JPH10147594A

JPH10147594A - Antitumor substances be-43547s

Info

Publication number: JPH10147594A
Application number: JP32350896A
Authority: JP
Inventors: Hiroshi Nishioka; 浩西岡; Shigeru Nakajima; 中島　　茂; Masao Nagashima; 正生長嶋; Katsuhisa Ojiri; 勝久小尻; Hiroyuki Suda; 寛之須田
Original assignee: Banyu Phamaceutical Co Ltd
Current assignee: MSD KK
Priority date: 1996-11-19
Filing date: 1996-11-19
Publication date: 1998-06-02

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To obtain the subject new compounds, comprising an antitumor substance prepared by culturing a microorganism such as Streptomyces sp. or its mutant, capable of inhibiting the proliferation of tumor cells and manifesting antitumor actions and useful as a therapeutic agent, etc., for cancer. SOLUTION: The new antitumor substances BE-43537s are represented by the formula [R is (CH2 )10 CH(CH3 )2 , (CH2 )12 CH3 , (CH2 )10 CH(CH3 )CH2 CH3 , (CH2 )11 CH(CH3 )2 , (CH2 )13 CH3 , (CH2 )12 CH(CH3 ) or (CH2 )14 (CH3 )] and capable of inhibiting the proliferation of tumorous cells and manifesting antitumor actions and useful as a therapeutic agent for cancer in the medicinal field. The antitumor substances are obtained by culturing a microorganism having the ability to produce the compounds represented by the formula [e.g. Streptomyces sp. A43547 (FERM P-14444)] or its mutant and collecting the resultant product from the cultured product.

Description

DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は医薬の分野で有用で
あり、より具体的には腫瘍細胞の増殖を阻害して抗腫瘍
作用を示す新規化合物、その製造法及びその用途並びに
該化合物を産生する微生物に関するものである。TECHNICAL FIELD [0001] The present invention is useful in the field of medicine, and more specifically, a novel compound having an antitumor effect by inhibiting the growth of tumor cells, a method for producing the compound, its use, and production of the compound. Pertaining to microorganisms that do.

【０００２】[0002]

【従来の技術】癌化学療法の分野においては、既に多く
の化合物が医薬品として実用化されている。しかしなが
らさまざまな種類の腫瘍に対してその効果は必ずしも充
分ではなく、また臨床上これらの薬剤に対する腫瘍細胞
の耐性現象が明らかにされるにつれ、その臨床的応用性
は複雑化している［第４７回日本癌学会総会記事、１２
頁〜１５頁（１９８８年）等参照］。このような状況
下、癌治療の分野においては常に新規抗腫瘍性物質の開
発が求められている。2. Description of the Related Art In the field of cancer chemotherapy, many compounds have already been put into practical use as pharmaceuticals. However, its effect on various types of tumors is not always sufficient, and its clinical applicability is complicated as the phenomenon of resistance of tumor cells to these drugs is clinically revealed [47] Article of the General Meeting of the Japanese Cancer Society, 12
Pp. 15-15 (1988) etc.]. Under such circumstances, the development of new antitumor substances is always required in the field of cancer treatment.

【０００３】[0003]

【発明が解決しようとする課題】本発明は上記の希求に
応えることのできる新規な抗腫瘍性物質を提供すること
を目的とするものである。即ち、既存の抗腫瘍性物質が
充分に効果を発揮できない種々の腫瘍に対しても抗腫瘍
効果を発揮する化合物を提供することが本発明が解決し
ようとする課題である。SUMMARY OF THE INVENTION An object of the present invention is to provide a novel antitumor substance which can satisfy the above demand. That is, an object of the present invention is to provide a compound that exhibits an antitumor effect even on various tumors in which existing antitumor substances cannot sufficiently exert an effect.

【０００４】[0004]

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課
題を解決すべく、抗腫瘍活性を有する物質について微生
物二次代謝産物を広くスクリーニングした結果、後記一
般式［Ｉ］で表される化合物が優れた抗腫瘍作用を示す
ことを見いだして本発明を完成した。即ち、本発明は新
規な一般式［Ｉ］Means for Solving the Problems In order to solve the above-mentioned problems, the present inventors have screened a wide range of secondary metabolites of microorganisms for substances having antitumor activity, and as a result, they are represented by the following general formula [I]. The present invention has been completed by finding out that the compounds exhibit excellent antitumor activity. That is, the present invention provides a novel compound represented by the general formula [I]:

【０００５】[0005]

【化２】［式中、Ｒは−（ＣＨ₂）₁₀ＣＨ（ＣＨ₃）₂、−（Ｃ
Ｈ₂）₁₂ＣＨ₃、−（ＣＨ₂）₁₀ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂Ｃ
Ｈ₃、−（ＣＨ₂）₁₁ＣＨ（ＣＨ₃）₂、−（ＣＨ₂）₁₃Ｃ
Ｈ₃、−（ＣＨ₂）₁₂ＣＨ（ＣＨ₃）₂又は−（ＣＨ₂）₁₄
ＣＨ₃を示す］で表される化合物、その製法及び用途、
並びに一般式［Ｉ］の化合物を産生する能力を有するス
トレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属に属す
る微生物に関するものである。Embedded image[Wherein, R represents-(CH_Two)_TenCH (CH_Three)_Two,-(C
H_Two)₁₂CH_Three,-(CH_Two)_TenCH (CH_Three)CH_TwoC
H_Three,-(CH_Two)₁₁CH (CH_Three)_Two,-(CH_Two)₁₃C
H_Three,-(CH_Two)₁₂CH (CH_Three)_TwoOr-(CH_Two)₁₄
CH_ThreeThe compound represented by the formula, its production method and use,
And a compound capable of producing a compound of the general formula [I].
Belongs to the genus Streptomyces
Microorganisms.

【０００６】一般式［Ｉ］の化合物は、その産生菌株ス
トレプトミセス・エスピーＡ４３５４７株に因んで、
Ｒが−（ＣＨ₂）₁₀ＣＨ（ＣＨ₃）₂である化合物をＢＥ
−４３５４７Ａ₁、−（ＣＨ₂）₁₂ＣＨ₃である化合物を
ＢＥ−４３５４７Ａ₂、−（ＣＨ₂）₁₀ＣＨ（ＣＨ₃）Ｃ
Ｈ₂ＣＨ₃である化合物をＢＥ−４３５４７Ｂ₁、−（Ｃ
Ｈ₂）₁₁ＣＨ（ＣＨ₃）₂である化合物をＢＥ−４３５４
７Ｂ₂、−（ＣＨ₂）₁₃ＣＨ₃である化合物をＢＥ−４３
５４７Ｂ₃、−（ＣＨ₂）₁₂ＣＨ（ＣＨ₃）₂である化合物
をＢＥ−４３５４７Ｃ₁、−（ＣＨ₂）₁₄ＣＨ₃である化
合物をＢＥ−４３５４７Ｃ₂と称し、またこれらを総称
してＢＥ−４３５４７類と称する。以下に本発明にかか
わる新規な抗腫瘍性物質ＢＥ−４３５４７類の物理化学
的な性状を示す。下記にＮＭＲ測定における略号の意味
を示す。ｓ：シングレットｄ：ダブレットｔ：トリプレットｑ：カルテットｍ：マルチプレットｂｒ：ブロードＪ：カップリング定数Ｈｚ：ヘルツＢＥ−４３５４７Ａ₁の物理化学的性状性状；白色アモルファス状固体若しくは結晶分子式；Ｃ₃₀Ｈ₄₉Ｎ₃Ｏ₇ 質量分析；［高分解能ＦＡＢ−ＭＳ］（Ｍ＋Ｈ）⁺とし
て：実測値５６４．３６４４計算値５６４．３６４９比旋光度；［α］²⁰ _D＝＋１２．８°（ｃ＝０．５，Ｍ
ｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃）紫外部吸収スペクトル；λ_max（ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃，
ｎｍ（ε））：２３８ｓｈ（１３，２００），２５８
（１６，２００）赤外部吸収スペクトル；（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）：３４４
２，３４１０，３３６９，３２５３，２９２０，２８５
２，１７４９，１７０９，１６８９，１６６２，１６１
８，１５９１，１５３３，１５１６，１４６８，１４０
０，１２７５，１１９２，１１６５，１１０９，１０８
２，１０１８，９７４，９３７，８７０，８４９¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
_6,δｐｐｍ）：８．５９（１Ｈ，ｓ），８．３０（１
Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．７，５．５Ｈｚ），７．０５（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ），６．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝１５．２Ｈｚ），６．２０（１Ｈ，ｓ），５．７２
（１Ｈ，ｓ），５．２７（１Ｈ，ｓ），５．０５（１
Ｈ，ｂｒｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），４．５２（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝１９．０Ｈｚ），４．００（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１
６．５，５．５Ｈｚ），３．７８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１
６．５，６．７Ｈｚ），３．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１
９．０Ｈｚ），３．３３（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝９．８，
７．０Ｈｚ），２．９１（３Ｈ，ｓ），１．６１（３
Ｈ，ｓ），１．６１（１Ｈ，ｍ），１．４６（１Ｈ，
ｍ），１．４２（１Ｈ，ｍ），１．１２−１．２８（１
６Ｈ，ｍ），１．１０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），
１．０５（２Ｈ，ｍ），０．７７（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．
７Ｈｚ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
_6,δｐｐｍ）：２１１．５（ｓ），１７３．７（ｓ），
１６７．９（ｓ），１６７．３（ｓ），１６６．５
（ｓ），１３９．５（ｄ），１３６．８（ｓ），１１
６．３（ｄ），１１４．９（ｔ），８０．４（ｓ），７
６．２（ｄ），５０．３（ｔ），４４．０（ｔ），４
３．７（ｄ），３８．３（ｔ），３５．１（ｑ），３
１．３（ｔ），２９．２（ｔ），２８．９（ｔ），２
８．９（ｔ），２８．８（ｔ），２８．７（ｔ），２
８．７（ｔ），２７．２（ｄ），２６．７（ｔ），２
４．２（ｔ），２２．１（ｑ），２２．１（ｑ），２
０．７（ｑ），１５．７（ｑ）溶解性；クロロホルム等の有機溶媒に溶け易く、水に溶
けにくい。酸性、中性、塩基性物質の区別；中性物質呈色反応；硫酸反応陽性Ｒｆ値；０．５３［メルク社製キーゼルゲル６０Ｆ
₂₅₄使用、展開溶媒：クロロホルム−メタノール（１
０：１）］ＲＴ；１０．６ｍｉｎ［高速液体クロマトグラフィー；
カラム：クロマトレックス−ＯＤＳ４．６Φｘ２５０
ｍｍ、溶出溶媒：９０％メタノール、流速：１．０ｍｌ
／ｍｉｎ、検出：ＵＶ２５４ｎｍ］ＢＥ−４３５４７Ａ₂の物理化学的性状性状；白色アモルファス状固体若しくは結晶分子式；Ｃ₃₀Ｈ₄₉Ｎ₃Ｏ₇ 質量分析；［高分解能ＦＡＢ−ＭＳ］（Ｍ＋Ｈ）⁺とし
て：実測値５６４．３６４０計算値５６４．３６４９比旋光度；［α］²⁰ _D＝＋９°（ｃ＝１．０，ＭｅＯＨ
−ＣＨＣｌ₃）紫外部吸収スペクトル；λ_max（ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃，
ｎｍ（ε））：２３６ｓｈ（１１，６００），２５７
（１４，３００）赤外部吸収スペクトル；（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）：３４０
６，３３６７，３３０２，３２６９，２９２０，２８５
０，１７４７，１７０７，１６６０，１６１８，１５９
１，１５３１，１５１４，１４６８，１４００，１３７
７，１２６９，１１９２，１１６１，１１３４，１１１
１，１０８０，１０１２，９７２，９３７，８６６，８
４９¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
_6,δｐｐｍ）：８．５９（１Ｈ，ｓ），８．３２（１
Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．７，５．５Ｈｚ），７．０４（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ），６．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝１５．３Ｈｚ），６．２１（１Ｈ，ｓ），５．７２
（１Ｈ，ｓ），５．２６（１Ｈ，ｓ），５．０４（１
Ｈ，ｂｒｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），４．５２（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝１９．２Ｈｚ），４．００（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１
６．５，５．５Ｈｚ），３．７７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１
６．５，６．７Ｈｚ），３．６６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１
９．２Ｈｚ），３．３３（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝９．８，
７．０Ｈｚ），２．９１（３Ｈ，ｓ），１．６１（３
Ｈ，ｓ），１．６１（１Ｈ，ｍ），１．４７（１Ｈ，
ｍ），１．１２−１．２８（２２Ｈ，ｍ），１．０９
（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），０．７８（３Ｈ，ｔ，
Ｊ＝６．７Ｈｚ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
_6,δｐｐｍ）：２１１．６（ｓ），１７３．７（ｓ），
１６７．９（ｓ），１６７．３（ｓ），１６６．５
（ｓ），１３９．５（ｄ），１３６．８（ｓ），１１
６．３（ｄ），１１４．９（ｔ），８０．４（ｓ），７
６．２（ｄ），５０．３（ｔ），４４．０（ｔ），４
３．７（ｄ），３５．０（ｑ），３１．３（ｔ），３
１．２（ｔ），２８．９（ｔ），２８．９（ｔ），２
８．９（ｔ），２８．９（ｔ），２８．８（ｔ），２
８．７（ｔ），２８．７（ｔ），２８．６（ｔ），２
４．２（ｔ），２２．０（ｔ），２０．７（ｑ），１
５．７（ｑ），１３．５（ｑ）溶解性；クロロホルム等の有機溶媒に溶け易く、水に溶
けにくい。酸性、中性、塩基性物質の区別；中性物質呈色反応；硫酸反応陽性Ｒｆ値；０．５３［メルク社製キーゼルゲル６０Ｆ
₂₅₄使用、展開溶媒：クロロホルム−メタノール（１
０：１）］ＲＴ；１１．３ｍｉｎ［高速液体クロマトグラフィー；
カラム：クロマトレックス−ＯＤＳ４．６Φｘ２５０
ｍｍ、溶出溶媒：９０％メタノール、流速：１．０ｍｌ
／ｍｉｎ、検出：ＵＶ２５４ｎｍ］ＢＥ−４３５４７Ｂ₁の物理化学的性状性状；白色アモルファス状固体若しくは結晶分子式；Ｃ₃₁Ｈ₅₁Ｎ₃Ｏ₇ 質量分析；［高分解能ＦＡＢ−ＭＳ］（Ｍ＋Ｈ）⁺とし
て：実測値５７８．３８０７計算値５７８．３８０５比旋光度；［α］²⁰ _D＝＋１９．６°（ｃ＝０．５，Ｍ
ｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃）紫外部吸収スペクトル；λ_max（ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃，
ｎｍ（ε））：２３８ｓｈ（１２，１００），２５７
（１４，８００）赤外部吸収スペクトル；（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）：３４４
２，３４０８，３３６９，３３３１，３２６１，２９６
２，２９２０，２８５２，２３３５，１７４９，１７０
７，１６６２，１６１６，１５８９，１５３５，１５１
４，１４６６，１４２７，１４００，１３７７，１３５
０，１２７７，１１９０，１１６１，１１３４，１１０
９，１０７８，１０１２，９７２，９３５，８６８，８
４９¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
_6,δｐｐｍ）：８．５７（１Ｈ，ｓ），８．１３（１
Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），７．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
１５．１Ｈｚ），６．２８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．１Ｈ
ｚ），６．０５（１Ｈ，ｓ），５．７２（１Ｈ，ｓ），
５．２９（１Ｈ，ｓ），５．０８（１Ｈ，ｂｒｔ，Ｊ＝
１０．０Ｈｚ），４．５２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１８．９Ｈ
ｚ），４．０３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６．５，５．８Ｈ
ｚ），３．８０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６．５，６．７Ｈ
ｚ），３．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１８．９Ｈｚ），３．
３４（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝１０．０，７．０Ｈｚ），２．
９２（３Ｈ，ｓ），１．６１（３Ｈ，ｓ），１．６０
（１Ｈ，ｍ），１．４６（１Ｈ，ｍ），１．１２−１．
２８（１９Ｈ，ｍ），１．１０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．０
Ｈｚ），１．０２（１Ｈ，ｍ），０．９９（１Ｈ，
ｍ），０．７６（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），０．７
４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
_6,δｐｐｍ）：２１１．５（ｓ），１７３．７（ｓ），
１６７．９（ｓ），１６７．２（ｓ），１６６．６
（ｓ），１３９．６（ｄ），１３６．７（ｓ），１１
６．２（ｄ），１１５．２（ｔ），８０．４（ｓ），７
６．１（ｄ），５０．４（ｔ），４４．０（ｔ），４
３．９（ｄ），３５．９（ｔ），３５．１（ｑ），３
３．７（ｄ），３１．４（ｔ），２９．３（ｔ），２
９．０（ｔ），２８．９（ｔ），２８．９（ｔ），２
８．８（ｔ），２８．８（ｔ），２８．７（ｔ），２
６．４（ｔ），２４．２（ｔ），２０．７（ｑ），１
８．６（ｑ），１５．７（ｑ），１０．８（ｑ）溶解性；クロロホルム等の有機溶媒に溶け易く、水に溶
けにくい。酸性、中性、塩基性物質の区別；中性物質呈色反応；硫酸反応陽性Ｒｆ値；０．５３［メルク社製キーゼルゲル６０Ｆ
₂₅₄使用、展開溶媒：クロロホルム−メタノール（１
０：１）］ＲＴ；１３．４ｍｉｎ［高速液体クロマトグラフィー；
カラム：クロマトレックス−ＯＤＳ４．６Φｘ２５０
ｍｍ、溶出溶媒：９０％メタノール、流速：１．０ｍｌ
／ｍｉｎ、検出：ＵＶ２５４ｎｍ］，２２．８ｍｉｎ
［高速液体クロマトグラフィー；カラム：フルオフィッ
クス４．６Φｘ２５０ｍｍ、溶出溶媒：７０％メタノ
ール、流速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ、検出：ＵＶ２５４ｎ
ｍ］ＢＥ−４３５４７Ｂ₂の物理化学的性状性状；白色アモルファス状固体若しくは結晶分子式；Ｃ₃₁Ｈ₅₁Ｎ₃Ｏ₇ 質量分析；［高分解能ＦＡＢ−ＭＳ］（Ｍ＋Ｈ）⁺とし
て：実測値５７８．３８０４計算値５７８．３８０５比旋光度；［α］²⁰ _D＝＋１６．８°（ｃ＝０．５，Ｍ
ｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃）紫外部吸収スペクトル；λ_max（ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃，
ｎｍ（ε））：２３６ｓｈ（１３，５００），２５７
（１６，５００）赤外部吸収スペクトル；（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）：３４４
４，３４０６，３３６９，３２６１，３２５３，２９２
０，２８５０，２３６２，２３３３，１７４９，１７０
７，１６６２，１６１４，１５８９，１５３３，１５１
２，１４６８，１４２９，１４００，１３７７，１３４
６，１２７７，１１９０，１１６３，１１３４，１１０
９，１０７８，１０１６，９７４，９３７，８６６，８
４９¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
_6,δｐｐｍ）：８．５７（１Ｈ，ｓ），８．１６（１
Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．７，５．５Ｈｚ），７．０８（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ），６．２８（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝１５．０Ｈｚ），６．０７（１Ｈ，ｓ），５．７２
（１Ｈ，ｓ），５．２８（１Ｈ，ｓ），５．０８（１
Ｈ，ｂｒｔ，Ｊ＝９．７Ｈｚ），４．５２（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝１９．２Ｈｚ），４．０３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１
６．５，５．５Ｈｚ），３．７９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１
６．５，６．７Ｈｚ），３．６３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１
９．２Ｈｚ），３．３４（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝９．７，
７．０Ｈｚ），２．９２（３Ｈ，ｓ），１．６１（３
Ｈ，ｓ），１．６０（１Ｈ，ｍ），１．４６（１Ｈ，
ｍ），１．４３（１Ｈ，ｍ），１．１２−１．２８（１
８Ｈ，ｍ），１．１０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），
１．０５（２Ｈ，ｍ），０．７７（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．
４Ｈｚ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
_6,δｐｐｍ）：２１１．５（ｓ），１７３．７（ｓ），
１６７．９（ｓ），１６７．２（ｓ），１６６．５
（ｓ），１３９．６（ｄ），１３６．７（ｓ），１１
６．２（ｄ），１１５．２（ｔ），８０．４（ｓ），７
６．１（ｄ），５０．３（ｔ），４４．０（ｔ），４
３．９（ｄ），３８．３（ｔ），３５．１（ｑ），３
１．４（ｔ），２９．２（ｔ），２９．０（ｔ），２
８．９（ｔ），２８．９（ｔ），２８．９（ｔ），２
８．８（ｔ），２８．７（ｔ），２７．２（ｄ），２
６．７（ｔ），２４．２（ｔ），２２．０（ｑ），２
２．０（ｑ），２０．７（ｑ），１５．７（ｑ）溶解性；クロロホルム等の有機溶媒に溶け易く、水に溶
けにくい。酸性、中性、塩基性物質の区別；中性物質呈色反応；硫酸反応陽性Ｒｆ値；０．５３［メルク社製キーゼルゲル６０Ｆ
₂₅₄使用、展開溶媒：クロロホルム−メタノール（１
０：１）］ＲＴ；１３．４ｍｉｎ［高速液体クロマトグラフィー；
カラム：クロマトレックス−ＯＤＳ４．６Φｘ２５０
ｍｍ、溶出溶媒：９０％メタノール、流速：１．０ｍｌ
／ｍｉｎ、検出：ＵＶ２５４ｎｍ］，２４．２ｍｉｎ
［高速液体クロマトグラフィー；カラム：フルオフィッ
クス４．６Φｘ２５０ｍｍ、溶出溶媒：７０％メタノ
ール、流速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ、検出：ＵＶ２５４ｎ
ｍ］ＢＥ−４３５４７Ｂ₃の物理化学的性状性状；白色アモルファス状固体若しくは結晶分子式；Ｃ₃₁Ｈ₅₁Ｎ₃Ｏ₇ 質量分析；［高分解能ＦＡＢ−ＭＳ］（Ｍ＋Ｈ）⁺とし
て：実測値５７８．３７８５計算値５７８．３８０５比旋光度；［α］²⁰ _D＝＋９．４°（ｃ＝１．０，Ｍｅ
ＯＨ−ＣＨＣｌ₃）紫外部吸収スペクトル；λ_max（ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃，
ｎｍ（ε））：２３８ｓｈ（１３，３００），２５８
（１６，４００）赤外部吸収スペクトル；（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）：３４４
４，３４０８，３３６９，３２６７，２９２０，２８５
０，１７４９，１６９１，１６６２，１６１６，１５９
１，１５３３，１５１２，１４６８，１４００，１３７
７，１２７５，１１９２，１１６３，１１０９，１０８
０，１０１２，９７４，９３７，８６８，８４９¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
_6,δｐｐｍ）：８．５８（１Ｈ，ｓ），８．１８（１
Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．４，５．５Ｈｚ），７．０７（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ），６．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝１５．２Ｈｚ），６．１０（１Ｈ，ｓ），５．７２
（１Ｈ，ｓ），５．２８（１Ｈ，ｓ），５．０７（１
Ｈ，ｂｒｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），４．５２（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝９．６Ｈｚ），４．０２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６．
５，５．５Ｈｚ），３．７９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６．
５，６．４Ｈｚ），３．６３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．６Ｈ
ｚ），３．３４（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝９．８，７．０Ｈ
ｚ），２．９２（３Ｈ，ｓ），１．６１（３Ｈ，ｓ），
１．６１（１Ｈ，ｍ），１．４７（１Ｈ，ｍ），１．１
２−１．２８（２４Ｈ，ｍ），１．１０（３Ｈ，ｄ，Ｊ
＝７．０Ｈｚ），０．７８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．７Ｈ
ｚ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
_6,δｐｐｍ）：２１１．５（ｓ），１７３．７（ｓ），
１６７．９（ｓ），１６７．３（ｓ），１６６．６
（ｓ），１３９．６（ｄ），１３６．８（ｓ），１１
６．２（ｄ），１１５．２（ｔ），８０．４（ｓ），７
６．１（ｄ），５０．４（ｔ），４４．０（ｔ），４
３．９（ｄ），３５．１（ｑ），３１．４（ｔ），３
１．２（ｔ），２９．０（ｔ），２９．０（ｔ），２
９．０（ｔ），２８．９（ｔ），２８．９（ｔ），２
８．９（ｔ），２８．８（ｔ），２８．７（ｔ），２
８．６（ｔ），２４．２（ｔ），２２．０（ｔ），２
０．７（ｑ），１５．７（ｑ），１３．５（ｑ）溶解性；クロロホルム等の有機溶媒に溶け易く、水に溶
けにくい。酸性、中性、塩基性物質の区別；中性物質呈色反応；硫酸反応陽性Ｒｆ値；０．５３［メルク社製キーゼルゲル６０Ｆ
₂₅₄使用、展開溶媒：クロロホルム−メタノール（１
０：１）］ＲＴ；１４．５ｍｉｎ［高速液体クロマトグラフィー；
カラム：クロマトレックス−ＯＤＳ４．６Φｘ２５０
ｍｍ、溶出溶媒：９０％メタノール、流速：１．０ｍｌ
／ｍｉｎ、検出：ＵＶ２５４ｎｍ］ＢＥ−４３５４７Ｃ₁の物理化学的性状性状；白色アモルファス状固体若しくは結晶分子式；Ｃ₃₂Ｈ₅₃Ｎ₃Ｏ₇ 質量分析；［高分解能ＦＡＢ−ＭＳ］（Ｍ＋Ｈ）⁺とし
て：実測値５９２．３９３０計算値５９２．３９６２比旋光度；［α］²⁰ _D＝＋１３．７°（ｃ＝１．０，Ｍ
ｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃）紫外部吸収スペクトル；λ_max（ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃，
ｎｍ（ε））：２３５ｓｈ（１１，５００），２５６
（１４，８００）赤外部吸収スペクトル；（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）：３４４
２，３４１０，３３７１，２９１８，２８５０，１７４
９，１７０７，１６８９，１６６０，１５３３，１５１
６，１４６８，１４００，１２７５，１１９２，１１６
５，１１３４，１１１１，１０８０，１０１８，９７
４，９３７，８６８，８４９¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
_6,δｐｐｍ）：８．６０（１Ｈ，ｓ），８．３４（１
Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，５．５Ｈｚ），７．０４（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ），６．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝１５．０Ｈｚ），６．２３（１Ｈ，ｓ），５．７２
（１Ｈ，ｓ），５．２６（１Ｈ，ｓ），５．０４（１
Ｈ，ｂｒｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），４．５２（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝１９．０Ｈｚ），４．００（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１
６．５，５．５Ｈｚ），３．７７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１
６．５，６．８Ｈｚ），３．６６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１
９．０Ｈｚ），３．３３（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝９．８，
７．０Ｈｚ），２．９１（３Ｈ，ｓ），１．６１（３
Ｈ，ｓ），１．６１（１Ｈ，ｍ），１．４６（１Ｈ，
ｍ），１．４２（１Ｈ，ｍ），１．１２−１．２９（２
０Ｈ，ｍ），１．０９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），
１．０５（２Ｈ，ｍ），０．７７（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．
７Ｈｚ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
_6,δｐｐｍ）：２１１．６（ｓ），１７３．８（ｓ），
１６７．９（ｓ），１６７．３（ｓ），１６６．６
（ｓ），１３９．５（ｄ），１３６．８（ｓ），１１
６．３（ｄ），１１４．９（ｔ），８０．４（ｓ），７
６．２（ｄ），５０．３（ｔ），４４．０（ｔ），４
３．７（ｔ），３８．３（ｔ），３５．１（ｑ），３
１．３（ｔ），２９．２（ｔ），２９．０（ｔ），２
８．９（ｔ），２８．９（ｔ），２８．９（ｔ），２
８．９（ｔ），２８．８（ｔ），２８．７（ｔ），２
７．２（ｔ），２６．７（ｔ），２４．２（ｔ），２
２．１（ｑ），２２．１（ｑ），２０．７（ｑ），１
５．７（ｑ）溶解性；クロロホルム等の有機溶媒に溶け易く、水に溶
けにくい。酸性、中性、塩基性物質の区別；中性物質呈色反応；硫酸反応陽性Ｒｆ値；０．５３［メルク社製キーゼルゲル６０Ｆ
₂₅₄使用、展開溶媒：クロロホルム−メタノール（１
０：１）］ＲＴ；１７．４ｍｉｎ［高速液体クロマトグラフィー；
カラム：クロマトレックス−ＯＤＳ４．６Φｘ２５０
ｍｍ、溶出溶媒：９０％メタノール、流速：１．０ｍｌ
／ｍｉｎ、検出：ＵＶ２５４ｎｍ］ＢＥ−４３５４７Ｃ₂の物理化学的性状性状；白色アモルファス状固体若しくは結晶分子式；Ｃ₃₂Ｈ₅₃Ｎ₃Ｏ₇ 質量分析；［高分解能ＦＡＢ−ＭＳ］（Ｍ＋Ｈ）⁺とし
て：実測値５９２．３９７６計算値５９２．３９６２比旋光度；［α］²⁰ _D＝＋１５．４°（ｃ＝０．３２，
ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃）紫外部吸収スペクトル；λ_max（ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃，
ｎｍ（ε））：２３８ｓｈ（１４，７００），２５７
（１８，３００）赤外部吸収スペクトル；（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）：３３６
３，３２４６，２９２２，２８４８，２３６４，１７４
５，１７０７，１６５３，１６１６，１５８９，１５１
６，１４６４，１４２７，１３９８，１２５９，１１９
４，１１０９，１０８４，１０１４，９７６，９４１，
８６８¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
_6,δｐｐｍ）：８．６０（１Ｈ，ｓ），８．３９（１
Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．４，５．５Ｈｚ），７．０３（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ），６．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝１５．２Ｈｚ），６．２９（１Ｈ，ｂｒｓ），５．７
１（１Ｈ，ｓ），５．２６（１Ｈ，ｓ），５．０３（１
Ｈ，ｂｒｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），４．５２（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝１９．２Ｈｚ），３．９９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１
６．２，５．５Ｈｚ），３．７７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１
６．２，６．４Ｈｚ），３．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１
９．２Ｈｚ），３．３３（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝９．８，
６．７Ｈｚ），２．９１（３Ｈ，ｓ），１．６０（３
Ｈ，ｓ），１．６０（１Ｈ，ｍ），１．４７（１Ｈ，
ｍ），１．１２−１．２８（２６Ｈ，ｍ），１．０９
（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），０．７８（３Ｈ，ｔ，
Ｊ＝６．７Ｈｚ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ
_6,δｐｐｍ）：２１１．６（ｓ），１７３．８（ｓ），
１６７．９（ｓ），１６７．４（ｓ），１６６．５
（ｓ），１３９．５（ｄ），１３６．８（ｓ），１１
６．３（ｄ），１１４．８（ｔ），８０．４（ｓ），７
６．２（ｄ），５０．３（ｔ），４４．０（ｔ），４
３．７（ｄ），３５．０（ｑ），３１．３（ｔ），３
１．２（ｔ），２８．９（ｔ），２８．９（ｔ），２
８．９（ｔ），２８．９（ｔ），２８．９（ｔ），２
８．９（ｔ），２８．９（ｔ），２８．８（ｔ），２
８．７（ｔ），２８．６（ｔ），２４．２（ｔ），２
２．０（ｔ），２０．７（ｑ），１５．７（ｑ），１
３．５（ｑ）溶解性；クロロホルム等の有機溶媒に溶け易く、水に溶
けにくい。酸性、中性、塩基性物質の区別；中性物質呈色反応；硫酸反応陽性Ｒｆ値；０．５３［メルク社製キーゼルゲル６０Ｆ
₂₅₄使用、展開溶媒：クロロホルム−メタノール（１
０：１）］ＲＴ；１８．８ｍｉｎ［高速液体クロマトグラフィー；
カラム：クロマトレックス−ＯＤＳ４．６Φｘ２５０
ｍｍ、溶出溶媒：９０％メタノール、流速：１．０ｍｌ
／ｍｉｎ、検出：ＵＶ２５４ｎｍ］ＢＥ−４３５４７類の生物学的活性（抗腫瘍作用）抗腫瘍性物質ＢＥ−４３５４７類のマウス実験腫瘍細胞
に対する増殖阻止作用を決定するため、試験管内で試験
を行なった。マウス白血病細胞Ｐ３８８に対する抗腫瘍
作用試験は、ＢＥ−４３５４７類をジメチルスルホキシ
ドに溶解した後、ジメチルスルホキシドで逐次希釈して
から、牛胎児血清１０％含有ＲＰＭＩ１６４０培地（２
０ｍＭの２−メルカプトエタノールを含む）に加え検液
とした。１ｘ１０³個の腫瘍細胞を含む細胞培養培地
（牛胎児血清１０％含有ＲＰＭＩ１６４０培地、２０ｍ
Ｍの２−メルカプトエタノールを含む）５０μｌを９６
穴マイクロプレートに分注し、３７℃で２４時間、５％
ＣＯ₂下で培養した後に上記の検液５０μｌを加え、３
７℃で７２時間、５％ＣＯ₂下で培養後、ＭＴＴ測定法
により対照群と比較した。マウス大腸癌細胞ｃｏｌｏｎ
２６に対する抗腫瘍試験は、ＢＥ−４３５４７類をジメ
チルスルホキシドに溶解した後ジメチルスルホキシドで
逐次希釈してから、牛胎児血清１０％含有ＲＰＭＩ１６
４０培地に加え検液とした。１ｘ１０³個の腫瘍細胞を
含む細胞培養培地（牛胎児血清１０％含有ＲＰＭＩ１６
４０培地）１００μｌを９６穴マイクロプレートに分注
し、３７℃で２４時間、５％ＣＯ₂下で培養した後に上
記の検液１００μｌを加え、３７℃で７２時間、５％Ｃ
Ｏ₂下で培養後、５０％トリクロロ酢酸で固定し、０．
４％スルホローダミンＢで染色後、１０ｍＭトリス液を
用いて細胞から色素を抽出した。４５０ｎｍを対照波長
として５５０ｎｍに於ける吸光度を測定して対照群と比
較した。その結果、ＢＥ−４３５４７類は両腫瘍細胞に
対し、強い増殖阻止活性を示し、５０％増殖阻害濃度
（ＩＣ₅₀）は第１表の通りであった。更に、ＢＥ−４３
５４７類のヒト腫瘍細胞に対する抗腫瘍活性を試験管内
で試験した。細胞は、ヒト大腸癌細胞ＤＬＤ−１、ヒト
肺癌細胞ＰＣ−１３及びヒト胃癌細胞ＭＫＮ−４５を使
用し、細胞培養用培地は、全ての腫瘍細胞共に牛胎児血
清１０％含有ＲＰＭＩ１６４０培地を用い、上記のマウ
ス大腸癌細胞ｃｏｌｏｎ２６と同様の方法を用いて測定
した。その結果、ＢＥ−４３５４７類はヒト腫瘍細胞に
対しても強い増殖阻害活性を示し、その５０％増殖阻止
濃度（ＩＣ₅₀）は第１表の通りであった。[0006] The compound of the general formula [I]
In connection with Treptomyces sp A43547 strain,
R is-(CH_Two)_TenCH (CH_Three)_TwoIs a compound
-43547A₁,-(CH_Two)₁₂CH_ThreeIs a compound
BE-43547A_Two,-(CH_Two)_TenCH (CH_Three)C
H_TwoCH_ThreeWith BE-43547B₁,-(C
H_Two)₁₁CH (CH_Three)_TwoWith BE-4354
7B_Two,-(CH_Two)₁₃CH_ThreeWith BE-43
547B_Three,-(CH_Two)₁₂CH (CH_Three)_TwoA compound that is
Is BE-43547C₁,-(CH_Two)₁₄CH_ThreeWhich is
The compound is BE-43547C_TwoAnd collectively these
And referred to as BE-43547. The present invention is described below.
Chemistry of new novel antitumor substances BE-43547
Characteristic. Abbreviations in NMR measurement below
Is shown. s: singlet d: doublet t: triplet q: quartet m: multiplet br: broad J: coupling constant Hz: hertzPhysico-chemical properties of the BE-43547A ₁ Properties: White amorphous solid or crystal Molecular formula: C₃₀H₄₉N_ThreeO₇ Mass spectrometry; [High-resolution FAB-MS] (M + H)⁺age
Te: measured value 564.3644 calculated value 564.3649 specific rotation; [α]²⁰ _D= + 12.8 ° (c = 0.5, M
OH-CHCl_Three) UV absorption spectrum; λ_max(MeOH-CHCl_Three,
nm (ε)): 238sh (13,200), 258
(16,200) Infrared absorption spectrum; (KBr, cm^-1): 344
2,3410,3369,3253,2920,285
2,1749,1709,1689,1662,161
8,1591,1533,1516,1468,140
0,1275,1192,1165,1109,108
2,1018,974,937,870,849¹ H-NMR spectrum (500 MHz, DMSO-d
_6,δ ppm): 8.59 (1H, s), 8.30 (1
H, dd, J = 6.7, 5.5 Hz), 7.05 (1
H, d, J = 15.2 Hz), 6.29 (1H, d, J)
= 15.2 Hz), 6.20 (1H, s), 5.72
(1H, s), 5.27 (1H, s), 5.05 (1
H, brt, J = 9.8 Hz), 4.52 (1H, d,
J = 19.0 Hz), 4.00 (1H, dd, J = 1)
6.5, 5.5 Hz), 3.78 (1H, dd, J = 1)
6.5, 6.7 Hz), 3.65 (1H, d, J = 1)
9.0 Hz), 3.33 (1H, dq, J = 9.8,
7.0 Hz), 2.91 (3H, s), 1.61 (3
H, s), 1.61 (1H, m), 1.46 (1H,
m), 1.42 (1H, m), 1.12-1.28 (1
6H, m), 1.10 (3H, d, J = 7.0 Hz),
1.05 (2H, m), 0.77 (6H, d, J = 6.
7Hz)¹³ C-NMR spectrum (125 MHz, DMSO-d
_6,δ ppm): 211.5 (s), 173.7 (s),
167.9 (s), 167.3 (s), 166.5
(S), 139.5 (d), 136.8 (s), 11
6.3 (d), 114.9 (t), 80.4 (s), 7
6.2 (d), 50.3 (t), 44.0 (t), 4
3.7 (d), 38.3 (t), 35.1 (q), 3
1.3 (t), 29.2 (t), 28.9 (t), 2
8.9 (t), 28.8 (t), 28.7 (t), 2
8.7 (t), 27.2 (d), 26.7 (t), 2
4.2 (t), 22.1 (q), 22.1 (q), 2
0.7 (q), 15.7 (q) Solubility; easily soluble in organic solvents such as chloroform and soluble in water
It is hard to shake. Distinguishing between acidic, neutral and basic substances; neutral substances Color reaction; sulfuric acid reaction Positive Rf value: 0.53 [Merck Kieselgel 60F
₂₅₄Use and developing solvent: chloroform-methanol (1
0: 1)] RT; 10.6 min [high-performance liquid chromatography;
Column: Chromatorex-ODS 4.6Φx250
mm, elution solvent: 90% methanol, flow rate: 1.0 ml
/ Min, detection: UV254 nm]Physico-chemical properties of the BE-43547A ₂ Properties: White amorphous solid or crystal Molecular formula: C₃₀H₄₉N_ThreeO₇ Mass spectrometry; [High-resolution FAB-MS] (M + H)⁺age
D: actual value 564.3640 calculated value 564.3649 specific rotation; [α]²⁰ _D= + 9 ° (c = 1.0, MeOH
-CHCl_Three) UV absorption spectrum; λ_max(MeOH-CHCl_Three,
nm (ε)): 236sh (11,600), 257
(14,300) Infrared absorption spectrum; (KBr, cm^-1): 340
6,3367,3302,3269,2920,285
0,1747,1707,1660,1618,159
1,1531,1514,1468,1400,137
7,1269,1192,1161,1134,111
1,1080,1012,972,937,866,8
49¹ H-NMR spectrum (500 MHz, DMSO-d
_6,δ ppm): 8.59 (1H, s), 8.32 (1
H, dd, J = 6.7, 5.5 Hz), 7.04 (1
H, d, J = 15.3 Hz), 6.29 (1H, d, J)
= 15.3 Hz), 6.21 (1H, s), 5.72
(1H, s), 5.26 (1H, s), 5.04 (1
H, brt, J = 9.8 Hz), 4.52 (1H, d,
J = 19.2 Hz), 4.00 (1H, dd, J = 1)
6.5, 5.5 Hz), 3.77 (1H, dd, J = 1)
6.5, 6.7 Hz), 3.66 (1H, d, J = 1)
9.2 Hz), 3.33 (1H, dq, J = 9.8,
7.0 Hz), 2.91 (3H, s), 1.61 (3
H, s), 1.61 (1H, m), 1.47 (1H,
m), 1.12-1.28 (22H, m), 1.09
(3H, d, J = 7.0 Hz), 0.78 (3H, t,
J = 6.7Hz)¹³ C-NMR spectrum (125 MHz, DMSO-d
_6,δ ppm): 211.6 (s), 173.7 (s),
167.9 (s), 167.3 (s), 166.5
(S), 139.5 (d), 136.8 (s), 11
6.3 (d), 114.9 (t), 80.4 (s), 7
6.2 (d), 50.3 (t), 44.0 (t), 4
3.7 (d), 35.0 (q), 31.3 (t), 3
1.2 (t), 28.9 (t), 28.9 (t), 2
8.9 (t), 28.9 (t), 28.8 (t), 2
8.7 (t), 28.7 (t), 28.6 (t), 2
4.2 (t), 22.0 (t), 20.7 (q), 1
5.7 (q), 13.5 (q) Solubility; easily soluble in organic solvents such as chloroform and soluble in water
It is hard to shake. Distinguishing between acidic, neutral and basic substances; neutral substances Color reaction; sulfuric acid reaction Positive Rf value: 0.53 [Merck Kieselgel 60F
₂₅₄Use and developing solvent: chloroform-methanol (1
0: 1)] RT; 11.3 min [High performance liquid chromatography;
Column: Chromatorex-ODS 4.6Φx250
mm, elution solvent: 90% methanol, flow rate: 1.0 ml
/ Min, detection: UV254 nm]Physico-chemical properties of the BE-43547B ₁ Properties: White amorphous solid or crystal Molecular formula: C₃₁H₅₁N_ThreeO₇ Mass spectrometry; [High-resolution FAB-MS] (M + H)⁺age
T: actual value 578.3807 calculated value 578.3805 specific rotation; [α]²⁰ _D= + 19.6 ° (c = 0.5, M
OH-CHCl_Three) UV absorption spectrum; λ_max(MeOH-CHCl_Three,
nm (ε)): 238sh (12,100), 257
(14,800) Infrared absorption spectrum; (KBr, cm^-1): 344
2,3408,3369,3331,3261,296
2,2920,2852,2335,1749,170
7,1662,1616,1589,1535,151
4,1466,1427,1400,1377,135
0,1277,1190,1161,1134,110
9,1078,1012,972,935,868,8
49¹ H-NMR spectrum (500 MHz, DMSO-d
_6,δ ppm): 8.57 (1H, s), 8.13 (1
H, t, J = 6.0 Hz), 7.08 (1H, d, J =
15.1 Hz), 6.28 (1H, d, J = 15.1H)
z), 6.05 (1H, s), 5.72 (1H, s),
5.29 (1H, s), 5.08 (1H, brt, J =
10.0 Hz), 4.52 (1H, d, J = 18.9H)
z), 4.03 (1H, dd, J = 16.5, 5.8H
z), 3.80 (1H, dd, J = 16.5, 6.7H
z), 3.62 (1H, d, J = 18.9 Hz);
34 (1H, dq, J = 10.0, 7.0 Hz);
92 (3H, s), 1.61 (3H, s), 1.60
(1H, m), 1.46 (1H, m), 1.12-1.
28 (19H, m), 1.10 (3H, d, J = 7.0)
Hz), 1.02 (1H, m), 0.99 (1H,
m), 0.76 (3H, t, J = 7.3 Hz), 0.7
4 (3H, d, J = 6.1 Hz)¹³ C-NMR spectrum (125 MHz, DMSO-d
_6,δ ppm): 211.5 (s), 173.7 (s),
167.9 (s), 167.2 (s), 166.6
(S), 139.6 (d), 136.7 (s), 11
6.2 (d), 115.2 (t), 80.4 (s), 7
6.1 (d), 50.4 (t), 44.0 (t), 4
3.9 (d), 35.9 (t), 35.1 (q), 3
3.7 (d), 31.4 (t), 29.3 (t), 2
9.0 (t), 28.9 (t), 28.9 (t), 2
8.8 (t), 28.8 (t), 28.7 (t), 2
6.4 (t), 24.2 (t), 20.7 (q), 1
8.6 (q), 15.7 (q), 10.8 (q) Solubility; easily soluble in organic solvents such as chloroform and soluble in water
It is hard to shake. Distinguishing between acidic, neutral and basic substances; neutral substances Color reaction; sulfuric acid reaction Positive Rf value: 0.53 [Merck Kieselgel 60F
₂₅₄Use and developing solvent: chloroform-methanol (1
0: 1)] RT; 13.4 min [high-performance liquid chromatography;
Column: Chromatorex-ODS 4.6Φx250
mm, elution solvent: 90% methanol, flow rate: 1.0 ml
/ Min, detection: UV254 nm], 22.8 min
[High Performance Liquid Chromatography; Column: Fluorescent
4.6 4.6 x 250 mm, elution solvent: 70% methano
Tool, flow rate: 1.0 ml / min, detection: UV254n
m]Physico-chemical properties of the BE-43547B ₂ Properties: White amorphous solid or crystal Molecular formula: C₃₁H₅₁N_ThreeO₇ Mass spectrometry; [High-resolution FAB-MS] (M + H)⁺age
T: actual value 578.3804 calculated value 578.3805 specific rotation; [α]²⁰ _D= + 16.8 ° (c = 0.5, M
OH-CHCl_Three) UV absorption spectrum; λ_max(MeOH-CHCl_Three,
nm (ε)): 236sh (13,500), 257
(16,500) Infrared absorption spectrum; (KBr, cm^-1): 344
4,3406,3369,3261,3253,292
0, 2850, 2362, 2333, 1749, 170
7,1662,1614,1589,1533,151
2,1468,1429,1400,1377,134
6,1277,1190,1163,1134,110
9,1078,1016,974,937,866,8
49¹ H-NMR spectrum (500 MHz, DMSO-d
_6,δ ppm): 8.57 (1H, s), 8.16 (1
H, dd, J = 6.7, 5.5 Hz), 7.08 (1
H, d, J = 15.0 Hz), 6.28 (1H, d, J)
= 15.0 Hz), 6.07 (1H, s), 5.72
(1H, s), 5.28 (1H, s), 5.08 (1
H, brt, J = 9.7 Hz), 4.52 (1H, d,
J = 19.2 Hz), 4.03 (1H, dd, J = 1)
6.5, 5.5 Hz), 3.79 (1H, dd, J = 1)
6.5, 6.7 Hz), 3.63 (1H, d, J = 1)
9.2 Hz), 3.34 (1H, dq, J = 9.7,
7.0 Hz), 2.92 (3H, s), 1.61 (3
H, s), 1.60 (1H, m), 1.46 (1H,
m), 1.43 (1H, m), 1.12-1.28 (1
8H, m), 1.10 (3H, d, J = 7.0 Hz),
1.05 (2H, m), 0.77 (6H, d, J = 6.
4Hz)¹³ C-NMR spectrum (125 MHz, DMSO-d
_6,δ ppm): 211.5 (s), 173.7 (s),
167.9 (s), 167.2 (s), 166.5
(S), 139.6 (d), 136.7 (s), 11
6.2 (d), 115.2 (t), 80.4 (s), 7
6.1 (d), 50.3 (t), 44.0 (t), 4
3.9 (d), 38.3 (t), 35.1 (q), 3
1.4 (t), 29.2 (t), 29.0 (t), 2
8.9 (t), 28.9 (t), 28.9 (t), 2
8.8 (t), 28.7 (t), 27.2 (d), 2
6.7 (t), 24.2 (t), 22.0 (q), 2
2.0 (q), 20.7 (q), 15.7 (q) Solubility; easily soluble in organic solvents such as chloroform and soluble in water
It is hard to shake. Distinguishing between acidic, neutral and basic substances; neutral substances Color reaction; sulfuric acid reaction Positive Rf value: 0.53 [Merck Kieselgel 60F
₂₅₄Use and developing solvent: chloroform-methanol (1
0: 1)] RT; 13.4 min [high-performance liquid chromatography;
Column: Chromatorex-ODS 4.6Φx250
mm, elution solvent: 90% methanol, flow rate: 1.0 ml
/ Min, detection: UV254 nm], 24.2 min
[High Performance Liquid Chromatography; Column: Fluorescent
4.6 4.6 x 250 mm, elution solvent: 70% methano
Tool, flow rate: 1.0 ml / min, detection: UV254n
m]Physico-chemical properties of the BE-43547B ₃ Properties: White amorphous solid or crystal Molecular formula: C₃₁H₅₁N_ThreeO₇ Mass spectrometry; [High-resolution FAB-MS] (M + H)⁺age
T: actual value 578.3785 calculated value 578.3805 specific rotation; [α]²⁰ _D= + 9.4 ° (c = 1.0, Me
OH-CHCl_Three) UV absorption spectrum; λ_max(MeOH-CHCl_Three,
nm (ε)): 238sh (13,300), 258
(16,400) Infrared absorption spectrum; (KBr, cm^-1): 344
4,3408,3369,3267,2920,285
0, 1749, 1691, 1662, 1616, 159
1,1533,1512,1468,1400,137
7,1275,1192,1163,1109,108
0,1012,974,937,868,849¹ H-NMR spectrum (500 MHz, DMSO-d
_6,δ ppm): 8.58 (1H, s), 8.18 (1
H, dd, J = 6.4, 5.5 Hz), 7.07 (1
H, d, J = 15.2 Hz), 6.29 (1H, d, J)
= 15.2 Hz), 6.10 (1H, s), 5.72
(1H, s), 5.28 (1H, s), 5.07 (1
H, brt, J = 9.8 Hz), 4.52 (1H, d,
J = 9.6 Hz), 4.02 (1H, dd, J = 16.
5,5.5 Hz), 3.79 (1H, dd, J = 16.
5,6.4 Hz), 3.63 (1H, d, J = 9.6H)
z), 3.34 (1H, dq, J = 9.8, 7.0H)
z), 2.92 (3H, s), 1.61 (3H, s),
1.61 (1H, m), 1.47 (1H, m), 1.1
2-1.28 (24H, m), 1.10 (3H, d, J
= 7.0 Hz), 0.78 (3H, t, J = 6.7H)
z)¹³ C-NMR spectrum (125 MHz, DMSO-d
_6,δ ppm): 211.5 (s), 173.7 (s),
167.9 (s), 167.3 (s), 166.6
(S), 139.6 (d), 136.8 (s), 11
6.2 (d), 115.2 (t), 80.4 (s), 7
6.1 (d), 50.4 (t), 44.0 (t), 4
3.9 (d), 35.1 (q), 31.4 (t), 3
1.2 (t), 29.0 (t), 29.0 (t), 2
9.0 (t), 28.9 (t), 28.9 (t), 2
8.9 (t), 28.8 (t), 28.7 (t), 2
8.6 (t), 24.2 (t), 22.0 (t), 2
0.7 (q), 15.7 (q), 13.5 (q) Solubility; easily soluble in organic solvents such as chloroform and soluble in water
It is hard to shake. Distinguishing between acidic, neutral and basic substances; neutral substances Color reaction; sulfuric acid reaction Positive Rf value: 0.53 [Merck Kieselgel 60F
₂₅₄Use and developing solvent: chloroform-methanol (1
0: 1)] RT; 14.5 min [high-performance liquid chromatography;
Column: Chromatorex-ODS 4.6Φx250
mm, elution solvent: 90% methanol, flow rate: 1.0 ml
/ Min, detection: UV254 nm]Physico-chemical properties of the BE-43547C ₁ Properties: White amorphous solid or crystal Molecular formula: C₃₂H₅₃N_ThreeO₇ Mass spectrometry; [High-resolution FAB-MS] (M + H)⁺age
T: actual value 592.3930 calculated value 592.3962 specific rotation; [α]²⁰ _D= + 13.7 ° (c = 1.0, M
OH-CHCl_Three) UV absorption spectrum; λ_max(MeOH-CHCl_Three,
nm (ε)): 235 sh (11,500), 256
(14,800) Infrared absorption spectrum; (KBr, cm^-1): 344
2,3410,3371,2918,2850,174
9, 1707, 1689, 1660, 1533, 151
6,1468,1400,1275,1192,116
5,1134,1111,1080,1018,97
4,937,868,849¹ H-NMR spectrum (500 MHz, DMSO-d
_6,δ ppm): 8.60 (1H, s), 8.34 (1
H, dd, J = 6.8, 5.5 Hz), 7.04 (1
H, d, J = 15.0 Hz), 6.29 (1H, d, J)
= 15.0 Hz), 6.23 (1H, s), 5.72
(1H, s), 5.26 (1H, s), 5.04 (1
H, brt, J = 9.8 Hz), 4.52 (1H, d,
J = 19.0 Hz), 4.00 (1H, dd, J = 1)
6.5, 5.5 Hz), 3.77 (1H, dd, J = 1)
6.5, 6.8 Hz), 3.66 (1H, d, J = 1)
9.0 Hz), 3.33 (1H, dq, J = 9.8,
7.0 Hz), 2.91 (3H, s), 1.61 (3
H, s), 1.61 (1H, m), 1.46 (1H,
m), 1.42 (1H, m), 1.12-1.29 (2
0H, m), 1.09 (3H, d, J = 7.0 Hz),
1.05 (2H, m), 0.77 (6H, d, J = 6.
7Hz)¹³ C-NMR spectrum (125 MHz, DMSO-d
_6,δ ppm): 211.6 (s), 173.8 (s),
167.9 (s), 167.3 (s), 166.6
(S), 139.5 (d), 136.8 (s), 11
6.3 (d), 114.9 (t), 80.4 (s), 7
6.2 (d), 50.3 (t), 44.0 (t), 4
3.7 (t), 38.3 (t), 35.1 (q), 3
1.3 (t), 29.2 (t), 29.0 (t), 2
8.9 (t), 28.9 (t), 28.9 (t), 2
8.9 (t), 28.8 (t), 28.7 (t), 2
7.2 (t), 26.7 (t), 24.2 (t), 2
2.1 (q), 22.1 (q), 20.7 (q), 1
5.7 (q) Solubility; easily soluble in organic solvents such as chloroform and soluble in water
It is hard to shake. Distinguishing between acidic, neutral and basic substances; neutral substances Color reaction; sulfuric acid reaction Positive Rf value: 0.53 [Merck Kieselgel 60F
₂₅₄Use and developing solvent: chloroform-methanol (1
0: 1)] RT; 17.4 min [high-performance liquid chromatography;
Column: Chromatorex-ODS 4.6Φx250
mm, elution solvent: 90% methanol, flow rate: 1.0 ml
/ Min, detection: UV254 nm]Physico-chemical properties of the BE-43547C ₂ Properties: White amorphous solid or crystal Molecular formula: C₃₂H₅₃N_ThreeO₇ Mass spectrometry; [High-resolution FAB-MS] (M + H)⁺age
Te: actual value 592.3976 calculated value 592.3962 specific rotation; [α]²⁰ _D= + 15.4 ° (c = 0.32,
MeOH-CHCl_Three) UV absorption spectrum; λ_max(MeOH-CHCl_Three,
nm (ε)): 238sh (14,700), 257
(18,300) Infrared absorption spectrum; (KBr, cm^-1): 336
3,3246,2922,2848,2364,174
5,1707,1653,1616,1589,151
6,1464,1427,1398,1259,119
4,1109,1084,1014,976,941,
868¹ H-NMR spectrum (500 MHz, DMSO-d
_6,δ ppm): 8.60 (1H, s), 8.39 (1
H, dd, J = 6.4, 5.5 Hz), 7.03 (1
H, d, J = 15.2 Hz), 6.30 (1H, d, J)
= 15.2 Hz), 6.29 (1H, brs), 5.7
1 (1H, s), 5.26 (1H, s), 5.03 (1
H, brt, J = 9.8 Hz), 4.52 (1H, d,
J = 19.2 Hz), 3.99 (1H, dd, J = 1)
6.2, 5.5 Hz), 3.77 (1H, dd, J = 1)
6.2, 6.4 Hz), 3.67 (1H, d, J = 1)
9.2 Hz), 3.33 (1H, dq, J = 9.8,
6.7 Hz), 2.91 (3H, s), 1.60 (3
H, s), 1.60 (1H, m), 1.47 (1H,
m), 1.12-1.28 (26H, m), 1.09
(3H, d, J = 6.7 Hz), 0.78 (3H, t,
J = 6.7Hz)¹³ C-NMR spectrum (125 MHz, DMSO-d
_6,δ ppm): 211.6 (s), 173.8 (s),
167.9 (s), 167.4 (s), 166.5
(S), 139.5 (d), 136.8 (s), 11
6.3 (d), 114.8 (t), 80.4 (s), 7
6.2 (d), 50.3 (t), 44.0 (t), 4
3.7 (d), 35.0 (q), 31.3 (t), 3
1.2 (t), 28.9 (t), 28.9 (t), 2
8.9 (t), 28.9 (t), 28.9 (t), 2
8.9 (t), 28.9 (t), 28.8 (t), 2
8.7 (t), 28.6 (t), 24.2 (t), 2
2.0 (t), 20.7 (q), 15.7 (q), 1
3.5 (q) Solubility; easily soluble in organic solvents such as chloroform and soluble in water
It is hard to shake. Distinguishing between acidic, neutral and basic substances; neutral substances Color reaction; sulfuric acid reaction Positive Rf value: 0.53 [Merck Kieselgel 60F
₂₅₄Use and developing solvent: chloroform-methanol (1
0: 1)] RT; 18.8 min [high-performance liquid chromatography;
Column: Chromatorex-ODS 4.6Φx250
mm, elution solvent: 90% methanol, flow rate: 1.0 ml
/ Min, detection: UV254 nm]Biological activity of BE-43547 (anti-tumor effect) Mouse experimental tumor cells of anti-neoplastic substances BE-43547
In vitro to determine the growth inhibitory effect on
Was performed. Antitumor against mouse leukemia cell P388
The action test showed that BE-43547s were dimethylsulfoxyl
Dissolved in dimethylsulfoxide and serially diluted with dimethylsulfoxide.
From RPMI 1640 medium containing 10% fetal bovine serum (2
Containing 0 mM 2-mercaptoethanol)
And 1x10^ThreeCell culture medium containing single tumor cells
(RPMI 1640 medium containing 10% fetal calf serum, 20 m
M 2-mercaptoethanol (50 μl) for 96
Dispense into a well microplate, 5% at 37 ° C for 24 hours
CO_TwoAfter culturing under the above, 50 μl of the above test solution was added, and 3
72% at 7 ° C, 5% CO_TwoAfter culturing under
And compared with the control group. Mouse colon cancer cell colon
26 anti-tumor test showed BE-43547
After dissolving in tyl sulfoxide, use dimethyl sulfoxide
After serial dilution, RPMI16 containing 10% fetal bovine serum was used.
A test solution was added to the 40 medium. 1x10^ThreeIndividual tumor cells
Containing cell culture medium (RPMI16 containing 10% fetal bovine serum)
Dispense 100 μl into a 96-well microplate
And 5% CO at 37 ° C for 24 hours_TwoAfter culturing under
Add 100 μl of the test solution described above, and add 5% C
O_TwoAfter culturing under the following conditions, the cells were fixed with 50% trichloroacetic acid.
After staining with 4% sulforhodamine B, 10 mM Tris solution was added.
To extract the dye from the cells. 450 nm as reference wavelength
The absorbance at 550 nm was measured and compared with the control group.
Compared. As a result, BE-43547s were found in both tumor cells.
On the other hand, it shows strong growth inhibitory activity and has a 50% growth inhibitory concentration
(IC₅₀) Are as shown in Table 1. Further, BE-43
Antitumor activity against 547 human tumor cells in vitro
Tested. Cells are human colon cancer cell DLD-1, human
Using lung cancer cell PC-13 and human gastric cancer cell MKN-45
Cell culture medium is used for bovine fetal blood for all tumor cells.
Using an RPMI 1640 medium containing 10% of
Colorectal cancer cells using the same method as colon26
did. As a result, BE-43547s are found in human tumor cells.
Also shows strong growth inhibitory activity and inhibits its growth by 50%
Concentration (IC₅₀) Are as shown in Table 1.

【０００７】[0007]

【表１】上述したようにＢＥ−４３５４７類はマウス及びヒト
の腫瘍細胞に対し顕著な増殖阻止作用を示す。従って、
本発明はヒトをはじめとする哺乳動物の抗腫瘍剤として
有用である。つぎに、ＢＥ−４３５４７類の製造法につ
いて説明する。本発明の抗腫瘍性物質ＢＥ−４３５４
７類の製造に使用する微生物又はその変異株は、抗腫瘍
性物質ＢＥ−４３５４７類を生産するものならばいず
れでも良いが、例えば以下の菌学的性状を有する微生物
が挙げられる。１．形態Ａ４３５４７株はよく伸長し分岐する基生菌糸と気菌糸
を形成し輪生枝および菌糸の分断は認められない。気菌
糸上には胞子の長い連鎖（５０個以上）を作り、その形
態は直線状である。胞子の表面は平滑で大きさが１．８
〜１．０×０．９〜０．７μｍ位の円筒状であり、胞子
のう、鞭毛胞子および菌核等の特殊な器官は観察されな
い。コロニーはイースト・麦芽寒天培地等で気菌糸の成
熟と共に次第に湿潤化することが観察される。２．各種寒天平板培地における培養性状（２８℃、１４
日間培養）[Table 1] As mentioned above, BE-43547s have a marked growth inhibitory effect on mouse and human tumor cells. Therefore,
The present invention is useful as an antitumor agent for mammals including humans. Next, a method for producing BE-43547s will be described. BE-4354 Antitumor substance of the present invention
Microorganisms or mutants thereof used in the production of Class 7 may be any as long as they produce the antitumor substance BE-43547, and include, for example, microorganisms having the following mycological properties. 1. Form A43547 strain forms an aerial mycelium with a base mycelium that elongates and diverges well. A long chain of spores (50 or more) is formed on aerial hyphae, and the form is linear. Spore surface is smooth and 1.8 in size
It has a cylindrical shape of about 1.0 × 0.9 to 0.7 μm, and no special organs such as spores, flagella spores and sclerotia are observed. It is observed that the colonies gradually become wet with the maturation of the aerial hyphae in a yeast-malt agar medium or the like. 2. Cultural properties on various agar plate media (28 ° C, 14
Days culture)

【０００８】[0008]

【表２】３．生育温度（イースト・麦芽寒天培地、１４日間培
養）９℃；生育せず１２℃；生育せず１５℃；生育僅少、気菌糸形成せず１８℃；生育良好、気菌糸形成せず２２℃；生育非常に良好、気菌糸形成良好２６℃；生育非常に良好、気菌糸形成良好２９℃；生育非常に良好、気菌糸形成良好３５℃；生育非常に良好、気菌糸形成良好３７℃；生育良好、気菌糸形成僅少４１℃；生育僅少、気菌糸形成せず４８℃；生育せず４．生理学的諸性質（１）ゼラチンの液化陽性（グルコース・ペプトン・ゼラチン培地）（２）スターチの加水分解陽性（スターチ・無機塩寒天培地）（３）脱脂粉乳の凝固陰性（スキムミルク培地）（４）脱脂粉乳のペプトン化陽性（スキムミルク培地）（５）メラニン様色素の生成陰性（６）食塩耐性食塩含有量４％以下で生育（イースト・麦芽寒天培地）５．炭素源の利用能プリドハム・ゴドリーブ寒天を基礎培地とし、下記各種
糖を添加して２８℃１４日間培養した。[Table 2] 3. Growth temperature (yeast / malt agar medium, cultivated for 14 days) 9 ° C; non-growing 12 ° C; non-growing 15 ° C; small growth, no aerial mycelium formation 18 ° C; good growth, no aerial hyphal formation 22 ° C; Very good growth, good aerial mycelium formation 26 ° C; Very good growth, good aerial mycelium formation 29 ° C; Very good growth, good aerial mycelium formation 35 ° C; Very good growth, good aerial mycelium formation 37 ° C; Good growth 3. slight growth of aerial hyphae 41 ° C; slight growth, no aerial hyphal formation 48 ° C; Physiological properties (1) Gelatin liquefaction positive (glucose / peptone / gelatin medium) (2) Starch hydrolysis positive (starch / inorganic salt agar medium) (3) Coagulation of skim milk powder negative (Skim milk medium) (4) 4. Peptone conversion of skim milk powder positive (Skim milk medium) (5) Melanin-like pigment formation negative (6) Salt tolerance Growing at a salt content of 4% or less (Yeast / malt agar medium) Ability to Use Carbon Source Pridham-Godlieve Agar was used as a basal medium, and the following various sugars were added thereto and cultured at 28 ° C. for 14 days.

【０００９】[0009]

【表３】６．細胞壁組成ＬＬージアミノピメリン酸とグリシンが検出された。以
上の菌学的諸性質よりＡ４３５４７株は放線菌ストレプ
トミセス属に属すると考えられる。したがって、Ａ４３
５４７株をストレプトミセス・エスピーＡ４３５４７
（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｓｐ．Ａ４３５４
７）と称することとした。尚、本菌株は通商産業省工業
技術院生命工学工業技術研究所に寄託されており、受託
番号はＦＥＲＭＰ−１４４４４である。本発明で使用
する抗腫瘍性物質ＢＥ−４３５４７類を生産する微生物
の変異株は、例えばＸ線若しくは紫外線などの照射処
理、例えばナイトロジェンマスタード、アザセリン、亜
硝酸、２−アミノプリン若しくはＮ−メチル−Ｎ’−ニ
トロ−Ｎ−ニトロソグアニジン（ＮＴＧ）等の変異誘起
剤による処理、ファージ接触、形質転換、形質導入又は
接合などの通常用いられる菌種変換処理方法によりＢＥ
−４３５４７類生産菌を変異させた微生物である。本発
明のＢＥ−４３５４７類を製造するにあたり、ＢＥ−４
３５４７類の生産菌株を栄養源含有培地に接種して好気
的に発育させることにより、ＢＥ−４３５４７類を含む
培養物が得られる。栄養源としては、放線菌の栄養源と
して公知のものが使用できる。例えば、炭素源として
は、市販されているブドウ糖、麦芽糖、デンプン、庶
糖、糖蜜又はデキストリンなどが単独又は混合物として
用いられる。窒素源としては、市販されている大豆粉、
コーンスティープリカー、グルテンミール、肉エキス、
酵母エキス、乾燥酵母、綿実粉、ペプトン、小麦胚芽、
魚粉、ミートミール、脱脂米ヌカ、脱脂肉骨粉、無機ア
ンモニウム塩又は硝酸ナトリウムなどが単独又は混合物
として用いられる。無機塩としては、市販されている炭
酸カルシウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸マ
グネシウム、臭化ナトリウム、ホウ酸ナトリウム又は各
種リン酸塩などを使用することができる。その他必要に
応じて、鉄、マンガン、亜鉛、コバルト、モリブデン酸
などの重金属塩を微量添加することもできる。また、発
泡の激しい場合には消泡剤として、例えば大豆油又は亜
麻仁油などの植物油、オクタデカノールなどの高級アル
コール類、各種シリコン化合物などを適宜添加してもよ
い。これらのもの以外でも、該生産菌が利用し、ＢＥ−
４３５４７類の生産に役立つもの例えば３−（Ｎ−モ
ルホリノ）プロパンスルホン酸又はホウ酸ナトリウムな
どであれば、いずれも使用することができる。培養方法
としては、一般の微生物代謝産物の生産方法と同様に行
なえばよく、固体培養でも液体培養でもよい。液体培養
の場合は、静置培養、攪拌培養、振とう培養又は通気培
養などのいずれを実施してもよいが、特に振盪培養又は
深部通気攪拌培養が望ましい。培養温度は１５〜４１℃
が適当であるが、好ましくは２２℃〜３５℃である。好
ましい培地のｐＨは４〜８の範囲で、培養時間は１２
０時間〜２１６時間、好ましくは１４４時間〜１９２時
間である。培養物から目的とするＢＥ−４３５４７類を
採取するには、微生物の生産する代謝物から採取するの
に通常使用される分離手段を適宜利用することができ
る。ＢＥ−４３５４７類は菌体中に存在するので、菌体
より通常の分離手段、例えば溶媒抽出法、イオン交換樹
脂法又は吸着もしくは分配クロマトグラフィー法及びゲ
ル濾過法などを単独又は組み合わせて行なうことにより
精製できる。好ましい分離精製の例として次の方法が挙
げられる。まず培養液を濾過し、菌体を得る。得られた
菌体をメタノールまたはアセトンなどの有機溶媒を用い
て抽出する。得られた粗抽出物について、水−酢酸エチ
ル系で分配を行ない、酢酸エチル層を留去後得られる残
留物についてシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホ
ルム／メタノールで溶出）などを行なうことにより、Ｂ
Ｅ−４３５４７類を粉末もしくは固体として得ることが
できる。本発明の化合物ＢＥ−４３５４７類は腫瘍細胞
の増殖を阻害し、抗腫瘍効果を発揮するが、本発明化合
物を抗腫瘍剤として使用する際の投与形態としては各種
の形態を選択でき、例えば錠剤、カプセル剤、散剤、顆
粒剤もしくは液剤などの経口剤、又は例えば溶液もしく
は懸濁液などの殺菌した液状の非経口剤が挙げられる。
固体の製剤は、そのまま錠剤、カプセル剤、顆粒剤又は
粉末の形態として製造することもできるが、適当な添加
物を使用して製造することもできる。そのような添加物
としては、例えば乳糖もしくはブドウ糖などの糖類、例
えばトウモロコシ、小麦もしくは米などのデンプン類、
例えばステアリン酸などの脂肪酸、例えばメタケイ酸ア
ルミン酸マグネシウムもしくは無水リン酸カルシウムな
どの無機塩、例えばポリビニルピロリドンもしくはポリ
アルキレングリコールなどの合成高分子、例えばステア
リン酸カルシウムもしくはステアリン酸マグネシウムな
どの脂肪酸塩、例えばステアリルアルコールもしくはベ
ンジルアルコールなどのアルコール類、例えばメチルセ
ルロース、カルボキシメチルセルロース、エチルセルロ
ースもしくはヒドロキシプロピルメチルセルロースなど
の合成セルロース誘導体、その他、水、ゼラチン、タル
ク、植物油、アラビアゴムなど通常用いられる添加物が
挙げられる。これらの錠剤、カプセル剤、顆粒剤及び粉
末などの固形製剤は一般的には０．１〜１００重量％、
好ましくは５〜１００重量％の有効成分を含む。液状製
剤は、水、アルコール類又は例えば大豆油、ピーナッツ
油もしくはゴマ油などの植物由来の油など液状製剤にお
いて通常用いられる適当な添加剤を使用し、懸濁液、シ
ロップ剤又は注射剤などの形態として製造される。特
に、非経口的に筋肉内注射、静脈注射又は皮下注射で投
与する場合の適当な溶剤としては、例えば注射用蒸留
水、塩酸リドカイン水溶液（筋肉注射用）、生理食塩
水、ブドウ糖水溶液、エタノール、静脈内注射用液体
（例えばクエン酸及びクエン酸ナトリウムなどの水溶
液）もしくは電解質溶液（点滴静注及び静脈内注射用）
など、又はこれらの混合溶液が挙げられる。これらの注
射剤はあらかじめ溶解したもののほか、粉末のままある
いは適当な添加剤を加えたものを用時溶解する形態もと
り得る。これらの注射液は通常、０．１〜１０重量％、
好ましくは１〜５重量％の有効成分を含む。又、経口投
与の懸濁剤又はシロップ剤などの液剤は、０．５〜１０
重量％の有効成分を含む。本発明の化合物の実際に好ま
しい投与量は、使用される化合物の種類、配合された組
成物の種類、適用頻度及び治療すべき特定部位、宿主及
び腫瘍によって変化することに注意すべきである。例え
ば、１日あたりの成人の投与量は、経口投与の場合、１
０〜５００ｍｇであり、非経口投与、好ましくは静脈注
射の場合、１日あたり、１０〜１００ｍｇである。な
お、投与回数は投与方法及び症状によって異なるが、１
回ないし５回である。以下に、実施例を挙げて本発明を
具体的に説明するが、本発明はこれら実施例のみに限定
されるものではない。[Table 3] 6. Cell wall composition LL diaminopimelic acid and glycine were detected. From the above mycological properties, the A43547 strain is considered to belong to the genus Streptomyces. Therefore, A43
547 strains of Streptomyces sp. A43547
(Streptomyces sp. A4354
7). The strain has been deposited with the Research Institute of Biotechnology and Industrial Technology, Ministry of International Trade and Industry of Japan, and the deposit number is FERM P-14444. The mutant strain of the microorganism producing the antineoplastic substances BE-43547 used in the present invention may be, for example, irradiated with X-rays or ultraviolet rays, for example, nitrogen mustard, azaserine, nitrite, 2-aminopurine or N-methyl. BE by a commonly used bacterial species conversion treatment method such as treatment with a mutagen such as -N'-nitro-N-nitrosoguanidine (NTG), phage contact, transformation, transduction or conjugation.
It is a microorganism obtained by mutating a -43547-producing bacterium. In producing BE-43547s of the present invention, BE-4
A culture containing BE-43547 can be obtained by inoculating a 3547-producing strain into a nutrient-containing medium and growing it aerobically. As a nutrient source, a known nutrient source for actinomycetes can be used. For example, as a carbon source, commercially available glucose, maltose, starch, sucrose, molasses, dextrin, or the like is used alone or as a mixture. As the nitrogen source, commercially available soy flour,
Corn steep liquor, gluten meal, meat extract,
Yeast extract, dried yeast, cottonseed flour, peptone, wheat germ,
Fish meal, meat meal, defatted rice bran, defatted meat-and-bone meal, inorganic ammonium salts or sodium nitrate are used alone or as a mixture. As the inorganic salt, commercially available calcium carbonate, sodium chloride, potassium chloride, magnesium sulfate, sodium bromide, sodium borate or various phosphates can be used. In addition, if necessary, trace amounts of heavy metal salts such as iron, manganese, zinc, cobalt, and molybdic acid can be added. In the case of severe foaming, for example, vegetable oils such as soybean oil or linseed oil, higher alcohols such as octadecanol, various silicon compounds, and the like may be appropriately added as antifoaming agents. In addition to these, BE-
Any of those useful for the production of 43547, such as 3- (N-morpholino) propanesulfonic acid or sodium borate, can be used. The culturing method may be the same as the method for producing a general microbial metabolite, and may be a solid culture or a liquid culture. In the case of liquid culture, any of static culture, stirring culture, shaking culture, and aeration culture may be performed, but shaking culture or deep aeration stirring culture is particularly desirable. Culture temperature is 15-41 ° C
Is suitable, but preferably 22 ° C to 35 ° C. The preferable pH of the medium is in the range of 4 to 8, and the culture time is 12 hours.
0 hours to 216 hours, preferably 144 hours to 192 hours. In order to collect the desired BE-43547 from the culture, a separation means usually used for collecting from metabolites produced by microorganisms can be appropriately used. Since BE-43547 is present in the cells, it can be separated from the cells by a conventional separation means such as a solvent extraction method, an ion exchange resin method or an adsorption or partition chromatography method and a gel filtration method alone or in combination. Can be purified. Preferred examples of separation and purification include the following methods. First, the culture solution is filtered to obtain cells. The obtained cells are extracted using an organic solvent such as methanol or acetone. The obtained crude extract was partitioned with a water-ethyl acetate system, and the residue obtained after evaporating the ethyl acetate layer was subjected to silica gel chromatography (eluted with chloroform / methanol).
E-43547 can be obtained as a powder or a solid. The compounds BE-43547 of the present invention inhibit the growth of tumor cells and exhibit an antitumor effect. However, various forms can be selected as the administration form when the compound of the present invention is used as an antitumor agent. And oral preparations such as capsules, powders, granules or liquids, or sterile liquid parenteral preparations such as solutions or suspensions.
Solid preparations can be produced as they are in the form of tablets, capsules, granules or powders, or they can be produced using appropriate additives. Such additives include, for example, sugars such as lactose or glucose, for example, starches such as corn, wheat or rice,
For example, fatty acids such as stearic acid; inorganic salts such as magnesium aluminate metasilicate or anhydrous calcium phosphate; synthetic polymers such as polyvinylpyrrolidone or polyalkylene glycol; fatty acid salts such as calcium stearate or magnesium stearate; Alcohols such as benzyl alcohol, for example, synthetic cellulose derivatives such as methylcellulose, carboxymethylcellulose, ethylcellulose and hydroxypropylmethylcellulose, and other commonly used additives such as water, gelatin, talc, vegetable oil, and gum arabic can be mentioned. Solid preparations such as tablets, capsules, granules and powders generally contain 0.1 to 100% by weight,
It preferably contains from 5 to 100% by weight of active ingredient. Liquid preparations use suitable additives usually used in liquid preparations such as water, alcohols or vegetable-derived oils such as soybean oil, peanut oil or sesame oil, and are used in the form of suspensions, syrups or injections. Manufactured as Particularly suitable solvents for parenteral administration by intramuscular injection, intravenous injection or subcutaneous injection include, for example, distilled water for injection, lidocaine hydrochloride aqueous solution (for intramuscular injection), physiological saline, glucose aqueous solution, ethanol, Liquid for intravenous injection (for example, aqueous solution of citric acid and sodium citrate) or electrolyte solution (for intravenous drip and intravenous injection)
Or a mixed solution thereof. These injections may be dissolved in advance, or may be in the form of powder or dissolved in a suitable additive before use. These injections are usually 0.1 to 10% by weight,
It preferably contains 1 to 5% by weight of active ingredient. Liquid preparations such as suspensions or syrups for oral administration are 0.5 to 10%.
Contains active ingredients by weight. It should be noted that the actual preferred dosage of the compounds of the present invention will vary with the type of compound used, the type of composition formulated, the frequency of application and the particular site to be treated, the host and the tumor. For example, the daily adult dose is 1
In the case of parenteral administration, preferably intravenous injection, it is 10 to 100 mg per day. The frequency of administration varies depending on the administration method and symptoms,
Times to 5 times. Hereinafter, the present invention will be described specifically with reference to examples, but the present invention is not limited to these examples.

【００１０】[0010]

BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION

【００１１】[0011]

【Example】

実施例１ＢＥ−４３５４７類の製造法斜面軟寒天培地に接種した放線菌Ａ４３５４７株をグル
コース０．２％、デキストリン２．０％、ミートミール
０．５％、脱脂米ヌカ０．５％、脱脂肉骨粉０．１％、
乾燥酵母０．０５％、硫酸マグネシウム０．０２５％、
臭化ナトリウム０．０２５％、塩化ナトリウム０．２５
％、リン酸水素二カリウム０．０５％、硫酸第一鉄０．
０００２％、塩化第二銅０．００００４％、塩化マンガ
ン０．００００４％、塩化コバルト０．００００４％、
硫酸亜鉛０．００００８％、ホウ酸ナトリウム０．００
００８％、モリブデン酸ナトリウム０．０００２４％か
らなる培地（ｐＨ７．２）１１０ｍｌを含む５００ｍｌ
容の三角フラスコ６本に接種し、２８℃で７２時間、回
転振盪機（毎分１８０回転）上で培養した。この培養液
を２ｍｌずつ上記の培地１１０ｍｌを含む５００ｍｌ容
の三角フラスコ２００本に接種し２８℃で１６８時間、
回転振盪機（毎分１８０回転）上で培養した。このよう
にして得られた培養液（約２０Ｌ）から濾過により菌体
を分離し、この菌体をメタノール２Ｌで洗浄後、メタノ
ール、メチルエチルケトンの混合溶媒（２：１）９Ｌで
数時間攪拌後、菌体を濾去し、粗抽出液を得た。この抽
出液をｎ−ヘキサン９Ｌで洗浄した後、酢酸エチル、脱
イオン水の混合溶媒（２：１）１８Ｌで溶剤抽出を行な
った。上層を減圧下に約１Ｌに濃縮し、クロロホルム
１．５Ｌ、メタノール１Ｌを加えて抽出した。得られた
クロロホルム抽出液を減圧下に濃縮し、残留物をシリカ
ゲル（１００ｇ）のクロマトカラムにかけ、クロロホル
ム、メタノールの混合溶媒（３０：１）で溶出した。溶
出した活性画分を減圧下に濃縮乾固し、ＢＥ−４３５４
７類を含む混合物を得た。再度、シリカゲル（８０ｇ）
のクロマトカラムを行なった後、セファデックスＬＨ−
２０のクロマトグラフィー用カラム（３φｘ５８ｃｍ）
にかけ、クロロホルム、メタノールの混合溶媒（１：
２）で溶出した。目的の分画を減圧下に濃縮し、クロロ
ホルム、メタノール及び脱イオン水の混合溶媒系を用い
て、４℃で２日間攪拌しながら結晶化を行ない、ＢＥ−
４３５４７類化合物を含む結晶を１０７６．７ｍｇ得る
ことができた。次いで、クロマトレックスのＯＤＳカラ
ム（Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ，５０φｘ３００ｍｍ）を
用いた高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を行な
い、９０％メタノール溶液で溶出した結果、ＢＥ−４３
５４７Ａ₁，Ａ₂を含む画分Ｉ（１５６．３ｍｇ）、ＢＥ
−４３５４７Ｂ₁，Ｂ₂，Ｂ₃を含む画分ＩＩ（６５７．
１ｍｇ）、ＢＥ−４３５４７Ｃ₁，Ｃ₂を含む画分ＩＩＩ
（１５１．０ｍｇ）がそれぞれ得られた。画分Ｉ（１５
３．６ｍｇ）からは、９０％メタノール溶液でＨＰＬＣ
（Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ−ＯＤＳ，２０φｘ２５０ｍ
ｍ）を行なうことにより、ＢＥ−４３５４７Ａ₁を２
７．４ｍｇ、ＢＥ−４３５４７Ａ₂を１１４．５ｍｇ単
離した。また、画分ＩＩの一部（３９８．０ｍｇ）よ
り、画分Ｉと同条件でＨＰＬＣ（Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅ
ｘ−ＯＤＳ，２０φｘ２５０ｍｍ）を行ない、ＢＥ−４
３５４７Ｂ₁，Ｂ₂の混合物を２６１．２ｍｇ、ＢＥ−４
３５４７Ｂ₃を１３０．５ｍｇ得た。更にＢＥ−４３５
４７Ｂ₁，Ｂ₂の混合物からは、７０％メタノールの溶出
溶液でフルオフィックスカラムを用いたＨＰＬＣ（Ｆｌ
ｕｏｆｉｘ，２０φｘ２５０ｍｍ）を行なうことによ
り、ＢＥ−４３５４７Ｂ₁を２７．９ｍｇ、ＢＥ−４３
５４７Ｂ₂を２２．２ｍｇ単離した。最後の画分ＩＩＩ
（１５１．０ｍｇ）においては、９０％メタノール溶液
でＨＰＬＣ（Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ−ＯＤＳ，２０φ
ｘ２５０ｍｍ）を行なうことにより、ＢＥ−４３５４７
Ｃ₁を１１２．８ｍｇ、ＢＥ−４３５４７Ｃ₂を１１．２
ｍｇ単離した。以下に本発明の化合物の製剤例を示す
が、本発明の化合物の製剤は本製剤例に限定されるもの
ではない。製剤例１本物質（ＢＥ−４３５４７）１０（部）重質酸化マグネシウム１５乳糖７５を均一に混合して、３５０μｍ以下の粉末状又は細粒状
の散剤とする。この散剤をカプセル容器に入れカプセル
剤とした。製剤例２本物質（ＢＥ−４３５４７）４５（部）澱粉１５乳糖１６結晶性セルロース２１ポリビニルアルコール３蒸留水３０を均一に混合した後、破砕造粒して乾燥し、次いで篩別
して直径１４１０〜１７７μｍの大きさの顆粒剤とし
た。製剤例３製剤例２と同様の方法で顆粒剤を作製した後、この顆粒
剤９６部に対してステアリン酸カルシウム３部を加えて
圧縮成形し直径１０ｍｍの錠剤を作製した。製剤例４製剤例２の方法で得られた顆粒剤９０部に対して結晶性
セルロース１０部及びステアリン酸カルシウム３部を加
えて圧縮成形し、直径８ｍｍの錠剤とした後、これにシ
ロップゼラチン、沈降性炭酸カルシウム混合懸濁液を加
えて糖衣錠を作製した。Example 1 Production method of BE-43547s The actinomycetes A43547 strain inoculated on a soft slope agar medium was 0.2% glucose, 2.0% dextrin, 0.5% meatmeal, 0.5% defatted rice bran, 0.5% defatted 0.1% meat-and-bone meal,
Dried yeast 0.05%, magnesium sulfate 0.025%,
0.025% sodium bromide, 0.25 sodium chloride
%, Dipotassium hydrogen phosphate 0.05%, ferrous sulfate 0.
0002%, cupric chloride 0.00004%, manganese chloride 0.00004%, cobalt chloride 0.00004%,
0.00008% of zinc sulfate, 0.005% of sodium borate
500 ml containing 110 ml of a medium (pH 7.2) consisting of 008% and 0.00024% sodium molybdate
6 Erlenmeyer flasks were inoculated and cultured at 28 ° C. for 72 hours on a rotary shaker (180 rotations per minute). This culture solution was inoculated into 200-ml 500-ml Erlenmeyer flasks each containing 110 ml of the above medium at 2 ml and inoculated at 28 ° C for 168 hours.
Culture was performed on a rotary shaker (180 rotations per minute). The cells were separated from the thus obtained culture solution (about 20 L) by filtration, washed with 2 L of methanol, and stirred for several hours with 9 L of a mixed solvent of methanol and methyl ethyl ketone (2: 1) for several hours. The cells were removed by filtration to obtain a crude extract. The extract was washed with 9 L of n-hexane and then subjected to solvent extraction with 18 L of a mixed solvent of ethyl acetate and deionized water (2: 1). The upper layer was concentrated to about 1 L under reduced pressure, and extracted with 1.5 L of chloroform and 1 L of methanol. The obtained chloroform extract was concentrated under reduced pressure, and the residue was applied to a silica gel (100 g) chromatography column, and eluted with a mixed solvent of chloroform and methanol (30: 1). The eluted active fraction was concentrated to dryness under reduced pressure, and BE-4354
A mixture containing Class 7 was obtained. Again, silica gel (80 g)
After performing the chromatography column of Sephadex LH-
20 chromatography columns (3φx58cm)
And mixed solvent of chloroform and methanol (1:
It eluted in 2). The desired fraction was concentrated under reduced pressure, and crystallization was performed using a mixed solvent system of chloroform, methanol and deionized water while stirring at 4 ° C for 2 days, and BE-
As a result, 1076.7 mg of a crystal containing a 43547 compound was obtained. Subsequently, high performance liquid chromatography (HPLC) using a chromatrex ODS column (Chromatorex, 50φ × 300 mm) was performed, and elution was carried out with a 90% methanol solution. As a result, BE-43 was obtained.
Fraction I (156.3 mg) containing 547A ₁ and A ₂ , BE
-43547B _1, B Fraction II (657 including _2, B _3.
1 mg), fraction III containing BE-43547C ₁ and C ₂
(151.0 mg) were each obtained. Fraction I (15
3.6 mg), HPLC with 90% methanol solution
(Chromatorex-ODS, 20φx250m
By performing m), BE-43547A ₁ to 2
7.4mg, and the BE-43547A ₂ away 114.5mg single. In addition, a part of Fraction II (398.0 mg) was subjected to HPLC (Chromatore) under the same conditions as Fraction I.
x-ODS, 20φx250mm) and BE-4
3547B _1, mixture 261.2mg of B _2, BE-4
The 3547B ₃ was obtained 130.5mg. BE-435
From the mixture of 47B ₁ and B ₂ , HPLC (Fl
Uofix, by performing 20φx250mm), 27.9mg the BE-43547B _1, BE-43
The 547B ₂ was isolated 22.2mg single. Last fraction III
(151.0 mg), HPLC (Chromatorex-ODS, 20φ) with 90% methanol solution.
x250mm), BE-43547
The C ₁ 112.8mg, a BE-43547C ₂ 11.2
mg isolated. Formulation examples of the compound of the present invention are shown below, but the formulation of the compound of the present invention is not limited to this formulation example. Formulation Example 1 This substance (BE-43547) 10 (parts) heavy magnesium oxide 15 lactose 75 is uniformly mixed to prepare a powdery or fine powder having a particle size of 350 μm or less. This powder was placed in a capsule container to obtain a capsule. Formulation Example 2 This substance (BE-43547) 45 (parts) Starch 15 Lactose 16 Crystalline cellulose 21 Polyvinyl alcohol 3 Distilled water 30 After uniformly mixed, crushed and granulated, dried, and then sieved to have a diameter of 1410 to 177 μm. Granules of the size Formulation Example 3 After a granule was prepared in the same manner as in Formulation Example 2, 3 parts of calcium stearate was added to 96 parts of the granule, followed by compression molding to prepare a tablet having a diameter of 10 mm. Formulation Example 4 To 90 parts of the granules obtained by the method of Formulation Example 2, 10 parts of crystalline cellulose and 3 parts of calcium stearate were added and compression-molded to obtain a tablet having a diameter of 8 mm. Sugar-coated tablets were prepared by adding a mixed calcium carbonate suspension.

【００１２】[0012]

【発明の効果】本発明に記載するＢＥ−４３５４７類
は、マウス及びヒトの腫瘍細胞に対して強い増殖抑制効
果を示すことから、医薬の分野で癌の治療剤として有用
である。INDUSTRIAL APPLICABILITY BE-43547s described in the present invention show a strong growth inhibitory effect on mouse and human tumor cells, and thus are useful as therapeutic agents for cancer in the field of medicine.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＣ１２Ｐ 21/04 Ｃ１２Ｐ 21/04 //(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:465） (72)発明者小尻勝久茨城県つくば市大久保３番地萬有製薬株式会社つくば研究所内 (72)発明者須田寛之茨城県つくば市大久保３番地萬有製薬株式会社つくば研究所内────────────────────────────────────────────────── ─── Continued on the front page (51) Int.Cl. ⁶ Identification symbol FI C12P 21/04 C12P 21/04 // (C12N 1/20 C12R 1: 465) (72) Inventor Katsuhisa Kojiri Tsukuba, Ibaraki No. 3 Okubo in Tsukuba Research Laboratories of Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. (72) Inventor Hiroyuki Suda No. 3 of Okubo Tsukuba Research Institute in Tsukuba City, Ibaraki Pref.

Claims

[Claims]

1. A compound of the general formula [I][Wherein, R represents-(CH_Two)_TenCH (CH_Three)_Two,-(C
H_Two)₁₂CH_Three,-(CH_Two)_TenCH (CH_Three)CH_TwoC
H_Three,-(CH_Two)₁₁CH (CH_Three)_Two,-(CH_Two)₁₃C
H_Three,-(CH_Two)₁₂CH (CH_Three)_TwoOr-(CH_Two)₁₄
CH_ThreeAnd a compound represented by the following formula:

2. A method of culturing a microorganism having the ability to produce the compound of claim 1 represented by the general formula [I] or a mutant thereof, and collecting the compound represented by the general formula [I]. A method for producing a compound represented by the general formula [I].

3. The method according to claim 2, wherein the microorganism or a mutant thereof is Streptomyces sp.

4. The method according to claim 1, wherein the microorganism is Streptomyces sp. A.
43547 (Streptomyces sp. A4
3547) or a mutant thereof.

5. A Streptomyces sp. Capable of producing the compound according to claim 1.
ces sp. ) Or a mutant thereof.

6. Streptomyces sp. A4354
7 (Streptomyces sp. A4354)
7) or a mutant thereof.

7. An antitumor agent comprising the compound of claim 1 represented by the general formula [I] as an active ingredient.