JPS6112295A - アルデヒド含有化合物の、求核化合物と触媒とを含む反応混合物への添加速度制御方法 - Google Patents
アルデヒド含有化合物の、求核化合物と触媒とを含む反応混合物への添加速度制御方法Info
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- JPS6112295A JPS6112295A JP12525885A JP12525885A JPS6112295A JP S6112295 A JPS6112295 A JP S6112295A JP 12525885 A JP12525885 A JP 12525885A JP 12525885 A JP12525885 A JP 12525885A JP S6112295 A JPS6112295 A JP S6112295A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
この発明に、ある種のアルデヒド含有化合物を求核物質
を含む反応混合物に添加する場合、その速度を制御する
方法に関する。
を含む反応混合物に添加する場合、その速度を制御する
方法に関する。
市場で多数取引されている重壁な化合物は、アルデヒド
含有の化合物と、求核化合物とを、酵素触媒の存在下で
合成することができる。例えば、酵素、セリンヒドロキ
７メチルトランスフエラーゼ（ＳＨＭＴ）Ｈフォルムア
ルデヒドを使ってグリノン反応を触媒進行させ、セリン
を作ったり、アセトアルデヒド金使って同様アロ・スレ
オニンとスレオニンを得たり、またベンズアルデヒドを
用いてβ−フェニル−セリンを生成することができる。
含有の化合物と、求核化合物とを、酵素触媒の存在下で
合成することができる。例えば、酵素、セリンヒドロキ
７メチルトランスフエラーゼ（ＳＨＭＴ）Ｈフォルムア
ルデヒドを使ってグリノン反応を触媒進行させ、セリン
を作ったり、アセトアルデヒド金使って同様アロ・スレ
オニンとスレオニンを得たり、またベンズアルデヒドを
用いてβ−フェニル−セリンを生成することができる。
アルデヒド含有化合物に触媒と相互反応したりまた、触
媒を不活性化し偵るものであるから、反応混合物内の含
アルデヒド化合物濃度を比較的低く保つことが望ましい
。このためには、反応混合物に含アルデヒド化合物を徐
々に加えて達成させる。一方、反応混合物中の含アルデ
ヒド化合物濃度にできるだけ高く保って、合理的な反応
速度を得べきである。偽安定状態を達成すべきであるが
、この場合、反応混合物中で一定のアルデヒド含有濃度
を保持するには、含アルデヒド化合物の添加速度と転化
率とは同等とすべきである。反応が完結に近つくにつれ
、供給率はこれに従って低く保持すべきである。さもな
いと、供給添加速度と転化率間のアンバランスにより反
応混合物中に含アルデヒド化合物が蓄積してきて、生体
触媒の不活性化を来たすもととなる。したがってこの反
Ｌｃス混合物内のアルデヒド含有物質磯度の変動を正し
く検出できる測定装置は、アルデヒド含有化合物全添加
して行く場合の速度を制御するに大切な９素と在る。
媒を不活性化し偵るものであるから、反応混合物内の含
アルデヒド化合物濃度を比較的低く保つことが望ましい
。このためには、反応混合物に含アルデヒド化合物を徐
々に加えて達成させる。一方、反応混合物中の含アルデ
ヒド化合物濃度にできるだけ高く保って、合理的な反応
速度を得べきである。偽安定状態を達成すべきであるが
、この場合、反応混合物中で一定のアルデヒド含有濃度
を保持するには、含アルデヒド化合物の添加速度と転化
率とは同等とすべきである。反応が完結に近つくにつれ
、供給率はこれに従って低く保持すべきである。さもな
いと、供給添加速度と転化率間のアンバランスにより反
応混合物中に含アルデヒド化合物が蓄積してきて、生体
触媒の不活性化を来たすもととなる。したがってこの反
Ｌｃス混合物内のアルデヒド含有物質磯度の変動を正し
く検出できる測定装置は、アルデヒド含有化合物全添加
して行く場合の速度を制御するに大切な９素と在る。
従来は、求核化合物を含む反応混合物に、含アルデヒド
化合物を添加する際、シンプルに連続し゛し、かつ感Ｉ
Ｗの高いｄｌす定装置を利用して、求核物′ｒ１含イｊ
の反応７１１５合物にアルデヒドを含む化合物の１：’
ｓ力１１ｉ・Ｉｒ ＋ｆｉ二を１１１月「１（すること
をしなかったため、結果と１．て／ことえは効率の悪い
合成反応および／またに触ｌ１Ｍの不活性化を１ねくこ
とがあった。
化合物を添加する際、シンプルに連続し゛し、かつ感Ｉ
Ｗの高いｄｌす定装置を利用して、求核物′ｒ１含イｊ
の反応７１１５合物にアルデヒドを含む化合物の１：’
ｓ力１１ｉ・Ｉｒ ＋ｆｉ二を１１１月「１（すること
をしなかったため、結果と１．て／ことえは効率の悪い
合成反応および／またに触ｌ１Ｍの不活性化を１ねくこ
とがあった。
ここに、ｊＩＸ純で連続的かつ鋭敏な、含アルデヒード
レベル辿］定法およびアルデヒドの添加速用制御法を必
要と−する余地が残されることになる。
レベル辿］定法およびアルデヒドの添加速用制御法を必
要と−する余地が残されることになる。
この発明によれば、含アルデヒド化合物を求核物質と触
媒とを含むある種反応混合物に添加する比率を制御する
方法を提供するものであり、この方法では反応混合物の
ｐＨを連続的に測定するとともに１反応混合物への含ア
ルデヒド化合物の添加量を潤節して、反応混合物のｐＨ
値が減少しないようにすることを特徴としている。ＰＦ
ｌの低減は好ましくない副反応の徴候を示し、これは含
アルデヒド化合物の存在過剰のもとで生ずる。
媒とを含むある種反応混合物に添加する比率を制御する
方法を提供するものであり、この方法では反応混合物の
ｐＨを連続的に測定するとともに１反応混合物への含ア
ルデヒド化合物の添加量を潤節して、反応混合物のｐＨ
値が減少しないようにすることを特徴としている。ＰＦ
ｌの低減は好ましくない副反応の徴候を示し、これは含
アルデヒド化合物の存在過剰のもとで生ずる。
この発明の方法は、ある秤アルデヒド含有化合物と求核
物ｆＰｊとから、希望の化合物を合成し、Ｐト１（ｊｉ
の重味変動を与えぬような利用途に採用し得る。
物ｆＰｊとから、希望の化合物を合成し、Ｐト１（ｊｉ
の重味変動を与えぬような利用途に採用し得る。
この種のぞましい反応には好適な反応畠をイ得るための
触媒を必要とするのが通例である。
触媒を必要とするのが通例である。
この発明で使用する好適な含アルデヒド化合物には、示
性式Ｒ−ＣＨＯ化合物が含まれ、ここでＲけアルキル、
アリル、置換アリル、アルケニル。
性式Ｒ−ＣＨＯ化合物が含まれ、ここでＲけアルキル、
アリル、置換アリル、アルケニル。
アルキニル、その他類似の基を示す。とくに好ましい含
アルデヒド化合物としては、フォルムアルデヒド、ア七
トアルデヒド、ベンズアルデヒド等があジ、その中で最
適のアルデヒドはフォルムアルデヒドである。
アルデヒド化合物としては、フォルムアルデヒド、ア七
トアルデヒド、ベンズアルデヒド等があジ、その中で最
適のアルデヒドはフォルムアルデヒドである。
一ツバ好適η求核性化自物としては第一級アミン、とく
にフ′ミノ自夕か挙げられる。グリシンはとくｒこすぐ
れた求杉゛性物質である。
にフ′ミノ自夕か挙げられる。グリシンはとくｒこすぐ
れた求杉゛性物質である。
あるＴ中の含アルテヒド化合物と求核物グ′Ｊとから希
望する化合物をイ（Ｉたいとする時、この反応混合物中
、何等かの不都合な副反応が生じ勝ちである。
望する化合物をイ（Ｉたいとする時、この反応混合物中
、何等かの不都合な副反応が生じ勝ちである。
たとえは期待反応かつぎの一般式
であられされ、’Ｒ−ＣＨＯを上記のごとくシ、化合物
Ａを求核付物ｙｆ＜たとえばグリシン）、化合物Ｂｆ：
希望する化合物（たとえばセリン）とした時、つぎの触
媒反応と外れた副反応が、反応混合物中で４トする。
Ａを求核付物ｙｆ＜たとえばグリシン）、化合物Ｂｆ：
希望する化合物（たとえばセリン）とした時、つぎの触
媒反応と外れた副反応が、反応混合物中で４トする。
ここで、化合物ＡｐとＡ ｕ ｐとはそれぞれ化合物Ａ
のプロトン化、非プロトン化物質をあられし、ＢｐとＢ
ｕｐとは同じく、化合物Ｂのプロトン化、非プロトン化
物質を、化合物Ｃは化合物Ａのシッフ塩基（たとえば、
ヒドロキシルメチルグリシン）ｆ、、化合物りは化合物
Ｂのシッフ塩基形（たとえばヒドロキシメチルセリン）
を、ＲＧ尖前掲記載どおりとする。
のプロトン化、非プロトン化物質をあられし、ＢｐとＢ
ｕｐとは同じく、化合物Ｂのプロトン化、非プロトン化
物質を、化合物Ｃは化合物Ａのシッフ塩基（たとえば、
ヒドロキシルメチルグリシン）ｆ、、化合物りは化合物
Ｂのシッフ塩基形（たとえばヒドロキシメチルセリン）
を、ＲＧ尖前掲記載どおりとする。
（１）の反応は希望するタイプであり反応（１）と（２
）と（３）とが共存すると熱力学的には好都合である。
）と（３）とが共存すると熱力学的には好都合である。
したがって、反応（２）と（３）とはアルデヒド過剰存
在のもとでのみ相当量化じる。（１）の反応、つ才りの
ぞみの反応中では酸もしくは塩基は生じない。
在のもとでのみ相当量化じる。（１）の反応、つ才りの
ぞみの反応中では酸もしくは塩基は生じない。
（２）の反応はシップの塩基反応である。化合物Ａにげ
求核基が含捷れ、この求核基は反応（１）に必要な反応
条件（ｐＨと温度）ではそれぞれ１個のプロトン化、非
プロトン化形態を呈する。この発明のすぐれた点は、不
適当にも高すぎるアルデヒド濃度で代表される好ましく
ない副反応を反応混合物のｐＨの低落によって検出し得
るということである。
求核基が含捷れ、この求核基は反応（１）に必要な反応
条件（ｐＨと温度）ではそれぞれ１個のプロトン化、非
プロトン化形態を呈する。この発明のすぐれた点は、不
適当にも高すぎるアルデヒド濃度で代表される好ましく
ない副反応を反応混合物のｐＨの低落によって検出し得
るということである。
−例として、アルデヒドとグリシン（反応ｌ）からセリ
ンの触媒による合成反応中、以下の好ましくない副反応
が反応混合物内で生ずることがある。
ンの触媒による合成反応中、以下の好ましくない副反応
が反応混合物内で生ずることがある。
（２）プロトン化グリシンニ非プロトン化グリシン＋Ｈ
″−一 ヒドロキシメチルグリシン １ＣＩ４０ （３）プロトン化セリンニ非プロトン化セリン＋Ｈ＋；
）：ｙ７−） ヒドロキシメチルセリン１ＣＩＩＯ Ｐｌｌの低下は、反応混合物内の過剰フォルムアルデヒ
ドにより生ずる好ましくない副反応（２）と（３）とが
」？１進していることを示す。
″−一 ヒドロキシメチルグリシン １ＣＩ４０ （３）プロトン化セリンニ非プロトン化セリン＋Ｈ＋；
）：ｙ７−） ヒドロキシメチルセリン１ＣＩＩＯ Ｐｌｌの低下は、反応混合物内の過剰フォルムアルデヒ
ドにより生ずる好ましくない副反応（２）と（３）とが
」？１進していることを示す。
反応効率を高め、および／捷たは含アルデヒド化合物に
よる触媒の不活性化を防ぐには、アルデヒド含有化合物
を徐々に反応混合物に加えていく要がある。さらに、同
一理由からある朽（レベル捷たにそ）１．以下でアルデ
ヒド含有化合物の濃度を維持することがのぞまれる。こ
の含アルデヒド化合物ｅこよる触媒の劣化を防ぐにｉｌ
″ｊ１上記アルデヒド化合物の濃度を、その触媒１１−
ｊきわめて有害となる濃度レベル以下に保持することが
できる。
よる触媒の不活性化を防ぐには、アルデヒド含有化合物
を徐々に反応混合物に加えていく要がある。さらに、同
一理由からある朽（レベル捷たにそ）１．以下でアルデ
ヒド含有化合物の濃度を維持することがのぞまれる。こ
の含アルデヒド化合物ｅこよる触媒の劣化を防ぐにｉｌ
″ｊ１上記アルデヒド化合物の濃度を、その触媒１１−
ｊきわめて有害となる濃度レベル以下に保持することが
できる。
反応混合物の−を反応（１）に好都合なレベルに選定、
維持する。含アルデヒド化合物の供給液は通常、反応混
合物に求められるより僅か酸度の高いものであるため、
反応中にこの化合物を加えることは、好ましくない副作
用により生ずるｐＨ変動測定の妨害となることがある。
維持する。含アルデヒド化合物の供給液は通常、反応混
合物に求められるより僅か酸度の高いものであるため、
反応中にこの化合物を加えることは、好ましくない副作
用により生ずるｐＨ変動測定の妨害となることがある。
したがって、その供給に先き立ち反応混合物の−に含ア
ルデヒド溶液のＰＩ（を合わせるか、または１０チＫ
ＯＨ程度のアルカリを周期的に加えて酸度全調節するか
の操作がのぞましい。このアルデヒド含有の化合物の存
在によりもたらされる反応混合物の酸性度の抑制により
、好ましくない反応（２）と（３）とによるｐＨの低減
状態を観測することができる。この発明による反応混合
物に対しアルデヒド含有の化合物の添加率を制御する際
、反応混合物のｐＨの測定操作ならびに、好ましくない
副反応（２）と（３）との存在を示す反応混合物Ｐ１１
の低減防止のための反応混合物中への上記アルデヒド含
有化合物の選択的な導入も含まれている。この際の反応
は反応混合物中のアルデヒドの０、′ｑ度過剰に由来す
るものである。
ルデヒド溶液のＰＩ（を合わせるか、または１０チＫ
ＯＨ程度のアルカリを周期的に加えて酸度全調節するか
の操作がのぞましい。このアルデヒド含有の化合物の存
在によりもたらされる反応混合物の酸性度の抑制により
、好ましくない反応（２）と（３）とによるｐＨの低減
状態を観測することができる。この発明による反応混合
物に対しアルデヒド含有の化合物の添加率を制御する際
、反応混合物のｐＨの測定操作ならびに、好ましくない
副反応（２）と（３）との存在を示す反応混合物Ｐ１１
の低減防止のための反応混合物中への上記アルデヒド含
有化合物の選択的な導入も含まれている。この際の反応
は反応混合物中のアルデヒドの０、′ｑ度過剰に由来す
るものである。
この発明の方法を実施する場合、求核物質の濃ｍ−はそ
の飽和−Ｂレベルより高くしても差し支えない。反応混
合物のｐＨ１はできれば約４から約１１の間がのぞまし
い汐≦５ この範囲外の１へかなｐＨイｉげ変動を確か
めることにむつかしく１寸だ触媒も恐らく不活性ＶＣな
ると考えられるからである。とくＶここのＰＩ（全豹６
から約８．５の間に保つとりΣに好適である◇ クリシンとフォルムアルデヒドからのＩ・−セリンの合
１戊についてさらにくわしく当発明を記述するつもりで
あるか、理解きれるようにこの発明（弓井／；二、希望
するｌＶ、応が反応混合物のｐＨＶＣ正味の変・“（υ
所生）ジ゛しめ＾ｊ）限り、アルデヒド含有のイ（１０
−物ならびに、・１ζ核物７１（を含’＆別秤反応にも
適用される。
の飽和−Ｂレベルより高くしても差し支えない。反応混
合物のｐＨ１はできれば約４から約１１の間がのぞまし
い汐≦５ この範囲外の１へかなｐＨイｉげ変動を確か
めることにむつかしく１寸だ触媒も恐らく不活性ＶＣな
ると考えられるからである。とくＶここのＰＩ（全豹６
から約８．５の間に保つとりΣに好適である◇ クリシンとフォルムアルデヒドからのＩ・−セリンの合
１戊についてさらにくわしく当発明を記述するつもりで
あるか、理解きれるようにこの発明（弓井／；二、希望
するｌＶ、応が反応混合物のｐＨＶＣ正味の変・“（υ
所生）ジ゛しめ＾ｊ）限り、アルデヒド含有のイ（１０
−物ならびに、・１ζ核物７１（を含’＆別秤反応にも
適用される。
グリシンとフォルムアルデヒドからＬ−セリンを酵素に
」：つて合成するザ゛５合、ｊＩＢ常酵Ａソセリンヒド
ロキシメチルトランスフエラーゼ（ｔ、 ＶＪ： Ｌば
Ｓ 、１−１ Ｍ Ｔと略称）と補因子であるテトラ・
ヒドロ葉酸塩（時々ＴＨＦ、−［たはテトラヒドロ葉酸
と呼称）と全必要とする。
」：つて合成するザ゛５合、ｊＩＢ常酵Ａソセリンヒド
ロキシメチルトランスフエラーゼ（ｔ、 ＶＪ： Ｌば
Ｓ 、１−１ Ｍ Ｔと略称）と補因子であるテトラ・
ヒドロ葉酸塩（時々ＴＨＦ、−［たはテトラヒドロ葉酸
と呼称）と全必要とする。
フォルムアルデヒド（ＨＣＨＯ）Ｕ ＴＩＩＦと反応し
てメチレン−Ｔ ＨＦ ｆＫ：生ずる。ついでグリシン
がＳ Ｈへ４Ｔ存在下でメチレン−Ｔ ＨＦと反応し、
Ｌ−セリンを形成しＴ ＨＦ ｉ再生する。この際、合
成は都合よく反応容器たとえば撹拌クンク式反応器内で
反応混合物と約４℃から約６０°Ｃ間、ＰＩ」（（ｔｑ
約４から約］】の条件で行うことができる。−Ｆ記より
さらに好適な条件に１温度：約２０℃から約４５℃、ｐ
Ｈ：約６から８．５の間である。温度が約４℃以下であ
れば反応時間けいちちるしく長びき、また約６０℃以上
に温度が上ると、酵素は変成−４る恐れがある。同様に
、Ｐ１］が約４以下か約１１以上となっても酵素の活性
は減殺されるであろう。
てメチレン−Ｔ ＨＦ ｆＫ：生ずる。ついでグリシン
がＳ Ｈへ４Ｔ存在下でメチレン−Ｔ ＨＦと反応し、
Ｌ−セリンを形成しＴ ＨＦ ｉ再生する。この際、合
成は都合よく反応容器たとえば撹拌クンク式反応器内で
反応混合物と約４℃から約６０°Ｃ間、ＰＩ」（（ｔｑ
約４から約］】の条件で行うことができる。−Ｆ記より
さらに好適な条件に１温度：約２０℃から約４５℃、ｐ
Ｈ：約６から８．５の間である。温度が約４℃以下であ
れば反応時間けいちちるしく長びき、また約６０℃以上
に温度が上ると、酵素は変成−４る恐れがある。同様に
、Ｐ１］が約４以下か約１１以上となっても酵素の活性
は減殺されるであろう。
混合物を早く攪拌するとＨ，ＣＨＯの分散を高めること
ができる。
ができる。
セリンヒドロキシメチルトランスフェラーゼはフォルム
アルデヒドにはきわめて敏感である。低濃度のフォルム
アルデヒドであっても、ＳＨＭＴｆｉ′Ｐ ；べ４迅、
１−←に不活性化させる。フメルムアルデヒＩ１１クリ
シンからセリンを生成するに心壁な一種の反応１）＼−
υあるため、フォルムアルデヒドによるＳ ＨＭ Ｔ不
活性防止操作は、プロセスを満足に進行さす／こめ必要
である。Ｔ ＨＦも反応においてＳＨＭ Ｔ （７）補
因子でらる。したがって、通常Ｔ ＨＦの／Ｉ’ｌｉ
ＩＬ’ｌ； ｆｌ、であれは反応を行わすに十分である
。
アルデヒドにはきわめて敏感である。低濃度のフォルム
アルデヒドであっても、ＳＨＭＴｆｉ′Ｐ ；べ４迅、
１−←に不活性化させる。フメルムアルデヒＩ１１クリ
シンからセリンを生成するに心壁な一種の反応１）＼−
υあるため、フォルムアルデヒドによるＳ ＨＭ Ｔ不
活性防止操作は、プロセスを満足に進行さす／こめ必要
である。Ｔ ＨＦも反応においてＳＨＭ Ｔ （７）補
因子でらる。したがって、通常Ｔ ＨＦの／Ｉ’ｌｉ
ＩＬ’ｌ； ｆｌ、であれは反応を行わすに十分である
。
’ＩＩ” Ｉ（Ｆ （ｒ２次式でボすように反応中リサ
イクルする。
イクルする。
ＥＣ］−１０＋ＴＨＦ←→メチレンーＴＨＦ十Ｉｈ０７
Ｅ・味反応 ＳＨＭＴ １１２０＋メチレン−Ｔ ＨＦ＋クリシンイー→セリン
＋Ｔ ＨＦＨＣＨＯ＋グリシン←→セリン Ｔ ＨＦ ｉｊ ＨＣＩ■ＯＫ対し高い親和性（、ｉ（
ｅｇ、＝３ｘｌＯ’）を有するため、ＨＣＨＯがＳ Ｉ
（ＭＴを不活性化させぬため、ＨＣＨＯを消費するのに
Ｔ ）ｌ Ｆ全使用する。したがって、触媒量以上の高
濃度のＴ ＨＦ−（ｉ７用いＨＣＨＯによる酵素の不活
性化を防ぐようにする。希望によっては、ＴＨＦ！度を
的外１１城（τまて高めても差し支えなく、このレベル
は１・１１と温１ｊ＋−により決する。たとえば、ｐＨ
が７．５．水浴液温度約３７゛Ｃで、Ｔ ＨＦの濃度＆
：ｊ：５０ｍＭ過剰とすることができる。好ましいＴｌ
ＨＦのｔ′Ｉ□度はｏ、ｏ ｌ ｍＭから５０ ｍＭ、
さらに好適な濃度は０．１ ｍＭから５ｍＭである。段
階的にフォルムアルデヒドを添加しつつＴＨＦを過剰に
させることにより、フォルムアルデヒドの蓄積とＳ Ｈ
ＭＴの不活性化を防止できる。
Ｅ・味反応 ＳＨＭＴ １１２０＋メチレン−Ｔ ＨＦ＋クリシンイー→セリン
＋Ｔ ＨＦＨＣＨＯ＋グリシン←→セリン Ｔ ＨＦ ｉｊ ＨＣＩ■ＯＫ対し高い親和性（、ｉ（
ｅｇ、＝３ｘｌＯ’）を有するため、ＨＣＨＯがＳ Ｉ
（ＭＴを不活性化させぬため、ＨＣＨＯを消費するのに
Ｔ ）ｌ Ｆ全使用する。したがって、触媒量以上の高
濃度のＴ ＨＦ−（ｉ７用いＨＣＨＯによる酵素の不活
性化を防ぐようにする。希望によっては、ＴＨＦ！度を
的外１１城（τまて高めても差し支えなく、このレベル
は１・１１と温１ｊ＋−により決する。たとえば、ｐＨ
が７．５．水浴液温度約３７゛Ｃで、Ｔ ＨＦの濃度＆
：ｊ：５０ｍＭ過剰とすることができる。好ましいＴｌ
ＨＦのｔ′Ｉ□度はｏ、ｏ ｌ ｍＭから５０ ｍＭ、
さらに好適な濃度は０．１ ｍＭから５ｍＭである。段
階的にフォルムアルデヒドを添加しつつＴＨＦを過剰に
させることにより、フォルムアルデヒドの蓄積とＳ Ｈ
ＭＴの不活性化を防止できる。
ＴＨＦに酵素の存在下ではきわめて不安定である。反応
混合物が酵素と接触しないようにする好ましい方法は、
反応容器内に不活性ガスを導入させることである。この
際とくに適合した不活性ガスは窒素とアルゴントである
。反応にに強い攪拌操作が必要とされるため、完全に０
２のない環境を維持することは到底むつかしいことであ
る。
混合物が酵素と接触しないようにする好ましい方法は、
反応容器内に不活性ガスを導入させることである。この
際とくに適合した不活性ガスは窒素とアルゴントである
。反応にに強い攪拌操作が必要とされるため、完全に０
２のない環境を維持することは到底むつかしいことであ
る。
ＴＨＦが空気で酸化されると、ＴＨＦとの反応で生ずる
ＳＨＭＴのＨＣＨＯからの保謄効果げもはや期待できな
い。
ＳＨＭＴのＨＣＨＯからの保謄効果げもはや期待できな
い。
Ｓ ＨＭ Ｔは通常反応混合物中、精製酵素、粗抽出物
の形態で存在するか、微生物細胞内に含有されている。
の形態で存在するか、微生物細胞内に含有されている。
この微生物はＳＨＭＴ表現を方向づける制御７〜ケンス
コントロ一ル栄件のもとで、Ｓ）ＩＭ、Ｔのアミノ酸シ
ーケンスを記号化するＤＮＡシーケンス含有の表現媒介
物とともに転換芒れるものである。このＳ）ＩＭＴ技術
的に公知のととく反応器内で不！ｌＴ！］態化させるこ
とができる。
コントロ一ル栄件のもとで、Ｓ）ＩＭ、Ｔのアミノ酸シ
ーケンスを記号化するＤＮＡシーケンス含有の表現媒介
物とともに転換芒れるものである。このＳ）ＩＭＴ技術
的に公知のととく反応器内で不！ｌＴ！］態化させるこ
とができる。
このＴ ＨＦの不安定性、したがって反応条件下てのｓ
Ｉ（ＭＴＨ； Ｌ−セリン合成に対し酵素反応の効率を
抑制するようにはたらく。
Ｉ（ＭＴＨ； Ｌ−セリン合成に対し酵素反応の効率を
抑制するようにはたらく。
反応混合物中に安定化した還元剤もしくは還元剤の混合
物があることで、テトラヒドロ葉酸を安定化させ、この
結果、酵素プロセスを抑制することなく反応条件下でＳ
ＨＭ Ｔの安定化を助けている。このＴ ＨＦに及ぼ
す安定効果は、反応混合物と空気との接触を断つことに
より促進される。還元剤は反応混合物のレドックス電位
を約−３００ｍＶ［たけそれ以下になる寸で添加し、さ
らに反応中、希望のレドックス市、位を保持する壕で加
えている。
物があることで、テトラヒドロ葉酸を安定化させ、この
結果、酵素プロセスを抑制することなく反応条件下でＳ
ＨＭ Ｔの安定化を助けている。このＴ ＨＦに及ぼ
す安定効果は、反応混合物と空気との接触を断つことに
より促進される。還元剤は反応混合物のレドックス電位
を約−３００ｍＶ［たけそれ以下になる寸で添加し、さ
らに反応中、希望のレドックス市、位を保持する壕で加
えている。
反応混合物中のフォルムアルデヒド濃度は好ブしくけ、
酵素濃度にいちぢるしく影響を与えない範囲に止めると
好適である。り゛す７ンがＬ−リシンに転化されるにつ
れ、フォルムアルデヒド力消費されるとともに、ＴＨＦ
が再生される。フォルムアルデヒドの反応混合物に対す
る好せしい添加率は、反応に使用する率に等しいかそれ
以下とするのがのぞましい−０その正羅な添加量は反応
条件（ｐＨ＋温度、酵素の濃度等）により変る。
酵素濃度にいちぢるしく影響を与えない範囲に止めると
好適である。り゛す７ンがＬ−リシンに転化されるにつ
れ、フォルムアルデヒド力消費されるとともに、ＴＨＦ
が再生される。フォルムアルデヒドの反応混合物に対す
る好せしい添加率は、反応に使用する率に等しいかそれ
以下とするのがのぞましい−０その正羅な添加量は反応
条件（ｐＨ＋温度、酵素の濃度等）により変る。
反応が進行し、Ｌ −１７ンンｆＡ度が反応混合物中で
増加するにつれ１反応速度は低減してくる。フォルムア
ルデヒドの添加率が付随して下ることがなければ、この
場合反応混合物中のフォルムアルデヒド濃度は増大する
。また、フォルムアルデヒド濃度が高まるにつれ、反応
混合物のｐＨ１ｒｓ低下するが、それは以下の可逆反応
式で示すように、フリーのフォルムアルデヒドがグリシ
ンのアミノ基および／ｉたはセリンと反応するからであ
る。
増加するにつれ１反応速度は低減してくる。フォルムア
ルデヒドの添加率が付随して下ることがなければ、この
場合反応混合物中のフォルムアルデヒド濃度は増大する
。また、フォルムアルデヒド濃度が高まるにつれ、反応
混合物のｐＨ１ｒｓ低下するが、それは以下の可逆反応
式で示すように、フリーのフォルムアルデヒドがグリシ
ンのアミノ基および／ｉたはセリンと反応するからであ
る。
ＮＨ３＋−ＲＨ２Ｎ −Ｒ十耐
）］ Ｂ
１ ］
ＨＣＨＯ−１−Ｈ２Ｎ−Ｒ−Ｒ−Ｎ−Ｃ−ＯＩ（一層多
くのフォルムアルデヒドを反応混合物に加え１１士ない
か、またに導入速度が目立って低減すると、上記反応は
逆転し、−が増し始めるであろう。この逆転反応率（お
よびＰＩＩＩ加率）はグリシンがセリンに転化する率の
割合に応じて設計されている。
くのフォルムアルデヒドを反応混合物に加え１１士ない
か、またに導入速度が目立って低減すると、上記反応は
逆転し、−が増し始めるであろう。この逆転反応率（お
よびＰＩＩＩ加率）はグリシンがセリンに転化する率の
割合に応じて設計されている。
当発明に基づき、混合反応物中のフォルムアルデヒドの
濃度増加を測定、管理するが、この場合、ＩＩ値全全継
続測定、反応混合物中へのフォルムアルデヒドの供給率
を円筒し、ｐＨレベルが反応ｍ値を下部１もないように
し、これによりフォルムアルデヒド門ｆ！Ｊ−の増加を
表示できるようにさせる。標ｆＭｓ 的１ ｒｌｌ （
ｉｉ’ｌ、６．５−７．０ ＣＤ範囲テｐＨ（７）低減
１ｉ５太Ｒ’ｆ′谷イ１白’、 ｐｉ約０２である。こ
こでのぞましいことは、Ｐ（１コントローラーの感度に
もよるが、フォルムアルデヒドの２導入割合′ｆ：ｐＨ
の低減割合が約０．０５かＣ・約（）１に斤るように調
節することである。
濃度増加を測定、管理するが、この場合、ＩＩ値全全継
続測定、反応混合物中へのフォルムアルデヒドの供給率
を円筒し、ｐＨレベルが反応ｍ値を下部１もないように
し、これによりフォルムアルデヒド門ｆ！Ｊ−の増加を
表示できるようにさせる。標ｆＭｓ 的１ ｒｌｌ （
ｉｉ’ｌ、６．５−７．０ ＣＤ範囲テｐＨ（７）低減
１ｉ５太Ｒ’ｆ′谷イ１白’、 ｐｉ約０２である。こ
こでのぞましいことは、Ｐ（１コントローラーの感度に
もよるが、フォルムアルデヒドの２導入割合′ｆ：ｐＨ
の低減割合が約０．０５かＣ・約（）１に斤るように調
節することである。
Ｐｌ（の値は従来の測定手段（つ’ｔＤｐＨメーター）
ヲ使って行い、できればこのメーターを在来式ｐＨコン
ｔローラーに連結する。ＨＣＨＯ供給ポンプはこのコン
トローラの６酸性”位置に連結する。
ヲ使って行い、できればこのメーターを在来式ｐＨコン
ｔローラーに連結する。ＨＣＨＯ供給ポンプはこのコン
トローラの６酸性”位置に連結する。
反応時のＰＩ−１の下部リミット１で…が低減すると、
これはフォルムアルデヒド濃度の増大の裏付けであり、
この場合、コントローラは自動的にＨＣＨＯ供給ポンプ
を閉にするはずである。したがって、これによりＨＣＨ
Ｏがこれ以上系内に導入されぬことが明確になる。この
時点で、ＨＣＨＯの供給率を手動もしくは自動的に低め
ることができる。
これはフォルムアルデヒド濃度の増大の裏付けであり、
この場合、コントローラは自動的にＨＣＨＯ供給ポンプ
を閉にするはずである。したがって、これによりＨＣＨ
Ｏがこれ以上系内に導入されぬことが明確になる。この
時点で、ＨＣＨＯの供給率を手動もしくは自動的に低め
ることができる。
（低減範囲はその当初設定値の５％から９５％の間、好
捷しくに１０％から４０％の間にすることが可能である
）。反応混合物に上記以上のＨＣＨＯが導入できなくな
るとｈ ｐＨは再び増大しはじめる。
捷しくに１０％から４０％の間にすることが可能である
）。反応混合物に上記以上のＨＣＨＯが導入できなくな
るとｈ ｐＨは再び増大しはじめる。
これが当初設定値以上になると、コントローラがこれを
感知し、ＨＣＨＯボングを開にする。
感知し、ＨＣＨＯボングを開にする。
３７係のフォルムアルデヒド溶液のＰｌ（は約４．５で
あるため、このＨＣＨＯ浴溶液ＰＩ］を、混合物に当初
フォルムアルデヒドを導入するに先き立ち、受容し得る
程度の触媒を添加してＰ１］中性値近くに（約４．５か
ら約６〜７．０の間に）調節すると好都合である。この
ようにして好ましくない副反応によるｐＨ低減を容易に
σ１］］定することができる。以下（ｌｊ、実ｈｉ：ｉ
１ｔｌけ二よりこの発明の計イ１１１を説１ダＪする
が、必−Ｊ’ Ｌ−もこの例に限定されることはない。
あるため、このＨＣＨＯ浴溶液ＰＩ］を、混合物に当初
フォルムアルデヒドを導入するに先き立ち、受容し得る
程度の触媒を添加してＰ１］中性値近くに（約４．５か
ら約６〜７．０の間に）調節すると好都合である。この
ようにして好ましくない副反応によるｐＨ低減を容易に
σ１］］定することができる。以下（ｌｊ、実ｈｉ：ｉ
１ｔｌけ二よりこの発明の計イ１１１を説１ダＪする
が、必−Ｊ’ Ｌ−もこの例に限定されることはない。
−２１７゛川イシリ １
グリシン（１＋″！終γｒ′１度２Ｍ）を水にｌｔＪ
ｊＱイ。その反ＬＴｈ’； ？ＩＡ合物のｐＨ＆ｊ約５
．８ ／１−５．８８でおった。このグリシン溶液２
（１ｃｃをかくはんしながらビーカーに分取し、ＣＩ＋
ｅｍｃ ｎ ｄ ｅ ｔ ｐＨｉｌと、Ｃｏ１ｅ −
Ｐｎｒｍｅｒ コントローラを使ってｐＨを測定。前記
で示す初期の値１でグリシン溶液の、ｌ（ｆ、（上げイ
）ためＮａＯＨ（１０づ）を使用した。つぎに１（ＣＩ
；Ｏ（Ｉ Ｎ ）を加え、ｒｌｌの低減状態を記録した
。その結果は表２のとおり。
ｊＱイ。その反ＬＴｈ’； ？ＩＡ合物のｐＨ＆ｊ約５
．８ ／１−５．８８でおった。このグリシン溶液２
（１ｃｃをかくはんしながらビーカーに分取し、ＣＩ＋
ｅｍｃ ｎ ｄ ｅ ｔ ｐＨｉｌと、Ｃｏ１ｅ −
Ｐｎｒｍｅｒ コントローラを使ってｐＨを測定。前記
で示す初期の値１でグリシン溶液の、ｌ（ｆ、（上げイ
）ためＮａＯＨ（１０づ）を使用した。つぎに１（ＣＩ
；Ｏ（Ｉ Ｎ ）を加え、ｒｌｌの低減状態を記録した
。その結果は表２のとおり。
表 ２
６．５４ ５ｍＭ ６．２４ ０．３
０．０６第−添加 ５ｍＭ ５．９６ （１，５８０，０５８第
二添加 ７．０３ ５ｍＭ ６．８ ０．２３
０．０４６５ ｍＭ ６．５６ ０．４７
０．０４７７．５ ５ｍＭ ７．３
８ ＋）、１２ ０．０２４５ｍＭ
７．２４ ０．２６ ０．０２にの糸古果、グ
リシン溶液にフォルムアルデヒドを添加するとｐＨの低
下を来し、測定系の感度のよいことが分かる。
０．０６第−添加 ５ｍＭ ５．９６ （１，５８０，０５８第
二添加 ７．０３ ５ｍＭ ６．８ ０．２３
０．０４６５ ｍＭ ６．５６ ０．４７
０．０４７７．５ ５ｍＭ ７．３
８ ＋）、１２ ０．０２４５ｍＭ
７．２４ ０．２６ ０．０２にの糸古果、グ
リシン溶液にフォルムアルデヒドを添加するとｐＨの低
下を来し、測定系の感度のよいことが分かる。
実施例２
グリシン濃度をＩＭとした以外、使用条件は実施例１と
同一である。その結果を示すと表３のとおり。
同一である。その結果を示すと表３のとおり。
表 ３
、、Ｈ １ｉ．ＣＨＯ ｒＨ Δ
ＰＩＩ Δｐ）１／ｍ Ｍ Ｉ（ Ｃ Ｈ Ｏ（辺脚
＞−一−−−−（＝ｐぞλーーーーーーーーーーーーー
ーー−−一一一６、５６ ’ ５ｍＭ ６，２６ ０．
３− ０．０６０５ｍＭ ６．旧） ０．５
６ ０．０５６７ 、０９ ５ ｍＭ
６，８９ ０．２ （ＬＯ４５ｍＭ
６．６６ ０，４３ ０．０４３７ 、５
５ ｍＭ ７，３８
０，１２ ０．０２４５ｍＭ ７，
２３ ０．２７ ０．０２７この結果の示すところで
に、グリシン溶液にフォルムアルデヒドを添加するとＰ
ｌ（の低下が生じる。
ＰＩＩ Δｐ）１／ｍ Ｍ Ｉ（ Ｃ Ｈ Ｏ（辺脚
＞−一−−−−（＝ｐぞλーーーーーーーーーーーーー
ーー−−一一一６、５６ ’ ５ｍＭ ６，２６ ０．
３− ０．０６０５ｍＭ ６．旧） ０．５
６ ０．０５６７ 、０９ ５ ｍＭ
６，８９ ０．２ （ＬＯ４５ｍＭ
６．６６ ０，４３ ０．０４３７ 、５
５ ｍＭ ７，３８
０，１２ ０．０２４５ｍＭ ７，
２３ ０．２７ ０．０２７この結果の示すところで
に、グリシン溶液にフォルムアルデヒドを添加するとＰ
ｌ（の低下が生じる。
」り定装置１【の感度は実施例１と同じであり、グリシ
ン濃度！度は高目である。
ン濃度！度は高目である。
実施例３
セリン２八４とグリシン０．８Ｍとの混合物を用い、り
゛リシントフォルムアルデヒドの反応路Ｊｔｌｌｉ’こ
近い生成条件でセリンを生成させるようにした以外、実
施例１と同一条件であった。この結果を表４に示す。
゛リシントフォルムアルデヒドの反応路Ｊｔｌｌｉ’こ
近い生成条件でセリンを生成させるようにした以外、実
施例１と同一条件であった。この結果を表４に示す。
表 ４
６、５０ ５ｍＭ ６，３１ ０，１９ ０．０３８
５ｍＭ ６，１４ ０．３６ ０．０３６７、０３
５ｍＭ ６．８９ ０．１４ ０．０２８５ｍＭ ６
．７８ ０，２５ ０．０２５７、！５ １０ｍＭ
７．３６ ’ ０．１４ ０．０１４１０ｍＭ ７．
２０ ０．３ ０．０１５上記からグリシンとセリン
の水溶液混合物にフオルノ・アルデヒドを添加すると、
Ｐｌ」の低下がおこることが分かる。
５ｍＭ ６，１４ ０．３６ ０．０３６７、０３
５ｍＭ ６．８９ ０．１４ ０．０２８５ｍＭ ６
．７８ ０，２５ ０．０２５７、！５ １０ｍＭ
７．３６ ’ ０．１４ ０．０１４１０ｍＭ ７．
２０ ０．３ ０．０１５上記からグリシンとセリン
の水溶液混合物にフオルノ・アルデヒドを添加すると、
Ｐｌ」の低下がおこることが分かる。
実施例４
ア士トアルデヒドを使用した以外、条件は実施例１と同
じである。
じである。
結果−表５の通９。
表 ５
，１１ アセト ＰＩ（Δ Ｐｌｌ
Δｐｌ（７ｍＭ７．００ ８．９ｍＭ ｆｉ
、８５ ０．１５ （Ｊ、０１７８．９
ｍＭ （ｉ、７２ ０．２８ ０．
’（１１６７，５９８，９ｍＭ ？、４７ ０．
．１２ ０．０１３Ｂ、９ｍＭ ７．３
８ ０．２１ Ｆ＋、（＋１２８、［Ｊ
２ ８．９ ｍＡ’ｌ ７．９４ ０．０８
０．（ＪＯ９８，９ｍＭ ７．８６
０，１６ ０．００９実施例５ １００ ｍｌの作業８ 、！Ｆ：： ｋ備える１ ５０
ｍ１（７）バイオリアクター１０ （ｊｉｆ５１図参
照）に２２５９のグリ７ン（３Ｍ）、（１，５Ｍのりん
酸ピリドキサール。
Δｐｌ（７ｍＭ７．００ ８．９ｍＭ ｆｉ
、８５ ０．１５ （Ｊ、０１７８．９
ｍＭ （ｉ、７２ ０．２８ ０．
’（１１６７，５９８，９ｍＭ ？、４７ ０．
．１２ ０．０１３Ｂ、９ｍＭ ７．３
８ ０．２１ Ｆ＋、（＋１２８、［Ｊ
２ ８．９ ｍＡ’ｌ ７．９４ ０．０８
０．（ＪＯ９８，９ｍＭ ７．８６
０，１６ ０．００９実施例５ １００ ｍｌの作業８ 、！Ｆ：： ｋ備える１ ５０
ｍ１（７）バイオリアクター１０ （ｊｉｆ５１図参
照）に２２５９のグリ７ン（３Ｍ）、（１，５Ｍのりん
酸ピリドキサール。
ｎＹ署乏セリンヒト°ロキシメチルトランスフェラーゼ
（４５（１栄位）全収納密封し、窒素タンク１２がら導
入するＮ２でカバーシ、温度を３７℃に保つ。
（４５（１栄位）全収納密封し、窒素タンク１２がら導
入するＮ２でカバーシ、温度を３７℃に保つ。
ｊ： ｉｅバイオリアクターには、通常使用するＰｌｌ
、 レドックスｔＩ、 ４１ｉ＋ｊ １４ ｋとりつ
ける。さらにＰ１１プローブ釦従来式のＰ１１コントロ
ーラ１６に連結１−る。基礎ポンプ１８をコントローラ
ーの「基礎部ＪＶｃ７−結する。コントローラーの基礎
位置でのｐＨ設定点は６．５とした。つぎに反応混合物
のｐＨをＫＯＨタンク２０から導入されるｌＯ％ＫＯＨ
溶液を用い、６．５に調節保持した。レドックス電位は
従来のレドックスコントローラ２２を使って維持させ、
反応混合物のレドックス電位を−３００ｒｒ＋ｖ以下に
低めるためβ−メルカットエタノール（０，２ｍ１）ｆ
導入した。レドックス電位とｐＨとが希望設定値に達し
て安定したのち、テトラヒドロフオレート（最終濃度１
ｍＭ）を添加。フォルムアルデヒドポンプ２４をｐＨコ
ントローラの酸の位置に連結した。この際のコントロー
ラの酸位置でのセットポイントのＰｌ（値は６．５相当
である。当初のフォルムアルデヒド添加速度を、３．７
ｍ１１時として、フォルムアルデヒドタンク２６からフ
ォルムアルデヒドをポンプ操作して反応を開始した。反
応を始めて当初４〜５時間で僅かのＰＦ１変動をみとめ
た。セリンの蓄積によりフォルムアルデヒド転化率がフ
ォルムアルデヒド添加速度よジ低くなった時、セリン卦
よび／またはグリシンのアミン基とフォルムアルデヒド
との反応とが（、ｌへか累積して、 Ｐ１＋の低減を生
ずる（実施例１− Ｉ１１参照）。Ｐｔｌが６．４４に
低減すると、コントローラが自動的に働いてフォルムア
ノトデヒドボンフ゛を止める。フォルムアルデヒド導入
限度に炸すると、ＰＩ−１が上昇する。これが６．４８
になると、再びコントａ−ラが自動的には／こらいてフ
ォルムアルデヒドポンプを動かす。この時点にに′ると
（つ寸りｐＨが６．４４に低減した瞬間）フォルムアル
デヒドの導入速度１″１１．２ｍｌ／時に減する。数時
間、Ｈを安定状態に保ったのち、ＰＩＩｉｙ丁内び低減
して、フォルムアルデヒドポンプが上動する。希望する
転化率が得られるまで全プロセスを繰りかえし操作する
。ここで従来式の２組のチャンネルレコーダ２８を使い
、ｐＨコントローラ１６とレドックス電位コントローラ
２２からのデ・−夕を記録１−る。この反応の工程中、
１０チＫ ＯＨＯ，（１８ｍｌを一時間ごとに加えて、
添加したフォルムアルデヒドの酸度を相殺する。−制御
したフォルムアルデヒドとの反応の結果を第２図に示す
。
、 レドックスｔＩ、 ４１ｉ＋ｊ １４ ｋとりつ
ける。さらにＰ１１プローブ釦従来式のＰ１１コントロ
ーラ１６に連結１−る。基礎ポンプ１８をコントローラ
ーの「基礎部ＪＶｃ７−結する。コントローラーの基礎
位置でのｐＨ設定点は６．５とした。つぎに反応混合物
のｐＨをＫＯＨタンク２０から導入されるｌＯ％ＫＯＨ
溶液を用い、６．５に調節保持した。レドックス電位は
従来のレドックスコントローラ２２を使って維持させ、
反応混合物のレドックス電位を−３００ｒｒ＋ｖ以下に
低めるためβ−メルカットエタノール（０，２ｍ１）ｆ
導入した。レドックス電位とｐＨとが希望設定値に達し
て安定したのち、テトラヒドロフオレート（最終濃度１
ｍＭ）を添加。フォルムアルデヒドポンプ２４をｐＨコ
ントローラの酸の位置に連結した。この際のコントロー
ラの酸位置でのセットポイントのＰｌ（値は６．５相当
である。当初のフォルムアルデヒド添加速度を、３．７
ｍ１１時として、フォルムアルデヒドタンク２６からフ
ォルムアルデヒドをポンプ操作して反応を開始した。反
応を始めて当初４〜５時間で僅かのＰＦ１変動をみとめ
た。セリンの蓄積によりフォルムアルデヒド転化率がフ
ォルムアルデヒド添加速度よジ低くなった時、セリン卦
よび／またはグリシンのアミン基とフォルムアルデヒド
との反応とが（、ｌへか累積して、 Ｐ１＋の低減を生
ずる（実施例１− Ｉ１１参照）。Ｐｔｌが６．４４に
低減すると、コントローラが自動的に働いてフォルムア
ノトデヒドボンフ゛を止める。フォルムアルデヒド導入
限度に炸すると、ＰＩ−１が上昇する。これが６．４８
になると、再びコントａ−ラが自動的には／こらいてフ
ォルムアルデヒドポンプを動かす。この時点にに′ると
（つ寸りｐＨが６．４４に低減した瞬間）フォルムアル
デヒドの導入速度１″１１．２ｍｌ／時に減する。数時
間、Ｈを安定状態に保ったのち、ＰＩＩｉｙ丁内び低減
して、フォルムアルデヒドポンプが上動する。希望する
転化率が得られるまで全プロセスを繰りかえし操作する
。ここで従来式の２組のチャンネルレコーダ２８を使い
、ｐＨコントローラ１６とレドックス電位コントローラ
２２からのデ・−夕を記録１−る。この反応の工程中、
１０チＫ ＯＨＯ，（１８ｍｌを一時間ごとに加えて、
添加したフォルムアルデヒドの酸度を相殺する。−制御
したフォルムアルデヒドとの反応の結果を第２図に示す
。
稀釈率（ｉ、］ ３ ） ｋ修正したのち、２３時間し
て平均１０．９ ｇセリン／時、ｌの収率で８２．５％
モル１モルの転化収率が得られる。酵素の活性度は反応
の終期でも９０％を維持していた。
て平均１０．９ ｇセリン／時、ｌの収率で８２．５％
モル１モルの転化収率が得られる。酵素の活性度は反応
の終期でも９０％を維持していた。
実施例６
酵素（セリン・ヒドロキシメチルトランスフェラーゼ）
によるグリシンとフォルムアルデヒドからセリンを生成
する条件ｆ’ｊ、ｐＨ設定点が６．５の代りに７．０で
あることを除き実施例４の条件と同じであった。反応２
４時間後に、平均１０．５ｇ／時、ｌのセリン収率をも
って８０チモル１モル転化率が得られた。酵素の活性度
は反応の終期でも９２チを維持していた。
によるグリシンとフォルムアルデヒドからセリンを生成
する条件ｆ’ｊ、ｐＨ設定点が６．５の代りに７．０で
あることを除き実施例４の条件と同じであった。反応２
４時間後に、平均１０．５ｇ／時、ｌのセリン収率をも
って８０チモル１モル転化率が得られた。酵素の活性度
は反応の終期でも９２チを維持していた。
第１図は当発明（（よるビオレアフタ−とｐＨＩＩＩ
定によるフィードバックコントロール装置の組立概略図
、第２図は２３時間にわたりＰ［１調節によるフォルム
アルデヒド添加のもとてグリシンから４０ ラれるＬ−
レシンの生成状態図を示すグラフである。 １０・・・ピオレアクター、１２・・・？素タンク、１
４・・レドックスＮ極、 １６−ｐＨコントローラー
、１８・・・基礎ポンプ、２０・・ＫＯＨタンク、２２
・・・レドックスコントローフ １２４・・・フォル
ムアルデヒドポンプ、２６・・フォルムアルデヒドタン
ク、２８・・・レコーダー。 特許出願人 ジエネツクス書コーポレイション（外２
名） 手 続 川）ＩＥ 書（自発） １，９オ［ｊ６Ｑ、、、７・３Ｊ１，１ヨ１１１ｊ″訂
庁長宮殿 １ ・ＩＩ ｆ’ｌの表ボ 士−１願昭６０−１２
５２５８号反１．コニ混合物への添加速度制御方法：３
．１山止を−４る／１ ＝Ｉ！ｒ！ｌとの関係 腸゛許出１ｇｒｉ 人ｆ１−
所 東京都港区西新［藷］ −Ｊ” ｒ−１
４番］Ｏ５す５、補正の対象 （１）願書の特許出願人の代表者の欄 （２）委任状および訳文 （３）明細書 （４）図 面 ６、 補正の内容 （１）別紙の通り願書の特許出願人の代表者を補正する
。 （２）別紙の通り委任状および訳文を補充する。 （３）明細書の浄書（内容に変更なし）（４）図面の浄
書（内容に変更なし） 以上
定によるフィードバックコントロール装置の組立概略図
、第２図は２３時間にわたりＰ［１調節によるフォルム
アルデヒド添加のもとてグリシンから４０ ラれるＬ−
レシンの生成状態図を示すグラフである。 １０・・・ピオレアクター、１２・・・？素タンク、１
４・・レドックスＮ極、 １６−ｐＨコントローラー
、１８・・・基礎ポンプ、２０・・ＫＯＨタンク、２２
・・・レドックスコントローフ １２４・・・フォル
ムアルデヒドポンプ、２６・・フォルムアルデヒドタン
ク、２８・・・レコーダー。 特許出願人 ジエネツクス書コーポレイション（外２
名） 手 続 川）ＩＥ 書（自発） １，９オ［ｊ６Ｑ、、、７・３Ｊ１，１ヨ１１１ｊ″訂
庁長宮殿 １ ・ＩＩ ｆ’ｌの表ボ 士−１願昭６０−１２
５２５８号反１．コニ混合物への添加速度制御方法：３
．１山止を−４る／１ ＝Ｉ！ｒ！ｌとの関係 腸゛許出１ｇｒｉ 人ｆ１−
所 東京都港区西新［藷］ −Ｊ” ｒ−１
４番］Ｏ５す５、補正の対象 （１）願書の特許出願人の代表者の欄 （２）委任状および訳文 （３）明細書 （４）図 面 ６、 補正の内容 （１）別紙の通り願書の特許出願人の代表者を補正する
。 （２）別紙の通り委任状および訳文を補充する。 （３）明細書の浄書（内容に変更なし）（４）図面の浄
書（内容に変更なし） 以上
Claims (12)
- （１）アルデヒド含有化合物の、求核化合物と触媒とを
含む反応混合物への添加速度を制御する方法であって、
上記反応混合物のｐＨを連続的に測定し、その反応混合
物中にアルデヒド含有化合物を導入して、望ましくない
高濃度のアルデヒド含有混合物の蓄積を示す上記反応混
合物のｐＨ値の低下を防止することからなる方法。 - （２）アルデヒド含有化合物を選択的に反応混合物に導
入して反応ｐＨ値の低下が約０．２より大きくならない
ことを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の方法。 - （３）アルデヒド含有化合物を選択的に反応混合物に導
入して反応ｐＨ値の低下が約０．０５から約０．１間の
値より大きくならないことを特徴とする特許請求の範囲
第２項記載の方法。 - （４）アルデヒド含有化合物の、求核化合物と触媒とを
含む反応混合物への添加速度を制御する方法であって、
求核化合物および触媒を含有する反応混合物中にアルデ
ヒド含有化合物を導入し、このアルデヒド化合物の導入
を、アルデヒド含有化合物の濃度の過剰を示す上記反応
混合物のｐＨ値の低下が起ったときに中止し、アルデヒ
ド化合物の上記反応混合物への導入を、上記反応混合物
のｐＨ値が所望の反応ｐＨに戻ったときに再開すること
からなる方法。 - （５）アルデヒド含有化合物が式Ｒ−ＣＨＯ群で示され
、Ｒをアルキル、アリル、置換アリル、アルケニル、ア
ルキニルの何れかとすることを特徴とする特許請求の範
囲第１項記載の方法。 - （６）アルデヒド含有化合物が式Ｒ−ＣＨＯ群で示され
、この場合Ｒがアルキル、アリル、置換アリル、アルケ
ニル、アルキニルの何れかであることを特徴とする特許
請求の範囲第４項記載の方法。 - （７）求核化合物が一種のアミン含有化合物かアミノ酸
含有化合物の何れかであることを特徴とする特許請求の
範囲第５項記載の方法。 - （８）求核化合物が、アミン含有化合物かまたはアミノ
酸含有の化合物であることを特徴とする特許請求の範囲
第６項記載の方法。 - （９）求核化合物がグリシンであることを特徴とする特
許請求の範囲第５項記載の方法。 - （１０）求核化合物がグリシンであることを特徴とする
特許請求の範囲第６項記載の方法。 - （１１）反応混合物がさらに、テトラヒドロ葉酸を含み
、かつ触媒がセリン・ヒドロキシメチルトランスフェラ
ーゼであることを特徴とする特許請求の範囲第９項記載
の方法。 - （１２）反応混合物がさらに、テトラヒドロ葉酸を含み
かつ、触媒がセリン・ヒドロキシメチルトランスフェラ
ーゼであることを特徴とする特許請求の範囲第１０項記
載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US61911684A | 1984-06-11 | 1984-06-11 | |
| US619116 | 1984-06-11 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6112295A true JPS6112295A (ja) | 1986-01-20 |
Family
ID=24480525
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP12525885A Pending JPS6112295A (ja) | 1984-06-11 | 1985-06-11 | アルデヒド含有化合物の、求核化合物と触媒とを含む反応混合物への添加速度制御方法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0165044A3 (ja) |
| JP (1) | JPS6112295A (ja) |
| BR (1) | BR8502782A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5266468A (en) * | 1990-06-04 | 1993-11-30 | University Of Notre Dame Du Lac | Process for preparing β-hydroxy-α amino acids |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3926738A (en) * | 1972-05-10 | 1975-12-16 | Wilson John D | Method and apparatus for control of biochemical processes |
| GR79037B (ja) * | 1982-11-19 | 1984-10-02 | Genex Corp |
-
1985
- 1985-06-11 EP EP85304127A patent/EP0165044A3/en not_active Withdrawn
- 1985-06-11 JP JP12525885A patent/JPS6112295A/ja active Pending
- 1985-06-11 BR BR8502782A patent/BR8502782A/pt unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0165044A2 (en) | 1985-12-18 |
| BR8502782A (pt) | 1986-02-18 |
| EP0165044A3 (en) | 1987-09-30 |
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