JPH1183829A - Recirculation type high speed liquid chromatography equipment and analyzing method for optical isomer analysis - Google Patents
Recirculation type high speed liquid chromatography equipment and analyzing method for optical isomer analysisInfo
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- JPH1183829A JPH1183829A JP10197914A JP19791498A JPH1183829A JP H1183829 A JPH1183829 A JP H1183829A JP 10197914 A JP10197914 A JP 10197914A JP 19791498 A JP19791498 A JP 19791498A JP H1183829 A JPH1183829 A JP H1183829A
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Abstract
Description
【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は、試料の再循環式分
析という本目的を達成するために、適時に高速液体クロ
マトグラフィー装置で自動的に鏡像異性体用クロマトグ
ラフィーカラムと通常のクロマトグラフィーカラムを切
り替えるための自動切り替え弁を有する制御器を使用す
ることを特徴とする、光学異性体分析用再循環式高速液
体クロマトグラフィー装置及び方法を開示する。本発明
により、鏡像異性体用クロマトグラフィーカラムにより
十分に分離できない光学異性体も十分に分離することが
できる。BACKGROUND OF THE INVENTION The present invention relates to a chromatography column for enantiomers and a conventional chromatography column, which is used to automatically achieve time-resolved analysis of a sample by a high-performance liquid chromatography apparatus in a timely manner. A recycle high-performance liquid chromatography apparatus and method for optical isomer analysis, characterized by using a controller having an automatic switching valve for switching between liquids. According to the present invention, optical isomers that cannot be sufficiently separated by an enantiomer chromatography column can be sufficiently separated.
【０００２】[0002]
【従来の技術】多くの医薬品が光学異性体の混合物の形
態で使用されている。通常、混合物の一成分のみが疾病
を治療するのに有効である。他の全ての成分は、負の効
果を示すか、副作用を生じる。混合物中の光学異性体は
物理的及び化学的特性において非常に近似しているの
で、容易には分離し得ない。その結果、これらの医薬品
は混合物をもってしか使用できないのである。BACKGROUND OF THE INVENTION Many pharmaceuticals are used in the form of a mixture of optical isomers. Usually, only one component of the mixture is effective in treating the disease. All other ingredients have a negative effect or produce side effects. The optical isomers in the mixture are so close in physical and chemical properties that they cannot be easily separated. As a result, these drugs can only be used in mixtures.
【０００３】現在、光学異性体に関する研究は、二つの
方法−不斉合成法及び光学凝離方法（optical breaking
method）を使用することにより実施されている。光学
異性体の合成法において光学異性体を分離する分析法
は、反応結果を追跡及び評価できるので、非常に重要で
ある。[0003] At present, studies on optical isomers are carried out by two methods-asymmetric synthesis method and optical breaking method.
method). An analytical method for separating optical isomers in a method for synthesizing optical isomers is very important because the reaction results can be tracked and evaluated.
【０００４】光学異性体を分離するために、高速液体ク
ロマトグラフィーカラムの種々の製造業者は、光学異性
体を分離し得る種々の鏡像異性体用クロマトグラフィー
カラムを製造している。いくつかの光学異性体に関して
は、これらのクロマトグラフィーカラムは優れた分離性
（separation）を示し得る。しかしながら、市販の鏡像
異性体用クロマトグラフィーカラムによっては十分に分
離され得ない今だ多くの光学異性体がある。本発明は、
通常の鏡像異性体用クロマトグラフィーカラムでは十分
に分離し得ない試料の問題を解決することを立案する。[0004] To separate the optical isomers, various manufacturers of high performance liquid chromatography columns produce various enantiomer chromatography columns capable of separating the optical isomers. For some optical isomers, these chromatographic columns can exhibit excellent separation. However, there are still many optical isomers that cannot be adequately separated by commercially available enantiomer chromatography columns. The present invention
It is designed to solve the problem of a sample that cannot be sufficiently separated by a normal enantiomer chromatography column.
【０００５】１９７５年以来、高速液体クロマトグラフ
ィーで自動切り替え弁を有する制御器を使用することに
より特定の目的を達成し得たことが知られている。従来
の文献では、高速液体クロマトグラフィーでカラム−切
り替えクロマトグラフィーを使用すると、主として一般
的な化合物の定量分析ができるとされている。また、そ
の使用は、分離を実施するために種々のクロマトグラフ
ィーカラムや移動相の特性の使用にも主として関連する
とされている。いずれの従来文献も、光学異性体を分離
するために高速液体クロマトグラフィーで繰り返し循環
式分析用カラム−切り替えクロマトグラフィーを使用す
る方法について報告していない。[0005] It has been known since 1975 that certain objectives could be achieved by using a controller with an automatic switching valve in high performance liquid chromatography. According to the conventional literature, the use of column-switching chromatography in high performance liquid chromatography enables quantitative analysis of mainly general compounds. Its use is also said to be primarily related to the use of various chromatographic columns and mobile phase properties to perform the separation. None of the prior art documents report a method of repeatedly using column-switching chromatography for cyclic analysis in high performance liquid chromatography to separate optical isomers.
【０００６】[0006]
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、光学
異性体分析用新規再循環式高速液体クロマトグラフィー
装置および方法を提供することである。本発明は、光学
異性体が通常の鏡像異性体用クロマトグラフィーカラム
により十分に分離され得ないという問題を解決し得る。SUMMARY OF THE INVENTION An object of the present invention is to provide a novel recycle high performance liquid chromatography apparatus and method for optical isomer analysis. The present invention can solve the problem that optical isomers cannot be sufficiently separated by a conventional enantiomer chromatography column.
【０００７】本発明は、時限事象出力機能（timed even
t output functions）を有する液圧ポンプ、試料注入手
段、６ポート自動切り替え弁を有する制御器、鏡像異性
体用クロマトグラフィーカラム、通常のクロマトグラフ
ィーカラム、検出手段及び積分器を含有する自動繰り返
し循環式分析用高速液体クロマトグラフィー装置に関す
る。液圧ポンプによる時限事象出力信号（timed event
signal output）は、必要により切り替えすべき６ポー
ト自動切り替え弁を有する制御器を制御する。鏡像異性
体用クロマトグラフィーカラム及び通常のクロマトグラ
フィーカラムの特定の接続と信号により、試料の再循環
式分析を達成し得る。The present invention provides a timed event output function (timed even output function).
Automatic recirculating system containing hydraulic pump with t output functions, sample injection means, controller with 6-port automatic switching valve, chromatography column for enantiomer, ordinary chromatography column, detection means and integrator The present invention relates to a high performance liquid chromatography device for analysis. Timed event output signal (timed event) by hydraulic pump
signal output) controls a controller with a 6-port automatic switching valve to switch if necessary. With the specific connections and signals of the enantiomeric and conventional chromatography columns, recycle analysis of the sample can be achieved.
【０００８】[0008]
【課題を解決するための手段】本発明は、（１）溶媒槽
（Ｅ）、（２）試料注入手段（Ｉ）、（３）試料注入手
段（Ｉ）の試料を前方へ移動させるために溶媒槽（Ｅ）
から溶媒を汲み上げる時限事象出力機能を有する液圧ポ
ンプ（Ｐ）、（４）試料注入手段からの試料を収容し、
互いに切り替え得る第１の切り替え路及び第２の切り替
え路を形成する６ポート自動切り替え弁を有する制御器
（Ｖ）であって、第１の切り替え路は、試料を収容する
ポート２とポート３との接続、ポート１と６との接続及
びポート４と５との接続からなり、第２の切り替え路
は、試料を受けるポート２とポート１との接続、ポート
３と４との接続及びポート５と６との接続からなり、
（５）制御器のポート３から試料を収容し、次いでポー
ト６に試料を送出する鏡像異性体用クロマトグラフィー
カラム（Ｃ1）、（６）制御器のポート１から試料を収
容し、次いでポート４に試料を送出する通常のクロマト
グラフィーカラム（Ｃ2）、（７）６ポート自動切り替
え弁を有する制御器のポート５から試料を収容する検出
手段（Ｄ）を含む光学異性体分析用再循環式高速液体ク
ロマトグラフィー装置であって、試料は鏡像異性体用ク
ロマトグラフィーカラム（Ｃ1）から溶離するが、十分
に分離しなかったときには、第１の切り替え路及び第２
の切り替え路は液圧ポンプ（Ｐ）から出力信号を受ける
ことを特徴とする該装置に関する。該信号は優れた分離
が達成されるまで、２つの経路を順番に切り替える。According to the present invention, there are provided (1) a solvent tank (E), (2) a sample injection means (I), and (3) a method for moving a sample of a sample injection means (I) forward. Solvent tank (E)
A hydraulic pump (P) having a timed event output function for pumping a solvent from the container, (4) containing a sample from the sample injection means,
A controller (V) having a 6-port automatic switching valve forming a first switching path and a second switching path that can be switched with each other, wherein the first switching path comprises a port 2 and a port 3 for accommodating a sample. , A connection between ports 1 and 6, and a connection between ports 4 and 5. The second switching path includes a connection between port 2 and port 1 for receiving a sample, a connection between ports 3 and 4, and a connection between port 5 and port 5. And the connection between 6 and
(5) an enantiomer chromatography column (C 1 ) that receives the sample from port 3 of the controller and then delivers the sample to port 6; (6) receives the sample from port 1 of the controller, then port A normal chromatography column (C 2 ) for delivering the sample to 4, a (7) recycle for optical isomer analysis including detection means (D) for containing the sample from port 5 of the controller having a 6-port automatic switching valve A high-performance liquid chromatography apparatus, wherein a sample is eluted from an enantiomer chromatography column (C 1 ), but when it is not sufficiently separated, a first switching path and a second switching path are used.
The switching path receives an output signal from the hydraulic pump (P). The signal switches between the two paths in sequence until good separation is achieved.
【０００９】本発明は、さらに光学異性体分析用再循環
式高速液体クロマトグラフィー方法であって、以下の
（１）時限事象出力機能を有する液圧ポンプ（Ｐ）を使
用して溶媒槽（Ｅ）から溶媒を汲み上げ、汲み上げられ
た溶媒は試料注入手段（Ｉ）の試料を６ポート自動切り
替え弁を有する制御器（Ｖ）へ移動させる、（２）６ポ
ート自動切り替え弁を有する制御器（Ｖ）を通過する試
料を、鏡像異性体用クロマトグラフィーカラム（Ｃ1）
及び通常のクロマトグラフィーカラム（Ｃ2）の順で分
析し、次いで（３）検出手段（Ｄ）を使用して分離した
試料を検出する段階を含む該方法に関する。The present invention further relates to a recycle type high performance liquid chromatography method for optical isomer analysis, which comprises the following (1) a hydraulic pump (P) having a timed event output function. )), And the pumped solvent moves the sample of the sample injection means (I) to a controller (V) having a 6-port automatic switching valve. (2) A controller (V) having a 6-port automatic switching valve. ) Is passed through a chromatographic column for enantiomers (C 1 ).
And analyzed in order conventional chromatographic column (C 2), then (3) the method comprising the step of detecting the separated sample using detection means (D) relates.
【００１０】本方法は、優れた分離を実施するために試
料を再循環させるのに適した時に自動的に切り替える６
ポート自動切り替え弁を有する制御器（Ｖ）を特徴とす
る。The method automatically switches when appropriate to recycle the sample in order to perform a good separation.
A controller (V) having a port automatic switching valve is characterized.
【００１１】再循環式高速液体クロマトグラフィー装置
の接続を図１に示す。図１（ａ）によると、試料注入手
段（Ｉ）からの分析すべき試料は、液圧ポンプ（Ｐ）に
より溶媒槽（Ｅ）から汲み上げられる移動相溶媒により
前方へ移動する。試料は第１の切り替え路に従い自動切
り替え弁を有する制御器のポート２及び３を順に介して
試料の１回目の分離のために鏡像異性体用クロマトグラ
フィーカラム（Ｃ1）に流れる。試料が鏡像異性体用ク
ロマトグラフィーカラム（Ｃ1）から溶離すると、試料
は、第１の切り替え路により自動切り替え弁を有する制
御器のポート６及び１を順に介して、通常のクロマトグ
ラフィーカラム（Ｃ2）に流れる。試料が通常のクロマ
トグラフィーカラム（Ｃ2）から全部流出していない場
合には、液圧ポンプ（Ｐ）は（図２に示されるように）
ｔ1の切り替え時間で第１の切り替え路を（図１（ｂ）
に示されるように）第２の切り替え路（Ｃ2）に切り替
えるための６ポート自動切り替え弁を有する制御器
（Ｖ）に信号を送る。次いで試料は、第２の切り替え路
により自動切り替え弁を有する制御器のポート４及び３
を順に介して、試料の２回目の分離のために再び鏡像異
性体用クロマトグラフィーカラム（Ｃ1）に流れる。試
料が鏡像異性体用クロマトグラフィーカラム（Ｃ1）か
ら溶離すると、試料は、第２の切り替え路により自動切
り替え弁を有する制御器のポート６及び５を順に介して
検出手段（Ｄ）に流れる。結果は積分器（Ｒ）により出
力される。試料は廃液収集器（Ｗ）に流れる。FIG. 1 shows the connection of the recirculation type high performance liquid chromatography apparatus. According to FIG. 1 (a), the sample to be analyzed from the sample injection means (I) is moved forward by the mobile phase solvent pumped from the solvent tank (E) by the hydraulic pump (P). The sample flows along the first switching path, in order through ports 2 and 3 of the controller with automatic switching valves, to the enantiomer chromatography column (C 1 ) for the first separation of the sample. As the sample elutes from the enantiomer chromatography column (C 1 ), the sample is passed through the first chromatography channel, in turn, through ports 6 and 1 of the controller with an automatic switching valve, through a conventional chromatography column (C 1). 2 ) Flowing. If no sample has flowed out of the usual chromatography column (C 2 ), the hydraulic pump (P) will be turned on (as shown in FIG. 2).
The first switching path is switched at the switching time of t 1 (FIG. 1B).
A signal is sent to the controller (V) which has a 6-port automatic switching valve for switching to the second switching path (C 2 ) (as shown in FIG. 2 ). The sample is then applied to ports 4 and 3 of the controller with the automatic switching valve by means of the second switching path.
Through the column in order for a second separation of the sample again into the chromatographic column for enantiomers (C 1 ). As the sample elutes from the enantiomer chromatography column (C 1 ), the sample flows to the detection means (D) by means of a second switching path via ports 6 and 5 of the controller with automatic switching valves. The result is output by the integrator (R). The sample flows to a waste liquid collector (W).
【００１２】２回目の分離が完了し、試料が鏡像異性体
用クロマトグラフィーカラム（Ｃ1）から殆ど流出した
ら、液圧ポンプ（Ｐ）は、（図１（ａ）に示されている
ように）ｔ2の切り替え時間で第２の切り替え路を第１
の切り替え路に切り替えるために制御器（Ｖ）に信号を
送る。試料は第１の切り替え路により自動切り替え弁を
有する制御器のポート６及び１を順に介して通常のクロ
マトグラフィーカラム（Ｃ2）に流れる。試料が通常の
クロマトグラフィーカラム（Ｃ2）から殆ど流出した
ら、液圧ポンプは、（図１（ｂ）に示されているよう
に）ｔ3の切り替え時間で第１の切り替え路を第２の切
り替え路に切り替える為に制御器に信号を送る。試料は
試料の三回目の分離のために再び、制御器のポート４及
び３を介して鏡像異性体用クロマトグラフィーカラム
（Ｃ1）に流れる。When the second separation is complete and the sample has almost flowed out of the enantiomer chromatography column (C 1 ), the hydraulic pump (P) is turned on (as shown in FIG. ) a second switching path in the switching time t 2 the first
A signal is sent to the controller (V) to switch to the switching path. The sample flows by means of a first switching path into a conventional chromatography column (C 2 ) via ports 6 and 1 of the controller having an automatic switching valve in sequence. When the sample has almost flowed out of the conventional chromatography column (C 2 ), the hydraulic pump switches the first switching path to the second switching path at a switching time of t 3 (as shown in FIG. 1 (b)). A signal is sent to the controller to switch to the switching path. The sample flows again through controller ports 4 and 3 to an enantiomer chromatography column (C 1 ) for a third separation of the sample.
【００１３】必要により、本発明は、優れた分離を実施
するために何回も試料を再循環させることができる。If necessary, the present invention can recycle the sample multiple times to perform a good separation.
【００１４】制御器（Ｖ）の一連の信号時間は、液圧ポ
ンプ（Ｐ）により制御され、図２に示されている。記号
ｔ0 は試料の注入時間を指し、記号ｔ1 は第１の切り替
え時間を指し、記号ｔ2 は第２の切り替え時間を指し、
及び記号ｔ3 は第３の切り替え時間を指す。他の記号は
順に定義されている。The series of signal times of the controller (V) is controlled by a hydraulic pump (P) and is shown in FIG. The symbol t 0 refers to the sample injection time, the symbol t 1 refers to the first switching time, the symbol t 2 refers to the second switching time,
And the symbol t 3 refers to the third switching time. Other symbols are defined in order.
【００１５】通常のクロマトグラフィーカラム（Ｃ2）
は、試料が切り替え時に鏡像異性体用クロマトグラフィ
ーカラム（Ｃ1）内を完全に通過し、検出手段（Ｄ）に
流れ込まないように確実にするための遅延カラムとして
使用される。検出手段への流れは、再循環の分離を停止
させてしまい得るからである。Conventional chromatography column (C 2 )
Is used as a delay column to ensure that the sample does not completely pass through the enantiomer chromatography column (C 1 ) when switched and does not flow into the detection means (D). This is because the flow to the detection means may stop the recirculation separation.
【００１６】制御器（Ｖ）の接続は、液圧ポンプ（Ｐ）
により制御され、表１及び図３に示されている通りであ
る。The controller (V) is connected to a hydraulic pump (P)
And is as shown in Table 1 and FIG.
【００１７】[0017]
【表１】 液圧ポンプの背面上の８ピンポートの信号の
説明 ピン＃ 説明 １ 準備（出力） ２ ＋５ ＶＤＣ １００ｍＡ 最大 ３ 基底状態 ４ 圧力 ０．１Ｖ／１０００ＰＳＩ ５ 停止（入力） ６ 時限事象（出力） ７ 操作（入力） ８ 注入一時停止（出力）。[Table 1] Signal description of the 8-pin port on the back of the hydraulic pump Pin # Description 1 Ready (output) 2 +5 VDC 100 mA Max 3 Ground state 4 Pressure 0.1 V / 1000 PSI 5 Stop (input) 6 Timed event (output) 7) Operation (input) 8 Pause injection (output).
【００１８】表１は、液圧ポンプの背面上の８ピンポー
トの信号の説明に関する。図３は、６ポート自動切り替
え弁を有する制御器の背面上のポートの接続ダイアグラ
ムに関する。接続は、図３に示されているように、末端
ブロックの底部の２つのポートを備える液圧ポンプの接
続ピン３及び６を含む。Table 1 relates to the signal description of the 8-pin port on the back of the hydraulic pump. FIG. 3 relates to the connection diagram of the ports on the back of the controller with a 6-port automatic switching valve. The connection includes connection pins 3 and 6 of a hydraulic pump with two ports at the bottom of the end block, as shown in FIG.
【００１９】以下の実施例は、本発明の有用性を説明す
るためのものである。本実施例は、いかなる点において
も本発明を限定するものではなく、そのように解釈され
るべきではない。The following examples are provided to illustrate the utility of the present invention. This example does not limit the invention in any way and should not be construed as such.
【００２０】[0020]
材料 １．光学異性体の試料： 以下の式： Materials 1. Optical isomer sample: The following formula:
【００２１】[0021]
【化１】 Embedded image
【００２２】＊：キラル中心 のEtodolac誘導体は、Organic Synthesis Laboratory o
f Development Center for Biotechnologyにより合成さ
れたもので、１２９７３５Ａの番号が付けられている。*: Etodolac derivative having a chiral center is available from Organic Synthesis Laboratory
f Synthesized by the Development Center for Biotechnology and numbered 129735A.
【００２３】２．移動相溶媒：移動相溶媒は、ヘキサン
９９重量部とイソプロピルアルコール１重量部からな
る。2. Mobile phase solvent: The mobile phase solvent consists of 99 parts by weight of hexane and 1 part by weight of isopropyl alcohol.
【００２４】装置 １．液圧ポンプ：モデルｐ１０００、Ｓｐｅｃｔｒａ−
Ｐｈｙｓｉｃｓ製． ２．試料注入器：モデル７７２５，Ｒｈｅｏｄｙｎｅ
製． ３．自動切り替え弁を有する制御器：モデルＡＣＰ−３
０１０、ＡＮＡＣＨＥＭ／ＵＫ；モデルＧＳ１０ｃバー
ジョン、Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ製． ４．６ポート弁：モデル７０１０，Ｒｈｅｏｄｙｎｅ
製． ５．クロマトグラフィーカラム： （１）鏡像異性体用クロマトグラフィーカラム：Ｍｅｒ
ｋのＬｉＣｈｒｏＣＡＲＴ（登録商標）（２５０×４ｍ
ｍＩ．Ｄ．；５ミクロン粒径）． （２）通常のクロマトグラフィーカラム：Ｋｅｙｓｔｏ
ｎｅのＮｕｃｌｅｏｓｉｌ Ｓｉｌｉｃａ（５０×４．
６ｍｍＩ．Ｄ．；３ミクロン粒径）． ６．検出手段：モデルｓｐｏ−６ＡＶ 紫外線検出器、
Ｓｈｉｍａｄｚｕ製． ７．積算器；モデル４２７，Ｂｅｃｋｍａｎ製。Apparatus 1. Hydraulic pump: Model p1000, Spectra-
Physics. 2. Sample injector: Model 7725, Rheodyne
Made. 3. Controller with automatic switching valve: Model ACP-3
010, ANACHEM / UK; Model GS10c version, manufactured by Universal. 4.6 port valve: Model 7010, Rheodyne
Made. 5. Chromatography column: (1) Chromatography column for enantiomer: Mer
k ChromoCART® (250 × 4 m
ml. D. ; 5 micron particle size). (2) Ordinary chromatography column: Keysto
ne's Nucleosil Silica (50 × 4.
6 mmI. D. ; 3 micron particle size). 6. Detecting means: Model spo-6AV ultraviolet ray detector,
Manufactured by Shimadzu. 7. Integrator; Model 427, manufactured by Beckman.
【００２５】試料調製 試料０．５ｍｇを秤量し、１０ｍＬのフラスコに入れ
た。移動相溶媒をフラスコに添加して１０ｍＬとした。
試料が完全に溶解するまで試料を撹拌した。溶液２．５
ｍＬを取り出し、他の１０ｍＬのフラスコに添加した。
移動相溶媒をフラスコに添加し、１０ｍＬとした。Sample Preparation A 0.5 mg sample was weighed and placed in a 10 mL flask. Mobile phase solvent was added to the flask to 10 mL.
The sample was agitated until the sample was completely dissolved. Solution 2.5
The mL was removed and added to another 10 mL flask.
Mobile phase solvent was added to the flask to make up to 10 mL.
【００２６】ＨＰＬＣの分析条件 １．移動相溶媒：ヘキサンとイソプロピルアルコールの
９９：１の割合の混合溶媒． ２．移動相流量：０．８ｍＬ／分． ３．注入した試料量：１０マイクロリットル． ４．紫外線検出器の波長：２５４ｎｍ． ５．検出器：ｃｓ＝０．５、ＰＴ＝５００、ＰＷ＝６、
ＡＴ＝１６。HPLC Analysis Conditions Mobile phase solvent: mixed solvent of hexane and isopropyl alcohol at a ratio of 99: 1. 2. Mobile phase flow rate: 0.8 mL / min. 3. Injected sample volume: 10 microliter. 4. UV detector wavelength: 254 nm. 5. Detector: cs = 0.5, PT = 500, PW = 6,
AT = 16.
【００２７】［実施例１］本実施例は、単一再循環によ
る試料１２９７３５Ａの分析実験に関する。最初に、試
料１２９７３５Ａを試料注入手段（Ｉ）により装置に注
入する。液圧ポンプ（Ｐ）により溶媒槽（Ｅ）から汲み
上げられた移動相溶媒は、試料注入手段（Ｉ）から試料
を制御器（Ｖ）の第１の切り替え路へ移動させる。試料
は、最初の分離のために、制御器のポート２及び３を順
に介して鏡像異性体用クロマトグラフィーカラム
（Ｃ1）に流れる。試料が鏡像異性体用クロマトグラフ
ィーカラム（Ｃ1）から溶離すると、試料は、制御器の
ポート６及び１を順に介して通常のクロマトグラフィー
カラム（Ｃ2）に流れる。ｔ1 が８分（即ち、試料が通
常のクロマトグラフィーカラム（Ｃ2）から殆ど流出す
る）であるとき、時限事象出力機能を有する液圧ポンプ
（Ｐ）は、全体の系を（図１（ｂ）に示されるように）
第２の切り替え路に切り替えるために６ポート自動切り
替え弁を有する制御器（Ｖ）に信号を送る。次いで、試
料は、２回目の分離のために、再び制御器のポート４及
び３を介して鏡像異性体用クロマトグラフィーカラム
（Ｃ1）に流れる。結果は、２つのピークを示している
（各々左旋及び右旋）。分離度は１．３であった。図５
は、単一再循環により分析した試料１２９７３５Ａのク
ロマトグラムである。表２は、２つのピークの滞留時
間、面積および分離度を示す。Example 1 This example relates to an experiment for analyzing a sample 129735A by single recirculation. First, the sample 129735A is injected into the apparatus by the sample injection means (I). The mobile phase solvent pumped from the solvent tank (E) by the hydraulic pump (P) moves the sample from the sample injection means (I) to the first switching path of the controller (V). The sample flows through the controller ports 2 and 3 sequentially through the enantiomer chromatography column (C 1 ) for the first separation. As the sample elutes from the enantiomer chromatography column (C 1 ), the sample flows to the conventional chromatography column (C 2 ) through ports 6 and 1 of the controller in sequence. When t 1 is 8 minutes (ie, the sample almost flows out of the ordinary chromatography column (C 2 )), the hydraulic pump (P) having a timed event output function sets the whole system (FIG. 1 ( b))
A signal is sent to a controller (V) having a 6-port automatic switching valve to switch to the second switching path. The sample then flows again through the controller ports 4 and 3 to the enantiomer chromatography column (C 1 ) for a second separation. The results show two peaks (left and right, respectively). The degree of separation was 1.3. FIG.
Is the chromatogram of sample 129735A analyzed by single recirculation. Table 2 shows the residence time, area and resolution of the two peaks.
【００２８】[0028]
【表２】 実施例１の結果 滞留時間 面積 ピークの分離度 ピーク１ １５．１７ ２３８０４ １．３ ピーク２ １６．０１ ２４９７９。Table 2 Results of Example 1 Residence time Area Peak resolution Peak 1 15.17 23804 1.3 Peak 2 16.01 24979.
【００２９】［比較例１］本比較例は、再循環を実施し
ない試料１２９７３５Ａの分析実験に関する。試料１２
９７３５Ａを試料入力手段（Ｉ）により装置に注入し
た。液圧ポンプ（Ｐ）により溶媒槽（Ｅ）から汲み上げ
られた移動相溶媒は、試料注入手段（Ｉ）から前方へ移
動させた。試料は、分離のために、６ポート自動切り替
え弁を有する制御器のポート２及び３を順に介して鏡像
異性体用クロマトグラフィーカラム（Ｃ1）に流れる。
結果は、２つのピークを示している（各々左旋及び右
旋）。分離度は０．９であった。図４は、再循環なしで
分析した試料１２９７３５Ａのクロマトグラムである。
表３は、２つのピークの分離度を示す。[Comparative Example 1] This comparative example relates to an analysis experiment of sample 129735A in which recirculation is not performed. Sample 12
9735A was injected into the apparatus by the sample input means (I). The mobile phase solvent pumped from the solvent tank (E) by the hydraulic pump (P) was moved forward from the sample injection means (I). The sample flows to the chromatographic column for enantiomers (C 1 ) in order via ports 2 and 3 of the controller with a 6-port automatic switching valve for separation.
The results show two peaks (left and right, respectively). The degree of separation was 0.9. FIG. 4 is a chromatogram of sample 129735A analyzed without recirculation.
Table 3 shows the resolution of the two peaks.
【００３０】[0030]
【表３】 比較例１の結果 滞留時間 面積 ピークの分離度 ピーク１ ８．６１ ２６３０８ ０．９ ピーク２ ８．９７ ２９６０３。Table 3 Results of Comparative Example 1 Residence time Area Peak resolution Peak 1 8.61 26308 0.9 Peak 2 8.97 29603.
【００３１】上記の実施例をもとにして、従来技術によ
り十分に分離できなかった光学異性体が、本発明の再循
環式高速液体クロマトグラフィー装置及び方法により十
分に分離することができる。Based on the above examples, optical isomers that could not be sufficiently separated by the conventional technique can be sufficiently separated by the recycle high-performance liquid chromatography apparatus and method of the present invention.
【図１】図１は、再循環式高速液体クロマトグラフィー
装置の構造ダイアグラムを示す図である。FIG. 1 is a diagram showing a structural diagram of a recirculation type high performance liquid chromatography apparatus.
【図２】図２は、液圧ポンプにより制御された６ポート
自動切り替え弁を有する制御器の信号時間ダイアグラム
を示す図である。FIG. 2 shows a signal time diagram of a controller with a 6-port automatic switching valve controlled by a hydraulic pump.
【図３】図３は、６ポート自動切り替え弁を有する制御
器の背面上のリモート接触クロージャの接続ダイアグラ
ムを示す図である。FIG. 3 shows a connection diagram of a remote contact closure on the back of a controller with a 6-port automatic switching valve.
【図４】図４は、再循環せずに分析された試料１２９７
３５Ａのクロマトグラムを示す図である。FIG. 4 shows a sample 1297 analyzed without recirculation.
It is a figure which shows the chromatogram of 35A.
【図５】図５は、１回の再循環により分析された試料１
２９７３５Ａのクロマトグラムを示す図である。FIG. 5 shows sample 1 analyzed by one recirculation.
It is a figure which shows the chromatogram of 29735A.
Ｅ 溶媒槽 Ｐ 液圧ポンプ Ｉ 試料注入手段 Ｃ1 鏡像異性体用クロマトグラフィーカラム Ｃ2 通常のクロマトグラフィーカラム Ｖ 制御器 Ｄ 検出手段 Ｒ 積分器 Ｗ 廃液収集器E Solvent tank P Hydraulic pump I Sample injection means C 1 Chromatography column for enantiomer C 2 Normal chromatography column V Controller D Detection means R Integrator W Waste liquid collector
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ｇ０１Ｎ 30/48 Ｇ０１Ｎ 30/48 Ｗ (72)発明者 スー−ビン・ルー 台湾、タイペイ、シー−チー、カン−ニ ン・ストリート、レイン・169、102──────────────────────────────────────────────────の Continuing on the front page (51) Int.Cl. 6 Identification symbol FI G01N 30/48 G01N 30/48 W (72) Inventor Soo-bin Lou Taiwan, Taipei, CC, KAN-NIN Street, Rain 169, 102
Claims (5)
段（Ｉ）、（３）試料注入手段（Ｉ）の試料を前方へ移
動させるために溶媒槽（Ｅ）から溶媒を汲み上げる時限
事象出力機能を有する液圧ポンプ（Ｐ）、（４）試料注
入手段から試料を収容し、互いに切り替え得る第１の切
り替え路及び第２の切り替え路を形成する６ポート自動
切り替え弁を有する制御器（Ｖ）であって、第１の切り
替え路は、試料を収容するポート２とポート３との接
続、ポート１と６との接続及びポート４と５との接続か
らなり、第２の切り替え路は、試料を収容するポート２
とポート１との接続、ポート３と４との接続及びポート
５と６との接続からなる制御器（Ｖ）、（５）制御器の
ポート３から試料を収容し、次いでポート６に試料を送
出する鏡像異性体用クロマトグラフィーカラム
（Ｃ1）、（６）制御器のポート１から試料を収容し、
次いでポート４に試料を送出する通常のクロマトグラフ
ィーカラム（Ｃ2）、（７）制御器のポート５から試料
を収容する検出手段（Ｄ）を含む光学異性体分析用再循
環式高速液体クロマトグラフィー装置であって、試料は
鏡像異性体用クロマトグラフィーカラム（Ｃ1）から溶
離するが、十分に分離しなかったときには、液圧ポンプ
（Ｐ）は、試料が十分に分離するまで第１の切り替え路
及び第２の切り替え路を順に切り替えるための信号を送
ることを特徴とする該装置。(1) Solvent tank (E), (2) Sample injection means (I), (3) Solvent from solvent tank (E) to move the sample of sample injection means (I) forward. A hydraulic pump (P) having a timed event output function for pumping up; (4) a 6-port automatic switching valve for accommodating a sample from the sample injection means and forming a first switching path and a second switching path that can be switched between each other; In the controller (V), the first switching path includes a connection between the port 2 and the port 3 containing the sample, a connection between the ports 1 and 6, and a connection between the ports 4 and 5, and a second switching path. The switching path is port 2 for storing the sample.
(V) comprising a connection between the controller and port 1; a connection between ports 3 and 4; and a connection between ports 5 and 6; An enantiomer chromatography column (C 1 ) to be delivered, (6) containing the sample from port 1 of the controller,
Then, a normal chromatography column (C 2 ) for delivering the sample to port 4 and (7) a recycle high performance liquid chromatography for optical isomer analysis including a detection means (D) for containing the sample from port 5 of the controller. The apparatus, wherein the sample elutes from the enantiomer chromatography column (C 1 ), but if not sufficiently separated, the hydraulic pump (P) switches the first switch until the sample is sufficiently separated. The apparatus for transmitting a signal for sequentially switching between a road and a second switching path.
マトグラフィー方法であって、以下の（１）時限事象出
力機能を有する液圧ポンプ（Ｐ）を使用して溶媒槽
（Ｅ）から溶媒を汲み上げ、汲み上げた溶媒は試料注入
手段（Ｉ）の試料を６ポート自動切り替え弁を有する制
御器（Ｖ）に移動させる、（２）制御器（Ｖ）を通過す
る試料は、鏡像異性体用クロマトグラフィーカラム（Ｃ
1）及び通常のクロマトグラフィーカラム（Ｃ2）の順で
分析され、次いで（３）検出手段（Ｄ）を使用して分離
した試料を検出する段階を含み、制御器（Ｖ）が優れた
分離を達成するために試料を再循環させるのが適当な時
には自動的に切り替わる６ポート自動切り替え弁を有す
ることを特徴とする該方法。2. A recirculating high performance liquid chromatography method for optical isomer analysis, comprising the following (1) a hydraulic pump (P) having a timed event output function: And the pumped solvent moves the sample of the sample injection means (I) to a controller (V) having a 6-port automatic switching valve. (2) The sample passing through the controller (V) is used for enantiomers. Chromatography column (C
1 ) and a conventional chromatography column (C 2 ), followed by (3) detecting the separated sample using a detection means (D), wherein the controller (V) has excellent separation. A 6-port automatic switching valve that automatically switches when it is appropriate to recycle the sample to achieve.
の切り替え路及び第２の切り替え路を形成し、第１の切
り替え路は試料を収容するポート２とポート３との接
続、ポート１と６との接続及びポート４と５との接続か
らなり、第２の切り替え路は、試料を収容するポート２
とポート１との接続、ポート３と４との接続及びポート
５と６との接続からなることを特徴とする請求項２に記
載の方法。3. The controller (V) has a first switchable state.
And a second switching path, wherein the first switching path comprises a connection between the port 2 and the port 3 containing the sample, a connection between the ports 1 and 6, and a connection between the ports 4 and 5, The second switching path is a port 2 for storing a sample.
3. The method according to claim 2, further comprising the steps of: connecting a port to port 1, connecting ports 3 and 4, and connecting ports 5 and 6.
られた試料は第１の切り替え路により制御器のポート２
及び３を順に介して１回目の分離のために鏡像異性体用
クロマトグラフィーカラム（Ｃ1）に流れ；試料が鏡像
異性体用クロマトグラフィーカラム（Ｃ1）から溶離す
ると、試料は、第１の切り替え路のポート６及び１を順
に介して通常のクロマトグラフィーカラム（Ｃ2）に流
れ；試料が通常のクロマトグラフィーカラム（Ｃ2）か
ら殆ど流出したら、液圧ポンプ（Ｐ）は第１の切り替え
路を第２の切り替え路に切り替えるように制御器（Ｖ）
に信号を送り；試料は、第２の切り替え路により制御器
のポート４及び３を順に介して２回目の分離の為に鏡像
異性体用クロマトグラフィーカラム（Ｃ1）に流れ；試
料が鏡像異性体用クロマトグラフィーカラム（Ｃ1）か
ら溶離すると、試料は第２の切り替え路により制御器の
ポート６及び５を順に介して検出手段（Ｄ）に流れるこ
とを特徴とする請求項３に記載の方法。4. A sample which has been moved forward by a hydraulic pump (P) is supplied to a port 2 of the controller by a first switching path.
And sequentially flow through 3 to a chiral chromatography column (C 1 ) for the first separation; as the sample elutes from the chiral chromatography column (C 1 ), the port 6 and the first switching path conventional chromatographic column (C 2) through the order flow; Once the sample is hardly flows out from the usual chromatographic column (C 2), a hydraulic pump (P) is first switched Controller (V) to switch the road to the second switching road
The sample flows to the enantiomer chromatography column (C 1 ) for a second separation through controller ports 4 and 3 in turn via a second switching path; elution from-body chromatography column (C 1), the samples according to claim 3, characterized in that flowing through the detecting means (D) via the ports 6 and 5 of the controller by the second switching path in order Method.
体用クロマトグラフィーカラム（Ｃ1）から殆ど流出し
た後、液圧ポンプ（Ｐ）は第２の切り替え路を第１の切
り替え路に切り替えるために制御器（Ｖ）に信号を送
り；試料は、第１の切り替え路により制御器のポート６
及び１を順に介して通常のクロマトグラフィーカラム
（Ｃ2）に流れ；試料が通常のクロマトグラフィーカラ
ム（Ｃ2）から殆ど流出したら、液圧ポンプ（Ｐ）は第
１の切り替え路を第２の切り替え路に切り替えるために
制御器（Ｖ）に信号を送り；試料は第２の切り替え路に
より制御器のポート４及び３を順に介して試料の三回目
の分離のために再び鏡像異性体用クロマトグラフィーカ
ラム（Ｃ1）に流れることを特徴とする請求項４に記載
の方法。5. After the second separation is completed and the sample has almost flowed out of the enantiomer chromatography column (C 1 ), the hydraulic pump (P) switches the second switching path to the first switching path. A signal to the controller (V) to switch to the controller;
And 1 in turn flows into a conventional chromatography column (C 2 ); when the sample has almost flowed out of the conventional chromatography column (C 2 ), the hydraulic pump (P) switches the first switching path to the second switching path. A signal is sent to the controller (V) to switch to the switching path; the sample is again switched to the enantiomer chromatograph for a third separation of the sample by means of the second switching path via ports 4 and 3 of the controller. the method of claim 4, characterized in that flowing through the chromatography column (C 1).
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| TW86109179A TW421718B (en) | 1997-06-30 | 1997-06-30 | Device and method of recirculating high performance liquid chromatography for analyzing optical isomers |
| TW86109179 | 1997-06-30 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH1183829A true JPH1183829A (en) | 1999-03-26 |
Family
ID=21626758
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10197914A Pending JPH1183829A (en) | 1997-06-30 | 1998-06-10 | Recirculation type high speed liquid chromatography equipment and analyzing method for optical isomer analysis |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH1183829A (en) |
| TW (1) | TW421718B (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2015042940A (en) * | 2013-07-22 | 2015-03-05 | 東ソー株式会社 | Sample injection device based on timing control and liquid chromatography including the same |
| US20190360978A1 (en) * | 2016-11-15 | 2019-11-28 | Shiseido Company, Ltd. | Multidimensional chromatographic analysis method and analysis system |
-
1997
- 1997-06-30 TW TW86109179A patent/TW421718B/en not_active IP Right Cessation
-
1998
- 1998-06-10 JP JP10197914A patent/JPH1183829A/en active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2015042940A (en) * | 2013-07-22 | 2015-03-05 | 東ソー株式会社 | Sample injection device based on timing control and liquid chromatography including the same |
| US20190360978A1 (en) * | 2016-11-15 | 2019-11-28 | Shiseido Company, Ltd. | Multidimensional chromatographic analysis method and analysis system |
| EP3543690A4 (en) * | 2016-11-15 | 2020-05-27 | Shiseido Company, Ltd. | Multidimensional chromatographic analysis method and analysis system |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| TW421718B (en) | 2001-02-11 |
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