JPH11500432A - ベルトレティア抽出物を含有する化粧用又は薬用、特に皮膚科用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明の目的は、化粧用又は薬用、特に皮膚科用組成物製造のための、ベルトレティア抽出物、特にベルトレティア・エクセルサ抽出物の使用である。ベルトレティア抽出物は、コラーゲンの合成促進又は抗フリーラジカル活性を有しており、例えば、皮膚の老化現象を抑制し、しわの予防やその深さを減少させ、皮膚を引き締める効果を持つ。

Description

【発明の詳細な説明】 ベルトレティア抽出物を含有する化粧用又は薬用、特に皮膚科用組成物 本発明は、本質的に、ベルトレティア（Bertholletia）抽出物を含有する化粧 用又は薬用組成物、特に皮膚科用組成物に関する。 更に詳しくは、本発明は、特にコラーゲンの合成促進又は抗フリーラジカル活 性を有し、特に皮膚の老化現象の抑制、肌の引き締め、瘢痕改善又はコラーゲン 不足に伴う種々の病状治療を目的とした、化粧剤としての又は化粧用若しくは薬 用組成物、特に皮膚科用組成物製造のための、ベルトレティア抽出物の使用、及 び、上記抽出物を含有する化粧用又は薬用組成物に関する。 ベルトレティアは、サガリバナ科に属し、ベルトレティア・エクセルサ（Bert holletia excelsa）とベルトレティア・ノビリス（Bertholletia nobilis）とい う２つの非常に似通った種を含む属である。これらは南アメリカ、特にブラジル の熱帯地方で見られる樹木である。高さは３０〜４０メートルに達する。一般に はブラジルクルミ又はブラジルクリノキと呼ばれている。この２種類の木の実は 類似点が多く、実際に混同されることがある。これらは食用である。 これらについては、特にパウルＨ．メンシエ（Paul H．Mensier）著、パウル ・レシェバリエ（Paul Lechevaliers）社出版、パリ、１９５７年の「ディクシ 辞典）」で記述されている。 アマゾンでは、ベルトレティア．エクセルサの幹の樹皮は、特にサポニンを含 有するため、肝臓の病気を抑制する煎じ薬として使用されている。その実から採 れる油脂は石鹸の製造に使用できる（Ｒ．Ｅ．シュルツ（R.E．Schultes）ら、 「ザ・ヒーリング・フォレスト（The healing forest）」、ディスコリヅ・プレ ス（Discorides Press）、ポートランド、オレゴン、米国、１９９０、２巻、２ ２５〜２２６頁）。 今回、ベルトレティアの抽出物が、特に肌ケア用の化粧品として極めて有用で あることを見いだした。 特に、ベルトレティア抽出物は、コラーゲン、特にＩ型又はIV型のコラーゲン （以下、「コラーゲンＩ」又は「コラーゲンIV」と略記）の合成において驚くべ き活性を有することを見いだした。 周知のように、皮膚は本質的にコラーゲンＩを含有する。コラーゲンＩは、真 皮中で最も数の多い細胞である繊維芽細胞により合成される蛋白質である。この 蛋白質は、支持的役割を果たし、真皮の流動学的性質、特にその張り、及び、そ の構造の維持に関する役割を持つ（Ｅ．Ｕ．クカルツ（E.U．KUCHARZ）、「ザ・ コラーゲン：バイオケミストリー・アンド・パトフィジオロジー（The collagen s : Biochemistry and pathophysiology）」、シュプリンガー・フェルラーク（ Springer Verlag）、ベルリン、１９９２）。また、老人は若者よりも真皮の繊 維芽細胞におけるコラーゲンの分泌量が少ないことが分かっている（Ｍ．デュマ ス（M．DUMAS）ら、Mech．Ageing Dev．、７３巻（１９９４）、１７９〜１８７ 頁）。従って、年と共に、皮膚の流動学的性質や日々受ける圧力に対する応答が 衰える。皮膚は拡張して、伸びに対する応答が乏しくなり、張りを失い、皺が深 くなる。 同じく周知のように、コラーゲンIVは表皮−真皮接合部の主要コラーゲンであ る。この主題に関する参考文献としては、ブリッガマンＲ．Ａ．（Briggaman R. A.）著、「バイオケミカル・コンポジション・オブ・ザ・エピダーマル−ダーマ ル・ジャンクション・アンド・アザー・ベイスメント・メンブラン（Biochemica l composition of the epidermal-dermal junction and other basement membra ne）」、J．Invest．Dermatol.出版、７８巻（１９８２）、１〜６頁、又は、Ｐ ．フェランド（P．Verande）著、「ラ・ジォクショ・デルモエピデルミク（La j 。 このコラーゲンIVは稠密層に存在するもので、細胞の固着に関与し、表皮ケラ チン細胞により合成される。基底板は、表皮ケラチン細胞につながる固着細繊維 （コラーゲンVII）と真皮コラーゲンの細繊維（コラーゲンＩ及びIII）をつなぎ とめるものである。この基底板はコラーゲンIVからなり、２つの皮膚の仕切りの 機能的な界面維持に必要である。また、コラーゲンIVは瘢痕化の過程において重 要な役割を果たし、良質な瘢痕組織の形成を可能にする。 更に、ベルトレティア抽出物は、顕著な抗フリーラジカル活性、即ち、遊離基 捕捉剤として働くことを見いだした。皮膚上での遊離基捕捉剤としての有利な効 果は、近年、Ｆ．Ｊ．ライト（F.J.Wright）、J．Appl．Cosmetol.、１３巻（１ ９９５）、４１〜５０頁で述べられている。 さて、フリーラジカルは、老化現象、特に皮膚における老化現象に関与し、皮 膚の質と特性を変更するものと理解されている。この主題に関する文献としては 、Ｉ．エメリット（I.Emerit）著、フリー・ラジカル・アンド・エイジング（Fr ee radicals and ageing）、Ｉ．メリット、Ｂ．チャンス（B.Chance）編、ビル クハウザー・フェルラーク（Birkhauser Verlag）、バーゼル、１９９２年、３ ２８〜３４１頁で紹介されている。 以上のように、ベルトレティア抽出物はコラーゲン合成やフリーラジカルに対 して活性を有するため、皺や皮膚の基礎組織のゆるみなどの皮膚の老化現象の抑 制、又は、瘢痕の改善に有用である。 従って、本発明の主要な目的は、皮膚の老化を予防・治療して皮膚を引き締め ることや瘢痕改善のために効果的であり、フリーラジカルに対する効果を持つ化 粧用又は薬用、特に皮膚科用組成物の新規製剤を提供するという新規の技術的課 題を解決することにある。 本発明の別の主要な目的は、特に化粧業界や製薬業界において工業的規模で利 用できる簡便な方法により、新規の上記技術的課題を解決することにある。 従って、第一の特徴によると、本発明は、特に抗フリーラジカル活性を有する 化粧用試薬としての、特に肌ケアのためのベルトレティア抽出物の使用に関する 。 本発明のある態様によると、ベルトレティア抽出物、好ましくはベルトレティ ア・エクセルサ抽出物は、コラーゲン、特にコラーゲンＩ又はコラーゲンIVの合 成促進又は抗フリーラジカル活性を有し、特に生物力学的特性及び皮膚表面の外 観だけでなく皮膚の瘢痕の改善、皮膚の引き締め、皮膚の老化現象の抑制、コラ ーゲン不足に伴う種々の病状の治療を目的とした化粧用又は薬用組成物、特に皮 膚科用組成物の製造に用いられる。 ある有利な態様によると、ベルトレティア抽出物は、皮膚の老化、特に皺を抑 制する効果を有し、皺の予防やその深さの減少を目的とする組成物の製法に用い られる。 別の有利な態様によると、ベルトレティア抽出物は、この植物の樹皮、好まし くはベルトレティア・エクセルサの幹から採れる抽出物である。 別の有利な態様によると、ベルトレティア抽出物は、ベルトレティアの果実、 即ち、木の実、より好ましくはベルトレティアの木の実の果皮、より好ましくは ベルトレティア・エクセルサの木の実の果皮から採れる抽出物である。 好ましくは、ベルトレティア抽出物は以下で示す方法により得られるが、これ らのみに限定されるものではない。 最初の抽出は、水、好ましくは１〜４個の炭素原子を有するアルコール、好ま しくは１〜２個の炭素原子を有する塩素系溶媒、好ましくは３〜６個の炭素原子 を有する有機エステル、及び、これらの溶媒の混合物を基礎とする混合溶媒から なる群より好適に選択される極性溶媒を用いて、上記植物の樹皮又は木の実、好 ましくは幹の樹皮又は木の実の果皮において行う。 より好ましくは、上記最初の抽出に用いる溶媒は、水、メタノール、エタノー ル、メタノール／水の混合物又はエタノール／水の混合物、クロロホルム及びジ クロロメタンからなる群より選択されるものである。更に好ましくは、上記溶媒 は、水、メタノール、エタノール又はこれらの溶媒の混合物である。 上記抽出溶媒に対する樹皮又は木の実、好ましくは木の実の果皮の比率は、特 に限定されず、通常は１：５〜１：２０重量部である。 上記抽出は、一般に室温から使用溶媒の沸点までの温度で行う。 上記最初の抽出は、大気圧下で２〜４時間かけて還流下で行うのが好ましい。 また、上記抽出溶媒中で２〜４時間の低温浸漬により行うのも好ましい。 抽出終了後、抽出物を含む溶媒相をろ過し、減圧下で濃縮及び／又は蒸発・乾 燥させて、本発明による最初のベルトレティア粗抽出物を得る。この粗抽出物は 、当業者に周知の種々の方法により精製することができる。 特に、サポニンを本発明のベルトレティア抽出物中に多く含有させることを望 む場合、以下に示す方法が用いられるが、決してこれに限定されるものではない 。上記最初の抽出により得られる抽出物を蒸発乾燥させ、残渣をメタノールに溶 解させる。得られた溶液をアセトンに注ぎ込み、生じた沈殿物をろ過により回収 する。好ましくは、この沈殿物は乾燥後、脱塩水を用いて透析を行う。最後に生 成物を凍結乾燥することで、サポニンに富む本発明のベルトレティア乾燥抽出物 が得られる。 上述した抽出過程は、特にベルトレティア・エクセルサ種に適用できる。 第二の特徴によると、本発明は更に、化粧学的に有効な量のベルトレティア抽 出物、好ましくはベルトレティア・エクセルサ抽出物を有効成分として含有し、 好ましくは上記抽出物が化粧学的に許容される賦形剤に分散してなることを特徴 とする化粧用組成物に関する。 ある好ましい態様によると、上記化粧用組成物は、コラーゲン、特にコラーゲ ンＩ又はコラーゲンIVの合成促進又は抗フリーラジカル活性を有しており、特に 皮膚の老化現象の抑制又は皮膚の引き締めを目的としている。このような組成物 は、例えば、皺の予防又はその深さの減少を目的とした組成物として好適に用い られる。 第三の特徴によると、本発明は更に、コラーゲン、特にコラーゲンＩ又はコラ ーゲンIVの合成促進又は抗フリーラジカル活性を有する薬用組成物、特に皮膚科 用組成物で、薬学的に有効な量のベルトレティア抽出物、好ましくはベルトレテ ィア・エクセルサ抽出物を有効成分として含有し、上記抽出物が薬学的に許容さ れる賦形剤に分散してなることを特徴とする薬用組成物に関する。 ある好ましい態様によると、上記組成物は皮膚の瘢痕の改善、又は、コラーゲ ン不足に伴う、又は、フリーラジカルの存在に起因する様々の病状の治療を目的 とする。 第四の特徴によると、本発明はまた、好ましくは化粧学的又は薬学的に許容さ れる賦形剤に分散されたベルトレティア抽出物、特にベルトレティア・エクセル サ抽出物を、化粧又は薬用治療にあたって化粧学的又は薬学的に有効な量で塗布 することを特徴とする化粧治療方法又は薬用治療法、特に皮膚の治療法をも扱う 。上記塗布は、好ましくは皮膚の該当箇所への局部的な塗布である。現時点で特 に好ましい化粧用又は薬用塗布は、以上の記述、実施例に関する以下の記述、及 び、請求の範囲から導かれる。濃縮抽出物に関しても同様のことが言える。 上記特徴のいずれにおいても、ベルトレティア抽出物、好ましくはベルトレテ ィア・エクセルサ抽出物は、目的組成物の全重量に対して０．０００１〜１重量 ％の濃度で用いられるのが好ましい。より好ましくは、目的組成物の全重量に対 して０．０１〜０．２５重量％の濃度である。 また、上記特徴のいずれにおいても、本発明による組成物は、アスコルビン酸 、マデカシン酸（ｍａｄｅｃａｓｓｉｃ ａｃｉｄ）、アシアチン酸（ａｓｉａ ｔｉｃ ａｃｉｄ）、マデカソサイド（ｍａｄｅｃａｓｓｏｓｉｄｅ）、アシア チコサイド（ａｓｉａｔｉｃｏｓｉｄｅ）、α−１−プロテイナーゼ阻害剤、レ チノイン酸等のコラゲナーゼ阻害剤、エラスターゼ阻害剤、リジン、プロリン、 ２−オキソグルタレート及びジンセノサイドＲ₀からなる群より選択される有効 物質を更に含有することが好ましい。 本発明の他の目的、特徴及び利点については、いくつかの実施例についての以 下の記述から明らかになるが、本発明はこれら実施例にのみ限定されるものでは ない。 実施例においては、他に記載がなければ、百分率は重量百分率で、抽出物の量 は乾燥重量で表される。実施例１ サポニンに富む、ベルトレティア・エクセルサの幹の樹皮からのメタノール抽出 物の調製 ベルトレティア・エクセルサの幹の樹皮をすりつぶして粉末状にし、得られた 粉末４９ｇを５００ｍｌのメタノール中で２時間浸漬させる。この混合物を全て ３時間還流し、放置冷却後にガラスフィルターにてろ過を行う。得られたろ液が 本発明による最初の抽出物であり、以下においては抽出物Ｉ₁とする。この最初 の抽出物を蒸発乾固し、１４．７ｇの残渣を１００ｍｌのメタノールに溶解させ る。この溶液を５００ｍｌのアセトンに注ぎ込み、得られた沈殿物をろ過する。 次に、この沈殿物を水酸化カリウム等の固形状脱水剤で乾燥させて、１．３３ｇ の乾燥した生成物を得る。次いで８３０ｍｇのこの生成物を４日間、９ｍｌの脱 塩水により透析したのち、凍結乾燥を行い、サポニンに富む本発明の抽出物（抽 出物Ｉ₂とする）１８２ｍｇを得る。実施例２ サポニンに富む、ブラジリアン・ベルトレティア・エクセルサの木の実の果皮か らのメタノール抽出物の調製 市販されているブラジリアン・ベルトレティア・エクセルサの木の実の果皮を 集めて、粗くすりつぶしてから粉砕する。 得られた粉末状の果皮１００ｇを３０分間の還流下、１リットルのメタノール で連続的に３回抽出する。 孔径０．４５μｍのろ紙を用いてそれぞれの抽出液をろ過し、３つの抽出液を 合わせる。 合わせた抽出液を回転式蒸発器を用いて濃縮し、乾燥した膜を得る。 この膜を水で振蕩し、得られる乳状液を凍結乾燥する。 これにより、サポニンを多く含有する本発明の果皮の抽出物（抽出物Ｉ₃とす る）を５ｇ得る。この抽出物の収率は５％である。実施例３ 実施例１により得られた、ベルトレティア・エクセルサの幹の樹皮からメタノー ル抽出物（抽出物Ｉ₂）の、培養ヒト繊維芽細胞によるコラーゲン合成に対する 活性の証明 繊維芽細胞の培養 顔の美容整形中の６０歳女性由来の顔面の皮膚を用いて、体外培養法によって 健康な成人真皮の培養繊維芽細胞を調製する。 ２ｍｍｏｌ／ｌのＬ−グルタミン（ギブコ（Ｇｉｂｃｏ））及び１０ｖ／ｖ％ のウシ胎児血清（ギブコ）を添加したＥ１９９培地（ギブコ）で、５％の二酸化 炭素を含む３７℃の加湿大気下にて、上記繊維芽細胞が集密的になるまで培養す る。コラーゲン含量を評価するために、０．１％のトリプシン及び０．０２％の ＥＤＴＡを含むｐＨ７．２のリン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）を用いて、集密状態にあ る最初の培養細胞を集め、その細胞を、上記のものと同じ培地を入れた９６穴マ イクロカルチャープレート（ファルコン（Ｆａｌｃｏｎ））に、１ウェルあたり １０⁴個の繊維芽細胞密度で植えつける。 植えつけてから２４時間後、上記培地を取り除き、血清を含まず２５μｍｏｌ ／ｌのＬ−アスコルビン酸のナトリウム塩を加えたこと以外は上述のものと同じ 組成を有する培地と取り替える。また、この新しい培地は、処理培地であれば試 験生成物（抽出物Ｉ₂）を含有するが、コントロール培地の場合にはこれを含有 しない。次いで３７℃で更に４８時間培養を行う。試験生成物（抽出物Ｉ₂）は 、ＤＭＳＯに溶解させてから培地に添加する（培地中のＤＭＳＯの最終濃度は０ ．１ｖ／ｖ％である）。細胞の生存度 培養の終了時点で、上記培地を取り除き、デニゾットＦ．（Denizot F.）らの ジャーナル・オブ・イムノロジー・メソッド（J．Immunol．Methods）、（１９ ８６）８９巻、２７１〜２７７頁の記載に従って、ＭＴＴ細胞生存度試験を行っ た。フェノールレッドを含まないＥ１９９培地（ギブコ）で、０．５ｍｇ／ｍｌ のテトラゾリウム塩（３−〔４，５−ジメチルチアゾル−２−イル〕−２，５− ジフェニルテトラゾリウムブロマイド即ちＭＴＴ）を含有する溶液１００μｌ中 、３７℃で３時間、細胞の培養を行う。次に、各ウェルに１００μｌのイソプロ パノールを添加し、生存細胞により形成される暗色のホルマザンブルー誘導体を 溶解させる。５４０ｎｍで吸光度を測定する。コラーゲンの測定 繊維芽細胞が分泌したＩ型コラーゲンは、細胞と会合するか、又は、生成物（ 抽出物Ｉ₂）の有無に関わらず培養４８時間後の無血清培地に放出されており、 その総量を、ドュマス Ｍ．（Dumas M.）ら、Mech．Ageing Dev．（１９９４） ７３巻、１７９〜１８７頁、及び、グリモードＪ．Ｐ．（Grimaud J.P.）ら、メ ソッヅ・オブ・エンジマチック・アナリシス（Methods of Enzymatic Analysis ）、ベルマイヤーＨ．Ｕ.（Bermeyer，H.U．）編、VCH 出版、バインハイム（１ ９８６）、１８６〜２０１頁に記載されているＥＬＩＳＡ法により測定する。 音波処理により氷中で均一化した無血清培養培地と残余細胞を集めて、プラス チック製の免疫プレート（ＮＵＮＣ）のウェルに移動し、＋４℃で２４時間培養 し分泌したコラーゲンを付着させる。この培養期間中に、プロテアーゼ阻害剤（ エチルマレイイミド、フェニルメチルスルフォニルフルオリド、及び、エチレン ジアミンテトラアセテート、各最終濃度は１ｍＭ）を添加する。次にプレートを ＰＢＳで洗浄する。同様の洗浄過程をプレートの各処理後に行う。 非特異的結合を防ぐために血清アルブミンを加えて４℃で２４時間培養し、次 いで、抗ヒトＩ型コラーゲンウサギ抗体（パスツール研究所、リヨン、フランス ）を加えて２２℃で１．５時間置き、その結合抗体をアルカリホスファターゼと 結合した抗ウサギのヤギＩｇＧ（エテルチム（Interchim）、モンリュソン、フ ランス）と反応させる。アルカリホスファターゼによってパラニトロフェニルリ ン酸エステル（シグマ）から生成したパラニトロフェノールの吸光度は、４０５ ｎｍの測定により行った。精製ヒトＩ型コラーゲン（ジャックボーイ研究所（In stitut Jacques Boy）、フランス）の検量線を用いて、吸光度よりコラーゲンの ナノグラム量が得られる。統計 コラーゲン量（平均値±標準偏差、ｎ＝６）を、未処理のコントロール培養の コラーゲン量と比較する。０．０５以下のｐ値に関するこの比較の有意性は、ス テューデントのｔ検定により評価する。結果 コラーゲンＩの合成促進度の百分率Ａは、コントロール培養（試験生成物を含 まない）が分泌したコラーゲンＩの量Ｃ₀と、処理培養における量Ｃ_tを比較し、 次式に基づいて算出する。 結果を以下の表Ｉに示す。 表Ｉの結果より、まず、処理培養における細胞の生存度は、コントロール培養 のものと比較しても大きく変わらないことが分かる。従って、抽出物Ｉ₂は細胞 毒性を有しない。 この表では、繊維芽細胞のコラーゲンＩ分泌量は、ｎｇ／１００００細胞／４ ８時間の単位で表している。 表Ｉより、ベルトレティア・エクセルサのメタノールによる抽出物は、繊維芽 細胞によるコラーゲンＩ合成に対して有意な促進活性を示すことが分かる。 以上より、ベルトレティア・エクセルサ抽出物は、しわを扱う場合には、皮膚 の老化の抑制を目的とし、局部的にコラーゲン合成の増加が必要な製品、又は、 皮膚瘢痕の改善のために適用することが可能である。実施例４ 本発明のベルトレティア・エクセルサの木の実の果皮からのメタノール抽出物（ 抽出物Ｉ₃）の、培養ヒト表皮ケラチン細胞によるコラーゲンIV合成に対する活 性の証明 表皮ケラチン細胞の培養 顔の美容整形中の６０歳白人女性由来のヒト表皮ケラチン細胞を、ＥＧＦ（上 皮成長因子）と脳下垂体抽出物（ギブコ、フランス）を添加したギブコ表皮ケラ チン細胞用成長培地ＳＦＭ−Ｋにて培養する。上記細胞を培養ウェル当たり３０ ０００個の割合で、このＳＦＭ−Ｋ培地に接種する。 ２４時間後に、上記接種培地を回収し、ＥＧＦと脳下垂体抽出物を含有しない こと以外は同じ基礎培地を５０分の１に希釈したＳＦＭ−Ｋ培地と取り替える。 次いで試験生成物（ＤＭＳＯ溶液）を４８時間かけて異なる濃度で加える。コン トロール培養には試験生成物の溶媒、即ちＤＭＳＯ（最終濃度は０．１％）を同 量加える。 培養上清を回収し、前掲のドュマス Ｍ．ら、メカニズム・オブ・エイジング ・アンド・デベロップメント（Mechanisms of Ageing and Development）、１９ ９４年、７３巻、１７９〜１８７頁に記述された周知のＥＬＩＳＡ法でコラーゲ ンIVを定量分析する。用いた抗ヒトコラーゲンIV抗体は、パスツール研究所、リ ヨン、フランス提供のものである。 同時に、シグマ（フランス）社製のＢＣＡキットを用いるビシンコニニン酸法 により、蛋白質の定量分析を行う。 得られた結果を以下の表IIに示す。 表IIの結果より、試験抽出物は培養ヒト表皮ケラチン細胞によるコラーゲンIV 合成を大きく促進することは明らかである。従って、それを用いることによって 、一つには、表皮−真皮接合部、真皮と表皮の間の交換部位、及び、ケラチン細 胞の分化の過程に非常に重要な部位についての構造及び特性を増強することがで きる。実施例５ ベルトレティア・エクセルサの木の実の果皮からのメタノール抽出物が有する抗 フリーラジカル活性の証明 ここでは、実施例２の抽出物Ｉ₃を用いる。この試験は、ヒポキサンチン／キ サンチンオキシダーシゼつまりＨＸ／ＸＯ系によるフリーラジカルの攻撃を受け た健常人の表皮ケラチン細胞の細胞生存度の測定に基づく。 培養内の生成物の有無に関わらず細胞生存度の増加は、Ｍ．Ｓ．ノエル−ハド ソン（M.S．Noel-Hudson）ら、インターナショナル・ジャーナル・オブ・コスメ チック・サイエンス（International Journal of Cosmetic Science）、１９９ ０年、１２巻、１０５〜１１４頁に記述された方法と類似の方法により評価する が、その文献によってその内容全てをここに含むものとする。試験手順 包皮の表皮ケラチン細胞を、ＥＧＦとウシ脳下垂体抽出物を添加したギブコ社 （フランス）製Ｋ−ＳＦＭ培地で培養する。培地は集密状態になるまでに一日置 きに取り替える。 トリプシン処理の後、９６ウェルプレートに１ウェル当たり２００００個の濃 度で上記細胞を投入する。２日間、Ｋ−ＳＦＭ培地で増殖させる。 ＨＯ／ＸＯ系（シグマ、フランス）をｐＨ７．４のハンクス液に加えたものを 、８ｍＵ ＸＵ／ｍｌと８０μｇヒポキサンチン／ｍｌの濃度で使用する。 細胞洗浄後、上記ＨＯ／ＸＯ系を添加し、１５０分間細胞と接触させたのち、 ウェルを空にし細胞を洗浄して反応を終了する。 試験生成物を含むものと含まないものの細胞生存度を上の実施例３で述べたよ うなＭＴＴ比色分析により測定する。 試験生成物、ここでは実施例２の抽出物Ｉ₃を１．２５μｇ／ｍｇ又は５μｇ ／ｍｇのＤＭＳＯ溶液で、ＨＯ／ＸＯの酸化的ストレス以前４８時間、及び、ス トレス中に投与する。 得られた結果を以下の表IIIに示す。 表IIIより以下のことが明らかになる： ａ）本実験条件下では、ＨＯ／ＸＯ系は細胞の６０％を殺し、４０％のみが残存 する。 ｂ）本発明の抽出物Ｉ₃は１．２５μｇ／ｍｌの濃度で、ＨＯ／ＸＯ系の毒性か ら表皮ケラチン細胞を強力に保護し、コントロール培養の４０％に対し、５６％ の細胞が残存する。この保護は有意差があり、本発明の抽出物Ｉ₃の抗フリーラ ジカル特性を証明するものである。 ｃ）５μｇ／ｍｌではこの特性は更に有意差が大きく、コントロールの４０％に 対し、８１％の細胞が残存する。 以上より、本発明のベルトレティア抽出物を用いると、多数の細胞が残存する ので、上記抽出物の抗フリーラジカル特性と、その肌ケアに対する有用性が明ら かとなった。 ベルトレティア・エクセルサ抽出物は、コラーゲン合成を促進する特性を持つ ので、上述したように化粧用又は薬用組成物、特に皮膚科用組成物における有効 成分として好適に用いられる。 化粧用組成物の種々の配合例を以下に示す：実施例５ 肌引き締め用マッサージゲル 水性賦形剤の一部は、カルボポールと共にゲルの部分製造に使用し、その残り は他の成分との混合に使用する。得られる溶液にゲルを加えて、マッサージゲル となるゲル化組成物を得る。 このマッサージゲル組成物は、２カ月間にわたり週に三度、胸部に用いられる 。実施例６ 肌引き締め用全身化粧水 実施例１のベルトレティア・エクセルサの樹皮の抽出物Ｉ₁ ０．５ｇ エタノール １ｇ ヒアルロン酸 ０．５ｇ 防腐剤及び所望により香料を含有する水性賦形剤 合計で１００．００ｇ 最初に抽出物を可溶化剤に溶解させ、次にヒアルロン酸が加えられた水性賦形 剤に加える。 このローションは、腹部や大腿部等のゆるみに過敏な部位に、三週間にわたり 用いることが出来る。実施例７ 抗しわ乳液 実施例１のベルトレティア・エクセルサの樹皮抽出物Ｉ₂ ０．０２５ｇ 芳香性乳化賦形剤 合計で１００．００ｇ実施例８ 治療用組成物 実施例１のベルトレティア・エクセルサの樹皮の抽出物Ｉ₁ ０．５ｇ Ｗ／Ｏ型の乳化賦形剤 合計で１００．００ｇ実施例９ 引き締め用美肌クリーム 実施例１のベルトレティア・エクセルサの幹の樹皮抽出物Ｉ₂ ０．１ｇ アシアチコサイド ０．０５ｇ アスコルビン酸リン酸塩（マグネシウム塩） ０．１ｇ プロリン ０．０５ｇ 防腐剤含有の乳化賦形剤 合計で１００．００ｇ このクリームは一日に一度か二度、三週間にわたって塗布すると、若い肌の張 りと弾力性、輝きを回復する。実施例１０ 抗老化クリーム 実施例２のベルトレティア・エクセルサの木の実の果皮抽出物Ｉ₃ ０．１ｇ アスコルビン酸リン酸マグネシウム １ｇ ヒアルロン酸 １ｇ 防腐剤含有の芳香性乳化賦形剤 合計で１００．００ｇ このクリームは一日に一度か二度、三週間にわたって首や顔の下部に局部的に 塗布すると、若い肌の張りと弾力性、輝きを回復する。実施例１１ 抗しわ用顔面ケアクリーム 実施例２のベルトレティア・エクセルサの木の実の果皮抽出物Ｉ₃ ０．１ｇ α−トコフェロール ０．０５ｇ ビタミンＣのリン酸マグネシウム塩 ０．１ｇ マデカソサイド ０．１ｇ ビタミンＡパルミテート ０．００３ｇ 防腐剤及び所望により香料を含有する水性賦形剤 合計で１００．００ｇ このクリームは従来の方法により製造し、一日に一度か二度、三週間にわたっ て顔のしわに塗布すると、しわを取り除いたり小さくしたりするので、若い肌の 張りと弾力性、輝きを回復できる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 カトリン ラヴォー フランス国 ターンクー 51430 16 グ ランド リュ (72)発明者 ジョルジュ マシオ フランス国 レインス 51100 １ アン パース デュ レバン

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． 特に抗フリーラジカル活性を有する化粧用試薬としての、特に肌ケアのた めのベルトレティア抽出物の使用。 ２． コラーゲン、特にコラーゲンＩ又はコラーゲンIVの合成促進又は抗フリー ラジカル活性を有し、特に生物力学的特性及び皮膚表面の外観だけでなく皮膚の 瘢痕の改善、皮膚の引き締め、表皮−真皮接合部の構造及び特性の増強、皮膚の 老化現象の抑制、又は、コラーゲン不足に伴う種々の病状の治療を目的とした、 化粧用又は薬用、特に皮膚科用組成物製造のための、ベルトレティア抽出物、好 ましくはベルトレティア・エクセルサ抽出物の使用。 ３． 組成物は、皮膚の老化、特にしわを抑制する効果を有し、しわの予防やそ の深さの減少を目的とする組成物である請求項１又は２記載の使用。 ４． 抽出物は、樹皮の抽出物及び木の実の抽出物、特にベルトレティア、好ま しくはベルトレティア・エクセルサの幹の樹皮の抽出物及び木の実の果皮の抽出 物からなる群より選択されるものである請求項１〜３のいずれか一項記載の使用 。 ５． ベルトレティア抽出物は、水、メタノールやエタノール等の好ましくは１ 〜４個の炭素原子を有するアルコール、クロロホルムやジクロロメタン等の好ま しくは１〜２個の炭素原子を有する塩素系溶媒、好ましくは３〜６個の炭素原子 を有する有機エステル、及び、これらの溶媒の混合物を基礎とする混合溶媒から なる群より好適に選択される極性溶媒を用いて抽出して得るものである請求項１ 〜４のいずれか一項記載の使用。 ６． 極性溶媒は、水、メタノール、エタノール、及び、これらの溶媒の混合物 を基礎とする混合溶媒からなる群より選択されるものである請求項５記載の使用 。 ７． ベルトレティア抽出物は、サポニンに富むものである請求項１〜６のいず れか一項記載の使用。 ８． 化粧学的に有効な量のベルトレティア抽出物、好ましくはベルトレティア ・エクセルサ抽出物を有効成分として含有し、前記抽出物が化粧学的に許容され る賦形剤に分散してなることを特徴とする化粧用組成物。 ９． コラーゲン、特にコラーゲンＩ又はコラーゲンIVの合成促進又は抗フリー ラジカル活性を有する薬用組成物、特に皮膚科用組成物であって、薬学的に有効 な量のベルトレティア抽出物、好ましくはベルトレティア・エクセルサ抽出物を 有効成分として含有し、前記抽出物が薬学的に許容される賦形剤に分散してなる ことを特徴とする薬用組成物。 １０． ベルトレティア抽出物、特にベルトレティア・エクセルサ抽出物の濃度 は、組成物の全重量に対して、０．０００１〜１重量％、好ましくは、０．０１ 〜０．２５重量％である請求項８又は９記載の組成物。 １１． 抽出物は、樹皮の抽出物及び木の実の抽出物、特にベルトレティア、好 ましくはベルトレティア・エクセルサの幹の樹皮の抽出物及び木の実の果皮の抽 出物からなる群より選択されるものである請求項８〜１０のいずれか一項記載の 組成物。 １２． ベルトレティア抽出物、特にベルトレティア・エクセルサ抽出物は、水 、メタノールやエタノール等の好ましくは１〜４個の炭素原子を有するアルコー ル、クロロホルムやジクロロメタン等の好ましくは１〜２個の炭素原子を有する 塩素系溶媒、好ましくは３〜６個の炭素原子を有する有機エステル、及び、これ らの溶媒の混合物を基礎とする混合溶媒からなる群より好適に選択される極性溶 媒を用いて抽出して得るものである請求項８〜１１のいずれか一項記載の組成物 。 １３． 極性溶媒は、水、メタノール、エタノール、及び、これらの溶媒の混合 物を基礎とする混合溶媒からなる群より選択されるものである請求項１２記載の 組成物。 １４． ベルトレティア抽出物は、サポニンに富むものである請求項８〜１３の いずれか一項記載の組成物。 １５． アスコルビン酸、マデカシン酸、アシアチン酸、マデカソサイド、アシ アチコサイド、α−１−プロテイナーゼ阻害剤、レチノイン酸等のコラゲナーゼ 阻害剤、エラスターゼ阻害剤、リジン、プロリン、２−オキソグルタレート及び ジンセノサイドＲ₀からなる群より選択される有効物質を更に含有する請求項８ 〜１４のいずれか一項記載の組成物。 １６． 好ましくは化粧学的に許容される賦形剤に分散されたベルトレティア抽 出物、特にベルトレティア・エクセルサ抽出物の化粧学的に有効な量を、人体に 外用として局部的に塗布することを特徴とする化粧治療方法。 １７． ベルトレティア抽出物、特にベルトレティア・エクセルサ抽出物は、ベ ルトレティア抽出物、特にベルトレティア・エクセルサ抽出物を、目的組成物の 全重量に対して、０．０００１〜１重量％、好ましくは、０．０１〜０．２５重 量％の濃度で含有する組成物中に存在するものである請求項１６記載の方法。 １８． 皮膚の瘢痕改善、皮膚の老化現象の抑制、しわの予防若しくはその深さ の減少、皮膚の引き締め、又は、表皮−真皮接合部の構造及び特性の増強のため の、コラーゲン、特にコラーゲンＩ又はコラーゲンIVの合成促進又は抗フリーラ ジカル活性を有する化粧治療からなる請求項１６又は１７記載の方法。