JPS6034913A - β−Ｄ−キシロシド系癌転移抑制剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、β−Ｄ−キシロシド系癌転移抑制剤に関する
。

悪性腫瘍細胞は、正常な細胞にはみられない種々の性質
を有しているが、その中でも、ある組織に発生した悪性
腫瘍細胞が他の組織あるいは臓器に転移する現象は、最
も悪性の名にふされしものであり、その機構をふまえて
の転移抑制剤の開発は医学的・薬学的に最も重要な課題
の一つである。

腫瘍細胞の転移は、（ａ）発生部位における急速な細胞
増殖、（ｂ）血管内への侵入、（Ｃ）特定臓器の毛細血
管内への沈着、（ｄ）血管の内側から外側への透過、（
ｅ）転移部位での急速な増殖など多くの過程から成って
いる。原理的には、この中のどれか一つの過程を抑制す
れば転移が抑８１ノ１される筈である。ところで、（Ｃ
）から（ｅ）までの過程、即ち、血管壁の内側への沈着
とそれにつづく外側への透過、そして増殖は、前もって
試験管内で増殖させた一定数の腫瘍細胞を直接マウスの
静脈へ注射し、時間を追ってそれら細胞の挙動と、標的
となる臓器に新生する転移コロニーの数を組織学的、生
化学的に定量する手法が確率され［１，Ｊ、Ｆｉｄｌｅ
ｒ、ｅｔ　ａｌ、；　Ｎａｔｕｒｅ、　２８３．１３９
−１４［１（１９８０）　］　、現在は、国際的にもこ
れを判定の基準として腫瘍細胞の転移能を定量する例が
多い。

例えば、Ｒ，ａｚら［Ａ、Ｒａｚ、ｅｔ　ａｌ、；　Ｃ
ａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ、　４０．１ｅ４５−１８
５１（１９８０）］は、マウスメラノーマ（悪性黒色細
胞腫）、１１１１胞５０．０００個をＣ５７ＢＬ／６マ
ウスの静脈に注射し、１８日後に肺を切除して転移によ
って生じたメラノーマ細胞の黒色コロニーの数をカウン
トした場合、そのコロニー数の平均値はメラノーマ細胞
の細胞表面化学組成と密接な関係があることを報告して
いる。

一方、Ｋ　ｉ　ｍａ　ｔａら　［Ｋ、Ｋｉｍａｔａ、ａ
ｔ　ａｌ、；ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ　、４３．
１３４７−１３５４（１９８３）］は、マウス自自然土
生乳より分離されたＦＭ３　Ａ癌細胞を２．５Ｘ１０５
又は　１．ＯＸ　１０６個をＣ３Ｈ／　Ｈｅ　マウスの
静脈に注射し、１８日後に肺を切除して転移巣の数をカ
ウントする方法で、ＦＭ３Ａ細胞群の中でも細胞表面に
ヒアルロン酸を多量にもつ細胞はと転移能が高いことを
明らかにしている。更に、Ｈｏｎｍａ　ら　［Ｙ、Ｈｏ
ｎｍａ、ｅｔ　ａｌ、；Ｇａｎｎ、η２，８９８−９０
５（１９８１）］は、ＦＭ３Ａ細胞に転移能が高いほど
宿主マウスの生存日数が短くなることを証明している。

また、上述したように腫瘍細胞が転移するためには、そ
の細胞が血管内皮に沈着する過程が不＋ｒｆ欠であるが
、この沈着は腫瘍細胞の表面に分布する分子と血管内皮
マトリックスを構成する分子との相互認識、結合によっ
てひきおこされることか多くのス（礎実験によって明ら
かにされている［Ｒ。

Ｈ，Ｋｒａｍｅｒ、　ｅｔ　ａｔ、；　Ｐｒｏｃｅｅｄ
ｉｎｇｓ　ｏｆ　ＮａｔｕｒａｌＡｃａｄｅｍｙ　ｏｆ
　５ｃｉｅｎｃｅ、Ｕ、Ｓ、Ａ、、７ｆｆ、５７０４−
５７０８（１９７９）］。

一方、メラノーマＢ１６系の細胞表面には、多量のプロ
テオグリカンが存在し、それらはムコ多糖側鎖としてコ
ンドロイチン硫酸を有するもの、ヘパラン硫酸を有する
ものの２群より成ることが明らかにされている［０．５
ａｔｏｈ、　ｅｔ　ａｌ、；Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
、　１３．１２３３−１２４１（１９７４）］　、これ
らのプロテオグリカンはβ−Ｄ−キシロシド系化合物の
投与によってその生合成が特異的に撹乱され、細胞表面
に定着できない分子構造に変化させられることが多くの
実験で証明されている［Ｙ、Ｋａｔｏ、　ｅｔ　ａｌ、
；　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈ
ｅｍｉｓｔｒＹ、２５３．２７８４−２７８９（１９７
８）：　Ｐ、Ｒ。

５ｕｄｈａｋａｒａｎ、ｅｔ　ａｌ、；Ｈｏｐｐｅ−Ｓ
ｅｙｌｅｒ’ｓ　Ｚｅｉｔｓｃｈｒｉｆｔｆｕｒ　Ｐｈ
ｙｓｉｏｌｏｇｉｓｃｈｅ　Ｃｈｅｍｉｅ、３ｆｔ２．
　３９−４６（１９８１）コ　。

β−Ｄ−キシロシド系化合物にツイテハ、Ｃ−β−Ｄ−
キシロシド系化合物（特開昭５８−７７８７９号公報）
、Ｓ−β−Ｄ−キシロシド系化合物（特開昭５８−４８
０９９号公報）及び０−β−Ｄ−キシロシド系化合物［
Ｂ、Ｌｉｎｄｂｅｒｇ；　Ａｃｔａ　Ｇｈａｍ、　５ｃ
ａｎｄ、、　３　。

１５１−１５６（１９４９）：Ａ、Ｔｈｏｍｐｓｏｎ、
ｅｔ　ａｌ、；ＭｅｔｈｏｄｓＣａｒｂｏｈＹｄ、Ｃｈ
ｅｍ、、　ｇ　、２１５−２２０（１９Ｅ１３）コなど
の化合物群が知られているが、癌転移抑制剤としての適
用に関する報告は未だなされていない。

木発明者らは、新規な癌転移抑制剤を開発すべく、β−
Ｄ−キシロシド系化合物のうち、高転移性メラノーマ細
胞Ｂ１６Ｆ−１０によって活発をこ合成され細胞表面に
分布するプロテオコン１ζ゛ロイチン硫酩を特異的に撹
乱するβ−Ｄ−キシロシド系化合物約６０種を化学合成
し、その撹乱活性の測定スクリーニングを行なったとこ
ろ、ある種のＳ−β−Ｄ−キシロシド系化合物及び０−
β−Ｄ−キシロシド系化合物が特に優れた撹乱活性を示
し、更に、この化合物について、癌転移抑制効果を検討
したところ、顕著な効果を有することを見出し、本発明
を完成するに至った。

即ち、本発明の癌転移抑制剤は、 　ＯＨ （式中、又は、酸素原子又はイオウ原子を表わし、Ｒは
、炭素原子数１〜８の直鎖状又は分枝状のアルキル基を
表わす）で示されるβ−Ｄ−キシロシド系化合物を有効
成分とすることを特徴とするものである。

前記式において、Ｒで表わされるアルキル基としては、
メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基
、ｎ−ブチル基、イソブチル基、５ｅｃ−ブチル基、ｔ
ｅｒｔ−ブチル基、ｎ−アミル基（ペンチル基）、イソ
アミル基、ｎ−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、ｎ−オク
チル基、シクロプロヒル基、シクロブチル基、シクロヘ
キシル基等が挙げられるが、メチル基、エチル基、ｎ−
プロピル基、ｎ−ブチル基、ｎ−アミル基、イソアミル
基、ｎ−ヘキシル基が好ましく、ｎ−ブチル基が更に好
ましい。

前記式（Ｉ）で示される化合物は、例えば、次に示す反
応経路に従って合成することができる。

（１）　（１） （ＩＹ）　（Ｖｌａ）　（Ｉａ） （Ｖ）　（、ＶＩｂ） ■（ （１ｂ） ［前記経路及び式中、Ａｃはアセチル基を表わす。

又は臭素原子又はヨウ素原子を表わし、Ｒは前述の意味
を有する。］ 即ち、Ｄ−キシロース（ＩＩ　）をノ＼ドソン（Ｈｕｄ
ｓｏｎ）等の方法［Ｃ，Ｓ、Ｈｕｄｓｏｎ、ｅｔ　ａｌ
、；　Ｊ、Ａｍ。

Ｃｈｅｍ、　Ｓａｃ、、　３？　、２７４８（１９１５
）］によりアセチル化してテトラアセテート（ＩＩＩ）
を得、これをホランド（Ｈｏ１ｌａｎｄ）等の方法［Ｃ
，Ｖ、）Ｉｏｌｌａｎｄ、ｅｔ　ａｌ、；Ｊ、　Ｏｒｇ
、　３２．１８１８（１９８７）］により塩塩化アルミ
ニラで処理して化合物（ＩＶ）を得る。このとき、（ｍ
）を塩化アルミニウムで短時間処理すると（ＩＶ）のβ
一体が得られるが、長時間処理すると熱力学的により安
定なα一体が得られる。（ＩＶ）は、また、（ＩＩ　）
を塩化亜鉛存在下、塩化アセチルで処理することによっ
ても得ることができる［上記、ｊ、Ａｍ、ｃｈｅｍ、ｓ
ｏｃ、、　３７．２７４８（＋９１５）参照］。

この化合物（ＩＶ）を酸化銀及びアルコールで処理する
と化合物（Ｖｉａ）が得られ、これをメタノール中、触
媒量の水酸化リチウム等の塩基で処理すると対応するＯ
−β−Ｄ−キシロシド系化合物（Ｉ　ａ）が得られる。

一方、化合物（ＩＶ）をチオ尿素、次いでピロ亜硫酸カ
リウムと反応させて化合物（Ｖ）を得る。

次いで、この化合物（Ｖ）をＲＸで示される臭化物若し
くはヨウ化物と反応させて化合物（■ｂ）を得る。かく
して得られる化合物（ｖ’ｒｂ）をメタノール中、触媒
量の水酸化リチウム等の塩基で処理すると、対応するＳ
−β−Ｄ−キシロシド系化合物（Ｉｂ）が得られる。

天然プロテオコンドロイチン硫酸は、芯（コア）として
のタンパク質（コアタンパク質）に数十水のコンドロイ
チン硫酸側鎖が結合した分子であるが、上記の方法で、
得られたβ−Ｄ−キシロシド系化合物は、いずれも、試
験管内で培養中のメラノーマＢ１６−ＦＩＯ細胞に対し
、０．０５ｍＭ〜１．０ｍＭの範囲内で、新たに合成さ
れるプロテオコンドロイチン硫酸の９０％以上を、コア
タンパク質をもたないコンドロイチン硫酸に変化させ、
従って細胞表面へのプロテオコンドロイチン硫酸の定着
を不可能にする活性を示した。即ち、腫瘍細胞の表面に
分布する分子構造と配置を大きく変化させる効力を有す
ることが証明された。

次に、本発明に用いるβ−Ｄ−キシロシド系化合物（Ｓ
−β−Ｄ−キシロシド系化合物及び０−β−Ｄ−キシロ
シド系化合物）と、他のキシロシド系化合物、即ち、Ｃ
−β−Ｄ−キシロシド系化合物とについて、腫瘍細胞の
増殖能に与える影響を比較検討したところ、これらのキ
シロシド系化合物は、いずれも、細胞の増殖に対しては
、抑制効果を示さず、また、他の正常細胞、例えば、マ
ウス皮膚の線維芽細胞（フィブロブラスト）、ニワトリ
軟骨細胞（コンドロサイト）、マウス乳腺」二皮細胞等
に対しても全く毒性（生長抑制）を示さなかった。

更に、これらのキシロシド系化合物について、マウス腫
瘍細胞の転移能に対する効果を比較検討したところ、本
発明に用いるβ−Ｄ−キシロシド系化合物、即ち、Ｓ−
β−Ｄ−キシロシド系化合物及びＯ−β−Ｄ−キシロシ
ド系化合物は、Ｃ−β−Ｄ−キシロシド系化合物に比し
、顕著に優れた転移抑制効果を示した。

即ち、本発明の癌転移抑制剤は、細胞の増殖に対しては
、何ら影響を与えず、腫瘍細胞の転移能のみを選択的に
抑制するので、一般の制癌剤、例えば、アルキル化剤、
代謝拮抗剤等にみられる骨髄障害、６毒性、脱毛等の副
作用がないことが示唆された。

本発明の癌転移抑制剤は、その薬理からみて、特にプロ
テオグリカンを活発に合成し、細胞表面に保有している
種々の悪性腫瘍の転移抑制に用いられるが、特に、高転
移性の悪性腫瘍、例えば、悪性黒色腫（メラノーマ）、
線維肉腫（フィブロザルコーマ）、リンパ肉腫（リンフ
ォザルコーマ）、リンパ腫（リンフオーマ）等に対して
優れた効果が期待され、また外科療法時には転移が起き
やすいので、このような場合にも、優れた効果を示すと
推定される。

本発明の癌転移抑制剤の適用に際しては、顆粒剤、細粒
剤、散剤、錠剤、カプセル剤、シロップ剤、懸濁剤若し
くは液剤等の剤型にして、又は原末のまま経口投与して
もよいし、注射剤として静脈内投与、動脈内投与、門脈
内投与、胸囲腔内投与、筋肉内投与、皮下投与又は腫瘍
内投与してもよい。また、注射用の粉末にして、用時調
製して使用してもよいし、単剤等の剤型にして、経腸又
は非経口投与してもよい。経口、経腸若しくは非経口投
与に適した医薬用の有機又は無機の、固体又は液体の担
体若しくは稀釈剤を本発明の癌転移抑制剤の調製に用い
ることができる。水、ゼラチン、乳糖、でんぷん、ステ
アリン酩マグネシウム、タルク、動ＷＩＩ油脂、ベンジ
ルアルコール、カム、ポリアルキレングリコール、石油
４８Ｉ脂、やし油、ラノリン又は医薬に用いられる他の
キャリアー（担体）はすべて、本発明に用いるキシロシ
ｉ・系化合物の担体として適用することができる。

また、安定剤、湿潤剤、乳化剤や、浸透圧を変えたり、
配合剤の適切なｐ）ｌを維持するための塩類を補助薬剤
として適宜用いることもできる。更に、本発明の癌転移
抑制剤は、前記悪性腫瘍の治療において、本発明の癌転
移抑制剤とともに適切に投与することができる他の医薬
として有効な成分、例えば、一般の抗悪性腫瘍剤又は抗
炎症剤、抗生物質、止血剤若しくは消化性潰瘍治療剤を
含有していてもよい。

臨床投与量は、経口投与により用いる場合には、成人に
対しキシロシド系化合物として、１日量２００〜５．Ｏ
ＱＱｍｇを内服するのが好ましいが、年令、病態、症状
により適宜増減することが更に好ましい。前記１日量の
癌転移抑制剤は、１０に１回、又は適当な間隔をおいて
１日に２若しくは３回に分けて投与してもよいし、間欠
投与してもよい。

また、注射剤として用いる場合には、成人に対しキシロ
シド系化合物として、１回置２〜１００ｍｇを連続投与
又は間欠投与することが好ましい。

以下に、本発明を合成例、試験例及び実施例に基づいて
更に詳細に説明するが、これらは、本発明の範囲を何ら
制限するものではない。

尚、以下に示す実施例において、キシロシド系化合物の
癌転移抑制効果を検討する際に、接種前の腫瘍細胞に直
接キシロシド系化合物を作用させているが、これは、該
化合物の効果が、腫瘍細胞の表面に存在するプロテオグ
リカンの撹乱によって特異的に導かれるものであること
を厳密に証明する目的からである。

５０％アセトン水溶液２０ｍ１に２　、３　、４−１−
リーＯ−アセチル−１−３−β−Ｄ−キシロシド（Ｖ）
２．９２ｇと臭化ｎ−ヘプチル１．７９ｇを加えた。こ
の溶液に、更に、ｋｍカリウム１．３８ｇを加え、１時
間煮沸還流した。反応終了後、溶液を酩酊で中和し、ク
ロロホルムで抽出し、水洗後乾燥した。溶媒を留去し、
無色油状のｎ−ヘプチル２．３．４−トリー〇−アセチ
ル−１−３−β〜Ｄ−キシロシド　（Ｖｌ　ｂ）２．５
５ｇを得た。収率６５．３％。

次にこの化合物　（ＶＩ　ｂ）２．４５ｇをメタノール
１０ｍ１に溶解し、この溶液に水酸化リチウム１０ｍｇ
を加えた後、室温で１時間攪拌して、ｎ−ヘプチル１−
３−β−Ｄ−キシロシド１．５ｇを得た。収率９５％。

塩化メチレン２０ｍ１に２　、３　、４−　）リー〇−
アセチル−１−３−β−Ｄ−キシロシド（Ｖ）２．９２
ｇと臭化ｎ−オクチル１．９３ｇを溶解し、更にトリエ
チルアミン１．５３ｍ１を加えて、室温下１日間攪拌し
た。反応終了後１反応溶液を水洗し、乾燥した後、溶媒
を留去し、無色で油状のｎ−オクチル　２，３．４−ｌ
・ジ−０−アセチル−１−８−β−Ｄ−キシロシド　（
ＶＴ　ｂ）　１．０３９ｇをイ！Ｉた。収率２５．７％
。

かくして得られた化合物（ＶＩ　ｂ）２ｇをメタノール
１０ｍ１に溶解し、水酸化リチウム１５ｍｇを加えて、
室温で１時間攪拌し、■−オクチル　１−３−β−Ｄ−
キシロシドの無色針状晶１．３２ｇを得た。収率９５％
。

九人皇」 臭化ｎ−ヘプチルの代わりに、臭化メチル、臭化エチル
、臭化ｎ−プロピル、臭化イソプロピル、臭化ｎ−ブチ
ル、臭化イソブチル、臭化５ｅｃ−ブチル、臭化ｔｅｒ
ｔ−ブチル、臭化ｎ−アミル、臭化イソアミル、臭化ｎ
−ヘキシル、臭化シクロプロヒル、臭化シクロブチル、
臭化シクロヘキシルを用いた以外は、合成例１と同一の
原料及び方法により、それぞれ対応するアルキル　１−
８−β−Ｄ−キシロシドを得た。

アセトニトリル３０ｍ１に２　、３　、４−１−ジ−０
−アセチルーα−Ｄ−キシロシルクロリド２．９５ｇ、
調製したばかりの酸化銀４．８４ｇ及び無水エタノール
０．９２ｇを加えて、室温下−夜攪拌した。反応終了後
、濾過し、炉液を濃縮した後、残渣をクロロホルム１０
０ｍ１で抽出した。抽出液を飽和炭酸水素ナトリウム溶
液、水で順次洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した後、
溶媒を留去し、白色粉末状のエチル　２　、３　、４−
　トリー〇−アセチル−１−０−β−Ｄ−キシロシド（
ＶＩ　ａ）２．０４ｇを得た。収率６６．９％。

次にこの化合物（Ｖｌ　ａ）２．０４ｇをメタノール２
０ｍ１に溶解し、この溶液に水酸化リチウム０．０２ｇ
を加えた後、室温で４時間攪拌して、エチル１−Ｏ−β
−Ｄ−キシロシド０．８ｇを得た。収率４４，９％・ア
セト＝　ｉリル５０＋ｏｌに２．３．４−トリー〇−ア
セチルーα−Ｄ−キシロシルクロリド４．４３ｇ、調製
したばかりの酸化銀８．９５ｇ　、　炭酸カルシウム１
．０ｇ、モレキュラ・シープス３　Ａ’ｌ／１８　１．
０’ｇ及び無水ｎ−ブタノール２．２２ｇを加えて、室
温下２時間攪拌した。反応終了後、濾過し、炉液を濃縮
した後、残渣をクロロホルム１００１で抽出した。抽出
液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水で順次洗浄し、硫
酸マグネシウムで乾燥した後、溶媒を留去し、油状物を
含む固体状のｎ−ブチル　２　・３．４−トリー〇−７
セチルーｌ−〇−β−Ｄ−キシロシド　（Ｖｌ　ａ）４
．２０ｇを得た。収率８４．１％。

次にこの化合物（ＶＩ　ａ）４．２０ｇをメタノール４
０　ｍ、Ｊに溶解し、この溶液に水酸化リチウム０．０
５ｇを加えた後、室温で２時間攪拌して、ｎ−ブチル１
−０−β−Ｄ−キシロシド２．１ｇを得た。収率６８．
０％。

アセトニトリル３０ｍ１に２．３．４−トリー〇−アセ
チルーα−Ｄ−キシロシルクロリＦ　２．９５ｇ、調製
したばかりの酸化銀４．８４ｇ及び無水ｎ−オクタツー
ル１．３０ｇを加えて、室温下−夜攪拌した。

反応終了後、濾過し、炉液を濃縮した後、残渣をクロロ
ホルム１００１で抽出した。抽出液を飽和炭酸水素ナト
リウム溶液、水で順次洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥
した後、溶媒を留去し、油状のｎ−オクチル　２　、３
　、４−１−リー０−アセチル−１−０−β−Ｄ−キシ
ロシド（ＶＩ　ａ）３．２０ｇを得た。収率８２．３％
。

次にこの化合物（ＶＩ　ａ）３．２０ｇをメタノール２
０１に溶解し５、この溶液に水酸化リチウム０．０２ｇ
を加えた後、室温で３時間攪拌して、ｎ−オクチル１−
０−β−Ｄ−キシロシド１．８０ｇを得た。収率６１．
１％。

１度１ノ 無水エタノールの代わりに、無水メタノール、無水ｎ　
−フロパノール、無水イソプロパツール、無水イソブタ
ノール、無水５ｅｃ−ブタノール、無水ｔｅｒｔ　−フ
タ／−ル、無水ｎ−アミルアルコール、無水イソアミル
アルコール、無水ｎ−ヘキサノール、無水ｎ−へブタノ
ールを用いた以外は、合成例４と同一の原料及び方法に
より、それぞれ対応するアルキル　１−０−β−Ｄ−キ
シロシドを得た。

入１１犯」　籾Ｊコ１ΩＪ（（ｕ 腫瘍細胞：　Ｆｉｄｌｅｒら［１，Ｊ、Ｆｉｄｌｅｒ、
ｅｔ　ａｌ、；Ｎａｔｕｒｅ、　２８３，１３９−１４
８（１９８０）］によってマウスから分離された高転移
性のメラノーマＢ１６−ＦＩＯ株を使用した。

培養ニ一般細胞培養の場合と同様、プラスチック製培養
皿上で１０％のウシ胎児血清を添加し、基準の倍量のビ
タミンを含むイーグル（Ｅａｇｌｅ’ｓ）ＭＥＭ培地に
、更にピルビン酸、アミノ酸を補強した培地中で５％Ｃ
Ｏ２，加湿空気中において３７°Ｃで培養した。増殖曲
線を第１図に示す。細菌、ウィルスによる汚染はなかっ
た。実測値の測定に当っては用いる細胞の生理条件を一
定にするため前もって充分量の腫瘍細胞を同一条件下に
大量培養し、液体窒素で冷却した容器中に凍結保存し、
必要に応じて凍結保存細胞の一部を解凍して、前記条件
下に培養増殖させてから実験に供した。

静脈注射と転移コロニーの測定：培養皿中のＢ１６−Ｆ
ＩＯ細胞は底部に強く接着しているので、２ｍＭのエチ
レンジアミンテトラアセテートを含むリン酸緩衝生理的
食塩水を用いて遊離させ、一部を用いてトリパン青染色
で死細胞数のパーセントをカウントし、更に細胞相互の
接着のないことを確認の」二５×１０４個７０．１ｍｌ
又は０．４ｍｌリン酸緩衝生理的食塩水懸濁液として、
Ｃ５７ＢＬ／６マウス（１つの測定に７−１３匹を使用
）の尻尾の静脈に注射した。１４日後にマウスを殺し、
両肺を摘出し、顕微鏡下に転移コロニーの数を数え、７
〜１３匹のデータの中間値をもって転移コロニーの数と
した。以上の条件下で肺での転移コロニーの数は注射し
た細胞数と１２，５００個から５０，０００個の範囲内
で直線関係を示し、本測定法は肺に転移する腫瘍細胞の
数を測定する上で信頼できる方法であることが判明した
。

佐笠１」　瘍　の　−箋に−える影 ｎ−ブチル　１−３−β−Ｄ−キシロシド又はｎ−ブチ
ル　１−Ｃ−β−Ｄ−キシロシドが腫−癌細胞の増殖能
に与える影響について検討した。

腫瘍細胞としては、マウスメラノーマＢ１６−ＦＩＯ細
胞を用いた。

培地は２４時間ごとに交換した。培養開始３日目にそれ
ぞれのキシロシドを添加し、途中１回培地交換をした後
、培養５日目に細胞を採取した。結果を第２図に示す。

第２図において、０印はチオキシロシド、Δ印はＣ−キ
シロシドを、それぞれ添加したものの増殖曲線を表わし
、矢印（↓）は、キシロシドの添加時を表わし、斜線で
示された横棒は、　ｌ／４Ｉ＋胞がキシロシドに接触し
た期間を表わす。第１図及び第２図を比較することによ
り、キシロシド系化合物は細胞の増殖に対し何ら影響を
及ぼさないことがわかる。

ん象狙」　１１亙丘ス１ 合成例において得たアルキル　１−３−β−Ｄ−キシロ
シド及びアルキル　１−０−β−Ｄ−キシロシドについ
て、ｄｄＹ系マウスを用いて急性毒性試験を行なってＬ
Ｄ　をめたところ、以下に示す結果を得た。

（単位＋　ｍｇ／ｋｇ） １及１　キシロシド系ヒ令　の癌Ａ　抑ｎｊｊＪ釆 高転移性メラノーマＢ１６−ＦＩＯ細胞を前述の試験例
１の条件下に培養、増殖させ、３　Ｅ３目に最終濃度０
．２５ｍＭになるようにそれぞれのキシロシド系化合物
を楕加し、４８時間後に細胞をエチレンジアミンテトラ
アセテート溶液を用いて採取した。対照としてキシロシ
ド系化合物を添加しないものを用いた。次いで、それぞ
れの細胞５０．０００個をリン酸緩衝生理的食塩水０．
１又は０．４１に懸濁し、試験例１の転移能測定プロト
コールに従ってそれぞれの肺転移能を測定し、結果を第
２表に示した。

第２表

【図面の簡単な説明】

第１図はキシロシド系化合物無添加のときの、第２図は
キシロシド系化合物を添加したときの、細胞増殖曲線を
示す図である。 第１図 斧（ｐ数−（ｄａｙ） 第２　図 ｇＡＦ３ｅ−（ｄａｙ）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 　ＯＨ （式中、又は、酸素原子又はイオウ原子を表わし、Ｒは
   、炭素原子ａ１〜８の直鎖状又は分枝状のアルキル基を
   表わす）で示されるβ−Ｄ−キシロシド系化合物を有効
   成分とすることを特徴とするβ−〇−キシロシド系癌転
   移抑制剤。