JPS597698B2 - Fueganomycin group antibiotics - Google Patents

Fueganomycin group antibiotics

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JPS597698B2
JPS597698B2 JP53027761A JP2776178A JPS597698B2 JP S597698 B2 JPS597698 B2 JP S597698B2 JP 53027761 A JP53027761 A JP 53027761A JP 2776178 A JP2776178 A JP 2776178A JP S597698 B2 JPS597698 B2 JP S597698B2
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JP
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phg
culture
medium
group
water
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JP53027761A
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浜夫 梅沢
謙二 前田
雅 浜田
智久 滝田
信義 嶋田
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Microbial Chemistry Research Foundation
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Microbial Chemistry Research Foundation
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  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は一般式(I) (式中、R1は水素原子または水酸基を、R2は水酸基
、アスパラギン酸残基、アスパルチル・アルギニン残基
またはアスパルチル・グリシル・プロリル・スレオニン
残基を示す。
Detailed Description of the Invention The present invention is based on the general formula (I) (wherein R1 is a hydrogen atom or a hydroxyl group, R2 is a hydroxyl group, an aspartic acid residue, an aspartyl-arginine residue, or an aspartyl-glycyl-prolyl-threonine residue). Indicates the group.

)で表わされるフエガノマイシン群抗生物質に関するも
のである。本発明者らは上記一般式(1)において、R
1およびR2が共に水酸基で表わされる化合物をフエガ
ノマイシン(以下「PHG]という。)、R1が水酸基
、R2がアスバラギン酸残基で表わされる化合物をフエ
ガノマイシンD(以下「PHGD」という。)、R1が
水酸基、R2がアスパルチル・アルギニン残基で表わさ
れる化合物をフエガノマイシンDR(以下「PHG−D
R]という。)、R1が水酸基、R2がアスパルチル・
グリシル・プロリル・スレオニン残基で表わされる化合
物をフCエガノマイシンDGPT(以下[PHG−DG
PT」という。)、R1が水素原子、R2がアスバラギ
ン酸残基で表わされる化合物をデオキシフエガノマイシ
ンD(以下「デオキシPHG−D]という。)と命名し
た。これらはすべて新規抗生物質である。なお本発明で
はこれらの化合物を繰称してフエガノマイシン群抗生物
質という。次に本発明のフエガノマイシン群抗生物質の
理化学的性状を示す。1 外観:無色の粉末 2.元素分析値(%): 3.分子量: 4.融点:フエガノマイシン群抗生物質は明瞭な融点ま
たは分解点を示さないがPHG−D、PHG−DRlデ
オキシPHG−Dは230℃以上で、またPHG,.P
HG−DGPTは210℃より徐々に分解する。
) is related to the feganomycin group antibiotics. The present inventors have found that in the above general formula (1), R
A compound in which 1 and R2 are both hydroxyl groups is Feganomycin (hereinafter referred to as "PHG"), a compound in which R1 is a hydroxyl group and R2 is an asbaragic acid residue is Feganomycin D (hereinafter referred to as "PHGD"), and R1 is a hydroxyl group. , a compound in which R2 is an aspartyl arginine residue is referred to as feganomycin DR (hereinafter referred to as "PHG-D").
R]. ), R1 is a hydroxyl group, R2 is an aspartyl group,
A compound represented by glycyl, prolyl, and threonine residues is referred to as ``PHG-DGPT'' (hereinafter referred to as [PHG-DG
PT”. ), a compound in which R1 is a hydrogen atom and R2 is an aspartic acid residue was named deoxyfueganomycin D (hereinafter referred to as "deoxyPHG-D"). All of these are new antibiotics. Note that the present invention Hereinafter, these compounds will be referred to as feganomycin group antibiotics.Next, the physical and chemical properties of the feganomycin group antibiotics of the present invention will be shown.1.Appearance: colorless powder2.Elemental analysis value (%):3.Molecular weight:4 .Melting point: The fueganomycin group antibiotics do not show a clear melting point or decomposition point, but PHG-D, PHG-DRldeoxyPHG-D has a temperature of 230°C or higher, and PHG, .P
HG-DGPT gradually decomposes from 210°C.

5.比旋光度: 6.紫外線吸収スベクトルリフエガノマイシン群抗生物
質の紫外線吸収スペクトルを第1図に示す。
5. Specific rotation: 6. FIG. 1 shows the ultraviolet absorption spectrum of ultraviolet absorbing Svectorifeganomycin group antibiotics.

PHG,.PHG−D,.PHG−DRlPHG−DG
PTは282nmに肩を有し、282nmに吸収極大を
有する。それらの1% E はそれぞれ27.2、22.417.61crr
L− ― ) ) 0 )
16.2である。
PHG,. PHG-D,. PHG-DRlPHG-DG
PT has a shoulder at 282 nm and an absorption maximum at 282 nm. Their 1% E is 27.2 and 22.417.61crr respectively
L--))0)
It is 16.2.

1またデオキシPHG−Dは277nm 1% 1% (El4.5)と283nm(El4.3)1CTrL
゜1CTI1゛に二つの吸収極大を有している。
1 Also, deoxyPHG-D is 277nm 1% 1% (El4.5) and 283nm (El4.3) 1CTrL
It has two absorption maxima at ゜1CTI1゛.

7.赤外線吸収スペクトル:臭化カリウム錠として測淀
したPHG,.PHG−D,.PHG−DR,.乏PH
G−DGPTおよびデオキシPHG−Dの赤外線吸収ス
ペクトルを第2図ないし第6図に示す。
7. Infrared absorption spectrum: PHG measured as potassium bromide tablets. PHG-D,. PHG-DR,. Poor PH
The infrared absorption spectra of G-DGPT and deoxyPHG-D are shown in FIGS. 2 to 6.

各化合物の吸収極大値(波数CrrL−1 )を以下に
示す。PHG;3350、3027(Sh)、2970
,.シ16601161011535、1475、14
45、1405、1375、1335、1285、12
35、1190110701990、940、925、
855、820。
The absorption maximum value (wave number CrrL-1) of each compound is shown below. PHG; 3350, 3027 (Sh), 2970
、. C16601161011535, 1475, 14
45, 1405, 1375, 1335, 1285, 12
35, 1190110701990, 940, 925,
855, 820.

PHG−D;340013230(Sh)、 J
3O8O(Sh)、2970116601161011
535、1475、1445、1400、133011
30011235、1190、10701990、94
0、925、855、8200− PHG−DR:3350、3170(Sh)、3070
(Sh)、2930、165011530、1465、
1435、1400、1330、1285、1235、
1170、1070、9901940、930、855
、PHG−DGPT;3430、3050(Sh)、2
970、1650、155011530、144011
395、1330、1235、119011075、9
95、925、855、8200 デオキシPHG−D;3430、3230(Sh)、3
070(Sh)、295011660、1530、14
3011400113301130011230、11
80、1090、990、930、850、8150 3.溶剤に対する溶解性:フエガノマイシン群抗生物質
はメタノール、エタノール、プロパノール、アセトン、
酢酸エチル、酢酸ブチル、エーテルおよびベンゼンなど
の有機溶媒にはほとんど溶けない。
PHG-D; 340013230 (Sh), J
3O8O(Sh), 2970116601161011
535, 1475, 1445, 1400, 133011
30011235, 1190, 10701990, 94
0, 925, 855, 8200- PHG-DR: 3350, 3170 (Sh), 3070
(Sh), 2930, 165011530, 1465,
1435, 1400, 1330, 1285, 1235,
1170, 1070, 9901940, 930, 855
, PHG-DGPT; 3430, 3050 (Sh), 2
970, 1650, 155011530, 144011
395, 1330, 1235, 119011075, 9
95, 925, 855, 8200 DeoxyPHG-D; 3430, 3230 (Sh), 3
070 (Sh), 295011660, 1530, 14
3011400113301130011230, 11
80, 1090, 990, 930, 850, 8150 3. Solubility in solvents: Feganomycin group antibiotics are soluble in methanol, ethanol, propanol, acetone,
Barely soluble in organic solvents such as ethyl acetate, butyl acetate, ether and benzene.

またPHG,.PHG−DRlPHG−DGPTは水に
よく溶けるがPHG−DおよびデオキシPHG−Dはこ
れらに比して溶解度が小さい。→.呈色反応:フエガノ
マイシン群抗生物質は、ニンヒドリン反応、ライドンス
ミス反応、ペンタシアノアクオフエリエイト反応、パウ
リ反応は陽性、テトラゾリウムクロライド反応、工ール
リツヒ反応は陰性を示す。
Also PHG,. PHG-DRlPHG-DGPT is highly soluble in water, but PHG-D and deoxyPHG-D have lower solubility than these. →.. Color reaction: Feganomycin group antibiotics show positive results in ninhydrin reaction, Lydon-Smith reaction, pentacyanoaqueofriate reaction, and Pauli reaction, and negative results in tetrazolium chloride reaction and Ehrlitsug reaction.

坂口反応はPHGDRのみ陽性で他は疑陽性を示す。1
0,酸加水分解生成物:フエガノマイシン群抗生物質を
6規定塩酸、105℃、17時間封管中で加水分解後ア
ミノ酸分析を行いそのモル比をもとめた。
In the Sakaguchi reaction, only PHGDR is positive and the others are false positive. 1
0. Acid hydrolysis product: A feganomycin group antibiotic was hydrolyzed in a sealed tube at 105° C. for 17 hours with 6N hydrochloric acid, and then amino acid analysis was performed to determine the molar ratio.

その結果を第2表に示す。以上のことから本発明のフエ
ガノマイシン群抗生物質は新規化合物であると判断した
The results are shown in Table 2. Based on the above, it was determined that the feganomycin group antibiotic of the present invention is a new compound.

逐※ 次に本発明のフエガノマイシン群抗生物
質の抗菌スペクトルを第3表および第4表に示す。フエ
ガノマイシン群抗生物質は、第3表および第4表に示す
如くグラム陽性菌および陰性菌、カビ、酵母類に対して
ぱほとんど活性を示さない。しかし抗酸性菌に抗菌活性
を示し、そのうちでPHG−DRは最も強く阻止した。
また既知抗生物質耐性マイコバクテリウム607に対し
交差耐性を示さなかつた。フエガノマイシン DRのマ
ウンに対する毒性(LD5O)は400η/K9(1.
v.)以上で、毒性の弱いことを示した。
*Next, Tables 3 and 4 show the antibacterial spectra of the feganomycin group antibiotics of the present invention. As shown in Tables 3 and 4, the feganomycin group antibiotics show almost no activity against Gram-positive bacteria, Gram-negative bacteria, molds, and yeasts. However, it showed antibacterial activity against acid-fast bacteria, and among them, PHG-DR was most strongly inhibited.
Further, it did not show cross-resistance to known antibiotic-resistant Mycobacterium 607. The toxicity (LD5O) of feganomycin DR to mauns is 400η/K9 (1.
v. ) The above shows that the toxicity is low.

フエガノマイシン群抗生物質は以上の結果から明らかな
ように抗結核剤として期待できるものである。本発明の
フエガノマイシン群抗生物質は例えばストレプトミセス
属に属するフエガノマイシン群抗生物質生産菌を培地に
培養し、フエガノマイシン群抗生物質を生成蓄積せしめ
、これを採取することによつて製造することができる。
As is clear from the above results, the fueganomycin group antibiotics are promising as antituberculous agents. The fueganomycin group antibiotic of the present invention can be produced, for example, by culturing a fueganomycin group antibiotic-producing bacterium belonging to the genus Streptomyces in a medium, producing and accumulating the fueganomycin group antibiotic, and collecting the resulting product.

ストレプトミセス属に属するフエガノマイシン群抗生物
質生産菌の代表的なものとしては、財団法人微生物化学
研究所において昭和47年9月、山梨県河口湖の土壌か
ら分離したストレプトミセス・シラートウスMD227
−A9(StreptOmycescirratusM
D227−A9)(以下「MD227−A9株」という
A typical example of the fueganomycin group antibiotic-producing bacteria belonging to the genus Streptomyces is Streptomyces silatous MD227, which was isolated from the soil of Lake Kawaguchi, Yamanashi Prefecture in September 1972 at the Institute of Microbial Chemistry.
-A9 (StreptOmycescirratus M
D227-A9) (hereinafter referred to as "MD227-A9 strain").

)(工業技術院微生物工業技術研究所受託番号第358
6号、FERM−PS).3586)があげられる。以
下にMD227−A9株の菌学的性状を示す。1.形態 MD227−A9株は顕微鏡下で分枝した基中菌糸より
螺旋状の気菌糸を形成し、輪生枝はみとめられない。
) (Agency of Industrial Science and Technology, Institute of Microbial Technology, Accession No. 358
No. 6, FERM-PS). 3586). The mycological properties of MD227-A9 strain are shown below. 1. Morphology The MD227-A9 strain forms spiral aerial hyphae from branched basal hyphae, and no whorled branches are observed.

成熟した胞子鎖は10個以上の胞子の連鎖をみとめ、胞
子の大きさは0.6〜0.8×1.0〜1.2ミクロン
位で胞子の表面は平滑である。2.各種培地における生
育状態 色の記載について〔〕内に示す標準はコンテイナ一・コ
ーポレーシヨン・オブ・アメリカのカラー・ハーモニイ
・マニユアル(COntainerCOrpOrati
OnOf飾EricaのCOlOrHarmOnyll
anllal)を用いた01)シユクロース・硝酸塩寒
天培地(27゜C培養)無色の発育上に、茶白〜ピック
白の気菌糸をうつすらと着生し、溶解性色素はみとめら
れない。
A mature spore chain consists of 10 or more spores, the size of the spores is about 0.6 to 0.8 x 1.0 to 1.2 microns, and the surface of the spores is smooth. 2. Regarding the description of growth state colors in various media, the standards shown in brackets are from the Color Harmony Manual of Container Corporation of America.
OnOf Decoration Erica's COlOrHarmOnyll
01) Sucrose/nitrate agar medium (cultivated at 27°C) using A. anllal) Brown-white to pick-white aerial mycelia grow loosely on the colorless growth, and no soluble pigments are observed.

2)グルコース・アスパラギン寒天培地(27℃培養)
発育は無色〜うす黄、気菌糸は着生せず、溶解性色素も
みとめられない。
2) Glucose-asparagine agar medium (cultured at 27°C)
Growth is colorless to pale yellow, no aerial mycelia are attached, and no soluble pigments are observed.

3)グリセリン・アスパラギン寒天培地 (ISP一培地5、270℃培養) よす黄茶の発育上に、うすピック〔6ec、POwde
rROse′)ゝピック灰〔6ge1R0seGray
〕〜赤昧灰の気菌糸を着生し、溶解性色素はかすかに茶
色味をおびる程度である。
3) Glycerin-asparagine agar medium (ISP-1 medium 5, cultured at 270°C)
rROse') Pick Gray [6ge1R0seGray
] ~ Red-gray aerial mycelium grows on the plant, and the soluble pigment is only slightly brownish.

4)スターチ・無機塩寒天培地(ISP一培地4、27
0℃培養)無色〜うす黄の発育上に、うすピック〔5e
c.DustyPeach〕〜うす赤茶の気菌糸を着生
し、溶解性色素はかすかに茶色昧をおびる程度である。
4) Starch/inorganic salt agar medium (ISP-1 medium 4, 27
0℃ culture) On the colorless to pale yellow growth, apply a light pick [5e
c. Dusty Peach]~Grows on light reddish brown aerial mycelium, and the soluble pigment is only slightly brownish.

5)チロシン寒天培地(ISP一培地7、27゜C培養
)灰昧黄茶〜黄茶の発育上に、うすピック 〔7ec1R0seMist〕〜ピック灰〔6ge1R
0seGray〕 の気菌糸を着生し、暗い茶の溶解性
色素を産生する。
5) Tyrosine agar medium (ISP-1 medium 7, cultured at 27°C) Light pick [7ec1R0seMist] - Pick ash [6ge1R]
0seGray] and produces a dark brown soluble pigment.

3)栄養寒天培地(27℃培養) 発育は灰昧黄茶〜茶色、気菌糸は着生せず、茶色の溶解
性色素を産生する。
3) Nutrient agar medium (cultured at 27°C) Growth is pale yellow to brown, aerial mycelia do not attach, and brown soluble pigment is produced.

1)イースト・麦芽寒天培地(ISP一培地2、270
℃培養)うす黄茶〜黄茶の発育上に、うすピック〔〔7
ec1R0seMist〕〜ピック灰〔6ge1R0s
eGray〕 〜赤味灰の気菌糸を着生し、溶解性色素
はみとめられない。
1) Yeast/malt agar medium (ISP-1 medium 2, 270
℃ culture) light yellow tea to yellow tea, apply a light pick [[7]
ec1R0seMist] ~ Pick Ash [6ge1R0s
eGray] ~Grows on reddish gray aerial mycelia, and no soluble pigments are observed.

3)オートミール寒天培地(ISP一培地3、27゜C
培養)無色の発育上に、うすピック〔6ec、 POwderROse〕〜うす赤茶の気菌糸を着生し、
溶解性色素はみとめられない。
3) Oatmeal agar medium (ISP-1 medium 3, 27°C
Culture) A light reddish brown aerial mycelium grows on the colorless growth,
No soluble pigments are observed.

(9)グリセリン・硝酸塩寒天培地(27℃培養)無色
の発育上に、茶白の気菌糸をうつすらと着生し、溶解性
色素はみとめられない。
(9) Glycerin/nitrate agar medium (cultured at 27°C) Brown-white aerial mycelium grows loosely on the colorless growth, and no soluble pigment is observed.

(代)スターチ寒天培地(27゜C培養)無色〜うす黄
、あるいはうすオリーブの発育上にうすピック〜うす赤
茶の気菌糸を着生し、溶解性色素はかすかに黄色味をお
びる程度である。
(Sub) Starch agar medium (27°C culture) Colorless to light yellow, or light pick to light reddish brown aerial mycelia are grown on the growing pale olive, and the soluble pigment is only slightly yellowish. be.

(自) リンゴ酸石灰寒天培地(27℃培養)無色の発
育上に、白の気菌糸をうつすらと着生し、溶解性色素は
みとめられない。
(Own) Malate-lime agar medium (cultured at 27°C) White aerial mycelium grows loosely on the colorless growth, and no soluble pigment is observed.

(代)セルロース(27℃培養) 発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素もみとめら
れない。
(Substitute) Cellulose (cultured at 27°C) Growth is colorless, no aerial mycelia are attached, and no soluble pigments are observed.

(自)ゼラチン穿刺培養 単純ゼラチン培地(20℃培養)では、無色〜うす黄茶
の発育上に、白の気菌糸をうつすらと着生し、茶の溶解
性色素を産生する。
(Auto) Gelatin puncture culture In a simple gelatin medium (cultured at 20°C), white aerial mycelium grows loosely on the growing colorless to pale yellow tea, producing the soluble pigment of tea.

グルコース・ペプトン・ゼラチン培地(27℃培養)で
は、発育は灰味黄茶、気菌糸は着生せず、溶解性色素は
暗い茶を呈する。(自)脱脂牛乳(37℃培養) 発育はうす黄茶〜黄茶、わずかな白色の気菌糸を着生し
、明るい茶〜茶色の溶解性色素を産生する。
In glucose-peptone-gelatin medium (cultured at 27°C), the growth is grayish yellowish brown, no aerial mycelia are attached, and the soluble pigment is dark brown. (Own) Skimmed milk (cultured at 37°C) Growth is light yellow to yellowish brown, a few white aerial mycelia are attached, and light brown to brown soluble pigment is produced.

3.生理的性質 (1)生育温度範囲 グルコース・アスパラギン寒天を用い、 20℃、24℃、27℃、30℃、37℃、50℃の各
温度で試験の結果、50℃を除いて、何れの温度でも生
育するが、最適温度は27℃〜30℃と思われる。
3. Physiological Properties (1) Growth Temperature Range Using glucose-asparagine agar, the results of tests at each temperature of 20°C, 24°C, 27°C, 30°C, 37°C, and 50°C showed that all temperatures except 50°C However, the optimum temperature is thought to be between 27°C and 30°C.

(2)ゼラチンの液化(グルコース・ペプトン・ゼラチ
ン培地、27℃培養および15%単純ゼラチン培地、2
0℃培養)単純ゼラチン培地の場合は液化はみとめられ
ない。
(2) Liquefaction of gelatin (glucose peptone gelatin medium, 27°C culture and 15% simple gelatin medium, 2
(Culture at 0°C) No liquefaction was observed in the case of simple gelatin medium.

グルコース・ペプトン・ゼラチン培地では、培養後14
日目頃から液化が始まり、その作用は中等度〜弱い方で
ある。(3)スターチの加水分解(スターチ・無機塩寒
天培地およびスターチ寒天培地、何れも27℃培養)培
養後5日目頃から水解性がみとめられ、その作用は中等
度〜強い方である。
In glucose-peptone-gelatin medium, after culturing 14
Liquefaction begins around the first day, and its effect is moderate to weak. (3) Hydrolysis of starch (starch/inorganic salt agar medium and starch agar medium, both cultured at 27°C) Water decomposition was observed from around 5 days after culture, and its effect was moderate to strong.

(4)脱脂牛乳の凝固・ペプトン化(脱脂牛乳、37℃
培養)凝固しないで培養後10日目頃からペプトン化が
始まり、14日目頃には完了する。
(4) Coagulation and peptonization of skimmed milk (skimmed milk, 37℃
Cultivation) Peptonization begins around the 10th day after culture without coagulation and is completed around the 14th day.

その作用は中等度〜強い方である。(5)メラニン様色
素の生成(トリフトン・イースト・プロス、ISP一培
地1、ペプトン・イースト・鉄寒天、ISP一培地6;
チロシン寒天1SP一培地7、何れも27℃培養)何れ
の培地でもみとめられる。
The effect is moderate to strong. (5) Production of melanin-like pigment (Trifton Yeast Pros, ISP-1 Medium 1, Peptone Yeast-Iron Agar, ISP-1 Medium 6;
Tyrosine agar 1SP and medium 7, all cultured at 27°C).

(6)炭素源の利用性(プリドハム・ゴトリーブ寒天培
地、ISP一培地9、27℃培養)グルコース、L−ア
ラビノース、D−フラグドーズを利用し,て発育し、シ
ユクロース、イノシトール、ラムノース、ラフイノース
、D−マンニトールは利用しない。
(6) Utilization of carbon sources (Pridham-Gotlieb agar medium, ISP-1 medium 9, 27°C culture) Glucose, L-arabinose, D-flag dose, sucrose, inositol, rhamnose, raffinose, D -Do not use mannitol.

D−キシロースはおそらく利用しない。(7) リンゴ
酸石灰の溶5解(リンゴ酸石灰寒天、27℃培養)培養
後10日目頃から発育周辺のリンゴ酸石灰を溶解し、そ
の作用は中等度〜強い方である。
D-xylose is probably not utilized. (7) Dissolution of malic acid lime (malic acid lime agar, cultured at 27°C) Malic acid lime around the growth is dissolved from around 10 days after culture, and its effect is moderate to strong.

(8)硝酸塩の還元反応(1.0%硝酸ソーダ含有ペプ
トン水、SP一培地8、27℃培養)陽性である。
(8) Nitrate reduction reaction (peptone water containing 1.0% sodium nitrate, SP-1 medium 8, cultured at 27°C) is positive.

以上の性状を要約するとMD227−A9株はストレプ
トミセス属に属し、気菌糸は螺旋形成をみとめ、輪生枝
はみられず、胞子の表面は平滑である。
To summarize the above properties, strain MD227-A9 belongs to the genus Streptomyces, the aerial hyphae are spirally formed, whorled branches are not observed, and the surface of the spores is smooth.

種々の培地で無色〜うす黄茶あるいは黄茶の発育上に、
うすピック〜ピック灰あるいはうす赤茶の気菌糸を着生
し、溶解性色素はほとんどみとめられない。
On the growth of colorless to light yellowish brown or yellowish brown in various media,
It grows on aerial mycelia of light pick to pick ash or light reddish brown color, and almost no soluble pigments are observed.

メラニン様色素は陽性、蛋白分解力、スターチの水解性
は中等度〜強い方である。これらの性状よりMD227
−A9株に近縁の既知菌種を検索するとISP記載から
ストレプトミセス●シラートウス(StreptOmy
cescirratusl文献1)Internati
nalJOurnalOfSystematicBac
terlOlOgyl22巻、284頁、1972年;
文献2)TheJOurnalOfAntiblOti
cs,.Ser.All6巻、黒2、59頁、1963
年)とストレプトミセス・グリゼオラベンドウス(St
reptOmycesgriseOlavendusl
InternatiOnalJOurnalOfSys
tematicBActerlOlOgyll9巻、4
34頁、1969年)*があげられる。次に実際にこれ
ら2種の菌株を入手し、MD227−A9株と比較検討
した成績の大要を示すと次の如くである。表にみられる
如くMD227−A9株とストレプトミセス・シラート
ウスSP5479株とは、硝酸塩の還元反応、牛乳の凝
固およびD−キシロースの利用性を除いてほぼ一致して
いる。
The melanin-like pigment is positive, and the proteolytic ability and starch hydrolyzability are moderate to strong. From these properties, MD227
- When searching for known bacterial species closely related to strain A9, the ISP description shows that Streptomyces
cescirratuslReference 1) International
nalJOurnalOfSystematicBac
terlOlOgyl vol. 22, p. 284, 1972;
Reference 2) TheJOnalOfAntiblOti
cs,. Ser. All 6 volumes, black 2, 59 pages, 1963
) and Streptomyces griseolabendus (St.
reptOmycesgriseOlavendusl
InternationalJournalOfSys
tematicBActerlOlOgyll Volume 9, 4
p. 34, 1969) *. Next, we actually obtained these two strains and compared them with the MD227-A9 strain, and the summary of the results is as follows. As seen in the table, strain MD227-A9 and Streptomyces silatus SP5479 are almost identical except for nitrate reduction reaction, milk coagulation, and D-xylose utilization.

ストレプトミセス・シラートウスの牛乳の凝固性は文献
(2)にぱ陰性と記載されている如く極く弱いもので、
又硝酸塩の還元反応の相異は一般的に余り重要とはみと
め難く、D−キシロースの利用性が一番大きな相異点と
判断される。
The coagulability of milk produced by Streptomyces silatus is extremely weak, as described in literature (2).
Furthermore, the difference in the reduction reaction of nitrate is generally not considered to be very important, and the greatest difference is judged to be the usability of D-xylose.

他方ストレプトミセス・グリゼオラベンドウスISP5
385株とは、螺旋形成の有無、牛乳の凝固、さらにL
−アラビノースおよびD−フラグドーズの利用性でも相
異点をみとめる。これらの相異点の中、螺旋形成につい
てはストレプトミセス・グリゼオラベンドウスは文献に
よると気菌糸の先端が鉤状あるいはループ状になる場合
が記載されているが、この比較実験ではISPの培地上
では螺旋形成は全くみとめられず、牛乳の凝固、L−ア
ラビノースの利用と併せてMD227−A9株との大き
な相異点と判断される。これらの点からMD227−A
9株はストレプトミセス・シラートウスに最も近縁の種
と考えられ、ストレプトミセス・シラートウスMD22
7一A9と同定した。
On the other hand, Streptomyces griseolabendus ISP5
The 385 strain is characterized by the presence or absence of spiral formation, milk coagulation, and L.
- Differences are also observed in the availability of arabinose and D-flag doses. Among these differences, regarding spiral formation, Streptomyces griseolabendus has been described in the literature as having a hook-shaped or loop-shaped tip of the aerial hyphae, but in this comparative experiment, the ISP medium In the above, no spiral formation was observed, which is considered to be a major difference from the MD227-A9 strain, along with coagulation of milk and utilization of L-arabinose. From these points, MD227-A
The 9 strains are considered to be the most closely related species to Streptomyces silatus, and include Streptomyces silatus MD22.
It was identified as 71A9.

放線菌は人工的に、又自然界で変異をおこし易いが、こ
こにいうMD227一A9はそれらの変異菌のすべてを
包括する。これらの菌種はまたフエガノマイシン群抗生
物質を生産し、本菌種およびその変質菌と明確に区別さ
れない菌はすべてこれを包含する。フエガノマイシン群
抗生物質生産菌によりフエガノマイシン群抗生物質を製
造するには、先ず前記菌株を放線菌が利用し得る栄養物
を含有する培地で好気的に培養する。
Actinomycetes tend to undergo mutations both artificially and naturally, and MD227-A9 here includes all of these mutant bacteria. These bacterial species also produce fueganomycin group antibiotics, and include all bacteria that are not clearly distinguishable from this bacterial species and its variants. To produce a fueganomycin group antibiotic using a fueganomycin group antibiotic-producing bacterium, the strain is first aerobically cultured in a medium containing nutrients that can be utilized by actinomycetes.

栄養源としては、従来から放線菌の培養に利用されてい
る公知のものが使用でき、例えば、炭素源としてはグル
コース、デンブン、マルトース、デキストリン、シェー
クロース、水飴(デンプン麦芽糖化物)、大豆油などを
単独または組み合わせて用いることができる。
As a nutrient source, known ones that have been conventionally used for culturing actinomycetes can be used. For example, as a carbon source, glucose, starch, maltose, dextrin, shaken sugar, starch syrup (starch malt saccharide), soybean oil, etc. can be used alone or in combination.

無機および有機窒素源としては塩化アンモニウム、硫酸
アンモニウム、尿素、硝酸アンモニウム、硝酸ソーダ、
ペプトン、肉工キズ、酵母工キズ、乾燥酵母、コーンス
チープリカ一、大豆粉、綿実油ガス、カザミノ酸、バク
トソイトン、ソリユブルベジタブルプロテインなどを単
独または組み合わせて用いることができる。その他必要
に応じて食塩、硫酸マグネシウム、硫酸銅、硫酸鉄、硫
酸亜鉛、塩化マンガン、炭酸カルシウム、燐酸塩などの
無機塩類を加えることができるほか本菌の生育やフエガ
ノマイシン群抗生物質の生産を促進する有機物、たとえ
ばアミノ酸類や無機物を適当に添加することができる。
培養法としては液体培養法、特に深部攪拌培養法が最も
適している。培養温度は25℃〜40℃、PHは中性な
いし微酸性で培養を行うことが望ましい。液体培養では
通常3日ないし10日間培養を行うとフエガノマイシノ
群抗生物質が培養液中に生成蓄積される。培養液中の生
成量が最大に達したとき培養を停止し、菌体を沢別し、
得られる培養沢液中より目的物を精製単離する。培養沢
液から本物質の精製単離には一般に微生物代謝生産物を
その培養液から単離するために用いられる分離精製の方
法が利用される。
Inorganic and organic nitrogen sources include ammonium chloride, ammonium sulfate, urea, ammonium nitrate, sodium nitrate,
Peptone, meat factory scratches, yeast factory scratches, dry yeast, corn steep liquor, soybean flour, cottonseed oil and gas, casamino acids, bacto soyton, solid vegetable protein, etc. can be used alone or in combination. Other inorganic salts such as common salt, magnesium sulfate, copper sulfate, iron sulfate, zinc sulfate, manganese chloride, calcium carbonate, and phosphates can be added as necessary to promote the growth of this bacteria and the production of feganomycin group antibiotics. Organic substances such as amino acids and inorganic substances can be appropriately added.
The most suitable culture method is a liquid culture method, especially a deep agitation culture method. It is desirable to culture at a culture temperature of 25° C. to 40° C. and at a neutral or slightly acidic pH. In liquid culture, when the culture is carried out for 3 to 10 days, the fueganomycino group antibiotics are produced and accumulated in the culture solution. When the production amount in the culture solution reaches the maximum, stop the culture, separate the bacterial cells,
The target product is purified and isolated from the obtained culture fluid. For the purification and isolation of this substance from the culture fluid, a separation and purification method generally used for isolating microbial metabolic products from the culture fluid is used.

フエガノマイシ7群抗生物質は水によく溶けるがメタノ
ール、エタノール、アセトンをはじめとする一般有機溶
媒には不溶ないし、溶けにくい物質で、その精製はいわ
ゆる水溶性塩基性物質の精製に用いられる方法により行
われる。すなわちカチオン交換樹脂、アンバーライト8
XAD−2および活性炭末による吸脱着法、セフアデツ
クス G−10、CMセフアデツクス8C−25のカラ
ムクロマトグラフイ一などの方法を適当に組み合わせて
用いることができる。例えば培養沢液をPH6.5に調
整した後、アンバーライト8XAD−2に吸着さノ せ
、水洗後50%メタノールで溶出し、活性区分を濃縮後
凍結乾燥する。得られた茶褐色の粗粉末をメタノールで
可溶部分を除去し、不溶物を乾燥後水に溶解し、活性炭
末カラムに吸着後水洗し、0.1規定塩酸:アセトン(
1容:1容)で溶出し、一
、 9τ 得られた活性区分を弱塩基性
樹脂ダウエツクス44(0Hタイプ)で中和した後濃縮
凍結乾燥し、灰褐色のフエガノマイシン群抗生物質(混
合物)を含有する粗粉末を得る。これを少量の0.05
M食塩水に溶かし、CMセフアデツクス C−259の
カラムに吸着させ、0.05M〜1.0Mの食塩水で濃
度勾配溶出を行うと、0.05M〜0.1Mの濃度でP
HG−DGPT..PHG−D1デオキシPHG−Dが
、0.4M付近でPHGが、また0.5M付近でPHG
−DRがそれぞれ溶出される。これらをアンバーライト
8XAD−2に吸着させ、水洗後50%メタノール水で
溶出することにより脱塩し、凍結乾燥する。ここに得ら
れたそれぞれの粗粉末を少量の水に溶かし、セフアデツ
クスG−10カラムに吸着させ水で展開し、着色物質を
除去し、活性区分を濃縮し凍結乾燥する。淡黄色のPH
G−DGPT,.PHG−D1デオキシPHG−Dの混
合物を少量の水に溶かし、CMセフアデツクス C−2
5のカラムを用い、0.05M食塩水で溶出するとPH
G−DGPTlPHG−D1デオキシPHG−Dの順で
溶出される。各活性区分を前述の方法で脱塩を行い、そ
れぞれの無色粉末を得る。以下に実施例により本発明の
フエガノマイシン群抗生物質の製造法について述べる。
Group 7 antibiotics of P. fuegani are highly soluble in water, but are insoluble or poorly soluble in general organic solvents such as methanol, ethanol, and acetone, and are purified using the method used to purify water-soluble basic substances. be exposed. Namely, cation exchange resin, Amberlite 8
Adsorption/desorption methods using XAD-2 and activated carbon powder, column chromatography using Cephadex G-10 and CM Cephadex 8C-25, and other methods can be used in appropriate combinations. For example, after adjusting the culture suspension to pH 6.5, it is adsorbed on Amberlite 8XAD-2, washed with water, eluted with 50% methanol, and the active fraction is concentrated and freeze-dried. The soluble portion of the obtained brownish coarse powder was removed with methanol, the insoluble matter was dried and dissolved in water, adsorbed on an activated carbon powder column, washed with water, and mixed with 0.1N hydrochloric acid:acetone (
1 volume: 1 volume),
, 9τ The obtained active fraction is neutralized with a weakly basic resin Dowex 44 (0H type) and then concentrated and freeze-dried to obtain a gray-brown coarse powder containing a feganomycin group antibiotic (mixture). Add a small amount of this to 0.05
When P is dissolved in saline solution and adsorbed on a column of CM Sephadex C-259, and concentration gradient elution is performed with a saline solution of 0.05M to 1.0M, P is dissolved in a concentration of 0.05M to 0.1M.
HG-DGPT. .. PHG-D1 DeoxyPHG-D is PHG at around 0.4M, and PHG at around 0.5M.
-DR are respectively eluted. These are adsorbed onto Amberlite 8XAD-2, washed with water, desalted by elution with 50% methanol water, and freeze-dried. Each crude powder obtained here is dissolved in a small amount of water, adsorbed on a Sephadex G-10 column and developed with water to remove colored substances, and the active fraction is concentrated and freeze-dried. pale yellow pH
G-DGPT,. Dissolve the mixture of PHG-D1 deoxy PHG-D in a small amount of water and add CM Cephadex C-2.
Using a column of No. 5 and eluting with 0.05M saline, the pH
It is eluted in the order of G-DGPTlPHG-D1 deoxyPHG-D. Each active fraction is desalted using the method described above to obtain colorless powders. The method for producing the feganomycin group antibiotics of the present invention will be described below with reference to Examples.

実施例 1 0ータリ一型振盪機用500m1容バツフル付き三角フ
ラスコに、デンプン1%、グルコース1%、大豆粉1.
5%、第2燐酸カリウム0.1%、硫酸マグネシウム0
.1%、食塩0.3%、硫酸銅0.0007%、硫酸鉄
0.00013%、塩化マンガン0.0008%、硫酸
亜鉛0.0002%、消泡剤としてシリコンKM−70
(信越化学製):大豆油(局法)(1:1)0.05%
、PH6.8、120℃、20分間オートクレーブ滅菌
した培地120m1をとり、これにMD227−A9株
(微工研菌寄第3586号)の1白金耳を接種し、28
℃、180回転/分、2日間振盪培養した。
Example 1 1% starch, 1% glucose, 1.
5%, dibasic potassium phosphate 0.1%, magnesium sulfate 0
.. 1%, salt 0.3%, copper sulfate 0.0007%, iron sulfate 0.00013%, manganese chloride 0.0008%, zinc sulfate 0.0002%, silicone KM-70 as antifoaming agent.
(Shin-Etsu Chemical): Soybean oil (local method) (1:1) 0.05%
, 120 ml of medium was autoclaved at 120°C for 20 minutes at pH 6.8, inoculated with one platinum loop of MD227-A9 strain (Feikoken Bacteria No. 3586),
Shaking culture was carried out at 180 rpm for 2 days at 180°C.

これとは別に前記同様の三角フラスコに水飴5%、ポリ
ペプトン0,5%、肉工キズ0.5%、酵母工キズ0.
3%、食塩0.3%、硫酸マグネシウム0.1%、硫酸
銅0.0007%、硫酸鉄0,00013%、塩化マン
ガン0.0008%、硫酸亜鉛0.0002%、消泡剤
としてシリコンKM−70:大豆油(局法)(1:1)
0.05%PH6.8、120℃、20分間、オートク
レーブ滅菌した培地120m1をとり、これに前記培養
液2〜3m1を移植し、前記と同じ条件下で5日間振盪
培養した。培養液はPH6.5で沢過し、沢液10f!
を得た(培養力価25mcg力価/ml:但しPHG−
DRlOOOmcg力価/Tfl9)。アンバーライト
9XAD−211を充填したカラムにこの沢液を通し、
フエガノマイシン群抗生物質(混合物)を吸着させ、水
洗後50%メタノール水で溶出した,活性区分を集め、
減圧下で濃縮し、凍結乾燥し、焦茶色の粉末5,901
(38mcg/〜)を得た。これを250m1のメタノ
ールで処理し、可溶部を除去した後、不溶部を減圧下で
乾燥し、3.82y(55mcg力価/Tf!9)の褐
色粗粉末を得た。これを水382m1に溶かし、活性炭
末100m1のカラムに吸着させ、水洗した後、0.1
規定塩酸:アセトン(1:1)で溶出し、活性区分をダ
ウエツクス 44(0H−)で中和し、減圧下で濃縮凍
結乾燥した。得られた灰色粗粉末1.407(90mc
g/Trl9)を0.05M食塩水50m1に溶かし、
予め0.05M食塩水で平衡化したCMセフアデツクス
C−25、500m1のカラムに吸着させ、0.05
M食塩水500m1で溶出した後、0.3および0.7
Mの食塩水各21の直線濃度勾配法で溶出した。0.0
5M(′PHG一DGPT,.PHG−D1デオキシP
HG−Dの混合物、0.4M付近でPHGlO.5M付
近でPHG一DRの順序で溶出された。
Separately, in the same Erlenmeyer flask as above, 5% starch syrup, 0.5% polypeptone, 0.5% meat scratches, and 0 yeast scratches.
3%, salt 0.3%, magnesium sulfate 0.1%, copper sulfate 0.0007%, iron sulfate 0,00013%, manganese chloride 0.0008%, zinc sulfate 0.0002%, silicon KM as an antifoaming agent. -70: Soybean oil (local law) (1:1)
120 ml of a medium was sterilized in an autoclave at 0.05% pH 6.8 at 120° C. for 20 minutes, 2 to 3 ml of the above culture solution was transplanted thereto, and cultured with shaking under the same conditions as above for 5 days. The culture solution has a pH of 6.5 and is strained at 10 f!
(Culture titer 25mcg titer/ml: However, PHG-
DRlOOOOmcg titer/Tfl9). Pass this slurry through a column packed with Amberlite 9XAD-211,
Feganomycin group antibiotics (mixture) were adsorbed, and after washing with water, the active fraction eluted with 50% methanol water was collected.
Concentrated under reduced pressure and lyophilized to dark brown powder 5,901
(38 mcg/~) was obtained. This was treated with 250ml of methanol to remove the soluble portion, and then the insoluble portion was dried under reduced pressure to obtain a brown coarse powder of 3.82y (55mcg titer/Tf!9). This was dissolved in 382 ml of water, adsorbed on a column of 100 ml of activated carbon powder, washed with water, and then
Elution was carried out with normal hydrochloric acid:acetone (1:1), and the active fraction was neutralized with Dowex 44 (0H-) and concentrated and lyophilized under reduced pressure. The resulting gray coarse powder 1.407 (90mc
g/Trl9) in 50ml of 0.05M saline,
Adsorb onto a 500ml column of CM Sephadex C-25 equilibrated with 0.05M saline, and
After elution with 500 ml of M saline, 0.3 and 0.7
Each sample was eluted using a linear concentration gradient method with 21 M saline solutions. 0.0
5M('PHG-DGPT,.PHG-D1 DeoxyP
A mixture of HG-D, PHGlO. around 0.4M. It was eluted in the order of PHG-DR around 5M.

各活性区分をアンバーライト9XAD−230m1に吸
着せしめ、水洗した後、50%メタノール水で溶出する
脱塩操作により得られた活性区分を減圧下で濃縮凍結乾
燥し、それぞれ淡黄白色をおびた粉末87η(287m
cg力価/Wl9)、無色の粉末10η(100mcg
力価/Tn9)、無色の粉末50η(1000mcg力
価/即)を得た。淡黄色を有するPHG−DGPT.P
HG−D、デオキシPHG−Dを含有する混合物87T
!19を水3〜5m1に溶かし、予め水で膨潤化したセ
フアデツクス8G−10300m1のカラムを通過させ
着色物質を除去し、活性区分を集め3〜5m1に減圧下
で濃縮し、直ちに予め0.05M食塩水で平衡化した[
株]CMセフアデツクス C−25200meのカラム
に吸着させ、0.05M食塩水で溶出し、PHG一DG
PT..PHG−D1デオキシPHG−Dの順序で溶性
区分を得た。
Each active fraction was adsorbed onto Amberlite 9XAD-230ml, washed with water, and then desalted by elution with 50% methanol water. The obtained active fractions were concentrated and freeze-dried under reduced pressure to form pale yellowish-white powders. 87η (287m
cg titer/Wl9), colorless powder 10η (100mcg
A colorless powder of 50η (potency: 1000 mcg/immediately) was obtained. PHG-DGPT. with pale yellow color. P
Mixture 87T containing HG-D and deoxyPHG-D
! 19 was dissolved in 3 to 5 ml of water, passed through a column of 300 ml of Sephadex 8G-10 swollen with water to remove colored substances, the active fraction was collected and concentrated to 3 to 5 ml under reduced pressure, and immediately dissolved in 0.05 M sodium chloride in advance. Equilibrated with water [
It was adsorbed on a column of CM Sephadex C-25200me, eluted with 0.05M saline, and PHG-DG
P.T. .. Solubility categories were obtained in the order of PHG-D1 deoxy PHG-D.

次に前述した脱塩操作により脱塩し、純粋のPHG−D
GPT2Omg(250mcg力価/7n9)、PHG
−D2OTIi9(500mcg力価/1T19)、デ
オキシPHG−DlOη(500mcg力価/η)の無
色粉末を得た。実施例 2実施例1と同様にしてMD2
27−A9株(微工研菌寄第3586号)を培養して得
た前培養液31?を実施例1記載の生産培地120,e
を仕込んだ2001容ステンレス製発酵槽に移植し、2
8℃、4日間通気攪拌方式(回転数380回/分通気量
1201/分)により培養を行つた。
Next, the pure PHG-D is desalted by the desalting operation described above.
GPT2Omg (250mcg titer/7n9), PHG
Colorless powders of -D2OTIi9 (500mcg titer/1T19) and deoxyPHG-DlOη (500mcg titer/η) were obtained. Example 2 MD2 in the same manner as Example 1
Pre-culture solution 31? obtained by culturing the 27-A9 strain (Feikoken Bacteria No. 3586) Production medium 120,e described in Example 1
Transferred to a 2001 capacity stainless steel fermenter containing
Culture was carried out at 8° C. for 4 days using an aeration agitation method (number of revolutions: 380 revolutions/min, aeration rate: 1201/min).

フエガノマイシン群抗生物質(混合物)の生成濃度、1
5mcg力価/ml(PHG−DRlOOOmcg力価
/〜)を含む培養液1001に沢過助剤ダイ− 8力
ライト 〔ダイカライト・オリエント(株)〕3k9を
加え、菌体を沢別した。
Production concentration of fueganomycin group antibiotics (mixture), 1
A filter aid, Dai-8 Power Light (Daicalite Orient Co., Ltd.) 3k9, was added to culture solution 1001 containing 5 mcg titer/ml (PHG-DRlOOOmcg titer/~), and the bacterial cells were separated.

沢液801を1規定の苛性ソーダーでPH6.5に調整
し、アンバーライト XAD−2101のカラムに通し
、目的成分混合物を吸着させた。カラムを水洗後50%
メタノール水で溶出し、活性区分を集め、減圧下で濃縮
凍結乾燥し、80yの焦茶色の粗粉末(13mcg力価
/ワ)を得た。次にこの粗粉末807をメタノール31
で処理し可溶部を除去した後、不溶部を減圧下で乾燥し
、焦茶色の粗粉末40y(20mcg力価/ワ)を得た
。この粉末を800mjの水に溶かし、活性炭末1/?
のカラムに通し、フエガノマイシン群抗生物質(混合物
)を吸着させ、水洗後、0.1規定塩酸:アセトン(1
.、 8容:1容)で溶出し、活性区分をダウエツク
ス44(0H)で中和し、濃縮凍結乾燥した。
The pH of the slurry 801 was adjusted to 6.5 with 1N caustic soda, and the mixture was passed through an Amberlite XAD-2101 column to adsorb the target component mixture. 50% after washing column with water
Elution was carried out with methanol water, and the active fraction was collected and concentrated and lyophilized under reduced pressure to obtain an 80y dark brown coarse powder (13 mcg titer/wa). Next, mix this coarse powder 807 with methanol 31
After removing the soluble portion, the insoluble portion was dried under reduced pressure to obtain a dark brown coarse powder 40y (20 mcg titer/wa). Dissolve this powder in 800mj of water and dissolve the activated carbon powder in 1/2?
was passed through a column to adsorb the fueganomycin group antibiotic (mixture). After washing with water, 0.1N hydrochloric acid:acetone (1
.. , 8 volumes: 1 volume), and the active fraction was neutralized with Dowex 44 (0H), concentrated and lyophilized.

得られた褐色粗粉末13y(50mcg力価/M9)を
0.05M食塩水200T!11に溶かし、予め0.0
5M食塩水で平衡化したCMセフアデツクス8C253
1のカラムに吸着させ、0.05M食塩水61で溶出し
た後、0.3M10.4Ms0,5Mの食塩水各61で
ステップワイスに溶出した。0.05M濃度でPHG−
DGPT.PHG−D、デオキシPHG−Dの混合物、
0.3〜0.4M濃度付近にPHG、0.5M濃度でP
HG−DRの各成分が溶出された。
The obtained brown coarse powder 13y (50mcg titer/M9) was added to 200T of 0.05M saline solution! 11, preliminarily 0.0
CM Sephadex 8C253 equilibrated with 5M saline
1 column and eluted with 0.05M saline 61, then eluted with 61 each of 0.3M, 0.4M, and 0.5M saline in a stepwise wash. PHG- at 0.05M concentration
DGPT. PHG-D, a mixture of deoxyPHG-D,
PHG near 0.3-0.4M concentration, P at 0.5M concentration
Each component of HG-DR was eluted.

各活性区分を実施例1と同様の脱塩法ZZで脱塩し、減
圧下で濃縮、凍結、乾燥し、PHGDGPT.PHG−
D、デオキシPHG−Dの淡黄白色をおびた混合物45
0ワ(366mcg力価/Tl9)、PHGの無色粉末
50労(100mcg力価/mク)およびPHG−DR
無色粉末250mク(1000mcg力価/ワ)を得た
Each active fraction was desalted using the same desalting method ZZ as in Example 1, concentrated under reduced pressure, frozen, and dried to produce PHGDGPT. PHG-
D, pale yellowish-white mixture of deoxyPHG-D 45
0wa (366mcg titer/Tl9), PHG colorless powder 50w (100mcg titer/mk) and PHG-DR
250 mcg (potency 1000 mcg/w) of colorless powder was obtained.

次に淡黄色をおびた混合物450ワを水20m1に溶−
、 9かし、予め水で膨潤化したセフアデツクス G
lOl.5lのカラムを通過させ着色物質を除去し、活
性区分を減圧下で10〜15m1に濃縮し、それを直ち
に0,05M食塩水で平衡化したCMセフアデツクス
C−2511のカラムに吸着させ、0.05M食塩水で
溶出するとPHGDGPT.PHG−D、デオキシPH
G−Dの順に溶出された。
Next, dissolve 450 liters of the pale yellow mixture in 20 ml of water.
, 9, Cephadex G pre-swollen with water
lOl. CM Sephadex was passed through a 5 l column to remove colored substances and the active fraction was concentrated under reduced pressure to 10-15 ml, which was immediately equilibrated with 0.05 M saline.
When adsorbed onto a C-2511 column and eluted with 0.05M saline, PHGDGPT. PHG-D, deoxyPH
It was eluted in the order of GD.

それぞれの活性区分を前述の脱塩操作により脱塩し、純
粋のPHG−DGPTl5Om′(250mcg力価/
ワ)、PHG−Dl5O即(500mcg力価/η)、
およびデオキシPHG−D5Oη(500m0g力価/
ヮ)の無色粉末を得た。
Each active fraction was desalted by the desalting operation described above, and pure PHG-DGPTl5Om' (250 mcg titer/
wa), PHG-Dl5O immediately (500mcg titer/η),
and deoxyPHG-D5Oη (500m0g titer/
A colorless powder of ヮ) was obtained.

【図面の簡単な説明】[Brief explanation of the drawing]

第1図は、フエガノマイシン、フエガノマイシンD1フ
エガノマイシンDRlフエガノマイシンDGPTおよび
デオキシフエガノマイシンDの紫外線吸収スペクトルを
、第2図ないし第6図は臭化カリウム錠として測定した
フエガノマイシン、フエガノマイシンD1フエガノマイ
シンDRlフエガノマイシンDGPT、デオキシフエガ
ノマイシンDのそれぞれの赤外線吸収スペクトルを示し
たものである。
Figure 1 shows the ultraviolet absorption spectra of Feganomycin, Feganomycin D1, Feganomycin DR, Feganomycin DGPT, and Deoxyfeganomycin D. 1 shows the infrared absorption spectra of Feganomycin D.

Claims (1)

【特許請求の範囲】 1 一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ (式中、R_1は水素原子または水酸基を、R_2は水
酸基、アスパラギン酸残基、アスパルチル・アルギニン
残基またはアスパルチル・グリシル・プロリル・スレオ
ニン残基を示す。 )で表わされるフエガノマイシン群抗生物質。
[Claims] 1 General formula ▲ Numerical formula, chemical formula, table, etc. ▼ A fueganomycin group antibiotic represented by (indicates a prolyl-threonine residue).
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