JPS58109426A - サルモネラ菌による感染に対して有効な細菌ワクチンの製造法 - Google Patents
サルモネラ菌による感染に対して有効な細菌ワクチンの製造法Info
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- JPS58109426A JPS58109426A JP57215645A JP21564582A JPS58109426A JP S58109426 A JPS58109426 A JP S58109426A JP 57215645 A JP57215645 A JP 57215645A JP 21564582 A JP21564582 A JP 21564582A JP S58109426 A JPS58109426 A JP S58109426A
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- A61K39/025—Enterobacteriales, e.g. Enterobacter
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明員サルモネラ熱、＋ｎｊザフス及びノ４ラチフス
熱に対する生化学ワクチンの製造法に関するものである
〇 サルモネラ熱の流行の兆しは疫学的報告によって示され
るごとく世界中で絶え壕なく牛じており、抗生物質に対
１−て増大（また耐性全もつように進化Ｉ−ｌｔ 種々
のサルモネラ菌による伝染病の蔓延は重大な問題である
。サルモネラ；症の場合に示される抗０．抗）Ｉ又は抗
Ｖｉ 凝集抗体の割合とこれらの細菌に対して獲得さ
れた免疫度との間には平行関係はないことはかなり以前
から知られている。ワクチンの有効性についての唯一の
妥当な判定基準は人又は動物を同様の感染性バクテリア
から保護１〜得るか否かである。
熱に対する生化学ワクチンの製造法に関するものである
〇 サルモネラ熱の流行の兆しは疫学的報告によって示され
るごとく世界中で絶え壕なく牛じており、抗生物質に対
１−て増大（また耐性全もつように進化Ｉ−ｌｔ 種々
のサルモネラ菌による伝染病の蔓延は重大な問題である
。サルモネラ；症の場合に示される抗０．抗）Ｉ又は抗
Ｖｉ 凝集抗体の割合とこれらの細菌に対して獲得さ
れた免疫度との間には平行関係はないことはかなり以前
から知られている。ワクチンの有効性についての唯一の
妥当な判定基準は人又は動物を同様の感染性バクテリア
から保護１〜得るか否かである。
数種の型のワクチンはすでに提案されている。
しかしながら、これらのワクチンＬｖＭ々の欠点及び危
険性をもつ。たとえば注射用不活化ワクチン（ＴＡＢ）
は人間に対して投与する場合、１０ 個を越えない病
原菌の供試用量に関して危険な［２に適切な有効性を与
えることはできない。他力、経口投与ワクチン、特に生
菌を含有するこれらのワクチンはより有効であるが、そ
れらの使用は貯蔵の困難性に基因する実用上の及び心理
的観点でのなお未解決のいくつかの問題を提示する。
険性をもつ。たとえば注射用不活化ワクチン（ＴＡＢ）
は人間に対して投与する場合、１０ 個を越えない病
原菌の供試用量に関して危険な［２に適切な有効性を与
えることはできない。他力、経口投与ワクチン、特に生
菌を含有するこれらのワクチンはより有効であるが、そ
れらの使用は貯蔵の困難性に基因する実用上の及び心理
的観点でのなお未解決のいくつかの問題を提示する。
これまで、細菌から抽出された保獲作用をもつ精製画分
はサルモネラ菌に対するワクチン接種の問題を満足に解
決するものと考えられてきた。さらにすべての細菌は抗
原モザイクの補児体（ｍａｄ ｅｕｐ ｏｆ ａｎｔｉ
ｇｅｎ ｍｏｓａｉｃｓ ）、すなわちワクチン用抗原
の解剖学的支持構造体としてサルモネラ菌（ダラム陰性
菌）中に生ずる細胞外膜壁の外側膜と考え得るという既
知事夾に基ついて、このワクチン用抗原の優先的抽出手
段を見出すために種々の研究がなされてきた。
はサルモネラ菌に対するワクチン接種の問題を満足に解
決するものと考えられてきた。さらにすべての細菌は抗
原モザイクの補児体（ｍａｄ ｅｕｐ ｏｆ ａｎｔｉ
ｇｅｎ ｍｏｓａｉｃｓ ）、すなわちワクチン用抗原
の解剖学的支持構造体としてサルモネラ菌（ダラム陰性
菌）中に生ずる細胞外膜壁の外側膜と考え得るという既
知事夾に基ついて、このワクチン用抗原の優先的抽出手
段を見出すために種々の研究がなされてきた。
種々の研究、特にＭａｘ ｆ’１ａｎｃｋ Ｉｎ５ｔｉ
ｔｕｔｅ の０、 Ｗｅｓｔｐｈａｌらの研究、特に
Ｚｅｎｔｒａｌｂｌ、 Ｂａｃｔｅ＝ｒｉｏｌ： Ｍｉ
ｋｒｏｂｉｏｌ、Ｈｙｇ、 Ｉ ＡＢｔ Ｏｒｉｇ、
ａ、 ｍａｄ。
ｔｕｔｅ の０、 Ｗｅｓｔｐｈａｌらの研究、特に
Ｚｅｎｔｒａｌｂｌ、 Ｂａｃｔｅ＝ｒｉｏｌ： Ｍｉ
ｋｒｏｂｉｏｌ、Ｈｙｇ、 Ｉ ＡＢｔ Ｏｒｉｇ、
ａ、 ｍａｄ。
ｍ１ｌｃｒｏｂｉｏｌ−ｔｎｆｅｋｔｉｏｎａｋｒ、
Ｐａｒａａｉｔｏｌ ２４８ （ｉｌ。
Ｐａｒａａｉｔｏｌ ２４８ （ｉｌ。
１９ｇ０．６４−８０に記載されている研究においては
、％ＶＣ１’う１−陰性菌、たとえばサルモネラ チフ
イムリウム（ネズミチフス菌）及びサルモネラ ミオツ
タ及び変異菌５Ｒからの分子を蛋白質塩基で抽出する際
にダアニジン チオシアナート、尿素及びペロナール緩
衝液を使用することが記載されている〇 今般、発酵、抽出及び精製技術において、入間及びｒｋ
ＩＩ物をおかすサルモネラ熱ＶＣ対し−Ｃ生ワクチンと
同程度に有効であり、長期間貯蔵が容易でありかつ注射
又は経口投与に適１−る活性生化学ワクチンを取得１．
得る方法が開発された。
、％ＶＣ１’う１−陰性菌、たとえばサルモネラ チフ
イムリウム（ネズミチフス菌）及びサルモネラ ミオツ
タ及び変異菌５Ｒからの分子を蛋白質塩基で抽出する際
にダアニジン チオシアナート、尿素及びペロナール緩
衝液を使用することが記載されている〇 今般、発酵、抽出及び精製技術において、入間及びｒｋ
ＩＩ物をおかすサルモネラ熱ＶＣ対し−Ｃ生ワクチンと
同程度に有効であり、長期間貯蔵が容易でありかつ注射
又は経口投与に適１−る活性生化学ワクチンを取得１．
得る方法が開発された。
本発明の方法に士つき゛の一連の製造工程の組合せを特
徴とするものである。
徴とするものである。
まず第一工程においてにり、適当な液体が１．質中でネ
ズミチフス菌Ｍ２Ｏ６のような弱肯性菌株’（ａｖ−ｉ
ｒｕｌｅｎｔ ５ｔｒａｉｎ ） の発酵を行なう。
ズミチフス菌Ｍ２Ｏ６のような弱肯性菌株’（ａｖ−ｉ
ｒｕｌｅｎｔ ５ｔｒａｉｎ ） の発酵を行なう。
発酵培地の温度は３３°Ｃ〜３５°Ｃの許容条件に正確
に保持することが有利である。ネズミチフス菌の発育に
は３４°Ｃの温度か特に適当でおる。発酵は平均的好気
生活中で接種物の寸法の関数である期間行なわｉする。
に保持することが有利である。ネズミチフス菌の発育に
は３４°Ｃの温度か特に適当でおる。発酵は平均的好気
生活中で接種物の寸法の関数である期間行なわｉする。
その際培地の−１は中性よりも僅かに高い値に訴整され
る。
る。
遠心分離−低速で行なって液体部分と細菌残渣の形の細
菌とを分離１１２、後者を洗滌する。
菌とを分離１１２、後者を洗滌する。
ついで選定された選択的溶剤を用い、厳密に制御された
ｐＨ条件下でかつ特定時間抽出処理し、て膜抗原を抽出
する。ワクチン作用をもつ（ｖＢｃｃｉｎ−ａｔｉｎｇ
：以下ワクチン用という）膜抗原の抽出は細菌残渣會
低級トリス（ヒドロキシアルキル）アミノアルカンに属
する溶剤と接触せしめることによって有力われる。トリ
ス（ヒドロキシメチル）アミノエタンか本発明方法に卦
ける膜抗原の抽出に特に適当１゛ある。
ｐＨ条件下でかつ特定時間抽出処理し、て膜抗原を抽出
する。ワクチン作用をもつ（ｖＢｃｃｉｎ−ａｔｉｎｇ
：以下ワクチン用という）膜抗原の抽出は細菌残渣會
低級トリス（ヒドロキシアルキル）アミノアルカンに属
する溶剤と接触せしめることによって有力われる。トリ
ス（ヒドロキシメチル）アミノエタンか本発明方法に卦
ける膜抗原の抽出に特に適当１゛ある。
溶剤ｔｉｔ低ｍ度で使用されそ１．て抽出媒体は緩衝化
される。その際、ｐｌｌＦ；ｉ強酸によって８．４〜８
．６の間に調整さ１する。抽出は細菌残ｆｐｒＫ対【５
、て、絶えず攪拌ｌ、つつ、酵素又は微生物の発育を完
全に同道するために低温で、好まＩ、＜は０°Ｃ〜＋４
°Ｃの範囲の温度で行なう。１Ｉｌｔｌ菌残渣を攪拌下
に緩衝剤−溶剤媒体と接触させて行なう抗原の抽出時間
は少なくとも約６０時間、好ま］、〈は７０時時間開で
ある。
される。その際、ｐｌｌＦ；ｉ強酸によって８．４〜８
．６の間に調整さ１する。抽出は細菌残ｆｐｒＫ対【５
、て、絶えず攪拌ｌ、つつ、酵素又は微生物の発育を完
全に同道するために低温で、好まＩ、＜は０°Ｃ〜＋４
°Ｃの範囲の温度で行なう。１Ｉｌｔｌ菌残渣を攪拌下
に緩衝剤−溶剤媒体と接触させて行なう抗原の抽出時間
は少なくとも約６０時間、好ま］、〈は７０時時間開で
ある。
ついで軽度の遠心分離による＃１ｉ潟を行斥い、さらに
−Ｉｌ液を１０．０００〜３００．０００ にわたる
蝕々の分子飾分離限界値をもつ膜−Ｌで限外濾過するこ
とに［つて精製及び分画処理１−９て所望の分子量−を
もつ種々の両分を得る。、ｔり低分子量をもつ画分は透
析１〜で塩を除去する。 ゛ 本発明の方法の有利な一変形によ７′Ｌは、抗原の抽出
幻抽出媒体の２．３％程度、好まＬ＜は１％程度の割合
の表面活性剤、たとえ−°ポリオキシエチレン及び、１
２リオキシ工タノール系列の表面活性剤の存在下に溶剤
を用いて行なうことができる。
−Ｉｌ液を１０．０００〜３００．０００ にわたる
蝕々の分子飾分離限界値をもつ膜−Ｌで限外濾過するこ
とに［つて精製及び分画処理１−９て所望の分子量−を
もつ種々の両分を得る。、ｔり低分子量をもつ画分は透
析１〜で塩を除去する。 ゛ 本発明の方法の有利な一変形によ７′Ｌは、抗原の抽出
幻抽出媒体の２．３％程度、好まＬ＜は１％程度の割合
の表面活性剤、たとえ−°ポリオキシエチレン及び、１
２リオキシ工タノール系列の表面活性剤の存在下に溶剤
を用いて行なうことができる。
ワクチン用抗原の抽出の改良に適する表面活性剤として
は、トウイーン（Ｔｗｅｅｎ ）の商標で販売されてい
るポリオキシエチレンソルベー？ （５ｏｒｂ−ａｔｅ
）、旧ｔＩＩ）Ｊの商標で販売されている蹟すオキシ
エチレンラウリルエステル及びトライトン（Ｔｒｉｊ□
ｎ ）の商標で販売されているポリエトキシエタノール
をあけることができる。表面活性剤の使用は活性の観点
から有利である。［かじながら、抽出工程において表面
活性剤を使用すると、精製された抗原の製造を目的とす
る場合にはその後のｎＩ製工程においである種の困難が
生ずるおそれがある点に留意すべきである。この場合に
は、ワクチン用抗原の抽出物を限外濾過による１′＃製
及び分別のｆ＆にさらに別の分析技術、たとえば等電点
分画を気泳動法によっであるいはイオン交換樹脂を用い
る工業的規模での方法によって完全に精製１−る。
は、トウイーン（Ｔｗｅｅｎ ）の商標で販売されてい
るポリオキシエチレンソルベー？ （５ｏｒｂ−ａｔｅ
）、旧ｔＩＩ）Ｊの商標で販売されている蹟すオキシ
エチレンラウリルエステル及びトライトン（Ｔｒｉｊ□
ｎ ）の商標で販売されているポリエトキシエタノール
をあけることができる。表面活性剤の使用は活性の観点
から有利である。［かじながら、抽出工程において表面
活性剤を使用すると、精製された抗原の製造を目的とす
る場合にはその後のｎＩ製工程においである種の困難が
生ずるおそれがある点に留意すべきである。この場合に
は、ワクチン用抗原の抽出物を限外濾過による１′＃製
及び分別のｆ＆にさらに別の分析技術、たとえば等電点
分画を気泳動法によっであるいはイオン交換樹脂を用い
る工業的規模での方法によって完全に精製１−る。
本発明の方法に従って得られた凍結乾燥された生化学ワ
クチン−そのワクチン用抗原画分の分子量か５０，００
０ より大であるもの−は人間及び動物のワクチン接
種に使用［２得るものであり、かつこれらはマウスのワ
クチン接Ｉ！！にお（Ａて生ワクチンと同様に有効であ
る。抗原画分の分子量が３００ 、０００より大である
ワクチンはチフス菌用のものとみな［、得るので、腸チ
フス及び・臂うチフス熱の処置用に使用するのＫきわめ
て有利である。これらのワクチンは注射用又は経口投与
用に処方し。
クチン−そのワクチン用抗原画分の分子量か５０，００
０ より大であるもの−は人間及び動物のワクチン接
種に使用［２得るものであり、かつこれらはマウスのワ
クチン接Ｉ！！にお（Ａて生ワクチンと同様に有効であ
る。抗原画分の分子量が３００ 、０００より大である
ワクチンはチフス菌用のものとみな［、得るので、腸チ
フス及び・臂うチフス熱の処置用に使用するのＫきわめ
て有利である。これらのワクチンは注射用又は経口投与
用に処方し。
得る。これらは凍結乾燥された形で製造されるので、き
わめて長期間貯蔵し得る。
わめて長期間貯蔵し得る。
つきに本発明を実施例によって説明するが、これらは本
発明を限定するものではない、。
発明を限定するものではない、。
実施例１
サルモネラ ナフイムリウムＭ２Ｏ６の発醇を有効容ｆ
＊１５ｔの発酵槽中で１を当りつぎの組成をもつ繁殖正
常肉汁型培地中で行なった。
＊１５ｔの発酵槽中で１を当りつぎの組成をもつ繁殖正
常肉汁型培地中で行なった。
トリプトン １５ ｆ大豆ｌヤパ
インペプトン ５ｆグルコース
５ｆＮａＣ／
４ ｔＬ−シスチン Ｏ，，３ｆ
亜硫酸ナトリウム ０．２２クエン
酸ナトリウム Ｉｆ培養ｌ−ｔ、３４
°Ｃの温度で、０．５ＶＶＭの通気条件下で、 ｐＨを
７．７に調整１．１．て行なった。培養開始当初に若干
の酸性化が観察された。発酵肋間Ｖｉ２４時間であった
。遠心分離は低速度で行ない、残渣を水洗し、脱塩１−
そ１．て秤量した。
インペプトン ５ｆグルコース
５ｆＮａＣ／
４ ｔＬ−シスチン Ｏ，，３ｆ
亜硫酸ナトリウム ０．２２クエン
酸ナトリウム Ｉｆ培養ｌ−ｔ、３４
°Ｃの温度で、０．５ＶＶＭの通気条件下で、 ｐＨを
７．７に調整１．１．て行なった。培養開始当初に若干
の酸性化が観察された。発酵肋間Ｖｉ２４時間であった
。遠心分離は低速度で行ない、残渣を水洗し、脱塩１−
そ１．て秤量した。
抽出は細菌残渣３０ｆｔ（湿潤重量）に対し２てトリス
（ヒドロキシメチル）アミノメタン（０，−０’５Ｍ）
及びＨＣ，！ （２００ｄ ）で…８．５に保持された
溶剤−緩衝剤系を用い、＋４°Ｃの温度で絶えず攪拌し
つつかつｐＨを８．５に調整（て行なった。平均６７〜
７２時間の抽出時間の終りに２０６ ｎｍ ｋζおける
吸収によって制御された抽出収率は最大であった。この
時点を超えると、それ以上の抽出収率の改善は観察され
なかった。
（ヒドロキシメチル）アミノメタン（０，−０’５Ｍ）
及びＨＣ，！ （２００ｄ ）で…８．５に保持された
溶剤−緩衝剤系を用い、＋４°Ｃの温度で絶えず攪拌し
つつかつｐＨを８．５に調整（て行なった。平均６７〜
７２時間の抽出時間の終りに２０６ ｎｍ ｋζおける
吸収によって制御された抽出収率は最大であった。この
時点を超えると、それ以上の抽出収率の改善は観察され
なかった。
この媒質をきわめて軽度の遠心分離によって傾瀉し、つ
いで５０ 、０００〜１０，０００ダルトンの分子片分
離限界値をもつ膜上で限外濾過１．た。
いで５０ 、０００〜１０，０００ダルトンの分子片分
離限界値をもつ膜上で限外濾過１．た。
つさの両分が得られた。
抗Ｊ９両分 重相
ＭＷ ＞ ５０．０００ ０．５９６ ｆ
ｌｏ、０００くＭＷ（５０，００００，０３９ｒＭＷ＜
１０．０００ ０．７７ ？各々１００
匹のマウスから＃６成される三群のマウスに上記３種の
画分の各々を２００μｔ／日 の投与量で５日間経口的
にワクチン投Ｊｊ １． ｆｃ ｎ２週間稜、各マウス
にサルモネラ チフィムリウム（ネズミチフスｗｌ）Ｃ
５を４．６ＸｌＯ個の供試用量で投与１．た。同様に１
００匹のマウスの一群には生ワクチンＳｔｍＲａｆ：ワ
クチン投与１−かつ別の１００匹のマウスの一群はワク
チン投与せずに対照群と１．に０試鹸結果けっぎのとお
りであるｎｌ） Ｋ［１０ １！ｊ 心 へ ω ト 寸
か 膚Ｆｔ−ｔ＋− 〇 〇 〇 有効指数は対照群に対１．て生存率及び平均生存１ヨ数
を考慮したものである。
ｌｏ、０００くＭＷ（５０，００００，０３９ｒＭＷ＜
１０．０００ ０．７７ ？各々１００
匹のマウスから＃６成される三群のマウスに上記３種の
画分の各々を２００μｔ／日 の投与量で５日間経口的
にワクチン投Ｊｊ １． ｆｃ ｎ２週間稜、各マウス
にサルモネラ チフィムリウム（ネズミチフスｗｌ）Ｃ
５を４．６ＸｌＯ個の供試用量で投与１．た。同様に１
００匹のマウスの一群には生ワクチンＳｔｍＲａｆ：ワ
クチン投与１−かつ別の１００匹のマウスの一群はワク
チン投与せずに対照群と１．に０試鹸結果けっぎのとお
りであるｎｌ） Ｋ［１０ １！ｊ 心 へ ω ト 寸
か 膚Ｆｔ−ｔ＋− 〇 〇 〇 有効指数は対照群に対１．て生存率及び平均生存１ヨ数
を考慮したものである。
５０ 、０００ ダルトンよシ大きい分子Ｍをもつ抗
原画分はマウスにワクチン役方した場合実質的に生ワク
チンと同程度に有効であった。
原画分はマウスにワクチン役方した場合実質的に生ワク
チンと同程度に有効であった。
実施例２
発酵及び抽出工程を実施例１と同一条件下で行ない、つ
いで抽出液を軽度に遠心分離し、ついで５０．０００
、１００，０００ 及び３００，０００ダルトンの分
離限界値をもつ幌上で限外濾過１、た。
いで抽出液を軽度に遠心分離し、ついで５０．０００
、１００，０００ 及び３００，０００ダルトンの分
離限界値をもつ幌上で限外濾過１、た。
得られた両分の各々をマウスＶＣ２００μＶ／日の投与
量で５日間経口投島した。ネズミチフス菌Ｃ５の供試用
量は５×１０ 個／マウスであった。
量で５日間経口投島した。ネズミチフス菌Ｃ５の供試用
量は５×１０ 個／マウスであった。
つき′の結果が得られた。
ね Ｑ
実施例３
発酵、抽出及び限外−過は紬記と同一条件で行なった。
’（００，０００よね大きい分子Ｓをもつ抗原画分を等
電点分画電気泳動法により処理［−１て異なる等霜点を
もつ異なる種類の蛋白質の両分であると考えられる種々
の両分を得た。得らｔまたすべての画分のうち、５．５
と６との間の等電点に相当する一画分をマウスｒ（ワク
チン投４してネズミチフス菌に対する効果を調べた結果
、生ワクチンと同等に有効であることが認められた。試
駆結果はつぎのとあ−りである。
電点分画電気泳動法により処理［−１て異なる等霜点を
もつ異なる種類の蛋白質の両分であると考えられる種々
の両分を得た。得らｔまたすべての画分のうち、５．５
と６との間の等電点に相当する一画分をマウスｒ（ワク
チン投４してネズミチフス菌に対する効果を調べた結果
、生ワクチンと同等に有効であることが認められた。試
駆結果はつぎのとあ−りである。
７″
／
、′
婦 Ｑ
１） べ １１］ い１ 、
、。
、。
ムｔｇ へ へ Ｌｎ のＳ−計
− 以上詳述；、た特定の実施態様は琲に本発明の一般的特
徴を示すためのものであり、当業者は本発明の一般的概
念から逸脱することなしに種々の目的のために現在の技
術水準での知識の適用によってか＼る特定の実施態様を
修正し及び／又は変形することが可能である。したがっ
て、当業者が容易にな【７″４Ｊ４るか＼る修正及び変
形は開示された特定の実施態様と均等なものであり、本
発明の範囲に稿するものとみなされるべきである。なお
上述ＩＩ：語句の説明は単に本発明を理解させるための
ものであって、同等制限するものではない点も理解され
るべきである。さらに本発明は本発明の方法に従って製
造された凍結乾燥された細菌ワクチンを腸チフス及びパ
ラチフス熱から人Ｉ′ＩＪ１及び動駿１を保護するため
に投与するワクチン投与法を包含する本のである。
− 以上詳述；、た特定の実施態様は琲に本発明の一般的特
徴を示すためのものであり、当業者は本発明の一般的概
念から逸脱することなしに種々の目的のために現在の技
術水準での知識の適用によってか＼る特定の実施態様を
修正し及び／又は変形することが可能である。したがっ
て、当業者が容易にな【７″４Ｊ４るか＼る修正及び変
形は開示された特定の実施態様と均等なものであり、本
発明の範囲に稿するものとみなされるべきである。なお
上述ＩＩ：語句の説明は単に本発明を理解させるための
ものであって、同等制限するものではない点も理解され
るべきである。さらに本発明は本発明の方法に従って製
造された凍結乾燥された細菌ワクチンを腸チフス及びパ
ラチフス熱から人Ｉ′ＩＪ１及び動駿１を保護するため
に投与するワクチン投与法を包含する本のである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、つぎの工程ニ ー サルモネラ属の弱毒性菌株を適当な液体培地中で、
中性よりも僅かに高い−で、通常の好気的条件下３３〜
３５°Ｃの温度で、接種物の量の関数である期間、発酵
させ； −得られる発酵混合物を低速度で遠心分離シテ絽菌残渣
を分離し； −分離した細菌残渣を攪拌下、低温で、８．４〜８．６
の−で、低級トリス（ヒドロキシアルキル）アミノアル
カンに属する溶剤と少なくとも約６０時間の期間接触さ
せることによってワクチン用抗原を抽出しニ ー ワクチン用抗原をきわめて軽度の遠心分離によって
傾瀉し、これを所望の分子量の関数として選定された分
離限界値をもつ膜上で限外濾過し、より低分子量の画分
は透析することによってワクチン用抗原を精製、分画【
７；そ【２″ｒ−ワクチン用抗原画分を凍結乾燥する；
工程からなるサルモネラ感染症ｒ（対ｊ−て有効な細菌
ワクチンの製造法。 ２、弱毒性菌株がネズミチフス菌である特ＷＥ Ｍ＋ｉ
＋求の範囲第１項記載の細菌ワクチンの製造法。 Ｂ、 ｍ抗原の抽出溶剤かトリス（ヒドロキシメチル
）アミノエタンである特許請求の範囲第１項記載の細菌
ワクチンの製造法。 ４、ワクチン用膜抗原の抽出を、絶えず攪拌１゜つつ０
°Ｃ〜＋４°Ｃｌ７）温度で、ｐｉｌを強酸を用いて８
．４〜８．６に調整しつつ、トリス（ヒドロキシメチル
）アミノエタン溶剤を低濃度で用いて行なう％訂藷求の
範囲第３項記載の細菌ワクチンの製造法。 ５・ ワクチン用膜抗原の抽出を抽出用媒体に対して多
くても２〜３チ程度の低濃度の４リオキシエチレン及び
？リオキシエタノールから選んだ表面活性剤の存在下で
行なう特許請求の範囲第１項Ｍｌの細菌ワクチンの製造
法。 （１，ワクチン用膜抗原の抽出物を限外濾過によって精
製、分画し、た後、さらに吟電点分画電気泳動法のよう
な分析法又はイオン交侯樹脂を用いる工業的方法によっ
て完全に精製する特許請求の範囲第１項記賊の細菌ワク
チンの製造法。 ？、 ３００．０００よりも大きい分子ｌをもつワク
チン用抗原画分を分離する特許請求の範囲第６項記載ノ
細菌ワクチンの製造法。
Applications Claiming Priority (2)
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| FR8123067 | 1981-12-10 | ||
| FR8123067A FR2517967A1 (fr) | 1981-12-10 | 1981-12-10 | Procede de production d'un vaccin biochimique contre les fievres a salmonelles |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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