JPH09500428A

JPH09500428A - Method for treating non-cotton cloth with cellulase

Info

Publication number: JPH09500428A
Application number: JP7524688A
Authority: JP
Inventors: エー．クラークソン，カスリーン; ラレナス，エドムンド; ウェイス，ジョフリー．エル
Original assignee: ジェネンカーインターナショナル，インコーポレイティド
Priority date: 1994-03-18
Filing date: 1995-03-14
Publication date: 1997-01-14
Anticipated expiration: 2022-05-09
Also published as: FI115306B; DK0699249T3; EP0699249A1; FI955554A0; DE69521250T2; DE69521250D1; CA2162903A1; EP0699249B1; FI955554A; JP3911009B2; WO1995025841A1

Abstract

(57)【要約】綿含有布と綿非含有セルロース系布の改良処理方法並びにこれらの方法から製造された布を開示する。特に、開示する方法は、１以上のEG型成分及び１以上のCBHＩ型成分を含んで成る真菌セルラーゼ組成物であって５：１より大きな全EG型成分対全 CBHＩ型成分のタンパク質重量比をもつものを含む水性溶液と綿含有又は綿非含有セルロース系布とを接解させることに向けられる。そのように処理された綿含有布は、より多量の CBHＩ型成分を含むセルラーゼ組成物により処理された布に比べて減少された強度損失を有している。 (57) [Summary] Disclosed are methods of improved treatment of cotton-containing and non-cotton-containing cellulosic cloths and cloths made from these methods. In particular, the disclosed method is a fungal cellulase composition comprising one or more EG-type components and one or more CBHI-type components, wherein the protein weight ratio of total EG-type components to total CBHI-type components is greater than 5: 1. It is directed to the contacting of an aqueous solution containing the stuff with a cotton-containing or non-cotton-containing cellulosic cloth. The cotton-containing fabric so treated has a reduced strength loss as compared to the fabric treated with the cellulase composition containing a higher amount of CBHI type component.

Description

【発明の詳細な説明】セルラーゼによる綿非含有布の処理方法発明の背景１．発明の分野本発明は、セルラーゼによる綿含有布 (cotton-containing fabrics)及び綿非含有セルロース系布（non-cotton containing cellulosic fabrics）の改良処理方法並びにこれらの方法により製造された織物に関する。特に、本発明に係る改良された方法は、１以上のEG型成分を含んで成り、かつ、低濃度の CBHＩ型成分を含む真菌セルラーゼ組成物を含む水性溶液と綿含有布及び綿非含有布を接触させることに向けられる。綿含有布及び綿非含有セルロース系布がこのような溶液により処理されるとき、得られる布は、例えば処理前の布と比較して、感触、外観、及び／又は柔らかさ、等について期待される強化を有し、そして綿含有布も、高濃度の CBHＩ型成分を含むセルラーゼ成分により処理された布と比較して、減少された強度の損失を有する。２．技術水準それらの製造の間又は直後、綿含有布は、その布に所望の特性を付与するためにセルラーゼにより処理されることができる。例えば、繊維産業においては、セルラーゼは、綿含有布の感触及び／又は外観を改善するために、綿含有編物からの表面繊維を除去するために、綿含有デニムにストーン・ウォッシュ外観を付与する等のために使用されている。特に、日本国特許出願第58-36217号及び第58-54032号並びにOhis hi et al.，“Reformation of Cotton Fabric by Cellulase”及びJTN December 1988 journal article “What's New -- Weight Loss Treatment to Soften th e Touch of Cotton Fabric”は、それぞれ、セルラーゼによる綿含有布の処理がその布について改善された感触をもたらすことについて開示している。このセルラーゼ処理が綿の毛羽立ち (fuzzing)及び／又は表面繊維を除去して、それがその布の重量を減少させるということが一般的に信じられている。これらの効果の組み合せは、その布に改善された感触（feel）を付与する、すなわちその布がより絹に似た感触になる。さらに、本分野においてはこれまで、例えばジェットの使用により、これらの編布に一般的な折れた繊維及び糸を除去する目的をもって、撹拌及びカスケード条件下で、セルロース溶液により綿含有織布を処理することが知られている。そのように処理されるとき、バッファーは一般的には使用されない。なぜなら、それらは、選ばれた染料による染料落ちに有害な影響を与えると信じられているからである。さらに本分野においてはこれまで、撹拌及びカスケード条件下でセルラーゼ溶液により綿含有織布を処理することも知られている。そのように処理されるとき、その綿含有織布をは、処理前の布と比較して改良された感触及び外観を有している。最後に、これまで、撹拌及びカスケード条件下、すなわち回転ドラム洗濯機内で、セルラーゼ溶液による綿含有の染色されたデニムの処理が、そのデニムに“ ストーン・ウォッシュ（stone washed）”外観を付与することも知られている。セルラーゼ溶液によるこのような綿含有布の処理に関連する共通の問題は、処理された布が、非処理布に比較してかなりの強度損失を示すということである。そのセルラーゼがセルロース（β−１，４−グルカン結合）を加水分解し、これが次にその綿ポリマーの一部の破壊をもたらすことができるために、強度損失が生じる。綿ポリマーが破壊されればされる程、その布の繊維強度は減少される。綿織布に上でのセルロース溶液の撹拌及びカスケード (agitation and cascad ing)を含む方法がより短かい反応時間を必要とするために、これらの方法は、撹袢及びカスケードを含まないセルラーゼ処理方法に比較して減少された強度損失の綿含有織布を提供すると信じられている。しかしながら、いずれの事案においても、このような方法は、かなりの強度損失をもたらす。従って、処理前の布に比較してセルラーゼによる処理から生じる処理された綿含有布における所望の強化を未だ達成しながら、減少された強度損失を提供するようにこのようなセルラーゼ処理を修飾することが特に望ましいであろう。さらに、セルラーゼの真菌源がひじょうに多量のセルラーゼを分泌することが知られており、そしてさらにこのような真菌源についての発酵手順並びにそのセルラーゼを単離するための単離及び精製手順が本分野においてよく知られているために、感触及び／又は外観を付与するための方法においてこのような真菌セルラーゼを使用することが特に有利であろう。発明の要約本発明は、真菌セルラーゼにより綿含有布及び綿非含有セルロース系布を処理するためのこれまでに知られている方法が、１以上のEG型成分を含んで成り、かつ、有意に低い濃度の CBHＩを含む真菌セルラーゼ組成物を使用することにより改善されることができるという発見に関する。驚ろくべきことに、EG型成分が、このようなセルラーゼ組成物による処理前の布に比較して、感触（feel）、外観（appearance）、柔らかさ（softuess）、着色強化 (color enhancement)、及び／又はストーン・ウォッシュ外観 (stone washed appearance)に関してその処理された布に強化を付与することができるということが発見された。さらに、EG型成分との組合せにおける CBHＩ型成分がその処理された布内の強度損失のかなりの大きさの部分についての原因であるということが発見された。従って、本発明においては、綿含有布及び綿非含有セルロース系布を処理するために使用されるセルラーゼ組成物が、強度損失抵抗性であるように有意に低い濃度の CBHＩ型成分を含むようにあつらえられる。上記視点においては、その方法の態様の中の１においては、本発明は、真菌セルラーゼ組成物による綿含有布及び綿非含有布の改良処理方法であって、その改良方法が１以上のEG型成分及び１以上の CBHＩ型成分を含んで成る真菌セルラーゼ組成物を使用することを含んで成り、そのセルラーゼ組成物が、５：１を上廻る、全EG型成分対全 CBHＩ型成分のタンパク質重量比をもつ、ような方法に関する。好ましい態様においては、本発明において使用される真菌セルラーゼ組成物は、１以上のEG型成分及び１以上のCBH 型成分を含んで成り、そのセルラーゼ組成物が５：１を上廻る全EG型成分：全CBH型成分のタンパク質重量比をもつ。さらに好ましい態様においては、本真菌セルラーゼ組成物は、そのセルラーゼ組成物中のタンパク質の全重量に基づき、少なくとも約10重量パーセント、そして好ましくは少なくとも約20重量パーセントを含んで成る。その方法の態様の中の他のものにおいては、本発明は、水性真菌セルラーゼ溶液による綿含有布及び綿非含有セルロース系布の改良処理方法であって、その方法がその布に対するそのセルラーゼ溶液のカスケード効果を作り出すような条件下でそのセルラーゼ溶液の撹拌により行われ、その改良が１以上のEG型成分及び１以上の CBHＩ型成分を含んで成る真菌セルラーゼ組成物の使用を含んで成り、そのセルラーゼ組成物が５：１を上廻る全EG型成分対全 CBHＩ型成分のタンパク質重量比をもつ、ような方法に関する。好ましい態様においては、本発明において使用される真菌セルラーゼ組成物は、１以上のEG型成分及び１以上のCBH 型成分を含んで成り、そのセルラーゼ組成物は、５：１を上廻る全EG型成分対全CBH 型成分のタンパク質重量比をもつ。さらに他の好ましい態様においては、真菌セルラーゼ組成物は、そのセルラーゼ組成物中のタンパク質の全重量に基づき少なくとも約10重量パーセント、そして好ましくは少なくとも約20重量パーセントを含んで成る。本発明に係る方法により処理された綿含有布は、より多量の CBHＩ型成分を含む真菌セルラーゼ組成物により処理された布と比較して、減少された強度損失を示しながら処理前の布に比較して予期された強化をもつ。この減少された強度損失は、本発明に係る方法が強度損失抵抗性であることを立証する。本発明に係る方法により処理された綿非含有セルロース系布は、非処理綿非含有セルロース系布に比較して感触、外観、柔らかさ、着色強化及び／又はストーン・ウォッシュ外観に関して付与された強化を示すことが発見された。その組成物の態様においては、本発明は、先に定義した本発明に係る方法において処理された綿含有布及び綿非含有セルロース系布に関する。図面の簡単な説明図１は、ｐΔ CBHＩpyr4の構築の概要である。図２は、トリコデルマ・ロンジブラチアタム（Trichoderma long ibrachiatum) 染色体の中のＩ上のcbh1座におけるｐΔ CBHＩpvr4からの大きい方の EcoＲＩ断片の組み込みによるトリコデルマ・ロンジブラチアタム（Trichode rma longibrachiatum）cbh1 遺伝子の欠失について示す。図３は、プローブとして³²ＰラベルされたｐΔ CBHＩpyr4を用いたサザン・ブロット分析後の EcoＲＩ消化ｐΔ CBHＩpyr4により形質転換されたトリコデルマ・ロンジブラチアタム (Trichoderma longibrachiatum)株GC69からのDNAのオートラジオグラフである。図４は、プローブとして³²ＰラベルされたpInt CBHＩを用いたサザン・ブロット分析後の EcoＲＩ消化されたｐΔ CBHＩpyr4により形質転換されたトリコデルマ・ロンジブラチアタム (Trichoderma longibrachiatum)株GC69からのDNA のオートラジオグラフである。図５は、トリコデルマ・ロンジブラチアタムの野生型により及び形質転換株により分泌されたタンパク質を示す等電点フォーカシング・ゲルである。特に図５中、この等電点フォーカシング・ゲルのレーンＡはトリコデルマ・ロンジブラチアタムの部分的に精製された CBHＩを使用し；レーンＢは、野生型トリコデルマ・ロンジブラチアタムからのタンパク質を使用し；レーンＣは、cbh1遺伝子が欠失されたトリコデルマ・ロンジブラチアタム株からのタンパク質を使用し；そしてレーンＤは、cbh1とcbh2遺伝子が欠失されたトリコデルマ・ロンジブラチアタムからのタンパク質を使用する。図５中、図の右手側の数字は、１以上の分泌タンパク質中に見つかった単一タンパク質の位置を示すためにマークされている。特にBGはβ−グルコシダーゼをいい；E1はエンドグルカナーゼＩをいい；E2はエンドグルカナーゼIIをいい；E3 はエンググルカナーゼIIIをいい；C1はエクソ−セロビオヒドロラーゼＩをいい；そしてC2はエクソ−セロビオヒドロラーゼIIをいう。図6Aは、ゲノムDNA の 4.1KB EcoＲＩ断片としてクローン化されたトリコデルマ・ロンジブラチアタムcbh2座を表したものであり、そして図6Bは、そのcbh2 遺伝子欠失ベクター、pPΔ CBHIIを表したものである。図７は、プローブとして³²ＰラベルされたpPΔ CBHIIを用いたサザン・ブロット分析の後の EcoＲＩ消化されたpPΔ CBHIIにより形質転換されたトリコデルマ・ロンジブラチアタム株P37 ｐΔ CBHＩからのDNA のオートラジオグラフである。図８は、プラスミドpEGＩpyr4のダイアグラムである。図９は、40℃におけるpHレンジについてのトリコデルマ・ロンジブラチアタムから誘導された酸性EG強化真菌セルラーゼ組成物(CBHＩ及び CBHII欠失) のRBB- CMC 活性特性；並びに40℃におけるpHレンジについてのトリコデルマ・ロンジブラチアタムから誘導された強化EGIIIセルラーゼ組成物の活性特性を示す。図10は、さまざまな量のCBH 成分をもつセルラーゼ組成物により処理された綿含有布についての洗濯メーター (launderometer)内での３回の洗浄サイクル後の強度損失結果を示す。図11は、さまざまなpHにおける野生型トリコデルマ・ロンジブラチアタムにより分泌されたセルラーゼ（全セルラーゼ）により処理された綿含有布についての（パネル・テスト等級に基づく）繊維除去結果を示す。図12は、野生型トリコデルマ・ロンジブラチアタムにより分泌されたセルラーゼのさまざまな濃度 (ppm)により処理された綿含有布についての及び CBHＩと C BHIIを分泌することができないように遺伝子操作されたトリコデルマ・ロンジブラチアタムの株により分泌されたセルラーゼにより処理された綿布についての（パネル・テスト等級に基づく）繊維除去結果を示す。図13は、 CBHＩ＆IIを生産することができないように遺伝子修飾されたトリコデルマ・ロンジブラチアタムの株から誘導されたEG強化セルラーゼ組成物のさまざまな濃度 (ppm)についての柔らかさパネル・テスト結果を示す。図14は、 CBHＩ＆IIを生産することができないように遺伝子修飾されたトリコデルマ・ロンジブラチアタムの株から誘導されたEG強化セルラーゼ組成物により処理された綿非含有セルロース系布についての柔らかさパネル・テスト結果を示す。図15は、 CBHＩ＆IIを生産することができないように遺伝子修飾されたトリコデルマ・ロンジブラチアタムの株から誘導されたEG強化セルラーゼ組成物により処理された綿非含有セルロース系布についての外観パネル・テスト結果を示す。好ましい態様の詳細な説明上述のように、本発明に係る方法は、セルラーゼによる綿含有布及び綿非含有セルロース系布の従来技術の処理方法における改良である。本改良は、その布における強度損失を最小化しながらその布に所望の強化を付与する特異的なセルラーゼ組成物を使用することを含んで成る。しかしながら詳細に本発明を討議するに先立って、以下の用語を最初に定義する。用語“綿含有布（cotton-containing fabric）”とは、棒織布、綿編物、綿デニム、綿ヤーン、等を含む純綿又は綿ブレンドから作られた縫布又は非縫布をいう。綿ブレンドが使用されるとき、その布中の綿の量は、少なくとも約40重量パーセントの綿；好ましくは約60重量パーセントを上廻る綿；そして最も好ましくは約75重量パーセントを上廻る綿でなければならない。ブレンドとして使用されるとき、その布中で使用される相手の材料は、１以上の非綿繊維であって合成繊維、例えばポリアミド繊維（例えばナイロン６及びナイロン66）、アクリル繊維（例えばポリマクリロニトリル繊維）、及びポリエステル繊維（例えばポリエチレン・テレフタレート）、ポリビニル・アルコール繊維（例えばビニロン）、ポリビニル・クロライド繊維、ポリビニリデン・クロライド繊維、ポリウレタン繊維、ポリウレア繊維及びマラミド繊維を含むものを含むことができる。再生セルロース、例えばレーヨンが本発明に係る方法において綿のための代替物として使用されることができるであろうことが企図される。用語“セルロース非含有布（non-cellulosic-containing fabric）”とは、天然セルロース（例えばジュート、フラックス、ラミー、等）及び人造セルロース誘導体を含む綿非含有セルロース布又は綿非綿含有セルロース誘導体ブレンドのいずれかをいう。人造セルロースのブレンドの標題の下に含まれるのは、本分野においてよく知られた再生セルロース、例えばレーヨンがある。他の人造セルロースは、セルロース繊維の化学修飾物（例えばアセテート等により誘導体化されたセルロース）及び溶媒紡糸セルロース繊維（例えばリオセル(lyocell)）を含む。上記の綿非含有セルロースは、リオセル−レーヨン、リオセル−リネン、ビスコース・レーヨン・アセテート、レーヨン・ウール、シルク−アセテート、等を含むブレンドとして使用されることもできる。用語“仕上げ (finishing)”は、本明細書中に使用するとき、布に対するセルラーゼのセルロース分解活性を実質的に防止するのに十分な量の仕上げ剤を綿含有布又は綿非含有セルロース布に適用することを意味する。仕上げ剤は一般的に、その布の特性、例えば柔らかさ、ドラパビリティー (drapability)等を強化する目的をもってその布の製造工程の終りに又は終了付近に適用され、それは、セルラーゼとの反応からその布をさらに保護する。綿含有布の仕上げに有用な仕上げ剤は、本分野においてよく知られており、そして樹脂状材料、例えばメラミン、グリオキサル、又はウレアホルムアルデヒド、並びにワックス、シリコーン、フルオロケミカル類及び第４類を含む。そのように仕上げられるとき、その綿含有布は、セルラーゼに対して実質的ほとんど反応性でない。用語“真菌セルラーゼ（fungal cellulase）”とは、真菌源から得られたセルラーゼ遺伝子の全部又は一部を取り込み、かつ、発現するように遺伝子修飾された真菌源又は微生物から誘導された酵素組成物をいう。真菌セルラーゼは、セルロース及びその誘導体に対して働いて、セルロースを加水分解し、そして主生成物、グルコース及びセロビオースを与える。真菌セルラーゼは、微生物、例えば放線菌類、粘菌バクラリア（ミクソバクテリア）及び真のバクテリアを含む非真菌源から生産されたセルラーゼからは区別される。本明細書中に記載するセルラーゼ組成物の製造に有用なセルラーゼを生産することができる真菌は、英国特許第 2 094 826Ａ号（この開示を引用により本明細書中に取り込む。）中に開示されている。ほとんどの真菌セルラーゼは一般的に、酸性又は中性pHレンジ内にそれらの最適活性をもつ。但し、いくつかの真菌セルラーゼは、中性及び僅かにアルカリ性の条件下でかなりの活性を有していることが知られている。すなわち、例えばフミコーラ・インソレンス (Humicola insolens)から誘導されるセルラーゼは、中性〜僅かにアルカリ性の条件下で活性を有することが知られている。真菌セルラーゼは、異なる基質特異性、酵素作用パターン、等をもついくつかの酵素分類を占めることが知られている。さらに、それぞれの分類内の酵素成分は、異なる分子量、異なる程度の糖添加、異なる等電点、異なる基質特異性、等を示すことができる。例えば、真菌セルラーゼは、エンドグルカナーゼ（endoglucanases） (EG_s ))、エクソセロビオヒドロラーゼ (exocellobiohydrolases (CBH_s ))、β−グルコシダーゼ (β−gluc osidases (BG_s ))、等を含むセルラーゼ分離を含むことができる。他方において、バクテリアのセルラーゼはCBH 成分をほとんど又は全く含まないものとして上記分献中に報告されているけれども、バクテリアのセルラーゼから誘導されたCB H-様成分がエクソセロビオヒドロラーゼ活性を有していることが報告されたいくつかのケースが存在する。天然真菌源により生産され、かつ、１以上のCBH 及びEG成分を含んで成り、それらの成分のそれぞれがその真菌源により生産された比において見られる真菌セルラーゼ組成物を、ときどき本明細書中に、“完全真菌セルラーゼ系（complete fungal cellulase system）”又は“完全真菌セルラーゼ組成物 (complete fun gal cellulase composition)”といって、それらを、それから単離されたセルラーゼの分類及び成分から、バクテリア及びいくつかの真菌により生産された不完全セルラーゼ組成物から、又は、セルラーゼの１以上のCBH 及び／又はEG成分を過剰生産し、過小生産し、又は生産しないように遺伝子修飾された微生物から得られたセルラーゼ組成物から区別する。セルラーゼの生産のために真菌を培養するための発酵手順は、本分野においてそれ自体公知である。例えば、セルラーゼ系は、バッチ、供給−バッチ及び連続フロー工程を含む固体又は浸漬培養のいずれかにより生産されることができる。発酵ブロスからのセルラーゼ系の採取及び精製も、本分野においてそれ自体知られた手順により行われることができる。 “エンドグルカナーゼ（“EG”）型成分”とは、トリコデルマ・ロンジブラチアタム (Trichoderma Longibrachiatum)のエンドグルカナーゼ成分と同様の繊維活性特性を示すような真菌セルラーゼ成分の全て又はそれらの成分の組合せをいう。これに関して、トリコデルマ・ロンジブラチアタムのエンドグルカナーゼ成分（特に、単独又は組合せのいずれかにむけるEGＩ，EGII，EGIII 等、）は、それらの成分が繊維処理媒質中に取り込まれ、そしてその布がこの媒質により処理されるとき（処理前の布に比較して）綿含有布に、改善された感触、改善された外観、柔らかさ、着色強化、及び／又はストーン・ウォッシュ外観を付与する。さらに、トリコデルマ・ロンジブラチアタムのエンドグルカナーゼ成分による綿含有布の処理は、類似の組成物であるがさらに CBHＩ型成分を含むによる処理から生じる強度損失に比較してより小さな強度損失をもたらす。従って、エンドグルカナーゼ型成分は、これらの成分がその布を処理するために使用される媒質に取り込まれるとき（処理前の布と比較して）綿含有布に改善された感触、改善された外観、柔らかさ、着色強化、及び／又はストーン・ウォッシュ外観を付与し、そして類似のセルラーゼ組成物であるがさらに CBHＩ型成分を含むものによる処理から生じる強度損失に比較して綿含有布に減少された強度損失を付与するような真菌セルラーゼ成分である。このようなエンドグルカナーゼ型成分は、活性テスト、例えば、それらの成分が（ａ）可溶性セルロース誘導体、例えばカルボキシメチルセルロース (CMC)を加水分解し、それによりCMC 含有溶液の粘度を減少される能力、それらの成分が（ｂ）セルロースの水和形態例えばリン酸膨潤セルロース（例えばWalseth セルロース）を容易に加水分解し、そしてセルロースのより高い結晶形態（例えばAv icel，Solkafloc 、等）をほとんど容易に加水分解しない能力、を使用してエンドグルカナーゼとして伝統的に分類される成分を含むことができない。他方において、このような活性テストにより定義されるようなすべてのエンドグルカナーゼ成分が、綿含有布に１以上の強化並びに綿含有布に減少された強度損失を付与しないであろうと信じられている。従って、本発明における目的にとって、トリコデルマ・ロンジブラチアタムのエンドグルカナーゼ成分により所有されるものと同様な繊維活性特性を有するような真菌セルラーゼの成分としてエンドグルカナーゼ型成分を定義することが、より正確である。真菌セルラーゼは、１以上のEG型成分を含むことができる。異なる成分は一般的に異なる等電点、異なる分子量、異なる程度の糖添加、異なる基質特異性異なる酵素作用パターン、等をもつ。異なる等電点の成分は、イオン交換クロマトグラフィー等を介してそれらを分離することができる。実際に、異なる真菌源からの成分の単離が本分野において公知である。例えばBjork et al.，米国逐次番号第 07/422，814号、Schulein et al.,国際出願WO89/09259，Wood et al., Bioch emistry and Genetics of Cellulose Degradation，pp．31 to 52（1988）；Woo d et al.，Carbohydrate Research，Vol．190，pp．279 to 297（1989）；Schul ein，Uethods in Enzymology，Vol．160，pp-234 to 242（1988）;等を参照のこと。これらの文献のそれぞれの開示全体を引用により本明細書中に取り込む。一般的に、EG型成分の組合せが単一EG成分に比較して綿含有布及び綿非含有布への強化の付与並びに減少された強度損失の付与において協力的応答を与えることができることが企図される。他方において、単一EG型成分は、より安定であり、又はpH_s のレンジについてより広い活性スペクトルをもつことができる。従って、本発明において使用されるEG型成分は、単一EG型成分又は２以上のEG型成分の組合せのいずれかであることができる。成分の組合せが使用されるとき、そのEG型成分は、同一又は異なる真菌源から誘導されることができる。 EG型成分がバクテリアにより誘導されたセルラーゼから誘導されることができることも企図される。 “エクソ−セロビオヒドロラーゼ型（“CBH 型”）成分（Exo-cellobiohydrol ase type (“CBH type”) components）”とは、トリコデルマ・ロンジブラチアタムの CBHＩ及び／又は CBHIIセルラーゼ成分と同様の繊維活性特性を示すような真菌セルラーゼ成分をいう。これに関して、（先に定めたような）EG型セルラーゼ成分の非存在中で使用されるとき、トリコデルマ・ロンジブラチアタム単独の CBHＩ及び CBHII成分は、そのように処理された綿含有布に、感触、外観、着色強化、及び／又はストーン・ウォッシュ外観における有意な強化のいずれをもを付与しない。従って、EG型成分との組合せにおいて使用されるとき、トリコデルマ・ロンジブラチアタムの CBHＩ成分は、綿含有布に強化された強度損失を付与する。従って、 CBHＩ型成分と CBHII型成分とは、それぞれ、トリコデルマ・ロンジブラチアタムの CBHＩと CBHII成分と同様の繊維活性特性を示すような真菌セルラーゼ成分をいう。上述のように、 CBHＩ型成分については、これは、EG型成分の存在中で使用されるとき、綿含有布の強度損失を強化する特性を含む。好ましい態様においては、そしてEG型成分との組合せにおいて使用されるとき、トリコデルマ・ロンジブラチアタムの CBHＩ型成分は、増分のクリーニング利益を付与することができる。さらに、トリコデルマ・ロンジブラチアタムの CBHＩ成分は、単独において又はEG型成分との組合せにおいて使用されるとき、増分の柔らかさ利益を付与することができる。このようなエクソ−セロビオヒドロラーゼ型成分は、活性テスト、例えばトリコデルマ・ロンジブラチアタムからの CBHＩと CBHIIを特徴付けるために使用されるようなものを使用して、エクソセロビオヒドロラーゼとして伝統的に分離される成分を、たぶん含むことができないであろう。例えば、このような成分（ａ）は、セロビオースにより競合的に阻害され（Ki約１mM）；（ｂ）は、いずれかの有意な程度まで置換セルロース、例えばカルボキシメチルセルロース、等を加水分解することができず；そして（ｃ）は、リン酸膨潤セルロースを加水分解し、そしてより小さな程度に高結晶性セルロースを加水分解する。他方において、このような活性テストによるCBH 成分として特徴付けられるいくつかの真菌セルラーゼ成分が、そのセルラーゼ組成物単独で使用されるとき最小の強度損失をもつ綿含有布に、改善された感触、外観、柔らかさ、着色強化、及び／又はストーン・ウォッシュ外観を付与するであろうと信じられている。従って、本発明における目的をのために、EG型成分としてこのようなエクソ−セロビオヒドロラーゼを定義することがより正確であると信じられる。なぜなら、これらの成分が、トリコデルマ・ロンジブラチアタムのエンドヌクレアーゼ成分により所有されるように繊維用途において同様の機能的特性を有するからである。１以上のEG型成分及び１以上の CBHＩ型成分をもつ真菌セルラーゼ組成物であって、そのセルラーゼ組合物が５：１を上廻る全EG型成分対全 CBHＩ型成分のタンパク質重量比をもつものを、精製技術により得ることができる。特に、その完全セルラーゼ系を、好適なpHにおけるイオン交換クロマトグラフィー、アフィニティー・クロマトグラフィー、サイズ排除、等を含む上記文献においてよく頒布されたよく認識された分離技術により実質的に純粋な成分に精製することができる。例えば、イオン交換クロマトグラフィー（普通にはアニオン交換クロマトグラフィー）においては、pHグラジエント、又は塩グラジエント、又はpHと塩の両方のグラジエントによる溶出により上記セルラーゼ成分を分離することができる。精製後、所望の成分の必要量が組換えられることができる。 EG型成分対 CBHＩ型セルラーゼ成分の必要比をもつセルラーゼ成分の混合物はそれらの成分の単離及び組換え以外の手段により製造されることができることも企図される。これに関して、EG対CBH 成分の比較的高い比を与えるために天然の微生物についての発酵条件を修飾することができる。同様に、組換え技術は、EG 型成分対CBH型成分の比較的高い比をもつセルラーゼ成分の混合物を作り出すためにEG型成分対CBH 型成分の相対比を交換することができる。上記に関して、本明細書中に記載するセルラーゼ組成物の好ましい製造方法は、１以上の酸性EG型成分を過剰生産するように微生物を遺伝子修飾することによる。同様に、１以上のCBH 型成分を生産することができないように微生物を遺伝子修飾することもでき、その方法はいずれの外因性タンパク質も生産しない。このような場合においては、このように修飾された微生物により生産されたセルラーゼの必要量は、１以上のEG型成分及び１以上の CBHＩ型成分を含むセルラーゼ組成物であってそのセルラーゼ組成物が５：１を上廻る全EG型成分対全 CBHＩ型成分のタンパク質重量比をもつものを提供するために天然の微生物により生産されるセルラーゼ（すなわち、 CBHＩ型成分を含むもの）と併合されることができるであろう。上記に関して、1990年10年５日に出願された米国逐次番号第07/593,919号であって全体として引用により本明細書に取り込むものは、１以上のCBH 成分を生産することができず、そして／又は１以上のEG成分を過剰生産することができないようにトリコデルマ・ロンジブラチアタムを遺伝子操作する方法について開示している。その上、その出願の方法は、外因性タンパク質のいずれをも生産しないトリコデルマ・ロンジブラチアタムを作り出した。同様に、Milleret al.，“Di rect and Indirect Gene Replacement in Aspergillus nidulans”，Molecular and Cellular Biology，p. 1714-1721（1985）は、相同DNA の線状断片を用いた DNA 仲介形質転換によりアスペルギルス・ニジュランス（Aspergillus nidulans ）内での遺伝子の欠失方法について開示している。Miller et al.,の方法は、外因性タンパク質のいずれをも生産せずに遺伝子欠失を達成するであろう。上記の視点において、 CBHＩ型及び／又は CBHII型セルラーゼ成分の生産に責任を負う遺伝子の欠失は、そのセルラーゼ組成物中に存在するEG成分の量を強化する効果をもつであろう。真菌セルラーゼ組成物が低濃度の CBHＩ型成分を生産する真菌源から本発明において使用されることができることもさらに企図される。さらに、慣用手順により精製された１以上の CBHＩ型成分の必要量が、EG型成分対 CBHＩ型成分の特定化を達成するように CBHＩ型成分を生産することができないように遺伝子操作された微生物から生産されたセルラーゼ組成物に添加されることができる。すなわち、EG型成分に富むように全CBH 型成分を含まないセルラーゼ組成物が、精製された CBHＩ型成分（又は CBHII型成分）の上記量を上記セルラーゼ組成物に単に添加することにより２重量パーセントの CBHＩ型成分（又は CBHII型成分）を含むように配合されることができる。 “β−グルコシダーゼ（BG）成分”とは、BG活性を示すようなセルラーゼの成分をいい；すなわちこのような成分がセロビオース及び他の可溶性セロオリゴ糖（“セロビオース（cellobiose）”）の非還元末端から作用し、そして唯一の生成物としてグルコースを与えるであろうということをいう。BG成分は、セルロースポリマー上に吸着せず又はそれと反応しない。さらに、このようなBG成分は、グルコースにより競合的に阻害される（Ki約１mM）。厳密に言えば、BG成分は文言上セルラーゼではない。なぜなら、それらがセルロースを分解することができないからである。しかしながら、このようなBG成分は上記セルラーゼ系の定義内に含まれる。なぜならこれら酵素が、CBH 成分とEG成分の併合作用により作り出される阻害性セルロース分解生成物（特にセロビオース）をさらに分解することによりセルロースの全体としての分解を容易にするからである。BG成分の存在を伴わずに、結晶性セルロースの中程度又は僅かな加水分解が生じるであろう。BG成分は、アリール基質、例えばｐ−ニトロフェノールβ−Ｄ−グルコシド（PNPG）についてしばしば特徴付けられ、そしてこれ故、しばしばアリール−グルコシダーゼといわれる。すべてのグルコシダーゼがBG成分ではなく、その中のいくつかはセロビオースを加水分解しないということに注意しなければならない。本セルラーゼ組成物中のBG成分の存在又は非存在がその組成物中のいずれかの CBH 成分の活性を調節するために使用されることができることが企図される。特に、セロビオースはCBH 成分によりセルラーゼ分解の間に作られるので、そして高濃度のセロビオースがCBH 活性を阻害することが知られているので、そしてさらにこのようなセロビオースがBG成分によりグルコースに加水分解されるので、セルラーゼ組成物中のBG成分の非存在は、セロビオースの濃度が阻害レベルに達するときにCBH 活性を“停止（Turn-off）される”であろう。１以上の添加物（例えばセロビオース、グルコース、等）をそのセルラーゼ組成物に添加して、 C BHＩ型活性全て並びに他の CBH 活性のいくつか又は全てを、直接的又は間接的に、有効に“停止させる”ことができることも企図される。このような添加物が使用されるとき、得られる組成物は、使用される添加物の量が、本明細書中に記載するセルラーゼ組成物を用いて達成される CBHＩ型活性レベルに等しいか又はそれ未満のレベルにその CBH Ｉ型活性を低下させるのに十分である場合に、本発明における使用に好適な組成物であると考えられる。他方において、BG成分の添加量を含むセルラーゼ組成物は、そのCBH 成分により生成されたセロビオースのレベルが添加されたBG成分の非存在中上記のような全体的な加水分解を制限するようになる場合に、セルロースの全体的な加水分解を増加させることができる。セルラーゼ組成物中のBG成分の量を増加させるか又は減少させるかのいずれかの方法は、アトーニ−書類番号第010055-056号として1990年12月10日に出願され、“SACCHARIFICATION OF CELLULOSE BY CLONING AND AMPLIFICATION OF THE β −GLUCOSIDASE GENE OF TRICHODERMA REESEI”と名称を付けられた米国逐次番号第07/625,140号中に開示されている（この出願を全体として引用により本明細書中に取り込む）。真菌セルラーゼは１を上廻るBG成分を含むことができる。異なる成分は一般的に、イオン交換クロマトグラフィー等を介してそれらの分離を許容する異なる等電点をもつ。単一BG成分又はEG成分の組合せのいずれかを使用することができる。繊維処理溶液中で使用されるとき、BG成分は、一般的に、そのセルラーゼ組成物中にあるいずれかのCBH 及びEG成分のセロビオースによる阻害を妨ぐのに十分な量において添加される。添加されるBG成分の量は、当業者により容易に測定されることができる繊維組成物中で生産されたセロビオースの量に依存する。しかしながら、使用されるとき、セルラーゼ組成物中に存在するいずれかのCBH 型成分に対するBG成分の重量パーセントは、好ましくは約 0.2〜約10重量パーセント、そしてより好ましくは約 0.5〜約５重量パーセントである。本発明において使用される真菌セルラーゼ組成物を製造するための使用に好ましい真菌セルラーゼは、トリコデルマ・ロンジブラチアタム (Trichoderma long ibrachiatum) 、トリコデルマ・コニンジ（Trichoderma koningii）、ペンシラム種 (Pencillum sp.)、フミコーラ・インソレンス (Humicola insolens)、等から得られるものである。特定の真菌セルラーゼは商業的に入手可能であり、すなわち、CELLUCAST（Novo Industry，Copenhagen，Denmark から入手可能）、RAPIDA SE（Gist Brocades，N．V.，Delft，Hollandから入手可能）、CYTOLASE 123（Ge nencor International，South San Framcisco，California から入手可能）、等である。他の真菌セルラーゼ本分野において認知された発酵及び単離手順により容易に単離されることができる。用語“バッファー”とは、綿含有布のセルラーゼ処理の間の不所望のpHシフトに付してそのセルラーゼ溶液を安定化させる本分野において認知された酸／塩基試薬をいう。これに関して、セルラーゼ活性がpH依存性であることは本分野において認識されている。すなわち、特定のセルラーゼ組成物は所定のpHレンジ内にセルロース分解活性を示すであろうし、最適セルロース分解活性はこの定められたレンジの小部分内に一般的に見られる。セルロース分解活性について特定のpH レンジはそれぞれのセルラーゼ組成物に従って変化するであろう。上述のように、ほとんどのセルラーゼは、酸性〜中性pH特性内にセルロース分解活性を示すであろうけれども、アルカリ性pH特性内でセルロース分解活性を示すいくつかのセルラーゼ組成物がある。綿含有布と綿非含有セルロース系布のセルラーゼ処理の間、最初のセルラーゼ溶液のpHは、セルラーゼ活性に必要なレンジの外側にあることができる。さらに、そのpHが、例えばその溶液のpHを変化させる反応生成物の生成により、その綿含有又は綿非含有セルロース系布の処理の間に変化することもできる。いずれの事件においても、非緩衝化セルラーゼ溶液のpHは、セルロース分解活性に必要なレンジの外側にあることができるであろう。例えば、酸性活性特定をもつセルラーゼが中性の非緩衝化水性溶液中で使用される場合、その溶液のpHは、より低いセルロース分解活性をもたらすであろうし、そしてたぶんセルロース分解活性の中止をもたらすであろう。他方において、中性非緩衝化水性溶液中の中性又はアルカリ性pH特定をもつセルラーゼの使用は、最初に有意なセルロース分解活性を提供しなければならない。上記の視点においては、セルラーゼ溶液のpHは、セルロース分解活性に必要なレンジ内で維持されなければならない。これを達成する１の手段は、その系のpH を単に維持し、そして酸又は塩基のいずれかの添加により適宜そのpHを調整することによる。しかしながら、好ましい態様においては、その系のpHは好ましくは、そのセルラーゼ溶液中のバッファーの使用により所望のpHレンジ内に維持される。一般的に、その中で使用されるセルラーゼが活性を示すレンジ内にその溶液のpHを維持するのに十分な量のバッファーが使用される。異なるセルラーゼ組成物がセルラーゼ活性を示すための異なるpHレンジをもつ限り、使用される特定のバッファーは、その使用される特定のセルラーゼ組成物との関係において選定される。使用されるセルラーゼ組成物との使用のために選ばれたバッファーは、使用されるセルラーゼ組成物のためのpHレンジ及び最適pH並びにそのセルラーゼ溶液のpHを考慮して当業者により容易に決定されることができる。好ましくは、使用されるバッファーは、セルラーゼ組成物と相溶性であり、かつ、最適活性のために必要なpHレンジ内でそのセルラーゼ溶液のpHを維持するであろうものである。好適なバッファーは、クエン酸ナトリウム、酢酸アンモニウム、酢酸ナトリウム、リン酸２ナトリウム、及びいずれかの他の本分野において認知されたバッファーを含む。綿含有布の引っ張り強さは、互いに直角にあるたて糸とよこ糸の方向において計測されることができる。従って、用語“たて糸引っ張り強さ (warp tensile s trength)”とは、本明細書中に使用するとき、綿含有布の長さに沿って計測されるときの綿含有布の引っ張り強さをいい、一方、用語“よこ糸引っ張り強さ (fi ll tensile strength)”とは、綿含有布の幅を横切って計測されるときの綿含有布の引っ張り強さをいう。得られるセルラーゼ溶液により処理された綿含有布の引っ張り強さは、その処理の強度減少効果を測定するためにセルラーゼ溶液による処理に先立つその引っ張り強さと比較される。引っ張り強さがかなり減少される場合、得られる綿含有布は容易に裂け、そして／又は穴を形成するであろう。従って、処理前の引っ張り強さの少なくとも約50％である処理後の（たて糸とよこ糸の両方の）引っ張り強さを維持することが望ましい。綿含有布の引っ張り強さは、ASTM D1682テスト方法論に従って容易に行われる。このような布の引っ張り強さをテストするのに好適な装置は、Scott テスター又はInstron テスターを含み、この両方が商業的に入手可能である。セルラーゼ溶液により処理された綿含有布の引っ張り強さのテストにおいては、処理後及びテスト前の布の縮みを妨ぐことに注意しなければならない。このような縮みは、誤った引っ張り強さのデータをもたらすであろう。綿含有布及び綿非含有セルロース系布に対する強化は、これまでに使用されたような方法により達成される。例えば、改善された感触をもつ綿含有布は、日本国特許出願第58-36217号及び第58-54032号並びにOhishi et al.,“Reformation of Cotton Fabric by Cellulase ”及びJTN 1988年12月ジャーナル記事“What's New -- Weight Loss Treatment to Soften the Touch of Cotton Fabric”に従って達成されることができる。これらの文献のそれぞれの技術を引用により本明細書中に取り込む。同様に、綿含有布と綿非含有セルロース系布の感触と外観の両方を改善するための方法は、その溶液が撹拌され、そして綿含有又は綿非含有セルロース系布に対するセルラーゼ溶液のカスケード効果が達成されるような条件下でセルラーゼを含む水性溶液とその布を接触させることを含む。このような方法は、そのように処理された綿含有布と綿非含有セルロース系布の改善された感触と外観をもたらし、そして1990年10月16日に出願された米国逐次番号第07/598,506号中に記載されており、そしてこれを全体として引用により本明細書中に取り込む。綿含有編物の強化方法は、International Textile Bulletin，Dyeing/Printin g/Finishing，page ５ et seq.，２^nd Quarter，1990（これを引用により本明細書中に取り込む。）中に記載されている。同様に、綿含有デニムにストーン・ウォッシュ外観を付与する方法は、米国特許第 4,832,864号（これを全体として引用により本明細書中に取り込む。）中に記載されている。セルラーゼ組成物による処理により綿含有布を強化する他の方法は本分野に公知である。好ましくは、このような方法においては、セルラーゼによる綿含有布の処理は、その綿含有布を仕上げする前に行われる。上述のように、本発明は、本発明が、その処理された布において強度損失を最小化する特定のセルラーゼ組成物を使用する限り、従事技術を上廻る、綿含有布の改良方法である。本発明において使用されるセルラーゼ組成物は、１以上のEG 型成分及び１以上のCBH 型成分を含んで成る真菌セルラーゼ組成物であって、その組成物が５：１を上廻る全EG型成分対全CBH 型成分の重量比をもつものである。さらに、本明細書中に記載するセルラーゼ組成物の使用は、応力を加えられた綿含有布と綿非含有セルロース系布の布／色の強化をももたらす。特に、綿含有布と綿非含有布の製造の間、その布は、応力を加えられるようになることができ、そしてそのように応力が加えられるとき、それは破壊され、かつ、無秩序な繊維を含むであろう。このような繊維は、その布にすりきれた、かつ、曇った外観を有害に付与する。しかしながら、本発明に係る方法において処理されるとき、そのように応力の加えられた布は布／色の強化を受ける。これは、応力を加えられるようになる前の布の外観を回復させる効果をもつ破壊され、かつ、無秩序な繊維のいくつかを除去することにより生じると信じられている。さらに、顔料型染色布（例えば、デニム）と共に本明細書中に記載するセルラーゼ組成物を使用することにより、これらのセルラーゼ組成物は、綿含有と綿非含有セルロース系布上への染料のより少ない再付着を引き起こすであろうということが企図される。これらの再付着特定が他の成分に比較して１以上の特定のEG 型成分について強化されることができることも企図される。先に記載された真菌セルラーゼ組成物は、セルラーゼ及び、例えばバッファー、界面活性剤、精練剤（scouring agent）、等を含む他の任意的成分を含む水性溶液中で使用される。本溶液中で使用されるセルラーゼ組成物の濃度は、一般的にその意図された目的に十分な濃度である。すなわち、セルラーゼ組成物の量は、綿含有布に所望の強化を提供するために使用される。使用されるセルラーゼ組成物の量は、使用される装置、使用される工程パラメーター（そのセルラーゼ溶液の温度、そのセルラーゼ溶液への暴露時間）、セルラーゼ活性（例えば、セルラーゼ溶液はより小さな活性のセルラーゼ組成物に比較してより大きい活性のセルラーゼ組成物のより低濃度を必要とするであろう。）、等にも依存する。セルラーゼ組成物の正確な濃度は、上記の要因並びに所望の効果に基づいて当業者により容易に決定されることができる。好ましくは、本発明において使用されるセルラーゼ溶液中のセルラーゼ組成物の濃度は、約0.01グラム／セルラーゼ溶液１リッター〜約10.0グラム／セルラーゼ溶液１リッター；そしてより好ましくは、約0.05グラム／セルラーゼ溶液１リッター〜約２グラム／セルラーゼ溶液１リッターである（先に掲げたセルラーゼ濃度は、全タンパク質の重量についてのものである。）バッファーをセルラーゼ溶液中に使用するとき、水性セルラーゼ溶液中のバッファーの濃度は、その中で使用されるセルラーゼが活性を示すレンジ内の溶液の pHを維持するのに十分なものであり、それは、次に、使用されるセルラーゼの性質に依存する。使用されるバッファーの正確な濃度は、当業者が容易に考慮に入れることができるいくつかの要因に依存するであろう。例えば、好ましい態様においては、そのバッファー並びにバッファー濃度は、最適なセルラーゼ活性に必要なpHレンジ内にそのセルラーゼ溶液のpHを維持するように選ばれる。一般的に、セルラーゼ溶液中のバッファー濃度は、約 0.005Ｎ以上である。好ましくはセルラーゼ溶液中のバッファーの濃度は、約0.01〜約 0.5Ｎ、そしてより好ましくは、約0.05〜約0.15Ｎである。セルラーゼ溶液中の増加したバッファー濃度が処理された布の引っ張り強さの損失の割合を強化することができることが可能である。セルラーゼとバッファーに加えて、セルラーゼ溶液は場合により、少量の界面活性剤、すなわち、約２重量パーセント未満、そして好ましくは約0.01〜約２重量パーセントの界面活性剤を含むことができる。好適な界面活性剤は、例えば、アニオン性、非イオン性及び両性界面活性剤を含む、セルラーゼとその布と適合性のいずれかの界面活性剤を含む。本発明における使用に好適にアニオン性界面活性剤は、線状又は分枝アルキルベンゼンスルホネート；線状又は分枝アルキル基又はアルケニル基をもつアルキル又はアルケニル・エーテル界面活性剤；アルキル又はアルケニル・スルフェート；オレフィンスルホネート；アルカンスルホネート、等を含む。アニオン界面活性剤に好適な相手イオンは、アルカリ金属イオン、例えばナトリウムとカリウム；アルカリ土類金属イオン、例えばカルシウムとマグネシウム；アンモニウム・イオン；及び炭素数２又は３の、１〜３のアルカノール基をもつアルカノールアミンを含む。両性界面活性剤（Ampholytic surtactants）は、スルホン酸第４アンモニウム塩、ベタイン型（betaine-type）両性界面活性剤、等を含む。このような両性界面活性剤は、同一分子内に正と負の両方の電荷をもつ。非イオン界面活性剤は、一般的に、ポリオキシアルキレン・エーテル、並びにその高級脂肪酸アルカノールアミド又はアルキレン・オキシド付加物、脂肪酸グリセリン・モノエステル、等を含んで成る。界面活性剤の混合物を使用することもできる。本発明において使用する、液化、すなわち、セルラーゼ溶液の重量対の重量の比は、一般的に、綿含有又は綿非含有セルロース系布において所望の強化を達成するのに十分な量であり、そして使用される方法及び達成されるべき強化に依存する。好ましくは、この液化は一般的に約 0.1：１以上、そしてより好ましくは約１：１以上、そしてさらにより好ましくは約10：１以上である。約50：１以上の液化の使用は経済的な視点から通常好ましくない。セルラーゼ処理のための反応温度は、２つの競合要因に支配される。第一に、より高い温度は、一般的に強化された反応速度に対応し、すなわちより速い反応は、低温において必要とされる反応時間に比較して減少された反応時間を許容する。従って、反応温度は一般的に少なくとも約30℃以上である。第二に、セルラーゼは、使用されるセルラーゼの性質に依存する所定の反応温度を超えて活性を失うタンパク質である。従って、その反応温度があまりに高くされる場合、そのセルロース分解活性は、そのセルラーゼの変性の結果として失われる。結果として、本発明において使用される最大反応温度は一般的に約65℃である。上記の視点において、反応温度は一般的に約30℃〜約65℃；好ましくは約35℃〜約60℃；そしてより好ましくは約35℃〜約50℃である。反応時間は一般的に、約 0.1時間〜約24時間、そして好ましくは約0.25時間〜約５時間である。このようなセルラーゼ組成物を用いて先に記載した方法において処理された綿含有布は、完全真菌セルラーゼ組成物により同一のやり方で処理された同一の綿含有布に比較して減少された強度損失を有する。このようなセルラーゼ組成物を用いて上記の方法により処理された綿非含有セルロース系布も、完全真菌セルラーゼ組成物により同一のやり方で同一の綿非含有セルロース系布に比較して減少された強度損失を有するであろうことが企図される。好ましい態様においては、濃縮物を、本明細書中に記載する方法において使用のために製造することができる。このような濃縮物は、好ましくは、水性溶液中、先に記載したセルラーゼ組成物、バッファー及び界面活性剤の濃縮量を含むであろう。そのように配合されるとき、濃縮物は、これらの添加物の必要な濃度をもつセルラーゼ溶液を迅速且つ正確に製造するように容易に水により希釈されることができる。好ましくは、このような濃縮物は、約 0.1〜約20重量パーセントの先に記載したセルラーゼ組成物（タンパク質）；約10〜約50重量パーセントのバッファー；約10〜約50重量パーセントの界面活性剤；及び約０〜80重量パーセントの水を含んで成るであろう。水性濃縮物が配合されるとき、これらの濃縮物は、そのセルラーゼ溶液中その成分の必要な濃度に達するように約２〜約200 の係数により希釈されることができる。自明であろうが、このような濃縮物は、そのセルラーゼ溶液の容易な配合を許容し、並びにそれが使用されるであろう位置へのその濃縮物の実行可能な移送を許容する。上記のセルラーゼ組成物は、液体希釈物、粒状物、エマルジョン、ゲル、ペースト、等のいずれかにおける濃縮物に添加されることができる。このような形態は当業者によく知られている。固体セルラーゼ濃縮物が使用されるとき、このセルラーゼ組成物は一般的に粒状物、粉末、凝集物、等である。粒状物が使用されるとき、これらの粒状物は好ましくは、セルラーゼ保護剤を含むように配合される。例えば、アトーニ−書類番号第010055-073号として、“GRANULES CONTAINING BOTH AN ENZYME AND AN EN ZYME PROTECTING AGENT AND DETERGENT COMPOSITIONS CONTAINING SUCH GRANULE S ”と名称付けされた、1991年１月17日に出願された米国逐次番号第07/642,669号（この出願を全体として引用により本明細書中に取り込まれた。）を参照のこと。同様に、粒状物は、洗浄媒質中への粒状物の溶解速度を減少させるための材料を含むように配合されることができる。このような材料と粒状物は、アトーニ−書類番号GCS-171-US1 として、そして“GRANULAR COMPOSITIONS ”と名称付けされた1991年１月17日に出願された米国逐次番号第07/642,596号（この出願を引用により全体として本明細書中に取り込む。）中に開示されている。本明細書中に記載するセルラーゼ組成物が、液体又はスプレーのいずれかとして前洗浄において、そして前浸漬においてさらに使用されることができることが企図される。さらに、本明細書中に記載するセルラーゼ組成物が、布の色及び外観の強化に好適な独立組成物として家庭において使用されることもできることが企図される。例えば米国特許第 4,738,682号（これを全体として引用により本明細書中に取り込む。）を参照のこと。以下の実施例は、本発明を説明するために提供され、そしていずれの方法によるかを問わず本発明の範囲を限定するものと解されるべきではない。実施例実施例１〜12は、１以上のセルラーゼ成分を生産することができないように又は特定のセルラーゼ成分を過剰生産するように遺伝子操作されたトリコデルマ・ロンジブラチアタム（Trichoderma longibrachiatum)の作出について実証する。実施例１トリコデルマ・ロンジブラチアタムのpyr4突然変異体についての選択上記pyr4遺伝子は、オロチジン−５′−モノホスフェート・デカルボキシラーゼ、ウリジンの生合成に必要な酵素をコードする。毒性阻害剤５− フルオロオロチン酸 (FOA)は、野生型細胞によりウリジンに取り込まれ、そしてそれ故それらの細胞に毒性である。しかしながら、pvr4遺伝子内に欠陥がある細胞は、この阻害剤に抵抗性であるが、成長のためにウリジンが必要である。それ故、FOA を用いてpyr4突然変異体株について選択することができる。実際に、トリコデルマ・ロンジブラチアタム株RL-P37（Sheir-Neiss G-and Montenecourt， B．S.，1984，Appl．Microbiol．Biotechnol．20： 46-53）の胞子を、２mg／ml のウリジンと 1.2mg／mlのFOA を含む固化培地の表面上に拡げた。自生FOA-耐性コロニーが３〜４日以内に現れ、そしてその後に、成長のためにウリジンを必要とするようなFOA-耐性突然変異体を同定することができた。欠陥pyr4遺伝子を特別にもっていた突然変異体を同定するために、プロトプラストを作り、そして野生型pyr4遺伝子を含むプラスミドにより形質転換させた（実施例３と４を参照のこと。）。形質転換後、プロトブラストをウリジンを欠いた培地上にプレートした。形質転換されたコロニーのその後の成長は、プラスミド担持pyr4遺伝子による欠陥pyr4遺伝子の相補を立証した。実施例２ CBHＩ欠失ベクターの調製 CBHＩタンパク質をコードするcbh1遺伝子を、公知のプローブ合成法 (Shoema ker et al.，“Molecular Cloning of Exo-cellobiohydrolase I Derived from Trichoderma longibrachitatum strain L27 ”，Bio/Technology １，p．691 ( 1983))を用いてこの遺伝子のための公開された配列に基づいてデザインされたオリゴヌクレオチド・プローブによるハイブリダイゼーションにより株RL-P37を使用してゲノムDNA からクローン化した。このcbh1遺伝子は 6.5kb P st Ｉ断片上にあり、そして（Pharmacia Inc.，Piscataway，NJから購入した） p st Ｉ切断pUC4K 内に挿入してこのベクターの Kan^r 遺伝子を置換した。得られたプラスミド、pUC4K :: cbhＩを次にHindIIIにより切断し、そして約６kbのより大きな断片を単離し、そしてライゲートしてpUC4K :: cbhＩΔＨ／Ｈを得た。この手順は、cbh1コード配列の全体及びその元の PstＩ断片のいずれかの側からのフランキングDNA の約 1.2kb上流及び 1.5kb下流を除去する。トリコデルマ・ロンジブラチアタムpyr4遺伝子を、Sambrook et al.，1989,“ Molecular Cloning，A Laboratory Manual”，２^nd Ed.，Cold Spring Harbor L aboratory Press の方法に従ってpUC18 内のゲノムDNA の 6.5kb断片としてクローン化した。プラスミドpUC4K :: cbhＩΔＨ／ＨをHindIIIにより切断し、そしてその両端をウシ腸アルカリ性ホスファターゼにより脱リン酸化した。この末端が脱リン酸化されたDNA をトリコデルマ・ロンジブラチアタムpyr4遺伝子を含む 6.5kbのHindIII断片とライゲートしてｐΔ CBHＩpyr4を得た。図１を参照のこと。実施例３プロトプラストの単離菌糸体を、 500mlフラスコ内の 100mlのYEG (0.5％酵母エキス、２％グルコース) を約５×10⁷ のトリコデルマ・ロンジブラチアタムGC胞子（pyr4突然変異体株）により接種することにより得た。次にこのフラスコを37℃において振とうしながら約16時間インキュベートした。菌糸体を 2,750xgにおける遠心分離により収穫した。収穫された菌糸体をさらに 1.2Ｍソルビトール溶液中で洗浄し、そして５mg／ml Novozym^R 234；５mg／ml MgSO₄・７H₂O； 0.5mｇ／mlウシ血清アルブミン； 1.2Ｍソルビトールを含む40mlの Novozym^R 234 溶液（これは、Novo B iolabs，Danbury ct．からの、１，３− アルファーグルカナーゼ、１，３−ベーターグルカナーゼ、ラミナリナーゼ、キシラナーゼ、キチナーゼ及びプロテアーゼを含む多成分酵素系のための商品名である。）中に再懸濁させた。プロトプラストを、Miracloth (Calbiochem．Corp) を通しての濾過により細胞死骸から取り出し、そして 2,000xgにおける遠心分離により採取した。このプロトプラストを 1.2Ｍソルビトール中で３回、そして 1 .2Ｍソルビトール、50mM CaCl₂中で１回洗浄し、遠心分離し、そして再懸濁させた。プロトプラストを最終的に、 1.2Ｍソルビトール、50mM CaCl₂の１ml当り２ ×10⁸ プロトプラストの密度において再懸濁させた。実施例４真菌プロトプラストの形質転換実施例３において調製した 200μｌのプロトブラスト懸濁液を、TEバッファー (10mn Tris，pH7.4；１mM EDTA)中の（実施例２において調製した） EcoＲＩ消化ｐΔ CBHＩpyr4の20μｌ、及び25％ PEG 4000，0.6Ｍ KCl及び50mM CaCl₂を含むポリエチレン・グリコール (PEG)溶液50μｌに添加した。この混合物を氷上で 20分間インキュベートした。このインキュベーション期間の後、20mlの上記同定 PEG 溶液をそれに添加し、その溶液をさらに混合し、そして室温において５分間インキュベートした。この第二のインキュベーションの後、 1.2Ｍソルビトールと50mM CaCl₂を含む 4.0mlの溶液をそれに添加し、そしてこの溶液をさらに混合した。このプロトプラスト溶液を次に追加の１％グルコース、 1.2Ｍソルビトール及び１％アガロースを含むVogel's Medium N (リッター当り、３グラムのクエン酸ナトリウム、５グラムのKH₂PO₄、２グラムのNH₄NO₃， 0.2グラムの MgSO₄・７H₂O，0.1グラムの CaCl₂・２H₂O，５μｇのα−ビオチン、５mgのクエン酸、５mgの ZnSO₄・７H₂O，１mgのFe(NH₄)₂ ・６H₂O， 0.25mgの CnSO₄・５H₂O， 50μｇの MnSO₄・４H₂O)の溶けたアリコートに直ちに添加した。プロトプラスト／培地混合物を次に上記と同一のVogel's 培地を含む固体培地上に注いだ。ウリジンはその培地中に全く存在せず、そしてそれ故、形質転換されたコロニーだけが、ｐΔ CBHＩpyr4中に存在する野生型py r4 遺伝子による株GC69のpyr4突然変異体の相補の結果として成長することができた。これらのコロニーはその後、添加物として１％グルコースを含む固体Vogel' s 培地Ｎ上に、移され、そして安定した形質転換体が精製された。実施例５形質転換体の分析 DNA を、実施例３において得られた形質転換体からそれらが１％グルコースを含む液体Vogel's 培地Ｎ中で増殖された後に単離した。これらの形質転換体DNA サンプルをさらに PstＩ制限酵素により切断し、そしてアガロース・ゲル電気泳動に供した。このゲルを次にさらにNytran膜フィルター上にブロットし、そして³² ＰラベルされたｐΔ CBHＩpyr4プローブとハイブリダイズさせた。このプローブは、 6.5kb pstＩ断片としての生来のcbh1遺伝子、生来のpyr4遺伝子、及び形質転換性DNA 断片から誘導されたいずれかのDNA 配列を同定するように選ばれた。図２は、トリコデルマ・ロンジブラチアタム染色体の中の１上のcbh1座におけるｐΔ CBHＩpyr4からのより大きな EcoＲＩ断片の組み込みによるトリコデルマ・ロンジブラチアタムcbh1遺伝子の欠失を概説する。上記ハイブリダイゼーションからのバンドをオートラジオグラフィーを介して可視化した。オートラジオグラフの結果を図３中に示す。５つのサンプルを上記のように走らせた、よってサンプルＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ、及びＥ。レーンＥは、非形質転換株GC69であり、そして本分析において対照として使用した。レーンＡ−Ｄは、上記の方法から得られた形質転換体を表す。オートラジオグラフの側上の数は、分子量マーカーのサイズを表す。このオートラジオグラフから分かるように、レーンＤは 6.5kb CBHＩバンドを含まず、このことは、この遺伝子がその形質転換体内で完全に欠失していたことを示している。このcbh1欠失株を、p37PΔ CBHＩという。分析された他の形質転換体は、非形質転換対照株と同じようである。ｐΔ CBHＩpyr4からの線状断片が生来のpyr4座における２重交差により組み込まれて遺伝子置換事件を与えたために、これが生じたと推定される。実施例６実施例５におけるものと同一の手順を本実施例において使用した。但し、使用したプローブを、³²ＰラベルされたpInt CBHＩプローブに変更した。このプローブは、pUC4 :: cbh1ΔＨ／Ｈ内で欠失された領域内にcbh1座からの２kb BglII断片を含むpUC-型プラスミドである。対照サンプルＡであって非形質転換株GC69であるもの及び形質転換体P37PΔ CBHＩ、サンプルＢを含む２つのサンプルを本実施例において走らせた。図４から分かるように、 6.5kbにおけるバンドにより示されるように、サンプルＡはcbh1遺伝子を含むが；形質転換体、サンプルＢはこの 6.5kbバンドを含まず、そしてそれ故cbh1遺伝子を含まない。実施例７株P37PΔ CBHＩによるタンパク質分泌作出されたP37PΔ CBHＩ株からの胞子を、１％グルコース、0.14％ (NH₄)₂SO₄ ， 0.2％ KH₂PO₄， 0.03％ MgSO₄，0.03％尿素、0.75％バクトトリプトン、0.05 ％ Tween 80， 0.000016％ CuSO₄・５H₂O，0.001％ FeSO₄・７H₂O， 0.000128％ ZnSO₄・７H₂O，0.0000054 ％ Na₂MoO₄・２H₂O，0.0000007％ MnCl・４H₂O を含むトリコデルマ (Trichode rma) 基本培地50mlに接種した。この培地を振とうしながら37℃において48時間 2 50mlフラスコ内でインキュベートした。得られた菌糸体をMiracloth（Calbio ch em Corp.）を通しての濾過により採取し、そして17mMリン酸カリウムにより２又は３回洗浄した。この菌糸体を、１mMソフォロースを含む17mMリン酸カリウム中に最終的に懸濁させ、そしてさらに振とうしながら30℃において24時間インキュベートした。次にこの上清をこれらの培養物から集め、そしてその菌糸体を廃棄した。この培養上清のサンプルを、製造者の指示に従って、Pharmacia Phastgel システム及びpH３〜９プレキャスト・ゲルを使用して等電点フォーカシングにより分析した。このゲルを銀ステインにより着色して、そのタンパク質バンドを可視化した。cbh1タンパク質に対応するバンドは図５に示されるように、株P37PΔ CBHＩから誘導されたサンプルからは非存在であった。この等電点フォーカシング・ゲルは、トリコデルマ・ロンジブラチアタムの異なる上清カルチャー中にさまざまなタンパク質を示している。レーンＡは、部分的に精製された CBHＩであり；レーンＢは非形質転換トリコデルマ・ロンジブラチアタムからの上清であり；レーンＣは本本発に係る方法に従って作出されたcbh1遺伝子について欠失された株からの上清である。さまざまなセルラーゼ成分の位置が標識付けされている。 CBHＩは全細胞外タンパク質の約50％を構成するので、それは主要な分泌タンパク質であり、そしてそれ故そのゲル上の最も暗いバンドである。この等電点フォーカシング・ゲルは、cbh1について欠失された株内の CBHＩタンパク質の消失をはっきりと示している。実施例８ pPΔ CBHIIの調製 CBHIIタンパク質をコードするT．longibrachiatumのcbh2遺伝子はゲノムDNA の 4.1kb EcoＲＩとしてクローン化されており、これを図６中にダイアグラムとして示す（Chen et al.，1987 Biotechnology，５：274-278）。本分野において公知の方法を使用して、プラスミド、pPΔ CBHII（図6B）が構築されており、この内で、 ( CBHII翻訳開始部位の74bp３′における)HindIII部位と(CBHIIの最終コドンの 265bp３′における) ClaＩ部位との間のこのクローンの 3.2kbの中央領域がトリコデルマ・ロンジブラチアタム（Trichoderma longibrachiatum）pyr 4 遺伝子により除去され、そして置換されている。 EcoＲＩによるこのプラスミドの消化は、１端におけるcbh2座から 0.7kbのフランキングDNA をもつ断片、その他端においてcbh2座から 1.7kbのフランキング DNA 、そしてその中央においてトリコデルマ・ロンジブラチアタムpyr4遺伝子を解放するであろう。実施例９ P37PΔ CBHＩのpyr4^- 突然変異体の生成 cbh1遺伝子について欠失された形質転換体（P37PΔ CBHＩ）の胞子をFOA を含む培地上に拡げた。この形質転換体のpyr4 ^- 誘導体をその後実施例１の方法を使用して得た。このpyr4 ^- 株をP37PΔ CBHＩ Pyr^- 26 と命名した。実施例10 cbh1について先に欠失された株内のcbh2遺伝子の欠失株P37PΔ CBHＩ Pyr^- 26のプロトプラストを、実施例３と４に概説した方法に従って生成し、そして EcoＲＩ消化pPΔ CBHIIにより形質転換した。精製され安定した形質転換体を実施例７におけるように振とうフラスコ内で培養し、そしてその培養上清中のタンパク質を等電点フォーカシングにより検査した。１の形質転換体（P37PΔΔ CBH67と命名されたもの）であっていずれの CBHIIタンパク質を生産しなかったものを同定した。図５のレーンＤは、本発明に係る方法に従って作出されたcbh1とcbh2遺伝子の両方について欠失された株からの上清を示す。 DNA を、株P37PΔΔ CBH67から抽出し、 EcoＲＩと Asp718 により消化し、そしてアガロース・ゲル電気泳動に供した。このゲルからのDNA を、膜フィルターにブロットし、そして³²ＰラベルされたpPΔ CBHIIとハイブリダイズした（図７）。図７のレーンＡは、非形質転換トリコデルマ・ロンジブラチアタム株からの DNA について観察されたハイブリダイゼーション・パターンを示す。野生型cbh2 遺伝子を含む 4.1kbの EcoＲＩ断片を観察した。レーンＢは、株P37PΔΔ CBH67 について観察されたハイブリダイゼーション・パターンを示す。単一の 4.1kbバンドが取り除かれ、そして約 0.9と 3.1kbの２つのバンドにより置換された。これは、pPΔ CBHIIからの EcoＲＩ断片の単一コピーがcbh2座に正確に組み込まれている場合に予想されるパターンである。同一DNA サンプルを EcoＲＩによっても消化し、そしてサザン分析を上述のように行った。本実施例においては、プローブは³²ＰラベルされたpInt CBHIIであった。このプラスミドは、プラスミドpPΔ CBHII内で欠失されたcbh2 DNAのセグメント内からのcbh2遺伝子コード配列の一部を含む。株P37PΔΔ CBH67からのDN A とのハイブリダイゼーションは全く見られず、これは、このcbh2遺伝子が欠失されており、そして上記pUC プラスミドから誘導された配列はこの株内に全く存在しなかったことを示している。実施例11 pEGＩpyr4の構築 EGＩをコードするトリコデルマ・ロンジブラチアタム eglＩ遺伝子は、公開された配列に従って合成されたオリゴヌクレオチドとのハイブリダイゼーションにより株RL-P37からのゲノムDNA の 4.2kb HindIII断片としてクローン化されている（Penttila et al.，1986，Gene 45： 253-263）。 3.6kbのHindIII− Bam ＨＩ断片をこのクローンから取り出し、そしてトリコデルマ・ロンジブラチアタムpyr4遺伝子を含む 1.6kbのHindIII− BamＨＩとHindIIIにより切断されたpUC- ベースのプラスミドとライゲートしてプラスミド pEGＩpyr4を得た（図８）。Hi nd IIIによる pEGＩpyr4の消化は、トリコデルマ・ロンジブラチアタムのゲノムD NA(egl1とpyr4遺伝子）だけを含むDNA の断片を解放するであろう。但し、これらの２つの遺伝子間の24塩基対の配列決定された合成DNA 及び１端における６塩基対の配列決定された合成DNA を除く（図８参照）。実施例12 pEGＩpyr4を含むトリコデルマ・ロンジブラチアタムの形質転換体トリコデルマ・ロンジブラチアタム株RutC30 (Sheir-Neiss and Montenecourt ，1984，Appl．Microbiol．Biotechnol．20： 46-53)のpyr4欠陥突然変異体を実施例１に概説した方法により得た。この株のプロトプラストを非消化 pEGＩpyr4 により形質転換し、そして安定した形質転換休を精製した。（EP２，EP４，EP５，EP６，EP11と命名された）これらの形質転換体の中の５、ならびに非形質転換 RutC30を、 250ml振とうフラスコ内の50mlとのEG培地（酵母エキス、５ｇ／ｌ；グルコース、20ｇ／ｌ）中に接種し、そして振とうしながら28℃において２日間培養した。得られた菌糸体を滅菌水により洗浄し、そして50mlのTSF 培地 (0.05 Ｍクエン酸塩−リン酸塩バッファー、pH5.0； Avicel微晶性セルロース、10ｇ／ｌ；KH₂PO₄， 2.0ｇ／ｌ； (NH₄)₂SO₄， 1.4ｇ／ｌ；プロテロース・ペプトン、 1.0ｇ／ｌ；尿素、 0.3ｇ／ｌ； MgSO₄・７H₂O，0.3ｇ／ｌ；CaCl₂，0.3ｇ／ｌ； FeSO₄・７ H₂O，5.0mg／ｌ； MnSO₄・H₂O，1.6mg／ｌ；ZnSO₄，1.4mg／ｌ；CoCl₂，2.0mg／ｌ； 0.1％ Tween 80)に添加した。これらのカルチャーを28℃においてさらに４日間振とうしながらインキュベートした。上清のサンプルをこれらのカルチャーから採取し、そしてタンパク質の全量及びエンドグルカナーゼの全量を計測するためにデザインされた検定を以下に記載するように行った。このエンドグルカナーゼ検定は、Remazol Brilliant Blue−カルボキシメチルセルラーゼ (Mega Zyme，North Rocks，NSW，Australiaから得られたRBB-CMC)からの可溶性の、染色されたオリゴ糖の放出に依るものであった。基質を、激しく撹拌しながら２ｇの乾燥RBB-CMC を80mlの沸騰したての脱イオン水に添加することにより調製した。室温まで冷却したとき、５mlの２Ｍ酢酸ナトリウム・バッファー (pH4.8)を添加し、そしてそのpHを 4.5に調整した。その容量を最終的に脱イオン水により 100mlに調整し、そしてアジ化ナトリウムを0.02％の最終濃度に添加した。トリコデルマ・ロンジブラチアタムの培養上清のアリコート又はブランクとしての 0.1Ｍ酢酸ナトリウム（10〜20μｌ）を管内に入れ、 250μｌの基質を添加し、そしてそれらの管を37℃において30分間インキュベートした。これらの管を氷上に10分間置き、そして１mlの冷沈澱剤(3.3％酢酸ナトリウム、 0.4 ％酢酸亜鉛、HCl によるpH５，76％エタノール) を次に添加した。これらの管を撹拌し、そして約13,000xgにおいて３分間の遠心分離前５分間静置さした。吸光度を 590-600nmの波長において分光光度計により測定した。使用したタンパク質検定はPierce，Rockford，Illinois，USA から得た試薬を用いたBCA(ビシンコニン酸) 検定であった。標準はウシ血清アルブミン (BSA)であった。BCA 試薬を、１部の試薬Ｂと50部の試薬Ａとを混合することにより調製した。１mlのBCA 試薬を、50μｌの、適当に希釈されたBSA 又はトリコデルマ・ロンジブラチアタム培養上清と混合した。インキュベーションは37 ℃30分間であり、そして吸光度を最終的に、 562nmの波長において分光光度計により測定した。上記の検定の結果を表１中に示す。形質転換体のいくつかは、非形質転換株Ru tC30に比べて増加量のエンドグルカナーゼ活性を作り出したことは明らかである。非形質転換トリコデルマ・ロンジブラチアタムにより生産されたエンドグルカナーゼ又はエクソ−セロビオヒドロラーゼは、分泌されたタンパク質の全量のそれぞれ約20％と70％を占める。それ故、形質転換体、例えばEP５であって、株Ru tc30よりも約４倍多くのエンドグルカナーゼを生産するものは、ほとんど等量のエンドグルカナーゼ型とエクソ−セロビオヒドロラーゼ型タンパク質を分泌すると予想されるであろう。本実施例中に記載する形質転換体は、悪傷の pEGＩpyr4を使用して得られ、そしてpUC プラスミドから誘導されたゲノム内に組み込まれたDNA 配列を含むであろう。形質転換に先立って、HindIIIにより pEGＩpyr4を消化し、そしてトリコデルマ・ロンジブラチアタムDNA だけを含むより大きなDNA 断片を単離することができるであろう。この単離されたDNA 断片によるトリコデルマ・ロンジブラチアタムの形質転換は、図８中に示す合成DNA の２つの短い片を除き外因性DNA 配列を全く含まず、そしてEGＩを過剰生産する形質転換体の単離を許容するであろう。cbh1遺伝子又はcbh2遺伝子のいずれか、あるいは両方の遺伝子について欠失された株を形質転換するために pEGＩpyr4を使用することもできるであろう。この方法で、EGＩを過剰生産し、そしてエクソ−セロビオヒドロラーゼの限定されたレンジを生産するか又は全く生産するかのいずれかであろう株を構築することができた。実施例12の方法は、トリコデルマ・ロンジブラチアタム（T．longibrachiatum ）により正常に生産される他のエンドグルカナーゼのいずれかを過剰生産するであろうトリコデルマ・ロンジブラチアタムを作出するために使用されることができた。上記結果は、EGＩ成分の過剰生産を立証する目的をもって、そして過剰生産の程度の目的をもたずに、提示される。これに関して、過剰生産の程度は、各実験により変動すると予想される。実施例13は、精製手順を介してのCytolase 123セルラーゼ（リコデルマ・ロンジブラチアタム（richoderma longibrachiatum）から得られ、そしてGenencor I nternational，Inc.，South San Francisco，CA から入手可能な完全真菌セルラーゼ組成物）の成分の単離について立証する。実施例13 Cytolase 123 Cellulaseの、セルラーゼ成分への精製 CYTOLASE 123セルラーゼを以下のやり方で分画した。このセルラーゼ系におけるセルラーゼ成分の正常分布は以下のようなものである： CBHＩ 45−55重量パーセント CBHII 13−15重量パーセント EG Ｉ 11−13重量パーセント EG II 8−10重量パーセント EG III 1−4 重量パーセント BG 0.5−1 重量パーセント分画を以下の樹脂を含むカラムを使用して行った：Sigma Chemical Company C st．Louis，Mo)からのSephadex G-25 ゲル濾過樹脂、IBF Bio technics（Savage ，Md）からのQA Trisacryl Mアニオン交換樹脂及びSP Triacryl M カチオン交換樹脂。CYTOLASE 123セルラーゼ、 0.5ｇを、pH6.8 における10mMリン酸ナトリウム・バッファーにより３リッターのSephadex G-25 ゲル濾過樹脂のカラムを使用して脱塩した。この脱塩溶液を次に20mlのQA Trisacryl Mアニオン交換樹脂のカラム上にロードした。このカラムに結合された画分は CBHＩとEGＩを含んでいた。これらの成分を０〜約 500mMの塩化ナトリウムを含む水性グラジエントを用いたグラジエント溶出により分離した。このカラムに結合されなかった画分は CBH IIとEGIIを含んでいた。これらの画分を、10mMクエン酸ナトリウム、pH3.3 により平衡化したSephadex G-25 ゲル濾過樹脂のカラムを用いて脱塩した。この溶液 200mlを次に20mlのSP Trisacryl Mカチオン交換樹脂上にロードした。 CBHIIと EGIIを、０〜約 200mM塩化ナトリウムを含む水性グラジエントを用いて別々に溶出した。先の実施例13の手順と同様の手順に従えば、それらの成分に分離されることができる他のセルラーゼ系は、（Novo Industry，Copenhagen，Demma rkから入手可能な）CELLVCAST，(Gist Brocades，N．V.，Delft，Hollandから入手可能な) PAPIDASE、及びトリコデルマ・コニンジ（Trichoderma koningii）、ペニシラム・エスピー（Penicillum sp.）、等から誘導されたセルラーゼ系を含む。実施例14 Cytolase 123 CellulaseからのEGIIIの精製上記実施例13は、Cytolase 123 Cellulaseからのいくつかの成分の単離について立証する。しかしながら、EGIIIは、Cytolase 123 Cellulase中、ひじょうに少量で存在するので、以下の手順を、この成分を単離するために使用した。Ａ．EGIIIセルラーゼ酵素の大規模抽出 100ｌの無細胞セルラーゼ濾液を約30℃に加熱した。加熱材料を約４wt／vol ％のPEG 8000（ポリエチレン・グリコール、約8000の分子量）と約10wt／vol ％の無水硫酸ナトリウムにより調製した。この混合物は２相液体混合物を形成した。これらの相を銀染等電点フォーカシング・ゲルを用いて分析した。分離物を、 EGIIIとキシラナーゼについて得た。回収された組成物は、約20〜50重量パーセントのEGIIIを含んでいた。上記手順に関して、約8000末端の分子量をもつポリエチレン・グリコールの使用は適当な分離を与える；一方、約8000を超える分子量をもつポリエチレン・グリコールの使用は、その回収された組成物中の所望の酵素の排除をもたらした。硫酸ナトリウムの量に関しては、約10wt／vol ％を超える硫酸ナトリウムのレベルは沈澱問題を引き起こし；一方、約10wt／vol ％未満の硫酸ナトリウム・レベルは貧弱な分離又は単一相において残る溶液を与えた。Ｂ．分画を介してのEGIIIの精製 EGIIIの精製を、野生型トリコデルマ・ロンジブラチアタムにより生産された完全真菌セルラーゼ組成物（Genencor Internatponal，South San Francisco，C A から商業的に入手可能なCYTOLASE 123セルラーゼ）からの分画により行った。特に、この分画を、以下の樹脂を含むカラムを使用して行う：Sigma Chemical C ompany (St．Louis，Mo)からのSephadex G-25 ゲル濾過樹脂、IBF Biotechnics (Savage，Md)からのQA Trisacryl Mアニオン交換樹脂及びSP Trisacryl Mカチオン交換樹脂。CYTOLASE 123セルラーゼ、 0.5ｇを、pH6.8 における10mMリン酸ナトリウム・バッファーにより３リッターのSephadex G-25 ゲル濾過樹脂のカラムを使用して脱塩した。この脱塩溶液を次に20mlのQA Trisacryl Mアニオン交換樹脂のカラム上にロードした。このカラムに結合された画分は CBHＩとEGＩを含んでいた。このカラムに結合されなかった画分は CBHII，EGII及びEGIIIを含む。これらの画分を、10mMクエン酸ナトリウム、pH4.5 により平衡化したSephadex G -25 ゲル濾過樹脂のカラムを用いて脱塩した。この溶液 200mlを次に20mlのSP T risacryl Mカチオン交換樹脂上にロードした。EGIIIを、 200mM塩化ナトリウムの水性溶液 100mLにより溶出した。 EGIIIの単離の効率を強化するために、１以上のEGＩ，EGII， CBHＩ及び／又は CBHIIを生産することができないように遺伝子修飾されたトリコデルマ・ロンジブラチアタムを使用することが望ましくあることができる。１以上のこのような成分の非存在は、EGIIIのより効率的な単離を必ず導くであろう。同様に、上記のEGIII組成物がさらに精製されて実質的に純粋なEGIII組成物、すなわち約80重量パーセントのタンパク質を上廻るEGIIIを含む組成物、を提供することが望ましくあることができる。例えば、このように実質的に純粋なEGII Iタンパク質は、手順Ｂにおいて手順Ａから得られた材料を使用して、又はこれと逆の操作により、得られることができる。EGIIIをさらに精製するためのＩの特定の方法は、本実施例14のパートｂ）において得られたEGIIIサンプルのさらなる分画による。このさらなる分画は、（Pharmacia LKB Biotechnology，Piscataway，NJ から入手可能な）Mono -S-HR ５／５カラムを用いてFPLCシステム上で行われた。このFPLCシステムは、液体クロマトグラフィー・コントローラー、２つのポンプ、２経路モニター、分画コレクター、及びチャート・レコーダー（これらの全ては、Pharmacia LKB Bi otechnology, Piscataway，NJ から入手可能である。）から成る。この分画を、 10mMクエン酸ナトリウムpH４により先に平衡化された20ml Sephadex G-25カラムによる本実施例14のパートｂ）において調製された５mlのEGIIIを脱塩することにより行った。このカラムを、次に、 0.5ml／分の速度でNaClの０〜200mM の水性グラジエントにより溶出し、サンプルを１ml画分において集めた。EGIIIは画分10と11内に回収され、そしてSDS ゲル電気泳動により90％よりも高い純度であると測定された。この純度のEGIIIは、公知技術によるＮ−末端アミノ酸配列の決定に好適である。実質的に純粋なEGIII並びに先の実施例13において精製されたEGＩとEGII成分を、本発明に係る方法において単独で又は混合において使用することができる。これらのEG成分は、以下の特徴をもつ：１．以下の実施例15に従ってRBB-CMC 活性により測定された最適pH 本発明の実施におけるこれらの成分の混合物の使用は、単一成分に比較して、柔らかさ、感触、外観等の改善において協力的な応答を与えることができる。他方において、本発明の実施における単一成分の使用は、pH_s のレンジにわたるより広い活性スペクトルをもち又はより安定であることができる。例えば、以下の実施例15は、EGIIIはアルカリ性条件下でRBB-CMC に対してかなりの活性をもつことを示している。実施例15 pHレンジにわたるセルラーゼ組成物の活性以下の手順を２つの異なるセルラーゼ組成物のpH特性を測定するために使用した。第一のセルラーゼ組成物は、 CBHＩと CBHII成分を生産することができないように先に記載したものと同様のやり方で遺伝子修飾されたトリコデルマ・ロンジブラチアタムから調製された CBHＩとII欠失セルラーゼ組成物であった。このセルラーゼ組成物が、トリコデルマ・ロンジブラチアタムから誘導されたセルラーゼ組成物の約58〜70パーセントを一般的に占める CBHＩと CBHIIを含まない限り、このセルラーゼ組成物は、必ず CBHＩ型と CBHII型セルラーゼ成分を実質的に含まず、そしてそれ故EG成分、すなわちEGＩ，EGII，EGIII、等に富む。第二セルラーゼ組成物は、実施例14のパートｂ）と同様の精製方法を介してトリコデルマ・ロンジブラチアタムから誘導されたセルラーゼ組成物から単離されたEGIIIの約20〜40％純度の画分であった。これらのセルラーゼ組成物の活性を40℃において測定し、そしてそれらの測定を以下の手順を使用して行った。最終溶液中の必要量の酵素を提供するのに十分な濃度において５〜20μｌの適当な酵素溶液を添加する。pH４，５，5.5 ，６，6.5 ，７，7.5 及び８において 0.05Ｍクエン酸塩／リン酸塩バッファー中２重量パーセントのRBB-CMC（Mega Zyme，６ Altona Place，North Rocks，N ．S．W．2151，Australiaから商業的に入手可能なRemazol Brilliant Blue R-Ca rboxymethyl cellulose） 250μｌを添加する。撹拌し、そして40℃において30分間インキュベートする。 0.3Ｍ酢酸ナトリウムと0.02Ｍ酢酸亜鉛を含むメチル・セロソルブ1000μｌを添加する。遠心分離し、そしてキュベットに上清を注ぐ。 590nmにおいて各キュベット内の溶液の吸光度（0D）を測定する。より高いレベルの吸光度はより高いレベルの酵素活性に対応する。この分析の結果を図９中に記す。図９は、EGIIIセルラーゼ組成物に比較した CBHＩとII欠失セルラーゼ組成物の比活性を示している。この図から、 CBHＩと CBHIIにおいて欠失されたセルラーゼ組成物がpH5.5 付近にRBB-CMC に対する最適セルロース分解活性を有し、そしてアルカリ性pH、すなわち７超〜８のpHにおいていくらかの活性をもつことが分かる。他方において、EGIIIに富んだセルラーゼ組成物は、 pH5.5〜６において最適セルロース分解活性を有し、そしてアルカリ性pHにおいてかなりの活性を有している。上記の例から、当業者は、そのセルラーゼ組成物が活性であり、そして好ましくは最適活性を有するように、その水性繊維組成物のpHを調節し、そして維持するであろう。上述のように、このような調節及び維持は、好適なバッファーの使用を含むことができる。実施例16 セルラーゼ組成物の洗濯計強度損失検定本実施例は、綿含有布の強度を減少させる、さまざまなセルラーゼ組成物の能力について検査する。本実施例は、pH５に維持された水性セルラーゼ溶液を使用する。なぜならトリコデルマ・ロンジブラチアタムから誘導されたセルラーゼ成分のほとんどの活性がpH５において又はその付近で最大であり、そしてそれ故強度損失結果が、本検定がこのpH付近で行われるときに、最も明確であるであろうからである。特に、本実施例においては、分析された第一セルラーゼ組成物は、野生型トリコデルマ・ロンジブラチアタムにより生産された完全真菌セルラーゼ系（Genenc or Iuternational，South San Francisco，CA から商業的に入手可能なCYTOLASE 123セルラーゼ）であり、そしてGC 010と同定される。分析された第二セルラーゼ組成物は、 CBHIIを発現することができないように先の実施例１〜12と同様のやり方で遺伝子修飾されたトリコデルマ・ロンジブラチアタムから生産された CBHII欠失セルラーゼ組成物であり、そして CBHIIｄと同定される。 CBHIIがそのセルラーゼ組成物の約15パーセントまでを占める限り、この成分の欠失は、 CBHＩ、及びEG成分の全てのの強化されたレベルをもたらす。分析された第三のセルラーゼ組成物は、 CBHＩと CBHIIを発現することができないように先に記載したものと同様のやり方で遺伝子修飾されたトリコデルマ・ロンジブラチアタムから生産された CBHＩと CBHII欠失セルラーゼ組成物であり、 CBHＩ／IIｄと同定される。 CBHＩと CBHIIがこの修飾された微生物により生産されない限り、セルラーゼは、必ず、 CBHＩ型成分の全て並びにCBH 成分の全てを含まない。分析された最後のセルラーゼ組成物は、 CBHＩを発現することができないように先に記載したものと同様のやり方で遺伝子修飾されたトリコデルマ・ロンジブラチアタムから生産された CBHＩ欠失セルラーゼ組成物であり、そして CBHＩｄと同定される。この修飾された微生物が CBHＩを発現することができない限り、このセルラーゼ組成物は、必然的に CBHＩ型セルラーゼ成分の全てを含まない。上記のセルラーゼ組成物を洗濯計 (launderometer)内で綿含有布強度損失に対するそれらの効果についてテストした。これらの組成物を、最初に、等量のEG成分が使用されるように規定した。各セルラーゼ組成物を次に、pH５に滴定された 20mMクエン酸塩／リン酸塩バッファーの 400mlの別々の溶液に添加し、そしてこれは 0.5mlの非イオン界面活性剤を含んでいる。得られた溶液のそれぞれを、次に別個の洗濯計キャニスターに添加した。これらのキャニスター内に、強度損失を容易にするための多量の小石 (narbles)並びに16インチ×20インチの綿布（Te st Fabrics，Inc.，200 Blackford Ave.，Middlesex，NJ 08846 からStyle No． 467 として入手可能な、 100％識綿）を添加した。このキャニスターに次に蓋をし、そしてこのキャニスターを、43℃において維持された洗濯計浴内に降下させた。次にこのキャニスターを、約１時間、少なくとも約40の１分間当りの回転数（rpms）の速度においてその浴内で回転させた。その後、布を取り出し、十分に濯ぎ、そして標準的なドライヤー内で乾燥させた。強度損失結果を最大化するために、上記の手順を２回以上繰り返し、そして３回目の処理後、その綿布を取り出し、そして強度損失について分析した。強度損失を、Instron Testerを使用してよこ糸方向における引っ張り強さ（“FTS ”）を測定することにより計測し、そしてその結果を、セルラーゼが添加されていないことを除き同一溶液により処理された布のFTS と比較した。この分析の結果を以下のように決定されるパーセント強度損失として報告する：この分析の結果を図10に記す、この図は、 CBHＩを含む組成物、すなわち全セルラーゼ（GC 010）と CBHII欠失セルラーゼは最高の強度損失を有し、一方、 CBHＩを全く含まない組成物は、全セルラーゼと CBHII欠失セルラーゼと比べて有意に減少された強度損失を有していたことを示している。これらの結果から、セルラーゼ組成物中の CBHＩ型成分の存在が、 CBHＩ型成分を含まない類似組成物に比較してその組成物に増加された強度損失を付与することが分かる。同様に、これらの結果は、 CBHIIが強度損失においていくらかの役割を演じていることを示している。従って、これらの結果の視点において、強度損失抵抗性セルラーゼ組成物は、 CBHＩ型セルラーゼ成分の全て、そして好ましくは、CBH 型セルラーゼ成分の全てを含まないような組成物である。これに関して、このようなセルラーゼ組成物は、図10中に示すpH５において観察されるような結果よりもpH≧７においてより低い強度損失をもたらすであろうことが企図される。綿含有布の製造の間、布は応力を加えられることができ、そしてそのように応力が加えられたとき、それは破壊され、が、無秩序な繊維を含むであろう。このような繊維は、その布に、すりきれて曇った外観（worn and dull appearance）を劇的に付与する。しかしながら、本発明に係る方法は、布／色強化をもたらすであろうことが発見されている。これは、応力を加えられるようになる前の布の外観を回復する効果をもつ破壊され無秩序な繊維のいくつかの除去により生じると信じられている。以下の実施例17と18は、本発明のこの利点について説明する。これらの実施例はすりきれた綿Ｔ−シャツ（編物）並びに新たな綿編物を使用したことに注意のこと。このすりきれた綿含有布の色あせた外観は、一定時間にわたる、ゆるみ、そして壊れた表面繊維の布の蓄積から生じる。これらの繊維は、その布についての色あせ、そしてつやの消された（matted）外観を生じさせ、そしてそれ故、これらの繊維の除去は、その布に元のきれいな色を回復させるのに必要な先行条件である。従って、新たな綿編物上の破壊された表面繊維の蓄積はこのような布に曇った外観を付与する。従って、これらの実験は、必然的に、応力の加わった綿含有布の色強化に利用可能である。なぜなら、両方が布からの表面繊維の除去に関係するからである。実施例17 色強化綿含有布において色を強化する、EG成分の能力を、以下の実験において分析した。特に第一の実験は、さまざまなpHにわたり綿含有布から表面繊維を除去するために野生型トリコデルマ・ロンジブラチアタムにより生産された完全セルラーゼ系（Genencor Iuternational，South San Francisco，CA から商業的に入手可能なCYTOLASE 123セルラーゼ）の能力を測定する。このセルラーゼを、洗濯計内で表面繊維を除去するその能力についてテストした。最終組成物中25ppm 又は10 0ppmのいずれかのセルラーゼを提供するのに適当な量のセルラーゼを、 0.5mlの非イオン界面活性剤を含む20mMのクエン酸塩／リン酸塩バッファー 400mlの別々の溶液に添加した。pH５，pH６，pH７及びpH7.5 においてサンプルを提供するようにサンプルを調製し、そして滴定した。得られた溶液のそれぞれを次に別々の洗濯計キャニスターに添加した。これらのキャニスター内に、繊維除去を容易にするための多量の小石並びに７インチ×５インチの綿布（Test Fabrics，Inc.， 200 Blackford Ave，Middlesex，NJ 08846からStyle No．439 W として入手可能な 100％織綿）を添加した。次にこのキャニスターに蓋をし、そしてこのキャニスターを43℃ に維持された洗濯計内に降下させた。次に、このキャニスターを、約１時間少なくとも約40回転／分（rpms）の速度においてその浴内で回転させた。その後、布を取り出し、十分に濯ぎ、そして標準的なドライヤー内で乾燥させた。そのように処理された布を次に、パネル・テストにおける評価により繊維除去 (fiber removal)について分析した。特に、これらの布（マークせず）を、６人の個体により繊維のレベルについて等級付けした。これらの布を、表面繊維について肉眼観察により評価し、そして０〜６等級に等級付けした。等級は、意義のある比較を可能にするために６つの標準をもつ。これらの標準は以下のようなものである。等級標準^a ０セルラーゼにより処理されない布１８ppm セルラーゼにより処理された布^b ２ 16ppm セルラーゼにより処理された布３ 20ppm セルラーゼにより処理された布４ 40ppm セルラーゼにより処理された布５ 50ppm セルラーゼにより処理された布６ 100ppmセルラーゼにより処理された布ａこれらの標準のすべてにおいて、布は、Test Fabrics，Inc.，200 Blackf ord Ave，Middlesex，NJ 08846から入手可能な 100％綿シート材料標準化テスト布 (Style No．439 W)であった。ｂ全サンプルを同一のセルラーゼ組成物により処理した。セルラーゼ濃度は全タンパク質におけるものである。洗濯計処理条件は先の実施例16中に述べたものと同じである。等級付けされるべき布は、上記標準の中の１に最も密に適合する等級を提供された。上記布の完全な分析の後、個体のすべてにより各布に指定された値を加算し、そして平均値を得た。これらの分析の結果を図11中に記す。特に、図11は、同一のpHにおいて、投与量依存性応答が除去された繊維の量において見られたことを示す。すなわち、同一のpHにおいては、より多くのセルラーゼにより処理された布は、より少ないセルラーゼにより処理された布に比べてより高いレベルの繊維除去を提供した。その上、この図の結果は、より高いpHにおいて、繊維除去が、未だ、より高濃度のセルラーゼを単に使用することにより行われることができるということを立証している。第二の実験において、２つの異なるセルラーゼ組成物を、繊維を除去する能力について比較した。特に、分析された第一セルラーゼ組成物は、野生型トリコデルマ・ロンジブラチアタムにより生産された完全セルラーゼ系（Genencor Iuter national，South San Francisco，CA から商業的に入手可能な、CYTOLASE 123セルラーゼ）であり、そしてGC 010と同定された。分析された第二のセルラーゼ組成物は、 CBHＩと CBHIIを発現することができないように先に記載されたものと同様なやり方で遺伝子修飾されたトリコデルマ・ロンジブラチアタムから生産され、(CBHＩ型成分を含む）CBH 型成分のすべてを実質的に含まないセルラーゼ組成物であり、そして CBHＩ／II欠失として同定される。 CBHＩと CBHIIがそのセルラーゼ組成物の約70パーセントまでを占める限り、この成分の欠失は、EG成分のすべての強化されたレベルをもたらす。この組成物を、洗濯計内で表面繊維を除去するそれらの能力についてテストした。最終組成物中必要濃度のEG成分を提供するのに適当な量のセルラーゼを、 0.5mlの非イオン界面活性剤を含む20mMのクエン酸塩／リン酸塩バッファー 400mlの別々の溶液に添加した。サンプルを調製し、そして滴定pH５にした。得られた溶液のそれぞれを次に別々の洗濯計キャニスターに添加した。これらのキャニスター内に、繊維除去を容易にするための多量の小石並びに７インチ×５インチの綿布（ Test Fabrics，Inc.，200 Blackford Ave，Middlesex，NJ 08846からStyle No． 439 W として入手可能な 100％織綿）を添加した。次にこのキャニスターに蓋をし、そしてこのキャニスターを43℃に維持された洗濯計内に降下させた。次に、このキャニスターを、約１時間少なくとも約40回転／分（rpms）の速度においてその浴内で回転させた。その後、布を取り出し、十分に濯ぎ、そして標準的なドライヤー内で乾燥させた。そのように処理された布を次に、先に記載したパネル・テストにおける評価により繊維除去 (fiber removal)について分析した。この分析の結果を、推定EG濃度上にプロットされる図12中に記載する。特に、図12は、GC 010と CBHＩ／II欠失セルラーゼ組成物の両方が、実質的に等しいエンドグルカナーゼ濃度において、実質的に同一の繊維除去結果を与えたことを示している。この図の結果は、繊維除去を提供するのがEG成分であることを示唆している。図11の結果と併せてこれらの結果は、EG成分が表面繊維を除去することを立証する。実施例18 Tergotometer色強化本実施例は実施例17に後続し、そしてCBH 型成分が色強化に必要ではないことを実証し、そして本実施例の目的が、綿含有布に対して色を強化する、CBH 型成分に欠陥のあるセルラーゼ組成物の能力を検査することである。特に、本実施例において使用されるセルラーゼ組成物は、 CBHＩと CBHIIを発現することができないように先に記載したものと同様のやり方で遺伝子修飾されたトリコデルマ・ロンジブラチアタムからこの組成物が生産される限り、(CBHＩ型成分を含む) CBH 型成分のすべてを実質的に含まない。 CBHＩと CBHIIがこのセルラーゼ組成物の約70パーセントまでを占める限り、この成分の欠失は、EG成分のすべての強化されたレベルをもたらす。検定を、500ppmのセルラーゼを提供するのに十分な濃度のこのセルラーゼ組成物を50mMクエン酸塩／リン酸塩バッファーに添加することにより行った。この溶液はpH５に滴定され、そして 0.1重量パーセントの非イオン界面活性剤 (Gresco Mfg.，Thomasville，N．C．27360 から商業的に入手可能な、Grescoterg GL 10 0)を含んでいた。10インチ×10インチの色あせた綿含有布並びに10インチ×10インチの新たな編布であってゆるんで破壊された表面繊維をもつものを次に１ｌの上記バッファー中に入れ、そして30分間 110°Ｆにおいて静置し、そして次に30 分間 100rpmsにおいて撹拌した。これらの布を次にそのバッファーから取り出し、洗浄し、そして乾燥させた。次に得られた布を処理前の布と比較した。この分析の結果は以下のようである：用語“利益が見られる（benefit seen）”は、処理された布が、tergotometer を用いた結果として生じた表面繊維を含む破壊された表面繊維の除去を含む非処理布と比べて色回復を示す（すなわち、より色あせしない）ということを意味する。これらの結果は、CBH 型成分の存在が色あせた綿含有布の色回復を行うために必要でないという実施例17の結果を実証する。このような組成物がその布に対して有害な強度損失を伴わずに加工の間に生じた破壊／ゆるみ繊維を除去するであろうので、このようなセルラーゼ組成物が布加工の間に有益であるであろうことが企図される。実施例19 柔らかさ本実施例は、CBH 型成分の存在が綿含有布への改善された柔らかさの付与に不可欠ではないということを立証する。特に、本実施例は、 CBHＩとII成分を生産することができないように先に記載したやり方で遺伝子操作されたトリコデルマ・ロンジブラチアタムから誘導される、CBH 型成分のすべてを含まないセルラーゼ組成物を使用する。このセルラーゼ組成物を、テリー・ウォッシュ・クロス（terry wash cloth）を柔らかくするその能力についてテストした。特に、（Test Fabrics，Inc.，20 0 Blackford Ave，Middlesex，NJ 08846からStyle No．420 NSとして入手可能な）14インチ×15インチの非柔軟化 8.5オンスの綿テリー・クロスを７インチ×7. 5 インチの布きれに切断した。上記のセルラーゼ組成物を、洗濯計内でこれらの布きれを柔らかくするその能力についてテストした。特に、最終セルラーゼ溶液中、500ppm，250ppm，100ppm ，50ppm 、及び10ppm のセルラーゼを提供するのに適当な量の CBHＩとII欠失セルラーゼを、 0.025重量パーセントの非イオン界面活性剤 (Triton×114)を含む 20mMクエン酸塩／リン酸塩バッファー 400mlの別々の溶液に添加した。さらに、同一溶液を含むがセルラーゼが全く添加されていないブランクを走らせた。サンプルをpH５に滴定した。得られた溶液のそれぞれを次に、別々の洗濯計キャニスターに添加した。これらのキャニスター内に、柔らかさを容易にするための多量の小石並びに先に記載した綿の布きれを添加した。すべての条件は、キャニスター当り２つの布きれ（swatches）をもって３連で走らせた。次に、各キャニスターに蓋をし、そしてそのキャニスターを、37℃において維持させた洗濯計内に降下させた。次に、このキャニスターを約１時間、少なくとも40rpmsの速度でその浴内で回転させた。その後、上記布きれを取り出し、十分に濯ぎ、そして標準的なドライナー内で乾燥させた。次に、布きれを嗜好テストにおける評価により柔らかさについて分析した。特に、６人のパネリストに彼ら自身のセットの布を与え、そして柔らかさの基準、例えば布全体の柔軟性に基づく柔らかさに関してそれらを等級付けするように依頼した。５つの異なる酵素濃度による処理から得られた布きれとブランクをスクリーンの裏ろに置き、そして上記パネリストに、最も柔らかくないものから最も柔らかいものまでそれらを順序付けるように依頼した。等級を、他の布きれに対してのその順番に基づき各布きれに指定した；５が最も柔らかく、そして０が最も柔らかくない。各パネリストからの等級を加算し、そして平均した。この平均の結果を図13中に記す。特に、これらの結果は、より高い濃度において、改善された柔らかさが得られるということを立証する。この改善された柔らかさは、セルラーゼ組成物中 CBHＩ又はIIのいずれの存在をも伴わずに達成されることに注目のこと。実施例20 感触と外観本実施例は、CBH 型成分の存在が、綿含有布に改善された感触と外観を付与するのに不可欠でないということを立証する。特に、本実施例は、CBH 型成分のいずれをも生産することができないように（すなわち、 CBHＩとII成分を生産することができないように）先に記載したようなやり方で遺伝子操作されたトリコデルマ・ロンジブラチアタムから得られたセルラーゼ組成物を使用する。このセルラーゼ組成物を、綿含有布の外観を改善するその能力についてテストした。特に（Test Fabrics，Inc.，200 Blackford Ave.，Middlesex，NJ 08846 からStyle No．439 W として入手可能）適当なサイズの 100％綿シート材料を、本実施例の外観面において使用した。先に記載したセルラーゼ組成物を、洗濯計内でこれらのサンプルの外観を改善するその能力についてテストした。特に、最終セルラーゼ溶液中25ppm，50ppm、及び100ppmのセルラーゼを提供するのに適当な量の CBHＩとII欠失セルラーゼを、0.25重量パーセントの非イオン界面活性剤 (Triton×114)を含む20mMクエン酸塩／リン酸塩バッファー 400mlの別々の溶液に添加した。さらに、同一溶液を含むがセルラーゼが全く添加されていないブランクを走らせた。そのように調製されたサンプルをpH５に滴定した。得られた溶液のそれぞれを次に、別々の洗濯計キャニスターに添加した。これらのキャニスター内に、外観における改善を容易にするための多量の小石並びに先に記載した綿サンプルを添加した。各キャニスターに次に蓋をし、そしてこのキャニスターを、約40℃において維持された洗濯計浴内に降下させた。次にこのキャニスターを約１時間少なくとも約40rpmsの速度においてその浴内で回転させた。その後、サンプルを取り出し、十分に濯ぎ、そして標準乾燥機内で乾燥させた。次にサンプルを、嗜好テストにおける評価にり改善された外観について分析した。特に６人のパネリストに（同定されていない）４つのサンプルを与え、そして、外観に関してそれらを等級付けるように依頼した。これらのパネリストは、用語“外観（appearance）”とは、眼に対する綿含有布の物理的外観をいい、そして部分的に、その布の表面上の、けば、表面繊維、等の存在又は非存在により、並びにその布の構造（ウェーブ）を見分けることができるか又はできないかにより、決定されるということを、指示された。それが存在する場合であってもけば及び表面繊維をほとんどもたず、そしてその構造（ウェーブ）が明らかに見分けられることができる布は、けば及び／又はゆるんだ繊維及び／又は見分けることができないウェーブをもつ布に比べて改善された外観を有する。その後パネリストは、他のサンプルに対するその順序に基づき各サンプルに、指定された等級を指定した；４は最良の外観をもち、そして１は最悪の外観をもつ。各パネリストからの等級を加算し、そして次に平均した。このテストの結果は以下のようなものである： CBHＩとII欠失セルラーゼ組成物を次に、綿含有布の感触を改善するその能力についてテストした。特に、（Test Fabrics，Inc.，200 Blackford Ave.，Midd lesex，NJ 08846 からStyle No．439 W から入手可能な）適当なサイズの 100％綿シート材料を本実施例の感触面において使用した。先に記載したセルラーゼ組成物を洗濯計内でこれらのサンプルの感触を改善する能力についてテストした。特に、最終セルラーゼ溶液中500ppm，1000ppm 、及び2000ppm セルラーゼを提供するのに適当な量のセルラーゼを20mMクエン酸塩／リン酸塩バッファーの24Ｌの別々の溶液に添加した。さらに、同一溶液を含むがセルラーゼを全く添加されていないブランクを走らせた。すべてのテストをpH5. 8 において行い、そして工業的洗濯機内で走らせた。この洗濯機を50℃、全容量 24Ｌ，50：１の液対布比（重量対重量）において操作し、そしてこの洗濯機を30 分間走らせた。その後、サンプルを取り出し、そして工業的ドライヤー内で乾燥させた。次に、サンプルを、嗜好テストにおける評価により改善された感触について分析した。特に、５人のパネリストに４つの（同定されていない）サンプルを与え、そして感触に関してそれらを等級付けするように依頼した。パネリストは、改善された感触をもつ布が他の布よりも接触に対してよりなめらか、かつ、絹のようであること、そして感触が品質、例えば柔らかさ（その感触よりもむしろ布の柔軟性をいう）、厚さ、色、又はその布のなめらかさに関係しない他の物理的特徴から区別されるということを指示された。次にパネリストは、他のサンプルに対するその順番に基づいて各サンプルに等級を指定した；４は最良の感触であり、そして１は最悪の感触をもつ。各パネリストからの等級を加算し、そして次に平均した。このテストの結果は以下のようなものである：上記の結果は、感触と外観における改善が、全CBH 型成分を含まないセルラーゼ組成物により達成されることができるということを立証する。実施例21 ストーン・ウォッシュ外観本実施例は、CBH 型成分の存在が綿含有布にストーン・ウォッシュ外観を付与するために不可欠でないということを立証する。特に、この実施例は、CBH 型成分のいずれをも生産することができないように（すなわち、 CBHＩとII成分を生産することができないように）先に記載したやり方で遺伝子操作されたトリコデルマ・ロンジブラチアタムから得られた組成物並びにトリコデルマ・ロンジブラチアタムから誘導された完全セルラーゼ組成物がGenencor Iuterna tional，South San Francisco，CA からCytolase 123セルラーゼとして入手可能なものを使用する。これらのセルラーゼ組成物を、染色された綿含有デニム・パンツにストーン・ウォッシュ外観を付与するそれらの能力についてテストした。特に、サンプルを、以下の条件下工業的洗濯機とドライヤーを使用して調製した： 10mM クエン酸塩／リン酸塩バッファー pH５ 40Ｌ全容量 110° Ｆデニム・パンツ４つ１時間の操作時間 50ppm の CBHＩとII欠失セルラーゼ又は 100ppmの全セルラーゼ（すなわち、EG濃度にほぼ等しい）サンプルを、８人のパネリストによりそれらのストーン・ウォッシュ外観について評価した。８人のパネリストの全てが、より良好なストーン・ウォッシュの見た目をもつものとして非酵素処理のパンツよりも100ppmの全セルラーゼを選んだ。８人のパネリストの中の４人が、より良好なストーン・ウォッシュの見た目をもつものとして全セルラーゼよりも CBHＩとII欠失セルラーゼ処理パンツを選び；一方、他の４人のパネリストが、より良好なストーン・ウォッシュの見た目をもつものとして全セルラーゼ処理パンツを選んだ。これらの結果は、 CBHＩとII欠失セルラーゼ処理パンツが全セルラーゼ処理パンツから区別されることができず、そして CBHＩ及び／又は CBHIIが綿含有布にストーン・ウォッシュ外観を付与するのに不可欠でないということを示している。実施例16〜21に関して、 CBHＩ型成分を含まず、そしてトリコデルマ・ロンジブラチアタム以外の微生物から誘導されるセルラーゼ組成物が、これらの実施例中に記載したセルラーゼ組成物の代わりに使用されることができるであろう。特に、EG型成分を含むセルラーゼ組成物の源は、本発明にとって重量ではなく、そして１以上のEG型成分を含み、そして実質的に CBHＩ型成分のすべてを含まないいずれかの真菌セルラーゼ組成物を本発明において使用することができる。例えば、本発明において使用される真菌セルラーゼ組成物の調製における使用のための真菌セルラーゼは、トリコデルマ・コニンジ（Trichoderma koningii）、ペンシラム・エスピー (Pencillum sp.)、等から得られることができ、又は商業的に入手可能なセルラーゼ、すなわち (Novo Industry，Copenhagen，Deumar から入手可能な)CELLUCAST，（Gist Brocades，N．V.，Delft，Hollandから入手可能な）RAPIDASE、等を使用することができる。実施例22 綿非含有セルロース系布の強化特性本実施例は、綿非含有セルロース系布の外観、柔らかさ及び表面光沢を強化するEGセルラーゼ組成物の能力を立証する。 200kgのJet Dyer機を、綿非含有セルロース系布TENCEL^TMの強化特性を評価するために使用した。約10kgの 100％ TE NCEL^TM中−重量織布をロープ形態において上記機械内に装填し、そして端から端まで縫った。この方法は未漂白未染色の（greige）又は染色された布について行うことができる。上記ジェット・マシンを 150〜200 リッターの水（これは、約15〜20：１の液対布比を表す）で満たし、そして 120〜140 °Ｆ（ 50〜60℃）に加熱した。pHを 3.6ｇ／ｌ（56％）酢酸と 1.9ｇ／ｌ（50％）水酸化ナトリウムにより 4.5〜5.0 に調整した。水酸化ナトリウムを、上記マシンに入れる前にゆっくりと希釈酢酸溶液に添加した。次に、0.25〜0.5 ml／ｌの非イオン性水和剤（Triton X-100）をこの液に添加した。このpHを温度を、そのpHが 4.5と5.0 の間にあり、そしてその温度が50℃と60℃の間にあることを確保するためにチェックした。次に、３〜４ｇ／ｌの強化EGセルラーゼ組成物を添加した。この強化EGセルラーゼ組成物は、CBH 型成分のすべてを含まないセルラーゼ組成物であって、 CBHＩとII成分を生産することができず、そしてEGＩを過剰生産するように先に記載したやり方で遺伝子操作されたトリコデルマ・ロンジブラチアタムから誘導されるものを含んで成る。この強化EGセルラーゼ組成物を添加した後に、このジェットを30〜60分間走らせた。そのサイクルの終りに、0.25ｇ／ｌのソーダ灰をその液に添加し、そして 10分間走らせた。液をそのジェットから滴下し、次にそのジェットを再び水で満たし、そしてその布をさらに１回濯いだ。この布をそのジェットから取り出し、そして乾燥させた。最後に、シリコーン・ベース仕上げ剤をその布上に使い尽くした。布きれを、嗜好テストにおける評価により柔らかさと表面外観について分析した。特に、４人のパネリストに彼ら自身の布セットを与え、そして柔らかさと表面外観に関してそれらを等級付けするように依頼した。柔らかさは、柔らかさの基準、例えば布全体の柔軟さに基づいた。表面外観は、その布上に存在するゆるんだ繊維又はけばの量に基づいた。布きれを非酵素処理布対照と比較し、そして柔らかさの測定においては、追加の対象すなわち、完全真菌セルラーゼ組成物により処理された布が含まれた。等級を各布きれに指定し、そして平均等級を４人のパネリストから作表した。柔らかさと表面外観についての最高の等級に 5.0の値を指定した。最小の柔らかさと最も多いけばについての最小の等級に０の値を指定した。この平均化の結果を図14と15に記す。特に、これらの結果は、柔らかさと表面外観がEGセルラーゼ処理後に両方改善されたことを立証する。さらにTENCEL^TM布の表面外観は10回の家庭での洗濯後維持され、一方、対照布の表面外観は実質的に低下した。 EG強化セルラーゼ組成物処理されたTENCEL^TM布のさらなる比較を、全セルラーゼ処理されたTENCEL^TM布と比較した（図14）。本実施例においては、布きれを、嗜好テストにおける評価により柔らかさについて分析した。４人のパネリストに彼ら自身の布セットを与え、そして柔らかさに関してそれらを等級付けるように依頼した。柔らかさは、上述の基準及びパネル等級に基づいた。布きれを全セルラーゼ処理布対照と比較した。等級を各布きれに指定し、そして平均等級を４人のパネリストから作表した。この平均の結果を図14中に記す。特に、これらの結果は、EG強化セルラーゼ処理TENCEL^TM布が全セルラーゼ処理布対照よりも平均してより柔らかかったことを立証する。Detailed Description of the Invention Method for treating non-cotton cloth with cellulase BACKGROUND OF THE INVENTION 1.Field of the invention The present invention is directed to cellulase-based cotton-containing fabrics and cotton-containing fabrics. Improved treatment of non-cotton containing cellulosic fabrics The present invention relates to methods and textiles produced by these methods. In particular, the modification according to the present invention The improved method comprises one or more EG type components and has a low concentration of CBHI type components. Contacting the cotton-containing and non-cotton-containing fabrics with an aqueous solution containing the fungal cellulase composition containing Directed to letting. Cotton-containing and non-cotton-containing cellulosic cloths are such solutions. The resulting fabric when treated with It has the expected enhancements in appearance and / or softness, etc., and also cotton containing fabrics , Compared to a cloth treated with a cellulase component containing a high concentration of CBHI type component, Has reduced strength loss. 2. State of the art During or shortly after their manufacture, cotton-containing fabrics are used to impart the desired properties to the fabric. Can be treated with cellulase. For example, in the textile industry, Lulase is added to cotton containing fabrics to improve the feel and / or appearance of cotton containing fabrics. Gives cotton-washed denim a stone-washed look to remove surface fibers from It is used for things such as doing. In particular, Japanese patent applications 58-36217 and 58-54032 and Ohis hi et al., “Reformation of Cotton Fabric by Cellulase” and JTN December 1988 journal article “What's New --Weight Loss Treatment to Soften th e Touch of Cotton Fabric ”is the treatment of cotton-containing cloth with cellulase. It discloses that the fabric provides an improved feel. This cell Lase treatment removes cotton fuzzing and / or surface fibers, which It is generally believed to reduce the weight of the fabric. Of these effects The combination gives the fabric an improved feel, i.e. Feels like silk. Furthermore, in the art, these have been hitherto used, for example by the use of jets. Agitating and cascading with the purpose of removing the broken fibers and threads typical of knitted fabrics. It is known to treat cotton-containing woven fabrics with cellulose solutions under conditions. So Buffers are generally not used when processed as. Because Are they believed to have a detrimental effect on dye removal from selected dyes? It is. Furthermore, in the field, cellulase lysis under stirring and cascade conditions has so far been performed. It is also known to treat cotton-containing woven fabrics with liquids. When processed that way The cotton-containing woven fabric has an improved feel and appearance compared to the untreated fabric. I have. Finally, so far, under stirring and cascade conditions, i.e. in a rotating drum washing machine The treatment of dyed denim containing cotton with cellulase solution It is also known to impart a "stone washed" appearance. Common problems associated with the treatment of such cotton-containing fabrics with cellulase solutions are: That is, the treated fabric exhibits a considerable strength loss compared to the untreated fabric. The cellulase is cellulose (β-1, 4-glucan bond) which in turn destroys some of the cotton polymer. The loss of strength occurs because it can be pulled down. If the cotton polymer is destroyed The more the fiber strength of the fabric is reduced. Agitation and cascading of cellulose solution on cotton woven fabric ing) requires shorter reaction times, these methods are Reduced strength loss compared to the cellulase treatment method without the skirt and cascade Is believed to provide a cotton containing woven fabric. However, in any case Even so, such a method results in a considerable loss of strength. Therefore, the treated cotton resulting from the treatment with cellulase as compared to the untreated fabric. Provides reduced strength loss while still achieving the desired reinforcement in the containing fabric It would be particularly desirable to modify such cellulase treatments as such. In addition, the fungal source of cellulase can secrete very high amounts of cellulase. Known and further fermentation procedures for such fungal sources and their Isolation and purification procedures for isolating lulase are well known in the art In order to impart a feel and / or appearance to such fungal cells It would be particularly advantageous to use a lase. SUMMARY OF THE INVENTION The present invention treats cotton-containing and non-cotton-containing cellulosic cloths with fungal cellulases. The methods known to date for comprising one or more EG type components, By using a fungal cellulase composition containing significantly lower concentrations of CBHI Regarding the discovery that it can be improved. Surprisingly, the EG type ingredient, Compared to the cloth before treatment with such a cellulase composition, feel and appearance (Appearance), softuess, color enhancement, and And / or processing for stone washed appearance It has been discovered that reinforcement can be imparted to the woven fabric. Furthermore, EG type CBHI type components in combination with the components significantly reduce the strength loss in the treated fabric. It has been discovered that it is the cause of the size of the. Therefore, the present invention Used to treat cotton-containing and non-cotton-containing cellulosic fabrics in The cellulase composition has a significantly lower concentration of CBHI-formed so that it is resistant to strength loss. Made to include minutes. In the above aspect, in one of its method aspects, the present invention provides a fungal cell. A method for improving the treatment of cotton-containing cloth and non-cotton-containing cloth with a lulase composition, the method comprising: Fungal cellular comprising one or more EG type components and one or more CBHI type components A cellulase composition of more than 5: 1. With a protein weight ratio of all EG type components to all CBHI type components. You. In a preferred embodiment, the fungal cellulase composition used in the present invention is Cellulase composition comprising one or more EG-type components and one or more CBH-type components The product has a protein weight ratio of all EG type components to all CBH type components of greater than 5: 1. Further In a preferred embodiment, the fungal cellulase composition is a cellulase composition thereof. At least about 10 weight percent, based on the total weight of protein in, and preferred Preferably, it comprises at least about 20 weight percent. In another of its method aspects, the invention provides an aqueous fungal cellulase lysate. A method for improving treatment of cotton-containing cloth and non-cotton-containing cellulosic cloth with a liquid, Conditions under which the method creates a cascade effect of the cellulase solution on the cloth Under that cellulase solution It is carried out by stirring, and the improvement includes one or more EG type components and one or more CBHI type components. Comprising the use of a fungal cellulase composition comprising Those who have a protein weight ratio of all EG type components to all CBHI type components that exceeds 1: Concerning the law. In a preferred embodiment, the fungal cellular used in the present invention The composition comprises one or more EG-type components and one or more CBH-type components, The lase composition has a protein weight ratio of all EG-type components to all CBH-type components that exceeds 5: 1. With. In yet another preferred embodiment, the fungal cellulase composition comprises the cell At least about 10 weight percent based on the total weight of protein in the lulase composition , And preferably at least about 20 weight percent. The cotton-containing fabric treated by the method according to the invention contains a higher amount of CBHI type components. Reduced strength loss compared to fabrics treated with the fungal cellulase composition. Having the expected reinforcement compared to the untreated fabric as shown. This reduced strength loss The loss proves that the method according to the invention is strength loss resistant. According to the present invention The cotton-free cellulosic cloth treated by the method is Feel, appearance, softness, color enhancement and / or stone wash compared to cloth It has been found to exhibit the imparted enhancement in appearance. In its composition aspect, the invention relates to a method according to the invention as defined above. And cotton-free cellulosic fabrics that have been treated with. Brief description of the drawings Figure 1 shows pΔ CBHIpyr4Is an outline of the construction of. Figure 2 shows Trichoderma longibrachiatum (Trichoderma long ibrachiatum) On I in the chromosomecbh1PΔ CBHI in Zodiacpvr4From the big one ofEcoTrichoderma longibrachiatum by incorporating RI fragment (Trichode rma longibrachiatum) cbh1 The deletion of the gene is shown. Figure 3 shows the probe³²P-labeled pΔ CBHIpyr4Southern Buddha After lot analysisEcoRI digested pΔ CBHIpyr4Transformed with Trichoderma ・ Lonjibrachiatum ((Trichoderma longibrachiatum)DNA from strain GC69 It is a tradiograph. Figure 4 shows the probe³²Southern block using p-labeled pInt CBHI After analysisEcoRI-digested pΔ CBHIpyr4Transformed by Trichoder Ma Longjibrachiatum ((Trichoderma longibrachiatum)DNA from strain GC69 It is a radiograph. FIG. 5 shows that the wild-type Trichoderma longibrachiatum and transformants Isoelectric focusing gel showing more secreted proteins. Especially Figure 5 In the lane A of this isoelectric focusing gel is Trichoderma longibrachi. Atam's partially purified CBHI was used; lane B contains wild type Trichoderma. • using protein from longibrachiatum; lane Ccbh1Missing gene Using the protein from the lost Trichoderma longibrachiatum strain; Lane Dcbh1Whencbh2Trichoderma longibrachiata with gene deletion Use proteins from the In Fig. 5, the numbers on the right-hand side of the figure are single tags found in one or more secreted proteins. It is marked to indicate the location of the protein. Especially BG is a β-glucosidase E1 refers to endoglucanase I; E2 refers to endoglucanase II; E3 Refers to engglucanase III; C1 refers to exo-cellobiohydrolase I And C2 refers to exo-cellobiohydrolase II. Figure 6A shows 4.1KB of genomic DNAEcoTrichode cloned as RI fragment Luma Longibrachiatumcbh2FIG. 6B shows the constellationcbh2 1 represents a gene deletion vector, pPΔCBHII. Figure 7 shows the probe³²Southern block using P-labeled pPΔCBHII After analysisEcoTrichoderma transformed with RI-digested pPΔCBHII ・ It is an autoradiograph of DNA from the longibrachiatum strain P37 pΔ CBHI. . FIG. 8 shows the plasmid pEGI.pyr4It is a diagram of. Figure 9 shows Trichoderma longibrachiatum for the pH range at 40 ° C. Of an acidic EG-enriched fungal cellulase composition (CBHI and CBHII deletion) derived from RBB- CMC activity profile; and Trichoderma longjib for pH range at 40 ° C 1 shows the activity profile of a fortified EGIII cellulase composition derived from latiatam. Figure 10 shows cotton treated with cellulase compositions with varying amounts of CBH components. After 3 wash cycles in the launderometer for the containing fabric The strength loss results are shown. Figure 11 shows wild-type Trichoderma longibrachiatum at various pHs. For cotton-containing fabrics treated with secreted cellulase (total cellulase) Figure 3 shows fiber removal results (based on panel test grade). Figure 12: Cellular secreted by wild-type Trichoderma longibrachiatum CBHI and C for cotton-containing fabrics treated with various concentrations (ppm) of Trichoderma longjib genetically engineered to be unable to secrete BHII For cotton cloth treated with cellulase secreted by a strain of Latiata ( Fiber removal results (based on panel test grade) are shown. FIG. 13 shows a tricogene genetically modified so that it cannot produce CBHI & II. An EG-enhanced cellulase composition derived from a strain of Derma longibrachiatum. Soft panel test results for various concentrations (ppm) are shown. FIG. 14 shows a trichocogene genetically modified so that it cannot produce CBHI & II. By an EG-enhanced cellulase composition derived from a strain of Derma longibrachiatum Shows softness panel test results for treated cotton-free cellulosic fabrics You. FIG. 15 shows a trichogenetically modified so that it cannot produce CBHI & II. By an EG-enhanced cellulase composition derived from a strain of Derma longibrachiatum Shows the appearance panel test results for the treated cotton-free cellulosic cloth. Detailed description of preferred embodiments As mentioned above, the method according to the invention comprises cotton-containing cloth and non-cotton containing cellulase. An improvement over prior art treatment methods for cellulosic fabrics. This improvement is in the cloth Specific cellular that imparts the desired reinforcement to the fabric while minimizing strength loss in Comprising using an enzyme composition. However, the invention is discussed in detail Prior to, the following terms will be defined first. The term "cotton-containing fabric" means a bar woven cloth, a cotton knitted cloth, a cotton cloth. Sewn or unsewn fabric made from pure cotton or cotton blends, including nims, cotton yarns, etc. U. When a cotton blend is used, the amount of cotton in the fabric should be at least about 40 weight parts. % Cotton; preferably greater than about 60 weight percent cotton; and most preferably Must be greater than about 75 weight percent cotton. Used as a blend , The mating material used in the fabric is one or more non-cotton fibers. There are synthetic fibers such as polyamide fibers (eg nylon 6 and nylon 66), Acrylic fibers (eg polymacrylonitrile fibers) and polyester fibers (eg For example, polyethylene terephthalate), polyvinyl alcohol fiber (for example, vinyl Nilon), polyvinyl chloride fiber, polyvinylidene chloride fiber, polyethylene Can include those containing polyurethane fibers, polyurea fibers and malamide fibers You. Regenerated cellulose, such as rayon, is a substitute for cotton in the method of the present invention. It is contemplated that it could be used as a replacement. The term "non-cellulosic-containing fabric" means Natural cellulose (eg jute, flax, ramie, etc.) and artificial cellulose Of a non-cotton-containing cellulose cloth or a non-cotton-containing cellulose derivative blend containing a derivative Say either. Included under the heading Synthetic Cellulose Blends is the field There are regenerated celluloses well known in, for example rayon. Other artificial cellulos The cellulose is a chemically modified cellulose fiber (eg, derivatized with acetate, etc.). Cellulose) and solvent-spun cellulose fibers (eg lyocell). No. The above-mentioned non-cotton-containing cellulose is lyocell-rayon, lyocell-linen, biscel Course rayon acetate, rayon wool, silk-acetate, etc. It can also be used as a blend containing. The term "finishing," as used herein, refers to a cell for fabric. Include cotton in an amount sufficient to substantially prevent the cellulolytic activity of the enzyme. Means application to cellulosic fabrics with or without cotton. Finishing agents are generally , Enhance the properties of the fabric, such as softness, drapability, etc. With the purpose of Applied at or near the end of the fabric's manufacturing process, which Further protect the cloth from the reaction. Finishing agents useful for finishing cotton-containing fabrics are Well known in the field and resinous materials such as melamine, glyoxa Or urea formaldehyde, wax, silicone, fluorochem Includes Cals and Class 4. When so finished, the cotton-containing fabric is Substantially no reactivity to the enzyme. The term “fungal cellulase” refers to cells obtained from fungal sources. It is genetically modified to incorporate and express all or part of the lucase gene. Enzyme composition derived from a fungal source or a microorganism. Fungal cellulase cell Acts on sucrose and its derivatives to hydrolyze cellulose and produce major Glucose, glucose and cellobiose. Fungal cellulases are microorganisms, such as Non-true, including actinomycetes, slime mold Bacillus (myxobacteria) and true bacteria It is distinguished from cellulases produced from bacterial sources. Cellular described herein A fungus capable of producing cellulase useful in the production of a protease composition is described in British Patent No. 2 094 826A, the disclosure of which is incorporated herein by reference. Have been. Most fungal cellulases are generally their maximum in the acidic or neutral pH range. Has suitable activity. However, some fungal cellulases are neutral and slightly alkaline. It is known to have a considerable activity under the conditions of. That is, for example Michela Insolence (Humicola insolens)Cellulase derived from It is known to have activity under mild to slightly alkaline conditions. Fungal cellulases have several different substrate specificities, enzyme action patterns, etc. It is known to occupy the enzyme classification of. In addition, the enzyme components within each category Are different molecular weights, different degrees of sugar addition , Different isoelectric points, different substrate specificities, etc. For example, a fungal cell The enzyme is an endoglucanase (EG_s )), Exocellobiohi Drorase (exocellobiohydrolases (CBH_s )), Β-glucosidase (β-gluc osidases (BG_s )), Etc. can be included. On the other hand , Bacterial cellulases are listed above with little or no CBH component. CB derived from bacterial cellulase, as reported in the transcript It has been reported that the H-like component has exocellobiohydrolase activity. There are some cases. Produced from natural fungal sources and comprising one or more CBH and EG components, Each of these components is found in the fungal cell found in the ratio produced by that fungal source. The lulase composition is sometimes referred to herein as "complete fungal cellulase system (complete fungal cellulase system) ”or“ complete fungal cellulase system ” gal cellulase composition) ”, Incompleteness produced by bacteria and some fungi from the classification and composition of From the whole cellulase composition or one or more CBH and / or EG components of cellulase Obtained from microorganisms that have been genetically modified to overproduce, underproduce, or not produce From the cellulase composition obtained. Fermentation procedures for culturing fungi for the production of cellulase are well known in the art. It is known per se. For example, cellulase systems include batch, feed-batch and continuous. It can be produced by either solid or submerged culture with a flow step. The collection and purification of cellulase systems from fermentation broth is also known in the art. Can be performed according to the procedure described above. “Endoglucanase (“ EG ”) type ingredient” means Trichoderma Longibrachiatum (Trichoderma Longibrachiatum)Endoglucanase component of Of fungal cellulase components or similar components exhibiting similar fiber activity properties to The combination of In this regard, the Endo of Trichoderma longibrachiatum Lucanase components (especially EGI, EGII, EGIII, either alone or in combination) Etc.), those ingredients are incorporated into the fiber treatment medium, and the fabric is Improved feel on cotton-containing fabrics when treated by quality (compared to untreated fabrics) , Improved appearance, softness, color enhancement, and / or stone wash appearance Is given. In addition, the endoglucanase of Trichoderma longibrachiatum Treatment of cotton-containing fabrics with ingredients has similar composition but further includes CBHI type ingredients Results in a smaller strength loss as compared to the strength loss resulting from the treatment by. Therefore, endoglucanase-type ingredients are used because these ingredients treat the fabric. Improved to cotton-containing fabrics (compared to untreated fabrics) when incorporated into the media used for Texture, improved appearance, softness, color enhancement, and / or stone wall A cellulosic appearance and a similar cellulase composition, but with additional CBHI The reduced strength of cotton-containing fabrics compared to the strength loss resulting from treatment with It is a fungal cellulase component that imparts a degree loss. Such endoglucanase-type components may be used in activity tests, such as those components. Is (a) a soluble cellulose derivative such as carboxymethyl cellulose (CMC) The ability to hydrolyze and thereby reduce the viscosity of CMC-containing solutions, their components (B) Hydration forms of cellulose, such as phosphoric acid swollen cellulose (eg, Walseth cells It readily hydrolyzes and increases the crystalline form of cellulose (eg Av Encapsulation with the ability to hydrolyze icel, Solkafloc, etc.) with little ease Contains ingredients traditionally classified as dogglucanase Can not do. On the other hand, as defined by such activity tests All of the endoglucanase ingredients in cotton-containing fabrics with one or more reinforcements and cotton-containing fabrics It is believed that it will not impart reduced strength loss. Therefore, the present invention Endoglucanase from Trichoderma longibrachiatum Fungal cellulases with fiber activity properties similar to those owned by the ingredients It is more accurate to define the endoglucanase type component as the component of The fungal cellulase can include one or more EG type components. Different ingredients are common Different isoelectric points, different molecular weights, different degrees of sugar addition, different substrate specificities The enzyme action pattern, etc. The components with different isoelectric points are They can be separated via Raffy or the like. In fact, from different fungal sources Isolation of the components of is known in the art. Bjork et al., US serial numbers No. 07 / 422,814, Schulein et al., International Application WO89 / 09259, Wood et al., Bioch emistry and Genetics of Cellulose Degradation, pp. 31 to 52 (1988); Woo d et al., Carbohydrate Research, Vol. 190, pp. 279 to 297 (1989); Schul ein, Uethods in Enzymology, Vol. 160, pp-234 to 242 (1988); When. The entire disclosure of each of these documents is incorporated herein by reference. In general, the combination of EG type components has a cotton-containing and non-cotton-containing fabric compared to a single EG component. To provide a cooperative response in the provision of strengthening and reduced strength loss to It is contemplated that On the other hand, single EG-type components are more stable or at pH_s About the range of Can have a broader spectrum of activity. Therefore, it is used in the present invention. The EG-type ingredient that is used must be either a single EG-type ingredient or a combination of two or more EG-type ingredients. Can be. Combination of ingredients When used, the EG-type component must be derived from the same or different fungal sources Can be. EG-type components can be derived from bacterially induced cellulases It is also contemplated. "Exo-cellobiohydrol-type (" CBH-type ") component (Exo-cellobiohydrol ase type (“CBH type”) components) ”means Trichoderma longibrachia To exhibit fiber activity characteristics similar to the CBHI and / or CBHII cellulase components of tom Fungal cellulase component. In this regard, EG cellular (as defined above) Trichoderma longibrachiatum alone when used in the absence of a protease component The CBHI and CBHII components of S. Both color enhancement and / or significant enhancement in stone wash appearance Is not given. Therefore, when used in combination with EG type ingredients, the trichode The CBHI component of Luma longibrachiatum provides enhanced strength loss to cotton-containing fabrics. Give. Therefore, the CBHI type component and the CBHII type component are respectively Trichoderma longi Fungal cell with fiber activity properties similar to those of CBHI and CBHII components of Braciatum Refers to the lacse component. As mentioned above, for CBHI type components, this is used in the presence of EG type components. When included, it includes properties that enhance the strength loss of cotton-containing fabrics. In a preferred embodiment , And when used in combination with EG-type ingredients, Trichoderma longjib Laciatam's CBHI Type Components Can Add Incremental Cleaning Benefits . In addition, the CBHI component of Trichoderma longibrachiatum, alone or Gives incremental softness benefits when used in combination with EG type ingredients be able to. Such an exo-cellobiohydrolase type component can be tested for activity. Characterize CBHI and CBHII from, for example, Trichoderma longibrachiatum Used as such for transmission as an Exocellobiohydrolase It would probably not be possible to include components that are systematically separated. For example, this Una component (a) is competitively inhibited by cellobiose (Ki about 1 mM); (b) Are substituted celluloses to any significant extent, such as carboxymethylcellulose. (C) is phosphoric acid swollen cellulose. And to a lesser extent highly crystalline cellulose. other On the other hand, the number of CBH components characterized by such an activity test Of fungal cellulase components are minimal when used in the cellulase composition alone. For cotton-containing fabrics with strength loss, improved feel, appearance, softness, color enhancement, and It is believed that it will give a stone wash look. Therefore , For the purposes of the present invention, such exo-cellobio as EG type ingredients It is believed that defining a hydrolase is more accurate. Because these Of the endonuclease component of Trichoderma longibrachiatum This is because they have similar functional properties in fiber applications as possessed. A fungal cellulase composition having one or more EG type components and one or more CBHI type components The cellulase combination exceeds 5: 1 for all EG type components vs. all CBHI type components. Those with a protein weight ratio can be obtained by refining techniques. In particular, The whole cellulase system was subjected to ion exchange chromatography, pH Distributed well in the above references including T-chromatography, size exclusion, etc. Can be purified to substantially pure components by well-recognized separation techniques You. For example, ion exchange chromatography (usually anion exchange chromatography Raffy), pH gradient , Or salt gradient, or by elution with both pH and salt gradients The cellulase component can be separated. After purification, the required amount of the desired component is recombined Can be done. A mixture of cellulase components with the required ratio of EG type components to CBHI type cellulase components is It may also be possible to produce those components by means other than isolation and recombination. Is contemplated. In this regard, natural to give a relatively high ratio of EG to CBH components. The fermentation conditions for the microorganism can be modified. Similarly, recombinant technology is EG To create a mixture of cellulase components with a relatively high ratio of type components to CBH type components Therefore, the relative ratio of EG type component to CBH type component can be exchanged. With respect to the above, the preferred method of making the cellulase compositions described herein is By genetically modifying a microorganism to overproduce one or more acidic EG-type components. You. Similarly, a microorganism is inherited so that it is unable to produce more than one CBH type component. It can also be child modified and the method does not produce any exogenous protein. This In such cases, the cellular produced by the microorganism thus modified is Cellulase containing at least one EG-type component and at least one CBHI-type component A composition, wherein the cellulase composition exceeds 5: 1, all EG type components vs. all CBHI types Produced by natural microorganisms to provide those with a protein to protein weight ratio. Can be combined with a cellulase (ie, containing a CBHI type component) Will In relation to the above, US Serial No. 07 / 593,919 filed on October 5, 1990 Are incorporated herein by reference in their entirety to produce one or more CBH components. And / or cannot overproduce one or more EG components And a method for genetically engineering Trichoderma longibrachiatum. ing. Moreover, the method of that application does not produce any of the exogenous proteins Created the Trichoderma longibrachiatum. Similarly, Miller et al., “Di rect and Indirect Gene Replacement inAspergillus nidulans”， Molecular and Cellular Biology, p. 1714-1721 (1985) used linear fragments of homologous DNA. Aspergillus nidulans (Aspergillus nidulans ), The method of deleting the gene is disclosed. Miller et al., Gene deletions will be achieved without producing any of the causative proteins. From the above viewpoint, it is responsible for the production of CBHI type and / or CBH II type cellulase components. Deletion of the responsible gene enhances the amount of EG component present in the cellulase composition Will have the effect of A fungal cellulase composition producing a low concentration of a CBHI type component from a fungal source is used in the present invention. It is further contemplated that it can be used in. In addition, the required amount of one or more CBHI type components purified by conventional procedures is CBHI type components can be produced so as to achieve the specification of CBHI type components against minutes. Added to cellulase compositions produced from genetically engineered microorganisms Can be That is, cells that do not contain all CBH-type components to enrich the EG-type components. The above-mentioned amount of the purified CBHI type component (or CBH II type component) is Two weight percent of a CBHI type component (by simply adding to the cellulase composition ( Or a CBH type II component). “Β-Glucosidase (BG) component” means the formation of cellulase that exhibits BG activity. Minutes; that is, such ingredients are cellobiose and other soluble cellooligosaccharides. Acts from the non-reducing end of ("cellobiose") and is the only raw Glucose as a product It means that you will get. The BG component does not adsorb on the cellulose polymer and Does not react to it. In addition, such BG components are competitive with glucose. It is inhibited (Ki about 1 mM). Strictly speaking, the BG component is literally not a cellulase. Because they cannot break down the cellulose. But However, such BG components are included within the definition of cellulase system above. Because this Inhibitory cellulose component produced by the combined action of CBH and EG components. By further degrading the degradation products (especially cellobiose) This makes it easier to disassemble. Crystalline cellulosics without the presence of BG components Moderate or slight hydrolysis will occur. BG component is an aryl substrate, eg Often characterized for p-nitrophenol β-D-glucoside (PNPG), for example And is therefore often referred to as an aryl-glucosidase. Not all glucosidases are BG components, some of which are cellobiose It must be noted that it does not hydrolyze. The presence or absence of the BG component in the present cellulase composition is either It is contemplated that it can be used to modulate the activity of the CBH component. Special In addition, because cellobiose is produced during cellulase degradation by the CBH component, and Since high concentrations of cellobiose are known to inhibit CBH activity, and Moreover, since such cellobiose is hydrolyzed into glucose by the BG component, The absence of the BG component in the cellulase composition resulted in cellobiose concentrations reaching inhibitory levels. CBH activity will be "turned off" when it does. One or more additives ( Cellobiose, glucose, etc.) to the cellulase composition to give C All BHI type activities as well as other To effectively "terminate" some or all of the CBH activity, either directly or indirectly. It is also contemplated that The set obtained when such additives are used The product is a cellulase composition as described herein, wherein the amount of additive used is The level of CBHI activity that is equal to or less than that Compositions suitable for use in the present invention if sufficient to reduce Type I activity It is considered to be a thing. On the other hand, the cellulase composition containing the added amount of BG component depends on its CBH component. The level of cellobiose produced was in the absence of added BG component as described above. The overall hydrolysis of cellulose when it comes to limit the overall hydrolysis. Can be increased. Either increase or decrease the amount of BG component in the cellulase composition Was filed on December 10, 1990 as Atoni-No. 010055-056. , “SACCHARIFICATION OF CELLULOSE BY CLONING AND AMPLIFICATION OF THE β − US serial number named “GLUCOSIDASE GENE OF TRICHODERMA REESEI” No. 07 / 625,140, which is hereby incorporated by reference in its entirety. Take it in). The fungal cellulase can contain more than one BG component. Different ingredients are common Different, allowing their separation via ion exchange chromatography etc. It has an electric point. Either a single BG component or a combination of EG components can be used . When used in fiber treatment solutions, the BG component generally has its cellulase composition. Sufficient to prevent cellobiose inhibition of any CBH and EG components in the product Added in various amounts. The amount of BG component added can be easily measured by those skilled in the art. Fiber composition that can be It depends on the amount of cellobiose produced in the material. However, when used , The weight ratio of the BG component to any CBH type component present in the cellulase composition. %, Preferably about 0.2 to about 10 weight percent, and more preferably about 0.5 to about 5 weight percent. Preferred for use in producing the fungal cellulase composition used in the present invention. The new fungal cellulase is Trichoderma longibrachiatum (Trichoderma long ibrachiatum) , Trichoderma conninji (Trichoderma koningii), Pencilram Seed (Pencillum sp.), Humicola Insolence (Humicola insolens)From, etc. Is what you get. Certain fungal cellulases are commercially available, CELLUCAST (available from Novo Industry, Copenhagen, Denmark), RAPIDA SE (available from Gist Brocades, NV, Delft, Holland), CYTOLASE 123 (Ge available from nencor International, South San Framcisco, California), etc. It is. Other fungal cellulases By fermentation and isolation procedures recognized in the art It can be easily isolated. The term "buffer" refers to an unwanted pH shift during cellulase treatment of cotton-containing fabrics. Acid / base recognized in the art to stabilize the cellulase solution upon exposure Refers to a reagent. In this regard, it is well known in the art that cellulase activity is pH dependent. Have been recognized. That is, a particular cellulase composition is within a given pH range. The optimum cellulolytic activity will be Commonly found within a small portion of a stove. Specific pH for cellulolytic activity The range will vary according to the respective cellulase composition. As mentioned above , Most cellulases exhibit cellulolytic activity within the acidic to neutral pH profile. Probably, but alkali There are several cellulase compositions that exhibit cellulolytic activity within the neutral pH profile. The first cellulase during cellulase treatment of cotton-containing and non-cotton-containing cellulosic cloths The pH of the solution can be outside the range required for cellulase activity. further , Its pH, for example, by the formation of reaction products that change the pH of the solution, It can also be varied during the treatment of cellulosic fabrics containing or non-cotton. Any Even in the event, the pH of the unbuffered cellulase solution was required for cellulolytic activity. Could be outside the range. For example, cellular with acidic activity specification If the enzyme is used in a neutral unbuffered aqueous solution, the pH of that solution will be lower Will result in cellulolytic activity, and probably Will bring discontinuation. On the other hand, neutral or acid in neutral unbuffered aqueous solution. The use of cellulases with Lucaris pH specificity initially led to significant cellulolytic activity. Must be provided. From the above viewpoint, the pH of the cellulase solution is required for cellulolytic activity. Must be maintained within range. One way to achieve this is by the pH of the system. Simply maintain and adjust its pH accordingly by addition of either acid or base It depends. However, in a preferred embodiment, the pH of the system is preferably , Maintained within the desired pH range by using a buffer in the cellulase solution You. Generally, the solution is within the range in which the cellulase used therein exhibits activity. Sufficient buffer is used to maintain the pH of. Different cellulase composition As long as the materials have different pH ranges for exhibiting cellulase activity, the specific The buffer is chosen in relation to the particular cellulase composition used. It is. The buffer selected for use with the cellulase composition used will PH range and optimum pH for cellulase compositions used and its cellulase solubility It can be easily determined by those skilled in the art in consideration of the pH of the liquid. Preferably, The buffer used is compatible with the cellulase composition and has optimal activity. Will maintain the pH of the cellulase solution within the pH range required for . Suitable buffers are sodium citrate, ammonium acetate, sodium acetate. , Disodium phosphate, and any other art-recognized buff Including Tensile strength of cotton-containing cloth is measured in the direction of warp and weft, which are at right angles to each other. Can be measured. Therefore, the term “warp tensile s” "trength)", as used herein, is measured along the length of a cotton-containing fabric. The tensile strength of a cotton-containing cloth when it is used, while the term “weft tensile strength (fi ll tensile strength) ”means cotton containing when measured across the width of the cotton containing fabric. The tensile strength of a cloth. Of the cotton-containing cloth treated with the resulting cellulase solution Tensile strength was measured by cellulase solution to determine the strength-reducing effect of the treatment. Is compared to its tensile strength prior to treatment. Tensile strength is significantly reduced If so, the resulting cotton-containing fabric will tear easily and / or form holes. Therefore, it is at least about 50% of the pre-treatment tensile strength after treatment (called warp yarn). It is desirable to maintain the tensile strength (both of the thread). Tensile strength of cotton-containing fabrics is easily done according to ASTM D1682 test methodology . A suitable device for testing the tensile strength of such fabrics is the Scott tester. Or Instron testers, both of which are commercially available. Cellulase In the tensile strength test of cotton fabrics treated with the solution, after treatment and Care must be taken to prevent shrinkage of the fabric prior to testing. Such shrinkage is It will give false tensile strength data. Reinforcements to cotton-containing and non-cotton-containing cellulosic fabrics have been used previously It is achieved by such a method. For example, cotton-containing fabrics with improved feel are National patent applications 58-36217 and 58-54032 and Ohishi et al., "Reformation of Cotton Fabric by Cellulase ”and JTN December 1988 journal article“ What's According to New --Weight Loss Treatment to Soften the Touch of Cotton Fabric ” Can be achieved. The technology of each of these documents is described by reference. Incorporate in the detailed book Similarly, it improves both the feel and appearance of cotton-containing and non-cotton-containing cellulosic fabrics. The method is to mix the solution into a cellulosic fabric with or without cotton Cellulase under conditions such that the cascade effect of the cellulase solution is achieved. Contacting the fabric with an aqueous solution containing. Such a method is like that With improved feel and appearance of cotton-treated and non-cotton-containing cellulosic fabrics treated with cotton And in U.S. Serial No. 07 / 598,506, filed October 16, 1990. And is incorporated herein by reference in its entirety. International Textile Bulletin, Dyeing / Printin g / Finishing, page 5 et seq., 2^nd Quarter, 1990 Take it into the book. ). Similarly, a method of imparting a stone-washed look to cotton-containing denim is a US patent. In U.S. Pat. No. 4,832,864, which is incorporated herein by reference in its entirety. Have been described. Other methods of strengthening cotton-containing fabrics by treatment with cellulase compositions are known in the art. Is knowledge. Preferably, in such a method, The treatment of the cotton-containing fabric with cellulase is performed before finishing the cotton-containing fabric. As mentioned above, the present invention provides that the present invention maximizes strength loss in the treated fabric. As long as a specific cellulase composition to be used is miniaturized, it is a cotton-containing cloth which is superior to the skill in the art. Is an improved method of. The cellulase composition used in the present invention comprises one or more EG A fungal cellulase composition comprising a mold component and one or more CBH-type components, comprising: Of the composition has a weight ratio of all EG type components to all CBH type components of greater than 5: 1. . Further, the use of the cellulase composition described herein provides for stressed It also provides fabric / color enhancement for cotton-containing and non-cotton-containing cellulosic fabrics. Especially cotton During the manufacture of cloth and non-cotton containing cloth, the cloth can become stressed. , And when so stressed, it breaks down and is a disordered fiber. Will include fissures. Such fibers have a worn and hazy appearance on the fabric. To be harmful. However, when processed in the method according to the invention, Fabrics so stressed undergo fabric / color enhancement. It is stressed Destroyed and chaotic with the effect of restoring the appearance of the cloth before It is believed to occur by removing some of the fibers. Additionally, the cellular dyes described herein along with pigmented dyed fabrics (eg, denim). These cellulase compositions are made with cotton-containing and non-cotton-containing products. That would cause less redeposition of dye on the cellulosic-containing fabric It is contemplated. These redeposition features are more than one specific EG compared to other components. It is also contemplated that the mold components can be enhanced. The fungal cellulase composition described above comprises cellulase and, for example, Other optional ingredients, including buffers, surfactants, scouring agents, etc. Used in an aqueous solution containing minutes. Concentration of cellulase composition used in this solution Degree is generally a concentration sufficient for its intended purpose. That is, cellulase The amount of composition is used to provide the desired reinforcement to the cotton-containing fabric. used The amount of cellulase composition depends on the equipment used, the process parameters used, Cellulase solution temperature, exposure time to the cellulase solution), cellulase activity ( For example, a cellulase solution is more active than a smaller active cellulase composition. Lower concentrations of threshold active cellulase composition will be required. ), Etc. Exist. The exact concentration of cellulase composition will depend on the above factors as well as the desired effect. And can be easily determined by those skilled in the art. Preferably, in the present invention The concentration of cellulase composition in the cellulase solution used is about 0.01 grams / cell. Lase solution 1 liter to about 10.0 grams / cellulase solution 1 liter; and more Preferably, about 0.05 grams / liter cellulase solution to about 2 grams / cellular. 1 liter of ze solution (cellulase concentration listed above is based on total protein weight) About. ) When using the buffer in the cellulase solution, the buffer in the aqueous cellulase solution is used. The fur concentration depends on the solution in the range in which the cellulase used in it is active. is sufficient to maintain the pH, which in turn is determined by the nature of the cellulase used. Depends on quality. The exact concentration of the buffer used is easily taken into account by those skilled in the art. Will depend on several factors that can be met. For example, in a preferred embodiment In addition, the buffer and buffer concentration are essential for optimal cellulase activity. It is chosen to maintain the pH of the cellulase solution within the required pH range. Typically , The buffer concentration in the cellulase solution is , About 0.005N or more. Preferably the concentration of the buffer in the cellulase solution is About 0.01 to about 0.5N, and more preferably about 0.05 to about 0.15N. Cellular The percentage of loss of tensile strength of treated fabrics with increasing buffer concentration in the ze solution It is possible to be able to strengthen. In addition to cellulase and buffer, cellulase solution may optionally contain a small amount of interface. Activator, ie, less than about 2 weight percent, and preferably about 0.01 to about double. Amount percent surfactant can be included. Suitable surfactants include, for example: Compatible with cellulases and their fabrics, including anionic, nonionic and amphoteric surfactants Includes surfactants of either sex. Suitable anionic surfactants for use in the present invention are linear or branched alkyls. Benzene sulfonate; Alky with linear or branched alkyl or alkenyl groups Or alkenyl ether surfactants; alkyl or alkenyl sulphates Olefin sulfonate; alkane sulfonate; Anion interface Suitable counterions for activators are alkali metal ions such as sodium and potassium. Alkaline earth metal ions such as calcium and magnesium; ammonium .Ions; and alkanols having 2 to 3 carbon atoms and 1 to 3 alkanol groups Contains amines. Ampholytic surtactants are quaternary ammonium sulfonates Includes salts, betaine-type amphoteric surfactants, and the like. Bisexual like this Surfactants have both positive and negative charges within the same molecule. Nonionic surfactants are generally polyoxyalkylene ethers, and The higher fatty acid alkanolamide or alkylene oxide adduct, fatty acid group Contains lysine / monoester, etc. You. It is also possible to use mixtures of surfactants. As used in the present invention, liquefaction, i.e. The ratio generally achieves the desired reinforcement in cellulosic fabrics with or without cotton. Sufficient to do so, and depends on the method used and the enhancement to be achieved. I do. Preferably, the liquefaction is generally about 0.1: 1 or greater, and more preferably It is about 1: 1 or greater, and even more preferably about 10: 1 or greater. About 50: 1 or more The use of liquefaction is usually unfavorable from an economical point of view. The reaction temperature for cellulase treatment is governed by two competing factors. Primarily, Higher temperatures generally correspond to enhanced reaction rates, i.e. faster reactions Allows a reduced reaction time compared to the reaction time required at low temperatures You. Therefore, the reaction temperature is generally at least about 30 ° C. or higher. Second, the cellular The enzyme is active above a certain reaction temperature, which depends on the nature of the cellulase used. It is a protein to lose. Therefore, if the reaction temperature is raised too high, the Cellulolytic activity is lost as a result of denaturation of the cellulase. As a result Thus, the maximum reaction temperature used in the present invention is generally about 65 ° C. Above view In that respect, the reaction temperature is generally about 30 ° C to about 65 ° C; preferably about 35 ° C to about 60 ° C; And more preferably about 35 ° C to about 50 ° C. The reaction time is generally about 0.1 hours to about 24 hours, and preferably about 0.25 hours. About 5 hours. Cotton treated in such a manner as described above with such a cellulase composition The containing fabric is the same cotton treated in the same manner with the complete fungal cellulase composition. It has a reduced strength loss compared to the containing fabric. Such a cellulase composition A cotton-free cellulosic fabric treated with the above method using In the composition Reduced strength loss compared to the same cotton-free cellulosic fabric in a more identical manner It is contemplated that one will have a loss. In a preferred embodiment, the concentrate is used in the methods described herein. Can be manufactured for. Such a concentrate is preferably in an aqueous solution. , Including the cellulase composition, buffer and detergent concentrate described above. There will be. When so formulated, the concentrate will provide the required concentrations of these additives. Easily diluted with water to produce fast and accurate cellulase solution be able to. Preferably, such concentrates are from about 0.1 to about 20 weight percent. Cellulase composition (protein) described above; from about 10 to about 50 weight percent Buffer; about 10 to about 50 weight percent surfactant; and about 0 to 80 weight percent. It will comprise water. When aqueous concentrates are formulated, these concentrates From about 2 to about 200 to reach the required concentration of that component in the cellulase solution. It can be diluted by a factor. Obviously, such concentrates To allow easy formulation of the cellulase solution, as well as where it will be used Allows the viable transfer of that concentrate to. The above cellulase composition is a liquid Concentrate in any of diluents, granules, emulsions, gels, pastes, etc. Can be added. Such forms are well known to those skilled in the art. When a solid cellulase concentrate is used, the cellulase composition is generally granular. In the form of powder, powder, aggregate, and the like. When granules are used, these granules are preferred. Preferably, it is blended so as to contain a cellulase protecting agent. For example, Atoni-Documents No. 010055-073, "GRANULES CONTAINING BOTH AN ENZYME AND AN EN ZYME PROTECTING AGENT AND DETERGENT COMPOSITIONS CONTAINING SUCH GRANULE US serial number filed January 17, 1991, named "S" No. 07 / 642,669 (this application is incorporated herein by reference in its entirety. )checking. Similarly, particulates reduce the rate of dissolution of particulates in the wash medium. Can be formulated to include materials for Such materials and granules As Atoni-Document number GCS-171-US1 and “GRANULAR COMPOSITIONS US Serial No. 07 / 642,596 (filed January 17, 1991, entitled " This application is incorporated herein by reference in its entirety. ) Is disclosed in . The cellulase compositions described herein are either liquid or spray. Can be further used in pre-washing, and in pre-soaking Is contemplated. In addition, the cellulase compositions described herein provide a fabric color and It may also be used at home as a stand-alone composition suitable for viewing enhancement Is contemplated. For example, U.S. Pat. No. 4,738,682, which is incorporated by reference in its entirety. Incorporate in the detailed book. )checking. The following examples are provided to illustrate the present invention and by any method. It should not be construed as limiting the scope of the invention in any way. Example Examples 1-12 also demonstrate the inability to produce more than one cellulase component. Are genetically engineered to overproduce specific cellulase components. Longibrachiatum ((Trichoderma longibrachiatum)Demonstrate the production of.Example 1 Selection for the pyr4 mutant of Trichoderma longibrachiatum the abovepyr4The gene is orotidine-5'-monophosphate deca. It encodes ruboxylase, an enzyme required for uridine biosynthesis. Toxicity inhibitor 5- Fluoroorotic acid (FOA) is taken up by uridine by wild-type cells, and It is therefore toxic to those cells. However,pvr4Fine lines with defective genes The vesicles are resistant to this inhibitor but require uridine for growth. That So using FOApyr4Selection can be made for mutant strains. In fact, Ricoderma longibrachiatum strain RL-P37 (Sheir-Neiss G-and Montenecourt, B. S., 1984, Appl. Microbiol. Biotechnol. 20: 46-53) spores 2 mg / ml Of uridine and 1.2 mg / ml of FOA were spread on the surface of the solidification medium. Native FOA-resistant Colonies appear within 3-4 days and then require uridine for growth It was possible to identify FOA-resistant mutants such as defectpyr4Special gene To identify the mutants we had, we made protoplasts and Raw formpyr4Transformed with the plasmid containing the gene (see Examples 3 and 4). thing. ). After transformation, plate the protoblasts on medium lacking uridine. Was. Subsequent growth of transformed colonies is plasmid-carryingpyr4By gene Defectspyr4Gene complementation was demonstrated.Example 2 Preparation of CBHI deletion vector Encodes the CBHI proteincbh1Genes were prepared using the known probe synthesis method (Shoema ker et al., “Molecular Cloning of Exo-cellobiohydrolase I Derived fromTrichoderma longibrachitatum strain L27 ”,Bio / Technology 1, P. 691 ( 1983)) and designed based on the published sequence for this gene. Strain RL-P37 was used by hybridization with a oligonucleotide probe. Cloned from genomic DNA. thiscbh16.5 kb geneP st I fragment and (purchased from Pharmacia Inc., Piscataway, NJ)p st This vector was inserted into I-cut pUC4K^r The gene was replaced. Got The plasmid, pUC4K :: cbhIHindCleaved by III, and about 6 kb more The large fragment was isolated and ligated to give pUC4K :: cbhIΔH / H. This The procedure ofcbh1From either side of the entire coding sequence and its original PstI fragment Remove approximately 1.2 kb upstream and 1.5 kb downstream of flanking DNA. Trichoderma longibrachiatumpyr4The gene was modified by Sambrook et al., 1989, “ Molecular Cloning, A Laboratory Manual ”, 2^nd Ed., Cold Spring Harbor L A 6.5 kb fragment of genomic DNA in pUC18 was cloned according to the method of aboratory Press. It has become Plasmid pUC4K :: cbhIΔH / HHindCut by III, and then Both ends were dephosphorylated with calf intestinal alkaline phosphatase. This end Dephosphorylated DNA from Trichoderma longibrachiatumpyr4Contains genes 6.5 kbHindLigate with III fragment and pΔ CBHIpyr4I got See Figure 1 When.Example 3 Isolation of protoplasts The mycelium was added to 100 ml of YEG (0.5% yeast extract, 2% glucose) in a 500 ml flask. About 5 × 10⁷ Trichoderma longibrachiatum GC spores (pyr4Mutant Strain). Then shake the flask at 37 ° C. While incubating for about 16 hours. By centrifuging mycelium at 2,750 xg Harvested The harvested mycelium was further washed in 1.2M sorbitol solution and 5mg / ml Novozym^R 234; 5 mg / ml MgSO_Four・ 7H₂O; 0.5 mg / ml bovine serum al Bumin; 40ml Novozym with 1.2M sorbitol^R 234 solution (this is the Novo B iolabs, Danbury ct. From, 1,3- Alpha glucanase, 1,3-beta glucanase, laminarinase, key Under the trade name for multi-component enzyme systems including silanase, chitinase and protease is there. ). Protoplasts with Miracloth (Calbiochem. Corp) Removed from cell debris by filtration through and centrifuged at 2,000xg Collected by Repeat this protoplast three times in 1.2 M sorbitol, and 1 .2M sorbitol, 50mM CaCl₂Washed once in, centrifuged, and resuspended Was. The protoplasts were finally mixed with 1.2 M sorbitol, 50 mM CaCl₂2 per 1 ml of × 10⁸ Resuspended at density of protoplasts.Example 4 Transformation of fungal protoplasts 200 μl of the protoblast suspension prepared in Example 3 was treated with TE buffer. (Prepared in Example 2) in (10 mn Tris, pH 7.4; 1 mM EDTA)EcoRI disappearance P p CBHIpyr420 μl, and 25% PEG 4000, 0.6 M KCl and 50 mM CaCl₂Including 50 μl of polyethylene glycol (PEG) solution. This mixture on ice Incubated for 20 minutes. After this incubation period, 20 ml of the above identification Add the PEG solution to it, mix the solution further, and at room temperature for 5 minutes. Incubated. After this second incubation, 1.2M sorbitol And 50 mM CaCl₂Add 4.0 ml of the solution containing it and mix this solution further did. This protoplast solution was then added with additional 1% glucose, 1.2M sorbitol. Vogel's Medium N containing 1% agarose (3 gram of queer per liter) Sodium phosphate, 5 grams KH₂PO_Four2 grams of NH_FourNO_Three, 0.2 g of MgSO_Four・ 7H₂O, 0.1 gram CaCl₂・ 2H₂O, 5 μg α-biotin, 5 mg citric acid, 5 mg ZnSO_Four・ 7H₂O, 1 mg of Fe (NH_Four)₂ ・ 6H₂O, 0.25mg CnSO_Four・ 5H₂O, 50 μg MnSO_Four・ 4H₂O) Melted Alicho Was added immediately. The protoplast / medium mixture was then mixed with the same Vogel's as above. Poured onto solid medium containing medium. Uridine is not present in the medium at all, and Therefore, only transformed colonies could be transformed into pΔ CBHI.pyr4Wild type present inpy r4 Genes of strain GC69pyr4Can grow as a result of complementation of mutants Was. These colonies were then solid Vogel 'containing 1% glucose as an additive. s were transferred onto medium N and the stable transformants were purified.Example 5 Analysis of transformants DNA was obtained from the transformants obtained in Example 3 in the presence of 1% glucose. Isolated after being grown in liquid Vogel's medium N containing. DNA of these transformants More samplesPSTCleavage with I restriction enzyme and agarose gel electrophoresis I put it in motion. The gel was then further blotted onto a Nytran membrane filter, and³² P-labeled pΔ CBHIpyr4Hybridized with probe. This pro 6.5kbPSTNative as an I fragmentcbh1Gene, innatepyr4Gene and shape Selected to identify any DNA sequence derived from a transducible DNA fragment . Figure 2 on the 1 of the Trichoderma longibrachiatum chromosomecbh1Sit down PΔ CBHIpyr4Greater fromEcoTrichoderma by incorporation of RI fragments ・ Lonjibrachiatumcbh1Outline the gene deletion. Bands from the above hybridization were autoradiographed Visualized. The result of the autoradiograph is shown in FIG. 5 samples above Samples A, B, C, D, and E. Lane E is non-formal It is a quality conversion strain GC69, and Used as a control in this analysis. Lanes A-D were obtained from the above method Represents a transformant. The number on the side of the autoradiograph is the size of the molecular weight marker. Represents As you can see from this autoradiograph, Lane D is 6.5kb CBHI It contains no band, which means that the gene was completely deleted in the transformant. It has been shown. thiscbh1The deletion strain is called p37PΔCBHI. Other analyzed Transformants appear to be the same as the non-transformed control strains. pΔ CBHIpyr4Line from Natural fragmentspyr4Incorporated by double-crossing at the locus gives a gene replacement case It is highly probable that this has occurred.Example 6 The same procedure as in Example 5 was used in this example. However, use The probe³²Change to P-labeled pInt CBHI probe. This pro Is in the region deleted in pUC4 :: cbh1ΔH / H.cbh12kb from ZodiacBglII PUC-type plasmid containing a piece. Control sample A, non-transformed strain GC69 Two samples, one of which is a transformant P37PΔCBHI It was run in the examples. As can be seen in Figure 4, the band at 6.5 kb indicates As you can see, sample Acbh1Includes gene; transformant, sample B Of the 6.5 kb band, and hencecbh1Does not contain genes.Example 7 Protein secretion by strain P37PΔCBHI Spores from the produced P37PΔCBHI strain were treated with 1% glucose, 0.14% (NH_Four)₂SO_Four , 0.2% KH₂PO_Four, 0.03% MgSO_Four, 0.03% urea, 0.75% bactotryptone, 0.05 % Tween 80, 0.000016% CuSO_Four・ 5H₂O, 0.001% FeSO_Four・ 7H₂O, 0.000128% ZnSO_Four・ 7H₂O, 0.0000054 % Na₂MoO_Four・ 2H₂O, 0.0000007% MnCl / 4H₂Trichoderma (including O (Trichode rma) 50 ml of basal medium was inoculated. Shake this medium for 48 hours at 37 ° C 2 Incubated in a 50 ml flask. The obtained mycelium was treated with Miracloth (Calbio ch em Corp.) and filtered with 17 mM potassium phosphate for 2 Was washed 3 times. This mycelium in 17 mM potassium phosphate containing 1 mM sophoreth Final suspension in water and incubate at 30 ° C for 24 hours with further shaking. I got it. The supernatant is then collected from these cultures and the mycelium discarded. did. A sample of this culture supernatant was taken according to the manufacturer's instructions, Pharmacia Phastgel. By isoelectric focusing using the system and pH 3-9 precast gel Analysis. The gel is stained with silver stain to reveal the protein band. Visualized.cbh1The band corresponding to the protein is strain P37PΔ, as shown in FIG. It was absent from samples derived from CBHI. This isoelectric focuskashin Gugel was loaded in different supernatant cultures of Trichoderma longibrachiatum. Shows various proteins. Lane A is partially purified CBHI Lane B is supernatant from untransformed Trichoderma longibrachiatum. Lane C was created according to the method of the present inventioncbh1Deleted for the gene It is the supernatant from the strain. Locations of various cellulase components are labeled . Since CBHI makes up about 50% of all extracellular proteins, it is the major secretory protein. It is a puff and therefore the darkest band on the gel. This isoelectric point The Focusing Gel iscbh1Of CBHI protein in strains deleted for Is clearly shown.Example 8 Preparation of pPΔCBHII Encodes the CBHII proteinT. longibrachiatumofcbh2Gene is genomic DNA Of 4.1kbEcoIt has been cloned as RI and is shown in the diagram in FIG. (Chen et al., 1987 Biotechnology, 5: 274-278). In this field The plasmid, pPΔCBHII (FIG. 6B), was constructed using known methods. (At 74bp 3'of the CBHII translation initiation site)HindIII site and (final of CBHII (At 265 bp 3'of the codon)Cla3.2 kb center of this clone between I site Territory is Trichoderma longibrachiatum (Trichoderma longibrachiatum) pyr Four It has been removed and replaced by the gene. EcoDigestion of this plasmid with RI is at one endcbh20.7 kb from Zodiac Fragment with ranking DNA, at the other endcbh21.7kb flank from Zodiac DNA, and in its center Trichoderma longibrachiatumpyr4Gene Will release.Example 9 Generation of mutants ^- pyr4 of P37PΔ CBHI cbh1The spores of the transformant (P37PΔCBHI) that had been deleted for the gene contained FOA. Spread on the culture medium. Of this transformantpyr4 ^- The derivative was then used as in Example 1. Obtained. thispyr4 ^- Share the P37PΔ CBHI Pyr^- I named it 26.Example 10 Deletion of the cbh2 gene in the strain previously deleted for cbh1 Stock P37PΔ CBHI Pyr^- Twenty-six protoplasts were added to the method outlined in Examples 3 and 4. Thus generate, andEcoTransformation with RI digested pPΔCBHII. The purified, stable transformants were grown in shake flasks as in Example 7. And then the protein in the culture supernatant is subjected to isoelectric focusing. Inspected by focusing. 1 transformant (also named P37PΔΔCBH67 ), Which did not produce any CBHII protein. Figure 5 Lane D of was produced according to the method of the present invention.cbh1Whencbh2For both genes The supernatant from the deleted strain is shown. DNA was extracted from strain P37PΔΔCBH67,EcoWith RIAspDigested with 718 And subjected to agarose gel electrophoresis. The DNA from this gel is filtered through a membrane filter. Blot to, and³²Hybridized with P-labeled pPΔCBHII (FIG. 7). ). Lane A in FIG. 7 is from an untransformed Trichoderma longibrachiatum strain. The hybridization pattern observed for DNA is shown. Wild typecbh2 4.1kb containing geneEcoThe RI fragment was observed. Lane B is strain P37PΔΔCBH67 Shows the hybridization pattern observed for Single 4.1kb bus Band was removed and replaced by two bands at approximately 0.9 and 3.1 kb. This This is from pPΔCBHIIEcoA single copy of the RI fragmentcbh2Seated exactly in the seat This is the pattern that is expected when Same DNA sampleEcoAlso digested by RI and Southern analysis as described above. I went. In this example, the probe is³²P-labeled pInt CBHII Was. This plasmid was deleted in the plasmid pPΔCBHIIcbh2 DNA seg From withincbh2Contains part of the gene coding sequence. DN from stock P37PΔΔ CBH67 No hybridization with A was observed, which iscbh2Gene deleted And the sequences derived from the pUC plasmid described above are completely present in this strain. It shows that it did not exist.Example 11 Construction of pEGIpyr4 Trichoderma longibrachiatum coding for EGIeglI gene published For hybridization with oligonucleotides synthesized according to the sequence 4.2 kb of genomic DNA from strain RL-P37HindCloned as a III fragment (Penttila et al., 1986, Gene 45: 253-263). 3.6 kbHindIII-Bam The HI fragment was picked from this clone, and Trichoderma longibrachiata Mpyr41.6kb containing geneHindIII-BamHI andHindPUC-cleaved by III Ligate the base plasmid and plasmid pEGIpyr4Was obtained (FIG. 8).Hi nd PEGI by IIIpyr4Digestion of Trichoderma longibrachiatum genome D NA (egl1Whenpyr4Will release fragments of DNA containing only genes. However, this 24 base pair sequenced synthetic DNA between two genes and 6 salts at one end Exclude base pair sequenced synthetic DNA (see Figure 8).Example 12 Transformant of Trichoderma longibrachiatum containing pEGIpyr4 Trichoderma longibrachiatum strain RutC30 (Sheir-Neiss and Montenecourt , 1984, Appl. Microbiol. Biotechnol. 20: 46-53)pyr4Defect mutant Obtained by the method outlined in Example 1. The protoplasts of this strain were undigested pEGIpyr4 And the stable transformants were purified. (EP2, EP4, EP5 , EP6, EP11) 5 of these transformants, as well as non-transformed RutC30 with EG medium (yeast extract, 5 g / l; 50 ml in a 250 ml shake flask; Glucose, 20 g / l) and shaken at 28 ° C for 2 days Cultured. The mycelium obtained was washed with sterile water and 50 ml of TSF medium (0.05 M citrate-phosphate buffer, pH 5.0; Avicel microcrystalline cellulose, 10 g / l; KH₂PO_Four, 2.0 g / l; (NH_Four)₂SO_Four, 1.4 g / l; proterose peptone, 1.0 g / l; Urea, 0.3 g / l; MgSO_Four・ 7H₂O, 0.3g / l; CaCl₂, 0.3 g / l; FeSO_Four・ 7 H₂O, 5.0 mg / l; MnSO_Four・ H₂O, 1.6mg / l; ZnSO_Four, 1.4 mg / l; CoCl₂, 2.0 mg / 1; 0.1% Tween 80). 4 more of these cultures at 28 ° C Incubated with shaking for days. Sample supernatants in these cultures , And measure total amount of protein and total amount of endoglucanase The assay designed for was performed as described below. This endoglucanase assay is based on Remazol Brilliant Blue-Carboxymethyl Cellulase (RBB-CMC from Mega Zyme, North Rocks, NSW, Australia) Of soluble, stained oligosaccharides. Vigorously the substrate Add 2 g of dry RBB-CMC to 80 ml of freshly boiled deionized water while stirring. It was prepared by. When cooled to room temperature, 5 ml of 2M sodium acetate buff PH 4.8 was added and the pH was adjusted to 4.5. Finally remove its capacity Adjust to 100 ml with deionized water and bring the sodium azide to a final concentration of 0.02%. Was added. An aliquot or bra of culture supernatant of Trichoderma longibrachiatum Add 0.1 M sodium acetate (10-20 μl) as a solution into the tube, and Quality was added and the tubes were incubated for 30 minutes at 37 ° C. this The tubes were placed on ice for 10 minutes and 1 ml of cold precipitant (3.3% sodium acetate, 0.4 % Zinc acetate, pH 5,76% ethanol with HCl) was then added. These tubes Stir and let sit for 5 minutes before centrifugation for 3 minutes at about 13,000 xg. Absorption Degrees were measured with a spectrophotometer at wavelengths of 590-600 nm. Was the protein assay used Pierce, Rockford, Illinois, USA? It was a BCA (bicinchoninic acid) assay using the reagent obtained from et al. Standard is bovine serum album It was Min (BSA). Mix BCA reagent with 1 part Reagent B and 50 parts Reagent A. It was prepared by. 1 ml of BCA reagent was added to 50 μl of appropriately diluted BSA or solution. Mix with Rhicoderma longibrachiatum culture supernatant. 37 incubation C for 30 minutes, and the absorbance is finally analyzed by a spectrophotometer at a wavelength of 562 nm. More measured. The results of the above assay are shown in Table 1. Some of the transformants are non-transformed Ru strains. It is clear that it produced an increased amount of endoglucanase activity compared to tC30 . Endogluca produced by untransformed Trichoderma longibrachiatum Nase or exo-cellobiohydrolase is the total amount of secreted protein. They account for about 20% and 70%, respectively. Therefore, a transformant, eg EP5, strain Ru Those that produce about four times more endoglucanase than tc30 have almost the same amount. Secretes endoglucanase-type and exo-cellobiohydrolase-type proteins Would be expected. The transformants described in this example are for pEGI of wounds.pyr4Obtained by using Containing the DNA sequence integrated into the genome derived from the pUC plasmid. Would. Prior to transformationHindPIII by IIIpyr4Digests, and trico Isolating a larger DNA fragment containing only Derma longibrachiatum DNA Will be able to. Trichoderma longibrachi with this isolated DNA fragment Transformation of Atam was carried out by exogenous DNA control except for the two short pieces of synthetic DNA shown in FIG. It should allow the isolation of transformants that contain no rows and overproduce EGI. U.cbh1Gene orcbh2Deletion of either or both genes PEGI to transform the selected strainpyr4Could also be used. This Method of EGI Overproduce, and produce a limited range of exo-cellobiohydrolases It was possible to construct strains that would either produce or produce altogether. The method of Example 12 was carried out using the Trichoderma longibrachiatum (T. longibrachiatum ) Can overproduce any of the other endoglucanases normally produced by It could be used to create Trichoderma longibrachiatum Came. The above results are for the purpose of demonstrating overproduction of EGI components, and Presented without any purpose. In this regard, the degree of overproduction depends on each experiment. Expected to fluctuate due to Example 13 shows that the Cytolase 123 cellulase (Ricoderma long Dibratiata (richoderma longibrachiatum), And Genencor I Complete fungal cellular available from nternational, Inc., South San Francisco, CA The isolation of the components of theExample 13 Purification of Cytolase 123 Cellulase into cellulase components CYTOLASE 123 cellulase was fractionated in the following manner. In this cellulase system The normal distribution of cellulase components is as follows: CBHI 45-55 weight percent CBHII 13-15 weight percent EG I 11-13 weight percent EG II 8-10 weight percent EG III 1-4 weight percent BG 0.5-1 weight percent Fractionation was performed using a column containing the following resin: Sigma Chemical Company C st. Sephadex G-25 gel filtration resin from Louis, Mo), IBF Bio technics (Savage , Md) QA Trisacryl M anion exchange resin and SP Triacryl M cation exchange resin resin. 0.5 g of CYTOLASE 123 cellulase was added to 10 mM sodium phosphate at pH 6.8. Column with 3 liter Sephadex G-25 gel filtration resin with buffer And desalted. This desalted solution was then mixed with 20 ml of QA Trisacryl M anion exchange resin. Loaded on the ram. Fractions bound to this column contained CBHI and EGI . These components are used in an aqueous gradient containing 0 to about 500 mM sodium chloride. Separated by gradient elution. Fractions not bound to this column are CBH II and EGII were included. These fractions were washed with 10 mM sodium citrate, pH 3.3. Desalted using a column of re-equilibrated Sephadex G-25 gel filtration resin. This solution 200 ml was then loaded onto 20 ml SP Trisacryl M cation exchange resin. CBHII Dissolve EGII separately using an aqueous gradient containing 0 to about 200 mM sodium chloride. Issued. A procedure similar to that of Example 13 above was followed to separate the components. Other cellulase systems that can be used are (Novo Industry, Copenhagen, Demma CELLVCAST (available from rk), imported from Gist Brocades, NV, Delft, Holland (Possible) PAPIDASE and Trichoderma conninji (Trichoderma koningii), Penicillum spPenicillum sp.), Etc. No.Example 14 Purification of EGIII from Cytolase 123 Cellulase Example 13 above describes the isolation of some components from Cytolase 123 Cellulase. Prove it. However, EGIII was very active in Cytolase 123 Cellulase. The following procedure was used to isolate this component as it is present in small amounts.A. Large-scale extraction of EGIII cellulase enzyme 100 l of cell-free cellulase filtrate was heated to about 30 ° C. About 4wt / vol of heating material % PEG 8000 (polyethylene glycol, molecular weight of about 8000) and about 10 wt / vol% Of anhydrous sodium sulfate. This mixture formed a two-phase liquid mixture . These phases were analyzed using a silver dye isoelectric focusing gel. Isolate Obtained for EGIII and xylanase. The recovered composition will contain approximately 20 to 50 weight percent. Contained EGIII of the product. For the above procedure, use of polyethylene glycol with a molecular weight of about 8000 ends. Provides adequate separation; while polyethylene polyethylene having a molecular weight above about 8000 The use of recall resulted in the elimination of the desired enzyme in the recovered composition. As for the amount of sodium sulfate, the level of sodium sulfate above about 10 wt / vol% Cause precipitation problems; while sodium sulfate levels below about 10 wt / vol% Gave a poor separation or solution that remained in a single phase.B. Purification of EGIII via fractionation Purification of EGIII produced by wild-type Trichoderma longibrachiatum Complete fungal cellulase composition (Genencor Internatponal, South San Francisco, C CYTOLASE 123 cellulase commercially available from A). In particular, this fractionation is performed using a column containing the following resin: Sigma Chemical C Sephadex G-25 gel filtration resin from ompany (St. Louis, Mo), IBF Biotechnics (Savage, Md) QA Trisacryl M anion exchange resin and SP Trisacryl M cation Exchange resin. CYTOLASE 123 cellulase, 0.5 g, was added to 10 mM sodium phosphate buffer at pH 6.8. Column of 3 liter Sephadex G-25 gel filtration resin with thorium buffer Was used to desalt. This desalted solution was then added to 20 ml of QA Trisacryl M anion exchange resin. Loaded on a fat column. The fraction bound to this column contains CBHI and EGI I was out. The fraction not bound to this column contains CBHII, EGII and EGIII. These fractions were collected on Sephadex G equilibrated with 10 mM sodium citrate, pH 4.5. Desalted using a column of -25 gel filtration resin. 200 ml of this solution is then added to 20 ml of SP T Loaded onto risacryl M cation exchange resin. EGIII, 200 mM sodium chloride Was eluted with 100 mL of an aqueous solution of. To enhance the efficiency of the isolation of EGIII, one or more of EGI, EGII, CBHI and / or Is a genetically modified Trichoderma ron that is incapable of producing CBHII. It may be desirable to use dibratiatum. More than 1 like this The absence of such components will necessarily lead to a more efficient isolation of EGIII. Similarly, the above EGIII composition is further purified to a substantially pure EGIII composition, That is, a composition comprising EGIII in excess of about 80 weight percent protein is provided. It may be desirable to do so. For example, EGII thus substantially pure I protein is in step B Obtainable using the material obtained from step A or vice versa Can be. A specific method of I for further purification of EGIII is described in Example 14 By further fractionation of the EGIII sample obtained in step b). This further minute Drawings are Mono (available from Pharmacia LKB Biotechnology, Piscataway, NJ) -Performed on an FPLC system using a S-HR 5/5 column. This FPLC system is Liquid Chromatography Controller, 2 Pumps, 2 Path Monitor, Minutes Picture collector and chart recorder (all of these are Pharmacia LKB Bi Available from otechnology, Piscataway, NJ. ) Consists of. This fraction 20 ml Sephadex G-25 column previously equilibrated with 10 mM sodium citrate pH 4. Desalting 5 ml of EGIII prepared in part b) of this Example 14 according to Was performed. The column is then loaded with 0-200 mM NaCl in water at a rate of 0.5 ml / min. Elution with a sex gradient and collecting samples in 1 ml fractions. EGIII is a picture Recovered within minutes 10 and 11 and was> 90% pure by SDS gel electrophoresis. Was measured. EGIII of this purity has the N-terminal amino acid sequence of the known art. Suitable for decisions. Substantially pure EGIII as well as the EGI and EGII components purified in Example 13 above. Can be used alone or in a mixture in the process according to the invention. These EG components have the following characteristics: 1. Optimum pH measured by RBB-CMC activity according to Example 15 below The use of a mixture of these components in the practice of the present invention provides a single component Give a cooperative response in improving softness, feel, appearance, etc. Can be. On the other hand, the use of a single component in the practice of the present invention is_s Len It can have a broader spectrum of activity across the spectrum or be more stable. An example For example, Example 15 below shows that EGIII significantly reduces RBB-CMC under alkaline conditions. It has the activity of.Example 15 Cellulase composition activity over pH range The following procedure was used to measure the pH profile of two different cellulase compositions Was. The first cellulase composition is unable to produce CBHI and CBHII components Trichoderma ron genetically modified in a manner similar to that previously described. CBHI and II deficient cellulase composition prepared from dibrachiatum. this A cellulase composition derived from Trichoderma longibrachiatum CBHI and CBHII, which generally make up about 58 to 70 percent of the composition, Therefore, this cellulase composition contains essentially no CBHI type and CBH II type cellulase components. , And therefore rich in EG components, namely EGI, EGII, EGIII, etc. The second cellulase composition was prepared by the same purification method as in Example 14 part b). Isolated from a cellulase composition derived from Rhicoderma longibrachiatum The fraction was about 20-40% pure of EGIII. The activity of these cellulase compositions was measured at 40 ° C and their measurement Was performed using the following procedure. 5-20 μl of aliquot at a concentration sufficient to provide the required amount of enzyme in the final solution. Add the appropriate enzyme solution. at pH 4, 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5 and 8 0.05M citrate / phosphate buffer 2% by weight of RBB-CMC (Mega Zyme, 6 Altona Place, North Rocks, N . S. W. 2151, Remazol Brilliant Blue R-Ca, commercially available from Australia Add 250 μl of rboxymethyl cellulose). Stir and incubate at 40 ° C. for 30 minutes. 0.3M sodium acetate And 1000 μl of methyl cellosolve containing 0.02 M zinc acetate. Centrifuge , And pour the supernatant into the cuvette. Absorbance of solution in each cuvette at 590 nm Measure the degree (0D). Higher levels of absorbance correspond to higher levels of enzyme activity. To respond. The results of this analysis are shown in FIG. Figure 9 compares to EGIII cellulase composition 1 shows the specific activity of CBHI and II deleted cellulase compositions. From this figure, CBHI The cellulase composition deleted in CBHII was found to be maximal for RBB-CMC around pH 5.5. It has a suitable cellulolytic activity and has an alkaline pH, i.e. a pH above 7-8. It turns out that it has some activity. On the other hand, EGIII-rich cellular The enzyme composition has optimum cellulolytic activity at pH 5.5-6 and It has considerable activity at potash pH. From the above examples, those skilled in the art will appreciate that the cellulase composition is active and Or adjust and maintain the pH of the aqueous fiber composition to have optimal activity. Will As mentioned above, such adjustment and maintenance is accomplished using a suitable buffer. Can be included.Example 16 Washing machine strength loss test of cellulase composition This example demonstrates the ability of various cellulase compositions to reduce the strength of cotton-containing fabrics. Check for power. This example uses an aqueous cellulase solution maintained at pH 5. I do. Because of the cellulase synthesis derived from Trichoderma longibrachiatum Most of the activity is pH 5 At or near, and therefore the strength loss result is This is because it will be the most clear when done at around pH. In particular, in this example, the analyzed first cellulase composition was a wild-type chicken. The complete fungal cellulase system (Genenc) produced by Koderma longibrachiatum or CYTOLASE commercially available from Iuternational, South San Francisco, CA 123 cellulase) and is identified as GC 010. The analyzed second cellulase composition was rendered incapable of expressing CBHII. Trichoderma longibra genetically modified in a manner similar to previous Examples 1-12 CBHII-deficient cellulase composition produced from ciatum, and with CBHIId To be identified. As long as CBHII makes up about 15 percent of its cellulase composition , Deletion of this component results in enhanced levels of all CBHI and EG components You. The analyzed third cellulase composition is capable of expressing CBHI and CBHII. Trichoderma was genetically modified in a similar manner to that described above CBHI and CBHII deficient cellulase composition produced from longibrachiatum , CBHI / IId. CBHI and CBHII are produced by this modified microorganism. Unless it is produced, cellulase is guaranteed to contain all CBHI type components as well as all CBH components. Not included. The last cellulase composition analyzed appeared to be unable to express CBHI Trichoderma longjib genetically modified in a manner similar to that previously described in CBHI-deficient cellulase composition produced from Laciatam, and CBHId Identified. Unless this modified microorganism can express CBHI, This cellular The ze composition does not necessarily contain all of the CBHI type cellulase components. The above cellulase composition was used to measure the strength loss of cotton-containing cloth in a launderometer. Tested for their effect on. These compositions were first mixed with an equal volume of EG. Minutes specified to be used. Each cellulase composition was then titrated to pH 5. Add to 400 ml separate solution of 20 mM citrate / phosphate buffer, and It contains 0.5 ml of nonionic surfactant. Each of the resulting solutions Was added to a separate washer canister. Within these canisters, strength loss A large amount of narbles and 16-inch x 20-inch cotton cloth (Te Style No. from st Fabrics, Inc., 200 Blackford Ave., Middlesex, NJ 08846. 100% cotton, available as 467) was added. Then put the lid on this canister And lower the canister into a washing meter bath maintained at 43 ° C. Was. The canister is then rotated for about 1 hour, at least about 40 revolutions per minute. Spin in the bath at a speed of (rpms). Then take out the cloth and thoroughly Rinse and dry in standard dryer. Repeat the above procedure more than once to maximize strength loss results, and After the first treatment, the cotton cloth was removed and analyzed for strength loss. Strength loss Loss, tensile strength in the weft direction ("FTS") using the Instron Tester , And the result was measured with the addition of cellulase. Compared to FTS of fabrics treated with the same solution except that The result of this analysis Report as the percent strength loss determined as follows: The results of this analysis are shown in Figure 10, which shows a composition containing CBHI, That is, total cellulase (GC 010) and CBHII deficient cellulase have the highest strength loss. On the other hand, a composition containing no CBHI was used for the whole cellulase and CBHII deficient cellular. Indicating that it had a significantly reduced strength loss compared to ze. these The results show that the presence of CBHI type components in the cellulase composition does not include CBHI type components. Found to impart increased strength loss to the composition as compared to similar compositions. You. Similarly, these results indicate that CBHII plays some role in strength loss. It indicates that Therefore, in view of these results, the strength loss resistant cellulase composition is All CBHI cellulase components, and preferably all CBH cellulase components It is a composition containing no iron. In this regard, such cellulase compositions Is more at pH ≧ 7 than the results observed at pH 5 shown in FIG. It is contemplated that it will result in low strength loss. During the manufacture of cotton-containing fabrics, the fabric can be stressed, and so When force is applied, it will break, but will contain disordered fibers. this Such fibers have a worn and dull appearance on the cloth. Is given dramatically. However, the method according to the invention results in fabric / color enhancement. It has been discovered that it will. This is the cloth before it becomes stressed Caused by the removal of some of the disrupted and disordered fibers that have the effect of restoring the appearance of Is believed to be. Examples 17 and 18 below illustrate this advantage of the invention. Examples of these Note the use of a clean cotton T-shirt (knit) as well as a new cotton knit. thing. The faded appearance of this grated cotton-containing cloth is And broken face fiber cloth Results from the accumulation of. These fibers make the fabric faded and matte. Resulting in a matted appearance, and thus the removal of these fibers It is a necessary precondition for the cloth to restore its original clean color. Therefore, new cotton The buildup of broken surface fibers on the knit gives the fabric a hazy appearance. Obedience Therefore, these experiments are necessarily applicable to the color enhancement of stressed cotton-containing fabrics. It is. Because both are involved in removing surface fibers from the fabric.Example 17 Color enhancement The ability of the EG component to enhance color in cotton-containing fabrics was analyzed in the following experiments. Was. Especially the first experiment removes surface fibers from cotton-containing fabrics over different pH Complete cellular produced by wild type Trichoderma longibrachiatum for Ze system (commercially available from Genencor Iuternational, South San Francisco, CA) CYTOLASE 123 cellulase). Use this cellulase in the washing machine Was tested for its ability to remove surface fibers. 25 ppm or 10 in final composition Appropriate amount of cellulase to provide 0 ppm of either cellulase, 0.5 ml of Separate 400 ml of 20 mM citrate / phosphate buffer with nonionic detergent Was added to the solution. Provide samples at pH 5, pH 6, pH 7 and pH 7.5 Samples were prepared and titrated. Each of the resulting solutions is then separated into separate Added to washing machine canister. Easy fiber removal in these canisters A large amount of pebbles and cotton cloth measuring 7 inches x 5 inches (Test Fabrics, Inc., Style No. from 200 Blackford Ave, Middlesex, NJ 08846. Available as 439 W 100% woven cotton) was added. Then cover the canister, and the canister 43 ℃ star It was dropped into the washing machine maintained at. Next, let this canister run for about an hour Spinning was carried out in the bath at a speed of at least about 40 revolutions per minute (rpms). Then the cloth Was removed, rinsed thoroughly, and dried in a standard dryer. The fabric so treated was then subjected to fiber removal as assessed in panel tests. (Fiber removal) was analyzed. In particular, these cloths (not marked) Were graded for fiber level. Attach these cloths to the surface fibers. It was visually evaluated and graded 0-6. Grade is of significance We have six standards to allow some comparisons. These standards are Of. Grade standard ^a 0 Cloth not treated with cellulase Cloth treated with 18ppm cellulase^b 2 Cloth treated with 16ppm cellulase 3 Cloth treated with 20ppm cellulase 4 Cloth treated with 40ppm cellulase Cloth treated with 50ppm cellulase 6 Cloth treated with 100ppm cellulase a In all of these standards, the fabric is Test Fabrics, Inc., 200 Blackf 100% cotton sheet material standardization test available from ord Ave, Middlesex, NJ 08846 It was cloth (Style No. 439 W). b All samples were treated with the same cellulase composition. Cellulase concentration is For all proteins. The washing machine treatment conditions are as described in Example 16 above. Is the same as. The fabric to be graded provides the grade that most closely fits one of the above standards. Was. After a complete analysis of the above cloth, all of the individuals The values specified for each fabric were added and the average value was obtained. The results of these analyzes are shown in Figure 11. In particular, FIG. 11 shows that administration at the same pH It shows that a dose-dependent response was seen in the amount of fiber removed. That is, the same At one pH, more cellulase-treated fabric will have less cell strength. It provided a higher level of fiber removal compared to the lulase treated fabric. So Above, the results of this figure show that at higher pH, fiber removal was still Prove that it can be done by simply using cellulase ing. In a second experiment, two different cellulase compositions were tested for their ability to remove fibers. Were compared. In particular, the analyzed first cellulase composition was Complete cellulase system produced by Luma longibrachiatum (Genencor Iuter CYTOLASE 123 series, commercially available from national, South San Francisco, CA Lulase) and was identified as GC 010. The second cellulase composition analyzed is capable of expressing CBHI and CBHII. Trichoderma genetically modified in a manner similar to that described previously so that no ・ All of CBH type ingredients (including CBHI type ingredients) produced from Lonzibrachiatum Cellulase composition substantially free of and identified as CBHI / II deletion Is done. CBHI and CBHII make up about 70 percent of the cellulase composition As long as the deletion of this component results in all enhanced levels of the EG component. this The compositions were tested for their ability to remove surface fibers in the laundry scale. Most Add 0.5 ml of the appropriate amount of cellulase to provide the required concentration of EG component in the final composition. Separate 400 ml of 20 mM citrate / phosphate buffer with nonionic detergent Was added to the solution. Samples were prepared and titrated to pH 5. Of the resulting solution Each was then added to a separate washer canister. In these canisters And a large amount of pebbles and a 7 inch x 5 inch cotton cloth to facilitate fiber removal ( Style No. from Test Fabrics, Inc., 200 Blackford Ave, Middlesex, NJ 08846. 100% woven cotton available as 439 W) was added. Then put a lid on this canister The canister was then lowered into a washing scale maintained at 43 ° C. next, Run the canister at a speed of at least about 40 revolutions per minute (rpms) for about 1 hour. It was rotated in the bath. Then remove the cloth, rinse it thoroughly, and remove it with a standard Dried in the layer. The fabric so treated was then subjected to evaluation in the panel test described above. More fiber removal was analyzed. The result of this analysis is the estimated EG concentration. It is described in FIG. 12, which is plotted above. In particular, Figure 12 shows that GC 010 and CBHI / II are missing. Both of the cellulase depletion compositions are at substantially equal endoglucanase concentrations. , Gave substantially the same fiber removal results. The result of this figure is It is suggested that it is the EG component that provides fiber removal. Together with the results in Figure 11. These results demonstrate that the EG component removes surface fibers.Example 18 Tergotometer color enhancement This example follows Example 17, and no CBH-type component is required for color enhancement. And the purpose of this example is to enhance color for cotton-containing fabrics, CBH molding. The ability of the defective cellulase composition to be tested. In particular, the cellulase composition used in this example produces CBHI and CBHII. Genetically modified in a similar manner to that described above so that it cannot Tricoderma Longibrachiatum As long as this composition is produced, all of the CBH type ingredients (including CBHI type ingredients) Not qualitatively included. CBHI and CBHII account for up to about 70 percent of this cellulase composition As long as it accounts for the loss of this component, it results in all enhanced levels of the EG component. You. Assay the cellulase composition at a concentration sufficient to provide 500 ppm of cellulase. Was added to 50 mM citrate / phosphate buffer. This solution The solution was titrated to pH 5 and 0.1 weight percent of nonionic surfactant (Gresco Mfg., Thomasville, N.M. C. Grescoterg GL 10 commercially available from 27360 0) was included. 10 inch x 10 inch faded cotton-containing cloth and 10 inch x 10 inch A new knitted fabric with loose and broken surface fibers Place in the above buffer and let stand for 30 minutes at 110 ° F and then 30 Stirred at 100 rpms for minutes. Then remove these cloths from the buffer Washed, and dried. The resulting fabric was then compared to the untreated fabric. This minute The results of the analysis are as follows: The term “benefit seen” means that the treated fabric is tergotometer. Treatment including removal of destroyed surface fibers, including surface fibers resulting from the use of Means that it shows more color recovery (ie less faded) than fabric cloth You. These results are due to the presence of the CBH type component to provide color recovery for faded cotton-containing fabrics. The results of Example 17 that are not required for are demonstrated. Such a composition can be produced during processing without detrimental strength loss to the fabric. This will remove broken / loose fibers It is contemplated that such cellulase compositions will be beneficial during textile processing.Example 19 soft In this example, the presence of the CBH type component is not sufficient to impart improved softness to cotton-containing fabrics. Prove that it is not essential. In particular, this example produces CBHI and II ingredients. Trichoderma genetically engineered in the manner described above so that it cannot ・ Cellular derived from longibrachiatum that does not contain all CBH-type components ZE composition is used. Apply this cellulase composition to terry wash cloth. Was tested for its ability to soften. In particular, (Test Fabrics, Inc., 20 0 Style No. from Blackford Ave, Middlesex, NJ 08846. Available as 420 NS ) 14 inch x 15 inch non-softening 8.5 inch cotton terry cloth 7 inch x 7. Cut into a 5 inch piece of cloth. The above cellulase composition has the ability to soften these swatches in a washing machine. Tested for power. Especially in the final cellulase solution, 500ppm, 250ppm, 100ppm CBHI and II deletion cells in appropriate amounts to provide cellulase at 50, 50, and 10 ppm. Lulase containing 0.025 weight percent nonionic surfactant (Triton x 114) 20 mM citrate / phosphate buffer was added to 400 ml of separate solutions. further, A blank containing the same solution but without any addition of cellulase was run. Sun The pull was titrated to pH 5. Each of the resulting solutions is then placed in a separate laundry scale canister. Was added. Inside these canisters, a large amount to facilitate softness Pebbles and cotton swatches described above were added. All conditions are canisters -Two per I ran three trains with swatches. Next, cover each canister, Then, the canister was dropped into a washing scale maintained at 37 ° C. Next And rotate the canister in the bath at a speed of at least 40 rpms for about 1 hour. I let you. Then remove the swatch, rinse thoroughly, and clean with a standard dry liner. Dried in-house. Next, the swatches were analyzed for softness by evaluation in a taste test. Special Giving six panelists their own set of cloth, and a measure of softness, For example, to grade them for softness based on the overall softness of the fabric I asked. Scrap the cloth and blank obtained from the treatment with 5 different enzyme concentrations. Place it on the back of the lean, and tell the panelists, from least softest to most Asked them to be ordered up to the soft ones. Compare the grade to other rags We assigned each swatch based on its order of number; 5 is the softest and 0 is the most. Not too soft. The grades from each panelist were added and averaged. The result of this average is shown in FIG. In particular, these results are And prove that improved softness is obtained. This improved softness Bulkness is achieved without the presence of either CBHI or II in the cellulase composition. Note that.Example 20 Feel and appearance This example demonstrates that the presence of a CBH type component imparts improved feel and appearance to cotton-containing fabrics. Prove that it is not essential to In particular, this example uses the CBH type component Being unable to produce gaps (ie producing CBHI and II ingredients) So that it cannot be) genetically engineered in the manner described above. Luma Longe A cellulase composition obtained from Braciatum is used. Test this cellulase composition for its ability to improve the appearance of cotton-containing fabrics did. Especially (Test Fabrics, Inc., 200 Blackford Ave., Middlesex, NJ 08846 To Style No. Available as 439 W) 100% cotton sheet material of appropriate size, It was used for the appearance of this example. The cellulase composition described above improves the appearance of these samples in the wash scale. Tested for their ability to do. Especially in the final cellulase solution 25ppm, 50ppm, And a suitable amount of CBHI and II deficient cellulase to provide 100 ppm cellulase. , 20 mM citric acid with 0.25 weight percent nonionic surfactant (Triton x 114) Salt / phosphate buffer was added to 400 ml of separate solutions. In addition, including the same solution However, a blank containing no cellulase added was run. So prepared The obtained sample was titrated to pH 5. Each of the resulting solutions is then placed on a separate laundry scale. Added to canister. Easy to improve in appearance within these canisters A large amount of pebbles to make the above as well as the cotton sample described above were added. Each canis The tar is then covered and the canister is washed at about 40 ° C. It was dropped into the measuring bath. Then run this canister at a speed of at least about 40 rpms for about 1 hour The bath was rotated in degrees. Then remove the sample, rinse thoroughly, Then, it was dried in a standard dryer. The sample is then analyzed for improved appearance upon evaluation in a taste test. Was. In particular, giving 6 (unidentified) 4 samples to 6 panelists, And asked them to grade them for appearance. These panelists The term "appearance" refers to the physical appearance of the cotton-containing cloth to the eye. Partly due to the presence or absence of fluff, surface fibers, etc. on the surface of the fabric. , And whether or not the structure (wave) of the cloth can be distinguished I was instructed that it would be decided more. It has few fluff and surface fibers, if any, and Cloths whose structure (wave) can be clearly discerned are fluffy and / or Improved over fabrics with loose fibers and / or indistinguishable waves It has a beautiful appearance. The panelist then gives each sample, based on its order relative to the other samples, Specified grades specified; 4 has the best appearance, and 1 has the worst appearance One. The grades from each panelist were added and then averaged. The result of this test Is like this: The CBHI and II deficient cellulase composition is then tested for its ability to improve the feel of cotton-containing fabrics. Was tested. In particular, (Test Fabrics, Inc., 200 Blackford Ave., Midd Style No. from lesex, NJ 08846. 100% of suitable size (available from 439 W) A cotton sheet material was used on the feel side of this example. The cellulase composition described above improves the feel of these samples in the wash scale. Was tested for ability. Especially, in the final cellulase solution, 500ppm, 1000ppm, and And 2000 mM cellulase in an appropriate amount of 20 mM citrate / Added to 24 L separate solution of phosphate buffer. In addition, including the same solution, A blank with no addition of cellulase was run. Perform all tests at pH 5. 8 and run in an industrial washing machine. This washing machine is 50 ℃, full capacity Operating at 24 L, 50: 1 liquid to cloth ratio (weight to weight), and operating this washing machine at 30 I ran for a minute. Then remove the sample and dry in an industrial dryer I let it. The sample is then analyzed for improved feel as assessed by the preference test. Was analyzed. In particular, we gave 5 panelists 4 (unidentified) samples , And asked to grade them for feel. The panelists are A cloth with a good feel is smoother to the touch and silky than other cloths. And the feel is of quality, for example softness (rather than the feel of a cloth Softness), thickness, color, or other physical characteristic that is not related to the smoothness of the fabric. I was instructed to be distinguished from the signs. The panelist then gives each sample etc. based on its order with respect to the other samples. A grade was specified; 4 is the best feel, and 1 is the worst feel. Each panel The grades from the strike were added and then averaged. The results of this test are as follows Is something like: The above results show that the improvement in feel and appearance is achieved with cellular that does not contain all CBH type components. It will be demonstrated that this can be achieved with a ze composition.Example 21 Stone wash appearance In this example, the presence of a CBH type component was found to cause stone-wash Demonstrate that it is not essential for imparting a visual appearance. In particular, this embodiment So that it cannot produce any of the CBH-type ingredients (ie CBHI And the component II is engineered in the manner described above (so that it cannot produce the II component). Derived from Trichoderma longibrachiatum and Trichoderma ・ A complete cellulase composition derived from lonzibrachiatum is Genencor Iuterna Available as Cytolase 123 Cellulase from National, South San Francisco, CA Use something Apply these cellulase compositions to dyed cotton-containing denim pants with stone Tested for their ability to impart a wash appearance. Especially the sample , Prepared using an industrial washing machine and dryer under the following conditions: 10 mM citrate / phosphate buffer pH 5 40L total capacity 110 ° F 4 denim pants 1 hour operation time 50 ppm CBHI and II deficient cellulase or 100 ppm total cellulase (ie, approximately equal to EG concentration) Samples were given by eight panelists to their stone wash appearance. And evaluated. All eight panelists had better stone wash Choose 100ppm whole cellulase over non-enzymatic pants as it looks It is. 4 out of 8 panelists had a better stone wash look CBHI and II deficient cellulase treated pants are preferred over all cellulase On the other hand, the other four panelists had a better stone wash look All cellulase-treated pants were selected as those with. These results show that CBHI and II-deficient cellulase-treated pants were treated with whole cellulase-treated CBHI and / or CBHII are not suitable for cotton-containing fabrics. It shows that it is not essential for imparting a tone wash appearance. For Examples 16-21, no CBHI type component and Trichoderma longi Cellulase compositions derived from microorganisms other than Braciatum have been described in these examples. It could be used in place of the cellulase composition described above. Special In addition, the source of the cellulase composition containing the EG type component is not the weight for the present invention, And contains one or more EG type components, and is substantially free of all CBHI type components Any fungal cellulase composition can be used in the present invention. example For use in the preparation of fungal cellulase compositions used in the present invention Fungal cellulase of Trichoderma konjinji (Trichoderma koningii),pen Siram SP (Pencillum sp.), Etc., or commercially Cellulase available, ie (from Novo Industry, Copenhagen, Deumar CELLUCAST (available) (available from Gist Brocades, NV, Delft, Holland) ) RAPIDASE, etc. can be used.Example 22 Reinforcing properties of cotton-free cellulosic fabrics This example enhances the appearance, softness and surface gloss of cotton-free cellulosic fabrics. Demonstrate the potency of EG cellulase composition. 200 kg Jet Dyer machine with cotton-free cells Loin-based cloth TENCEL^TMIt was used to evaluate the toughening properties of. About 10kg 100% TE NCEL^TMA medium-weight woven fabric is loaded into the machine in rope form and end-to-end. Sewn up. This method works on unbleached, unbleached (greige) or dyed fabrics. I can. 150 to 200 liters of water in the jet machine (This represents a liquid to cloth ratio of about 15-20: 1) and 120-140 ° F ( Heated to 50-60 ° C). The pH is 3.6 g / l (56%) acetic acid and 1.9 g / l (50%) hydroxy acid. Adjusted to 4.5-5.0 with sodium iodide. Add sodium hydroxide to the above machine Slowly added to dilute acetic acid solution before dosing. Next, use a non-imaging solution of 0.25 to 0.5 ml / l. An on-type wettable powder (Triton X-100) was added to this solution. This pH is the temperature Ensure that it is between 4.5 and 5.0 and its temperature is between 50 and 60 ° C I checked for it. Next, 3-4 g / l of the enhanced EG cellulase composition was added. . This enhanced EG cellulase composition is a cellulase set that does not contain all of the CBH type components. A product that is unable to produce CBHI and II components and overproduces EGI Trichoderma longibrachi genetically engineered in the manner described above to Comprising those derived from Atam. Run the jet for 30-60 minutes after adding the enhanced EG cellulase composition. I let you. At the end of the cycle, add 0.25 g / l soda ash to the liquor, and I ran for 10 minutes. Drop the liquid from the jet, then fill the jet again with water. And the cloth was rinsed once more. Take this cloth out of the jet, And dried. Finally, exhaust the silicone-based finish onto the fabric did. Cloth spill was analyzed for softness and surface appearance by evaluation in a taste test. Was. In particular, four panelists were given their own cloth set, and the softness and surface We asked them to grade them for surface appearance. Softness is soft It was based on criteria such as overall fabric softness. The surface appearance depends on what is present on the cloth. Based on the amount of fibers or fluff. Compare the swatch to the non-enzyme treated cloth control, and For softness measurements, an additional object is complete fungal cellular A fabric treated with the hose composition was included. Assign a grade to each swatch and then The equivalent class was tabulated from four panelists. Best about softness and surface appearance A value of 5.0 was specified for the grade. Least softness and least etc. about the most fluff A value of 0 was specified for the class. The results of this averaging are shown in Figures 14 and 15. In particular, these results Fruit demonstrates that softness and surface appearance were both improved after EG cellulase treatment. You. Furthermore TENCEL^TMThe surface appearance of the fabric is maintained after 10 home launderings, while the control The surface appearance of the fabric was substantially reduced. EG enhanced cellulase composition treated TENCEL^TMFurther comparison of fabrics, all cellular Z-processed TENCEL^TMCompared to cloth (Figure 14). In this embodiment, a piece of cloth is Softness was analyzed by evaluation in a taste test. To four panelists To give them their own cloth set and grade them for softness I asked. Softness was based on the above criteria and panel rating. All the cells It was compared to the transferase-treated cloth control. Assign a grade to each swatch and give an average grade of 4 Tabulated from the panelists. The result of this average is shown in FIG. In particular, these results Fruit is EG-enhanced cellulase treated TENCEL^TMThe cloth is more average than the all-cellulase treated cloth control Prove that it was softer.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者ラレナス，エドムンドアメリカ合衆国，カリフォルニア 94080, サウスサンフランシスコ，キンボールウェイ 180，ジェネンカーインターナショナル，インコーポレイティド (72)発明者ウェイス，ジョフリー．エルアメリカ合衆国，カリフォルニア 94080, サウスサンフランシスコ，キンボールウェイ 180，ジェネンカーインターナショナル，インコーポレイティド────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of front page (72) Inventor Larenas and Edmund United States, California 94080, South San Francisco, Kimball Way 180, Genenker Internal Sional, Inc. (72) Inventor Weiss, Joffrey. El United States, California 94080, South San Francisco, Kimball Way 180, Genenker Internal Sional, Inc.

Claims

[Claims] 1. Contains exo-cellobiohydrolase type I component and endoglucanase type component Treatment of the fabric with a composition comprising a complete fungal cellulase composition comprising Enhance the feel and / or appearance to cotton-free cellulosic fabrics during the manufacture of And / or modifications to provide color enhancement and / or stone wash appearance A good method, the improvement of which includes one or more EG type components and one or more CBHI type components. A fungal cellulase composition comprising: more than 5: 1 total EG-type components to total CBHI Comprising using a composition comprising one having a protein component weight ratio of mold component A method consisting of. 2. The fungal cellulase composition comprises one or more EG type components and one or more CBH type components And a protein weight ratio of all EG-type components to all CBH-type components greater than 5: 1. The method of claim 1, comprising: 3. The fungal cellulase composition contains more than 10: 1 total EG-type components versus all CBH-type components. The method of claim 2 having a protein weight ratio. 4. The fungal cellulase composition comprises the total weight of proteins in the cellulase composition. The composition of claim 1 comprising at least about 20 weight percent EG-type component based on How to list. 5. Comprising a complete fungal cellulase composition comprising CBHI type and EG type components Treatment of the fabric with an aqueous fungal cellulase solution to prevent the production of cotton-free cells during the manufacture of the fabric. Enhance the feel and / or appearance of loin-based cloth, or color enhance and / or stow An improved method for providing a washed wash appearance, which method The cell under conditions that create a cascade effect of the cellulase solution It is carried out with the stirring of the lucase solution, and the improvement is one or more EG type components and one or more CBH. A fungal cellulase composition comprising a type I component comprising: Those with a protein weight ratio of all EG-type components to all CBHI-type components greater than 5: 1 A method such as comprising using an aqueous composition comprising. 6. The fungal cellulase composition comprises one or more EG type components and one or more CBH type components And a protein weight ratio of all EG-type components to all CBH-type components greater than 5: 1. The method of claim 5, comprising: 7. The fungal cellulase composition contains more than 10: 1 total EG-type components versus all CBH-type components. 7. The method of claim 6 having a protein weight ratio. 8. The fungal cellulase composition comprises the total weight of proteins in the cellulase composition. The composition of claim 5 comprising at least about 20 weight percent EG type component based on How to list. 9. A cotton-free cellulosic cloth produced by the method of claim 1. Ten. A cotton-free cellulosic cloth produced by the method of claim 5.