JPS61197598A

JPS61197598A - S-muramyldipeptide derivative

Info

Publication number: JPS61197598A
Application number: JP60036567A
Authority: JP
Inventors: Akira Hasegawa; 明長谷川; Ichiro Azuma; 市郎東; Yasuaki Osada; 長田　恭明; Yuichi Yamamura; 雄一山村
Original assignee: Daiichi Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Daiichi Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1985-02-27
Filing date: 1985-02-27
Publication date: 1986-09-01

Abstract

NEW MATERIAL:The compound of formula I (Ala is alanine, R1, R2 and R3 are acyl; R4 is H or alkyl). EXAMPLE:N-[ 2-O-( 2-acetamido-1-S-acetyl-2, 3-dideoxy-6-O-hexanoyl-1-thio-beta-D- glucopyranos-3-yl) -D-lactoyl]-L-alanyl-D-isoglutamine methyl ester. USE:Preventive and remedy for infection with microorganisms such as bacteria, viruses, etc. PREPARATION:The objective compound of formula I can be produced by dissolving 1mol of the compound of formula II in a solvent (e.g. 3/1-6/1 mixture of anhydrous pyridine/dichloromethane), cooling preferably to -30--25 deg.C, adding about 1.1mol of a fatty acid anhydride (e.g. caproic anhydride) or a fatty acid chloride dropwise to the solution, reacting the components or 2-3hr, and removing the impurities from the reaction products e.g. by chromatography.

Description

【発明の詳細な説明】〈産業上の利用分野〉本発明はすぐれた免疫アジュバント活性及び微生物感染
予防・治療効果を有する新規ムラミルジペプチド誘導体
、更に詳しくは一般式（１）（上記式中Ａｌａはアラニ
ン残基を＋　１’ｂ＊　Ｒ２及び−はそれぞれアシル基
を意味し、Ｒｔは水素原子又はアルキル基を意味する。Detailed Description of the Invention <Industrial Application Field> The present invention provides novel muramyl dipeptide derivatives having excellent immune adjuvant activity and microbial infection preventive/therapeutic effects, more specifically, general formula (1) (in the above formula, Ala represents an alanine residue + 1'b* R2 and - each represent an acyl group, and Rt represents a hydrogen atom or an alkyl group.

）で示され、４ラミルジペプチド誘導体及びその塩に関
する。), and relates to 4-ramyl dipeptide derivatives and salts thereof.

〈発明が解決しようとする問題点〉本発明者等は優れた微生物感染予防・治療効果を有する
化合物について鋭意検討を試みた結果。<Problems to be Solved by the Invention> The present inventors have made extensive efforts to study compounds that have excellent preventive and therapeutic effects on microbial infections.

大型結核菌、ＢＯＧ、その他ミコバクテリアならびに細
胞寄生性細菌の細胞壁の最小構造単位であるＮ−アシル
ムラミルジペプチドのムラミン酸の１位にＳ原子を導入
し、かつムラミン酸の６位をアシル化した式（１）の化
合物が優れた微生物感染予防・治療効果及びアジュバン
ト活性を有することを見い出し本発明を完成した。Introducing an S atom into the 1st position of muramic acid of N-acylmuramyl dipeptide, which is the minimum structural unit of the cell wall of Mycobacterium tuberculosis, BOG, other mycobacteria, and cell-parasitic bacteria, and acylating the 6th position of muramic acid. The present invention has been completed by discovering that the compound of formula (1) has excellent preventive and therapeutic effects on microbial infection and adjuvant activity.

本発明の式（１）の化合物は以下の反応式で示す方法に
より製造することができる。The compound of formula (1) of the present invention can be produced by the method shown in the following reaction formula.

（■）（１）（式中Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４及びＡｌａは前記に同じ
。）即ち１式＜ＩＩ）の化合物を無水ピリジン及びジク
ロロメタンの混液（３：１〜６：１）等の溶媒に溶解し
９式（］ＩＩの化合物に対し約１．１倍モル当量の脂肪
酸無水物又は脂肪酸クロライドを滴下して加え。(■) (1) (In the formula, R1, R2, R3, R4 and Ala are the same as above.) That is, the compound of formula 1<II) is mixed with a mixture of anhydrous pyridine and dichloromethane (3:1 to 6:1), etc. About 1.1 times the molar equivalent of fatty acid anhydride or fatty acid chloride was added dropwise to the compound of Formula 9 (II) dissolved in a solvent.

−８０℃〜０℃、好ましくは一８０″Ｃ〜−２５°Ｃで
２〜８時間反応する。反発後適量のメタノールを加えた
後そのまま減圧濃縮乾固するか又は残存する不純物をイ
オン交換樹脂、薄層クロマトグラフィー等を用いて除去
することにより目的とする式（Ｉ）の化合物を得ること
ができる。React at -80°C to 0°C, preferably -80"C to -25°C for 2 to 8 hours. After repulsion, add an appropriate amount of methanol and concentrate to dryness under reduced pressure, or remove remaining impurities with ion exchange resin. The desired compound of formula (I) can be obtained by removing the compound using thin layer chromatography or the like.

前記製造法において使用される原料化合物（ＩＩ）は公
知の方法（０ａｒｂｏｈ％ｒ、　Ｒｅｓ、　　１２　Ｂ
　（１９８３）１８８〜１９９）で合成可能である。The raw material compound (II) used in the production method is prepared by a known method (0arboh%r, Res, 12B
(1983) 188-199).

〈発明の効果〉本発明化合物は優れた感染防禦効果及びアジュバント活
性並びに低毒性をなし、細菌、ウィルス等の微生物の感
染予防欝畜ｉ剤並びに抗癌剤等として免疫機能の低下に
起因する多くの疾病に用いることが可能であり、又ワク
チンのアジュバントとして用いることも可能である。<Effects of the Invention> The compound of the present invention has excellent infection prevention effects, adjuvant activity, and low toxicity, and can be used as an anti-infection agent for microorganisms such as bacteria and viruses, and as an anticancer agent for many diseases caused by decreased immune function. It can also be used as an adjuvant for vaccines.

〈実施例〉以下１本発明を更に参考例、実施例及び試験例により詳
細に説明するが、これらは本発明を限定するものではな
い。<Examples> The present invention will be further explained in detail by reference examples, examples, and test examples below, but these are not intended to limit the present invention.

参考例Ｎ−（２−０−（２−アセトアミド−２，８−ジデオキ
シ−４，６−０−イソプロピリデン−１−チオ−β−ロ
ーグルコビラノース−８−イル）−ｎ−ラクトイル〕−
Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミンメチルエステル１０
０■を乾燥ピリジン１−及び乾燥ジクロロメタン２−の
混液に溶解し。Reference example N-(2-0-(2-acetamido-2,8-dideoxy-4,6-0-isopropylidene-1-thio-β-loglucobylanos-8-yl)-n-lactoyl]-
L-alanyl-D-isoglutamine methyl ester 10
0■ was dissolved in a mixture of dry pyridine 1 and dry dichloromethane 2.

０℃にてミリストイルクロライド６０■を乾燥ジクロロ
メタン１−に溶解した溶液を加え４０分間反応させる。At 0 DEG C., a solution of 60 ml of myristoyl chloride dissolved in 1 ml of dry dichloromethane was added and reacted for 40 minutes.

メタノール０．５−を加えた後、減圧濃縮する。クロロ
ホルム抽出し、クロロホルム層を水洗乾燥後濃縮し、得
られたシロ、ブをシリカゲル１０ｇにて精製する。クロ
ロホルム−メタノール（３０：１）溶出液よりｓ−（ｚ
−ｏ−（ｇ−アセトアミド−２，３−ジデオキシ−４，
６−０−イソプロピリデン−１−３−テトラデカノイル
−１−チオ−β−ローグルコビラノース−８−イル）−
Ｄ−ラクトイル〕−Ｌ−アラニルーＤ−イソグルタミン
　メチルエステル１０５■を得る。収率８５％。融点１
８２”Ｃｏ（α）ｏ＋６．０°（ｃ−０−５゜クロロホ
ルム）。After adding 0.5 methanol, the mixture is concentrated under reduced pressure. Chloroform extraction is carried out, the chloroform layer is washed with water, dried, and concentrated, and the resulting mixture is purified using 10 g of silica gel. From the chloroform-methanol (30:1) eluate, s-(z
-o-(g-acetamido-2,3-dideoxy-4,
6-0-isopropylidene-1-3-tetradecanoyl-1-thio-β-loglucobylanose-8-yl)-
D-lactoyl]-L-alanyl-D-isoglutamine methyl ester 105 µ is obtained. Yield 85%. Melting point 1
82"Co(α)o+6.0° (c-0-5°chloroform).

元素分析値　Ｃ３ｔＨｓ４Ｎ４０１１８として計算値　
０５７．４９．　　Ｈ８，３５，Ｎ　７．２５実測値　
Ｃｉ　５７．３８．　　Ｈ８，３２，Ｎ　７．１９上記
化合物５０ｍ９を８０％酢酸２−に溶解し。Elemental analysis value Calculated value as C3tHs4N40118
057.49. H8, 35, N 7.25 actual measurement value
Ci 57.38. H8,32,N 7.19 Dissolve 50m9 of the above compound in 80% acetic acid 2-.

４５℃にて２時間加温し加水分解する。減圧乾燥し、得
られた固体をエーテルより再結晶するとはぼ定量的にＮ
−（２−０−（２−アセトアミド−２，８−ジデオキシ
−１−８−テトラデカノイル−１−チオーβ−Ｄ−グル
フピラノース−８−イル）−Ｄ−ラクトイル〕−Ｌ−ア
ラニルーＤ−イソグルタミン　メチルエステル４６■を
得る。融点１７３．５℃。〔α）”　＋　３７．４°（
ａ−ｏ、ｓｏ、メタノール）。Hydrolyze by heating at 45°C for 2 hours. Drying under reduced pressure and recrystallizing the obtained solid from ether means that N
-(2-0-(2-acetamido-2,8-dideoxy-1-8-tetradecanoyl-1-thio β-D-gulfpyranos-8-yl)-D-lactoyl]-L-alanyl-D- Isoglutamine methyl ester 46■ is obtained. Melting point: 173.5°C. [α)" + 37.4° (
a-o, so, methanol).

元素分析値　０３４Ｈ６ＯＮ４０１１Ｓとして計算値　
Ｃ５５，７１，Ｈ８，２５，Ｎ　７．６５実測値　Ｃ５
５，５１，Ｈ８，２４，Ｎ　７．４８実施例ＩＮ−（２−０−（２−アセトアミド−１−Ｓ−アセチル
−２，３−ジデオキシ−６−ｏ−ヘキサノイル−１−チ
オ−β−ローグルコビラノース−３−イル）−Ｄ−ラク
トイル）−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミン　メチル
エステルＮ−（２−０−（２−アセトアミド−１−ｓ−アセチル
−２，８−ジデオキシ−１−チオ−β−ローグルコビラ
ノース−８−イル）−Ｄ−ラクトイル〕−Ｌ−アラニル
ーＤ−イソグルタミン　メチルエステル（以下化合物１
）を−８０°Ｃにて無水ピリジンを唯−及び無水ジクロ
ロメタン０．５−の混合液に溶解し、これに１．１倍当
量の無水カプロン酸をジクロロメタン１ｇＬｔに加えた
溶液を滴下する。２時間、−８０℃にて反応させた後、
メタノール０．５−を加え、減圧濃縮乾固し、得られた
シロップを薄層クロマトグラフィー〔Ｋ１θｓｅ１ｇｅ
１６０Ｆ　２５４　；展開液（クロロホルム−メタノー
ル（５：１））Ｉに付し、ヨード発色にて発色した部分
ヲクロロホルムーメタノール（３：１）で２時間攪拌、
抽出する。シリカゲルを濾別後濾液を減圧濃縮し、標記
化合物１３０１９を得る。Elemental analysis value Calculated value as 034H6ON4011S
C55,71,H8,25,N 7.65 Actual value C5
5,51,H8,24,N 7.48 Example I N-(2-0-(2-acetamido-1-S-acetyl-2,3-dideoxy-6-o-hexanoyl-1-thio-β -Rhoglucobylanose-3-yl)-D-lactoyl)-L-alanyl-D-isoglutamine methyl ester N-(2-0-(2-acetamido-1-s-acetyl-2,8-dideoxy- 1-thio-β-loglucobylanos-8-yl)-D-lactoyl]-L-alanyl-D-isoglutamine methyl ester (hereinafter compound 1
) is dissolved in a mixture of anhydrous pyridine and anhydrous dichloromethane at -80°C, and a solution of 1.1 equivalents of caproic anhydride in 1 gLt of dichloromethane is added dropwise thereto. After reacting at -80°C for 2 hours,
0.5-methanol was added and concentrated to dryness under reduced pressure, and the resulting syrup was subjected to thin layer chromatography [K1θse1ge
160F 254; Apply to developing solution (chloroform-methanol (5:1)) I, and stir the colored part with iodine coloring for 2 hours with chloroform-methanol (3:1).
Extract. After filtering off the silica gel, the filtrate is concentrated under reduced pressure to obtain the title compound 13019.

〔α〕。＋２５．６６°（Ｃ−０，４８，クロロホルム
−メタノール（１：　２　）　）０実施例２Ｎ−（２−０−（２−アセトアミド−１−８−アセチル
−６−０−デカノイル−２，８−ジデオキシ−１−チオ
−β−ローグルコビラノース−８−イル）−Ｄ−ラクト
イル）−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミン　メチルエ
ステル化合物１１５０■を一３０℃で無水ピリジン３ｇＬｔ及
び無水ジクロロメタン０．５１１ｔの混合液に溶解し、
これに１．１倍当量のデカノイルクロリドをジクロロメ
タン１−に加えた溶液を滴下する。２時間−ａＯｏＣに
て反応した後メタノールＧ、５−を加え少量のアンバー
ライトＩＲＣｉ−４５（ＯＨ″″）及びアンバーライト
ＩＲＣ−５０（Ｈ”）を用いてピリジンの塩酸塩を攪拌
して除去し、樹脂を濾別する。濾液及び洗液を減圧濃縮
乾固し、得られたシロップを薄層クロマトグラフ　４−
　（Ｋｉｅｓｅｌ　ｇｅ１６０Ｆ２５４Ｂ展開液（クロ
ロホルム−メタノール＜　５　：　１　＞　）ｌに供し
ヨード発色にて発色した部分ヲクロロホルムーメタノー
ル（８：１）にて２時間攪拌、抽出する。シリカゲルを
濾別後濾液を減圧濃縮することによって標記化合物１６
０ｍ’９を得る。〔α）、＋ｉｓ、３°（Ｃ−０，４，
クロロホルム−メタノール（ｔ：１））。[α]. +25.66° (C-0,48, chloroform-methanol (1:2)) 0 Example 2 N-(2-0-(2-acetamido-1-8-acetyl-6-0-decanoyl-2, 8-dideoxy-1-thio-β-loglucobylanose-8-yl)-D-lactoyl)-L-alanyl-D-isoglutamine methyl ester compound 1150 μL was added at 30°C to 3 g Lt of anhydrous pyridine and 0% of anhydrous dichloromethane. Dissolved in .511t of mixed liquid,
A solution of 1.1 equivalents of decanoyl chloride in dichloromethane 1- is added dropwise to this. After reacting at -aOoC for 2 hours, methanol G and 5- were added and pyridine hydrochloride was removed by stirring using a small amount of Amberlite IRCi-45 (OH'''') and Amberlite IRC-50 (H''). 4-
(Kiesel gel160F254B developing solution (chloroform-methanol <5:1>) 1 and the colored part was extracted with chloroform-methanol (8:1) for 2 hours with stirring. After filtering off the silica gel, the filtrate was extracted. The title compound 16 was obtained by concentration under reduced pressure.
Obtain 0m'9. [α), +is, 3° (C-0,4,
Chloroform-methanol (t:1)).

実施例３Ｎ−（２−０−（２−アセトアミド−１−８−アセチル
−２，８−ジデオキシ−６−ｏ−テトラデカノイル−１
−チオ−β−ローグルコビラノース−８−イル）−Ｄ−
ラクトイル〕−Ｌ−アラニルーＤ−イソグルタミン　メ
チルエステル化合物１及びテトラデカノイルクロリドを
実施例２と同様に反応させて標記化合物を得る。Example 3 N-(2-0-(2-acetamido-1-8-acetyl-2,8-dideoxy-6-o-tetradecanoyl-1
-thio-β-loglucobylanos-8-yl)-D-
Lactoyl]-L-alanyl-D-isoglutamine methyl ester Compound 1 and tetradecanoyl chloride are reacted in the same manner as in Example 2 to obtain the title compound.

〔α）　　＋２５．５°（ａ−ｏ、ｅ、クロロホルム−
メタノール（１：１））。[α) +25.5° (a-o, e, chloroform-
methanol (1:1)).

８８５０〜８３００（０１（、ＮＨ）２９００．２８８０（メチル、メチレン）１７２０（Ｃ
−０）１６５０．１５４０（アミド）ｎ　ｍ　ｒ　（９０ＭＨｚ、　０ＤＯｂ−ＣＤ３０Ｄ　
）０．８５　（ｎｅａｒ　ｔ、　６　Ｈ，Ｊ　−６，０
Ｈｚ　）１．９３（ｓ、３Ｈ）１．２〜１．５　（ｍ、　２８　Ｈ）２．８５（ｓ、３Ｈ）３．７４（ｓ、３Ｈ）５−４８　（ｄ　ｖ　Ｉ　Ｈ＋　Ｊ−１０−ＯＨｚ　）
実施例４Ｎ−（２−０−（２−アセトアミド−１−８−アセチル
−２，３−ジデオキシ−６−０−オクタデカノイル−１
−チオ−β−ローグルコビラノース−８−イル）−Ｄ−
ラクトイル）−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミン　メ
チルエステル化合物１及びオクタデカノイルクロリドを
実施例２と同様に反応させ標記化合物を得る。〔α〕。8850-8300 (01 (, NH) 2900.2880 (methyl, methylene) 1720 (C
-0) 1650.1540 (amide) nm r (90MHz, 0DOb-CD30D
)0.85 (near t, 6H,J -6,0
Hz ) 1.93 (s, 3H) 1.2-1.5 (m, 28 H) 2.85 (s, 3H) 3.74 (s, 3H) 5-48 (d v I H+ J-10 -OHz)
Example 4 N-(2-0-(2-acetamido-1-8-acetyl-2,3-dideoxy-6-0-octadecanoyl-1
-thio-β-loglucobylanos-8-yl)-D-
Lactoyl)-L-alanyl-D-isoglutamine methyl ester Compound 1 and octadecanoyl chloride are reacted in the same manner as in Example 2 to obtain the title compound. [α].

＋１３．０’　（Ｇ−０，５，クロロホルム−メタノー
ル（１，：１））。+13.0' (G-0,5, chloroform-methanol (1,:1)).

実施例５Ｎ−（２−０−（２−アセトアミド−１−８−デカノイ
ル−２，８−ジデオキシ−６−ｏ−ヘキサノイル−１−
チオ−β−クーグルコビラノース−８−イル）−Ｄ−ラ
クトイル）−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミン　メチ
ルエステルＮ−（２−０−（２−ア七ドアミドー１−８−デカメイ
ル−２，８−ジデオキシ−１−チオ−β−クーグルコビ
ラノース−８−イル）−Ｄ−ラクトイル〕−Ｌ−アラニ
ルーＤ−イソグルタミン　メチルエステル（以下化合物
２）及び無水カプロン酸を実施例１と同様に反応させて
標記化合物を得る。〔α）４１２．４°（ｃ−０，９，
クロロホルム−メタノール（１：１））。Example 5 N-(2-0-(2-acetamido-1-8-decanoyl-2,8-dideoxy-6-o-hexanoyl-1-
Thio-β-cuuglucobylanose-8-yl)-D-lactoyl)-L-alanyl-D-isoglutamine methyl ester N-(2-0-(2-acytadoamide 1-8-decamyl-2, 8-dideoxy-1-thio-β-cu-glucobylanos-8-yl)-D-lactoyl]-L-alanyl-D-isoglutamine methyl ester (hereinafter referred to as compound 2) and caproic anhydride in the same manner as in Example 1. The title compound is obtained by reaction. [α) 412.4° (c-0,9,
Chloroform-methanol (1:1)).

８８５０〜３８００（ＯＨ，ＮＨ）２９００．２８８０（メチル、メチレン）１７２０（Ｃ
−Ｑ）１６９０（Ｓ−アシル）１６５０．１５４０（アミド）ｎ　ｍ　ｒ　（９０ＭＨｚ、　０ＤＣｂ　−（ＤａＯＤ
　）０．８５（ｎｅａｒ　ｔ、　６Ｈ，Ｊ−６，０Ｈｚ
）１．９８（ｓ、８Ｈ）１．２〜１．５　（ｍ、　２６　Ｈ）３．７４（ｓ、３Ｈ）５．４８（ｄ、ＩＨ，Ｊ−１０，０Ｈｚ）実施例６Ｎ−（２−０−（２−アセトアミド−６−〇−デカノイ
ルー１−８−デカノイル−２，８−ジデオキシ−１−チ
オ−β−クーグルコビラノース−８−イル）−Ｄ−ラク
トイル〕−Ｌ−アラニルーＤ−イソグルタミン　メチル
エステル化合物２及びデカメイルクロリドを実施例２と同様に反
応させて標記化合物を得る。8850-3800 (OH, NH) 2900.2880 (methyl, methylene) 1720 (C
-Q) 1690 (S-acyl) 1650.1540 (amide) n m r (90 MHz, 0DCb -(DaOD
)0.85(near t, 6H,J-6,0Hz
) 1.98 (s, 8H) 1.2-1.5 (m, 26 H) 3.74 (s, 3H) 5.48 (d, IH, J-10,0Hz) Example 6 N-( 2-0-(2-acetamido-6-〇-decanoyl-1-8-decanoyl-2,8-dideoxy-1-thio-β-cu-glucobylanose-8-yl)-D-lactoyl]-L-alanyl D-isoglutamine methyl ester compound 2 and decamyl chloride are reacted in the same manner as in Example 2 to obtain the title compound.

〔α〕。＋２６．２６　（Ｃ−０，８，クロロホルム−
メタノール（１：ｚ））。[α]. +26.26 (C-0,8, chloroform-
methanol (1:z)).

３３５０〜８３００（ＯＨ，Ｎ）Ｉ）２９００．２８８０（メチル、メチレン）１７２０（Ｃ
−０）１６５０．１５４０（アミド）ｎ　ｒｌＩｒ　（９０ＭＨｚ、　ＧＴＪＣＩｓ−ＣＤ１
ＯＤ　）０．８５（ｎｅａｒ　ｔ、　ＯＨ，Ｊｍ６．０
Ｈｚ）１．９８（ｓ、８Ｍ）１．２〜１．５（ｍ、８４Ｈ）８．７４（８，８Ｈ）５−４８　（ａ　＊　Ｉ　Ｈ、Ｊ−１０，０Ｈｚ　）実
施例７Ｎ−（２−０−（２−アセトアミド−１−８−デカメイ
ル−２，８−ジデオキシ−６−０−テトラデカメイル−
１−チオーβ−Ｄ−グルフビラノースー３−イル）−Ｄ
−ラクトイル〕−Ｌ−アラニルーＤ−イソグルタミン　
メチルエステル化合物２及びテトラデカノイルクロリド
を実施例２と同様に反応させて標記化合物を得る。3350-8300 (OH, N) I) 2900.2880 (methyl, methylene) 1720 (C
-0) 1650.1540 (amide) n rlIr (90MHz, GTJCIs-CD1
OD) 0.85 (near t, OH, Jm6.0
Hz) 1.98 (s, 8M) 1.2-1.5 (m, 84H) 8.74 (8,8H) 5-48 (a * I H, J-10,0Hz) Example 7 N- (2-0-(2-acetamido-1-8-decayl-2,8-dideoxy-6-0-tetradecamyl-
1-thio β-D-glufuviranose-3-yl)-D
-lactoyl]-L-alanyl-D-isoglutamine
Methyl ester compound 2 and tetradecanoyl chloride are reacted in the same manner as in Example 2 to obtain the title compound.

〔α）　　＋２１．６°（Ｃ−０，９，クロロホルム−
メタノール（１：１））。[α) +21.6° (C-0,9, chloroform-
methanol (1:1)).

８１３５０〜３３００（ＯＨ，ＮＨ）２９００．２８Ｊ３０（メチル、メチレン）１７２０（
Ｃ−０）１６９０（Ｓ−アシル）１６５０．１５４０（アミド）ｎ　ｍ　ｒ　（９０ＭＨｚ、　ＣＤＣｌ５−０ＤａＯＤ
　）０．８５　（ｎｅａｒ　ｔ、　６　Ｈ，Ｊ−６，０
Ｈｚ　）１．９３（ｓ、８Ｈ）１．２〜１．５（ｍ、４２Ｈ）３．７４（ｓ、８Ｈ）５．４８（＋１．ＩＨ，Ｊ−１０，０Ｈ２）実施例８Ｎ−（２−０−（２−アセトアミド−１−８−デカノイ
ル−２，３−ジデオキシ−６−０−オクタデカノイル−
１−チオ−β−クーグルコビラノース−３−イル）−Ｄ
−ラクトイル）−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミン　
メチルエステル化合物２及びオクタデカノイルクロリド
を実施例２と同様に反応させて標記化合物を得る。81350-3300 (OH, NH) 2900.28J30 (methyl, methylene) 1720 (
C-0) 1690 (S-acyl) 1650.1540 (amide) n m r (90 MHz, CDCl5-0DaOD
) 0.85 (near t, 6 H, J-6,0
Hz) 1.93 (s, 8H) 1.2-1.5 (m, 42H) 3.74 (s, 8H) 5.48 (+1.IH, J-10,0H2) Example 8 N-( 2-0-(2-acetamido-1-8-decanoyl-2,3-dideoxy-6-0-octadecanoyl-
1-thio-β-cu-glucobylanos-3-yl)-D
-lactoyl)-L-alanyl-D-isoglutamine
Methyl ester compound 2 and octadecanoyl chloride are reacted in the same manner as in Example 2 to obtain the title compound.

〔α）、＋２２．１°（ｃ−ｏ、ｅ、クロロホルム−メ
タノール（１：１））。[α), +22.1° (co, e, chloroform-methanol (1:1)).

３３５０〜８８００（ＯＨ，ＮＨ）２９００．２８３０（メチル、メチレン）１７２０（Ｃ
−０）１６９０（８−アシル）１６５０．１５４０（アミド）ｎ　ｍ　ｒ　（９０ＭＨｚ、　ＣＤＧＩｓ−ＣＤｓＯＤ
　）０．８５　（ｎｅａｒ　ｔ、　６　Ｈ，Ｊ−６，０
Ｈｚ　）１．９８（ｓ、８Ｍ）１．２〜１．５　（ｍ、　５０　Ｈ）８．７ｓ（ｓ、８Ｈ）５．４８（１，１Ｂ、Ｊ−１０，０Ｈｚ）実施例９Ｎ−（２−０−（２−アセトアミド−２，８−ジデオキ
シ−６−〇−ヘキサノイルー１−８−テトラデカノイル
−１−チオーβ−〇−グルフピラノース−８−イル）−
ｎ−ラクトイル〕−Ｌ−アラニルーＤ−イソグルタミン
　メチルエステルｕ−（ｚ−ｏ−（２−７セ）アミド−
２，８−ジデオキシ−１−８−テトラデカノイル−１−
チオ−β−ローグルコビラノース−３−イル）−Ｄ−ラ
クトイル）−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミン　メチ
ルエステル（以下、化合物８）及び無水カプロン酸を実
施例１と同様に反応させて標記化合物を得る。〔α〕。3350-8800 (OH, NH) 2900.2830 (methyl, methylene) 1720 (C
-0) 1690 (8-acyl) 1650.1540 (amide) n m r (90 MHz, CDGIs-CDsOD
) 0.85 (near t, 6 H, J-6,0
Hz) 1.98 (s, 8M) 1.2-1.5 (m, 50 H) 8.7s (s, 8H) 5.48 (1,1B, J-10,0Hz) Example 9 N- (2-0-(2-acetamido-2,8-dideoxy-6-〇-hexanoyl-1-8-tetradecanoyl-1-thio β-〇-gulfpyranose-8-yl)-
n-lactoyl]-L-alanyl-D-isoglutamine methyl ester u-(zo-(2-7ce)amide-
2,8-dideoxy-1-8-tetradecanoyl-1-
Thio-β-loglucobylanos-3-yl)-D-lactoyl)-L-alanyl-D-isoglutamine methyl ester (hereinafter, compound 8) and caproic anhydride were reacted in the same manner as in Example 1 to obtain the title Obtain the compound. [α].

＋８１．６°（Ｃ−０，８，クロロホルム−メタノール
（１：１））ＣＩ８３５０〜３３００（ＯＨ，ＮＨ）２９００．２８３０（メチル、メチレン）１７２０（ｃ
−ｏ）１６９０（Ｓ−アシル）１６５０．１５４０（アミド）ｎ　ｍ　ｒ　（９０ＭＨｚ、　ＣＴ３Ｃ１ｓ−ＣＤ３０
Ｄ　）０．８５　（ｎｅａｒ　　ｔ、　６　Ｈ，Ｊ−６
，０Ｈｚ　）１．９８（８，８Ｈ）１．２〜１．５　（ｍ、　８４　Ｈ）８．７４（ｓ、８Ｈ）５．４８　（ｅｉ、　Ｉ　Ｈ，Ｊ−１０，０Ｈｚ　）実
施例１ＯＮ−（２−０−（１−アセトアミド−６−〇−デカメイ
ルー２，３−ジデオキシ−１−８−テトラデカメイル−
１−チオーβ−Ｄ−グルコビテノースー８−イル）−Ｄ
−ラクトイル）−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミン　
メチルエステル化合物８及びデカメイルクロリドを実施
例２と同様に反応させて標記化合物を得る。+81.6° (C-0,8, chloroform-methanol (1:1)) CI 8350-3300 (OH, NH) 2900.2830 (methyl, methylene) 1720 (c
-o) 1690 (S-acyl) 1650.1540 (amide) nm r (90 MHz, CT3C1s-CD30
D) 0.85 (near t, 6H, J-6
,0Hz) 1.98 (8,8H) 1.2-1.5 (m, 84H) 8.74 (s, 8H) 5.48 (ei, IH,J-10,0Hz) Example 1O N-(2-0-(1-acetamido-6-〇-decamyl-2,3-dideoxy-1-8-tetradecayl-
1-thio β-D-glucobitenosu-8-yl)-D
-lactoyl)-L-alanyl-D-isoglutamine
Methyl ester compound 8 and decamethyl chloride are reacted in the same manner as in Example 2 to obtain the title compound.

〔α）＋２６．０°（Ｃ−０，４，クロロホルム−メタ
ノール（１：１））。[α)+26.0° (C-0,4, chloroform-methanol (1:1)).

８３５０〜８３ｏｏ（ｏＨ，ｎＨ）２９００．２８８０（メチル、メチレン）１７２０（Ｃ
−０）１６９０（８−アシル）１６５０．１５４０（アミド）ｎ　ｍ　ｒ　（９０ＭＨｚ、　ＣＤ０ｈ　−ＣＤ３０Ｄ
　）０．８５　（ｎｏ＆ｘｔ、　６　Ｈ，Ｊ−６，０Ｈ
ｚ　）１．９８（８，３Ｈ）１．２〜１．５（ｍ、４２Ｈ）１１１．７４（ｓ、　３Ｈ）５．４８（（１，ＬＨ，Ｊ−１０，０Ｈｚ）実施例１１Ｎ−（ｇ−０−（ｇ−アセトアミド−２，３−ジデオキ
シ−６−〇−テトラデカノイルー１−ｓ−テトラデカノ
イル−１−チオ−β−ローグルコビラノース−３−イル
）−ｎ−ラクトイル〕−Ｌ−アラニルーＤ−イソグルタ
ミン　メチルエステル化合物３及びテトラデカノイルク
ロリドを実施例２と同様に反応させて標記化合物を得る
。−〔α〕。＋２４．９°（Ｃ−０，５，クロロホルム
−メタノール（１：１））。8350-83oo (oH, nH) 2900.2880 (methyl, methylene) 1720 (C
-0) 1690 (8-acyl) 1650.1540 (amide) nm r (90MHz, CD0h -CD30D
)0.85 (no&xt, 6H,J-6,0H
z ) 1.98 (8,3H) 1.2-1.5 (m, 42H) 111.74 (s, 3H) 5.48 ((1,LH,J-10,0Hz) Example 11 N- (g-0-(g-acetamido-2,3-dideoxy-6-〇-tetradecanoyl-1-s-tetradecanoyl-1-thio-β-loglucobylanos-3-yl)-n- Lactoyl]-L-alanyl-D-isoglutamine methyl ester compound 3 and tetradecanoyl chloride are reacted in the same manner as in Example 2 to obtain the title compound.-[α].+24.9° (C-0,5, Chloroform-methanol (1:1)).

８３５０〜Ｌ３００（ｏＨ，ＮＨ）２９００．２８８０（メチル、メチレン）１’１Ｏ（ｃ
−ｏ）１６９０（Ｓ−アシル）１６５０．１５４０（アミド）ｎ　ｍ　ｒ　（９０ＭＨｚ、　０ＤＣｂ　−（Ｄ３０Ｄ
　）０．８５　（ｎｅａｒ　ｔ、　６　Ｈ，Ｊ−６，０
Ｈｚ　）１．９８（８，３Ｈ）１．２〜１．５　（ｍ、　５０　Ｈ）８．７４（ｓ、８Ｈ）ｆｉ、４８（ｄ、１Ｍ、Ｊ−１０，０Ｈｚ）実施例１２Ｎ−（２−０−（２−アセトアミド−２，８−ジデオキ
シ−６−〇−オクタデカノイルー１−５−テトラデカノ
イル−１−チオーβ−Ｄ−グルコビラ／−ス−３−イル
）−ｎ−ラクトイル〕−り一アラニルーＤ−イソグルタ
ミン　メチルエステル化合物８及びオクタデカメイルク
ロリドを実施例２と同様に反応させて標記化合物を得る
。8350~L300 (oH, NH) 2900.2880 (methyl, methylene) 1'1O (c
-o) 1690 (S-acyl) 1650.1540 (amide) nm r (90MHz, 0DCb -(D30D
) 0.85 (near t, 6 H, J-6,0
Hz) 1.98 (8,3H) 1.2-1.5 (m, 50 H) 8.74 (s, 8H) fi, 48 (d, 1M, J-10,0Hz) Example 12 N- (2-0-(2-acetamido-2,8-dideoxy-6-〇-octadecanoyl-1-5-tetradecanoyl-1-thio β-D-glucobyl/-su-3-yl)-n -lactoyl]-ri-alanyl-D-isoglutamine methyl ester compound 8 and octadecamyl chloride are reacted in the same manner as in Example 2 to obtain the title compound.

〔α）　　＋２２．５°（ｃ−０，５，クロロホルム−
メタノール（１：１））。[α) +22.5° (c-0,5, chloroform-
methanol (1:1)).

３３５０〜３ａＯｏ（ｏＨ，Ｎａ）２９００．２８８０（メチル、メチレン）１７２０（Ｃ
鴫０）１６９Ｇ（Ｓ−アシル→ １６５０．１５４０（アミド）ｎ　ｍ　ｒ　（９０ＭＨｚ、　ＣＤＣｌ５−　ＣＤ３０
Ｄ　）０．８５　（ｎｅＩＬｒ　ｔ、　Ｊ−６，０Ｈｚ
　）１．９３（ｓ、３Ｈ）１．２〜１．５　（ｍ、　５８　Ｈ）８．７４（ｓ、３）（）５．４　ｓ　（（１，Ｉ　Ｈ，Ｊ−１０，０Ｈ２）実施
例１３Ｎ−ＩＪ−０−（２−アセトアミド−２，３−ジデオキ
シ−６−〇−ヘキサノイ／Ｌ／−１−８−オクタデカノ
イル−１−チオ−β−クーグルコビラノース−８−イル
）−ｎ−ラクトイル）−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタ
ミン　メチルエステルＮ−（２−０−（２−アセトアミ
ド−２，３−ジデオキシ−１−８−オクタデカノイＡ／
−１−チオ−β−Ｄ−グルコビラノース−３−イル）−
Ｄ−ラクトイル〕−Ｌ−アラニルーＤ−イソグルタミン
　メチルエステル（以下、化合物４）及び無水カプロン
酸を実施例１と同様に反応させて標記化合物を得る。〔
α〕。＋１５．８°（Ｃ−０，５，クロロホルム−メタ
ノール（１：１））。3350-3aOo (oH, Na) 2900.2880 (methyl, methylene) 1720 (C
0) 169G (S-acyl → 1650.1540 (amide) nm r (90MHz, CDCl5- CD30
D) 0.85 (neILrt, J-6,0Hz
) 1.93 (s, 3H) 1.2-1.5 (m, 58 H) 8.74 (s, 3) () 5.4 s ((1, I H, J-10, 0H2) carried out Example 13 N-IJ-0-(2-acetamido-2,3-dideoxy-6-〇-hexanoy/L/-1-8-octadecanoyl-1-thio-β-couglucobylanose-8-yl )-n-lactoyl)-L-alanyl-D-isoglutamine methyl ester N-(2-0-(2-acetamido-2,3-dideoxy-1-8-octadecanoy A/
-1-thio-β-D-glucobyranose-3-yl)-
D-lactoyl]-L-alanyl-D-isoglutamine methyl ester (hereinafter, compound 4) and caproic anhydride are reacted in the same manner as in Example 1 to obtain the title compound. [
α〕. +15.8° (C-0,5, chloroform-methanol (1:1)).

８３５０〜８８００（ＯＨ，ＮＨ）。8350-8800 (OH, NH).

ｚ９ｏｏ、２８３０（メチル、メチレン）１６９Ｇ（Ｓ
−アシル）１４５０．１５４０（アミＦ）ｎ　ｔａ　ｒ　（９０ＭＨＥ、　ＧＤＯＩｓ−ＣＤａＯ
Ｄ　）０．８５　（ｎｅａｒ　ｔ、　Ｊ−６，０Ｈｚ　
）１．９３　（８，３Ｈ）１．２〜１．５（ＩＩ、４旧０Ｌ７４（ｓ、８）１）５．４８　（（１，Ｉ　Ｈ，Ｊ−１０，０）１ｚ　）実
施例１４Ｎ−（２−０−（２−アセトアミド−６−〇−デカノイ
ルー２．８−ジデオキシ−１−ｓ−オクタデカノイル−
１−チオーβ−Ｄ−グルフピラノースー８−イル）−Ｄ
−ラクトイル〕−Ｌ−アラニルーＤ−イソグルタミン　
メチルエステル化合物４及びデカメイルクロリドを実施
例２と同様に反応させて標記化合物を得る。z9oo, 2830 (methyl, methylene) 169G (S
-acyl) 1450.1540 (amiF) n tar (90MHE, GDOIs-CDaO
D) 0.85 (near t, J-6,0Hz
) 1.93 (8,3H) 1.2-1.5 (II, 4 old 0 L74 (s, 8) 1) 5.48 ((1, I H, J-10, 0) 1z) Example 14 N-(2-0-(2-acetamido-6-〇-decanoyl-2,8-dideoxy-1-s-octadecanoyl-
1-thio β-D-gulfpyranosol-8-yl)-D
-lactoyl]-L-alanyl-D-isoglutamine
Methyl ester compound 4 and decamethyl chloride are reacted in the same manner as in Example 2 to obtain the title compound.

〔α〕　＋１７．７°（Ｃ−０，９，クロロホルム−メ
タノール（１：１））。[α] +17.7° (C-0,9, chloroform-methanol (1:1)).

８８５０〜８３００（０１（、ＮＨ）２９００．２８３０（メチル、メチレン）１７２０（Ｃ
−０）１６９０（Ｓ−アシル）１６５０．１５４０（アミド）ｎ　ｍ　ｒ　（９０ＭＨｚ、　ＧＤＧＩｓ　−ＣＤ５Ｏ
Ｄ　）０．８５　（ｎｅａｒ　ｔ、　Ｊ−６，０Ｈｚ　
）１．９８（ｓ、８Ｈ）１．２〜１．５　（ｍ、　５０　Ｈ）３．７４（ｓ、８Ｈ）５．４８　（ｄ、　１１（、Ｊ−１０，０Ｈｚ　）実施
例１５ｕ−（２−０−（２−アセトアミド−２，８−ジデオキ
シ−１−８−オクタデカノイル−６−０−テトラデカノ
イル−１−チオーβ−Ｄ−グルフビラノース−８−イル
）−〇−ラクトイル〕−Ｌ−アラニルーＤ−イソグルタ
ミン　メチルエステル化合物４及びテトラデカ／イルク
ロリドを実施例２と同様に反応させ標記化合物を得る。8850-8300 (01 (, NH) 2900.2830 (methyl, methylene) 1720 (C
-0) 1690 (S-acyl) 1650.1540 (amide) n m r (90 MHz, GDGIs -CD5O
D) 0.85 (near t, J-6,0Hz
) 1.98 (s, 8H) 1.2-1.5 (m, 50 H) 3.74 (s, 8H) 5.48 (d, 11 (, J-10,0Hz) Example 15 u- (2-0-(2-acetamido-2,8-dideoxy-1-8-octadecanoyl-6-0-tetradecanoyl-1-thio β-D-glufuviranose-8-yl)-〇- Lactoyl]-L-alanyl-D-isoglutamine methyl ester compound 4 and tetradeca/yl chloride are reacted in the same manner as in Example 2 to obtain the title compound.

〔α）、＋２１．２２°（Ｃ−０，９，クロロホルム−
メタノール（１：１））。[α), +21.22° (C-0,9, chloroform-
methanol (1:1)).

３３５０〜３３００（ＯＨ，ＮＨ）２９００．２８３０（メチル、メチレン）１りｇｏ（ｃ
−ｏ）１６９０（Ｓ−アシル）１６５０．１５４０（アミド）ｎ　ｍ　ｒ　（９０Ｍｌ（Ｚ、　ＣＤＣ／３−０Ｄ３０
Ｄ　）０．８５　（ｎｅａｒ　ｔ、　Ｊ−６，０Ｈｚ　
）１．９８（ｓ、８Ｈ）１．２〜１．５　（ｍ、　５８　Ｈ）３、’７４（ｓ、３Ｈ）５．４８（６，１１（、Ｊ−１０，０Ｈｚ）実施例１６Ｎ−（２−０−（２−ア七ドアミドーＺ、ａ−ジデオキ
シ−６−０−オクタデカノイル−１−８−オクタデカノ
イル−１−チオーβ−Ｄ−グルコビラノース−３−イル
）−Ｄ−ラクトイル〕−Ｌ−アラニルーＤ−イソグルタ
ミン　メチルエステル化合物４及びオクタデカメイルク
ロリドを実施例２と同様に反応させて標記化合物を得る
。3350-3300 (OH, NH) 2900.2830 (methyl, methylene) 1 go (c
-o) 1690 (S-acyl) 1650.1540 (amide) n m r (90Ml (Z, CDC/3-0D30
D) 0.85 (near t, J-6,0Hz
) 1.98 (s, 8H) 1.2-1.5 (m, 58 H) 3,'74 (s, 3H) 5.48 (6,11 (, J-10,0Hz) Example 16 N -(2-0-(2-7adoamide Z, a-dideoxy-6-0-octadecanoyl-1-8-octadecanoyl-1-thio β-D-glucobylanose-3-yl)- D-lactoyl]-L-alanyl-D-isoglutamine methyl ester compound 4 and octadecamyl chloride are reacted in the same manner as in Example 2 to obtain the title compound.

〔α）、＋８．７°（Ｇ−０，６３，クロロホルム−メ
タノール（２：１））。[α), +8.7° (G-0,63, chloroform-methanol (2:1)).

各実施例で製せられた化合物の元素分析値を次表に示す
。The elemental analysis values of the compounds produced in each example are shown in the following table.

試験例本発明化合物の効果は下記する方法で確認された。Test example The effects of the compounds of the present invention were confirmed by the method described below.

■微生物感染防禦効果各実施例で得られた化合物をそれぞれリン酸緩―凌衝化生理食塩に０．５ｍ９／＊Ｐとなるように懸濁又は
溶解させた。これを０．２−とり一群１０〜２０匹のＳ
切−６ｄＹ　　マウス（２２，０〜２９．２ｇ、５連合
）に皮下投与し９次いで２４時間後にＥ、　ｃｏｌｉＥ
７７１５６株を５．１５　Ｘ　１０’、　？、６９　Ｘ
　１０６Ｃθｌｌ＋　／マウスの接種菌量で皮下感染さ
せた。効果判定は感染７日後のマウス生存率（％）から
求めた。結果は表−１に示される通り本発明化合物は優
れた感染防禦効果を呈した。(2) Effect on preventing microbial infection The compounds obtained in each example were suspended or dissolved in phosphate buffered physiological saline at a concentration of 0.5 m9/*P. Take this 0.2-S and make a group of 10-20 S.
E.coliE.
77156 shares 5.15 x 10', ? , 69 X
Subcutaneous infection was carried out at an inoculum amount of 106Cθll+/mouse. Efficacy was determined from the mouse survival rate (%) 7 days after infection. As shown in Table 1, the compound of the present invention exhibited excellent infection prevention effects.

表−Ｉ　　Ｋ、ｃｏｌｉＷ！Ａ染マウスにおける防禦効
果■免疫アジュバント活性本発明化合物の免疫アジュバント活性は、たとえばモル
モットにおけるＮ−アセチルチロシン−８−アゾベンゼ
ン−４′−アルソン酸（以下、ＡＢＡ−Ｎ−Ａｃ−Ｔｙ
ｒ）に対する遅延型アレルギー発現に対しての増強作用
によって確認された。Table-I K, coliW! Protective effect in A-stained mice ■Immune adjuvant activity The immunoadjuvant activity of the compound of the present invention is, for example, N-acetyltyrosine-8-azobenzene-4'-arsonic acid (ABA-N-Ac-Ty) in guinea pigs.
This was confirmed by the potentiating effect on delayed allergic reactions to r).

すなわち、ＡＢＡ−Ｎ−Ａｃ−Ｔｙｒ　　（１匹あたり
５０　／ｌ　）および実施例で得られた化合物（１匹あ
たり６０〜１００／ｌ）の各々を７０イント不完全アジ
ユバント（以下、ＦＩＡ）と混合して調製した油中水型
Ｃζ）エマルジョンをモルモア１足譲に投与する。２週
間後、８−アゾベンゼン−４′−アルソン酸と牛血清ア
ルブミン結合物１１００Ｐを皮肉注射して２４および４
８時間後の皮肉反応（紅斑および硬結）の直径を測定す
る。この直径の大きさが細胞性免疫の尺度とみなされる
。That is, each of ABA-N-Ac-Tyr (50/l per animal) and the compound obtained in the example (60 to 100/l per animal) was mixed with 70 int incomplete adjuvant (hereinafter referred to as FIA). The water-in-oil Cζ) emulsion prepared in this manner is administered to each mormor. Two weeks later, 24 and 4
The diameter of the sarcastic reaction (erythema and induration) is measured after 8 hours. The size of this diameter is considered a measure of cell-mediated immunity.

以下９表−２に成績を示す。The results are shown in Table 9-2 below.

Claims

[Claims] S-muramyl dipeptide derivative and its salts represented by the general formula ▲ Numerical formula, chemical formula, table, etc.
In the above formula, Ala means an alanine residue, R_1, R_
2 and R_3 each mean an acyl group, and R_4 means a hydrogen atom or an alkyl group. )