JPH10179142A - 新規微生物及び該新規微生物による物質 - Google Patents
新規微生物及び該新規微生物による物質Info
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- JPH10179142A JPH10179142A JP8356635A JP35663596A JPH10179142A JP H10179142 A JPH10179142 A JP H10179142A JP 8356635 A JP8356635 A JP 8356635A JP 35663596 A JP35663596 A JP 35663596A JP H10179142 A JPH10179142 A JP H10179142A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 ＴＮＦ誘導活性物質、抗菌性物質の両者の製
造に利用でき、その生産物全てを有効利用できる新規微
生物を提供する。 【解決手段】 受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１５９１８と
して寄託されているエンテロコッカス属に属する新規微
生物による。
造に利用でき、その生産物全てを有効利用できる新規微
生物を提供する。 【解決手段】 受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１５９１８と
して寄託されているエンテロコッカス属に属する新規微
生物による。
Description
【０００１】
【０００２】本発明は、エンテロコッカス（Ｅｎｔｅｒ
ｏｃｏｃｃｕｓ）属に属する新規微生物及び該新規微生
物による物質に関し、詳細には、受託番号ＦＥＲＭ Ｐ
−１５９１８として寄託されているエンテロコッカス属
に属する新規微生物と、その新規微生物の菌体によるＴ
ＮＦ誘導活性物質と、その新規微生物が産生する抗菌性
物質とに関する。
ｏｃｏｃｃｕｓ）属に属する新規微生物及び該新規微生
物による物質に関し、詳細には、受託番号ＦＥＲＭ Ｐ
−１５９１８として寄託されているエンテロコッカス属
に属する新規微生物と、その新規微生物の菌体によるＴ
ＮＦ誘導活性物質と、その新規微生物が産生する抗菌性
物質とに関する。
【０００３】本発明に係る新規微生物の菌体によるＴＮ
Ｆ誘導活性物質は、制癌効果を有する物質として利用で
きる。
Ｆ誘導活性物質は、制癌効果を有する物質として利用で
きる。
【０００４】また、本発明に係る新規微生物が産生する
抗菌性物質は、本発明に係る新規微生物の菌体培養時に
培地中等に産生するもので、リステリア症の原因となる
病原菌であるリステリア・モノサイトゲネス（Ｌｉｓｔ
ｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）に対して生育
抑制作用を有し、リステリア症の発生を防ぐために利用
できる。
抗菌性物質は、本発明に係る新規微生物の菌体培養時に
培地中等に産生するもので、リステリア症の原因となる
病原菌であるリステリア・モノサイトゲネス（Ｌｉｓｔ
ｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）に対して生育
抑制作用を有し、リステリア症の発生を防ぐために利用
できる。
【０００５】
【０００６】ＴＮＦとは、腫瘍壊死因子（Ｔｕｍｏｒ
Ｎｅｃｒｏｓｉｓ Ｆａｃｔｏｒ）の略称であり、体内
に於て乳酸菌等の微生物が入ったとき、それを抗原とし
て免疫を担う細胞マクロファージより誘導分泌されるタ
ンパク質サイトカインの一つであり、癌の壊死を引き起
こす因子が含まれている。
Ｎｅｃｒｏｓｉｓ Ｆａｃｔｏｒ）の略称であり、体内
に於て乳酸菌等の微生物が入ったとき、それを抗原とし
て免疫を担う細胞マクロファージより誘導分泌されるタ
ンパク質サイトカインの一つであり、癌の壊死を引き起
こす因子が含まれている。
【０００７】従来、ＴＮＦ誘導活性を有する菌について
は、ストレプトコッカス パイオジェネス（Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ），ラクトバチル
スカゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅ
ｉ），ラクトコッカス ラクティス（Ｌａｃｔｏｃｏｃ
ｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ）等が知られ、これらの菌体によ
るＴＮＦ誘導活性物質が知られている。
は、ストレプトコッカス パイオジェネス（Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ），ラクトバチル
スカゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅ
ｉ），ラクトコッカス ラクティス（Ｌａｃｔｏｃｏｃ
ｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ）等が知られ、これらの菌体によ
るＴＮＦ誘導活性物質が知られている。
【０００８】一方、リステリア症は、致命率の高い（１
５〜３３％）疾病であり、原因菌であるリステリア・モ
ノサイトゲネスは低温でも増殖をする特徴をもち、食品
衛生上、最も注目される菌の一つである。
５〜３３％）疾病であり、原因菌であるリステリア・モ
ノサイトゲネスは低温でも増殖をする特徴をもち、食品
衛生上、最も注目される菌の一つである。
【０００９】該リステリア症は、リステリア・モノサイ
トゲネスに汚染された植物、肉、動物を介して経気道、
経口、接触感染し、新生児、乳児及び免疫力の低下した
ものに感染し、髄膜炎や敗血症を起こすものである。
トゲネスに汚染された植物、肉、動物を介して経気道、
経口、接触感染し、新生児、乳児及び免疫力の低下した
ものに感染し、髄膜炎や敗血症を起こすものである。
【００１０】１９８０年代に入り、欧州諸国でチーズ等
の食品を感染源とする人の集団リステリア症が相次ぎ、
人におけるリステリア症が食品媒介感染症の一つである
ことが明らかとなった。
の食品を感染源とする人の集団リステリア症が相次ぎ、
人におけるリステリア症が食品媒介感染症の一つである
ことが明らかとなった。
【００１１】その後もリステリア症については、イギリ
スでミートパテやフランクフルターなど食肉が感染源と
思われる事例がいくつか報告されている。
スでミートパテやフランクフルターなど食肉が感染源と
思われる事例がいくつか報告されている。
【００１２】従来、リステリア・モノサイトゲネスに対
して生育抑制作用を有する抗菌性物質を産生するものと
しては、ペディオコッカス・アシヂラクチシ（Ｐｅｄｉ
ｏｃｏｃｃｕｓ ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）、及び人
や動物の腸内の常在菌である腸内の有害菌を抑える働き
を持つエンテロコッカス属に属する微生物が知られてお
り、該微生物による抗菌性物質が知られている。
して生育抑制作用を有する抗菌性物質を産生するものと
しては、ペディオコッカス・アシヂラクチシ（Ｐｅｄｉ
ｏｃｏｃｃｕｓ ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）、及び人
や動物の腸内の常在菌である腸内の有害菌を抑える働き
を持つエンテロコッカス属に属する微生物が知られてお
り、該微生物による抗菌性物質が知られている。
【００１３】
【００１４】しかしながら、従来は、ＴＮＦ誘導活性物
質の基になる微生物と、抗菌性物質を産生する微生物が
異なり、ＴＮＦ誘導活性物質の基になり、かつ、抗菌性
物質を産生する微生物は知られていない。
質の基になる微生物と、抗菌性物質を産生する微生物が
異なり、ＴＮＦ誘導活性物質の基になり、かつ、抗菌性
物質を産生する微生物は知られていない。
【００１５】即ち、微生物の菌体にＴＮＦ産生誘導活性
を有し、かつ、微生物の培養液中にリステリア・モノサ
イトゲネスに対して生育抑制作用を有する抗菌性物質を
産生するものは未だ見いだされていない。
を有し、かつ、微生物の培養液中にリステリア・モノサ
イトゲネスに対して生育抑制作用を有する抗菌性物質を
産生するものは未だ見いだされていない。
【００１６】そのため、従来は、抗腫瘍活性物質及び抗
菌性物質を得るためには、個々の微生物が必要であり、
抗腫瘍活性物質の製造に於て副生する培養液や、抗菌性
物質の生産に於て副生する菌体は利用できず、廃棄処理
する必要があった。
菌性物質を得るためには、個々の微生物が必要であり、
抗腫瘍活性物質の製造に於て副生する培養液や、抗菌性
物質の生産に於て副生する菌体は利用できず、廃棄処理
する必要があった。
【００１７】従って、本発明は、ＴＮＦ誘導活性物質、
抗菌性物質の両者の製造に利用でき、その生産物全てを
有効利用できる新規微生物を提供することを目的とす
る。
抗菌性物質の両者の製造に利用でき、その生産物全てを
有効利用できる新規微生物を提供することを目的とす
る。
【００１８】
【００１９】本発明者らは、抗腫瘍活性物質及び抗菌性
物質を同時に生産する菌株であれば複数の用途に利用で
き、また、抗腫瘍活性物質を有する菌体と抗菌性物質を
含む培養液を別々に利用する場合にも菌体、培養液共に
廃棄物とならずコストの削減になると考え、両条件を満
足する菌の検索を行い、エンテロコッカス属に属する新
規微生物エンテロコッカス フェシウム Ｓ１（Ｅｎｔ
ｅｒｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃｉｕｍ Ｓ１）が、ＴＮＦ
産生誘導活性、抗菌性物質産生能力、共に満足できるも
のであることを見いだし、本発明を完成するに至った。
物質を同時に生産する菌株であれば複数の用途に利用で
き、また、抗腫瘍活性物質を有する菌体と抗菌性物質を
含む培養液を別々に利用する場合にも菌体、培養液共に
廃棄物とならずコストの削減になると考え、両条件を満
足する菌の検索を行い、エンテロコッカス属に属する新
規微生物エンテロコッカス フェシウム Ｓ１（Ｅｎｔ
ｅｒｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃｉｕｍ Ｓ１）が、ＴＮＦ
産生誘導活性、抗菌性物質産生能力、共に満足できるも
のであることを見いだし、本発明を完成するに至った。
【００２０】即ち、本発明の課題を解決するための手段
は、下記の通りである。
は、下記の通りである。
【００２１】第１に、受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１５９
１８として寄託されているエンテロコッカス属に属する
新規微生物。第２に、受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１５９
１８として寄託されているエンテロコッカス属に属する
新規微生物の菌体によるＴＮＦ誘導活性物質。第３に、
受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１５９１８として寄託されて
いるエンテロコッカス属に属する新規微生物が産生する
抗菌性物質。
１８として寄託されているエンテロコッカス属に属する
新規微生物。第２に、受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１５９
１８として寄託されているエンテロコッカス属に属する
新規微生物の菌体によるＴＮＦ誘導活性物質。第３に、
受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１５９１８として寄託されて
いるエンテロコッカス属に属する新規微生物が産生する
抗菌性物質。
【００２２】なお、受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１５９１
８として寄託されているエンテロコッカス属に属する新
規微生物が産生する抗菌性物質には、該新規微生物が産
生する抗菌性物質含有物も含まれる。
８として寄託されているエンテロコッカス属に属する新
規微生物が産生する抗菌性物質には、該新規微生物が産
生する抗菌性物質含有物も含まれる。
【００２３】このような抗菌性物質含有物としては、培
養した培地、即ち培養液、培養上清等をあげることがで
きる。
養した培地、即ち培養液、培養上清等をあげることがで
きる。
【００２４】上記の受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１５９１
８として寄託されているエンテロコッカス属に属する新
規微生物（以下、ＥＦ−Ｓ１という）は、平成８年（１
９９６年）１０月２５日付けで工業技術院生命工学工業
技術研究所に寄託されており、次の菌学的性質を有する
ものである。
８として寄託されているエンテロコッカス属に属する新
規微生物（以下、ＥＦ−Ｓ１という）は、平成８年（１
９９６年）１０月２５日付けで工業技術院生命工学工業
技術研究所に寄託されており、次の菌学的性質を有する
ものである。
【００２５】（１）形態
【００２６】・菌の大きさは０．６〜１．２μｍで数個
から十数個が連なる連鎖球菌である。 ・グラム陽性で非運動性、非胞子形成菌である。 ・多形成はなく、色素形成をしない。
から十数個が連なる連鎖球菌である。 ・グラム陽性で非運動性、非胞子形成菌である。 ・多形成はなく、色素形成をしない。
【００２７】（２）生理学的性質
【００２８】・アンモニアの生成：＋ ・０．１％メチレンブルーミルクの還元：＋ ・チロシンの脱炭酸：＋ ・テトラゾリウムの還元：＋ ・カタラーゼの生成：− ・生育温度 １０℃：＋，４５℃：＋ ・６．５％ＮａＣｌ耐性：＋ ・ｐＨ９．６耐性：＋ ・ＶＰテスト：＋ ・レバン生成：− ・ゼラチン液化能：− ・リトマスミルクの凝固：＋ ・糖の資化性 Ｌ−アラビノース：＋ Ｄ−リボース：＋ Ｄ−キシロース：＋ グルコネイト：＋ グルコース：＋ フラクトース：＋ ガラクトース：＋ マンノース：＋ ラムノース：＋ セロビオース：＋ ラクトース：＋ マルトース：＋ メリビオース：− シュクロース：＋ ラフィノース：− サリシン：＋ トレハロース：＋ メレジトース：− マンニトール：＋ ソルビトール：− スターチ：− ・分離源：子牛の腸内
【００２９】これらの結果を元に、ＢＥＲＧＥＹ’Ｓ
ＭＡＮＵＡＬ ＯＦ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔ
ｅｒｉｏｌｏｇｙ Ｖｏｌｕｍｅ２（１９９２）で照会
したところ、ＥＦ−Ｓ１は、他の既知の菌株の性状との
比較、あるいは後に述べるＥＦ−Ｓ１のＴＮＦ誘導活性
及び培養して得られる抗菌性物質の指示菌株に対する抗
菌スペクトル等の違いからも、新規な菌株であると考え
られた。
ＭＡＮＵＡＬ ＯＦ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔ
ｅｒｉｏｌｏｇｙ Ｖｏｌｕｍｅ２（１９９２）で照会
したところ、ＥＦ−Ｓ１は、他の既知の菌株の性状との
比較、あるいは後に述べるＥＦ−Ｓ１のＴＮＦ誘導活性
及び培養して得られる抗菌性物質の指示菌株に対する抗
菌スペクトル等の違いからも、新規な菌株であると考え
られた。
【００３０】この新規な菌株であるＥＦ−Ｓ１を培養
し、分離した菌体はＴＮＦ誘導活性物質を有した。
し、分離した菌体はＴＮＦ誘導活性物質を有した。
【００３１】また、その培養液を硫安塩析した沈殿よ
り、新規な抗菌性物質が得られた。
り、新規な抗菌性物質が得られた。
【００３２】この抗菌性物質は、ポリペプチドまたはこ
れらを複合する複合体であることが確認された。
れらを複合する複合体であることが確認された。
【００３３】上記の抗菌性物質について、供試菌株を
０．０４％接種したＮｕｔｒｉｅｎｔａｇａｒ（Ｄｉｆ
ｃｏ社製）、または、ＭＲＳ ａｇａｒ（ＯＸＯＩＤ社
製）を分注した平板培地に直径５ミリの孔を切り、上記
の硫安塩析沈殿物を２０μｌずつ分注し、それぞれ供試
菌株の最適温度で培養し、孔の周囲に生じた阻止円の直
径を測定することで、抗菌スペクトルの試験を行った。
０．０４％接種したＮｕｔｒｉｅｎｔａｇａｒ（Ｄｉｆ
ｃｏ社製）、または、ＭＲＳ ａｇａｒ（ＯＸＯＩＤ社
製）を分注した平板培地に直径５ミリの孔を切り、上記
の硫安塩析沈殿物を２０μｌずつ分注し、それぞれ供試
菌株の最適温度で培養し、孔の周囲に生じた阻止円の直
径を測定することで、抗菌スペクトルの試験を行った。
【００３４】この抗菌スペクトルの試験の結果を、表
１，表２に示す。
１，表２に示す。
【００３５】
【表１】
【００３６】
【表２】
【００３７】表１，表２から分かるように、本発明に係
る抗菌性物質は、グラム陽性菌に対してのみ抗菌活性を
示し、狭い阻害スペクトルを示すことから、典型的なバ
クテリオシンの特徴を表している。
る抗菌性物質は、グラム陽性菌に対してのみ抗菌活性を
示し、狭い阻害スペクトルを示すことから、典型的なバ
クテリオシンの特徴を表している。
【００３８】また、上記の抗菌スペクトルの試験の際の
硫安塩析沈殿物について、熱安定性、及び各種酵素に対
する感受性を測定した。
硫安塩析沈殿物について、熱安定性、及び各種酵素に対
する感受性を測定した。
【００３９】なお、熱安定性、及び各種酵素に対する感
受性試験は、次の方法により実施した。
受性試験は、次の方法により実施した。
【００４０】（１）熱安定性試験
【００４１】上記の硫安塩析沈殿物を蒸留水に溶解し、
沸騰水中で３０分加熱し、冷却後上記の方法でエンテロ
コッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆ
ａｅｃａｌｉｓ）ＡＴＣＣ１３３９８を検定菌として試
験し、阻止円の形成の有無により感受性の陽性、陰性を
測定した。
沸騰水中で３０分加熱し、冷却後上記の方法でエンテロ
コッカス・フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆ
ａｅｃａｌｉｓ）ＡＴＣＣ１３３９８を検定菌として試
験し、阻止円の形成の有無により感受性の陽性、陰性を
測定した。
【００４２】（２）酵素に対する感受性試験
【００４３】上記の硫安塩析沈殿物を蒸留水に溶解し、
各種酵素を０．５ｍｇ／ｍｌとなるように添加し、３７
℃で６時間反応させた。エンテロコッカス・フェカリス
（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）ＡＴ
ＣＣ１３３９８を検定菌として上記の方法で阻止円の形
成の有無により感受性の陽性、陰性を測定した。
各種酵素を０．５ｍｇ／ｍｌとなるように添加し、３７
℃で６時間反応させた。エンテロコッカス・フェカリス
（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）ＡＴ
ＣＣ１３３９８を検定菌として上記の方法で阻止円の形
成の有無により感受性の陽性、陰性を測定した。
【００４４】熱安定性、及び各種酵素に対する感受性試
験の結果を、表３に示す。
験の結果を、表３に示す。
【００４５】
【表３】
【００４６】表３より、ＥＦ−Ｓ１の産生する抗菌性物
質は、耐熱性があり、プロテアーゼ、トリプシンに対し
て感受性があるが、ペプシン非感受性であることがわか
る。
質は、耐熱性があり、プロテアーゼ、トリプシンに対し
て感受性があるが、ペプシン非感受性であることがわか
る。
【００４７】本発明に係る抗菌性物質は、上記した方法
によって得ることができ、またポリペプチドまたはその
複合体であって、Ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−Ｋ、Ｐｒｏｎ
ａｓｅ、Ｐａｐａｉｎ、Ｐａｎｃｒｅａｔｉｎ ＮＦ、
Ｔｒｉｐｓｉｎで消化されず、１００℃で３０分加熱し
ても安定性を示すものである。
によって得ることができ、またポリペプチドまたはその
複合体であって、Ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−Ｋ、Ｐｒｏｎ
ａｓｅ、Ｐａｐａｉｎ、Ｐａｎｃｒｅａｔｉｎ ＮＦ、
Ｔｒｉｐｓｉｎで消化されず、１００℃で３０分加熱し
ても安定性を示すものである。
【００４８】本発明に係る新規微生物であるＥＦ−Ｓ１
とその新規微生物が産生する抗菌性物質、及び、抗菌性
物質含有物は、食品の保存、特に低温でのリステリア・
モノサイトゲネスの生育を抑制することに使用できる他
に、家畜等への生菌剤などに使用できる。
とその新規微生物が産生する抗菌性物質、及び、抗菌性
物質含有物は、食品の保存、特に低温でのリステリア・
モノサイトゲネスの生育を抑制することに使用できる他
に、家畜等への生菌剤などに使用できる。
【００４９】
【実施例１】
【００５０】培地として、ＭＲＳ ｂｒｏｔｈ（ＯＸＯ
ＩＤ社製）を用い、本発明に係るＥＦ−Ｓ１の前培養液
を２％接種し、３０℃で１６時間培養した。培養後、遠
心分離（８０００ｒｐｍ）により菌体と培養液とを分離
した。菌体は、培養液を取り除く目的で洗浄した後に殺
菌（１０５℃，３０分間）を行い、凍結乾燥した。得ら
れた乾燥菌体は、培養液１リットルあたり２．８２ｇ、
ＴＮＦ誘導活性が２．３６Ｕ／ｍｌ±０．４０（ｎ＝
３）であり、ＴＮＦ誘導活性に優れたＴＮＦ誘導活性物
質であった。また、培養液は有機酸による影響を取り除
くため、１０ｍＭクエン酸緩衝液（ｐＨ５．０）に対し
て一晩透析を行い、抗菌性物質を得た。抗菌性物質を含
有する透析膜内液は、１ｍｌあたり２２００ＡＵの抗菌
活性を示した。なお、ＡＵとは、透析膜内液を希釈し抗
菌スペクトルと同じ方法で抗菌活性を測定した際の阻止
円を生じる最大希釈率とした。
ＩＤ社製）を用い、本発明に係るＥＦ−Ｓ１の前培養液
を２％接種し、３０℃で１６時間培養した。培養後、遠
心分離（８０００ｒｐｍ）により菌体と培養液とを分離
した。菌体は、培養液を取り除く目的で洗浄した後に殺
菌（１０５℃，３０分間）を行い、凍結乾燥した。得ら
れた乾燥菌体は、培養液１リットルあたり２．８２ｇ、
ＴＮＦ誘導活性が２．３６Ｕ／ｍｌ±０．４０（ｎ＝
３）であり、ＴＮＦ誘導活性に優れたＴＮＦ誘導活性物
質であった。また、培養液は有機酸による影響を取り除
くため、１０ｍＭクエン酸緩衝液（ｐＨ５．０）に対し
て一晩透析を行い、抗菌性物質を得た。抗菌性物質を含
有する透析膜内液は、１ｍｌあたり２２００ＡＵの抗菌
活性を示した。なお、ＡＵとは、透析膜内液を希釈し抗
菌スペクトルと同じ方法で抗菌活性を測定した際の阻止
円を生じる最大希釈率とした。
【００５１】
【試験例１】
【００５２】上記実施例１で得たＴＮＦ誘導活性物質に
ついて、本発明に係るＥＦ−Ｓ１によって誘導されたＴ
ＮＦ（腫瘍壊死因子）誘導活性測定値を、市販品である
ピシバニール（中外製薬製）と比較した。なお、測定値
はＣａｒｓｗｅｌｌ等の方法による。その結果を表４に
示す。
ついて、本発明に係るＥＦ−Ｓ１によって誘導されたＴ
ＮＦ（腫瘍壊死因子）誘導活性測定値を、市販品である
ピシバニール（中外製薬製）と比較した。なお、測定値
はＣａｒｓｗｅｌｌ等の方法による。その結果を表４に
示す。
【００５３】
【表４】
【００５４】表４より、ＥＦ−Ｓ１の有するＴＮＦ誘導
活性はピシバニールの約１．２５倍であり、菌体をＴＮ
Ｆ誘導活性物質として利用できることがわかる。
活性はピシバニールの約１．２５倍であり、菌体をＴＮ
Ｆ誘導活性物質として利用できることがわかる。
【００５５】
【試験例２】
【００５６】本発明に係る抗菌性物質について、ＥＦ−
Ｓ１の培養時間と抗菌活性の関係を調べた。
Ｓ１の培養時間と抗菌活性の関係を調べた。
【００５７】そして、図１に、ＥＦ−Ｓ１の増殖曲線と
抗菌性物質の生産性の関係を表した。図１によると、抗
菌活性は培養後１２時間まで急激に上昇し、２０時間ま
で最高値の活性を保った。これは菌数の上昇とほぼ同じ
傾向を示している。
抗菌性物質の生産性の関係を表した。図１によると、抗
菌活性は培養後１２時間まで急激に上昇し、２０時間ま
で最高値の活性を保った。これは菌数の上昇とほぼ同じ
傾向を示している。
【００５８】
【試験例３】
【００５９】ＭＲＳ０．２寒天培地（ペプトン１．０
％，肉エキス０．８％，酵母エキス０．４％，グルコー
ス０．２％，ツイーン８０ ０．１％，リン酸水素２カ
リウム０．２％，酢酸ナトリウム０．５％，クエン酸ア
ンモニウム０．２％，硫酸マグネシウム０．０２％，硫
酸マンガン０．００５％，寒天１．５％ ｐＨ７．４）
を１２１℃で１５分間滅菌し、６０℃に冷却後、滅菌シ
ャーレに１０ｍｌずつ分注し、冷却し固化させ平板培地
とした。ＭＲＳ０．２ソフト培地（上記ＭＲＳ０．２寒
天培地の寒天含有量を０．７％としたもの）を１２１℃
で１５分間滅菌し、５５℃に冷却し、リステリア・モノ
サイトゲネスＹ−４，Ｙ−７，Ｙ−１４，Ｙ−１７を３
７℃で一晩培養した培養液を０．７％加えて上記のＭＲ
Ｓ０．２寒天培地の上に重層し冷却し固化した。この上
に直径７ミリの孔を切り、実施例１にあげた透析膜内液
２５μｌを接種し、３０℃で一晩培養し、生育阻止円の
直径を測定した。その結果、リステリア・モノサイトゲ
ネス４株とも直径２０ミリ以上の大きな阻止円を形成し
た。
％，肉エキス０．８％，酵母エキス０．４％，グルコー
ス０．２％，ツイーン８０ ０．１％，リン酸水素２カ
リウム０．２％，酢酸ナトリウム０．５％，クエン酸ア
ンモニウム０．２％，硫酸マグネシウム０．０２％，硫
酸マンガン０．００５％，寒天１．５％ ｐＨ７．４）
を１２１℃で１５分間滅菌し、６０℃に冷却後、滅菌シ
ャーレに１０ｍｌずつ分注し、冷却し固化させ平板培地
とした。ＭＲＳ０．２ソフト培地（上記ＭＲＳ０．２寒
天培地の寒天含有量を０．７％としたもの）を１２１℃
で１５分間滅菌し、５５℃に冷却し、リステリア・モノ
サイトゲネスＹ−４，Ｙ−７，Ｙ−１４，Ｙ−１７を３
７℃で一晩培養した培養液を０．７％加えて上記のＭＲ
Ｓ０．２寒天培地の上に重層し冷却し固化した。この上
に直径７ミリの孔を切り、実施例１にあげた透析膜内液
２５μｌを接種し、３０℃で一晩培養し、生育阻止円の
直径を測定した。その結果、リステリア・モノサイトゲ
ネス４株とも直径２０ミリ以上の大きな阻止円を形成し
た。
【００６０】
【００６１】本発明によれば、菌体に強いＴＮＦ誘導活
性物質を有し、リステリア・モノサイトゲネスに対し、
生育抑制作用のある抗菌性物質を産生する新規微生物を
提供することができる。
性物質を有し、リステリア・モノサイトゲネスに対し、
生育抑制作用のある抗菌性物質を産生する新規微生物を
提供することができる。
【００６２】即ち、本発明によれば、ＴＮＦ誘導活性物
質、抗菌性物質の両者の製造に利用でき、その生産物全
てを有効利用できる新規微生物を提供することができ
る。
質、抗菌性物質の両者の製造に利用でき、その生産物全
てを有効利用できる新規微生物を提供することができ
る。
【００６３】本発明に係るポリペプタイドまたはその複
合体からなる抗菌性物質は、リステリア症の原因となる
人畜共通の病原菌であるリステリア・モノサイトゲネス
に対して強い抗菌性を示し、耐熱性を有し、リステリア
症予防に効果がある。
合体からなる抗菌性物質は、リステリア症の原因となる
人畜共通の病原菌であるリステリア・モノサイトゲネス
に対して強い抗菌性を示し、耐熱性を有し、リステリア
症予防に効果がある。
【図１】本発明に係る抗菌性物質について、ＥＦ−Ｓ１
の増殖曲線と抗菌性物質の生産性の関係を表すグラフ
の増殖曲線と抗菌性物質の生産性の関係を表すグラフ
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｒ 1:01）
Claims (3)
- 【請求項１】 受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１５９１８と
して寄託されているエンテロコッカス属に属する新規微
生物。 - 【請求項２】 受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１５９１８と
して寄託されているエンテロコッカス属に属する新規微
生物の菌体によるＴＮＦ誘導活性物質。 - 【請求項３】 受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１５９１８と
して寄託されているエンテロコッカス属に属する新規微
生物が産生する抗菌性物質。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP35663596A JP4458559B2 (ja) | 1996-12-27 | 1996-12-27 | 新規微生物及び該新規微生物による物質 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP35663596A JP4458559B2 (ja) | 1996-12-27 | 1996-12-27 | 新規微生物及び該新規微生物による物質 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10179142A true JPH10179142A (ja) | 1998-07-07 |
| JP4458559B2 JP4458559B2 (ja) | 2010-04-28 |
Family
ID=18450016
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP35663596A Expired - Fee Related JP4458559B2 (ja) | 1996-12-27 | 1996-12-27 | 新規微生物及び該新規微生物による物質 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4458559B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111676154A (zh) * | 2020-05-30 | 2020-09-18 | 青岛玛斯特生物技术有限公司 | 一株粪肠球菌及其在水质改良和水产养殖中的应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0899887A (ja) * | 1994-08-01 | 1996-04-16 | Nichinichi Seiyaku Kk | 免疫賦活剤 |
| JPH08259450A (ja) * | 1995-03-17 | 1996-10-08 | Nichinichi Seiyaku Kk | インターフェロン産生増強剤 |
-
1996
- 1996-12-27 JP JP35663596A patent/JP4458559B2/ja not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0899887A (ja) * | 1994-08-01 | 1996-04-16 | Nichinichi Seiyaku Kk | 免疫賦活剤 |
| JPH08259450A (ja) * | 1995-03-17 | 1996-10-08 | Nichinichi Seiyaku Kk | インターフェロン産生増強剤 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| 北関東医学, vol. 46, no. 2, JPN4006007059, March 1996 (1996-03-01), JP, pages 89 - 102, ISSN: 0000732609 * |
| 北関東医学, vol. 46, no. 2, JPNX006042753, March 1996 (1996-03-01), JP, pages 89 - 102, ISSN: 0000773875 * |
| 北関東医学, vol. 46, no. 2, JPNX006060556, March 1996 (1996-03-01), JP, pages 89 - 102, ISSN: 0000800184 * |
| 日本農芸化学会誌, vol. 68, no. 3, JPN4006007058, March 1994 (1994-03-01), JP, pages 360 - 2, ISSN: 0000732608 * |
| 日本農芸化学会誌, vol. 68, no. 3, JPNX006042752, March 1994 (1994-03-01), JP, pages 360 - 2, ISSN: 0000773874 * |
| 日本農芸化学会誌, vol. 68, no. 3, JPNX006060555, March 1994 (1994-03-01), JP, pages 360 - 2, ISSN: 0000800183 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111676154A (zh) * | 2020-05-30 | 2020-09-18 | 青岛玛斯特生物技术有限公司 | 一株粪肠球菌及其在水质改良和水产养殖中的应用 |
| CN111676154B (zh) * | 2020-05-30 | 2022-04-05 | 青岛玛斯特生物技术有限公司 | 一株粪肠球菌及其在水质改良和水产养殖中的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP4458559B2 (ja) | 2010-04-28 |
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| JP4458559B2 (ja) | 新規微生物及び該新規微生物による物質 |
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