JPH09229932A - 抗ゼラチン抗体の測定法 - Google Patents
抗ゼラチン抗体の測定法Info
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- JPH09229932A JPH09229932A JP8073333A JP7333396A JPH09229932A JP H09229932 A JPH09229932 A JP H09229932A JP 8073333 A JP8073333 A JP 8073333A JP 7333396 A JP7333396 A JP 7333396A JP H09229932 A JPH09229932 A JP H09229932A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】本発明は、
イ、血液中の抗ゼラチン抗体、そのアレルゲンとなるゼ
ラチン動物種及びその分画を測定する方法と試薬 ロ、特定動物のみから得られるゼラチンと、これを添加
した食品・薬剤に関する物である。 【構成】以下の通り、構成する。 イ、血液中の抗ゼラチン抗体とその由来動物種を免疫反
応を用いて測定する方法とその試薬 ロ、血液中の抗特定分画ゼラチン抗体を免疫反応を用い
て測定する方法とその試薬 ハ、ゼラチンを用いた皮内反応法とその注射剤 ニ、ゼラチンを用いたパッチ反応法とその試薬 ホ、食品・薬剤中のゼラチンの存在とその由来動物種を
測定する方法とその試薬 ヘ、特定動物由来のゼラチンとこれを添加した食品・薬
剤
ラチン動物種及びその分画を測定する方法と試薬 ロ、特定動物のみから得られるゼラチンと、これを添加
した食品・薬剤に関する物である。 【構成】以下の通り、構成する。 イ、血液中の抗ゼラチン抗体とその由来動物種を免疫反
応を用いて測定する方法とその試薬 ロ、血液中の抗特定分画ゼラチン抗体を免疫反応を用い
て測定する方法とその試薬 ハ、ゼラチンを用いた皮内反応法とその注射剤 ニ、ゼラチンを用いたパッチ反応法とその試薬 ホ、食品・薬剤中のゼラチンの存在とその由来動物種を
測定する方法とその試薬 ヘ、特定動物由来のゼラチンとこれを添加した食品・薬
剤
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、 イ、血液中の抗ゼラチン抗体、そのアレルゲンとなるゼ
ラチン動物種及びその分画を測定する方法と試薬 ロ、特定動物のみから得られるゼラチンと、これを添加
した食品・薬剤に関する物である。
ラチン動物種及びその分画を測定する方法と試薬 ロ、特定動物のみから得られるゼラチンと、これを添加
した食品・薬剤に関する物である。
【０００２】
【従来の技術】従来、ゼラチンアレルギー者を発見する
には、反応を起こした食品や薬剤の共通成分を推定いく
のが一般的で、時間を要した。又、専門医にゼラチンア
レルギー者と診断されても、ゼラチンは、様々な食品や
薬剤に微量ずつ含まれているのでどの食品を避けるべき
か不明で、又ゼラチンアレルギー者用の食品もない。更
にゼラチンアレルギー者は、一般に用いられる薬剤、例
えば疾病予防の為に当然投与されるべき必要なワクチン
も、ゼラチンを含む為、時には避けなくてはならなかっ
た。
には、反応を起こした食品や薬剤の共通成分を推定いく
のが一般的で、時間を要した。又、専門医にゼラチンア
レルギー者と診断されても、ゼラチンは、様々な食品や
薬剤に微量ずつ含まれているのでどの食品を避けるべき
か不明で、又ゼラチンアレルギー者用の食品もない。更
にゼラチンアレルギー者は、一般に用いられる薬剤、例
えば疾病予防の為に当然投与されるべき必要なワクチン
も、ゼラチンを含む為、時には避けなくてはならなかっ
た。
【０００３】
【発明が解決しょうとする課題】本発明者は、長い間、
ゼラチンアレルギー者の簡便な発見方法、食品・薬剤中
の微量ゼラチンの検出方法、及びゼラチンアレルギー者
用の食品・薬剤の研究に努めた。
ゼラチンアレルギー者の簡便な発見方法、食品・薬剤中
の微量ゼラチンの検出方法、及びゼラチンアレルギー者
用の食品・薬剤の研究に努めた。
【０００４】
【課題を解決するための手段】その結果、本発明者は、
ゼラチンアレルギー者の簡便な発見方法として、下記
１、２、４、３を確立した。
ゼラチンアレルギー者の簡便な発見方法として、下記
１、２、４、３を確立した。
【０００５】１血液中の抗ゼラチン抗体とその由来動物
種を免疫反応を用いて測定する方法とその試薬。ヒト血
清中の抗ゼラチン抗体を、酵素免疫反応（ＥＬＩＳＡ）
で測定する時、どの種のゼラチンと交叉するか知る為、
あらかじめ動物種が明確なゼラチンを、種別にプレート
にコートする事、及び抗ゼラチン抗体として、ＩｇＥを
捕捉する為、第二抗体として、抗ヒトＩｇＥ抗体を用い
る測定法及びその試薬。つまり試薬として、１）各種動
物由来のゼラチンをコートしたプレート２）酵素標識抗
ヒトＩｇＥ抗体３）発色基質（ＴＭＢ，過酸化水素）
４）反応停止液（硫酸）を用い、一般の酵素免疫反応に
よりヒト血清を検体として測定する。
種を免疫反応を用いて測定する方法とその試薬。ヒト血
清中の抗ゼラチン抗体を、酵素免疫反応（ＥＬＩＳＡ）
で測定する時、どの種のゼラチンと交叉するか知る為、
あらかじめ動物種が明確なゼラチンを、種別にプレート
にコートする事、及び抗ゼラチン抗体として、ＩｇＥを
捕捉する為、第二抗体として、抗ヒトＩｇＥ抗体を用い
る測定法及びその試薬。つまり試薬として、１）各種動
物由来のゼラチンをコートしたプレート２）酵素標識抗
ヒトＩｇＥ抗体３）発色基質（ＴＭＢ，過酸化水素）
４）反応停止液（硫酸）を用い、一般の酵素免疫反応に
よりヒト血清を検体として測定する。
【０００６】もちろん、免疫反応として、酵素免疫反応
に限定されず、ＲＩＡ，免疫発光法、凝集反応他を含
み、酵素標識の抗体としては、ポリクローナル又はモノ
クローナル抗体を問わず、又それを放射性物質、発光物
質で標識した物、無標識物でも良い。プレートをゼラチ
ンでコートする時、プレート毎に動物種を変えても良い
が、同一プレートの穴毎にかえて、パネルにする方が望
ましい。同一検体と複数のゼラチンとの反応を、一目で
観察できるからである。又、動物種毎にプレートや穴
に、マークや色をつければ識別しやすい。用いるゼラチ
ンの動物種としては、ウシ、ブタ、ニワトリ、羊、鮭、
タコ等、又これに限定されない。単に、ゼラチン抗体を
検出するなら、プレートにコートするゼラチンは、複数
種を混合したもので良いが、それでは、避けるべきゼラ
チンの動物種までは明確に成らない。更に第二抗体は、
抗ヒトＩｇＥ抗体に限定されず、抗ヒトイムノグロブリ
ン抗体でも良いが、抗ヒトＩｇＥ抗体の方が望ましい。
に限定されず、ＲＩＡ，免疫発光法、凝集反応他を含
み、酵素標識の抗体としては、ポリクローナル又はモノ
クローナル抗体を問わず、又それを放射性物質、発光物
質で標識した物、無標識物でも良い。プレートをゼラチ
ンでコートする時、プレート毎に動物種を変えても良い
が、同一プレートの穴毎にかえて、パネルにする方が望
ましい。同一検体と複数のゼラチンとの反応を、一目で
観察できるからである。又、動物種毎にプレートや穴
に、マークや色をつければ識別しやすい。用いるゼラチ
ンの動物種としては、ウシ、ブタ、ニワトリ、羊、鮭、
タコ等、又これに限定されない。単に、ゼラチン抗体を
検出するなら、プレートにコートするゼラチンは、複数
種を混合したもので良いが、それでは、避けるべきゼラ
チンの動物種までは明確に成らない。更に第二抗体は、
抗ヒトＩｇＥ抗体に限定されず、抗ヒトイムノグロブリ
ン抗体でも良いが、抗ヒトＩｇＥ抗体の方が望ましい。
【０００７】２血液中の抗特定分画ゼラチン抗体を免疫
反応を用いて測定する方法と試薬。各動物種のゼラチン
を電気泳動で分画した後、この各分画を採取し、前述
「１」と同様に、プレートにコートする。他は前述
「１」と同様の試薬と測定法である。これにより、抗ゼ
ラチン抗体と反応する動物種のみならず、反応するゼラ
チンの分画まで確定できる。
反応を用いて測定する方法と試薬。各動物種のゼラチン
を電気泳動で分画した後、この各分画を採取し、前述
「１」と同様に、プレートにコートする。他は前述
「１」と同様の試薬と測定法である。これにより、抗ゼ
ラチン抗体と反応する動物種のみならず、反応するゼラ
チンの分画まで確定できる。
【０００８】３ゼラチンを用いた皮内注射法とその注射
剤 各動物種由来の微量のゼラチンを、例えばウシ、ニワト
リ、サケの、１μｇ〜０．０１μｇ／ｍｌを各別個のリ
ン酸バッファーに溶解し、その０．１ｍｌ〜０．０１ｍ
ｌを皮内注射し、その部位に発赤を生じる時にどの動物
種由来のゼラチンに陽性かを判定できる。この時、ゼラ
チンは、前述「２」の電気泳動分画を用いれば、より適
格にアレルゲンを推定できる。ゼラチンの注射量は、濃
度０．０１μｇ／ｍｌの液を、０．０１ｍｌ投与で、充
分であるが、これに限定されない。溶解液は、リン酸バ
ッファーが望ましいが、それ自身が反応に影響を与えな
いものであれば、代用できる。
剤 各動物種由来の微量のゼラチンを、例えばウシ、ニワト
リ、サケの、１μｇ〜０．０１μｇ／ｍｌを各別個のリ
ン酸バッファーに溶解し、その０．１ｍｌ〜０．０１ｍ
ｌを皮内注射し、その部位に発赤を生じる時にどの動物
種由来のゼラチンに陽性かを判定できる。この時、ゼラ
チンは、前述「２」の電気泳動分画を用いれば、より適
格にアレルゲンを推定できる。ゼラチンの注射量は、濃
度０．０１μｇ／ｍｌの液を、０．０１ｍｌ投与で、充
分であるが、これに限定されない。溶解液は、リン酸バ
ッファーが望ましいが、それ自身が反応に影響を与えな
いものであれば、代用できる。
【０００９】４ゼラチンを用いたパッチ反応法とその試
薬。各種動物由来の、例えばウシ、ニワトリ、鮭由来の
微量のゼラチン、例えば１ｍｇ〜０．５μｇ／平方ｃｍ
を各別個のパッチに付着させ、これを、通常のパッチ試
験と同様、背部に貼り、その部位に発赤を生じる時、ど
の動物由来のゼラチンに陽性か判定できる。この時、ゼ
ラチンは、前述「２」の電気泳動分画を用いれば、より
適格にアレルゲンを推定できる。
薬。各種動物由来の、例えばウシ、ニワトリ、鮭由来の
微量のゼラチン、例えば１ｍｇ〜０．５μｇ／平方ｃｍ
を各別個のパッチに付着させ、これを、通常のパッチ試
験と同様、背部に貼り、その部位に発赤を生じる時、ど
の動物由来のゼラチンに陽性か判定できる。この時、ゼ
ラチンは、前述「２」の電気泳動分画を用いれば、より
適格にアレルゲンを推定できる。
【００１０】従来ゼラチンアレルギーと称されていた人
が、全ての動物由来のゼラチンに反応するものではな
く、ウシ由来のみに反応することを発見した。又、特定
分画としてウシ由来α２のみと反応した。他方各種市販
ゼラチンを調べたところその由来は全てウシであった。
ウシがゼラチンの原料として繁用されるから、いわゆる
ゼラチンアレルギー者は、ウシ由来のゼラチンのみに反
応するのである。ゼラチンとしてブタが汎用されれば、
ゼラチンアレルギー者のアレルゲンは、ブタゼラチンに
特定される可能性を示す。これは、「ゼラチンはコラー
ゲンの変性したものであり、コラーゲンは構造上動物種
差がないから、どの動物由来のゼラチンも一緒だろう。
だから、ゼラチンアレルギー者は、全ての動物由来のゼ
ラチンに反応するはずだ。」と言う一般の思い込みを否
定するものであった。つまり、ゼラチンは、構造上、機
能上、由来動物の種差はないが、アレルギー反応のよう
な免疫上の違いを示すと言う事である。本発明者は、以
上の発明と発見から、更に下記５・６の発明を完成し
た。
が、全ての動物由来のゼラチンに反応するものではな
く、ウシ由来のみに反応することを発見した。又、特定
分画としてウシ由来α２のみと反応した。他方各種市販
ゼラチンを調べたところその由来は全てウシであった。
ウシがゼラチンの原料として繁用されるから、いわゆる
ゼラチンアレルギー者は、ウシ由来のゼラチンのみに反
応するのである。ゼラチンとしてブタが汎用されれば、
ゼラチンアレルギー者のアレルゲンは、ブタゼラチンに
特定される可能性を示す。これは、「ゼラチンはコラー
ゲンの変性したものであり、コラーゲンは構造上動物種
差がないから、どの動物由来のゼラチンも一緒だろう。
だから、ゼラチンアレルギー者は、全ての動物由来のゼ
ラチンに反応するはずだ。」と言う一般の思い込みを否
定するものであった。つまり、ゼラチンは、構造上、機
能上、由来動物の種差はないが、アレルギー反応のよう
な免疫上の違いを示すと言う事である。本発明者は、以
上の発明と発見から、更に下記５・６の発明を完成し
た。
【００１１】５食品・薬剤中のゼラチンの存在と、その
由来動物種を免疫反応を用いて測定する方法と試薬。例
えば、食品や薬剤、具体的には、ケーキやワクチン中の
ゼラチンの存在と、その由来動物種を知る為、サンドイ
ッチ法による酵素免疫反応（ＥＬＩＳＡ）で測定する
時、サンドイッチ法の一方又は両方を、特定動物種のゼ
ラチンにのみ反応する抗ゼラチン抗体を用いることを特
長とする測定法及びその試薬である。試薬としては、
１）特定動物種のゼラチンに反応する抗ゼラチン抗体を
コートしたプレート２）特定動物種のゼラチンに反応す
る酵素標識抗体３）発色基質（ＴＭＢ、過酸化水素）
４）反応停止液（硫酸）を用い一般の酵素免疫反応によ
り、食品又は薬剤を検体として測定する。食品や薬剤が
直接検体として用い難い形状の時は、これを強酸（又は
アルカリ）で処理すれば、ゼラチンが抽出されるので、
強酸（又はアルカリ）を除き、適当な緩衝液、例えばリ
ン酸バッファーに溶解させて検体とする。免疫反応とし
ては、酵素免疫反応のみでなく、ＲＩＡ、免疫発光法、
凝集反応他を含み、サンドイッチ法で使用する抗体はポ
リクローナル又はモノクローナル抗体を問わず、又、そ
れを、酵素、放射性物質、発光物質で標識したものでも
良い。特定動物種としては、ウシ、ブタ、ニワトリ、鮭
に限定されない。
由来動物種を免疫反応を用いて測定する方法と試薬。例
えば、食品や薬剤、具体的には、ケーキやワクチン中の
ゼラチンの存在と、その由来動物種を知る為、サンドイ
ッチ法による酵素免疫反応（ＥＬＩＳＡ）で測定する
時、サンドイッチ法の一方又は両方を、特定動物種のゼ
ラチンにのみ反応する抗ゼラチン抗体を用いることを特
長とする測定法及びその試薬である。試薬としては、
１）特定動物種のゼラチンに反応する抗ゼラチン抗体を
コートしたプレート２）特定動物種のゼラチンに反応す
る酵素標識抗体３）発色基質（ＴＭＢ、過酸化水素）
４）反応停止液（硫酸）を用い一般の酵素免疫反応によ
り、食品又は薬剤を検体として測定する。食品や薬剤が
直接検体として用い難い形状の時は、これを強酸（又は
アルカリ）で処理すれば、ゼラチンが抽出されるので、
強酸（又はアルカリ）を除き、適当な緩衝液、例えばリ
ン酸バッファーに溶解させて検体とする。免疫反応とし
ては、酵素免疫反応のみでなく、ＲＩＡ、免疫発光法、
凝集反応他を含み、サンドイッチ法で使用する抗体はポ
リクローナル又はモノクローナル抗体を問わず、又、そ
れを、酵素、放射性物質、発光物質で標識したものでも
良い。特定動物種としては、ウシ、ブタ、ニワトリ、鮭
に限定されない。
【００１２】６特定動物由来のゼラチンとこれを含む食
品、薬剤。特定動物由来のゼラチンを得るには、ゼラチ
ン製造時には、単一動物種のみを扱い、得られたゼラチ
ンを他種のものと混合しない。ウシゼラチンは、その骨
を原料とし、強酸（強アルカリ）、脱灰の処理で製する
が、他の動物でも、例えば、ブタ、羊、ニワトリでも同
様に可能で有る。動物でも、魚類は、例えば鮭は、皮を
用いる。軟体類は、例えばタコ、イカは、そのまま用い
る。又、ウシ、ブタ、羊、ニワトリは、皮も利用でき
る。皮を原料とする時は、真皮のみを用いる事が望まし
い。軟体類や皮からの場合、強酸（強アルカリ）に漬
け、加熱することで抽出される。ゼラチンの製法は、本
法に限定されず、例えば、コラーゲんを製し、これを、
加熱変性させても良い。
品、薬剤。特定動物由来のゼラチンを得るには、ゼラチ
ン製造時には、単一動物種のみを扱い、得られたゼラチ
ンを他種のものと混合しない。ウシゼラチンは、その骨
を原料とし、強酸（強アルカリ）、脱灰の処理で製する
が、他の動物でも、例えば、ブタ、羊、ニワトリでも同
様に可能で有る。動物でも、魚類は、例えば鮭は、皮を
用いる。軟体類は、例えばタコ、イカは、そのまま用い
る。又、ウシ、ブタ、羊、ニワトリは、皮も利用でき
る。皮を原料とする時は、真皮のみを用いる事が望まし
い。軟体類や皮からの場合、強酸（強アルカリ）に漬
け、加熱することで抽出される。ゼラチンの製法は、本
法に限定されず、例えば、コラーゲんを製し、これを、
加熱変性させても良い。
【００１３】これら、各種由来のゼラチンを、従来の原
料不明のゼラチンに代えて、食品や薬剤に加えれば、特
定動物由来のゼラチンを含む食品・薬剤が得られる。特
定動物由来のゼラチンを、できるだけ多くそろえること
は、将来、ウシ以外の動物ゼラチンにアレルギーが現れ
た時に、有用である。食品に加えるゼラチンは、その食
味の点から他の材料に代え難い。例えば、ゼラチンゼリ
ーや、煮凝である。薬剤に加えるゼラチンは、薬剤の安
定化の為に代え難い。例えば、ワクチンやカプセルであ
る。ワクチンに、代用物質としてウシ血清アルブミンや
ヒト血清アルブミンを加える事は、抗原性、安全性で問
題がある。又、ワクチンは、時に、ゼラチンを培地とし
て用い、ふけい剤として用いる。これらの時、一般に用
いられるゼラチンに代えて、特定動物種、例えば、ニワ
トリ由来のゼラチンを使用すれば、従来製していたもの
と同じ食品や薬剤が、同じ製法で得られ、同じ効果を得
られ、ウシゼラチンアレルギー者は安心して利用でき
る。
料不明のゼラチンに代えて、食品や薬剤に加えれば、特
定動物由来のゼラチンを含む食品・薬剤が得られる。特
定動物由来のゼラチンを、できるだけ多くそろえること
は、将来、ウシ以外の動物ゼラチンにアレルギーが現れ
た時に、有用である。食品に加えるゼラチンは、その食
味の点から他の材料に代え難い。例えば、ゼラチンゼリ
ーや、煮凝である。薬剤に加えるゼラチンは、薬剤の安
定化の為に代え難い。例えば、ワクチンやカプセルであ
る。ワクチンに、代用物質としてウシ血清アルブミンや
ヒト血清アルブミンを加える事は、抗原性、安全性で問
題がある。又、ワクチンは、時に、ゼラチンを培地とし
て用い、ふけい剤として用いる。これらの時、一般に用
いられるゼラチンに代えて、特定動物種、例えば、ニワ
トリ由来のゼラチンを使用すれば、従来製していたもの
と同じ食品や薬剤が、同じ製法で得られ、同じ効果を得
られ、ウシゼラチンアレルギー者は安心して利用でき
る。
【００１４】
【実施例１】ゼラチンアレルギー患者血清中の抗ゼラチ
ン抗体とその由来動物種を測定した。健常者血清を対照
とし、次の試薬で酵素免疫反応を行った。 試薬１、ウシ（タイプＩコラーゲン型）ゼラチン、ニワ
トリ（タイプＩコラーゲン型）ゼラチン、鮭由来ゼラチ
ンを各０．５μｇ／穴をコートしたマイクロプレート 試薬２、ＨＲＰ標識抗ヒトＩｇＥ抗体（ラット由来ポリ
クローナル） 試薬３、ＴＭＢ試薬（ＴＭＢ０．１％，過酸化水素０．
０２％、０．１Ｍクエン酸緩衝液） 試薬４、反応停止液（０．５Ｍ硫酸） 検体は、リン酸緩衝液で１００倍に希釈し、１００μｌ
／穴を用いた。 測定方法：試薬１に検体１００μｌ／穴→２時間インキ
ュベーション及び洗浄→試薬２、１００μｌ／穴→１時
間インキュベーションおよび洗浄→試薬３、１００μｌ
→３０分インキュベーション→試薬４、５０μｌ→測定
（吸光度４５０ｎｍ） 結果：検体中には、抗ウシゼラチン抗体が認められた
が、抗ニワトリゼラチン抗体、抗鮭ゼラチン抗体は認め
られなかった。よって、このゼラチンアレルギー患者
は、ウシゼラチンアレルギーで、ウシゼラチンのみ避け
れば良い。又、本法は、血清中の抗ゼラチン抗体の存在
とその由来動物種を測定する方法となり得る。
ン抗体とその由来動物種を測定した。健常者血清を対照
とし、次の試薬で酵素免疫反応を行った。 試薬１、ウシ（タイプＩコラーゲン型）ゼラチン、ニワ
トリ（タイプＩコラーゲン型）ゼラチン、鮭由来ゼラチ
ンを各０．５μｇ／穴をコートしたマイクロプレート 試薬２、ＨＲＰ標識抗ヒトＩｇＥ抗体（ラット由来ポリ
クローナル） 試薬３、ＴＭＢ試薬（ＴＭＢ０．１％，過酸化水素０．
０２％、０．１Ｍクエン酸緩衝液） 試薬４、反応停止液（０．５Ｍ硫酸） 検体は、リン酸緩衝液で１００倍に希釈し、１００μｌ
／穴を用いた。 測定方法：試薬１に検体１００μｌ／穴→２時間インキ
ュベーション及び洗浄→試薬２、１００μｌ／穴→１時
間インキュベーションおよび洗浄→試薬３、１００μｌ
→３０分インキュベーション→試薬４、５０μｌ→測定
（吸光度４５０ｎｍ） 結果：検体中には、抗ウシゼラチン抗体が認められた
が、抗ニワトリゼラチン抗体、抗鮭ゼラチン抗体は認め
られなかった。よって、このゼラチンアレルギー患者
は、ウシゼラチンアレルギーで、ウシゼラチンのみ避け
れば良い。又、本法は、血清中の抗ゼラチン抗体の存在
とその由来動物種を測定する方法となり得る。
【００１５】実施例２ ウシ由来ゼラチンを電気泳動により分画した。この分画
の中から、α１とα２を、「実施例２」の「試薬１」を
置き換え「実施例２」と同様の実験を行った。 結果：検体中の抗ウシ由来ゼラチン抗体はα２分画にの
み反応し、α１分画とは反応しなかった。よって、この
ゼラチンアレルギー患者は、ウシα２分画のみがアレル
ゲンで、ウシ由来ゼラチンを食品や薬剤に用いる時、α
２分画を除いて用いれば良い。
の中から、α１とα２を、「実施例２」の「試薬１」を
置き換え「実施例２」と同様の実験を行った。 結果：検体中の抗ウシ由来ゼラチン抗体はα２分画にの
み反応し、α１分画とは反応しなかった。よって、この
ゼラチンアレルギー患者は、ウシα２分画のみがアレル
ゲンで、ウシ由来ゼラチンを食品や薬剤に用いる時、α
２分画を除いて用いれば良い。
【００１６】実施例３ ゼラチンアレルギー者にウシ由来ゼラチン、ニワトリ由
来ゼラチン、サケ由来ゼラチンの各０．００１μｇ／１
０μｌリン酸バッファーを皮内注射した。又、日をあら
ため、これらの注射薬を、同量、同一人に皮下注射し
た。 結果：皮内注射後、ウシ由来ゼラチンのみ、翌日に発赤
を示し、ニワトリ及びサケ由来ゼラチンは発赤を観察さ
れなかった。皮下注射似ついても、異常がなかった。よ
って、ゼラチンを用いた皮内注射反応法は、ゼラチンア
レルギー患者の発見と、そのゼラチン由来種を明確にす
る。又、非ウシ由来ゼラチンを含む注射薬剤はウシゼラ
チンアレルギー者に安全に投与し得る。
来ゼラチン、サケ由来ゼラチンの各０．００１μｇ／１
０μｌリン酸バッファーを皮内注射した。又、日をあら
ため、これらの注射薬を、同量、同一人に皮下注射し
た。 結果：皮内注射後、ウシ由来ゼラチンのみ、翌日に発赤
を示し、ニワトリ及びサケ由来ゼラチンは発赤を観察さ
れなかった。皮下注射似ついても、異常がなかった。よ
って、ゼラチンを用いた皮内注射反応法は、ゼラチンア
レルギー患者の発見と、そのゼラチン由来種を明確にす
る。又、非ウシ由来ゼラチンを含む注射薬剤はウシゼラ
チンアレルギー者に安全に投与し得る。
【００１７】
【実施例４】ゼラチンアレルギー患者の背部に、ウシ由
来ゼラチン、ニワトリ由来ゼラチン、サケ由来ゼラチン
の１００μｇ／９平方ミリメートルのガーゼをしっかり
と貼り付けた。 結果：付着後、ウシ由来ゼラチンのみが、２日後赤色斑
を示し、ニワトリ及びワケ由来ゼラチンには赤色斑が観
察されなかった。よって、ゼラチンを用いたパッチ反応
法は、ゼラチンアレルギー患者の発見と、そのアレルギ
ー由来種を明確にする。
来ゼラチン、ニワトリ由来ゼラチン、サケ由来ゼラチン
の１００μｇ／９平方ミリメートルのガーゼをしっかり
と貼り付けた。 結果：付着後、ウシ由来ゼラチンのみが、２日後赤色斑
を示し、ニワトリ及びワケ由来ゼラチンには赤色斑が観
察されなかった。よって、ゼラチンを用いたパッチ反応
法は、ゼラチンアレルギー患者の発見と、そのアレルギ
ー由来種を明確にする。
【００１８】
【実施例５】食品及び薬剤のゼラチンの存在とその由来
動物を測定した。ゼラチンを大量に含む水菓子及びＭＭ
Ｒワクチンを検体とし、次の試薬で酵素免疫反応を行っ
た。対象検体には、ウシゼラチン、ニワトリゼラチン
（共にタイプＩコラーゲン型）を使用した。 試薬１、抗ウシ（タイプＩコラーゲン型）ゼラチン抗
体、抗ニワトリ（タイプＩコラーゲン型）ゼラチン抗体
を各０．５μｇ／穴をコートしたマイクロプレート 試薬２−１、ＨＲＰ標識抗ウシ（タイプＩコラーゲン
型）ゼラチン抗体 試薬２−２、ＨＲＰ標識抗ニワトリ（タイプＩコラーゲ
ン型）ゼラチン抗体 試薬３、ＴＭＢ試薬（ＴＭＢ０．１％，過酸化水素０．
０２％、０．１Ｍクエン酸緩衝液） 試薬４、反応停止液（０．５Ｍ硫酸） 検体は、リン酸緩衝液に溶解させ、１００μｌ／穴を用
いた。 測定方法：試薬１に検体１００μｌ／穴→２時間インキ
ュベーション及び洗浄→試薬２−１、２−２、各１００
μｌ／穴→１時間インキュベーションおよび洗浄→試薬
３、１００μｌ→３０分インキュベーション→試薬４、
５０μｌ→測定（吸光度４５０ｎｍ）し、ＯＤ値の高さ
で判定。 結果：検体中には、ウシ由来ゼラチンが認められたが、
ニワトリ由来ゼラチンは認められなかった。よって、本
法は、食品・薬剤中のゼラチンの存在とその由来動物種
を測定する方法となり得る。
動物を測定した。ゼラチンを大量に含む水菓子及びＭＭ
Ｒワクチンを検体とし、次の試薬で酵素免疫反応を行っ
た。対象検体には、ウシゼラチン、ニワトリゼラチン
（共にタイプＩコラーゲン型）を使用した。 試薬１、抗ウシ（タイプＩコラーゲン型）ゼラチン抗
体、抗ニワトリ（タイプＩコラーゲン型）ゼラチン抗体
を各０．５μｇ／穴をコートしたマイクロプレート 試薬２−１、ＨＲＰ標識抗ウシ（タイプＩコラーゲン
型）ゼラチン抗体 試薬２−２、ＨＲＰ標識抗ニワトリ（タイプＩコラーゲ
ン型）ゼラチン抗体 試薬３、ＴＭＢ試薬（ＴＭＢ０．１％，過酸化水素０．
０２％、０．１Ｍクエン酸緩衝液） 試薬４、反応停止液（０．５Ｍ硫酸） 検体は、リン酸緩衝液に溶解させ、１００μｌ／穴を用
いた。 測定方法：試薬１に検体１００μｌ／穴→２時間インキ
ュベーション及び洗浄→試薬２−１、２−２、各１００
μｌ／穴→１時間インキュベーションおよび洗浄→試薬
３、１００μｌ→３０分インキュベーション→試薬４、
５０μｌ→測定（吸光度４５０ｎｍ）し、ＯＤ値の高さ
で判定。 結果：検体中には、ウシ由来ゼラチンが認められたが、
ニワトリ由来ゼラチンは認められなかった。よって、本
法は、食品・薬剤中のゼラチンの存在とその由来動物種
を測定する方法となり得る。
【００１９】
【実施例６】ゼラチンアレルギー者に、ウシ由来ゼラチ
ン、ニワトリ由来ゼラチン、サケ由来ゼラチン各０．０
３％含有０．０１Ｍクエン酸水１０ｍｌを口くう内に２
０秒間含ませ、吐き出させた後、観察した。 結果：ウシ由来ゼラチンの時のみ、口くう内に発赤が見
られたが、ニワトリ由来ゼラチン及びサケ由来ゼラチン
の時には、口くう内に変化は見られなかった。よって、
非ウシ由来ゼラチンを用いた食品や内服薬剤はウシゼラ
チンアレルギー者に使用できる。
ン、ニワトリ由来ゼラチン、サケ由来ゼラチン各０．０
３％含有０．０１Ｍクエン酸水１０ｍｌを口くう内に２
０秒間含ませ、吐き出させた後、観察した。 結果：ウシ由来ゼラチンの時のみ、口くう内に発赤が見
られたが、ニワトリ由来ゼラチン及びサケ由来ゼラチン
の時には、口くう内に変化は見られなかった。よって、
非ウシ由来ゼラチンを用いた食品や内服薬剤はウシゼラ
チンアレルギー者に使用できる。
【００２０】
【実施例７】鮭由来ゼラチン、ニワトリ皮膚由来ゼラチ
ンを、別々に、温湯で希釈した出汁に加え、加熱した
後、冷却し、鮭由来ゼラチンとニワトリゼラチン由来の
煮凝を得た。ウシゼラチンアレルギー者に、各１０ｇ
を、食してもらったが、まったく変化はなかった。これ
により、単一動物由来のゼラチンを加えた食品が得られ
る事、非ウシゼラチン添加の食品を、ウシゼラチンアレ
ルギー者は、食することができることが明らかである。
ンを、別々に、温湯で希釈した出汁に加え、加熱した
後、冷却し、鮭由来ゼラチンとニワトリゼラチン由来の
煮凝を得た。ウシゼラチンアレルギー者に、各１０ｇ
を、食してもらったが、まったく変化はなかった。これ
により、単一動物由来のゼラチンを加えた食品が得られ
る事、非ウシゼラチン添加の食品を、ウシゼラチンアレ
ルギー者は、食することができることが明らかである。
【００２１】
【実施例８】ニワトリ由来ゼラチンを３％濃度に、０．
０１Ｍ酢酸に溶解させた後、乾燥させて、シート状にし
た。このシートで、乳糖１００ｍｇを包み、ウシゼラチ
ンアレルギー者に、内服してもらったが、まったく変化
は見られなかった。これにより、非ウシ由来のゼラチン
は、ウシゼラチンアレルギー者に、カプセルとして使用
できる。
０１Ｍ酢酸に溶解させた後、乾燥させて、シート状にし
た。このシートで、乳糖１００ｍｇを包み、ウシゼラチ
ンアレルギー者に、内服してもらったが、まったく変化
は見られなかった。これにより、非ウシ由来のゼラチン
は、ウシゼラチンアレルギー者に、カプセルとして使用
できる。
【００２２】
【発明の効果】従来、ゼラチンアレルギーは、卵、牛
乳、そば等の食物アレルギーと同様切実な問題であっ
た。卵、牛乳、そばは、その食品を食べなければ済む
が、ゼラチンは、そのままの形の事はなく、安定剤とし
て薬剤に、食感剤として食品に、又その他の理由で、多
くの食品、薬剤に含まれている。しかし含有を示されて
いることは少ない。それ故、薬剤や食品で、異常反応を
示した時、主成分以外のゼラチンが原因であることを特
定することは困難であった。又、ゼラチンがアレルゲン
と判明しても、避けるべき食品は不明であった。治療
上、予防上、必要な薬剤を使用するのに不安であった。
本発明は、このような状況を憂慮し、ゼラチンアレルギ
ー者を見つけだし、アレルゲンとなる動物種のゼラチン
及びその分画を特定し、避けるべき食品、薬剤を示すこ
とを可能にし、更に彼等の為に必要な食品と薬剤の供給
を可能にした。
乳、そば等の食物アレルギーと同様切実な問題であっ
た。卵、牛乳、そばは、その食品を食べなければ済む
が、ゼラチンは、そのままの形の事はなく、安定剤とし
て薬剤に、食感剤として食品に、又その他の理由で、多
くの食品、薬剤に含まれている。しかし含有を示されて
いることは少ない。それ故、薬剤や食品で、異常反応を
示した時、主成分以外のゼラチンが原因であることを特
定することは困難であった。又、ゼラチンがアレルゲン
と判明しても、避けるべき食品は不明であった。治療
上、予防上、必要な薬剤を使用するのに不安であった。
本発明は、このような状況を憂慮し、ゼラチンアレルギ
ー者を見つけだし、アレルゲンとなる動物種のゼラチン
及びその分画を特定し、避けるべき食品、薬剤を示すこ
とを可能にし、更に彼等の為に必要な食品と薬剤の供給
を可能にした。
Claims (6)
- 【請求項１】血液中の抗ゼラチン抗体とその由来動物種
を免疫反応を用いて測定する方法とその試薬 - 【請求項２】血液中の抗特定分画ゼラチン抗体を免疫反
応を用いて測定する方法とその試薬 - 【請求項３】ゼラチンを用いた皮内反応法とその注射剤
- 【請求項４】ゼラチンを用いたパッチ反応法とその試薬
- 【請求項５】食品・薬剤中のゼラチンの存在とその由来
動物種を測定する方法とその試薬 - 【請求項６】特定動物由来のゼラチンとこれを添加した
食品・薬剤
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP07333396A JP4045558B2 (ja) | 1996-02-21 | 1996-02-21 | 抗ゼラチン抗体の測定法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP07333396A JP4045558B2 (ja) | 1996-02-21 | 1996-02-21 | 抗ゼラチン抗体の測定法 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2005029727A Division JP4899038B2 (ja) | 2005-01-07 | 2005-01-07 | 抗ゼラチン抗体の測定法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09229932A true JPH09229932A (ja) | 1997-09-05 |
| JP4045558B2 JP4045558B2 (ja) | 2008-02-13 |
Family
ID=13515150
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP07333396A Expired - Lifetime JP4045558B2 (ja) | 1996-02-21 | 1996-02-21 | 抗ゼラチン抗体の測定法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4045558B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998018003A2 (de) * | 1996-10-23 | 1998-04-30 | Manfred Gareis | Verfahren zum herkunftsnachweis von nutztieren sowie davon stammenden produkten |
-
1996
- 1996-02-21 JP JP07333396A patent/JP4045558B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998018003A2 (de) * | 1996-10-23 | 1998-04-30 | Manfred Gareis | Verfahren zum herkunftsnachweis von nutztieren sowie davon stammenden produkten |
| WO1998018003A3 (de) * | 1996-10-23 | 1998-06-18 | Manfred Gareis | Verfahren zum herkunftsnachweis von nutztieren sowie davon stammenden produkten |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP4045558B2 (ja) | 2008-02-13 |
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