JPH11504647A

JPH11504647A - Antibiotics

Info

Publication number: JPH11504647A
Application number: JP8533895A
Authority: JP
Inventors: ボロフスキ，エドヴァルト; グジボフスカ，ヨランタ; ソヴィンスキ，パヴェウ; グミエニアク，イェジ; チェルヴィンスキ，アンヂュジェイ
Original assignee: ブリティッシュ・テクノロジー・グループ・リミテッド
Priority date: 1995-05-13
Filing date: 1996-05-10
Publication date: 1999-04-27
Also published as: AU5698396A; KR19990014843A; PL308583A1; IL118233A0; MX9708637A; PL180253B1; AU716883B2; CA2220771A1; NZ307592A; EP0825995A1; ZA963787B; WO1996035701A1

Abstract

(57)【要約】本発明は、一般式（１ａ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド抗生物質残基を表わし、Ｒは糖残基の可変部分を表わし、かつＲ¹およびＲ²はそれぞれＣ_1-4アルキル基を表わす）のポリエンマクロライド群抗真菌性抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体、一般式（２ａ）（式中、Ｒ，Ｒ¹，Ｒ²およびＭは前記の通りで、Ａは有機または無機酸のアニオンを表わす）の塩類に関する。式（１ｂ）および（２ｂ）（式中、Ｎ−アルキルおよびアルキルエステル基はメチル基で表わされる）の化合物はとくに興味がある。本発明は、また、該化合物の調製法、該化合物を含有する組成物、および治療ならびにヒトおよび動物の外因性および内因性真菌感染症の処置におけるその使用にも関する。 (57) Abstract: The present invention provides a compound represented by the general formula (1a) wherein M represents a polyene macrolide antibiotic residue, R represents a variable portion of a sugar residue, and R ¹ and R ² each represent N-alkyl-N-glycosyl derivatives of alkyl esters of polyene macrolide antifungal antibiotics of C _1-4 alkyl groups, of the general formula (2a) wherein R, R ¹ , R ² and M Is as described above, and A represents an anion of an organic or inorganic acid). Of particular interest are compounds of the formulas (1b) and (2b), wherein the N-alkyl and alkyl ester groups are represented by methyl groups. The invention also relates to methods of preparing the compounds, compositions containing the compounds, and their use in therapy and treatment of exogenous and endogenous fungal infections in humans and animals.

Description

【発明の詳細な説明】抗生物質本発明は、一般式１（ａ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド抗生物質残基を表わし、Ｒは糖残基の可変部分を表わし、そして同一かまたは異なることができるＲ¹およびＲ²はそれぞれＣ_1-4アルキル基を表わす）のポリエンマクロライド群抗真菌性抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体、一般式２（ａ）（式中、Ｍ，Ｒ，Ｒ¹およびＲ²は前記同様で、Ａは無機または有機酸のアニオンを表わす）によって表わされる化合物１（ａ）の塩類、一般式１（ａ）および２（ａ）の化合物の調製法ならびに薬剤におけるその使用に関する。とくに興味ある化合物は、一般式１（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド抗生物質残基を表わし、Ｒは糖残基の可変部分を表わす）のポリエンマクロライド群抗真菌性抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体および一般式２（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド抗生物質残基を表わし、Ｒは糖残基の可変部分を表わし、Ａは無機または有機酸のアニオンを表わす）の、その塩類を含み、その調製法および薬剤としての使用にも興味がある。出発原料の抗生物質のアミノ基をアルキル基で置換するポリエンマクロライド群抗生物質のＮ−アルキル誘導体は公知である。出発原料の抗生物質のアミノ基を糖残基で置換するポリエンマクロライドのＮ −グリコシル誘導体も公知である(L.Falkowski、J.Golik、P.Kolodziejczyk、J.P awlak、J.Zielinski、T.Ziminski、E.Borowski の J.Antibiotics 28、244（197 5）；L.Falkowski、J.Pawlak、J.Golik、P.Kolodziejczyk、B.Stefanska、E.Byl ec、E.Borowski の Acta Polon．Pharm．37、517(1980))。これら誘導体の調製に用いられる糖類の例にはＤ−グルコース、Ｄ−マンノース、Ｌ−ラムノース、Ｄ −リボース、およびマルトースがある。ポリエンマクロライドを適当な糖と反応させると同時にアマドリ転位が起って、対応するＮ−グリコシル誘導体を生成する。該化合物は出発原料の抗生物質と同様の生物学的活性を示し、水溶性塩を生じる。しかし、それに付随する高毒性は顕著な欠点を示す。 L．Falkowski、J．Golik、P．Kolodziejczyk、J．Pawlak、J．Zielinski、T． Ziminski、E．BorowskiのJ．Antibiotics 28、244（1975）；L．Falkowski、J． Pawlak、J．Golik、P．Kolodziejczyk、B．Stefanska、E．Bylec、E．Borowski のActa Polon．Pharm．37、517(1980)の論文から出発原料の抗生物質のアミノ基をＤ−グルコース、Ｄ−マンノース、Ｌ−ラムノース、Ｄ−リボース、マルトースのような糖残基で置換するポリエンマクロライドのＮ−グリコシル誘導体が公知である。該化合物は、ポリエンマクロライドと前記の糖類との反応および同時のアマドリ転位によって調製される。該化合物は出発原料の抗生物質と同様の生物学的活性を示し、水溶性塩を生じる。しかし、該化合物は著しい毒性を示す。出発原料の抗生物質のアミノ基を完全にメチル化して第四級アンモニウム塩とするポリエンマクロライドメチルエステルのトリメチルアンモニウム誘導体も公知である（L．Falkowski、 B．Stefanska、 J．Zielinski、 E．Bylec、 J．Gol ik、P．Kolodziejczyk、 E．Borowski の J．Antibiotics 32、1080（1979））。該化合物は、出発原料の抗生物質のジメチル硫酸による完全メチル化によって調製される。該誘導体の有利な性質には水への溶解度、出発原料の抗生物質と同様の抗真菌性活性がある。別の種類の誘導体は、L．Falkowski、B．Stefanska、J．Zielinski、E．Bylec 、J．Golik、P．Kolodziejczyk、E．Borowskiの論文のJ.Antibiotics 32 1080(1 979)により公知のポリエンマクロライドメチルエステルのトリメチルアンモニウム誘導体であって、該化合物では、抗生物質のメチルエステルのアミノ基は完全にメチル化されて第四級アンモニウム塩となっている。該化合物は、出発原料の抗生物質のジメチル硫酸による完全メチル化によって調製される。該誘導体は水に可溶で、出発原料の抗生物質の活性と同様の抗真菌性活性を特徴とするが、極めて毒性があって、不安定である。他のタイプのＮ−アルキル誘導体には、抗生物質とＮ−エチルマレイミド、Ｎ，Ｎ'−ヘキサメチレンジマレイミド、Ｎ−(３−ジメチルアミノプロピル)マレイミドのようなＮ置換マレイミドとのマイケル付加反応によって生成するＮ−スクシンイミジル誘導体があり、該化合物はA．Czerwinski、W．A．Konig、T．Zie niawa、P．Sowinski、V．Sinnwell、S．Milewski、E．Borowskiの論文J.Antibio tics 44 979(1991)によって公知である。該化合物は出発原料の抗生物質よりも毒性が少ないが、抗真菌性活性が低下する。最後に、ポリエンマクロライドのＮ−アルキル誘導体の最後の公知の群は、抗生物質と、アセチルアセトン、エチルアセチルアセテート、ジメチルアセタールまたはジメチルホルムアミドとの反応によって生成するＮ−エナミンおよびアミジン誘導体であり、該化合物は、B．Stefanska、J．Zielinski、E．Borowski、L ．Falkowskiの論文Acta Polonica Phann．45、71（1988）に示されている。該誘導体は、出発原料の抗生物質と同様の抗真菌性活性および有機溶剤へのすぐれた溶解度を示すが、該化合物は依然として著しい毒性があり、また極めて不安定である。本発明者らは今やポリエンマクロライド抗生物質のアルキルエステルの混合Ｎ −アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体を調製した。これら混合化合物の調製法も確立した。これら新規化合物は、出発原料の抗生物質と同様のすぐれた抗真菌性活性を有し、酸と水に可溶な塩類を生成し、かつ著しく低毒性であることが判明した。従来技術のポリエンマクロライドのＮ−アルキル誘導体はすべて、かなりの欠点である高毒性を示すので、これらの性質は予期しないことである。本発明により含まれる化合物はこの欠点がない。現在まで、ポリエンマクロライド抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ −グリコシル誘導体およびその調製法は知られていなかった。驚くべきことに、該化合物は、出発原料の抗生物質と同様の高抗真菌性活性を保持し、酸と水に可溶な塩を生成し、かつ驚異的に低毒性である。これら化合物は、従来技術のＮ− アルキル誘導体と同様の毒性を示さない。高毒性は以前に公知であったすべてのポリエンマクロライドＮ−アルキル誘導体の基本的な欠点をなすが、本発明により含まれる化合物はこの欠点がない。本発明の第１の態様は、一般式１（ａ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは抗生物質と単糖類またはオリゴ糖との反応によって生成する糖残基の一部分を表わし、そして同一かまたは異なることができるＲ¹ およびＲ²はそれぞれＣ_1-4アルキル基を表わす）のポリエンマクロライド群抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体を提供する。好ましくは、ポリエンマクロライド群抗生物質の残基ＭはアンホテリシンＢ、カンジジン、カンジドイン、カンジジニン、マイコヘプチン、ナイスタチン、ポリフンギン、オーレオファシン、バシジン、トリコマイシンまたはカンジシジンから選ばれる。糖残基Ｒが誘導される単糖類またはオリゴ糖はＤ−グルコース、またはＬ−グルコース、またはＤ−マンノース、またはＤ−ガラクトース、またはラクトース、またはマルトースから選ぶのが好ましい。ポリエンマクロライドを適当な糖と反応させると、同時にアマドリ転位が起って本発明の化合物に対するＮ−グリコシル前駆物質を生成する。本発明の好ましい態様は、一般式１（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは抗生物質と、単糖類またはオリゴ糖、好ましくはＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応、および同時のアマドリ転位によって生成する糖残基の一部分を表わす）によって示されるポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体を含む。好ましい形態の本発明は、ポリエンマクロライド群抗生物質がアンホテリシンＢ、またはカンジジン、またはカンジドイン、またはカンジジニン、またはマイコヘプチン、またはナイスタチン、またはポリフンギン、またはオーレオファシン、またはバシジン、またはトリコマイシン、またはカンジシジンである誘導体に関する。本発明の第２の態様は、一般式２（ａ）（式中、Ｍ，Ｒ，Ｒ¹およびＲ²は前記本発明の第１の態様に示した通りであり、Ａは有機または無機酸のアニオンを表わす）のポリエンマクロライド群抗生物質のＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類を提供する。該塩は生理学的に許容できる塩であることが好ましく、またＡがＬ−アスパラギン酸のアニオンである化合物がとくに好ましい。Ｒ¹およびＲ²がメチル基である塩がとりわけ好ましい。本発明の第２の態様の好ましい実施態様は、一般式２（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは抗生物質と、単糖類またはオリゴ糖、好ましくＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応および同時のアマドリ転位によって生成する糖残基の一部分を表わし、かつＡは有機または無機酸のアニオンを表わす）によって示されるポリエンマクロライド群抗生物質のＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類を含む。好ましい形態の本発明は、ポリエンマクロライド群抗生物質がアンホテリシンＢ、またはカンジジン、またはカンジドイン、またはカンジジニン、またはマイコヘプチン、またはナイスタチン、またはポリフンギン、またはオーレオファシン、またはバシジン、またはトリコマイシン、またはカンジシジンである塩に関し、また好ましくＡがＬ−アスパラギン酸のアニオンに関する。本発明の第３の態様は、式１（ａ）（式中、Ｍ，Ｒ，Ｒ¹およびＲ²は本発明の第１および第２の態様でさきに述べた通りである）の化合物の調製法において、ポリエンマクロライド抗生物質を単糖類またはオリゴ糖と反応させ、該反応は同時にアマドリ転位を生起して、ポリエンマクロライド抗生物質のＮ−グリシジル誘導体を生成することを特徴とし、該アマドリ転位の生成物を単離し、該生成物をアルキル化剤で処理し、さらに該組成物を精製する工程を含む方法を含む。本発明の第３の態様の１つの実施態様では、アマドリ転位の生成物を、該転位が生起する溶液から沈澱させて、懸濁物として単離させる。アマドリ転位を維持させるにはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような有機溶剤が好ましい。アマドリ転位の生成物を沈澱させて懸濁液を生成させるにはジエチルエーテルのような有機溶剤が適切である。本発明の第３の態様の第２の実施態様では、アマドリ転位の生成物のアルキル化を低温で行う。−５℃ないし＋５℃の温度が好ましい。ジアゾアルカンのようなアルキル化剤を使用することができる。ジアゾメタンのエーテル溶液が好ましいアルキル化剤である。溶剤を除去し、ジエチルエーテルで沈澱させるとＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル粗製物を単離することができる。精製産物は、公知の精製工程を用いて単離することができる。本発明の第３の態様の好ましい実施態様は、一般式１（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは抗生物質と、単糖類またはオリゴ糖、好ましくはＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応、および同時のアマドリ転位によって生成する糖残基の一部分を表わす）によって示されるポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ− メチル−Ｎ−グリコシル誘導体の調製法において、アマドリ転位によって得られるポリエンマクロライド群抗生物質のＮ−グリコシル誘導体を、有機溶剤、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の該誘導体の溶液から溶剤、好ましくはジエチルエーテルで沈澱させて懸濁液に変え、次いで低温、好ましくは−５℃ないし＋５℃の範囲でジアゾメタンのエーテル溶液で処理し、撹拌し、溶剤の蒸発および濃溶液、好ましくは過剰のジエチルエーテルによる沈澱によって単離し、さらに粗製物を公知の方法で精製する方法を含む。本発明の第４の態様は、一般式２（ａ）（式中、Ｍ，Ｒ，Ｒ¹およびＲ²は本発明の第１、第２、および第３の態様についてさきに述べた通りである）のポリエンマクロライド抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類調製法において、本発明の第３の態様によって調製したＮ−アルキル −Ｎ−グリコシル誘導体を均質懸濁液を生成させるのに十分な水に懸濁させ、得られた懸濁液を酸性化して、生成物を単離させる工程を含む方法を提供する。ポリエンマクロライド抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類の調製がとくに好ましい。懸濁液を酸性化するのに有機または無機酸を使用することができる。Ｌ−アスパラギン酸が好ましい。精製産物の単離は、有機溶液による粗製物の沈澱に続く補足的な適当な溶剤による洗浄および乾燥によって行うことができる。粗製物を沈澱させるのに用いる溶剤は水と混和できるものが好ましく、アセトンが好ましい。生成物を洗うのに用いる典型的な溶剤にはアセトンおよびジエチルエーテルがある。生成物は減圧で乾燥するのが好ましい。本発明の第４の態様の好ましい実施態様は、一般式２（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは抗生物質と、単糖類またはオリゴ糖、好ましくはＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応および同時のアマドリ転位によって生成する糖残基の一部分を表わす）によって示されるポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類の調製法において、アマドリ転位によって得られるポリエンマクロライド群抗生物質のＮ−グリコシル誘導体を、有機溶剤、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の該誘導体の溶液から、溶剤、好ましくはジエチルエーテルで沈澱させて懸濁液に変え、次いで低温、好ましくは− ５℃ないし＋５℃の範囲で、ジアゾメタンのエーテル溶液で処理し、撹拌し、さらに溶剤の蒸発および濃溶液、好ましくは過剰のジエチルエーテルによる沈澱により単離させ、さらに公知の方法により粗製物を精製し、次に固形物として得た誘導体を少量の水に懸濁させ、理論量の有機または無機酸を加え、次いで生成した溶液から水と混和する過剰の有機溶剤、好ましくはアセトンで生成物を沈澱させ、さらに固形物を、好ましくはアセトンで洗った後、好ましくはジエチルエーテルで洗い、好ましくは減圧で乾燥する方法を含む。本発明の第５の態様は、治療に使用する式１（ａ）のＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類を含む。本発明の第６の態様は、ヒトおよび動物の真菌感染症の処置法において、式１（ａ）のＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類を本明細書でさきに述べたようにヒトおよび動物への投与を含む方法を提供する。式１（ｂ）のＮ −メチル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類がとくに興味がある。本発明の第６の態様の第１の好ましい実施態様は、ヒトおよび動物の外因性および内因性真菌感染症の処置法において、一般式１（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは抗生物質と単糖類またはオリゴ糖、好ましくはＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応、および同時のアマドリ転位によって生成する糖残基の一部分を表わす）によって示されるポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル −Ｎ− グリコシル誘導体を用いて該感染症を処置する方法を含む。本発明の第６の態様の第２の好ましい実施態様は、ヒトおよび動物の外因性および内因性真菌感染症の処置法において、一般式２（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは抗生物質と、単糖類またはオリゴ糖、好ましくはＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応、および同時のアマドリ転位によって生成する糖残基の一部分を表わし、Ａは有機または無機酸のアニオンを表わす）によって示されるポリエンマクロライド抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類を使用して該感染症を処置する方法を含む。本発明の第７の態様は、さきに本明細書でさきに述べたように真菌感染症を処置するのに使用するための式１（ａ）のＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類を提供する。式１（ｂ）のＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類がとくに興味がある。処置が講じられる感染症は内因性であっても外因性であってもよい。投与の方式は感染症の性質による。したがって、本発明の化合物は静脈内、腹腔内、経口、局所、皮下、直腸または膣投与用に処方することができる。本発明の第８の態様は、真菌感染症の処置に使用するための式１（ａ）のＮ− アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩、および生理学的に許容できるキャリヤーを含む組成物を提供する。Ｎ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体およびキャリヤーの性質は投与方式による。該組成物は、場合により、必要に応じて他の公知の抗真菌剤とともに、本発明による１種以上の化合物から処方することができる。式１（ｂ）のＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類を含有する組成物がとくに興味がある。本発明の第９の態様は、医薬用または獣医学用に処方される１種以上の式１（ａ）のＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類および生理学的に許容できるキャリヤーを含む単位用量形態を提供する。単位用量形態は、場合により他の公知の抗真菌剤とともに本発明による１種以上の化合物から処方することができる。本発明の前記態様の類推から式１（ｂ）のＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体を含有する単位用量形態がとくに興味がある。前述のように、単位用量形態の性質は投与方式による。典型的には、錠剤やカプセルは経口投与に適し、クリームやパッチは局所投与に適し、またペッサリーは直腸や膣投与に適する。本発明の第１０の態様は、真菌感染症の処置に用いるための薬剤調製への式１（ａ）のＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類の使用を提供する。Ｎ−アルキルおよびアルキルエステル置換基が共にメチル基である化合物がとくに興味がある。本発明の化合物について分光法を用いて行った構造決定は出発原料の抗生物質の安全性が反応中保持されることを示す。ポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体の本発明による調製法は、出発原料の抗生物質の構造を変えることなく所望の生成物をもたらす。得られた化合物の構造は分光法を用いて確認された。式３のＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの構造決定によって実証される。Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの電子スペクトルは、アンホテリシンＢを意味する出発原料の抗生物質の電子スペクトルと同一であって、本発明による方法が、ポリエン発色団の分解をもたらさず、大きい吸光値（Ｅ^1% _1cm＝１３００（３８２ｎｍにおいて））は得られた生成物の高純度を確証することを示す。Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの赤外吸収スペクトルは、１７３０ｃｍ^-1におけるエステルカルボニル基の伸縮振動に関連するバンドおよび遊離カルボキシル基のバンドの欠除を示し、これはカルボキシル基がメチルエステル基に完全に変ったことを意味する。Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの構造に関する完全な情報は¹Ｈ（ＤＱＦ−ＣＯＳＹ、ＲＯＥＳＹ）、¹³Ｃ（ＤＥＰＴ）の核磁気共鳴スペクトル（ＮＭＲ）および化合物の式３への帰属を可能にしたヘテロ相関スペクトル（Varian ３００ＭＨＺスペクトロメーター）によってもたらされた。もっとも重要な¹Ｈおよび¹³Ｃの情報をそれぞれが表１および２に示す。アンホテリシンＢのアグリコンのＮＭＲデータは文献値（P．Sowinski、J．Pawlak、 E．Borowski、P．Gariboldiの Magn．Reson．Chem．30，275（1992））に完全に一致する。Ｎ−ＣＨ₃（δ＝２．３５ｐｐｍ）およびＨ−１”（２．３０および３.１５ｐｐｍ）の¹Ｈ化学シフト（ＤＭＳＯ／ＭｅＯＤ溶剤系中）はアミノ置換基の効果の特徴である。酸性化後、アミノ基のプロトン化によって(Ｈ−３'のδ が３.１９ｐｐｍに変る）、δはＮ−ＣＨ₃の２.９２ｐｐｍおよびＨ−１”の３. ６４に変る。これらのデータはプロトンＮＣＨ₃／Ｈ３'、ＮＣＨ₃／Ｈ２'、ＮＣＨ₃／Ｈ１”ｂおよび１″ａ／Ｈ３'間のＲＯＥ効果によっても支持される。結合定数およびＲＯＥは、以前に遊離アンホテリシンＢに認められたように、マイコサミン部分の⁴Ｃ₁立体配座を示す。表１はＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの二糖類フラグメントの化学シフト¹ＨおよびＲＯＥ効果を示す。表２は、Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの二糖類フラグメントの¹³Ｃ−ＮＭＲ化学シフトとＤ−フルクトースのデータとの比較を示す。表２からのフルクトシルフラグメントの¹³Ｃ−ＮＭＲデータをＤ−フルクトースの文献値と比較すると、糖置換基がピラノシド形であることがわかる。表３に示すカップリング定数の観察値は式４によって表わされるフルクトピラノシド環の舟形立体配座を立証する。該環のこのコンホメーションだけが測定したカップリング定数と完全に一致する。表３はＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの二糖類フラグメントのプロトンのカップリング定数Ｊ_H,Hを示し（ピリジン−ｄ₅ ：メタノール−ｄ₄９：１）、密に結合したＨ３”−Ｈ６”スピン系のカップリング定数および化学シフトはコンピュータのシミュレーションによって反復改善した。示された結果は式４によって表わされるＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルのフルクトシルフラグメントの立体配座を立証する。他の、ポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ− グリコシル誘導体は前記と同様の方法によって特徴づけた。これから、下記の非限定例を参照しながら本発明を述べる。本発明の範囲に入るさらに他の態様は当業者には明らかとなろう。抗真菌活性調製したすべての化合物について、生体外で抗真菌活性さらにまた毒性も測定した。Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルアスパラテートを指していう最良の性質を有する化合物の場合には、生体内の活性および毒性をも測定した。生体外の抗真菌活性ポリエンマクロライド処置の標準法に従って化合物の抗真菌活性を測定した。液状Sabouraud培地に１０⁴細胞/ｍｌの試験生物 Candida albicans ATCC 262778 を接種して供試抗生物質（無菌希釈液）とともに３０℃で２４時間培養した。対照としてアンホテリシンＢを使用した。化合物はＤＭＦに溶解し、溶液の適当な量を培地に加えた。成育阻止の程度を測定するのに濁度測定法（６６０ｎｍ）を適用した。真菌の成育を５０％阻止した抗生物質の濃度を投与量反応曲線から求めた。得られたＩＣ₅₀値は化合物の抗真菌活性を特徴づけた。生体外（ｉｎｖｉｔｒｏ）毒性動物細胞に対する生体外の化合物の毒性を、ヒトの赤血球の溶血度の測定により、ポリエンマクロライド処置の標準法を用いて測定した。新鮮なクエン酸添加のヒトの血液から単離したヒトの赤血球を冷塩水で２回洗った。細胞を塩水で２５０倍に希釈して、３７℃で３０分間平衡させた。赤血球試料を種々の濃度の抗生物質（ＤＭＦ中のベース溶液）とともに３７℃で３０分培養した。遠心分離後、溶液に遊離したヘモグロビンを測定することによって赤血球のリーシスを評価した。上澄液の光学濃度を５５０ｎｍで測定した。結果は、５０％の溶血が起る抗生物質の濃度としてＥＨ₅₀で表わした。ＥＨ₅₀の値は溶血度を抗生物質の投与量と関係づける曲線から読み取った。生体内（ｉｎｖｉｖｏ）毒性生体内毒性は、Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルＬ−アスパラテートについて、最大耐用量(ＭＴＤ)および急性毒性（ＬＤ₅₀ ）として求めた。ＭＴＤ用量を求めるために、化合物をグルコースの５％溶液に溶解し、Ｂａｌｂ／ｃマウスに単一および多重用量で静脈内および腹腔内に投与した。単一最大耐用量は静脈内投与の場合には１００ｍｇ／ｋｇ、腹腔内投与の場合には２００ｍｇ／ｋｇ以上であった。５日間で１００ｍｇ／ｋｇという腹腔内投与の多重最大耐用量は極めて多かった。このような用量の場合には、観察２０日間には毒性効果は認められなかった。Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルＬ−アスパラテートの急性毒性ＬＤ₅₀は平均重量が２０ｇのSwiss Websterのメスのマウスについて試験した。種々の用量の供試化合物および比較のため５％グルコースに溶解したファンギゾンの形のアンホテリシンＢをマウスの静脈内に投与した。溶液の投与量は０.５ｍlであった。対照として５％グルコース溶液の０.５ｍlをマウスに投与した。両方の配合物の各用量を５匹のマウスに投与した。マウスは７日間観察した。次に、マウスを殺して、若干の血清指数を求めた。対照と比較して、アスパラテートアミノトランスフェラーゼまたはクレアチニンのレベルが増大しないことが判明した。Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルＬ−アスパラテートの場合にはＬＤ₅₀が４００ｍｇ／ｋｇであることが認められ、一方ファンギゾン形のアンホテリシンＢの場合にはＬＤ₅₀が６ｍｇ／ｋｇであった。化学療法効果マウスの全身性カンジタ症モデルを用いてＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルＬ−アスパラテートの化学療法効果を調べた。 Candida albicans をSabouraudデキストロースブロス中で室温下で一夜間生育させた。真菌細胞を遠心分離し、０．９％塩化ナトリウム溶液で２回洗って、生理的食塩水中に懸濁させた。体重２５ｇのメスのSwiss Websterマウスに、０．９％塩化ナトリウム溶液０．２ｍl中の１０⁵個のCandida の細胞を静脈内に注射した。当初、感染症は全身的であったが、２ないし３日までには腎臓に局限された。無処置のマウスは通常感染後７日から１４日の間に死亡した。感染後３日間は２回、続けて５日間は５ないし６時間間隔でマウスの静脈内に処置した。配合物は５％グルコース溶液として投与した。マウスは感染の日から始めて５週間観察した。この時が過ぎると生存したマウスを殺して、腎臓を取り出し、滅菌水で均質にしてホモジネートをSabouraudデキトスロース寒天の上に置いて、Candidaの生育するコロニーを数えた。化学療法の有効性は、前記のテストで５０％のマウスの生存をもたらした投与量ｍｇ／ｋｇとして、また半分のマウスの腎臓からの Candidaのクリアランスに基づいて表わした。ＥＤ₅₀と呼ぶ投与量はJ.Hyg.27,49 3、(193 8)に示された方法を用いて算出した。Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルＬ−アスパラテートのＥＤ₅₀値は生存に基づくと２．３ｍｇ／ｋｇ、腎臓のクリアランスに基づくと６ｍｇ／ｋｇである。調製例ポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体、その塩類、および調製法を下記実施例によって説明する。実施例Ｉ１ｇのアンホテリシンＢ（Ｅ^1% _1cm＝１３５０（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨにおいて））を１５ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、０．３ｇのＤ−グルコースを加え、混合物を暗所内で、３７℃で４０時間撹拌した。次に、反応物を冷却し、過剰のジエチルエーテルで固形物を沈澱させた。固形物を遠心分離し、ジエチルエーテルで２回洗い、減圧乾燥した。過剰のグルコースを除くために固形物を２０ｍｌの水に懸濁させ、遠心分離し、少量の水で２回、アセトンで２回、さらにジエチルエーテルで２回洗った。生成物を減圧乾燥して０．９８ｇのＮ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢ（Ｅ^1% _1cm＝１２００（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨにおいて））を得た。この生成物を撹拌しながら１０ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、この溶液に５０ｍｌのジエチルエーテルを加えて、微細懸濁液を得た。懸濁液を氷中で０−２℃に冷却し、烈しく撹拌しながら、Ｎ −Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢ１モル当り新たに調製したジアゾメタンのジエチルエーテル溶液２．５モルを加えた。反応に続いてクロロホルム−メタノール−水１０：６：１（容量／容量）溶剤系でシリカゲルを用いる薄層クロマトグラフィーを行った。約２時間を要した反応完了後、過剰のジアゾメタンおよびジエチルエーテルを４０℃以下の温度で減圧下で蒸発させた。過剰のジエチルエーテルを用いて残留物から粗製物を沈澱させ、遠心分離し、ジエチルエーテルで２回、さらにｎ−ヘキサンで洗い、減圧乾燥して、０．９５ｇの粗製物を得た。クロロホルム−メタノール−水２０：８：１（容量／容量）溶剤系で７０−２３０メッシュのMerk Silicagel ６０を用いてカラムクロマトグラフィーで粗製物から純粋なＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルを単離した。たとえば、０．９５ｇの粗製物を前記の溶剤混合物中に懸濁させ、もしも生成物が難溶であれば、前記溶剤の比率を１０：６：１に変えた。未溶解部分を遠心分離し、上澄液をクロマトグラフィーのカラムに入れ、次いで前記溶剤混合物（ただし、比率は２０：８：１（容量／容量））中で展開させた。クロロホルム−メタノール−水１０：６：１（容量／容量）溶剤系を用いシリカプレート上で溶離液を分析した。硫酸セリウム試薬でプレートを可視化させた。純粋のアンホテリシンＢメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシル誘導体を含むＲf＝０．５−０．５４の画分を集めた。集めた画分を減圧下で蒸発させた。乾燥残留物を少量のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、生成物を過剰のジエチルエーテルで沈澱させ、固形物を遠心分離し、ジエチルエーテルで２回洗って、真空デシケータで乾燥した。０．１３７ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステル（Ｅ^1% _1cm＝１３００（３８２ｎｍ、メタノール中において））が得られた。構造の証明は前記説明部分に示した。前記のように試験したCandida albicansに対するこの化合物の抗真菌活性はＩＣ₅₀＝０．１２μ ｇ／ｍｌを示し、前記のように測定したヒトの赤血球に対する毒性は３５０μｇ／ｍｌよりも大きいＥＨ₅₀を示した。比較すると、出発原料のアンホテリシンＢのＥＨ₅₀値は１．５μｇ／ｍｌであった。３５０μｇ／ｍｌを上回るとこの化合物はこの実験条件では不溶であるので、Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルのＥＨ₅₀の正確な値は求めることができなかった。実施例ＩＩ０．５ｇのカンジジン(Ｅ^1% _1cm＝１１７５(３８２ｎｍ、ＭｅＯＨにおいて)) および０．１５ｇのＤ−グルコースを１０ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解して、３７℃で３６時間撹拌した。以降の手順は実施例Ｉと同様であって、０．４３ｇのＮ−Ｄ−フルクトシルカンジジン（Ｅ^1% _1cm＝１１００（３８２ｎｍ）ＭｅＯＨ中において））が得られた。実施例Ｉと同様にこの生成物をジアゾメタンのジエチルエーテル溶液でメチル化して、０．４ｇの粗製物を得た。実施例Ｉに示したと同様の方法により、カラムクロマトグラフィーによって純粋なＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルカンジジンメチルエステルを単離した。純粋な誘導体を含む画分を薄層クロマトグラフィーにかけてＲf＝０.４９−０.５２と確認した。画分を集め、蒸発乾固し、少量のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、ジエチルエーテルで固形物を沈澱させた。固形物を遠心分離し、ジエチルエーテルで洗い、真空デシケータで乾燥して、０.０５ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルカンジジンメチルエステル（Ｅ^1% _1cm＝１２００（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨ中において）、ＩＣ₅₀＝０．７５μｇ／ｍｌおよび３００μｇ／ｍｌを上回るＥＨ₅₀）を得た。この化合物の構造は、Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの場合と同じ方法によって決定された。実施例ＩＩＩ２ｇのナイスタチン(Ｅ^1% _1cm＝８７０(３０４ｎｍ、ＭｅＯＨ中において))および０．６ｇのＤ−グルコースを３５ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドに溶解して、３７℃で４０時間撹拌した。反応完了後、粗製物をジエチルエーテルで沈澱させ、遠心分離して、真空乾燥した。次に過剰のグルコースを少量の水−アセトン１：１混合物、ついでアセトン、ジエチルエーテルで洗い去り、生成物を遠心分離し、真空デシケータで乾燥して、１．２ｇのＮ−Ｄ−フルクトシルナイスタチン（Ｅ^1% _1cm＝７２０（３０４ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））を得た。実施例Ｉと同様にジアゾメタンを用いてこの生成物をメチル化して、１．２５ｇの粗製物を得た。この生成物を実施例Ｉと同様にシリカゲルカラムで精製した。純粋なＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルナイスタチンメチルエステルを含有する画分を実施例Ｉのように薄層クロマトグラフィーにかけてＲf＝０．４９−０.５２と確認した。該画分を集め、減圧下３０℃で蒸発乾固し、少量のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、生成物をジエチルエーテルで沈澱させた。生成物を遠心分離し、ジエチルエーテルで洗い、真空デシケータで乾燥して、０.１７ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルナイスタチンメチルエステル（Ｅ^1% _1cm＝９００（３０４ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））を得た。この化合物の構造はＮ− メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの場合に述べた方法によって決定された。得られた化合物の場合、ＩＣ₅₀＝６．８μｇ／ｍｌおよび３００μｇ／ｍｌを上回るＥＨ₅₀が認められた。実施例ＩＶ１５ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の０．７９ｇのバシジン（抗生物質複合オーレオファシンの主成分）（Ｅ^1% _1cm＝９００（３７８ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））および０．２２ｇのＤ−グルコースを３７℃で１８時間撹拌した。反応完了後、混合物を冷却し、過剰のジエチルエーテルで固形物を沈澱させた。固形物を遠心分離し、ジエチルエーテルで洗い、減圧乾燥して、０．８ｇの粗製Ｎ−Ｄ−フルクトシルバシジン（Ｅ^1% _1cm＝７２０（３７８ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））を得た。実施例Ｉと同様にジアゾメタンを用いて得られた誘導体をメチル化して、０．５ｇの粗製物を得た。実施例Ｉに述べたと同様に、シリカゲルカラムのクロマトグラフィーによって純粋なＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルバシジンメチルエステルを単離した。ただしカラムはクロロホルム−メタノール −水３０：８：１溶剤系で展開した。純粋なバシジン誘導体を含有し、かつ薄層クロマトグラフィーにかけてクロロホルム−メタノール−水１３：８：１溶剤系でＲf＝０．５３−０．５５値を有する画分を集めて一緒にした。以後の手順は実施例ＩＩＩと同様であった。０．０７ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルバシジンメチルエステル（Ｅ^1% _1cm＝９００（３７８ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））が得られた。この化合物はＩＣ₅₀＝０.０１μｇ／ｍｌおよびＥＨ₅₀＝１７０μｇ／ｍｌを示した。この化合物の構造はＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルについて述べた方法によって決定された。実施例Ｖ０．７９ｇのカンジシジンＤ（抗生物質複合カンジシジンの主成分）を実施例ＩＶに述べたと同様に処理した。０．１ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルカンジシジンＤメチルエステルが得られた（Ｅ^1% _1cm＝９２０（３７８ｎｍ、ＭｅＯＨ中において）、実施例ＩＶに記載した条件下の薄層クロマトグラフィーによる該化合物のＲfは０．５０−０．５３であった）。この化合物はＩＣ₅₀＝０．０１μｇ／ｍｌおよびＥＨ₅₀＝１８０μｇ／ｍｌを示した。該化合物の構造はＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルについて述べた方法によって決定された。実施例ＶＩ０．７９ｇの抗生物質複合トリコマイシン主成分を実施例ＩＶに述べたと同様に処理した。０．１ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルトリコマイシンメチルエステルが得られた（Ｅ^1% _1cm＝９１０（３７８ｎｍ、ＭｅＯＨ中において）、実施例ＩＶに記載した条件下の薄層クロマトグラフィーによる該化合物のＲfは０．４９−０．５２であった）。該化合物はＩＣ₅₀＝０．０１３μｇ／ｍｌおよびＥＨ₅₀＝１６５μｇ／ｍｌを示した。該化合物の構造はＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルについて記載した方法によって決定された。実施例ＶＩＩ８ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の０．５ｇのアンホテリシンＢ（Ｅ^1% _1cm ＝１３５０（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））および０．１５ｇのＬ −グルコースを３７℃で４０時間撹拌した。以後の操作は実施例Ｉと同様であった。０．０６５ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｌ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルが得られた（Ｅ^1% _1cm＝１２８０（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））。該化合物はＩＣ₅₀＝０．４２μｇ／ｍｌおよび２００μｇ／ｍｌを上回るＥＨ₅₀を示した。該化合物の構造はＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルについて記載した方法により決定された。実施例ＶＩＩＩ０．５２ｇのアンホテリシンＢ（Ｅ^1% _1cm＝１３５０（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））および０．１５３ｇのＤ−マンノースを１０ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解して、３７℃で４０時間撹拌した。以後の操作は実施例Ｉと同様であった。実施例Ｉの場合と同様に、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより純粋な誘導体を単離し、実施例Ｉに記載した方法により、薄層クロマトグラフィーにおいて、Ｒf値が０．５３−０．５５の画分を集めた。以後の操作は実施例Ｉの場合と同様であった。０．０８ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステル（Ｅ^1% _1cm＝１２８０（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））が得られた。該化合物はＩＣ₅₀＝０．４２μｇ／ｍｌおよび２００μｇ／ｍｌを上回るＥＨ₅₀を示した。該化合物の構造はＮ−メチル−Ｎ −Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルについて述べた方法によって決定された。実施例ＩＸ１２ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の０．５ｇのアンホテリシンＢ（Ｅ^1% _1cm＝１３５０（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））および０．３ｇのＤ −ラクトースを３７℃で２日間撹拌した。以後の操作は実施例Ｉと同様であった。実施例Ｉと同様に、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによる純粋な誘導体を単離し、実施例Ｉに記載した方法により、薄層クロマトグラフィーにおいてＲ f値が０．２５−０．３０の画分を集めた。０．０８ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ− フルクトシルガラクトシルアンホテリシンＢメチルエステル（Ｅ^1% _1cm＝１０００（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））が得られた。該化合物はＩＣ₅₀＝６．０μｇ／ｍｌおよび２００μｇ／ｍｌを上回るＥＨ₅₀を示した。実施例Ｘ実施例Ｉにより調製した０．５ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルを１０ｍｌの水に懸濁させ、２ｍｌの水に溶解した０．０５９ｇのアスパラギン酸を添加した。撹拌しながら酸溶液を１滴ずつ加えて、溶液とした。溶液を濾過して、少量の残留固形物を除き、この透明な濾液に、塩がすべて沈澱するまで過剰のアセトンを加えた。固形物を濾別または遠心分離し、アセトンで２回、ジエチルエーテルで２回洗い、減圧乾燥して、０．５ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルＬ−アスパラテート（Ｅ^1% _1cm＝１１００（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））が得られた。実施例Ｉのような条件による薄層クロマトグラフィーでＲf＝０.５−０.５４が得られた。生成物はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、およびグルコースの５％水溶液に可溶であった。生成物は水に極めてよく溶解した。該化合物はＩＣ₅₀＝０.１２５μｇ／ｍｌおよび３５０μｇ／ｍｌを上回るＥＨ₅₀を示した。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION Antibiotics The present invention relates to a compound of the general formula 1 (a) wherein M is a polyene macrolide antibiotic residue. R represents the variable part of the sugar residue and can be the same or different R¹And R^TwoIs C_1-4A polyene macrolide) N-alkyl-N-glycosyl derivatives of alkyl esters of group antifungal antibiotics , General formula 2 (a) (where M, R, R¹And R^TwoIs the same as above, and A is inorganic or Salts of compound 1 (a) represented by the general formula: The preparation of the compounds of 1 (a) and 2 (a) and their use in medicine You. Compounds of particular interest are those of the general formula 1 (b) (where M is a polyene macrolide R represents an antibiotic residue, and R represents a variable portion of a sugar residue). N-methyl-N-glycosyl derivatives of methyl esters of group C antifungal antibiotics And general formula 2 (b) (wherein M represents a polyene macrolide antibiotic residue; R represents a variable part of a sugar residue, and A represents an anion of an inorganic or organic acid) , Including its salts, and its preparation and use as a medicament. Polyene macrolides in which amino groups of starting antibiotics are substituted with alkyl groups N-alkyl derivatives of group antibiotics are known. N of polyene macrolide which substitutes amino group of starting antibiotic for sugar residue Glycosyl derivatives are also known (L. Falkowski, J. Golik, P. Kolodziejczyk, J.P. awlak, J. Zielinski, T. Ziminski, E. Borowski, J. Antibiotics 28, 244 (197 5); L.Falkowski, J.Pawlak, J.Golik, P.Kolodziejczyk, B.Stefanska, E.Byl ec, E. Borowski's Acta Polon. Pharm. 37, 517 (1980)). For the preparation of these derivatives Examples of sugars used include D-glucose, D-mannose, L-rhamnose, D -Ribose, and maltose. React polyene macrolide with appropriate sugar At the same time, the Amadori rearrangement occurs to form the corresponding N-glycosyl derivative. You. The compound exhibits the same biological activity as the starting antibiotic, and forms a water-soluble salt. I will. However, the associated high toxicity presents significant disadvantages. L. Falkowski, J .; Golik, P.S. Kolodziejczyk, J.M. Pawlak, J .; Zielinski, T .; Ziminski, E .; Borowski J. Antibiotics 28, 244 (1975); Falkowski, J .; Pawlak, J .; Golik, P.S. Kolodziejczyk, B.S. Stefanska, E.A. Bylec, E.C. Borowski Acta Polon. Pharm. 37, 517 (1980) To D-glucose, D-mannose, L-rhamnose, D-ribose, maltaux N-glycosyl derivatives of polyene macrolides substituted with sugar residues such as Is knowledge. The compound is obtained by reacting and simultaneously reacting a polyene macrolide with the saccharide. Prepared by the Amadori rearrangement of The compound is similar to the starting antibiotic. Shows physical activity and produces water-soluble salts. However, the compounds exhibit significant toxicity. The amino group of the starting antibiotic is completely methylated to form a quaternary ammonium salt. Trimethylammonium derivative of polyene macrolide methyl ester (L. Falkowski, B. Stefanska, J. Zielinski, E. Bylec, J. Gol ik, p. Kolodziejczyk, E.P. J. Borowski Antibiotics 32, 1080 (1979)). The compound is prepared by complete methylation of the starting antibiotic with dimethyl sulfate. Made. Advantageous properties of the derivative include solubility in water, similar to the starting antibiotic Has antifungal activity. Another class of derivatives is described in L.W. Falkowski, B.S. Stefanska, J.S. Zielinski, E.A. Bylec J. Golik, P.S. Kolodziejczyk, E.A. J. Antibiotics 32 1080 (1 979) trimethylammonium of polyene macrolide methyl ester The amino group of the methyl ester of the antibiotic is completely To a quaternary ammonium salt. The compound is a starting material Prepared by complete methylation of antibiotics with dimethyl sulfate. The derivative is water Soluble in water and characterized by antifungal activity similar to that of the starting antibiotic, but extremely Very toxic and unstable. Other types of N-alkyl derivatives include antibiotics and N-ethylmaleimide, , N'-Hexamethylenedimaleimide, N- (3-dimethylaminopropyl) male N-s produced by a Michael addition reaction with an N-substituted maleimide such as imide There are succinimidyl derivatives, which are described in US Pat. Czerwinski, W.C. A. Konig, T .; Zie niawa, p. Sowinski, V.S. Sinnwell, S.M. Milewski, E. Borowski's dissertation J. Antibio tics 44 979 (1991). The compound is more toxic than the starting antibiotic Less, but with reduced antifungal activity. Finally, the last known group of N-alkyl derivatives of polyene macrolides is Raw material, acetylacetone, ethylacetylacetate, dimethylacetal Or N-enamine and amine formed by reaction with dimethylformamide Gin derivatives; Stefanska, J.S. Zielinski, E.A. Borowski, L . Falkowski's paper Acta Polonica Phann. 45, 71 (1988). The invitation The conductor has the same antifungal activity as the starting antibiotic and excellent access to organic solvents Despite its solubility, the compound is still highly toxic and extremely unstable is there. The present inventors have now found that the mixture N of alkyl esters of polyene macrolide antibiotics -Alkyl-N-glycosyl derivatives were prepared. Methods for preparing these mixed compounds are also confirmed. Erect. These new compounds have excellent antifungal activity similar to the starting antibiotics , Producing salts soluble in acids and water, and was found to be extremely low-toxic. Was. All N-alkyl derivatives of the prior art polyene macrolides have significant These properties are unexpected, as they exhibit the disadvantage of high toxicity. In the present invention More involved compounds do not have this disadvantage. To date, the N-methyl-N of the methyl ester of polyene macrolide antibiotics -Glycosyl derivatives and their preparation were not known. Surprisingly, The compound retains the same high antifungal activity as the starting antibiotic and is soluble in acids and water. Produces soluble salts and is surprisingly low toxicity. These compounds are known from the prior art N- It does not show the same toxicity as alkyl derivatives. High toxicity was previously known for all Despite the basic disadvantages of polyene macrolide N-alkyl derivatives, the present invention The compounds included do not have this disadvantage. A first aspect of the present invention is directed to a compound represented by the general formula 1 (a) wherein M is a polyene macrolide group R represents the residue of the antibiotic, and R represents the reaction between the antibiotic and the monosaccharide or oligosaccharide. R represents a portion of the sugar residue produced by¹ And R^TwoIs C_1-4(Representing an alkyl group) An N-alkyl-N-glycosyl derivative of an alkyl ester of a raw material is provided. Preferably, residue M of the polyene macrolide antibiotic is amphotericin B, Candidine, candidoin, candidinine, mycoheptin, nystatin, Rifungin, aureofascin, basidin, tricomycin or candicidin Selected from. The monosaccharide or oligosaccharide from which the sugar residue R is derived is D-glucose or L-glucose. Lucose, or D-mannose, or D-galactose, or lactose Or maltose. Polyene macrolide with appropriate sugar Upon reaction, the Amadori rearrangement occurs simultaneously, resulting in N-glycoside to the compound of the present invention. Produces sill precursor. A preferred embodiment of the present invention is a compound represented by the general formula 1 (b): wherein M is a polyene macrolide R represents a residue of a group antibiotic, and R is a monosaccharide or oligosaccharide, preferably Is D-glucose, or L-glucose, or D-mannose, or Is the reaction with D-galactose or lactose or maltose, and And a portion of the sugar residues produced by the simultaneous Amadori rearrangement) N-methyl-N-glycol of methyl ester of polyene macrolide antibiotics Including cosyl derivatives. In a preferred form, the invention provides that the polyene macrolide antibiotic is amphotericin. B, or candidine, or candidoin, or candidinine, or my Coheptin, or nystatin, or polyfungin, or aureofasi Or basidin, or tricomycin, or a derivative that is candicidin About. The second embodiment of the present invention relates to a compound represented by the general formula 2 (a): wherein M, R, R¹And R^TwoIs As shown in the first embodiment of the present invention, A represents an anion of an organic or inorganic acid. N-alkyl-N-glycosyl derivatives of polyene macrolide antibiotics Provides body salts. Preferably, the salt is a physiologically acceptable salt. Compounds in which A is an anion of L-aspartic acid are particularly preferred. R¹And And R^TwoAre particularly preferred. A preferred embodiment of the second aspect of the present invention is a compound of the general formula 2 (b) wherein M is poly R represents the residue of an enmacrolide group antibiotic, and R is a combination of the antibiotic and a monosaccharide or Rigo sugar, preferably D-glucose or L-glucose or D-man North or D-galactose or lactose or maltose Represents a part of the sugar residue generated by the reaction with and the simultaneous Amadori rearrangement, And A represents an anion of an organic or inorganic acid) Includes salts of N-methyl-N-glycosyl derivatives of the loride group antibiotics. In a preferred form, the invention provides that the polyene macrolide antibiotic is amphotericin. B, or candidine, or candidoin, or candidinine, or my Coheptin, or nystatin, or polyfungin, or aureofasi Or basidin, or tricomycin, or a salt that is candicidin. And A preferably relates to the anion of L-aspartic acid. The third aspect of the present invention relates to a method of formula 1 (a) wherein M, R, R¹And R^TwoOf the present invention As described above in the first and second aspects), The polyene macrolide antibiotic is reacted with a monosaccharide or oligosaccharide, and the reaction is the same. Occasionally, Amadori rearrangement occurs, causing the polyene macrolide antibiotic N-glycidyl. Isolating the product of the Amadori rearrangement, wherein the product is a derivative. With an alkylating agent, and further purifying the composition. In one embodiment of the third aspect of the present invention, the product of the Amadori rearrangement is Is precipitated from the solution in which it occurs and isolated as a suspension. Maintain Amadori dislocation For this purpose, an organic solvent such as N, N-dimethylformamide is preferable. Amado To precipitate the rearranged product to form a suspension, such as diethyl ether Organic solvents are suitable. In a second embodiment of the third aspect of the present invention, there is provided an alkylated product of the Amadori rearrangement. The conversion is carried out at a low temperature. Temperatures between -5 ° C and + 5 ° C are preferred. Like diazoalkane Any alkylating agent can be used. Diazomethane in ether is preferred Is an alkylating agent. The solvent is removed and precipitated with diethyl ether to give N-alkyl-N-glycosyl. Crude product can be isolated. Purified products are isolated using known purification steps. Can be A preferred embodiment of the third aspect of the present invention is a compound of the general formula 1 (b) wherein M is poly R represents the residue of an enmacrolide group antibiotic, and R is a combination of the antibiotic and a monosaccharide or Rigo sugar, preferably D-glucose or L-glucose or D-glucose Nonose, or D-galactose, or lactose, or maltose And a part of the sugar residues generated by simultaneous Amadori rearrangement. N) of the methyl ester of a polyene macrolide antibiotic represented by In a process for the preparation of a methyl-N-glycosyl derivative, it is obtained by Amadori rearrangement. N-glycosyl derivatives of polyene macrolide antibiotics, such as organic solvents, Or from a solution of the derivative in N, N-dimethylformamide to a solvent, preferably Precipitate with diethyl ether to a suspension and then cool to low temperature, preferably -5 ° C. Treat with a solution of diazomethane in ether at + 5 ° C, stir and evaporate the solvent And concentrated by precipitation with a solution, preferably excess diethyl ether, Further, a method for purifying a crude product by a known method is included. The fourth embodiment of the present invention relates to a compound represented by the general formula 2 (a): wherein M, R, R¹And R^TwoIs the original The first, second, and third aspects of the present invention are as previously described). -N-alkyl-N-glycosyl induction of alkyl esters of macromacrolide antibiotics In a process for preparing salts of conductors, the N-alkyl prepared according to the third aspect of the invention The N-glycosyl derivative is suspended in sufficient water to form a homogeneous suspension, Acidifying the resulting suspension to isolate the product. Po N-methyl-N-glycosyl induction of methyl esters of lienmacrolide antibiotics The preparation of salts of the conductor is particularly preferred. Organic or inorganic acids can be used to acidify the suspension. L-Ass Partic acid is preferred. Isolation of the purified product can be achieved by precipitation of the crude with organic solution followed by supplemental suitable solvent. Washing and drying. Used to precipitate crude Preferably, the solvent is miscible with water, and acetone is preferred. To wash the product Typical solvents used include acetone and diethyl ether. Product is decompressed It is preferable to dry. A preferred embodiment of the fourth aspect of the present invention is a compound represented by the general formula 2 (b) wherein M is poly R represents the residue of an enmacrolide group antibiotic, and R is a combination of the antibiotic and a monosaccharide or Rigo sugar, preferably D-glucose or L-glucose or D-glucose Nonose, or D-galactose, or lactose, or maltose Represents a part of the sugar residue generated by the reaction with )), The N-methyl methyl ester of a polyene macrolide antibiotic In a method for preparing salts of a tyl-N-glycosyl derivative, the salt is obtained by Amadori rearrangement. An N-glycosyl derivative of a polyene macrolide antibiotic, Solvent, preferably from a solution of the derivative in N, N-dimethylformamide. Or by precipitation with diethyl ether to give a suspension, then cold, preferably- Treat with diazomethane in ether at 5 ° C to + 5 ° C, stir, And evaporation of the solvent and precipitation with a concentrated solution, preferably with excess diethyl ether. And further purified the crude by known methods, then obtained as a solid The derivative is suspended in a small amount of water, a stoichiometric amount of an organic or inorganic acid is added, The product is precipitated from the solution obtained with an excess of an organic solvent miscible with water, preferably acetone. And further washing the solid, preferably with acetone, preferably with diethyl ether Washing with a ter and preferably drying under reduced pressure. A fifth aspect of the present invention relates to N-alkyl-N-glycans of formula 1 (a) for use in therapy. Includes cosyl derivatives or salts thereof. A sixth aspect of the present invention relates to a method for treating a fungal infection in humans and animals, comprising a compound of formula 1 The N-alkyl-N-glycosyl derivative of (a) or a salt thereof is herein referred to as And methods comprising administration to humans and animals as described in US Pat. N in Equation 1 (b) Of particular interest are -methyl-N-glycosyl derivatives or salts thereof. A first preferred embodiment of the sixth aspect of the present invention provides for exogenous human and animal And a method for treating an endogenous fungal infection, wherein general formula 1 (b) (where M is a polyene) R represents the residue of a macrolide antibiotic, and R represents the antibiotic and a monosaccharide or an oligosaccharide. , Preferably D-glucose or L-glucose or D-mannose Or D-galactose or lactose or maltose Reaction, and part of the sugar residues generated by simultaneous Amadori rearrangement) N-methyl of methyl esters of polyene macrolide antibiotics represented by -N- A method of treating said infection with a glycosyl derivative. A second preferred embodiment of the sixth aspect of the present invention provides for exogenous human and animal And a method of treating an endogenous fungal infection, wherein M is a polyene. R represents the residue of a macrolide group antibiotic, and R represents the antibiotic and a monosaccharide or oligosaccharide. Sugar, preferably D-glucose or L-glucose or D-manno Or D-galactose or lactose or maltose And a part of the sugar residues generated by the simultaneous Amadori rearrangement, A represents an anion of an organic or inorganic acid) Salts of N-methyl-N-glycosyl derivatives of methyl esters of steroid antibiotics And methods of treating said infection. A seventh aspect of the present invention is a method for treating a fungal infection as previously described herein. N-alkyl-N-glycosyl derivatives of formula 1 (a) for use in Or its salts. An N-methyl-N-glycosyl derivative of the formula 1 (b) or Is particularly interested in its salts. The infection to be treated may be endogenous or exogenous. Administration The formula depends on the nature of the infection. Thus, the compounds of the present invention can be administered intravenously, intraperitoneally, orally. It can be formulated for topical, subcutaneous, rectal or vaginal administration. An eighth aspect of the present invention is directed to an N-formula of formula 1 (a) for use in treating a fungal infection. Alkyl-N-glycosyl derivatives or salts thereof, and physiologically acceptable A composition comprising the carrier is provided. N-alkyl-N-glycosyl derivatives and The nature of the carrier depends on the mode of administration. The composition may optionally contain other Can be formulated from one or more compounds according to the present invention, together with known antifungal agents. it can. Contains an N-methyl-N-glycosyl derivative of Formula 1 (b) or a salt thereof The composition of interest is of particular interest. A ninth aspect of the present invention is a method of formulating one or more formula 1 (s) formulated for pharmaceutical or veterinary use. a) N-alkyl-N-glycosyl derivatives or their salts and physiologically acceptable A unit dosage form comprising an acceptable carrier is provided. Unit dosage forms may be Formulated from one or more compounds according to the present invention together with other known antifungal agents. Can be. By analogy with the above embodiment of the present invention, N-methyl-N-glycoside of formula 1 (b) Of particular interest are unit dosage forms that contain a sill derivative. As noted above, the nature of the unit dosage form depends on the mode of administration. Typically, tablets and mosquitoes Puser is suitable for oral administration, creams and patches are suitable for topical administration and pessaries Is suitable for rectal and vaginal administration. A tenth aspect of the present invention provides a method of formula 1 for preparing a medicament for use in treating a fungal infection. (A) Use of the N-alkyl-N-glycosyl derivative or a salt thereof is provided. . Compounds in which the N-alkyl and alkyl ester substituents are both methyl groups I'm interested. Structural determinations performed on the compounds of the present invention using spectroscopy indicate that the starting antibiotic Is maintained during the reaction. N-methyl-N-glycoyl of methyl ester of polyene macrolide antibiotics The preparation of the sil derivatives according to the invention does not alter the structure of the starting antibiotic. To give the desired product. The structure of the resulting compound was confirmed using spectroscopy . N-methyl-ND-fructosylamphotericin B methyl ester of formula 3 Demonstrated by structure determination. Electrons of N-methyl-ND-fructosylamphotericin B methyl ester The spectrum is the electronic spectrum of the starting antibiotic, amphotericin B. And the method according to the invention does not result in degradation of the polyene chromophore, Threshold value (E^1% _1cm= 1300 (at 382 nm)) of the product obtained Indicates that high purity is confirmed. N-methyl-ND-fructosylamphoterisi The infrared absorption spectrum of methyl B methyl ester is 1730 cm^-1Esters in Of the band related to the stretching vibration of the carbonyl group and the band of the free carboxyl group Lack, which means that the carboxyl group was completely changed to a methyl ester group. Taste You. Structure of N-methyl-ND-fructosylamphotericin B methyl ester For complete information about¹H (DQF-COSY, ROESY),¹³C (DEPT )) And the assignment of the compound to Formula 3 was made possible By heterocorrelation spectrum (Varian 300MHZ spectrometer) It was done. Most important¹H and¹³The information of C is shown in Tables 1 and 2, respectively. Ann NMR data for the aglycone of hotelricin B are published (P. Sowinski, J. Pawlak, E. Borowski, P .; Gariboldi's Magn. Reson. Chem. 30, 275 (1992)) Matches. N-CH_Three(Δ = 2.35 ppm) and H-1 ″ (2.30 and 3.15 ppm)¹H chemical shift (in DMSO / MeOD solvent system) is amino substitution Characteristic of the effect of the group. After acidification, the protonation of the amino group results in (δ of H-3 ′) Changes to 3.19 ppm), δ is N-CH_Three2.92 ppm of H-1 ″ and 3.92 ppm of H-1 ″. Changes to 64. These data are based on the proton NCH_Three/ H3 ', NCH_Three/ H2 ', NC H_ThreeIt is also supported by the ROE effect between / H1 ″ b and 1 ″ a / H3 ′. Join Constants and ROEs were determined for myco, as previously observed for free amphotericin B. Samin's part^FourC₁Shows the conformation. Table 1 shows N-methyl-ND-fructosylamphotericin B methyl ester. Chemical shift of disaccharide fragments¹H and ROE effects are shown. Table 2 shows N-methyl-ND-fructosylamphotericin B methyl ester. Of the disaccharide fragment of¹³C-NMR chemical shift and D-fructose data The following shows a comparison. Of the fructosyl fragment from Table 2¹³Convert C-NMR data to D-fructo Comparison with the literature values shows that the sugar substituent is in pyranoside form. Table 3 The observed coupling constant is the fructopyranoside ring represented by Formula 4. Demonstrate the boat-shaped conformation of. Cup measured only by this conformation of the ring Exactly match the ring constant. Table 3 shows the N-methyl-ND-fructosylamphotericin B methyl ester. Coupling constant J of proton of disaccharide fragment_{H, H}(Pyridine-d_Five : Methanol-d_Four9: 1), coupling of tightly coupled H3 "-H6" spin systems Constants and chemical shifts are iteratively improved by computer simulation did. The results shown are for the N-methyl-ND-fructosylan represented by Formula 4. Demonstrate conformation of fructosyl fragment of hotelricin B methyl ester . Other N-methyl-N-methyl esters of polyene macrolide antibiotics The glycosyl derivative was characterized by the same method as described above. The invention will now be described with reference to the following non-limiting examples. Within the scope of the present invention Still other embodiments will be apparent to those skilled in the art.Antifungal activity In vitro antifungal activity as well as toxicity of all prepared compounds did. N-methyl-ND-fructosylamphotericin B methyl ester as In the case of a compound having the best property of paratate, its activity in vivo and And toxicity were also measured.In vitro antifungal activity The antifungal activity of the compounds was determined according to the standard method of polyene macrolide treatment. 10 in liquid Sabouraud medium^FourTest organism in cells / ml Candida albicans ATCC 262778 And inoculated with a test antibiotic (sterile dilution) at 30 ° C. for 24 hours. versus Amphotericin B was used as control. The compound is dissolved in DMF and the appropriate The amount was added to the medium. The turbidity measurement method (660 nm) is used to measure the degree of growth inhibition. Applied. The concentration of the antibiotic that inhibited fungal growth by 50% was determined from the dose response curve. I did. The obtained IC₅₀The values characterized the compound's antifungal activity.In vitro toxicity The toxicity of the compound in vitro to animal cells is determined by measuring the degree of hemolysis of human red blood cells. And measured using standard methods of polyene macrolide treatment. Fresh citric acid addition Human erythrocytes isolated from human blood were washed twice with cold saline. Cells in saline 2 Dilute 50-fold and equilibrate for 30 minutes at 37 ° C. Erythrocyte samples were tested at various concentrations The cells were cultured with the raw material (base solution in DMF) at 37 ° C. for 30 minutes. After centrifugation Evaluates erythrocyte lysis by measuring hemoglobin released into solution did. The optical density of the supernatant was measured at 550 nm. The result is 50% hemolysis occurs EH as antibiotic concentration₅₀Indicated by EH₅₀The value of the hemolytic degree of antibiotic administration Readings were made from curves relating to quantity.In vivo toxicity The toxicity in vivo is N-methyl-ND-fructosylamphotericin B methyle For stele L-asparatate, the maximum tolerated dose (MTD) and acute toxicity (LD₅₀ ). To determine the MTD dose, compound was added to a 5% solution of glucose. And injected into Balb / c mice in single and multiple doses intravenously and intraperitoneally. Gave. Single maximum tolerated dose is 100 mg / kg for intravenous administration, intraperitoneal administration Was 200 mg / kg or more. Belly of 100mg / kg in 5 days Multiple maximal tolerated doses of intracavitary administration were extremely high. For such doses, observe 2 No toxic effects were observed at day 0. N-methyl-ND-fructosylamphotericin B methyl ester L-as Acute toxicity of paratate LD₅₀Is a Swiss Webster female mouse with an average weight of 20g Test. Various doses of test compound and 5% glucose for comparison Amphotericin B in the form of fungizone dissolved in iv was administered intravenously to the mice. The dose of the solution was 0.5 ml. As a control, 0.5 ml of a 5% glucose solution Mice were administered. Each dose of both formulations was administered to 5 mice. Mouse Observed for 7 days. The mice were then killed and some serum index was determined. Compare with control Aspartate aminotransferase or creatinine levels It was found not to increase. N-methyl-ND-fructosylamphotericin LD for B methyl ester L-aspartate₅₀Is 400 mg / kg In the case of fungizone-form amphotericin B, LD₅₀But It was 6 mg / kg.Chemotherapy effect N-methyl-ND-fructosyl using a mouse systemic candidiasis model The chemotherapeutic effect of amphotericin B methyl ester L-aspartate was examined. Candida albicans grown overnight in Sabouraud dextrose broth at room temperature I let you. The fungal cells are centrifuged, washed twice with 0.9% sodium chloride solution, Suspended in normal saline. 0.9 g in female Swiss Webster mice weighing 25 g 10% sodium chloride solution in 0.2 ml^FiveInjection of Candida cells intravenously Was. Initially, the infection was systemic, but was limited to the kidneys by 2-3 days . Untreated mice usually died between 7 and 14 days after infection. 3 days after infection Mice were treated twice intravenously at 5-6 hour intervals for 5 consecutive days. Compound Was administered as a 5% glucose solution. Mice are observed for 5 weeks starting on the day of infection did. After this time, the surviving mice are killed, the kidneys are removed, and the mice are homogenized with sterile water. And place the homogenate on Sabouraud Dextrose Agar for Candida. Growing colonies were counted. The efficacy of chemotherapy was 50% Mg / kg which resulted in the survival of Expressed based on Candida clearance. ED₅₀The dose referred to as J. Hyg. 27,49 3, (193 It was calculated using the method shown in 8). N-methyl-ND-fructosylampho ED of Terisin B methyl ester L-aspartate₅₀Values are based on survival. 3 mg / kg, 6 mg / kg based on kidney clearance.Preparation example N-methyl-N-glycoyl of methyl ester of polyene macrolide antibiotics The syl derivatives, their salts, and preparation methods are illustrated by the following examples.Example I 1 g of amphotericin B (E^1% _1cm= 1350 (382 nm, in MeOH Was dissolved in 15 ml of N, N-dimethylformamide, and 0.3 g of D-g Lucose was added and the mixture was stirred at 37 ° C. for 40 hours in the dark. Next, the reactants Was cooled and the solid was precipitated with excess diethyl ether. Centrifuge the solids , Washed twice with diethyl ether and dried under reduced pressure. To remove excess glucose The solid is suspended in 20 ml of water, centrifuged, twice with a little water and twice with acetone. And twice with diethyl ether. The product was dried under reduced pressure to give 0.98 g ND-fructosylamphotericin B (E^1% _1cm= 1200 (382 nm, M in MeOH) was obtained. While stirring the product, 10 ml of N, N-dimethyl Dissolve in tylformamide, add 50 ml of diethyl ether to this solution, A fine suspension was obtained. The suspension is cooled in ice to 0-2 ° C. and stirred vigorously with N 2 Of newly prepared diazomethane per mole of -D-fructosylamphotericin B 2.5 mol of diethyl ether solution was added. Following the reaction, chloroform-methano Thin-layer chromatography using silica gel in a solvent-water 10: 6: 1 (vol / vol) solvent system The photographic was performed. After completion of the reaction, which took about 2 hours, an excess of diazomethane and The diethyl ether was evaporated under reduced pressure at a temperature below 40 ° C. Excess diethyl ether The crude was precipitated from the residue using a centrifuge, centrifuged and It was further washed twice with n-hexane and dried under reduced pressure to obtain 0.95 g of a crude product. Chloroform-methanol-water 20: 8: 1 (vol / vol) solvent system 70-23 Crude product by column chromatography using 0 mesh Merk Silicagel 60 N-methyl-ND-fructosylamphotericin B methyl ester Was isolated. For example, 0.95 g of crude product is suspended in the above solvent mixture, If product Was poorly soluble, the solvent ratio was changed to 10: 6: 1. Centrifuge undissolved part Separate, put the supernatant in a chromatography column and then add the solvent mixture However, the ratio was developed in a ratio of 20: 8: 1 (volume / volume). Chloroform-me Elution on a silica plate using a 10: 6: 1 (vol / vol) solvent system of ethanol-water The liquid was analyzed. Plates were visualized with cerium sulfate reagent. Pure amphoteri Rf = including N-methyl-ND-fructosyl derivative of syn B methyl ester Fractions of 0.5-0.54 were collected. The collected fractions were evaporated under reduced pressure. Dry residue Is dissolved in a small amount of N, N-dimethylformamide and the product is dissolved in excess diethyl ether. Precipitate, centrifuge the solid, wash twice with diethyl ether and vacuum Dried in a desiccator. 0.137 g of N-methyl-ND-fructosyluane Hotelricin B methyl ester (E^1% _1cm= 1300 (382 nm, in methanol )) Was obtained. The proof of the structure is given in the above description. Try as above The antifungal activity of this compound against Candida albicans tested was IC₅₀= 0.12μ g / ml, and the toxicity to human erythrocytes measured as described above is 350 μg. EH greater than / ml₅₀showed that. By comparison, the starting material amphotericin B EH₅₀The value was 1.5 μg / ml. When it exceeds 350 μg / ml, this compound The product is insoluble under these experimental conditions, so that N-methyl-ND-fructosyl EH of hotelricin B methyl ester₅₀The exact value of could not be determined. Example II 0.5 g of candidine (E^1% _1cm= 1175 (382 nm, in MeOH)) And 0.15 g of D-glucose in 10 ml of N, N-dimethylformamide And stirred at 37 ° C. for 36 hours. The subsequent procedure is the same as in Example I. , 0.43 g of ND-fructosylcandidine (E^1% _1cm= 1100 (382 nm) in MeOH) was obtained. The product was prepared as in Example I Methylation with a solution of zomethane in diethyl ether gave 0.4 g of crude product. Real In a similar manner as described in Example I, the pure N-methyl-ND-fructosylcandidine methyl ester was isolated. pure The fraction containing the derivative was subjected to thin layer chromatography to obtain Rf = 0.49-0.52. I confirmed. Collect the fractions, evaporate to dryness and dilute in a small amount of N, N-dimethylformamide Dissolve, The solid was precipitated with diethyl ether. Centrifuge the solid and add diethyl ether And dried in a vacuum desiccator to obtain 0.05 g of N-methyl-ND-fur Octosylcandidine methyl ester (E^1% _1cm= 1200 (382 nm, MeO H), IC₅₀= 0.75 μg / ml and above 300 μg / ml EH₅₀) Got. The structure of this compound is N-methyl-ND-fructosylan. Determined by the same method as for Hotelricin B methyl ester. Example III 2 g of nystatin (E^1% _1cm= 870 (304 nm, in MeOH)) And 0.6 g of D-glucose were dissolved in 35 ml of N, N-dimethylacetamide. Dissolved and stirred at 37 ° C. for 40 hours. After completion of the reaction, the crude product was Settle, centrifuge and vacuum dry. The excess glucose is then added to a small amount of water The mixture was washed away with a 1: 1 mixture of acetone and acetone and diethyl ether. Centrifuge, dry in a vacuum desiccator, and add 1.2 g of ND-fructosyl Statins (E^1% _1cm= 720 (304 nm, in MeOH). Real The product was methylated with diazomethane as in Example I to give 1.25 g of A crude was obtained. This product was purified on a silica gel column as in Example I. Pure Contains stylish N-methyl-ND-fructosylnystatin methyl ester Fractions were subjected to thin layer chromatography as in Example I, Rf = 0.49-0.5. 2 was confirmed. The fractions were collected, evaporated to dryness under reduced pressure at 30 ° C., and a small amount of N, N-dimethyl Dissolved in tylformamide and precipitated the product with diethyl ether. The product Centrifuge, wash with diethyl ether, dry in vacuum desiccator, 0.17 g Of N-methyl-ND-fructosylnystatin methyl ester (E^1% _1cm= 900 (304 nm, in MeOH)). The structure of this compound is N- Methyl-ND-fructosylamphotericin B methyl ester Determined by the method. In the case of the obtained compound, IC₅₀= 6.8 μg / ml And EH above 300 μg / ml₅₀Was observed. Example IV 0.79 g of bacidine (antibiotic) in 15 ml of N, N-dimethylformamide Main component of denatured complex aureofasin) (E^1% _1cm= 900 (378 nm, MeOH During ~ )) And 0.22 g of D-glucose were stirred at 37 ° C. for 18 hours. After the reaction was completed, the mixture was cooled and the solid was precipitated with excess diethyl ether. The solid is centrifuged, washed with diethyl ether, dried under reduced pressure and 0.8 g of crude ND-fructosyl vasidin (E^1% _1cm= 720 (378 nm, in MeOH) )). In the same manner as in Example I, the derivative obtained using Chilled to give 0.5 g of crude product. Silica gel as described in Example I Pure N-methyl-ND-fructosyl by column chromatography Basidin methyl ester was isolated. However, the column is chloroform-methanol -Developed in a 30: 8: 1 water solvent system. Thin layer containing pure basidin derivative After chromatography, chloroform-methanol-water 13: 8: 1 solvent system The fractions with Rf = 0.53-0.55 values were collected and combined. The rest of the procedure Same as Example III. 0.07 g of N-methyl-ND-fructosyl Basidin methyl ester (E^1% _1cm= 900 (378 nm in MeOH) ))was gotten. This compound has an IC₅₀= 0.01 μg / ml and EH₅₀= 17 0 μg / ml was shown. The structure of this compound is N-methyl-ND-fructosyl Determined by the method described for amphotericin B methyl ester. Example V Example: 0.79 g of candicidin D (the main component of the antibiotic complex candicidin) Treated as described in IV. 0.1 g of N-methyl-ND-fructosyl Candicidin D methyl ester was obtained (E^1% _1cm= 920 (378 nm, M MeOH) in thin layer chromatography under the conditions described in Example IV. Rf of the compound was 0.50-0.53). This compound has an IC₅₀= 0 . 01 μg / ml and EH₅₀= 180 μg / ml. The structure of the compound is Description of N-methyl-ND-fructosylamphotericin B methyl ester Determined by solid method. Example VI 0.79 g of antibiotic-combined tricomycin main component as described in Example IV Processed. 0.1 g of N-methyl-ND-fructosyltricomycin methyl (E)^1% _1cm= 910 (378 nm, in MeOH) , Real Rf of the compound determined by thin layer chromatography under the conditions described in Example IV was 0. . 49-0.52). The compound is an IC₅₀= 0.013 μg / ml and EH₅₀= 165 µg / ml. The structure of the compound is N-methyl-ND-F Determined by the method described for luctosylamphotericin B methyl ester Was done. Example VII 0.5 g of amphotericin B (E) in 8 ml of N, N-dimethylformamide^1% _1cm = 1350 (382 nm in MeOH)) and 0.15 g of L -The glucose was stirred at 37 ° C for 40 hours. Subsequent operations were the same as in Example I. Was. 0.065 g of N-methyl-NL-fructosylamphotericin B methyl The ester was obtained (E^1% _1cm= 1280 (382 nm, in MeOH) ). The compound is an IC₅₀= 0.42 μg / ml and E above 200 μg / ml H₅₀showed that. The structure of the compound is N-methyl-ND-fructosylamphoteri Determined by the method described for syn B methyl ester. Example VIII 0.52 g of amphotericin B (E^1% _1cm= 1350 (382 nm, MeOH )) And 0.153 g of D-mannose in 10 ml of N, N-dimension. It was dissolved in tilformamide and stirred at 37 ° C. for 40 hours. Subsequent operations are examples Same as I. As in Example I, silica gel column chromatography A more pure derivative was isolated and purified by thin-layer chromatography by the method described in Example I. Fractions with Rf values between 0.53 and 0.55 were collected on tomography. Subsequent operations The crop was the same as in Example I. 0.08 g of N-methyl-ND-fruc Tosylamphotericin B methyl ester (E^1% _1cm= 1280 (382 nm, M In MeOH) was obtained. The compound is an IC₅₀= 0.42 μg / ml and More than 200 μg / ml₅₀showed that. The structure of the compound is N-methyl-N -D-fructosylamphotericin B methyl ester Was decided. Example IX 0.5 g of amphotericin B (12 ml of N, N-dimethylformamide) E^1% _1cm= 1350 (382 nm in MeOH)) and 0.3 g of D -Lactose was stirred at 37 ° C for 2 days. Subsequent operations were the same as in Example I. . Pure derivative by column chromatography on silica gel as in Example I And isolated by thin-layer chromatography by the method described in Example I. Fractions with f-values of 0.25-0.30 were collected. 0.08 g of N-methyl-ND- Fructosylgalactosylamphotericin B methyl ester (E^1% _1cm= 100 0 (382 nm, in MeOH)). The compound is an IC₅₀= 6. EH greater than 0 μg / ml and 200 μg / ml₅₀showed that. Example X 0.5 g of N-methyl-ND-fructosylampho prepared according to Example I Tericin B methyl ester was suspended in 10 ml of water and dissolved in 2 ml of water. . 059 g of aspartic acid was added. Add the acid solution drop by drop with stirring And a solution. The solution was filtered to remove a small amount of residual solids and the clear filtrate was Excess acetone was added until all the salts precipitated. Filtration or centrifugation of solids Then, the mixture was washed twice with acetone and twice with diethyl ether, dried under reduced pressure, and dried in an amount of 0.5 g. N-methyl-ND-fructosylamphotericin B methyl ester L-aspa Rate (E^1% _1cm= 1100 (382 nm in MeOH)) Was. Rf = 0.5-0.5 by thin layer chromatography under the conditions as in Example I. 4 was obtained. The product is N, N-dimethylformamide, dimethylsulfoxide , And a 5% aqueous solution of glucose. Product is very soluble in water did. The compound is an IC₅₀= Above 0.125 μg / ml and 350 μg / ml EH₅₀showed that.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ソヴィンスキ，パヴェウポーランド国81−862 ソポト，クヤフスカ・ストリート 35／１ (72)発明者グミエニアク，イェジアメリカ合衆国テキサス州77477，スタッフォード，シュガー・グローブ・ブールバード 4950，ナンバー 1305 (72)発明者チェルヴィンスキ，アンヂュジェイアメリカ合衆国テキサス州77477，スタッフォード，サウス・カークウッド 12525, アパートメント 204────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of front page (81) Designated countries EP (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, L U, MC, NL, PT, SE), OA (BF, BJ, CF) , CG, CI, CM, GA, GN, ML, MR, NE, SN, TD, TG), AP (KE, LS, MW, SD, S Z, UG), AM, AT, AU, BB, BG, BR, B Y, CA, CH, CN, CZ, DE, DK, EE, ES , FI, GB, GE, HU, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LK, LR, LT, LU, LV, M D, MG, MN, MW, MX, NO, NZ, PL, PT , RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, TJ, TM, TT, UA, UG, US, UZ, VN (72) Inventor Sovinski, Paveu Poland 81-862 Sopot, Kuyahus Ka Street 35/1 (72) Inventor Gumieniak, Jesi 77774, Texas, United States Ford, Sugar Grove Bourbba Code 4950, Number 1305 (72) Inventor Cervinski, Andy Jay 77774, Texas, United States Ford, South Kirkwood 12525, Apartment 204

Claims

[Claims] 1. Formula 1 (a) wherein M represents a residue of a polyene macrolide antibiotic, R represents a portion of a sugar residue formed by the reaction of the antibiotic with a monosaccharide or oligosaccharide, and R ¹ and R ² each may be the same or different and each represents a C _1-4 alkyl group). 2. 2. The N-alkyl-N-alkyl-N-alkylene ester of a polyene macrolide antibiotic according to claim 1, wherein M is selected from amphotericin B, candidine, candidoin, candidinin, mycoheptin, nystatin, polyfungin, aureofasin, basidin, tricomycin or candicidin. Glycosyl derivatives. 3. The monosaccharide or oligosaccharide from which the sugar residue R is derived is selected from D-glucose, L-glucose, D-mannose, D-galactose, or lactose, or maltose. N-alkyl-N-glycosyl derivatives of alkyl esters of polyene macrolide antibiotics. 4. The N-alkyl-N-glycosyl derivative of an alkyl ester of a polyene macrolide antibiotic according to any one of claims 1 to 3, wherein R ¹ and R ² are methyl groups. 5. A polyene macrocycle of the general formula 2 (a) wherein M, R, R ¹ and R ² are defined by any one of claims 1 to 4 and A represents an anion of an organic or inorganic acid. Salts of N-alkyl-N-glycosyl derivatives of alkyl esters of ride group antibiotics. 6. The salts of an N-alkyl-N-glycosyl derivative of an alkyl ester of a polyene macrolide antibiotic according to claim 5, wherein A is the anion of L-aspartic acid. 7. The method for preparing an N-alkyl-N-glycosyl derivative of an alkyl ester of a polyene macrolide antibiotic according to any one of claims 1 to 4, wherein the polyene macrolide antibiotic is reacted with a monosaccharide or an oligosaccharide. The reaction is characterized by simultaneously causing an Amadori rearrangement to produce the N-glycosyl derivative of the polyene macrolide antibiotic, isolating the product of the Amadori rearrangement, and alkylating the product. And purifying the crude product by treating with an agent. 8. 8. A process according to claim 7, wherein the product of the Amadori rearrangement is precipitated from the solution in which the rearrangement takes place and is isolated in the form of a suspension. 9. 9. The method according to claim 7, wherein the Amadori rearrangement is maintained using N, N-dimethylformamide. 10. The process according to any one of claims 7 to 9, wherein the product of the Amadori rearrangement is precipitated using diethyl ether to form a suspension. 11. 11. A process according to any one of claims 7 to 10, wherein the alkylation of the product of the Amadori rearrangement is carried out at a low temperature. 12. The process according to claim 10, wherein the alkylation is carried out at a temperature between -5 ° C and + 5 ° C. 13. The method according to any one of claims 7 to 12, wherein the alkylating agent is an ether solution of diazomethane. 14． The method for preparing salts of N-alkyl-N-glycosyl derivatives of alkyl esters of polyene macrolide antibiotics of the general formula 2 (a) according to claim 5 or claim 6, wherein Suspending the N-alkyl-N-glycosyl derivative prepared by the above in water sufficient to form a homogeneous suspension, acidifying the resulting suspension and isolating the product Method. 15. 15. The method for preparing salts of N-alkyl-N-glycosyl derivatives of alkyl esters of polyene macrolide antibiotics according to claim 14, wherein the suspension is acidified with an organic or inorganic acid. 16. 16. The method for preparing salts of N-alkyl-N-glycosyl derivatives of alkyl esters of polyene macrolide antibiotics according to claim 15, wherein the suspension is acidified with L-aspartic acid. 17． 17. A process for preparing salts of N-alkyl-N-glycosyl derivatives of alkyl esters of polyene macrolide antibiotics according to any one of claims 14 to 16, wherein the crude product is precipitated with an organic solvent. A method of isolating the pure product by subsequent washing with a suitable solvent and drying. 18. 18. The process for preparing salts of N-alkyl-N-glycosyl derivatives of alkyl esters of polyene macrolide antibiotics according to any one of claims 14 to 17, wherein the solvent used to precipitate the crude product is: A method that is miscible with water. 19. 19. The method for preparing salts of N-alkyl-N-glycosyl derivatives of alkyl esters of polyene macrolide antibiotics according to claim 18, wherein the solvent is acetone. 20. 20. A process for preparing salts of N-alkyl-N-glycosyl derivatives of alkyl esters of polyene macrolide antibiotics according to any one of claims 17 to 19, wherein the supplements used to wash the product. A suitable solvent is selected from acetone and diethyl ether. 21. 21. A process for preparing salts of N-alkyl-N-glycosyl derivatives of alkyl esters of polyene macrolide antibiotics according to any one of claims 14 to 20, wherein the products are dried under reduced pressure. 22. 7. An N-alkyl-N-glycosyl derivative of formula 1 (a) or a salt thereof according to any one of claims 1 to 6 for use in therapy. 23. 7. A method for treating fungal infections in humans and animals, comprising administering the N-alkyl-N-glycosyl derivative of formula 1 (a) or a salt thereof according to any one of claims 1 to 6 to humans and animals. Including methods. 24. 7. A method for treating fungal infections in humans and animals, comprising administering the N-methyl-N-glycosyl derivative of formula 1 (a) or a salt thereof according to any one of claims 1 to 6 to humans and animals. Including methods. 25. A composition for use in the treatment of a fungal infection comprising an N-alkyl-N-glycosyl derivative of formula 1 (a) or a salt thereof according to any one of claims 1 to 6 and a physiologically acceptable carrier. 26. A unit dosage form comprising one or more N-alkyl-N-glycosyl derivatives of Formula 1 (a) or salts thereof and a physiologically acceptable carrier formulated for pharmaceutical or veterinary use. 27. 26. The fungal infection of claim 25, wherein said N-alkyl-N-glycosyl derivative of Formula 1 (a) or a salt thereof comprises an N-methyl-N-glycosyl derivative of said methyl ester of Formula 1 (b) or a salt thereof. A composition or a unit dosage form according to claim 26 for use in the treatment of a disease. 28. 28. The composition or unit dosage form according to any one of claims 25 to 27, further comprising a known antifungal agent. 29. 29. The composition or unit dosage form according to any one of claims 25 to 28, wherein the composition or unit dosage form is formulated for intravenous, intraperitoneal, oral, topical, subcutaneous, rectal, or vaginal administration. 30. Use of an N-alkyl-N-glycosyl derivative of an alkyl ester of formula 1 (a) or a salt thereof according to any one of claims 1 to 6 for the preparation of a medicament for the treatment of a fungal infection. 31. 31. The use according to claim 30, wherein said N-alkyl and alkyl ester substituents are both methyl groups. 32. Use of an N-alkyl-N-glycosyl derivative of formula 1 (a) according to any one of claims 1 to 6 or a salt thereof for treating fungal infections. 33. 33. Use according to claim 32, wherein said N-alkyl and alkyl ester substituents are both methyl groups. 34. 34. Use according to claim 32 or 33, wherein said fungal infection is exogenous or endogenous. 35. Formula 1 (b) (where M represents a residue of a polyene macrolide antibiotic, and R represents a monosaccharide or oligosaccharide, preferably D-glucose, or L-glucose, or D-glucose). N-alkyl-N- of the methyl ester of the polyene macrolide antibiotics represented by the reaction with mannose or D-galactose or lactose or maltose and the concomitant Amadori rearrangement) Glycosyl derivatives. 36. 38. The derivative according to claim 37, wherein the polyene macrolide antibiotic is amphotericin B, or candidine, or candidoin, or candidinin, or mycoheptin, or nystin, or polyfungin, or aureofacin, or tricomycin, or candicidin. 37. General formula 2 (b) (where M represents a residue of a polyene macrolide antibiotic, and R represents a monosaccharide or oligosaccharide, preferably D-glucose or L-glucose or D-glucose) Which represents a part of a sugar residue produced by reaction with mannose or D-galactose or lactose or maltose and simultaneous Amadori rearrangement, and A represents an anion of an organic or inorganic acid) Salts of N-methyl-N-glycosyl derivatives of antibiotics. 38. The polyene macrolide antibiotic is amphotericin B, or candidine, or candidin, or candidinin, or mycoheptin, or nystatin, or polyfungin, or aureofasin, or basidin, or tricomycin, or candicidin. salts. 39. A salt according to claim 39 or claim 40, wherein A relates to the anion of L-aspartic acid. 40. Formula 1 (b) wherein M represents a residue of a polyene macrolide antibiotic, and R represents a monosaccharide or oligosaccharide, preferably D-glucose, or L-glucose, or D N-methyl-N of the methyl ester of the polyene macrolide antibiotics represented by the reaction with mannose or D-galactose or lactose or maltose and the simultaneous Amadori rearrangement) In the process for the preparation of glycosyl derivatives, the polyene macrolide antibiotic N-glycosyl derivative obtained by Amadori rearrangement is converted from a solution of the derivative in an organic solvent, preferably N, N-dimethylformamide, to a solvent, preferably diethyl ether. Precipitate with ether, convert to a suspension, then cool, preferably In the range of -5 DEG C. to +5 DEG C., stirring, and further isolation by evaporation of the solvent and precipitation with a concentrated solution, preferably with excess diethyl ether, by known methods. Method of purifying. 41. Formula 1 (b) wherein M represents a residue of a polyene macrolide antibiotic, and R represents a monosaccharide or oligosaccharide, preferably D-glucose, or L-glucose, or D N-methyl-N of the methyl ester of the polyene macrolide antibiotics represented by the reaction with mannose or D-galactose or lactose or maltose and the concomitant Amadori rearrangement) In the process for preparing salts of glycosyl derivatives, the polyene macrolide antibiotic N-glycosyl derivative obtained by Amadori rearrangement is converted from a solution of the derivative in an organic solvent, preferably N, N-dimethylformamide, preferably to a solvent, Transform into a suspension by precipitation with diethyl ether and then cold, preferably In the range from -5 DEG C. to +5 DEG C., stirring, distilling off the solvent and evaporating off the solvent and precipitating with a concentrated solution, preferably with excess diethyl ether, The derivative, which is subsequently purified as a solid, is suspended in a small amount of water, a stoichiometric amount of an organic or inorganic acid is added and then an excess of an organic solvent which is miscible with water from the resulting solution, preferably Precipitating the product with acetone, washing the solids preferably with acetone, preferably with diethyl ether, and then preferably drying under reduced pressure. 42. In a method of treating exogenous and endogenous fungal infections in humans and animals, a compound of the general formula 1 (a) wherein M represents a residue of a polyene macrolide antibiotic, R is the antibiotic and a monosaccharide Or an oligosaccharide, preferably D-glucose, or L-glucose, or D-mannose, or D-galactose, or lactose, or lactose, or a sugar residue generated by simultaneous Amadori rearrangement with maltose). A method for treating said infection using an N-methyl-N-glycosyl derivative of a methyl ester of a polyene macrolide antibiotic. 43. In a method of treating exogenous and endogenous fungal infections in humans and animals, a compound of the general formula 2 (b) wherein M represents a residue of a polyene macrolide antibiotic, R is the antibiotic and a monosaccharide Or an oligosaccharide, preferably D-glucose, or L-glucose, or D-mannose, or D-galactose, or lactose, or a portion of the sugar residue produced by simultaneous Amadori rearrangement with maltose). A method for treating said infectious disease using salts of the indicated N-methyl-N-glycosyl derivatives of methyl esters of polyene macrolide antibiotics.