JPH11505225A - 糖ペプチドおよびその誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、式(Ｉ)：Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ−[(Ｘ)_n−Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ]_m−(Ｘ)_n−Ｗ（式中、Ｗは、独立に、（ａ）糖；（ｂ）アリール、アラルキル；（ｃ）任意に置換された炭素数１〜８のアルキル；（ｄ）炭素数５〜７の環状アルキル、ヘテロ環状アルキル）；Ｙは、独立に、−ＮＲ³−Ｃ(Ｏ)−および−Ｃ(Ｏ)−ＮＲ³−よりなる群から選ばれる；Ｘは、（ａ）アリール、アラルキル；（ｂ）１〜３の置換基で任意に置換された炭素数１〜８のアルキル、よりなる群から選ばれた２官能性または多官能性基；Ｒは、−Ｈ、または低級アルキル、低級アリール、および低級アラルキル；Ｒ'は、独立に、−Ｈ、炭素数１〜４の低級アルキル、炭素数２〜１９のアラルキル、および−Ｃ(Ｏ)Ｒ"よりなる群から選ばれる；Ｒ"は、炭素数１〜４の低級アルキル；およびＲ³は、−Ｈ、炭素数１〜８のアルキル、および炭素数５〜８のアラルキルよりなる群から選ばれる；および薬理学的に許容しうるその塩）で示される糖模倣糖ペプチドを記載する。

Description

【発明の詳細な説明】 糖ペプチドおよびその誘導体 本願出願は、１９９５年５月１０日に出願した出願番号第０８／４３８,６６ ９号（その全内容を参照のため本明細書中に引用する）の一部継続出願である。発明の技術分野 本発明は、アミド結合を含む新規なクラスの炭水化物誘導体、糖ペプチド（sa ccharopeptides）、並びにこれら糖ペプチドの製造方法、およびこれら糖ペプチ ドを用いてある種の疾患を処置する方法およびタンパク質を精製する方法に関す る。発明の背景 天然に存在する炭水化物は、遊離の糖としてか、または他の成分、たとえば他 の糖に連結した単糖単位（オリゴ糖または多糖を形成）、他のタンパク質に連結 した単糖単位（糖タンパク質）、他の脂質に連結した単糖単位（糖脂質）もしく は他の有機分子に連結した単糖単位（たとえば、ヌクレオシド、ステロイドグリ コシド、フラボノイド等）のいずれかの形態として存在する。糖（単糖）は、互 いに、または他の種類の化合物にグリコシド結合により結合する。最も一般的に は、この結合はＯ−グリコシド結合であるが、ヘテロ原子置換（Ｓ、Ｎ、Ｃ）が 環外および環内の両方で起こることもある。 炭水化物は多くの薬理活性を有する。これら活性には、好中球の漸増から炎症 部位となるセレクチンへの結合が含まれる。他の薬理活性としては、細胞表面上 のタンパク質へ炭水化物、ヘパリンおよびヘパリン硫酸が結合して形態、増殖お よび移動を含む種々の細胞機能を調節することが含まれる。ヘパリンおよびヘパ リン硫酸はまた、有用な抗血栓症活性をも有する。 さらに、ヘパリンおよびヘパラン硫酸は成長因子およびヘパリナーゼと相互作 用して血管形成および腫瘍増殖を媒体する。炭水化物はまた、ウイルスが細胞に 付着し感染するための重要な細胞表面リガンドでもある。他の活性に加えて、炭 水化物はまた抗生物質および免疫調節剤の重要な部分でもある。これら薬理活性 については下記にさらに詳細に記載する。炭水化物媒体白血球接着の糖模倣（Glycomimetic）インヒビター 癌、自己免疫疾患を含むある種の疾患において、および炎症応答において、受 容体のファミリー、セレクチン（ＬＥＣＡＭｓ）を確立する非常に多くのデータ が蓄積されている。このファミリーの３つの知られた成員であるＬ−セレクチン （ＬＥＣＡＭ−１、ＬＡＭ−１、ｇｐ９０ＭＥＬ）、Ｅ−セレクチン（ＬＥＣＡ Ｍ−２、ＥＬＡＭ−１）およびＰ−セレクチン（ＬＥＣＡＭ−３、ＧＭＰ−１４ ０、ＰＡＤＧＥＭ）は、それぞれ、カルシウム依存性レクチン（Ｃ−レクチン） 、ＥＧＦ様ドメイン、および幾つかの補体結合タンパク質様ドメインに対してホ モロジーを有するドメインを含む（ベビラッカ（Ｂevilacqua）ら、Ｓcience（ １９８９）２４３：１１６０−１１６５；ジョンストン（Ｊohnston）ら、Ｃell （１９８９）５６：１０３３−１０４４；ラスキー（Ｌasky）ら、Ｃell（１９ ８９）５６：１０４５−１０５５；テッダー（Ｔedder）ら、Ｊ.Ｅxp.Ｍed.（１ ９８９）１７０：１２３−１３３、ダスグプタ（Ｄasgupta）ら、Ｅxp.Ｏpin.Ｉ nvest.Ｄrugs （１９９４）３（７）：７０９）。セレクチンは特定の炭水化物リ ガンドに結合すること、およびこのことが各セレクチンの生物学的活性を説明す ることが提唱されている。それゆえ、リガンドのセレクチンへの結合を妨害する かまたは防ぐ薬剤は、種々の疾患を治療するための有用な医薬である。 接着分子のセレクチンファミリーは、活性化された内皮細胞上での白血球のロ ーリング（rolling）を開始させることにより急性炎症に関与している。このこ とは、Ｐ−セレクチンが障害組織への好中球の漸増において重要な役割を果たし ている虚血再灌流障害（ischemia reperfusion injury）の研究において特に明 らかである。最近、ブエルク（Ｂuerke,Ｍ.）らは、虚血再灌流障害などの炎症 状態におけるセレクチンの重要な役割をネコにおいて示している（ブエルクら、Ｊ.Ｃlin.Ｉnvest .（１９９４）９３：１１４０）。ツルネン（Ｔurunen,Ｊ.Ｐ. ）らは、腎臓移植において急性拒絶反応の間の部位特異的なリンパ球の管外遊出 におけるｓＬｅＸおよびＬ−セレクチンの役割を示している（ツルネンら、Ｅur .Ｊ.Ｉmmunol .（１９９４）２４：１１３０）。Ｐ−セレクチンは、特に急性肺 障害に関連して中心的に関与していることが示されている。マリガン（Ｍulliga n, Ｍ.Ｓ.）らは、齧歯類の肺障害モデルにおいて抗Ｐ−セレクチン抗体を用いて強 力な防御効果を報告している（マリガンら、Ｊ.Ｃlin.Ｉnvest.（１９９１）９ ０：１６００、マリガンら、Ｎature（１９９３）３６４：１４９）。炎症およ び血栓症におけるＰ−セレクチンの中心的な役割はパラブリカ（Ｐalabrica,Ｔ. ）らによって示されている（パラブリカら、Ｎature（１９９２）３５９：８４ ３）。 Ｅ−セレクチンは、感染および障害に応答した初期の好中球の管外遊出に関係 している（ベビラッカら、Ｓcience（１９８９）２４３：１１６０）。実際、グ ンデル（Ｇundel,Ｒ.Ｈ.）らは、Ｅ−セレクチンに対する抗体が喘息の霊長類モ デルにおいて好中球の流入を阻止し、それゆえ炎症応答の結果としての気道閉塞 を防ぐのに有益であることを示している（グンデルら、Ｊ.Ｃlin.Ｉnvest.（１ ９９１）８８：１４０７）。 Ｌ−セレクチンリガンドおよびＥ−またはＰ−セレクチンリガンドの単球上の 存在は、これら受容体−リガンド相互作用が慢性炎症に関係していることを示唆 している。このことは、皮膚科学的状態におけるＥ−セレクチンの慢性的発現お よび慢性関節リウマチ患者からの関節滑液内皮上でのＰ−セレクチン発現の知見 により支持されている。ラスキー、Ａnnu.Ｒev.Ｂiochem.６４：１１３−３９（ １９９５）；白血球接着の生理学および病理生理学、ニエル・グランジエ（Ｄ. Ｎiel Ｇrangier）およびデールト・シュミットショーンバイン（Ｄeert Ｓchmi d Ｓchonbein）編、オックスフォードユニバーシティープレス、ニューヨーク（ １９９５）中のマイケル・フォレスト（Ｍichael Ｆorrest）およびジェームズ ・シー・ポールソン（Ｊames Ｃ.Ｐaulson）の「接着分子のセレクチンファミリ ー」 セレクチンはある種の炭水化物に結合することが知られている。Ｅ−セレクチ ンは、下記構造IIIで示されるシアリルルイスｘ（Ｓialyl Ｌewis ｘ）（ｓＬｅ Ｘ）四糖エピトープを認識するレクチン様ドメインを有する。 ｓＬｅ^XがＥ−セレクチンに結合する能力は、ロウェ（Ｌowe）ら、Ｃell（１ ９９０）６３：４７５；フィリップス（Ｐhillips）ら、Ｓcience（１９９０） ２５０−１１３０；ワルツ（Ｗalz）ら、Ｓcience（１９９０）２５０：１１３ ２；およびチレル（Ｔyrrell）ら、Ｐroc.Ｎatl.Ａcad.Ｓci.ＵＳＡ（１９９１ ）８８：１０３７２に記載されている。 Ｅ−セレクチンおよびＰ−セレクチンの両者はまた、下記構造IVで示される異 性体四糖ｓＬｅ^aを認識することも示されている（バーグ（Ｂerg）ら、Ｊ.Ｂiol .Ｃhem .（１９９１）２６５：１４８６９；ハンダ（Ｈanda）ら、Ｂiochem.Ｂio phys.Ｒes.Ｃommun .（１９９１）１８１：１２２３）。 Ｌ−セレクチンおよびＰ−セレクチンはまたｓＬｅ^X含有リガンドにも結合す るが、これらセレクチンはシアリル化および硫酸化Ｌｅ^xおよびＬｅ^a構造並びに 他の硫酸化または荷電炭水化物を含む広範囲の天然リガンドに対して特異性を有 する（バーキ（Ｖarki）ら、Ｐroc.Ｎatl.Ａcad.Ｓci.ＵＳＡ ９１：７３９０− ７３９７（１９９４）；およびローゼン（Ｒosen）ら、Ｃurrent Ｏpinion in Ｃell Ｂiology （１９９４）６：６６３−６７３）。ｓＬｅ^XおよびｓＬｅ^aは、 その三次元立体配置において構造類似性を有する（バーグら、Ｊ.Ｂiol.Ｃhem. （１９９１）２６６：１４８６５−１４８７２）。詳しくは、これら四糖中の２ つの機能性エピトープであるシアル酸およびフコースは、セレクチンによる認識 に適した仕方で空間的に並置されている。最も重要なことに、これら両四糖にお いて、四糖のラクトースコアに付随する、シアル酸とフコースとを機能的に分離 する４〜１２の原子が同定された。これら原子の置換によって本明細書中に記載 し特許請求しているような糖模倣化合物が導かれると仮定された。４〜１２が好 ましい原子数であるが、最も好ましいのは下記図に示すように６〜８原子である 。この原子の数は、シアル酸のＯ−グリコシドとフコースのＯ−グリコシドとの 間の原子の数をいう。 たとえば、ｓＬｅ^X（IIIに示す）またはＲ＝ＯＨであるその修飾形（ｓＬｅ^X Ｇｌｃ）の構造を詳しく調べると、ＲがＮＨＡｃまたはＯＨである下記構造III （ａ）においてエピトープ、すなわちα−Ｎｅｕ５ＡｃおよびＬ−フコースは６ つの原子（Ｎｏ．１〜６）または８つの原子（Ｎｏ.i〜viii）により連結されて いる。 この知見に基づき、セレクチンのレクチンドメイン上の対応エピトープが、リ ガンド構造中の６〜８原子の維持によって天然に存在するリガンドとは構造の全 く異なる活性リガンドが得られるように、同様の三次元立体配置で空間配置され ていることが導き出された。 ｓＬｅ^XおよびｓＬｅ^aは、フコースおよびシアル酸官能基が単一の面上に配置 され、シアル酸上のカルボン酸のカルボニル炭素とフコースのＣ−３との間の距 離が１０〜１２Åと測定されるような特別の関係にて両官能基を呈示することも 示された（ラオ（Ｒao）ら、Ｊ.Ｂiol.Ｃhem.（１９９４）２６９（３１）： １９６６３）。本発明のある種の化合物は、フコースまたはフコース模倣物から 好ましくは８−１４Å、より好ましくは９−１１Åにある酸官能基模倣物を有す る。この距離は、酸模倣物のカルボニル炭素からフコースのＣ−３炭素またはそ の模倣物上の等価物までを測定したものである。これら２つの官能基はペプチド 結合により連結されている。 本発明の糖模倣化合物は、セレクチンリガンド結合のために必要な特別な要件 を満足させる適当な基の結合という観点において、相当の多様性および容易さを 提供する。 セレクチンリガンドの明らかな医学的重要性に鑑み、その活性を促進し、また はその活性に必要なセレクチンリガンドに付随する決定的な物理／化学的パラメ ータを同定するための相当の努力がなされ、現在も続けられている（ドゥ・フリ ース（ＤeＦrees,Ｓ.Ａ.）ら、Ｊ.Ａm.Ｃhem.Ｓoc.（１９９３）１１５：７５４ ９）。この努力は、少なからぬ部分において、廉価に製造できるセレクチンリガ ンドを得る必要性に駆られて行われている（１９９４年３月２２日発行の米国特 許第５,２９６,５９４号；アランソン（Ａllanson,Ｎ.Ｍ.）ら、Ｔetrahedron Ｌett .（１９９３）３４：３９４５；マッサー（Ｍusser,Ｊ.Ｈ.）ら、Ｃurrent Ｐharmaceutical Ｄesign（１９９５）２２１−２３２）。一般に酵素合成また は化学合成のいずれかにより天然のｓＬｅ^Xを商業ベースで製造することは、多 くの非常に複雑な反応が関与することから非常に高価になるであろうと思われる 。ｓＬｅ^Xの模倣については多くの論文が刊行されている。１９９６年４月１６ 日発行の米国特許第５,５０８,３８７号；ラオら、Ｍed.Ｃhem.Ｒes.（１９９１ ）１：１−８；ラオら、Ｊ.Ｂiol.Ｃhem.（１９９４）２６９（３１）：１９６ ６３−１９６６６；ウチヤマ（Ｔ.Ｕchiyama）ら、Ｊ.Ａm.Ｃhem.Ｓoc.（１９９ ５）１１７：５３９５−５３９６；ランファル（Ｊ.Ｙ.Ｒamphal）ら、Ｊ.Ｍed. Ｃhem .（１９９４）３７：３４５９−３４６３；レビー（Ｄ.Ｅ.Ｌevy）ら、Ａn n.Ｒeports Ｍed.Ｃhem .（１９９４）２９：２１５−２２４；デュプラ（Ｂ.Ｄe pre）ら、Ｂioorg.Ｍed.Ｃhem.Ｌet.（１９９６）６（５）：５６９−５７２； バークベック（Ａ.Ａ.Ｂirkbeck）ら、Ｂioorg.Ｍed.Ｃhem.Ｌet. （１９９６）５（２２）：２６３７−２６４２；スプレンガール（Ｕ.Ｓprengar d）ら、Ｂioorg.Ｍed.Ｃhem.Ｌet.（１９９６）６（５）：５０９−５１４；ウ ー（Ｓ.−Ｈ.Ｗu）ら、Ａng.Ｃhem.Ｉnt.Ｅd.Ｅngl.（１９９６）３５（１）： ９６−９８；およびラガン（Ｒagan）ら、Ｂioorg.Ｍed.Ｃhem.Ｌet.（１９９４ ）４（２１）：２５６３−２５６６。それゆえ、本明細書に記載するようなｓＬ ｅＸの非オリゴ糖模倣物に向けたアプローチは、強力で、安価で、安定かつ生体 利用性のある薬剤候補を提供する可能性を有する。ヘパリンおよびヘパラン硫酸配列模倣治療剤 ヘパリンおよびヘパラン硫酸（ＨＳ）は、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）タン パク質と（クジェレン（Ｋjellen）およびリンダール（Ｌindahl）、（１９９１ ）Ａnnu.Ｒev.Ｂiochem.６０：４４３）、成長因子と（ボビック（Ｂobik）およ びカンプベル（Ｃampbell）、Ｐharmacological Ｒev.（１９９３）４５：１） 、成長因子高親和性受容体と（スピバク−クロイツマン（Ｓpivak−Ｋroizman） ら、Ｃell（１９９４）７９：１０１５）、酵素（白血球プロテアーゼを含む） と（レジニ（Ｒdini）ら、Ｂiochem.Ｊ.（１９８８）２５２：５１５）、および プロ炎症メディエーター（proinflammatory mediators）（ミラー（Ｍiller）お よびクランゲル（Ｋrangel）、Ｃritical Ｒev.Ｉmmunol.（１９９２）１２：１ ７）と相互作用することにより、細胞機能の過多（plethora）を調節しうるグリ コサミノグリカン（ＧＡＧｓ）のクラスを構成する。これら複雑な炭水化物は、 たいていの場合、タンパク質のセリン残基に結合してプロテオグリカンを形成す ることがわかっている。ヘパラン硫酸プロテオグリカン（ＨＳＰＧｓ）は基底膜 およびストローママトリックス中に分布し、ほとんどすべての細胞表面と結合し ている。ヘパラン硫酸プロテオグリカンはまた、アルツハイマー病患者からのア ミロイドプラーク中でも認められている。スノウ（Ｓnow）ら、Ｎeurobiology Ａging （１９８９）１０：４８１−４９７。ヘパラン硫酸プロテオグリカンはそ のＨＳ鎖により多くの因子と相互作用して、血液凝固（マーカム（Ｍarcum）お よびローゼンバーグ（Ｒosenberg）（１９８８）、「血管壁の抗凝血活性ヘパリ ン様分子の生化学、細胞生物学および病理生理学」、Ｈeparin、レーンおよびリ ンダー ル（編）、ＣＲＣプレス、ボカラトン、フロリダ中、２７５−２９４頁）、白血 球活性化（タナカ（Ｔanaka）ら、Ｉmmunol.Ｔoday（１９９３）１４：１１１） 、細胞の運動性（マカベ（Ｍakabe）ら、Ｊ.Ｂiol.Ｃhem.（１９９０）２６５： １４２７０）および細胞増殖（ラプレーガー（Ｒapraeger）ら、Ｓcience（１９ ９１）２５２：１７０５）などの細胞および組織特異的な事象を制御している。 これら特性の多くは抗凝血活性に関連しないので、ヘパリンの非抗凝血活性に基 づいて治療薬を開発することに相当の関心が存在する（リンダールら、Ｔhromos is Ｒes .（１９９４）７５（１）：１−３２、レーンおよびアダムズ、Ｎ.Ｅngl .Ｊ.Ｍed .（１９９３）３２９（２）；１２９−１３０、チレルら、ＴiＰＳ（１ ９９５）（１６）；１９８−２０４）。ＨＳおよびヘパリン関連構造の生物学的 特性は、ＨＳおよびヘパリン関連構造を新規医薬開発の魅力的な先例としている 。 ヘパリンはグリコサミノグリカンの一般的なヘパラン硫酸クラスの生合成的に より成熟した形態である。ヘパラン硫酸またはヘパリンの小さな定められた配列 が特定の生物学的特性を有する可能性は、ヘパリン−アンチトロンビンIII（Ａ ＴＩＩＩ）相互作用に関与する充分に特徴付けられた五単糖配列、およびヘパリ ン−ｂＦＧＦ相互作用に関与する最小の六単糖配列によって支持されている。こ れら結果は、炭水化物由来の模倣物およびヘパリン配列模倣物が血栓症疾患を治 療するための抗血栓症剤および血管形成および癌腫瘍増殖を抑制するためのｂＦ ＧＦアンタゴニストを製造するうえでの有効な戦略となりうる。 ヘパリンは広く用いられている抗凝血および抗血栓症治療剤である。ヘパリン は、ある種のセリンプロテアーゼインヒビター（セルピン（serpins））が凝血 に関与するセリンプロテアーゼに結合しそれを阻害する速度を約１０００倍、触 媒作用により増加させることにより抗凝血剤として機能する（ブリン（Ｍ.−Ｃ. Ｂourin）およびリンダール、Ｂiochem.Ｊ.（１９９３）２８９：３１３−３３ ０）。ヘパリン中の構造配列は、触媒作用に関与するこれらセルピン補因子との 複合体の形成を媒体する。このようにして、セルピン抗トロンビンIII（ＡＴIII ）はプロテアーゼ第IIａ因子および第Ｘａ因子をより有効に阻害し、一方、セル ピンヘパリン−補因子II（ＨＣII）はプロテアーゼ第IIａ因子（トロンビン）を より有効 に阻害する。ヘパリンのＡＴIIIへの結合はヘパリン多糖鎖中に含まれる特定の よく定められた五単糖配列により行われるが、ヘパリンのＨＣIIへの結合は比較 的非特異的で非局在化した静電相互作用により行われる。 低分子量ヘパリン（以下、「ＬＭＷヘパリン」という）（臨床的実際における 低分子量ヘパリン、ドゥトレメピウチ（Ｃ.Ｄoutremepuich）編、マーセル・デ ッカー、１９９２）および合成ヘパリン配列（バン・ベッケル（van Ｂoeckel） およびペチトウ（Ｐetitou）、Ａng.Ｃhem.（１９９３）、３２（１２）：１６ ７１−１８１８）は、ヘパリンの臨床的使用に伴うある種の合併症、たとえば、 出血やヘパリン誘発血小板減少症、さらに慢性的な使用では骨粗鬆症を回避する ためのアプローチとして探求されている。 ＬＭＷヘパリンは抗血栓症の適応症として臨床的に有効であることがわかって いるが（グリーン（Ｄ.Ｇreen）ら、Ｐharmacological Ｒeviews（１９９４）４ ６（１）：８９−１０９）、出血および血小板減少症の懸念は除かれていない。 主要な努力は、ヘパリンおよび種々の配列アナログの最小ＡＴIII結合五単糖を 合成して（バン・ベッケルおよびペチトウ、Ａng.Ｃhem.（１９９３）３２（１ ２）：１６７１−１８１８１）治療剤開発のために単一の化合物を提供すること に向けられている。このアプローチは、非常に強力な抗凝血剤および抗血栓症剤 の候補であるオリゴ糖ベースの配列を提供している。しかしながら、これらオリ ゴ糖は天然の五単糖に比べて単純化されているとはいうものの商業ベースの合成 の実際性、および経口でのバイオアベイラビリティーの欠如は主要な未解決問題 のままである。 それゆえ、ＡＴIII結合五単糖の非グリコシドヘパリン配列模倣物は、改良さ れた抗血栓症治療剤の可能性を有する。天然および合成ＡＴIII結合五単糖を下 記に示す。 ｂＦＧＦ拮抗作用の概観 ｂＦＧＦ（塩基性線維芽細胞増殖因子）などのヘパリン結合増殖因子（ＨＢＧ Ｆ）とヘパラン硫酸およびヘパリンとの相互作用は、これらタンパク質のマイト ジェン活性を仲介するのに必要であることが知られている（ウィルキー（Ａ.Ｏ. Ｍ．Ｗilkie）ら、Ｃurrent Ｂiology（１９９５）、５（５）：５００−５０６ 、イシハラ（Ｍ.Ｉshihara）、Ｔrends in Ｇlycoscience and Ｇlycotechnolog y （１９９３）、５（２５）：３４３−３５４）。ｂＦＧＦとヘパラン硫酸およ びヘパリンとの相互作用は六単糖配列により仲介されること（チレルら、Ｊ.Ｂi ol.Ｃhem .（１９９３）２６８（７）：４６８４−４６８９、マッカラーナ（Ｍ. Ｍaccarana）、カス（Ｂ.Ｃasu）およびリンダール、Ｊ.Ｂiol.Ｃhem.（１９９ ３）２６８（３２）：２３８９８−２３９０５）、およびかかる六単糖は単離さ れたときにｂＦＧＦアンタゴニスト特性を保持しており、ポリマー性ヘパラン硫 酸に付随するｂＦＧＦ刺激特性を失うこと（イシハラ、Ａnal.Ｂiochem.（１９ ９２）２０２：３１０−３１５、イシハラら、Ｇlycobiology（１９９４）４（ ４）：４５１−４５８）が確立されている。天然および単離したｂＦＧＦ結合六 単離配列を下記に示す。 ヘパラナーゼ阻害の概観 ヘパラナーゼはヘパラン硫酸（「ＨＳ」）およびヘパリン鎖の内部のグリコシ ド結合を加水分解するエンドグリコシダーゼのファミリーであり、種々の組織中 、および正常および悪性の血液由来（blood-borne）細胞中に認めることができ る（ナカジマ（Ｎakajima）ら、Ｊ.Ｃell Ｂiochem.（１９８８）３６：１５７ ；ブロダブスキー（Ｖlodavsky）ら、Ｉnvasion Ｍetastasis（１９９２）１２ ：１１２）。これら酵素は、塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）や血管内皮 増殖因子（ＶＥＧＦ）などのヘパリン結合増殖因子を細胞外マトリックス（ＥＣ Ｍ）から放出することによって新規の血管形成（脈管形成）に関与すること（バ シュキン（Ｂashkin）ら、Ｂiochem.（１９８９）２８：１７３７）および内皮 下基底膜およびＥＣＭの再構築においてセリンプロテアーゼおよびマトリックス メタロプロテアーゼの活性を補償すること（ブラッド（Ｂlood）およびゼッター （Ｚetter）、Ｂiochim.Ｂiophys.Ａcta.（１９９０）１０３２：８９）が提唱 されている。転移性の腫瘍細胞はマトリックス分解酵素（エンドグリコシダーゼ およびプロテアーゼ）を利用して内皮下基底膜、ＥＣＭおよび間質ストローマへ 浸潤していくことにより脈管構造から出て行くこともまた提唱されている（リオ ッタ（Ｌiotta）ら、Ｃell（１９９１）６４：３２７）。この浸潤性の表現型は 、多くの腫瘍細胞変異体におけるヘパラナーゼ活性の増加レベルと相関関係があ ることが示されている（ナカジマら、Ｊ.Ｃell.Ｂiochem.（１９８８）３６：１ ５７）。内皮ヘパラナーゼはまたアテローム性動脈硬化症においてある種の役割 を果たすことが示唆されている（シババム（Ｓivavam）ら、Ｊ.Ｂiol.Ｃhem.（ １９９５）２７０（５０）：２９７６０−２９７６５）。それゆえ、ヘパラナー ゼインヒビターはアテローム性動脈硬化症を防止または治療するために用いるこ とができる。 ヘパリンは、インビトロでヘパラナーゼ阻害活性を示すこと（イリムラ（Ｉri mura）ら、Ｂiochem.（１９８６）２５：５３２２）、内皮細胞（ＥＣ）ＥＣＭ ＨＳＰＧ（ヘパラン硫酸プロテオグリカン）分解を抑制すること（バーーナー（ Ｂar−Ｎer）ら、Ｉnt.Ｊ.Ｃancer（１９８７）４０：５１１；パリッシュ（Ｐa rish）ら、１９８７）、および転移性腫瘍細胞の肺への転移を阻止すること（イ リムラら、上掲）が示されている。ヘパリンはインビボでは、その抗凝血能およ び出血性合併症を誘発する可能性のために比較的低濃度でしか投与することがで きない（レビンら（１９８９）「ヘパリン誘発性出血」、Ｈeparin、レインおよ びリンダール（編）、ＣＲＣプレス、ボカ・レートン、フロリダ中、５１７−５ ３１頁）。ヘパリン投与に伴う過剰出血のリスクなしに高濃度での投与を可能に するには、最小酵素−ヘパラン硫酸結合配列の小分子模倣物を同定することが極 めて価値あることである。一般に、ヘパラナーゼ阻害活性は修飾ヘパリンポリマ ー中、およびヘパリン由来のオリゴ糖中に存在することが示されている。最近、 公知のノイラミニダーゼインヒビターであるシアスタチン（siastatin）および その関連構造が、マウスＢ１６−Ｆ１０転移性癌細胞株由来のヘパラナーゼの活 性を阻害することが報告されている（クマセ（Ｙ.Ｋumase）ら、Ｊ.Ａntibiotic s （１９９６）、４９（１）５４−６０、および６１−６４）。 ヘパラナーゼは、腫瘍細胞の増殖、転移、および腫瘍血管新生に関係している ことが示されている。文献記載の豊富なヘパラナーゼ「インヒビター」である（ ナカジマら、１９８８）ヘパリン中のどの化学基がヘパラナーゼ阻害活性に貢献 しているかを評価するためのヘパラナーゼの定量アッセイが開発された。そのよ う な情報は、より優れたヘパラナーゼインヒビターの開発へとつながるかもしれな い。本発明の糖ペプチドは、シアスタチン様化合物が作用することが示されてい るようなヘパラナーゼのインヒビターとして作用する糖模倣物である。 ヘパリン由来薬剤の発見および開発における主要な障壁は、実際の天然配列の 単離または合成のいずれかにおける許容しえないコストおよび困難性であった。 代表的なオリゴ糖およびアナログの全合成（バン・ベッケルら、Ａng.Ｃhem.（ １９９３）３２（１２）：１６７１−１８１８、ニルソン（Ｍ.Ｎilsson）、Ｃa rbohydr.Ｒes .（１９９３）２４６：１６１−１７２、スラゲク（Ｔ.Ｍ.Ｓlaghe k）ら、Ｔetrahedron：Ａsym.（１９９４）５（１１）：２２９１−２３０１） から容易に入手しうるオリゴ糖の修飾および硫酸化（ウェッセル（Ｈ.Ｗessel） ら、Ｊ.Ｃarbohyr.Ｃhem.（１９９６）１５（２）：２０１−２１６、ウェッセ ルら、Ｂioorg.Ｍed.Ｃhem.Ｌett.（１９９６）６（４）：４２７−４３０）に いたる種々のアプローチが試みられている。現在までのところ、非グリコシドヘ パラン硫酸配列模倣物の実際的な合成法は記載されていない。 本明細書中に記載する糖ペプチドは、ヘパリンが有益な関係を有することが示 されている疾患領域の多くにおいて有用なヘパラン硫酸配列糖模倣物の発見およ び開発に適した多様な「オリゴ糖ペプチド」への便利で実際的なアプローチを提 供する。ヘパリンと他のタンパク質との相互作用が詳しく研究され、特異性の相 違が可能であること、およびこれら相互作用がさらに別の薬剤発見標的を提供す る可能性を有することが明らかである（ランダー（Ａ.Ｄ.Ｌander）ら、Ｃhemis try and Ｂiology （１９９４）１：７３−７８、ウィット（Ｄ.Ｐ.Ｗitt）およ びランダー、Ｃurrent Ｂiology（１９９４）４（５）３９４−４００）。抗感染症剤 炭水化物は、ウィルス接着プロセスのための重要な細胞表面リガンドであるこ とが知られている。ウイルス糖タンパク質のプロセシングに関与する酵素（グリ コシダーゼ）の阻害をターゲティングすることにより、炭水化物は抗ウイルス剤 として作用しうる。たとえば、デオキシノジリマイシン（Ｄeoxynojirimicin） およびコスタノ−スペルミン（costano-spermine）は、おそらくそのグリコシダ ーゼ阻害活性によりウイルス感染を抑制する（グルテン（Ｒ.Ａ.Ｇruten）ら、Ｎature （１９８７）３３０：７４；およびワルデン（Ｄ.Ｄ.Ｗalden）ら、Ｐro c.Ｎatl.Ａcad.Ｓci.ＵＳＡ （１９８７）８４：８１２０；およびラトナー、Ａi des Ｒesearch and Ｈuman Ｒetroviruses （１９９１）８（２）：１６５−１７ ３）。同様に、酵素ノイラミニダーゼ（α−シアリダーゼ）のインヒビターもま た、インフルエンザウイルスのインビトロ感染を抑制することが示されており（ ナギー（Ｊ.Ｏ.Ｎagy）ら、Ｊ.Ｍed.Ｃhem.（１９９２）３５：４５０１−４５ ０２）、現在、臨床的な評価がされているところである（スタンレー（Ｉ.Ｄ.Ｓ tanley）ら、Ｔet.Ｌett.（１９９５）３６（２）：２９９−３０２；およびフ ォン−イタシュタイン（Ｍ.von-Ｉtastein）ら、Ｎature（１９９３）３６３： ４１８−４２３）。 薬剤開発アプローチとして適した第二の炭水化物ベースのメカニズムは、ウイ ルス結合のインヒビターである。ヘパラン硫酸はＨＩＶの結合を支持すると思わ れており、ヘパリン配列模倣物はウイルス結合のインヒビターとして機能する可 能性がある。薬剤開発のための炭水化物ベースの両抗ウイルス戦略において、新 規な糖模倣化合物を生成する能力が非常に有利である。抗菌標的としての炭水化物 抗生物質は最も広く用いられている炭水化物治療剤のクラスであり、ストレプ トマイシンはその第一の例である（ウメサワ（Ｓ.Ｕmesawa）、Ａdv.Ｃarbohydr .Ｃhem.Ｂiochem .（１９７４）３０：１１１）。糖ペプチドからマクロ環化合物 、さらに最近では合成糖模倣物にいたる幾つかのクラスの炭水化物関連抗生物質 が発見されている。一般に炭水化物成分は最適の活性のために必要であると思わ れ る（ルカクス（Ｇ,Ｌukacs）、抗生物質および関連細菌産物の化学合成における 最近の進歩、スプリンガー−フェアレイ、ニューヨーク、１９９３）。本発明の 糖ペプチドは抗菌活性を有するかもしれない。免疫調節のための糖模倣物アプローチ 多くの炭水化物含有分子、とりわけムラミルペプチドなどの糖ペプチドおよび アナログ、およびリピドＡなどの糖脂質は免疫応答を調節することが知られてい る（ロコフ（Ｏ.Ｌockoff）、Ａngew Ｃhem.Ｉnt.Ｅd.Ｅngl.（１９９１）３０ ：１６１１−１６２０およびマッサー（Ｊ.Ｈ.Ｍusser）ら、Ｂurgers Ｍedical Ｃhemistry and Ｄrug Ｄiscovery、第５版、第１巻；Ｐrinciples and Ｐract ice、マンフレッド（Ｍanfred Ｅ.Ｗolff）編、１９５５、ジョン・ウイリー・ アンド・サンズ、９０１−９４７頁）。本発明の糖模倣物は免疫調節剤として作 用するかもしれない。 多くの炭水化物由来治療剤に付随する主な制限は、比較的不安定なＯ−グリコ シド結合が存在することである。このことは、炭水化物含有治療剤に付随して不 充分なインビボ安定性または最適でない薬動力学特性をしばしば引き起こす重要 な因子である。天然の炭水化物は構造が非常に複雑であり、単離または合成する のは困難かつ費用がかかる。オリゴ糖の化学合成は、生成物の立体化学および位 置化学を制御するために精巧な戦略を必要とする。グリコシルトランスフェラー ゼおよびグリコシダーゼを用いた酵素合成は天然物質に密接に関連したリガンド のために実行可能な別法であるが、適当な特異性をもった酵素の入手可能性に限 度がある。化学合成の概観 炭水化物の複雑な性質および複雑な炭水化物の組み立てに付随する比較的困難 な合成手順は、炭水化物抗生物質の治療能を最適化するために医薬化学を適用す ることを制限してきた。安定化された炭水化物および他の糖模倣構造物に向けら れた幾つかのアプローチが、この必要性に部分的に取り組むために近年、行われ てきている。たとえば、ヘテロ原子グリコシド、とりわけＳ−グリコシドおよび Ｃ−グリコシドが一般的にＯ−グリコシドに取って代わって用いられており、安 定化炭水化物様構造への活路を開いている。これらアプローチは幾つかの可能性 をもたらしてはいるものの、実際には、目的とする特定の標的に依存して、立体 化学の制御も含めて天然の炭水化物構造に比べて合成がむしろ一層困難であるこ とがある。この立体化学の欠如は、オリゴ糖組み合わせ（combinatorial）ライ ブラリーを調製するうえでの主な障害となっている。 本発明は、多様で新規な糖模倣構造物を生成するために比較的簡単な合成手順 に基づいた一般法を記載するものである。このアプローチは、糖模倣物分子の慎 重な化学合成または糖模倣物組み合わせライブラリーの生成に適しており、糖模 倣物治療剤の発見および開発の実際性において有意の進展をもたらすものである 。本発明はまた、炭水化物によって媒体される特異性を相当の空間的および機能 的多様性と組み合わせて、上記のように炭水化物によって媒体された相互作用に より治療作用を付与する可能性のある糖模倣物構造を生成する、一般的アプロー チをも提供する。 単糖がグリコシド結合以外の結合で互いに結合した合成化合物の例が文献に散 見される。これらには、ジスルフィド架橋（ウィッスラー（Ｗhistler,Ｒ.Ｌ.） ら、Ｊ.Ｏrg.Ｃhem.（１９６４）２９：１２５９）、ヒドラジン架橋（フロイデ ンベルク（Ｆreudenberg,Ｋ.）ら、Ｂer Ｄtsch.Ｃhem.Ｇes.（１９２５）５８ ：２９４）、カルボジイミド架橋（コバックス（Ｋovacs,Ｊ.）ら、Ｃarbohydr. Ｒes .（１９８７）１６６：１０１）、カルバミド架橋（ジョーンズ（Ｊones,Ａ .Ｓ.）ら、Ｔetrahedron（１９６２）１８：１８９）、およびチオカルバミド架 橋（アバロス（Ａvalos,Ｍ.）ら、Ｊ.Ｃhem.Ｓoc.Ｐerkin Ｔrans.Ｉ（１９９０ ）４９５、およびその中の参照文献）の例が含まれる。しかしながら、これら例 はプソイド二糖に限られており、しかも殆どの場合、これら化合物の調製に用い た化学は高次ホモログの合成を排除している。 ヨシムラ（Ｙoshimura,Ｊ.）らは、ヘキソサミヌロン酸を含有するある種のア ミド結合二糖を調製した（ヨシムラら、Ｂull.Ｃhem.Ｓoc.Ｊap.（１９７６）４ ９（ａ）：２５１１−２５１４）。本発明とは対照的に、ヨシムラらは末端糖に カルボン酸基を有しない中性の二糖を調製したにすぎない。ヨシムラらは、ア ミド結合二糖よりも大きな分子の合成を試みたが、失敗した。 最近、何人かの研究者はペプチドを含有する炭水化物の合成を報告している。 フォン・レーダン（Ｖon Ｒoedern,Ｅ.Ｇ.）らは、糖アミノ酸グリコシルウロン 酸メチルアミンを含有する環状ソマトスタチンアナログおよび線状ロイシン−エ ンケファリンアナログを調製した。彼らは、この糖アミノ酸を二糖イソステア（ isostere）として記載している（フォン・レーダンおよびケッスラー（Ｋessler ,Ｈ.）、Ａngew.Ｃhem.Ｉnt.Ｅd.Ｅngl.（１９９４）３３：６８７；フォン・レ ーダンおよびケッスラー、アブストラクトＮｏ.Ａ１.１２、ＸＶIIth Ｉnternat ional Ｃarbohydrate Ｓymposium 、オタワ、１９９４年７月１７〜２２日）。ウ ィットマン（Ｗittmann,Ｖ.）らは、水溶性の増大および代謝安定性の増大のた め、デカペプチド性腺刺激ホルモン放出ホルモンのＣ−グリコシル化およびＳ− グリコシル化アラニン誘導体を調製した（ウィットマンら、アブストラクトＮｏ .Ｃ２.３２、ＸＶIIth Ｉnternational Ｃarbohydrate Ｓymposium、オタワ、１ ９９４年７月１７〜２２日）。しかしながら、これら例は、ペプチドの立体配置 を制限するためかまたはペプチドの代謝的安定性を増大させるためのペプチド骨 格の修飾に限られている。これら例は、いずれもペプチド結合により互いに連結 した糖を示すものはない。 ＰＣＴ公開ＷＯ９５／０４７５１号には、三次元的に安定な立体配置を有し、 遊離のカルボン酸基を有するアミノ酸またはペプチドに共有結合したフコースを 含む糖ペプチドが記載されている。かかる化合物はセレクチンに結合するように デザインされている。これら構造は、ペプチド骨格中のＬ−セリンまたはＬ−ト レオニンに結合したＯ−グリコシドである。互いにペプチド結合した糖について は示されていない。 米国特許第５,００８,２４７号には、アルドナミドのポリ硫酸エステルが記載 されている。これら例ではビスアルドン酸誘導体は炭水化物残基の開鎖形態に限 られることを認識することは重要である。 本発明は、ペプチド結合により互いにまたはペプチドまたは他の種類の化合物 に結合した炭水化物誘導体、アナログまたは模倣物を含有する、新規のクラスの 炭水化物誘導体である糖ペプチド、およびアフィニティークロマトグラフィーを 用いたタンパク質精製や薬剤としてのある種の疾患の治療を含む、これら糖ペプ チドの使用方法に関する。発明の要約 本発明の第一の目的は、ペプチド結合により他の炭水化物または他の基に結合 した炭水化物誘導体を含む新規な化合物を記載することである。かかる化合物は 天然の炭水化物リガンドを模倣するものである。かかる本発明の化合物は、下記 一般式Ｉで示される： Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ−[(Ｘ)_n−Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ]_m−(Ｘ)_n−Ｗ （Ｉ） （式中、 Ｗは、独立に、 （ａ）糖； （ｂ）アリール、アラルキル； （ｃ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、＝Ｏ、−ＯＲ 、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲか ら選ばれる１〜２の置換基で任意に置換されている）および （ｄ）炭素数５〜７の環状アルキル、５〜７の環原子およびＮ、ＯおよびＳよ りなる群から選ばれた１〜２のヘテロ原子のヘテロ環状アルキル（＝Ｏ、−ＯＨ 、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲおよび−alk −ＣＯＯＲから選ばれる１〜５の置換基で任意に置換されている） よりなる群から選ばれる； Ｙは、独立に、−ＮＲ³−Ｃ(Ｏ)−および−Ｃ(Ｏ)−ＮＲ³−よりなる群から選ば れる； Ｘは、 （ａ）アリール、アラルキル； （ｂ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、−Ｏ−、−Ｎ Ｒ'−、−Ｓ−、＝Ｏ、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ 、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲから選ばれる１〜３の置換基でアル キ ル骨格中またはアルキル骨格のエキソにて任意に置換されている） よりなる群から選ばれた２官能性または多官能性基； 各ｎは、独立に０または１； 各ｍは、独立に０または１〜９９の整数、ただし、Ｗ基の総数は２〜１００であ る； Ｒは、−Ｈ、または低級アルキル、低級アリール、および低級アラルキル； Ｒ'は、独立に、−Ｈ、炭素数１〜４の低級アルキル、炭素数２〜１９のアラル キル、および−Ｃ(Ｏ)Ｒ"よりなる群から選ばれる； Ｒ"は、炭素数１〜４の低級アルキル；および Ｒ³は、−Ｈ、炭素数１〜８のアルキル、および炭素数５〜８のアラルキルより なる群から選ばれる） および薬理学的に許容しうるその塩；ただし、 （ａ）Ｗ基の総数が２である場合は、両Ｗ基は２−アミノヘキソースではない； （ｂ）少なくとも１のＷ基は糖である；および （ｃ）末端ＷがＮ−アセチルグルコサミンである場合は、アノマー炭素において 天然アミノ酸に−ＮＨＣＯ−で結合していなくてよい。 本発明の第二の目的は、癌、心血管疾患、網膜症、炎症、自己免疫疾患、およ び細菌およびウイルス感染を含むある種の疾患の治療または予防に使用できる糖 ペプチドを記載することにある。 本発明の第三の目的は、細胞−細胞接着を抑制する糖ペプチドを記載すること にある。 本発明の第四の目的は、セレクチンに結合する糖ペプチドを提供することにあ る。 本発明の第五の目的は、脈管形成を抑制する糖ペプチドを提供することにある 。 本発明の第六の目的は、タンパク質のヘパリンへの結合を抑制する糖ペプチド を提供することにある。 本発明の第七の目的は、ｂＦＧＦの結合を抑制する糖ペプチドを提供すること にある。 本発明の第八の目的は、同化および異化の両方において炭水化物プロセシング 酵素を抑制しうる糖ペプチドを提供することにある。 本発明の第九の目的は、ヘパラナーゼを阻害する糖ペプチドを提供することに ある。 本発明の第十の目的は、アフィニティークロマトグラフィーを用いてタンパク 質を精製するのに用いることができる糖ペプチドを提供することにある。 本発明のこれら目的および他の目的、利点、および特徴は、以下に一層詳しく 記載する合成、構造、製剤および用途の詳細を読めば当業者には明らかであろう 。定義 本発明に従い、および本明細書において、下記術語は特に明示的に断らない限 り下記意味を有するものとして定義される。 「シアル酸」とは、炭素数が９またはそれ以上の一群のアミノ糖、ノイラミン 酸のＮ−およびＯ−置換誘導体をいう。 「ケンプ酸（Ｋemp's acid）」とは、１,３,５−トリメチル−１,３,５−シク ロヘキサン−トリカルボン酸（各酸はアキシアルである）をいう。これは適当な シアル酸模倣物である。 「Ｎ−アセチルノイラミン酸」とは、５−（アセチルアミノ）−３,５−ジデ オキシ−Ｄ−グリセロ−Ｄ−ガラクト−２−ノヌロソン酸（nonulosonic acid） である： 「β形」とは、Ｏ−グリコシドまたはＣ−グリコシドのアノマー位の立体配置 を示す標準命名をいう。 「α形」とは、Ｏ−グリコシドまたはＣ−グリコシドのアノマー位の立体配置 を示す標準命名をいう。 「アミノ」とは、−ＮＲ₂（式中、Ｒは独立に−Ｈ、低級アルキル、低級アリ ール、および低級アラルキルから選ばれる）をいう。 「アルキル」とは、飽和炭化水素をいい、直鎖、分岐鎖、環状または脂環式で あってよい。好ましくはアルキル基は１〜８の炭素原子を含む。最も好ましいの は１〜４の炭素原子である。 「低級アルキル」とは、炭素数１〜４の分岐鎖または直鎖のアルキルをいう。 「アルコキシ」とは、−ＯＲ（式中、Ｒはアルキルである）をいう。低級アル コキシとは、−ＯＲ（式中、Ｒは低級アルキルである）をいう。 「アリール」とは、共役ｐｉ電子系を有する１〜３の環を有する芳香族基をい い、炭素環アリールおよびヘテロ環アリール（両者とも任意に置換されていてよ い）を含む。適当な多環アリール基には、ナフチルおよびアントラシルが含まれ る。好ましくは、アリールは１〜１４の炭素原子を含み、さらに好ましくは４〜 １４の炭素原子を含む。低級アリールとは６までの炭素原子を含むアリールをい い、任意に置換されていてよい。 「炭素環アリール」基とは、環原子が炭素原子である基をいう。 「ヘテロ環アリール」基とは、環中に１〜４のヘテロ原子を含み、環原子の残 りが炭素原子である基をいう。適当なヘテロ原子には、窒素、酸素および硫黄が 含まれる。適当なヘテロ環アリールには、ピリジル、フラニル、チエニル、ピロ リル、トリアゾリル、テトラゾリルなどが含まれ、任意に置換されていてよい。 ヘテロアリールはヘテロ環アリールと同じである。 「脂環式」とは、脂肪族基と環式アルキル基との性質を合わせた基をいう。た とえば、 および は脂環式基である。 「任意に置換された」とは、無置換であるか、または低級アルキル、−ＯＨ、 −ＯＲ、−ＳＲ、−ＳＨ、−ＮＲ'₂、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、ハロ、カルボン酸 、エステル、ＮＯ₂、および低級ペルハロアルキル（式中、ＲはＨまたは低級ア ルキル、Ｒ'はＨ、低級アルキル、アラルキルおよび低級アシル）から独立に選 ばれた１〜３の置換基による置換のいずれかをいう。 「アラルキル」とは、アリール基で置換されたアルキル基をいい、任意に置換 されていてよい。ベンジルは適当なアラルキル基である。好ましくは、アラルキ ル基は２〜１９の炭素原子を有し、さらに好ましくは５〜１９の炭素原子を有す る。低級アラルキルとは、８までの炭素原子を含むものをいい、任意に置換され ていてよい。アラルキル基は該基のアルキル部分で結合している。 「アルケニル」とは、少なくとも１の炭素−炭素二重結合を含む不飽和基をい い、直鎖、分岐鎖および環式基を含む。二重結合は該鎖に対してエキソであって よい。 「アルコキシアリール」とは、アルコキシ基で置換されたアリール基をいう。 「アルキニル」とは、少なくとも１の炭素−炭素三重結合を含む不飽和基をい い、直鎖、分岐鎖および環式基を含む。 「アリールオキシ」とは、−Ｏ−アリールをいう。 「アラルコキシ」とは、−Ｏ−アラルキルをいう。 「カルボン酸」とは、−ＣＯＯＨをいう。 「エステル」とは、−ＣＯＯＲ（式中、Ｒは低級アルキル、低級アリール、お よび低級アラルキル）をいう。 「アミド」とは、−ＣＯＮＲ₂（式中、各Ｒは独立に水素、低級アルキル、低 級アリール、および低級アラルキルから選ばれる）をいう。好ましくは、少なく とも一つのＲは水素である。 「アシル」とは、−Ｃ(Ｏ)Ｒ（式中、Ｒはアルキル、アラルキル、およびアリ ール）をいう。 「保護基」とは、１または幾つかの本来の官能基を保護する基をいう。適当な 「保護基」は、官能基および化合物やライブラリーを構築するのに用いた特定の 化学に依存するであろう。適当な官能基保護基の例は当業者には明らかであろう が、たとえば、グリーン（Ｇreene）およびウッツ（Ｗutz）、Ｐrotecting Ｇro ups in Ｏrganic Ｓynthesis 、第２版、ジョン・ウイリー＆サンズ、ニューヨー ク（１９９１）（参照のため本明細書中に引用する）に記載されている。 適当な−Ｏ−保護基は上記書籍に記載されている。好ましいそのような保護基 には、アセテート、ベンゾイル、およびベンジルが含まれる。 「糖」とは、一般組成(Ｃ)_n(Ｈ₂Ｏ)_nを含む化学残基を有する炭水化物誘導体 をいい、これらに限られるものではないが、グルコース、ガラクトース、フコー ス、フルクトース、サッカロース、マンノース、アラビノース、キシロース、ソ ルボース、ラクトース、およびその誘導体、たとえば、アルドン酸、ウロン酸、 デソキシ糖などの他の元素組成を有する化合物、またはアミノ糖などの別の元素 または残基を含む化合物を含み（これらに限られるものではない）、式中、ｎは 一般に４、５、６または７原子であり、糖中の酸素原子は窒素、硫黄および炭素 などのヘテロ原子で置換されていてよいものをいう。「糖」には炭素グリコシド を含む。本明細書において糖は、いずれかのヒドロキシ基の「Ｈ」が化学的に適 合しうる残基「Ｒ」で置換された化学構造を含むものと理解され、本明細書で使 用する意味でのモノマー、オリゴマーまたはポリマーであってよい。糖はピラノ ース環またはフラノース環の形態であってよく、アノマー中心においてαまたは βのいずれかの立体配置を有する。オリゴマー糖は、独立に、エーテル結合、チ オエーテル結合、グリコシド結合、チオグリコシド結合、炭素グリコシド結合、 またはアミノ結合により共有結合している。 糖のヒドロキシル基またはアミン基は、Ｈ、ハロゲン、−ＣＯＯＨまたはＯＲ¹ （式中、Ｒ¹はアルキル、アリール、アラルキル、アシル（すべて任意に置換さ れていてよい）、保護基、および脂質）で任意に置換されている。糖は飽和であ っても不飽和であってもよい。糖は荷電または非荷電のいずれであってもよい。 適当な荷電糖には、ガラクツロン酸、グルクロン酸、およびシアル酸が含まれる 。 「炭水化物単位」は、単糖を含むモノマーである。本発明において有用な適当 な単糖の例としては、これらに限られるものではないが、Ｄ−グルコース、Ｄ− ガラクトース、Ｄ−マンノース、Ｄ−キシロース、Ｄ−およびＬ−アラビノース 、Ｄ−リボース、Ｌ−ラムノース、Ｌ−フコース、Ｄ−グルクロン酸、Ｄ−ガラ クツロン酸、Ｌ−イズロン酸、Ｄ−グルコサミン、Ｄ−ガラクトサミン、Ｄ−リ キソサミン、グルコサミンウロン酸およびシアル酸が挙げられる。 「オリゴマー」および「オリゴ糖」とは、複数の単糖を含む、炭素グリコシド を含む炭水化物をいう。これには、二糖、三糖などが含まれ、好ましくは３〜１ ２のモノマー単位を含む。本発明において有用な二糖の例としては、これらに限 られるものではないが、マルトース、ラクトース、セロビオース、メリビオース および３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−アラビノースが挙げられる。 本発明において有用な三糖およびより高度なオリゴ糖の例としては、マルトトリ オースおよびマルトテトラオースが挙げられる。 「非糖」とは、 （ａ）アリール、アラルキル； （ｂ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、＝Ｏ、−ＯＨ、 −ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−al k−ＣＯＯＲから選ばれる１〜２の置換基で任意に置換されている）および （ｃ）炭素数５〜７の環状アルキル、５〜７の環原子およびＮ、ＯおよびＳより なる群から選ばれた１〜２のヘテロ原子のヘテロ環状アルキル（＝Ｏ、−ＯＨ、 −ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲおよび−alk− ＣＯＯＲから選ばれる１〜５の置換基で任意に置換されている） よりなる群から選ばれるＷ基をいう。 「２官能性」または「多官能性」アルキル、アリールまたはアラルキル基、ア ミノ酸またはペプチドとは、２つの糖単位を好ましくはエーテル結合、チオエー テル結合、グリコシド結合、チオグリコシド結合、アミノ結合またはアミド結合 のいずれかにより連結しうる基をいう。例としては、これらに限られるものでは ないが、ジオール、ジオールのオリゴマー、芳香族ジオール、たとえばヒドロキ ノンおよびジヒドロキシナフタレン、アラルキルジオール、たとえばベンゼンジ メタノール、ジチオール、ジチオールのオリゴマーおよびチオヒドロキシ化合物 、 ジアミン、ジアミンのオリゴマー、ジカルボン酸およびジカルボン酸のオリゴマ ーが挙げられる。場合により、該基は、ヒドロキシル、チオール、アミン、カル ボン酸、アミドまたはスルホン酸などの他の官能基を有していてよく、その際、 これら基は糖単位と結合を形成しない。 「炭素配当体」は、アノマー位に酸素を有しないが炭素置換基を有する炭水化 物誘導体である。 「ペプチド」結合とは、−ＮＲ−Ｃ(Ｏ)−および−Ｃ(Ｏ)−ＮＲ−（式中、Ｒ は水素、アルキル、アリールまたはアラルキル）をいう。 「ヘテロ原子配当体」は、アノマー位の酸素が、炭素、窒素、硫黄、リンおよ びケイ素を含む、酸素以外の原子で置換されている炭水化物である。 「同定標識（Identifier tag）」は、標識した合成オリゴマーライブラリー中 の個々のオリゴマーの構造を解明するための手段を提供する検出可能な属性であ る。たとえば、同定標識は、標識した合成オリゴマーライブラリーの合成で得ら れた生成物を同定するのに用いることができる。 「人名反応（Ｎamed Ｒeactions）」は、当業者に知られた化学的標準反応で ある化学反応であり、アルパー（Ａlper）反応、バルビエール反応、クライゼン −アイルランド（Ｉreland）反応、コープ転位、デルピンアミン合成、ゲバルト （Ｇewald）ヘテロ環合成、ヒヤマ−ヒースコック（Ｈiyama−Ｈeathcock）立体 選択アリル化、ストーク（Ｓtork）ラジカル環化、トロストシクロペンタン化（ Ｔrost Ｃyclopentanation）、バイデンハーゲン（Ｗeidenhagen）イミダゾール 合成が挙げられる。とりわけ、「人名反応および非人名反応に基づく有機合成」 、Ｔetrahedron Ｏrganic Ｃhemistry Ｓeries、ボールドウィンおよびマグヌス 編、パーガモン、グレートブリテンを参照。 「多糖」とは、複数の単糖を含む、炭素配当体を含む炭水化物をいう。 「合成化学ライブラリー」は、無作為または半無作為に合成した分子の集合で あり、かかるライブラリーの各成員は化学合成または酵素合成により製造される ものをいう。 「合成支持体」は、堅固なまたはやや堅固な表面を有し、官能基またはリンカ ーを有する物質である。合成支持体は、合成反応を行うのに適した官能基または リンカーで誘導体化することができる。かかる物質は、小さなビーズ、ペレット 、ディスク、毛管、中空繊維、針、固体繊維、セルロースビーズ、多孔ガラスビ ーズ、シリカゲル、ポリエチレングリコールジビニルベンゼンで任意に架橋され た ポリスチレンビーズ、グラフトコポリマービーズ、ポリアクリルアミドビーズ、 ラテックスビーズ、Ｎ,Ｎ'−ビスアクリロイルエチレンジアミンで任意に架橋さ れたジメタクリルアミドビーズ、疎水性ポリマーをコーティングしたガラス粒子 の形態、または他の都合のよい形態をとるであろう。 「変換事象（Transformation event）」または「反応」は、化合物、モノマー 、オリゴマーまたはポリマーの化学構造の変化をもたらす事象をいう。「変換事 象」または「反応」は、物理的、化学的、酵素的、生物学的または他の手段、ま たはそれらの組み合わせ、たとえば、これらに限られるものではないが、光学的 、化学的、酵素的または生物学的に媒体された異性化または開裂、光学的、化学 的、酵素的または生物学的に媒体された側鎖基または官能基の付加、除去または 修飾、温度の変化、圧力の変化、などにより媒体される。それゆえ、「変換事象 」または「反応」には、これらに限られるものではないが、モノマー、オリゴマ ーまたはポリマーの分子量の増加となる事象、たとえば１または複数のモノマー の付加、溶媒または気体の付加、金属または他の無機基質、たとえばゼオライト の配位が含まれる。「変換事象」または「反応」はまた、たとえば、アルコール の脱水素によるアルケンの生成またはエステルもしくはアミドの酵素的加水分解 など、オリゴマーまたはポリマーの分子量の低下という結果にもなる。「変換事 象」または「反応」はまた、たとえば、１または複数のキラル中心における立体 化学変化、クライゼン転位、アイルランド転位、またはコープ転位および本明細 書を検討して当業者に明らかな他の事象など、モノマー、オリゴマーまたはポリ マーの分子量の正味の変化とならない事象をも含む。 「ヘテロ環式アルキル」とは、環原子の１〜３がヘテロ原子であり、残りの環 原子が炭素原子である環式アルキル基をいう。適当なヘテロ原子は、窒素、酸素 および硫黄である。適当なヘテロ環式アルキル基は、モルホリン、ピペリジンお よびピペラジンである。 「−Ａｒ−」とは、任意に置換されたフェニルをいう。 「−alk−」とは、低級アルキル、およびシクロアルキルから選ばれるアルキ ル連結基をいう。適当な「−alk−」基には、−Ｃ(ＣＨ₃)₂−が含まれる。 「ハロ」とは、ハロゲン原子、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒおよび−Ｉをいう。 「シクロアルキル」とは、環式アルキル基をいい、シクロプロピル、シクロペ ンチル、シクロヘキシル、およびシクロヘプチルを含む。 「薬理学的に許容しうる塩」としては、本発明の化合物と有機または無機酸ま たは塩基との組み合わせから得られる、式Ｉの化合物の塩を含む。本発明の化合 物は、遊離の酸、遊離の塩基、および塩の形態の両者で有用である。発明の詳細な説明 本明細書の記載を通じて、科学論文並びに特許および特許出願を含む刊行物を 参照している。これら刊行物は、本明細書中で引用したときにはその全内容を参 照のために引用することを意図するものである。 本発明を記載するまえに、本発明は記載した特定の組成物、方法またはプロセ スに限られるものではないことを理解しなければならない。なぜなら、かかる組 成物や方法はもちろん変わってよいからである。 本発明と関連して本明細書中に用いる幾つかの標準的な略語としては、以下の ものが含まれる：ＢＳＡ、ウシ血清アルブミン；ＤＥＡＥ、ジエチルアミノエチ ル；ＤＭＳＯ、ジメチルスルホキシド；ＤＭＦ、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド ；ＤＣＥ、ジクロロエタン；Ｅ−セレクチンまたはＥＬＡＭ−１、内皮／白血球 接着分子−１；ＨＰＴＬＣ、高速薄層クロマトグラフィー；Ｌ−セレクチンまた はＬＥＣＡＭ−１、白血球／内皮細胞接着分子−１；ＭＯＰＳ、３−［Ｎ−モル ホリノ］プロパンスルホン酸；ＮＡＮＡ、Ｎ−アセチルノイラミン酸；ＰＶＣ、 ポリ塩化ビニル；ＴＬＣ、薄層クロマトグラフィー；ＴＦＡ、トリフルオロ酢酸 ；トリス、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン。 本発明の新規な糖ペプチド化合物は、完全にグリコシド結合した化合物に本来 的に備わる合成における挑戦のすべては含まない糖模倣物となるようデザインさ れている。これら新規な糖ペプチドは、下記一般式Ｉで示される： Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ−[(Ｘ)_n−Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ]_m−(Ｘ)_n−Ｗ （Ｉ） （式中、 Ｗは、独立に、 （ａ）糖； （ｂ）アリール、アラルキル； （ｃ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、＝Ｏ、−ＯＲ 、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲか ら選ばれる１〜２の置換基で任意に置換されている）および （ｄ）炭素数５〜７の環状アルキル、５〜７の環原子およびＮ、ＯおよびＳよ りなる群から選ばれた１〜２のヘテロ原子のヘテロ環状アルキル（＝Ｏ、−ＯＨ 、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲおよび−alk −ＣＯＯＲから選ばれる１〜５の置換基で任意に置換されている） よりなる群から選ばれる； Ｙは、独立に、−ＮＲ³−Ｃ(Ｏ)−および−Ｃ(Ｏ)−ＮＲ³−よりなる群から選ば れる； Ｘは、 （ａ）アリール、アラルキル； （ｂ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、−Ｏ−、−Ｎ Ｒ'−、−Ｓ−、＝Ｏ、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ 、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲから選ばれる１〜３の置換基でアル キル骨格中またはアルキル骨格のエキソにて任意に置換されている）よりなる群 から選ばれた２官能性または多官能性基； 各ｎは、独立に０または１； 各ｍは、独立に０または１〜９９の整数、ただし、Ｗ基の総数は２〜１００であ る； Ｒは、−Ｈ、または低級アルキル、低級アリール、および低級アラルキル； Ｒ'は、独立に、−Ｈ、炭素数１〜４の低級アルキル、炭素数２〜１９のアラル キル、および−Ｃ(Ｏ)Ｒ"よりなる群から選ばれる； Ｒ"は、炭素数１〜４の低級アルキル；および Ｒ³は、−Ｈ、炭素数１〜８のアルキル、および炭素数５〜８のアラルキルより なる群から選ばれる） および薬理学的に許容しうるその塩；ただし、 （ａ）Ｗ基の総数が２である場合は、両Ｗ基は２−アミノヘキソースではない； （ｂ）少なくとも１のＷ基は糖である；および （ｃ）末端ＷがＮ−アセチルグルコサミンである場合は、アノマー炭素において 天然アミノ酸に−ＮＨＣＯ−で結合していなくてよい。 本発明の一つの好ましい側面は、式Ｉにおいてｍが１〜９９である化合物であ る。好ましいのは、ｍが１〜５の整数であり、Ｗが独立にフコース、３−アミノ −３−デオキシグルコース、４−アミノ−４−デオキシグルコース、グルコース 、ガラクトース、グルコサミン、ガラクトサミン、グルクロン酸、ガラクツロン 酸、グルコサミンウロン酸、ノイラミン酸、マルトース、マルトトリオースイズ ロン酸、２,５−アンヒドロマンニトール、マンノース、マンヌロン酸、および セロビオースよりなる群から選ばれる化合物である。特に好ましいのは、ｍが１ 〜２の整数であり、Ｗが独立にグルクロン酸およびグルコサミンから選ばれる化 合物である。 他の好ましい化合物群は、Ｗがマルトース、マルトトリオースおよびセロビオ ースよりなる群から選ばれる化合物である。ｎおよびｍが１であり、Ｘが独立に エチレングリコール、エチレングリコールオリゴマー、低級アルキル、任意に置 換されたアルキル、アミノおよびペプチドよりなる群から選ばれる化合物。 本発明の他の好ましい側面は、式： Ｗ'−Ｙ−Ｗ"−Ｙ−Ｗ' （式中、 各Ｗ'は、独立に、糖よりなる群から選ばれ； Ｗ"は （ａ）アリール、アラルキル； （ｂ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、＝Ｏ、−ＯＲ 、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲよ りなる群から選ばれた１〜２の置換基で任意に置換されている）および （ｃ）炭素数５〜７の環状アルキル、５〜７の環原子およびＮ、ＯおよびＳよ りなる群から選ばれた１〜２のヘテロ原子のヘテロ環状アルキル（＝Ｏ、−ＯＨ 、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲおよび−alk −ＣＯＯＲから選ばれる１〜５の置換基で任意に置換されている） よりなる群から選ばれる； Ｙは、−ＮＨ−ＣＯ−） で示される化合物である。 本発明の他の好ましい側面は、式： Ｗ'−Ｙ−Ｗ'−Ｙ−Ｗ" （式中、Ｗ'、Ｗ"およびＹは前記と同じ） で示される化合物である。 本発明の他の好ましい側面は、式Ｉにおいて少なくとも１のＷ基が−ＮＲ'₂、 −ＳＯ₃Ｒまたは−ＣＯＯＲで置換された化合物である。 好ましいのは、式ＩにおいてＷ基の総数が２〜８の化合物である。さらに好ま しいのは、Ｗ基の総数が３〜４の化合物である。 本発明の他の好ましい側面は、式： Ｗ¹−Ｙ−Ｗ−Ｙ−Ｗ² （式中、 Ｗ¹は、−(Ｃ＝Ｏ)Ｒ¹¹、シアル酸、ケンプ酸、−Ｂ、−ＳＯ₃Ｍ、−ＯＳＯ₃Ｍ 、−ＳＯ₂ＮＨ₂、−ＰＯ₃Ｍ'₂、−ＯＰＯ₃Ｍ'₂、−ＮＯ₂、炭素数１〜４の飽和 または不飽和カルボン酸（１〜２のヒドロキシル基で任意に置換されている）、 およびそのエステル、およびアミド； Ｗ²は式： （式中、Ｕは、−Ｒ⁹、−ＣＨ₂ＯＲ¹⁰、−ＣＨ₂Ｏ−保護基、−ＣＯＯＲ¹¹、− ＣＯＮ(Ｒ¹¹)₂および−ＣＯＯＭ； Ｒ⁹は低級アルキル； 各ｓは、独立に１、２および３よりなる群から選ばれる； 各ｚは、独立に１および２よりなる群から選ばれる； Ｒ¹⁰は、−Ｈ、−Ｒ¹¹、−ＳＯ₃Ｍ、−(Ｃ＝Ｏ)Ｒ¹¹、−ＳＯ₂ＮＨ₂、−ＰＯ₃ Ｍ'₂、−alk−ＣＯＯＲ₁₃、−alk−ＣＯＮ(Ｒ¹¹)₂および−Ｏ−炭水化物よりな る群から選ばれる； Ｒ¹¹は、独立に−Ｈ、低級アルキル、炭素数５〜６の環状アルキル、４〜５の 炭素原子および１〜２のヘテロ原子のヘテロ環式アルキル、低級アリールおよび 低級アラルキルよりなる群から選ばれる； Ｒ¹³は、Ｒ¹¹およびＭよりなる群から選ばれる； Ｒ¹⁴は、−Ｈおよび−ＯＲ¹⁰よりなる群から選ばれる； Ｍは、Ｎａ⁺、Ｋ⁺、Ｍｇ²⁺およびＣａ²⁺よりなる群から選ばれる； Ｍ'は、−Ｈ、−Ｍ、およびＲ⁹よりなる群から選ばれる； Ｘは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ(Ｒ¹¹)−Ｃ(Ｒ¹¹)₂−、および−Ｎ(Ｒ¹¹)−より なる群から選ばれる）で示される基； Ｂは、少なくとも１の−ＣＯＯＲ¹¹、−ＣＯＮ(Ｒ¹¹)₂、−ＣＯＯＭ、−ＳＯ₃Ｍ または−(Ｃ＝Ｏ)Ｒ¹¹ ₂置換基を含有するＷ²基） で示される化合物である。 他の好ましい式Ｉの化合物群は、全部で４〜８のＷ基を有し、これらＷ基のう ち２〜４が任意に完全もしくは部分的に硫酸化された糖である化合物である。 好ましいのは、セレクチンＥＬＩＳＡ ＩＣ₅₀が≦２５０μＭである化合物で ある。より好ましいのは、ＩＣ₅₀が≦１００μＭである化合物である。 好ましいのは、ｂＦＧＦアッセイにおいてＩＣ₅₀が＜１０μｇである化合物で ある。投与および用途 本発明の新規な糖ペプチドは、（１）炭水化物含有抗生物質；（２）グリコシ ダーゼインヒビターベースの抗ウイルスおよび抗腫瘍剤；（３）アドリアマイシ ン由来の抗癌剤；（４）強心配当体；および（５）ヘパリン由来の五糖抗生物質 を含む公知の炭水化物治療剤に基づいて糖模倣物を生成する。さらに重要なこと に、本発明によって提供される糖模倣化合物生成の多様さは、炭水化物相互作用 に基づく新規治療剤の発見および開発を容易にするであろう。 本明細書において一層詳細に記載される幾つかの例には、下記のものが含まれ る：（１）炎症および転移のためのセレクチンアンタゴニスト；（２）抗トロン ビンIII相互作用により媒体される抗血栓症活性、ｂＦＧＦの細胞増殖活性、ア ルツハイマー病におけるアミロイドプラークの生成および脈管形成や癌腫瘍増殖 に付随する他のヘパリン結合増殖因子を含む、ヘパラン硫酸結合タンパク質相互 作用のアンタゴニストとしてのヘパラン硫酸配列模倣物；（３）重要な細胞認識 プロセスを媒体する複雑な炭水化物エピトープを生合成するグリコシルトランス フェラーゼ（キシロシド、フコシルトランスフェラーゼインヒビター）などの炭 水化物生合成酵素のインヒビター（ムッサーら、「医薬品化学および薬剤発見に おける炭水化物ベースの治療剤」、第５版、第１巻、マンフレッド編、１９９５ 、ジョン・ウイリー・アンド・サンズ、９０１−９４７頁；およびカールソン（ Ｋ.Ａ.Ｋarlsson）、Ｇlycobiology：Ａ Ｇrowing Ｆield for Ｄrug Ｄesign、 ＴｉＰＳ、１９９１年７月、１２：２６５−２７３）；グリコシル化（glycatio n）反応の抑制はアルツハイマー病を予防または治療するかもしれない（ハリン トン（Ｈarrington）ら、Ｎature（１９９４）３７０：２４７）；および（４） ヘパラナーゼなどの炭水化物分解酵素（細胞外マトリックスを分解して血管壁お よび組織を通した癌細胞および炎症細胞の管外遊出およびアテローム性動脈硬化 症プラークの生成を容易にする）のインヒビター。 本発明の糖ペプチドはβ−グルクロニダーゼのインヒビターとして有用である 。グルクロニダーゼは炭水化物代謝に関与する最も重要な酵素であり、哺乳動物 の組織および体液並中びに低級細菌中に広く分布する。この酵素の合成インヒビ ターは、アフィニティークロマトグラフィーによる該酵素の精製の有用な手段を 提供するとともに代謝研究の手助けとなる（リー（Ｙ.Ｃ.Ｌee）ら、Ｃarbohydr ate Ｒesearch（１９７８）６４：３０２）。しかしながら、ごくわずかのβ− グル クロニダーゼインヒビターが報告されているにすぎない。本発明の糖ペプチドは β−グルクロニダーゼのインヒビターであり、アフィニティークロマトグラフィ ーによる該酵素の精製に有用である。 一般に酵素活性の測定は、β−グルクロニダーゼの作用による反応の間にグル クロン酸から放出される種々のアグリコン（たとえば、フェノールフタレイン） の吸光度値を測定することにより行う。 β−グルクロニダーゼ阻害アッセイは溶媒中で行うのが好ましい。溶媒の例と しては水および適当な緩衝液が挙げられるが、酢酸またはＡＭＰ（２−アミノ− ２−メチル−１−プロパノール）緩衝液が好ましい。フェノールフタレインモノ −β−グルクロン酸および糖基質を該酵素で室温にて約４〜５のｐＨで処理する 。反応時間は０.５〜２時間の範囲である。反応完了後、ｐＨを調節することに より反応を停止させ、５５０ｎｍにおける吸光度を測定する。 本発明の糖ペプチドはまた、癌、自己免疫疾患、炎症、感染、および血小板凝 固または血管形成活性により引き起こされまたは悪化される疾患を含む種々の疾 患の治療または予防のための治療学的応用においても有用である。 治療しうる癌には、原発性または転移性の悪性腫瘍、および転移はしないが剪 断塊（shear mass）による圧迫および／または閉塞の結果として罹患率および死 亡率に影響を及ぼす良性腫瘍が含まれる。以下に治療しうる癌の幾つかを記載す るが、これらは本発明の範囲を限定するものではない。脳では、多形性神経膠芽 腫、悪性神経膠腫、髄芽腫、原発性リンパ腫、および髄膜腫を治療することがで きる。肺では、腺癌、偏平上皮細胞癌、未分化大細胞（Ｌarge Ｃell Ｕndiffer entiated）癌、および小細胞（Ｓmall Ｃell）癌を治療することができる。 胃腸管（口腔および咽頭、食道、胃、小腸、大腸および肛門を含む）では、偏 平上皮細胞癌、腺癌、および原発性リンパ腫を治療することができる。 肝細胞癌などの肝臓癌も治療できる。治療できる骨／骨髄の癌には、骨肉腫、 多発性骨髄腫、白血病（赤白血病、急性／慢性リンパ性白血病、急性／慢性骨髄 性白血病）およびユーイング肉腫が含まれる。胸部では、治療できる癌には、管 （Ｄuctal）腺癌、小葉（Ｌobular）癌、延髄癌、炎症性（Ｉnflammatory）癌が 含まれる。 前立腺／膀胱では、治療できる癌には、腺癌、転移細胞（Ｔransitional Ｃel l）癌、および偏平上皮細胞癌が含まれる。精巣および卵巣では、治療できる癌 には、腺癌（乳頭／血清）、性腺−基質腫瘍、奇形癌、胎生期癌、および絨毛癌 が含まれる。 リンパ節では、治療できる癌には、悪性リンパ腫、およびホジキンリンパ腫が 含まれる。治療できる皮膚、深部組織、頭部および頸部の癌には、悪性黒色腫、 偏平上皮癌、基底細胞癌、血管肉腫、カポジ肉腫、悪性繊維性組織球腫、および 脂肪肉腫が含まれる。子宮では、治療できる癌および腫瘍には、平滑筋腫、平滑 筋肉腫、腺肉腫および腺癌が含まれる。内分泌腺癌もまた治療できる。これには 、腺腫および頭蓋咽頭腫を含む下垂体の癌、乳頭癌、小胞癌および延髄癌を含む 胸腺の癌、腺癌および島細胞癌を含む膵臓の癌、および副腎癌を含む副腎の癌が 含まれる。腎臓では、治療できる癌には、腎細胞癌およびウイルムス腫瘍が含ま れる。単一の臓器には必ずしも特定されない小児科の腫瘍もまた治療できる。こ れらには神経芽腫および横紋筋肉腫が含まれる。 本発明の糖ペプチドの投与は通常の経路で行うことができ、静脈内、皮下、経 口および吸入が含まれるがこれらに限られるものではない。急性使用の好ましい 投与量は、静脈内投与で０.１〜１０ｍｇ／ｋｇまたは皮下経路で１〜１００ｍ ｇ／ｋｇ／日である。慢性疾患のための経口経路または吸入による好ましい投与 量は１〜１００ｍｇ／ｋｇ／日である。典型的な投与量は、５〜３０日、好まし くは７〜１４日間の継続で０.１〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲である。 低投与量での皮下注射もしくは静脈注射に比べてやや高投与量での経口投与、 または局所障害のための経膜または経皮その他の局所投与もまた有効である。外 傷部位にアクセスできる場合には、持続放出デバイス（支持マトリックスなど； おそらく血管移植材料に含まれる）による局所投与が特に有用である。 上記モードの投与に適した製剤は当該技術分野で知られており、製剤の適当な 概要はＲemington's Ｐharmaceutical Ｓciences、マック・パブリッシング・カ ンパニー、イーストン、ペンシルベニア、最新版に記載されている。 糖ペプチドはまた放射性標識、蛍光標識、発色団または酵素などの典型的な方 法で標識することができ、かかる化合物の投与後の生物学的試料中の該化合物の 量をアッセイするのに用いることができる。標識を炭水化物または関連残基にカ ップリングするには常法を用いることができる。かかる技術は当該技術分野でよ く確立されている。たとえば、米国特許第４,６１３,６６５号を参照。標識した 糖ペプチドは、競合イムノアッセイや疾患部位の同定に用いることができ、該化 合物のインビボでの薬動力学を追跡する手段としても用いることができる。この 目的のための適当な放射性同位元素標識には、水素³、ヨウ素¹³¹、インジウム^{11 1} 、テクネチウム⁹⁹、およびリン³²が含まれる。適当な酵素標識には、アルカリ ホスファターゼ、グルコース６−リン酸デヒドロゲナーゼ、および西洋ワサビペ ルオキシダーゼが含まれる。特に好ましい蛍光標識にはフルオレセインおよびダ ンシルが含まれる。これら３つのタイプの広範囲の標識が当該技術分野で知られ ている。 生物学的試料中の分析対象物の競合アッセイの適当なプロトコールは当該技術 分野でよく知られており、一般に、試料を標識競合物と混合し、分析対象物と反 応する特異的結合相手、典型的には免疫グロブリンまたはそのフラグメントで処 理することを含む。以下に記載する本発明により調製した抗体は、この目的のた めに有用である。該抗体への分析対象物および競合物の結合は、結合した複合体 を除去し、該複合体かまたは上澄み液のいずれかについて標識をアッセイするこ とにより測定できる。特異的結合相手を前以て固体支持体に結合させておくこと により、分離を一層容易にすることができる。かかる技術は当該技術分野でよく 知られており、かかる競合アッセイに利用できるプロトコールは余りにも多く、 当該技術分野で余りにもよく知られているから、本明細書中で詳細に記載するに は及ばない。一般的合成 アミド結合による各糖間の結合は、アミノ基とカルボン酸基との反応により行 うことができ（式ＩにおけるＹ）、その際、アミノ基およびカルボン酸基はそれ ぞれＷ基に直接またはＸ基を介して結合させることができる。アミノおよび／ま たはカルボン酸置換基以外に、Ｗ基はさらに任意に−Ｈ、ハロゲン、−ＣＯＯＨ 、または−ＯＲ¹（式中、Ｒ¹はアルキル、アリール、アラルキル、アシル（任意 に置換されている）、−ＰＯ₃、保護基および脂質）で置換されていてよい。上 記タイプの炭水化物由来アミノ酸（糖アミノ酸）かまたは天然もしくは非天然の アミノ酸を用い、ペプチド結合による鎖延長をさらに行うことができる。 単糖を官能化して上記２つの官能基をもつようにすること（糖アミノ酸が得ら れる）は、炭水化物化学の標準法を用いて行うことができる（ボガー（Ｂoger, Ｊ.）ら、Ｈelvestica Ｃhimica Ａcta（１９７８）６１：２１９０、ドゥ・ヌ ーイ（de Ｎooy,Ａ.Ｅ.Ｊ.）ら、Ｃarbohydrate Ｒesearch（１９９５）２６９ ：８９）。２つのタイプの糖アミノ酸が一般式IVおよびＶで示される。以下にタ イプＡと称する糖アミノ酸（式IV）では、アミノ基およびカルボキシル基は単糖 またはオリゴ糖単位の異なる位置に結合している。両官能基は糖環に直接結合さ せることもできるし、または両官能基の一方または両者をＸ基を介して糖に結合 させることができる（その際、ｋは０に等しいかまたはそれ以上である）。以下 にタイプＢと称する糖アミノ酸（式Ｖ）では、アミノ基およびカルボキシル基は ともに、直接またはＸ基を介して糖環の同じ炭素原子に結合している（その際、 ｐは０に等しいかまたはそれ以上である）。 タイプＡおよび／またはＢのいずれかの糖アミノ酸の合成は、ヒドロキシル基 をアミノ基に変換し、他のヒドロキシル基をカルボキシル基に変換することによ り行う。 アミノ基の導入は、以下に掲げるような種々の方法により行うことができる： （ａ）ヒドロキシル基を脱離基に変換し、該脱離基をさらに適当なアミノ官能 基で置換する。この方法は、ヒドロキシル基をハロゲンまたはスルホニルオキシ 脱離基、好ましくは臭素、ヨウ素、ｐ−トルエンスルホン酸、ｐ−ブロモベンゼ ンスルホン酸、メタンスルホン酸およびトリフルオロメタンスルホン酸に変換し た後、該脱離基を求核基を含有する適当な窒素、たとえばアンモニア、ヒドラジ ンまたはアジドなどで置換することを含む。アジドは、合成が容易であること、 および他のヒドロキシル基をさらに修飾することができること、という二重の利 点を有することから好ましい求核基である。 （ｂ）トリフェニルホスフィンやアジ化リチウムで処理するなどの、アジドに よるヒドロキシル基の直接置換（ボガーら、Ｈelvestica Ｃhimica Ａcta（１９ ７８）６１：２１９０）。 （ｃ）エポキシドを適当な窒素含有求核基、たとえばアンモニア、アジドその 他のアミンで比較的穏やかな条件下で開環してもアミノ糖を合成する便利な経路 が得られる。 （ｄ）グリコシルアミンはまた、アンモニウム−炭化水素または適当に保護し たアノマー的に純粋なグリコシルアジドを用いて遊離の糖から容易に合成するこ とができる。 （ｅ）カルボニル化合物（アルデヒドまたはケトン）を出発物質として、オキ シムまたはヒドラゾンを経てアミン基を導入することができる。 カルボキシル基の導入は、標準的な酸化法、好ましくはジョーンズ酸化（バウ アーズ（Ｂowers,Ａ.）ら、Ｊ.Ｃhem.Ｓoc.（１９５３）２６：２５７６）、白 金酸化（ヘインズ（Ｈeyns,Ｋ.）ら、Ｂer.Ｄtsch.Ｃhem.Ｇes.（１９５５）８ ８ ：１８８）、またはＴＥＭＰＯ媒体酸化（ドゥ・ヌーイら、Ｃarbohydrate Ｒ esearch （１９９５）２６９：８９）により、第一級アルコール基を酸化してカ ルボン酸 とすることにより行うことができるし、または単一の非保護ヒドロキシル基をカ ルボン酸含有基でアルキル化することができる。 これら化合物をカップリングして一般構造式Ｉで示される糖ペプチドを得るこ とは、一方の反応物中のアミノ基と他の反応物中のカルボキシル基とが互いに反 応してペプチド結合を形成するのに適した形態をしており、一方、他の官能基は 保護してあるような誘導体を用いたペプチド化学の標準法により行うことができ る。さらなる鎖伸長は、得られた生成物中にアミノ基またはカルボキシル基を生 成させ、これを他のモノマーまたはオリゴマー単位とカップリングすることによ り行うことができる。上記のように、糖アミノ酸の鎖伸長のための構築ブロック には、炭水化物、天然アミノ酸、および非天然アミノ酸が含まれるが、これらに 限られるものではない。 糖単位のアノマー中心へＸ基を結合させてグリコシド結合、チオグリコシド結 合またはカーボグリコシド結合のいずれかを形成することは、活性化糖誘導体、 たとえば、ハロゲン化グリコシル、チオグリコシド、グリコシルイミデートまた はｎ−ペンテニルグリコシドをＸ基のヒドロキシルまたはチオールと反応させる ことにより行うことができる。エーテル結合またはチオエーテル結合によるＸ基 の結合は、古典的なエーテル調製法を用いて行うことができる。 所望であれば、糖ペプチドを官能化してさらに単糖またはオリゴ糖単位を結合 させることができる。 本発明の他の側面は、好ましくはヒドロキシル基またはアミン基による糖基の 硫酸化である。ヒドロキシル基およびアミン基は、部分的かまたは完全に硫酸化 することができる。 糖基をＸ基により連結した後、糖基を脱保護して遊離のヒドロキシル基および アミン基を生成させる。ついで、遊離のヒドロキシルおよびアミンを適当な硫酸 化剤、たとえばクロロスルホン酸または三酸化硫黄と有機塩基との錯体（これら に限られるものではない）を用い、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、 ヘキサメチルリン酸トリアミド、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳ）またはピリジ ンなどの不活性溶媒中で硫酸化する。当該技術分野で公知の技術を用い、ヒドロ キシル基またはアミン基のいずれかの選択的硫酸化を得ることができる。アミン を硫酸化する場合は、水を溶媒として用いることができる。硫酸後、硫酸基を生 物学的に許容しうるカチオン、たとえばＮａ、Ｋ、Ｌｉ、Ｃａ、Ｍｇ、ＮＨ４、 アルミニウム、エタノールアミン、トリエタノールアミン、モルホリン、ピリジ ンおよびペピリジン（これらに限られるものではない）を有するように修飾する ことができる。 糖ペプチドは固相合成法を用いて合成することができる。一般に、遊離のアミ ンを有する糖を好ましくはＢｏｃ基で標準法により選択的に保護する。Ｂｏｃ− 誘導体を、メリフィールド（Ｍerrifield,Ｒ.Ｂ.）によって記載されているよう に（メリフィールド、Ｂiochemistry（１９６４）３：１３８５；エリクソン（ Ｅrickson,Ｂ.Ｗ.）およびメリフィールド、Ｔhe Ｐroteins、ノイラス（Ｎeura th,Ｈ.）およびヒル（Ｈill,Ｒ.Ｌ.）編、第２巻、第３版、アカデミック・プレ ス、ニューヨーク、２５５−５２７（１９７９）；バラニー（Ｂarany,Ｇ.）お よびメリフィールド、Ｔhe Ｐeptides、グロス（Ｇross,Ｅ.）およびメリフィー ルド編、第２巻、アカデミック・プレス、ニューヨーク、３−２８５（１９７９ ））メリフィールド樹脂に結合させる。 Ｎ−保護した樹脂結合糖を酸、好ましくはトリフルオロ酢酸で処理して遊離ア ミノ酸樹脂結合誘導体を得ることにより、Ｂｏｃ基を除去してさらに伸長させる ことができる。Ｂｏｃ−誘導体と遊離アミノ樹脂結合誘導体とを上記方法を用い てカップリングすると、樹脂に結合した保護二糖ペプチドが得られる。保護基を 上記と同様にして除去し、メリフィールドによって記載されているようにフッ化 水素で処理することにより樹脂から糖ペプチドを脱離させる。この方法を繰り返 すことにより所望の長さの糖ペプチドを得ることができる。 本発明の糖ペプチドの調製に有用な有機溶媒としては、これらに限られるもの ではないが、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、１,４−ジオキサン、酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ ）、ヘキサメチルリン酸トリアミド、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン（Ｔ ＨＦ）、およびピリジンが挙げられる。ＴＬＣとは薄層クロマトグラフィーをい う。ヘパリンからの糖アミノ酸および関連するグリコサミノグリカン グリコサミノグリカンの二糖構成成分は、これまでに報告された種々の仕方で 生成および単離することができる（カス、「ヘパリンおよびヘパリン断片の構造 」、ヘパリンおよび関連多糖、レイン、ブヨルク（Ｉ.Ｂjork）およびリンダー ル、Ａnn.Ｎ.Ｙ.Ａcad.Ｓci.（１９８９）５５６：１−１７）。これら方法はヘ パリンにおいて最もしばしば応用されているが、他のグリコサミノグリカンおよ び関連多糖、たとえばヘパラン硫酸、Ｋ５およびＫ４細菌多糖などの他のグルコ サミノグリカン、およびコンドロイチン、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸 などのガラクトサミノグリカン、並びにヒアルロン酸およびケラタン硫酸にも応 用することができる（ラガジ（Ｍ.Ｒagazi）ら、Ｊ.Ｃarbohydr.Ｃhem.１２（４ ＆５）５２３−５３５（１９９３））。ヘパリン二糖を生成および単離するため の下記手順はこの方法を説明するものであり、当業者であればこれら方法を他の グリコサミノグリカン物質に応用する仕方がわかるであろう。ヘパリン二糖生成のＨＯＮＯ脱重合からのヘパリン由来糖アミノ酸 ヘパリンおよび関連多糖を亜硝酸脱重合して還元末端に２,５アンヒドロアル ドース残基を生成すること（シブリー（Ｓhively）およびコンラッド（Ｃonrad ）、Ｂiochemistry（１９７６）１５：３９３２−３９４２）は、長年の間知ら れている（フォスター（Ａ,Ｂ.Ｆoster）ら、Ｊ.Ｃhem.Ｓoc.（１９６３）２２ ７９）。それゆえ、アミノ糖に結合したウロン酸を含む二糖繰り返しを有する多 糖（グリコサミノグリカンなど）の完全な脱重合からは、２,５アンヒドロアル ドースにウロン酸が結合した二糖誘導体が得られる。ヘパリンの場合、このグル コサミンに由来する末端アンヒドロアルドースはアンヒドロマンノースである。 コンドロイチンおよびデルマタンなどのガラクトサミノグリカンでは、ガラクト サミン由来の還元末端はアンヒドロタロースである。コンラッド（Ｃonrad）ら （Ａnal.Ｂiochemistry（１９８９）１７６、９６−１０４）並びに他の研究者 は、亜硝酸法を用いたヘパリンの完全な脱重合の効率的な方法を報告している。 この方法は、下記に示すとおりである。 実施例 実施例１ サッカロアミノ酸−１−アミノ−１−デオキシウロン酸誘導体−の合成 （２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルクロピラノシルアジド）ウ ロン酸メチル（１） （２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシルブロミド）ウ ロン酸メチル（８ｇ）をＤＭＦ（１００ｍｌ）に溶かし、その溶液へナトリウム アジド（３．２５ｇ）とリチウムアジド（２．２５ｇ）の１：１混合物を加えた 。得られた混合物を室温で一晩撹拌し、クロロホルム（５００ｍｌ）と水で希釈 した。有機層を水洗し蒸発させた。残渣をエタノールから結晶化して（１）を得 た（６．６７ｇ、９２％）。 （２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル− −Ｄ−グルコピラノシルアミン）ウロ ン酸メチル（２） （１）（０．４８ｇ）の酢酸エチル（１０ｍｌ）溶液を１０％パラジウム炭素 （Ｐｄ−Ｃ、０．１ｇ）の存在下に室温で大気圧下に１時間水素添加した。触媒 を濾去し、濾液を濃縮してシロップ（２）（０．４４ｇ、１００％）を得た。 ２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−１−アジド−１−デオキシ−β−Ｄ−グル コピランウロン酸（６） （ａ）２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−クルコピラノシルア ジド（３）（５．６ｇ）のメタノール（５０ｍｌ）溶液へ、１Ｍのメタノール性 ナトリウムメトキサイド（０．５ｍｌ）を加え、その溶液を０℃で一晩撹拌し、 次いでＡＧ５０Ｗ−Ｘ８（Ｈ⁺）イオン交換樹脂で中和した。樹脂を濾去し、濾 液を蒸発し減圧乾燥して、公知のβ−Ｄ−グルコピラノシルアジド（４）を得た 。 組成物（４）（３．０５ｇ）を乾燥ピリジン（５０ｍｌ）に溶解し、クロロト リフェニルメタン（５．０１ｇ）を加え、反応混合物を７０℃で３時間撹拌した 。それを０℃に冷却し、無水酢酸（６．３６ｇ）を滴下し、その混合物を室温で 一晩撹拌した。それを氷水へ注ぎ、クロロホルム（３００ｍｌ）で希釈した。有 機層を水、１Ｍ塩酸、水で逐次洗い、乾燥し、蒸発させて２，３，４−トリ−Ｏ −アセチル−６−Ｏ−トリチル−β−Ｄ−グルコピラノシルアジド（５）（６７ ．６７ｇ，９０％）を得た。 アセトン（７０ｍｌ）中の組成物（５）（７．６７ｇ）を、三酸化クロム（８ ．０２ｇ）の３．５Ｍ硫酸（１０ｍｌ）溶液でジョーンズ酸化して（６）を得た 。これをカラムクロマトグラフィーで精製し２．８６ｇ（６２％）の最終生成物 を得た。 （ｂ）（１）（３７１ｍｇ）をピリジン中でヨウ化リチウム（６７０ｍｇ）で 選択的脱エステル化して、遊離のカルボン酸（６）（１６５ｍｇ，４７％）を得 た。 １−アジド−１−デオキシ−２，３，４−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グ ルクロン酸（７） ピリジン（５０ｍＬ）中の組成物（４）（３．５１ｇ）の溶液へ７０℃で次い でそれを０℃に冷却し、その溶液へベンゾイルクロライド（１０．３７ｍＬ）を 滴下した。反応混合物を室温で一晩撹拌し、氷水へ注ぎ、クロロホルム（５００ ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、２Ｍ塩酸および水で洗い、乾燥しそして蒸 発させた。粗製物（２，３，４−トリ−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−トリチル−β −Ｄ−グルコピラノシルアジド）（１１．４０ｇ）を、ジョーンズ法を用いてア セトン（２５０ｍＬ）中０℃で、３．５Ｍ硫酸中の三酸化クロム（８．０２ｇ） の溶液で直接酸化した。得られたものをカラムクロマトグラフィー（トルエン− ２−プロパノール、４：１）で精製して、１−アジド−１−デオキシ２，３，４ −トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルクロン酸（７．４２ｇ，８９％）を得た 。 １−アミノ−１−デオキシウロン酸誘導体の構造 実施例２ サッカロアミノ酸−２−アミノ−２−デオキシウロン酸誘導体−の合成 ３，４−ジ−Ｏ−アセチル−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−２−デオ キシ−α−Ｄ−グルクロピラノシルウロン酸メチル（１０） 乾燥ピリジン（３０ｍｌ）中のメチル２−ベンジルオキシカルボニルアミノ− ２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシド（８）（６．３６ｇ）の溶液へ、トリ フェニルメチルクロライド（８．１２ｇ）を加えた。混合物を７０℃で３時間撹 拌した。室温に冷却後、無水酢酸（５．４９ｇ）を加え、この混合物を室温で一 晩撹拌した。それを氷水へ注ぎ、（５）で述べたようにして処理した。カラムク ロマトグラフィー（トルエン−酢酸エチル、８５：１５）によりメチル３，４− ジ−Ｏ−アセチル−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−２−デオキシ−６− Ｏ−トリフェニルメチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（９）（１１．６５ｇ，９ ６％）を得た。 アセトン（１００ｍｌ）中のカラムクロマトグラフィーで精製後の組成物（９ ）（１１．６５ｇ）を、３．５Ｍ硫酸（１５ｍｌ）中の三酸化クロム（１０．７ ｇ）溶液でジョーンズ酸化して、酸（１０）（５．３６ｇ，７１％）を得た。 （メチル３，４−ジ−Ｏ−アセチル−２−アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グ ルコピラノシド）ウロン酸メチル（１２） 乾燥メタノール中の（１０）（１．８ｇ）の溶液へ、ＡＧ５０Ｗ−Ｘ８（Ｈ⁺ ）イオン交換樹脂を加え、混合物を一晩撹拌した。樹脂を濾去し、濾液を蒸発さ せ た。残渣をカラムクロマトグラフィー（トルエン−酢酸エチル、３：２）で精製 して、（メチル３，４−ジ−Ｏ−アセチル−２−ベンジルオキシカルボニルアミ ノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシド）ウロン酸メチル（１１）（１． ６８ｇ，９３％）を得た。 （１１）（２１９ｍｇ）の酢酸エチル（５ｍｌ）溶液を、１０％Ｐｄ−Ｃ（０ ．１ｇ）の存在下に、室温で大気圧で１時間水素添加した。触媒を濾去し、濾液 を蒸発させて（１２）をシロップとして得た（１５７ｍｇ，１００％）。 ３，４−ジ−Ｏ−ベンゾイル−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−２−デ オキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（１４） メチル２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコ ピラノシド（４．９１ｇ）をピリジン（２０ｍＬ）に溶解し、溶液にクロロトリ フェニルメタン（６．３０ｇ）を加え、反応混合物を一晩７０℃で撹拌した。反 応混合物を０℃に冷却し、ベンゾイルクロライド（５．２２ｍＬ）を滴下し、混 合物を一晩室温で撹拌した。それを氷水に注ぎ、クロロホルム（２ｘ２００ｍＬ ）で抽出した。有機層を分離し、２Ｍ塩酸と水で洗い、乾燥し、溶媒を蒸発させ 、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（トルエン−酢酸エチル、９５：１→９ ：１）で精製して、メチル３，４−ジ−Ｏ−ベンゾイル−２−ベンジルオキシカ ルボニルアミノ−２−デオキシ−６−Ｏ−トリチル−α−Ｄ−グルコピラノシド （１３）を得た（０．９９ｇ，９４％）。 組成物（１３）（９．９９ｇ）を、アセトン中で三酸化クロム（８．９８ｇ） の３．５Ｍ硫酸（１０ｍＬ）溶液でジョーンズ酸化し粗製の標記生成物を得、こ れをカラムクロマトグラフィー（トルエン−２−プロパノール、９：１→３：２ ）で精製して、遊離のウロン酸（１４）（４．８０ｇ，６８％）を得た。 メチル３，４−ジ−Ｏ−アセチル−２−（９−フルオレニルメトキシカルボニ ル）アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（１７） Ｄ−グルコサミン塩酸塩（１３．５７ｇ）と炭酸水素ナトリウム（１０．５９ ｇ）を水（４５ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却し、Ｆｍｏｃ塩化物（１９．７０ｇ ）の１，４−ジオキサン（５０ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を一晩室温で 撹拌し、沈澱した白色固体を濾過して集め、８０％メタノールから再結晶してＦ ｍｏｃで保護されたグルコースアミン（２１．６８ｇ，９０％）を得た。 メチルグリコシドを生成するために、上記の生成物の７．００ｇを１％塩酸を 含むメタノール中で一晩還流し、その溶液を室温まで冷却し、重炭酸ソーダで中 和した。固形物を濾去し、溶媒を蒸発させ、粗製の生成物を９５％エタノールで 再結晶して、メチル２−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ−２− デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシド（１５）（６．５４ｇ，９０％）を得た。 ［α］_D＋５８．８（ｃ１．１７，クロロホルム）。 粗製物（１５）を、既述のようにピリジン（１５ｍＬ）中で遊離糖とクロロト リフェニルメタン（４．１８ｇ）と反応させてアセチル化６−Ｏ−トリチル誘導 体に変換し、６．６９ｇ（９０％）のメチル３，４−ジ−Ｏ−アセチル−２−（ ９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ−２−デオキシ−６−トリチル− α−Ｄ−グルコピラノシド（１６）を得た。 組成物（１６）（６．６９ｇ）を、ジョーンズ酸化（３．５Ｍ硫酸中の三酸化 クロム４．５０ｇの溶液）によりウロン酸に変換して、標記の生成物（１７）を 得た。 メチル３，４−ジ−Ｏ−ベンゾイル−２−（９−フルオレニルメトキシカルボ ニル）アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルクロン酸（１９） 組成物（１５）（４．１５ｇ）をピリジン（２５ｍＬ）中でクロロトリフェニ ルメタン（４．１５ｇ）と反応させ、次いで既述のようにベンゾイルクロライド （３．４６ｍＬ）と反応させて、ベンゾイル化されたトリチル誘導体（１８）（ ７．４５ｇ，８６％）を得た。 組成物（１８）（６．４９ｇ）を、既述の方法を用いて酸化し、標記の化合物 （１９）２．９６ｇ（６２％）を得た。 ２−アミノ−２−デオキシウロン酸誘導体の構造 実施例３ サッカロアミノ酸−３−アミノ−３−デオキシウロン酸誘導体−の合成メチル２，４−ジ−Ｏ−ベンゾイル−３−アジド−３−デオキシ−β−Ｄ−グル クロン酸（２７） １，２：５，６−ジ−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ−グルコフラノース（２ ０．８ｇ）を、酢酸エチル（１００ｍＬ）とジメチルスルホキシド（６０ｍＬ） の混合物中、無水燐酸（４．００ｇ）の存在下にＤＣＣ（４２．３０ｇ）で酸化 して、１，２：５，６−ジ−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ−リボーヘキソフラ ノース−３−ウロースとした。沈澱したＤＣＵは濾去し、溶液を飽和重炭酸ソー ダと食塩水で洗い、溶媒を留去した。 同一の化合物はまた、無水酢酸とジメチルスルホキシドを用いての出発物質（ ５０．０ｇ）の酸化によっても合成された。 粗製物を、室温で２時間９５％エタノール（３００ｍＬ）中のナトリウムボロ ハイドライド（３．００ｇ）と撹拌して還元した。溶媒を蒸発させ、残渣をクロ ロホルムと水の間で分配した。有機層を分離し、水洗し、乾燥し、蒸発させて１ ，２：５，６−ジ−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ−アロフラノース（４６．５ ２ｇ，９３％）を得た。これを、室温で一晩ｐ−トルエンスルホニルクロライド （４０．９０ｇ）とピリジン（１２０ｍＬ）中で反応させ、３−Ｏ−トシル誘導 体に変換した。反応混合物を氷水に注ぎ、固形物を集め、エタノールから再結晶 して１，２：５，６−ジ−Ｏ−イソプロピリデン−３−Ｏ−トシル−α−Ｄ−ア ロフラノース（２０）（６１．１７ｇ，８２％）を得た。 組成物（２０）（２８．００ｇ）を、出発物質が全部変換されるまで、１２０ ℃でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４００ｍＬ）中でナトリウムアジド（５４ ．００ｇ）と反応させた。溶媒を留去し、残渣をクロロホルム（５００ｍＬ）に とり、水で抽出し、次いで溶媒を留去した。粗製物をカラムクロマトグラフィー （トルエン−酢酸エチル、８５：１５）で精製して、３−アジド−３−デオキシ −１，２：５，６−ジ−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ−グルコフラノース（２ １）（１５．１３ｇ，７８％）を得た。 組成物（２１）（７．１２ｇ）を、７５％酢酸中で還流してイソプロピリデン 保護基を除去し、保護基のない３−アジド−３−デオキシ−Ｄ−グルコース（２ ２）（５．００ｇ，９７％）を得た。 これをピリジン（１５ｍＬ）中で無水酢酸（１８．００ｍＬ）でアセチル化し て１，２，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−３−アジド−３−デオキシ−Ｄ−グ ルコース（２３）（８．３２ｇ，９３％）を得た。 組成物（２３）（６．４８ｇ）を、０℃でジクロロメタン（２５ｍＬ）の中で 酢酸（８．３１ｍＬ）中の臭化水素酸と反応させ、グリコシルブロマイドに変換 した。反応を通常のように進め、粗製のブロマイドを、酸化水銀（ＩＩ）（１０ ０ｇ）と臭化水銀（ＩＩ）（０．０７ｇ）の存在下にメタノール（７．２０ｍＬ ）と反応させた。臭化物の完全な変換後に、反応混合物をクロロホルム（３００ ｍＬ）で希釈し、セライトのパッドで濾過し、濾液を１０％のヨウ化カリウム水 溶液、水、飽和重炭酸ソーダ水溶液、水で洗浄し、その溶液を乾燥させ、そして 溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラム（トルエン−酢酸エチル、９：１→８ ５：１５）で分離して、メチル２，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−３−アジド− ３−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（２４）（１．９２ｇ，３２％）を得 た。 組成物（２４）（１．８６ｇ）を、ｐＨ＝９でメタノール（１０ｍＬ）中にお いてナトリウムメトキサイドで脱保護した。この溶液を中和し蒸発させて、１． １８ｇ（９８％）のメチル３−アジド−３−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシ ド（２５）を得た。 これをピリジン（１０ｍＬ）中で、（クロロトリフェニルメタン３．００ｇに より）トリチル化し、次いで（ベンゾイルクロライド２．２５ｍＬにより）ベン ゾイル化して、メチル３−アジド−２，４−ジ−Ｏ−ベンゾイル−３−デオキシ −６−Ｏ−トリチル−β−Ｄ−グルコピラノシド（２６）（３．３１ｇ，９２％ ）を得た。 組成物（２６）（３．２８ｇ）をアセトン（１００ｍＬ）中で三酸化クロム（ １．４７ｇ）の３．５Ｍ硫酸溶液で酸化し、その混合物を既述のように処理して 、標記の化合物（２７）を得た（１．５１ｇ，７０％）。 メチル２，４−ジ−Ｏ−アセチル−３−（９−フルオレニルメトキシカルボニ ル）アミノ−３−デオキシ−β−Ｄ−グルクロン酸（３２） 組成物（２１）（２．８５ｇ）を、大気圧下に１０％のパラジウム−活性炭の 存在下に１０％メタノール水溶液（１００ｍＬ）の中で水素添加した。触媒を濾 去し、溶媒を留去した。粗製物を水とジオキサンの（１：１）混合物（３０ｍＬ ）に溶かし、その溶液に重炭酸ソーダ（１．６８ｇ）を加え、固形物が溶けるま でその混合物を撹拌し、次いで０℃に冷却し、ＦｍｏｃＣｌ（２．９８ｇ）の１ ，４−ジオキサン溶液（２５ｍＬ）を滴下し、混合物を一晩撹拌した。反応混合 物 を、２０％のテトラヒドロフラン（２５０ｍＬ）を含有するクロロホルムで希釈 し、有機層を分離して水洗した。カラムクロマトグラフィー（トルエン−酢酸エ チル、６：５）処理して１，２：５，６−ジ−Ｏ−イソプロピリデン−３−（９ −フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ−α−Ｄ−グルコフラノース（４． １８ｇ）を得た。これを７５％酢酸で処理してイソプロピリデン基を加水分解し 、得られた生成物を、ピリジン（２５ｍＬ）中で無水酢酸によりアセチル化した 。混合物を既述のように処理して、２，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−３−（９ −フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ−３−デオキシ−Ｄ−グルコピラノ ース（４．７５ｇ，９６％）を得た。この化合物を、ジクロメタンと酢酸エチル （２：１混合物）（２２５ｍＬ）の中で四酸化チタンと反応させて、グルコシル ブロマイド誘導体へと変換し、次いでこれをトリフルオロメタンスルフォン酸銀 （２．５７ｇ）の存在下にジクロロメタン（１５ｍＬ）中のメタノール（５．２ ｍＬ）と反応させて、ブロマイドをメチルグルコシドへ変換した。粗製物を、カ ラムクロマトグラフィー（トルエン−酢酸エチル、８５：１５）で精製して、メ チル２，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−３−（９−フルオレニルメトキシカルボ ニル）アミノ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（２８）を得た（４． ３８ｇ，９７％）。 組成物（２８）（４．３３ｇ）をメタノール中でナトリウムメトキサイドで脱 アセチル化して２つの生成物を得た。その１つはメチル２−Ｏ−アセチル−３− （９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ−３−デオキシ−β−Ｄ−グル コピラノシド（１９）（０.７６ｇ，２０％）である。 もう１つはメチル３−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ−３−デ オキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（３０）（２．６０ｇ，７８％）である。 組成物（３０）（１．６５ｇ）を、ピリジン（２０ｍＬ）中クロロトリチルフ ェニルアミン（２．０８ｇ）でトリチル化し、次いで無水酢酸（１．３５ｍＬ） でアセチル化して、メチル２，４−ジ−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−トリチル−３− （９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ−３−デオキシ−β−Ｄ−グル コピラノシド（３１）（２．６８ｇ，９１％）を得た。 組成物（３１）（２．５２ｇ）を既述のように処理して標記の化合物（３２） （１．６１ｇ，９２％）を得た。 ３−アミノ−３−デオキシウロン酸誘導体の構造 実施例４ サッカロアミノ酸−４−アミノ−４−デオキシウロン酸誘導体−の合成 メチル２，３−ジ−Ｏ−アセチル−４−アジド−４−デオキシ−β−Ｄ−グル コピラノシドウロン酸（３７） メチルβ−Ｄ−ガラクロピラノシド（７．００ｇ）をピリジン（５０ｍＬ）に 溶解し、溶液を−３０℃に冷却した。ベンゾイルクロライドをこの溶液に滴下し た。通常の処理を行って、メチル２，３，６−トリ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガ ラクトピラノシド（３３）（１０．４５ｇ，５６％）を得た。 組成物（３３）（１０．５２ｇ）を既述のように、ｐ−トルエンスルホニルク ロライド（５．７２ｇ）とピリジン（４０ｍＬ）中で反応させて、メチル２，３ ，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−トシル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（ ３４）（１０．５１ｇ，８０％）を得た。 組成物（３４）（９．３０ｇ）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１５０ｍ Ｌ）中でナトリウムアジド（４．５５ｇ）と処理した。反応を既述のようにして 行い、生成物をカラムクロマトグラフィー（トルエン−酢酸エチル、９：１→４ ：１）で精製して、メチル４−アジド−２，３，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−４ −デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（３５）（６．２１ｇ，８３％）を得た 。 組成物（３５）（６．１０ｇ）を、メタノール（１００ｍＬ）中でナトリウム オキサイドで脱ベンゾイル化して、メチル４−アジド−４−デオキシ−β−Ｄ− グルコピラノシド（３６）（２．５２ｇ，定量的）を得た。 組成物（３６）（０．８８ｇ）を、飽和重炭酸ソーダ溶液の中で、ＴＥＭＰＯ （４０ｍｇ）の存在下に次亜塩素酸ソーダ（２７ｍＬ）で酸化した。出発物質を 完全に変換後、反応混合物を凍結乾燥し、残渣をピリジン（１０ｍＬ）にとり、 そしてアセチル化した。アセチル化した４−アジドウロン酸を、カラムクロマト グラフィー（トルエン−１０％メタノール水溶液−アセトン、２：１：１）で単 離して、標記の化合物（３７）（０．６２ｇ、６７％）を得た。 メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−（９−フルオレニルメトキシカルボ ニル）アミノ−４−デオキシ−β−Ｄ−グルコオピラノシドウロン酸（４０） 組成物（３６）（３．２８ｇ）を、大気圧下で１０％パラジウム−活性炭の存 在下に、メタノールと水の混合物（２：１）（６０ｍＬ）の中で水素添加して、 遊離のアミノ誘導体を得た。触媒を濾去し、溶媒を留去した。粗製物を水（３０ ｍＬ）に溶かし、重炭酸ソーダ（２．５２ｇ）を加え、固形物が溶けるまで混合 物を撹拌し、次いで０℃に冷却し、ＦｍｏｃＣｌ（５．０４ｇ）の１，４−ジオ キサン（４０ｍＬ）溶液を滴下し、その混合物を一晩撹拌した。それを、２０％ テトラヒドロフラン（４００ｍＬ）含有のクロロホルムで希釈し、有機層を分離 し、水洗した。カラムクロマトグラフィー（クロロホルム−メタノール、９：１ ）により、メチル４−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ−４−デ オ キシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（３８）（５．２２ｇ，８４％）を得た。 組成物（３８）（５．２２ｇ）を、ピリジン（２０ｍＬ）中でクロロトリフェ ニルアミン（４．９１ｇ）によりトリチル誘導体へ変換し、これをベンゾイルク ロライド（８．７５ｍＬ）でベンゾイル化して、メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾ イル−４−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ−４−デオキシ−６ −Ｏ−トリチル−β−Ｄ−グルコピラノシド（３９）（９．５７ｇ，８８％）を 得た。 組成物（３９）（４．５０ｇ）を、既述のように酸化して標記化合物（４０（ ３．１４ｇ，９５％）を得た。 ４−アミノ−４−デオキシウロン酸誘導体の構造 実施例５ サッカロアミノ酸−カルボシキル基が糖環に直接結合してない化合物−の合成 メトキシカルボニルメチル６−アイノ−６−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノ シド（４５） アセトブロモグルコース（２０．５６ｇ）を、酸化水銀（ＩＩ）（１．０７ｇ ）と臭化水銀（ＩＩ）の存在下、ジクロロメタン（１００ｍＬ）中のドナーをメ チルグリコレート（２０ｍＬ）と一晩０℃で反応させて、メトキシカルボニルメ チル２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド（４１ ）に変換した。反応混合物をクロロホルムで希釈し、セライトのパッドで濾過し 、濾液を１０％ヨウ化カリウム水溶液および水で洗浄し、乾燥し、蒸発させた。 カラムクロマトグラフィー（トルエン−酢酸エチル、４：１→３：２）で精製し て、保護されたグリコシド（４１）（１２．９７ｇ，６０％）を得た。 組成物（４１）（７．００ｇ）を、ナトリウムメトキサイドでｐＨを８〜９に 調節しメタノール（１００ｍＬ）中で脱アセチル化した。この溶液を中和し、溶 媒を留去した。残渣を減圧乾燥し、ピリジン（５０ｍＬ）に溶解し、ｐ−トルエ ンスルホニルクロライド（３．４０ｇ）で処理して６−Ｏ−トシル誘導体とし、 これを無水酢酸（１０．１０ｍＬ）でアセチル化した。反応混合物を氷水に注ぎ 、通常の処理のあと、粗製物をエタノールから再結晶して、結晶状のメトキシカ ルボニルメチル２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−トシル−β−Ｄ−グ ルコピラノシド（４２）（７．８５ｇ，９１％）を得た。 組成物（４２）であるこの誘導体（５．３２ｇ）を、既述の方法を用いてアジ ド誘導体に変換して、メトキシカルボニルメチル２，３，４−トリ−Ｏ−アセチ ル−６−アジド−６−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（４３）（３．４３ ｇ，８５％）を得た。 組成物（４３）（０．６１ｇ）を、メタノール（１０ｍＬ）中ナトリウムメト キサイドで脱アセチル化した。出発物質が完全に変換されたあと、反応混合物を ＡＧ５０Ｗ−Ｘ８［Ｈ⁺］イオン交換樹脂で中和し、溶媒を留去して、０．４１ ｇ（定量的）のメトキシカルボニルメチル６−アジド−６−デオキシ−β−Ｄ− グルコピラノシド（４４）を得た。 次いでこれを、１０％のパラジウム−活性炭の存在下にメタノール中で水素化 分解すると、遊離のアミン（４５）が得られる。 メトキシカルボニルメチルＤ−グルコピラノシド誘導体の構造 実施例６ サッカロアミノ酸−Ｃ−グリコシルアミノ酸−の合成 ３−Ｃ−（２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｌ−フコピラノシル）−Ｎ −ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアラニンエチルエステル（５０） ２−（トリメチルシリルメチル）アクリル酸エチル（１５ｇ）を、窒素中で１ −Ｏ−アセチル−２，３，４−トリ−Ｏ−トリベンジル−Ｌ−フコピラノース（ １６ｇ）のアセトニトリル（１００ｍＬ）に加えた。混合物を０℃に冷却し、こ の冷却溶液に三フッ化ホウ素エーテレート（１２ｍＬ）を加えた。反応混合物を 一晩撹拌し、ゆっくり室温とした。反応混合物を０℃に冷却し、重炭酸ソーダ水 溶液で中和し、ジクロロメタン（５００ｍＬ）で希釈し、水洗（１００ｍＬで３ 回）した。ジクロロメタン溶液を硫酸ソーダ上で乾燥し、そして濃縮した。残渣 をシリカゲルによるカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル、８：１ ）にふして、白色ガム状のエチル３−Ｃ−（２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル− α−Ｌ−フコピラノシル）−メタクリレート（４６）（９．６６ｇ，５５％）を 得た。［α］_D−３２．８（ｃ１．１０，クロロホルム）；Ｒ_f０．３４（ヘキサ ン−アセトン、５：１）；ＭＳ：［Ｍ＋Ｎａ］⁺５５３．４、［Ｍ＋Ｈ］⁺５３１ ．３。 ジクロロメタン−メタノール混合物（４：１、１２５ｍｌ）中の（４６）（９ ．６６ｇ）の溶液を−７８℃に冷却し、青色が現れるまでＯ₃を注意深く溶液の 中 へ吹き込んだ。反応混合物をジメチルサルファイド（１５ｍＬ）でクエンチング し、室温になるまで一晩ゆっくり撹拌して加温した。溶媒と過剰のジメチルサル ファイドを留去し、残渣をメチレンクロライド（４００ｍＬ）に溶かし、その溶 液を重炭酸ソーダ水溶液と水（２ｘ１００ｍＬ）で洗い、硫酸ソーダで乾燥した 。濃縮後、３−Ｃ−（２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｌ−フコピラノシ ル）−ピルビン酸エチル（４７）を透明な油として得た（９．５ｇ，９５％）。 このものは、次の工程にそのまま使用できる程度に純粋であった。 少量の生成物を、カラムクロマトグラフィーで精製し、この精製標本について 次の分析データを得た。Ｒ_f０.３８（ヘキサン−酢酸エチル、４：１）、［α］_D −２３．２（ｃ１．８、クロロホルム）；ＭＳ：［Ｍ＋Ｎａ］⁺５５５．４、［ Ｍ−Ｎａ−ＮａＯＢｎ］４２５．４。 エタノール（１５ｍＬ）中の化合物（４７）（９５ｇ）の溶液を、室温でヒド ロキシルアミンクロライド（４．６ｇ）のピリジン−エタノール（１：１、１０ ０ｍＬ）溶液へ加えた。反応混合物を１時間撹拌し、氷水（２００ｍＬ）へ注ぎ 、１０分間撹拌し、ジクロロメタン（３ｘ１５０ｍＬ）で抽出した。ジクロロメ タン溶液を合併し、硫酸ソーダで乾燥し、濃縮して、透明な油として９．８５ｇ （９５％）の３−Ｃ−（２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｌ−フコピラノ シル）ピルビン酸エチルオキシムを得た。少量の粗製物（０．６４ｇ）を、カラ ムクロマトグラフィー（トルエン−アセトン、９：１）で精製した。２つの分画 を採取したところ、ＮＭＲによりこれらはＥ及びＺオキシムであることが判明し た。異性体１：０．０３０ｇ、Ｒ_f０．５（トルエン−アセトン、８：１）；［ α］_D−３６．１（ｃ１．０、クロロホルム）；ＦＡＢ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｎａ］⁺５ ７０．４、［Ｍ＋Ｈ］⁺５４８．４。異性体２：０．５５０ｇ；Ｒ_f０．３８（ト ルエン−アセトン、８：１）；［α］_D−４３．１、（ｃ１．７、クロロホルム ）；ＭＳ：異性体１と同じ。 （４８）（８．７ｇ）のエタノール（３０ｍＬ）溶液を、２日間室温でラネー ニッケルの存在下に水素添加した。ＴＬＣ（トルエン−アセトン、３：１）によ れば、出発物質は存在しておらず、約１：１の比率で２つの新しいスポット （Ｒ_f０．３９及びＲ_f０．３２）が現れていた。セライトを通して固形物を濾去 し、エタノールで洗浄した。濾液と洗液を合併し、濃縮し、透明な油として３− Ｃ−（２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｌ−フコピラノシル）アラニンエ チルエステル（４９）（７．０６ｇ、８４％）を得た。このものは直接に次の工 程へ用いた。 （４９）（７．０６ｇ）のエタノール（４０ｍＬ）溶液を、過剰のジ−ｔｅｒ ｔ−ブチルジカーボネートへ室温で添加した。反応混合物を１時間撹拌し、次い で蒸発乾燥させた。残渣をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−エーテル、３ ：１）で精製して、（５０）のＤ−およびＬ−立体異性体を得た。収量は併せて ７．１６ｇ、８０％。異性体１：２．５ｇ、Ｒ_f０．２８（ヘキサン−エーテル 、２：１）；［α］_D−２５．３（ｃ１．２５、クロロホルム）；ＦＡＢ−ＭＳ ：［Ｍ−ＣＯ₂ＣＨ₂ＣＨ₃］５５８．２。異性体２：３．２ｇ、Ｒ_f０．２５（ヘ キサン−エーテル、２：１）；［α］_D−１８．７（ｃ１．２５、クロロホルム ）；ＦＡＢ−ＭＳ：異性体１と同じ。 Ｃ−グリコシルアミノ酸誘導体の構造 実施例７ サッカロペプチド−（１→６）結合ホモオリゴマー−の合成 Ｎ−（メチル２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−Ｄ−グルコピラノ−１−シル ウロネート）−（１−アジド−１−デオキシ−２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル −β−Ｄ−グルコピラヌロアミド）（５１α及び５１β） （ａ）組成物（２）（０．４３２ｇ）及び（６）（４０３ｍｇ）をＤＭＦ（５ ｍｌ）に溶解し、この溶液へＮ−イソブトキシカルボニル−２−イソブトキシ− １，２−ジヒドロキノン（ＩＩＤＱ）（３８５μｌ）を加えた。反応混合物を、 遊離カルボン酸誘導体が消費されるまで室温で撹拌した。溶媒を留去し、残渣を カラムクロマトグラフィー（トルエン−アセトン、９：１→８５：１５）で精製 してＮ−｛メチル２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノ−１ −シルウロネート｝−｛１−アジド−１−デオキシ−２，３，４−トリ−Ｏ−ア セチル−β−Ｄ−グルコピラヌロアミド｝（５１β、２４８ｍｇ，３１％）を得 た。 α異性体、すなわちＮ−｛メチル２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ− グルコピラノ−１−シルウロネート｝−｛１−アジド−１−デオキシ−２，３， ４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラヌロアミド｝（５１α）は、２番 目に溶離された（２４８ｍｇ、３１％）。 （ｂ）ＩＩＤＱの代わりにＮ，Ｎ−ジイソプロイルカルボジイミド（ＤＩＣ） を用いて（２）と（６）をカップリングさせ、上記と同様の比率で、そしてより 高い収率（５９２ｍｇ，７４％）で（５１α）及び（５１β）を得た。 （ｃ）ＤＭＦの代わりに溶媒としてＴＨＦを用いて（２）と（６）をカップリ ングさせ、（５１β）のみを得た（収率８７％）。 Ｎ−（メチル−Ｄ−グルコピラノ−１−シルウロネート）−（１−アジド−１ −デオキシ−β−Ｄ−グルコピラヌロンアミド）（５１α及び５２β） （５１β）（６６ｍｇ）のメタノール（５ｍ）溶液へ、１Ｍメタノール性ナト リウムメトキサイド（０．２ｍｌ）を加え、その溶液を０〜５℃で撹拌した。脱 アセチル化生成物を、溶液から結晶化させた。生成物を濾去し、冷メタノールで 洗浄してＮ−（メチルβ−Ｄ−グルコピラノ−１−シルウロネート）−（１−ア ジド−１−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノ−１−シルウロネート）（５２β） （３９ｍｇ，９６％）を得た。 組成物（５１α）を上述のようにして脱アセチル化した。反応混合物を、ＡＧ ５０Ｗ−８（Ｈ⁺）イオン交換樹脂で中和した。樹脂を濾去し、溶媒を留去して Ｎ−（メチルα−Ｄ−グルコピラノ−１−シルウロネート）−（１−アジド−１ −デオキシ−β−Ｄ−グルコピラヌロンアミド）（５２α、３８ｍｇ，９５％） を得た。 Ｎ−（Ｄ−グルコピラノ−１−シルウロン酸）−１−アジド−１−デオキシ− β−Ｄ−グルコピラノヌロアミド（５３α及び５３β） 脱アセチル化生成物（５２β）（３２ｍｇ）を０．１ＭのＮａＯＨ（２ｍｌ） に溶かし、０〜５℃に一晩保持した。溶液をＡＧ５０Ｗ−Ｘ８（Ｈ⁺）イオン交 換樹脂で中和し、濾過し、濾液を凍結乾燥してＮ−（β−Ｄ−グルコピラノ−１ −シルウロン酸）−１−アジド−１−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラヌロンアミ ド（５３β）（３０ｍｇ、９７％）を得た。 脱アセチル化生成物（５２α）（３２ｍｇ）を、上述と同様に処理して、Ｎ− （α−Ｄ−グルクロピラノ−１−シルウロン酸）−１−アジド−１−デオキシ− β−Ｄ−グルコピラヌロンアミド（５３α）（３２ｍｇ、１００％）を得た。 Ｎ−（メチル２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノ−１− シルウロネート）−Ｎ−（２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルクロ ピラノ−１−シルウロナミド）−（１−アジド−１−デオキシ−２，３，４−ト リ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノ−１−シルウロナミド）（５５） （５１β）（０．５０ｇ）の酢酸エチル（１０ｍＬ）溶液を、大気圧下で室温 において１０％パラジウム−活性炭１５０ｍｇの存在下に水素添加して、アミン （５４）を得た。［α］_D＋２３．１°（ｃ０．３２、クロロホルム）。 組成物（５４及び６）（０．２６ｇ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶かし、その溶 液へＨＯＢＴ（０．２５ｇ）とＤＩＣ（０．２５ｍＬ）を加えた。反応混合物を 既述のようにして処理し、カラムクロマトグラフィー（トルエン−アセトン、３ ：２）で生成して、標記の化合物（５５）を得た。０．６２ｇ、８７％。 Ｎ−（メチルβ−Ｄ−グルコピラノ−１−シルウロネート）−Ｎ−（β−Ｄ− グルコピラノ−１−シルウロナミド）−（１−アジド−１−デオキシ−β−Ｄ− グルコピラノ−１−シルウロナミド）（５６） 組成物（５５）（０．１９ｇ）を、メタノール（１５ｍＬ）中で触媒量の１Ｍ ナトリウムメトキサイドで脱アセチル化して、標記の生成物（５６）０．１０ｇ （９０％）を得た。［α］_D−６２．１（ｃ Ｎ−（β−Ｄ−グルコピラノ−１−シルウロネート）−Ｎ−（β−Ｄ−グルコ ピラノ−１−シルウロナミド）−（１−アジド−１−デオキシ−β−Ｄ−グルコ ピラノ−１−シルウロナミド）（５７） 組成物（５６）（８３ｍｇ）を０℃で１分間０．１ＭのＮａＯＨ（２ｍｌ）で 処理して、遊離のウロン酸（５７）８０ｍｇ（９９％）を得た。 Ｎ−（メチル２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノ−１− シルウロネート）−Ｎ−（２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピ ラノ−１−シルウロナミド）−Ｎ−（２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ −グクコピラノ−１−シルウロナミド）−（１−アジド−１−デオキシ−２，３ ，４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノ−１−シルウロナミド）（５ ８） 組成物（５５）（０．２０ｇ）を、０．１５ｇの１０％のパラジウム−活性炭 の存在下に酢酸エチル（１０ｍＬ）で水素添加して、保護されたアミンを得た。 これを、ＴＨＦ（５ｍＬ）とＤＩＣ（６０ｍＬ）中で（６）（８０ｍｇ）とカッ プリングさせて、保護されたテトラマー（５８）（０．２１ｇ、８０％）を得た 。 Ｎ−（メチルβ−Ｄ−グルコピラノ−１−シルウロネート）−Ｎ−（β−Ｄ− グルコピラノ−１−シルウロナミド）−Ｎ−（β−Ｄ−グルコピラノ−１−シル ウロナミド）−（１−アジド−１−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノ−１−シル ウロナミド）（５９） 組成物（５８）（０．２１ｇ）を、メタノール（１０ｍｌ）中の１Ｍナトリウ ムメトキサイドで脱アセチル化して、０．１１ｇ（９２％）の（５９）を得た。 Ｎ−（β−Ｄ−グルコピラノ−１−シルウロネート）−Ｎ−（β−Ｄ−グルコ ピラノ−１−シルウロナミド）−Ｎ−（β−Ｄ−グルコピラノ−１−シルウロナ ミド）−（１−アジド−１−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノ−１−シルウロナ ミド）（６０） 組成物（５９）（０．１１ｇ）を、１ＭのＮａＯＨ（２ｍＬ）に溶かし、０℃ で１分間保持した。この溶液を、ＡＧ−５０Ｗ−Ｘ８（Ｈ⁺）イオン交換樹脂で 中和し、凍結乾燥して、保護されてないテトラマー（６０）を定量的に得た。 （１→６）結合ホモオリゴマーサッカロペプチドの構造 実施例８ サッカロペプチド−（２→６）ホモオリゴマー−の合成 メチル｛メチル３，４−ジ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−２−［（メチル３ ，４−ジ−Ｏ−アセチル−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−２−デオキシ −α−Ｄ−グルコピラノシド）ウロナミド］−α−Ｄ−グルコピラノシド｝ウロ ネート（６１） （ａ）組成物（１２）（１５７ｍｇ）と（１０）（２１６ｍｇ）をＴＨＦ（５ ｍｌ）に溶かし、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイ ミド塩酸塩（ＤＥＣ）（９５ｍｇ）とＮ−ヒドロキシベンズトリアゾール（ＨＯ ＢＴ）（６ｍｇ）を加えた。反応混合物を、室温で一晩撹拌した。反応混合物を 室温で一晩撹拌した。混合物を水とクロロホルム（２０ｍｌ）で希釈し、有機層 を分離し、水洗（２ｘ５ｍｌ）し、蒸発させた。カラムクロマトグラフィー（ト ルエン−アセトン、３：２）により組成物（６１）（１４９ｍｇ、４１％）を得 た。 （ｂ）ＤＥＣの代わりに、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ） を用いて（１２）と（１０）をカップリングさせ、さらに高収率（９５％）で（ １５）を得た。 メチル｛メチル２−デオキシ−２−［（メチル２−ベンジルオキシカルボニル アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドウロナミド）−α−Ｄ−グル コピラノシド］｝ウロネート（６２） ジサッカロペプチド（６１）（０．１１ｇ）をメタノール（１０ｍＬ）に溶か し、触媒量のナトリウムアジドで脱アセチル化して（６２）（０．０８ｇ、９８ ％）を得た。［α］_D＋４．０４° メチル（２−デオキシ−２−（メチル２−ベンジルオキシカルボニルアミノ− ２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドウロナミド）−α−Ｄ−グルコピラノ シドウロン酸（６３） 組成物（６２）を１ＭのＮａＯＨで処理して遊離の酸（６３）７４ｍｇ（１０ ０％）を得た。 メチル２−デオキシ−２−（メチル２−アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グル コピラノシドウロナミド）−α−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（６４） 組成物（６３）（７４ｍｇ）を、活性炭（５０ｍｇ）上の１０％パラジウムの 存在下に酢酸（５ｍＬ）で水素添加して、（６４）（５５ｍｇ、１００％）を得 た。 メチル｛メチル３，４−ジ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−２−［メチル３， ４−ジ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−２−（メチル３，４−ジ−Ｏ−アセチル −２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノ シドウロナミド）−α−Ｄ−グルコピラノシドウロナミド］−α−Ｄ−グルコピ ラノシド｝ウロネート（６６） （６１）（４３０ｍｇ）の酢酸エチル（１５ｍｌ）溶液を、室温と大気圧下で １時間１０％Ｐｄ−Ｃ（１５０ｍｇ）の存在下に水素添加した。触媒を濾去し、 濾液を留去して、メチル｛メチル３，４−ジ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−２ −［（メチル３，４−ジ−Ｏ−アセチルアミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコ ピラノシド）ウロナミド］−α−Ｄ−グルコピラノシド｝ウロネート（６５）（ ３５０ｍｇ、１００％）を得た。これを直接にカップリング反応に用いた。組成 物（６５）（３５０ｍｇ）と（１２）（２６０ｍｇ）をＴＨＦ（１０ｍｌ）に溶 かし、この溶液へ１，３−ジイソプロピルカルボジイミド（０．１ｍｌ）及びＨ ＯＢＴ（５０ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温で２日間撹拌した。反応混合物 を、（６１）のところで述べたように処理した。カラムクロマトグラフィーによ り標記の生成物（６６）（５６０ｍ、９３％）を得た。 メチル｛メチル２−デオキシ−２−［メチル２−デオキシ−２−（メチル２− ベンジルオキシカルボニルアミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドウ ロナミド）−α−Ｄ−グルクロピラノシドウロナミド］−α−Ｄ−グルコピラノ シド｝ウロネート（６７） 組成物（６６）（０．１９７ｇ）を、既述のようにして脱アセチル化して０． １４０ｇ（９５％）の（６７）を得た。 メチル／メチル３，４−ジ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−｛メチル３，４− ジ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−２−［メチル３，４−ジ−Ｏ−アセチル−２ −デオキシ−２−（メチル３，４−ジ−Ｏ−アセチル−２−ベンジルオキシカル ボニルアミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドウロナミド）−α−Ｄ −グルコピラノシドウロナミド］−α−Ｄ−グルコピラノシドウロナミド｝−α −Ｄ−グルコピラノシド／ウロネート（６８） （６６）（３２ｍｇ）の溶液を上述のように水素添加し、そして遊離のアミン （２７０ｍｇ）を、上述のようにＴＨＦと１，４−ジオキサンの混合物中で（１ ２）（１３０ｍｇ）とカップリングさせ、標記の組成物（６８）（２８０ｍｇ、 ７２％）を得た。 メチル２−デオキシ−２−｛メチル２−デオキシ−２−［メチル２−デオキシ −２−（メチル２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−２−デオキシ−α−Ｄ− グルコピラノシドウロナミド）−α−Ｄ−グルコピラノシドウロナミド］−α− Ｄ−グルコピラノシドウロナミド｝−α−Ｄ−グクコピラノシドウロン酸（６９ ） 組成物（６８）（０．１３ｇ）を脱アセチル化して、０．０７４ｇ（８０％） の（６９）を得た。 （２→６）結合ホモオリゴマーサッカロペプチドの構造 実施例９ サッカロペプチド−１−アミノグルクロン酸Ｃ−端末単位をもつヘテロオリゴ マーの合成 Ｎ−（メチル２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノ−１− シルウロネート）−（メチル３，４−ジ−Ｏ−アセチル−２−ベンジルオキシカ ルボニルアミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドウロナミド）（７０ ） 組成物（２）（０．７０ｇ）と（１０）（０．８５ｇ）をジクロロメタン（１ ０ｍＬ）に溶かし、ＨＯＢＴ（０．４０ｇ）とＤＩＣ（０．４７ｍＬ）を加え、 反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応を既述のようにして進め、粗製物をカラ ムクロマトグラフィーで精製して、１．２ｇの（７０）を得た。 Ｎ−（メチル−β−Ｄ−グルコピラン−１−オシルウロネート）−（メチル２ −ベンジルオキシカルボニル−アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシ ドウロナミド）（７１） 合成物７０(０．１１g)をメタノール(１０ml)中でナトリウムメトキシドで脱 アセチルして７１(７８mg、収率９８％)を得る。 Ｎ−（β−Ｄ−グルコピラン−１−オシルウロン酸）−（メチル２−ベンジル オキシカルボニル−アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドウロナミ ド）（７２） 合成物７１(０．１１g)を１Ｍ ＮａＯＨ(５ml)に溶解し、０℃にて１分間保持 する。保持終了後、溶液を凍結乾燥して７２(７５mg、収率９７％)を得る。 Ｎ−（β−Ｄ−グルコピラン−１−オシルウロン酸）−（メチル２−アミノ− ２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドウロナミド）（７３） 合成物７２(０．１１g)を大気圧中１０％パラジウム／炭素(５０mg)の存在下 で一夜水素添加する。触媒を濾去し、濾液を蒸発して７３(８０mg、収率８８％) を得る。 Ｎ−（メチルβ−Ｄ−グルコピラン−１−オシルウロネート）−（メチル２− アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドウロナミド）（７４） 合成物７１(８４mg)を大気圧中１０％パラジウム／活性炭の存在下、メタノー ル／水(１０ml)の混合液中にて水添分解する。反応完了後、触媒を濾去し、濾液 を蒸発して遊離アミン誘導体７４(５４mg)を得る。 Ｎ−（メチル２,３,４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラン−１−オ シルウロネート）Ｎ−（メチル３,４−ジ−Ｏ−アセチル−２−アミノ−２−デ オキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドウロネート）−（１−アジド−１−デオキシ −２,３,４−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラン−１−オシルウロナ ミド（７５） 合成物７０(０．５５g)を１０％パラジウム／炭素(１００mg)の存在下、酢酸 エチル(１０ml)中で水素添加してジサッカロペプチドの遊離アミン誘導体を得る 。触媒を濾去し、溶媒を蒸発する。残渣および化合物７(０．４０g)をＴＨＦ(１ ０ml)に溶解する。ＨＯＢＴ(０．１５g)およびＤＩＣ(０．１２ml)を加え、反応 混合物を３日間撹拌する。前述したように反応が完了した後、カラムクロマトグ ラフィーにて精製し、保護トリサッカロペプチド７５(０．７６ｇ、収率９０％) を得る。 Ｎ−(メチル−β−Ｄ−グルコピラン−１−オシルウロネート)−Ｎ−(メチル ２−アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドウロネート)−(１−アジ ド−１−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラン−１−オシルウロナミド)（７６） 合成物７５(０．５６g)をメタノール(１０ml)中でナトリウムメトキシドで脱 アセチルして７６(０．２９g、収率９６％)を得る。 Ｎ−(β−Ｄ−グルコピラン−１−オシルウロン酸)−Ｎ−(メチル２−アミノ −２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドウロネート)−(１−アジド−１−デ オキシ−β−Ｄ−グルコピラン−１−オシルウロナミド)（７７） 合成物７６(０．２５g)を１Ｍ水酸化ナトリウムで処理し、前述のとおり処理 して７７(０．２４g、収率１００％)を得る。 １−アミノ−グルクロン酸Ｃ−末端ユニットを有するサッカロペプチドヘテロ オリゴマーの構造式 β−ＤＧｌｃＡＡｃ＝１−アジド−１−デオキシ−２,３,４−トリ−Ｏ−アセ チル−β−Ｄ−グルコピラヌロン−６−オシル β−ＤＧｌｃＡ＝１−アジド−１−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラヌロン−６ −オシル 実施例１０ ２−アミノ−グルクロン酸Ｃ末端ユニットを有するサッカロペプチドヘテロオ リゴマーの合成 メチル［メチル３,４−ジ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−２−［（１−アジ ド−１−デオキシ−２,３,４−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラン− ウロナミド）−α−Ｄ−グルコピラノシド］］ウロネート（７８） 合成物１２(１．５２g)および７をＴＨＦ(１０ml)およびＤＩＣ(２．３４ml) に溶解し、溶液にＨＯＢＴ(０．８０g)を加える。反応混合物を一夜撹拌し、前 述のとおり処理する。カラムクロマトグラフィーにより、保護ジサッカロペプチ ド７８(３．２７g、収率８０％)を得る。［α］_D＋５２．２°（ｃ１．３８クロ ロホルム），m.p.１３０℃（メタノール）。 メチル［メチル２−デオキシ−２−(１−アジド−１−デオキシ−β−Ｄ−グ ルコピランウロナミド)−α−Ｄ−グルコピラノシド］ウロネート（７９） 合成物７８(０．２１g)を前述のとおり脱アセチルして７９(１００mg、収率９ ５％)を得る。m.p.１９０〜１９１℃。 メチル２−デオキシ−２−(１−アジド−１−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラ ンウロナミド)−α−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（８０） 合成物７９(０．１０g)を水酸化ナトリウムで脱保護して遊離酸８０(９５mg、 収率９７％)を得る。［α］_D＋２４．６（ｃ１．２７，水）。 メチル［メチル３,４−ジ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−２−［２,３,４− トリ−Ｏ−ベンゾイル−１−（１−アジド−１−デオキシ−２,３,４−トリ−Ｏ −ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピランウロナミド）−β−Ｄ−グルコピランウロ ナミド］−α−Ｄ−グルコピラノシド］ウロネート（８１） ＥｔＯＡｃ(２０ml)中の合成物７８(０．６３g)の溶液を１０％Ｐｄ−Ｃ(０． ６g)の存在下、室温にて３．５時間水添分解する。混合物をセライトで濾過し、 固体をＥｔＯＡｃで洗浄する。濾液を合わせ、洗液を濃縮して粗生成物を白色泡 状物で得、これをそのまま次工程に用いる。 無水ＴＨＦ(１０ml)中の上記生成物(０．６g)および合成物７(０．４１g)の溶 液にＨＯＢＴ(０．５２g)を室温にて加える。混合物を１０分間撹拌した後、１, ３−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ，０．６１ml）を加える。反応混合 物を室温にて９日間撹拌する。反応中、さらに７(２００mg)およびカップリング 試薬(ＤＩＣ，０．３０ml)を加える。反応完了後、水(３×５０ml)で洗浄し、乾 燥(Ｎａ₂ＳＯ₄)し、濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（トルエン −ＥｔＯＡｃ＝３：１）に付して標記化合物８１(２３０mg、収率２５％)を白色 泡状物で得る。［α］_D＋６３．１（ｃ１．６０，クロロホルム）；ＦＡＢＭＳ ［Ｍ−Ｈ］^-１３０４．５；［Ｍ−Ｈ］^-１３０６．６；Ｒｆ０．４６（トルエン −アセトン，４：１）。 メチル［メチル２−デオキシ−２−［１−（１−アジド−１−デオキシ−β− Ｄ−グルコピランウロナミド）−β−Ｄ−グルコピランウロナミド］−α−Ｄ− グルコピラノシド］ウロネート（８２） ＭｅＯＨ(５ml)中の８１(２３０mg)の溶液にＭｅＯＨ(０．５ml)中の０．５Ｍ ＮａＯＭｅ(０．０３６ml)を室温にて加え、反応溶液のｐＨを８〜９にする。 反応混合物を室温にて３日間撹拌する。反応中、さらにＮａＯＭｅ(０．０６ml) を加える。反応完了後、陽イオン交換樹脂［Ｈ⁺］にて反応混合物を中和し、次 いで樹脂を濾去し、ＭｅＯＨで洗浄する。濾液を合わせ、洗液を濃縮し、残渣を カラムクロマトグラフィー［ＣＨＣｌ₃−１０％水性ＭｅＯＨ，２：１］にて生 成し、８２(３０mg、収率３０％)を白色泡状物で得る。［α］_D＋６０．５（ｃ １．０，水）；Ｒｆ０．３５（ＣＨＣｌ₃−１０％水性ＭｅＯＨ，２：１）；Ｆ ＡＢＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］⁺５９８．３，［Ｍ＋Ｎａ］⁺６２０．３；［Ｍ−Ｈ］^-５ ９６．０。 メチル２−デオキシ−２−［１−（１−アジド−１−デオキシ−β−Ｄ−グル コピランウロナミド）−β−Ｄ−グルコピランウロナミド］−α−Ｄ−グルコピ ラノシド］ウロン酸（８３） １Ｍ水性ＮａＯＨ中の合成物８２(１５mg)の溶液を室温にて０．５分間撹拌し 、次いで、すぐに陽イオン交換樹脂にて中和する。樹脂を濾去し、水で洗浄する 。水性溶液を合わせ、凍結乾燥して８３(１２mg、収率８２％)を白色泡状物で得 る。［α］_D＋８７．３（ｃ０．８，水）；ＦＡＢＭＳ：［Ｍ−Ｈ］^-５８２．０ ；［Ｍ−Ｈ＋Ｎａ］６０３．８。 ２−アミノ−グルクロン酸Ｃ−末端ユニットを有するサッカロペプチドヘテロ オリゴマーの構造式 β−ＤＧｌｃＡＡｃ＝１−アジド−１−デオキシ−２,３,４−トリ−Ｏ−アセ チル−β−Ｄ−グルコピラヌロン−６−オシル β−ＤＧｌｃＡ＝１−アジド−１−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラヌロン−６ −オシル 実施例１１ ２−アミノ−グルコースＣ末端ユニットを有するサッカロペプチドヘテロオリ ゴマーの合成 メチル２−（１−アジド−２,３,４−トリ−Ｏ−ベンゾイル−１−デオキシ− β−Ｄ−グルコピランウロナミド）−α−Ｄ−グルコピラノシド（８４） ＤＭＦ(１５ml)中の合成物１５(０．８６g、２．０７ミリモル)の溶液に、ピ ペリジン(２ml)を室温にて加える。０．５時間後、反応混合物を減圧下で蒸発乾 固し、粗メチル２−アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドを直接次 工程に用いる。ＤＭＦ(１５ml)中の、メチル２−アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ −グルコピラノシドの溶液、次いでＤＩＣ(０．５９ml)を、ＤＭＦ(２０ml)中の 合成物７(１．０g)およびＨＯＢＴ(０．２８g)の混合物にシリンジにて加え、窒 素下、室温にて１．５時間撹拌する。４日後、反応混合物を濃縮乾固し、残渣を カラムクロマトグラフィー（クロロホルム−メタノール，１０：１）で精製し、 ８４(１．０３g、収率７７％)を白色泡状物で得る。Ｒｆ０．４０（クロロホル ム−メタノール，１０：１），［α］_D＋５５．７（ｃ１．１５，クロロホルム ）；ＥＳＩ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｎａ］⁺７２９．３，［Ｍ＋Ｈ］⁺７０７．３。 メチル２−（１−アジド−１−デオキシ−β−Ｄ−グルコピランウロナミド） ２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシド（８５） ＭｅＯＨ(８ml)中の８４(１２０mg)の溶液に、メタノール性ＮａＯＭｅ(０． ２ml)を加える。反応混合物を室温で２時間撹拌後、ＡＧＷ５０−Ｘ８（Ｈ⁺）イ オン交換樹脂にて中和し、次いで樹脂を濾去し、洗液を濃縮し、残渣を水に溶解 し、エーテルで抽出する。水層を凍結乾燥して８５(７１mg、収率１００％)を白 色固体で得る。［α］_D＋３３．７（ｃ０．８６，水）；ＥＳＩ−ＭＳ：［Ｍ＋ Ｎａ］⁺４１７．６。 メチル２−（１−アジド−１−デオキシ−β−Ｄ−グルコピランウロナミド） ２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシド６−Ｏ−スルフェート（８６） ピリジン(３ml)中の合成物８５(５０mg)の溶液に、三酸化イオウ−ピリジン複 合体(２０mg)を加え、混合物を室温にて撹拌する。２日後、さらに三酸化イオウ (２０mg)を加え、混合物をさらに１日撹拌する。メタノールを加え、混合物を濃 縮する。Ｃ１８シリカゲルカラムを用い、水で溶離して残渣を精製する。主要生 成物含有画分をＡＧＷ５０−Ｘ８［Ｎａ⁺］樹脂とともに撹拌し、樹脂を濾去し 、水で洗浄する。濾液を凍結乾燥して８６(３０mg、収率５０％)を白色固体で得 る。Ｒｆ０．２０（クロロホルム−１０％水性メタノール，２：１），［α］_D ＋２７．２（ｃ０．９２，水）；ＥＳＩ−ＭＳ：［Ｍ−Ｎａ］^-４７３．３。 ２−アミノ−グルコースＣ−末端ユニットを有するサッカロペプチドヘテロオ リゴマーの構造式 実施例１２ 非炭化水素アミノ酸を有するサッカロペプチドの合成 メチル１−［２−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ］−ベンズ アミド−２,３,４−トリ−Ｏ−アセチル−１−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラン ウロネート（８７） 無水ＴＨＦ(３０ml)およびＤＩＣ(１．７４ml)中の化合物２(１．５g)の溶液 をＴＨＦ(１０ml)中の２−フルオレニルオキシカルボニルアミノ安息香酸(２． ０g)およびＨＯＢＴ(０．８３g)の混合物に加え、窒素下、室温にてＣ₁．５時間 撹拌する。反応混合物を室温にて５日間撹拌後、固体を濾過し、濾液を濃縮する 。残渣をカラムクロマトグラフィーに付し、８７(１．１５g、収率３０％)を白 色固体で得る。Ｒｆ０．３２（トルエン−アセトン，８：１），［α］_D−７． ８（ｃ０．６４，クロロホルム−メタノール，１０：１）；ＥＳ−ＭＳ：［Ｍ− Ｈ］^-６７３．３，［Ｍ−Ｆｍｏｃ］４５１．３。 メチル１−［２−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ］−ベンズ アミド−１−デオキシ−β−Ｄ−グルコピランウロネート（８８） ＭｅＯＨ(１０ml)中の８７(１５０mg)の溶液に０．５Ｍメタノール性ＮａＯＭ ｅ(０．０５ml)を室温にて加え、ｐＨ８程度に調節する。反応混合物を室温にて ２時間撹拌後、溶液を陽イオン交換樹脂［Ｈ⁺型］で中和し、樹脂を濾過し、Ｍ ｅＯＨで洗浄する。濾液を合わせ、洗液を濃縮して白色泡状物を得、カラムクロ マトグラフィー（ＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨ，１０：１）にて精製し、８８(１００mg 、収率８２％)を白色固体で得る。 メチル１−（２−アミノ）−ベンズアミド−１−デオキシ−β−Ｄ−グルコピ ランウロネート（８９） ＤＭＦ(１０ml)中の８８(９０mg)の溶液にピペリジン(２ml)を室温にて加える 。混合物を０．５時間撹拌後、水(２０ml)で希釈し、ヘキサンで抽出して副生成 物を除去する。水層を分離し、凍結乾燥して８９(３５mg、収率６６％)を白色固 体で得る。［α］_D−１８０．０（ｃ０．２，水）；Ｒｆ０．３５（クロロホル ム−メタノール，５：１）；ＥＳ−ＭＳ：［Ｍ；Ｎａ］⁺３４９．４，［Ｍ＋Ｈ ］⁺３２７．４。 １−（２−アミノ）−ベンズアミド−１−デオキシ−β−Ｄ−グルコピランウ ロン酸（９０） １Ｍ ＮａＯＨ水溶液中の８９(２０mg)の溶液を室温にて０．５時間撹拌し、 次いでイオン交換［Ｈ⁺］樹脂にて迅速に中和する。樹脂を濾去し、水で洗浄す る。無為溶液を合わせ、凍結乾燥して９０(１０mg、収率５２％)を白色固体で得 る。 Ｎ−（４−メトキシカルボニルフェニル） １−アジド−２,３,４−トリ−Ｏ −ベンゾイル−１−デオキシ−β−Ｄ−グルコピランウロナミド（９１） ＴＨＦ(２０ml)中の４−アミノ−安息香酸メチル(０．３０２g)および化合物 ７(１．０６２g)の混合物にＨＯＢ(２．７０２g)およびＤＩＣ(０．９４ml)を加 える。混合物を室温にて撹拌する。さらに４−アミノ−安息香酸メチル(０．１ ５１g)、ＨＯＢＴ(１．３５１g)およびＤＩＣ(０．４７ml)を３日後に加え、混 合物をさらに１日間撹拌する。蒸発し、残渣をカラムクロマトグラフィー（トル エン−酢酸エチル，９５：５）に付し、９１(０．３１４g、収率２３．７％)を 得る。 Ｎ−（４−メトキシカルボニルフェニル） １−アジド−１−デオキシ−β− Ｄ−グルコピランウロナミド（９２） 合成物９１（０．２９９）をメタノール性ＮａＯＭｅにて脱ベンゾイルし、９ ２(０．１０７g、収率６７．４％)を得る。［α］_D−５５．４（ｃ０．５８，メ タノール）。 Ｎ−（４−カルボキシ−フェニル） １−アジド−１−デオキシ−β−Ｄ−グ ルコピランウロナミド（９３） 合成物９２(０．０９０g)を８９と同様にして９３(０．０７３g、収率８４． ７％)を得る。 非炭化水素アミノ酸を有するサッカロペプチドの構造式 実施例１３ Ｎ,Ｎ'−[ビス（β−マルトトリオシル）]−スクシンジアミドスルフェート （ａ）ジクロロメタン(１０ml)中のウンデカ酢酸マルトトリロース(１．９３g )の溶液をアジドトリメイツシランおよび塩化スズ（ＩＶ）(０．１８ml)で処理 し、反応混合物を室温にて一夜撹拌し、クロロホルム(５０ml)で希釈し、飽和重 炭酸ナトリウム水溶液、水で抽出し、乾燥し、蒸発する。カラムクロマトグラフ ィー（トルエン−酢酸エチル，７：３ ３：２）に付し、１−アジド−１−デオ キシ−（２,３,４,６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）− （１−４）−Ｏ−（２,３,６−トリ−Ｏ−アセチル−Ｄ−グルコピラノシル）− （１−４）−２,３,６−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノース(９４ ，１．８２g、収率９２％)． 酢酸エチル(１５ml)中の９４(１．３１g)の溶液をＰｄ−Ｃ(０．３g)の存在下 、周囲圧にて１時間水素添加する。Ｐｄ−Ｃを濾過し、溶媒を蒸発してデカ−Ｏ −アセチル−β−マルトトリオシルアミン(９５，１．２９g、収率１００％)を 得る。［α］_D＋９１．８°（ｃ１．０１，クロロホルム）。 ジクロロメタン(１０ml)中の９５(０．８９g)の溶液にピリジン(０．０８５ml )、次いでスクシニルジクロリド(０．０５ml)を０℃にて滴下する。反応混合物 を室温で一夜撹拌し、クロロホルム(５０ml)で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液 および水で洗浄する。有機層を乾燥し、蒸発し、粗生成物をカラムクロマトグラ フィー（トルエン−アセトン，３：２）で精製してＮ,Ｎ'−［ビス（デカ−Ｏ− アセチル−β−マルトトリオシル）スクシンジアミド(９６，０．９３g、収率４ ５％)を得る。［α］_D＋９３．９°（ｃ１．２８，クロロホルム）。 メタノールおよび水（２：１，９ml）の混合液中の９６(０．４９g)の溶液を メタノール性ナトリウムメトキシドで処理してｐＨ８に調節する。混合物を０℃ で一夜撹拌し、ＡＧ５０Ｗ−Ｘ８（Ｈ⁺）樹脂で中和する。樹脂を濾過し、濾液 を蒸発して残渣を減圧乾燥し、Ｎ,Ｎ'−［ビス（β−マルトトリオシル）］スク シンジアミド(９７，０．２５g、収率９０％)を得る。 ＤＭＦ(５ml)中の９７(０．１９g)、２，６−ジ−ｔ−ブチル−４−メチルピ リジン(１．５１g)の溶液を三酸化イオウ複合体(１．１６g)で処理し、混合物を 室温で３日間撹拌する。反応混合物を０℃に冷却し、飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液を 用いてｐＨ８に調節し、溶媒を蒸発する。０．５Ｍ重炭酸アンモニウムを溶離液 として用い、バイオゲルＰ−２で残渣を脱塩する。炭化水素含有画分を集め、凍 結乾燥する。得られる生成物をＳＰセファデックスＣ−２５（Ｎａ⁺）カラムに 水とともに通し、Ｎ,Ｎ'−［ビス（β−マルトトリオシル）］スクシンジアミド スルフェート(９８，０．５２g、収率９２％)を得る。 （ｂ）ＮＨ₄ＨＣＯ₃(６．３２g)をマルトトリオース(２．０２g)の水溶液に加 え、混合物を室温で撹拌する。３日後に追加のＮＨ₄ＨＣＯ₃(６．３２g)を加え る。１週間後、ＴＬＣ（イソプロピルアルコール−アセトン−水，４：２：１） により、完全に変換されているのがわかる。混合物を凍結乾燥する。得られるマ ルトトリシルアミン(２．０２g)を水(１０ml)に溶解し、水性ＮａＨＣＯ₃を加え てｐＨ９にし、混合物を０℃に冷却し、スクシニルジクロリド(０．１６ml)を滴 下する。混合物を蒸発し、残渣をカラムクロマトグラフィー（クロロホルム−９ ０％水性メタノール，１：１）に付し、９７を得る。前記と同様にして９７を硫 酸化して９８を得る。 実施例１４ Ｎ,Ｎ'−[ビス（β−マルトシル）スクシンジアミドスルフェート（１０３） ジクロロメタン(５０ml)中のマルトースオクタアセテート(６．７８g)をアジ ドトリメチルシラン(１．８ml)および塩化スズ（ＩＶ）(１．０ml)で処理し、混 合物を室温で一夜撹拌する。反応混合物を前記と同様にして処理し、粗生成物を エタノールから再結晶して１−アジド−１−デオキシ−（２,３,４,６−テトラ −Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−２,３,６−トリ− Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノース(９９，６．２８g、収率９５％)を得 る。 酢酸エチル(１５ml)中の９９(０．６７g)の溶液をＰｄ−Ｃ(０．３g)の存在下 、大気圧にて１時間水素添加する。Ｐｄ−Ｃを濾過し、溶媒を蒸発して１−アミ ノ−１−デオキシ−（２,３,４,６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピ ラノシル）−（１→４）−２,３,６−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラ ノース(１００，０．６４g、収率１００％)を得る。 ＴＨＦ(８ml)中の１００(０．６４g)およびスクシン酸(０．０６g)の溶液をＨ ＯＢＴ(５０mg)の存在下、ＤＩＣ(０．２４ml)で処理し、混合物を室温にて３日 間撹拌する（ＴＬＣ−トルエン−アセトン，３：２）。溶媒を蒸発し、残渣をカ ラムクロマトグラフィー（トルエン−アセトン，４：１ ７：３）で精製し、Ｎ ，Ｎ'−［ビス（ヘプタ−Ｏ−アセチル−β−マルトシル）］スクシンジアミド( １０１，０．５６g、収率８４％)を得る。 メタノール(２０ml)中の１０１(０．３４g)の溶液をメタノール性ナトリウム メトキシド（ｐＨ９）で０℃にて一夜処理する。溶液から同時に結晶化した生成 物を濾過し、冷メタノールで洗浄し、Ｎ,Ｎ'−［ビス（β−マルトシル）］スク シンジアミド(１０２，０．１８g、収率９５％)を得る。前記と同様にして１０ ２を硫酸化してＮ,Ｎ'−[ビス（β−マルトシル）スクシンジアミドスルフェー ト１０３を得る。 実施例１５ Ｎ,Ｎ'−[ビス(β−マルトシル)]アジピンジアミドスルフェート（１０６） ＴＨＦ(６ml)中のヘプタ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−マルトシルアミン（１００ ）(０．６４g)およびアジピン酸(０．０７g)の溶液をＤＩＣ(０．２５ml)および ＨＯＢＴ(５０mg)で前記と同様に処理し、Ｎ,Ｎ'−[ビス(ヘプタ−Ｏ−アセチル −β−マルトシル)]アジピンジアミドを得る。粗生成物をカラムクロマトグラフ ィー（トルエン−アセトン，４：１）で精製し、最終生成物１０４(０．２４g、 収率３４％)を得る。［α］_D５５．６０（ｃ１．００，クロロホルム）。 １０４(０．２４g)の溶液を前記と同様にして脱アセチルし、Ｎ,Ｎ'−[ビス( β−マルトシル)]アジピンジアミド(１０５，０．１２g、収率９０％)を得る。 前記と同様にして１０５を硫酸化してＮ,Ｎ'−[ビス（β−マルトシル）アジピ ンジアミドスルフェート１０６を得る。 合成物９８、１０３および１０６の構造式を以下に示す。 合成物９８，ｕ＝１，ｔ＝２；合成物１０３，ｕ＝０，ｔ＝２；合成物１０６ ，ｕ＝０，ｔ＝４； ３つの合成物すべてにおいてＲ＝−ＳＯ₃，Ｒ'＝−ＣＨ₂ＯＳＯ₃である。 実施例１６ Ｎ,Ｎ'−[ビス(β−Ｄ−セロビオシル)]スクシンジアミドスルフェート（３ ９） ジクロロメタン(５０ml)中のセロビオースオクタアセテート(６．７８g)の溶 液をアジドトリメチルシラン(１．８ml)および塩化スズ（ＩＶ）(１．０ml)で処 理し、混合物を室温で一夜撹拌する。反応混合物を前記と同様にして処理し、粗 生成物をエタノールから再結晶して１−アジド−１−デオキシ−（２,３,４,６ −テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−２,３,６ −トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノース(１０７，６．４８g、収率９ ８％)を得る。 酢酸エチル(１５ml)中の１０７(０．６７g)の溶液をＰｄ−Ｃ(０．３g)の存在 下、大気圧にて１時間水素添加する。Ｐｄ−Ｃを濾過し、溶媒を蒸発して１−ア ミノ−１−デオキシ−（２,３,４,６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコ ピラノシル）−（１→４）−２,３,６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピ ラノース(１０８，０．６４g、収率１００％)を得る。 ＴＨＦ(８ml)中の１０８(０．６４g)およびスクシン酸(０．０６g)の溶液をＨ ＯＢＴ(５０mg)の存在下、前記と同様にしてＤＩＣ(０．２４ml)で処理し、Ｎ, Ｎ'−［ビス（ヘプタ−Ｏ−アセチル−β−セロビオシル）］スクシンジアミド( １０９，０．５８g、収率８６％)を得る。［α］_D−７．１°（ｃ１．００，ク ロロホルム）。 メタノール(１０ml)中の１０９(０．１９g)の溶液を前記と同様にして脱アセ チルし、結晶化したＮ,Ｎ'−［ビス（β−セロビオシル）］スクシンジアミド( １１０，０．１g、収率９８％)を得る。［α］_D−１８．４°(ｃ０．９８，水) 。 前記と同様にして１１０(０．０５g)を硫酸化してＮ,Ｎ'−[ビス（β−セロビ オシル）スクシンジアミドスルフェート(１１１，０．２５g、収率８９％)を得 る。 実施例１７ Ｎ,Ｎ'−[ビス(β−Ｄ−セロビオシル)]−３−ヒドロキシ−３−メチルグルタ ルジアミドスルフェート（１１４） 化合物１０８(０．６４g)および３−ヒドロキシ−３−メチルグルタル酸(０． ０８g)を１,４−ジオキサン(８ml)中、ＨＯＢＴの存在下、前記と同様にしてＤ ＩＣ(０．２４ml)と反応させてＮ,Ｎ'−[ビス(ヘプタ−Ｏ−アセチル−β−セ ロビオシル)]−３−ヒドロキシ−３−メチルグルタルジアミド(１１２，０．５ ３g、収率７６％)を得る。［α］_D−１１.７°(ｃ１.０６，クロロホルム)。 メタノール(１０ml)中の１１２(０．３４g)の溶液を前記と同様にして脱アセ チルし、結晶化したＮ,Ｎ'−[ビス(β−セロビオシル)]−３−ヒドロキシ−３− メチルグルタルジアミド(１１３，０．１９g、収率９８％)を得る。［α］_D−４ ．８°(ｃ１．０３，水)。 前記と同様にして１１３(０．１６g)を硫酸化し、Ｎ,Ｎ'−[ビス(β−Ｄ−セ ロビオシル)]−３−ヒドロキシ−３−メチルグルタルジアミドスルフェート（１ １４，０．１４g、９１％）を得る。 実施例１８ テトラサッカロペプチドの硫酸化（６０） メタノール−水(１：１，１０ml)混合液中の合成物６０(１００mg)の溶液を室 温にて一夜撹拌する。ＡＧ５０ＸＨ＋イオン交換樹脂を用いて混合物を中和する 。樹脂を濾去し、溶媒を蒸発して遊離ヒドロキシル含有ウロン酸誘導体を得る。 ＤＭＦ(５ml)中のウロン酸誘導体の溶液と、三酸化イオウピリジン複合体(１ ００mg)を室温にて３日間撹拌する。ＮａＨＣＯ₃を用い、混合物を中和して約ｐ Ｈ８にし、蒸発し、バイオゲルＰ−２カラムにて重炭酸アンモニウム(０.５Ｍ) で脱塩し、ＳＰ−セファデックスイオン交換カラムを通してアンモニウム塩をナ トリウム塩に変換し、硫酸化Ｎ保護テトラサッカロペプチド１１５を得る。 実施例１９ 固相合成 合成物１１(４２７mg)を前記と同様にして脱アセチルし、遊離アミノ酸誘導体 (２００mg)を得る。ジオキサン(１０ml)およびトリエチルアミン（ＴＥＡ，０． ２ml）中、遊離アミンをＢＯＣＯＮ［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシ −イミノ）−２−フェニルアセトニトリル，３９０mg］で処理し、溶媒を蒸発し 、残渣を乾燥し、ピリジン(１０ml)中に再溶解し、０℃に冷却し、酢酸無水物( ０.５ml)を溶液に滴下する。反応混合物を一夜撹拌し、氷水を注ぎ入れ、クロロ ホルムで抽出し、蒸発し、残渣をエタノールから再結晶してＢｏｃ−糖アミノ酸 メチルエステル(３８０mg)を得る。先に述べたようにＢｏｃ誘導体の選択的脱エ ステル化を行い、３,４−ジ−Ｏ−アセチル−２−ｔ−ブトキシカルボニルアミ ノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸（１１６）を得る。メリ フィールドの記載にしたがって、合成物１１６をメリフィールド樹脂に結合させ る［メリフィールド，Ｒ．Ｂ．のBiochemistry（１９６４）３：１３８５；エリ ックソン，Ｂ．Ｗ．およびメリフィールド，Ｒ．Ｂ．のThe Proteins,ノイラス ，Ｈお よびヒル，Ｒ．Ｌ．(編)Ｖｏｌ．２，３版，アカデミック・プレス，ニューヨー ク，２５５〜５２７（１９７９）；バラニー，Ｇ．およびメリフィールド，Ｒ． Ｂ．のThe Peptides,グロス，Ｅ．およびマイエンホーファー，Ｊ．（編），Ｖ ｏｌ.２，アカデミック・プレス，ニューヨーク，３〜２８５（１９７９）］。 さらに延長するために、Ｎ保護，樹脂結合糖をジクロロメタン(２０ml)中のト リフルオロ酢酸(０．５ml)で処理することによりＢｏｃ基を除去し、遊離のアミ ノ誘導体１１７を得、ジクロロメタン(２０ml)中のＴＥＡ(０．２ml)で処理する 。先に記載した方法を用いて１１６と１１７をカップリングさせ、樹脂結合保護 ジサッカロペプチドを得る。保護基を前記と同様にして除去し、メリフィールド の記載にしたがってフッ化水素で処理することにより、サッカロペプチドを樹脂 からはずす［メリフィールド，Ｒ．Ｂ．のBiochemistry（１９６４）３：１３８ ５；エリックソン，Ｂ．Ｗ．およびメリフィールド，Ｒ．Ｂ．のThe Proteins, ノイラス，Ｈおよびヒル，Ｒ．Ｌ．(編)Ｖｏｌ．２，３版，アカデミック・プレ ス，ニューヨーク，２５５〜５２７（１９７９）；バラニー，Ｇ．およびメリフ ィールド，Ｒ．Ｂ．のThe Peptides,グロス，Ｅ．およびマイエンホーファー， Ｊ．（編），Ｖｏｌ.２，アカデミック・プレス，ニューヨーク，３〜２８５（ １９７９）］。 実施例２０ 組み合わせ合成 メチルポリエチレングリコリル（ＭｅＯＰＥＧｙｌ）（１−アジド−１−デオ キシ−２,３,４−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノース）ウロネー ト（１１８） ジクロロメタン(１０ml)中の７(１．０６g)の溶液にＮ,Ｎ−ジメチルホルム( ０．３１ml)を加え、反応混合物を０℃に冷却する。溶液に塩化オキサリル(０． ３８ml)を滴下し、混合物を２０分間撹拌する。 ポリエチレングリコールモノエチルエーテル(７．５０g)を無水ジクロロメタ ン(３０ml)に溶解する。ピリジン(１．２１ml)を溶液に加え、次いであらかじめ 調製しておいた塩化アシルを加える。３０分後、反応混合物に氷水を加え、ジク ロロメタン(５００ml)で希釈する。有機層を分離し、次いで水、飽和ＮａＨＣＯ₃ 、水で連続的に抽出し、乾燥し、蒸発する。残渣を熱エタノールから再結晶し て１１８(８．００g、収率９６％)を得る。 ＭｅＯＰＥＧｙｌ［メチル３,４−ジ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−２−（ ９−フルオレニルメトキシカルボニル−アミノ）−α−グルコピラノシド］ウロ ネート（１１９） 無水テトラヒドロフラン(３０ml)および無水ジクロロメタン(１０ml)中のポリ エチレングリコールモノメチルエーテル（ＭｅＯＰＥＧＯＨ）（平均分子量５０ ００）(７．５０g)の溶液に１７(１．０３g)およびＨＯＡＴの(０．５４g)の溶 液を加え、次いで１,３−ジイソプロピル−カルボジイミド（ＤＩＣ）(０．７７ ml)を加える。反応混合物を室温で３日間撹拌し、次いで溶媒の半分を蒸発させ る。ｔｅｒｔ−ブチル−メチルエーテルでＭｅＯＰＥＧ誘導体を沈殿させる。白 色固体を濾去し、熱エタノール(５０ml)に再溶解し、沈殿が完了するまで５℃に 冷却する。生成物を濾過分離し、ｔ−ブチル−メチルエーテルで洗浄し、減圧乾 燥そて１１９(７．８４g、収率９５％)を得る。 ＭｅＯＰＥＧｙｌ［メチル３,４−ジ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−２−（ １−アジド−１−デオキシ−２,３,４−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコ ピランウロナミド）−α−グルコピラノシド］ウロネート（１２１） ２０％ピペリジン含有Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(１０ml)中で１１９(１． １０g)のＦmoc保護基を除去する。ｔ−ブチル−メチルエーテルにより沈殿した 生成物を濾去し、エタノールから再結晶して遊離アミン１２０(１．０g、収率９ ５％)を得、これを直接次工程に用いる。合成物１２０を無水テトラヒドロフラ ン(１０ml)およびジクロロメタン(５ml)の混合液に溶解し、ＴＨＦ(５ml)中の７ (０．１１g)およびＨＯＡＴ(０．０３g)を加え、次いでＤＩＣ(０．０５ml)を加 える。反応混合物を室温で一夜撹拌し、前記と同様にして１２１(１．０５g、収 率９１％)を得る。 ＭｅＯＰＥＧｙｌ［メチル３,４−ジ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−２−（ ３−フルオレニルメトキシカルボニル−アミノ−ベンズアミド）−α−Ｄ−グル コピラノシド］ウロネート（１２２） 先の記載と同様にして化合物１１９(３．３５g)を脱保護して１２０(２．９８ g、収率９４％)を得、ＴＨＦ(２５ml)およびジクロロメタン(１５ml)の混合液中 、ＨＯＡＴ(０．１６g)およびＤＩＣ(０．２ml)の存在下、３−フルオレニルメ トキシカルボニルアミノ安息香酸(０．４３g)とカップリングさせる。先の記載 と同様にして標記生成物を単離する。 ５成分サッカロトリペプチドライブラリーの合成 合成物１２２(２．７０g)を先の記載と同様にして脱保護して遊離アミノ誘導 体１２３を得る。これを、ＴＨＦ(２５ml)およびジクロロメタン(１０ml)の混合 液中、ＨＯＡＴ(０．３３g)およびＤＩＣ(０．３７ml)の存在下、次のカルボン 酸：７(５１mg)、１９(６１mg)、４０(６１mg)、３−フルオレニルメトキシカル ボニルアミノ安息香酸(３４mg)およびＮ−フルオレニルメトキシカルボニル−β −アラニン(２９mg)とカップリングさせる。 ｔ−ブチル−メチルエーテルポリマー結合生成物を沈殿させ、エタノールから 再結晶させる。固体を濾去し、粗生成物(２．６０g)を得る。物性： 粗生成物を触媒量のナトリウムメトキシドで処理して同時にサッカロ−トリペ プチドをポリマー担体から切断し、アセチルおよびベンゾイル保護基を除去して 、サッカロ−トリペプチドのＦmoc保護メチルエステル誘導体を得る。中和後、 溶液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（トルエン−１０％Ｈ₂Ｏ／メ タノール−アセトン，２：１：１）に付して次の生成物を分離する。 メチル［メチル２−デオキシ−２−［３−（３−フルオレニルメトキシカルボ ニルアミノ−ベンズアミド）−ベンズアミド］−α−Ｄ−グルコピラノシド］ウ ロネート（１２４） メチル［メチル２−デオキシ−２−［３−（Ｎ−フルオレニルメトキシカルボ ニル−β−アラニル）−３−アミノ−ベンズアミド］−α−Ｄ−グルコピラノシ ド］ウロネート（１２５） メチル［メチル２−デオキシ−２−［３−（メチル２−デオキシ−２−（９− フルオレニルメトキシカルボニル−アミノ）−α−Ｄ−グルコピランウロナミド ）−３−アミノ−ベンズアミド］−α−Ｄ−グルコピラノシド］ウロネート（１ ２６） メチル［メチル２−デオキシ−２−［３−（メチル４−デオキシ−４−（９− フルオレニルメトキシカルボニル−アミノ）−β−Ｄ−グルコピランウロナミド ）−３−アミノ−ベンズアミド］−α−Ｄ−グルコピラノシド］ウロネート（１ ２７） メチル［メチル２−デオキシ−２−［３−（１−アジド−１−β−Ｄ−グルコ ピランウロナミド）−３−アミノ−ベンズアミド］−α−Ｄ−グルコピラノシド ］ウロネート（１２８） １５成分サッカロ−トリペプチドライブラリーの合成 ＭｅＯＰＥＧｙｌ［メチル３，４−ジ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−２−［ ２ −（９−フルオレニルメトキシカルボニル）−アミノ−ベンズアミド］−α−Ｄ −グルコピラノシド］ウロネート（１２９）、ＭｅＯＰＥＧｙｌ［メチル３，４ −ジ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−２−［３−（９−フルオレニルメトキシカ ルボニル）アミノ−ベンズアミド］−α−Ｄ−グルコピラノシド］ウロネート（ １２２）およびＭｅＯＰＥＧｙｌ［メチル３，４−ジ−Ｏ−アセチル−２−デオ キシ−２−［４−（９−フルオレニルメトキシ−カルボニル）アミノ−ベンズア ミド］−α−Ｄ−グルコピラノシド］ウロネート（１３０） 合成物１１９(１３．０３g)を先の記載と同様にして脱保護し、１２０(１１． ６２g、収率９３％)を得、ＴＨＦ(７５ml)およびジクロロメタン(５５ml)の混合 液中、ＨＯＡＴ(０．３６g)およびＤＩＣ(０．６８ml)の存在下、２−（９−フ ルオレニルメトキシカルボニル）アミノ安息香酸(０．２７g)、３−（９−フル オレニルメトキシカルボニル）アミノ安息香酸(０．２７g)および４−（９−フ ルオレニルメトキシカルボニル）アミノ安息香酸(０．２７g)の混合物とカップ リングさせる。先の記載と同様にして反応を行い、標記生成物(１２．８７g、収 率９５％)を単離する。 上記１２２、１２９および１３０の混合物(１２．８７g)を先の記載と同様に して脱保護し、遊離アミノベンズアミド誘導体を得、ＴＨＦ(５０ml)およびジク ロロメタン(２５ml)の混合液中、ＨＯＡＴ(０．３４g)およびＤＩＣ(０．８１ml )の存在下、次のカルボン酸：(０．２２３g)、１９(０．２６８g)、４０(０．２ ６８g)、３−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ安息香酸(０．１ ５１g)およびＮ−９−フルオレニルメトキシカルボニル−β−アラニン(０．１ ３０g)とカップリングさせる。ｔ−ブチル−メチルエーテルを加えてポリマーを 沈殿させ、エタノールから再結晶させる。固体を濾去し、粗生成物を得る。 粗生成物を触媒量のナトリウムメトキシドで処理して、サッカロ−トリペプチ ドをポリマーから除去し、該サッカロ−トリペプチドのＮ−Ｆmoc、ＣＯ₂Ｍｅ保 護誘導体を得る。溶液を蒸発し、残渣をカラムクロマトグラフィー（トルエン− １０％水性メタノール−アセトン，２：１：１）に付して次の生成物の混合物を 得る。 メチル［メチル２−デオキシ−２−［２−（１３１），３−（１２４）および ４−（３−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ−ベンズアミド）− アミノ−ベンズアミド］−α−Ｄ−グルコピラノシド］ウロネート（１３２）； メチル［メチル２−デオキシ−２−［２−（１３３），３−（１２５）および ４−（Ｎ−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）β−アラニル）−アミノ− ベンズアミド］−α−Ｄ−グルコピラノシド］ウロネート（１３４）； メチル［メチル２−デオキシ−２−［２−（１３５），３−（１２６）および ４−（メチル２−デオキシ−２−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミ ノ−α−Ｄ−グルコピランウロナミド）−アミノ−ベンズアミド］−α−Ｄ−グ ルコピラノシド］ウロネート（１３６）； メチル［メチル２−デオキシ−２−［２−（１３７），３−（１２７）および ４−（メチル４−デオキシ−４−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミ ノ−β−Ｄ−グルコピランウロナミド）−アミノ−ベンズアミド］−α−Ｄ−グ ルコピラノシド］ウロネート（１３８）； メチル［メチル２−デオキシ−２−［２−（１３９），３−（１２８）および ４−（１−アジド−１−デオキシ−β−Ｄ−グルコピランウロナミド）アミノ− ベンズアミド］−α−Ｄ−グルコピラノシド］ウロネート（１４０）。 サッカロペプチドの組み合わせ合成 実施例２１ ウシの肺ヘパリンのＨＯＮＯ解重合からの、ヘパリン誘導サッカロアミノ酸、 ジサッカリドの製造 ウシの肺ヘパリン（３g）を１００mlの水に溶解し、０℃に冷却する。ＮaＮＯ₂ の規定溶液（３．５g／１００ml）を０℃にて２０gのＤowexＩＲ１２０（Ｈ^t） で処理し、次いで濾過して、規定ＨＯＮＯの溶液を調製する。ヘパリン溶液とＨ ＯＮＯ溶液を０℃にてコンバインし、０℃で５ｈ反応させる。次いで１Ｎ−ＮＨ₄ ＨＣＯ₃を加えて反応液を中和し、冷凍し、凍結乾燥する。水１００ml中での溶 解および凍結乾燥を２回行って、過剰の重炭酸アンモニウムを除去する。 サッカロアミノ酸の製造 次に、グリコサミノグリカンから単離したジサッカリドを、以下の手順でサッ カロアミノ酸に変換することができる。すなわち、アンヒドロアルドース基のア ンモニウム塩およびシアノホウ水素化ナトリウムによる還元アミノ化によって、 ウロン酸基が末端１−アミノ・２，５アンヒドロアルジトール基に結合したジサ ッ カリド・グリコアミノ酸を得る。 ジサッカリド混合残留物を１００mlの１Ｎ酢酸アンモニウム（ｐＨ８）に溶解 する。この撹拌溶液に、４gのシアノホウ水素化ナトリウムを注意深く加える。 〜２０ｈ反応後、１．５mlの氷酢酸を加えて、過剰のシアノホウ水素化ナトリウ ムを消滅する。次いで反応液を、飽和重炭酸アンモニウムでｐＨ〜７に中和し、 凍結乾燥し、１Ｎ−ＮaＯＡc溶液（２００ml）に再溶解し、エタノール（８００ ml）で沈澱せしめる。沈澱物を集め、乾燥して＞９５％ヘパリン誘導１−アミノ −アンヒドロマンニトール・ジサッカリドのオリゴサッカリド混合物を得る。 ヘパリンの酵素解重合によるヘパリン誘導グリコアミノ酸 ジサッカリド生成 ヘパリンよりヘパリンの酵素解重合によるジサッカリドの製造法は、Ａ．ホー ンらの「Ｃarbohydr．Ｒes.」（２２５、４３〜５７、１９９２年）、およびＭ. ラガジらの「Ｊ．Ｃarbohydr．Ｃhem．」（１２（４＆５）、５２３〜５３５、 １９９３年）に記載されている。実際には、ヘパリン（１g）を、１mＭ塩化カル シウム含有の、適当な緩衡液、たとえば０．１Ｍ酢酸ナトリウム（pＨ７．０） に１〜２％ｗ／ｖで溶解する。酵素製剤（〜２５０ユニット）を加え、反応せし める。ＵＶ吸収４，５−不飽和ウロン酸基の生成を、吸光プラトーが得られるま で監視する。次いで溶液を凍結乾燥して、ジサッカリドと大きなフラグメントの ヘパリンとの混合物を得る。この混合物から、サイズ・イクスクルージョン(siz e exclusion)クロマトグラフィー〔Ａ．ホーンらの「Ｃarbohydr．Ｒes．」(２ ２５ 、４３〜５７、１９９２年)〕またはイオン交換クロマトグラフィー(Ｕ．Ｓ ．特許Ｎo.５１４５９５６)によって、ジサッカリドを単離する。 サイズ・イクスクルージョンクロマトグラフィーの場合、フラグメントを最小 量の水に溶解し、次いで０．５Ｍ重炭酸アンモニウム中平衡なＢioＧel Ｐ６カ ラムに加える。高分子量成分含有の画分を溶離し、次いでジサッカリドを溶離し 、凍結乾燥を繰返して単離する。 グリコアミノ酸の製造 次に、得られるＮ−硫酸化またはＮ−アセチル化ジサッカリドをそれぞれ、Ｙ ．イノウエおよびＫ．ナガサワの方法を用いるＮ−脱硫酸化〔「Ｃarbohydr．Ｒ es．」(４６、８７〜９５、１９７６年)〕またはシェイクリーおよびコンラドの 方法を用いるＮ−脱アセチル化〔「Ｂiochem．Ｊ．」（２１７、１８７〜１９７ 、１９８４年）〕で、所望のグリコアミノ酸に変換する。 実施例２２ （２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｌ−フコピラノシル）酢酸（１４１ ）の製造 アセトニトリル／四塩化炭素／水（８０ml：８０ml：１２０ml）の溶剤混合物 中の１−Ｃ−アリル−１−デオキシ−２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｌ −フコピラノース（１０．０g、３１．９ミリモル）の撹拌混合物に、２８．０g （１３１．２ミリモル）の過ヨウ素酸ナトリウムを加えた後、三塩化ルテニウム ・ 水和物（１４５mg）を加える。１０分後に反応液は発熱し、室温で一夜撹拌する 。この混合物を水（３００ml）で希釈し、ジクロロメタン（３００ml×２）で抽 出する。コンバインした有機層を水（１００ml）で洗い、濃縮する。残留油状物 を酢酸エチル（２００ml）に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム（３０ml）で抽出す る。有機層を再び、水（２０ml）で洗い、重炭酸ナトリウム溶液抽出物とコンバ インする。このコンバインした水性抽出物を、６Ｎ塩化水素酸溶液でｐＨ１に酸 性化し、ジクロロメタン（２００ml×２）で抽出する。コンバインした有機抽出 物を水（１００ml）で洗った後、飽和塩化ナトリウム溶液で洗い、硫酸ナトリウ ム上で乾燥し、濾過し、濃縮して６．９g（２０．８ミリモル、６５％）の（２ 、３，４−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｌ−フコピラノシル）酢酸（１４１）を得 、これを精製せずに用いる。 （２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｌ−フコピラノシル）酢酸・Ｎ−ヒ ドロキシスクシンイミドエステル（１４２） １４１のサンプル（１．９７g、６．１６ミリモル）をジクロロメタン（２５m l）に溶解し、溶液にＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ、１．０g，８．６ ９ミリモル）を加え、溶液を加温してＮＨＳを溶解する。ジシクロヘキシルカル ボジイミド（ＤＣＣ、１．４１g、６．８３ミリモル）をジクロロメタン（５ml ）に溶解し、これを反応混合物に撹拌しながら加える。５時間後、反応混合物を ４℃に冷却し、濾過し、蒸発する。シロップ状残渣を酢酸エチル（５０ml）に溶 かし、濾過し、水（２５ml×２）で洗う。酢酸エチル層を無水硫酸ナトリウム上 で乾燥し、濾過し、蒸発する。高減圧下で乾燥後、２．５g（９４％）の非晶質 白色の１４２を得る。 （２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｌ−フコピラノシル）酢酸・Ｎ−ヒ ドロキシスクシンイミドエステル（１４２）のヘパリン誘導グリコアミノ酸ジサ ッカリドへのカップリング 実施例２１からのヘパリン誘導グリコアミノ酸ジサッカリド（２５０mg）を、 ２mlの５％重炭酸ナトリウム溶液に溶解し、２mlのＤＭＦで希釈する。ＤＭＦ中 のＮＨＳ−Ｃ−フコシド（１．５ml中の０．７５g）の溶液を、反応時間０、６ 、 および１８ｈにて５００mlの３回分で加える。２４ｈ後、反応液を塩化メチレン で抽出して、過剰のＣ−フコシドを除去する。水性層を凍結乾燥して、Ｎ−（Ｃ −フコシル）アセチル・ジサッカリド誘導体を得る。 Ｎ−脱アセチル化コロミン酸（１４３） コロミン酸（２５０mg）を、１０mgのＮaＢＨ₄含有の２．０Ｎ水酸化ナトリウ ム中で一夜還流することによって、Ｎ−脱アセチル化する。２０％酢酸でｐＨ〜 ８に中和後、溶液を濾過し、透析する。生成物収量：２２５mg。 Ｎ−（２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｌ−フコピラノシル）アセチル 化，Ｎ−脱アセチル化コロミン酸（１４４） Ｎ−脱アセチル化コロミン酸（１４３）（５０mg）を２mlの水に溶解し、１． ０mlのＤＭＦで希釈する。１４２の溶液をＤＭＦ中で調製する（１mlのＤＭＦ中 ２５０mg）。Ｎ−脱アセチル化コロミン酸溶液に、反応時間０、４および２０ｈ にて、Ｃ−フコシド試薬のアリコートを加える。トータル２４ｈ反応時間後、反 応液をＣＨ₂Ｃl₂で２回抽出し、水性層を透析し、凍結乾燥して５２mgの生成物 を得る。 Ｎ−（α−Ｌ−フコピラノシル）アセチル化,Ｎ−脱アセチル化コロミン酸（ １４５） 組成１４４を０．１Ｍ−Ｋ₂ＣＯ₃（１０ml）に溶解し、４０℃で２ｈ撹拌する 。溶液を透析し、凍結乾燥して４０mgの白色固体生成物を得る。１Ｈ−ＮＭＲに より、コロミン酸ピーク、ＣＨ₂ＣＯ−リンカーのＣＨ₂共鳴およびアセテートピ ークのロスが認められる。 ４−Ｎ−（α−Ｌ−フコピラノシル）アセチル・ノイラミン酸（１４６） 組成１４５を９mlのＨ₂Ｏに溶解し、１Ｎ−ＨＣｌ（１０ml）を加えて希釈し 、４０℃にて４ｈ撹拌せしめる。次いで反応溶液を冷凍し、凍結乾燥して生成物 を得る。 実施例Ａ セレクチン結合アッセイ 構造式Ｉのサッカロペプチドについて、セレクチン（selectin）受容体への結 合および／または該受容体の結合部位のブロックにより、天然リガンドがセレク チン受容体に結合するのを防止する能力を試験することができる〔ホクサルらの 「Ｔhe Ｊournal of Ｃell Ｂiology」（１１７：８９５、１９９２年）〕。リ ガンドを試験する一般的手順は、以下の通りである。 ＥＬＩＳＡアッセイの使用が好ましく、この方法は下記の３つの工程で構成さ れる。 １．２，３スレックス（slex）グリコリピド（２５ピコモル／ウェル）を溶液 で、微量滴定ウェル（microtitre wells）に移し、蒸発除去する。未結合のまま の過剰分を、水で洗い除く。ウェルを室温にて、５％ＢＳＡで１時間ブロックし 、１mＭカルシウム含有のＰＢＳで洗う。 ２．セテクチン−ＩgＧキメラの″多価の″受容体の調製を以下の手順で実施 する。すなわち、それぞれのキメラ（１g／ml）を、ビオチン標識ゴート（goat ）Ｆ（ａｂ'）２抗ヒトＩgＧ（Ｆｃ特異）および１％ＢＳＡ−ＰＢＳ（１mＭカ ルシウム）中１：１０００希釈のストレプトアビジン−アルカリホスフアターゼ とコンバインし、次いで３７℃で１５分間培養する。これは、可溶性多価受容体 複合体を形成せしめる。 ３．かかわる可溶性受容体に３７℃にて、構造式Ｉのサッカロペプチドなどの 潜在インヒビターを４５分間反応せしめる。このテストは、可溶性相受容体複合 体とインヒビター（非天然リガンド）間の最適結合がこの時間フレーム内に起こ りうることを仮定する。この溶液を、工程１で調製した微量滴定ウェルに入れる 。３７℃にて４５分間平板培養を行い、可溶性受容体をその天然リガンドに結合 せしめる。強いインヒビターの存在下で、天然リガンドで被覆した微量滴定平板 にほんのわずかな受容体しか自由に結合しないのである。正コントロールは、い ずれのインヒビターの非存在下で微量滴定ウェルの天然リガンドと反応せしめる とき、可溶性受容体によって生じるシグナルである。これは１００％結合と見な す。以前にインヒビターで処理した受容体によって生じるシグナル（Ｏ．Ｄ．と 記録）を、正コントロールによって生じるシグナルで割り、１００をかけて、イ ンヒビター存在下のウェルへの受容体の結合率（％）を計算する。これの逆数は 抑制率 (％)である。このセレクチンＥＬＩＳＡアッセイで、代表的な本発明化合物を試 験した結果を、下記表１に示す。表中の数値は、mＭ単位で測定したＩＣ₅₀であ る。アッセイの幾つかは、７４mＭの感度カットオフで、また幾つかは＞１mＭの カットオフで行う。 実施例Ｂ セレクチンセル−ベースド検定 チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞をプラスミドＣＤＭ８−Ｅ−セレ クチン又はＣＤＭ８−Ｐ−セレクチン（それぞれＥ−セレクチン又はＰ−セレク チンの全長をコードしているｃＤＮＡを含んでいる）及びｐＳＶｎｅｏでエレク トロポレーション法でもって形質転換（transfect）し、ネオマイシン耐性によ って選択した。個々の細胞をクローンし、そして又はＥ−又はＰ−セレクチンに 対するモノクローナル抗体を用いてセレクチン発現のための流星血球計算器によ って選択した。 プレートは次の様にして作成した。 ９６穴コーニングプレートを０.２％ゼラチンでコートした。プレートに５× １０⁴細胞／穴か或は、３×１０⁴細胞／穴に蒔き、２日〜３日間生育させた。金 曜日に低密度で蒔いた細胞は、月曜日に検定する。単層をＰＢＳで洗滌した。つ いでその細胞を０.５％パラホルムアルデヒド５０μｌで２０分間固定した。そ のプレートをＰＢＳで洗滌し、１％ＢＳＡ／ＰＢＳ（１００μｌ／穴）で、室温 で２０〜３０分間ブロックした。プレートを化合物に加える直前にＰＢＳで洗滌 した。 ＨＬ−６０細胞は以下の様にして作製した。 ＨＬ−６０細胞を数え、７.５×１０⁶細胞／プレートを移した。この細胞を５ ０ｍｌ遠心管に入れＰＢＳで洗滌した（５０ｍｌ管当り細胞２０ｍｌを越えない 範囲で）。細胞を２×１０⁶／ｍｌ（２プレート当り７.５ｍｌ）で再懸濁させた 。ついで、５μＭでのＢＣＥＣＦ−ＡＭ（１０ｍＭストック），１／２０００希 釈を加えた。その細胞製品を３７℃で３０分間培養した。管にＰＢＳを加えて洗 滌し、上記の様に遠心分離し、そして傾斜した。該細胞を１０分間１０００ｒｐ ｍでペレット化し、該細胞を１.５×１０⁶細胞／ｍｌ（１０ｍｌ）で再懸濁した 。 化合物は、１：５希釈を初めとして、種々の濃度で試験した。４０μｌの化合 物を４本足のウエルに加え、ついで細胞４０μｌを加える。懸濁液を室温で２０ 分間５０ｒｐｍで回転させる。非結合細胞を除去又ははじきとばす。混合物をＰ ＢＳで２回洗滌する。ついで７５μｌの溶解（Ｌysis）緩衝液（１００ｍｌトリ ス，ｐＨ９.５，２％トリトンｓ１００）を加える。コントロールは、６５μｌ の溶解緩衝液を混ぜた１０μｌのラベルした細胞である。励起蛍光は、４８５ｎ ｍで、放出蛍光は細胞蛍光の６０の増加と共に５３０ｎｍで読み取る。蛍光の減 少は、単層への細胞の付着の阻止を示す。 実施例Ｃ セレクチン移動（rolling）検定；セレクチンへの好中球付着の糖蛋白の効果 好中球は血管壁に沿って移動し、血管に付着し、急性炎症の場の組織に移住す る。セレクチンは、好中球の移動と付着を媒介する。かくして、セレクチンへの 好中球の付着の阻止は、細胞粘着阻止剤として、そして抗炎症剤としての活性を 示す。 糖蛋白の存在下、フロウ条件下、Ｐ−およびＥ−セレクチニンへの白血球又は ＨＬ−６０細胞の粘着はパーテルら（Ｐatel，et al．Ｊ．Ｃlin．Ｉnvest.（１ ９９５）９６：１８８７−１８９６）の論文記載の方法に従って測定する。 フロウ条件下白血球又はＨＬ−６０細胞のＰ−及びＥ−セレクチンへの粘着は 次の様に検定される。微小血管系に存在する液体シェア（Ｓhear）ストレスが平 行プレートフロウチェンバー中で刺激される。ジョーンズらの論文（Ｊones，et .al.，Ｂiophys．Ｊ.（１９９４）６５：１５６０−１５６９）ムーアらの論文 （Ｍoor，et al.，Ｊ．Ｃell．Ｂiol.（１９９５）１２８：６６１−６７１）。 ＨＢＳＳ／０.５％ＨＳＡ中の白血球（１０⁶／ｍｌ）が所望の壁シェアストレス でチェンバーを通して灌流される。白血球の移動はＥ−又はＰ−セレクチン発現 ＣＨＯ細胞上、又はＩＬ−１β，ＴＮＦα或いはＩＬ−４刺激ヒト内皮細胞上で ４分間、そしてデータを取る前にセレクチンで被服したプラスチック上で８分間 平衡状態に保つ。コントロールと試験白血球の比較実験が同じ培養皿上の平行チ ェンバー中で行われる。白血球の相互作用が、フェーズコントラストビディオマ イクロスコピを使った４０倍対物レンズ（視野：０.０３２ｍｍ²）で可視化する 。相互作用はコンピューターイメージングシスティム（Ｓun Ｍicrosystem，Ｍo untain Ｖiew，ＣＡ；Ｉnovision，Ｄurham，Ｎ'Ｃ）を用いて数量化する粘着又は移動 白血球の数はイメージフレームをデジタル化し、上記のジョーンズらの論文に記 載されているように確実に付着又は移動している細胞の数を決定することにより 計測する。白血球の剥離は、白血球を静的条件下表面に粘着させ、ついで１ｄｙ ｎ／ｃｍ²の壁シェアストレスでフロウを開始することによって決定する。壁シ ェアストレスは３０秒ごとに自然に増加し、粘着性を残している白血球の数を決 定する。全ての実験は、特に指示しない限り、２２℃で行なう。ある種の実験に おいては、細胞を１０分間阻害剤と共にプレインキュベートし、移動（rolling ）を阻害剤のたえざる存在下アッセイする。 実施例Ｄ ｂＦＧＦエリーザ（ＥＬＩＳＡ） 本発明の糖蛋白がホクザル（Ｆoxall et al．Ａnal．Ｂiochem（１９９５）２ ３１：３６６−３７３）の方法に従ってｂＦＧＦへの結合を阻止するために割当 てられる。 要するに、塩基性ＦＧＦを０.１Ｍ炭酸緩衝液（ｐＨ９.６）で２μｇ／ｍｌに 希釈する。５０μｌをマイクロタイタープレートのウエル（Ｐrobind，Ｆalcon ，Ｌincoln Ｐark，ＮＪ又はＩmmulon ４，Ｄynatech Ｌaboratories，Ｃhantil ly，ＶＡ）に置き、４℃で一夜吸収させる。そのプレートを０.０２％ ツイーン ２０（ＰＢＳＴ）を含むＰＢＳ中でひたし、振りとばすことによって３回洗滌 する。そのウェルをＰＢＳ中の１％牛血清アルブミン(ＢＳＡ)で室温下１時間ブ ロックし、そのプレートを上記の様に洗滌する。 そのウエルが最大限にコートされていることを確認するために、マイクロタイ ターウエルに吸収されたｂＧＦＧの滴定を行なう。３重のウエルは５０μｌのｂ ＦＧＦで、０.５，１，１.２５，１.５，１.７５及び２μｇ／ｍｌの濃度でコー トし、上述の様にブロックする。ビオチン化ＨＳ，５０μｌ（１μｇ／ｍｌ）を 各ウエルに加え、下記のアッセイを行なう。 種々の濃度での直接結合を測定するためのアッセイのために、ビオチン化ＨＳ 又はヘパリンを１％ＢＳＡ−ＰＢＳＴに１μｇ／ｍｌまで希釈し、ついで連続的 に１０倍まで希釈する。タイム−コースアッセイのために、そのビオチン化化合 物は、ＢＳＡ−ＰＢＳＴ中で１００ｎｇ／ｍｌまで希釈される。競合アッセイの ために、ビオチン化ＨＳはＢＳＡ−ＰＢＳＴ中で２μｇ／ｍｌまで希釈される。 結合の潜在的阻止剤として試験される化合物は、上記希釈剤で、等量で、それら の最終濃度の２倍で希釈し、標識ＨＳと合する。５０μｌを３重のウエルに加え 、３７℃で４５分間結合を進行させる。そのプレートを上記の様にして洗滌し、 ＢＳＡ−ＰＢＳＴ中で１：５０００に希釈したストレプトアビジンアルカリホス ホターゼ５０μｌを加える。そのプレートを３７℃で４５分間培養する。そのプ レートを上記の様に洗滌し、さらに３回蒸留水で洗滌する。アルカリホスファタ ーゼの基質，ｐＮＰＰは、１Ｍジエタノールアミン緩衝液で次の様にして調製さ れる。３５ｍｌの蒸留水に、５ｍｇの塩化マグネシウム、４.８５ｍｌのジエタ ノールアミンを加える。ｐＨを１ＮＨＣｌ６.５ｍｌで９.８に調整し、量を水で ５０ｍｌに調節する。この緩衝液をせいぜい１週間暗室に貯える。使用直前に、 ｐＮＰＰの５−ｍｇ錠を溶解し、／ｍｇ／ｍｌの溶液を作製し、ウエル当り５０ μｌを加える。色を１時間、室温で、暗室下発色させる。色の濃度は分子装置プ レートリーダー（Ｍenlo Ｐark，ＣＡ）の４０５ｎｍで読みとられる。 ｐＮＰＰ上でのアルカリホスホターゼ作用の結果としての発色は二つの実験で 、色の濃度の展開が直線であることを決定させる。１つの実験において、完全な 結合曲線が１時間と２時間で読みとられる。第二の実験で、種々の阻止曲線をも ったプレートの光学的濃度が２０，３０，４０，５０及び６０分で読みとられる 。 実施例Ｅ 細胞結合と増殖に対する糖蛋白の効果 ｂＦＧＦでコートしたマイクロタイターウエルへのＲＯ−１２ＵＣ細胞の結合 に対する組成物９８の効果は、イシハラら（Ｉshihara，Ｍ.，et al.，Ａnal Bi ochem（１９９２）２０２：３１０−３１５）の方法によって決定される（１９ ９４．３．２２発行のＵＳ Ｐatent ５,２９６,４７１も参照のこと）。結合細 胞は直ちに総蛋白として定量される。ＲＯ−１２ ＵＣ細胞の結合を阻止するヘ パリンは陽性コントロールとして用いられた。 アッセイは次の様にして行われた。ヒト組換体ｂＦＧＦ（１０μｇ／ｍｌ）の ５０μｌを９６穴組織培養プレートに加え、４℃で１晩培養した。各らＩＵをＰ ＢＳで吸引し、結合していないｂＦＧＦを除去し、ＰＢＳで２度洗滌し、ついで ５％（ｖ／ｖ）胎児牛血清を含むＰＢＳで１時間室温で培養した。ＲＯ−１２ ＵＣ細胞を５％牛胎児血清を含むＰＢＳに３×１０⁶細胞／ｍｌの密度で懸濁し た。この混合物に、硫酸化組成物又はヘパリンの所定量を添加した。それらはＰ ＢＳと２.５％牛胎児血清から成立っている。ＰＢＳと２.５％牛胎児血清のみを 含む対照も同様に行なった。次に１００μｌの細胞懸濁液をマイクロタイターウ エルに直ちに加え、５分間培養した。その後ウエルをＰＢＳで３回洗滌した。最 後に、ウエルに結合した細胞蛋白の量を５％ＳＤＳの２０μｌに結合細胞を溶解 し、セルライセイトの蛋白濃度を測定することによって、決定した。ＢＳＡは、 標準品として使用した。 ＲＯ−１２ＵＣ細胞で見られた効果を拡大すべく、２次の実験を行なった。ｂ ＦＧＦ依存副腎皮質内皮（ＡＣＥ）細胞の増殖を阻止する硫酸化マルトヘキソー スの能力を決定した。この細胞（Ｄ．Ｇospodarowicz，ＵＣＳＦによって提供さ れた）は、増殖応答のためにａＦＧＦかｂＦＧＦのどちらかを必要とする。細胞 をマイクロタイターウエルに低密度で２ｎｇ／ｍｌのｂＦＧＦの存在下蒔き、そ の生育は硫酸化マルトヘキソースの存在下４日後総蛋白として決定した。 組成物９８のＡＰＴＴ値はＵＳ Ｐatent ５,２９６,４７１に記載の方法で決 定した。表２にＵＣ−ＰＢＡアッセイ、ＡＣＥ細胞生育阻止アッセイ及びＡＰＴ Ｔ値についてリストした。 組成物９８はＵＣ−ＰＢＡアッセイ（ＩＣ５０ １μｇ／ｍｌ）における、ｂ ＦＧＦ総合活性に関して、ヘパリンに匹敵する。組成物９８は、ＡＣＥ細胞生育 阻止アッセイにおいても活性である。組成物９８のＡＰＴＴ値は同じサイズの他 の化合物よりも有意に低かった。従って、化合物９８は出血をひきおこす傾向が 少なく、ｂＦＧＦの結合を阻止するヘパリンと同様の作用を示すだろう。 表２はＡ₅₅₀値でのアッセイの結果をリストしている。 組成物５３βはβ−グルクロニダーゼ活性を約８５％まで減少した。 表２に示す通り、本発明の糖蛋白はβ−グルクロニダーゼの阻害剤であり、標 準方法を用いるアフィニティークロマトによるその酵素の精製に使用させるだろ う。 実施例Ｆ ニワトリ漿尿膜（ＣＡＭ）血管形成アッセイ 糖蛋白の血管形成活性はカセロットら（Ｃasselot，Ｊ．et al.，Ｊ．Ｃell． Ｐhys.(１９８６)１２７：３２３−３２９）の方法に従う漿尿膜でアッセイされ る。要するに、殻のない胚を、プラスチックラップ（Ｈandi−Ｗrap，Ｄow Ｃhe mical Ｃｏ．）からなり、ゴムバンドでもって発泡スチロール飲用カップ中に支 持された”スリング（sling）”に懸濁させる。受精後６０〜７２時間経過のニ ワトリの卵を割って、そのプラスチックラップのスリンジに入れ、１００ｍｍの 培養皿から殺菌プラスチック蓋でおおい、湿度を保持した３８℃培養器にいれる 。受精して９日後、試験物質を含む４０μｌのアガロースペレットをこの段階で 、３０〜４０ｃｍ²の範囲を占めているＣＡＭの上に置く６％水溶性低融点アガ ロース(Ｓigma type VII)２０μｌと同量の試験物質を３７℃で、直ちに混合し てペレットを作製する。その際に試験物質の加熱を避ける。そのペレットを４℃ で数分間おき、固化させる。この方法は、胚の５０％以上の生存を可能にし、実 験の直接視的及び写真によるモニターを可能にし、そして１１個の卵で５〜８個 の試料の試験を可能にする。スコア化は試験物質を添加して３〜４日後に、シン グル盲検法で行なう。陽性反応の組織学的切片は、常法で作製され、ＣＡＭの炎 症も陽性反応を示すから炎症細胞の存在のために試験される。澄明な半透明な ペレットが白色で不透明になることによって証拠づけられる様に、明白な炎症反 応を引き起したペレットは、スコア化されない。血管形成の阻止は傷の治療、炎 症の処理及び腫瘍の生長の阻止の重要な側面となりうる。 実施例Ｇ 慢性炎症：モルモット喘息モデル モルモットの喘息モデルでの糖蛋白の評価方法はイトウら（Ｉto，et al.Ｉnt .Ａrch．Ａllergy Ｉmmunology（１９９６）１０９：８６−９４）の論文に記載 されている。要するに、モルモットに５％オバルミン０.５ｍｌを皮下投与し、 そして０.５ｍｌを腹腔内投与して、感作する。追加抗原刺激の注射を７日後に 行ない、その７日又は８日後、オバルミン（１０ｍｇ／ｍｌ）をＨ₁アンタゴニ ストであるメピルアミン（mepyramine）１０ｍｇ／ｋｇｉ.ｐ.の入った(underco ver)噴射剤を用いて吸入させる。３０分後１％オバルミンで３分間チャレンジさ せる。７日後第２回目の投与（チャレンジ）を行なう。実験は７日〜８日後に行 なう。メピルアミンは、各抗原を投与する前に使用する。 気官支収縮のインデックスとして、特定の気道抵抗が呼吸分析器（Ｎon−Ｉnv asive Ｍodel，Ｂuxco，Inc.，Ｓharon，Ｃonn.，ＵＳＡ）とデータロガー（Ｍo del ＯＡ−１６，Ｂuxco）を見えたダブルチェンバー体積変動記録器でbreath− by-breath basisに基づき決定される。特定の気道抵抗はチャレンジ前とチャレ ンジ後０〜６時に測定される。 気道の応答はメタコリンの濃度の倍増に対する気道抵抗を測定し、決定する。 メタコリンに対する気官支収縮のインデックスとして、呼吸抵抗がマルチネブラ イザーを有するＡnimalasto（ＴＭＣ−２１００．Ｃhest−Ｍ１，Ｊapan）を用 いる強制振動法によって測定される。要するに、モルモットを体積変動記録器内 に入れ、３０Ｈｚサイン波の振動をモルモット体表面に適用する。マスクを通し ての流出率及びボックス圧は差動の変換器によって測定される。マスクフロウと ボックス圧の３−Ｈｚ分力はロック−イン−増幅器で抽出される。その抵抗が計 算される。気道抵抗の減少は抗炎症活性の微候である。 メタコリン（３２−４,０９６μｇ／ｍｌ）又は食塩エアロゾルは、圧縮空気 で作動される超音波ネブライザーを用いて起こされる。食塩水は１分間吸入され 、メタコリンの濃度を上げて１分間隔で１分間吸入させる。抵抗が個々の動物の ベースライン値の２００％を超えるメタコリンの最小刺激濃度が計算され、ＰＣ ２００（μｇ／ｍｌ）として表わされる。ＰＣ２００値は抗原吸入の１時間前（ pre）と４時間及び２４時間後に決定される。 モルモットは各気官支肺胞の洗浄前にペントバルビタール（３０ｍｇ／ｋｇ ｉ.ｐ.）で麻酔される。器官にディスポーサブル静脈カテーテル，３−Ｆｒ−サ イズ（ＡＴＯＭ ｃｏ，Ｔokyo，Ｊapan）でカニューレを行ない、気道内腔を３ ７℃の０.９％食塩水の等量で３回洗滌（１０ｍｌ／ｋｇ）、典型的には、体液 の７５％以上回収する。各動物から集めたＢＡＬＦを直ちに氷浴に置き、遠心分 離する（１５０ｇ １０分間 ４℃）。沈殿物は細胞成分と数を評価するために使 用される。 ＢＡＬＦの遠心後の細胞ペレットを４ｍｌのＨＢＳＳ（ハンクス平衡液）に再 懸濁し、ついで総細胞数を標準血球計を用いて数える。異なる細胞のカウントが メタノールに固定されたスメアに関して行われ、ついでライト（Ｗright）液に て染色される。１スメアあたり最小５００細胞がオイルで浸され、光学顕微鏡（ ×１,０００）によって数えられた。各細胞集団の比率は総細胞のパーセンテー ジとして表現され、ついで本比率は総細胞数とともに各細胞タイプの総数を計算 するために使用される。好酸球および／または好中球の減少は抗炎症活性を示唆 する。 実施例Ｈ モルモット好酸球増加症モデル 上記の喘息モデルにおいて使用したのと同様のプロトコールを用いて、活発に 感作したモルモットの気管支肺胞洗浄液（bronchoalveolar lavage fluid）（Ｂ ＡＬＦ）中の抗原により誘発した顆粒細胞の蓄積に及ぼす影響をアッセイする。 簡単には、ハートリーモルモットを−１４日〜−７日に２回、５０mg／mlオバ ルブミンで感作させる。第０日に６分間エアロゾルオバルブミン（１０mg／ml） の吸入の１時間前および１時間後に糖ペプチドを静脈内注射する。オバルブミン を感作させる５分前に０.００１％サルブタモールを５分間吸入する。洗浄液を 抗原の吸入の４時間後に回収する。好酸球および好中球の数を数える。好酸球の 分布の密度をミコデンツ（Ｍycodenz）断続密度勾配によって測定する。好酸球 および好中球の数の減少は抗炎症活性を示唆する。 実施例Ｉ ラットにおけるアジュバント誘発関節炎 １６０−１９０ｇのルイス−ＬＥＷ／ＣrlＢＲ（チャールズ・リバー・ラボラ トリーズ（Ｃharles Ｒiver Ｌaboratories））雌ラットの尾に、第１日目に０. ７５mgのマイコバクテリウム・ブチリカム（Ｍycobacterium butyricum）（０. １mＬのパラフィンまたはライトミネラルオイル中の０.７５mg）を注入する。尾 への注入の直前にすべてのラットの後足の体積を決定し、ついでラブキャット・ ランダマイゼーション・プログラム（ＬabＣat Ｒandomization Ｐrogram）を用 いて総後足の容積により１０匹のラットの各グループに出来るだけ均等に分配す る。そのアッセイは多様な用量レベルの糖ペプチドおよび１つのビヒクルのコン トロール群を用いて行う。そのビヒクルは０.２５％の濃度のメチルセルロース であってよい。１０匹の別の群に２.５mg／kgのインドメタシンを経口投与する 。すべての動物は第１日〜第１９日まで１日１回、栄養を皮下、または腹腔内投 与により経口的に投与される。その動物にはまた、多様な用量にて投与し、また は静脈内注射を介して投与する。後足の体積をアジュバントを投与した後毎日水 置換によってモニターする。 ラットの後足の体積を水腫の表の内部のウェルに結合したトランスデューサー を介する水置換を用いてプレスチモグラフを用いて記録する。データを水腫ソフ トウエアのためのバクスコ・バイオシステム（ＢＵＸＣＯ Ｂiosisutem）を介し て回収し、ついでさらなる統計的分析にかける。ハードウェアおよびシグナルの 前もったキャリブレーションを行う。読み取った容積を０にリセットし、ついで 後足を広げてもともとののヘアラインまで浸す。そのシステムは自動的に読み取 り、ついで次の被験体に進むように活性化されている。得られたすべてのデータ は水置換の容積（ml）に等しい。後足の容積の減少は抗炎症活性を示唆する。 実施例Ｊ ラット肉芽腫性脈管炎モデル 糖ペプチド糖模倣物のグルカン−誘発肺顆粒腫の形成の減少能力の測定 糖ペプチド化合物をイン・ビトロアッセイにて試験し、肺肉芽腫形成のイン・ ビボモデルにて試験する。これらの手続きはフローリ（Ｆlory）ら、Ｌab.Ｉnve st. （１９９３）６９：３９６−４０４；およびフローリーらＡm.Ｊ.Ｐath（２ ９９５）１４６：４５０−４６２に一層完全に記載されている。プロトコールＩ −IIIはコントロール動物に投与したビヒクル（食塩水）に比較して肺肉芽腫形 成に対しての保護薬剤としての糖ペプチド糖模倣物の評価を行うように設計され ている。４８時間後の形態分析の前の酵母細胞壁グルカン（５mg／kg）の注入を 糖模倣物の保護効果を評価するために使用する。プロトコールＩは糖模倣物 の保護効果の評価、即ち関心のある化合物をグルカン注入の前に投与することを 認めている。対して、プロトコールIIおよびIIIにおける試験群は一層臨床的な 設定に厳重に似せており、すなわちその化合物はそれぞれグルカン注入の６およ び１２時間後投与する。初期の肉芽腫の増殖（１−６時間）はグルカンの与えら れた領域おける好中球の一時的な流入によって特徴付けられる。この時間の後、 最終的な肉芽腫を構成する単球およびマクロファージを探す。プロトコールＩは 、糖模物の初期の好中球媒介の肉芽腫増殖相を抑制する能力を測定するのに利用 される。プロトコールIIおよびIIIは、肉芽腫形成の減少させようとこれらの細 胞タイプに影響を及ぼす糖模倣物の能力を測定するように直接単球／マクロファ ージ相に指令する。最少６匹からなる各群（ビヒクルコントロールおよび糖模倣 処理）は最終的なデータ分析での含有物に適していることがわかった。プロトコールＩ： グルカン誘発肺肉芽腫： ２５０−３００gの特定病原体を持たないロングエバンスラット（Ｌong−Ｅva ns Ｒat）を層流（laminar air flow）を有した特定病原体を持たない部屋で飼 育する。肺肉芽腫を麻酔した動物の背側陰茎静脈（dorsal penil vein）への個 々のグルカン（５mg／ラット）の注入によって誘発する。屠殺時に肺をゆっくり と４％パラホルムアルデヒド（４ml）で満たし、光学および電子顕微鏡で常法で 処理する。プロトコールII： イン・ビボ実験： 糖ペプチドの静脈内注入： グルカン注入時、糖ペプチドを麻酔をかけた動物の背側陰茎静脈を介して注入 する。コントロールラットはビヒクル（食塩水）を検査下化合物の代わりに使用 する点を除いては同じく処理する。循環中の白血球細胞の数に及ぼす糖ペプチド の効果を異なる細胞数となるライト−ギムザ（Ｗrights-Ｇimsa）型染色にて末 梢血液スメアを染色することによって測定する。プロトコールIII： 肺肉芽腫の大きさおよび数の形態測定分析： 肉芽腫形成の形態測定分析をグリカン注入後４８時間後に屠殺した動物由来の 肺切片に関して行う。２０の１０倍の視野をブラインド切片からランダムに選択 し、ついで視野あたりの肉芽腫の数および領域を記録する。各肉芽腫の領域をＮ ＩＨイメージ１０００ソフトウェアを有したマッキントッシュII ＦＸ（Ｍachin tosh II ＦＸ）コンピューターにつないだソニー・ビデオ・イメージ・カメラ（ Ｓony video image camera）を用いて測定する。その領域を変換因子を得るため の血球計上の既知の領域を測定することによってピクセルズ²(pixels²)からμｍ² へと変換する。 肺ＭＰＯ（ミエロペルオキシダーゼ）アッセイを、糖模倣物の存在がグルカン を与えらえた動物の肺内の好中球の蓄積に影響を及ぼすか否かを決定するために 利用される。もし処理動物のＭＰＯレベルがコントロールに比較して有意に減少 してない場合、その化合物が血管外の部分の血管構造からの好中球の移動に影響 を及ぼす可能性が電子顕微鏡によって検査される。ＥＭの使用は好酸球の位置に 関する情報を提供する（血管の空間対血管外の空間）。肺ＭＰＯアッセイ： 除去に関して、ＭＰＯ分析のための肺を液体窒素中で即座に凍結する。その組 織を２つの容量のホモジネーションバッファー（５０mＭのリン酸ナトリウム、p Ｈ６.０）内に入れ、ホモジナイズする。そのホモジネートしたものを３０分間 遠心し（３０００×ｇ、４℃）、ついでその上清を除去する。ＭＰＯ活性をＯ− ジアニシジンの存在下でのＨ₂Ｏ₂変換の結果の吸光度４６０nmでの変化を測定す ることによって決定する。そのＭＰＯ活性は組織の重量により標準化する。 好中球は完全な肉芽腫の増殖に必要である。単球走化性サイトカインＭＣＰ− １の発現を増強する作用があるようである。従って、好中球の接着／蓄積を抑制 することは糖模倣物の作用の間接的なメカニズムを提供する。これらの化合物の ケモカイン発現への影響を決定するため、肺組織切片の免疫組織化学をラット走 化性サイトカインに対するポリクローナル抗体を用いて行う。ＭＣＰ−１発現の免疫組織化学分析： グルカン注入６時間後に屠殺した動物から除去した肺組織切片を組換えラット ＭＣＰ−１（１：２５０希釈）に対して作成したウサギ精製ＩgＧでインキュベ ートする。洗浄を繰り返した後、細胞をビオチン化したヤギ抗ウサギ二次抗体（ １：１０００希釈）でインキュベートする。ベクスタイン（Ｖecstain）ＡＢＣ キット（ベクター・ラボラトリーズ（Ｖector Ｌaboratoris））を用いて、３− アミノ−９−エチル−カルバゾールを基質として用いて一次抗体を検出する。コ ントロールには、一次抗体を省略している切片および一次抗体のかわりに放射線 標識したマウスＩgＧ１抗体でインキュベートした切片を含む。 実施例Ｊ ＣＰＣ沈降を用いたラット肝癌細胞の可溶性抽出物におけるヘパラナーゼ活性の ヘパリン模倣物の定量のヘパラナーゼ阻害作用のアッセイ アッセイ ラピエール（Ｌapierre）らにより記載された方法を用いてヘパラナーゼ阻害 作用を測定する。Ｇlycobiology（１９９６）６（３）：３５５−３６６。ＣＰ Ｃ沈降アッセイはヘパラナーゼ切断ＨＳ鎖（［³Ｈ］膵臓ＨＳ基質由来）が選択 的に非切断鎖をＣＰＣで沈澱させることによって後者から区別することができる という観察から発展した（オールドバーグ（Ｏldberg）ら、Ｂiochem.（１９８ ０）１９：５７５５；ベーム（Ｂame）、Ｊ．Ｂiol．Ｃhem.（１９９３）２６８ ：１９９５６）。簡単には、このアッセイは２００mＭ ＭＥＳ、０.１４Ｍ Ｎa Ｃl、ｐＨ５.２中の［³Ｈ］アセチル化膵臓ＨＳ（１０mＬ、２５０ng、８０,０ ００ＣＰＭ）と０−１０００mg／mＬの濃度の試験化合物（１０mＬ）を水中で合 わせて行う。すべてのアッセイはポジティブコントロールとしてのヘパリンとと もに３回行う。新しく調整したバッファー１中で３３３mg／mＬに希釈した肝癌 可溶性抽出物（３０mＬ）を０℃で各チューブに（バックグランドＣＰＭを測定 するために試用するものを除いて、すなわち、試験化合物なしのものを除いて） 加える。そのサンプルを３７℃のウォーターバスに２０分間インキュベートし、 その後、ヘパリン（１５０mＬ、３３３mg／mＬ）をその反応を停止させるために 加える。その２０分のインキュベーション時間をこの系におけるＨＳ加水分解の 速度が３０分まで低下し始めるという観察の後に選択する。酵素の不活性化より もむ しろ基質の枯渇が速度の低下を引き起こすと決定される。というのは基質の開裂 の速度における増加が新鮮な酵素を加えた後に観察されないからである。さらに 、３７℃で酵素を前以てインキュベートしてもＨＳ加水分解の速度に影響を及ぼ さない。可溶性肝癌抽出物をヘパリンを加えた後にバックグランドチューブの各 々に加える。酢酸ナトリウムの１００mＭ溶液（pＨ５.５）（２００mＬ）を各チ ューブに加えた後、水中（１００mＬ）の０.６％ＣＰＣｗ／ｖの溶液を加える。 そのチューブをボルテックスし、ついで周辺温度にて１時間インキュベートし、 ついでエッペンドルフ（Ｅppendorf）５４１５Ｃマイクロセントリフュージ（mi crocentrifuge）にて４,０００×ｇで１０分間遠心する。上清（４００mＬ）を 注意深く除去し、液体シンチレーションカウンティングによって³Ｈでアッセイ する。ＣＰＣ試薬がヘパリンまたは本アッセイにて使用した試験化合物の最高濃 度にて枯渇しないことを確認するために、２００mg／mＬの化合物を肝癌抽出物 および［³Ｈ］膵臓ＨＳ基質と０℃で２０分間インキュベートする。これらの反 応チューブの可溶性ＣＰＭとバックグランドＣＰＭとの間に検出できる差異はあ るべきではない。本アッセイを他のライソゾームエキソヒドロラーゼインヒビタ ー（lysosomal exohydrolase inhibitors）のヘパリナーゼに及ぼす影響を検査 するため、水中の１０mＬのＩＳＭＳ（１０００mg／mＬ）およびＧlcＮＡc（３ ０００mg／mＬ）を放射線標識したＨＳ基質および可溶性肝癌抽出物（総容量５ ０mＬ）を含むアッセイチューブに加える。インヒビター濃度を、インヒビター のＫ₁値および基質ＩＳＭＳには肝臓イデュロネート２−サルファターゼおよび 基質ＩＭＳには肝臓−イデュロニダーゼのＫ_m値に基づきイデュロネート２−サ ルファターゼおよび−イデュロニダーゼ活性の９９％より多くを抑制するために 選択する（ホプウッド（Ｈopwood）（１９８９）、「エンザイムズ・ザット・デ グレード・ヘパリン・アンド・ヘパリン・サルフェート」（”Ｅnzymes that Ｄ egrade Ｈeparin and Ｈeparin Ｓulfate”、Ｈeparin（レーン（Ｌane）および リンダール（Ｌindahl）編）、ＣＲＣプレス、インク、（ＣＲＣ Ｐress Ｉnc. ）、ボカ・レイトン（Ｂoca Ｒaton）、フロリダ、１９１−２２７頁；フリーマ ン（Ｆreeman）およびホプウッド、Ａdv．Ｅxp．Ｍed．Ｂiol.（１９９２）３１ ３ ：１２１）。ヘパリナーゼ開裂［³Ｈ］アセチル化膵臓ＨＳのサイズ排除ＨＰＬＣによる特徴 付け アセチル化膵臓ＨＳサンプルを肝癌可溶性抽出物とともに０、１０、１５およ び２０分間インキュベートし、ついでその反応をヘパリン（１５０mＬ、３３３m g／mＬ）を加えた後、１０分間沸騰させることによって停止させる。サンプルを ０.２mmマイクロセントリフュージフィルターインサートを通して濾過し、１６, ０００×ｇで１０分間回転させ、窒素下で蒸発乾固し、ついで濾過した水（２０ mＬ）中に再度溶解させる。サンプルアリコート（１７μＬ）を前記のＨＰＬＣ サイズ排除系に注入する。画分（３７５mＬ）を回収し、ついで液体シンチレー ションカウンティングにより［³Ｈ］に関してアッセイする。［³Ｈ］標識したヘ パリンヘキササッカリド標準をクロマトグラフィーにかけて屈折率検出計を用い てオリゴサッカリドをと液体シンチレーションカウンティングにより測定された オリゴサッカリドの溶出との間に観察された時間差を決定する。各サンプルのＣ ＰＭ時間点をプロファイルを比較するため最高の総ＣＰＭでの時間点のサンプル に標準化する。 実施例Ｋ β−グルクロニダーゼ抑制アッセイ 要素５３βを試用してβ−グルクロニダーゼ活性を測定し、ついでその測定を 常法と同様のやり方で行う。 その手続きはシグマ（Ｓigma）キット３２５−Ａに提供される指示書により行 われる。使用された試薬はそのキットに提供されており、ついでその使用された 試薬の比率は以下の表に記載する： ＰＧＡを除くすべての要素を室温で３０分間前以てインキュベートし、ついで ＰＧＡを混合物に加える。様々な時点（０.５、１および２時間）、２μｌのア リコートを除去し、１mlのアッセイ希釈剤を加え、混合し、ブランクに対して５ ５０nmで吸光度を読み取る（Ａ₅₅₀）。そのアッセイ希釈剤は酢酸バッファー（ １.４４ml）、水（０.９６ml）およびＡＭＰ（２−アミノ−２−メチル−１−プ ロパノール）バッファー（１２ml、０.１Ｍ ＡＭＰ、pＨ１１、０.２％硫酸ラウ リルナトリウムを含む）の混合液である。 表４にＡ₅₅₀値に関するアッセイの結果を列挙する。 要素５３βはβ−グルクロインダーゼ活性を約８５％にまで減じる。 表４に示すように、本発明の糖ペプチドはβ−グルクロニダーゼのインヒビタ ーであり、標準方法を用いたアフィニティークロマトグラフィーによる酵素の精 製に有用であろう。 実施例Ｍ 癌モデル 多様な癌モデルが当該技術分野においてよく知られている。以下は使用される ことができる多くの癌モデルのいくつかの実施例である。ヌードマウスにおけるヒト膵臓（ＣaＰan−２）アデノカルシノーマの皮下腫瘍 増殖： ３×１０⁶細胞／mＬのＣaＰan−２腫瘍細胞を雄Ｂalb／c無胸腺ヌードマウス （シモンセンラボラトリーズ（Ｓimonsen Ｌaboratories）、ギルロイ（Ｇilroy ）、カリフォルニア）の前背側部に０.１mＬのｓ.ｃ.の容量にて注入する。動物 （１０動物／処置群）は１μｇ−１００ｍｇの糖ペプチドまたはＰＢＳビヒクル を第１日〜第３５日に毎日ｓ.ｃ.投与される。腫瘍の測定を１週間に３回行い、 ついでデータを分散ＳＡＳ ＪＭＰバージョン３（Ｖariance ＳＡＳ ＪＭＰ Ｖersion３）の分析にて評価する。Ｂ１６−Ｆ１０メラノーマ実験的肺転移アッセイ： ４−６週齢の雌Ｃ５７ＢＬ／６Ｎマウス（チャールズ・リバー、ラレイ、ＮＣ ）の尾に５×１０⁴Ｂ１６−Ｆ１０メラノーマ細胞を静脈注射（ｉ.ｖ.）にて０. １mlの容量にて注入する。動物は食塩水ビヒクルコントロールおよび処置群を割 り当てられる前にランダムに分けられる。動物（１０動物／処置群）は１−１０ ０ｍｇ／ｋｇのｓ.ｃ.、ｉ.ｖ.、経口またはｉ.ｐ.で単独の用量（０.０５mＬ） または０.９％の食塩水ビヒクルでの糖ペプチドを第０日〜第４日に投与を受け 、最初の投与は腫瘍の投与の１時間前に行う。ビヒクルコントロールおよび処置 群の動物の生存時間を記録する。結果をＣhi−Ｓquared統計分析にかけて評価す る。ヘパリンミメティクスのヒトＣaＰan−２およびＢ１６−Ｆ１０メラノーマ細胞 の増殖への影響 ４８ウェルのプラスチック組織培養プレートコーニング（Ｃorning）中に、Ｃ aＰan−２細胞を１０％ウシ胎児血清およびＬ−グルタミンを含むマッコイ５Ａ 培地に１ウェルあたり２０,０００細胞にて静置する一方、Ｂ１６−Ｆ１０メラ ノーマ細胞を１０％ウシ胎児血清を含むＤＭＥＭに１ウェルあたり２,０００ 細胞にて静置する。その培地はまた、適当なビヒクル（０.９％食塩水またはＰ ＢＳ）中に溶かした糖ペプチド１００μｇ／mＬまたはビヒクルだけを含む。ク ールターカウンター（Ｃoulter counter）を用いて各ウェル中の細胞の総数を３ ７℃で２４、４８および９６時間インキュベートした後に決定する。使用された 各条件について６つの複製が行われ、総細胞のカウントの平均が決定される。 本発明は上記実施例の詳細に参照のため開示されているが、本開示は制限する よりもむしろ例示的であることを意図していると理解されるべきである。当業者 であれば容易に本発明の本質および付記されている請求の範囲内で改変がなしえ るであろうことが考えられるからである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 31/70 ＡＢＮ Ａ６１Ｋ 31/70 ＡＢＮ ＡＤＵ ＡＤＵ ＡＤＷ ＡＤＷ ＡＥＤ ＡＥＤ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，Ｓ Ｚ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，Ｉ Ｓ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ， ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，Ｓ Ｄ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者 ホーム，ケビン・アール アメリカ合衆国94501カリフォルニア州 アラメダ、インビンシブル・コート30番 (72)発明者 ワン，リー アメリカ合衆国94501カリフォルニア州 アラメダ、タイドウェイ・ドライブ・ナン バー105、341番

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．一般式Ｉ： Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ−[(Ｘ)_n−Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ]_m−(Ｘ)_n−Ｗ （Ｉ） （式中、 Ｗは、独立に、 （ａ）糖； （ｂ）アリール、アラルキル； （ｃ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、＝Ｏ、−ＯＲ 、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲか ら選ばれる１〜２の置換基で任意に置換されている）および （ｄ）炭素数５〜７の環状アルキル、５〜７の環原子およびＮ、ＯおよびＳよ りなる群から選ばれた１〜２のヘテロ原子のヘテロ環状アルキル（＝Ｏ、−ＯＨ 、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲおよび−alk −ＣＯＯＲから選ばれる１〜５の置換基で任意に置換されている） よりなる群から選ばれる； Ｙは、独立に、−ＮＲ³−Ｃ(Ｏ)−および−Ｃ(Ｏ)−ＮＲ³−よりなる群から選ば れる； Ｘは、 （ａ）アリール、アラルキル； （ｂ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、−Ｏ−、−Ｎ Ｒ'−、−Ｓ−、＝Ｏ、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ 、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲから選ばれる１〜３の置換基でアル キル骨格中またはアルキル骨格のエキソにて任意に置換されている） よりなる群から選ばれた２官能性または多官能性基； 各ｎは、独立に０または１； 各ｍは、独立に０または１〜９９の整数、ただし、Ｗ基の総数は２〜１００であ る； Ｒは、−Ｈ、または低級アルキル、低級アリール、および低級アラルキル； Ｒ'は、独立に、−Ｈ、炭素数１〜４の低級アルキル、炭素数２〜１９のアラル キル、および−Ｃ(Ｏ)Ｒ"よりなる群から選ばれる； Ｒ"は、炭素数１〜４の低級アルキル；および Ｒ³は、−Ｈ、炭素数１〜８のアルキル、および炭素数５〜８のアラルキルより なる群から選ばれる および薬理学的に許容しうるその塩；ただし、 （ａ）Ｗ基の総数が２である場合は、両Ｗ基は２−アミノヘキソースではない； （ｂ）少なくとも１のＷ基は糖である；および （ｃ）末端ＷがＮ−アセチルグルコサミンである場合は、アノマー炭素において 天然アミノ酸に−ＮＨＣＯ−で結合していなくてよい） で示される糖模倣糖ペプチド化合物。 ２．ｍが１〜５の整数であり、Ｗが独立にフコース、３−アミノ−３−デオキ シグルコース、４−アミノ−４−デオキシグルコース、グルコース、ガラクトー ス、グルコサミン、ガラクトサミン、グルクロン酸、ガラクツロン酸、グルコサ ミンウロン酸、ノイラミン酸、マルトース、マルトトリオース、イズロン酸、２ ，５−アンヒドロマンニトール、マンノース、マンヌロン酸、およびセロビオー スよりなる群から選ばれる、請求項１に記載の化合物。 ３．ｍが１〜２の整数であり、Ｗが独立にグルクロン酸およびグルコサミンか ら選ばれる、請求項２に記載の化合物。 ４．Ｗがマルトース、マルトトリオースおよびセロビオースよりなる群から選 ばれる、請求項１に記載の化合物。 ５．ｎおよびｍが１であり、Ｘが独立にエチレングリコール、エチレングリコ ールオリゴマー、低級アルキル、任意に置換されたアルキル、アミノ酸およびペ プチドよりなる群から選ばれる、請求項４に記載の化合物。 ６．式： Ｗ'−Ｙ−Ｗ"−Ｙ−Ｗ' （式中、 各Ｗ'は、独立に、糖よりなる群から選ばれ； Ｗ"は （ａ）アリール、アラルキル； （ｂ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、＝Ｏ、−ＯＲ 、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲよ りなる群から選ばれた１〜２の置換基で任意に置換されている）および （ｃ）炭素数５〜７の環状アルキル、５〜７の環原子およびＮ、ＯおよびＳよ りなる群から選ばれた１〜２のヘテロ原子のヘテロ環状アルキル（＝Ｏ、−ＯＨ 、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲおよび−alk −ＣＯＯＲから選ばれる１〜５の置換基で任意に置換されている） よりなる群から選ばれる； Ｙは、−ＮＨ−ＣＯ−） で示される、請求項１に記載の化合物。 ７．式： Ｗ'−Ｙ−Ｗ'−Ｙ−Ｗ" （式中、 各Ｗ'は、独立に、糖よりなる群から選ばれ； Ｗ"は （ａ）アリール、アラルキル； （ｂ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、＝Ｏ、−ＯＲ 、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲよ りなる群から選ばれた１〜２の置換基で任意に置換されている）および （ｃ）炭素数５〜７の環状アルキル、５〜７の環原子およびＮ、ＯおよびＳよ りなる群から選ばれた１〜２のヘテロ原子のヘテロ環状アルキル（＝Ｏ、−ＯＨ 、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲおよび−alk −ＣＯＯＲから選ばれる１〜５の置換基で任意に置換されている） よりなる群から選ばれる； Ｙは、−ＮＨ−ＣＯ−） で示される、請求項１に記載の化合物。 ８．少なくとも１のＷ基が−ＮＲ'₂、−ＳＯ₃Ｒまたは−ＣＯＯＲで置換され ている、請求項１に記載の化合物。 ９．Ｗ基の総数が２〜８である、請求項１に記載の化合物。 １０．Ｗ基の総数が３〜４である、請求項１０に記載の化合物。 １１．式： Ｗ¹−Ｙ−Ｗ−Ｙ−Ｗ² （式中、 Ｗ¹は、−(Ｃ＝Ｏ)Ｒ¹¹、シアル酸、ケンプ酸、−Ｂ、−ＳＯ₃Ｍ、−ＯＳＯ₃Ｍ 、−ＳＯ₂ＮＨ₂、−ＰＯ₃Ｍ'₂、−ＯＰＯ₃Ｍ'₂、−ＮＯ₂、炭素数１〜４の飽和 または不飽和カルボン酸（１〜２のヒドロキシル基で任意に置換されている）、 およびそのエステル、およびアミド； Ｗ²は式： （式中、Ｕは、−Ｒ⁹、−ＣＨ₂ＯＲ¹⁰、−ＣＨ₂Ｏ−保護基、−ＣＯＯＲ¹¹、− ＣＯＮ(Ｒ¹¹)₂および−ＣＯＯＭ； Ｒ⁹は低級アルキル； 各ｓは、独立に１、２および３よりなる群から選ばれる； 各ｚは、独立に１および２よりなる群から選ばれる； Ｒ¹⁰は、−Ｈ、−Ｒ¹¹、−ＳＯ₃Ｍ、−(Ｃ＝Ｏ)Ｒ¹¹、−ＳＯ₂ＮＨ₂、 −ＰＯ₃Ｍ'₂、−alk−ＣＯＯＲ₁₃、−alk−ＣＯＮ(Ｒ¹¹)₂および−Ｏ−炭水化物 よりなる群から選ばれる； Ｒ¹¹は、独立に−Ｈ、低級アルキル、炭素数５〜６の環状アルキル、４〜５の 炭素原子および１〜２のヘテロ原子のヘテロ環式アルキル、低級アリールおよび 低級アラルキルよりなる群から選ばれる； Ｒ¹³は、Ｒ¹¹およびＭよりなる群から選ばれる； Ｒ¹⁴は、−Ｈおよび−ＯＲ¹⁰よりなる群から選ばれる； Ｍは、Ｎａ⁺、Ｋ⁺、Ｍｇ²⁺およびＣａ²⁺よりなる群から選ばれる； Ｍ'は、−Ｈ、−Ｍ、およびＲ⁹よりなる群から選ばれる； Ｘは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ(Ｒ¹¹)−Ｃ(Ｒ¹¹)₂−、および−Ｎ(Ｒ¹¹)−より なる群から選ばれる）で示される基； Ｂは、少なくとも１の−ＣＯＯＲ¹¹、−ＣＯＮ(Ｒ¹¹)₂、−ＣＯＯＭ、−ＳＯ₃Ｍ または−(Ｃ＝Ｏ)Ｒ¹¹ ₂置換基を含有するＷ²基） で示される、請求項１に記載の化合物。 １２．全部で４〜８のＷ基を有し、これらＷ基のうち２〜４が任意に完全もし くは部分的に硫酸化された糖である、請求項１に記載の化合物。 １３．式Ｉ： Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ−[(Ｘ)_n−Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ]_m−(Ｘ)_n−Ｗ （Ｉ） （式中、 Ｗは、独立に、 （ａ）糖； （ｂ）アリール、アラルキル； （ｃ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、＝Ｏ、−ＯＲ 、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲか ら選ばれる１〜２の置換基で任意に置換されている）および （ｄ）炭素数５〜７の環状アルキル、５〜７の環原子およびＮ、ＯおよびＳよ りなる群から選ばれた１〜２のヘテロ原子のヘテロ環状アルキル（＝Ｏ、−ＯＨ 、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲおよび−alk −ＣＯＯＲから選ばれる１〜５の置換基で任意に置換されている） よりなる群から選ばれる； Ｙは、独立に、−ＮＲ³−Ｃ(Ｏ)−および−Ｃ(Ｏ)−ＮＲ³−よりなる群から選ば れる； Ｘは、 （ａ）アリール、アラルキル； （ｂ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、−Ｏ−、−Ｎ Ｒ'−、−Ｓ−、＝Ｏ、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＮＲ'²、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ 、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲから選ばれる１〜３の置換基でアル キル骨格中またはアルキル骨格のエキソにて任意に置換されている） よりなる群から選ばれた２官能性または多官能性基； 各ｎは、独立に０または１； 各ｍは、独立に０または１〜９９の整数、ただし、Ｗ基の総数は２〜１００であ る； Ｒは、−Ｈ、または低級アルキル、低級アリール、および低級アラルキル； Ｒ'は、独立に、−Ｈ、炭素数１〜４の低級アルキル、炭素数２〜１９のアラル キル、および−Ｃ(Ｏ)Ｒ"よりなる群から選ばれる； Ｒ"は、炭素数１〜４の低級アルキル；および Ｒ³は、−Ｈ、炭素数１〜８のアルキル、および炭素数５〜８のアラルキルより なる群から選ばれる および薬理学的に許容しうるその塩；ただし、 （ａ）Ｗ基の総数が２である場合は、両Ｗ基は２−アミノヘキソースではない； （ｂ）少なくとも１のＷ基は糖である；および （ｃ）末端ＷがＮ−アセチルグルコサミンである場合は、アノマー炭素において 天然アミノ酸に−ＮＨＣＯ−で結合していなくてよい） で示される化合物の薬理学的有効量を投与することを含む、アルツハイマー病、 アテローム性動脈硬化症、炎症、網膜症、癌、感染、および自己免疫疾患よりな る群から選ばれる状態について患者を治療する方法。 １４．該疾患が癌である、請求項１３に記載の方法。 １５．該癌が、腎臓癌、結腸癌、胃癌、食道癌、肝臓癌、乳癌、肺癌、前立腺 癌、膀胱／泌尿器癌、脳神経膠腫、リンパ腫、卵巣癌、子宮癌、および肉腫より なる群から選ばれる、請求項１４に記載の方法。 １６．該疾患が炎症である、請求項１３に記載の方法。 １７．該炎症状態が、関節炎、炎症性腸疾患、乾癬、再灌流障害、敗血症ショ ッ ク、循環血液量減少性ショック、外傷性ショック、急性呼吸障害症候群、および 喘息よりなる群から選ばれる、請求項１６に記載の方法。 １８．該疾患が自己免疫疾患である、請求項１３に記載の方法。 １９．該自己免疫疾患が、全身性エリトマトーデス（ＳＬＥ）、慢性関節リウ マチ（ＲＡ）、強皮症、および皮膚筋炎よりなる群から選ばれる、請求項１８に 記載の方法。 ２０．式Ｉ： Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ−[(Ｘ)_n−Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ]_m−(Ｘ)_n−Ｗ （Ｉ） （式中、 Ｗは、独立に、 （ａ）糖； （ｂ）アリール、アラルキル； （ｃ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、＝Ｏ、−ＯＲ 、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲか ら選ばれる１〜２の置換基で任意に置換されている）および （ｄ）炭素数５〜７の環状アルキル、５〜７の環原子およびＮ、ＯおよびＳよ りなる群から選ばれた１〜２のヘテロ原子のヘテロ環状アルキル（＝Ｏ、−ＯＨ 、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲおよび−alk −ＣＯＯＲから選ばれる１〜５の置換基で任意に置換されている） よりなる群から選ばれる； Ｙは、独立に、−ＮＲ³−Ｃ(Ｏ)−および−Ｃ(Ｏ)−ＮＲ³−よりなる群から選ば れる； Ｘは、 （ａ）アリール、アラルキル； （ｂ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、−Ｏ−、−Ｎ Ｒ'−、−Ｓ−、＝Ｏ、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ 、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲから選ばれる１〜３の置換基でアル キル骨格中またはアルキル骨格のエキソにて任意に置換されている） よりなる群から選ばれた２官能性または多官能性基； 各ｎは、独立に０または１； 各ｍは、独立に０または１〜９９の整数、ただし、Ｗ基の総数は２〜１００であ る； Ｒは、−Ｈ、または低級アルキル、低級アリール、および低級アラルキル； Ｒ'は、独立に、−Ｈ、炭素数１〜４の低級アルキル、炭素数２〜１９のアラル キル、および−Ｃ(Ｏ)Ｒ"よりなる群から選ばれる； Ｒ"は、炭素数１〜４の低級アルキル；および Ｒ³は、−Ｈ、炭素数１〜８のアルキル、および炭素数５〜８のアラルキルより なる群から選ばれる および薬理学的に許容しうるその塩；ただし、 （ａ）Ｗ基の総数が２である場合は、両Ｗ基は２−アミノヘキソースではない； （ｂ）少なくとも１のＷ基は糖である；および （ｃ）末端ＷがＮ−アセチルグルコサミンである場合は、アノマー炭素において 天然アミノ酸に−ＮＨＣＯ−で結合していなくてよい） で示される化合物の薬理学的有効量を投与することを含む、患者における血管形 成を抑制する方法。 ２１．該投与がｂＦＧＦの結合を抑制する、請求項２０に記載の方法。 ２２．式Ｉ： Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ−[(Ｘ)_n−Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ]_m−(Ｘ)_n−Ｗ （Ｉ） （式中、 Ｗは、独立に、 （ａ）糖； （ｂ）アリール、アラルキル； （ｃ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、＝Ｏ、−ＯＲ 、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲか ら選ばれる１〜２の置換基で任意に置換されている）および （ｄ）炭素数５〜７の環状アルキル、５〜７の環原子およびＮ、ＯおよびＳよ りなる群から選ばれた１〜２のヘテロ原子のヘテロ環状アルキル（＝Ｏ、−ＯＨ 、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲおよび−alk −ＣＯＯＲから選ばれる１〜５の置換基で任意に置換されている） よりなる群から選ばれる； Ｙは、独立に、−ＮＲ³−Ｃ(Ｏ)−および−Ｃ(Ｏ)−ＮＲ³−よりなる群から選ば れる； Ｘは、 （ａ）アリール、アラルキル； （ｂ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、−Ｏ−、−Ｎ Ｒ'−、−Ｓ−、＝Ｏ、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ 、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲから選ばれる１〜３の置換基でアル キル骨格中またはアルキル骨格のエキソにて任意に置換されている） よりなる群から選ばれた２官能性または多官能性基； 各ｎは、独立に０または１； 各ｍは、独立に０または１〜９９の整数、ただし、Ｗ基の総数は２〜１００であ る； Ｒは、−Ｈ、または低級アルキル、低級アリール、および低級アラルキル； Ｒ'は、独立に、−Ｈ、炭素数１〜４の低級アルキル、炭素数２〜１９のアラル キル、および−Ｃ(Ｏ)Ｒ"よりなる群から選ばれる； Ｒ"は、炭素数１〜４の低級アルキル；および Ｒ³は、−Ｈ、炭素数１〜８のアルキル、および炭素数５〜８のアラルキルより なる群から選ばれる および薬理学的に許容しうるその塩；ただし、 （ａ）Ｗ基の総数が２である場合は、両Ｗ基は２−アミノヘキソースではない； （ｂ）少なくとも１のＷ基は糖である；および （ｃ）末端ＷがＮ−アセチルグルコサミンである場合は、アノマー炭素において 天然アミノ酸に−ＮＨＣＯ−で結合していなくてよい） で示される化合物の薬理学的有効量を投与することを含む、患者におけるセレク チンを抑制する方法。 ２３．該投与が細胞接着を抑制する、請求項２２に記載の方法。 ２４．式Ｉ： Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ−[(Ｘ)_n−Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ]_m−(Ｘ)_n−Ｗ （Ｉ） （式中、 Ｗは、独立に、 （ａ）糖； （ｂ）アリール、アラルキル； （ｃ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、＝Ｏ、−ＯＲ 、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲか ら選ばれる１〜２の置換基で任意に置換されている）および （ｄ）炭素数５〜７の環状アルキル、５〜７の環原子およびＮ、ＯおよびＳよ りなる群から選ばれた１〜２のヘテロ原子のヘテロ環状アルキル（＝Ｏ、−ＯＨ 、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲおよび−alk −ＣＯＯＲから選ばれる１〜５の置換基で任意に置換されている） よりなる群から選ばれる； Ｙは、独立に、−ＮＲ³−Ｃ(Ｏ)−および−Ｃ(Ｏ)−ＮＲ³−よりなる群から選ば れる； Ｘは、 （ａ）アリール、アラルキル； （ｂ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、−Ｏ−、−Ｎ Ｒ'−、−Ｓ−、＝Ｏ、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ 、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲから選ばれる１〜３の置換基でアル キル骨格中またはアルキル骨格のエキソにて任意に置換されている） よりなる群から選ばれた２官能性または多官能性基； 各ｎは、独立に０または１； 各ｍは、独立に０または１〜９９の整数、ただし、Ｗ基の総数は２〜１００であ る； Ｒは、−Ｈ、または低級アルキル、低級アリール、および低級アラルキル； Ｒ'は、独立に、−Ｈ、炭素数１〜４の低級アルキル、炭素数２〜１９のアラル キル、および−Ｃ(Ｏ)Ｒ"よりなる群から選ばれる； Ｒ"は、炭素数１〜４の低級アルキル；および Ｒ³は、−Ｈ、炭素数１〜８のアルキル、および炭素数５〜８のアラルキルより なる群から選ばれる および薬理学的に許容しうるその塩；ただし、 （ａ）Ｗ基の総数が２である場合は、両Ｗ基は２−アミノヘキソースではない； （ｂ）少なくとも１のＷ基は糖である；および （ｃ）末端ＷがＮ−アセチルグルコサミンである場合は、アノマー炭素において 天然アミノ酸に−ＮＨＣＯ−で結合していなくてよい） で示される化合物の薬理学的有効量を投与することを含む、患者におけるヘパラ ナーゼを抑制する方法。 ２６．式Ｉ： Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ−[(Ｘ)_n−Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ]_m−(Ｘ)_n−Ｗ （Ｉ） （式中、 Ｗは、独立に、 （ａ）糖； （ｂ）アリール、アラルキル； （ｃ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、＝Ｏ、−ＯＲ 、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲか ら選ばれる１〜２の置換基で任意に置換されている）および （ｄ）炭素数５〜７の環状アルキル、５〜７の環原子およびＮ、ＯおよびＳよ りなる群から選ばれた１〜２のヘテロ原子のヘテロ環状アルキル（＝Ｏ、−ＯＨ 、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲおよび−alk −ＣＯＯＲから選ばれる１〜５の置換基で任意に置換されている） よりなる群から選ばれる； Ｙは、独立に、−ＮＲ³−Ｃ(Ｏ)−および−Ｃ(Ｏ)−ＮＲ³−よりなる群から選ば れる； Ｘは、 （ａ）アリール、アラルキル； （ｂ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、−Ｏ−、−Ｎ Ｒ'−、−Ｓ−、＝Ｏ、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ 、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲから選ばれる１〜３の置換基でアル キル骨格中またはアルキル骨格のエキソにて任意に置換されている）よりなる群 から選ばれた２官能性または多官能性基； 各ｎは、独立に０または１； 各ｍは、独立に０または１〜９９の整数、ただし、Ｗ基の総数は２〜１００であ る； Ｒは、−Ｈ、または低級アルキル、低級アリール、および低級アラルキル； Ｒ'は、独立に、−Ｈ、炭素数１〜４の低級アルキル、炭素数２〜１９のアラル キル、および−Ｃ(Ｏ)Ｒ"よりなる群から選ばれる； Ｒ"は、炭素数１〜４の低級アルキル；および Ｒ³は、−Ｈ、炭素数１〜８のアルキル、および炭素数５〜８のアラルキルより なる群から選ばれる および薬理学的に許容しうるその塩；ただし、 （ａ）Ｗ基の総数が２である場合は、両Ｗ基は２−アミノヘキソースではない； （ｂ）少なくとも１のＷ基は糖である；および （ｃ）末端ＷがＮ−アセチルグルコサミンである場合は、アノマー炭素において 天然アミノ酸に−ＮＨＣＯ−で結合していなくてよい） で示される１またはそれ以上の化合物を含む組成物。 ２７．式Ｉ： Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ−[(Ｘ)_n−Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ]_m−(Ｘ)_n−Ｗ （Ｉ） （式中、 Ｗは、独立に、 （ａ）糖； （ｂ）アリール、アラルキル； （ｃ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、＝Ｏ、−ＯＲ 、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲか ら選ばれる１〜２の置換基で任意に置換されている）および （ｄ）炭素数５〜７の環状アルキル、５〜７の環原子およびＮ、ＯおよびＳよ りなる群から選ばれた１〜２のヘテロ原子のヘテロ環状アルキル（＝Ｏ、−ＯＨ 、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲおよび−alk −ＣＯＯＲから選ばれる１〜５の置換基で任意に置換されている） よりなる群から選ばれる； Ｙは、独立に、−ＮＲ³−Ｃ(Ｏ)−および−Ｃ(Ｏ)−ＮＲ³−よりなる群から選ば れる； Ｘは、 （ａ）アリール、アラルキル； （ｂ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、−Ｏ−、−Ｎ Ｒ'−、−Ｓ−、＝Ｏ、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ 、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲから選ばれる１〜３の置換基でアル キル骨格中またはアルキル骨格のエキソにて任意に置換されている）よりなる群 から選ばれた２官能性または多官能性基； 各ｎは、独立に０または１； 各ｍは、独立に０または１〜９９の整数、ただし、Ｗ基の総数は２〜１００であ る； Ｒは、−Ｈ、または低級アルキル、低級アリール、および低級アラルキル； Ｒ'は、独立に、−Ｈ、炭素数１〜４の低級アルキル、炭素数２〜１９のアラル キル、および−Ｃ(Ｏ)Ｒ"よりなる群から選ばれる； Ｒ"は、炭素数１〜４の低級アルキル；および Ｒ³は、−Ｈ、炭素数１〜８のアルキル、および炭素数５〜８のアラルキルより なる群から選ばれる および薬理学的に許容しうるその塩；ただし、 （ａ）Ｗ基の総数が２である場合は、両Ｗ基は２−アミノヘキソースではない； （ｂ）少なくとも１のＷ基は糖である；および （ｃ）末端ＷがＮ−アセチルグルコサミンである場合は、アノマー炭素において 天然アミノ酸に−ＮＨＣＯ−で結合していなくてよい） で示される化合物を含む、糖ペプチド組み合わせライブラリー。 ２８．式Ｉ： Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ−[(Ｘ)_n−Ｗ−(Ｘ)_n−Ｙ]_m−(Ｘ)_n−Ｗ （Ｉ） （式中、 Ｗは、独立に、 （ａ）糖； （ｂ）アリール、アラルキル； （ｃ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、＝Ｏ、−ＯＲ 、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲか ら 選ばれる１〜２の置換基で任意に置換されている）および （ｄ）炭素数５〜７の環状アルキル、５〜７の環原子およびＮ、ＯおよびＳよ りなる群から選ばれた１〜２のヘテロ原子のヘテロ環状アルキル（＝Ｏ、−ＯＨ 、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲおよび−alk −ＣＯＯＲから選ばれる１〜５の置換基で任意に置換されている） よりなる群から選ばれる； Ｙは、独立に、−ＮＲ³−Ｃ(Ｏ)−および−Ｃ(Ｏ)−ＮＲ³−よりなる群から選ば れる； Ｘは、 （ａ）アリール、アラルキル； （ｂ）炭素数１〜８のアルキル（低級アリール、低級アルキル、−Ｏ−、−Ｎ Ｒ'−、−Ｓ−、＝Ｏ、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＮＲ'₂、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯ₄Ｒ 、−ＳＯ₃Ｒ、−ＣＯＯＲ、−alk−ＣＯＯＲから選ばれる１〜３の置換基でアル キル骨格中またはアルキル骨格のエキソにて任意に置換されている） よりなる群から選ばれた２官能性または多官能性基； 各ｎは、独立に０または１； 各ｍは、独立に０または１〜９９の整数、ただし、Ｗ基の総数は２〜１００であ る； Ｒは、−Ｈ、または低級アルキル、低級アリール、および低級アラルキル； Ｒ'は、独立に、−Ｈ、炭素数１〜４の低級アルキル、炭素数２〜１９のアラル キル、および−Ｃ(Ｏ)Ｒ"よりなる群から選ばれる； Ｒ"は、炭素数１〜４の低級アルキル；および Ｒ³は、−Ｈ、炭素数１〜８のアルキル、および炭素数５〜８のアラルキルより なる群から選ばれる および薬理学的に許容しうるその塩；ただし、 （ａ）Ｗ基の総数が２である場合は、両Ｗ基は２−アミノヘキソースではない； （ｂ）少なくとも１のＷ基は糖である；および （ｃ）末端ＷがＮ−アセチルグルコサミンである場合は、アノマー炭素において 天然アミノ酸に−ＮＨＣＯ−で結合していなくてよい） で示される化合物を含む、化合物の配列。