JPH08506323A - RXR homodimer formation and bridged bicyclic aromatic compounds and their use in regulated gene expression - Google Patents

RXR homodimer formation and bridged bicyclic aromatic compounds and their use in regulated gene expression

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JPH08506323A
JPH08506323A JP6513405A JP51340593A JPH08506323A JP H08506323 A JPH08506323 A JP H08506323A JP 6513405 A JP6513405 A JP 6513405A JP 51340593 A JP51340593 A JP 51340593A JP H08506323 A JPH08506323 A JP H08506323A
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receptor
compound
retinoid
homodimer
formation
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ジャン，シャオ−クン
エム． レーマン，ユールゲン
アイ． ダウソン，マルシア
エフ． カメロン，ジェイムズ
ディー． ホッブス，ピーター
ジョン，リン
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Abstract

(57)【要約】 本発明は、物質およびレチノイドＸレセプターを含む溶液を合わせる工程、およびホモダイマー形成の存在を測定する工程を包含する、レチノイドＸレセプターホモダイマーの形成に影響を及ぼす能力について物質をスクリーニングする方法を提供する。このスクリーニング方法を用いて、ホモダイマー形成およびヘテロダイマー形成を選択的に活性化する化合物を測定し得る。また、物質をホモダイマーと合わせる工程、およびDNAを結合するホモダイマーの能力への化合物の影響を測定する工程を包含する、レチノイドＸレセプターホモダイマーのDNAを結合する能力への影響について物質をスクリーニングする方法も提供される。最後に、本発明は、レチノイドＸレセプターホモダイマー形成を活性化する方法を提供する。R1、R2、R3、R4、R5、およびnが本明細書に記載のように定義される構造（I）を有する架橋二環式芳香族化合物が提供される。この化合物は、レチノイン酸レセプター、ビタミンＤレセプター、および甲状腺レセプターの遺伝子発現を調節するのに有用である。薬学的組成物および遺伝子発現を調節する方法もまた提供される。 (57) Abstract: The present invention screens substances for their ability to influence the formation of retinoid X receptor homodimers, including the steps of combining a solution containing the substance and retinoid X receptor, and measuring the presence of homodimer formation. Provide a way to do. This screening method can be used to measure compounds that selectively activate homodimer formation and heterodimer formation. Also provided is a method of screening a substance for its effect on the ability of a retinoid X receptor homodimer to bind to DNA, comprising the steps of combining the substance with a homodimer and measuring the effect of the compound on the ability of the homodimer to bind DNA. Provided. Finally, the invention provides a method of activating retinoid X receptor homodimer formation. Provided are bridged bicyclic aromatic compounds having structure (I) where R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , R 5 , and n are defined as described herein. This compound is useful for modulating retinoic acid receptor, vitamin D receptor, and thyroid receptor gene expression. Pharmaceutical compositions and methods of modulating gene expression are also provided.

Description

【発明の詳細な説明】 RXRホモダイマー形成ならびに架橋二環式芳香族化合物 および調節遺伝子発現におけるそれらの使用 技術分野 本発明は、一般にレチノイドレセプターによる遺伝子発現の調節に関し、そし てより特定すれば、レチノイドＸレセプター、ならびに、レチノイン酸レセプタ ー、レチノイドＸレセプター、ビタミンＤレセプターおよび甲状腺レセプターに よる遺伝子発現の調節において有用である、新規の架橋二環式芳香族化合物に関 する。 背景技術 ビタミンＡ代謝生成物全-トランス-レチノイン酸（RA）およびその天然および 合成誘導体（レチノイド）は、広範囲の生物学的効果を奏する1,2。臨床的に、 レチノイドは皮膚病および癌の治療において重要な治療薬である3-6。多数のレ チノイドの作用が分子レベルでどのように仲介され得るかの理解は、特定の核レ セプター、レチノイン酸レセプター（RAR）7-12およびレチノイドＸレセプター （RXR）13-17のクローニングおよび特徴付けによって顕著に高められた。RARお よびRXRはステロイド／甲状腺ホルモンレセプタースーパーファミリーの一部で ある18,19。両方のタイプのレセプターは、３つの異なった 遺伝子（α、β、およびγ）によってコード化され、それから、RARの場合多重 イソ型が生成され得る20-22。興味深いことに、RARは脊椎動物では特異的である が、その一方RXRはショウジョウバエからヒトまでよく保存されている17,23。近 年レチノイドレセプター作用の分子機構の理解がかなり進んでいるにもかかわら ず、天然に存在しているレチノイドについて異なる分子経路が存在するかどうか という中心的な問題については、いまだ答えが出ていない。RAの立体異性体9-シ ス-RAがRXRに高親和性で結合するという最近の観察23,24は、全-トランス-RAの 経路とは異なるレチノイド応答経路を示唆した。しかしながら、RARが効果的にD NA結合および機能するために補助レセプターとの相互作用を必要とし、しかもRX Rがそのような補助レセプターであるということが、いくつかの研究室によって ほぼ同時に発見された15,16,26-29。従って、RARは、ヘテロダイマー性RAR/RXR 複合体として、またはさらに同定される必要のある相当する補助タンパク質との 組合せでのみ効果的に機能するようである。同様に、RXRは、効果的なDNA結合の ために、RAR、甲状腺ホルモンレセプター（TR）、またはビタミンＤ3レセプター （VDR）を必要とすることが示された15,16,26-29。従って、これらのDNA結合研 究から、RXRは、専ら補助レセプターとしてでなくても優先的に機能し得ること が明らかとなり、それによって、転写調節の高度な多様性および特異性を発生さ せ、ならびにリガンド活性化レセプターの少なくとも３つの異なるクラスに対す るDNA親和性および 特異性を増加することにより異なるホルモンの非常に多面的な効果を仲介するこ とにおいて重要な役割を行う。 これらの知見とは反対に、本発明は、RXRがホモダイマーを形成することを提 供する。本発明は、これらホモダイマーが補助レセプターの非存在下で特異的な 応答エレメントに効果的に結合し、そしてそれらのDNA結合特異性がヘテロダイ マーを含有するRXRのDNA結合特異性と異なることを提供する。本発明は、レチノ イドの作用について新規の機構を説明し、それによって、リガンド誘導ホモダイ マーが異なったレチノイド経路を仲介する。さらに、RXRホモダイマー形成を選 択的に活性化するリガンドが提供される。 本発明はまた、本明細書で詳細に記載されるように、架橋二環式芳香族化合物 の形態の新規なクラスのレチノイドを提供する。これら新規化合物は、レチノイ ン酸ファミリー中のレセプター（例えば、RAR、RXR、ビタミンＤレセプター（VD R）、甲状腺ホルモンレセプター（THR））による選択的遺伝子発現の調節および ／または誘発のために効果的である。理論によって束縛されることは意図しない が、本明細書で開示され、そして請求項に記載の化合物は、前述のレセプターに 結合するレセプタータンパク質と相互作用するそれらの能力のために調節遺伝子 発現に有効である。前記化合物はまた、RAR-RXR、VDR-RXR、およびTHR-RXRヘテ ロダイマーに加えて、RXRホモダイマーの形成を誘導することにより、調節遺伝 子発現において有用である。 新規化合物は、従って、甲状腺ホルモン、ビタミンＤ、および9-シス-レチノ イン酸のようなレチノイド（RXRに対する天然リガンド）により調節される細胞 プロセスを制御するために有用である。それ故、座瘡、白血病、乾癬、および皮 膚老化（すべてはレチノイン酸により調節される）は、骨石灰化作用（ビタミン Ｄによって調節され得る）およびエネルギーレベル（甲状腺ホルモンによって調 節され得る）と同様に、本発明の化合物を用いて治療され得る。先行技術の合成 レチノイドとは異なって、本発明化合物は、実質的に減少した副作用および奇形 遺伝性を提供すると考えられる。 発明の要旨 本発明は、レチノイドＸレセプターホモダイマーの形成に影響する能力につい て物質をスクリーニングする方法を提供し、この方法は、この物質とレチノイド Ｘレセプターを含有する溶液とを合わせる工程、およびホモダイマー形成の存在 を測定する工程を包含する。また、DNAに結合するレチノイドＸレセプターホモ ダイマーの能力に関する影響について物質をスクリーニングする方法が提供され 、この方法は上記物質をホモダイマーと合わせる工程、およびDNAに結合するホ モダイマーの能力に関して上記化合物の影響を測定する工程を包含する。また、 レチノイドＸレセプターホモダイマーの形成を増加させる工程を包含し、それに よってレチノイドＸレセプターがヘテロダイマーを形成することを抑制し、そし て得 られるヘテロダイマーの活性を抑制するレチノイドＸレセプターヘテロダイマー 活性を阻害する方法が提供される。さらに、レチノイドＸレセプターホモダイマ ーの活性を阻害する方法も提供される。レチノイドＸレセプターホモダイマー形 成と関連する病状が増加する確率を測定、およびそのような病状を治療する方法 がさらに提供される。さらに、レチノイドＸレセプターホモダイマーとの結合に ついて応答エレメントをスクリーニングする方法が提供される。最後に、本発明 は、レチノイドＸレセプターホモダイマー形成を活性化する方法を提供する。 さらに、レセプターのレチノイン酸ファミリー中のレセプターにより、遺伝子 発現を調節するために有用な新規の化合物を提供することにより、上記で述べた 当該技術分野での要求を満たすことが、本発明の第１の目的である。本発明の別 の目的は、甲状腺ホルモン、ビタミンＤ、および／または9-シス-レチノイン酸 のようなレチノイドにより調節される細胞分化プロセスを制御するために有用な 新規化合物を提供することである。本発明のさらに別な目的は、架橋された二環 式構造形態の新規化合物を提供することである。本発明のさらに別の目的は、１ つまたはそれ以上の新規化合物を含有する薬学的組成物を提供することである。 本発明のさらに別の目的は、レチノイン酸レセプター、レチノイドＸレセプター 、ビタミンＤレセプター、および甲状腺レセプターから成る群から選択されるレ セプターの遺伝子発現を調節するための方 法を提供することである。本発明のさらに別の目的は、甲状腺ホルモン、ビタミ ンＤ、および／または9-シス-レチノイン酸のようなレチノイドにより調節され る細胞分化プロセスを制御するための方法を提供することである。 本発明のさらなる目的、利点および新規の特徴は、以下の記載で部分的に提示 され、そして一部は以下を読めば当業者に明らかとなり得、または本発明の実施 により学ばれ得る。 次に、１つの局面で、本発明は構造式（I）を有する新規の化合物に関する： ここで、 Ｒ1は低級アルキルおよびアダマンチルから成る群から選択され； Ｒ2は−Ｏ−Ｒ6または−Ｓ-Ｒ6であり、ここでＲ6は低級アルキルであり；ま たは ここでＲ1はＲ2に対してオルトであり、Ｒ1およびＲ2は共に連結して、５員環 または６員環シクロアルキレン環を形成し、このシクロアルキレン環は、炭素数 １〜４個の低級アルキル基で置換されないまたは置換され、そして必要に応じて Ｏ、ＳおよびＮＲからなる群から選択される１個または２個 のヘテロ環原子を含み、ここてＲは水素または低級アルキル、好ましくは芳香族 環に隣接し； Ｒ3はカルボニル、 からなる群より選択され、 ここで、Ｘ1およびＸ2はＯ、Ｓおよびメチレンからなる群から独立して選択され 、ここでＸ1およびＸ2の少なくとも１つはＯまたはＳであり、またはここでＸ1 およびＸ2の１つはＮＲであり、および他はメチレンであり、ｍは２または３で あり、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8およびＲ9はそれぞれ独立して水素または低級アルキルであ り、ただし、ｎが０のとき、Ｒ6およびＲ7は両方とも水素でなくかつＲ8および Ｒ9は両方とも水素でなく、またはＲ8およびＲ9は共に連結して、３〜６個の炭 素原子を有するシクロアルキレン環を形成し得、そして*は分子の残り部分への Ｒ3置換基の結合位置を示す；そして Ｒ4は以下からなる群から選択され、 ここで、Ｒ10は水素またはメチルであり、ｌは０または１であり、**は分子の残 りへのＲ4置換基の結合位置表し、 Ｒ5は低級アルキルおよび低級アルコキシからなる群から独立して選択され； そして ｎは０、１、２または３であり、 ただし、ｎが０のとき、Ｒ3はカルボニル、*C=CH2またはCH2以外である。 本発明はまた、以下に詳細に説明されるように、薬学的に受容可能なエステル 、アミドおよびそのような化合物の塩を包含する。 他の局面では、本発明は、前述の化合物を含有する薬学的組成物、ならびにレ セプターのレチノイン酸ファミリーに属するレセプターによる選択的遺伝子発現 を調節するのために上記化合物を使用する方法に関する。 図面の簡単な説明 図１は、9-シス-レチノイン酸がTREpalに関してRXRホモダイマー結合を誘導す ることを示す。 （a）インビトロで合成されたRXRαを、インビトロ合成TRαまたはRARβの存 在下または非存在下のいずれかで、示されたホルモン（10-7M 9-シス-RA；10-6M RA；10-6M Ｔ3）とと もに（+）またはなし（-）のいずれかで室温で30分間インキュベートした。この プレインキュベーションの後、反応混合物をプローブとして32P-標識TREpalを使 用してゲル遅延アッセイにより分析した。レーン１は、非プログラム化網状赤血 球溶解液の非特異的結合を表す。白三角は、非プログラム化網状赤血球溶解液で 観測される非特異的複合体を示す。黒三角は、特異的TRα-RXRαヘテロダイマー 結合を示す。矢印は、特異的RXRαホモダイマー結合を示す。RXRα／RARβヘテ ロダイマーは、RXRαホモダイマーと同じ位置に移動する。比較のために、RARβ 結合に関する9-シス-RAの影響を示す。 （b）9-シス-RAで誘導されたDNA結合複合体がRXRαタンパク質を含むことを測 定するために、フラッグ（Flag）-RXRα（F-RXR）（特異的抗フラッグモノクロ ーナル抗体によって認識され得る、アミノ末端に８個のアミノ酸のエピトープ（ フラッグ）を含むRXRα誘導体である）を構築した。インビトロ合成F-RXRαを、 特異的抗フラッグ抗体（αF）または非特異的プレ免疫血清（NI）のいずれかの 存在中で10-7M 9-シス-RAとともに（+）またはなし（-）のいずれかで室温で30 分間インキュベートした。次に、9-シス-RAの存在下でF-RXRα結合に関する抗フ ラッグ抗体の影響を、プローブとして32P-標識TREpalを用いるゲル遅延アッセイ により分析した。レーン１は、非プログラム化網状赤血球溶解液の非特異的結合 を示す（白三角）。矢印は、特異的F-RXRαホモダイマーおよびRAR-RXRヘテロダ イマー結合を示す。菱形は、抗フラッグ抗体で上にシフトしたF-RXRホ モダイマーを示す。 図２は、TPEpalに関する9-シス-RAで誘導されたRXRホモダイマーの特徴付けを 示す。 （a）9-シス-RAで誘導されたRXRαホモダイマーの協同的結合。10-7M 9-シス- RAの存在下または非存在下で異なるレセプター濃度でのRXR-DNA複合体の形成を 、プローブとして標識TPEpalを使用するゲル遅延アッセイにより分析した。白三 角は、非プログラム化網状赤血球溶解液の非特異的結合を示す。矢印は、特異的 にRXRが結合した複合体を示す。 （b）9-シス-RAの存在下の異なるレセプター濃度でのRXR結合複合体の定量。 図２（a）に示した9-シス-RA存在下のRXR結合複合体を含有するゲルスライスを 切除し、そしてシンチレーションカウンターで計測しそしてプロットした。 （c）TREpalに関するRXRホモダイマーの9-シス-RA濃度依存性結合。等量のイ ンビトロ合成RXRタンパク質を、9-シス-RAの示された濃度を用いてインキュベー トした。次に、反応混合物をプローブとして標識TPEpalを使用するゲル遅延アッ セイにより分析した。白三角は、非プログラム化網状赤血球溶解液の非特異的結 合を示す。矢印は、特異的にRXRが結合した複合体を示す。 図３は、9-シス-RAが、RXR特異的応答エレメントに関してRXRホモダイマー結 合を誘導することを示す。 （a）本研究で使用した核レセプター結合エレメント。これらのオリゴヌクレ オチドを、小文字で示したように両端の適 切な制限部位を有して合成した。AGG/TTCAモチーフに緊密に関連する配列を矢印 で示す。 （b）ApoAI-RAREまたはCRBPII-RAREのRXRホモダイマー結合に関する9-シス-RA の影響を、本質的に図１ａに記載されるように分析した。レーン１は非プログラ ム化網状赤血球溶解液の非特異的結合を表し、これは白三角により示される。黒 三角は、RAR/RXRヘテロダイマー複合体を示す。矢印は特異的にRXRが結合した複 合体を示す。 図４は、RXRホモダイマーの応答エレメント特異的結合を示す。RA特異的応答 エレメント（a）、Ｔ3特異的応答エレメント（b）、またはエストロゲン特異的 応答エレメント（c）上のRXR結合に関する9-シス-RAの影響を、図１ａで記載さ れたようなゲル遅延アッセイにより分析した。比較として、RXR/RARヘテロダイ マー（a）、RXR/TRヘテロダイマー（b）またはエストロゲン（c）の結合を示す 。白三角は、非プログラム化網状赤血球溶解液の非特異的結合を示す。黒三角形 は、RAR/RXRヘテロダイマー複合体（a）、TR/RXRヘテロダイマー複合体（b）ま たはER複合体（c）を示す。 図５は、RXRホモダイマー化が溶液中で起こることを示す。35S-標識インビト ロ合成RXRαタンパク質を、示されたように応答エレメントまたは化学的架橋剤D SPの存在下または非存在下のいずれかで、部分精製された細菌発現フラッグ-RXR （F-RXR）（+）または同様に調製されたグルタチオントランスフェラーゼ制御タ ンパク質（-）とともにインキュベートした。インキ ュベーション後、抗フラッグ抗体（F）または非特異的プレ免疫血清（NI）のい ずれかを添加した。10-7M 9-シス-RAを作業プロセスの間維持した。10-7M 9-シ ス-RAの存在下で免疫複合体を洗浄し、SDS試料緩衝液中で沸騰し、そして10％SD S-PAGE上で分離した。35S-標識インビトロ合成RXRαタンパク質を右のパネルに 示した。 図６は、RXRおよびRARαの転写活性化を示す：天然応答エレメントに関する9- シス-RAによるRXRヘテロダイマー。100ngのレポータープラスミド（a）TREpal-t k-CAT（b）βRARE-tk-CAT（c）ApoAI-RARE-tk-CATおよび（d）CRBPI-RARE-tk-CA Tならびに5ngの空（empty）pECE発現ベクター、pECE-RXRα、pECE RARαまたは 示されたような両者の組み合わせでCV-1細胞を同時トランスフェクトした。トラ ンスフェクトした細胞を、ホルモンなし（白棒）、10-7M RA（斜線棒）、または 10-7M 9-シス-RA（濃斜線棒）で処理した。２回行った代表的な実験の結果を示 す。 図７は、レポーター構築物（a）TREpal-tk-CAT（10）または（b）CRBPII-tk-C AT（10）RXRα-依存性のトランス活性化を、9-シス-RAまたはレチノイドSR11203 、SR11217、SR11234、SR11235、SR11236、およびSR11237により示す。４回実行 した代表的な実験の結果を示す。４つの独立した実験において誘導プロフィルは 有意に変化しなかった。CAT活性を、トラスフェクションについて、および同時 トランスフェクトしたβ-ガラクトシダーゼ発現プラスミド（pCH110、Pharmacia ）由来の酵素 活性を測定することにより回収効率について標準化した。 発明の詳細な説明 定義および名称： 本発明の化合物、組成物、および方法を開示・記載するにあたり、本発明は、 特定の合成方法、特定の薬学上のキャリア、あるいは特定の薬学的製剤または投 与のレジメ（regimen）に限定されずに当然変化し得ることを理解すべきである 。本明細書で使用される用語は、特定の実施態様を記載するためだけに使用され 、制限することを意図しないこともまた理解すべきである。 本明細書中および添付の請求項中で使用されるとき、単数形「a」「an」およ び「the」は、文脈が他を明らかに指示しない場合、複数形の指示対象を包含す る。従って、例えば「二環式芳香族化合物」に関しては、二環式芳香族化合物の 混合物を包含し、「薬学的キャリア」に関しては、２種またはそれ以上のそのよ うなキャリアの混合物などを包含する。 本明細書および添付の請求項において、多くの用語になされ得る参照は以下の 意味を有すると規定される： 本明細書で使用する用語「アルキル」は、分枝または分枝していない１〜24個 の炭素原子の飽和炭化水素基をいう。即ち、それらは、メチル、エチル、n-プロ ピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、t-ブチル、オクチル、デシル、テ トラデシル、ヘキサデシル、エイコシル、テトラコシルなどであ る。本明細書における好ましいアルキル基は１〜12個の炭素原子を含む。用語「 低級アルキル」は、１〜６個の炭素原子のアルキル基を意図し、好ましくは、１ 〜４個の炭素原子を意図する。用語「シクロアルキル」は、３〜８個、好ましく は５または６個の炭素原子の環状アルキル基を意図する。 本明細書中で使用した用語「アルコキシ」は、一重の末端エーテル結合を介し て結合したアルキル基を意図する；即ち、「アルコキシ」基は、Rが上記で定義 されたようなアルキルである-ORと定義され得る。「低級アルキル」基は、１〜 ６個、さらに好ましくは１〜４個の炭素原子を含有するアルキル基を意図する。 本明細書中て使用した用語「アルキレン」は、１〜24個の炭素原子を含む、二 官能性の飽和分枝または分枝していない炭化水素鎖をいい、そして例えばメチレ ン（-CH2-）、エチレン（-CH2-CH2-）、ポリエチレン（-CH2-CH2-CH2-）、２メ チルプロピレン［--CH2-CH（CH3）-CH2-］、ヘキシレン［-（CH2）6-］などを包 含する。「低級アルキレン」は、１〜６個、さらに好ましくは１〜４個の炭素原 子のアルケン基をいう。本明細書中で使用した用語「シクロアルキレン」は、環 状アルキレン基、代表的には5-または6-員環をいう。 本明細書中で使用した用語「アルケン」は、２〜24個の炭素原子のモノ不飽和 またはジ不飽和炭化水素基を意図する。このクラスにはいる好ましい基は、２〜 12個の炭素原子を含有する。（AB）C=C（CD）ような不斉構造は、EおよびZ異性 体の両 方を含むことを意図する。このことは、本明細書の構造式において仮定され得、 ここで不斉アルケンが存在し、または結 「任意の」または「必要に応じて」は引き続いて記載される事象または状況が 生じ得または生じ得ないことを意味し、そしてこの記載はこの事象または状況が 生じる例および生じない例を包含する。例えば、語句「必要に応じて置換された フェニル」は、フェニルが、置換され得または置換され得ないことを意味し、し かもこの記載は、非置換フェニルおよび置換があるフェニルの両者を包含する。 本明細書中で提供される化合物の、用語「有効量」により、非毒性であって所 望の遺伝子発現の調節を提供するに十分な化合物の量を意味する。以下で指摘さ れ得るように、正確な必要量は被験体によって変化し得る。それは、種、年齢、 被験体の一般的状態、治療されている病気の重篤度、用いた特定の二環式化合物 、その投与方法などによる。従って、正確な「有効量」を明細書に記載すること は不可能である。しかし、適切な有効量は、ルーチンの実験のみを用い当業者に より決定され得る。 用語「薬学的に受容可能」は、生物学的にまたはその他に所望されない材料で はないことを意味する。すなわち、望ましくない任意の生物学的影響を生じるこ となく、または薬学的組成物に含まれる任意の他の成分と心身に有害な様式で相 互作用することのなく、選択された二環式化合物とともに個 体に投与され得る材料であり得る。 選択的な遺伝子発現の「誘導」「調節」または「調整」は、化合物が、特定の レセプター（すなわち、レチノイン酸ファミリー）により遺伝子発現のアクティ ベーターまたはアンタゴニストとして作用し得ることを意味することを意図する 。 レセプターの「レチノイン酸ファミリー」は、「レチノイドレセプター」とも 呼ばれ、レチノイン酸レセプター、レチノイドXレセプター、ビタミンDレセプタ ー、および甲状腺ホルモンレセプターを包含することを意図する。前述の３つの 群のレセプターはまた、本明細書では「レチノイン酸レセプター」と広く呼ばれ る。すなわち、この用語は、レチノイド酸レセプターそれ自身に加えて、レチノ イドXレセプター、ビタミンDレセプター、および甲状腺ホルモンレセプターを含 有する。 「架橋二環式芳香族化合物」は、式（I）の構造に包含される全ての化合物を 示す。これらの化合物はまた、「レチノイド」と呼ばれ、その用語はさらにレチ ノイン酸および9-シスレチノイン酸のような種を包含することを意図する。 本発明は、RXRホモダイマーの形成に影響を及ぼす能力について物質をスクリ ーニングする方法を提供し、この方法は、この物質およびRXRを含む溶液を合わ せる工程、およびホモダイマー形成の存在を測定する工程を包含する。ホモダイ マー形成の存在は、例えば、RXRホモダイマーまたは共沈により転写の活性化を 検出することにより決定され得る。この影響は、 ホモダイマー形成の誘導、例えば、9-シス-RAにより活性化された活性に類似の 活性または、ヘテロダイマー形成に対してホモダイマー形成を選択的に活性化す る活性てあり得る。用語「選択的に活性化する」は、ホモダイマー形成を活性化 するが、ヘテロダイマーを顕著に活性化しない化合物を意味する。あるいは、「 選択的に活性化する」は、ヘテロダイマー形成を活性化するが、ホモダイマー形 成を顕著に活性化しない化合物を包含する。用語「顕著な活性化」は、被験体に 有害な薬理学的影響を起こすに十分な活性化を包含する。この影響はまた、ホモ ダイマー形成の阻害であり得る。阻害の例は、9-シス-RAのレセプターへの結合 に対し競争するが、それ自身は二量体化を活性化または誘導しない物質、または その活性をブロックするために9-シス-RAを結合する物質を包含する。物質のこ のようなスクリーニングは被験体が居れば、ホモダイマー形成の発見をルーチン に実施し得る。以下に提示される特定のアッセイセットは、9-シス-RAを、目的 の物質で単に置換することで、スクリーニングのために一般に使用され得る。こ のような「物質」をスクリーニングするための良好な出発点は、本明細書中に記 載される9-シス-RA活性である。9-シス-RAに関する置換体は、9-シス-RAアナロ グを作成するために変化し得、およびホモダイマー形成の任意の増加または減少 を測定するための方法でスクリーニングされ得る。しかし、任意の物質が、ホモ ダイマー形成について任意の影響を測定するために、このアッセイでスクリーニ ングされ得る。 このような化合物は、次いで細胞中でホモダイマー形成および遺伝子転写を促進 するために用いられ得る。本明細書中で用いられる細胞は、インビトロまたはイ ンビボのいずれにか見い出される細胞を包含する。従って、RXRホモダイマー形 成に影響を与え、そしてRXRホモダイマーにより活性化される遺伝子の転写を促 進するためにヒト被験体にこれら化合物が投与され得る。このような化合物を、 以下の実施例に提示する。 以下の本明細書で提示されたデータはRXRαを利用する。しかし、RXRα、β、 およびγの間で高い相同性が与えられれば各タンパク質は、ホモダイマーを形成 すべきであり、そしてRXRαホモダイマーについて記載された活性を有する。関 連して、ホモダイマーは異なったRXR間で形成され得る。例えば、ホモダイマー は、RXRαとRXRβの間、あるいはRXRβとRXRγの間、あるいはRXRαとRXRγの間 で形成され得る。これらのホモダイマーの活性は、本明細書で提示される方法を 用いて確認され得る。 本発明はまた、RXRホモダイマーのDNAを結合する能力に関する影響について物 質をスクリーニングする方法を提供し、この方法は、この物質を上記ホモダイマ ーと合わせる工程、およびDNAと結合するホモダイマーの能力への化合物の影響 を測定する工程を包含する。例えば、ホモダイマーを結合し得る、またはRXRホ モダイマーにより認識されるDNA応答エレメントを結合し得る化合物は、この方 法でスクリーニングされ得る。 本発明は、さらに、RXR含有ヘテロダイマーの活性を阻害する方法を提供し、 この方法は、RXRホモダイマーの形成を増加させ、それによってRXRがヘテロダイ マーの形成を抑制しそして得られるヘテロダイマー活性を抑制する工程を包含す る。この活性は、任意の活性であり得るが、一般には転写の活性化または抑制化 である。この活性は、例えば、そうでなければヘテロダイマーを形成するために 利用され得るRXRを、ホモダイマーを形成するために利用することによりブロッ クされ得る。ヘテロダイマーの数が減少するので、ヘテロダイマーの活性は減少 する。１つの実施例では、RXRヘテロダイマーは、甲状腺ホルモンレセプターお よびRXRから成る。RXR/TRヘテロダイマーの活性は減少した。その他のヘテロダ イマーを、本明細書で提示された標準方法を用いて試験し得る。 本発明はまた、RXRレセプターホモダイマーの活性を阻害する方法を提供し、 この方法は、RXRホモダイマー形成を抑制する工程を包含する。このような阻害 は、例えば、9-シス-RA、または9-シス-RAによる転写または活性化を阻害するこ とにより得られ得る。この阻害される活性は、一般に転写の活性化または抑制化 である。 本発明はまた、RXRホモダイマーの活性を阻害する方法を提供し、この方法は 、RXRホモダイマーのその応答エレメントへの結合を抑制する工程を包含する。 例えば、同じ応答エレメントと競合するレセプターの活性が促進され得る。一般 に、阻害される活性は、転写の活性化または抑制化である。 本発明は、RXRホモダイマー形成に関連する病状の増加の確率を測定する方法 をさらに提供し、この方法は、被験体において正常被験体と比較したときのRXR ホモダイマー形成の調節を検出する工程を包含する。この調節は、ホモダイマー 形成を増加または減少し得る。このような調節は、例えば、変異したRXRから生 じ得る。この減少は、サンプル中でホモダイマーについてのアッセイにより、ま たはホモダイマー形成を減少することが知られている変異体を検出することによ り検出され得る。 関連して、本発明は、被験体においてホモダイマー形成をの調節する工程を包 含する、被験体中でRXRホモダイマー形成に関連する病状を治療する方法を提供 する。この調節は、病状に依存して増加または減少され得る。このような増加は 、例えば、RXR転写を促進する化合物を利用して達成され得る。この病状は、例 えば座瘡および乾癬のような皮膚に関連し得る。さらに、この病状は癌であり得 る。このような化合物の正確な必要量は、被験体によって変化し得、それは、種 、年齢、被験体の一般的状態、治療されている病気の重篤度、用いられる特定の 化合物、その投与方法などに依存する。従って、正確な活性促進量を特定するこ とは不可能である。しかし、適切な量は、本明細書で教示が与えられれば、ルー チンの実験のみを用いて当業者により決定され得る。 本発明はまた、精製されたRXRホモダイマーを提供する。用語「精製された」 は、天然環境中でRXRホモダイマーに関連す る少なくとも数種の細胞成分が無いこと意味する。 本発明は、RXRホモダイマーとの結合するための応答エレメントをスクリーニ ングする方法を提供し、この方法は、この応答エレメントを上記RXRホモダイマ ーと合わせる工程、および結合の存在を検出する工程を包含する。結合の存在を 、多くの標準的な方法により決定し得る。１つの方法では、応答エレメントに作 動可能に連結するマーカーの転写活性化により結合を検出する。用語「作動可能 に連結」は、転写アクティベーターの存在下でマーカーが転写され得ることを意 味する。 本研究は、天然のビタミンＡ誘導体9-シス-RAのレチノイドレセプターDNA結合 および転写活性化に関する影響の研究から得られる。全-トランス-RAと反対に、 9-シスアナログは、10-9〜10-8M濃度で、天然TREまたはEREへのではなくいくつ かのRXR-特異的RAREへのRXRα結合を劇的に促進する。この影響は、RXRα、βま たはγの応答エレメントへの結合を、9-シス-RAが誘導しないので、RXRに特異的 である（図１、図３）。ゲルシフトアッセイにおける移動パターンから判断して 、RXRトリマーまたはテトラマーを包含するより大きな複合体が生じ得るが（特 にCRBPII-RAREの場合）、9-シス-RAがホモダイマー形成を誘導すると推定される 。このようなトリマーまたはテトラマー形成は、本明細書に提示の方法を用いて 試験され得る。 RXRαホモダイマーは、ヘテロダイマーと異なる応答エレメント特異性を奏す る。rCRBPI応答エレメントは、RXRホモダイ マーと相互作用せず、その一方CRBPII応答エレメント（完全繰返しを含むこれま でに同定された天然のRARE）のみが、9-シス-RAで誘導されるRXRαホモダイマー の強力なバインダーであった。この応答エレメントがRXRα24,30により良好に活 性化されることは先に示されていた。この応答エレメントはまた、RXRα-RARα ヘテロダイマー（図３）27,29により効果的に結合されるが、ヘテロダイマーは リプレッサー機能を有するようである30。 CV-1細胞は、試験された全ての他のほ乳類組織培養細胞のように、部分的に影 響を不明瞭にし得る内因性のレチノイドレセプターを包むけれども、転写活性化 研究で得られた結果は、DNA結合研究で得られた結果と良く一致する。それにも かかわらず、9-シス-RA-RXRαホモダイマーと強く結合する応答エレメントはま た、9-シス-RAの存在下で同時トランスフェクトしたRXRαに強く応答する。その 一方、RXRαホモダイマーに良好に結合しない応答エレメントは、rCRBPI-RAREま たはMHC-TREのように、RXRα単独によっては活性化され得なかった。 核ホルモンレセプターの二量体化-ホモ二量体化またはヘテロ二量体化は、レ セプターとそれらの同族の応答エレメントとの高親和性の相互作用に重要である 一般に信じられている。RXRは溶液中で主にモノマーとして存在し16、効果的なD NA結合活性を示すために高濃度またはRAR、TRあるいはVDRの存在を13,15,16,26- 30 必要とする。9-シス-RAの存在下で増加した協同RXR DNA結合活性の観察は、9- シス-RAが、DNAに対する増 加した親和性を有するRXRホモダイマーの形成を誘導したことを示す。従って、9 -シス-RAのRXRへの結合は、構造変換を誘導し得、それはホモ二量体化を起こす 。9-シス-RAおよびRAがRARに結合し得るが24,25、それらはRARホモダイマー形成 を誘導しないことは興味深い。 RXRαホモダイマー形成は、DNA非存在下の溶液中で生じ得る。従って、9-シス -RAが細胞に利用されるようになる場合、モノマー性とダイマー性レセプターと の間の平衡が変化し、そしてさらなる種、RXRホモダイマーが形成され得、新規 の応答経路を与える。インビトロのゲルシフトアッセイにより観察されるように リガンド誘導ホモダイマー結合の概念は、変異したエストロゲンレセプター（ER -val-400）を除く核レセプターについて先に観察されている44,45。 関連TRについて、リガンドの影響は、ホモダイマー結合に関して報告されてい るが46,47、しかし、リガンド（T3）は、ホモダイマー応答エレメント相互作用 を減少させた。TRおよびRARのカルボキシ末端の半分が、リガンドおよび二量体 化機能の両方をコード化するので36,46,48、ここで観察されるように二量体化に 関するリガンドの強い影響は、全く驚くべきことではない。しかし、この影響の 特異性は、ヘテロダイマー形成ではなくホモダイマー形成のみに影響するような ので、きわめて劇的である。全体像は、その相互に混合されたドメインを介する レセプターのカルボキシ末端領域（転写活性化領域もまた含有する）49が、他の 制御タンパク質50との相互作用 をも含み得る個々のレセプター多重の活性を許容することから生じる。 本出願に記載のデータは、２つの機能を有するRXRの中心の役割を実証した。 それは、ヘテロ二量体化を通じてRAR、TRおよびVDRのホルモンレセプターの３つ のクラスについて補助レセプターとして作用することを可能にする。RXRの２つ の機能−ホモ二量体化およびヘテロ二量体化−は、２つの別個の転写調節制御を 説明する。それは、別個の生理的プロセスに影響すると予想され得る。従って、 9-シス-RAは、全-トランス-RAの治療特性とは別個の治療特性を有し得る。 本明細書で提供される新規化合物は、上記の構造式（I）により定義される化 合物である。この一般構造に入る好ましい化合物は以下を包含する： ここで、Ｒ11は、Ｏ、Ｓ、（ＣＨ3）2ＣおよびＣＨ2からなる群から選択され、 そしてＲ12は水素またはメチルである。この群に入る特に好ましい化合物は構造 式（II）に示されるような化合物である。 好ましいＲ3置換体は、Ｒ3が、以下の一般構造を有する場合であり、 以下よりなる群から選択される： 好ましいＲ3置換体は、Ｒ3が以下の一般構造の場合であり、 以下よりなる群から選択される： 式（II）に包含される好ましい構造の例は以下を包含する： 式（II）により定義される化合物のクラスに入る特定の詳細な好ましい化合物の 例は以下を包含する： 本発明はまた、カルボン酸部分を含む式（I）の化合物の薬学的に受容可能な 無毒性エステル、アミド、および塩の誘導体を包含する。 薬学的に受容可能な塩は、遊離酸を適量の薬学的に受容可能な塩基で処理する ことにより調製される。代表的な薬学的に受容可能な塩基は、水酸化アンモニウ ム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、水酸化カルシウム、 水酸化マグネシウム、水酸化第一鉄、水酸化亜鉛、水酸化銅、水酸化アルミニウ ム、水酸化第二鉄、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、 トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、2-ジメチルアミノ エタノール、2-ジエチルアミノエタノール、リジン、アルギニン、ヒスチジンな どである。反応は、水中で、水のみまたは不活性な水と混和し得る有機溶媒と組 み合わせて、約０℃〜約100℃の温度で、好ましくは室温で行われる。用いられ る塩基に対する構造式（I）の化合物のモル比は、任意の特定の塩に所望の比を 提供するように選択される。例えば、遊離酸出発物質のアンモニウム塩（本明細 書中の特に好ましい実施態様）の調製については、この出発物質は、約１当量の 薬学的に受容可能な塩基で処理されて中性塩が得られ得る。カルシウム塩が調製 される場合、約1/2モル当量の塩基を用いて中性塩が得られるが、アンモニウム 塩については、約1/3モル当量の塩基が用いられる。 エステル誘導体は、代表的には、化合物の酸形態に対する 前駆体として調製され（以下の実施例に例示する）、したがってプロドラッグと して用いられ得る。一般的には、これらの誘導体は、アセテート、プロピオネー トなどの低級アルキルエステルである。アミド誘導体の、-（CO）NH2、-（CO）N HR、および-（CO）NR2（ここでRは低級アルキルである）は、カルボン酸含有化 合物とアンモニアまたは置換アミンとの反応により調製され得る（以下の実施例 VIIに例示する）。 合成方法： 本発明の化合物は、有機合成化学者に一般に公知の技法を用いて容易に合成さ れ得る。架橋二環式芳香族化合物の製造および誘導体化に適切な実験方法は、例 えば、上記の要約したMaignanらの特許に記載されており、その特許の開示内容 は参考として本明細書中に援用されている。本発明の特定のおよび好ましい化合 物の製造方法は、以下の実施例III〜XVIIに詳細に記載されている。 有用性および投与： 構造式（I）で定義される本発明の化合物（その薬理学的に受容可能なエステ ル、アミド、または塩を含む）は、レチノイン酸ファミリーにおけるレセプター による選択的遺伝子発現を誘導および／または調節すること、およびレチノイド 、ビタミンＤ、および／または甲状腺ホルモンにより調節される細胞分化プロセ スを制御することに有用である。したがって、 上記のように、本発明の化合物は、座瘡（acne）、白血病、乾癬、皮膚の老化、 骨の石灰化、およびエネルギーレベル、ならびにレチノイン酸、ビタミンＤ、甲 状腺ホルモン、および9-シス-レチノイン酸により調節される細胞プロセスに関 連する他の徴候を治療することに有用である。 本発明の化合物は、薬学的に受容可能なキャリアと共に１つまたはそれ以上の 化合物から構成される薬学的組成物中に好都合に処方され得る。例えば、Reming ton's Pharmaceutical Sciences 、最新版、E.W．Martin（Mack Publ．Co.、East on PA）は、代表的なキャリア、および本発明の化合物の処方物の調製に関連し て用いられ得る薬学的組成物の従来の調製方法を開示していることを参照のこと 。 化合物は、経口的、非経口的（例えば、静脈内）、筋肉内注射、腹腔内注射、 局所的、経皮的などにより投与され得るが、代表的には経口または局所投与が好 ましい。もちろん、投与される活性化合物の量は、治療される被験体、被験体の 体重、投与方法、処方する医師の判断に依存する。しかし、一般に、投与量はレ チノイン酸の投与に代表的な量に近似しており、好ましくは約２μg/kg/日〜２m g/kg/日の範囲である。 所定の投与の態様に依存して、薬学的組成物は、固体形態、半固体形態、また は液体投与形態であり得、例えば、錠剤、坐剤、丸剤、カプセル剤、散剤、液剤 、懸濁剤、ローション剤、クリーム剤、ゲル剤などであり得、好ましくは、正確 な単回投与用量に適切な単位投与形態であり得る。この組成物 は、上記のように、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて、選択された有 効量の薬物を含み、そしてさらに、他の医用剤、薬用剤、キャリア、アジュバン ト、希釈剤などを含み得る。 固体組成物については、従来の無毒性固体キャリアには、例えば、薬用グレー ドのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカ リンナトリウム、タルク、セルロース、グルコース、スクロース、炭酸マグネシ ウムなどが含まれる。液体の薬学的に投与可能な組成物は、例えば、本明細書に 記載のような活性化合物および任意の薬学的アジュバントを、例えば、水、生理 食塩液、デキストロース水溶液、グリセロール、エタノールなどの賦形剤中に、 溶解、分散などすることにより調製されて、それにより溶液または懸濁液を形成 し得る。所望であれば、投与される薬学的組成物はまた、湿潤剤または乳化剤、 pH緩衝化剤など（例えば、酢酸ナトリウム、ソルビタンモノラウレート、トリエ タノールアミン酢酸ナトリウム、トリエタノールアミンオレエートなど）の少量 の無毒性の補助剤を含み得る。このような投与形態を調製する実際の方法は、当 該技術分野の当業者に公知または明らかであり、例えば、上記参考のRemington' s Pharmaceutical Sciences を参照のこと。 経口投与については、微細粉末または顆粒は、希釈剤、分散剤、および／また は界面活性剤を含み得、そして水中にまたはシロップ中に、乾燥状態ではカプセ ルまたは袋（sachet） 中に、または懸濁化剤が含まれ得る非水性溶液または懸濁液中に、結合剤または 滑沢剤が含まれ得る錠剤中に、または水またはシロップ中の懸濁液中に存在し得 る。所望であればまたは必要であれば、矯味剤、保存剤、懸濁化剤、濃稠化剤、 または乳化剤が含まれ得る。錠剤および顆粒剤は好ましい経口投与形態であり、 そしてこれらはコーティングされ得る。 非経口投与は、用いるのであれば、一般に注射により特徴づけられる。注射剤 は、液体溶液または懸濁液、注射前の液体中での溶液または懸濁液に適切な固体 形態として、または乳化剤としてのいずれかで、従来の形態で調製され得る。非 経口投与の最近再検討されたアプローチには、一定レベルの投与量が維持される ような、徐放性または持効性システムの使用が含まれる。例えば、米国特許第3, 710,795号を参照のこと。これは、本明細書中に参考として援用されている。 実験 以下の実施例は、本明細書中で請求項に挙げた方法、組成物および化合物を、 どのように作製し評価したかという完全な開示および記載を、当業者に提供する ために提出した。そして実施例は、発明者らの発明の範囲を制限することは意図 していない。数値（例えば、量、温度など）について正確さを保証する努力をし たが、いく分かの誤差および偏差を考慮しなければならない。特に指示がない限 り、部は重量部、温度は℃、そして圧力は大気圧またはそれに近い圧力である。 記載中の基および置換基の位置は、以下の番号付けシステムを実施例を通じて 採用する： 実施例Ｉ ホモダイマー形成の同定 ９-シス-RAは、TREpal上でRXRホモダイマー結合を誘導する RXRを高濃度で用いる場合、RXRがRA応答エレメント（RARE）に結合することを 示されているが28,30,31、さらに最近の研究により、RXRは溶液中でモノマーと して主に存在すること10、そして効果的なDNA相互作用に、RARまたはTRまたはVD Rと のヘテロダイマー形成が必要であること15,16,26-29が明らかになった。種々の 応答エレメントへのヘテロダイマーの結合は、リガンド非依存性であることが見 出された32。新たに発見された天然のRA異性体９-シス-RAは、RARまたはTRのい ずれも含んでいないことが知られているDrosophila Schneider細胞中のRXRの効 果的なアクティベーターであることが報告された17,24。９-シス-RAが、RXRに対 する確かに真のリガンドである場合、このリガンドが、RXR応答エレメント相互 作用を調節すると予想される。従って、コレセプター（TRおよびRAR）の非存在 下および存在下で、パリンドローム性TRE（TREpal）、RXR応答エレメント14への RXRαの結合に及ぼす９-シス-RAの影響を研究した。 RXRα、RARβ、またはTRαのレセプターcDNAのpBluescript（Stratagene，San Diego，CA）へのクローニングは、先に記載されている26。フラッグ-RXRαを、 ATGコドンを含む２本鎖のオリゴヌクレオチドとRXRαのＮ末端に相当するフラッ グ（Arg-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys）［配列番号：１］をコードするDNA配列 とのライゲーションにより、先の記載33のように構築した。次いで、融合生成物 を、pBluescriptにクローニングした。インビトロでの転写/翻訳系を用いるレセ プタータンパク質の合成、および合成したレセプタータンパク質および２本鎖TR Epalを用いるゲル遅延アッセイ34は、記載されたとおりである33。９-シス-RA（ 融点184-187℃）を、HOAc-MeOHの存在下で２段階の連続MnO2酸化35により、９- シス-レチナ− ルから調製し、メチルエステル（69％）を得、続いて25％ MeOH水溶液中の0.5Ｎ KOH中で加水分解（80％）し、そして結晶化した（MeOH）；HPLC（Novapak Ｃ18 、32％ MeCN、27％ MeCH、16％ Ｉ-PrOH、24％ H2O、１％ HOAc、1.9mL/分、260 nM）ｔR15.4分（100％）。ホルモンの影響を分析するために、DNA結合アッセイ を行う前に、レセプタータンパク質を適切な濃度のホルモンと、室温で30分間イ ンキュベートした。抗フラッグ抗体（Immunex，Seattle，WA）を用いて、DNA結 合アッセイを行う前に、１μｌの抗血清をレセプタータンパク質と、室温でさら に30分間インキュベートした。 リガンド非存在下では、RXR単独ではTREpalに効果的に結合せず、そして応答 エレメント相互作用のためにTRまたはRARを必要としたが、RXRの結合は、９-シ ス-RAの存在下で劇的に増加し（図１ａ）、そしてTRまたはRARを必要としなかっ た。９-シス-RAの存在下で観察されるRXR特異的バンドは、ヘテロダイマーTR-RX RおよびRAR/RXR複合体を用いて得たバンドと同じくらい目立った。RXR複合体は 、RAR/RXRヘテロダイマーTREpal複合体の位置と非常に似た位置に、TR-RXR複合 体に比べより遅くと移動した。従って、これらのデータは、９−シス-RAがRXRホ モダイマー形成を誘導することを示す。９-シス-RAで誘導されるRXRホモダイマ ー複合体と同じ位置でのRAR-RXR複合体が移動するため、両方の複合体が形成さ れるか否かを、この実験において決定し得なかった。特筆すべきことには、全− トランス-RAを10-6Ｍの濃度で添加した場合もまた、RXRα ホモダイマー結合をある程度誘導したが、Ｔ3は誘導しなかった。RAの影響は、 幾つかの用時調製RA溶液を用いて観察し得たが、RAの存在下におけるこのホモダ イマー形成が、本明細書で用いた全-トランス-RA溶液中の９-シス-RA不純物のせ いであるか、または全-トランス-RAの直接の影響であるのかは現時点では明確で はない（以下を参照のこと）。興味深いことには、９-シス-RAは、RXRに対する その影響とは異なって、RARには結合し得ると報告24されているが、９-シス-RA が、TREpalへのRARホモダイマー結合を誘導することは見出されなかった。 ９-シス-RAの存在下で観察された複合体が、確かにRXR複合体であるという証 拠をさらに提供するために、DNA結合実験をフラッグ-RXRを用いて行った。この 誘導体は、抗フラッグ（αF）抗体により特異的に認識される８個のアミノ酸ア ミノ末端エピトープを保持する33。図１ｂに示したように、αFは、９-シス-RA 誘導複合体をシフトさせたが、非特異的抗体はしなかった。このことは、９−シ ス-RAの存在下でTREpalにより観察された複合体が、確かにRXRタンパク質を含有 することを証明した。９−シス-RA誘導ホモダイマー形成が、RXRタンパク質の濃 度にどのように依存しているかを調べるために、インビトロでの翻訳されたRXR タンパク質の増加する濃度を、９−シス-RAの存在下または非存在下で、標識し たTREpalと混合した（図２ａ）。これらの混合物を、ゲル遅延アッセイにより分 析した場合、ホモダイマーのDNA結合に、RXRαタンパク質濃度 に正の相関で依存する、強い協同の影響が見られた（図２ａ，ｂ）。高濃度のRX Rを用いた場合、RXRのわずかな結合を観察し得るが、用いた全てのレセプター濃 度において、９-シス-RAが効果的な複合体形成に必要であった。用いた全てのレ セプター濃度において、ホモダイマー複合体形成に必要な９-シス-RAの濃度をさ らに決定した。ホモダイマー複合体形成に必要な９-シス-RAの濃度をさらに決定 した。10-9Ｍで著しい影響が既に観察されたが、最適結合は10-8Ｍで見られた（ 図２ｃ）。従って、効果的なRXRホモダイマーDNA相互作用は、RXRタンパク質濃 度に依存し、そして低レベルの９−シス-RAで生じ得る。９-シス-RAは、特定の応答エレメントとのホモダイマーの相互作用を誘導する RXR含有ヘテロダイマーは、種々の天然の応答エレメントとの高い特異的な相 互作用を有し、TR-RXRヘテロダイマーはTREと強く結合するだけであり、RAREと は結合しない。ところが、RAR-RXRヘテロダイマーについては、逆が真実である1 5,32 。多数の天然および合成応答エレメントを用いて、９-シス-RA誘導RXRホモ ダイマーのDNA結合に必要な配列を調べた（図３ａ）。 インビトロで合成されたレセプタータンパク質を用いるゲル遅延アッセイを、 図１説明に記載する。以下のオリゴヌクレオチドおよびそれらの相補鎖を、図３ および図４においてプローブとして用いた。ApoAI-RARE、２bpスペーサーを有す る直接反復応答エレメント31、gatcAGGGCAGGGGTCAAGGGTTCAGTgatc ［配列番号：２］；CRBPII-RARE、１bpスペーサーを有する直接反復RXR特異的 応答エレメント30、gatcCAGGTCACAGGTCACAGGTCA-CAGTTCAAgatc［配列番号：３］ ；β RARE、RARβプロモーターに存在するRA応答エレメントの直接反復36,37、g atctGTAGGGTTCACCG-AAAGTTCACTCagatc［配列番号：４］；CRBPI-RARE、ラットCR BPIプロモーターに存在する直接反復RA特異的応答エレメント38、gatccAGGTCAAA AAGTCAGgatc［配列番号：５］；MHC-TRE、ラットα-ミオシンＨ鎖遺伝子に存在 する、直接反復Ｔ3特異的応答エレメント40、gatcCTGGAGGTGACAGGAGGACAGCgatc ［配列番号：６］；ME-TRE、ラットリンゴ酸酵素遺伝子に存在する直接反復Ｔ3 特異的応答エレメント41、gatcCAGGACGTTGGGGTTAGGGGAGGACAGTGGgatc［配列番号 ：７］；DR-4、４bpのスペーサーを有する理想化した直接反復Ｔ3特異的応答エ レメント39、gatcTCAGGTCATCCTCAGGTCA-gatc［配列番号：８］；DR-5、５bpスペ ーサーを有する理想化した直接反復RA特異的応答エレメント39、gatcTCAGGTCATC CTCAGGTCA-gatc［配列番号：９］；ERE、完全なパリンドローム性のER応答エレ メント42、gatcTCAGGTCACTGTGACCTGAgatc［配列番号：10］。TREpal配列［配列 番号：11］を、比較のために示す。 ApoAI-RARE（２bpのスペーサーを含む直接反復応答エレメント）は、RXR特異 的であると示唆31されているが、９-シス-RAの存在下で強いRXR複合体として得 られ、そしてRA（10-6Ｍ）とはより低い程度の複合体として得られた。RXR-RAR ヘテロダイマーはまた、この応答エレメントと効果的に結合した。ヘテロダイマ ー複合体は、RXRホモダイマーと同じ位置で移動した ので、９-シス-RAのRXR-RARヘテロダイマーの影響は明確には決定され得ない。R ARホモダイマー結合は、９-シス-RAにより誘導されなかった（図３ｂ）。他のRX R応答エレメント30、つまりCRBPII-RAREへのRXR結合を誘導する９-シス-RAを研 究したところ、（リガンドの非存在下で）ヘテロダイマーよりさらに遅く移動し た複合体を観察したが、９-シス-RAおよびRARの存在下では、ホモダイマー結合 およびヘテロダイマー結合のいずれもがその強さに減少が見られた（図３）；同 様の影響が、高RA濃度において、または９-シス-RAおよびRAがいずれも存在する 場合において見られた。９-シス-RAはまた、RXRのβRARE、（５bpのスペーサー を含むヒトRARβプロモーター由来のRAR応答エレメント36,37）との相互作用を 誘導した（図４ａ）。しかし、RXRホモダイマーバンドは、用いたタンパク質濃 度において、RAR-RXRヘテロダイマーバンドよりかなり弱い。興味深いことに、 ラットCRBPIプロモーター由来の他の天然のRARE38（２bpのスペーサーを含むApo AI-RAREに似ている）は、９-シス-RAの存在下で、RXRのいかなる結合も示さなか った（図４ａ）。これは、反復コアモチーフの実際の配列が、RXRホモダイマー 結合に重要であることを示している。同様に、DR-5-RARE、つまりβ-RARE由来の 完全な反復エレメント39は、９-シス-RAの存在下ではRXRとの相互作用を示さな かったが、RAREが存在する場合に、RXRと強く相互作用する（図４ａ）。 RXRホモダイマー結合が特定のRAREに特異的であるか否かを決定するために、 ラットα-ミオシンＨ鎖プロモーター（MHC- TRE）由来のＴ3応答エレメント40、ラットリンゴ酸酵素（ME-TRE）由来のＴ3応 答エレメント41、および完全な反復DR-4由来のＴ3応答エレメント39を用いてゲ ルシフト実験をまた行った。３つの場合の全てにおいて、９-シス-RAの存在下ま たは非存在下でRXRの特異的な結合は観察され得なかったが、３つの応答エレメ ントの全ては、TR/RXRヘテロダイマーと効果的に結合し、これらのエレメントは 、レチノイドによって誘導されないという見解と一致する。同様に、完全なパリ ンドローム性ERE42はまた、RXRホモダイマーと相互作用しなかった（図４ｃ）。DNAの非存在下で９-シス-RAで誘導されるホモダイマー形成が生じる RXRは、溶液中に主にモノマーとして存在することが報告された16。重要な問 題は、９-シス-RAで誘導されるRXRホモダイマー（ヘテロダイマー含有のRXRに似 ている）が、DNAの非存在下で溶液中で形成し得るか否かということである。こ の問題に解決するためにフラッグ-RXR誘導体の利点、即ち、抗フラッグ抗体と特 異的に沈殿し得るが、RXR野生型は沈殿し得ないという利点を用いた。 フラッグ-RXRαを、発現ベクターpGex 2T（Pharmacia）中に読み取り枠を合わ せてクローニングし、そして製造業者により提供された手順を用いて細菌中て発 現させた。タンパク質を、予め充填されたグルタチオンセファロース4Bカラム（ Pharmacia）上で部分精製し、そして抗フラッグ抗体を用いるゲル 遅延アッセイおよびウエスタンブロッティングにより、その機能について試験し た。免疫共沈殿アッセイを、本質的には記載26されたように行った。簡単に言え ば、インビトロにおいて35Ｓ標識した10μｌの合成RXRαタンパク質を、５μｌ （約0.1μｇ）の部分精製した細菌で発現させたフラッグ-RXRα融合タンパク質 または同様に調製したグルタチオントランスフェラーゼ対照タンパク質と、100 μｌ緩衝液（10-7Ｍ９-シス-RA、50mM KCl、および10％グリセロール含有）中で 、室温で30分間インキュベートした。化学的架橋剤またはオリゴヌクレオチドの 存在下でアッセイした場合、DMSOに溶解した２μｌの100mMジチオビススクシン イミジルプロピオネート（DSP）、または10ngのオリゴヌクレオチドを添加し、 そして室温で15分間インキュベートを続けた。次いで、反応混合物を１μｌの抗 フラッグ抗体または非特異的プレ免疫血清と、氷上で２時間インキュベートした 。免疫複合体を、50μｌのプロテイン-Ａ-セファローススラリーを添加し、そし て低温室で１時間連続的に混合することにより沈殿させた。免疫複合体を、10-7 Ｍ９-シス-RA含有の冷NET-N緩衝液（20mM トリス、pH 8.0、100mM NaCl、１mM DTT、0.5％ NP-40）でよく洗浄し、SDS試料緩衝液中で煮沸し、そしてSDS-ポリ アクリルアミドゲル電気泳動により分析した。ゲルを固定し、乾燥し、そしてオ ートラジオグラフィーにより可視化した。 フラッグ-RXRを、インビトロにおいて標識した35S-RXRタンパク質と混合した 場合、標識RXRは、抗フラッグ抗体の存在 下では沈殿し得たが、非特異的血清の存在下で沈殿し得なかった（図５）。ApoA I-RARE存在下では、共沈殿効率はわずかに増加したが、MHC-TREの存在下では増 加しなかった。さらに、架橋剤（DSP）とのインキュベートにより、標識RXRの共 沈殿がさらに増強された。全ての場合において、特異的な共沈殿は、９-シス-RA の存在下でのみ観察された。従って、これらのデータにより、９-シス-RA誘導RX Rホモダイマー形成が、溶液中で生じ、そしてRXR-DNA相互作用を必要としないと いう仮説が強く指示される。９-シス-RAおよびRXRαによる応答エレメント特異的転写活性化 ９-シス-RA/RXRαホモダイマー応答エレメント相互作用が、９-シス-RA/RXR複 合体によるそのような応答エレメントによる転写活性化と関連し得るか否かを研 究するために、CV-１細胞において一連の一時的なトランスフェクションアッセ イを行った。ここでは、レセプター発現ベクターを、tkプロモーターの種々の上 流の応答エレメントを有するCATリポーター構築物で同時トランスフェクトした 。CV-１細胞を、先に記載43のように改変したリン酸カルシウム沈殿手順を用い て、一時的にトランスフェクトた。同時トランスフェクトしたβ-ガラクトシダ ーゼ発現プラスミド（pCH110、Pharmacia）由来の酵素活性を測定することによ り、CAT活性をトランスフェクション効率について標準化した。トランスフェク トした細胞を、10-7 Ｍ ９-シス-RAまたは全-トランス-RAの非存在下または存在下で生育させた。 TREpal含有リポーターを用いて、９-シス-RAの存在下でのRXRαによる強い活 性化、およびRAを添加した場合活性化がほとんど観察されなかった。活性化は、 RARαの同時トランスフェクションによりさらに増強され得た。しかし、この場 合、RAはまた、９-シス-RAほど効率的ではないが、効果的なアクティベーターと して機能した。全体で、RARαおよびRXRαの存在下で、９-シス-RAによる活性化 は、RXRα単独でみられた強さの約２倍であり、両方のレセプターが存在した場 合、結合が９-シス-RAの存在下でヘテロダイマーおよびホモダイマーの両者によ って観察された、DNA結合データと一致する（図６ａ）。βRAREを試験したとき （図６ｂ）、この応答エレメントは、先の観察37,42と一致して、内因性のCV-１ 細胞レセプターにより高く活性化されることが観察されたが、低濃度の同時トラ ンスフェクトしたレセプターによるさらなる活性化は観察され得なかった。しか し、９-シス-RAは、興味深いことに、10-7Ｍにおいて、RAより強い活性化剤であ った。従って、これらのデータは、CV-１細胞が内因性レチノイドレセプター活 性を含んでおり、その活性はβRAREについて特に活性であり、そして９-シス-RA に応答性であるということを示す。 ApoAIエレメント含有リポーターはまた、９-シス-RAの存在下でRXRαにより非 常に効果的に活性化されたが（図６ｃ）、RXRαの非存在下で得られるレベルを 超えてRAは誘導しなかっ た。TREpalと同様に、レセプターRXRαおよびRARαの両方を同時トランスフェク トした時、最大の活性化がみられた。これらの条件下で、RAはまた強い活性化に 至った。それに対して、CRBPIエレメント（ここでは、９-シス-RAの存在下でRXR によるDNA結合は観察されなかった）はまた、一時的なトランスフェクション研 究においてRXRおよび９-シス-RAにより活性化されなかったが（図６ｄ）、RARα 単独で、大体において９-シス-RA依存性である顕著な活性化に至った。ヘテロダ イマーRARα RXRαは、９-シス-RAの存在下で最大の活性化を可能にした。予測 しなかったことではないが、RXRαおよび９-シス-RAによる誘導は、MHC-TRE、ME -TRE、またはEREについては観察されなかった。これらのインビボでの分析は、 インビトロでのDNA結合研究で得られた結果に顕著な相関を示した。そこでは、 ９-シス-RAの存在下でRXRαによる強い活性化が、９-シス-RA誘導RXRαホモダイ マーと強く相互作用する応答エレメントについてのみ観察される。９-シスレチレイン酸は、TR/RXRヘテロダイマーによる活性化を阻害する 甲状腺ホルモン（Ｔ3）の存在下で、甲状腺ホルモンレセプター/RXRヘテロダ イマーにより活性化されるCATでリポートされた遺伝子は、９-シス-RAを添加す ることにより阻害され得る。この型の阻害は、トランスフェクションアッセイを 用いて最も容易に測定される。 実施例II RXR活性を誘導する化合物の同定および選択 TREpal-tk-リポーター遺伝子を、本質的には記載51のように一時的なトランス フェクションアッセイに用い、RXR活性の誘導について化合物を評価した。簡単 に言えば、CV-１細胞またはHep G2細胞を、10％ウシ胎児血清を補填したDME培地 中で生育させた。細胞は、トランスフェクション前に24ウェルプレート中16〜24 時間てウェル当たり1.0×105個にプレート培養した。一般的に、100ngのリポー タープラスミド、150ngのβ-ガラクトシダーゼ発現ベクター（pCH110、Pharmaci a）、およびレセプター発現ベクターの種々の量を、キャリアDNA（pBluescript ）と混合し、ウェル当たり1,000ng全DNAとした。クロラムフェニコールアセチル トランスフェラーゼ（CAT）活性を、先に記載52のように対応するβ-ガラクトシ ダーゼ活性によりトランスフェクション効率を標準化した。実施例Ｉに示したよ うに、TREpalは、RAR/RXRヘテロダイマーおよびRXRホモダイマーの両方により活 性化される応答エレメントを表す。RXR発現ベクターをTREpal-tk-リポーター遺 伝子と、CV-１細胞に同時トランスフェクションする場合、全-トランス-RAは、 リポーターを効果的に活性化しないが、９-シス-RAは活性化する。一連のレチノ イドの評価は、幾つかがRXRとの活性を示すことを指摘した。次いで、これらの 構造物の薬効を有する（pharmacophoric）エレメントを組み合わせ、そしてさら に改変 してRXRに対する活性化プロフィールが、９-シス-RAのそれに類似するレチノイ ドのサブセットを生成した。RXRとの幾つかのレチノイド活性についての誘導曲 線を図７ａに示す。興味深いことには、活性化合物のいずれもが、10-8Ｍでは活 性を示さなかったが、10-7Ｍでは、全てが９-シス-RAと同様の活性を示した。次 に細胞質レチノール結合タンパク質II（CRBPII）のRARE30を有するリポーター遺 伝子を用いた。これは、RXRホモダイマーによってのみ活性化されるが、RAR/RXR ヘテロダイマーによっては活性化されない応答エレメントである。この応答エレ メントにより得られた誘導プロフィールは、TREpal応答物に似ていた（図７ｂ） 。従って、合成レチノイドのSR11203、SR11217、SR11234、SR11235、SR11236、 およびSR11237は、RXRαの効果的なアクティベーターのようであった。化合物の 構造は、以下の通りである： この一連のレチノイドについての活性ランキングは、TREpalおよびCRBPIIリポ ーター遺伝子の両者について同じであっ た。ケタールSR11237が最も活性であり、続いてイソプロピリデニルレチノイドS R11217、ヘミチオケタールSR11235およびチオケタールSR11234であった。ジチア ンSR11203およびジオキサンSR11236は最も低い活性を有した。構造分析により、 これらのレチノイドは、９-シス-RAの親油性の頭部およびカルボキシル末端の空 間的配向と類似の空間的配向を有し、しかも、活性がテトラヒドロナフタレンお よびフェニル環系に結合している置換基（CRR1）の長さおよび体積に関係し得る ことが示された。 実施例Ｉに、RXRαホモダイマー形成を誘導することにより、９-シス-RAがRXR αを特異的に活性化することを示したので、ゲル遅延アッセイを用いて、TREpal へのレチノイド誘導RXRホモダイマー結合を研究した。簡単に言えば、ゲル遅延 アッセイを、本質的には先に記載33のように行った。インビトロで翻訳したレセ プターレセプタータンパク質（翻訳効率に依存して１〜５ml）を、32Ｐ標識オリ ゴヌクレオチドと20mlの反応混合物（10mM Hepes緩衝液、pH 7.9、50mM KCl、１ mM DTT、2.5mM MgCl、10％グリセロール、および１mgのポリ（dI-dC）含有）中 で、25℃、20分間インキュベートした。次いで、反応混合物を、0.5×TBE（１× TBE＝0.089Ｍ トリスボレート、0.089Ｍホウ酸、および0.002Ｍ EDTA）含有の ５％非変性ポリアクリルアミドゲル上にロードした。 ９-シス-RAの非存在下で、RXRはこの応答エレメントに結合しなかった。レチ ノイドSR11217、およびSR11237は、濃度に 依存する様式で、応答エレメントへのRXRホモダイマー結合を誘導した。レチノ イド11203（これは、一時的なトランスフェクションアッセイにおいて弱いアク ティベーターとしてふるまった）はまた、弱いRXR結合のみを誘導した。SR11231 （これは、RXRホモダイマーを活性化しなかった）はまた、RXRホモダイマー結合 を誘導し得なかった。同様の結果が、CRBPII-RAREおよびApoAI-RAREで得られた 。従って、本明細書中において、RXRαを活性化する合成レチノイドのクラスを 、ホモダイマー形成およびDNAへの結合により規定した。 重要な問題は、９-シス-RA様のこれらのRXR活性化化合物がまた、RAR/RXRヘテ ロダイマーを活性化し得るか、あるいは、それらが真にRXR選択性であり得るか 否かであった。この問題を分析するために、以下のいずれかを保持する４つの異 なるリポーター構築物を用いた：i）ラット細胞質レチノール結合性タンパク質 Ｉ（CRBPI）遺伝子RARE38であり、これだけがRAR/RXRヘテロダイマーにより結合 され活性化される；ii）RARβ2遺伝子プロモーターRARE36、37、これはヘテロダ イマーにより最も効率的に結合されるが、RXRホモダイマーによってもまたある 程度までは活性化される；iii）CRBPII-RARE、これはRXRホモダイマーによって のみ活性化され、そしてRARはRXR活性を抑制する30；iv）アポリポプロテインAI （apoAI）遺伝子RARE31であり、これはRAR/RXRヘテロダイマーにより、およびRX Rホモダイマーにより結合され、そして活性化される。４つの異なるリポーター 構築物を、RARα、RARβ、RXRαで、また はRXRαとRARαで一緒に同時トランスフェクトした51。レチノイドを、５×10-7 の濃度で分析した（示した投与量でほとんど完全な誘導が得られた（図７））。 CV-１細胞を、100ngのリポータープラスミドのa）CRBPI-tk-CAT、b）βRARE-t k-CAT、c）CRBPII-tk-CAT、およびd）apoAI-tk-CATで、同時トランスフェクトし た。レチノイドを、５×10-7Ｍで適用した。代表的な実験の結果を示す。 RXR特異的レチノイドは、RXRホモダイマーを活性化するのみであるが、RAR/RX Rヘテロダイマーを活性化しない点で、９-シス-RA（またはRA）とは著しく異な って作用する。９-シス-RAとのように、SR11217およびSR11237の両者は、CRBPII -RARE（すなわち、RXRホモダイマーによってのみ顕著に活性化されるRARE）の強 いアクティベーターである。しかし、９-シス-RAに比べて、それらは、RAR/RXR ヘテロダイマーによってのみ活性化されるCRBPI-RAREを誘導しなかった。従って 、SR11217およびSR11237は、CRBPII-RAREについて、９-シス-RAに非常に似た作 用をするが、それらはCRBPI-RAREについては応答を示さず、ここでは、９-シス- RAは最適のアクティベーターである。βRAREは、SR11217およびSR11237によりわ ずかに活性化され、この応答エレメントについてのRXRホモダイマーの比較的低 い親和性と一致した。apoAI-RAREは、９-シス-RAの存在下で、RAR/RXRヘテロダ イマーにより最も効果的に活性化された。CV-１細胞中で見出された活性に加え て、レチノイドSR11217およびSR11237により、顕著なそしてRXR特異的な活性 化がまた、種々の他の細胞株（Hep G2細胞を含む）においても観察され、ここで は、特に高い応答が観察された。RARαおよびRARβは、同時トランスフェクトし ただけの場合は、試験した任意の応答エレメントについても、任意の合成レチノ イドによっても顕著に活性化されなかった。同様のネガティブな結果がRARγに ついて得られた。RARαおよびβは、CV-１細胞中で、内因性のRXR様タンパク質 とヘテロダイマーを形成すると仮定される。従って、これらのヘテロダイマーは また、合成レチノイドに非応答性である。 これらのデータは、新規なクラスのレチノイド類を同定したことを示す。これ らのレチノイド類は、RXRホモダイマー形成を特異的に誘導し、そして特異的に 応答エレメントについてRXRホモダイマーを活性化するが、RAR/RXRヘテロダイマ ーを活性化しない。これらのレチノイド類は、RXR選択的応答経路の特異的な活 性化を可能にするが、RAR依存性応答経路の誘導はしない。これらのレチノイド 類は、現在用いられているRA異性体または他のレチノイドに比べさらに制限され た生理学的応答を提供する。 実施例III （a.）メチル4-［（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2-ナフタレ ニル）カルボニル］ベンゾエート（3）： 1.5mLの1,2-ジクロロメタン中の塩化アルミニウム（1.13ｇ、8.5mmol）の懸濁 液に、０℃で、アルゴン雰囲気下にて、６mLの1,2-ジクロロエタン中の1,2,3,4- テトラヒドロ-1,1,4,4-テトラメチルナフタレン１（1.45ｇ、7.7mmol）（Kagech ika，H.ら、J．Med．Chem． 31：2182（1988））および4-カルボメトキシベンゾ イルクロライド２（1.56ｇ、7.9mmol）の溶液を添加した（4-カルボメトキシベ ンゾイルクロライド２は、Aldrichから容易に入手可能なモノメチルテレフタレ ートから、１工程（SOCl2、DMF）により得た）。得られた溶液を室温まで昇温し 、その後16時間撹拌した。反応混合物を、氷水上に注ぎ、40％酢酸エチル/ヘキ サンで抽出した。合わせた有機層を、飽和NaHCO3水溶液および塩水で洗浄した。 溶液を、無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して橙色の固体（4.5ｇ）を得 た。フラッシュクロマトグラフィー（50％ジクロロメタン/ヘキサン）により、 所 望の生成物３を、淡黄色の固体（2.07ｇ）として得た。ジクロロメタン/ヘキサ ンからの再結晶により、所望の生成物３を、白色の結晶性固体として得た（1.96 ｇ、50％）：融点146〜148℃；Rf 0.14（50％CH2Cl2/ヘキサン）。生成物の構造 もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。 （b.）［2-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチルナフタレン-2-イル ）-2-（4-カルボメトキシフェニル）］-1,3-ジチアン（4）： ３mLのクロロホルム中のケト-エステル３（97mg、0.277mmol）の溶液に、０℃ で、アルゴン雰囲気下にて、1,3-プロパンジオール（33μL、36mg、0.332mmol） の溶液、続いて三フッ化ホウ素エーテル錯体（17μL、0.140mmol）を添加した。 得られた混合物を、０℃で１時間撹拌し、次いで一晩室温まで温めた。反応混合 物を、飽和Na2CO3水溶液中に注ぐことによりクエンチし、そしてジクロロメタン で抽出した。合わせた有機層を、無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して 黄色の固体（0.108ｇ）を得た。酢酸エチル/ヘキサンからの再結晶により、所望 のジチアン４を、白色の結晶性固体として得た（0.087ｇ、71％）：融点195〜19 7℃；Rf 0.32（50％CH2Cl2/ヘキサン）。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよ び質量分析を用いて確認した。 （c.）［2-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチルナ フタレン-2-イル）-2-（4-カルボキシフェニル）］-1,3-ジチアン（5）： 75％水性メタノール溶液（２mL）中のエステル４（85mg、0.193mmol）の懸濁 液に、0.024ｇの水酸化カリウムを添加し、そして混合物を50℃でこの物質が溶 解するまで２時間撹拌した。溶液を室温まで冷却し、1Nの塩酸水溶液で酸性にし 、次いで80％酢酸エチル/ヘキサンで抽出した。合わせた有機層を、無水MgSO4で 乾燥し、濾過し、そして濃縮して白色固体を得た。ベンゼン/ヘキサンからの再 結晶により、所望の酸５を、白色粉末として得た（0.076ｇ、92％）：融点229〜 231℃。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。 実施例IV （a.）［2-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2-ナフタレニル） -2-（4-カルボメトキシフェニル）］-1,3-ジチオラン（6）： ジクロロメタン（２mL）中のケト-エステル３（80mg、0.228mmol）の溶液に、 ０℃で、アルゴン雰囲気下にて、ジクロロメタン（0.5mL）中のエタンジチオー ル（26mg、0.27mmol）、続いて三フッ化ホウ素エーテル錯体（0.04mL、0.3mmol ）を添加した。得られた混合物を、０℃で１時間撹拌し、次いで一晩室温まで温 めた。反応混合物を、飽和Na2CO3水溶液中に注ぐことによりクエンチし、そして 40％酢酸エチル/ヘキサンで抽出した。合わせた有機層を、無水MgSO4で乾燥し、 濾過し、そして濃縮して固体を得た。フラッシュクロマトグラフィー（30；40％ CH2Cl2/ヘキサン）により、所望のジチアン６を白色固体として得た（0.088g、9 0％）：融点105〜107℃：Rf 0.33（50％CH2Cl2/ヘキサン）。生成物の構造もま た、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。 （b.）［2-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2-ナフタレニル） -2-（4-カルボキシフェニル）］-1,3-ジチオラン（7）： 75％水性メタノール溶液（３mL）中のエステル６（85mg、0.199mmol）の懸濁 液に、水酸化カリウム１粒（0.11ｇ）を添加し、そして混合物を70℃でこの物質 が溶解するまで１時間撹拌した。溶液を室温まで冷却し、1Nの塩酸水溶液で酸性 にし、次いで、80％酢酸エチル/ヘキサンで抽出した。合わせた有機層を、無水M gSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して白色固体を得た。ジクロロメタン-ヘキ サンからの再結晶により、所望の 酸７を、白色粉末として得た（0.064ｇ、79％）：融点218〜221℃。生成物の構 造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。 実施例Ｖ （a.）［2-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2-ナフタレニル） -2-（4-カルボメトキシフェニル）］-1,3-ジオキソラン（8）： １mLのベンゼン中のケト-エステル３（80mg、0.228）の溶液に、エチレングリ コール（１mL）、1,2-ビス（トリメチルシリルオキシ）エタン（２mL）、および 触媒量のp-TsOHを添加した。反応混合物を４時間還流加熱し、次いで室温まで冷 却した。溶液を飽和NaHCO3水溶液中に注ぎ、そして40％酢酸エチル/ヘキサンで 抽出した。合わせた有機層を、無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して固 体を得た。フラッシュクロマトグラフィー（50％CH2Cl2/ヘキサン）により、所 望のケタール８を白 色固体として得た（0.082ｇ、91％）：融点145〜147℃；Rf 0.16（50％CH2Cl2/ ヘキサン）。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した 。 （b.）［2-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2-ナフタレニル） -2-（4-カルボキシフエニル）］-1,3-ジオキソランアンモニウム塩（10）： 75％水性メタノール溶液（２mL）中のエステル８（50mg、0.127mmol）の懸濁 液に、水酸化カリウム１粒（0.1ｇ）を添加し、そして反応混合物を70℃でこの 物質が溶解するまで１時間撹拌した。溶液を室温まで冷却し、1Nの塩酸水溶液で 酸性にし、次いで80％酢酸エチル/ヘキサンで抽出した。合わせた有機層を、無 水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して白色固体９を得た。この酸９を、ア ルゴン雰囲気下にてジクロロメタン（４mL）に溶解し、そして溶液中にアンモニ アガスを凝縮し、それを５分間、-33℃で撹拌した。溶液を20分間室温まで温め 、アンモニアをエバポレートし、そして濃縮してアンモニウム塩10を白色粉末と して得た（47mg、93％）：融点259〜261℃。生成物の構造もまた、IR、1H NMRお よび質量分析を用いて確認した。 実施例VI （a.）［2-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2-ナフタレニル） -2-（4-カルボメトキシフェニル）］-1,3-オキサチオラン（11）： ２mLのベンゼン中のケト-エステル３（88mg、0.251）の溶液に、2-メルカプト エタノール（１mL）、および触媒量のp-TsOHを添加した。反応混合物を一晩還流 加熱し、次いで室温まで冷却した。溶液を、飽和NaHCO3水溶液中に注ぎ、そして 40％酢酸エチル/ヘキサンで抽出した。合わせた有機層を、無水MgSO4で乾燥し、 濾過し、そして濃縮して固体を得た。フラッシュクロマトグラフィー（50％CH2C l2/ヘキサン）により、所望のケタール11を白色固体として得た（0.09ｇ、87％ ）：融点122〜124℃：Rf 0.24（50％CH2Cl2/ヘキサン）。生成物の構造もまた、 IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。 （b.）［2-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2-ナフタレニル） -2-（4-カルボキシフェニル）］-1,3-オキサチオラン（12）： 75％水性メタノール溶液（３mL）中のエステル11（64mg、0.1 56mmol）の懸濁液に、水酸化カリウム１粒（0.12ｇ）を添加し、そして反応混合 物を75℃でこの物質が溶解するまで１時間撹拌した。溶液を室温まで冷却し、1N の塩酸水溶液で酸性にし、次いで、80％酢酸エチル/ヘキサンで抽出した。合わ せた有機層を、無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して白色固体を得た。 ジクロロメタン-ヘキサンからの再結晶により、所望の酸12を、白色粉末として 得た（0.06ｇ、97％）：融点216〜217.5℃。生成物の構造もまた、IR、1H NMRお よび質量分析を用いて確認した。 （a.）［2-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2-ナフタレニル） -2-（4-カルボメトキシフェニル）］-1,3-ジオキサン（13）： ５mLのベンゼン中のケト-エステル３（150mg、0.428mmol）の 溶液に、1,3-プロパンジオール（1.5mL）、および触媒量のp-TsOHを添加した。 反応混合物を、一晩還流加熱し、次いで室温まで冷却した。溶液を飽和NaHCO3水 溶液中に注ぎ、そして40％酢酸エチル/ヘキサンで抽出した。合わせた有機層を 、無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して固体を得た。フラッシュクロマ トグラフィー（50％CH2Cl2/ヘキサン）により、所望のケタール13を白色固体と して得た（0.164ｇ、94％）：融点157〜159℃；Rf 0.24（５％酢酸エチル／ヘキ サン）。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。 （b.）［2-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2-ナフタレニル） -2-（4-カルボキシフェニル）］-1,3-ジオキサンアンモニウム塩（15）： 75％水性メタノール溶液（３mL）中のエステル13（0.1ｇ、0.245mmol）の懸濁 液に、水酸化カリウム１粒（0.12ｇ）を添加した。反応混合物を80℃でこの物質 が溶解するまで30分間撹拌した。溶液を室温まで冷却し、1Nの塩酸水溶液で酸性 にし、次いで80％酢酸エチル/ヘキサンで抽出した。合わせた有機層を、無水MgS O4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して白色固体14を得た。酸14を、アルゴン雰囲 気下にてジクロロメタン（４mL）に溶解した。アンモニアガスをフラスコ中に凝 縮し、そして混合物を５分間、−33℃で撹拌した。溶液を、20分間で室温まで温 め、アンモニアをエバポレートし、そして濃縮してアンモニウム塩15を、白色粉 末として得た（0.238ｇ、97％）： 融点228〜230℃。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認 した。 実施例VIII （a.）メチル4-［1-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2-ナフタ レニル）-1-エテニル］ベンゾエート（16）： ５mLのベンゼン中のメチルトリフェニルホスホニウムブロマイド（0.78ｇ、2. 18mmol）の懸濁液に、室温でアルゴン雰囲気下にて、ヘキサメチルジシラジドカ リウムの0.5Ｍトルエン溶液（4.4mL、2.2mmol）を添加し、そして黄色の溶液を ５分間撹拌した。７mLのベンゼン中のケトエステル３（0.51ｇ、1.455mmol）の 溶液を添加し、そして橙色の溶液を、１時間室温で撹拌した。反応混合物を、飽 和NaHCO3水溶液中に注ぎ、そして40％酢酸エチル/ヘキサンで抽出した。合わせ た有機層を、無水MgSO4で乾燥し、シリカゲルのプラグを通して濾過し、そ して濃縮して固体を得た。フラッシュクロマトグラフィー（30％ジクロロメタン /ヘキサン）により、所望の生成物16を白色固体として得た（0.405ｇ、 80％） ：融点117〜118℃；Rf 0.2（25％CH2Cl2/ヘキサン）。生成物の構造もまた、IR 、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。 （b.）［1-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2-ナフタレニル） -1-（4-カルボメトキシフェニル）］シクロプロパン（17）： 10mLのベンゼン中のエテン16（0.130ｇ、0.373mmol）の溶液に、室温でアルゴ ン雰囲気下にて、ジエチル亜鉛の１Ｍヘキサン溶液（5.6mL、5.6mmol）を添加し 、そして反応混合物を60℃まで加熱した。２mLのベンゼン中のジヨードメタン（ 0.48mL、6.0mmol）を５分間滴下した。反応混合物を室温まで冷却し、そして酸 素を３時間通じた。濁った溶液を、40％酢酸エチル/ヘキサンで希釈し、そして 塩酸水溶液、水、および飽和NaHCO3水溶液で洗浄した。有機層を、無水MgSO4で 乾燥し、濾過し、そして濃縮して固体を得た。フラッシュクロマトグラフィー（ 30％；40％CH2Cl2/ヘキサン）により、所望の生成物17を白色固体として得た（0 .08ｇ、59％）：融点100〜102℃；Rf 0.36（50％CH2Cl2/ヘキサン）。生成物の 構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。 （c.）［1-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2 -ナフタレニル）-1-（4-カルボキシフェニル）］シクロプロパン（18）： 75％水性メタノール溶液（２mL）中のエステル17（60mg、0.166mmol）の懸濁 液に、水酸化カリウム１粒（0.12ｇ）を添加し、そして反応混合物を70℃でこの 物質が溶解するまで１時間撹拌した。溶液を室温まで冷却し、1Nの塩酸水溶液で 酸性にし、次いで80％酢酸エチル/ヘキサンで抽出した。合わせた有機層を、無 水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して白色固体を得た。ジクロロメタン-ヘ キサンから再結晶により、所望の酸18を、白色粉末として得た（0.055ｇ、95％ ）：融点333〜335℃。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて 確認した。 実施例IX （a.）メチル4-［1-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テト ラメチル-2-ナフタレニル）-2-メチル-1-プロペニル］ベンゾエート（19）： ３mLのベンゼン中のイソプロピルトリフェニルホスホニウムヨージド（0.35、 0.807mmol）の懸濁液に、室温でアルゴン雰囲気下にて、トルエン（1.8mL、0.89 mmol）中のヘキサメチルジシラジドカリウムの0.5M溶液を添加し、そして赤色の 溶液を、５分間撹拌した。３mLのベンゼン中のケト-エステル３（0.169ｇ、0.48 1mmol）を添加し、そして、約４mLのベンゼンが蒸発する間、赤色の溶液を110℃ まで加熱した。１時間後、反応混合物を、40％の酢酸エチル／ヘキサンで希釈し 、そして飽和NaHCO3水溶液および塩水で洗浄した。有機層を無水MgSO4で乾燥し 、シリカゲルのプラグを介して濾過し、そして濃縮して固体を得た。フラッシュ クロマトグラフィー（40％ジクロロメタン／ヘキサン）により、所望の生成物19 を白色粉末として得た（0.128ｇ、71％）：Rf 0.44（50％CH2Cl2／ヘキサン）。 生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。 （b.）4-［1-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2-ナフタレニル ）-2-メチル-1-プロペニル］安息香酸（20）： 75％水性メタノール溶液（3mL）中のエステル19（0.115g、0.304mmol）の懸濁 液に、水酸化カリウム１粒（0.12ｇ）を添加した。混合物を、この物質が溶解す るまで１時間、75℃で撹拌した。溶液を室温まで冷却し、1Nの塩酸水溶液を用い て 酸性にし、次いで、80％酢酸エチル／ヘキサンで抽出した。合わせた有機層を、 無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して所望の酸20を白色粉末として得た （0.11ｇ、99％）：融点204〜206℃。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質 量分析を用いて確認した。 実施例Ｘ （a.）メチル4-［（4,4-ジメチル-3,4-ジヒドロ-2H-1-ベンゾピラン-6-イル） カルボニル］ベンゾエート（22）（Maignan,J.ら、BE 1,000,195）： １mLの1,2-ジクロロエタン中の塩化アルミニウム（1.6ｇ、12mmol）の懸濁液 に、室温でアルゴン雰囲気下にて９mLの1,2-ジクロロエタン中の4,4-ジメチル-3 ,4-ジヒドロ-2H-1-ベンゾピラン21（1.5ｇ、9.25mmol）（Dawson，M.I.ら、J．M ed．Chem． 27 ：1516-1531（1984））および4-カルボメトキシベン ゾイルクロライド２（1.79ｇ、9mmol）を添加した。反応混合物を一晩撹拌し、 氷水上に注ぎ、40％酢酸エチル／ヘキサンで抽出した。合わせた有機層を飽和Na HCO3水溶液および塩水で洗浄した。溶液を無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして 濃縮して黄色の固体（3.24ｇ）を得た。フラッシュクロマトグラフィー（80％ジ クロロメタン／ヘキサン）により、所望の生成物22を白色粉末として得た（1.42 g、49％）：融点129〜131℃；Rf 0.26（CH2Cl2）。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。 （b.）［2-（4,4-ジメチル-3,4-ジヒドロ-2H-1-ベンゾピラン-6-イル）-2-（4 -カルボメトキシフェニル）］-1,3-ジチアン（23）： ジクロロメタン（3mL）中のケト-エステル22（0.152ｇ、0.469mmol）の溶液に 、０℃でアルゴン雰囲気下にて1,3-プロパンジチオール（0.061ｇ、0.563mmol） を添加し、続いて三フッ化ホウ素エーテル錯体（0.07mL、0.57mmol）を添加した 。得られた混合物を０℃で１時間、そして常温で一晩撹拌した。反応混合物を、 飽和Na2CO3水溶液に注いでクエンチし、次いで、40％酢酸エチル／ヘキサンで抽 出した。合わせた有機層を無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮してオイル を得た。フラッシュクロマトグラフィー（80％ジクロロメタン／ヘキサン）によ り、所望のジチアン23を白色固体として得た（0.175g、90％）：融点103〜105℃ ；Rf 0.2（50％CH2Cl2／ヘキ サン）。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。 （c.）［2-（4,4-ジメチル-3,4-ジヒドロ-2H-1-ベンゾピラン-6-イル）-2-（4 -カルボキシフェニル）］-1,3-ジチアン（24）： 75％水性メタノール溶液（4mL）中のジチアン23（0.145ｇ、0.349mmol）の懸 濁液に、水酸化ナトリウム１粒（0.106ｇ）を添加した。反応混合物を、この物 質が溶解するまで１時間、70℃で撹拌した。溶液を室温まで冷却し、１Nの塩酸 水溶液を用いて酸性にし、次いで、80％酢酸エチル／ヘキサンで抽出した。合わ せた有機層を、無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して白色固体を得た。 ジクロロメタン-ヘキサンから再結晶することにより、所望の酸24を白色粉末と して得た（0.127ｇ、90％）：融点204〜205℃。生成物の構造もまた、IR、1H NM Rおよび質量分析を用いて確認した。 実施例XI （a.）メチル4-［（4,4-ジメチル-3,4-ジヒドロ-2H-1-ベンゾチオピラン-6-イ ル）カルボニル］ベンゾエート（26）： １mLの1,2-ジクロロエタン中の塩化アルミニウム（1.65ｇ、9.25mmol）の懸濁 液に、室温でアルゴン雰囲気下で、９mLの1,2-ジクロロエタン中の4,4-ジメチル -3,4-ジヒドロ-2H-1-ベンゾチオピラン25（1.65ｇ、9.25mmol）（Waugh，K.M.ら 、J．Med．Chem． 28：116-124（1985））および4-カルボメトキシベンゾイルク ロライド２（1.8ｇ、9.06mmoｌ）の溶液を添加した。反応混合物を、一晩撹拌し 、氷水上に注ぎ、そして40％酢酸エチル／ヘキサンで抽出した。合わせた有機層 を飽和NaHCO3水溶液および塩水で洗浄した。溶液を無水MgSO4で乾燥し、濾過し 、そして濃縮して緑色の固体（2.1ｇ）を得た。フラッシュクロマトグラフィー （80％ジクロロメタン／ヘキサン）により、所望の生成物26を白色粉末として得 た（1.23ｇ、40％）： 融点118〜120℃；Rf 0.35（CH2Cl2）。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび 質量分析を用いて確認した。 （b.）［2-（4,4-ジメチル-3,4-ジヒドロ-2H-1-ベンゾチオピラン-6-イル）-2 -（4-カルボメトキシフェニル）］-1,3-ジチアン（27）： ジクロロメタン（3mL）中のケトーエステル26（0.12ｇ、0.353mmol）の溶液に 、０℃でアルゴン雰囲気下にて1,3-プロパンジチオール（0.06mL、0.53mmol）を 添加し、続いて三フッ化ホウ素エーテル錯体（0.07mL、0.57mmol）を添加した。 得られる混合物を０℃で１時間撹拌し、そして室温で一晩温めた。反応混合物を 、飽和Na2CO3水溶液中に注いでクエンチし、そして40％酢酸エチル／ヘキサンで 抽出した。合わせた有機層を無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮してオイ ルを得た。フラッシュクロマトグラフィー（80％CH2Cl2／ヘキサン）により、所 望のジチアン27を白色固体として得た（0.145ｇ、96％）：融点164〜166℃；Rf 0.27（50％CH2Cl2／ヘキサン）。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分 析を用いて確認した。 （c.）［2-（4,4-ジメチル-3,4-ジヒドロ-2H-1-ベンゾチオピラン-6-イル）-2 -（4-カルボキシフェニル）］-1,3-ジチアン（28）： 75％水性メタノール溶液（4mL）中のジチアン27（0.1ｇ、0. 232mmol）の懸濁液に、水酸化カリウム１粒（0.12ｇ）を添加した。反応混合物 を、この物質が溶解するまで１時間、75℃で撹拌した。溶液を室温まで冷却し、 １Nの塩酸水溶液を用いて酸性にし、次いて、80％酢酸エチル／ヘキサンで抽出 した。合わせた有機層を、無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して白色固 体を得た。ジクロロメタン／ヘキサンからの再結晶により、所望の酸28を白色粉 末として得た（0.089ｇ、92％）：融点211〜212.5℃。生成物の構造もまた、IR 、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。 実施例XII （a.）メチル［4-（5,6,7,8-テトラヒドロ-3,5,5,8,8-ペンタメチル-2-ナフタ レニル）カルボニル］ベンゾエート（30）： 30mLの1,2-ジクロロエタン中の塩化アルミニウム（1.10ｇ、8.25mmol）の懸濁 液に、室温でアルゴン雰囲気下で、15mLの 1,2-ジクロロエタン中の1,2,3,4-テトラヒドロ-1,1,4,4,6-ペンタメチルナフタ レン29（1.52ｇ、7.5mmol）（Kagechika,H.ら、J．Med．Chem． 31：2182（1988 ））および4-カルボメトキシベンゾイルクロライド２（1.57ｇ、7.87mmol）の溶 液を添加した。反応混合物を一晩撹拌し、氷水上に注ぎ、そして40％酢酸エチル ／ヘキサンで抽出した。合わせた有機層を飽和NaHCO3水溶液および塩水で洗浄し た。溶液を無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して褐色の固体（2.56ｇ） を得た。フラッシュクロマトグラフィー（60％ジクロロメタン／ヘキサン）によ り、所望の生成物30を白色の結晶性固体として得た（1.733g、64％）：融点146 〜149℃；Rf 0.11（50％CH2Cl2／ヘキサン）。生成物の構造もまた、IR、1H NMR および質量分析を用いて確認した。 （b.）［4-（5,6,7,8-テトラヒドロ-3,5,5,8,8-ペンタメチル-2-ナフタレニル ）カルボニル］安息香酸（31）： 75％水性メタノール溶液（2mL）中のエステル30（0.120ｇ、0.329mmol）の懸 濁液に、水酸化カリウム（0.055ｇ）を添加した。反応混合物を、この物質が溶 解するまで１時間、60℃で撹拌した。溶液を室温まで冷却し、１Nの塩酸水溶液 を用いて酸性にし、次いで、80％酢酸エチル／ヘキサンで抽出した。合わせた有 機層を、無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して白色固体を得た（0.109ｇ ）。ベンゼン／ヘキサンからの再結晶により、31を白色の結晶性固体として得た （0.102ｇ、 89％）：融点209〜212℃。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を用 いて確認した。 実施例XIII （a.）メチル4-［1-（5,6,7,8-テトラヒドロ-3,5,5,8,8-ペンタメチル-2-ナフ タレニル）-1-エテニル］ベンゾエート（32）： １mLのベンゼン中のメチルトリフェニルホスホニウムブロマイド（0.196ｇ、0 .55mmol）の懸濁液に、室温でアルゴン雰囲気下にて、トルエン（1.2mL、0.6mmo l）中のヘキサメチルジシラジドカリウムの0.5M溶液を添加し、そしてこの黄色 溶液を５分間撹拌した。1.5mLのベンゼン中のケト-エステル30（0.1ｇ、0.274mm ol）の溶液を添加し、そして橙色の溶液を室温で３時間撹拌した。反応混合物を 、40％酢酸エチル／ヘキサンを用いてシリカゲルのプラグを介して濾過した。濾 液を濃縮して、固体を得た。フラッシュクロマトグラフィー （30％；40％ジクロロメタン／ヘキサン）により、所望の生成物32を白色の結晶 性固体として得た（0.077ｇ、78％）：融点167〜168℃；Rf 0.4（50％ジクロロ メタン／ヘキサン）。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて 確認した。 （b.）［4-［1-（5,6,7,8-テトラヒドロ-3,5,5,8,8-ペンタメチル-2-ナフタレ ニル）-1-エテニル］安息香酸（33）： 75％水性メタノール溶液（2mL）中のエステル32（0.058ｇ、0.16mmol）の懸濁 液に、水酸化カリウム１粒（0.1ｇ）を添加した。混合物を、この物質が溶解す るまで１時間、70℃で撹拌した。溶液を室温まで冷却し、１Nの塩酸水溶液を用 いて酸性にし、次いで、80％酢酸エチル／ヘキサンで抽出した。合わせた有機層 を、無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して白色固体を得た。ジクロロメ タン／ヘキサンからの再結晶により、所望の酸33を白色の結晶性固体として得た （42mg、91％）：融点230〜231℃。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量 分析を用いて確認した。 実施例XIV （a.）5-カルボエトキシチオフェン-2-カルボン酸（35）： 10mLのTHF中のジイソプロピルアミン（3.6mL、25.75mmol）の溶液に、-78℃で アルゴン雰囲気下にて、ヘキサン（16.1mL、25.75mmol）中のn-ブチルリチウム の1.6M溶液を添加した。混合物を15分間撹拌し、そして５mLのTHF中の2-チオフ ェンカルボン酸34（1.5ｇ、11.705mmol）（２−チオフェンカルボン酸34はAldri chより容易に入手可能である）の溶液を徐々に添加した。混合物を15分間撹拌し 、そしてエチルクロロホルメート（2.7mL、28.33mmol）を添加した。混合物を-7 8℃で30分間撹拌し、そして次の30分間で０℃まで昇温した。反応混合物を飽和N aHCO3水溶液中に注ぎ、そして80％酢酸エチル／ヘキサンで洗浄した。水層を酢 酸で酸性にし、80％酢酸エチル／ ヘキサンで抽出した。合わせた有機層を無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃 縮して黄色の固体を得た。フラッシュクロマトグラフィーにより、所望の酸35（ 1.76ｇ、75％）を白色固体として得た：融点は300℃を超える。生成物の構造も また、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。 （b.）5-カルボエトキシチオフェン-2-カルボニルクロライド（36）： ジクロロメタン（20mL）中の酸35（0.64ｇ、3.2mmol）の懸濁液に、室温でア ルゴン雰囲気下にて、ジクロロメタン（2.4mL、4.8mmol）中の（COCl）2の2.0M 溶液およびDMF２滴を添加し、１時間撹拌した。過剰の（COCl）2およびジクロロ メタンを減圧下で除去し、そして粘性の明るい黄色の生成物を、一晩乾燥し、所 望のベンゾイルクロライド36を黄色の固体として得た。生成物の構造もまた、IR 、および1H NMR分光法を用いて確認した。 （c.）エチル5-［（5,6,7,8-テトラヒドロ-3,5,5,8,8-ペンタメチル-2-ナフタ レニル）カルボニル］チオフェン-2-カルボキシレート（37）： １mLの1,2-ジクロロエタン中の塩化アルミニウム（0.5ｇ、3.75mmol）の懸濁 液に、室温でアルゴン雰囲気下にて、3.5mLの1,2-ジクロロエタンの1,2,3,4-テ トラヒドロ-1,1,4,4,6-ペンタメチルナフタレン29（0.712ｇ、3.52mmol）および36 （0.7ｇ、3.2mmol）の溶液を滴下した。反応混合物を一晩撹拌し、次いで、氷水 上に注ぎ、そして40％酢酸エチル／ヘキサンで抽出した。合わせた有機層を、飽 和NaHCO3水溶液および塩水で洗浄した。溶液を、無水MgSO4で乾燥し、濾過し、 そして濃縮して黄色固体（1.5ｇ）を得た。フラッシュクロマトグラフィー（50 ％ジクロロメタン／ヘキサン）により、明るい黄色の固体を得た。ジクロロメタ ン／ヘキサンからの再結晶により、37を白色の結晶性固体として得た（0.62ｇ、 50％）：融点111〜112℃：Rf 0.2（50％CH2Cl2／ヘキサン）。生成物の構造も また、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。 （d.）5-［（5,6,7,8-テトラヒドロ-3,5,5,8,8-ペンタメチル-2-ナフタレニル ）カルボニル］チオフェン-2-カルボン酸（38）： 75％水性メタノール溶液（3mL）中のエステル37（50mg、0.13mmol）の懸濁液 に、水酸化カリウム１粒（0.1ｇ）を添加した。反応混合物を、この物質が溶解 するまで1.5時間、70℃で撹拌した。溶液を室温まで冷却し、１Nの塩酸水溶液を 用いて酸性にし、次いで、80％酢酸エチル／ヘキサンで抽出した。合わせた有機 層を、無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して白色固体を得た（46mg）。 メタノールからの再結晶により、所望の酸38を白色の結晶性固体として得た（42 ｇ、91％）：融点214〜215℃。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析 を用いて確認した。 実施例XV （a.）2-アセチル-3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン （39）： １mLの1,2-ジクロロエタン中の塩化アルミニウム（0.96ｇ、7.17mmol）の懸濁 液に、室温でアルゴン雰囲気下にて、９mLの1,2-ジクロロエタン中の1,2,3,4-テ トラヒドロ-1,1,4,4,6-ペンタメチルナフタレン29（1.2ｇ、5.93mmol）およびア セチルクロライド（0.51ｇ、6.52mmol）の溶液を添加した。反応混合物を１時間 撹拌し、次いで、氷水上に注ぎ、そして40 ％酢酸エチル／ヘキサンで抽出した。合わせた有機層を、飽和NaHCO3水溶液およ び塩水で洗浄した。溶液を、無水MgSO4で乾燥し、シリカゲルのプラグを介して 濾過し、そして濃縮して白色固体39を得た（1.45ｇ、99％）：融点54〜57℃；Rf 0.62（10％酢酸エチル／ヘキサン）。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび 質量分析を用いて確認した。 （b.）エチル（E）-4-ヒドロキシ-3-メチル-6-オキソ-6-（3,5,5,8,8-ペンタ メチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフタレニル）-2-ヘキセノエート（41）： ７mLのTHF中のジイソプロピルアミン（0.5mL、3.52mmol）の溶液に、-78℃で アルゴン雰囲気下にて、ヘキサン（2.2mL、3.52mmol）中のn-ブチルリチウムの1 .6M溶液を添加した。混合物を25分間撹拌し、そして４mLのTHF中のケトン39（0. 78ｇ、3.2mmol）の溶液を徐々に添加した。混合物を20分間撹拌し、そして３mL のTHF中のエチル（E）-3-ホルミル-2-ブテノエート40（0.45ｇ、3.2mmol）（エ チル（E）-3-ホルミル-2-ブテノエート40はFlukaより容易に入手可能である）の 溶液を徐々に添加した。混合物を-78℃で35分間撹拌し、飽和NH4Cl水溶液中に注 ぎ、そして40％酢酸エチル／ヘキサンで抽出した。合わせた有機層を無水MgSO4 で乾燥し、濾過し、そして濃縮して明るい黄色の固体を得た。フラッシュクロマ トグラフィーにより、所望のアルコール41を白色の結晶性固体として得た（0.98 g、80％）：融点126〜128℃；Rf 0.13（10％酢酸エチル／ ヘキサン）。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した 。 （c.）エチル（2E,4E）-6-オキソ-6-（3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テト ラヒドロ-2-ナフタレニル）-2,4-ヘキサジエノエート（42）： ８mLのTHF中の41（0.33ｇ、0.85mmol）の溶液に、０℃で、トリエチルアミン （0.5mL、4mmol）および2mLのTHF中のメチルスルホニルクロライド（0.106ｇ、0 .93mmol）の溶液を徐々に添加した。混合物を０℃で１時間撹拌し、そして30分 間室温まで昇温した。混合物を、10％酢酸エチル／ヘキサンを用いてシリカゲル のプラグを介して濾過した。濾液を濃縮して、42を明るい黄色の固体として得た 。ジクロロメタン／ヘキサンからの再結晶により、所望の酸42を黄色の粉末とし て得た（0.3g、95％）：融点101〜102℃；Rf 0.42（10％酢酸エチル／ヘキサン ）。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。 （d.）［2-（5,6,7,8-テトラヒドロ-3,5,5,8,8-ペンタメチル-2-ナフタレニル ）-2-（4-カルボエトキシ-2E,4E-3-メトキシブタジエニル）］-1,3-ジオキソラ ン（43）： ２mLのベンゼン中のケト-エステル42（0.12ｇ、0.33mmol）の溶液に、エチレ ングリコール（0.8mL）、1,2-ビス（トリメチルシリルオキシ）エタン（2mL）お よび触媒量のp-TsOHを添加し た。反応混合物を２日間還流加熱し、次いで、室温まで冷却した。溶液を、飽和 NaHCO3水溶液中に注ぎ、40％酢酸エチル／ヘキサンで抽出した。合わせた有機層 を、無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して固体を得た。フラッシュクロ マトグラフィー（５％酢酸エチル／ヘキサン）により、所望のケタール43を無色 のオイルとして得た（0.109ｇ、80％）：Rf 0.43（10％酢酸エチル／ヘキサン） 。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。 （e.）［2-（5,6,7,8-テトラヒドロ-3,5,5,8,8-ペンタメチル-2-ナフタレニル ）-2-（4-カルボキシ-2E,4E-3-メチルブタジエニル）］-1,3-ジオキソラン（44 ）： 75％水性メタノール溶液（2mL）中のエステル43（30mg、0.073mmol）の溶液に 、水酸化カリウム１粒（0.1ｇ）を添加した。反応混合物を、この物質が溶解す るまで0.5時間、6O℃で撹拌した。溶液を室温まで冷却し、１Nの塩酸水溶液を用 いて酸性にし、次いで、80％酢酸エチル／ヘキサンで抽出した。合わせた有機層 を、無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮して白色固体を得た。ジクロロメ タン／ヘキサンからの再結晶により、所望の酸44を白色の結晶性固体として得た （27mg、96％）：融点189〜190℃。成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分 析を用いて確認した。 実施例XVI （E）および（Z）-4-［1-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2- ナフタレニル）プロペン-1-イル］安息香酸（46および47）： １mLのTHF中のエチルトリフェニルホスホニウムブロマイド（160mg、0.43mmol ）の懸濁液に、０℃でアルゴン雰囲気下にて、トルエン（0.95mL、0.47mmol）中 のヘキサメチルジシラジドカリウムの0.5M溶液を添加し、そして反応混合物を、 ５分間撹拌した。0.8mLのTHF中のケト-エステル3の溶液（100mg、0.28mmol）を 添加し、そして橙色の溶液を室温で３時間撹拌した。反応混合物を20％酢酸エチ ル／ヘキサンで希釈し、そして20％酢酸エチル／ヘキサンを用いてシリカのプラ グを介して濾過した。溶液を濃縮して黄色のゴム状物を得た。クロマトグラフィ ー（38％ジクロロメタン／ヘキサン）により、45の混合物を淡黄色のゴム状物と して得た（51mg、50％）：Rf 0.43、0.47（40％CH2Cl2／ヘキサン）。分取HPLC （Waters Radialpak Novapakシリカ、８mm×10cm、２％エーテル／ヘ キサン、1.0mL／分、260nm）により、無色のガム状物45a（20mg、tr=9.8分）お よび白色の固体45b（25mg、tr=10.8分）を得た。 0.5mLのエタノール中のエステル45a（20mg）の懸濁液に、水酸化カリウム（0. 2ｇ）の40％水溶液を添加し、そして反応混合物を、この物質が溶解するまで２ 時間、70℃でアルゴン雰囲気下にて撹拌した。次いで、溶液をアルゴン雰囲気下 で濃縮した。残渣を室温まで冷却し、１Nの硫酸水溶液を用いてpH２〜３に酸性 にし、次いで、濾過した。沈殿物を繰り返し水（６回×１mL）で洗浄し、そして 乾燥して白色粉末（20mg）を得た。酢酸エチル／ヘキサンからの再結晶により、 酸46を白色粉末として得た（16mg、全収率16％）：融点212℃。生成物の構造も また、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。46の位置化学（regiochemi stry）を1H nOe NMR分光法により確認した。 エステル45bを上記のように加水分解して25mgの淡黄色の固体を得た。酢酸エ チル／ヘキサンからの再結晶により、酸47を淡黄色の粉末として得た（21mg、全 収率20％）：融点229℃。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を用 いて確認した。47の位置化学を1H nOe NMR分光法により確認した。 実施例XVII （a.）4-［1-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2-ナフタレニル ）-1-エテニル］安息香酸（48）： 75％水性メタノール溶液（2mL）中のエステル16（94mg、0.27mmol）の懸濁液 に、水酸化カリウム（0.045ｇ）を添加し、そして反応混合物を、この物質が溶 解するまで14時間、50℃で撹拌した。溶液を室温まで冷却し、２Nの塩酸水溶液 を用いて酸性にし、次いで、エーテルで抽出した。合わせた有機層を、水および 塩水で洗浄した。次いで、有機層を無水MgSO4で乾燥し、濾過し、そして濃縮し て白色固体を得た。ベンゼン-ヘキサンからの再結晶により、所望の酸48を白色 の結晶性固体として得た（0.074ｇ、82％）：融点201〜204℃。生成物の構造も また、IR、1H NMRおよび質量分析を用いて確認した。 （b.）4-［1-（5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル -2-ナフタレニル）-1-エチル］安息香酸（49）： オレフィン48（0.0105ｇ、0.0314mmol）を、室温および大気圧下で、チャコー ル担持５％パラジウムで水素化した。１当量（0.7mL）の水素を取り込ませた後 、触媒を小さなセライトパッドを介して濾過することにより取り除いた。溶媒を 真空下で取り除き、粗製の酸を白色固体として得た（0.019ｇ）。ベンゼン-ヘキ サンからの再結晶により、所望の酸49を白色の結晶性固体として得た（0.0078ｇ 、74％）：融点186〜188℃。生成物の構造もまた、IR、1H NMRおよび質量分析を 用いて確認した。 上記の実施例は、本発明を限定するのではなく、例示するためものであること が意図される。それらが使用され得る代表的なものである一方で、当業者に公知 の他の手順が、代わりに用いられ得る。 本出願を通して、種々の刊行物が番号により援用される。それにより、それら の刊行を完全に引用する。これらの刊行物における開示は全体として、本発明が 属する当該分野の状態をより充分に記載するために、本出願に参考として援用さ れる。 参考丈献 配列表 (1)一般的情報： (A)住所人：ザ ガバーメント オブ ザ ユナイテッド ステイツ オブ アメリカ、アズ リプレゼンティド バイ ザ セクレタリー (B)番地：スイート ３２５、エグゼクティブ ブルバード ６０１１ (C)市：ロックビル (D)州：メリーランド (E)国：アメリカ合衆国 (F)郵便番号：20852 (G)電話：(301)496-7056 (H)テレファックス：(301)402-0220 (I)テレックス：なし (ii)発明の名称：RXRホモダイマー形成 (iii) 配列数：11 (vi)コンピューター読み出し形態： (A)媒体型：フロッピーディスク (B)コンピューター：IBM PC互換用 (C)操作システム：PC-DOS/MS-DOS (D)ソフトウェア：パテントインリリース#1.0、バージョン#1.25 (vi)現在の出願データ： (A)出願番号：まだなし (B)出願日： (Vii)先行出願データ： (A)出願番号：US/07/901/719 (B)出願日：1992年6月16日 (2)配列番号：１の情報： (i)配列の特色： (A)長さ：８アミノ酸 (B)型：アミノ酸 (C)鎖の数：一本鎖 (D)トポロジー：直鎖状 (ii)配列の種類：ペプチド (xi)配列：配列番号：１： (2)配列番号：２の情報： (i)配列の特色： (A)長さ：31塩基対 (B)型：核酸 (C)鎖の数：一本鎖 (D)トポロジー：直鎖状 (ii)配列の種類：DNA（ゲノム） (xi)配列：配列番号：２： (2)配列番号：３の情報： (i)配列の特色： (A)長さ：37塩基対 (B)型：核酸 (C)鎖の数：一本鎖 (D)トポロジー：直鎖状 (ii)配列の種類：DNA（ゲノム） (xi)配列：配列番号：３： (2)配列番号：４の情報： (i)配列の特色： (A)長さ：34塩基対 (B)型：核酸 (C)鎖の数：一本鎖 (D)トポロジー：直鎖状 (ii)配列の種類：DNA（ゲノム） (xi)配列：配列番号：４： (2)配列番号：５の情報： (i)配列の特色： (A)長さ：24塩基対 (B)型：核酸 (C)鎖の数：一本鎖 (D)トポロジー：直鎖状 (ii)配列の種類：DNA（ゲノム） (xi)配列：配列番号：５： (2)配列番号：６の情報： (i)配列の特色： (A)長さ：30塩基対 (B)型：核酸 (C)鎖の数：一本鎖 (D)トポロジー：直鎖状 (ii)配列の種類：DNA（ゲノム） (xi)配列：配列番号：６： (2)配列番号：７の情報： (i)配列の特色： (A)長さ：38塩基対 (B)型：核酸 (C)鎖の数：一本鎖 (D)トポロジー：直鎖状 (ii)配列の種類：DNA（ゲノム） (xi)配列の特徴：配列番号：７： (2)配列番号：８の情報： (i)配列の特色： (A)長さ：27塩基対 (B)型：核酸 (C)鎖の数：一本鎖 (D)トポロジー：直鎖状 (ii)配列の種類：DNA（ゲノム） (xi)配列：配列番号：８： (2)配列番号：９の情報： (i)配列の特色： (A)長さ：27塩基対 (B)型：核酸 (C)鎖の数：一本鎖 (D)トポロジー：直鎖状 (ii)配列の種類：DNA（ゲノム） (xi)配列：配列番号：９： (2)配列番号：10の情報： (i)配列の特色： (A)長さ：27塩基対 (B)型：核酸 (C)鎖の数：一本鎖 (D)トポロジー：直鎖状 (ii)配列の種類：DNA（ゲノム） (xi)配列：配列番号：10： (2)配列番号：11の情報： (i)配列の特色： (A)長さ：24塩基対 (B)型：核酸 (C)鎖の数：一本鎖 (D)トポロジー：直鎖状 (ii)配列の種類：DNA（ゲノム） (xi)配列：配列番号：11： Detailed Description of the Invention            RXR homodimer formation and bridged bicyclic aromatic compounds                 And their use in regulatory gene expression                              Technical field   The present invention relates generally to the regulation of gene expression by retinoid receptors, and More specifically, retinoid X receptor and retinoic acid receptor , Retinoid X receptor, vitamin D receptor and thyroid receptor Novel bridged bicyclic aromatic compounds useful in the regulation of gene expression by To do.                              Background technology   Vitamin A metabolite all-trans-retinoic acid (RA) and its natural and Synthetic derivatives (retinoids) exert a wide range of biological effects1,2. Clinically, Retinoids are important therapeutic agents in the treatment of skin diseases and cancer3-6. A lot of records Understanding how the actions of tininoids can be mediated at the molecular level is a matter of specific nuclear levels. Scepter, retinoic acid receptor (RAR)7-12And retinoid X receptor (RXR)13-17Was significantly enhanced by cloning and characterization of. RAR And RXR are part of the steroid / thyroid hormone receptor superfamily is there18,19. Both types of receptors have three different Encoded by genes (α, β, and γ), and then multiplex in the case of RAR Isoforms can be generated20-22. Interestingly, RAR is specific in vertebrates On the other hand, RXR is well conserved from Drosophila to humans.17,23. Near Even though the molecular mechanism of retinoid receptor action has advanced considerably in recent years And whether different molecular pathways exist for naturally occurring retinoids There is no answer yet to the central question. RA stereoisomer 9-Si Recent observations that Su-RA binds RXR with high affinity23,24All-trans-ra A retinoid response pathway different from the pathway was suggested. However, RAR is effectively D NA requires interaction with coreceptors to bind and function, yet RX The fact that R is such a coreceptor has been confirmed by several laboratories. Discovered almost at the same time15,16,26-29. Therefore, RAR is heterodimeric RAR / RXR As a complex or with a corresponding accessory protein that needs to be further identified Only the combination seems to work effectively. Similarly, RXR is an effective DNA-binding For RAR, thyroid hormone receptor (TR), or vitamin D3Receptor Was shown to require (VDR)15,16,26-29. Therefore, these DNA binding Research indicates that RXR can function preferentially, but not exclusively as a coreceptor Are revealed, which generate a high degree of diversity and specificity of transcriptional regulation. And to at least three different classes of ligand-activated receptors DNA affinity and It can mediate the very pleiotropic effects of different hormones by increasing its specificity. Play an important role in and.   Contrary to these findings, the present invention proposes that RXR forms homodimers. To serve. The present invention shows that these homodimers are specific in the absence of coreceptors. It binds effectively to response elements, and their DNA-binding specificity It is provided that it differs from the DNA binding specificity of RXR containing mers. The present invention is a retino Explain a novel mechanism for the action of ids, and thereby induce ligand-induced homodimers Mars mediate different retinoid pathways. Furthermore, we chose RXR homodimer formation. Ligands that are selectively activated are provided.   The present invention also provides bridged bicyclic aromatic compounds, as described in detail herein. A novel class of retinoids of the form These new compounds are retinoi Receptors in the acid family (eg RAR, RXR, vitamin D receptor (VD R), thyroid hormone receptor (THR)) regulation of selective gene expression and And / or effective for triggering. Not intended to be bound by theory However, the compounds disclosed and claimed herein are not bound to the aforementioned receptors. Regulator genes because of their ability to interact with receptor proteins that bind It is effective for expression. The compounds also have RAR-RXR, VDR-RXR, and THR-RXR In addition to rhodimer, regulated inheritance by inducing the formation of RXR homodimer It is useful in offspring expression.   The new compounds are therefore thyroid hormones, vitamin D, and 9-cis-retino. Cells regulated by retinoids (a natural ligand for RXR) such as in acid Useful for controlling the process. Therefore, acne, leukemia, psoriasis, and skin Skin aging (all regulated by retinoic acid) is associated with bone mineralization (vitamin D and can be regulated by thyroid hormone. Can be treated with a compound of the invention. Prior art synthesis Unlike retinoids, the compounds of the present invention have substantially reduced side effects and malformations. It is believed to provide heredity.                             Summary of the invention   The present invention describes the ability to influence the formation of retinoid X receptor homodimers. And a retinoid. The step of combining with a solution containing the X receptor and the presence of homodimer formation The step of measuring is included. Also, retinoid X receptor homo that binds to DNA Methods are provided for screening substances for effects on dimer performance. , This method involves combining the above substances with homodimers, and Measuring the effect of the compound on the potency of the modimer. Also, Comprising the step of increasing the formation of retinoid X receptor homodimer, Therefore, it suppresses the retinoid X receptor from forming a heterodimer, and Profitable Retinoid X receptor heterodimer that suppresses the activity of heterodimers Methods of inhibiting activity are provided. Furthermore, retinoid X receptor homodimer There is also provided a method of inhibiting the activity of a protein. Retinoid X receptor homodimer form Measuring the probability of an increase in a medical condition associated with growth and a method of treating such a medical condition Will be further provided. Furthermore, for binding to retinoid X receptor homodimer Methods for screening response elements are provided. Finally, the present invention Provide a method of activating retinoid X receptor homodimer formation.   In addition, the receptor in the retinoic acid family of receptors allows the gene By providing novel compounds useful for regulating expression, as described above It is a first object of the present invention to meet the needs in the art. Another aspect of the present invention Purpose of thyroid hormone, vitamin D, and / or 9-cis-retinoic acid Useful for controlling cell differentiation processes regulated by retinoids such as It is to provide a novel compound. Yet another object of the present invention is a bridged bicyclic ring. It is to provide novel compounds of formula structural form. Still another object of the present invention is 1 It is to provide pharmaceutical compositions containing one or more novel compounds. Still another object of the present invention is retinoic acid receptor, retinoid X receptor. A vitamin D receptor, and a thyroid receptor. For regulating scepter gene expression To provide the law. Still another object of the present invention is thyroid hormone, vitamin D and / or regulated by retinoids such as 9-cis-retinoic acid It is to provide a method for controlling the cell differentiation process.   Further objects, advantages and novel features of the present invention will be presented in part in the description below. And will be apparent to those of ordinary skill in the art upon reading the following, or practice of the invention. Can be learned by.   Next, in one aspect, the invention relates to novel compounds having structural formula (I): here,   R1Is selected from the group consisting of lower alkyl and adamantyl;   R2Is -OR6Or -SR6And where R6Is lower alkyl; Or   Where R1Is R2Is ortho to and R1And R2Are connected together to form a five-membered ring Or, a 6-membered cycloalkylene ring is formed, and this cycloalkylene ring has a carbon number Unsubstituted or substituted with 1 to 4 lower alkyl groups, and optionally 1 or 2 selected from the group consisting of O, S and NR Heterocycle atoms, wherein R is hydrogen or lower alkyl, preferably aromatic Adjacent to the ring;   R3Is carbonyl, Selected from the group consisting of Where X1And X2Are independently selected from the group consisting of O, S and methylene , Where X1And X2At least one of O or S, or X1 And X2One of is NR and the other is methylene, m is 2 or 3 Yes, R6, R7, R8And R9Are each independently hydrogen or lower alkyl However, when n is 0, R6And R7Is not hydrogen and R8and R9Are not both hydrogen, or R8And R9Connect together 3 to 6 charcoals Can form a cycloalkylene ring with elementary atoms, and * to the rest of the molecule R3Indicates the position of attachment of the substituent; and   RFourIs selected from the group consisting of Where RTenIs hydrogen or methyl, l is 0 or 1,**Is the rest of the molecule R to RFourRepresents the bonding position of the substituent,   RFiveAre independently selected from the group consisting of lower alkyl and lower alkoxy; And   n is 0, 1, 2 or 3;   However, when n is 0, R3Is carbonyl,*C = CH2Or CH2Other than   The present invention also provides pharmaceutically acceptable esters, as described in detail below. , Amides and salts of such compounds.   In another aspect, the invention provides a pharmaceutical composition containing a compound as described above, as well as a pharmaceutical composition comprising: Selective gene expression by receptors belonging to the retinoic acid family of scepters Relates to a method of using the above compounds to regulate                         Brief description of the drawings   Figure 1 9-cis-retinoic acid induces RXR homodimer binding on TREpal Indicates that   (A) In vitro synthesized RXRα was tested for the presence of in vitro synthesized TRα or RARβ. The indicated hormone (10-7M 9-cis-RA; 10-6M  RA ； 10-6M T3) And Incubated with either (+) or none (-) for 30 minutes at room temperature. this After pre-incubation, use the reaction mixture as a probe32Use P-labeled TREpal And analyzed by gel retardation assay. Lane 1 is unprogrammed reticulated red blood Represents non-specific binding of sphere lysate. Open triangles are non-programmed reticulocyte lysates The non-specific complex observed is shown. Black triangles are specific TRα-RXRα heterodimers Indicates binding. Arrows indicate specific RXRα homodimer binding. RXRα / RARβ Hete Rhodimer moves to the same position as RXRα homodimer. RARβ for comparison The effect of 9-cis-RA on binding is shown.   (B) It was determined that the 9-cis-RA-induced DNA-binding complex contained RXRα protein. To determine the flag (Flag) -RXRα (F-RXR) (specific anti-flag monochrome Amino acid terminal 8 amino acid epitope ( Flag), which is an RXRα derivative) was constructed. In vitro synthetic F-RXRα, Either specific anti-flag antibody (αF) or non-specific preimmune serum (NI) In existence 10-730 at room temperature with (+) or none (-) with M 9-cis-RA Incubated for minutes. Next, an anti-frame for F-RXRα binding in the presence of 9-cis-RA. Using the effect of rag antibody as a probe32Gel retardation assay using P-labeled TREpal Was analyzed by. Lane 1 is non-specific binding of unprogrammed reticulocyte lysate. Indicates (white triangle). Arrows indicate specific F-RXRα homodimers and RAR-RXR heterodyne. Shows immer binding. The diamonds are F-RXR hos that have been shifted up with anti-flag antibodies. Indicates a modimer.   Figure 2 shows the characterization of 9-cis-RA-induced RXR homodimer for TPEpal. Show.   (A) 9-cis-RA-induced cooperative association of RXRα homodimers. Ten-7M 9-cis- Formation of RXR-DNA complex at different receptor concentrations in the presence or absence of RA , Analyzed by gel retardation assay using labeled TPEpal as probe. White three Horns indicate non-specific binding of unprogrammed reticulocyte lysate. Arrow is specific Shows the complex bound by RXR.   (B) Quantification of RXR binding complex at different receptor concentrations in the presence of 9-cis-RA. The gel slice containing the RXR binding complex in the presence of 9-cis-RA shown in FIG. Excised and counted in a scintillation counter and plotted.   (C) 9-cis-RA concentration-dependent binding of RXR homodimer with TREpal. Equal amount of In vitro synthesized RXR protein was incubated with the indicated concentrations of 9-cis-RA. I got it. Next, the reaction mixture is used as a probe for gel delay assembly using labeled TPEpal. It was analyzed by Sei. Open triangles indicate non-specific binding of unprogrammed reticulocyte lysate. Indicates the result. The arrow indicates the complex specifically bound by RXR.   Figure 3 shows that 9-cis-RA binds RXR homodimers with respect to RXR-specific response elements. Indicates that it induces   (A) Nuclear receptor binding element used in this study. These oligonuclides Place the octid in both ends as shown in lowercase. It was synthesized with a sharp restriction site. Arrows show sequences closely related to the AGG / TTCA motif Indicate.   (B) 9-cis-RA related to RXR homodimer binding of ApoAI-RARE or CRBPII-RARE Was analyzed essentially as described in Figure 1a. Lane 1 is non-program Represents non-specific binding of murine reticulocyte lysate, indicated by open triangles. black Triangles indicate RAR / RXR heterodimer complex. The arrow indicates the compound that RXR is specifically bound to. Indicates coalescence.   FIG. 4 shows the response element-specific binding of RXR homodimers. RA-specific response Element (a), T3Specific response element (b) or estrogen specific The effect of 9-cis-RA on RXR binding on response element (c) is described in Figure 1a. Gel retardation assay as described above. For comparison, RXR / RAR heterodie Show binding of mer (a), RXR / TR heterodimer (b) or estrogen (c) . Open triangles indicate non-specific binding of unprogrammed reticulocyte lysate. Black triangle Is the RAR / RXR heterodimer complex (a) or TR / RXR heterodimer complex (b). Or ER complex (c).   FIG. 5 shows that RXR homodimerization occurs in solution.35S-Labeled Inbit B. Synthetic RXRα protein as shown in response element or chemical crosslinker D Partially purified bacterial expression flag-RXR in the presence or absence of SP (F-RXR) (+) or similarly prepared glutathione transferase regulatory tag Incubated with protein (-). ink After incubation, anti-flag antibody (F) or non-specific preimmune serum (NI) Add a gap. Ten-7M 9-cis-RA was maintained throughout the work process. Ten-7M 9-Si Immune complexes were washed in the presence of Su-RA, boiled in SDS sample buffer, and 10% SD Separated on S-PAGE.35S-labeled in vitro synthesized RXRα protein in right panel Indicated.   FIG. 6 shows transcriptional activation of RXR and RARα: 9-for natural response elements RXR heterodimer by cis-RA. 100 ng of reporter plasmid (a) TREpal-t k-CAT (b) βRARE-tk-CAT (c) ApoAI-RARE-tk-CAT and (d) CRBPI-RARE-tk-CA T and 5 ng empty pECE expression vector, pECE-RXRα, pECE RARα or CV-1 cells were co-transfected with a combination of both as indicated. Tiger Transfected cells without hormone (white bar), 10-7M RA (diagonal bar), or Ten-7Treated with M 9-cis-RA (thick shaded bar). The results of a representative experiment conducted twice are shown. You   FIG. 7 shows reporter constructs (a) TREpal-tk-CAT (10) or (b) CRBPII-tk-C. AT (10) RXRα-dependent transactivation of 9-cis-RA or retinoid SR11203 , SR11217, SR11234, SR11235, SR11236, and SR11237. Run 4 times The results of a representative experiment performed are shown below. The induction profile in four independent experiments It did not change significantly. CAT activity for transfection and simultaneously Transfected β-galactosidase expression plasmid (pCH110, Pharmacia ) Derived enzyme The recovery efficiency was standardized by measuring the activity.                         Detailed Description of the Invention Definition and name:   In disclosing and describing the compounds, compositions, and methods of the present invention, the present invention provides Specific synthetic method, specific pharmaceutical carrier, or specific pharmaceutical formulation or dosage It should be understood that it is not limited to a given regime and can of course vary . The terms used in this specification are only used to describe specific embodiments. It should also be understood that it is not intended to be limiting.   As used herein and in the appended claims, the singular forms "a", "an" and And "the" include plural referents unless the context clearly dictates the other It Thus, for example, for a "bicyclic aromatic compound", “Pharmaceutical carrier” includes two or more compounds, including mixtures. A mixture of such carriers is included.   In this specification and in the appended claims, references to many terms are set forth below. Defined to have meaning:   As used herein, the term "alkyl" refers to 1 to 24 unbranched or unbranched. Refers to a saturated hydrocarbon group of carbon atoms. That is, they are methyl, ethyl, n-pro Pill, isopropyl, n-butyl, isobutyl, t-butyl, octyl, decyl, te Such as tradecyl, hexadecyl, eicosyl, tetracosyl, etc. It Preferred alkyl groups herein contain 1-12 carbon atoms. the term" "Lower alkyl" intends an alkyl group of 1 to 6 carbon atoms, preferably 1 -4 carbon atoms is intended. The term "cycloalkyl" is 3-8, preferably Is intended for cyclic alkyl groups of 5 or 6 carbon atoms.   The term “alkoxy” as used herein, is attached through a single terminal ether linkage. Intended to be an alkyl group attached to it; that is, an "alkoxy" group means that R is as defined above. May be defined as -OR, which is alkyl as defined above. A "lower alkyl" group refers to 1 Alkyl groups containing 6 and more preferably 1 to 4 carbon atoms are intended.   The term "alkylene," as used herein, contains 1 to 24 carbon atoms, Functional saturated branched or unbranched hydrocarbon chains, and for example methyl (-CH2-), Ethylene (-CH2-CH2-), Polyethylene (-CH2-CH2-CH2-) 2 me Chill propylene [--CH2-CH (CH3) -CH2-], Hexylene [-(CH2)6-] Etc. Including. "Lower alkylene" means 1 to 6, more preferably 1 to 4 carbon atoms. It refers to the child's alkene group. The term "cycloalkylene," as used herein, refers to a ring Alkylene group, typically a 5- or 6-membered ring.   As used herein, the term “alkene” refers to monounsaturated 2 to 24 carbon atoms. Or a diunsaturated hydrocarbon group is intended. Preferred groups within this class are 2 to It contains 12 carbon atoms. Asymmetric structures such as (AB) C = C (CD) have E and Z isomerism. Both sides of the body It is intended to include This can be assumed in the structural formulas herein, Where an asymmetric alkene is present or   "Any" or "as needed" means that the event or situation described subsequently is May or may not occur, and this description states that this event or situation Includes examples that occur and examples that do not. For example, the phrase "replaced as needed. "Phenyl" means that phenyl can be substituted or unsubstituted, This description also includes both unsubstituted phenyl and substituted phenyl.   By the term “effective amount” of a compound provided herein is non-toxic By an amount of compound sufficient to provide the desired regulation of gene expression. Pointed out below As will be appreciated, the exact required amount may vary from subject to subject. It ’s the species, the age, The general condition of the subject, the severity of the disease being treated, the particular bicyclic compound used , Depending on the method of administration. Therefore, the exact "effective amount" should be stated in the description. Is impossible. However, an appropriate effective amount will be determined by one of ordinary skill in the art using only routine experimentation. Can be determined more.   The term "pharmaceutically acceptable" refers to any biologically or otherwise unwanted material. Means no. That is, it may cause any unwanted biological effects. Or in combination with any other ingredients contained in the pharmaceutical composition in a manner detrimental to the body and mind. Individuals with selected bicyclic compounds without interaction It can be a material that can be administered to the body.   Selective "induction," "modulation," or "modulation" of gene expression is when the compound Activation of gene expression by receptors (ie, the retinoic acid family) Intended to mean capable of acting as a beta or antagonist .   The "retinoic acid family" of receptors is also called the "retinoid receptor". Called retinoic acid receptor, retinoid X receptor, vitamin D receptor , And thyroid hormone receptor. The above three The group of receptors is also broadly referred to herein as "retinoic acid receptors." It That is, the term refers to retino in addition to the retinoid acid receptor itself. Includes id X receptor, vitamin D receptor, and thyroid hormone receptor Have.   “Bridged bicyclic aromatic compound” includes all compounds included in the structure of formula (I). Show. These compounds are also called "retinoids," which term further retinoids. It is intended to include such species as noic acid and 9-cis retinoic acid.   The present invention screens substances for their ability to influence the formation of RXR homodimers. A method of combining the substances and a solution containing RXR. And measuring the presence of homodimer formation. Homodai The presence of mer formation leads to transcriptional activation, for example by RXR homodimer or co-precipitation. It can be determined by detecting. This effect is Induction of homodimer formation, eg, similar to activity activated by 9-cis-RA Active or selectively activate homodimer formation over heterodimer formation Can be active. The term "selectively activates" activates homodimer formation. However, it means a compound that does not significantly activate the heterodimer. Alternatively, " "Selectively activate" activates heterodimer formation, but homodimer form Compounds that do not significantly activate growth are included. The term "significant activation" refers to a subject Includes activation sufficient to cause adverse pharmacological effects. This effect is also homozygous It may be the inhibition of dimer formation. An example of inhibition is the binding of 9-cis-RA to the receptor. A substance that competes for but does not itself activate or induce dimerization, or Includes agents that bind 9-cis-RA to block its activity. Material saw Screening such as routine routinely finds homodimer formation in subjects. Can be carried out. The specific assay set presented below targets 9-cis-RA Can be commonly used for screening by simply substituting This Good starting points for screening "substances" such as 9-cis-RA activity listed. Substitutes for 9-cis-RA are 9-cis-RA analogs Can be altered to create groups, and any increase or decrease in homodimer formation Can be screened by a method for measuring However, any substance To measure any effect on dimer formation, a screen Can be Such compounds then promote homodimer formation and gene transcription in the cell Can be used to Cells as used herein are in vitro or yeast. Includes cells found anywhere in vivo. Therefore, RXR homodimer form Influence transcription and promote transcription of genes activated by RXR homodimers These compounds can be administered to human subjects to progress. Such compounds The following examples are presented.   The data presented herein below utilize RXRα. However, RXR α, β, Each protein forms a homodimer if a high homology between γ and γ is given. Should have the activity described for the RXRα homodimer. Seki In succession, homodimers can form between different RXRs. For example, homodimer Between RXRα and RXRβ, between RXRβ and RXRγ, or between RXRα and RXRγ Can be formed with. The activity of these homodimers is determined by the methods presented herein. Can be confirmed using   The present invention also relates to the effects on the ability of RXR homodimers to bind DNA. A method of screening for quality is provided, in which this material is homodimerized as described above. Of the compound on the process of ligation and the ability of the homodimer to bind to DNA The step of measuring is included. For example, it may bind homodimers, or RXR Compounds capable of binding the DNA response element recognized by the modimer are Can be screened by the method.   The present invention further provides a method of inhibiting the activity of RXR-containing heterodimers, This method increases the formation of RXR homodimers, which causes RXR to become heterodimeric. Inhibiting the formation of the mer and the resulting heterodimer activity. It This activity can be any activity, but is generally transcriptional activation or repression. Is. This activity is used, for example, to form otherwise heterodimers. The available RXRs can be used to form homodimers by blocking them. Can be burned. Heterodimer activity is reduced because the number of heterodimers is reduced To do. In one example, the RXR heterodimer is a thyroid hormone receptor or And RXR. The activity of RXR / TR heterodimer decreased. Other heteroda Immers can be tested using the standard methods presented herein.   The present invention also provides a method of inhibiting the activity of RXR receptor homodimer, This method includes the step of inhibiting RXR homodimer formation. Such an inhibition Inhibits transcription or activation by, for example, 9-cis-RA, or 9-cis-RA. It can be obtained by This inhibited activity is generally the activation or repression of transcription. Is.   The present invention also provides a method of inhibiting the activity of RXR homodimer, which method comprises: , RXR homodimer binding to its response element is suppressed. For example, the activity of a receptor that competes with the same response element may be enhanced. General In addition, the activity that is inhibited is the activation or repression of transcription.   The present invention provides a method of measuring the probability of increased pathology associated with RXR homodimer formation. And the method provides RXR in a subject as compared to a normal subject. Detecting the regulation of homodimer formation. This regulation is a homodimer Formation can be increased or decreased. Such regulation may occur, for example, from a mutated RXR. You can get it. This reduction was achieved by assaying for homodimers in the sample. Or by detecting variants known to reduce homodimer formation. Can be detected.   Relatedly, the present invention involves the step of modulating homodimer formation in a subject. Methods of treating conditions associated with RXR homodimer formation in a subject, including To do. This regulation can be increased or decreased depending on the condition. Such an increase , For example, utilizing a compound that promotes RXR transcription. This condition is an example For example, it may be associated with skin such as acne and psoriasis. In addition, the condition may be cancer It The precise requirements for such compounds may vary from subject to subject, depending on the species. , Age, general condition of the subject, severity of the illness being treated, the particular used It depends on the compound and its administration method. Therefore, it is necessary to specify an accurate activity-promoting amount. Is impossible. However, a suitable amount is a route, given the teachings herein. It can be determined by one of ordinary skill in the art using only Chin experiments.   The present invention also provides a purified RXR homodimer. The term "purified" Is related to the RXR homodimer in its natural environment. Means the absence of at least some cellular components.   The present invention screens response elements for binding to RXR homodimers. Providing the response element to the RXR homodimer described above. And the step of detecting the presence of binding. The existence of a bond , Can be determined by many standard methods. One way is to create a response element. Binding is detected by transcriptional activation of a marker that is operably linked. The term "ready "Linked to" means that the marker can be transcribed in the presence of a transcription activator. To taste.   In this study, the natural vitamin A derivative 9-cis-RA binds to retinoid receptor DNA. And from studies of effects on transcriptional activation. All-as opposed to Trans-RA, 9-cis analog is 10-9~Ten-8How many at M concentration, not to natural TRE or ERE Dramatically promotes RXRα binding to the RXR-specific RARE. This effect affects RXRα and β Specific for RXR because 9-cis-RA does not induce γ- or γ-binding to response elements. (FIGS. 1 and 3). Judging from migration pattern in gel shift assay , Larger complexes containing RXR trimers or tetramers can occur (see In the case of CRBPII-RARE), 9-cis-RA is presumed to induce homodimer formation. . Such trimer or tetramer formation can be achieved using the methods presented herein. Can be tested.   RXRα homodimer has different response element specificity than heterodimer It The rCRBPI response element The CRBPII response element (which contains complete repeats). 9-cis-RA-induced RXRα homodimer It was a strong binder. This response element is RXRα24,30To live better It was previously shown to be sexualized. This response element is also RXRα-RARα Heterodimer (Fig. 3)27,29Is more effectively bound by It seems to have a repressor function30.   CV-1 cells, like all other mammalian tissue culture cells tested, partially shaded. Transcriptional activation, though encapsulating an endogenous retinoid receptor that can obscure the sound The results obtained in the study are in good agreement with the results obtained in the DNA binding study. Also Nevertheless, the response element that binds tightly to the 9-cis-RA-RXRα homodimer does not It also strongly responds to RXRα cotransfected in the presence of 9-cis-RA. That On the other hand, the response element that does not bind well to RXRα homodimer is rCRBPI-RARE or Or, like MHC-TRE, it could not be activated by RXRα alone.   Nuclear hormone receptor dimerization--homodimerization or heterodimerization Important for high affinity interactions between scepters and their cognate response elements Generally believed. RXR exists mainly as a monomer in solution16, Effective D High concentration or presence of RAR, TR or VDR to show NA binding activity13,15,16,26- 30 I need. The observation of increased cooperative RXR DNA binding activity in the presence of 9-cis-RA was 9- Cis-RA increases against DNA It shows that it induced the formation of RXR homodimers with added affinity. Therefore, 9 -Binding of cis-RA to RXR can induce a conformational change, which causes homodimerization . Although 9-cis-RA and RA can bind to RAR24,25, They form RAR homodimers It is interesting not to induce.   RXRα homodimer formation can occur in solution in the absence of DNA. Therefore, 9-cis -When RA becomes available to cells, it will have monomeric and dimeric receptors The equilibrium between the two, and an additional species, RXR homodimer, can form Give the response path of. As observed by in vitro gel shift assay The concept of ligand-induced homodimer binding involves the mutated estrogen receptor (ER -val-400) except nuclear receptors have been previously observed44,45.   For related TRs, ligand effects have been reported for homodimer binding. But46,47, But the ligand (T3) interacts with the homodimer response element Was reduced. The carboxy-terminal halves of TR and RAR are ligands and dimers Code both functions36,46,48, Dimerization as observed here The strong influence of the ligands involved is not at all surprising. But of this effect Specificity only affects homodimer formation, not heterodimer formation So extremely dramatic. The big picture is through its intermingled domains The carboxy-terminal region of the receptor (which also contains the transcriptional activation region)49But the other Regulatory protein50Interaction with Resulting from allowing the activity of multiple individual receptors.   The data described in this application demonstrated the central role of RXR with two functions. It is one of the three hormone receptors for RAR, TR and VDR through heterodimerization. It is possible to act as a coreceptor for a class of. Two of RXR Functions of homodimerization and heterodimerization-provide two distinct transcriptional regulatory controls. explain. It can be expected to affect distinct physiological processes. Therefore, 9-cis-RA may have therapeutic properties that are distinct from those of all-trans-RA.   The novel compounds provided herein are compounds defined by structural formula (I) above. It is a combination. Preferred compounds that fall within this general structure include: Where R11Is O, S, (CH3)2C and CH2Selected from the group consisting of, And R12Is hydrogen or methyl. Particularly preferred compounds within this group are the structures It is a compound represented by the formula (II).   Preferred R3Substitute is R3Is a case having the following general structure, Selected from the group consisting of: Preferred R3Substitute is R3Is the case of the following general structure, Selected from the group consisting of: Examples of preferred structures encompassed by formula (II) include: Of particular detailed preferred compounds falling within the class of compounds defined by formula (II) Examples include:   The present invention also provides a pharmaceutically acceptable compound of formula (I) containing a carboxylic acid moiety. Includes non-toxic ester, amide, and salt derivatives.   A pharmaceutically acceptable salt treats the free acid with an appropriate amount of a pharmaceutically acceptable base. It is prepared by A typical pharmaceutically acceptable base is ammonium hydroxide. , Sodium hydroxide, potassium hydroxide, lithium hydroxide, calcium hydroxide, Magnesium hydroxide, ferrous hydroxide, zinc hydroxide, copper hydroxide, aluminum hydroxide System, ferric hydroxide, isopropylamine, trimethylamine, diethylamine, Triethylamine, tripropylamine, ethanolamine, 2-dimethylamino Ethanol, 2-diethylaminoethanol, lysine, arginine, histidine How is it? The reaction is carried out in water with an organic solvent that is miscible with water alone or with inert water. In combination, it is performed at a temperature of about 0 ° C to about 100 ° C, preferably at room temperature. Used The molar ratio of the compound of structural formula (I) to the base is that desired for any particular salt. Selected to provide. For example, ammonium salts of the free acid starting material (herein For the preparation of (particularly preferred embodiments herein), the starting material comprises about 1 equivalent Treatment with a pharmaceutically acceptable base may give a neutral salt. Calcium salt prepared If used, about 1/2 molar equivalent of the base is used to obtain the neutral salt, but ammonium salt is obtained. For salts, about 1/3 molar equivalent of base is used.   Ester derivatives are typically based on the acid form of the compound. Prepared as a precursor (exemplified in the examples below) and thus Can be used. Generally, these derivatives are acetate, propione And lower alkyl esters such as g. Amide derivative,-(CO) NH2,-(CO) N HR, and- (CO) NR2(Where R is lower alkyl) is a carboxylic acid containing It can be prepared by reaction of a compound with ammonia or a substituted amine (see the examples below. VII). Synthesis method:   The compounds of this invention are readily synthesized using techniques generally known to synthetic organic chemists. Can be Suitable experimental methods for the preparation and derivatization of bridged bicyclic aromatic compounds are described in Examples For example, the disclosures of the patents of Maignan et al. Are incorporated herein by reference. Specific and preferred combinations of the invention The method of making the article is described in detail in Examples III-XVII below. Utility and administration:   The compound of the present invention defined by the structural formula (I) (its pharmacologically acceptable ester , Amide, or salt) is a receptor in the retinoic acid family Inducing and / or regulating selective gene expression by and retinoid Differentiation process regulated by thyroid, vitamin D, and / or thyroid hormone It is useful for controlling the temperature. Therefore, As mentioned above, the compounds of the invention are effective against acne, leukemia, psoriasis, skin aging, Bone mineralization and energy levels, retinoic acid, vitamin D, instep Involved in the cellular processes regulated by thyroid hormones and 9-cis-retinoic acid. It is useful for treating a series of other symptoms.   The compounds of the present invention may be used in combination with one or more pharmaceutically acceptable carriers. It may be conveniently formulated in a pharmaceutical composition comprised of a compound. For example,Reming ton's Pharmaceutical Sciences , Latest version, E.W. Martin (Mack Publ. Co., East on PA) is related to the preparation of typical carriers and formulations of compounds of the present invention. See disclosing conventional methods of preparing pharmaceutical compositions that can be used as .   The compound can be administered orally, parenterally (eg, intravenously), intramuscularly, intraperitoneally, It may be administered topically, transdermally, etc., but typically oral or topical administration is preferred. Good. Of course, the amount of active compound administered will depend on the subject being treated, the subject. It depends on body weight, administration method, and judgment of the prescribing physician. However, in general, the dose It is similar to the typical dose of administration of thynoic acid, preferably about 2 μg / kg / day to 2 m The range is g / kg / day.   Depending on the mode of administration given, the pharmaceutical composition may be in solid form, semi-solid form, or May be a liquid dosage form, for example tablets, suppositories, pills, capsules, powders, solutions , Suspensions, lotions, creams, gels, etc., preferably It may be in unit dosage form suitable for any single dose. This composition Selected in combination with a pharmaceutically acceptable carrier, as described above. Containing an effective amount of drug, and further other medicinal agents, medicinal agents, carriers, adjuvants May include diluents, diluents, etc.   For solid compositions, conventional non-toxic solid carriers include, for example, medicated gray. De mannitol, lactose, starch, magnesium stearate, sacchar Sodium phosphate, talc, cellulose, glucose, sucrose, magnesia carbonate Um, etc. are included. Liquid pharmaceutically administrable compositions are described herein, for example. The active compound as described and any pharmaceutical adjuvant may be used, for example in water, physiological In an excipient such as saline solution, aqueous dextrose solution, glycerol, ethanol, Prepared by dissolving, dispersing, etc., thereby forming a solution or suspension You can If desired, the pharmaceutical composition to be administered may also contain a wetting or emulsifying agent, pH buffering agents, etc. (eg sodium acetate, sorbitan monolaurate, trie Small amount of tanolamine sodium acetate, triethanolamine oleate, etc.) Non-toxic auxiliaries may be included. The actual method for preparing such dosage forms is Those known or apparent to those skilled in the art, see, eg, the above references.Remington ' s Pharmaceutical Sciences checking ...   For oral administration, fine powders or granules can be used as diluents, dispersants, and / or May include a surfactant and be capsulated in water or in a syrup, dry. Le or sachet A binder or in a non-aqueous solution or suspension that may include a suspending agent; May be present in tablets, which may include lubricants, or in suspension in water or syrup It If desired or necessary, flavoring agents, preservatives, suspending agents, thickening agents, Or an emulsifier can be included. Tablets and granules are the preferred oral dosage forms, And these can be coated.   Parenteral administration, if used, is generally characterized by injection. Injection Is a liquid solution or suspension, a solid suitable for solution or suspension in a liquid prior to injection. It can be prepared in conventional forms, either as a form or as an emulsifier. Non Recently Revisited Approach to Oral Administration Maintains Dose Levels Such as the use of sustained or sustained release systems. For example, US Pat. See 710,795. This is incorporated herein by reference.                                 Experiment   The following examples demonstrate the methods, compositions and compounds claimed herein. A person skilled in the art is provided with a complete disclosure and description of how it was made and evaluated. Submitted for. And the examples are not intended to limit the scope of our invention. I haven't. Efforts are made to ensure accuracy with respect to numbers (eg, amounts, temperature, etc.). However, some error and deviation must be taken into account. Unless otherwise specified Parts are parts by weight, temperature is in degrees Celsius, and pressure is at or near atmospheric.   The positions of the groups and substituents in the description are based on the following numbering system through the examples. adopt:                              Example I Identification of homodimer formation 9-cis-RA induces RXR homodimer binding on TREpal   When RXR is used at high concentration, it may bind to the RA response element (RARE). Although shown28,30,31, And more recent research shows that RXR can be used as a monomer in solution. And mainly existTen, And for effective DNA interaction, RAR or TR or VD R and The heterodimer formation of15,16,26-29Became clear. Various Binding of heterodimers to response elements was found to be ligand-independent. Was issued32. The newly discovered natural RA isomer 9-cis-RA is either RAR or TR Effects of RXR in Drosophila Schneider cells, which are known not to contain shift Reported to be a fruitful activator17,24. 9-cis-RA faces RXR If it is indeed a true ligand, this ligand will It is expected to regulate the action. Therefore, the absence of coreceptors (TR and RAR) Palindromic TRE (TREpal), RXR response element under and in the presence of14To The effect of 9-cis-RA on RXRα binding was studied.   RXBlue, RARβ, or TRα receptor cDNA pBluescript (Stratagene, San  Cloning to Diego, CA) has been previously described.26. Flag-RXRα, A double-stranded oligonucleotide containing the ATG codon and a flag corresponding to the N-terminal of RXRα. DNA sequence encoding Arg-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys [SEQ ID NO: 1] Due to the ligation with33Built like. Then the fusion product Was cloned into pBluescript. Receiving with an in vitro transcription / translation system Synthesis of putter protein, and synthesized receptor protein and double-chain TR Gel delay assay using Epal34Is as described33. 9-cis-RA ( Melting point 184-187 ° C) in the presence of HOAc-MeOH in two successive MnO 2 steps.2Oxidation35By 9- Cis-retinal To give the methyl ester (69%), followed by 0.5N in 25% aqueous MeOH.  Hydrolyzed (80%) in KOH and crystallized (MeOH); HPLC (Novapak C18 , 32% MeCN, 27% MeCH, 16%I-PrOH, 24% H2O, 1% HOAc, 1.9 mL / min, 260 nM) tR15.4 minutes (100%). DNA binding assay to analyze hormonal effects Incubate the receptor protein with the appropriate concentration of hormone for 30 minutes at room temperature before Incubated. DNA binding was performed using anti-flag antibody (Immunex, Seattle, WA). Prior to performing the combined assay, 1 μl of antiserum was exposed to the receptor protein at room temperature. And incubated for 30 minutes.   RXR alone does not bind TREpal effectively and responds in the absence of ligand TR or RAR was required for element interaction, but RXR binding was 9-system Dramatically increased in the presence of Su-RA (Fig. 1a) and did not require TR or RAR It was The RXR-specific band observed in the presence of 9-cis-RA is the heterodimer TR-RX. It was as prominent as the bands obtained with the R and RAR / RXR complexes. RXR complex , TR-RXR complex at a position very similar to that of the RAR / RXR heterodimer TREpal complex I moved later than my body. Therefore, these data show that 9-cis-RA is RXR It is shown to induce modimeric formation. RXR homodimer induced by 9-cis-RA -As the RAR-RXR complex migrates at the same position as the complex, both complexes are formed. Could or could not be determined in this experiment. Notably, all- Transformer-RA 10-6Also when added at a concentration of M, RXRα Induced homodimer binding to some extent3Did not induce. The impact of RA is It could be observed with several freshly prepared RA solutions, but this homodyne in the presence of RA Immer formation is due to the 9-cis-RA impurities in the all-trans-RA solution used herein. It is not clear at this time whether this is a direct effect of all-trans-RA. No (see below). Interestingly, 9-cis-RA is a Reported that, unlike its effects, it could bind to RARtwenty fourHas been used, but 9-cis-RA Was not found to induce RAR homodimer binding to TREpal.   Proof that the complex observed in the presence of 9-cis-RA is indeed the RXR complex. To provide further support, DNA binding experiments were performed with Flag-RXR. this The derivative is an 8 amino acid sequence that is specifically recognized by an anti-flag (αF) antibody. Retains mino-terminal epitope33. As shown in FIG. 1b, αF is 9-cis-RA. The induction complex was shifted, but not the non-specific antibody. This is 9- The complex observed by TREpal in the presence of Su-RA does indeed contain RXR protein Proved to do. 9-cis-RA-induced homodimer formation was associated with the concentration of RXR protein. In vitro translated RXR to determine how often it depends Increasing concentrations of protein were labeled in the presence or absence of 9-cis-RA. Was mixed with TREpal (Fig. 2a). These mixtures were separated by gel retardation assay. When analyzed, the DNA binding of the homodimer resulted in RXRα protein concentration The effect of strong co-operation was seen, which depended on the positive correlation (Fig. 2a, b). High concentration RX When R is used, slight binding of RXR can be observed, but at all receptor concentrations used. In degrees, 9-cis-RA was required for effective complex formation. All the records used At the sceptor concentration, the concentration of 9-cis-RA required for homodimer complex formation was determined. Decided. Further determination of the concentration of 9-cis-RA required for homodimer complex formation did. Ten-9A significant effect was already observed with M, but the optimal binding was 10-8Seen in M ( Figure 2c). Therefore, effective RXR homodimer DNA interactions are Degree-dependent and can occur at low levels of 9-cis-RA.9-cis-RA induces homodimer interactions with specific response elements   RXR-containing heterodimers are highly specific phases with various natural response elements. It has an interaction and the TR-RXR heterodimer only binds strongly to TRE and Does not combine. However, the reverse is true for RAR-RXR heterodimers1 5,32 . Using multiple natural and synthetic response elements, 9-cis-RA induced RXR homo The sequences required for DNA binding of the dimer were examined (Fig. 3a).   A gel retardation assay using a receptor protein synthesized in vitro, It is described in FIG. The following oligonucleotides and their complementary strands are shown in FIG. And used as a probe in FIG. ApoAI-RARE with 2bp spacer Direct repeat response element31, GatcAGGGCAGGGGTCAAGGGTTCAGTgatc   [SEQ ID NO: 2]; CRBPII-RARE, direct repeat RXR specific with 1 bp spacer Response element30, GatcCAGGTCACAGGTCACAGGTCA-CAGTTCAAgatc [SEQ ID NO: 3] ; Β RARE, direct repeat of RA response element present in RARβ promoter36,37, G atctGTAGGGTTCACCG-AAAGTTCACTCagatc [SEQ ID NO: 4]; CRBPI-RARE, rat CR Directly repeated RA-specific response element present in the BPI promoter38, GatccAGGTCAAA AAGTCAGgatc [SEQ ID NO: 5]; MHC-TRE, present in rat α-myosin heavy chain gene Direct iteration T3Specific response element40, GatcCTGGAGGTGACAGGAGGACAGCgatc [SEQ ID NO: 6]; ME-TRE, direct repeat T existing in rat malate enzyme gene3 Specific response element41, GatcCAGGACGTTGGGGTTAGGGGAGGACAGTGGgatc [SEQ ID NO: : 7]; DR-4, idealized direct repeat T with 4 bp spacer3Specific response Rement39, GatcTCAGGTCATCCTCAGGTCA-gatc [SEQ ID NO: 8]; DR-5, 5 bp space Idealized direct repeat RA-specific response element with a prober39, GatcTCAGGTCATC CTCAGGTCA-gatc [SEQ ID NO: 9]; ERE, complete palindromic ER response element Ment42, GatcTCAGGTCACTGTGACCTGAgatc [SEQ ID NO: 10]. TREpal array [array No .: 11] is shown for comparison.   ApoAI-RARE, a direct repeat response element containing a 2 bp spacer, is RXR specific Suggestive31However, it was obtained as a strong RXR complex in the presence of 9-cis-RA. And RA (10-6M) was obtained as a lower degree of complex. RXR-RAR The heterodimer also effectively bound this response element. Heterodimer -The complex migrated at the same position as the RXR homodimer Therefore, the effect of RXR-RAR heterodimer of 9-cis-RA cannot be clearly determined. R AR homodimer binding was not induced by 9-cis-RA (Fig. 3b). Other RX R response element30, That is, 9-cis-RA that induces RXR binding to CRBPII-RARE Upon investigation, it migrated even slower than heterodimers (in the absence of ligand) Complex was observed, but in the presence of 9-cis-RA and RAR, homodimer binding Both the dimer and heterodimer binding showed a decrease in their strength (Fig. 3); -Like effects are present at high RA concentrations or both 9-cis-RA and RA are present Seen in the case. 9-cis-RA is also the βRARE of RXR (5 bp spacer RAR response element derived from human RARβ promoter containing36,37) Interaction with It was induced (Fig. 4a). However, the RXR homodimer band is In magnitude, it is much weaker than the RAR-RXR heterodimer band. Interestingly, Other natural RAREs from the rat CRBPI promoter38(Apo containing 2bp spacer Similar to AI-RARE) does not show any binding of RXR in the presence of 9-cis-RA (Fig. 4a). This is because the actual sequence of the repeat core motif is the RXR homodimer. It is shown to be important for binding. Similarly, from DR-5-RARE, or β-RARE Complete repeating element39Shows no interaction with RXR in the presence of 9-cis-RA. Although, it strongly interacts with RXR when RARE is present (Fig. 4a).   To determine whether RXR homodimer binding is specific to a particular RARE, Rat α-myosin heavy chain promoter (MHC- T from TRE)3Response element40, T derived from rat malate enzyme (ME-TRE)3Response Answer element41, And T from the complete repeat DR-43Response element39Using The Leshift experiment was performed again. In all three cases, the presence of 9-cis-RA No specific binding of RXR could be observed in the absence or presence of the three response elements. All of these effectively bind the TR / RXR heterodimer and these elements , Consistent with the view that it is not induced by retinoids. Similarly, perfect Paris Eroded ERE42Also did not interact with the RXR homodimer (Fig. 4c).9-cis-RA-induced homodimer formation occurs in the absence of DNA   RXR was reported to exist primarily as a monomer in solution16. Important question The title is 9-cis-RA-induced RXR homodimer (similar to RXR containing heterodimer). Is that it can form in solution in the absence of DNA. This The advantage of the flag-RXR derivative to solve the problem of The advantage was taken that the RXR wild type could not be precipitated, whereas the RXR wild type could not.   Align the flag-RXRα with the open reading frame in the expression vector pGex 2T (Pharmacia). Cloned and cloned into bacteria using the procedure provided by the manufacturer. Made it appear. Proteins were preloaded with glutathione Sepharose 4B column ( Gel partially purified on Pharmacia) and with anti-flag antibody Tested for its function by delay assay and Western blotting It was Essentially described co-immunoprecipitation assay26Went as was done. Simply say In vitro355 μl of 10 μl S-labeled synthetic RXRα protein (About 0.1 μg) partially purified bacterially expressed flag-RXRα fusion protein Or a similarly prepared glutathione transferase control protein and 100 μl buffer (10-7In M9-cis-RA, 50 mM KCl, and 10% glycerol) Incubated for 30 minutes at room temperature. Of chemical crosslinkers or oligonucleotides 2 μl of 100 mM dithiobissuccin dissolved in DMSO when assayed in the presence Add imidyl propionate (DSP), or 10 ng of oligonucleotide, Then, the incubation was continued for 15 minutes at room temperature. The reaction mixture was then added with 1 μl of Incubated with flag antibody or non-specific preimmune serum for 2 hours on ice . The immune complex was added to 50 μl of protein-A-sepharose slurry and then And precipitated by continuous mixing in a cold room for 1 hour. Immune complex, 10-7 Cold NET-N buffer containing M9-cis-RA (20 mM Tris, pH 8.0, 100 mM NaCl, 1 mM Wash well with DTT, 0.5% NP-40), boil in SDS sample buffer, and wash with SDS-poly It was analyzed by acrylamide gel electrophoresis. Fix the gel, dry, and dry. It was visualized by radiography.   Flag-RXR was labeled in vitro35Mixed with S-RXR protein If labeled RXR, the presence of anti-flag antibody It could precipitate below, but not in the presence of non-specific serum (Figure 5). ApoA Coprecipitation efficiency increased slightly in the presence of I-RARE, but increased in the presence of MHC-TRE. I didn't join. In addition, by co-incubating with a cross-linking agent (DSP), the labeled RXR The precipitation was further enhanced. In all cases, the specific co-precipitation was 9-cis-RA Was observed only in the presence of Therefore, these data show that 9-cis-RA induced RX R homodimer formation occurs in solution and does not require RXR-DNA interactions This hypothesis is strongly indicated.Response element-specific transcriptional activation by 9-cis-RA and RXRα   9-cis-RA / RXRα homodimer response element interaction To investigate whether it may be associated with transcriptional activation by such response elements by coalescence To investigate, a series of transient transfection assays in CV-1 cells was performed. I went. In this case, the receptor expression vector was constructed on the various tk promoters. Co-transfected with a CAT reporter construct containing a flow response element . CV-1 cells described above43Using a modified calcium phosphate precipitation procedure such as And transiently transfected. Co-transfected β-galactosida By measuring the enzyme activity derived from the enzyme expression plasmid (pCH110, Pharmacia). CAT activity was normalized for transfection efficiency. Transfection 10 cells-7 Grow in the absence or presence of M9-cis-RA or all-trans-RA.   Strong activity by RXRα in the presence of 9-cis-RA using TREpal-containing reporter Almost no activation or activation was observed when RA was added. Activation is It could be further enhanced by co-transfection of RARα. But this place If so, RA is also not as efficient as 9-cis-RA, but an effective activator. And it worked. Overall, activation by 9-cis-RA in the presence of RARα and RXRα Is about twice as strong as that seen with RXRα alone, in the presence of both receptors. The binding is by both heterodimer and homodimer in the presence of 9-cis-RA. Which is consistent with the observed DNA binding data (Fig. 6a). When testing βRARE (Fig. 6b), this response element was previously observed.37,42In agreement with the endogenous CV-1 It was observed to be highly activated by cell receptors, but at low concentrations No further activation by the transfected receptor could be observed. Only However, 9-cis-RA is interestingly 10-7M is a stronger activator than RA It was. Therefore, these data show that CV-1 cells activate endogenous retinoid receptor activity. And its activity is particularly active for βRARE, and 9-cis-RA To be responsive to.   The ApoAI element-containing reporter was also non-expressed by RXRα in the presence of 9-cis-RA. It was always effectively activated (Fig. 6c), but the levels obtained in the absence of RXRα RA is not induced beyond It was Similar to TREpal, cotransfect both receptors RXRα and RARα When activated, maximum activation was observed. Under these conditions, RA is also strongly activated. Reached. In contrast, CRBPI elements (here, RXR in the presence of 9-cis-RA No DNA binding was observed). Was not activated by RXR and 9-cis-RA in the study (Fig. 6d), but RARα Alone led to a prominent activation that is largely 9-cis-RA dependent. Heteroda Immer RARα RXRα allowed maximal activation in the presence of 9-cis-RA. prediction Although not not done, induction with RXRα and 9-cis-RA was associated with MHC-TRE, ME -Not observed for TRE or ERE. These in vivo analyzes There was a significant correlation with the results obtained in the in vitro DNA binding studies. Where, Strong activation by RXRα in the presence of 9-cis-RA was associated with 9-cis-RA-induced RXRα homodimer Only observed for response elements that interact strongly with the mer.9-cis Retileic acid inhibits activation by TR / RXR heterodimer   Thyroid hormone (T3) In the presence of thyroid hormone receptor / RXR heterodyne CAT Reported Gene Activated by Immers Adds 9-cis-RA Can be inhibited by This type of inhibition allows transfection assays Is most easily measured using.                              Example II          Identification and selection of compounds that induce RXR activity   Essentially describes the TREpal-tk-reporter gene51Temporary trance like Compounds were evaluated for induction of RXR activity in a fection assay. Simple In other words, CV-1 cells or Hep G2 cells were added to DME medium supplemented with 10% fetal bovine serum. It was grown in. Cells should be placed in a 24-well plate 16-24 before transfection. 1.0 x 10 per wellFivePlates were individually cultivated. Generally, 100 ng report Target plasmid, 150 ng β-galactosidase expression vector (pCH110, Pharmaci a), and various amounts of the receptor expression vector were added to the carrier DNA (pBluescript ) Was mixed with each other to give 1,000 ng of total DNA per well. Chloramphenicol acetyl Transferase (CAT) activity is described above52Corresponding β-galactose like Transfection efficiency was standardized by the dase activity. As shown in Example I As such, TREpal is active by both RAR / RXR heterodimers and RXR homodimers. Represents a response element that is sexualized. RXR expression vector for TREpal-tk-reporter When cotransfecting a gene with CV-1 cells, all-trans-RA It does not effectively activate the reporter, but it does activate 9-cis-RA. Set of retino Evaluation of Id pointed out that some show activity with RXR. Then these Combines the pharmacophoric elements of the structure and Modified to Retinoids whose activation profile for RXR is similar to that of 9-cis-RA. Generated a subset of the code. Derivatives for some retinoid activity with RXR The lines are shown in Figure 7a. Interestingly, none of the active compounds-8Live in M Showed no sex, but 10-7In M, all showed similar activity to 9-cis-RA. Next RARE of cytoplasmic retinol binding protein II (CRBPII)30Reporter remains I used a gene. It is activated only by the RXR homodimer, but not the RAR / RXR It is a response element that is not activated by heterodimers. This response element The induction profile obtained with menthol resembled the TREpal responder (Fig. 7b). . Therefore, synthetic retinoids SR11203, SR11217, SR11234, SR11235, SR11236, And SR11237 appeared to be an effective activator of RXRα. Compound The structure is as follows:   The activity rankings for this series of retinoids are TREpal and CRBPII lipoproteins. Is the same for both It was Ketal SR11237 is the most active, followed by isopropylidenyl retinoid S R11217, hemithioketal SR11235 and thioketal SR11234. Zitia SR11203 and dioxane SR11236 had the lowest activity. Structural analysis These retinoids are found in the lipophilic head of 9-cis-RA and in the empty carboxyl terminus. It has a spatial orientation similar to the inter-orientation and its activity is tetrahydronaphthalene. And substituents attached to the phenyl ring system (CRR1) Can be related to length and volume Was shown.   In Example I, by inducing RXRα homodimer formation, 9-cis-RA was converted into RXR Since it has been shown to specifically activate α, TREpal was analyzed using a gel retardation assay. The retinoid-induced RXR homodimer binding to was studied. Simply put, gel delay The assay is essentially as described above33I went like. In vitro translated receive Putter receptor protein (1-5 ml depending on translation efficiency)32P label Gonucleotide and 20 ml reaction mixture (10 mM Hepes buffer, pH 7.9, 50 mM KCl, 1, in mM DTT, 2.5 mM MgCl, 10% glycerol, and 1 mg poly (dI-dC) Incubated at 25 ° C for 20 minutes. The reaction mixture is then treated with 0.5 x TBE (1 x TBE = 0.089M trisborate, 0.089M boric acid, and 0.002M EDTA) Loaded on 5% non-denaturing polyacrylamide gel.   RXR did not bind to this response element in the absence of 9-cis-RA. Reti The noids SR11217, and SR11237 RXR homodimer binding to response elements was induced in a dependent manner. Retino Id 11203 (This is a weak transfection assay in transient transfection assays. (Acting as a tibeter) also induced only weak RXR binding. SR11231 RXR homodimer binding (which did not activate RXR homodimer) Could not be induced. Similar results were obtained with CRBPII-RARE and ApoAI-RARE . Therefore, in the present specification, a class of synthetic retinoids that activate RXRα is , Homodimer formation and binding to DNA.   The key issue is that these RXR activating compounds, such as 9-cis-RA, are also associated with RAR / RXR Whether the rhodimers can be activated or they can be truly RXR selective It was no. To analyze this issue, we have four differences that hold one of the following: The following reporter constructs were used: i) rat cytoplasmic retinol binding protein I (CRBPI) gene RARE38And only this is bound by the RAR / RXR heterodimer Ii) RARβ2 gene promoter RARE36, 37, This is heteroda Most efficiently bound by immers, but also by RXR homodimers To some extent activated; iii) CRBPII-RARE, which is a RXR homodimer Only activated, and RAR suppresses RXR activity30Iv) Apolipoprotein AI (ApoAI) gene RARE31This is due to the RAR / RXR heterodimer, and RX It is bound and activated by the R homodimer. 4 different reporters Constructs with RARα, RARβ, RXRα, Co-transfected with RXRα and RARα together51. 5 × 10 retinoids-7 Was analyzed at the concentrations indicated (almost complete induction was obtained at the doses indicated (FIG. 7)).   CV-1 cells were treated with 100 ng of reporter plasmid a) CRBPI-tk-CAT, b) βRARE-t co-transfected with k-CAT, c) CRBPII-tk-CAT, and d) apoAI-tk-CAT. It was 5 × 10 retinoids-7Applied at M. The results of a representative experiment are shown.   RXR-specific retinoids only activate RXR homodimers, but not RAR / RX Not significantly different from 9-cis-RA (or RA) in that it does not activate the R heterodimer Works. Like 9-cis-RA, both SR11217 and SR11237 have CRBPII -Strength of RARE (ie, RARE significantly activated only by RXR homodimer) A good activator. However, compared to 9-cis-RA, they are RAR / RXR It did not induce CRBPI-RARE, which is activated only by the heterodimer. Therefore , SR11217 and SR11237 are very similar to 9-cis-RA for CRBPII-RARE. However, they do not show a response for CRBPI-RARE, here 9-cis- RA is the best activator. βRARE depends on SR11217 and SR11237. Slightly activated, the relatively low RXR homodimer for this response element Consistent with the good affinity. apoAI-RARE is a RAR / RXR heterodyne in the presence of 9-cis-RA. Most effectively activated by immers. In addition to the activity found in CV-1 cells And the retinoids SR11217 and SR11237 cause significant and RXR-specific activity. Was also observed in various other cell lines, including Hep G2 cells, where , A particularly high response was observed. RARα and RARβ were co-transfected , Any synthetic retino for any response element tested. It was not significantly activated by id. Similar negative results for RARγ I got it. RARα and β are endogenous RXR-like proteins in CV-1 cells And form a heterodimer. Therefore, these heterodimers It is also non-responsive to synthetic retinoids.   These data demonstrate the identification of a new class of retinoids. this These retinoids specifically induce RXR homodimer formation and specifically Activates the RXR homodimer for the response element, but uses the RAR / RXR heterodimer Do not activate These retinoids are specific activities of the RXR selective response pathway. It allows sexualization but does not induce the RAR-dependent response pathway. These retinoids The class is more limited than the currently used RA isomers or other retinoids. To provide a physiological response.                             Example III   (A.) Methyl 4-[(5,6,7,8-Tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthale Nyl) carbonyl] benzoate (3):   Suspension of aluminum chloride (1.13 g, 8.5 mmol) in 1.5 mL of 1,2-dichloromethane The liquid was added to 6 mL of 1,2,3,4- in 1,2-dichloroethane under argon atmosphere at 0 ° C. Tetrahydro-1,1,4,4-tetramethylnaphthalene1(1.45g, 7.7mmol) (Kagech ika, H. et al.J. Med. Chem. 31: 2182 (1988)) and 4-carbomethoxybenzo Ilchloride2A solution of (1.56 g, 7.9 mmol) was added (4-carbomethoxybenzene). Nzoyl chloride2Is monomethyl terephthalate, readily available from Aldrich. 1 step (SOCl2, DMF)). Warm the resulting solution to room temperature , And then stirred for 16 hours. The reaction mixture was poured onto ice water and 40% ethyl acetate / hex Extracted with sun. The combined organic layers were washed with saturated NaHCO3Wash with aqueous solution and brine. The solution is anhydrous MgSOFourDried at rt, filtered and concentrated to give an orange solid (4.5 g) It was By flash chromatography (50% dichloromethane / hexane) Place Desired productThreeWas obtained as a pale yellow solid (2.07 g). Dichloromethane / hexa The desired product by recrystallization from theThreeWas obtained as a white crystalline solid (1.96 g, 50%): melting point 146-148 ° C; Rf 0.14 (50% CH2Cl2/ Hexane). Product structure Also IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectroscopy.   (B.) [2- (5,6,7,8-Tetrahydro-5,5,8,8-tetramethylnaphthalen-2-yl ) -2- (4-Carbomethoxyphenyl)]-1,3-dithiane (Four):   Keto-ester in 3 mL chloroformThree(97mg, 0.277mmol) solution, 0 ℃ Then, under argon atmosphere, 1,3-propanediol (33 μL, 36 mg, 0.332 mmol) Was added, followed by boron trifluoride ether complex (17 μL, 0.140 mmol). The resulting mixture was stirred at 0 ° C. for 1 hour then allowed to warm to room temperature overnight. Reaction mixture Saturated Na2CO3Quench by pouring into aqueous solution, and dichloromethane It was extracted with. The combined organic layers were washed with anhydrous MgSO 4.FourDried, filtered and concentrated A yellow solid (0.108g) was obtained. Desired by recrystallization from ethyl acetate / hexane The JitianFourWas obtained as a white crystalline solid (0.087 g, 71%): mp 195-19. 7 ℃; Rf 0.32 (50% CH2Cl2/ Hexane). The structure of the product is also IR,1H NMR and And mass spectrometry.   (C.) [2- (5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethylna Phthalen-2-yl) -2- (4-carboxyphenyl)]-1,3-dithiane (Five):   Ester in 75% aqueous methanol solution (2 mL)FourSuspension of (85mg, 0.193mmol) 0.024 g of potassium hydroxide was added to the solution, and the mixture was dissolved at 50 ° C. Stir for 2 hours until it dissolves. Cool the solution to room temperature and acidify with 1N aqueous hydrochloric acid. , Then extracted with 80% ethyl acetate / hexane. The combined organic layers were washed with anhydrous MgSO 4.Fourso Dry, filter, and concentrate to give a white solid. Regeneration from benzene / hexane Depending on the crystal, the desired acid5Was obtained as a white powder (0.076 g, 92%): melting point 229- 231 ° C. The structure of the product is also IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectroscopy.                              Example IV   (A.) [2- (5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthalenyl)) -2- (4-carbomethoxyphenyl)]-1,3-dithiolane (6):   Keto-ester in dichloromethane (2 mL)3 (80 mg, 0.228 mmol) solution, Ethanedithioe in dichloromethane (0.5 mL) at 0 ° C under argon atmosphere (26 mg, 0.27 mmol), followed by boron trifluoride ether complex (0.04 mL, 0.3 mmol) ) Was added. The resulting mixture was stirred at 0 ° C. for 1 hour then allowed to warm to room temperature overnight. I have The reaction mixture was saturated Na2CO3Quench by pouring into an aqueous solution, and Extracted with 40% ethyl acetate / hexane. The combined organic layers were washed with anhydrous MgSO 4.FourDried in Filtered and concentrated to give a solid. Flash chromatography (30; 40% CH2Cl2/ Hexane) to give the desired dithiane6Was obtained as a white solid (0.088 g, 9 0%): melting point 105-107 ° C: Rf 0.33 (50% CH2Cl2/ Hexane). The structure of the product IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectroscopy.   (B.) [2- (5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthalenyl)) -2- (4-Carboxyphenyl)]-1,3-dithiolane (7):   Ester in 75% aqueous methanol solution (3 mL)6(85mg, 0.199mmol) suspension To the liquor, 1 grain of potassium hydroxide (0.11 g) was added, and the mixture was added to this substance at 70 ° C. Was stirred for 1 hour. Cool the solution to room temperature and acidify with 1N aqueous hydrochloric acid. And then extracted with 80% ethyl acetate / hexane. Combine the organic layers with anhydrous M gSOFourDried at rt, filtered and concentrated to give a white solid. Dichloromethane-hex By recrystallization from sun, desired acid7Was obtained as a white powder (0.064 g, 79%): mp 218-221 ° C. Product structure Structure is also IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectroscopy.                              Example V   (A.) [2- (5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthalenyl)) -2- (4-carbomethoxyphenyl)]-1,3-dioxolane (8):   Keto-ester in 1 mL of benzeneThree(80mg, 0.228) solution, ethylene glycol Cole (1 mL), 1,2-bis (trimethylsilyloxy) ethane (2 mL), and Catalytic amountp-TsOH was added. The reaction mixture is heated at reflux for 4 hours and then cooled to room temperature. I rejected it. Saturated NaHCO solution3Pour into aqueous solution and with 40% ethyl acetate / hexane Extracted. The combined organic layers were washed with anhydrous MgSO 4.FourDried, filtered, and concentrated to dryness. Got the body Flash chromatography (50% CH2Cl2/ Hexane) Ketal of Hope8The white Obtained as a colored solid (0.082g, 91%): mp 145-147 ° C; Rf 0.16 (50% CH2Cl2/ Hexane). The structure of the product is also IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectrometry .   (B.) [2- (5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthalenyl)) -2- (4-Carboxyphenyl)]-1,3-dioxolane ammonium salt (Ten):   Ester in 75% aqueous methanol solution (2 mL)8Suspension of (50mg, 0.127mmol) To the liquor, 1 grain of potassium hydroxide (0.1 g) was added and the reaction mixture was stirred at 70 ° C. Stir for 1 hour until the material dissolves. Cool the solution to room temperature and add 1N aqueous hydrochloric acid. Acidified and then extracted with 80% ethyl acetate / hexane. The combined organic layers are Water MgSOFourDried over, filtered, and concentrated to a white solid.9Got This acid9A Dissolve in dichloromethane (4 mL) under a Lgon atmosphere and add ammonia to the solution. The agas was condensed and it was stirred for 5 minutes at -33 ° C. Warm the solution to room temperature for 20 minutes Evaporate ammonia, and concentrate to ammonium saltTenWith white powder Obtained (47 mg, 93%): mp 259-261 ° C. The structure of the product is also IR,1H NMR And confirmed using mass spectrometry.                              Example VI   (A.) [2- (5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthalenyl)) -2- (4-carbomethoxyphenyl)]-1,3-oxathiolane (11):   Keto-ester in 2 mL of benzeneThreeIn a solution of (88mg, 0.251), 2-mercapto Ethanol (1 mL), and catalytic amountp-TsOH was added. Reflux reaction mixture overnight Heated, then cooled to room temperature. The solution is saturated with NaHCO3Poured into an aqueous solution, and Extracted with 40% ethyl acetate / hexane. The combined organic layers were washed with anhydrous MgSO 4.FourDried in Filtered and concentrated to give a solid. Flash chromatography (50% CH2C l2/ Hexane), the desired ketal11Was obtained as a white solid (0.09 g, 87% ): Melting point 122-124 ° C: Rf 0.24 (50% CH2Cl2/ Hexane). The product structure is also IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectroscopy.   (B.) [2- (5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthalenyl)) -2- (4-Carboxyphenyl)]-1,3-oxathiolane (12):   Ester in 75% aqueous methanol solution (3 mL)11(64 mg, 0.1 To a suspension of 56 mmol), 1 grain of potassium hydroxide (0.12 g) was added, and the reaction mixture was mixed. The material was stirred at 75 ° C for 1 hour until the material dissolved. Cool the solution to room temperature and Acidified with aqueous hydrochloric acid, and then extracted with 80% ethyl acetate / hexane. Together The organic layer was washed with anhydrous MgSO 4.FourDried at rt, filtered and concentrated to give a white solid. Recrystallization from dichloromethane-hexane gave the desired acid.12As a white powder Obtained (0.06 g, 97%): mp 216-217.5 ° C. The structure of the product is also IR,1H NMR And confirmed using mass spectrometry.   (A.) [2- (5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthalenyl)) -2- (4-carbomethoxyphenyl)]-1,3-dioxane (13):   Keto-ester in 5 mL of benzeneThree(150 mg, 0.428 mmol) To the solution, add 1,3-propanediol (1.5 mL) and a catalytic amount ofp-TsOH was added. The reaction mixture was heated at reflux overnight then cooled to room temperature. Saturated NaHCO solution3water Poured into solution and extracted with 40% ethyl acetate / hexane. The combined organic layers , Anhydrous MgSOFourDried over, filtered and concentrated to give a solid. Flash chroma Tography (50% CH2Cl2/ Hexane), the desired ketal13As a white solid Obtained (0.164 g, 94%): mp 157-159 ° C; Rf 0.24 (5% ethyl acetate / hex Sun). The structure of the product is also IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectroscopy.   (B.) [2- (5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthalenyl)) -2- (4-Carboxyphenyl)]-1,3-dioxane ammonium salt (Fifteen):   Ester in 75% aqueous methanol solution (3 mL)13Suspension of (0.1g, 0.245mmol) To the solution was added 1 particle of potassium hydroxide (0.12 g). The reaction mixture at 80 ° C It was stirred for 30 minutes until dissolved. Cool the solution to room temperature and acidify with 1N aqueous hydrochloric acid. And then extracted with 80% ethyl acetate / hexane. Combine the organic layers with anhydrous MgS OFourDried over, filtered, and concentrated to a white solid.14Got acid14In an argon atmosphere It was dissolved in dichloromethane (4 mL) under air. Ammonia gas is condensed in the flask. Shrink and the mixture was stirred for 5 minutes at -33 ° C. Allow the solution to warm to room temperature in 20 minutes Evaporate ammonia and concentrate to ammonium saltFifteenA white powder Obtained as powder (0.238 g, 97%): Melting point 228-230 ° C. The structure of the product is also IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectrometry did.                             Example VIII   (A.) Methyl 4- [1- (5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphtha (Renyl) -1-ethenyl] benzoate (16):   Methyltriphenylphosphonium bromide (0.78g, 2. (18 mmol) suspension in a room temperature argon atmosphere at room temperature under an atmosphere of hexamethyldisilazide. 0.5M Toluene solution of 4.4mM (4.4mL, 2.2mmol) was added and the yellow solution was added. Stir for 5 minutes. Ketoester in 7 mL of benzeneThree(0.51 g, 1.455 mmol) The solution was added and the orange solution was stirred for 1 hour at room temperature. Saturate the reaction mixture Japanese NaHCO3Poured into aqueous solution and extracted with 40% ethyl acetate / hexane. Match The organic layer wasFourAnd dry through a plug of silica gel, And concentrated to give a solid. Flash chromatography (30% dichloromethane / Hexane), the desired product16Was obtained as a white solid (0.405 g, 80%) : Melting point 117-118 ° C; Rf 0.2 (25% CH2Cl2/ Hexane). The product structure is also IR ,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectroscopy.   (B.) [1- (5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthalenyl)) -1- (4-carbomethoxyphenyl)] cyclopropane (17):   Ethene in 10 mL of benzene16Add a solution of (0.130 g, 0.373 mmol) to the solution at room temperature. 1M hexane solution of diethylzinc (5.6mL, 5.6mmol) was added under , And the reaction mixture was heated to 60 ° C. Diiodomethane (in 2 mL of benzene ( 0.48 mL, 6.0 mmol) was added dropwise for 5 minutes. The reaction mixture was cooled to room temperature and acid I was able to get through for three hours. The cloudy solution was diluted with 40% ethyl acetate / hexane, and Aqueous hydrochloric acid, water, and saturated NaHCO3It was washed with an aqueous solution. The organic layer was washed with anhydrous MgSO 4.Fourso Dry, filter, and concentrate to give a solid. Flash chromatography ( 30%; 40% CH2Cl2/ Hexane), the desired product17Was obtained as a white solid (0 .08g, 59%): melting point 100-102 ° C; Rf 0.36 (50% CH2Cl2/ Hexane). Product The structure is also IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectroscopy.   (C.) [1- (5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2 -Naphthalenyl) -1- (4-carboxyphenyl)] cyclopropane (18):   Ester in 75% aqueous methanol solution (2 mL)17Suspension of (60mg, 0.166mmol) To the liquor, 1 grain of potassium hydroxide (0.12g) was added and the reaction mixture was stirred at 70 ° C. Stir for 1 hour until the material dissolves. Cool the solution to room temperature and add 1N aqueous hydrochloric acid. Acidified and then extracted with 80% ethyl acetate / hexane. The combined organic layers are Water MgSOFourDried at rt, filtered and concentrated to give a white solid. Dichloromethane Recrystallization from xane gave the desired acid18Was obtained as a white powder (0.055 g, 95% ): Melting point 333-335 ° C. The structure of the product is also IR,1Using 1 H NMR and mass spectrometry confirmed.                              Example IX   (A.) Methyl 4- [1- (5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-teto Lamethyl-2-naphthalenyl) -2-methyl-1-propenyl] benzoate (19):   Isopropyltriphenylphosphonium iodide (0.35, 3 mL in benzene 0.807 mmol) in a suspension of toluene (1.8 mL, 0.89 0.5M solution of potassium hexamethyldisilazide in 1 mmol) and the red The solution was stirred for 5 minutes. Keto-ester in 3 mL of benzeneThree(0.169g, 0.48 1 mmol) and the red solution at 110 ° C. while about 4 mL of benzene has evaporated. Heated up. After 1 hour, the reaction mixture was diluted with 40% ethyl acetate / hexane. , And saturated NaHCO3Wash with aqueous solution and brine. The organic layer is anhydrous MgSOFourDried in , Filtered through a plug of silica gel, and concentrated to give a solid. flash Chromatography (40% dichloromethane / hexane) gives the desired product19 Was obtained as a white powder (0.128 g, 71%): Rf 0.44 (50% CH2Cl2/ Hexane). The structure of the product is also IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectroscopy.   (B.) 4- [1- (5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthalenyl ) -2-Methyl-1-propenyl] benzoic acid (20):   Ester in 75% aqueous methanol solution (3 mL)19(0.115g, 0.304mmol) suspension To the solution was added 1 particle of potassium hydroxide (0.12 g). The mixture dissolves this substance It was stirred at 75 ° C. for 1 hour. Cool the solution to room temperature and use 1N aqueous hydrochloric acid. hand Acidified, then extracted with 80% ethyl acetate / hexane. The combined organic layers, Anhydrous MgSOFourDried over, filtered, and concentrated to the desired acid.20Was obtained as a white powder (0.11 g, 99%): melting point 204-206 ° C. The structure of the product is also IR,11 H NMR and quality Confirmed using quantitative analysis.                              Example X   (A.) Methyl 4-[(4,4-dimethyl-3,4-dihydro-2H-1-benzopyran-6-yl) Carbonyl] benzoate (twenty two) (Maignan, J. et al., BE 1,000,195):   A suspension of aluminum chloride (1.6 g, 12 mmol) in 1 mL of 1,2-dichloroethane. And at room temperature under an argon atmosphere 9 mL of 4,4-dimethyl-3 in 1,2-dichloroethane. , 4-dihydro-2H-1-benzopyrantwenty one(1.5 g, 9.25 mmol) (Dawson, M.I. et al.,J. M ed. Chem. 27 : 1516-1531 (1984)) and 4-carbomethoxyben Zoyl chloride2(1.79 g, 9 mmol) was added. The reaction mixture was stirred overnight, It was poured onto ice water and extracted with 40% ethyl acetate / hexane. Combine the combined organic layers with saturated Na HCO3Wash with aqueous solution and brine. Anhydrous MgSO solutionFourDried, filtered, and Concentration gave a yellow solid (3.24g). Flash chromatography (80% Chloromethane / hexane) to give the desired producttwenty twoWas obtained as a white powder (1.42 g, 49%): melting point 129-131 ° C; Rf 0.26 (CH2Cl2). The structure of the product is also IR,1H  Confirmed using NMR and mass spectroscopy.   (B.) [2- (4,4-dimethyl-3,4-dihydro-2H-1-Benzopyran-6-yl) -2- (4 -Carbomethoxyphenyl)]-1,3-dithiane (twenty three):   Keto-ester in dichloromethane (3 mL)twenty twoTo a solution of (0.152g, 0.469mmol) 1,3-propanedithiol (0.061g, 0.563mmol) under argon atmosphere at 0 ℃ Was added, followed by boron trifluoride ether complex (0.07 mL, 0.57 mmol) . The resulting mixture was stirred at 0 ° C. for 1 hour and at ambient temperature overnight. The reaction mixture is Saturated Na2CO3Quench by pouring into aqueous solution, then extract with 40% ethyl acetate / hexane. I put it out. The combined organic layers were dried over anhydrous MgSO4, filtered, and concentrated to an oil. Got By flash chromatography (80% dichloromethane / hexane) The desired dithianetwenty threeWas obtained as a white solid (0.175 g, 90%): melting point 103-105 ° C. ; Rf 0.2 (50% CH2Cl2/ Heki Sun). The structure of the product is also IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectroscopy.   (C.) [2- (4,4-dimethyl-3,4-dihydro-2H-1-Benzopyran-6-yl) -2- (4 -Carboxyphenyl)]-1,3-dithiane (twenty four):   Dithiane in 75% aqueous methanol solution (4 mL)twenty three(0.145g, 0.349mmol) One particle of sodium hydroxide (0.106 g) was added to the suspension. The reaction mixture is The mixture was stirred at 70 ° C for 1 hour until the quality dissolved. Cool the solution to room temperature and add 1N hydrochloric acid. Acidified with aqueous solution, then extracted with 80% ethyl acetate / hexane. Together The organic layer was washed with anhydrous MgSO 4.FourDried at rt, filtered and concentrated to give a white solid. The desired acid was obtained by recrystallization from dichloromethane-hexane.twenty fourWith white powder Obtained (0.127 g, 90%): mp 204-205 ° C. The structure of the product is also IR,1H NM Confirmed using R and mass spectroscopy.                              Example XI   (A.) Methyl 4-[(4,4-dimethyl-3,4-dihydro-2H-1-benzothiopyran-6-a Le) carbonyl] benzoate (26):   Suspension of aluminum chloride (1.65 g, 9.25 mmol) in 1 mL of 1,2-dichloroethane The solution was stirred at room temperature under an argon atmosphere with 9 mL of 4,4-dimethyl in 1,2-dichloroethane. -3,4-dihydro-2H-1-benzothiopyrantwenty five(1.65g, 9.25mmol) (Waugh, K.M. et al. ,J. Med. Chem. 28: 116-124 (1985)) and 4-carbomethoxybenzoylk Loride2A solution of (1.8g, 9.06mmol) was added. The reaction mixture was stirred overnight , Poured onto ice water, and extracted with 40% ethyl acetate / hexane. Combined organic layers Saturated NaHCO3Wash with aqueous solution and brine. Anhydrous MgSO solutionFourDried with , And concentrated to give a green solid (2.1 g). Flash chromatography (80% dichloromethane / hexane) gives the desired product26As a white powder (1.23g, 40%): Melting point 118-120 ° C; Rf 0.35 (CH2Cl2). The structure of the product is also IR,11 H NMR and Confirmed using mass spectrometry.   (B.) [2- (4,4-dimethyl-3,4-dihydro-2H-1-benzothiopyran-6-yl) -2 -(4-Carbomethoxyphenyl)]-1,3-dithiane (27):   Ketoester in dichloromethane (3 mL)26To a solution of (0.12g, 0.353mmol) 1,3-propanedithiol (0.06mL, 0.53mmol) under argon atmosphere at 0 ℃ Addition followed by boron trifluoride ether complex (0.07 mL, 0.57 mmol). The resulting mixture was stirred at 0 ° C. for 1 hour and warmed to room temperature overnight. The reaction mixture , Saturated Na2CO3Quench by pouring into aqueous solution and with 40% ethyl acetate / hexane Extracted. The combined organic layers were dried over anhydrous MgSOFourDried, filtered, and concentrated to dryness. Got the le. Flash chromatography (80% CH2Cl2/ Hexane) Hope Jitian27Was obtained as a white solid (0.145 g, 96%): mp 164-166 ° C .; Rf  0.27 (50% CH2Cl2/ Hexane). The structure of the product is also IR,11 H NMR and mass fraction Confirmed using analysis.   (C.) [2- (4,4-dimethyl-3,4-dihydro-2H-1-benzothiopyran-6-yl) -2 -(4-Carboxyphenyl)]-1,3-dithiane (28):   Dithiane in 75% aqueous methanol solution (4 mL)27(0.1g, 0. To a suspension of 232 mmol), 1 particle of potassium hydroxide (0.12 g) was added. Reaction mixture Was stirred at 75 ° C. for 1 hour until the material dissolved. Cool the solution to room temperature, Acidify with 1N aqueous hydrochloric acid, then extract with 80% ethyl acetate / hexane. did. The combined organic layers were washed with anhydrous MgSO 4.FourDried, filtered, and concentrated to a white solid. Got the body Recrystallization from dichloromethane / hexane gave the desired acid28The white powder Obtained as powder (0.089 g, 92%): melting point 211-212.5 ° C. The product structure is also IR ,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectroscopy.                             Example XII   (A.) Methyl [4- (5,6,7,8-tetrahydro-3,5,5,8,8-pentamethyl-2-naphtha (Renyl) carbonyl] benzoate (30):   Suspension of aluminum chloride (1.10 g, 8.25 mmol) in 30 mL of 1,2-dichloroethane 15 mL of the liquid at room temperature under an argon atmosphere. 1,2,3,4-Tetrahydro-1,1,4,4,6-pentamethylnaphtha in 1,2-dichloroethane Len29(1.52 g, 7.5 mmol) (Kagechika, H. et al.,J. Med. Chem. 31: 2182 (1988 )) And 4-carbomethoxybenzoyl chloride2(1.57 g, 7.87 mmol) dissolved The liquid was added. The reaction mixture was stirred overnight, poured onto ice water and 40% ethyl acetate. / Extracted with hexane. The combined organic layers are saturated with NaHCO 3.3Wash with aqueous solution and brine It was Anhydrous MgSO solutionFourDried over, filtered, and concentrated to a brown solid (2.56 g). Got By flash chromatography (60% dichloromethane / hexane) The desired product30Was obtained as a white crystalline solid (1.733 g, 64%): mp 146 ~ 149 ℃; Rf 0.11 (50% CH2Cl2/ Hexane). The structure of the product is also IR,1H NMR And confirmed using mass spectrometry.   (B.) [4- (5,6,7,8-tetrahydro-3,5,5,8,8-pentamethyl-2-naphthalenyl ) Carbonyl] benzoic acid (31):   Ester in 75% aqueous methanol solution (2 mL)30(0.120g, 0.329mmol) Potassium hydroxide (0.055 g) was added to the suspension. The reaction mixture is Stir for 1 hour at 60 ° C. until it dissolves. Cool the solution to room temperature and add 1N aqueous hydrochloric acid. Acidified with and then extracted with 80% ethyl acetate / hexane. Combined Machine layer is anhydrous MgSOFourDried at rt, filtered and concentrated to give a white solid (0.109 g ). By recrystallization from benzene / hexane,31Was obtained as a white crystalline solid (0.102g, 89%): melting point 209-212 ° C. The structure of the product is also IR,1For 1 H NMR and mass spectrometry I confirmed.                             Example XIII   (A.) Methyl 4- [1- (5,6,7,8-tetrahydro-3,5,5,8,8-pentamethyl-2-naphth Tarenyl) -1-ethenyl] benzoate (32):   Methyltriphenylphosphonium bromide (0.196 g, 0 in 1 mL of benzene) 0.55 mmol) in toluene at room temperature under argon atmosphere with toluene (1.2 mL, 0.6 mmo l) Add a 0.5M solution of potassium hexamethyldisilazide in The solution was stirred for 5 minutes. Keto-ester in 1.5 mL of benzene30(0.1g, 0.274mm ol) was added and the orange solution was stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture , 40% ethyl acetate / hexanes and filtered through a plug of silica gel. Filter The liquid was concentrated to give a solid. Flash chromatography (30%; 40% dichloromethane / hexane) gives the desired product32The white crystals Obtained as a crystalline solid (0.077 g, 78%): mp 167-168 ° C; Rf 0.4 (50% dichloro Methane / hexane). The structure of the product is also IR,1Using 1 H NMR and mass spectrometry confirmed.   (B.) [4- [1- (5,6,7,8-tetrahydro-3,5,5,8,8-pentamethyl-2-naphthale Nyl) -1-ethenyl] benzoic acid (33):   Ester in 75% aqueous methanol solution (2 mL)32(0.058g, 0.16mmol) suspension To the solution was added 1 particle (0.1 g) of potassium hydroxide. The mixture dissolves this substance The mixture was stirred for 1 hour at 70 ° C. Cool the solution to room temperature and use a 1N aqueous hydrochloric acid solution. Acidified, then extracted with 80% ethyl acetate / hexane. Combined organic layers Is anhydrous MgSOFourDried at rt, filtered and concentrated to give a white solid. Dichlorometh The desired acid was obtained by recrystallization from tan / hexane.33Was obtained as a white crystalline solid (42 mg, 91%): melting point 230-231 ° C. The structure of the product is also IR,11 H NMR and mass Confirmed using analysis.                             Example XIV   (A.) 5-carbethoxythiophene-2-carboxylic acid (35):   To a solution of diisopropylamine (3.6 mL, 25.75 mmol) in 10 mL THF at -78 ° C. In hexane (16.1 mL, 25.75 mmol) under argon atmospheren-Butyl lithium Of 1.6 M solution was added. The mixture was stirred for 15 minutes and 2-thiof in 5 mL THF. Carboxylic acid34(1.5 g, 11.705 mmol) (2-thiophenecarboxylic acid34Is Aldri ch), which is more readily available from ch.). Stir the mixture for 15 minutes , And ethyl chloroformate (2.7 mL, 28.33 mmol) was added. Mix-7 Stir at 8 ° C. for 30 minutes and then raise to 0 ° C. in the next 30 minutes. Saturate the reaction mixture with N aHCO3Poured into aqueous solution and washed with 80% ethyl acetate / hexane. Vinegar water layer Acidify with acid, 80% ethyl acetate / It was extracted with hexane. The combined organic layers were dried over anhydrous MgSOFourDried, filtered, and concentrated. Fried to give a yellow solid. By flash chromatography, the desired acid35( 1.76 g, 75%) was obtained as a white solid: melting point above 300 ° C. The structure of the product Also IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectroscopy.   (B.) 5-carbethoxythiophene-2-carbonyl chloride (36):   Acid in dichloromethane (20 mL)35(0.64 g, 3.2 mmol) in a suspension at room temperature. (COCl) in dichloromethane (2.4 mL, 4.8 mmol) under a Lgon atmosphere22.0M The solution and 2 drops of DMF were added and stirred for 1 hour. Excess (COCl)2And dichloro The methane was removed under reduced pressure and the viscous light yellow product was dried overnight and Desired benzoyl chloride36Was obtained as a yellow solid. The product structure is also IR ,and1Confirmed using 1 H NMR spectroscopy.   (C.) Ethyl 5-[(5,6,7,8-Tetrahydro-3,5,5,8,8-pentamethyl-2-naphtha (Renyl) carbonyl] thiophene-2-carboxylate (37):   Suspension of aluminum chloride (0.5 g, 3.75 mmol) in 1 mL of 1,2-dichloroethane The solution was placed at room temperature under an argon atmosphere in 3.5 mL of 1,2-dichloroethane of 1,2,3,4-tetrahydrofuran. Trahydro-1,1,4,4,6-pentamethylnaphthalene29(0.712 g, 3.52 mmol) and36 A solution of (0.7 g, 3.2 mmol) was added dropwise. The reaction mixture was stirred overnight, then ice water Pour over and extract with 40% ethyl acetate / hexane. Satisfy the combined organic layers Japanese NaHCO3Wash with aqueous solution and brine. The solution is anhydrous MgSOFourDried with, filtered, And it concentrated and the yellow solid (1.5g) was obtained. Flash chromatography (50 % Dichloromethane / hexane) gave a light yellow solid. Dichlorometa By recrystallization from hexane / hexane,37Was obtained as a white crystalline solid (0.62 g,  50%): melting point 111-112 ° C: Rf 0.2 (50% CH2Cl2/ Hexane). The structure of the product Also IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectroscopy.   (D.) 5-[(5,6,7,8-Tetrahydro-3,5,5,8,8-pentamethyl-2-naphthalenyl ) Carbonyl] thiophene-2-carboxylic acid (38):   Suspension of ester 37 (50 mg, 0.13 mmol) in 75% aqueous methanol solution (3 mL) To this, 1 grain of potassium hydroxide (0.1 g) was added. This material dissolves in the reaction mixture The mixture was stirred at 70 ° C. for 1.5 hours. Cool the solution to room temperature and add 1N aqueous hydrochloric acid. Acidified using and then extracted with 80% ethyl acetate / hexane. Combined organic Layer with anhydrous MgSOFourDried over, filtered, and concentrated to a white solid (46 mg). The desired acid was obtained by recrystallization from methanol.38Was obtained as a white crystalline solid (42 g, 91%): melting point 214-215 ° C. The structure of the product is also IR,11 H NMR and mass spectrometry It confirmed using.                              Example XV   (A.) 2-Acetyl-3,5,5,8,8-pentamethyl-5,6,7,8-tetrahydronaphthalene (39):   Suspension of aluminum chloride (0.96 g, 7.17 mmol) in 1 mL of 1,2-dichloroethane The liquid was allowed to stand at room temperature under an argon atmosphere in 1,2,3,4-tetrahydrofuran in 9 mL of 1,2-dichloroethane. Trahydro-1,1,4,4,6-pentamethylnaphthalene29(1.2 g, 5.93 mmol) and A solution of cetyl chloride (0.51 g, 6.52 mmol) was added. Reaction mixture for 1 hour Stir, then pour onto ice water and 40 Extracted with% ethyl acetate / hexane. The combined organic layers were washed with saturated NaHCO3Aqueous solution and And washed with brine. The solution is anhydrous MgSOFourDried over and through a silica gel plug Filter and concentrate to a white solid39Was obtained (1.45 g, 99%): melting point 54-57 ° C; Rf  0.62 (10% ethyl acetate / hexane). The structure of the product is also IR,11 H NMR and Confirmed using mass spectrometry.   (B.) Ethyl (E) -4-Hydroxy-3-methyl-6-oxo-6- (3,5,5,8,8-penta Methyl-5,6,7,8-tetrahydro-2-naphthalenyl) -2-hexenoate (41):   To a solution of diisopropylamine (0.5 mL, 3.52 mmol) in 7 mL THF at -78 ° C. In hexane (2.2 mL, 3.52 mmol) under argon atmospheren-Butyllithium 1 The .6M solution was added. The mixture was stirred for 25 minutes and the ketone in 4 mL THF was added.39(0. A solution of 78 g, 3.2 mmol) was added slowly. The mixture is stirred for 20 minutes and 3 mL Ethyl in THF (E) -3-Formyl-2-butenoate40(0.45g, 3.2mmol) (D Chill (E) -3-Formyl-2-butenoate40Is more readily available than Fluka) The solution was added slowly. The mixture was stirred at -78 ° C for 35 minutes, saturated NHFourPour into Cl aqueous solution And extracted with 40% ethyl acetate / hexane. The combined organic layers were dried over anhydrous MgSOFour Dried at rt, filtered and concentrated to give a light yellow solid. Flash chroma The desired alcohol by topography41Was obtained as a white crystalline solid (0.98 g, 80%): melting point 126-128 ° C; Rf 0.13 (10% ethyl acetate / Hexane). The structure of the product is also IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectrometry .   (C.) Ethyl (2E,FourE) -6-Oxo-6- (3,5,5,8,8-pentamethyl-5,6,7,8-teto Lahydro-2-naphthalenyl) -2,4-hexadienoate (42):   In 8 mL of THF41To a solution of (0.33g, 0.85mmol) at 0 ° C, triethylamine (0.5 mL, 4 mmol) and methylsulfonyl chloride (0.106 g, 0 in 2 mL of THF. A solution of .93 mmol) was added slowly. The mixture was stirred at 0 ° C for 1 hour and 30 minutes The temperature was raised to room temperature. The mixture is silica gel with 10% ethyl acetate / hexane. Filtered through a plug. Concentrate the filtrate,42As a light yellow solid . Recrystallization from dichloromethane / hexane gave the desired acid42As a yellow powder Obtained (0.3 g, 95%): melting point 101-102 ° C; Rf 0.42 (10% ethyl acetate / hexane ). The structure of the product is also IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectroscopy.   (D.) [2- (5,6,7,8-Tetrahydro-3,5,5,8,8-pentamethyl-2-naphthalenyl ) -2- (4-Carboethoxy-2E,FourE-3-Methoxybutadienyl)]-1,3-dioxola (43):   Keto-ester in 2 mL of benzene42Add a solution of (0.12g, 0.33mmol) Glycol (0.8 mL), 1,2-bis (trimethylsilyloxy) ethane (2 mL) And of catalytic amountp-Added TsOH It was The reaction mixture was heated at reflux for 2 days then cooled to room temperature. Saturated solution NaHCO3It was poured into an aqueous solution and extracted with 40% ethyl acetate / hexane. Combined organic layers Is anhydrous MgSOFourDried over, filtered and concentrated to give a solid. Flash black Desired ketal by matography (5% ethyl acetate / hexane)43The colorless Obtained as an oil (0.109g, 80%): Rf 0.43 (10% ethyl acetate / hexane) . The structure of the product is also IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectroscopy.   (E.) [2- (5,6,7,8-Tetrahydro-3,5,5,8,8-pentamethyl-2-naphthalenyl ) -2- (4-carboxy-2E,FourE-3-Methylbutadienyl)]-1,3-dioxolane (44 ):   Ester in 75% aqueous methanol solution (2 mL)43To a solution of (30mg, 0.073mmol) , 1 particle of potassium hydroxide (0.1 g) was added. The reaction mixture is The mixture was stirred at 60 ° C for 0.5 hour. Cool the solution to room temperature and use a 1N aqueous hydrochloric acid solution. Acidified, then extracted with 80% ethyl acetate / hexane. Combined organic layers Is anhydrous MgSOFourDried at rt, filtered and concentrated to give a white solid. Dichlorometh The desired acid was obtained by recrystallization from tan / hexane.44Was obtained as a white crystalline solid (27 mg, 96%): mp 189-190 ° C. The structure of the product is also IR,11 H NMR and mass fraction Confirmed using analysis.                             Example XVI   (E)and(Z) -4- [1- (5,6,7,8-Tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2- Naphthalenyl) propen-1-yl] benzoic acid (46and47):   Ethyltriphenylphosphonium bromide (160 mg, 0.43 mmol) in 1 mL of THF ) Suspension in toluene (0.95 mL, 0.47 mmol) at 0 ° C. under an argon atmosphere. Solution of potassium hexamethyldisilazide in 0.5 M was added, and the reaction mixture was added to Stir for 5 minutes. Keto-ester in 0.8 mL THF3Solution of (100 mg, 0.28 mmol) Addition and the orange solution was stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture is treated with 20% ethyl acetate. Dilute with silica / hexane and add silica gel using 20% ethyl acetate / hexane. Filtered through a column. The solution was concentrated to give a yellow gum. Chromatography -(38% dichloromethane / hexane)45A mixture of light yellow gum Obtained (51mg, 50%): Rf 0.43, 0.47 (40% CH2Cl2/ Hexane). Preparative HPLC (Waters Radialpak Novapak silica, 8mm × 10cm, 2% ether / hair Xant, 1.0 mL / min, 260 nm), colorless gum45a(20 mg, tr= 9.8 minutes) And white solid45b(25 mg, tr= 10.8 minutes).   Ester in 0.5 mL ethanol45a(20 mg) suspension, potassium hydroxide (0. 2 g) of 40% aqueous solution was added and the reaction mixture was adjusted to 2 until the material dissolved. The mixture was stirred at 70 ° C. for an hour under an argon atmosphere. The solution is then placed under an argon atmosphere Concentrated in. Cool the residue to room temperature and acidify to pH 2-3 with 1N aqueous sulfuric acid. And then filtered. The precipitate was repeatedly washed with water (6 times x 1 mL), and Drying gave a white powder (20 mg). By recrystallization from ethyl acetate / hexane, acid46Was obtained as a white powder (16 mg, overall yield 16%): melting point 212 ° C. The structure of the product Also IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectroscopy.46Position chemistry (regiochemi stry)1Confirmed by H n Oe NMR spectroscopy.   ester45bWas hydrolyzed as above to give 25 mg of a pale yellow solid. Acetic acid Recrystallization from chill / hexane gives acid47Was obtained as a pale yellow powder (21 mg, total Yield 20%): melting point 229 ° C. The structure of the product is also IR,1For 1 H NMR and mass spectrometry I confirmed.47Position chemistry1Confirmed by H n Oe NMR spectroscopy.                             Example XVII   (A.) 4- [1- (5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthalenyl ) -1-Ethenyl] benzoic acid (48):   Ester in 75% aqueous methanol solution (2 mL)16(94 mg, 0.27 mmol) suspension To this, potassium hydroxide (0.045 g) was added, and the reaction mixture was dissolved in this material. Stir for 14 hours at 50 ° C. until it dissolves. Cool the solution to room temperature and add 2N aqueous hydrochloric acid. Acidified with and then extracted with ether. Combine the combined organic layers with water and Washed with brine. The organic layer was then dried over anhydrous MgSOFourDried, filtered, and concentrated. To give a white solid. The desired acid was obtained by recrystallization from benzene-hexane.48The white (0.074 g, 82%) as a crystalline solid of mp: 201-204 ° C. The structure of the product Also IR,1Confirmed using 1 H NMR and mass spectroscopy.   (B.) 4- [1- (5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl -2-Naphthalenyl) -1-ethyl] benzoic acid (49):   Olefin48(0.0105 g, 0.0314 mmol) at room temperature and atmospheric pressure And hydrogenated with 5% palladium on palladium. After incorporating 1 equivalent (0.7 mL) of hydrogen The catalyst was removed by filtration through a small Celite pad. Solvent Removal under vacuum gave the crude acid as a white solid (0.019g). Benzene-hex The desired acid was obtained by recrystallization from sun.49Was obtained as a white crystalline solid (0.0078 g) , 74%): mp 186-188 ° C. The structure of the product is also IR,1H NMR and mass spectrometry Confirmed using.   The examples described above are intended to be illustrative, not limiting, of the invention. Is intended. Known to those skilled in the art while they are typical of those that can be used Other procedures in can be used instead.   Throughout this application various publications are referenced by number. Thereby those The full publication is cited. The disclosures in these publications are, in their entirety, Incorporated by reference into the present application to more fully describe the state of the art to which it belongs. Be done.                                 Reference                                  Sequence listing (1) General information:     (A) Addressee: The Government of the United States of                As Represented By The Secretary, USA     (B) Address: Suite 325, Executive Boulevard 6011     (C) City: Rockville     (D) State: Maryland     (E) Country: United States     (F) Zip code: 20852     (G) Telephone: (301)496-7056     (H) Telefax: (301)402-0220     (I) Telex: None   (ii) Title of invention: RXR homodimer formation (iii) Number of sequences: 11   (vi) Computer read mode:       (A) Medium type: Floppy disk       (B) Computer: For IBM PC compatibility       (C) Operating system: PC-DOS / MS-DOS       (D) Software: Patent-in Release # 1.0, Version # 1.25   (vi) Current application data:       (A) Application number: None yet       (B) Application date:   (Vii) Prior application data:       (A) Application number: US / 07/901/719       (B) Application date: June 16, 1992 (2) Information of SEQ ID NO: 1:   (i) Features of the array:       (A) Length: 8 amino acids       (B) type: amino acid       (C) Number of chains: single chain       (D) Topology: linear   (ii) Sequence type: peptide   (xi) Sequence: SEQ ID NO: 1: (2) Information of SEQ ID NO: 2:   (i) Features of the array:     (A) Length: 31 base pairs     (B) type: nucleic acid     (C) Number of chains: single chain     (D) Topology: linear   (ii) Sequence type: DNA (genome)   (xi) Sequence: SEQ ID NO: 2: (2) Information of SEQ ID NO: 3:   (i) Features of the array:     (A) Length: 37 base pairs     (B) type: nucleic acid     (C) Number of chains: single chain     (D) Topology: linear   (ii) Sequence type: DNA (genome)   (xi) Sequence: SEQ ID NO: 3: (2) Information of SEQ ID NO: 4:   (i) Features of the array:     (A) Length: 34 base pairs     (B) type: nucleic acid     (C) Number of chains: single chain     (D) Topology: linear   (ii) Sequence type: DNA (genome)   (xi) Sequence: SEQ ID NO: 4: (2) Information of SEQ ID NO: 5:   (i) Features of the array:     (A) Length: 24 base pairs     (B) type: nucleic acid     (C) Number of chains: single chain     (D) Topology: linear   (ii) Sequence type: DNA (genome)   (xi) Sequence: SEQ ID NO: 5: (2) Information of SEQ ID NO: 6:   (i) Features of the array:     (A) Length: 30 base pairs     (B) type: nucleic acid     (C) Number of chains: single chain     (D) Topology: linear   (ii) Sequence type: DNA (genome)   (xi) Sequence: SEQ ID NO: 6: (2) Information of SEQ ID NO: 7:   (i) Features of the array:     (A) Length: 38 base pairs     (B) type: nucleic acid     (C) Number of chains: single chain     (D) Topology: linear   (ii) Sequence type: DNA (genome)   (xi) Sequence features: SEQ ID NO: 7: (2) Information of SEQ ID NO: 8:   (i) Features of the array:     (A) Length: 27 base pairs     (B) type: nucleic acid     (C) Number of chains: single chain     (D) Topology: linear   (ii) Sequence type: DNA (genome)   (xi) Sequence: SEQ ID NO: 8: (2) Information of SEQ ID NO: 9:   (i) Features of the array:     (A) Length: 27 base pairs     (B) type: nucleic acid     (C) Number of chains: single chain     (D) Topology: linear   (ii) Sequence type: DNA (genome)   (xi) Sequence: SEQ ID NO: 9: (2) Information of SEQ ID NO: 10:   (i) Features of the array:     (A) Length: 27 base pairs     (B) type: nucleic acid     (C) Number of chains: single chain     (D) Topology: linear   (ii) Sequence type: DNA (genome)   (xi) Sequence: SEQ ID NO: 10: (2) Information of SEQ ID NO: 11:   (i) Features of the array:     (A) Length: 24 base pairs     (B) type: nucleic acid     (C) Number of chains: single chain     (D) Topology: linear   (ii) Sequence type: DNA (genome)   (xi) Sequence: SEQ ID NO: 11:

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 31/335 ＡＤＶ 9454−4Ｃ ＡＤＹ 9454−4Ｃ ＡＥＧ 9454−4Ｃ 31/38 ＡＤＵ 9454−4Ｃ 31/385 ＡＢＪ 9454−4Ｃ 31/39 ＡＤＳ 9454−4Ｃ Ｃ０７Ｃ 63/66 9450−4Ｈ 65/36 9450−4Ｈ 69/76 Ａ 9546−4Ｈ 233/64 9547−4Ｈ Ｃ０７Ｄ 311/58 9360−4Ｃ 317/30 9454−4Ｃ 319/06 9454−4Ｃ 327/04 9455−4Ｃ 333/22 9455−4Ｃ 339/06 9455−4Ｃ 339/08 9455−4Ｃ 409/04 ３１１ 7602−4Ｃ ３３５ 7602−4Ｃ Ｃ０７Ｋ 14/705 8318−4Ｈ Ｇ０１Ｎ 33/50 Ｐ 8310−2Ｊ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ， ＣＡ，ＣＨ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，Ｈ Ｕ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＵ，ＭＧ，ＭＮ ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ， ＳＤ，ＳＥ，ＳＫ，ＵＡ，ＶＮ (72)発明者 フォール，マグナス アメリカ合衆国 カリフォルニア 92075, ソラナ ビーチ，ノース ライオス アベ ニュー 605 (72)発明者 ジャン，シャオ−クン アメリカ合衆国 カリフォルニア 92037, ラ ホヤ，リージェンツ ロード 9176エ フ (72)発明者 レーマン，ユールゲン エム. アメリカ合衆国 ノース キャロライナ 27514，チャペル ヒール，ホワイト プ レインズ ロード 1911 (72)発明者 ダウソン，マルシア アイ. アメリカ合衆国 カリフォルニア 94026, メンロ パーク，ピー． オー． ボック ス 1033 (72)発明者 カメロン，ジェイムズ エフ. アメリカ合衆国 カリフォルニア 94038, モス ビーチ，ピー． オー． ボックス 69，リンダ ビスタ 881 (72)発明者 ホッブス，ピーター ディー. アメリカ合衆国 カリフォルニア 94306, パロ アルト，ウィリアムズ ストリート 2176 (72)発明者 ジョン，リン アメリカ合衆国 カリフォルニア 94087, サニーベイル，エイピーティー． ナンバ ー22，サニーベイル―サラトーガ ロード 1166 【要約の続き】 る。 ─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of front page (51) Int.Cl. 6 Identification code Office reference number FI A61K 31/335 ADV 9454-4C ADY 9454-4C AEG 9454-4C 31/38 ADU 9454-4C 31/385 ABJ 9454 -4C 31/39 ADS 9454-4C C07C 63/66 9450-4H 65/36 9450-4H 69/76 A 9546-4H 233/64 9547-4H C07D 311/58 9360-4C 317/30 9454-4C 319 / 06 9454-4C 327/04 9455-4C 333/22 9455-4C 339/06 9455-4C 339/08 9455-4C 409/04 311 7602-4C 335 7602-4C C07K 14/705 8318-4H G01N 33/50 P 8310-2J (81) Designated countries EP (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE), OA (BF, BJ , CF, CG, CI, CM, A, GN, ML, MR, NE, SN, TD, TG), AT, AU, BB, BG, BR, BY, CA, CH, CZ, DE, DK, ES, FI, GB, HU, JP, KP, KR, KZ, LK, LU, MG, MN, MW, NL, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SK, UA, VN (72) Inventor Fall, Magnus United States California 92075 , Solana Beach, North Rios Avenue 605 (72) Inventor Jean, Xiao-kun United States California 92037, La Jolla, Regents Road 9176 EF (72) Inventor Lehmann, Jürgen M. United States North Carolina 27514, Chapel Heel, White Plains Road 1911 (72) Inventor Dowson, Marcia Ai. United States California 94026, Menlo Over click, copy. Oh. Boxes 1033 (72) Inventor Cameron, James F. United States California 94038, Moss Beach, Pea. Oh. Box 69, Linda Vista 881 (72) Inventor Hobbs, Peter Dee. United States California 94306, Palo Alto, Williams Street 2176 (72) Inventor John, Lin United States California 94087, Sunnyvale, APT. Number 22, Sunnyvale-Saratoga Road 1166 [Continued Summary].

Claims (1)

【特許請求の範囲】 １．レチノイドＸレセプターホモダイマーの形成に影響を及ぼす能力について 物質をスクリーニングする方法であって、該物質およびレチノイドＸレセプター を含む溶液を合わせる工程、およびホモダイマー形成の存在を測定する工程を包 含する、方法。 ２．前記ホモダイマー形成の存在が、前記レチノイドＸレセプターホモダイマ ーによる転写の活性化を検出することにより測定される、請求項１に記載の方法 。 ３．前記ホモダイマー形成の存在が、共沈澱により測定される、請求項１に記 載の方法。 ４．前記影響がホモダイマー形成の誘導である、請求項１に記載の方法。 ５．前記影響がホモダイマー形成の阻害である、請求項１に記載の方法。 ６．前記レチノイドＸレセプターがレチノイドＸレセプターαである、請求項 １に記載の方法。 ７．前記物質がレチノイドＸレセプターヘテロダイマーを誘導するかどうかを 測定する工程、およびレチノイドＸレセプターホモダイマーの形成を選択的に誘 導する該物質を選択する工程をさらに包含する、請求項４に記載の方法。 ８．以下の工程を包含する、レチノイドＸレセプターホモダイマーよりもレチ ノイドＸレセプターヘテロダイマーの形成を選択的に誘導する能力について物質 をスクリーニングする方法： ａ）該物質がレチノイドＸレセプターホモダイマー形成を誘導するかどうかを 測定する工程； ｂ）該物質がレチノイドＸレセプターヘテロダイマー形成を誘導するかどうか を測定する工程：および ｃ）レチノイドＸレセプターホモダイマーよりもレチノイドＸレセプターヘテ ロダイマーの形成を選択的に誘導する化合物を選択する工程。 ９．レチノイドＸレセプターホモダイマーのDNAを結合する能力への影響につ いて物質をスクリーニングする方法であって、該物質を該ホモダイマーと合わせ る工程、およびDNAを結合するホモダイマーの能力への化合物の影響を測定する 工程を包含する、方法。 １０．レチノイドＸレセプターホモダイマーと結合するた めの応答エレメントをスクリーニングする方法であって、該応答エレメントを該 レチノイドＸレセプターホモダイマーと合わせる工程、および結合の存在を検出 する工程を包含する、方法。 １１．前記結合の存在が、前記応答エレメントに作動可能に連結されるマーカ ーの転写活性化により検出される、請求項１０に記載の方法。 １２．精製レチノイドＸレセプターホモダイマー。 １３．以下の構造式を有する二環式芳香族化合物： ここで、 R1は、低級アルキルおよびアダマンチルからなる群より選択され； R2は、-O-R6または-S-R6であり、ここでR6は低級アルキルであり；または、R1 がR2に対してオルトであるとき、R1およびR2が互いに連結して５または６員のシ クロアルキレン環を形成し得、非置換であるかまたは１〜４個の低級アルキル基 で置換され、そして任意にO、S、およびNRからなる群より選択される１または２ 個のヘテロ環式原子を含み、ここでRは水素または低級アルキルであり； R3は、カルボニル、 からなる群より選択され、ここでX1およびX2は、独立して、O、S、およびメチレ ンからなる群より選択され、ここでX1およびX2の少なくとも１つはOまたはSであ り、またはX1およびX2の１つがNRでありそして他方がメチレンであり、mは２ま たは３であり、R6、R7、R8、およびR9は、独立して、水素または低級アルキルで あり、ただし、nが0、R6およびR7であるときは両方とも水素ではなくそしてR8お よびR9は両方とも水素ではなく、またはR8およびR9は互いに連結して３〜６個の 炭素原子を含むシクロアルキレン環を形成し得、そして*は分子の残りの部分へ のR3置換基の付加位置を示し；そして R4は、 からなる群より選択され、ここでR10は水素またはメチルであり、１は０または １であり、そして**は分子の残りの部分へのR4置換基の付加位置を示し、 R5は、独立して、低級アルキルおよび低級アルコキシからなる群より選択され ；そして nは０、１、２、または３であり、 ただし、nが０であるとき、R3はカルボニル、*C=CH2、またはCH2以外であり、 および該化合物の薬学的に受容可能なエステル、アミド、および塩。 からなる群より選択される構造を有する、請求項１３に記載 の化合物であって、ここでR11がO、S、（CH3）2C、およびCH2からなる群より選 択され、そしてR12が水素またはメチルである、化合物。 １５．前記構造式（II）を有する、請求項１４に記載の化合物。 １６．nが０である、請求項１５に記載の化合物。 であり、そしてlが１である、請求項１６に記載の化合物。 である、請求項１７に記載の化合物。 である、請求項１７に記載の化合物。 を有する、請求項１５に記載の化合物。 を有する、請求項１７に記載の化合物。 を有する、請求項１５に記載の化合物。 を有する、請求項１７に記載の化合物。 からなる群より選択される、請求項２３に記載の化合物。 を有する、請求項１５に記載の化合物。 を有する、請求項１７に記載の化合物。 からなる群より選択される、請求項２６に記載の化合物。 を有する、請求項１５に記載の化合物。 を有する、請求項１５に記載の化合物。 を有する、請求項１５に記載の化合物。 を有する、請求項１５に記載の化合物。 を有する、請求項１５に記載の化合物。 を有する、請求項１５に記載の化合物であって、ここで、X1およびX2が、独立し て、0およびSからなる群より選択される化合物、および該化合物のアンモニウム 塩。 を有する、請求項１５に記載の化合物であって、ここで、X1およびX2が、独立し て、0およびSからなる群より選択される化合物、および該化合物のアンモニウム 塩。 を有する、請求項１５に記載の化合物。 を有する、請求項１５に記載の化合物。 を有し、R1が0またはSである、請求項１５に記載の化合物。 を有する、請求項１５に記載の化合物、および該化合物のアンモニウム塩。 を有する、請求項１５に記載の化合物。 を有する、請求項１５に記載の化合物。 を有する、請求項１５に記載の化合物。 を有する、請求項１５に記載の化合物。 ４３．レチノイドＸレセプターヘテロダイマーの活性を阻害する方法であって 、レチノイドＸレセプターホモダイマーの形成を誘導する工程を包含し、それに より該レチノイドＸレセプターのヘテロダイマー形成を抑制し、そして生じるヘ テロダイマー活性を抑制する、方法。 ４４．前記活性が転写の活性化または抑制化である、請求項４３に記載の方法 。 ４５．前記レチノイドＸレセプターヘテロダイマーが甲状腺ホルモンレセプタ ーおよびレチノイドＸレセプターである、請求項４３に記載の方法。 ４６．細胞中でレチノイドＸレセプターホモダイマーにより活性化される遺伝 子の転写を促進する方法であって、該細胞を、レチノイドＸレセプターホモダイ マーの形成を促進し得る量の合成化合物と接触させる工程を包含する、方法。 ４７．前記化合物が構造式 を有する、請求項４６に記載の方法。 ４８．前記化合物が構造式 を有する、請求項４６に記載の方法。 ４９．レチノイドＸレセプターホモダイマーの形成を抑制する工程を包含する 、該レチノイドＸレセプターホモダイマーの活性を阻害する方法。 ５０．前記活性が転写の活性化または抑制化である、請求項４９に記載の方法 。 ５１．レチノイドＸレセプターホモダイマーのその応答エレメントへの結合を 抑制する工程を包含する、該レチノイドＸレセプターホモダイマーの活性を阻害 する方法。 ５２．前記活性が転写の活性化または抑制化である、請求項５１に記載の方法 。 ５３．レチノイドＸレセプターホモダイマー形成に関連する病状の増加の確率 を測定する方法であって、被験体において、正常被験体と比較したときのレチノ イドＸレセプターホモダイマー形成の減少を検出する工程を包含する、方法。 ５４．被験体においてレチノイドＸレセプターホモダイマーに関連する病状を 治療する方法であって、該被験体においてレチノイドＸレセプターホモダイマー 形成を誘導する工程を包含し、それによりレチノイドＸレセプターホモダイマー により活性化され得る遺伝子の発現を増加する、方法。 ５５．レチノイドＸレセプターホモダイマー形成が構造式 を有する化合物の添加により誘導される、請求項５４に記載の方法。 ５６．レチノイドＸレセプターホモダイマー形成が構造式 を有する化合物の添加により誘導される、請求項５４に記載の方法。 ５７．前記病状が皮膚に関連する、請求項５４に記載の方法。 ５８．前記皮膚の病状が座瘡および乾癬からなる群より選択される、請求項５ ４に記載の方法。 ５９．前記病状が癌である、請求項５４に記載の方法。 ６０．前記遺伝子がアポリポタンパク質AI遺伝子である、請求項５４に記載の 方法。 ６１．細胞中でレチノイドＸレセプターホモダイマー形成を選択的に活性化す る方法であって、ホモダイマー形成特異的リガンドを該細胞に添加する工程を包 含し、それにより該細胞中の該レチノイドＸレセプターホモダイマー形成を選択 的に活性化する、方法。 ６２．前記化合物が構造式 を有する、請求項６１に記載の方法。 ６３．前記化合物が構造式 を有する、請求項６１に記載の方法。 ６４．細胞中での9-シス-RAの発現を包含する、該細胞におけるレチノイドＸ レセプターホモダイマー形成を促進する方法。 ６５．請求項１３に記載の化合物の有効に調節する量を、薬学的に受容可能な キャリアと組み合わせて含む、レチノイン酸、ビタミンＤ、または甲状腺ホルモ ンにより調節される細胞プロセスの制御ための薬学的組成物。 ６６．請求項１５に記載の化合物の有効に調節する量を、薬学的に受容可能な キャリアと組み合わせて含む、レチノイン酸、ビタミンＤ、または甲状腺ホルモ ンにより調節される細胞プロセスの制御ための薬学的組成物。 ６７．レチノイン酸レセプター、レチノイドＸレセプター、ビタミンＤレセプ ター、および甲状腺レセプターからなる群より選択されるレセプターにより、被 験体における遺伝子発現を調節する方法であって、請求項１３に記載の化合物の 有効に調節する量またはその薬学的組成物を該被験体に投与する工程を包含する 、方法。 ６８．レチノイン酸レセプター、レチノイドＸレセプター、 ビタミンＤレセプター、および甲状腺レセプターからなる群より選択されるレセ プターにより、被験体における遺伝子発現を調節する方法であって、請求項１５ に記載の化合物の有効に調節する量またはその薬学的組成物を該被験体に投与す る工程を包含する、方法。 ６９．レチノイド、甲状腺ホルモン、またはビタミンＤにより調節される細胞 分化プロセスの機能不全により生じる病気に罹患した被験体を治療する方法であ って、治療的に有効な量の請求項１３に記載の化合物またはその薬学的組成物を 該被験体に投与する工程を包含する、方法。 ７０．レチノイド、甲状腺ホルモン、またはビタミンＤにより調節される細胞 分化プロセスの機能不全により生じる病気に罹患した被験体を治療する方法であ って、治療的に有効な量の請求項１５に記載の化合物またはその薬学的組成物を 該被験体に投与する工程を包含する、方法。[Claims] 1. A method of screening a substance for the ability to affect the formation of retinoid X receptor homodimer, comprising combining a solution containing the substance and retinoid X receptor and determining the presence of homodimer formation. 2. The method of claim 1, wherein the presence of homodimer formation is determined by detecting activation of transcription by the retinoid X receptor homodimer. 3. The method of claim 1, wherein the presence of homodimer formation is measured by coprecipitation. 4. The method of claim 1, wherein the effect is induction of homodimer formation. 5. The method of claim 1, wherein the effect is inhibition of homodimer formation. 6. The method of claim 1, wherein the retinoid X receptor is retinoid X receptor α. 7. 5. The method of claim 4, further comprising determining whether the substance induces a retinoid X receptor heterodimer, and selecting the substance that selectively induces formation of a retinoid X receptor homodimer. 8. A method of screening a substance for the ability to selectively induce the formation of a retinoid X receptor heterodimer over a retinoid X receptor homodimer, comprising the steps of: a) determining whether the substance induces retinoid X receptor homodimer formation. Measuring step; b) measuring whether the substance induces retinoid X receptor heterodimer formation: and c) selecting a compound that selectively induces retinoid X receptor heterodimer formation over retinoid X receptor homodimer formation The process of doing. 9. A method of screening a substance for the effect of a retinoid X receptor homodimer on its ability to bind DNA, the steps of combining the substance with the homodimer, and measuring the effect of the compound on the ability of the homodimer to bind DNA. A method of including. 10. A method of screening a response element for binding to a retinoid X receptor homodimer, comprising the steps of combining said response element with said retinoid X receptor homodimer and detecting the presence of binding. 11. 11. The method of claim 10, wherein the presence of said binding is detected by transcriptional activation of a marker operably linked to said response element. 12. Purified retinoid X receptor homodimer. 13. Bicyclic aromatic compounds having the following structural formula: Wherein R 1 is selected from the group consisting of lower alkyl and adamantyl; R 2 is —OR 6 or —SR 6 , where R 6 is lower alkyl; or R 1 is R 2 When ortho to the contrary, R 1 and R 2 may be linked to each other to form a 5 or 6 membered cycloalkylene ring, which is unsubstituted or substituted with 1 to 4 lower alkyl groups and is optionally Contains 1 or 2 heterocyclic atoms selected from the group consisting of O, S, and NR, wherein R is hydrogen or lower alkyl; R 3 is carbonyl, Is selected from the group consisting of wherein X 1 and X 2 are independently, O, S, and is selected from the group consisting of methylene, wherein at least one of X 1 and X 2 is O or S , Or one of X 1 and X 2 is NR and the other is methylene, m is 2 or 3, and R 6 , R 7 , R 8 and R 9 are independently hydrogen or lower alkyl. With the proviso that, when n is 0, R 6 and R 7 , both are not hydrogen and R 8 and R 9 are not both hydrogen, or R 8 and R 9 are linked together and are 3-6. Can form a cycloalkylene ring containing 4 carbon atoms, and * indicates the position of addition of the R 3 substituent to the rest of the molecule; and R 4 is Selected from the group consisting of: wherein R 10 is hydrogen or methyl, 1 is 0 or 1 and ** indicates the position of addition of the R 4 substituent to the rest of the molecule and R 5 is , Independently selected from the group consisting of lower alkyl and lower alkoxy; and n is 0, 1, 2, or 3, provided that when n is 0, R 3 is carbonyl, * C = CH 2 , Or other than CH 2 , and pharmaceutically acceptable esters, amides, and salts of the compounds. Having a structure selected from the group consisting of a compound according to claim 13, wherein R 11 is O, S, is selected from the group consisting of (CH 3) 2 C, and CH 2, and R A compound wherein 12 is hydrogen or methyl. 15. 15. The compound of claim 14, having the structural formula (II). 16. 16. The compound according to claim 15, wherein n is 0. The compound of claim 16, wherein is 1 and 1 is 1. 18. The compound of claim 17, which is: 18. The compound of claim 17, which is: 16. The compound of claim 15 having 18. The compound of claim 17, having: 16. The compound of claim 15 having 18. The compound of claim 17, having: 24. A compound according to claim 23 selected from the group consisting of: 16. The compound of claim 15 having 18. The compound of claim 17, having: 27. The compound of claim 26, selected from the group consisting of: 16. The compound of claim 15 having 16. The compound of claim 15 having 16. The compound of claim 15 having 16. The compound of claim 15 having 16. The compound of claim 15 having The a, a compound according to claim 15, wherein, X 1 and X 2 are, independently, an ammonium salt of 0 and a compound selected from the group consisting of S, and said compound. The a, a compound according to claim 15, wherein, X 1 and X 2 are, independently, an ammonium salt of 0 and a compound selected from the group consisting of S, and said compound. 16. The compound of claim 15 having 16. The compound of claim 15 having And R 1 is 0 or S. 16. 16. A compound according to claim 15 having, and an ammonium salt of the compound. 16. The compound of claim 15 having 16. The compound of claim 15 having 16. The compound of claim 15 having 16. The compound of claim 15 having 43. A method of inhibiting the activity of a retinoid X receptor heterodimer, comprising the step of inducing the formation of a retinoid X receptor homodimer, thereby inhibiting the heterodimer formation of said retinoid X receptor and inhibiting the resulting heterodimer activity. how to. 44. 44. The method of claim 43, wherein the activity is activation or repression of transcription. 45. 44. The method of claim 43, wherein the retinoid X receptor heterodimer is thyroid hormone receptor and retinoid X receptor. 46. A method of promoting transcription of a gene activated by a retinoid X receptor homodimer in a cell, comprising contacting the cell with an amount of a synthetic compound capable of promoting formation of the retinoid X receptor homodimer. . 47. The compound is structural formula 47. The method of claim 46, comprising: 48. The compound is structural formula 47. The method of claim 46, comprising: 49. A method for inhibiting the activity of a retinoid X receptor homodimer, which comprises the step of suppressing the formation of a retinoid X receptor homodimer. 50. 50. The method of claim 49, wherein the activity is activation or repression of transcription. 51. A method for inhibiting the activity of a retinoid X receptor homodimer, comprising the step of suppressing the binding of the retinoid X receptor homodimer to its response element. 52. 52. The method of claim 51, wherein the activity is activation or repression of transcription. 53. A method of measuring the probability of an increase in a pathology associated with retinoid X receptor homodimer formation, the method comprising detecting a decrease in retinoid X receptor homodimer formation in a subject as compared to a normal subject. 54. A method of treating a condition associated with a retinoid X receptor homodimer in a subject, comprising the step of inducing retinoid X receptor homodimer formation in the subject, whereby expression of a gene activatable by the retinoid X receptor homodimer How to increase. 55. Retinoid X receptor homodimer formation is structural formula 55. The method of claim 54, which is induced by the addition of a compound having 56. Retinoid X receptor homodimer formation is structural formula 55. The method of claim 54, which is induced by the addition of a compound having 57. 55. The method of claim 54, wherein the medical condition is associated with skin. 58. 56. The method of claim 54, wherein the skin condition is selected from the group consisting of acne and psoriasis. 59. 55. The method of claim 54, wherein the medical condition is cancer. 60. 55. The method of claim 54, wherein the gene is the apolipoprotein AI gene. 61. A method of selectively activating retinoid X receptor homodimer formation in a cell comprising the step of adding a homodimer formation specific ligand to said cell, thereby selecting said retinoid X receptor homodimer formation in said cell. How to activate physically. 62. The compound is structural formula 62. The method of claim 61, comprising: 63. The compound is structural formula 62. The method of claim 61, comprising: 64. A method of promoting retinoid X receptor homodimer formation in a cell, comprising expression of 9-cis-RA in the cell. 65. 14. A pharmaceutical composition for controlling a cellular process regulated by retinoic acid, vitamin D, or thyroid hormone, comprising an effective modulating amount of a compound of claim 13 in combination with a pharmaceutically acceptable carrier. . 66. 16. A pharmaceutical composition for the control of cellular processes regulated by retinoic acid, vitamin D, or thyroid hormone, comprising an effective modulating amount of a compound of claim 15 in combination with a pharmaceutically acceptable carrier. . 67. A method of modulating gene expression in a subject with a receptor selected from the group consisting of retinoic acid receptor, retinoid X receptor, vitamin D receptor, and thyroid receptor, which effectively modulates the compound of claim 13. A method comprising administering an amount or a pharmaceutical composition thereof to the subject. 68. A method for regulating gene expression in a subject by a receptor selected from the group consisting of retinoic acid receptor, retinoid X receptor, vitamin D receptor, and thyroid receptor, which effectively regulates the compound according to claim 16. A method comprising administering an amount or a pharmaceutical composition thereof to the subject. 69. 14. A method of treating a subject suffering from a disease caused by a dysfunction of a cellular differentiation process regulated by retinoid, thyroid hormone, or vitamin D, wherein a therapeutically effective amount of the compound of claim 13 or a compound thereof. A method comprising administering a pharmaceutical composition to the subject. 70. 16. A method of treating a subject suffering from a disease caused by a dysfunction of a cellular differentiation process regulated by retinoid, thyroid hormone, or vitamin D, wherein a therapeutically effective amount of the compound of claim 15 or a compound thereof. A method comprising administering a pharmaceutical composition to the subject.
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