JPH1081695A - デチオメチルδ１−Ｉ及び−Ｂｒ - Google Patents

デチオメチルδ１−Ｉ及び−Ｂｒ

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JPH1081695A
JPH1081695A JP9149924A JP14992497A JPH1081695A JP H1081695 A JPH1081695 A JP H1081695A JP 9149924 A JP9149924 A JP 9149924A JP 14992497 A JP14992497 A JP 14992497A JP H1081695 A JPH1081695 A JP H1081695A
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dichloromethane
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Abstract

(57)【要約】 【課題】 抗菌剤及び抗腫瘍剤として有用な抗生物質Ｌ
Ｌ−Ｅ３３２８８ε−Ｉ及びＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｂ
ｒの合成中間体を提供すること。 【解決手段】 ＬＬ−Ｅ３３２８８δ1−ＩまたはＬＬ
−Ｅ３３２８８δ1−Ｂｒをトリフェニルホスフィンと
ジクロロメタン中で氷浴温度において反応させることに
より製造されることを特徴とする化合物デチオメチルδ
1−Ｉまたはデチオメチルδ1−Ｂｒ。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】ＬＬ−Ｅ３３２８８複合体として集合的に
知られている抗生物質および抗腫瘍剤のファミリーは、
１９８６年５月２８日に欧州特許（ＥＰ）１８２，１５
２号として発行された、１９８５年１０月２９日出願の
本出願人に係る欧州特許出願８５１１２７５１.３号に
記載され、そして特許請求されている。
【０００２】この発行された出願は、ＬＬ−Ｅ３３２８
８の複合体、それらの成分、すなわち、ＬＬ−Ｅ３３２
８８α1−Ｂｒ、ＬＬ−Ｅ３３２８８α1−Ｉ、ＬＬ−Ｅ
３３２８８α2−Ｂｒ、ＬＬ−Ｅ３３２８８α2−Ｉ、Ｌ
Ｌ−Ｅ３３２８８α3−Ｂｒ、ＬＬ−Ｅ３３２８８α3−
Ｉ、ＬＬ−Ｅ３３２８８α4−Ｂｒ、ＬＬ−Ｅ３３２８
８β1−Ｂｒ、ＬＬ−Ｅ３３２８８β1−Ｉ、ＬＬ−Ｅ３
３２８８β2−Ｂｒ、ＬＬ−Ｅ３３２８８β2−Ｉ、ＬＬ
−Ｅ３３２８８γ1−Ｂｒ、ＬＬ−Ｅ３３２８８γ1−Ｉ
およびＬＬ−Ｅ３３２８８δ１−Ｉ、およびミクロモノ
スポラ・エキノスポラ ssp カリケンシス（Ｍicromono
spora echinospora ssp calichensis）（以後、Ｍic
romonosporaechinospora ssp calichensisと呼ぶ）の
新規な株またはその天然または誘導された突然変異体を
利用する好気的発酵によって、それらを生産する方法を
記載している。
【０００３】ある種の他の抗生物質は、本発明に関連
し、それらは次の通りである： １）エスペラマイシンＢＢＭ−１６７５、効力のある抗
腫瘍抗生物質Ｉの新規なクラス。物理化学的データおよ
び部分的構造。Ｍ．コニシ（Ｋonishi）ら、ジャーナル
・オブ・アンチビオチックス（Ｊ．Ａntibitics）、３
８、１６０５（１９８５）。新規な抗腫瘍抗生物質複合
体。Ｍ．コニシ（Ｋonishi）ら、英国特許出願ＧＢ２,
１４１,４２５Ａ、１９８５年５月１５日。
【０００４】２）新規な抗腫瘍抗生物質、ＦＲ−９００
４０５およびＦＲ−９００４０６。 Ｉ．生産生株の分類学。Ｍ．イワミ（Ｉwami）ら、ジャ
ーナル・オブ・アンチビオチックス（Ｊ．Ａntibitic
s）、３８、８３５（１９８５）。新規な抗腫瘍抗生物
質、ＦＲ−９００４０５およびＦＲ−９００４０６。Ｉ
Ｉ．生産、分離、特性づけおよび抗腫瘍活性。Ｓ．キヨ
ト（Ｋiyoto）ら、ジャーナル・オブ・アンチビオチッ
クス（Ｊ．Ａntibitics）、３８、８４０（１９８
５）。
【０００５】３）ＰＤ １１４７５９およびＰＤ １１
５０２８、現象の効力をもつ新規な抗腫瘍抗生物質。
Ｒ．Ｒ．ブンゲ（Ｂunge）ら、ジャーナル・オブ・アン
チビオチックス（Ｊ．Ａntibitics）、３７、１５６６
（１９８４）。新規な抗腫瘍抗生物質ＰＤ １１４７５
９および関連誘導体の生物学的および生化学的活性。
Ｄ．Ｗ．フライ（Ｆry）ら、イベスティゲイショナル・
ニュー・ドラッグス（Ｉnvestigational Ｎew Ｄrug
s）、４、３（１９８６）。
【０００６】４）ストレプトマイセス（Ｓtreptomyce
s）ｓｐ．ＡＴＣＣ ３９３６３によって生産される新
規な抗生物質複合体ＣＬ−１５７７ＡおよびＣＬ−５７
７Ｂ。欧州特許出願第０,１３２,０８２，Ａ２。
【０００７】５）Ｃｌ−１５７７Ｄ及びＣｌ−１５７７
Ｅ抗生物質抗腫瘍化合物、その製造及び使用。米国特許
第４,５３９,２０３号。
【０００８】６）ＣＬ−１７２４抗生物質化合物、それ
らの生産および使用。米国特許第４,５５４,１６２号。
【０００９】本発明は、Ｍicromonospora echinospora
ssp calichensisの新規な株またはその天然または誘
導された突然変異体の好気的発酵によって誘導される、
新規な成分、ＬＬ−Ｅ３３２８８εに関する。ＬＬ−Ｅ
３３２８８εは抗菌および抗腫瘍活性を有する。
【００１０】ＬＬ−Ｅ３３２８８複合体の他の成分を使
用する場合におけるように、ヨウ素含有成分は無機およ
び有機のヨウ化物を含有する培地を使用する発酵におい
てのみ見出され、これに対して臭素含有成分は無機およ
び有機の臭化物を含有する培地を使用する発酵において
のみ見出されるので、本発明はＬＬ−Ｅ３３２８８ε−
Ｉ、ヨウ素含有成分およびＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｂ
ｒ、臭素含有成分の両者を包含する。本発明は、また、
対応するヨウドおよび臭素ＬＬ−Ｅ３３２８８γ１誘導
体からＬＬ−Ｅ３３２８８ε−ＩおよびＬＬ−Ｅ３３２
８８ε−Ｂｒを合成誘導化するための２つの方法に関す
る。
【００１１】ＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉの物理化学的特
性を以下に記載する： ａ） 分子式：Ｃ54Ｈ74Ｎ3Ｏ21ＩＳ2、 ｂ） 元素分析：Ｃ、４８.３７；Ｈ、５.７２；Ｎ、
３.０４；Ｓ、４.９８およびＩ、９.２８、 ｃ） 旋光度：［α］D 25＝−１４±１゜（Ｃ、１.１１
５％、メタノール）、 ｄ） 光学密度：０.２３、メタノール中１０μｇ／ｍ
ｌ、２３０ｎｍ、 ｅ） プロトン磁気共鳴スペクトル：図１に示す（３０
０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）、有意のピーク、７.１６（二
重線）、７.２１および７.２６（三重線）および７.５
５ppm（二重線）、および ｆ） 炭素−１３磁気共鳴スペクトル：図２に示す（７
５.４６ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）、有意のピーク、１２０
−１６０および１９０−２１０ppmの領域。
【００１２】ＬＬ−Ｅ３３２８８ε−ＩおよびＬＬ−Ｅ
３３２８８ε−Ｂｒの構造は完全には明らかにされなか
ったが、提案する構造を下記に示す。
【００１３】
【化１】
【００１４】新規な抗菌および抗腫瘍剤ＬＬ−Ｅ３３２
８８ε−ＩおよびＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｂｒは、Ｍic
romonospora echinospora ssp calichensis ＮＲＲ
Ｌ１５８３９、ＮＲＲＬ １５９７５およびＮＲＲＬ
１８１４９のコントロールした条件下の培養の間の生成
する。
【００１５】これらの新規は微生物は、アメリカン・サ
イアナミド・カンパニー（Ａmerican Ｃyanamid Ｃom
pany）（米国ニューヨーク州パールリバー）の医学研究
部（Ｍedical Ｒesearch Ｄivision）の培養物コレク
ションにおいて、ＬＬ−Ｅ３３２８８（ＮＲＲＬ １５
８３９）、ＬＬ−Ｅ３３２８８−Ｒ６６（ＮＲＲＬ１５
９７５）およびＬＬ−Ｅ３３２８８ ＵＶ ７８４（Ｎ
ＲＲＬ １８１４９）として維持されている。これらの
新規な微生物の生存しうる培養物は、米国農務省（Ｕ．
Ｓ．Ｄepartment of Ａgriculture）（イリノイ州ペ
オリア）のノーザーン・リージョナル・リサーチ・セン
ター（Ｎorthern Ｒegional Ｒesearch Ｃenter）、
ザ・カルチャー・コレクション・ラボラトリー（the
Ｃulture Ｃollection Ｌaboratory）にブダベスト条
約のもとで国際寄託されており、およびその永久的コレ
クションに加えられている。
【００１６】培養物ＬＬ−Ｅ３３２８８（ＮＲＲＬ １
５８３９）は、テキサス州において集められたカリチェ
粘土の試料から単離された。培養物ＬＬ−Ｅ３３２８８
−Ｒ６６（ＮＲＲＬ １５９７５およびＬＬ−Ｅ３３２
８８ ＵＶ ７８４（ＮＲＲＬ １８１４９）は、後述
するようにして得られた。
【００１７】ミクロモノスポラ（Ｍicromonospora）属
へのＮＲＲＬ １５８３９の一般的割当ては、形態学的
にかつ化学的に確証された。この株は、栄養型菌糸上で
単一にあるあいは塊で単胞子を産生する。気中の菌糸は
観察されなかった。電子顕微鏡検査は胞子がいぼ状であ
ることを示した。細胞の分析は、この株がジアミノピメ
リン酸のメソ異性体を含有することを示した。ジアミノ
ピメリン酸の３−ＯＨ誘導体は、大きい（主要）量で存
在した。さらに、この株はその全細胞の糖加水分解物中
にキシロース＋微量のアラビノースの存在（Ｄ型の全細
胞の糖のパターン）を示した。
【００１８】マクロ形態学的および生理学的研究から、
ＮＲＲＬ １５８３９は、ミクロモノスポラ・エキノス
ポラ（Ｍ．echinospora）のそして種と考えることがで
きると結論された（それはＭ．echinospora ssp．pall
idaに最も近い）。ＮＲＲＬ１５８３９の形態学的デー
タを表ＩおよびＩＩに記載する。生理学的データは表Ｉ
ＩＩおよびＩＶに記載する。
【００１９】 表 Ｉ ＮＲＲＬ １５８３９のマクロ形態学 （色はＮＢＳ‐ＩＳＣＣである） ＩＳＰ寒天培地 胞子 栄養型菌糸体 可溶性顔料 酵母モルト ─ 暗オレンジ‐黄 ─ (ISP 2) (72) オートミール ─ 無色ないし薄オレンジ ─ (ISP 3) ‐黄(73) 無機塩類‐でんぷん 黒色胞子の僅か 暗オレンジ‐黄(72) 薄褐色味 (ISP 4) に広い境界 ないし薄黄‐褐色(76) グリセロール‐ ─ 薄オレンジ‐黄(73) ─ アスパラギン ないし無色 表 ＩＩ アクチノミセテ（Ａctinomucete）の増殖（２８℃、２週）に使用した 種々の寒天培地上のＮＲＲＬ １５８３９のマクロ形態学 寒天培地 ＮＲＲＬ １５８３９ 栄養物 ベージュ色の栄養型菌糸；わずかの黒色 の胞子；可溶性顔料なし ツァペック ベージュ色の栄養型菌糸;胞子なし；可溶性顔料なし (Czapek)酵母 ツァペック ベージュ色の栄養型菌糸；わずかに黒色の胞子； わずかの暗色の顔料 酵母デキス 黄褐色の栄養型菌糸；中程度の黒色の胞子； トロース わずかの暗色の顔料 栄養 無色ないし黄褐色の菌糸；わずかの黒色の胞子； 可溶性顔料なし 栄養グリセ 無色ないし；薄ベージュ色の栄養型菌糸；胞子なし； ロール 可溶性顔料 ベンネット 無色ないしベージュ色の栄養型菌糸；わずかの黒色胞子； (Bennett)の わずかのばら色−褐色 デキストリン グルコース 無色ないし薄オレンジ−ベージュ色の栄養型菌糸； アスパラギン 胞子なし；可溶性顔料なし表ＩＩＩ ＮＲＲＬ １５８３９の炭水化物の利用 アラビノース ＋ セルロース − フルクトース ＋ グルコース ＋ イノシトール − マンニトール − ラフィノース ± ラムノース ＋ スクロース ＋ キシロース ＋表ＩＶ ＮＲＲＬ １５８３９の生理学的反応 次の物質の加水分解 カゼイン ＋ キサンチン − ハイポキサンチン − チロシン ＋ アデニン − ゼラチン ＋ ジャガイモ澱粉 ＋ エスクリン ＋ 次の物質の生産 硝酸塩リダクターゼ ＋ ホスファターゼ 弱い ウレアーゼ − 次の物質の存在下の増殖 サリシン − ５％塩化ナトリウム − リゾチームブロス − 次の物質の脱カルボキシル反応 アセテート ＋ ベンゾエート − シトレート − ラクテート − マレート − ムケート − オキサレート − プロピオネート ＋ ピルベート ＋ スクシネート − タートレート − 次の物質からの酸 アドニトール − アラビノース ＋ セロビオース ＋ デキストリン ＋ ズルシトール − エリスリトール − フルクトース ＋ ガラクトース 変動 グルコース ＋ グリセロール − イノシトール − ラクトース − マルトース ＋ マンニトール − マンノース ＋ α−メチル−Ｄ−クコシド ＋ メリビオース − ラフィノース ＋ ラムノース ＋ サリシン ＋ ソルビトール − スクロース ＋ トレハロース ＋ キシロース ＋ α−メチル−Ｄ−キシロシド − 次の温度における増殖 １０℃ − ４２℃ ＋ ４５℃ ＋ ＋＝陽性；−陰性 ２つの抗生物質産生突然変異体は、次の説明およびダイ
ヤグラムに従って、もとの培養物ＬＬ−Ｅ３３２８８
（ＮＲＲＬ １５８３９）から誘導した。もとの培養物
ＬＬ−Ｅ３３２８８（ＮＲＲＬ １５８３９）を平板培
養し、そして５０の単一のコロニーを分離した。これら
をＮＳ１〜ＮＳ５０と表示した（ＮＳ＝自然の選択）。
【００２０】これらの分離物の発酵は、中程度の胞子形
成のものは一般にＬＬ−Ｅ３３２８８複合体のよりすぐ
れた生成物であることを示した。分離物ＮＳ６はこの群
の代表として選択した。
【００２１】出発培養物として分離物ＮＳ６を使用し
て、胞子懸濁液を調製し、そして種々の突然変異源に暴
露した。紫外線照射への１系列の暴露から、単一のコロ
ニーを得、これから分離物ＵＶ６１０を高い生成の突然
変異体として選択した。分離物ＵＶ６１０を画線し、そ
して下位分離物（subisolate）１〜７をさらに得た。下
位分離物ＵＶ６１０（３）をそれ以上の研究のために選
択した。
【００２２】分離物ＵＶ６１０（３）からの栄養型増殖
（次のダイヤグラム参照）を、発酵に使用したように調
製し、そしてペプトン、デキストロース、糖蜜および水
から成る培地のフラスコを接種するために使用した。こ
の培地にＬＬ−Ｅ３３２８８β1−Ｂｒを８μｇ／ｍｌ
の濃度で補充した。このフラスコからある数の平板培養
を実施し、そして抵抗性の集団を第７日に得た。合計９
７のコロニー（Ｒ１〜Ｒ９７）を分離した。分離物Ｒ６
６は引続いてＮＲＲＬ １５９７５として受託された。
【００２３】分離物８０は、その生合成のポテンシャル
がＲ６６に本質的に類似し、出発培養物として使用し、
これから胞子懸濁液を調製し、そして比較的高い濃度の
ＬＬ−Ｅ３３２８８複合体に暴露して、ＬＬ−Ｅ３３２
８８抗生物質に対して抵抗性の高い生成性の分離物を得
た。１つの生存物、Ｔ２と表示した、は、フラスコ発酵
においてより高い収量のＬＬ−Ｅ３３２８８β1−Ｂｒ
およびＬＬ−Ｅ３３２８８γ1−Ｉを生成した。
【００２４】Ｔ２の胞子懸濁液を調製し、そして紫外線
照射に暴露した。次いで、合計１３１のコロニー（ＵＶ
７０３〜ＵＶ８３４）を分離し、発酵させ、そしてアッ
セイした。分離物ＵＶ７８４をその比較的高い収量につ
いて選択し、そしてこれは引続いてＮＲＲＬ １８１４
９として受託された。
【００２５】
【化２】
【００２６】ＬＬ−Ｅ３３２８８ε−ＩおよびＬＬ−Ｅ
３３２８８ε−Ｂｒの生産のため、本発明は前述の微生
物に、あるいは例示の目的でのみ記載した上記の増殖お
よび顕微鏡的特性に完全に応答する微生物に限定されな
い。事実、これらの微生物から種々の手段、例えば、Ｘ
線照射、紫外線輻射、Ｎ′−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ
−ニトロソグアニジン、アクチノファージ（actinophag
es）などへの暴露によって生産された突然変異体の使用
を包含する。
【００２７】ＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉの生体外抗菌活
性を、標準の寒天希釈法によって、グラム陽性およびグ
ラム陰性のバクテリアのスペクトルに対して決定した。
２倍に減少する濃度の抗生物質を含有するムエラー−ヒ
ントン（Ｍueller−Ｈinton）寒天をペトリ皿中に注い
だ。寒天表面を１〜５×１０4のコロニー形成単位でス
ティーアス（Ｓteers）増殖装置によって接種した。３
５℃において約１８時間後バクテリア株の増殖を阻害す
るＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉの最低濃度を、その株に対
する最小阻害濃度（ＭＩＣ）として記録した。結果を表
Ｖに記載する。
【００２８】 表 V ＬＬ−Ｅ ３２２８８ε−Ｉの生体外抗菌活性 有機体 最小阻害濃度 （μg／ｍl） Ｅscherichia coli ＣＭＣ８４−１１ ＞６４ Ｅscherichia coli Ｎｏ．３１１−（ＭＰ） ＞６４ Ｅscherichia coli ＡＴＣＣ２５９２２ ＞６４ Ｋlebsiella pneumoniae ＣＭＣ ８４−５ ＞６４ Ｋlebsiella pneumoniae ＡＤ （ＭＰ） ＞６４ Ｅnterobacter cloacae ＣＭＣ ８４−４ ＞６４ Ｅnterobacter aerogenes ＩＯ ８３−４４ ＞６４ Ｓerratia marcescens ＣＭＣ ８３−２７ ＞６４ Ｓerratia marcescens Ｆ ３５ （ＭＰ） ＞６４ Ｍorganella morganii ＩＯ ８３−１８ ＞６４ Ｐrovidencia stuartii ＣＭＣ ８３−８２ ＞６４ Ｃitrobacter diversus Ｋ ８２−２４ ＞６４ Ｃitrobacter freundii ＩＯ ８３−１３ ＞６４ Ａcinetobacter sp ＣＭＣ ８３−８９ ＞６４ Ａcinetobacter sp ＩＯ ８３−４９ ＞６４ Ｐseudomonas aeruginosa １２−４−４ （ＭＰ） ＞６４ Ｐseudomonas aeruginosa ＡＴＣＣ ２７８５３ ＞６４ Ｓtaphylococcus aureus Ｓmith ４ Ｓtaphylococcus aureus ＳＳＣ ８２−２１ ４ Ｓtaphylococcus aureus ＡＴＣＣ ２５９２３ ４ Ｓtaphylococcus aureus ＳＳＣ ８２−２０ ４ Ｓtaphylococcus aureus ＳＳＣ ８２−２３ ４ Ｓtaphylococcus aureus ＳＳＣ ８２−２４ ４ Ｓtaphylococcus aureus ＳＳＣ ８２−５４ ４ Ｓtaphylococcus epidermidis ＣＭＣ８３−１３３ ４ Ｓtaphylococcus epidermidis ＡＴＣＣ １２２２８ ４ Ｓtreptococcus faecalis ＡＴＣＣ ２９２１２ ４ Ｓtreptococcus faecalis ＶＧＨ ８４−６５ ４ Ｓtreptococcus faecalis ＣＭＣ ８３−５３ ４ Ｓtreptococcus faecalis ＵＣＩ ８５−２０ ４ Ｓtreptococcus faecalis ＩＯ ８３−２８ ４ 今回、抗菌および抗腫瘍剤ＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉお
よびＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｂｒは、対応するヨウドま
たは臭素ＬＬ−Ｅ３３２８８γ１誘導体を試薬、例え
ば、トリフェニルホスフィン、β−メルカプト−エタノ
ール、還元したグルタチオン、１,４−ジチオスレイト
ールまたは種々の他のスルフヒドリル含有試薬で、溶
媒、例えば、ジクロロメタン、アセトニトリル、酢酸エ
チル、メタノール、エタノールまたはクロロホルム中で
還元的に芳香族化することによって合成的に誘導される
ことが発見された。収量および生成物は、かなりな程度
において、試薬および溶媒の極性に依存する。さらに、
試薬の極性を増加すると、反応の速度に役立つ。好まし
い実施態様において、１,４−ジチオスレイトールは試
薬であり、そしてアセトニトリルは溶媒である。
【００２９】前述の抗生物質ＬＬ−Ｅ３３２８８α1−
Ｂｒ、ＬＬ−Ｅ３３２８８α1−Ｉ、ＬＬ−Ｅ３３２８
８α2−Ｂｒ、ＬＬ−Ｅ３３２８８α2−Ｉ、ＬＬ−Ｅ３
３２８８α3−Ｂｒ、ＬＬ−Ｅ３３２８８α3−Ｉ、ＬＬ
−Ｅ３３２８８α4−Ｂｒ、ＬＬ−Ｅ３３２８８β1−Ｂ
ｒ、ＬＬ−Ｅ３３２８８β1−Ｉ、ＬＬ−Ｅ３３２８８
β2−Ｂｒ、ＬＬ−Ｅ３３２８８β2−ＩおよびＬＬ−Ｅ
３３２８８δ1−Ｉを、前述の試薬で処理すると、対応
する還元的に芳香族化された抗生物質を生産されること
が、さらに、決定された。
【００３０】さらに、前述の抗生物質ＢＢＭ−１６７
５、ＦＲ−９００４０５、ＦＲ−９００４０６、ＰＤ１
１４７５９、ＰＤ １１５０２８、ＣＬ−１５７７Ａ、
ＣＬ−１５７７Ｂ、ＣＬ−１５７７Ｄ、ＣＬ−１５７７
ＥおよびＣＬ−１７２４を、前述の試薬で処理すると、
対応する還元的に芳香族化された抗生物質を生産される
ことが決定された。
【００３１】ＬＬ−Ｅ３３２８８成分の構造は完全には
推定されていないが、提案する構造は反応の概要を例示
するために以下に記載する。
【００３２】
【化３】
【００３３】本発明は、さらに、ＬＬ−Ｅ３３２８８ε
−ＩおよびＬＬ−Ｅ３３２８８ε−ＢｒをＬＬ−Ｅ３３
２８８γ1−ＩおよびＬＬ−Ｅ３３２８８γ1−Ｂｒから
製造するための合成法、およびこの方法の間開発され
た、それら自体抗腫瘍活性を有する、中間体、デチオメ
チルγ1または二量体と呼ぶ、に関する。
【００３４】これらの反応は以下に概略的に示されてお
り、そしてＬＬ−Ｅ３３２８８γ1−ＩおよびＬＬ−Ｅ
３３２８８γ1−Ｂｒ、ＬＬ−Ｅ３３２８８δ1−Ｉおよ
びヨウドおよびブロモ二量体が記載されている。
【００３５】
【化４】
【００３６】本発明は、また、次の反応式によって調製
できるＬＬ−Ｅ３３２８８δ1−Ｉのデチオメチル誘導
体に関する。
【００３７】
【化５】
【００３８】さらに、同一の反応を使用してＬＬ−Ｅ３
３２８８δ1−Ｂｒからデチオメチルδ1−Ｂｒを調製す
ることができる。
【００３９】上記の反応の概要に従い、ＬＬ−Ｅ３３２
８８γ1−Ｉ １ をジクロロメタン中に溶解し、氷浴
中で冷却し、ジクロロメタン中のトリフェニルホスフィ
ンで処理すると、デチオメチルγ1−Ｉ ２ が得ら
れ、これをセパレーションズ・テクノロジー（Separati
ons Technology）からのカラムを使用する、逆相、調製
用高性能液体クロマトグラフィーにより精製し、メタノ
ール中に溶解し、トリフェニルホスフィンで、わずかに
加温しながら、処理してＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉを生
成せしめる。
【００４０】上記の順序を使用するＬＬ−Ｅ３３２８８
γ1−Ｂｒの反応は、デチオメチルγ1−Ｂｒを生成し、
次いでＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｂｒを生成する。同様
に、同様な順序を使用してデチオメチルδ1−ＩをＬＬ
−Ｅ３３２８８ε1−Ｉに転化することができ、そして
デチオメチルδ1−ＢｒをＬＬ−Ｅ３３２８８ε1−Ｂｒ
に転化することができる。
【００４１】
【化６】
【００４２】
【化７】
【００４３】デチオメチルγ1−Ｉの物理化学的特性は
次の通りである： ａ）元素分析：Ｃ、４６.４６；Ｈ、５.８０；Ｎ、３.
０１；Ｉ、９.１０およびＳ、５.７４、 ｂ）分子式：Ｃ108Ｈ142Ｎ6Ｏ42Ｉ2Ｓ5、 ｃ）分子量：２６０８.４（ＦＡＢＭＳ）、および ｄ）第３図に示すプロトン磁気共鳴スペクトル（３００
ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）。
【００４４】デチオメチルγ1−Ｉの生体外抗菌活性
を、標準の寒天希釈法によって、グラム陽性およびグラ
ム陰性のバクテリアに対して決定した。２倍で減少する
濃度の抗生物質を含有するムエラー−ヒントン寒天を、
ペトリ皿中に注いだ。寒天表面を１〜５×１０4のコロ
ニー形成単位でスティーアス増殖装置によって接種し
た。３５℃において約１８時間後バクテリア株の増殖を
阻害するデチオメチルγ1−Ｉの最低濃度を、その株に
対する最小阻害濃度（ＭＩＣ）として記録した。結果を
表ＶＩに記載する。
【００４５】 表 ＶＩ デチオメチルγ1−Ｉの生体外抗菌活性 最小阻害濃度 有機体 (μｇ／ｍｌ) Escherichia coli ＣＭＣ ８４−１１ ４ Escherichia coli Ｎｏ．３１１−（ＭＰ） ４ Escherichia coli ＡＴＣＣ ２５９２２ ２ Klebsiella pneumoniae ＣＭＣ ８４−５ ８ Klebsiella pneumoniae ＡＤ （ＭＰ） ２ Enterobacter cloacae ＣＭＣ ８４−４ ８ Enterobacter aerogenes ＩＯ ８３−４４ ８ Serratia marcescens ＣＭＣ ８３−２７ ４ Serratia marcescens Ｆ ３５ （ＭＰ） ４ Morganella morganii ＩＯ ８３−１８ ４ Providencia stuartii ＣＭＣ ８３−８２ ８ Citrobacter diversus Ｋ ８２−２４ ４ Citrobacter freundii ＩＯ ８３−１３ ２ Acinetobacter sp ＣＭＣ ８３−８９ ４ Acinetobacter sp ＩＯ ８３−４９ ４ Pseudomonas aeruginosa １２−４−４ （ＭＰ） ４ Pseudomonas aeruginosa ＡＴＣＣ ２７８５３ ４ Staphylococcus aureus Smith ＜４×１０-6 Staphylococcus aureus ＳＳＣ ８２−２１ ３×１０-5 Staphylococcus aureus ＡＴＣＣ ２５９２３ ４×１０-3 Staphylococcus aureus ＳＳＣ ８２−２０ ２.５×１０-4 Staphylococcus aureus ＳＳＣ ８２−２３ ６×１０-5 Staphylococcus aureus ＳＳＣ ８２−２４ ＜４×１０-6 Staphylococcus aureus ＳＳＣ ８２−５４ ３×１０-5 Staphylococcus epidermidis ＣＭＣ８３−１３３ １.２×１０-4 Staphylococcus epidermidis ＡＴＣＣ １２２２８ １×１０-3 Streptococcus faecalis ＡＴＣＣ ２９２１２ １.５×１０-2 Streptococcus faecalis ＶＧＨ ８４−６５ １.５×１０-2 Streptococcus faecalis ＣＭＣ ８３−５３ ２.５×１０-1 Streptococcus faecalis ＵＣＩ ８５−２０ １.５×１０-2 Streptococcus faecalis ＩＯ ８３−２８ １.５×１０-2 ある種の生体内試験系およびプロトコル(protocols)
は、ナショナル・キャンサー・インスチチュート(Natio
nal Cancer Institute)によって、試験化合物につい
て、抗新生物剤としての適当性を決定するために開発さ
れた。これらは「癌の化学的治療の報告(Cancer Chemot
herapy Reports)」、部ＩＩＩ、Ｖｏｌ．３、Ｎｏ．２
（１９７２）、ゲラン(Geran)ら、に報告された。これ
らのプロトコルは標準化されたスクリーニング試験を確
立し、この試験は、一般に、抗腫瘍剤について試験する
分野において用いられている。これらの系のうちで、リ
ンパ性白血病Ｐ３８８はとくに本発明において意味があ
る。この新生物は、マウスにおける移植可能な腫瘍とし
て試験するために利用される。対照（Ｃ）動物をこえる
処置した（Ｔ）動物の平均生存時間の増加百分率によっ
て、このプロトコルにおいて示される有意の抗腫瘍活性
は、ヒトの白血病および固体の腫瘍において同様な結果
を示す。
【００４６】リンパ性白血病Ｐ３８８試験 使用した動物は、ＢＤＦ１マウス、すべて１つの性、体
重の最小１７ｇおよびすべて３ｇの体重の範囲内、であ
った。試験群につき５匹または６匹のマウスが存在し
た。腫瘍の移植は、リンパ性白血病Ｐ３８８の１０6の
細胞を含有する稀薄な腹水の０.５ｍｌの腹腔内注射に
よって実施した。試験化合物は、示す投与量において、
第１、５および９日（腫瘍の移植に関して）に通常の生
理的食塩水中の０.２％のクルセル(Klucel)中の０.５ｍ
ｌの体積で腹腔内投与した。マウスを体重測定し、およ
び生存するマウスを３０日間正規の基準で記録した。メ
ジアン生存時間および処置（Ｔ）／対照（Ｃ）動物につ
いての生存時間の比を計算した。ＬＬ−Ｅ３３２８８ε
−Ｉについて陽性の対照化合物は、１，４−ジヒドロキ
シ−５，８−ビス［［（２−ヒドロキシエチルアミノ）
エチル］アミノ］アントラキノン、二塩酸塩（米国特許
第４,１９７,２４９号）であった。デチオメチルγ1−
Ｉについて陽性の対照化合物は、１，４−ビス［２−
（２−ヒドロキシエチルアミノ）エチルアミノ］−５，
８−ジヒドロキシアントラキノン二塩酸塩、レダリー・
ラボラトリーズ(Lederle Laboratories)、ニューヨー
ク、パールリバー(“Nobantron")であった。対照は、示
す投与量において、第１、５および９日に０.２％のク
ルセル(Klucel)中の０.５ｍｌの体積で腹腔内注射とし
て投与した。結果を表ＶＩＩに記載する。
【００４７】Ｔ／Ｃ×１００（％）が１２５またはそれ
より大きいとき、試験した化合物は有意の抗腫瘍活性を
有すると考えた。
【００４８】 表 ＶＩＩ リンパ性白血病 Ｐ３８８ 試験 投与量 メジアン生存率 Ｔ／Ｃ×１００ 化合物 (mg/kg) （日） （％） ＬＬ-Ｅ ３２２８ε-Ｉ ３.２ １２ １２０ １.６ １６.５ １６５ ０.８ １７.５ １７５ ０.４ １５.５ １５５ ０.２ １５.５ １５５ ０.１ １５ １５０ ０.０５ １３ １３０ 対照 ─ １ ─ 陽性の対照 １.６ ２７ ２７０ ０.８ ＞３０ ＞３００ ０.４ ２１.５ ２１５ デチオメチルγ-Ｉ ０.０２５ ２３.５ ２３５ ０.０１２５ ２２ ２２０ ０.００６２ １９.５ １９５ ０.００３１ １８.５ １８５ ０.００１５５ １６ １６０ ０.００８ １３ １３０ ０.０００４ １２.５ １２５ 対照 ─ １０ ─ 陽性の対照 １.６ ２７ ２７０ ０.８ ＞３０ ＞３００ ０.４ ２１.５ ２１５ 本発明を次の実施例によりさらに説明する。これらの実
施例は本発明を限定することを意図していない。
【００４９】実施例１ 接種物の調製 一次接種物を成長するために使用する典型的な培地は、
次の処方Ｉａに従って調製した： デキストリン ２.４％ グルコース ０.５％ 酵母エキス ０.５％ トリプトン ０.５％ 牛肉エキス ０.３％ 炭酸カルシウム ０.４％ 消泡剤 ０.３％ 水 １００％とする量 この培地を滅菌し、そして１００ｍｌの部分をフラスコ
内で培養物ＮＲＲＬ１８１４９の菌糸体で接種する。こ
の培地を回転振盪器上に配置し、そして３２℃において
激しく撹拌した。次いで、一次接種物を使用して、びん
内の上記無菌培地の１０リットルを接種する。この培地
を３２℃で４８時間撹拌して、二次接種物を得た。次い
で、この二次接種物を使用して、槽内の上の無菌培地の
３００リットルを接種し、これを３２℃において４８時
間２２０ｒｐｍで駆動される羽根車および２００リット
ル／分の無菌の空気流によって撹拌しながらインキュベ
ーションして、三次接種物を得た。
【００５０】実施例２ 槽発酵 発酵培地を、次の処方に従って調製した： スクロース ２.０％ 硫酸第二鉄七水和物 ０.０１％ 硫酸マグネシウム七水和物 ０.０２％ ペプトン ０.５％ 糖蜜 ０.５％ ヨウ化カリウム＊ ０.０５％ 炭酸カルシウム ０.５％ 消泡剤 ０.３％ 水 １００％とする量 ＊臭化カリウムを置換すると、ブロモ誘導体が得られる
であろう。
【００５１】上の培地の２７００リットルの部分を滅菌
し、次いで実施例１に記載するように調製した三次接種
物の３００リットルを接種する。１リットルのマッシュ
につき６.５リットル／分の無菌の空気の速度で通気
し、そして撹拌を１２０ｒｐｍで駆動する羽根車によっ
て実施する。温度を３０℃に維持し、そして発酵を約１
２５時間後に停止し、このときマッシュを収穫する。
【００５２】実施例３ ＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉの単離 実施例２に記載するようにして実施した発酵からのマッ
シュの合計２４００リットルを、等体積の酢酸エチルと
ともに１時間撹拌した。酢酸エチル相を分離し、約２０
０リットルに減圧下に蒸発させ、そして１Ｎ水酸化ナト
リウムでｐＨ６〜７に調節した。酢酸エチル相を分離
し、３０〜４０リットルに濃縮し、次いで３０リットル
の水で希釈して乳化を容易にし、撹拌し、次いで沈降さ
せると、３相が形成した。水性（底の）相を分離し、そ
して酢酸エチルで抽出した。この抽出液を透明な（上
の）溶媒相と一緒にし、そして約６リットルに濃縮し
た。
【００５３】油状懸濁液の６リットルを１リットルの部
分に分割し、それらの各々を油に濃縮し、そしてヘキサ
ンとメタノールとの間の分配によって脱脂する。メタノ
ール相を油の段階に蒸発させ、次いで一緒にした。この
油をジクロロメタン中で再構成し、３０.５ｃｍ（１２
インチ）の床のカラム中の２ｋｇのシリカゲル上に供給
し、４リットルのジクロロメタンで展開し、次いでジク
ロロメタン中の２．５％のメタノールおよびジクロロメ
タン中の５％のメタノールの各々の４リットルで展開し
た。１リットルの分画を２０分毎に集めた。活性は生化
学的誘導アッセイにより分画９〜１４において見出され
た。これらの分画を一緒にし、そして蒸発させると、２
４ｇの粗製の暗褐色の固体が得られた。
【００５４】この固体を約６ｇの４つの部分に分割し
た。各部分を１００ｍｌのアセトニトリル中で３０形成
物質撹拌し、次いでろ過した。濾液を１５０ｍｌの０．
２モルの酢酸アンモニウム溶液で希釈し、そして再びろ
過した。この濾液をプレパック(Prepak)逆相カートリッ
ジを含有するウオーターズ(Waters)Ｌ／Ｃ５００器具上
にポンピングした。前記カートリッジは前もってアセト
ニトリル：０.２モルの酢酸アンモニウム溶液（４５：
５５）で平衡化されていた。このカラムを７〜８リット
ルの同一溶媒で展開した。溶離のプロセスは２５４ｎｍ
で監視した。第二リットルの溶離液はＬＬ−Ｅ３３２８
８ε−Ｉを含有した。この溶離液を十分に蒸発させてア
セトニトリルの大部分を除去した。残りの水性懸濁液を
その体積の半分の酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルの
抽出液を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、１０〜２０ｍ
ｌに濃縮し、そして７５ｍｌの激しく撹拌したヘキサン
中に滴下した。得られた沈殿を集め、そして乾燥する
と、１.６９４ｇのＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉが得られ
た。
【００５５】実施例４ ＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉの精製 実施例３からのＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉの１.６９ｇ
の部分を、プレパック逆相クロマトグラフィーに再びか
け、溶媒系のアセトニトリル：０.２モルの酢酸アンモ
ニウム溶液（３７：６３）を使用した。対称ピークのコ
ア分画を取り、そして処理すると、９６０ｍｇの灰色固
体が得られた。
【００５６】上の固体の８８０ｍｇの部分を、逆相クロ
マトグラフィーにかけ、同一溶媒系を使用した。監視し
たプロフィルの主要なピークを２つの部分に削った。前
方の分画を処理すると、１８６ｍｇの純粋なＬＬ−Ｅ３
３２８８ε−Ｉが得られた。
【００５７】実施例５ ＬＬ−Ｅ３３２８８γ１−Ｉをトリフェニルホスフィン
で処理することによるＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉの調製 １００ｍｌのジクロロメタン中の１.６７ｇのＬＬ−Ｅ
３３２８８ε−Ｉの溶液を、５ｍｌのジクロロメタン中
の５００ｍｇのトリフェニルホスフィンの溶液で処理し
た。この混合物を２時間撹拌し、次いでろ過した。濾液
を蒸発乾固し、残留物をメタノール中に溶解し、そして
２６８ｍｇのトリフェニルホスフィンで加温しながら処
理して溶解した。次いで、この反応混合物を１６時間室
温において撹拌し、そしてろ過した。濾液を蒸発乾固
し、次いで６０×３０ｃｍ［ＬＨ−harmacia)］カラム
のクロマトグラフィーにかけ、ヘキサン：ジクロロメタ
ン：メタノール（２：１：１）で溶離した。ＬＬ−Ｅ３
３２８８ε−Ｉを含有する分画を一緒にすると３３６ｍ
ｇの部分的に精製された生成物が得られ、次いで同一カ
ラムで再びクロマトグラフィーにかけた。ＬＬ−Ｅ３３
２８８ε−Ｉを含有する分画を、薄層クロマトグラフィ
ー（「ＴＬＣ」）で同定した。ＴＬＣ板を、１０％のイ
ソプロパノールを含有する０.２モルのリン酸水素二カ
リウムの緩衝液で飽和した酢酸エチル中に入れた。次い
で、板を紫外線でクエンチングして（ｑｕｅｃｈｅｄ）
問題の分画（分画１１〜１５）を同定した。分画１１〜
１５（各々５ｍｌ）を一緒にし、濃縮乾固し、そして少
量の酢酸エチル中に取った。これを過剰量の撹拌したヘ
キサンに滴々添加し、そして沈殿を集めると、１１２ｍ
ｇが得られた。次いで、１００ｍｇの部分を調製様逆相
クロマトグラフィーのカラムのクロマトグラフィーにか
け、アセトニトリル：０．２モルの酢酸アンモニウム緩
衝液（３７：６３）で溶離した。活性な分画をカラム上
のそれらの保持時間に基づいて同定した。ＬＬ−Ｅ３３
２８８εの分画を一緒にし、活性成分を酢酸エチル中に
抽出し、そしてヘキサンで沈殿させると、２００ｍｇの
純粋なＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉが得られた。生成物の
同定は、前述のように自然の源から得られた生成物と比
較することによって確証した。
【００５８】実施例６ ＬＬ−Ｅ３３２８８γ−Ｂｒをトリフェニルホスフィン
で処理することによるＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｂｒの調
製 ＬＬ−Ｅ３３２８８γ1−Ｂｒの一部を実施例５に記載
する手順に従って、ＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｂｒを得
た。
【００５９】実施例７ ＬＬ−Ｅ３３２８８γ1−Ｉをジチオスレイトールで処
理することによるＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉの調製 ８ｍｌのアセトニトリル中の１００ｍｇのＬＬ−Ｅ３３
２８８γ1−Ｉの溶液を、５９ｍｇの１，４−ジチオス
レイトールで処理した。この混合物を３時間撹拌し、次
いでろ過した。濾液を濃縮乾固し、少量のメタノールを
含有するジクロロメタン中に取り、そしてシリカゲルの
クロマトグラフィーにかけ、ジクロロメタン中の２％、
４％および５％のメタノールで溶離した。分画７、８お
よび９を一緒にし、そして蒸発させた。残留物をヘキサ
ン／酢酸エチルから沈殿させると、３０ｍｇの純粋なＬ
Ｌ−Ｅ３３２８８ε−Ｉが得られた。
【００６０】実施例８ ＬＬ−Ｅ３３２８８γ1−Ｂｒをジチオスレイトールで
処理することによるＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｂｒの調製 ＬＬ−Ｅ３３２８８γ1−Ｂｒの一部を実施例７に記載
する手順に従って、ＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｂｒを得
た。
【００６１】実施例９ デチオメチルγ1−Ｉの調製 ５０ｍｌのジクロロメタン中の１ｇのＬＬ−Ｅ３３２８
８γ1−Ｉを氷浴中で冷却し、そして２ｍｌのジクロロ
メタン中の２９３ｍｇのトリフェニルホスフィンで処理
した。氷浴の温度で２時間撹拌した後、溶液を室温に加
温し、そして粒状デチオメチルγ1−Ｉを集めた。この
生成物をＣ18逆相支持体（２５μ）を充填した１×３
５.６ｃｍ（１４インチ）のセパレイションズ・テクノ
ロジー(Separations Technology)を使用する調製用ＨＰ
ＬＣによって精製し、溶媒系のアセトニトリル：０.２
モルの酢酸アンモニウム（４８：５２）を使用した。デ
チオメチルγ1−Ｉを含有する分画を、薄層クロマトグ
ラフィー（「ＴＬＣ」）で同定した。ＴＬＣ板を、１０
％のイソプロパノールを含有する０.２モルのリン酸水
素二カリウムの緩衝液で飽和した酢酸エチル中に入れ
た。次いで、板を紫外線によりクエンチングして問題の
分画（分画５および６）を同定した。分画５および６を
一緒にし、アセトニトリルを真空下に除去し、得られる
曇った溶液を水で洗浄し、乾燥し、小さい体積に濃縮
し、そして１００ｍｌのヘキサンに撹拌しながら滴々添
加した。沈殿を集め、そして乾燥すると、１６８ｍｇの
デチオメチルγ1−Ｉが得られた。
【００６２】実施例１０ デチオメチルγ1−ＩのＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉへの
転化 １０ｍｌのメタノール中の４２ｍｇのデチオメチルγ1
−Ｉの溶液に、１０ｍｇのトリフェニルホスフィンを添
加した。この混合物を加温し、次いで室温において１６
時間撹拌した。１２ｍｇの部分のトリフェニルホスフィ
ンを添加し、次いで４０〜５０℃に１時間加温した。ワ
ットマン(Wahtoman)１０００μのシリカゲル板を使用す
る調製用ＴＬＣによって、得られるＬＬ−Ｅ３３２８８
ε−Iを精製した。ＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉを酢酸エ
チルで抽出すると、４ｍｇの純粋な生成物が得られた。
【００６３】本発明の主な態様および特徴は、次の通り
である。
【００６４】１．次の特性： ａ） 分子式：Ｃ54Ｈ74Ｎ3Ｏ21ＩＳ2、 ｂ） 元素分析：Ｃ、４８.３７；Ｈ、５.７２；Ｎ、
３.０４；Ｓ、４.９８およびＩ、９.２８、 ｃ） 旋光度：［α］D 25＝−１４±１゜（Ｃ、１.１１
５％、メタノール）、 ｄ） 光学密度：０.２３、メタノール中１０μg／ml、
２３０nm、 ｅ） 図１に示すプロトン磁気共鳴スペクトル、および ｆ） 図２に示す炭素−１３磁気共鳴スペクトル、を有
する化合物ＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉ。
【００６５】２． ａ） 微生物ミクロモノスポラ・エキノスポラssp カ
リケンシス（Ｍicromonospora echinospora ssp cal
ichensis） ＮＲＲＬ １５８３９またはその抗生物質
産生突然変異体ＮＲＲＬ１５９７５またはＮＲＲＬ １
８１４９を、炭素、窒素、ヨウ素および無機塩類の同化
可能な源を含有する液状培地中で、実質的な抗生物質活
性が前記培地に付与されるまで好気的に発酵させ、次い
でそれから抗生物質を回収するか、 ｂ） ＬＬ−Ｅ３３２８８γ1−Ｉをトリフェニルホス
フィンまたはスルフヒドリル含有試薬と溶媒中で反応さ
せ、次いでＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉをクロマトグラフ
ィーにより分離し、そして精製するか、 ｃ） ＬＬ−Ｅ３３２８８γ1−Ｉをトリフェニルホス
フィンとジクロロメタン中で氷浴の温度において反応さ
せ、室温に加温し、かくして生成するデチオメチルγ1
−Ｉを集め、該デチオメチルγ1−Ｉをトリフェニルホ
スフィンとメタノール中でわずかに加温しながら反応さ
せ、そしてかくして生成するＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉ
を集めるか、あるいは ｄ） ＬＬ−Ｅ３３２８８δ1−Ｉをトリフェニルホス
フィンとジクロロメタン中で氷浴の温度において反応さ
せ、室温に加温し、かくして生成するデチオメチルδ1
−Ｉを集め、該デチオメチルδ1−Ｉをトリフェニルホ
スフィンとメタノール中でわずかに加温しながら反応さ
せ、そしてかくして生成するＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉ
を集める、ことからなる上記第１項記載のＬＬ−Ｅ３３
２８８ε−Ｉの製造方法。
【００６６】３．微生物がミクロモノスポラ・エキノス
ポラ ssp カリケンシス（Ｍicromonospora echinosp
ora ssp calichensis） ＮＲＲＬ １８１４９であ
り、そしてスルフヒドリル含有試薬がβ−メルカプト−
エタノール、還元したグルタチオンまたは１,４−ジチ
オスレイトールから成る群より選択され、そして溶媒が
ジクロロメタン、アセトニトリル、酢酸エチル、メタノ
ール、エタノールまたはクロロホルムから成る群より選
択される上記第２項記載の方法。
【００６７】４． ａ） 微生物ミクロモノスポラ・エキノスポラssp カ
リケンシス（Ｍicromonospora echinospora ssp cal
ichensis） ＮＲＲＬ １５８３９またはその抗生物質
産生突然変異体ＮＲＲＬ１５９７５またはＮＲＲＬ １
８１４９を、炭素、窒素、臭素および無機塩類の同化可
能な源を含有する液状培地中で、実質的な抗生物質活性
が前記培地に付与されるまで好気的に発酵させ、次いで
それから抗生物質を回収するか、 ｂ） ＬＬ−Ｅ３３２８８γ1−Ｂrをトリフェニルホス
フィンまたはスルフヒドリル含有試薬と溶媒中で反応さ
せ、次いでＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｂrをクロマトグラ
フィーにより分離し、そして精製するか、 ｃ） ＬＬ−Ｅ３３２８８γ1−Ｂrをトリフェニルホス
フィンとジクロロメタン中で氷浴の温度において反応さ
せ、室温に加温し、かくして生成するデチオメチルγ1
−Ｂrを集め、該デチオメチルγ1−Ｂrをトリフェニル
ホスフィンとメタノール中でわずかに加温しながら反応
させ、そしてかくして生成するＬＬ−Ｅ３３２８８ε−
Ｂrを集めるか、あるいは ｄ） ＬＬ−Ｅ３３２８８δ1−Ｂrをトリフェニルホス
フィンとジクロロメタン中で氷浴の温度において反応さ
せ、室温に加温し、かくして生成するデチオメチルδ1
−Ｂrを集め、該デチオメチルδ1−Ｂrをトリフェニル
ホスフィンとメタノール中でわずかに加温しながら反応
させ、そしてかくして生成するＬＬ−Ｅ３３２８８ε−
Ｂrを集める、からなる上記第１項記載のＬＬ−Ｅ３３
２８８ε−Ｂｒの製造方法。
【００６８】５．微生物がミクロモノスポラ・エキノス
ポラ ssp カリケンシス（Ｍicromonospora echinosp
ora ssp calichensis） ＮＲＲＬ １８１４９であ
り、そしてスルフヒドリル含有試薬がβ−メルカプト−
エタノール、還元したグルタチオンまたは１,４−ジチ
オスレイトールから成る群より選択され、そして溶媒が
ジクロロメタン、アセトニトリル、酢酸エチル、メタノ
ール、エタノールまたはクロロホルムから成る群より選
択される上記第４項記載の方法。
【００６９】６．上記第４項記載の方法によって製造さ
れた化合物ＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｂr。
【００７０】７．特性： ａ） 分子式：Ｃ１０８Ｈ１４２Ｎ６Ｏ４２Ｉ２Ｓ５、 ｂ） 元素分析：Ｃ、４６.４６；Ｈ、５.８０；Ｎ、
３.０１；Ｉ、９.１０およびＳ、５.７４、 ｃ） 分子量：２６０８.４（ＦＡＢＭＳ）、および ｄ） 図３に示すプロトン磁気共鳴スペクトル、を有す
る化合物デチオメチルγ1−Ｉ。
【００７１】８．ＬＬ−Ｅ３３２８８γ1−Ｉをトリフ
ェニルホスフィンとジクロロメタン中で氷浴温度におい
て反応させることにより製造される化合物デチオメチル
γ1−Ｉ。
【００７２】９．ＬＬ−Ｅ３３２８８γ1−Ｂrをトリフ
ェニルホスフィンとジクロロメタン中で氷浴温度におい
て反応させることにより製造される化合物デチオメチル
γ1−Ｂr。
【００７３】１０．ＬＬ−Ｅ３３２８８δ1−Ｉをトリ
フェニルホスフィンとジクロロメタン中で氷浴温度にお
いて反応させることにより製造される化合物デチオメチ
ルδ1−Ｉ。
【００７４】１１．ＬＬ−Ｅ３３２８８δ1−Ｂrをトリ
フェニルホスフィンとジクロロメタン中で氷浴温度にお
いて反応させることにより製造される化合物デチオメチ
ルδ1−Ｂr。
【００７５】１２．ＬＬ−Ｅ３３２８８α1−Ｂr、ＬＬ
−Ｅ３３２８８α1−Ｉ、ＬＬ−Ｅ３３２８８α2−Ｂ
r、ＬＬ−Ｅ３３２８８α2−Ｉ、ＬＬ−Ｅ３３２８８α
3−Ｂr、ＬＬ−Ｅ３３２８８α3−Ｉ、ＬＬ−Ｅ３３２
８８α4−Ｂr、ＬＬ−Ｅ３３２８８β1−Ｂr、ＬＬ−Ｅ
３３２８８β1−Ｉ、ＬＬ−Ｅ３３２８８β2−Ｂr、Ｌ
Ｌ−Ｅ３３２８８β2−Ｉ、ＬＬ−Ｅ３３２８８δ1−
Ｉ、ＢＢＭ−１６７５、ＦＲ−９００４０５、ＦＲ−９
００４０６、ＰＤ １１４７５９、ＰＤ １１５０２
８、ＣＬ−１５７７Ａ、ＣＬ−１５７７Ｂ、ＣＬ−１５
７７Ｄ、ＣＬ−１５７７ＥおよびＣＬ−１７２４から成
る群より選択される化合物をトリフェニルホスフィンま
たはスルフヒドリル含有試薬と溶媒中で反応させ、次い
でクロマトグラフィーにより分離し、そして精製するこ
とからなる上記化合物の還元的に芳香族化された誘導体
の製造方法。
【００７６】１３．スルフヒドリル含有試薬がβ−メル
カプト−エタノール、還元したグルタチオンまたは１，
４−ジチオスレイトールから成る群より選択され、そし
て溶媒がジクロロメタン、アセトニトリル、酢酸エチ
ル、メタノール、エタノールまたはクロロホルムから成
る群より選択される上記第１２項記載の方法。
【００７７】１４．上記第１項記載のＬＬ−Ｅ３３２８
８ε−Ｉまたは上記第６項記載のＬＬ−Ｅ３３２８８ε
−Ｂrを温血動物に投与することからなる、温血動物に
おけるバクテリア感染の処置方法。
【００７８】１５．上記第１項記載のＬＬ−Ｅ３３２８
８ε−Ｉまたは上記第６項記載のＬＬ−Ｅ３３２８８ε
−Ｂｒを温血動物に投与することからなる、温血動物に
おける腫瘍の増殖抑制方法。
【００７９】１６．上記第１項記載のＬＬ−Ｅ３３２８
８ε−Ｉまたは上記第６項記載のＬＬ−Ｅ３３２８８ε
−Ｂrを温血動物に投与することからなる、温血動物に
おける白血病を後退させる方法。
【図面の簡単な説明】
【図１】ＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉのプロトン磁気共鳴
スペクトルである。
【図２】ＬＬ−Ｅ３３２８８ε−Ｉの炭素−１３磁気共
鳴スペクトルである。
【図３】ＬＬ−Ｅ３３２８８−デチオメチルγ1−Ｉの
プロトン磁気共鳴スペクトルである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 31/70 ＡＤＺ Ａ６１Ｋ 31/70 ＡＤＺ

Claims (3)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 ＬＬ−Ｅ３３２８８δ1−Ｉをトリフェ
    ニルホスフィンとジクロロメタン中で氷浴温度において
    反応させることにより製造されることを特徴とする化合
    物デチオメチルδ1−Ｉ。
  2. 【請求項２】 ＬＬ−Ｅ３３２８８δ1−Ｂｒをトリフ
    ェニルホスフィンとジクロロメタン中で氷浴温度におい
    て反応させることにより製造されることを特徴とする化
    合物デチオメチルδ1−Ｂｒ。
  3. 【請求項３】 ＬＬ−Ｅ３３２８８α1−Ｂｒ、ＬＬ−
    Ｅ３３２８８α1−Ｉ、ＬＬ−Ｅ３３２８８α2−Ｂｒ、
    ＬＬ−Ｅ３３２８８α2−Ｉ、ＬＬ−Ｅ３３２８８α3−
    Ｂｒ、ＬＬ−Ｅ３３２８８α3−Ｉ、ＬＬ−Ｅ３３２８
    ８α4−Ｂｒ、ＬＬ−Ｅ３３２８８β1−Ｂｒ、ＬＬ−Ｅ
    ３３２８８β1−Ｉ、ＬＬ−Ｅ３３２８８β2−Ｂｒ、Ｌ
    Ｌ−Ｅ３３２８８β2−Ｉ、ＬＬ−Ｅ３３２８８δ1−
    Ｉ、ＢＢＭ−１６７５、ＦＲ−９００４０５、ＦＲ−９
    ００４０６、ＰＤ １１４７５９、ＰＤ １１５０２
    ８、ＣＬ−１５７７Ａ、ＣＬ−１５７７Ｂ、ＣＬ−１５
    ７７Ｄ、ＣＬ−１５７７ＥおよびＣＬ−１７２４から成
    る群より選択される化合物の１種をトリフェニルホスフ
    ィンまたはスルフヒドリル含有試薬と溶媒中で反応さ
    せ、次いでクロマトグラフィーにより分離し、そして精
    製することを特徴とする上記化合物の還元的に芳香族化
    された誘導体の製造方法。
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