JPH11130676A - テロメラーゼ阻害剤 - Google Patents
テロメラーゼ阻害剤Info
- Publication number
- JPH11130676A JPH11130676A JP24438698A JP24438698A JPH11130676A JP H11130676 A JPH11130676 A JP H11130676A JP 24438698 A JP24438698 A JP 24438698A JP 24438698 A JP24438698 A JP 24438698A JP H11130676 A JPH11130676 A JP H11130676A
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- JP
- Japan
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- isothiazolin
- fluorophenyl
- chloro
- compound
- telomerase
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- Pending
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- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 新たなテロメラーゼ阻害剤を提供すること。
【解決手段】 一般式（１）
【化１】
（式中、Ｘは硫黄原子など、Ｒ１およびＲ２は、水素原
子など、Ｒ３〜Ｒ７は、水素原子、ハロゲン原子、炭素
数１〜３のハロアルキル基などを表す。）で示される化
合物またはその薬学的に許容し得る塩を含有するテロメ
ラーゼ阻害剤。
子など、Ｒ３〜Ｒ７は、水素原子、ハロゲン原子、炭素
数１〜３のハロアルキル基などを表す。）で示される化
合物またはその薬学的に許容し得る塩を含有するテロメ
ラーゼ阻害剤。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、３−イソチアゾロ
ンもしくは３−イソオキサゾロン誘導体を含有する、テ
ロメラーゼ阻害剤に関する。
ンもしくは３−イソオキサゾロン誘導体を含有する、テ
ロメラーゼ阻害剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】テロメラーゼは、テロメア末端（直鎖状
染色体の末端部分）の伸長を触媒する酵素として知られ
ており、数多くの研究がなされている（Ｇｒｅｉｄｅｒ
Ｃ．Ｗ．ａｎｄ Ｂｌａｃｋｂｕｒｎ Ｅ．Ｈ．，
（１９８７）Ｃｅｌｌ，５１，８８７−８９８；Ｍｏｒ
ｉｎ Ｇ．Ｂ．（１９８９）Ｃｅｌｌ，５９，５２１−
５２９）。
染色体の末端部分）の伸長を触媒する酵素として知られ
ており、数多くの研究がなされている（Ｇｒｅｉｄｅｒ
Ｃ．Ｗ．ａｎｄ Ｂｌａｃｋｂｕｒｎ Ｅ．Ｈ．，
（１９８７）Ｃｅｌｌ，５１，８８７−８９８；Ｍｏｒ
ｉｎ Ｇ．Ｂ．（１９８９）Ｃｅｌｌ，５９，５２１−
５２９）。
【０００３】テロメラーゼの活性は、造血幹細胞など一
部の細胞を除き、正常細胞では検出されない。一方、ほ
とんどのがん細胞では強いテロメラーゼ活性が検出され
ることから、テロメラーゼが細胞の不死化やがん細胞の
無限増殖の維持に関与していると考えられる。したがっ
て、テロメラーゼの阻害剤は、正常細胞に対する副作用
の少ない制がん剤、あるいは、テロメラーゼを含有する
不死化細胞の増殖抑制剤として期待することができる
（Ｃｏｕｎｔｅｒ Ｃ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．，（１９８
９）ＥＭＢＯ Ｊ．，１１，１９２１−１９２９；Ｃｏ
ｕｎｔｅｒ Ｃ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．，（１９９４）Ｐｒ
ｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９１，２
９００−２９０４；Ｃｈａｄｅｎｅａｕ Ｃ．ｅｔ ａ
ｌ．，（１９９５）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５５，２
５３３−２５３６；Ｈｉｙａｍａ Ｅ．ｅｔ ａｌ．，
（１９９５）Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ．，２４９−２５
５，Ｓｈａｙ Ｊ．Ｗ．ｅｔ ａｌ．，（１９９５）Ｍ
ｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，１５．，４２５−４３
２）。
部の細胞を除き、正常細胞では検出されない。一方、ほ
とんどのがん細胞では強いテロメラーゼ活性が検出され
ることから、テロメラーゼが細胞の不死化やがん細胞の
無限増殖の維持に関与していると考えられる。したがっ
て、テロメラーゼの阻害剤は、正常細胞に対する副作用
の少ない制がん剤、あるいは、テロメラーゼを含有する
不死化細胞の増殖抑制剤として期待することができる
（Ｃｏｕｎｔｅｒ Ｃ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．，（１９８
９）ＥＭＢＯ Ｊ．，１１，１９２１−１９２９；Ｃｏ
ｕｎｔｅｒ Ｃ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．，（１９９４）Ｐｒ
ｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９１，２
９００−２９０４；Ｃｈａｄｅｎｅａｕ Ｃ．ｅｔ ａ
ｌ．，（１９９５）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５５，２
５３３−２５３６；Ｈｉｙａｍａ Ｅ．ｅｔ ａｌ．，
（１９９５）Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ．，２４９−２５
５，Ｓｈａｙ Ｊ．Ｗ．ｅｔ ａｌ．，（１９９５）Ｍ
ｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，１５．，４２５−４３
２）。
【０００４】現在、テロメラーゼを阻害する化合物とし
ては、核酸系の抗ウイルス剤であるアジドチミジンなど
が知られているが、特異性等の点で問題があるとされる
（Ｙｅｇｏｒｏｖ Ｙ．Ｅ．，Ｃｈｅｒｎｏｖ Ｄ．
Ｎ．，Ａｋｉｍｏｖ Ｓ．Ｓ．，ｅｔ ａｌ．（１９９
６）ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．３８９，１１５−１１８；香
川靖雄，（１９９７）最新医学，５２，３０６−３１
２）。また、最近、２，６−ジアミドアントラキノン化
合物がテロメラーゼを阻害することが報告された（Ｓｕ
ｎ Ｄ．，Ｔｈｏｍｐｓｏｎ Ｂ．，ｅｔ ａｌ．，
（１９９７）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４０，２１１３
−２１１６）。しかし、その阻害活性は、満足できるも
のではなく、より優れたテロメラーゼ阻害作用を有する
薬剤が求められる。
ては、核酸系の抗ウイルス剤であるアジドチミジンなど
が知られているが、特異性等の点で問題があるとされる
（Ｙｅｇｏｒｏｖ Ｙ．Ｅ．，Ｃｈｅｒｎｏｖ Ｄ．
Ｎ．，Ａｋｉｍｏｖ Ｓ．Ｓ．，ｅｔ ａｌ．（１９９
６）ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．３８９，１１５−１１８；香
川靖雄，（１９９７）最新医学，５２，３０６−３１
２）。また、最近、２，６−ジアミドアントラキノン化
合物がテロメラーゼを阻害することが報告された（Ｓｕ
ｎ Ｄ．，Ｔｈｏｍｐｓｏｎ Ｂ．，ｅｔ ａｌ．，
（１９９７）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４０，２１１３
−２１１６）。しかし、その阻害活性は、満足できるも
のではなく、より優れたテロメラーゼ阻害作用を有する
薬剤が求められる。
【０００５】ところで、３−イソチアゾロンおよび３−
イソオキサゾロン誘導体には、多くの公知物質があり、
その用途としては、抗細菌、抗真菌、写真感光材料、抗
炎症、鎮痛、抗変形性関節炎などが知られている。しか
し、これら誘導体は、テロメラーゼ阻害剤、制がん剤、
あるいは、テロメラーゼ含有不死化細胞の増殖抑制剤と
しては全く知られていない。
イソオキサゾロン誘導体には、多くの公知物質があり、
その用途としては、抗細菌、抗真菌、写真感光材料、抗
炎症、鎮痛、抗変形性関節炎などが知られている。しか
し、これら誘導体は、テロメラーゼ阻害剤、制がん剤、
あるいは、テロメラーゼ含有不死化細胞の増殖抑制剤と
しては全く知られていない。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、３−
イソチアゾロンもしくは３−イソオキサゾロン誘導体を
含有するテロメラーゼ阻害剤を提供することである。
イソチアゾロンもしくは３−イソオキサゾロン誘導体を
含有するテロメラーゼ阻害剤を提供することである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】かかる状況にあって、本
発明者らは、優れたテロメラーゼ阻害作用を有する化合
物の開発を目的として鋭意研究を重ねた結果、一般式
（１）で表される３−イソチアゾロンもしくは３−イソ
オキサゾロン誘導体が、優れたテロメラーゼ阻害作用を
有することを見いだし、この知見に基づいて本発明を完
成させた。すなわち、本発明は、一般式（１）
発明者らは、優れたテロメラーゼ阻害作用を有する化合
物の開発を目的として鋭意研究を重ねた結果、一般式
（１）で表される３−イソチアゾロンもしくは３−イソ
オキサゾロン誘導体が、優れたテロメラーゼ阻害作用を
有することを見いだし、この知見に基づいて本発明を完
成させた。すなわち、本発明は、一般式（１）
【０００８】
【化４】
【０００９】（式中、Ｘは、硫黄原子または酸素原子を
表し；Ｒ1およびＲ2は、それぞれ独立して、水素原子、
ハロゲン原子、または炭素数１〜３の直鎖もしくは分岐
鎖状のアルキル基を表し；Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6およびＲ
7は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、炭
素数１〜３のハロアルキル基、シアノ基、−ＣＯＯ
Ｒ8、−ＳＲ9、または−ＯＲ10、を表し；Ｒ8、Ｒ9、Ｒ
10は、それぞれ独立して、炭素数１〜３の直鎖もしくは
分岐鎖状のアルキル基を表す。）で示される化合物を含
有する、制がん剤、テロメラーゼ阻害剤、もしくはテロ
メラーゼ含有不死化細胞の増殖抑制剤を提供するもので
ある。
表し；Ｒ1およびＲ2は、それぞれ独立して、水素原子、
ハロゲン原子、または炭素数１〜３の直鎖もしくは分岐
鎖状のアルキル基を表し；Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6およびＲ
7は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、炭
素数１〜３のハロアルキル基、シアノ基、−ＣＯＯ
Ｒ8、−ＳＲ9、または−ＯＲ10、を表し；Ｒ8、Ｒ9、Ｒ
10は、それぞれ独立して、炭素数１〜３の直鎖もしくは
分岐鎖状のアルキル基を表す。）で示される化合物を含
有する、制がん剤、テロメラーゼ阻害剤、もしくはテロ
メラーゼ含有不死化細胞の増殖抑制剤を提供するもので
ある。
【００１０】一般式（１）で示される化合物の定義にお
いて、Ｘは、上記のような定義を有するが、硫黄原子が
好ましい。
いて、Ｘは、上記のような定義を有するが、硫黄原子が
好ましい。
【００１１】Ｒ1およびＲ2におけるハロゲン原子とは、
フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を示
す。
フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を示
す。
【００１２】Ｒ1およびＲ2における炭素数１〜３の直鎖
もしくは分岐鎖状のアルキル基とは、メチル基、エチル
基、プロピル基、イソプロピル基を示す。
もしくは分岐鎖状のアルキル基とは、メチル基、エチル
基、プロピル基、イソプロピル基を示す。
【００１３】Ｒ1およびＲ2は、同一であっても異なって
いてもよいが、Ｒ1としては水素原子が好ましく、Ｒ2と
しては水素原子が好ましい。
いてもよいが、Ｒ1としては水素原子が好ましく、Ｒ2と
しては水素原子が好ましい。
【００１４】Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6およびＲ7における、
ハロゲン原子とは、上記と同じ意味であり、フッ素原子
が好ましい。
ハロゲン原子とは、上記と同じ意味であり、フッ素原子
が好ましい。
【００１５】Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6およびＲ7における、
炭素数１〜３のハロアルキル基のアルキル基とは、上記
と同じ意味であり、メチル基が好ましい。
炭素数１〜３のハロアルキル基のアルキル基とは、上記
と同じ意味であり、メチル基が好ましい。
【００１６】Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6およびＲ7における、
炭素数１〜３のハロアルキル基のハロゲン原子とは、上
記と同じ意味であり、１もしくは２以上のハロゲン原子
で置換されていてもよく、また、２以上置換されている
場合には、同一のハロゲン原子であっても異なるハロゲ
ン原子であってもよい。
炭素数１〜３のハロアルキル基のハロゲン原子とは、上
記と同じ意味であり、１もしくは２以上のハロゲン原子
で置換されていてもよく、また、２以上置換されている
場合には、同一のハロゲン原子であっても異なるハロゲ
ン原子であってもよい。
【００１７】Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6およびＲ7における、
炭素数１〜３のハロアルキル基としては、トリフルオロ
メチル基が好ましい。
炭素数１〜３のハロアルキル基としては、トリフルオロ
メチル基が好ましい。
【００１８】Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10における、炭素数１〜３の
直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基とは、上記と同じ意
味であり、メチル基、エチル基が好ましい。
直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基とは、上記と同じ意
味であり、メチル基、エチル基が好ましい。
【００１９】Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6およびＲ7における、
−ＣＯＯＲ8としては、Ｒ8がエチル基である場合が好ま
しい。
−ＣＯＯＲ8としては、Ｒ8がエチル基である場合が好ま
しい。
【００２０】Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6およびＲ7における、
−ＳＲ9としては、Ｒ9がメチル基である場合が好まし
い。
−ＳＲ9としては、Ｒ9がメチル基である場合が好まし
い。
【００２１】Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6およびＲ7における、
−ＯＲ10としては、Ｒ10がメチル基である場合が好まし
い。
−ＯＲ10としては、Ｒ10がメチル基である場合が好まし
い。
【００２２】Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6およびＲ7は、同一で
あっても異なっていてもよい。また、これらのうち、い
ずれか１〜３個が水素原子以外の上記の置換基である場
合が好ましい。
あっても異なっていてもよい。また、これらのうち、い
ずれか１〜３個が水素原子以外の上記の置換基である場
合が好ましい。
【００２３】Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6およびＲ7としては、
水素原子、フッ素原子、トリフルオロメチル基、エトキ
シカルボニル基、シアノ基、メチルチオ基が好ましい。
水素原子、フッ素原子、トリフルオロメチル基、エトキ
シカルボニル基、シアノ基、メチルチオ基が好ましい。
【００２４】それぞれの置換基は上記のような定義を有
するが、一般式（１）で示される化合物としては、２−
（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−４−イソチア
ゾリン−３−オン、２−（３−クロロ−２−フルオロフ
ェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、４−ブロモ
−２−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−４−イ
ソチアゾリン−３−オン、２−（３−トリフルオロメチ
ルフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−
（２，３，４−トリフルオロフェニル）−４−イソチア
ゾリン−３−オン、２−（４−エトキシカルボニルフェ
ニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−（４−シ
アノ−３−メチルチオフェニル）−４−イソチアゾリン
−３−オン、が好ましく、２−（３−クロロ−４−フル
オロフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−
（３−クロロ−２−フルオロフェニル）−４−イソチア
ゾリン−３−オン、４−ブロモ−２−（３−クロロ−４
−フルオロフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オ
ン、２−（３−トリフルオロメチルフェニル）−４−イ
ソチアゾリン−３−オン、２−（２，３，４−トリフル
オロフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−
（４−エトキシカルボニルフェニル）−４−イソチアゾ
リン−３−オン、が特に好ましい。
するが、一般式（１）で示される化合物としては、２−
（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−４−イソチア
ゾリン−３−オン、２−（３−クロロ−２−フルオロフ
ェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、４−ブロモ
−２−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−４−イ
ソチアゾリン−３−オン、２−（３−トリフルオロメチ
ルフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−
（２，３，４−トリフルオロフェニル）−４−イソチア
ゾリン−３−オン、２−（４−エトキシカルボニルフェ
ニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−（４−シ
アノ−３−メチルチオフェニル）−４−イソチアゾリン
−３−オン、が好ましく、２−（３−クロロ−４−フル
オロフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−
（３−クロロ−２−フルオロフェニル）−４−イソチア
ゾリン−３−オン、４−ブロモ−２−（３−クロロ−４
−フルオロフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オ
ン、２−（３−トリフルオロメチルフェニル）−４−イ
ソチアゾリン−３−オン、２−（２，３，４−トリフル
オロフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−
（４−エトキシカルボニルフェニル）−４−イソチアゾ
リン−３−オン、が特に好ましい。
【００２５】また、本願発明における、薬学的に許容し
得る塩とは、例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素
酸、燐酸、硝酸、硫酸等の無機酸の塩、または、酢酸、
シュウ酸、マレイン酸、フマル酸、クエン酸、酒石酸等
の有機酸塩をいうが、この例示に制限されるものではな
い。なお、本願発明における化合物のうち、２−（３−
クロロー４−フルオロフェニル）−４−イソチアゾリン
−３−オン、２−（３−クロロ−２−フルオロフェニ
ル）−４−イソチアゾリン−３−オン、４−ブロモ−２
−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−４−イソチ
アゾリン−３−オン、２−（３−トリフルオロメチルフ
ェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、および２−
（４−シアノ−３−メチルチオフェニル）−４−イソチ
アゾリン−３−オンは、文献に未記載の化合物であり、
また、医薬としても知られていない。
得る塩とは、例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素
酸、燐酸、硝酸、硫酸等の無機酸の塩、または、酢酸、
シュウ酸、マレイン酸、フマル酸、クエン酸、酒石酸等
の有機酸塩をいうが、この例示に制限されるものではな
い。なお、本願発明における化合物のうち、２−（３−
クロロー４−フルオロフェニル）−４−イソチアゾリン
−３−オン、２−（３−クロロ−２−フルオロフェニ
ル）−４−イソチアゾリン−３−オン、４−ブロモ−２
−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−４−イソチ
アゾリン−３−オン、２−（３−トリフルオロメチルフ
ェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、および２−
（４−シアノ−３−メチルチオフェニル）−４−イソチ
アゾリン−３−オンは、文献に未記載の化合物であり、
また、医薬としても知られていない。
【００２６】
【発明の実施の形態】本発明の制がん剤、テロメラーゼ
阻害剤、あるいはテロメラーゼ含有不死化細胞の増殖抑
制剤に含まれる化合物は、公知の化合物であって商業的
に入手可能であるか、または、以下に記載するような常
法によって製造することができる。
阻害剤、あるいはテロメラーゼ含有不死化細胞の増殖抑
制剤に含まれる化合物は、公知の化合物であって商業的
に入手可能であるか、または、以下に記載するような常
法によって製造することができる。
【００２７】３−イソチアゾロン誘導体は、例えば、
３、３’−ジチオジプロピオン酸アミド誘導体から製造
する場合には、例えば、Ｌｅｗｉｓ Ｓ．Ｎ．ａｎｄ
Ｍｉｌｌｅｒ Ｇ．Ａ． ｅｔ ａｌ．，（１９７１）
Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｈｅｍ．，８，５７１−
５８０に記載の方法によって製造することができ、シス
−３−チオ置換アクリルアミド誘導体から製造する場合
には、例えば、ＣｒｏｗＷ．Ｄ．ａｎｄ Ｌｅｏｎａｒ
ｄ Ｎ．Ｊ．，（１９６４）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ
Ｌｅｔｔ．，２３，１４７７−１４８０、Ｃｒｏｗ
Ｗ．Ｄ．ａｎｄＬｅｏｎａｒｄ Ｎ．Ｊ．，（１９６
５）Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，３０，２６６０−２６６
５ もしくは、Ｈａｒｗｏｏｄ Ｌ．Ｍ．ｅｔ ａ
ｌ．，（１９９４）Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｐｅｒｋ
ｉｎ Ｔｒａｎｓ．１，１６，２２４５−２２５１に記
載の方法によって製造することができ、γ−ケトアミド
誘導体から製造する場合には、例えば、Ｓａｎｄｒｉｓ
Ｃ．ｅｔ ａｌ．，（１９８７）Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃ
ｌｅｓ，２５，５６９−５７５に記載の方法によって製
造することができ、β−チオケトアミド誘導体から製造
する場合には、例えば、Ｇｏｅｒｄｅｌｅｒ Ｊ．ａｎ
ｄ Ｍｉｔｔｌｅｒ Ｗ．，（１９６３）Ｃｈｅｍ．Ｂ
ｅｒ．，９６，９４４−９５４に記載の方法によって製
造することができる。また、４位および（または）５位
ハロゲン置換３−イソチアゾロン誘導体を相当する３−
イソチアゾロン誘導体から製造する場合には、例えば、
ＬｅｗｉｓＳ．Ｎ．ｅｔ ａｌ．，（１９７１）Ｊ．Ｈ
ｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｈｅｍ．，８，５７１−５８
０、もしくはＭｉｌｌｅｒ Ｇ．Ａ．ｅｔ ａｌ．，
（１９７７）Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｈｅｍ．，
１４，６２７−６３０に記載の方法によって製造するこ
とができる。
３、３’−ジチオジプロピオン酸アミド誘導体から製造
する場合には、例えば、Ｌｅｗｉｓ Ｓ．Ｎ．ａｎｄ
Ｍｉｌｌｅｒ Ｇ．Ａ． ｅｔ ａｌ．，（１９７１）
Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｈｅｍ．，８，５７１−
５８０に記載の方法によって製造することができ、シス
−３−チオ置換アクリルアミド誘導体から製造する場合
には、例えば、ＣｒｏｗＷ．Ｄ．ａｎｄ Ｌｅｏｎａｒ
ｄ Ｎ．Ｊ．，（１９６４）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ
Ｌｅｔｔ．，２３，１４７７−１４８０、Ｃｒｏｗ
Ｗ．Ｄ．ａｎｄＬｅｏｎａｒｄ Ｎ．Ｊ．，（１９６
５）Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，３０，２６６０−２６６
５ もしくは、Ｈａｒｗｏｏｄ Ｌ．Ｍ．ｅｔ ａ
ｌ．，（１９９４）Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｐｅｒｋ
ｉｎ Ｔｒａｎｓ．１，１６，２２４５−２２５１に記
載の方法によって製造することができ、γ−ケトアミド
誘導体から製造する場合には、例えば、Ｓａｎｄｒｉｓ
Ｃ．ｅｔ ａｌ．，（１９８７）Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃ
ｌｅｓ，２５，５６９−５７５に記載の方法によって製
造することができ、β−チオケトアミド誘導体から製造
する場合には、例えば、Ｇｏｅｒｄｅｌｅｒ Ｊ．ａｎ
ｄ Ｍｉｔｔｌｅｒ Ｗ．，（１９６３）Ｃｈｅｍ．Ｂ
ｅｒ．，９６，９４４−９５４に記載の方法によって製
造することができる。また、４位および（または）５位
ハロゲン置換３−イソチアゾロン誘導体を相当する３−
イソチアゾロン誘導体から製造する場合には、例えば、
ＬｅｗｉｓＳ．Ｎ．ｅｔ ａｌ．，（１９７１）Ｊ．Ｈ
ｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｈｅｍ．，８，５７１−５８
０、もしくはＭｉｌｌｅｒ Ｇ．Ａ．ｅｔ ａｌ．，
（１９７７）Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｈｅｍ．，
１４，６２７−６３０に記載の方法によって製造するこ
とができる。
【００２８】３−イソオキサゾロン誘導体は、例えば、
ヒドロキシルアミン誘導体とジケテンもしくはβ−ケト
酸誘導体から製造する場合には、例えば、Ｙｏｎｅｍｉ
ｔｓｕ Ｏ．（１９８２）Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ，
１９，５２１−５２４、Ｊａｃｏｂｓｅｎ Ｎ．（１９
８４）Ｃａｎ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．，６２，１９４０−１９
４４ もしくは、Ｄｅｍｏｕｔｅ Ｊ．Ｐ．，（１９８
０）Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｈｅｍ．，１７，７
２７−７３１に記載の方法によって製造することがで
き、ヒドロキシルアミン誘導体とプロピオール酸誘導体
から製造する場合には、例えば、Ｎａｋａｍｕｒａ
Ｎ．ｅｔ ａｌ．（１９６６）Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．
Ｂｕｌｌ．，１４，１２７７−１２８６、もしくはＩｓ
ｈｉｄａ Ｎ．ｅｔ ａｌ．，（１９７１）Ｃｈｅｍ．
Ｐｈａｒｍ． Ｂｕｌｌ．，１９，１３８９−１３９
４に記載の方法によって製造することができ、３−ヒド
ロキシイソオキサゾロン誘導体から２−置換−３−イソ
オキサゾロン誘導体を製造する場合には、例えば、Ｍｕ
ｒａｋａｍｉ Ｔ．ｅｔ ａｌ．，（１９７９）Ｃｈｅ
ｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，２７，２３９８−２４０
４に記載の方法によって製造することができる。
ヒドロキシルアミン誘導体とジケテンもしくはβ−ケト
酸誘導体から製造する場合には、例えば、Ｙｏｎｅｍｉ
ｔｓｕ Ｏ．（１９８２）Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ，
１９，５２１−５２４、Ｊａｃｏｂｓｅｎ Ｎ．（１９
８４）Ｃａｎ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．，６２，１９４０−１９
４４ もしくは、Ｄｅｍｏｕｔｅ Ｊ．Ｐ．，（１９８
０）Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｈｅｍ．，１７，７
２７−７３１に記載の方法によって製造することがで
き、ヒドロキシルアミン誘導体とプロピオール酸誘導体
から製造する場合には、例えば、Ｎａｋａｍｕｒａ
Ｎ．ｅｔ ａｌ．（１９６６）Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．
Ｂｕｌｌ．，１４，１２７７−１２８６、もしくはＩｓ
ｈｉｄａ Ｎ．ｅｔ ａｌ．，（１９７１）Ｃｈｅｍ．
Ｐｈａｒｍ． Ｂｕｌｌ．，１９，１３８９−１３９
４に記載の方法によって製造することができ、３−ヒド
ロキシイソオキサゾロン誘導体から２−置換−３−イソ
オキサゾロン誘導体を製造する場合には、例えば、Ｍｕ
ｒａｋａｍｉ Ｔ．ｅｔ ａｌ．，（１９７９）Ｃｈｅ
ｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，２７，２３９８−２４０
４に記載の方法によって製造することができる。
【００２９】
【試験例】以下に、本発明の有用性を示すために、本発
明に包含される代表的化合物のテロメラーゼ阻害作用に
関する試験結果を示す。表１に、対応する化合物の化学
構造式を示す。
明に包含される代表的化合物のテロメラーゼ阻害作用に
関する試験結果を示す。表１に、対応する化合物の化学
構造式を示す。
【００３０】
【表１】
【００３１】
【試験例１】 ＴＲＡＰ−ＳＰＡ法による、化合物のヒ
トテロメラーゼ阻害活性評価材料及び方法 （１）細胞抽出物の調製 細胞抽出物は、公知の方法（Ｋｉｍ Ｎ．Ｗ．ｅｔ ａ
ｌ．（１９９４）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２０６，２０１１−
２０１５）にいくつかの改良を加えて調製した。すなわ
ち、ヒト前白血病細胞株ＨＬ−６０を培養し、対数増殖
期にある細胞を２０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細
胞を回収した。氷冷のＰＢＳで２回洗浄し、氷冷のＲＮ
ａｓｅを含まない洗浄用緩衝液（１０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ
ｐＨ７．５，１ｍＭ ＭｇＣｌ2，１０ｍＭ ＫＣ
ｌ，及び１ｍＭ ＤＴＴ）で１回洗浄した。細胞のペレ
ットを、ＲＮａｓｅを含まない溶液緩衝液（１０ｍＭ
Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ７．５，１ｍＭ ＭｇＣｌ2，
１ｍＭ ＥＧＴＡ，０．１ｍＭ ＰＭＳＦ，５ｍＭ β
−メルカプトエタノール，０．５％ ＣＨＡＰＳ（Ｃｈ
ｏｌｏａｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌ−ｄｉｍｅｔｈｙｌ−ａ
ｍｍｏｎｉｏ−１−ｐｒｏｐａｎｅｓｕｌｆｏｎａｔ
ｅ），及び１０％ グリセロール）中に５×１０3細胞
／μｌで再懸濁した。軽く攪拌し、氷上で３０分間イン
キュベートした後、１５，０００ｒｐｍで３０分間遠心
分離することにより溶解物中の不溶物を取り除いた。上
清を小分けし、−８０℃で貯蔵した。
トテロメラーゼ阻害活性評価材料及び方法 （１）細胞抽出物の調製 細胞抽出物は、公知の方法（Ｋｉｍ Ｎ．Ｗ．ｅｔ ａ
ｌ．（１９９４）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２０６，２０１１−
２０１５）にいくつかの改良を加えて調製した。すなわ
ち、ヒト前白血病細胞株ＨＬ−６０を培養し、対数増殖
期にある細胞を２０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細
胞を回収した。氷冷のＰＢＳで２回洗浄し、氷冷のＲＮ
ａｓｅを含まない洗浄用緩衝液（１０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ
ｐＨ７．５，１ｍＭ ＭｇＣｌ2，１０ｍＭ ＫＣ
ｌ，及び１ｍＭ ＤＴＴ）で１回洗浄した。細胞のペレ
ットを、ＲＮａｓｅを含まない溶液緩衝液（１０ｍＭ
Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ７．５，１ｍＭ ＭｇＣｌ2，
１ｍＭ ＥＧＴＡ，０．１ｍＭ ＰＭＳＦ，５ｍＭ β
−メルカプトエタノール，０．５％ ＣＨＡＰＳ（Ｃｈ
ｏｌｏａｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌ−ｄｉｍｅｔｈｙｌ−ａ
ｍｍｏｎｉｏ−１−ｐｒｏｐａｎｅｓｕｌｆｏｎａｔ
ｅ），及び１０％ グリセロール）中に５×１０3細胞
／μｌで再懸濁した。軽く攪拌し、氷上で３０分間イン
キュベートした後、１５，０００ｒｐｍで３０分間遠心
分離することにより溶解物中の不溶物を取り除いた。上
清を小分けし、−８０℃で貯蔵した。
【００３２】（２）プライマーの合成 ＴＳプライマー（配列：５’−ＡＡＴＣＣＧＴＣＧＡＧ
ＣＡＧＡＧＴＴ−３’）、非ビオチン化及びビオチン化
ＣＸプライマー（配列：５’−ＣＣＣＴＴＡＣＣＣＴＴ
ＡＣＣＣＴＴＡＣＣＣＴＡＡ−３’）は（株）サワディ
ー・テクノロジーより得た。
ＣＡＧＡＧＴＴ−３’）、非ビオチン化及びビオチン化
ＣＸプライマー（配列：５’−ＣＣＣＴＴＡＣＣＣＴＴ
ＡＣＣＣＴＴＡＣＣＣＴＡＡ−３’）は（株）サワディ
ー・テクノロジーより得た。
【００３３】（３）ペプチド核酸の合成 ペプチド核酸（配列：Ｎ−ＴＡＧＧＧＴＴＡＧＡＣＡＡ
−Ｃ）は、日本パーセプティブ（株）より得た。
−Ｃ）は、日本パーセプティブ（株）より得た。
【００３４】（４）テロメラーゼ活性測定 テロメラーゼ活性測定は、公知の方法である、テロメリ
ック リピート アンプリフィケーション プロトコー
ル法（ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ ｒｅｐｅａｔ ａｍｐｌｉ
ｆｉｃａｔｉｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｌ、以下、「ＴＲＡ
Ｐ法」という。；Ｋｉｍ Ｎ．Ｗ．ｅｔ ａｌ．（１９
９４）Ｓｃｉｎｅｃｅ ２０６，２０１１−２０１５；
Ｐｉａｔｙｓｚｅｋ ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｍｅｔ
ｈ．Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ．１７，１−１５）とシンチレー
ション近接アッセイ（ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ ｐ
ｒｏｘｉｍｉｔｙ ａｓｓａｙ；以下、「ＳＰＡ」とい
う。）技術とを組合わせたシステム（以下、「ＴＲＡＰ
−ＳＰＡ法」という。；日本特許出願 特願平８−１７
８３０に記載された方法である。）にいくつかの改良を
加えて行った。ＴＲＡＰ−ＳＰＡ法は、テロメラーゼに
より伸張されたプライマーをポリメラーゼ連鎖反応によ
り増幅する際に取り込まれるトリチウムラベルされたチ
ミジン量をＡｍｅｒｓｈａｍ社によって開発されたシン
チレーション近接アッセイ技術により測定する方法であ
る。具体的には、以下のように操作を行った。
ック リピート アンプリフィケーション プロトコー
ル法（ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ ｒｅｐｅａｔ ａｍｐｌｉ
ｆｉｃａｔｉｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｌ、以下、「ＴＲＡ
Ｐ法」という。；Ｋｉｍ Ｎ．Ｗ．ｅｔ ａｌ．（１９
９４）Ｓｃｉｎｅｃｅ ２０６，２０１１−２０１５；
Ｐｉａｔｙｓｚｅｋ ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｍｅｔ
ｈ．Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ．１７，１−１５）とシンチレー
ション近接アッセイ（ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ ｐ
ｒｏｘｉｍｉｔｙ ａｓｓａｙ；以下、「ＳＰＡ」とい
う。）技術とを組合わせたシステム（以下、「ＴＲＡＰ
−ＳＰＡ法」という。；日本特許出願 特願平８−１７
８３０に記載された方法である。）にいくつかの改良を
加えて行った。ＴＲＡＰ−ＳＰＡ法は、テロメラーゼに
より伸張されたプライマーをポリメラーゼ連鎖反応によ
り増幅する際に取り込まれるトリチウムラベルされたチ
ミジン量をＡｍｅｒｓｈａｍ社によって開発されたシン
チレーション近接アッセイ技術により測定する方法であ
る。具体的には、以下のように操作を行った。
【００３５】テロメラーゼによるＤＮＡ合成反応は、細
胞抽出物（１０００〜３０００細胞相当）並びに適当な
濃度の被験化合物を含む２５μｌの最終反応混合物中
（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ８．３，１．５ｍ
Ｍ ＭｇＣｌ2，６３ｍＭ ＫＣｌ，０．００５％ Ｔ
ｗｅｅｎ２０，１ｍＭ ＥＧＴＡ，それぞれ５０μＭの
ｄＡＴＰ，ｄＣＴＰ及びｄＧＴＰ，２μＭのｄＴＴＰ，
１μＣｉ［Ｍｅ−3Ｈ］ｄＴＴＰ（Ａｍｅｒｓｈａｍ社
製，１１４Ｃｉ／ｍｍｏｌ），０．１μｇ／μｌＢＳ
Ａ，並びに９ｐｍｏｌのＴＳプライマーを含む）で室温
にて３０分間インキュベートすることにより行った。
胞抽出物（１０００〜３０００細胞相当）並びに適当な
濃度の被験化合物を含む２５μｌの最終反応混合物中
（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ８．３，１．５ｍ
Ｍ ＭｇＣｌ2，６３ｍＭ ＫＣｌ，０．００５％ Ｔ
ｗｅｅｎ２０，１ｍＭ ＥＧＴＡ，それぞれ５０μＭの
ｄＡＴＰ，ｄＣＴＰ及びｄＧＴＰ，２μＭのｄＴＴＰ，
１μＣｉ［Ｍｅ−3Ｈ］ｄＴＴＰ（Ａｍｅｒｓｈａｍ社
製，１１４Ｃｉ／ｍｍｏｌ），０．１μｇ／μｌＢＳ
Ａ，並びに９ｐｍｏｌのＴＳプライマーを含む）で室温
にて３０分間インキュベートすることにより行った。
【００３６】次に、合成されたテロメアオリゴヌクレオ
チドを増幅するために、２０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ ｐ
Ｈ ８．３、１．５ｍＭ ＭｇＣｌ2、６３ｍＭ ＫＣ
ｌ、０．００５％ Ｔｗｅｅｎ２０、１ｍＭ ＥＧＴ
Ａ、それぞれ５０μＭのｄＡＴＰ、ｄＣＴＰ及びｄＧＴ
Ｐ、２μＭのｄＴＴＰ、１μＣｉ［Ｍｅ−3Ｈ］ｄＴＴ
Ｐ（Ａｍｅｒｓｈａｍ社製，１１４Ｃｉ／ｍｍｏｌ）、
０．１μｇ／μｌ ＢＳＡ、９ｐｍｏｌのＴＳプライマ
ー、１４ｐｍｏｌのビオチン化ＣＸプライマー、並びに
２ＵのＴａｑ ＤＮＡ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（宝酒造
（株）製）を含む２５μｌの溶液を加えた。混合物を９
０℃で９０秒加熱し、続いて９４℃で１５秒、５０℃で
３０秒及び７２℃で４５秒を１サイクルとして、これを
２５サイクルでポリメラーゼ連鎖反応を行った。ポリメ
ラーゼ連鎖反応はパーキン・エルマー社製ＧｅｎｅＡｍ
ｐ ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍｓ ９６００を用いて行っ
た。
チドを増幅するために、２０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ ｐ
Ｈ ８．３、１．５ｍＭ ＭｇＣｌ2、６３ｍＭ ＫＣ
ｌ、０．００５％ Ｔｗｅｅｎ２０、１ｍＭ ＥＧＴ
Ａ、それぞれ５０μＭのｄＡＴＰ、ｄＣＴＰ及びｄＧＴ
Ｐ、２μＭのｄＴＴＰ、１μＣｉ［Ｍｅ−3Ｈ］ｄＴＴ
Ｐ（Ａｍｅｒｓｈａｍ社製，１１４Ｃｉ／ｍｍｏｌ）、
０．１μｇ／μｌ ＢＳＡ、９ｐｍｏｌのＴＳプライマ
ー、１４ｐｍｏｌのビオチン化ＣＸプライマー、並びに
２ＵのＴａｑ ＤＮＡ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（宝酒造
（株）製）を含む２５μｌの溶液を加えた。混合物を９
０℃で９０秒加熱し、続いて９４℃で１５秒、５０℃で
３０秒及び７２℃で４５秒を１サイクルとして、これを
２５サイクルでポリメラーゼ連鎖反応を行った。ポリメ
ラーゼ連鎖反応はパーキン・エルマー社製ＧｅｎｅＡｍ
ｐ ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍｓ ９６００を用いて行っ
た。
【００３７】反応産物（２０μｌ）を９６ウェルプレー
ト（Ｗａｌｌａｃ社製）に移し、２６．５μｌのストレ
プトアビジン被覆の微小粒子フルオロマイクロスフィア
ー（０．４Ｍ ＥＤＴＡ中、５ｍｇ／ｍｌの溶液）を加
え、３７℃で１０分間インキュベートし、3Ｈ標識反応
産物をストレプトアビジンビーズに結合させた。プレー
トは、ＭｉｃｒｏＢｅｔａシンチレーションカウンター
（Ｗａｌｌａｃ社製）上でカウントした。
ト（Ｗａｌｌａｃ社製）に移し、２６．５μｌのストレ
プトアビジン被覆の微小粒子フルオロマイクロスフィア
ー（０．４Ｍ ＥＤＴＡ中、５ｍｇ／ｍｌの溶液）を加
え、３７℃で１０分間インキュベートし、3Ｈ標識反応
産物をストレプトアビジンビーズに結合させた。プレー
トは、ＭｉｃｒｏＢｅｔａシンチレーションカウンター
（Ｗａｌｌａｃ社製）上でカウントした。
【００３８】（５）ポリメラーゼ連鎖反応の阻害 上述のＴＲＡＰ−ＳＰＡ法において、テロメラーゼによ
るＤＮＡ合成反応は化合物非存在下において行い、続い
て行うポリメラーゼ連鎖反応は化合物存在下で行うよう
系を置き換えた。他はすべて同様に行った。化合物を含
まない条件下で行ったポリメラーゼ連鎖反応による反応
産物のカウントと比較して、１０μＭでの化合物のポリ
メラーゼ連鎖反応阻害活性を評価した（この１０μＭ
は、テロメラーゼ阻害活性評価系において、化合物を２
０μＭの濃度で加えた際のポリメラーゼ連鎖反応系にお
ける終濃度に相当する）。
るＤＮＡ合成反応は化合物非存在下において行い、続い
て行うポリメラーゼ連鎖反応は化合物存在下で行うよう
系を置き換えた。他はすべて同様に行った。化合物を含
まない条件下で行ったポリメラーゼ連鎖反応による反応
産物のカウントと比較して、１０μＭでの化合物のポリ
メラーゼ連鎖反応阻害活性を評価した（この１０μＭ
は、テロメラーゼ阻害活性評価系において、化合物を２
０μＭの濃度で加えた際のポリメラーゼ連鎖反応系にお
ける終濃度に相当する）。
【００３９】結果 結果は、図１〜図４、及び表２に示した。図１〜４は、
化合物を含まない場合の反応産物のカウントを１００％
とし、その相対活性として種々の濃度の化合物を含む場
合のテロメラーゼ活性をプロットしたものである（各濃
度での測定は、ｎ＝４であり、その平均値をプロットし
た）。表２は、５０％阻害濃度（ＩＣ50）をまとめたも
のである。なお、化合物１〜化合物７は、いずれも、１
０μＭの濃度でポリメラーゼ連鎖反応を阻害しなかっ
た。
化合物を含まない場合の反応産物のカウントを１００％
とし、その相対活性として種々の濃度の化合物を含む場
合のテロメラーゼ活性をプロットしたものである（各濃
度での測定は、ｎ＝４であり、その平均値をプロットし
た）。表２は、５０％阻害濃度（ＩＣ50）をまとめたも
のである。なお、化合物１〜化合物７は、いずれも、１
０μＭの濃度でポリメラーゼ連鎖反応を阻害しなかっ
た。
【００４０】
【表２】
【００４１】
【試験例２】 ＴＲＡＰ法によるラダー形成を指標にし
た、化合物の阻害活性評価方法 被験化合物の効果をＴＲＡＰ法によるラダー形成に対す
る阻害から同様に評価した。すなわち、ビオチン化プラ
イマーを非ビオチン化ＣＸプラマーに置き換え、ｄＣＴ
Ｐ濃度を２０μＭに変更し、ｄＴＴＰを５０μＭに増加
し、２μＣｉの［Ｍｅ−3Ｈ］ｄＴＴＰを［α−32Ｐ］
ｄＣＴＰ（Ａｍｅｒｓｈａｍ社製、３０００Ｃｉ／ｍｍ
ｏｌ）に置き換えて試験例１と同様に操作を行った。ポ
リメラーゼ連鎖反応終了後、反応産物を、１０％ポリア
クリルアミドゲル電気泳動により分離し、ＦＵＪＩＸ
バイオ・イメージングアナライザーＢＡＳ２０００（富
士フィルム社製）を用いて、反応産物の解析を行った。
なお、化合物は、２．０もしくは２０μＭとなるよう添
加して測定を行った。
た、化合物の阻害活性評価方法 被験化合物の効果をＴＲＡＰ法によるラダー形成に対す
る阻害から同様に評価した。すなわち、ビオチン化プラ
イマーを非ビオチン化ＣＸプラマーに置き換え、ｄＣＴ
Ｐ濃度を２０μＭに変更し、ｄＴＴＰを５０μＭに増加
し、２μＣｉの［Ｍｅ−3Ｈ］ｄＴＴＰを［α−32Ｐ］
ｄＣＴＰ（Ａｍｅｒｓｈａｍ社製、３０００Ｃｉ／ｍｍ
ｏｌ）に置き換えて試験例１と同様に操作を行った。ポ
リメラーゼ連鎖反応終了後、反応産物を、１０％ポリア
クリルアミドゲル電気泳動により分離し、ＦＵＪＩＸ
バイオ・イメージングアナライザーＢＡＳ２０００（富
士フィルム社製）を用いて、反応産物の解析を行った。
なお、化合物は、２．０もしくは２０μＭとなるよう添
加して測定を行った。
【００４２】結果 結果を図５に示す。２０μＭの濃度で添加した場合に
は、いずれの化合物もラダー形成をほぼ完全に阻害し
た。２μＭの濃度では試験例１（ＴＲＡＰ−ＳＰＡ法）
においてテロメラーゼの阻害活性がより強かった３化合
物（化合物１〜化合物３）にラダー形成の阻害が観測さ
れた。化合物を含まない系でＴＲＡＰ反応を行ったもの
をレーン番号１１に、細胞抽出物を含まないでＴＲＡＰ
反応を行ったものをレーン番号１２に示した。また、テ
ロメラーゼ活性阻害の陽性対照として、ヒトテロメラー
ゼＲＮＡサブユニットの鋳型部分に対するアンチセンス
ペプチド核酸（Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃ
ｉｄ；ＰＮＡ）の効果をレーン番号９及び１０に示し
た。
は、いずれの化合物もラダー形成をほぼ完全に阻害し
た。２μＭの濃度では試験例１（ＴＲＡＰ−ＳＰＡ法）
においてテロメラーゼの阻害活性がより強かった３化合
物（化合物１〜化合物３）にラダー形成の阻害が観測さ
れた。化合物を含まない系でＴＲＡＰ反応を行ったもの
をレーン番号１１に、細胞抽出物を含まないでＴＲＡＰ
反応を行ったものをレーン番号１２に示した。また、テ
ロメラーゼ活性阻害の陽性対照として、ヒトテロメラー
ゼＲＮＡサブユニットの鋳型部分に対するアンチセンス
ペプチド核酸（Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃ
ｉｄ；ＰＮＡ）の効果をレーン番号９及び１０に示し
た。
【００４３】
【発明の効果】上述のように、一般式（１）で示される
化合物またはその薬学的に許容し得る塩は、制がん剤、
テロメラーゼ阻害剤、または、テロメラーゼ含有不死化
細胞の増殖抑制剤としての作用を有しており、医薬とし
て有用である。
化合物またはその薬学的に許容し得る塩は、制がん剤、
テロメラーゼ阻害剤、または、テロメラーゼ含有不死化
細胞の増殖抑制剤としての作用を有しており、医薬とし
て有用である。
【００４４】
【図１】化合物１についての、濃度−テロメラーゼ阻害
活性（ＴＲＡＰ−ＳＰＡ法）のプロットである。
活性（ＴＲＡＰ−ＳＰＡ法）のプロットである。
【図２】化合物２についての、濃度−テロメラーゼ阻害
活性（ＴＲＡＰ−ＳＰＡ法）のプロットである。
活性（ＴＲＡＰ−ＳＰＡ法）のプロットである。
【図３】化合物３についての、濃度−テロメラーゼ阻害
活性（ＴＲＡＰ−ＳＰＡ法）のプロットである。
活性（ＴＲＡＰ−ＳＰＡ法）のプロットである。
【図４】化合物４についての、濃度−テロメラーゼ阻害
活性（ＴＲＡＰ−ＳＰＡ法）のプロットである。
活性（ＴＲＡＰ−ＳＰＡ法）のプロットである。
【図５】化合物１〜４についての、ゲル電気泳動パター
ン（ＴＲＡＰ法）である。
ン（ＴＲＡＰ法）である。
Claims (8)
- 【請求項１】 一般式（１） 【化１】 （式中、Ｘは、硫黄原子または酸素原子を表し；Ｒ1お
よびＲ2は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原
子、または炭素数１〜３の直鎖もしくは分岐鎖状のアル
キル基を表し；Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6およびＲ7は、それ
ぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、炭素数１〜３
のハロアルキル基、シアノ基、−ＣＯＯＲ8、−ＳＲ9、
または−ＯＲ10、を表し；Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10は、それぞれ
独立して、炭素数１〜３の直鎖もしくは分岐鎖状のアル
キル基を表す。）で示される化合物またはその薬学的に
許容し得る塩を含有する制がん剤。 - 【請求項２】 一般式（１） 【化２】 （式中、ＸおよびＲ1〜Ｒ10は、請求項１で定義したと
同じ意味を表す。）で示される化合物またはその薬学的
に許容し得る塩を含有するテロメラーゼ阻害剤。 - 【請求項３】 一般式（１） 【化３】 （式中、ＸおよびＲ1〜Ｒ10は、請求項１で定義したと
同じ意味を表す。）で示される化合物またはその薬学的
に許容し得る塩を含有する、テロメラーゼ含有不死化細
胞の増殖抑制剤。 - 【請求項４】 化合物が、２−（３−クロロ−４−フル
オロフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−
（３−クロロ−２−フルオロフェニル）−４−イソチア
ゾリン−３−オン、４−ブロモ−２−（３−クロロ−４
−フルオロフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オ
ン、２−（３−トリフルオロメチルフェニル）−４−イ
ソチアゾリン−３−オン、２−（２，３，４−トリフル
オロフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−
（４−エトキシカルボニルフェニル）−４−イソチアゾ
リン−３−オン、または、２−（４−シアノ−３−メチ
ルチオフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、で
ある、請求項１記載の制がん剤。 - 【請求項５】 化合物が、２−（３−クロロ−４−フル
オロフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−
（３−クロロ−２−フルオロフェニル）−４−イソチア
ゾリン−３−オン、４−ブロモ−２−（３−クロロ−４
−フルオロフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オ
ン、２−（３−トリフルオロメチルフェニル）−４−イ
ソチアゾリン−３−オン、２−（２，３，４−トリフル
オロフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−
（４−エトキシカルボニルフェニル）−４−イソチアゾ
リン−３−オン、または、２−（４−シアノ−３−メチ
ルチオフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、で
ある、請求項２記載のテロメラーゼ阻害剤。 - 【請求項６】 化合物が、２−（３−クロロ−４−フル
オロフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−
（３−クロロ−２−フルオロフェニル）−４−イソチア
ゾリン−３−オン、４−ブロモ−２−（３−クロロ−４
−フルオロフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オ
ン、２−（３−トリフルオロメチルフェニル）−４−イ
ソチアゾリン−３−オン、２−（２，３，４−トリフル
オロフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−
（４−エトキシカルボニルフェニル）−４−イソチアゾ
リン−３−オン、または、２−（４−シアノ−３−メチ
ルチオフェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、で
ある、請求項３記載のテロメラーゼ含有不死化細胞の増
殖抑制剤。 - 【請求項７】 ２−（３−クロロ−４−フルオロフェニ
ル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−（３−クロ
ロ−２−フルオロフェニル）−４−イソチアゾリン−３
−オン、４−ブロモ−２−（３−クロロ−４−フルオロ
フェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−（３
−トリフルオロメチルフェニル）−４−イソチアゾリン
−３−オン、２−（４−シアノ−３−メチルチオフェニ
ル）−４−イソチアゾリン−３−オン、からなる化合物
群から選択される化合物、またはその薬学的に許容し得
る塩。 - 【請求項８】 ２−（３−クロロ−４−フルオロフェニ
ル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−（３−クロ
ロ−２−フルオロフェニル）−４−イソチアゾリン−３
−オン、４−ブロモ−２−（３−クロロ−４−フルオロ
フェニル）−４−イソチアゾリン−３−オン、２−（３
−トリフルオロメチルフェニル）−４−イソチアゾリン
−３−オン、２−（４−シアノ−３−メチルチオフェニ
ル）−４−イソチアゾリン−３−オン、からなる化合物
群から選択される化合物、またはその薬学的に許容し得
る塩を含有する医薬。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24438698A JPH11130676A (ja) | 1997-08-15 | 1998-08-14 | テロメラーゼ阻害剤 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP25587897 | 1997-08-15 | ||
| JP9-255878 | 1997-08-15 | ||
| JP24438698A JPH11130676A (ja) | 1997-08-15 | 1998-08-14 | テロメラーゼ阻害剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11130676A true JPH11130676A (ja) | 1999-05-18 |
Family
ID=26536715
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24438698A Pending JPH11130676A (ja) | 1997-08-15 | 1998-08-14 | テロメラーゼ阻害剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH11130676A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001030771A1 (fr) * | 1999-10-28 | 2001-05-03 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Derives de thiazolidinedione |
-
1998
- 1998-08-14 JP JP24438698A patent/JPH11130676A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001030771A1 (fr) * | 1999-10-28 | 2001-05-03 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Derives de thiazolidinedione |
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