可及的に均一なものであること、 ｂ、導入流体のカラム内単位断面積・中位時間当りの流
通流量レベルが可及的に高いこと。
率的なりロマト分離を安定に実行させるには、カラムに
固定相剤として充填する粒子物質それ自体のクロマト分
離能の優秀性の他に、ａ、粒子体を充填したカラム内に
試料流体・キャリヤ流体を導入流通させたとき、充填粒
子個々の相互間隙を流通する流体の流れ速度がカラム横
断面内各部に関して可及的に均一なものであること、 ｂ、導入流体のカラム内単位断面積・中位時間当りの流
通流量レベルが可及的に高いこと。
が挙げられる。
而して上記ａ項のカラム断面に関する導入流体の流れ速
度は、カラム内に充填する粒子体の個々の粒子の大きさ
が小さく、且つその個々の粒子相互の大きさのバラツキ
幅が小さければ、カラム横断面内各部に関しての充填粒
子個々の相互間隙の大きさのバラツキ幅が小さくなって
均一化される、しかし個々の粒子の大きさをあまりに小
さなものにしてしまうことは前記す項のカラム内導入流
体に対する流通抵抗を増加させ流通流量レベルを低下さ
せる結果となる。
度は、カラム内に充填する粒子体の個々の粒子の大きさ
が小さく、且つその個々の粒子相互の大きさのバラツキ
幅が小さければ、カラム横断面内各部に関しての充填粒
子個々の相互間隙の大きさのバラツキ幅が小さくなって
均一化される、しかし個々の粒子の大きさをあまりに小
さなものにしてしまうことは前記す項のカラム内導入流
体に対する流通抵抗を増加させ流通流量レベルを低下さ
せる結果となる。
従ってカラム内に充填する粒子体は、優れたクロマト分
離能を有する物質であると共に、個々の粒子の大きさは
カラム内導入流体のある程度以上の流通流量レベルが確
保される大きさのもので、且つその大きさのバラツキ幅
が小さく粒の揃ったものであることが高精度・能率的な
りロマト分離を安定に実行させる上での大きな要因とな
る。
離能を有する物質であると共に、個々の粒子の大きさは
カラム内導入流体のある程度以上の流通流量レベルが確
保される大きさのもので、且つその大きさのバラツキ幅
が小さく粒の揃ったものであることが高精度・能率的な
りロマト分離を安定に実行させる上での大きな要因とな
る。
この観点から前述従来のチゼリウス式製造法で得られる
ＨＡ顆粒子充填してなるクロマトグラフィーカラムにつ
いて検討すると、 ＨＡ粒子自体は優れたクロマト分離
能を有する物質であり、又カラム内導入流体の流通流量
レベルも比較的高い。
ＨＡ顆粒子充填してなるクロマトグラフィーカラムにつ
いて検討すると、 ＨＡ粒子自体は優れたクロマト分離
能を有する物質であり、又カラム内導入流体の流通流量
レベルも比較的高い。
しかじカラム横断面内各部に関する導入流体の流れ速度
の均一性については問題がある。即ちチゼリウス式製造
法で生産されるＨＡ顆粒子、前述したように出発物質た
るブルスハイト結晶それ自体の形状をそのまま受は継い
だ、平均粒径が数１０Ｉｊ、ｍと比較的大きい、而も板
状ないしは鱗片状体であり、出発物質たるブルスハイト
結晶粒子の可能な形状には制限があり、実際上その粒径
のバラツキ範囲幅がかなり大きいものであること、及び
個々の板状ないしは鱗片状結晶のカラム内充填状態にお
ける配向方向の全体的或は局部的な不均一性により、カ
ラム任意部所の横断面内各部において形成されるＨＡ粒
子相互間の間隙の大きさについては実際上かなりのバラ
ツキ幅があり、その結果カラム横断面内各部に関する導
入流体の流れ速度は実際上かなり不均一な状態を生じる
もので、そのためにクロマト分離ピーク幅をある程度以
上狭めることが不可能であり、ここにＨＡ粒子充填カラ
ムを用いるクロマトグラフィーについてのクロマト分子
ａ渣の限界が生じる。
の均一性については問題がある。即ちチゼリウス式製造
法で生産されるＨＡ顆粒子、前述したように出発物質た
るブルスハイト結晶それ自体の形状をそのまま受は継い
だ、平均粒径が数１０Ｉｊ、ｍと比較的大きい、而も板
状ないしは鱗片状体であり、出発物質たるブルスハイト
結晶粒子の可能な形状には制限があり、実際上その粒径
のバラツキ範囲幅がかなり大きいものであること、及び
個々の板状ないしは鱗片状結晶のカラム内充填状態にお
ける配向方向の全体的或は局部的な不均一性により、カ
ラム任意部所の横断面内各部において形成されるＨＡ粒
子相互間の間隙の大きさについては実際上かなりのバラ
ツキ幅があり、その結果カラム横断面内各部に関する導
入流体の流れ速度は実際上かなり不均一な状態を生じる
もので、そのためにクロマト分離ピーク幅をある程度以
上狭めることが不可能であり、ここにＨＡ粒子充填カラ
ムを用いるクロマトグラフィーについてのクロマト分子
ａ渣の限界が生じる。
本発明は上記に鑑みて提案されたもので高精度・能率的
なりロマト分離を安定に実行させるためのＨＡ顆粒子し
て、個々の粒子の大きさはカラム内導入流体のある程度
以上の実用的流陽レベルが確保される大きさのもので、
且つその大きさのバラツキ幅が小さく粒の揃ったものを
、簡単に催率的拳低コストに量産することができるクロ
マトグラフィー用ＨＡ粒子の製造方法を提供することを
目的とする。
なりロマト分離を安定に実行させるためのＨＡ顆粒子し
て、個々の粒子の大きさはカラム内導入流体のある程度
以上の実用的流陽レベルが確保される大きさのもので、
且つその大きさのバラツキ幅が小さく粒の揃ったものを
、簡単に催率的拳低コストに量産することができるクロ
マトグラフィー用ＨＡ粒子の製造方法を提供することを
目的とする。
口、発明の構成
〔問題点を解決するための手段〕
本発明は、ブルスハイト結晶粒子（ＣａＨＰＯ４Φ２Ｈ
２Ｏ）を出発物質としてそれを脱水相転移温度以上〜分
解温度以下のａＶＲで加熱することによりモネタイト結
晶粒子（ＣａＨＰＯ４）に脱水相転移させ、次いでアル
カリを作用させてハイドロキシアパタイト結晶粒子（Ｃ
ａ＋ｏ （ＰＯ４） ｂ （ＯＨ） ２ ）を生成
させる、ことを予め生産する、クロマトグラフィー用ハ
イドロキシアパタイト結晶粒子の製造方法を要旨とする
。
２Ｏ）を出発物質としてそれを脱水相転移温度以上〜分
解温度以下のａＶＲで加熱することによりモネタイト結
晶粒子（ＣａＨＰＯ４）に脱水相転移させ、次いでアル
カリを作用させてハイドロキシアパタイト結晶粒子（Ｃ
ａ＋ｏ （ＰＯ４） ｂ （ＯＨ） ２ ）を生成
させる、ことを予め生産する、クロマトグラフィー用ハ
イドロキシアパタイト結晶粒子の製造方法を要旨とする
。
又、ブルスハイト結晶粒子を脱水相転移温度以上１分解
温度以下の温°度で脱水相転移処理して予め生産したモ
ネタイト結晶粒子を出発物質とし、それにアルカリを作
用させてハイドロキシアパタイト結晶粒子を生成させる
、ことを予め生産する、クロマトグラフィー用ハイドロ
キシアパタイト結晶粒子の製造方法を要旨とする。
温度以下の温°度で脱水相転移処理して予め生産したモ
ネタイト結晶粒子を出発物質とし、それにアルカリを作
用させてハイドロキシアパタイト結晶粒子を生成させる
、ことを予め生産する、クロマトグラフィー用ハイドロ
キシアパタイト結晶粒子の製造方法を要旨とする。
ブルスハイト結晶粒子は前述したように一般に厚さ１〜
３ＩＬｍ：平均直径数１１０１Ｌの比較的大型の板状も
しくは鱗片状結晶体である。これを該結晶の脱水相転移
温度（約７５℃）以ト、分解温度以下の範囲で加熱する
と脱水相転移（結晶水が抜ける）を生じてモネタイト結
晶に転換する。而してブルスハイト結晶粒子は脱水相転
移によりモネタイトに相転移したとき板状もしくは鱗片
状結晶の面内で直径数μｍの細片体となる砕は現象を生
じ、厚さ１〜３ ＩＬｍ、直径飲用ｍの、比較的大きさ
φ形の揃った小形な板状のモネタイト結晶粒子の集合体
となる。この砕は現象は脱水相転移により結晶内に生じ
る内部歪み応力によるものと思われる。
３ＩＬｍ：平均直径数１１０１Ｌの比較的大型の板状も
しくは鱗片状結晶体である。これを該結晶の脱水相転移
温度（約７５℃）以ト、分解温度以下の範囲で加熱する
と脱水相転移（結晶水が抜ける）を生じてモネタイト結
晶に転換する。而してブルスハイト結晶粒子は脱水相転
移によりモネタイトに相転移したとき板状もしくは鱗片
状結晶の面内で直径数μｍの細片体となる砕は現象を生
じ、厚さ１〜３ ＩＬｍ、直径飲用ｍの、比較的大きさ
φ形の揃った小形な板状のモネタイト結晶粒子の集合体
となる。この砕は現象は脱水相転移により結晶内に生じ
る内部歪み応力によるものと思われる。
次いでそのモネタイト結晶粒子に対してアルカリ（Ｎａ
ＯＨ−ＫＯＨｉ＞を作用させると該モネタイト結晶粒子
はＨＡ膜粒子ハイドロキシアパタイト結晶粒子）となる
、該生成ＨＡ粒子はモネタイト結晶粒子の形状をそのま
ま受は継いだものである。即ち厚さ１〜３ＩＬｍ、直径
数ＩＬｍの全体的に大きさｅ形の揃った小形な板状結晶
粒子体である。第１図はその電子顕微鏡写真である。ス
ケールは前述第２図の従来のチゼリウス式製造法による
ＨＡ膜粒子電子ＴｔＪ微鏡写真と同じである。
ＯＨ−ＫＯＨｉ＞を作用させると該モネタイト結晶粒子
はＨＡ膜粒子ハイドロキシアパタイト結晶粒子）となる
、該生成ＨＡ粒子はモネタイト結晶粒子の形状をそのま
ま受は継いだものである。即ち厚さ１〜３ＩＬｍ、直径
数ＩＬｍの全体的に大きさｅ形の揃った小形な板状結晶
粒子体である。第１図はその電子顕微鏡写真である。ス
ケールは前述第２図の従来のチゼリウス式製造法による
ＨＡ膜粒子電子ＴｔＪ微鏡写真と同じである。
最終的に上記のような全体的に大きさ拳形の揃った小形
なＨ＾粒子を製造する手順としては、ブルスハイト結晶
粒子を出発物質としてそれを加熱脱水相転移させてモネ
タイト化させ、引続いてアルカリを作用させてハイドロ
キシアパタイト化させるようにしてもよいし、ブルスハ
イト結晶粒子を加熱脱水相転移させて予め生産ストック
したモネタイト結晶粒子を出発物質としてそれにアルカ
リを作用させてハイドロキシアパタイト化させるように
してもよい。
なＨ＾粒子を製造する手順としては、ブルスハイト結晶
粒子を出発物質としてそれを加熱脱水相転移させてモネ
タイト化させ、引続いてアルカリを作用させてハイドロ
キシアパタイト化させるようにしてもよいし、ブルスハ
イト結晶粒子を加熱脱水相転移させて予め生産ストック
したモネタイト結晶粒子を出発物質としてそれにアルカ
リを作用させてハイドロキシアパタイト化させるように
してもよい。
ブルスハイト結晶粒子の加熱脱水相転移処理は該結晶粒
子の懸濁水を該結晶の脱水相転移温度から懸濁水の沸点
の範囲で加熱することにより行ってもよいし、ブルスハ
イト結晶粒子を乾燥器により脱水相転移温度以上、分解
温度以下の温度で加熱することにより行ってもよい。
子の懸濁水を該結晶の脱水相転移温度から懸濁水の沸点
の範囲で加熱することにより行ってもよいし、ブルスハ
イト結晶粒子を乾燥器により脱水相転移温度以上、分解
温度以下の温度で加熱することにより行ってもよい。
而して本発明者は後述の実施例に示すように上記本発明
方法で得られる）ＩＡ粒子を固定相剤としてカラムに充
填してＨＡクロマトグラフィーを実行した場合には、従
来のチゼリウス式製造法で得られるＨＡ膜粒子使用する
場合よりもより鋭敏で高精度なりロマト分離結果を得る
ことができ、又導入流体のカラム内単位断面積・単位時
間当りの流通流量レベルもチゼリウス式製造法で得られ
るＨＡ膜粒子使用する場合と同等のレベルを確保できる
ことを確認し、本発明を完成するに至ったものである。
方法で得られる）ＩＡ粒子を固定相剤としてカラムに充
填してＨＡクロマトグラフィーを実行した場合には、従
来のチゼリウス式製造法で得られるＨＡ膜粒子使用する
場合よりもより鋭敏で高精度なりロマト分離結果を得る
ことができ、又導入流体のカラム内単位断面積・単位時
間当りの流通流量レベルもチゼリウス式製造法で得られ
るＨＡ膜粒子使用する場合と同等のレベルを確保できる
ことを確認し、本発明を完成するに至ったものである。
ここでブルスハイト結晶粒子を加熱脱水相転移させてモ
ネタイト化させたとき、生成モネタイト結晶粒子に、リ
ン酸オクタカルシウム（Ｏｃｔａｃａｌｃｉｕｓ ｐｈ
ｏｓｐｈａｔｅ： ＣａＢ （ＨＰＯ４） ２ （Ｐ
Ｏ４） ４ ｅ ５Ｈ２Ｏ）などの中間体結晶粒子が混
在する場合もある。
ネタイト化させたとき、生成モネタイト結晶粒子に、リ
ン酸オクタカルシウム（Ｏｃｔａｃａｌｃｉｕｓ ｐｈ
ｏｓｐｈａｔｅ： ＣａＢ （ＨＰＯ４） ２ （Ｐ
Ｏ４） ４ ｅ ５Ｈ２Ｏ）などの中間体結晶粒子が混
在する場合もある。
そのような中間体結晶粒子も生成されたモネタイト結晶
粒子と同様に、ブルスハイト結晶粒子の砕けた小型板状
結晶粒子形態のものであり、且つアルカリが作用すると
その形態をそのまま受は継いだＨＡ膜粒子なる。
粒子と同様に、ブルスハイト結晶粒子の砕けた小型板状
結晶粒子形態のものであり、且つアルカリが作用すると
その形態をそのまま受は継いだＨＡ膜粒子なる。
従って本発明においてブルスハイト結晶粒子を加熱脱水
相転移させて生成させたモネタイト結晶粒子、若しくは
出発物質として予め生産したモネタイト結晶粒子には上
記のようなリン酸オクタカルシウム等の中間体結晶粒子
が混在するもの、もしくはそのような中間体結晶粒子分
の方がむしろ実質的に多いものも包含する。
相転移させて生成させたモネタイト結晶粒子、若しくは
出発物質として予め生産したモネタイト結晶粒子には上
記のようなリン酸オクタカルシウム等の中間体結晶粒子
が混在するもの、もしくはそのような中間体結晶粒子分
の方がむしろ実質的に多いものも包含する。
又既存のモネタイト結晶粒子、或はリン酸オクタカルシ
ウムのようにブルスハイトからモネタイトへ至る中間体
物質として既存の結晶粒子であって、必要に応じて粒径
数ｐｍに分別処理して、全体的に大きさ・形状の揃った
粒子体を出発物質とし、それにアルカリを作用させて目
的のＨＡ膜粒子生成製造することもできる。
ウムのようにブルスハイトからモネタイトへ至る中間体
物質として既存の結晶粒子であって、必要に応じて粒径
数ｐｍに分別処理して、全体的に大きさ・形状の揃った
粒子体を出発物質とし、それにアルカリを作用させて目
的のＨＡ膜粒子生成製造することもできる。
（１）ブルスハイト結晶粒子を２５０ｇ含む該結晶粒子
懸濁水５見を １８０分間加熱沸騰させて懸濁ブルスハ
イト結晶粒子をモネタイト結晶粒子に脱水相転移化させ
た０次いで水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）を４０ｇ投入
して撹拌し更に６０分間加熱沸騰を続けることによりモ
ネタイト結晶粒子をＨＡ（ハイドロキシアパタイト）結
晶粒子化させた。
懸濁水５見を １８０分間加熱沸騰させて懸濁ブルスハ
イト結晶粒子をモネタイト結晶粒子に脱水相転移化させ
た０次いで水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）を４０ｇ投入
して撹拌し更に６０分間加熱沸騰を続けることによりモ
ネタイト結晶粒子をＨＡ（ハイドロキシアパタイト）結
晶粒子化させた。
上記で得られたＨＡ膜粒子厚さ１〜３ｇｍ、直径５ＩＬ
ｍ±３１Ｌｍ程度の全体的に大きさ・形状の揃った粒子
体である。
ｍ±３１Ｌｍ程度の全体的に大きさ・形状の揃った粒子
体である。
このＨＡ膜粒子試料粒子Ａとする。
（２）チゼリウス式製造法によるＨＡ膜粒子して、ブル
スハイト結晶粒子を２５０ｇ含む該結晶粒子懸濁水５ｆ
Ｌに水酸化ナトリウムを４０ｇ加えて加熱し６゜分間沸
騰させた。これにより懸濁ブルスハイト結晶粒子はＨＡ
結晶粒子化する。
スハイト結晶粒子を２５０ｇ含む該結晶粒子懸濁水５ｆ
Ｌに水酸化ナトリウムを４０ｇ加えて加熱し６゜分間沸
騰させた。これにより懸濁ブルスハイト結晶粒子はＨＡ
結晶粒子化する。
得られたＨＡ膜粒子出発物質たるブルスハイト結晶粒子
の大きさ・形状をそのまま厚さ１〜３ＩＬｍ・直径４０
ＩＬｍ±２ＯＪＬｍ程度の全体的に大型の板状もしくは
鱗片状粒子で、大きさ・形状についてバラツキ幅の大き
い不揃いの粒子体である。
の大きさ・形状をそのまま厚さ１〜３ＩＬｍ・直径４０
ＩＬｍ±２ＯＪＬｍ程度の全体的に大型の板状もしくは
鱗片状粒子で、大きさ・形状についてバラツキ幅の大き
い不揃いの粒子体である。
この）［Ａ粒子を試料粒子Ｂとする。
（３）而して本発明方法に従って得られる試料粒子Ａと
、従来のチゼリウス式製造法による試料粒子Ｂとのクロ
マト性能の比較を行うために、該試料粒子Ａ−Ｂを夫々
固定相剤として内径６■−１有効長３ｃｍのステンレス
カラムに充填し、夫々のカラムを用いて、 ｉ、牛の血清アルブミン（ＢＳＡ） ｉｉ、鶏の卵白リゾチーム 目ｉ、馬の心臓のチトクロームＣ の３種の物質を含む混液を試料液とする高速液体クロマ
トグラフィー（）ＩＰＬＣ）を夫々下記の同一条件で実
行した。
、従来のチゼリウス式製造法による試料粒子Ｂとのクロ
マト性能の比較を行うために、該試料粒子Ａ−Ｂを夫々
固定相剤として内径６■−１有効長３ｃｍのステンレス
カラムに充填し、夫々のカラムを用いて、 ｉ、牛の血清アルブミン（ＢＳＡ） ｉｉ、鶏の卵白リゾチーム 目ｉ、馬の心臓のチトクロームＣ の３種の物質を含む混液を試料液とする高速液体クロマ
トグラフィー（）ＩＰＬＣ）を夫々下記の同一条件で実
行した。
■温度；室温
■キャリヤ液ニリン酸緩衝液
■試料液・キャリヤ液のカラム内供給量；０．５ｍ Ｊ
Ｌ ／ｓｉｎ ■リン酸緩衝液初期濃度；ｌ■に （Φリンｍｉｓ＃１液線型濃度勾配；１軸阿ｌ履見第４
図は試料粒子Ａを充填したカラムを用いたときに得られ
たクロマトグラム、第５図は試料粒子Ｂを充填したカラ
ムを用いたときに得られたクロマトグラムである。
Ｌ ／ｓｉｎ ■リン酸緩衝液初期濃度；ｌ■に （Φリンｍｉｓ＃１液線型濃度勾配；１軸阿ｌ履見第４
図は試料粒子Ａを充填したカラムを用いたときに得られ
たクロマトグラム、第５図は試料粒子Ｂを充填したカラ
ムを用いたときに得られたクロマトグラムである。
第４図及び第５図の両クロマトグラムにおいて夫々、Ａ
が血清アルブミンのクロマト分離ピーク、Ｂがリゾチー
ムのクロマト分離ピーク、Ｃ１・Ｃ２がチトクロームＣ
のクロマト分離ピークである。チトクロームＣのクロマ
ト分離ピークがＣ１・Ｃ２と２つに割れるのはチトクロ
ームＣの分子に含まれる鉄原子に酸化状態のものと還元
状態のものとがあることに起因するものと推定される。
が血清アルブミンのクロマト分離ピーク、Ｂがリゾチー
ムのクロマト分離ピーク、Ｃ１・Ｃ２がチトクロームＣ
のクロマト分離ピークである。チトクロームＣのクロマ
ト分離ピークがＣ１・Ｃ２と２つに割れるのはチトクロ
ームＣの分子に含まれる鉄原子に酸化状態のものと還元
状態のものとがあることに起因するものと推定される。
Ｄはリン酸緩衝液の塩濃度経時変化推移状態グラフ（無
段階線型制御）である。
段階線型制御）である。
第４図及び第５図の両クロマトグラムを比較すると、第
４図のクロマトグラムの方が第５図のそれよりも各分離
物質のクロマトビークの幅が明らかに狭く、クロマト分
離能が向上していることがわかる０例えば、第５図のク
ロマトグラムにおける場合はリゾチーム標準偏差σが３
．７腸にのリン酸濃度範囲にあるに対して、第４図のク
ロマトグラムにおけるそれは２．８ ｍＷの濃度範囲に
ある。又チトクロームＣの前記２つのクロマト分離ピー
クＣ１・Ｃ２の割れ方も第４図の方が第５図よりも明確
化している。
４図のクロマトグラムの方が第５図のそれよりも各分離
物質のクロマトビークの幅が明らかに狭く、クロマト分
離能が向上していることがわかる０例えば、第５図のク
ロマトグラムにおける場合はリゾチーム標準偏差σが３
．７腸にのリン酸濃度範囲にあるに対して、第４図のク
ロマトグラムにおけるそれは２．８ ｍＷの濃度範囲に
ある。又チトクロームＣの前記２つのクロマト分離ピー
クＣ１・Ｃ２の割れ方も第４図の方が第５図よりも明確
化している。
又試料粒子Ａを充填したカラムと、試料粒子Ｂを充填し
たカラム内に生じる圧力は何れもｌ Ｋｇｆ／ｃｍ２で
、同じである。即ち試料粒子Ａは試料粒子Ｂよりもかな
り小粒径のものであるけれども、該粒子Ａを充填したカ
ラムの、導入流体の流通流量レベルは、試料粒子Ｂを充
填したカラムのそれと同等のレベルが確保される。
たカラム内に生じる圧力は何れもｌ Ｋｇｆ／ｃｍ２で
、同じである。即ち試料粒子Ａは試料粒子Ｂよりもかな
り小粒径のものであるけれども、該粒子Ａを充填したカ
ラムの、導入流体の流通流量レベルは、試料粒子Ｂを充
填したカラムのそれと同等のレベルが確保される。
ハ、発明の効果
以上のように本発明方法に依れば、高精度・能率的なり
ロマト分離を安定に実行させるためのＨＡ顆粒子して、
個々の粒子の大きさ・形状はカラム内導入流体のある程
度以上の実用的流量レベルが確保されるもので、且つそ
の大きさ・形状のバラツキ幅が小さく全体的に粒の揃っ
たものを、簡単に能率的・低コストに量産することがで
きるもので、所期の目的がよく達成される。
ロマト分離を安定に実行させるためのＨＡ顆粒子して、
個々の粒子の大きさ・形状はカラム内導入流体のある程
度以上の実用的流量レベルが確保されるもので、且つそ
の大きさ・形状のバラツキ幅が小さく全体的に粒の揃っ
たものを、簡単に能率的・低コストに量産することがで
きるもので、所期の目的がよく達成される。
第１図は本発明製造方法に従って得たＨＡ顆粒子電子顕
微鏡写真、第２図・第３図は夫々従来のチゼリウム式製
造法で得たＨＡ顆粒子電子顕微鏡写真、第４図は未発ｔ
５’ｌ製造方法に従って得たＨＡ顆粒子充填し九カラム
を用いたクロマトグラフィー例で得られたクロマトグラ
ム、第５図はチゼリウス式製造法で得たＨＡ顆粒子充填
したカラムを用いた場合の同クロマトグラムである。 Ａは血清アルブミンのクロマト分離ピーク、Ｂはリゾチ
ームの同ピーク、Ｃ１・Ｃ２はチトクロームＣの同ピー
ク、Ｄはリン酸緩衝液の塩濃度経時変化グラフ。 ト女電ミｄイー さ 手続ネ市ＪＥ書（方式） ％式％ １、事件の表示 昭和６１年 特 許 間第 １８８６８号２、発明の
名称 グロマトグラフィー用ハイドロキシ アパタイト結晶粒子の製造方法 ３、補正をする者 事件との関係 特 許出願人 名 称 株式会社 高 研４、代理人 東京都渋谷区代々木二丁目１１番１２号５、補正指令の
日付 昭和６１年 ３月２５【］６、補正の対象
明細書「図面の簡単な説明」の欄。 ７、補正の内容 （１）明細書１８頁４行ｒＨＡ粒子」の次に「構造」を
加入する。 （２）同 同頁６行ｒＨＡ粒子」の次に「構造」を加
入する。
微鏡写真、第２図・第３図は夫々従来のチゼリウム式製
造法で得たＨＡ顆粒子電子顕微鏡写真、第４図は未発ｔ
５’ｌ製造方法に従って得たＨＡ顆粒子充填し九カラム
を用いたクロマトグラフィー例で得られたクロマトグラ
ム、第５図はチゼリウス式製造法で得たＨＡ顆粒子充填
したカラムを用いた場合の同クロマトグラムである。 Ａは血清アルブミンのクロマト分離ピーク、Ｂはリゾチ
ームの同ピーク、Ｃ１・Ｃ２はチトクロームＣの同ピー
ク、Ｄはリン酸緩衝液の塩濃度経時変化グラフ。 ト女電ミｄイー さ 手続ネ市ＪＥ書（方式） ％式％ １、事件の表示 昭和６１年 特 許 間第 １８８６８号２、発明の
名称 グロマトグラフィー用ハイドロキシ アパタイト結晶粒子の製造方法 ３、補正をする者 事件との関係 特 許出願人 名 称 株式会社 高 研４、代理人 東京都渋谷区代々木二丁目１１番１２号５、補正指令の
日付 昭和６１年 ３月２５【］６、補正の対象
明細書「図面の簡単な説明」の欄。 ７、補正の内容 （１）明細書１８頁４行ｒＨＡ粒子」の次に「構造」を
加入する。 （２）同 同頁６行ｒＨＡ粒子」の次に「構造」を加
入する。
Claims (6)
- （１）ブルスハイト結晶粒子（ＣａＨＰＯ＿４・２Ｈ＿
２Ｏ）を出発物質としてそれを脱水相転移温度以上〜分
解温度以下の範囲で加熱することによりモネタイト結晶
粒子（ＣａＨＰＯ＿４）に脱水相転移させ、次いでアル
カリを作用させてハイドロキシアパタイト結晶粒子〔Ｃ
ａ＿１＿０（ＰＯ＿４）＿６（ＯＨ）＿２〕を生成させ
る、ことを特徴とするクロマトグラフィー用ハイドロキ
シアパタイト結晶粒子の製造方法。 - （２）ブルスハイト結晶粒子の懸濁水を該結晶の脱水相
転移温度から懸濁水の沸点の範囲で加熱することにより
懸濁ブルスハイト結晶粒子をモネタイト結晶粒子に脱水
相転移させ、次いで該懸濁水にアルカリを添加する、特
許請求の範囲第１項に記載のクロマトグラフィー用ハイ
ドロキシアパタイト結晶粒子の製造方法。 - （３）ブルスハイト結晶粒子を脱水相転移温度以上、分
解温度以下の温度で脱水相転移処理して予め生産したモ
ネタイト結晶粒子を出発物質とし、それにアルカリを作
用させてハイドロキシアパタイト結晶粒子を生成させる
、ことを特徴とするクロマトグラフィー用ハイドロキシ
アパタイト結晶粒子の製造方法。 - （４）ブルスハイト結晶粒子の懸濁水を該結晶の脱水相
転移温度から懸濁水の沸点の範囲で加熱する、或はブル
スハイト結晶粒子を乾燥器により脱水相転移温度以上、
分解温度以下の温度で加熱して脱水相転移させることに
より出発物質としてのモネタイト結晶粒子を予め生産す
る、特許請求の範囲第３項に記載のクロマトグラフィー
用ハイドロキシアパタイト結晶粒子の製造方法。 - （５）予め生産した出発物質たるモネタイト結晶粒子の
懸濁水にアルカリを添加する、特許請求の範囲第３項に
記載のクロマトグラフィー用ハイドロキシアパタイト結
晶粒子の製造方法。 - （６）既存のモネタイト結晶粒子、或はブルスハイトか
らモネタイトへ至る中間体物質として既存の結晶粒子で
あって、全体的に大きさ、形状の揃った、或は揃うよう
に処置した粒子体を出発物質とし、それにアルカリを作
用させてハイドロキシアパタイト結晶粒子を生成させる
、ことを特徴とするクロマトグラフィー用ハイドロキシ
アパタイト結晶粒子の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61018868A JPS62202808A (ja) | 1986-01-30 | 1986-01-30 | クロマトグラフイ−用ハイドロキシアパタイト結晶粒子の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61018868A JPS62202808A (ja) | 1986-01-30 | 1986-01-30 | クロマトグラフイ−用ハイドロキシアパタイト結晶粒子の製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62202808A true JPS62202808A (ja) | 1987-09-07 |
Family
ID=11983519
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61018868A Pending JPS62202808A (ja) | 1986-01-30 | 1986-01-30 | クロマトグラフイ−用ハイドロキシアパタイト結晶粒子の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS62202808A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4874511A (en) * | 1986-03-07 | 1989-10-17 | Koken Co., Ltd. | Apatite chromatography column system |
| US5073357A (en) * | 1989-08-01 | 1991-12-17 | Toagosei Chemical Industry, Co., Ltd. | Process for producing hydroxylapatites |
| FR2857658A1 (fr) * | 2003-07-16 | 2005-01-21 | Rhodia Chimie Sa | Nouveaux granules de phosphates de calcium de type hydroxyapatite, leur procede de preparation et leurs applications |
| JP2008510674A (ja) * | 2004-07-07 | 2008-04-10 | イノフォス インコーポレーテッド | ヒドロキシアパタイト型のリン酸カルシウム顆粒の調製方法 |
-
1986
- 1986-01-30 JP JP61018868A patent/JPS62202808A/ja active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4874511A (en) * | 1986-03-07 | 1989-10-17 | Koken Co., Ltd. | Apatite chromatography column system |
| US5073357A (en) * | 1989-08-01 | 1991-12-17 | Toagosei Chemical Industry, Co., Ltd. | Process for producing hydroxylapatites |
| FR2857658A1 (fr) * | 2003-07-16 | 2005-01-21 | Rhodia Chimie Sa | Nouveaux granules de phosphates de calcium de type hydroxyapatite, leur procede de preparation et leurs applications |
| WO2005007599A3 (fr) * | 2003-07-16 | 2005-07-28 | Rhodia Chimie Sa | Granules de phosphates de calcium de type hydroxyapatite et leur procede de preparation et leurs applications |
| JP2007528833A (ja) * | 2003-07-16 | 2007-10-18 | イノフォス インコーポレーテッド | ヒドロキシアパタイトリン酸カルシウムの顆粒、それらの調製方法および使用 |
| JP4854507B2 (ja) * | 2003-07-16 | 2012-01-18 | イノフォス インコーポレーテッド | 顆粒形状のリン酸カルシウムの調製方法 |
| JP2008510674A (ja) * | 2004-07-07 | 2008-04-10 | イノフォス インコーポレーテッド | ヒドロキシアパタイト型のリン酸カルシウム顆粒の調製方法 |
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