JPS62164686A - ペニシリン類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は抗生物質、特に新規なベータラクタム抗生物質
を製造するための中間体に関する。

従来の技術 および ベータラクタムは、新規な抗生物質を得る目的で相当な
研究がおこなわれてきている特に重要な抗生物質群を構
成する。英国特許出願第８４２１２７９号明細書には、
一般式（Ｉ）： （式中、Ｘは硫黄原子もしくはメチレン、Ｒ１は水素原
子、アミノ基またはアシル化もしくはカルシ＜ミル化ア
ミノ基を示し、Ｒ２は水素原子またはアルキル基を示し
、Ｒ３はアルコキシ基を示す）で表わされる新規なベー
タラクタム抗生物質群が開示されている。

もちろんこの種のペニシリン化合物（Ｉ）はペナム環系
の２−位に、通常の２個のアルキル基（メチル基）の代
りに、アルコキシ基と共に水素原子もしくはアルキル基
を有している点で非常に珍しいものである。従って、２
−位にアルコキシ基を有するペニシリン類は関心のある
ものであるが、上記の英国特許出願明細書に記載された
化合物の製造過程には、酵素イソペニシリンＮシンセタ
ーゼの作用によって該化合物に変換され得るトリペプチ
ドを必要とするので、ペニシリン環の２−位に存在して
いてもよいアシルアミノ基の性質には相当な制約がある
。ペニシリン環系の不安定な性質に起因して相当な問題
かあるが、本発明者は、この種のペニシリン（Ｉ）を脱
アシル基化することによって、ペナム環系の６−位にア
ミノ基を有する対応する化合物（ＩＩ）を製造すること
が可能であることを究明した。これらの化合物（ＩＩ）
は６−位に異なったアシルアミノ基を有する式（Ｉ）で
表わされる化合物とは別の抗生物質である。

問題点を解決するための手段 即ち本発明は、一般式（ＩＩ）： ０２Ｈ （式中、Ｒは水素原子またはアルキル基を示し、Ｒ’は
アルコキシ基を示す） で表わされる化合物並びに該化合物の塩およびエステル
に関する。

塩もしくはエステル形態でない化合物（ＩＩ）において
は、アミノ基およびカルボキシ基は通常は双性イオン形
態（Ｈ３Ｎ”−および−ＣＯ２−）として存在する。

ペニシリン（ＩＩ）においては、Ｒは好ましくはアルキ
ル基である。アルキル基Ｒおよびアルコキシ基Ｒ′に含
まれるアルキル基は分枝鎖状であってもよいが、特に直
鎖状である。ＲおよびＲ′は炭素原子数１〜５、特に１
〜４、就中１〜３のアルキル基から選択するのが好適で
ある。好ましいＲとしテハイソプロビル、プロピル、特
にヱチル、就中メチルが例示され、好ましいＲ′として
はインプロポキシ、プロポキシ、特にヱト牛シ、就中メ
トキシが例示される。

ペニシリン（ＩＩ）の例えば水に対する溶解度を高める
ためには塩の形態にするのが有利である。このような塩
はアミノ基と無機酸もしくは有機酸との反応によって生
成させてもよく、あるいはカルボキシル基と無機塩基も
しくは有機塩基との反応によって生成させてもよく、例
えばペニシリン化合物（ＩＩ）の≠トリウム塩、カリウ
ム塩およびアンモニウム塩が重要である。有機溶剤に対
する溶解度を高めるためまたはその他の理由からは、ペ
ニシリン（ＩＩ）の３−カルボキシ基をエステル誘導基
の形態にするのか有利である。このようなエステル誘導
体は３−位にＣｏ２Ｒ１基を有する。この場合、Ｒ１は
公知のペニシリン中に存在する基を含む種々のタイプの
有機基である。従って、例えばＲ１はアリール基、特に
アリールオ牛ジアルキルもしくはアルコキシア゛ルキル
基または特にアラルキルくはアルキル基であってもよい
。このようなエステル基中に含まれるアリール基は置換
もしりｃ−！非置換であってもよく、特に置換もしくは
非置換フヱニル基が重要である。アルキル基とアルコキ
シ基は種々のサイズのものであってもよいが、炭素原子
数が１〜１０、特に１〜５の直鎖状もしくＣま分枝鎖状
の脂肪族炭化水素基またはこのような炭化水素基を含有
する基が特に重要である。ペニシリン（ＩＦ）のエステ
ル基中に存在していてもよ０基Ｒ１トしてはメチル、ヱ
チル、プロピル、イソプロピル、ベンジル、シフヱニル
メチル、ベンシルオキシメチル、２，　２．　２−トリ
クロロヱチルおよびトリメチルシリルが例示される。

ペニシリン（ＩＩ）の立体化学に関しては、基Ｒおよび
Ｒ′が結合した不斉炭素原子につ０て、隣接するカルボ
キシル基に対して同じ空間的配置をとるのが基Ｒである
かＲ′であるかによって２種のコンフィグレーションが
可能である。後者の万力Ｓより重要で、特にＲかアルキ
ルの場合番と６まこの立体異性体の調製が非常に容易で
あるという観点から重要である。

本発明による特に重要なペニシリンは、式（ＩＩ）にお
いてＲが水素原子、メチルまたはヱチルで、Ｒ′がメト
キシまたはヱトキシである化合物で、就中Ｒが水素原子
または特にメチルでＲ′がメトキシである化合物、例え
ば２−メチル−６ーアミ／−３−カルボキシベナムおよ
び２−メトキシ−６−アミノ−３−カルボキシペナム等
が含まれる。これらのペニシリン（ＩＩ）は特に重要で
、就中、Ｒがアルキルで、チアゾリドン環の２−位およ
び３−位のアルコキシ基およびカルボキシ基がジスコン
フィグレーションにおいて同じ空間的配置をとる立体異
性体、即ち２ミ一異性体か重要である。２Ｓ−２−メト
キシ−２−メチル−６−アミノ−３−カルボキシベナム
の構造は次式（ＩＩＩ）で表わされる： ＨＨＩ ＣＯ３Ｈ ペニシリン（ＩＩ）は、ペニシリン（ＩＩ）の２−位の
基ＲおよびＲ′に対応する２−位の基Ｒ２およびＲ３を
有するペニシリン（Ｉ）の脱アシル基化反応によって調
製するのが好適である。この目的に最も適したペニシリ
ン（Ｉ）は、Ｒ１かアミノ基で、好適にはＸがメチレン
である基を６−位に有するもので、好ましぐは該基がＬ
−コンフィグレーションである化合物、即ち６−δ−（
Ｌ−α−アミノアジパミド）基を有するペニシリン〔式
（Ｉ）におイテＲ□がＮＨ２でＸがＣＨ２の化合物〕が
特に有用である。

ペニシリン環系に置侠したδ−（α−アミ／アジパミド
）もしくは類似の基の説アシル基化反応には相当な問題
が伴う。酸もしくはアルカリを使用する直接的なアミド
加水分解法は適用できない。

何故ならば、このような方法によっては不安定な環系が
破壊されるからである。［イミノクロライド］法もこの
ような特別な情況下では不適である。

何故ならば、この方法を適用する前にカルボキシル基と
第一級アミノ基の両方を予め保護しなければならないか
らである。さらに、このような敏感な脱アシル基化反応
にしばしは使用される常套の細菌性デアシラーゼ酵素は
δ−（α−アミノアジパミド）基のような親水性基の場
合には一般に適用できない。酵素による脱アシル基化法
は本発明においても潜在的に注目すべきものであるか、
これには非常套の酵素、例えばペニシリウム・りする特
殊なデアシラーゼ酵素等が必要である。従って、これま
でに立証された特別な化学的方法が最も有効である。こ
の方法はノ１０ゲン化ニトロシル試薬、例えば臭化ニト
ロシルまたは特に塩化ニトロシルを使用するもので、こ
れによって化合物ＦＩＩの炭素原子に６−アシルアミノ
基のカルボニル酸素原子が結合したイミノラクトンを形
成させ、次いでこのイミノラクトンを開裂させてペニシ
リン（ＩＩ）とラクトン副生成物を生成させる〔化合物
（Ｉ）のアミノ基はイミノラクトンを形成する際に離脱
する〕。ペニシリン（１）トノ１０ゲン化ニトロシルと
の反応はアセトニトリルのような適当な溶媒中、窒素の
ような不活性雰囲気下において一り０℃〜七１０℃、例
えば０℃でおこなうのが好適である。

ハロゲン化ニトロシルは氷酢酸のような有機酸に添加す
るのが好適で、反応時間は一般に５〜１０分間が適当で
ある。この反応後、中間体イミノラクトンを開裂させる
。このための適当な試薬は第一級アルコーノへ例えばメ
タノールのようなＣ１〜５アルカノールである。このよ
うな試薬は、ハロゲン化ニトロシル反応混合物から溶媒
を除去して得られる生成物に添加し、この浴液を室温、
例えば２０〜３０℃において５〜１０分間放置するのが
好適である。ペニシリン（ＩＩ）を単離するための後処
理操作には蒸発、ｐＨ２の緩衝液を用いる残渣の処理、
炭酸水素アンモニウムを用いる中和、凍結乾燥および高
圧液体クロマトグラフィーの使用か含まれる。

ペニシリン（ｎ）の調製に使用されるペニシリン（Ｉ）
の立体化学に関しては次のことが判明した。

即ち、ペニシリン（Ｉ）の基Ｒ２およびＲ３の立体化学
的配置は脱アシル基化反応においても一般に保持され、
同じ配置の基ＲおよびＲ′を有するペニシリン（ＩＩ）
が得られる。英国特許出願第８４２１２７９号明細書に
記載されているようなペニシリン（１）（Ｒ□は水素原
子またはアミノ基を示す）は式（■）：０２Ｈ （式中、Ｘは硫黄原子またはメチレン基を示し、Ｒｏは
水素原子またはアミノ基を示し、Ｒ２は水素原子または
アルキル基を示し、Ｒ３はアルコキシ基を示す） で表わされる対応するトリペプチドにインペニシリンＮ
−シンセターゼを作用させることによって調製される。

Ｒ２がアルキル基の場合、基Ｒ２およびＲ３が結合した
炭素原子は不斉炭素原子である。イソペニシリンＮシン
セターゼを用いるトリペプチド（ＩＶ）のペニシリン（
Ｉ）への十分な変換は、２−位がＲ−コンフィグレーシ
ョンのトリペプチドを用いるときのみにおこなわれ、該
コンフィグレーションはこの変換中も保持され、２−位
が＄−ヱンフイグレーションの立体化学的に等価なペニ
シリンが得られることが判明した。Ｒ２が水素原子のと
き、該炭素原子は不斉炭素原子ではないので、この場合
に得られるペニシリン（Ｉ）は、２−位のコンフィグレ
ーションが異った２種の立体異性体の混合物と考えられ
る。この理由から、Ｒ２が水素原子ではなくてアルキル
基である最も重要なペニシリン（Ｉ）は、２−位が５−
コンフィグレーションである形態のものがより容易に調
製される。

従って本発明には、式（Ｉ）で表わされる対応する化合
物（式中、Ｒｏは水素原子または好ましくはアミノ基を
示し、Ｘは硫黄原子または好ましくはメチレン基を示す
）を例えば／１０ゲン化ニトロシルを用いて脱アシル基
化させて中間体イミノラクトン（Ｒ□は水素原子を示す
）を形成させ、次いで該中間体を開裂させることを含む
、前記の一般式（ＩＩ）で表わされる化合物の製造方法
が含まれる。

塩形態の化合物（ＩＩ）は前記の遊離の化合物を適当な
酸もしくは塩基と反応させることによって調製するのが
好適であり、一方、ヱステル形態の化合物はアルカリ金
属塩をジメチルホルムアミド中で適当なハロゲン化物と
反応させるか、または２−位のアミノ基との反応を防ぐ
他の常套法によって調製するのが好適である。

前述のように、ペニシリン（ＩＩ）は６−位のアミノ基
のアシル化によって新規なペニシリンを製造する場合の
中間体として使用できる。Ｒが有８！酸残基、特に有機
カルボン酸残基である種々のアシル基を導入してもよい
。アシル化剤としてはハロゲン化物、特に塩化物もしく
は臭化物または導入される酸残基の酸無水物か特に適し
ているが、他のアシル化剤を使用してもよい。このよう
な他のアシル化剤としては混合した酸無水物、活性化ヱ
ステルおよびカルボン酸とカルボジイミドとの混合物等
が例示される。多くの場合に特に有用な方法には有機酸
ハロゲン化物、例えばフヱニルアセチルクロライドのよ
うな有機カルボン酸ハロゲン化物の使用か含まれ、過剰
のこれらのアシル化剤をアセトンのような適当な溶媒系
中においてペニシリン（ＩＩ）と−５℃〜＋５℃、例え
ば０℃で反応させるのが好適で、反応時間は１０〜２０
分間が多くの場合適当である。

従って本発明には、式（ＩＩ）で表わされるペニシリン
に有機酸アシル化剤を作用させて該ペニシリンの６−位
のアミノ基をＲＮＨ−基（Ｒは有機酸残基を示す）に変
換させることを含む、６−アシルアミ／−２−アルコキ
シ−および６−アシルアミノ−２−アルコキシ−３−カ
ルボキシペナムの製造方法が含まれる。

以Ｆ、本発明を実施例によって説明する。

実施例１ ２Ｓ−２−メトキン−２−メチル−６−アミノ−３−カ
ルボキシペナムの調製 ２Ｓ−２−メトキシ−２−メチル−６−δ−（Ｌ−α−
アミノアジパミド）−３−カルボキシペナム〔２−メト
キシ−６−アミノ−３−カルボキシペナムは２−メトキ
シ−６−δ−（し−α−アミノアジパミド）−３−カル
ボキシペナムを出発物質として同様にして調製してもよ
い。）１．１５ｍｇを乾燥アセトニトリル３００μｅに
加えた溶液を塩化ニトロシルの氷酢酸溶液（２５μｌ　
、０．６１Ｍ）を用いて窒素雰囲気Ｆ、Ｏ℃で処理した
。０℃で５分間撹拌した溶液を０℃での蒸発処理に付し
て乾燥した。残渣をメタノール４００μｇで処理して得
られた溶液を２０℃で５分間放置した後、蒸発乾燥処理
に付した。０．０４　Ｍ　Ｈ（Ｊ’１０．１６ＭＫＣｌ
水性緩衝液（ｐＨ２）４００μｇを残渣に加えて得られ
た溶液を２０℃で３分間放置し、次いで該溶液に７０ｍ
Ｍ炭酸水素アンモニウム水溶液３００μｅを添加した溶
液を凍結乾燥した。この凍結乾燥物を、溶離剤として５
０　ｍＭ炭酸水素アンモニウム水溶液とメタノールの混
合液（１９：ｌｖ／ｖ）を用いる逆相（ｒｅｖｅｒｓｅ
　ｐｈａｓｅ　）オクタデシルンラン力うム上でのり、
ｐ、ｅ、　ｃ、に直接かけることによって２ミ−２−メ
トキシ−２−メチル−６−アミノ−３−カルボキシペナ
ムを凍結乾燥固体として５０ｇｇ得た〔非利用率（ｕｎ
ｏｐｔｉｍｉｓｅｄ　）　：　７　％　〕。’Ｈｎ。

ｍ、　ｒ、のデータ（５００ＭＨｚ、重水素化Ｎａ２Ｈ
２ＰＯ４／Ｎ　ａ２　ＨＰ　０４　／Ｋ　Ｃ１ｌ　緩衝
液（ｐＨ７，０）、（Ｃ）（３）３　ＳｉＣＤ２　ＣＤ
２　ＣＯ２Ｎ　ａ　”’　０．００　　を基準とするδ
値（１）−ｐ−ｍ、）〕は次の通りである：　１．９１
　（３Ｈ，ｓ、　２−β−ＣＨ５）、３．４０　（３Ｈ
，ｓ、　ＯＣＨ３）、４．３６　（ＩＨ，ｓ、　３Ｈ）
、５．３６　（Ｌ　Ｈ％ｄ、　Ｊ　４Ｈｚ、β−ラクタ
ム−Ｕ、他のβ−ラクタム一旦はＨＯ２Ｈのために不明
瞭）。

出発物質の調製 （Ａ）　２　Ｓ　−２−メト牛シー２−メチル−６−δ
−（シーα−アミノアジパミド）−３−カルボキシペナ
ム δ−（Ｌ！−α−アミノアジピル）−Ｌ−システイニル
−（２Ｒ，３１３−２−アミノ−３−メトキシブチル酸
）の調製 モー３−メトキシブチル酸 クロトン酸８．６　ｇ　（１００ｍｍｏｌ）をメタノー
ル５゜ｍＱに溶解させた溶液にＮ−ブロムアセトアミド
１３．８　ｇ　（１０ｍｍｏ＋）を３０分間かけて添加
した。

この溶液を２５℃で１５時間撹拌し、溶媒を蒸発させた
残渣をジヱチルヱーテルと水との間で分配させた。エー
テル層をＮａ２ＳＯ４を用いて乾燥させ、濾過処理およ
び蒸発処理に付した後、蒸留によって標記化合物を無色
オイ／ｌｚ　（ｂ、ｐ、ｓｓ〜８９°／　０．５　ｓｍ
　）として１４．３．ｇ　（７２％）得た。

ノー３−メトキシブチル酸 ２Ｂ、ａＢ−および２＄、３ミー２−ブロモ−３−メト
キシブチル酸１４　ｇ　（７１ｍｍｏｌ）をアンモニア
（ｓ、ｇ、　０．８８　）　２５０ｍｆに溶解させた混
合物をオートクレーブ中、９５℃で８時間加熱した。混
合物を２５℃まで冷却し、蒸発処理に付した残渣をアセ
トン中へ懸濁させた。得られた無色の固体を蓚酸無色固
体（ｍ、ｐ、１８０〜１８４℃（分解）〕として１２．
１ｇ得た。

（３）２Ｒ，３Ｒ−および２Ｓ、３Ｓ−Ｎ−ベンジルオ
キシカルボニル−２−アミノ−３−メトキシブチル酸、
ペンジルヱステル メトキシブチル酸３．１ｇを、ＩＭ水水酸ナナトリ９ム
溶液２７Ｑ％水２０ｍＱおよびジオキサン４０ｍＱから
成る混合物に溶解させた。ジオキサン２０ｍＱにベンジ
ルクロロフォーメート３．８　ｍＱ　（２２ｍｍｏｌ　
）を加えた溶液およびＩＭＭ酸化ナトリウム溶液２７ｍ
Ｑを別々に上記溶液に添加した（添加時間はいずれも２
５分間）。この混合物を１時間撹拌した後、酢酸ヱチル
を用いて抽出しく３ｘ２００ｍＱ）、２Ｎ塩酸を用いて
ｐＨ１まで酸性化し、次いで酢酸ヱチルを用いて再抽出
した（３ｘ２００ｍｆｆｉ）。抽出物を一緒にして乾燥
させ、濾過処理に付した後、蒸発処理に付してオイルを
得た。このオイルを乾燥ジメチルホルムアミド２０ｍｅ
に溶解させた溶液に炭酸水素ナトリウム３．１４ｇ（４
１ｍｍｏｌ）　、臭化ベンジル３．８ｍＱ　（３３ｍｍ
ｏｌ　）　、無水硫酸ナトリウム２００ｍｇおよびヨー
化すｌ−ＩＪウム１０ｍｇを添加し、全体を２５℃で２
４時間撹拌した。この混合物をジクロロメタン２００ｍ
Ｑで抽出し、水洗しく４ｘ３００ｄ）、硫酸ナトリウム
を用いて乾燥させた後、濾過処理に付し、次いで蒸発処
理に付した。溶離剤として酢酸ヱチルと石油ヱーテルを
連続的に使用するシリカゲル上でのクロマトグラフィー
によって精製をおこなって標記化合物を無色オイル（放
置するとｍ。

ｐ、４４℃の固体に変化する）として４．２ｇ（６５％
）得た。

３−メトキシブチル酸、ペンジルヱステルシ力ルボニル
−２−アミ／−３−メトキシブチル酸、ペンジルヱステ
ル５００ｍｇ　（１，４ｍｍｏｌ　）を乾燥ジクロロメ
タン３ｍＡに溶解させた溶液に臭化水素酸（４５％酢酸
溶液）２ｍＱを添加した。混合物をアルゴン雰囲気下で
２０分間撹拌した後、蒸発処理に付した。残渣をジクロ
ロメタンに溶解させ（３×３ｍｅ）、これを再蒸発処理
（３×）に付すことによって得られた残渣をキシレンに
溶解させ（２×３ｍＱ）、再蒸発処理（２Ｘ）に付した
。次いで石油ヱーテル５ｍＱを添加し、生成物を５分間
粉砕した後、母液を廃棄し、固体状残渣をジクロロメタ
ン５ｍＱに溶解させた。このジクロロメタン溶液にトリ
ヱチルアミ２１ｍｇ。添加し、２分間撹拌させた後、蒸
発処理に付した。残渣をジクロロメタンに溶解させ（３
ｘ５ｄ）、再蒸発処理（３Ｘ）に付すことによって得ら
れた残渣をジヱチルヱーテル５ｍＱと共に粉砕した。得
られた固体を濾取し、ジヱチルヱーテルを用いて再抽出
しく２Ｘ５ｍＱ）、−緒にしたエーテル層を蒸発処理に
付すことによって標記化合物を無色オイルとして２９０
ｍｇ（９３％）得た。

（５）　（Ｎ−ベンゾイルオキシカルボニル−α−ベン
ジルーδ−し一アミノアジピル＞−Ｓ−ベンジル−し−
システイニル−（２Ｒ，３Ｒ−２−アミ／−３−メトキ
シブチル酸）、ペンジルヱステル ２Ｒ，３ｇ−および２Ｓ、３ミー２−アミノ−３−メト
キシブチル酸、ベンジルヱステル１７７ｍｇ　（０，７
９ｍｍｏｌ　）を乾燥ジクロロメタン１ｏｍＱに溶解さ
せた溶液に、パルドウイン（Ｂａｌｄｗｉｎ　）　　ら
の方法〔ジャーナル・オブ・ザ・ケミカル・ソサイアテ
イ（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ
　５ｏｃｉｅｔｙ　）、パーキン（Ｐｅｒｋｉｎ）　Ｉ
　、　１９８１、第２２５３頁参照〕によって調製した
２−ヱトキシーＮ−ヱトキシ力ルボニル−１，２−ジヒ
ドロキノリン１９５ｍｇ（０，７９ｍｍｏｌ　）および
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−α−ベンジル−δ−（
Ｌ、−α−アミノアジピル）−８−ベンジル−し−シス
ティン４５６ｍｇ（０，７９ｍｍｏｌ）、および硫酸ナ
トリウム１００ｍｇを添加し、この混合物を２４時間撹
拌した。この溶液を蒸発処理に付すことによって得られ
た残渣を酢酸ヱチル１５０ｍ（！に溶解させ、この酢酸
ヱチル溶液を２Ｍ塩酸５０ｍＱ、炭酸水素ナトリウム飽
和溶欣５０ｍＱおよび塩水５０ｍｆｌを用いて順次洗浄
し、乾燥後、濾過処理および蒸発処理に付した。溶離剤
として酢酸ヱチルおよびヘキサンを連続的に使用するシ
リカ上でのクロマトグラフィーによる精製によって標記
化合物を無色固体として１８０ｍｇ（２９％）得た［　
ｍ、ｐ、　１１６〜１１８℃、〔α）２０−１１．７°
（ｑｌ、ＣＨＣ１３）（２１３，３Ｈ化合物は２３．３
Ｓ異性体よりも極性は小さい）〕。

ステイニル−（２Ｒ，３Ｒ−２−アミ／−３−メトキシ
ブチル酸） Ｎ−ペンジルオ牛ジカルボニルーα−ベンジル−δ−（
Ｌ、−α−アミ／アジピル）−３−ベンジル−し−シス
テイニル−（２Ｒ，３Ｒ−２−アミノ−３−メトキシブ
チル酸）、ペンジルヱステル２００　ｍｇ　（０，２６
ｍＱ）をテトラヒドロ７ラン１０ｍＱと乾燥液体アンモ
ニア３０ｍＱに溶解させた溶液に、系の青色呈色が１０
分間持続するまでナトリウムを少量ずつ添加し、この溶
液が無色になるまで乾燥硫酸アンモニウムを添加した。

溶媒を蒸発させた残渣を５０ｍＭ硫酸２０ｍ（！に溶解
させた溶液にホプキンス試薬（パルドウインらの前記文
献参照）０．０５ｍｇを添加した。水酸化アンモニウム
を用いることによって系のｐＨを４にし、得られた沈殿
物を水洗（３Ｘ２０ｍＱ）　シた後、水１０ｍｇ中に懸
濁させ、これを過剰の硫化水素を用いて処理した。

硫化第二水銀を濾別した後、凍結乾燥処理によって標記
化合物を白色固体として６７ｍｇ（６８％）得た〔この
化合物の収率は既知量のジオキサンを添加し、１．０５
シグナル（ＣＨＣＨ３プロトン）に対するスタンダード
のｎ、ｍ、ｒ、積分によって決定した。

この方法によれば、トリペプチド中に残余量（約１０％
）のアンモニウム塩が通常検出される。この汚染物質は
、実施例３に記載のようなイソペニシリンＮシンセター
ゼ酵素を用いるインキュベーションにおいても同様にし
てメトキシル化ヘニシリンをもたらす〕。この化合物の
Ｈｎ、ｍ、ｒ、のデータ〔Ｄ２０、テトラメチルシラン
（ＴＭＳ）を外部基桑、δ値（ｐ、ｐｏｍ）　）は次の
通りである：１．０５（３Ｈ，ｄ、Ｊ　８Ｈｚ）、１．
６０−１．９０（４Ｈ，ｍ）、２．２５（２Ｈ，ｔ、Ｊ
、８Ｈｚ）、２．８０（２Ｈ，ｍ）、３．２５（３Ｈ，
ｓ）。

３．７５−３．９０　（２Ｈ、ｍ　）および４．４０（
ＬＨ，ｍ）。

水道水の代りに蒸留水を使用する以外はフォーセット（
ＦａＷＣｅｔｔ）らの方法〔）＜イオケム・ジヱイ（Ｂ
ｉｏｃｈｅｍ、　Ｊ、、　１９７６年、第１５７巻、第
６５１頁〜第６６０頁参照〕と同様にしてセファロスポ
リン・アクレモニウム（Ｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｉｎ　
ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ　）■７２８　の細胞を培養した
。イソペニシリンＮシンセターゼを以下のステップ（実
施温度：２〜４℃）に従って単離した。

（１）粗製抽出物 菌糸体〔時令：９６時間／定常相（５ｔａｔｉｏｎａｒ
ｙｐｈａｓｅ　）　　の初期段階力）ら約１０時間経過
〕を二重チーズクロスを通す濾過によって採取した。捕
集した細胞を３Ｘ（ｖ／ｗ）蒸留水中に懸濁させ、これ
をブフナー漏斗内のワットマン濾紙（＆　５２　）　　
を通して吸引乾燥させた。吸引乾燥した菌糸体をほぼ３
Ｘ（ｖ／ｗ）の５０ｍＭトリス−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ８
，０）に！！！濁させ、これを、６００ｍＱガラスヘッ
ド内で３００Δｒ、ｐ、ｍ、　　で撹拌させた０、２５
ｆｌガラスピ一ズ５００ｍＱを用いてダイノ・ミル（Ｄ
ｙｎ。

Ｍｉｌｌ）［ウィリー・アー・バコフヱン・アーケー−
７シーネンファブリーク（Ｗｉｌｌｙ　Ａ　Ｂａｃｏｆ
ｅｎＡＧ　Ｍａｓｃｈｉｎｅｎｆａｂｒｉｋ　）　（バ
ーゼル）製〕内で粉砕した。

（２）硫酸プロタミン分別 上記のホモジヱネートに５分の１体積の硫酸プロタミン
溶液（蒸留水中の濃度二６％ｗ／ｖ　）を添加した。得
られた溶液を２０分間撹拌し、１０，０００ｇでの遠心
分離処理に３０分間付して沈殿物を除去した。

上記の捕集した上澄みを硫酸アンモニウム〔シグマ・グ
レード（Ｓｉｇｍａ　Ｇｒａｄｅ　）　Ｉ　］を用いて
５５％飽和とし、これを１０，０００　ｇでの遠心分離
処理に３０分間付して沈殿物を除去した。上澄みを硫酸
アンモニウムを用いて８５％飽和とし、これを１０．０
００ｇでの遠心分離処理に４５分間付して酵素蛋白質を
沈殿物として回収した。

５５〜８５％硫酸アンモニウム分別によって得られた沈
殿物を最小量のトリス−ＨＣｌ緩衝液（５０ｍＭ、ｐＨ
７，５，０，０１５％ｗ／ｖアジドナトリウム）に溶解
させ、蛋白質の最終濃度を４０　ｍｇ／ｍＱとした。こ
の蛋白質溶液８０ｍ（を、予め同じトリス−ＨＣｌ緩衝
液を用いて平衡状態にしたセファデック７．０−７５カ
ラム（３，７Ｃ７１１Ｘ　１１０ｃＭ）　［：ファーマ
シア（Ｐｈａｒｍａｃｉａ　）　Ｒ粗粒品］にかけた。

イソペニシリンＮシンセターゼ活性を有するフラクショ
ンをプールさせ、酵素蛋白質を８５％ｗ／ｖ硫酸アンモ
ニウムを用いる沈殿処理およびその後の遠心分離処理（
１０，０００ｇ、４５分間）によって濃縮させた。

高度に精製した酵素調製物を、セファデックスＧ７５カ
ラムクロマトグラフイーからの酵素フラクションをイオ
ン交換クロマトグラフィーに付すことによって得る。活
性フラクションをプールさせ、これを、トリス−ＨＣｌ
緩衝液（５０ｍＭ、ｐＨ７，５，０，０１５％　ｗ／ｖ
アジドナトリウム）を用いて予め平衡にしたＤＥＡＥ−
セファロースＣＬ−６Ｂカラム（５ｃｍ×１１．５ｃｍ
　）に直接Ｄ）げた。このカラムを同じトリス−ＨＣｌ
緩衝１夜中の５０　ｍＭ　Ｎａ（Ｊ’約５００　ｍＱを
用いて洗浄して非結合物質を除去した。

このカラムを次いで緩衝液中のＮａ　Ｃ１を用いる傾斜
溶離処理（５０ｍＭ→２５０ｍＭ、全体積８００ｍＱ。

直線傾斜）に付したところ、酵素活性物は約ｉｏ。

ｍＭ　ＮａＣ＃　で溶離した。このようにしてカラムか
ら得られた酵素調製物は直接使用するのに適している。

酵素の活性量はイソペニシリンＮシンセターゼ活性ユニ
ットによって定量的に表示してもよい。

このようなユニットの１つは、前述のような培養条件を
用いる標孕的アッセイ法において、２７℃で１分間あた
りにイソペニシリンＮを１μｍｏｌｅ生成させるのに必
要な酵素活性量として定義されるものである。

２５−２−メトキシ−２−メチル−６−δ−（レーα−
アミ／アジパミド）−３−カルボキシペナムの調製 前述のようにして調製したδ−（Ｌ−α−アミ／アジピ
ル）−月−システイニル＝（２Ｒ，３ド。

−２−アミノ−３−メトキシブチル酸２１０μｇを、コ
ファクタージチオスレイトール（２，１１ｍＭ）、アス
コルビン酸（１，０６ｍＭ　）、硫酸第一鉄（０，１１
ｍＭ）およびカタラーゼ（ウシの肝臓、１８００シグマ
ユニツト）の存在下、トリス−ＨＣｌ緩衝液［５０ｍＭ
。

ｐＨ７，５、（トリスは２−アミ／−２−ヒドロキシメ
チルプロパン１．３−ジオールを示す）〕中（全体積１
　ｍＱ　）において、以下のようにして得られた精製イ
ソペニシリンＮシンセターゼ（１，１ユニツト）を用い
てインキュベートした。インキュベーションは空気にさ
らしたシヱーカ−（２５Ｏｒ、ｐ、ｍ、）内において２
７℃で３０分間おこなった。アセトンを７０容量％の濃
度まで添加することによって蛋白質を混合物から沈殿さ
せ、遠心分離によって分離させ、上澄みを凍結乾燥させ
た。この凍結乾燥物を水５００μｌに溶解させ、生成物
を、溶離溶媒として９０容量％５０　ｍＭ　ＫＨ２Ｐ　
０４　／　１０容量％メタノールを使用し、抗生物質を
２２０ａｇにおける吸収によって検出するＨＰＬＣ（ウ
ォーターズ社（Ｗａｔｅｒｓ　）製のラジアル−バク（
Ｒａｄｉａｌ　−Ｐａｋ　）ＣＯ８１０カートリツジを
備えたモジュール・ラジアル・コンプレッション・セパ
レーター系（Ｍｏｄｕｌｅ　Ｒａｄｉａｌ　Ｃｏｍｐｒ
ｅｓｓｉｏｎ　５ｅｐａｒａｔｏｒ　Ｓｙｓｔｅｍ　）
〕によって精製した。得られた生成物を直ちに凍結乾燥
することによって標記化合物を得た。

この凍結乾燥物のｎ、ｍ、ｒ、のデータは次の通りであ
る〔前記の式（ＩＶ）における種々のプロトンシグナル
を示す〕： シグナル　　　　　　　　プロトン １．４７　　　　　　γ−ＣＨ２− １．６４　　　　　　β−ＣＨ２− １，７４ＣＨ３−（Ｃ−２） ２．１５　　　　　６−ＣＨ２ ３，１３ＣＨ３０−（Ｃ＝２） ３．４９　　　　　　　α−ＣＨ− ４，２４Ｈ−３ ５，１６Ｈ−５ ５，３２Ｈ−６ 核オーバーハウザー試＠　（Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｏｖｅｒ
ｈａｕｓｅｒｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　）によって化合
物の２−位の立体化学が実施例の表題に示すものである
ことを確認した。

即ち、１．７４　ｐ、ｐ、ｍ、のシングレット（メチル
基）の照射によって、β−コンフィグレーションにおけ
るメチル基に一致する４、２４　ｐ、ｐ、ｍ、　（Ｈ−
３）のシグナルをディファレンススペクトルにおいて増
大させる（典型的には１９％の増大）〔イソペン（Ｉ　
５ｏｐｅｎ　）　Ｎおよびペン（Ｐｅｎ）Ｇの場合にβ
−メチル基の照射において観測される増大率はそれぞれ
典型的には２１％および２５％である〕。得られた化合
物のファースト・アトム・ボンバードメント［Ｆａｓｔ
　Ａｔｏｍ　Ｂｏｍｂａｒｄｍｅｎｔ　（ＦＡＢ）　］
条件下で七 のマススペクトルにおいては分子イオンＣＭＨ）３７６
　ｍ／　ｅ　が観測された。３２１ｍ／ｅ　におけるベ
ースピークは次の特有のペニシリンフラグメントである
： （Ｂ）２−メトキン−６−δ（レーα−アミノアジパミ
ド）−３−カルボキシベナム チイニル−（ｐ−セリン−〇−メチルヱーテル）の調製 （１）　Ｎ　−ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル
−Ｄ−セリンベンジルヱステル ベイガント（Ｗｅｙｇａｎｄ　）とフンガー（Ｈｕｎｇ
ｅｒ　）の方法〔ベリヒテ（Ｂｅｒｉｃｈｔｅ　）、１
９６２．９５（１）、１参照〕によって調製した無色固
体（ｍ、ｐ、　９６〜９７℃、収率６０％）のＮ−ｐ−
メトキシベンジルオキシカルボニル−Ｄ−セリン５．３
９　ｍｇ　（２，００ｍｍｏｌ　）をメタノールに溶解
させた溶液を、水（２ｍｅ）に炭酸カリウム１３８ｍｇ
　（１，００ｍｍｏｌ　）を加えた浴液を用いて処理し
た。この混合物を蒸発乾燥処理に付し、Ｎ、Ｎ−ジメチ
ル−フォルムアミド（ＤＭＦ）を添加し、再蒸発処理に
付しく２Ｘ２ｍｌｊ）、固体状残渣を乾燥した加温ＤＭ
Ｆに溶解させ、これに臭化ベンジル２４８μｅ　（２，
１ｍｍｏｌ　）を添加した溶液を乾燥閉鎖フラスコ内に
３いて５０℃で１時間加温した。

得られた混合物をヱーテル（１０ｍＱ）と水（１０ｍＱ
）との間で分配させ、水性層をヱーテルを用いて抽出し
た（２×１０ｍＱ）。−緒にしたヱーテル抽出物を重炭
酸すＩ−ＩＪウム飽和溶液（５ｍｆｆｉ）および飽和塩
水（５＋＋ｄりを用いて洗浄し、乾燥後、蒸発乾燥させ
た。

残渣を、溶離剤として１　：　１　ｖ／ｖ酢酸酢酸ルチ
ル油ヱーテルを用いるシリカゲルカラム上でのクロマト
グラフィーによって精製して標記化合物を均一オイルト
シて５９０ｍｇ（８２％）得た。このオイルは放置する
と無色の固体に結晶化する（ｍ、ｐ、　６７〜６８℃（
ジヱチルヱーテルから再結晶）、〔α）　Ｄ６−３　（
＝　４．０、ＣＨＣｌ３）〕。

（２）　Ｎ　−ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル
−〇−メチ、ルーＤ−七゛リンベンジルヱステル Ｎ−ｐ−メト牛ジベンジル讐牛ジカルボニル−ｐ−セリ
ンベンジルヱステル７２０　ｍｇ　（２，００ｍｍｏｌ
　）を乾燥ジクロロメタン（２０ｍＱ）に溶解させた溶
液をドライアイス／アセトン中で冷却し、三弗化ホウ素
ヱーテレート１００μｌを添加後、ジアゾメタン（３０
ｍｍｏｌ　／２０　ｍＱ　ＣＨ２Ｃ（４２）を少量ずつ
添加しイた。３０分後、この溶液を濾過処理に付し、水
１０Ａを用いて一回洗浄し、ＭｇＳＯ４を用いて乾燥さ
せた後、蒸発乾燥させた。得られた残渣を、溶離剤とし
てクロロホルムを用いるシリカゲル上でのクロマトグラ
フィー処理に付して純粋な標記化合物をオイルとして５
２０ｍｇ（７０％）得た。このオイルは放置すると無色
固体に結晶化する（　ｍ、ｐ、　６８〜６９℃、（α席
ｘ、ａ°（ｃ　４．０　、　ＣＨＣ＃３　）　〕。

塩酸塩 Ｎ−ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル−〇−メチ
ルーｐ−セリンベンジルヱステル１３０ｍｇ（０，３５
ｍｍｏｌ　）に、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）とアニソ
ールとの４．８　：　１　ｖ／ｖ冷混合物０．６　ｍＱ
を添加した。この混合物を水浴上で振盪させて全固体を
溶解させた後、ＴＦＡを最初は回転ヱバポレーターを用
いて０℃で蒸発させ、最終的には高真空ポンプを用いて
蒸発させた。得られた残渣を、溶離剤トシて９８：２ｖ
／ｖクロロホルム：メタノールを用いるシリカゲル上で
のクロマトグラフィーによって精製して塩基形態の標記
化合物を帯黄色オイルとして３８ｍｇ（５５％）得た。

このオイルを白色固体の塩酸塩に変換させた［ｍ、ｐ、
１００〜１０１℃、〔α〕２０七１５．５°（９２゜０
、ＣＨ３０Ｈ）。

ンジルーδ−し一α−アミ／アジピル）−（Ｓ−ベンジ
ル−Ｌ−システイニル）−（０−メチル−Ｄ−セリンベ
ンジルヱステル）パルドウインらの前記文献に記載され
た方法によって調製した（Ｎ−ベンジルオキシカルボニ
ル−α−ベンジル−δ−し−α−アミ／アジピル）−８
−ベンジル−し−システィン１５０ｍｇ（０，２６ｍｍ
ｏｌ）および０−メチル−Ｄ−セリンベンジルヱステル
、塩酸塩６３ｍｇ（０，２６ｍｍｏｌ　）を、トリヱチ
ルアミン３６μ（１（０，２６ｍｍｏｌ　）含有ジクロ
ロメタン８ｍｒＬに溶解させ、これに２−ヱトキシーＮ
−ヱトキシ力ルボニル−１，２−ジヒドロキ／リン６４
ｍｇを添加した溶液を２４時間撹拌した。この溶液を蒸
発処理に付した残渣をクロロホルムｌＯｍ（！に溶解さ
せ、該クロロホルム溶液を０．１Ｍ塩酸１０ｍＱおよび
炭酸水素ナトＩＪウム飽和溶液１０ｍＮを用いて順次洗
浄し、ＭｇＳＯ４を用いて乾燥させた後、濾過処理に付
し、次いで蒸発処理に付した。溶離剤トシて９８　：　
２　ｖ／ｖクロロホルム：メタノールを用いるシリカゲ
ル上でのクロマトグラフィーによって精製して標記化合
物を１５０ｍｇ（７６％）得た。

該化合物を酢酸ヱチルから再結晶させて得た無色ＣＨＣ
ｌ３　）　：ｌの１Ｈｎ、ｍ、ｒ、のデータ（ＣＤ３Ｃ
Ｎ、ＴＭＳ外部基準、δ値（ｐ、ｐｏｍ、）〕は次の通
りである：１．５−２．３（溶媒のピークを含む）、２
．７２（２Ｈ。

ＡＢＸオクテツト”　ＡＢ　１３’　、ＪＡＸ　７．４
　およびＪＢＸ５．０Ｈｚ）、３．２５（３Ｈ，Ｓ）、
３．５６（ＩＨ，ＡＢＸのＡ、ＪＡＢ９．２　、　ＪＡ
Ｘ３．２Ｈ２）　、　３．７３　（３Ｈ，ｓ）　、３．
７７　（ＬＨ。

ＡＢＸのＢ、ＪＢＸ４．０Ｈ２）、４．２，４．５２，
４．６０（３Ｘ　ＩＨ。

ｍ）　、５．１（６Ｈ，ｍ）　、６．１３．６．６８．
７．１７（３ｘ　ＩＨ）。

７．３５（２０Ｈ，ｍ）。

（５）δ−（Ｌ−α−アミノアジピル）−Ｌ−システイ
ニル−（ｐ−セリン−〇−メチルヱーテル） （Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−α−ベンジル−δ−
し一α−アミノアジピル）−（Ｓ−ベンジルーし一シス
テイニル）−（０−メチル−ｐ−セリンベンジルエステ
ル）　８０ｍｇ　（０，１０ｍｍｏｌ　）をテトラヒド
ロフラン１ｍＱおよび乾燥液体アンモニア３０ｍｅに溶
解させた溶液に、溶液の青色呈色が５分間持続するまで
ナトリウムを少量ずつ添加した。乾燥硫酸アンモニウム
を、この溶液が無色になるまで添加した。溶媒を蒸発さ
せた残渣を水５ｍＱに溶解させた溶液に水酸化アンモニ
ウムを添加して系のｐＨを８に高めた後、酸素ガスを溶
液中に４時間バブルさせた。分取電気泳動による精製処
理（ｐＨ３，５，３Ｋｖ、２時間）によって、ジスルフ
ィド形態の標記化合物を無色固体として１０ｍｇ（２６
％）得た。この化合物の”Ｈｎ、ｍ、ｒ、のデータ〔Ｄ
２０．ＴＭＳ　外部基準、δ値（ｐ−ｐ−ｍ、）　）は
次の通りである： １．５−１．８（４Ｈ，ｍ）　、２．２５（２Ｈ，ｔ　
、　Ｊ７．ＯＨｚ）、２．７３（２Ｈ，ｍ）　、３．１
９（３Ｈ，Ｓ）　、３．６５（２Ｈ，ＡＢＸ、ＪＡＢｌ
ｏ、５　　ＪＡＸ３．９　、Ｊｆ３ｘ　５．５　Ｈｚ）
　、３．８４（ＬＨ，ｔ　、Ｊ６．２Ｈｚ）、４．４０
（ＩＨ，ｔ、Ｊ　５．８Ｈｚ）、４．４７（ＩＨ。

ｍ）。

２−メトキシ−６−δ−（ｂ−α−アミ／アジパミド）
−３−カルボキシペナムの調製上記のようにして調製し
たδ−（Ｌ−α−アミノアジピル）−シーシステイニル
−（ｐ−セリン−〇−メチルヱーテル）を上記のように
して得た精製イソペニシリンＮシンセターゼと共にイン
キュベートした。インキュベーション媒体としては、種
々の成分の水溶液を用いる以下の配合処方によって調製
した： 成　分　　　　　　　　　　　　　配合量トリペプチド
（１０ｍｇ／ｎ＋ｆ）　　　　　　　１００　ｐ（１イ
ンペニシリンＮシンセターゼ　　　　　　６．６ユニツ
ト硫酸第一鉄（５ｍＭ）　　　　　　　　　　１００μ
ｇＬ−アスコルビン酸（５ｍＭ）　　　　　　１００　
ａｌｌシナオスレイトール（１００ｍＭ）　　　　　５
０ｔｔｌカタラーゼ（標準調製品の１／１０希釈物）　
　４３μｇ水酸化ナトリウム（１００ｍＭ）　　　　　
　３０．ｃｃ、’最終的な体積はトリス緩衝液（ｐＨ７
，５）を用いて５ｍＱに調整した。ペプチド溶液の代り
に水１００４！を使用して対照実験をおこなった。イン
キュベーションは、空気にさらすシヱーカ−（２５０ｒ
、ｐ、ｍ、）内において、３０℃で３０分間おこなった
。アセトンを７０容量％まで添加することによって蛋白
質を混合物から沈殿させ、これを遠心分離処理（５，０
０Ｏｒ、ｐ、ｍ、　、１０分間）によって分離し、アセ
トンを真空Ｆで除去した後、上澄みを凍結乾燥させるこ
とによって、２Ｒおよび２＄−異性体の混合物と考えら
れる標記化合物を得た。

凍結乾燥物の”Ｈｎ、ｍ、ｒ、スペクトル［２５０ＭＨ
ｚ。

ＨＯＤ不含Ｄ２０．ＴＭＳ　外部基準、δ値（ｐ、ｐ−
ｍ、　）　）は５、２Ｓ（ＡＢ−カルチット）および５
．４５　（２Ｈ。

Ｊ　７＝３．９５Ｈｚ　）を示した。

実施例２ ２Ｓ−２−メト牛シー２−メチル−６−７ヱニルアセタ
ミドー３−カルボキシペナムの調製２Ｓ−２−メトキシ
ー２−メチル−６−アミノ−３−カルボキシペナム５０
μｇを炭ｍ　水素アンモニウム水溶液（１００ｍＭ、３
００μｇ）に溶解させた溶液を０℃に冷却して、アセト
ン１ｍＱにフヱニルアセチルクロライド１．５ｍｇを加
えた溶液を添加し、この溶液を０℃で１５分間撹拌し、
次いでジヱチルヱーテル２ｍＱを用いて抽出し、残留水
性層を凍結乾燥させた。これを、溶離剤として５０ｍＭ
炭酸水素アンモニウム水溶液：メタノール（３：２Ｖ／
Ｖ）を用いる逆相オクタデシルシランカラム上での直接
的なり、ｐ、ムＣＯによる精製処理に付し、２Ｓ−２−
メト牛シー２−メチル−６−フヱニルアセタミドー３−
カルボキシペナムを凍結乾燥固体として１５μｇ（非利
用率＝１９％）得た。この化合物の’Ｈｎ、ｍ、ｒ、の
データ（５００ＭＨｚ、　２Ｈ２０ｐＨ７，基準：　（
Ｃ）ｊ３　）３　Ｓ　ｊ　ＣＤ２　ＣＤ２　ＣＯ２Ｎａ
　＝Ｑ、Ｑ　Ｏ１δ値（ｐ、ｐ、ｍ、）　　）は次の通
りである：１．９１（３Ｈ，２，２−β−ＣＩｊ３）　
、３．３７（３Ｈ，ｓ、０ｃＨ３）。

５．３９（１）（、ｄ、ジ４Ｈｚ、β−ラクタム−）Ｉ
）　、　５．５５　ＣＬＨ。

ｄ、Ｊ４Ｈｚ、β−ラクタム−Ｈ）、７．３−７．４（
５Ｈ，ｍ、アリール−Ｈ）。

２５−メトキシ−２−メチル−６−７ヱニルアセタミド
ー３−カルボキシペナムをトリス緩衝液（ｐＨ７，５）
に溶解させた溶液を、スタフィ口コツヵス・アウレウス
（５ｔａｐｈｙｌｏｃｃｏｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　）（
Ｎ、Ｃ。

Ｔ、Ｃ，６５７１）を用いるホール・プレート・インヒ
ビジョン・アッセイ（ｈｏｌｅ　ｐｌａｔｅ　１ｎｈｉ
ｂｉｔｉｏｎａｓｓａｙ　）　　に使用した。該化合物
は抗菌活性を示し、該活性はバシルス・セレウス（Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓ　ｃｅｒｅｕｓ　）からのβ−ラクタマー
ゼＩの作用によって消失した。この結果は、このアッセ
イにおいて１μｇのレベルで抗菌活性を示さない２Ｓ−
２−メトキシ−２〜メチル−６−アミ／−３−カルボキ
シペナムの性質とは対照的である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式（II）： ▲数式、化学式、表等があります▼（II） （式中、Ｒは水素原子またはアルキル基を示し、Ｒ′は
   アルコキシ基を示す） で表わされる化合物並びに該化合物の塩およびヱステル
   。 ２、ＲがＣ＿１〜Ｃ＿５アルキル基を示す第１項記載の
   化合物。 ３、Ｒ′がＣ＿１〜Ｃ＿５アルコキシ基を示す第１項ま
   たは第２項記載の化合物。 ４、Ｒがメチル基を示す第１項から第３項いずれかに記
   載の化合物。 ５、Ｒ′がメトキシ基を示す第１項から第４項いずれか
   に記載の化合物。 ６、式−ＣＯ＿２Ｒ＾１（式中、Ｒ＾１は有機基を示す
   ）で表わされる基を３−位に有する化合物（II）のヱス
   テル誘導体である第１項から第５項いずれかに記載の化
   合物。 ７、有機基が公知のペニシリン類に存在するタイプの有
   機基である第１項から第６項いずれかに記載の化合物。 ８、有機基Ｒ＾１がアリール基、アリールオキシアルキ
   ル基、アルコキシアルキル基、アラルキル基またはアル
   キル基である（ヱステル基中のアリール基は置換もしく
   は非置換である）第１項から第７項いずれかに記載の化
   合物。 ９、Ｒ＾１がフヱニルを示す第１項から第８項いずれか
   に記載の化合物。 １０、Ｒ＾１がメチル、ヱチル、プロピル、イソプロピ
   ル、ベンジル、ジフヱニルメチル、ベンジルオキシメチ
   ル、２，２，２−トリクロロヱチルまたはトリメチルシ
   リルを示す第８項記載の化合物。 １１、Ｒ＾１が、隣接するカルボキシル基もしくはその
   誘導基と同じ空間的配置をとる第１項から第１０項いず
   れかに記載の化合物。 １２、２−メトキシ−２−メチル−６−アミノ−３−カ
   ルボキシペナムもしくは２−メトキシ−６−アミノ−３
   −カルボキシペナムである第１項から第１１項いずれか
   に記載の化合物。 １３、２−位のアルコキシ基が２￥Ｓ￥−コンフオメー
   シヨンをとり、３−位のカルボキシ基が同じ空間的配置
   をとる第１項から第１２項いずれかに記載の化合物。 １４、２￥Ｓ￥−２−メトキシ−２−メチル−６−アミ
   ノ−３−カルボキシペナム。 １５、一般式（ I ）： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒ＿１は水素原子もしくはアミノ基を示し、Ｘ
   は硫黄原子もしくはメチレンを示す） で表わされる化合物を脱アシル基化することを含む、一
   般式（II）で表わされる化合物の製造方法。 １６、式（ I ）（式中、Ｒ＿１は水素原子もしくはア
   ミノ基を示し、Ｘは硫黄原子もしくはメチレンを示す）
   で表わされる化合物を脱アシル基化反応に付して中間体
   としてイミノラクトンを生成させ、次いで開裂させるこ
   とを含む、第１５項記載の方法。 １７、Ｒ＿１がアミノ基を示す第１６項記載の方法。 １８、イミノラクトンを、式（ I ）で表わされる化合
   物にハロゲン化ニトロシルを作用させることによつて生
   成させる第１６項記載の方法。 １９、式（II）で表わされるペニシリンに有機酸アシル
   化剤を作用させ、該ペニシリン中の６−位のアミノ基を
   ＲＮＨ（式中、Ｒは有機酸残基を示す）に変換すること
   を含む、６−アリ−ルアミノ−２−アルコキシ−および
   −６−アシルアミノ−２−アルコキシ−２−アルキル−
   ３−カルボキシペナムの製造方法。