JPH11671A - Process for removing legionella in water system - Google Patents

Process for removing legionella in water system

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JPH11671A
JPH11671A JP16551898A JP16551898A JPH11671A JP H11671 A JPH11671 A JP H11671A JP 16551898 A JP16551898 A JP 16551898A JP 16551898 A JP16551898 A JP 16551898A JP H11671 A JPH11671 A JP H11671A
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JP
Japan
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legionella
hinokitiol
amoeba
water system
bacteria
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JP16551898A
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Japanese (ja)
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Tomoo Ishima
智生 石間
Hajime Kono
源 河野
Takuro Endo
卓郎 遠藤
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AKUASU KK
Original Assignee
AKUASU KK
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a process for removing effectively bacteria of legionella family, particularly legionella in the state of coexisting with amoeba or the like. SOLUTION: In a process for removing bacteria of legionalla family in a water system, a hinokithiol compound preferably selected out of hinokithiol, its salt, its metal complex and the like is added into a water system in which amoeba and legionella are in the coexistence state, and the loadings are preferably in the range of 1-1000 mg/L, and more preferably in the range of 10-500 mg/L.

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【0001】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は冷凍装置の循環冷却
水や24時間風呂の循環温水などの、冷温水系あるいは
蓄熱水系などにおける細菌類、特にレジオネラ属菌を除
菌し、且つその増殖を防止する方法に関する。
BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention eliminates bacteria in a cold / hot water system or a heat storage water system, such as circulating cooling water for a refrigeration system and circulating hot water for a 24-hour bath, in particular, Legionella bacteria, and prevents their growth. On how to do it.

【0002】[0002]

【従来の技術】空調設備や冷蔵あるいは冷凍庫などに用
いられる冷凍装置では、熱交換を効率的に行なうため
に、開放型の冷却塔などを用いて冷却した循環水を利用
することが多い。また24時間風呂などでは加温した温
水を濾過器を通しながら循環している。かかる循環水中
には外部から微生物などが入り込んで増殖し易く、スラ
イムなどによる熱交換器の熱交換効率の低下や、濾過器
の詰まりなどの障害を起こすほか、病原細菌、特にレジ
オネラ属菌などが増殖して飛散すると、特殊な肺炎たと
えば在郷軍人病やポンテアック熱のような病気の原因と
なる。
2. Description of the Related Art In refrigeration systems used for air conditioning equipment, refrigeration or freezers, circulating water cooled using an open cooling tower or the like is often used in order to efficiently exchange heat. In a 24-hour bath, heated warm water is circulated while passing through a filter. Microorganisms and the like easily enter the circulating water and proliferate, causing heat exchange efficiency of the heat exchanger to be reduced due to slime, causing obstacles such as filter clogging, and pathogenic bacteria, particularly Legionella spp. Proliferation and dispersal cause specific pneumonia, such as Legionnaires' disease and Pontiac fever.

【0003】このような微生物による問題の対策とし
て、循環水系に抗菌剤を注入して細菌類の増殖を抑制す
る方法や、装置内を機械的に清掃洗浄しあるいは洗浄剤
を用いて洗浄する方法などが用いられてきた。そして、
レジオネラ属菌を防除する殺菌剤として、従来から種々
の化合物が提案されているが、実験室内で殺菌効果を示
す薬剤でも、実際に稼働している水系に使用してみる
と、必ずしも十分な効果が得られないことが多かった。
[0003] As a countermeasure against such problems caused by microorganisms, a method of suppressing the growth of bacteria by injecting an antibacterial agent into the circulating water system, a method of mechanically cleaning and cleaning the inside of the apparatus, or a method of cleaning with a cleaning agent. Etc. have been used. And
Various compounds have been proposed as fungicides for controlling Legionella spp., But even those that show a bactericidal effect in a laboratory are not always effective enough when used in an actual operating water system. Was often not obtained.

【0004】ところで自然界におけるレジオネラ属菌
は、アメーバなどの細菌捕食性原生動物等に捕食されて
もなお寄生して繁殖し、共生することが知られている。
しかしこのようなアメーバなどとレジオネラ属菌との共
生関係が、レジオネラ属菌の殺菌剤抵抗性にどのように
影響するかについては、明らかではなかった。
[0004] By the way, Legionella spp. In the natural world is known to parasitize, proliferate, and coexist even if they are eaten by bacterial predatory protozoa such as amoeba.
However, it was not clear how such a symbiotic relationship between amoeba and the like and Legionella spp. Affects the fungicide resistance of Legionella spp.

【0005】一方、ヒノキチオールが抗菌活性を有する
ことは良く知られており、従来から食品の保存剤(例え
ば特開昭59−22467号など)、化粧品や医薬品な
どの保存用添加剤(例えば特開平5−214364号、
特開平7−97600号、特開平7−138155号、
特開平7−173053号、特開平8−59419号、
特開平9−12423号など)、植物の病害予防剤(例
えば特開昭51−22819号、特開昭64−9010
2号、特開昭64−90103号、特開昭64−901
04号、特開平4−182408号など)、生花、野
菜、果物などの鮮度保持剤(例えば特開平5−4678
号、特開平5−221807号など)等として用いるこ
とが、それぞれ提案されている。
On the other hand, it is well known that hinokitiol has an antibacterial activity, and it has been conventionally known that food preservatives (for example, JP-A-59-22467) and preservative additives for cosmetics and pharmaceuticals (for example, No. 5-214364,
JP-A-7-97600, JP-A-7-138155,
JP-A-7-173053, JP-A-8-59419,
JP-A-9-12423, etc., and plant disease preventive agents (for example, JP-A-51-22819, JP-A-64-9010).
No. 2, JP-A-64-90103, JP-A-64-901
No. 04, JP-A-4-182408, etc.) and freshness preservatives for fresh flowers, vegetables, fruits, etc.
And Japanese Patent Application Laid-Open No. Hei 5-221807) have been proposed.

【0006】そしてまた、抗微生物剤(例えば特開平3
−77801号)、外用の殺菌消毒剤(例えば特開平6
−279271号、特開平7−53360号、特開平7
−53369号、特開平7−69873号など)、抗ウ
イルス剤(特開平8−259439号)等として用いる
提案や、排水口用除菌剤として用いる提案(特開平9−
20604号)もあるが、水系中の細菌を除去するため
に用いるという提案はなかった。
[0006] Antimicrobial agents (for example, see JP-A-3
-77801), an external germicidal disinfectant (for example,
-279271, JP-A-7-53360, JP-A-7-53360
-53369, JP-A-7-69873, etc.), a proposal for use as an antiviral agent (JP-A-8-259439), and a proposal for use as a disinfectant for drainage ports (JP-A-9-239).
No. 20604), but there was no proposal to use it to remove bacteria in water systems.

【0007】[0007]

【発明が解決しようとする課題】本発明は、水系におけ
るレジオネラ属菌、特にアメーバなどとの共存状態にお
けるレジオネラ属菌の、増殖を防止するための有効な手
段がなかったことに鑑み、かかる水系中、特にアメーバ
共存水系中のレジオネラ属菌を効果的に除菌する方法を
提供することを目的とするものである。
DISCLOSURE OF THE INVENTION The present invention has been made in view of the fact that there has been no effective means for preventing the growth of Legionella spp. In an aqueous system, particularly in the state of coexistence with amoeba and the like. It is an object of the present invention to provide a method for effectively eliminating Legionella spp. In a water system coexisting with amoeba.

【0008】[0008]

【課題を解決するための手段】上記のような本発明の目
的は、水系に対して、ヒノキチオール化合物を添加する
ことを特徴とする、水系中のレジオネラ属菌の除菌方法
によって達成することができる。そして特に、アメーバ
とレジオネラ属菌とが共存している水系に対して、ヒノ
キチオール化合物を添加することを特徴とする、水系中
のレジオネラ属菌の除菌方法によって優れた効果が達成
される。また、かかる本発明の除菌方法において、ヒノ
キチオール化合物の添加量が1〜1000mg/L の範囲
にあることが好ましい。更に、かかるヒノキチオール化
合物として、ヒノキチオール、その塩又はその金属錯体
から選ばれたものであることが好ましい。
The object of the present invention as described above is achieved by a method for removing Legionella spp. From an aqueous system, which comprises adding a hinokitiol compound to the aqueous system. it can. In particular, excellent effects are achieved by a method for removing Legionella spp. From an aqueous system, which comprises adding a hinokitiol compound to an aqueous system coexisting with amoeba and Legionella spp. In the method of the present invention, the amount of the hinokitiol compound is preferably in the range of 1 to 1000 mg / L. Further, the hinokitiol compound is preferably selected from hinokitiol, a salt thereof, and a metal complex thereof.

【0009】[0009]

【発明の実施の形態】本発明の水系中のレジオネラ属菌
の除菌方法は、水系中にヒノキチオール化合物を1〜1
000mg/L の範囲、更に好ましくは10〜500mg/
L の範囲となるよう添加するものであるが、かかる水系
中にレジオネラ属菌が単独に存在する場合は勿論のこ
と、アメーバが共存する場合でもこれらの細菌類や原生
動物等を共に防除でき、極めて効果的に水系中のレジオ
ネラ属菌を除菌することができる。
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION The method for removing Legionella spp. In an aqueous system according to the present invention comprises the steps of:
000 mg / L, more preferably 10-500 mg / L
L is added so as to be in the range of L, but it is possible to control both these bacteria and protozoa etc. in the case where Legionella sp. Alone exists in such an aqueous system, even when amoeba coexists. It is possible to very effectively remove Legionella spp. From the water system.

【0010】ここでレジオネラ属菌の除菌に用いられる
ヒノキチオール化合物としては、精製されたヒノキチオ
ールのほか、未精製のヒノキチオールや、ヒノキチオー
ルを含むヒノキ油やヒバ油などの精油などを用いること
もでき、また化学的に合成したヒノキチオール(即ち、
2−ヒドロキシ−4−イソプロピル−2,4,6−シク
ロヘプタトリエン−1−オン)を用いてもよい。これら
のヒノキチオール化合物は単独で用いてもよいほか、例
えばシクロデキストリンなどとの包接化合物の形態で用
いることもできる。また更に好ましいヒノキチオール化
合物として、ヒノキチオールの例えばナトリウム、カリ
ウムなどの塩、あるいはヒノキチオールの、例えば銅や
亜鉛、銀などの金属錯体があり、これらの金属塩や金属
錯体は昇華性が抑制されていて安定でもあるので、効果
が優れているほか取扱上でも有利である。
As the hinokitiol compound used for the elimination of Legionella bacteria, not only purified hinokitiol, but also unpurified hinokitiol and essential oils such as hinoki oil containing hinokitiol and hiba oil can be used. Also, chemically synthesized hinokitiol (ie,
2-hydroxy-4-isopropyl-2,4,6-cycloheptatrien-1-one) may be used. These hinokitiol compounds may be used alone or in the form of an inclusion compound with, for example, cyclodextrin. Further preferred hinokitiol compounds include salts of hinokitiol such as sodium and potassium, and metal complexes of hinokitiol such as copper, zinc and silver.These metal salts and metal complexes have a suppressed sublimability and are stable. However, it is not only effective but also advantageous in handling.

【0011】[0011]

【実施例】【Example】

(第1実施例)表1に示した配合組成を有するBCYE
α平板培地上に、レジオネラ(Legionella pneumophila)
を接種して36℃で2日間培養した。
(First Example) BCYE having the composition shown in Table 1
On an alpha plate medium, Legionella (Legionella pneumophila)
And cultured at 36 ° C. for 2 days.

【0012】[0012]

【表1】BCYEα平板培地 純水 1000 mL 酵母エキス 10.0 g ACESバッファー 10.0 g L−システイン1塩酸塩 0.4 g 可溶性ピロ燐酸鉄 0.25g αケトグルタル酸 1.0 g 活性炭粉末 1.5 g 寒天 15 g pH 6.9[Table 1] BCYEα plate medium pure water 1000 mL yeast extract 10.0 g ACES buffer 10.0 g L-cysteine monohydrochloride 0.4 g soluble iron pyrophosphate 0.25 g α-ketoglutaric acid 1.0 g activated carbon powder 1 0.5 g agar 15 g pH 6.9

【0013】次に、ヒノキチオール化合物として、ヒノ
キチオール、ヒノキチオールのナトリウム塩、及びヒノ
キチオールの銅錯体を用意し、また比較用の殺菌剤とし
て、10.1%の5−クロロ−2−メチル−4−イソチ
アゾリン−3−オンと3.8%の2−メチル−4−イソ
チアゾリン−3−オンとを含む薬剤(ローム・アンド・
ハース社、KATHON WT )、及び2−ブロモ−2−ニトロ
プロパン−1,3−ジオール(一般名:ブロノポール)
を用意した。
Next, hinokitiol, a sodium salt of hinokitiol, and a copper complex of hinokitiol were prepared as hinokitiol compounds, and 10.1% of 5-chloro-2-methyl-4-isothiazoline was used as a bactericide for comparison. -3 -one and 3.8% of 2-methyl-4-isothiazolin-3-one (Rohm and
Haas, KATHON WT) and 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol (generic name: bronopol)
Was prepared.

【0014】そして、前記の培養レジオネラをpH7の
燐酸緩衝液に104 個/mLオーダーとなるように接種し
たのち、その液の一部をBCYEα平板培地に塗布し、
36℃で5日間培養後のコロニー数をカウントすること
により、生菌数を測定したところ、2.9×104 個/
mLであることを確認した。次いでこの液をそれぞれの培
養フラスコに分けて入れ、殺菌剤無添加のものと、上記
の各殺菌剤をそれぞれ1、5及び10mg/L の濃度とな
るよう添加したものとを調製し、37℃で24時間振盪
培養したのち、それぞれの生菌数(個/mL)を上記と同
様にして測定した。こうして得た培養後の生菌数の値
を、表2に示した。
After inoculating the above cultured Legionella in a phosphate buffer at pH 7 to the order of 10 4 cells / mL, a part of the solution is applied to a BCYEα plate medium,
The number of viable bacteria was measured by counting the number of colonies after culturing at 36 ° C. for 5 days. As a result, 2.9 × 10 4 cells /
mL. Next, this liquid was divided and put into each culture flask, and one containing no bactericide and one containing each of the above bactericides at concentrations of 1, 5 and 10 mg / L, respectively, were prepared. After shaking culture for 24 hours, the viable cell count (cells / mL) was measured in the same manner as described above. Table 2 shows the values of the viable cell count after cultivation thus obtained.

【0015】[0015]

【表2】 [Table 2]

【0016】表2の結果から、ヒノキチオール化合物は
レジオネラに対して優れた殺菌力を示すことが分かる。
From the results shown in Table 2, it can be seen that the hinokitiol compound has excellent bactericidal activity against Legionella.

【0017】(第2実施例)表3に示した配合組成を有
するPYGC培地を入れた培養フラスコに、アメーバ
( Acanthamoeba )を接種して30℃で4日間培養し、
古い培地を捨てて新しいPYGC培地を加え、これに第
1実施例と同様にしてBCYEα平板培地上で2日間培
養したレジオネラを接種し、30℃で4日間培養して、
アメーバとレジオネラとが共生している状態とした。
(Second Example) A culture flask containing a PYGC medium having the composition shown in Table 3 was inoculated with Acanthamoeba and cultured at 30 ° C. for 4 days.
The old medium was discarded, a new PYGC medium was added, and Legionella cultured on a BCYEα plate medium for 2 days was inoculated in the same manner as in Example 1, and cultured at 30 ° C. for 4 days.
Amoeba and Legionella coexist.

【0018】この培養フラスコ内の培地を攪拌してアメ
ーバを壁面から剥離し、培養液の一部を血球計数盤に滴
下して顕微鏡下でアメーバ数を測定したところ、アメー
バ数は2.0×106 個/mLであった。また、培養液の
別の一部を取り出し、10000rpm で20分間の遠心
操作を行ってアメーバを破壊したのち、BCYEα平板
培地に塗布し、36℃で5日間培養後のコロニー数をカ
ウントすることにより、レジオネラの菌数を測定したと
ころ、2.6×106 個/mLであった。
When the medium in the culture flask was stirred to remove the amoeba from the wall surface, a part of the culture solution was dropped on a hemocytometer and the number of amoeba was measured under a microscope. It was 10 6 cells / mL. Further, another part of the culture solution was taken out, centrifuged at 10,000 rpm for 20 minutes to destroy the amoeba, applied to a BCYEα plate medium, and counted for the number of colonies after culturing at 36 ° C. for 5 days. , Legionella was 2.6 × 10 6 cells / mL.

【0019】[0019]

【表3】PYGC培地 純水 950 mL プロテアーゼペプトン 10.0 g 酵母エキス 10.0 g 50%ブドウ糖水溶液 20 mL L−システイン1塩酸塩 0.95g 塩化ナトリウム 5.0 g 0.5モル燐酸水素2ナトリウム水溶液 20 mL 0.5モル燐酸2水素カリウム水溶液 10 mL 0.4モル塩化マグネシウム水溶液 5 mL 0.4モル塩化カルシウム水溶液 1 mL pH 6.9[Table 3] PYGC medium pure water 950 mL Protease peptone 10.0 g Yeast extract 10.0 g 50% dextrose aqueous solution 20 mL L-cysteine monohydrochloride 0.95 g Sodium chloride 5.0 g 0.5 M hydrogen phosphate 2 Sodium aqueous solution 20 mL 0.5 M potassium dihydrogen phosphate aqueous solution 10 mL 0.4 M magnesium chloride aqueous solution 5 mL 0.4 M calcium chloride aqueous solution 1 mL pH 6.9

【0020】前記のアメーバとレジオネラとが共生した
培地を入れた培養フラスコに、第1実施例と同じ各殺菌
剤をそれぞれ10、30及び100mg/L の濃度となる
ようそれぞれ添加したもの、及び殺菌剤無添加のものを
調製し、30℃で7日間培養した。そして、顕微鏡観察
によりアメーバの形態を調べた後、培養液を攪拌してア
メーバとレジオネラとを均一に分散させ、その培養液の
一部を取り出し、10000rpm で20分間の遠心操作
を行ってアメーバを破壊したのち、BCYEα平板培地
に塗布し、36℃で5日間培養後のコロニー数をカウン
トすることによりレジオネラの生菌数(個/mL)を測定
し、その結果を表4に示した。
A culture flask containing a culture medium in which the amoeba and Legionella coexist was added with the same bactericide as in the first embodiment at a concentration of 10, 30, and 100 mg / L, respectively. An agent-free product was prepared and cultured at 30 ° C. for 7 days. Then, after examining the form of the amoeba by microscopic observation, the culture solution is stirred to uniformly disperse the amoeba and Legionella, and a part of the culture solution is taken out and centrifuged at 10,000 rpm for 20 minutes to remove the amoeba. After disruption, the cells were spread on a BCYEα plate medium and cultured at 36 ° C. for 5 days. The number of colonies was counted to determine the number of viable Legionella cells (cells / mL). The results are shown in Table 4.

【0021】その一方で上記の均一に混合分散させた培
養液の別の一部を、そのまま新しいPYGC培地に接種
して30℃で7日間培養し、アメーバの生死状態を調べ
た。そして前記の顕微鏡観察結果とあわせて、栄養体と
して生存している状態を+、嚢子化して生存している状
態を±、死滅している状態を−として、表4に併せて示
した。
On the other hand, another part of the above-mentioned uniformly mixed and dispersed culture solution was directly inoculated into a new PYGC medium and cultured at 30 ° C. for 7 days, and the viable state of amoeba was examined. In addition to the results of the above microscopic observation, Table 4 also shows the state of living as a vegetative body as +, the state of living as a cyst as ±, and the state of dying as −.

【0022】[0022]

【表4】 [Table 4]

【0023】表4の結果から、レジオネラに対して優れ
た殺菌力を示す従来公知の殺菌剤が、アメーバ共存状態
ではレジオネラを有効に除菌することができないのに対
し、ヒノキチオール化合物はアメーバに対しても殺生力
があり、アメーバ共存状態のレジオネラをも効果的に除
菌でき、特にヒノキチオールの金属錯体が優れた効果を
示すことが分かる。
From the results shown in Table 4, it can be seen that a conventionally known fungicide having excellent bactericidal activity against Legionella cannot effectively eliminate Legionella in the presence of amoeba, whereas a hinokitiol compound does not effectively dissolve Legionella. However, it has a biocidal power and can effectively remove Legionella coexisting with amoeba. It can be seen that a metal complex of hinokitiol exhibits an excellent effect.

【0024】[0024]

【発明の効果】本発明は、水系中にヒノキチオール化合
物を添加することにより、水系中のレジオネラ属菌を殺
菌するもので、従来のレジオネラ属菌用の殺菌剤では除
菌できなかったようなアメーバ共存下の水系中のレジオ
ネラ属菌を、効果的に除菌することができるという効果
がある。
According to the present invention, a hinokitiol compound is added to an aqueous system to sterilize Legionella spp. In an aqueous system, and the amoebic bacterium cannot be removed by a conventional fungicide for Legionella spp. There is an effect that Legionella spp. In the coexisting water system can be effectively eliminated.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 FI C02F 1/50 532 C02F 1/50 532L 540 540B A01N 35/06 A01N 35/06 ──────────────────────────────────────────────────の Continued on the front page (51) Int.Cl. 6 Identification code FI C02F 1/50 532 C02F 1/50 532L 540 540B A01N 35/06 A01N 35/06

Claims (4)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項1】 水系に対して、ヒノキチオール化合物を
添加することを特徴とする、水系中のレジオネラ属菌の
除菌方法。
1. A method for removing Legionella spp. From a water system, comprising adding a hinokitiol compound to the water system.
【請求項2】 アメーバとレジオネラ属菌とが共存して
いる水系に対して、ヒノキチオール化合物を添加するこ
とを特徴とする、請求項1に記載の水系中のレジオネラ
属菌の除菌方法。
2. The method according to claim 1, wherein a hinokitiol compound is added to an aqueous system in which amoeba and Legionella coexist.
【請求項3】 ヒノキチオール化合物の添加量が1〜1
000mg/L の範囲にある、請求項1又は2に記載の水
系中のレジオネラ属菌の除菌方法。
3. The amount of the hinokitiol compound to be added is 1 to 1.
3. The method according to claim 1, wherein the amount of Legionella is in the range of 000 mg / L.
【請求項4】 ヒノキチオール化合物がヒノキチオー
ル、その塩又はその金属錯体から選ばれたものである、
請求項1乃至3のいずれかに記載の水系中のレジオネラ
属菌の除菌方法。
4. The hinokitiol compound is selected from hinokitiol, a salt thereof, or a metal complex thereof.
The method for removing bacteria of the genus Legionella in an aqueous system according to any one of claims 1 to 3.
JP16551898A 1998-06-12 1998-06-12 Process for removing legionella in water system Withdrawn JPH11671A (en)

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