【発明の詳細な説明】
Δ５−アンドロステンでのアルツハイマー病の治療および免疫系の調節
技術分野
本発明は広範には、望ましい生物学的応答を引き起こすステロイドの使用に関
する。より詳しくは本発明は、アルツハイマー病の退化性作用の遅延および免疫
系の抗体反応性の調節のためのΔ５−アンドロステンの使用に関する。
アルツハイマー病
アルツハイマー病は大脳皮質内の神経細胞の損傷を特徴とする退化性脳疾患で
ある。この疾患は初老期痴呆の主な原因である。有害な影響には言語障害、重度
の短期間の記憶喪失および失見当がある。上記疾患は精神機能の進行性脱落を生
じる。
長年の広範囲の研究にもかかわらず、研究者は上記疾患の原因を依然として解
明しておらず、今日まで有効な治療を発見できなかった。しかしながら、上記疾
患は神経伝達物質アセチルコリンの欠乏と関連していることが一般的に教示され
ている。
従って、アルツハイマー病の有害な作用の遅延に有効な治療薬に対する実質的
な要望がある。
免疫応答
免疫系は病原性微生物の侵入および進行に対し、ＴおよびＢリンパ球およびマ
クロファージの活性化により保
護する。抗原、例えば病原性微生物を検知すると、Ｔ細胞は活性化されてその他
の宿主細胞の活性化に影響を与えるリンホカインを産生し、そしてＢ細胞は成熟
して抗原と反応する免疫グロブリンまたは抗体を産生する。
免疫老化は免疫系の抗体反応性の低下を生じ、それにより病原性微生物に対し
て生体を免疫化するための免疫系の能力を妨害する。そのような抑圧された免疫
系は病原体が誘因となる病気の頻度および程度の昂進を生じ、そしておそらく死
を招く。
免疫老化は自然の老化の結果として、または病原性微生物の有害作用として生
じ得る。免疫老化は我々の時代の一般的に合意した主要な健康上の問題の一つで
あり、そして医学的な職業の中ではその問題は広まり得る程度にまもなく達する
であろう。
従って、免疫老化に対する免疫調節反応を誘導するために有効な治療薬に対す
る実質的な要望がある。
発明の要約
アルツハイマー病
オキソ基、ヒドロキシ基および加水分解によりそれらの基に変換し得る基から
なる群から選択されるＣ7置換基を有するΔ５−アンドロステン−３β−オール
−１７−オンの治療量を投与することによりアルツハイマー病は治療され得る。
そのような治療は、具体的には中枢神経系の悪化、金属機能の脱落、短期間の記
憶喪失および失見当等を包含するが、それらに限定されないアルツハ
イマー病の退化性作用を遅延させるのに有効である。
上記ステロイドはその他のΔ５−アンドロステンとは異なり、別の性ホルモン
の不所望の産生を刺激せずに、所望の生物学的応答を提示するので、アルツハイ
マー病の治療における使用に特に有効である。
免疫応答
オキソ基、ヒドロキシ基および加水分解によりそれらの基に変換し得る基から
なる群から選択されるＣ7置換基を有するΔ５−アンドロステン−３β−オール
−１７−オンの治療量を投与することにより免疫老化は調節され得る。
上記ステロイドはその他のΔ５−アンドロステンとは異なり、別の性ホルモン
の不所望の産生を剌激せずに、所望の生物学的応答を提示するので、免疫系を調
節するのに特に有効である。
最良の形態を含む発明の詳細な説明
オキソ基、ヒドロキシ基および加水分解によりそれらの基に変換し得る基から
なる群から選択されるＣ7置換基を有するΔ５−アンドロステン−３β−オール
−１７−オンを投与することによりアルツハイマー病および免疫不全失調は有効
に治療され得る。
上記ステロイドは、カルバメート、エナンテートまたはその他のエステル、例
えば腸管、血液および／または体組織内に特定のステロイドを放出し得る誘導体
として投与されてもよい。合成
（１）Δ５−アンドロステン ３β，７−ジオール，１７−オン（７−ヒドロキ
シＤＨＥＡ）
Δ５−アンドロステン ３β，７α−ジオール，１７−オン（７−ヒドロキシ
ＤＨＥＡ）は市販されて利用できるＤＨＥＡアセテート（１０）から連続的合成
方法：
Δ５−アンドロステン−３βヒドロキシ−１７−オンアセテート
Δ５−アンドロステン−３β−ヒドロキシ−７−ブロモ−１７−オン
Δ５−アンドロステン−３β，７α−ヒドロキシ−１７−オンジアセテート
Δ５−アンドロステン−３β，〔１〕７α−ヒドロキシ−１７−オン
により合成され得る。
Δ５−アンドロステン−３β−ヒドロキシ−７−ブロモ−１７−オン（７−ブ
ロモＤＨＥＡ）はΔ５−アンドロステン ３β−ヒドロキシ−１７−オンアセテ
ート（ＤＨＥＡアセテート）を臭素化剤、例えばジブロマンチン（１，３−ジブ
ロモ５，５−ジメチルヒダントイン）またはＮ−ブロモスクシンイミドと反応さ
せることによりＤＨＥＡアセテートから合成され得る。７−ブロモＤＨＥＡは不
安定であり、そして反応の次の工程にすぐに使用されなければならない。
７α−ブロモＤＨＥＡおよび７β−ブロモＤＨＥＡの
異性体混合物を含有する７−ブロモＤＨＥＡはConfalone，P．N.，Kulesha，I．
D.，およびUskokovic，M．R．Jour．Org．Chem.，vol．46，pp 1030-1032（1981
）にコレステロール誘導体に対して記載された方法に従って７α−ブロモＤＨＥ
Ａに平衡化され得る。要するに、７−ブロモＤＨＥＡのラセミ混合物を冷却無水
ＬｉＢｒと混ぜ、そして光学特異的な組成物が得られるまで光から遮断する。
Δ５−アンドロステン ３β，７−ヒドロキシ−１７−オンジアセテート（７
−ヒドロキシＤＨＥＡジアセテート）は、７−ブロモＤＨＥＡを氷酢酸と粉末酢
酸銀の混合物と室温で適当な溶媒、例えば塩化メチレンまたはアセトン中反応さ
せることにより７−ブロモＤＨＥＡから合成され得る。
Δ５−アンドロステン ３β，７α−ヒドロキシ−１７−オン（７−ヒドロキ
シＤＨＥＡ）は、メタノールに溶解した７−ヒドロキシＤＨＥＡジアセテー卜を
Ｎａ2ＣＯ3等の適当な塩基を含有する水溶液と反応させることにより７−ヒドロ
キシＤＨＥＡジアセテートから合成され得る。
合成された７−ヒドロキシＤＨＥＡは次いで（ｉ）真空中でメタノールを蒸発
させ、（ii）適当な有機溶媒、例えばジクロロメタン中に７−ヒドロキシＤＨＥ
Ａを抽出し、（iii）真空中で有機溶媒を蒸発させ、（iv）７−ヒドロキシＤＨ
ＥＡを含む抽出された固体を適当な有機
溶媒、例えばエタノールと共沸により乾燥させ、（ｖ）抽出された固体をアセト
ンに溶解させ、次に（vi）適当な沈澱剤、例えばヘキサンを添加してΔ５−アン
ドロステン ３β，７α−ジオール，１７−オン（７−ヒドロキシＤＨＥＡ）の
精製結晶を生成することにより精製され得る。
Δ５−アンドロステン−３β，７α−ジオール−１７−オン（７−ヒドロキシ
ＤＨＥＡ）結晶の第２の収量は得られた溶液を室温以下で冷却することにより得
ることができる。
（２）Δ５−アンドロステン−３β−オール−７，１７−ジオン（７−ケトＤＨ
ＥＡ）
Δ５−アンドロステン−３β−オール−７，１７−ジオンは、下記の連続合成
：
３β−アセトキシ−Δ５−アンドロステン−１７−オン
３β−アセトキシ−Δ５−アンドロステン−７，１７−ジオン
Δ５−アンドロステン−３β−ヒドロキシ−７，１７−ジオン
によって、市販のＤＨＥＡアセテートから合成することができる。
３β−アセトキシ−Δ５−アンドロステン−７，１７−ジオン（７−［オン］
オキソＤＨＥＡアセテート）は、フィーザー，エル．エフ．（Fieser，L.F.）の
Jour．Am．Soc.，Vol．75，pp4386-4394（1953）に記載された方法に従って、Ｄ
ＨＥＡアセテートを酸化剤ＣｒＯ3と反応させることにより、３β−アセトキシ
−Δ５−アンドロステン−１７−オン（ＤＨＥＡアセテート）から合成すること
ができる。
Δ５−アンドロステン−３β−ヒドロキシ−７，１７−ジオン（７−オンＤＨ
ＥＡ）は、７−オンＤＨＥＡアセテートから合成し、次いで、脱エステル化及び
７−ヒドロキシＤＨＥＡジアセテートからの７−ヒドロキシＤＨＥＡの合成及び
精製に関する上記精製工程を用いて精
製することができる。治療
患者は、摂取又は注射を含む通常受け入れられる操作の何れかにより、本文中
で特定されたステロイドを用いて治療されてよい。一日当たり体重１００ｋｇ当
たりステロイド約０．１ないし２ｇ、好ましくは一日当たり体重１００ｋｇ当た
りステロイド０．５ないし２ｇの投与量での治療が、所望の生物学的応答を誘発
させるために通常有効であると信じられている。体重１００ｋｇ当たり約０．１
ｇ未満の投与量は、所望の生物学的応答〔目的〕を誘発させるために不充分であ
ると通常信じられており、他方、体重１００ｋｇ当たり約２ｇを越える投与量は
、実際上の相当する利益を与えることなく治療費を増加させると信じられている
。患者に施薬すべき最適投与量は、流動体組成物（脂肪％）、年令等を含む幾つ
かの因子に依存する最適投与量としての特定の場合を表わす。
限定的な意味ではなく、我々は、本文中で特定されたステロイドは近似した代
謝産物（類）へのＤＨＥＡの変化の径路に沿った代謝中間体であると信じており
、このことは、アルツハイマー病の治療に対して応用し得る。
患者は、実質的に何れかの所望の計画に基づいて、本文中で特定されたステロ
イドのうちの一種を用いて治療されてよい。しかしながら、ステロイド自体は体
内に蓄積されず、且つ施薬後数時間〔数日〕以内に実質的に除
去及び／又は不活性化されると信じられている。
したがって、最適な効果のためには、治療を受ける患者は、少なくともほぼ毎
日治療されるべきである。便宜上の理由のために、治療を受ける患者は、最大限
の治療よりも少ない治療が受け入れられる場合には、例えば一日毎に又は一週間
に一度のように頻繁でなく治療されてよい。
投与及び投与量に影響を及ぼす因子は明らかなので、各々の特定患者は注意深
く且つ頻繁に診察されなければならず、そして投与及び／又は投与量は、特定の
症状に基づいて変更される。
実験例
実施例１
合成 Δ５−アンドロステン−３β，７α−ジオール−１７−オン（７−ヒドロキシ ＤＨＥＡ）
（工程１） 第一〔溶液〕混合物を形成するために、電磁攪拌機及び還流コンデ
ンサーを備えた２１の三つ口丸底フラスコ内に、ヘキサン１０００ｍl（沸点６
９−７１℃）、ＤＨＥＡアセテート１０ｇ（０．０３モル）及びＮａＨＣＯ3１
３．６ｇ（０．１６モル）を入れた。第一〔溶液〕混合物をＮ2雰囲気下に置き
、次いで一定攪拌下で還流するまで加熱した。第二溶液を形成するために、還流
している第一〔溶液〕混合物に、臭素化試薬としてジブロマンチン（１，３−ジ
ブロモ−５，５−ジ
メチルヒダントイン）６．１１ｇ（０．０２１モル）を添加した。第二溶液は、
急速に淡い白／黄色に変わった後に、徐々に橙色に変わった。第二溶液を３０分
間還流し、室温に冷却し、次いで焼結ガラスロートを通して濾過した。残部をジ
クロロメタン５０ｍｌで洗浄し、次いで３５℃未満の温度で乾燥するために、混
合された濾液を回転蒸発に付した。乾燥濾液（Δ５−アンドロステン−３β−オ
ール−７−ブロモ−１７−オン）は貯蔵のためには不安定であり、次いで第２工
程で即座に使用された。
（工程２） 乾燥濾液を、電磁攪拌機を備え且つ氷浴中に置かれた１ｌ栓付きフ
ラスコ内のジクロロメタン８０ｍｌに再溶解した。第三溶液を形成するために、
氷冷アセトン３２０ｍｌ中の無水ＬｉＢｒ８ｇを、再溶解濾液中に添加した。第
三溶液を光から遮蔽し、次いで３時間連続的に攪拌した。得られた溶液〔これは
主にΔ５−アンドロステン−３β−オール−７α−ブロモ−１７−オンを含んで
いた〕は短時間加温され、次いで第３工程で即座に使用された。
（工程３） 第１懸濁液を形成するために、電磁攪拌機を備えた５００ｍｌフラ
スコ内に、ジクロロメタン３２０ｍｌ、氷酢酸８０ｍｌ、及び酢酸銀２６ｇを入
れた。第１懸濁液を室温で２０分間連続的に攪拌した。第２懸濁液を形成するた
めに、攪拌された第１懸濁液を一定攪拌下で、主にΔ５−アンドロステン−３β
−オール−７
α−ブロモ−１７−オンからなる（加温された）溶液に添加した。第２懸濁液を
室温で３０分間連続して攪拌し、その〔間〕後、固体フラクションを〔製造〕分
離するために、この懸濁液を焼結ガラスロートを通して濾過した。濾過した固体
フラクションを、ジクロロメタン１００ｍｌで洗浄した。濾液を水１０００ｍｌ
で３回抽出し、残った酢酸を５％ＮａＨＣＯ3溶液〔１０００ｍｌ〕で中和し、
次いでジクロロメタン溶液を水で更に２回抽出した。Δ５−アンドロステン−３
β，１７α−ジオール−１７−オンジアセテートを含む有機溶液を、次いで乾燥
させるために回転蒸発に付した。
（工程４） 第４溶液を形成するために、乾燥された抽出固体を、電磁攪拌機及
び還流コンデンサーを備えた１ｌの三つ口フラスコ内のメタノール５００ｍｌに
再溶解した。第４溶液をＮ2雰囲気下に置き、次いで一定攪拌下で還流するまで
加熱した。第５溶液を形成するために、第４溶液にＮａ2ＣＯ3の５％水溶液２５
０ｍｌを添加した。第５溶液を一定攪拌下で４５分間還流した。メタノールを回
転蒸発させて除き、次いで水性の第５溶液を氷酢酸の適量を用いて注意深くｐＨ
７にした。中和した第５溶液を、ジクロロメタン１００ｍｌで抽出した。Δ５−
アンドロステン−３β，７α−ジオール−１７−オンのジクロロメタン溶液を、
ほぼ乾燥させるために回転蒸発に付し、無水エタノールを用いて共沸的に乾燥さ
せ、次いでアセトンを用いて２回共沸的に乾燥させた。第６
溶液を形成するために、固体が完全に溶解されるまで、乾燥された抽出固体に温
アセトンを添加した。溶液が濁り始めるまで（この時、Δ５−アンドロステン−
３β，７α−ジオール−１７−オンの結晶が室温で生成し始める）、ヘキサンを
第６溶液に添加した。
Δ５−アンドロステン−３β，７α−ジオール−１７−オン結晶の第２回捕集
物は、残った第６溶液を冷却することによって得られた。
生成物は約１８７−１８９℃で融解し、そしてアセトン／ヘキサンから再結晶
された場合には、約１９２−１９３℃で融解した。
実施例II合成
△５−アンドロステン ３β−７（αβ）−ジオール−１７−オン
７αβ−ヒドロキシ ＤＨＥＡ
△５−アンドロステン ３β−７α−ジオール−１７−オンを、段階１からの
乾燥したろ液を段階３のための製造におけるジクロロメタン８０ｍｌ中に単に溶
解するだけによって段階２を省略する以外は、実施例Ｉに記載した方法に従って
製造した。
実施例III合成
△５−アンドロステン ３β−オール−７，１７−ジオン
７αβ−ケト ＤＨＥＡ
（段階１）磁気攪拌機と水浴を備えた５０ｍｌフラスコ中に、無水酢酸６．５
ｇ、酢酸２３ｍｌ、酢酸ナトリウム１．７ｇ及びＤＨＥＡアセテート２ｇを添加
して１番目の混合物を形成した。
１番目の混合物に、三酸化クローム２ｇを３０分間にわたって添加して２番目
の混合物を形成した。１番目の混合物を５６−５８℃の定温に保ち三酸化クロー
ムの添加の間連続的に攪拌した。２番目の混合物を５６−５８℃に保ちそして更
に１時間連続して攪拌し、その後２番
目の混合物を冷却しそして連続的に攪拌しながら氷水６００ｍｌ中にゆっくり注
入して沈澱を形成した。羊毛状の沈澱物を焼付ガラスフィルタ上でろ過し緑色が
消失するまで水で洗浄した。Ｐ2Ｏ5上で減圧下乾燥後、生成物をメタノールに溶
解しそして再結晶して実質的に純粋な、融点約１９１−１９２℃の△５−アンド
ロステン３β−アセトキシ−７，１７−ジオンを取得した。
（段階２）メタノール５００ｍｌに再溶解した上記沈澱物を、磁気攪拌機と還
流凝縮器を付けた１リットル三頸丸底フラスコに入れて３番目の溶液を形成した
。その３番目の溶液をＮ2雰囲気下に置き、定常的な攪拌下還流するために加熱
した。その３番目の溶液にＮａ2ＣＯ3の５％溶液２５０ｍｌを添加して４番目の
溶液を形成した。その４番目の溶液を４５分間にわたり定常的な攪拌下還流する
。メタノールをロータリエバポレータで留去しそして水性の４番目の溶液を適当
量の氷酢酸で注意してｐＨ７にした。中和した４番目の溶液をジクロロメタン１
００ｍｌで２回抽出し、この２回分の抽出液を合わせ、ジクロロメタンを減圧下
留去した。次いで抽出固体を、初めに無水エタノールでそしてアセトンで２回、
共沸乾燥した。メタノールを、乾燥した抽出固体に固体が完全に溶解するまで添
加して５番目の溶液を形成した。ヘキサンを溶液が濁るまで添加するとその時点
で室温で△５−アンドロステン ３β−オール−７，１７−ジオンの結晶が形成
した。
２番目に取得の△５−アンドロステン ３β−オールー７，１７−ジオン結晶
は、残った６番目の溶液を冷却して得られた。
得られた生成物は約２３５−２３８℃の融点を持つ。
実施例IV
△５−アンドロステン ３β−オール−７，１７−ジオン（７−オキソ ＤＨ ＥＡ）の免疫調節効果
順化しそしてソレン−ユニット（Thoren- unit）で育成した１カ月令の３０頭
のＢａｌｂ／ｃマウスを５匹の６群に分け、メトフェイン（Methofane）麻酔下
、逆軌道的（retro-orbitally）に育成し、ワクチン接種前−血清を得た。全群
のための処理と薬量は下記の表１に記載されている。試験に使用されたＤＨＥＡ
は、ニューハンプシャ州，ウィルトン，ステラロイド・インコーポレィテッド（
Ｓｔｅｒａｌｏｉｄｓ Ｉｎｃ．）から入手した。７−オキソ ＤＨＥＡは、実
施例IIIの手順により合成した。
２回処理（／２）を受けるマウスは、１番目の処理をワクチン接種３日前にそ
して２番目の処理をワクチン接種と同時に受けた。他の全ての処理はワクチン接
種と同時に実施された。ワクチンは３種のインフルエンザ混合ワクチン（A/Taiw
an/H3N2/868，A/Panama/HIN1/91，B/Bejing）０．１７ｍｌからなっていた。ワ
クチン接種３週間後にマウスから採血してワクチン接種後−血清を得る。
ワクチン接種前−血清とワクチン接種後−血清中のインフルエンザ抗体濃度の
測定は、エリザ法により、１：１０００、１：４０００と１：１６０００の希釈
倍率で、増加する光学濃度が増加する抗体濃度を示す４０５ｎｍでの光学濃度で
得られる抗体レベルにより測定される。
各群についてのワクチン接種後の光学濃度は希釈倍率により表２（１：１００
０）、表３（１：４０００）、表４（１：１６０００）に記載されている。ワク
チン接種前−血清の光学濃度ベースラインは平均０．０８であって０．００ない
し０．２５の範囲にある。光学濃度のバックグランドは平均０．１である。
ボンフエロニ／ダン分析（Bonferroni/Dunn analysis）を試験結果について行
い、そしてワクチン注射後の抗体と結合した抗原を比較した。この分析の結果は
表２ＢＤ（１：１０００）、表３ＢＤ（１：４０００）および表４ＢＤ（１：１
６０００）に示される。
結論
ＤＨＥＡおよびΔ５−アンドロステン−３β−オール−７，１７−ジオン（７
−オキソ ＤＨＥＡ）は明白な毒性を臨床上誘導しなかった。
台湾 Ａ／ＨｌＮｌへの免疫反応は処理グループ間で最も小さく変化した。健
康なマウスは通常この病原体に良く反応する。従って、通常の免疫反応が通常最
良の免疫性である場合、Δ５−アンドロステン−３β−オール−７，１７−ジオ
ンによる処理は免疫反応を高めないことが明白となった。
Δ５−アンドロステン−３β−オール−７，１７−ジオンの反対方向の部位へ
の摂取（contralateral site inJection）はＡ／パナマ／ＨｌＮｌ／９１および
Ｂ／北京病原体への最も大きな反応を生じさせた。健康なマウスは通常この病原
体に良く反応しない。従って、通常の免疫反応が最良の免疫性に満たない場合、
Δ５−アンドロステン−３β−オール−１，１７−ジオンによる処理は免疫反応
を高めることが明白となった。Description: Therapeutic of Alzheimer's disease with Δ5-androstene and modulation of the immune system TECHNICAL FIELD The present invention relates generally to the use of steroids to elicit a desired biological response. More particularly, the present invention relates to the use of Δ5-androstene for delaying the degenerative action of Alzheimer's disease and for modulating antibody reactivity of the immune system. Alzheimer's Disease Alzheimer's disease is a degenerative brain disease characterized by damage to nerve cells in the cerebral cortex. This disease is the main cause of presenile dementia. Adverse effects include language impairment, severe short-term memory loss and disorientation. The disease causes progressive loss of mental function. Despite years of extensive research, researchers have not yet been able to elucidate the causes of the above diseases and to date have failed to find an effective treatment. However, it is generally taught that the above diseases are associated with a deficiency of the neurotransmitter acetylcholine. Therefore, there is a substantial need for therapeutic agents that are effective in delaying the adverse effects of Alzheimer's disease. Immune response The immune system protects against the invasion and progression of pathogenic microorganisms by activation of T and B lymphocytes and macrophages. Upon detection of an antigen, eg, a pathogenic microorganism, T cells are activated to produce lymphokines that affect the activation of other host cells, and B cells mature to produce immunoglobulins or antibodies that react with the antigen. To do. Immune senescence results in a decrease in the antibody reactivity of the immune system, thereby interfering with the ability of the immune system to immunize the body against pathogenic microorganisms. Such a suppressed immune system causes an increase in the frequency and extent of pathogen-triggered illness and possibly death. Immune aging can occur as a result of natural aging or as a deleterious effect of pathogenic microorganisms. Immune aging is one of the generally agreed major health problems of our time, and within the medical profession the problem will soon be widespread. Therefore, there is a substantial need for therapeutic agents that are effective to induce an immune regulatory response to immune aging. SUMMARY OF THE INVENTION Alzheimer's Disease A therapeutic amount of Δ5-androsten-3β-ol-17-one having a C 7 substituent selected from the group consisting of oxo groups, hydroxy groups and groups convertible to these groups by hydrolysis. Alzheimer's disease can be treated by administering. Such treatments specifically include, but are not limited to, central nervous system deterioration, loss of metal function, short-term memory loss and disorientation to delay the degenerative effects of Alzheimer's disease. It is valid. The steroids, unlike other Δ5-androstenes, are particularly effective for use in the treatment of Alzheimer's disease because they provide the desired biological response without stimulating the unwanted production of another sex hormone. . Immune Response Administering a therapeutic amount of Δ5-androsten-3β-ol-17-one having a C 7 substituent selected from the group consisting of oxo groups, hydroxy groups and groups convertible to these groups by hydrolysis. Thereby immune senescence can be regulated. The steroids, unlike other Δ5-androstenes, are particularly effective at modulating the immune system because they provide the desired biological response without stimulating the unwanted production of another sex hormone. is there. DETAILED DESCRIPTION oxo group of the invention, including the best mode, having a C 7 substituent selected from the group consisting of groups that can be converted into these groups by hydroxy groups and hydrolysis Δ5- androsten -3β- ol -17 By administering -one, Alzheimer's disease and immunodeficiency can be effectively treated. The steroids may be administered as carbamates, enanthates or other esters , for example derivatives capable of releasing certain steroids in the intestinal tract, blood and / or body tissues. Synthesis (1) Δ5-androstene 3β, 7-diol, 17-one (7-hydroxy DHEA) Δ5-Androstene 3β, 7α-diol, 17-one (7-hydroxy DHEA) is commercially available DHEA acetate Continuous synthesis method from (10): Δ5-androstene-3β hydroxy-17-one acetate Δ5-androstene-3β-hydroxy-7-bromo-17-one Δ5-androstene-3β, 7α-hydroxy-17- It can be synthesized with ondiacetate Δ5-androstene-3β, [1] 7α-hydroxy-17-one. Δ5-androstene-3β-hydroxy-7-bromo-17-one (7-bromoDHEA) is a brominating agent of Δ5-androstene 3β-hydroxy-17-one acetate (DHEA acetate), such as dibromantine (1,3 -Dibromo 5,5-dimethylhydantoin) or N-bromosuccinimide and can be synthesized from DHEA acetate. 7-Bromo DHEA is unstable and must be used immediately in the next step of the reaction. 7-Bromo DHEA containing an isomer mixture of 7α-bromo DHEA and 7β-bromo DHEA is described in Confalone, P .; N., Kulesha, I. D., and Uskokovic, M. R. Jour. Org. Chem., Vol. 46, pp 1030-1032 (1981) and can be equilibrated to 7α-bromo DHE A according to the method described for cholesterol derivatives. Briefly, the racemic mixture of 7-bromo DHEA is mixed with cold anhydrous LiBr and shielded from light until an optically specific composition is obtained. Δ5-androstene 3β, 7-hydroxy-17-one diacetate (7-hydroxy DHEA diacetate) is a mixture of 7-bromo DHEA with glacial acetic acid and powdered silver acetate in a suitable solvent such as methylene chloride or acetone at room temperature. It can be synthesized from 7-bromo DHEA by reacting. Δ5-androstene 3β, 7α-hydroxy-17-one (7-hydroxy DHEA) is prepared by reacting 7-hydroxy DHEA diacetate dissolved in methanol with an aqueous solution containing a suitable base such as Na 2 CO 3. It can be synthesized from 7-hydroxy DHEA diacetate. The synthesized 7-hydroxy DHEA is then (i) evaporated in vacuo with methanol, (ii) extracted with an appropriate organic solvent such as dichloromethane, 7-hydroxy DHEA, and (iii) the organic solvent in vacuo. Evaporated, (iv) the extracted solid containing 7-hydroxy DH EA is azeotropically dried with a suitable organic solvent such as ethanol, (v) the extracted solid is dissolved in acetone and then (vi) It can be purified by adding a suitable precipitating agent such as hexane to produce purified crystals of Δ5-androstene 3β, 7α-diol, 17-one (7-hydroxy DHEA). A second yield of Δ5-androstene-3β, 7α-diol-17-one (7-hydroxy DHEA) crystals can be obtained by cooling the resulting solution below room temperature. (2) Δ5-Androstene-3β-ol-7,17-dione (7-keto DH EA) Δ5-Androstene-3β-ol-7,17-dione is the following continuous synthesis: 3β-acetoxy-Δ5 -Androsten-17-one 3β-acetoxy-Δ5-androsten-7,17-dione Δ5-Androsten-3β-hydroxy-7,17-dione can be synthesized from commercially available DHEA acetate. 3β-acetoxy-Δ5-androstene-7,17-dione (7- [one] oxo DHEA acetate) is commercially available from Fizer, El. F. (Fieser, LF) Jour. Am. Soc., Vol. 75, pp4386-4394 (1953), DHEA acetate can be synthesized from 3β-acetoxy-Δ5-androsten-17-one (DHEA acetate) by reacting with the oxidizing agent CrO 3. it can. Δ5-Androstene-3β-hydroxy-7,17-dione (7-one DHEA) was synthesized from 7-one DHEA acetate, then deesterified and 7-hydroxy DHEA from 7-hydroxy DHEA diacetate. Can be purified using the above purification steps for the synthesis and purification of Treated patients may be treated with the steroids identified herein by any of the accepted procedures , including ingestion or injection. Treatment with a dose of about 0.1 to 2 g of steroid per 100 kg of body weight per day, preferably 0.5 to 2 g of steroid per 100 kg of body weight per day is usually effective for eliciting the desired biological response. Is believed. Dosages less than about 0.1 g / 100 kg body weight are generally believed to be insufficient to elicit the desired biological response [objective], while dosages greater than about 2 g / 100 kg body weight are provided. Is believed to increase treatment costs without inflicting a substantial corresponding benefit. The optimum dose to administer to a patient represents the particular case as an optimum dose depending on several factors including fluid composition (% fat), age and the like. In a non-limiting sense, we believe that the steroids identified in this text are metabolic intermediates along the path of DHEA changes to the close metabolite (s), which indicates that Alzheimer's It can be applied to the treatment of diseases. The patient may be treated with one of the steroids identified herein based on virtually any desired regimen. However, it is believed that the steroid itself does not accumulate in the body and is substantially eliminated and / or inactivated within hours (days) after administration. Therefore, for optimal effect, the patient to be treated should be treated at least almost daily. For reasons of convenience, the patient to be treated may be treated less frequently, such as daily or weekly, if less than the maximum treatment is acceptable. Each particular patient must be examined carefully and often, as the factors that affect dosing and dosage are clear, and dosing and / or dosing will vary based on the particular condition. Experimental Examples Example 1 Synthesis Δ5-androstene-3β, 7α-diol-17-one (7-hydroxy DHEA) (Step 1) A magnetic stirrer and reflux condenser were provided to form the first [solution] mixture. Into a three-necked round-bottomed flask with a volume of 21 was added 1000 ml of hexane (boiling point 69-71 ° C.), 10 g (0.03 mol) of DHEA acetate and 3.6 g (0.16 mol) of NaHCO 3 1. The first [solution] mixture was placed under a N 2 atmosphere and then heated under constant stirring to reflux. To form the second solution, 6.11 g (0.021 mol) of dibromantine (1,3-dibromo-5,5-dimethylhydantoin) as a brominating reagent was added to the refluxing first [solution] mixture. Was added. The second solution rapidly turned pale white / yellow and then gradually turned orange. The second solution was refluxed for 30 minutes, cooled to room temperature and then filtered through a sintered glass funnel. The residue was washed with 50 ml of dichloromethane and then the combined filtrate was subjected to rotary evaporation in order to dry at temperatures below 35 ° C. The dried filtrate (Δ5-androstene-3β-ol-7-bromo-17-one) was unstable for storage and then used immediately in the second step. (Step 2) The dried filtrate was redissolved in 80 ml of dichloromethane in a 1 l stoppered flask equipped with a magnetic stirrer and placed in an ice bath. To form a third solution, 8 g of anhydrous LiBr in 320 ml of ice-cold acetone was added into the redissolved filtrate. The third solution was shielded from light and then stirred continuously for 3 hours. The resulting solution, which primarily contained Δ5-androsten-3β-ol-7α-bromo-17-one, was warmed briefly and then used immediately in the third step. (Step 3) In order to form the first suspension, 320 ml of dichloromethane, 80 ml of glacial acetic acid and 26 g of silver acetate were placed in a 500 ml flask equipped with a magnetic stirrer. The first suspension was continuously stirred at room temperature for 20 minutes. To form the second suspension, the stirred first suspension is, under constant stirring, mainly composed of Δ5-androstene-3β-ol-7α-bromo-17-one (warmed). Was added to the solution. The second suspension was continuously stirred at room temperature for 30 minutes, during which time the suspension was filtered through a sintered glass funnel in order to [manufacture] separate the solid fraction. The filtered solid fraction was washed with 100 ml of dichloromethane. The filtrate was extracted 3 times with 1000 ml of water, the residual acetic acid was neutralized with a 5% NaHCO 3 solution [1000 ml], and then the dichloromethane solution was extracted twice with water. The organic solution containing Δ5-androstene-3β, 17α-diol-17-one diacetate was then subjected to rotary evaporation for drying. Step 4 The dried extracted solids were redissolved in 500 ml of methanol in a 1 liter three neck flask equipped with a magnetic stirrer and reflux condenser to form a fourth solution. The fourth solution was placed under N 2 atmosphere and then heated under constant stirring to reflux. To the fourth solution was added 250 ml of a 5% aqueous solution of Na 2 CO 3 to form a fifth solution. The fifth solution was refluxed for 45 minutes under constant stirring. The methanol was removed by rotary evaporation, then the aqueous fifth solution was carefully brought to pH 7 with an appropriate amount of glacial acetic acid. The neutralized fifth solution was extracted with 100 ml of dichloromethane. A solution of Δ5-androstene-3β, 7α-diol-17-one in dichloromethane was rotary evaporated to near dryness, azeotropically dried with absolute ethanol, then co-evaporated twice with acetone. Boiled dry. Warm acetone was added to the dried extracted solids until the solids were completely dissolved to form a sixth solution. Hexane was added to the sixth solution until the solution began to turn cloudy, at which time crystals of Δ5-androsten-3β, 7α-diol-17-one began to form at room temperature. A second collection of Δ5-androstene-3β, 7α-diol-17-one crystals was obtained by cooling the remaining sixth solution. The product melted at about 187-189 ° C and, when recrystallized from acetone / hexane, at about 192-193 ° C. Example II Synthesis Δ5- Androstene 3β-7 (αβ) -diol- 17-one 7αβ-Hydroxy DHEA Δ5- Androstene 3β-7α-diol-17-one was removed from the dried filtrate from step 1 Prepared according to the method described in Example I except omitting step 2 by simply dissolving it in 80 ml of dichloromethane in the preparation for step 3. Example III Synthesis Δ5-Androstene 3β-ol-7,17-dione 7αβ-keto DHEA (Step 1) In a 50 ml flask equipped with a magnetic stirrer and water bath, acetic anhydride 6.5 g, acetic acid 23 ml, sodium acetate The first mixture was formed by adding 1.7 g and 2 g of DHEA acetate. To the first mixture, 2 g of chromium trioxide was added over 30 minutes to form the second mixture. The first mixture was kept at a constant temperature of 56-58 ° C. and continuously stirred during the addition of chromium trioxide. The second mixture was kept at 56-58 ° C. and continuously stirred for another hour, after which the second mixture was cooled and poured slowly into 600 ml of ice water with continuous stirring to form a precipitate. The wooly precipitate was filtered on a baked glass filter and washed with water until the green color disappeared. After drying under reduced pressure over P 2 O 5 , the product was dissolved in methanol and recrystallized to give substantially pure Δ5-androstene 3β-acetoxy-7,17-dione, mp ca. 191-192 ° C. Got (Step 2) The above precipitate redissolved in 500 ml of methanol was placed in a 1 liter three-necked round bottom flask equipped with a magnetic stirrer and a reflux condenser to form a third solution. The third solution was placed under N 2 atmosphere and heated to reflux with constant stirring. To the third solution was added 250 ml of a 5% solution of Na 2 CO 3 to form a fourth solution. The fourth solution is refluxed for 45 minutes with constant stirring. The methanol was distilled off on a rotary evaporator and the aqueous fourth solution was carefully brought to pH 7 with an appropriate amount of glacial acetic acid. The neutralized fourth solution was extracted twice with 100 ml of dichloromethane, and the extracts of the two times were combined, and dichloromethane was distilled off under reduced pressure. The extracted solid was then azeotropically dried first with absolute ethanol and twice with acetone. Methanol was added to the dried extracted solids until the solids were completely dissolved to form a fifth solution. Hexane was added until the solution became cloudy, at which point crystals of Δ5-androstene 3β-ol-7,17-dione formed at room temperature. The second obtained Δ5-androstene 3β-ol-7,17-dione crystal was obtained by cooling the remaining 6th solution. The product obtained has a melting point of about 235-238 ° C. Example IV Δ5-Androstene 3β-ol-7,17-dione (7-oxo DH EA) Immunomodulatory Effect Acclimatized and cultivated in Thoren -unit 30 month old Balb The / c mice were divided into 6 groups of 5 mice, and were cultivated retro-orbitally under anesthesia with Methofane to obtain pre-vaccination-serum. Treatments and dosages for all groups are listed in Table 1 below. The DHEA used in the test was obtained from Steraloids Inc., Wilton, NH. 7-oxo DHEA was synthesized by the procedure of Example III. Mice receiving two treatments (/ 2) received the first treatment 3 days before vaccination and the second treatment at the same time as vaccination. All other treatments were given at the same time as vaccination. The vaccine consisted of 0.17 ml of three influenza mixed vaccines (A / Taiwan / H3N2 / 868, A / Panama / HIN1 / 91, B / Bejing). Mice are bled 3 weeks after vaccination to obtain post-vaccination-serum. Pre-vaccination-serum and post-vaccination-measurement of influenza antibody concentration in serum was carried out by the Eliza method at dilution ratios of 1: 1000, 1: 4000 and 1: 16000 to determine the antibody concentration at which the increasing optical density increases. Measured by the antibody level obtained at the optical density shown at 405 nm. The optical density after vaccination for each group is shown in Table 2 (1: 1000), Table 3 (1: 4000) and Table 4 (1: 16000) according to the dilution ratio. Pre-vaccination-the serum optical density baseline averaged 0.08 and ranged from 0.00 to 0.25. The background of optical density is 0.1 on average. A Bonferroni / Dunn analysis was performed on the test results, and the antibody-bound antigen was compared after vaccination. The results of this analysis are shown in Table 2BD (1: 1000), Table 3BD (1: 4000) and Table 4BD (1: 1 6000). Conclusion DHEA and Δ5-androsten-3β-ol-7,17-dione (7-oxo DHEA) did not induce overt toxicity clinically. The immune response to Taiwan A / H1N1 varied the least among the treatment groups. Healthy mice usually respond well to this pathogen. Thus, it became clear that treatment with Δ5-androstene-3β-ol-7,17-dione does not enhance the immune response when the normal immune response is usually the best immunity. Contralateral site inJection of Δ5-androstene-3β-ol-7,17-dione produced the greatest response to A / Panama / H1N1 / 91 and B / Beijing pathogens. Healthy mice usually do not respond well to this pathogen. Therefore, it was revealed that the treatment with Δ5-androstene-3β-ol-1,17-dione enhances the immune response when the normal immune response is less than the best immunity.
【手続補正書】特許法第１８４条の８
【提出日】１９９４年２月２８日
【補正内容】
請求の範囲
１．オキソ基、ヒドロキシ基および加水分解によりそれらに変換し得る基から
なる群から選択されたＣ7置換基を有するΔ５−アンドロステン−３β−オール
−１７ーオンからなる群から選択された、ステロイドの有効量を哺乳動物に投与
する手段からなるアルツハイマー病の哺乳動物を治療する方法。
２．ステロイドを哺乳動物に投与する手段がステロイドをヒトに投与する手段
からなる請求項１に記載の治療方法。
３．ステロイドを投与する手段がステロイドを注射する手段からなる請求項１
に記載の治療方法。
４．ステロイドを投与する手段がステロイドの摂取を誘発する手段からなる請
求項１に記載の治療方法。
５．オキソ基、ヒドロキシ基および加水分解によりそれらに変換し得る基から
なる群から選択されたＣ7置換基を有するΔ５−アンドロステン−３β−オール
−１７−オンからなる群から選択された、ステロイドの有効量を哺乳動物に投与
する手段からなるアルツハイマー病の哺乳動物の中枢神経系の変性を遅延させる
ための方法。
６．ステロイドを哺乳動物に投与する手段がステロイドをヒトに投与する手段
からなる請求項５に記載の治療方法。
７．ステロイドを投与する手段がステロイドを注射する手段からなる請求項５
に記載の治療方法。
８．ステロイドを投与する手段がステロイドの摂取を誘発する手段からなる請
求項５に記載の治療方法。
９．オキソ基、ヒドロキシ基および加水分解によりそれらに変換し得る基から
なる群から選択されたＣ7置換基を有するΔ５−アンドロステン−３β−オール
−１７−オンからなる群から選択された、ステロイドの治療上の量を哺乳動物に
投与する手段からなるアルツハイマー病の哺乳動物の精神機能の損失を遅延させ
る方法。
１０．ステロイドを哺乳動物に投与する手段がステロイドをヒトに投与する手段
からなる請求項９記載の治療方法。
１１．ステロイドを投与する手段がステロイドを注射する手段からなる請求項９
に記載の治療方法。
１２．ステロイドを投与する手段がステロイドの摂取を誘発する手段からなる請
求項９に記載の治療方法。
１３．オキソ基、ヒドロキシ基および加水分解によりそれらに変換し得る基から
なる群から選択されたＣ7置換基を有するΔ５−アンドロステン−３β−オール
−１７−オンからなる群から選択された、ステロイドの有効量を哺乳動物に投与
する手段からなるアルツハイマー病の哺乳動物の短期記憶喪失を遅延させる方法
。
１４．ステロイドを哺乳動物に投与する手段がステロイドをヒトに投与する手段
からなる請求項１３記載の治療方法。
１５．ステロイドを投与する手段がステロイドを注射する手段からなる請求項１
３に記載の治療方法。
１６．ステロイドを投与する手段がステロイドの摂取を誘発する手段からなる請
求項１３に記載の治療方法。
１７．オキソ基、ヒドロキシ基および加水分解によりそれらに変換し得る基から
なる群から選択されたＣ7置換基を有するΔ５−アンドロステン−３β−オール
−１７−オンからなる群から選択された、ステロイドの治療上の量を哺乳動物に
投与する手段からなるアルツハイマー病の哺乳動物の指南力障害の進行を遅延さ
せる方法。
１８．ステロイドを哺乳動物に投与する手段がステロイドをヒトに投与する手段
からなる請求項１７記載の治療方法。
１９．ステロイドを投与する手段がステロイドを注射する手段からなる請求項１
７に記載の治療方法。
２０．ステロイドを投与する手段がステロイドの摂取を誘発する手段からなる請
求項１７に記載の治療方法。
２１．オキソ基、ヒドロキシ基および加水分解によりそれらに変換し得る基から
なる群から選択されたＣ7置換基を有するΔ５−アンドロステン−３β−オール
−１７−オンからなる群から選択された、ステロイドの有効量を哺乳動物に投与
する手段からなる哺乳動物の免疫系を調節する方法。
２２．ステロイドを哺乳動物に投与する手段がステロイドをヒトに投与する手段
からなる請求項２１記載の治療方法。
２３．ステロイドを投与する手段がステロイドを注射する
手段からなる請求項２１に記載の治療方法。
２４．ステロイドを投与する手段がステロイドの摂取を誘発する手段からなる請
求項２１に記載の治療方法。
２５．オキソ基、ヒドロキシ基および加水分解によりそれらに変換し得る基から
なる群から選択されたＣ7置換基を有するΔ５−アンドロステン−３β−オール
−１７−オンからなる群から選択された、ステロイドの有効量を哺乳動物に投与
する手段からなる低下した哺乳動物の免疫系の抗体応答を剌激する方法。
２６．ステロイドを哺乳動物に投与する手段がステロイドをヒトに投与する手段
からなる請求項２５記載の治療方法。
２７．ステロイドを投与する手段がステロイドを注射する手段からなる請求項２
５に記載の治療方法。
２８．ステロイドを投与する手段がステロイドの摂取を誘発する手段からなる請
求項２５に記載の治療方法。
２９．感染および抗原に対して免疫系を高めるように、手段：
（ａ）オキソ基、ヒドロキシ基および加水分解によりそれらに変換し得る基から
なる群から選択されたＣ7置換基を有するΔ５−アンドロステン−３β−オール
−１７ーオンステロイドの予防上の量を哺乳動物に投与すること；からなる感染
因子および抗原に対する哺乳動物の免疫系応答を増加させる方法。
３０．感染因子はウイルス性のもの、細菌性のもの、真菌
性のもの、寄生体性のもの、べロイド（veroid）およびプリオンを含む請求項２
９記載の治療方法。
３１．感染および抗原に対して免疫系を高めるように、手段：
（ａ）オキソ基、ヒドロキシ基および加水分解によりそれらに変換し得る基から
なる群から選択されたＣ7置換基を有するΔ５−アンドロステン−３β−オール
−１７−オンステロイドの治療上の量をそのような治療を必要としている哺乳動
物に投与すること；からなる感染因子および抗原に対する哺乳動物の免疫系応答
を増加させる方法。
３２．感染因子はウイルス性のもの、細菌性のもの、真菌性のもの、寄生体性の
もの、べロイド（veroid）およびプリオンを含む請求項３１記載の治療方法。
イマー病の退化性作用を遅延させるのに有効である。
上記ステロイドはその他のΔ５−アンドロステンとは異なり、別の性ホルモン
の不所望の産生を剌激せずに、所望の生物学的応答を提示するので、アルツハイ
マー病の治療における使用に特に有効である。
免疫応答
オキソ基、ヒドロキシ基および加水分解によりそれらの基に変換し得る基から
なる群から選択されるＣ7置換基を有するΔ５−アンドロステン−３β−オール
−１７−オンの治療量を投与することにより免疫老化は調節され得る。
上記ステロイドはその他のΔ５−アンドロステンとは異なり、別の性ホルモン
の不所望の産生を剌激せずに、所望の生物学的応答を提示するので、免疫系を調
節するのに特に有効である。
最良の形態を含む発明の詳細な説明
オキソ基、ヒドロキシ基および加水分解によりそれらの基に変換し得る基から
なる群から選択されるＣ7置換基を有するΔ５−アンドロステン−３β−オール
−１７−オンを投与することによりアルツハイマー病および免疫不全失調は有効
に治療され得る。
上記ステロイドは、カルバメート、エナンテートまたはその他のエステル、例
えば腸管、血液および／または体組織内に特定のステロイドを放出し得る誘導体
として投与されてもよい。合成
（１）Δ５−アンドロステン ３β，７−ジオール，１７−オン（７−ヒドロキ
シＤＨＥＡ）
Δ５−アンドロステン ３β，７α−ジオール，１７−オン（７−ヒドロキシ
ＤＨＥＡ）は市販されて利用できるＤＨＥＡアセテート（１０）から連続的合成
方法：
Δ５−アンドロステン−３βヒドロキシ−１７−オンアセテート
Δ５−アンドロステン−３β−ヒドロキシ−７−ブロモ−１７−オン
Δ５−アンドロステン−３β，７α−ヒドロキシ−１７−オンジアセテート
Δ５−アンドロステン−３β，７α−ヒドロキシ−１７−オン
により合成され得る。
Δ５−アンドロステン−３β−ヒドロキシ−７−ブロモ−１７−オン（７−ブ
ロモＤＨＥＡ）はΔ５−アンドロステン ３β−ヒドロキシ−１７−オンアセテ
ート（ＤＨＥＡアセテート）を臭素化剤、例えばジブロマンチン（１，３−ジブ
ロモ５，５−ジメチルヒダントイン）またはＮ−ブロモスクシンイミドと反応さ
せることによりＤＨＥＡアセテートから合成され得る。７−ブロモＤＨＥＡは不
安定であり、そして反応の次の工程にすぐに使用されなければならない。
７α−ブロモＤＨＥＡおよび７β−ブロモＤＨＥＡの
異性体混合物を含有する７−ブロモＤＨＥＡはConfalone，P．N.，Kulesha，I．
D.，およびUskokovic，M．R．Jour．Org．Chem.，vol．46，pp 1030-1032（1981
）にコレステロール誘導体に対して記載された方法に従って７α−ブロモＤＨＥ
Ａに平衡化され得る。要するに、７−ブロモＤＨＥＡのラセミ混合物を冷却無水
ＬｉＢｒと混ぜ、そして光学特異的な組成物が得られるまで光から遮断する。
Δ５−アンドロステン ３β，７−ヒドロキシ−１７−オンジアセテート（７
−ヒドロキシＤＨＥＡジアセテート）は、７−ブロモＤＨＥＡを氷酢酸と粉末酢
酸銀の混合物と室温で適当な溶媒、例えば塩化メチレンまたはアセトン中反応さ
せることにより７−ブロモＤＨＥＡから合成され得る。
Δ５−アンドロステン ３β，７α−ヒドロキシ−１７−オン（７−ヒドロキ
シＤＨＥＡ）は、メタノールに溶解した７−ヒドロキシＤＨＥＡジアセテートを
Ｎａ2ＣＯ3等の適当な塩基を含有する水溶液と反応させることにより７−ヒドロ
キシＤＨＥＡジアセテートから合成され得る。
合成された７−ヒドロキシＤＨＥＡは次いで（ｉ）真空中でメタノールを蒸発
させ、（ii）適当な有機溶媒、例えばジクロロメタン中に７−ヒドロキシＤＨＥ
Ａを抽出し、（iii）真空中で有機溶媒を蒸発させ、（iv）７−ヒドロキシＤＨ
ＥＡを含む抽出された固体を適当な有機
溶媒、例えばエタノールと共沸により乾燥させ、（ｖ）抽出された固体をアセト
ンに溶解させ、次に（vi）適当な沈澱剤、例えばヘキサンを添加してΔ５−アン
ドロステン ３β，７α−ジオール，１７−オン（７−ヒドロキシＤＨＥＡ）の
精製結晶を生成することにより精製され得る。
Δ５−アンドロステン−３β，７α−ジオール−１７−オン（７−ヒドロキシ
ＤＨＥＡ）結晶の第２の収量は得られた溶液を室温以下で冷却することにより得
ることができる。
（２）Δ５−アンドロステン−３β−オール−７，１７−ジオン（７−ケトＤＨ
ＥＡ）
Δ５−アンドロステン−３β−オール−７，１７−ジオンは、下記の連続合成
：
３β−アセトキシ−Δ５−アンドロステン−１７−オン
３β−アセトキシ−Δ５−アンドロステン−７，１７−ジオン
Δ５−アンドロステン−３β−ヒドロキシ−７，１７−ジオン
によって、市販のＤＨＥＡアセテートから合成することができる。
３β−アセトキシ−Δ５−アンドロステン−７，１７−ジオン（７−オキソＤ
ＨＥＡアセテート）は、フィーザー，エル．エフ．（Fieser，L.F.）のJour．Am
．Soc.，Vol.75，pp4386-4394（1953）に記載された方法に従って、ＤＨＥＡア
セテートを酸化剤ＣｒＯ3と反応させることにより、３β−アセトキシ−Δ５−
アンドロステン−１７−オン（ＤＨＥＡアセテート）から合成することができる
。
Δ５−アンドロステン−３β−ヒドロキシ−７，１７−ジオン（７−オンＤＨ
ＥＡ）は、７−オンＤＨＥＡアセテートから合成し、次いで、脱エステル化及び
７−ヒドロキシＤＨＥＡジアセテートからの７−ヒドロキシＤＨＥＡの合成及び
精製に関する上記精製工程を用いて精
製することができる。治療
患者は、摂取又は注射を含む通常受け入れられる操作の何れかにより、本文中
で特定されたステロイドを用いて治療されてよい。一日当たり体重１００ｋｇ当
たりステロイド約０．１ないし２ｇ、好ましくは一日当たり体重１００ｋｇ当た
りステロイド０．５ないし２ｇの投与量での治療が、所望の生物学的応答を誘発
させるために通常有効であると信じられている。体重１００ｋｇ当たり約０．１
ｇ未満の投与量は、所望の生物学的応答を誘発させるために不充分であると通常
信じられており、他方、体重１００ｋｇ当たり約２ｇを越える投与量は、実際上
の相当する利益を与えることなく治療費を増加させると信じられている。患者に
施薬すべき最適投与量は、流動体組成物（脂肪％）、年令等を含む幾つかの因子
に依存する最適投与量としての特定の場合を表わす。
限定的な意味ではなく、我々は、本文中で特定されたステロイドは近似した代
謝産物（類）へのＤＨＥＡの変化の径路に沿った代謝中間体であると信じており
、このことは、アルツハイマー病の治療に対して応用し得る。
患者は、実質的に何れかの所望の計画に基づいて、本文中で特定されたステロ
イドのうちの一種を用いて治療されてよい。しかしながら、ステロイド自体は体
内に蓄積されず、且つ施薬後数時間以内に実質的に除去及び／又は不活性化され
ると信じられている。
したがって、最適な効果のためには、治療を受ける患者は、少なくともほぼ毎
日治療されるべきである。便宜上の理由のために、治療を受ける患者は、最大限
の治療よりも少ない治療が受け入れられる場合には、例えば一日毎に又は一週間
に一度のように頻繁でなく治療されてよい。
投与及び投与量に影響を及ぼす因子は明らかなので、各々の特定患者は注意深
く且つ頻繁に診察されなければならず、そして投与及び／又は投与量は、特定の
症状に基づいて変更される。
実験例
実施例１
合成 Δ５−アンドロステン−３β，７α−ジオール−１７−オン（７−ヒドロキシ ＤＨＥＡ）
（工程１） 第一混合物を形成するために、電磁攪拌機及び還流コンデンサーを
備えた２ｌの三つ口丸底フラスコ内に、ヘキサン１０００ｍｌ（沸点６９−７１
℃）、ＤＨＥＡアセテート１０ｇ（０．０３モル）及びＮａＨＣＯ3１３．６ｇ
（０．１６モル）を入れた。第一混合物をＮ2雰囲気下に置き、次いで一定攪拌
下で還流するまで加熱した。第二溶液を形成するために、還流している第一混合
物に、臭素化試薬としてジブロマンチン（１，３−ジブロモ−５，５−ジメチル
ヒダントイン）６．１１ｇ（０．０２１モル）を添加した。第二溶液は、急速
に淡い白／黄色に変わった後に、徐々に橙色に変わった。第二溶液を３０分間還
流し、室温に冷却し、次いで焼結ガラスロートを通して濾過した。残部をジクロ
ロメタン５０ｍｌで洗浄し、次いで３５℃未満の温度で乾燥するために、混合さ
れた濾液を回転蒸発に付した。乾燥濾液（Δ５−アンドロステン−３β−オール
−７−ブロモ−１７−オン）は貯蔵のためには不安定であり、次いで第２工程で
即座に使用された。
（工程２） 乾燥濾液を、電磁攪拌機を備え且つ氷浴中に置かれた１ｌ栓付きフ
ラスコ内のジクロロメタン８０ｍｌに再溶解した。第三溶液を形成するために、
氷冷アセトン３２０ｍｌ中の無水ＬｉＢｒ８ｇを、再溶解濾液中に添加した。第
三溶液を光から遮蔽し、次いで３時間連続的に攪拌した。主にΔ５−アンドロス
テン−３β−オール−７α−ブロモ−１７−オンを含む得られた溶液は短時間加
温され、次いで第３工程で即座に使用された。
（工程３） 第１懸濁液を形成するために、電磁攪拌機を備えた５００ｍｌフラ
スコ内に、ジクロロメタン３２０ｍｌ、氷酢酸８０ｍｌ、及び酢酸銀２６ｇを入
れた。第１懸濁液を室温で２０分間連続的に攪拌した。第２懸濁液を形成するた
めに、攪拌された第１懸濁液を一定攪拌下で、主にΔ５−アンドロステン−３β
−オール−７α−ブロモ−１７−オンからなる溶液に添加した。第２懸濁液を室
温で３０分間連続して攪拌し、その後、固体フラクションを分離するために、こ
の懸濁液を焼結ガラ
スロートを通して濾過した。濾過した固体フラクションを、ジクロロメタン１０
０ｍｌで洗浄した。濾液を水１０００ｍｌで３回抽出し、残った酢酸を５％Ｎａ
ＨＣＯ3溶液で中和し、次いでジクロロメタン溶液を水で更に２回抽出した。Δ
５−アンドロステン−３β，１７α−ジオール−１７−オンジアセテートを含む
有機溶液を、次いで乾燥させるために回転蒸発に付した。
（工程４） 第４溶液を形成するために、乾燥された抽出固体を、電磁攪拌機及
び還流コンデンサーを備えた１ｌの三つ口フラスコ内のメタノール５００ｍｌに
再溶解した。第４溶液をＮ2雰囲気下に置き、次いで一定攪拌下で還流するまで
加熱した。第５溶液を形成するために、第４溶液にＮａ2ＣＯ3の５％水溶液２５
０ｍｌを添加した。第５溶液を一定攪拌下で４５分間還流した。メタノールを回
転蒸発させて除き、次いで水性の第５溶液を氷酢酸の適量を用いて注意深くｐＨ
７にした。中和した第５溶液を、ジクロロメタン１００ｍｌで抽出した。Δ５−
アンドロステン−３β，７α−ジオール−１７−オンのジクロロメタン溶液を、
ほぼ乾燥させるために回転蒸発に付し、無水エタノールを用いて共沸的に乾燥さ
せ、次いでアセトンを用いて２回共沸的に乾燥させた。第６溶液を形成するため
に、固体が完全に溶解されるまで、乾燥された抽出固体に温アセトンを添加した
。溶液が濁り始めるまで（この時、Δ５−アンドロステン−３β，７α−ジオー
ル−１７−オンの結晶が室温で生成し始め
る）、ヘキサンを第６溶液に添加した。
Δ５−アンドロステン−３β，７α−ジオール−１７−オン結晶の第２回捕集
物は、残った第６溶液を冷却することによって得られた。
生成物は約１８７−１８９℃で融解し、そしてアセトン／ヘキサンから再結晶
された場合には、約１９２−１９３℃で融解した。
実施例II合成
△５−アンドロステン ３β−７（αβ）−ジオール−１７−オン
７αβ−ヒドロキシ ＤＨＥＡ
△５−アンドロステン ３β−７α−ジオール−１７−オンを、段階１からの
乾燥したろ液を段階３のための製造におけるジクロロメタン８０ｍｌ中に単に溶
解するだけによって段階２を省略する以外は、実施例Ｉに記載した方法に従って
製造した。
実施例III合成
△５−アンドロステン ３β−オール−７，１７−ジオン
７αβ−ケト ＤＨＥＡ
（段階１）磁気攪拌機と水浴を備えた５０ｍｌフラスコ中に、無水酢酸６．５
ｇ、酢酸２３ｍｌ、酢酸ナトリウム１．７ｇ及びＤＨＥＡアセテート２ｇを添加
して１番目の混合物を形成した。
１番目の混合物に、三酸化クローム２ｇを３０分間にわたって添加して２番目
の混合物を形成した。１番目の混合物を５６−５８℃の定温に保ち三酸化クロー
ムの添加の間連続的に攪拌した。２番目の混合物を５６−５８℃に保ちそして更
に１時間連続して攪拌し、その後２番
目の混合物を冷却しそして連続的に攪拌しながら氷水６００ｍｌ中にゆっくり注
入して沈澱を形成した。羊毛状の沈澱物を焼付ガラスフィルタ上でろ過し緑色が
消失するまで水で洗浄した。Ｐ2Ｏ5上で減圧下乾燥後、生成物をメタノールに溶
解しそして再結晶して実質的に純粋な、融点約１９１−１９２℃の△５−アンド
ロステン３β−アセトキシ−７，１７−ジオンを取得した。
（段階２）メタノール５００ｍｌに再溶解した上記沈澱物を、磁気攪拌機と還
流凝縮器を付けた１リットル三頸丸底フラスコに入れて３番目の溶液を形成した
。その３番目の溶液をＮ2雰囲気下に置き、定常的な攪拌下還流するために加熱
した。その３番目の溶液にＮａ2ＣＯ3の５％溶液２５０ｍｌを添加して４番目の
溶液を形成した。その４番目の溶液を４５分間にわたり定常的な攪拌下還流する
。メタノールをロータリエバポレータで留去しそして水性の４番目の溶液を適当
量の氷酢酸で注意してｐＨ７にした。中和した４番目の溶液をジクロロメタン１
００ｍｌで２回抽出し、この２回分の抽出液を合わせ、ジクロロメタンを減圧下
留去した。次いで抽出固体を、初めに無水エタノールでそしてアセトンで２回、
共沸乾燥した。メタノールを、乾燥した抽出固体に固体が完全に溶解するまで添
加して５番目の溶液を形成した。ヘキサンを溶液が濁るまで添加するとその時点
で室温で△５−アンドロステン ３β−オール−７，１７−ジオンの結晶が形成
した。
２番目に取得の△５−アンドロステン ３β−オール−７，１７−ジオン結晶
は、残った６番目の溶液を冷却して得られた。
得られた生成物は約２３５−２３８℃の融点を持つ。
実施例IV
△５−アンドロステン ３β−オール−７，１７−ジオン（７−オキソ ＤＨ ＥＡ）の免疫調節効果
順化しそしてソレン−ユニット（Thoren- unit）で育成した１カ月令の３０頭
のＢａｌｂ／ｃマウスを５匹の６群に分け、メトフェイン（Methofane）麻酔下
、逆軌道的（retro-orbitally）に育成し、ワクチン接種前−血清を得た。全群
のための処理と薬量は下記の表１に記載されている。試験に使用されたＤＨＥＡ
は、ニューハンプシャ州，ウィルトン，ステラロイド・インコーポレィテッド（
Ｓｔｅｒａｌｏｉｄｓ Ｉｎｃ．）から入手した。７−オキソ ＤＨＥＡは、実
施例IIIの手順により合成した。
２回処理（／２）を受けるマウスは、１番目の処理をワクチン接種３日前にそ
して２番目の処理をワクチン接種と同時に受けた。他の全ての処理はワクチン接
種と同時に実施された。ワクチンは３種のインフルエンザ混合ワクチン（A/Taiw
an/H3N2/868，A/Panama/HIN1/91，B/Bejing）０．１７ｍｌからなっていた。ワ
クチン接種３週間後にマウスから採血してワクチン接種後一血清を得る。
ワクチン接種前−血清とワクチン接種後−血清中のインフルエンザ抗体濃度の
測定は、エリザ法により、１：１０００、１：４０００と１：１６０００の希釈
倍率で、増加する光学濃度が増加する抗体濃度を示す４０５ｎｍでの光学濃度で
得られる抗体レベルにより測定される。
各群についてのワクチン接種後の光学濃度は希釈倍率により表２（１：１００
０）、表３（１：４０００）、表４（１：１６０００）に記載されている。ワク
チン接種前−血清の光学濃度ベースラインは平均０．０８であって０．００ない
し０．２５の範囲にある。光学濃度のバックグランドは平均０．１である。
ボンフェロニ／ダン分析（Bonferroni/Dunn analysis）を試験結果について行
い、そしてワクチン注射後の抗体と結合した抗原を比較した。この分析の結果は
表２ＢＤ（１：１０００）、表３ＢＤ（１：４０００）および表４ＢＤ（１：１
６０００）に示される。
結論
ＤＨＥＡおよびΔ５−アンドロステン−３β−オール−７，１７−シオン（７
−オキソＤＨＥＡ）は明白な毒性を臨床上誘導しなかった。
台湾 Ａ／ＨｌＮｌへの免疫反応は処理グループ間で最も小さく変化した。健
康なマウスは通常この病原体に良く反応する。従って、通常の免疫反応が通常最
良の免疫性である場合、△５−アンドロステン−３β−オール−７，１７−ジオ
ンによる処理は免疫反応を高めないことが明白となった。
△５−アンドロステン−３β−オール−７，１７−ジオンの反対方向の部位へ
の摂取（contralateral site inJection）はＡ／パナマ／ＨｌＮｌ／９１および
Ｂ／北京病原体への最も大きな反応を生じさせた。健康なマウスは通常この病原
体に良く反応しない。従って、通常の免疫反応が最良の免疫性に満たない場合、
△５−アンドロステン−３β−オール−１，１７−ジオンによる処理は免疫反応
を高めることが明白となった。[Procedure of Amendment] Patent Law Article 184-8 [Submission Date] February 28, 1994 [Amendment Content] Claims 1. Effectiveness of steroids selected from the group consisting of Δ5-androsten-3β-ol-17-one having a C 7 substituent selected from the group consisting of oxo groups, hydroxy groups and groups convertible to them by hydrolysis. A method of treating a mammal with Alzheimer's disease, which comprises administering an amount to the mammal. 2. The treatment method according to claim 1, wherein the means for administering the steroid to a mammal comprises means for administering the steroid to a human. 3. The therapeutic method according to claim 1, wherein the means for administering the steroid comprises a means for injecting the steroid. 4. The therapeutic method according to claim 1, wherein the means for administering the steroid comprises means for inducing the intake of the steroid. 5. A steroid selected from the group consisting of Δ5-androsten-3β-ol-17-one having a C 7 substituent selected from the group consisting of an oxo group, a hydroxy group and a group convertible to them by hydrolysis. A method for delaying degeneration of the central nervous system of a mammal with Alzheimer's disease, which comprises administering an effective amount to the mammal. 6. The treatment method according to claim 5, wherein the means for administering the steroid to a mammal comprises means for administering the steroid to a human. 7. The treatment method according to claim 7, wherein the means for administering the steroid comprises a means for injecting the steroid. 8. The therapeutic method according to claim 5, wherein the means for administering the steroid comprises means for inducing the intake of the steroid. 9. A steroid selected from the group consisting of Δ5-androsten-3β-ol-17-one having a C 7 substituent selected from the group consisting of an oxo group, a hydroxy group and a group convertible to them by hydrolysis. A method of delaying the loss of mental function in a mammal with Alzheimer's disease, which comprises administering a therapeutic amount to the mammal. 10. The method according to claim 9, wherein the means for administering the steroid to a mammal comprises means for administering the steroid to a human. 11. The therapeutic method according to claim 11, wherein the means for administering the steroid comprises means for injecting the steroid. 12. The treatment method according to claim 9, wherein the means for administering the steroid comprises means for inducing the intake of the steroid. 13. A steroid selected from the group consisting of Δ5-androsten-3β-ol-17-one having a C 7 substituent selected from the group consisting of an oxo group, a hydroxy group and a group convertible to them by hydrolysis. A method of delaying short term memory loss in a mammal with Alzheimer's disease, which comprises administering an effective amount to the mammal. 14. The method according to claim 13, wherein the means for administering the steroid to a mammal comprises means for administering the steroid to a human. 15. The therapeutic method according to claim 13, wherein the means for administering the steroid comprises means for injecting the steroid. 16. The therapeutic method according to claim 13, wherein the means for administering the steroid comprises means for inducing the intake of the steroid. 17． A steroid selected from the group consisting of Δ5-androsten-3β-ol-17-one having a C 7 substituent selected from the group consisting of an oxo group, a hydroxy group and a group convertible to them by hydrolysis. A method of delaying the progression of a rheumatoid dysfunction in a mammal with Alzheimer's disease, which comprises administering a therapeutic amount to the mammal. 18. 18. The therapeutic method according to claim 17, wherein the means for administering the steroid to a mammal comprises means for administering the steroid to a human. 19. The treatment method according to claim 17, wherein the means for administering the steroid comprises a means for injecting the steroid. 20. The therapeutic method according to claim 17, wherein the means for administering the steroid comprises means for inducing the intake of the steroid. 21. A steroid selected from the group consisting of Δ5-androsten-3β-ol-17-one having a C 7 substituent selected from the group consisting of an oxo group, a hydroxy group and a group convertible to them by hydrolysis. A method of modulating the immune system of a mammal comprising administering to the mammal an effective amount. 22. 22. The therapeutic method according to claim 21, wherein the means for administering the steroid to a mammal comprises means for administering the steroid to a human. 23. The therapeutic method according to claim 21, wherein the means for administering the steroid comprises means for injecting the steroid. 24. The therapeutic method according to claim 21, wherein the means for administering the steroid comprises means for inducing the intake of the steroid. 25. A steroid selected from the group consisting of Δ5-androsten-3β-ol-17-one having a C 7 substituent selected from the group consisting of an oxo group, a hydroxy group and a group convertible to them by hydrolysis. A method of stimulating a reduced antibody response of the immune system of a mammal comprising administering to the mammal an effective amount. 26. 26. The therapeutic method according to claim 25, wherein the means for administering the steroid to a mammal comprises means for administering the steroid to a human. 27. The treatment method according to claim 25, wherein the means for administering the steroid comprises means for injecting the steroid. 28. 26. The therapeutic method according to claim 25, wherein the means for administering the steroid comprises means for inducing the intake of the steroid. 29. Means to enhance the immune system against infections and antigens: (a) Δ5-androstene having a C 7 substituent selected from the group consisting of oxo groups, hydroxy groups and groups convertible thereto by hydrolysis. Administering to the mammal a prophylactic amount of a -3β-ol-17-one steroid; comprising increasing the immune system response of the mammal to infectious agents and antigens. 30. The treatment method according to claim 29, wherein the infectious agent includes viral, bacterial, fungal, parasitic, veroid and prion. 31. Means to enhance the immune system against infections and antigens: (a) Δ5-androstene having a C 7 substituent selected from the group consisting of oxo groups, hydroxy groups and groups convertible thereto by hydrolysis. Administering a therapeutic amount of a -3β-all-17-one steroid to a mammal in need of such treatment; comprising increasing the immune system response of the mammal to infectious agents and antigens. 32. 32. The method of treatment according to claim 31, wherein the infectious agent comprises viral, bacterial, fungal, parasitic, veroid and prion. It is effective in delaying the degenerative effects of Immer's disease. The steroids, unlike other Δ5-androstenes, are particularly effective for use in the treatment of Alzheimer's disease because they provide the desired biological response without stimulating the unwanted production of another sex hormone. is there. Immune Response Administering a therapeutic amount of Δ5-androsten-3β-ol-17-one having a C 7 substituent selected from the group consisting of oxo groups, hydroxy groups and groups convertible to these groups by hydrolysis. Thereby immune senescence can be regulated. The steroids, unlike other Δ5-androstenes, are particularly effective at modulating the immune system because they provide the desired biological response without stimulating the unwanted production of another sex hormone. is there. DETAILED DESCRIPTION oxo group of the invention, including the best mode, having a C 7 substituent selected from the group consisting of groups that can be converted into these groups by hydroxy groups and hydrolysis Δ5- androsten -3β- ol -17 By administering -one, Alzheimer's disease and immunodeficiency can be effectively treated. The steroids may be administered as carbamates, enanthates or other esters, for example derivatives capable of releasing certain steroids in the intestinal tract, blood and / or body tissues. Synthesis (1) Δ5-androstene 3β, 7-diol, 17-one (7-hydroxy DHEA) Δ5-Androstene 3β, 7α-diol, 17-one (7-hydroxy DHEA) is commercially available DHEA acetate Continuous synthesis method from (10): Δ5-androstene-3β hydroxy-17-one acetate Δ5-androstene-3β-hydroxy-7-bromo-17-one Δ5-androstene-3β, 7α-hydroxy-17- It can be synthesized with ondiacetate Δ5-androstene-3β, 7α-hydroxy-17-one. Δ5-androstene-3β-hydroxy-7-bromo-17-one (7-bromoDHEA) is a brominating agent of Δ5-androstene 3β-hydroxy-17-one acetate (DHEA acetate), such as dibromantine (1,3 -Dibromo 5,5-dimethylhydantoin) or N-bromosuccinimide and can be synthesized from DHEA acetate. 7-Bromo DHEA is unstable and must be used immediately in the next step of the reaction. 7-Bromo DHEA containing an isomer mixture of 7α-bromo DHEA and 7β-bromo DHEA is described in Confalone, P .; N., Kulesha, I. D., and Uskokovic, M. R. Jour. Org. Chem., Vol. 46, pp 1030-1032 (1981) and can be equilibrated to 7α-bromo DHE A according to the method described for cholesterol derivatives. Briefly, the racemic mixture of 7-bromo DHEA is mixed with cold anhydrous LiBr and shielded from light until an optically specific composition is obtained. Δ5-androstene 3β, 7-hydroxy-17-one diacetate (7-hydroxy DHEA diacetate) is a mixture of 7-bromo DHEA with glacial acetic acid and powdered silver acetate in a suitable solvent such as methylene chloride or acetone at room temperature. It can be synthesized from 7-bromo DHEA by reacting. Δ5-androstene 3β, 7α-hydroxy-17-one (7-hydroxy DHEA) is prepared by reacting 7-hydroxy DHEA diacetate dissolved in methanol with an aqueous solution containing a suitable base such as Na 2 CO 3. It can be synthesized from 7-hydroxy DHEA diacetate. The synthesized 7-hydroxy DHEA is then (i) evaporated in vacuo with methanol, (ii) extracted with an appropriate organic solvent such as dichloromethane, 7-hydroxy DHEA, and (iii) the organic solvent in vacuo. Evaporated, (iv) the extracted solid containing 7-hydroxy DH EA is azeotropically dried with a suitable organic solvent such as ethanol, (v) the extracted solid is dissolved in acetone and then (vi) It can be purified by adding a suitable precipitating agent such as hexane to produce purified crystals of Δ5-androstene 3β, 7α-diol, 17-one (7-hydroxy DHEA). A second yield of Δ5-androstene-3β, 7α-diol-17-one (7-hydroxy DHEA) crystals can be obtained by cooling the resulting solution below room temperature. (2) Δ5-Androstene-3β-ol-7,17-dione (7-keto DH EA) Δ5-Androstene-3β-ol-7,17-dione is the following continuous synthesis: 3β-acetoxy-Δ5 -Androsten-17-one 3β-acetoxy-Δ5-androsten-7,17-dione Δ5-Androsten-3β-hydroxy-7,17-dione can be synthesized from commercially available DHEA acetate. 3β-acetoxy-Δ5-androstene-7,17-dione (7-oxoD HEA acetate) is commercially available from Fizer, L .; F. (Fieser, LF) Jour. Am. From 3β-acetoxy-Δ5-androstene-17-one (DHEA acetate) by reacting DHEA acetate with the oxidant CrO 3 according to the method described in Soc., Vol. 75, pp4386-4394 (1953). Can be synthesized. Δ5-Androstene-3β-hydroxy-7,17-dione (7-one DHEA) was synthesized from 7-one DHEA acetate, then deesterified and 7-hydroxy DHEA from 7-hydroxy DHEA diacetate. Can be purified using the above purification steps for the synthesis and purification of Treated patients may be treated with the steroids identified herein by any of the accepted procedures , including ingestion or injection. Treatment with a dose of about 0.1 to 2 g of steroid per 100 kg of body weight per day, preferably 0.5 to 2 g of steroid per 100 kg of body weight per day is usually effective for eliciting the desired biological response. Is believed. It is generally believed that doses less than about 0.1 g / 100 kg body weight are insufficient to elicit the desired biological response, while doses greater than about 2 g / 100 kg body weight are actually It is believed to increase treatment costs without giving the corresponding benefits above. The optimum dose to administer to a patient represents the particular case as an optimum dose depending on several factors including fluid composition (% fat), age and the like. In a non-limiting sense, we believe that the steroids identified in this text are metabolic intermediates along the path of DHEA changes to the close metabolite (s), which indicates that Alzheimer's It can be applied to the treatment of diseases. The patient may be treated with one of the steroids identified herein based on virtually any desired regimen. However, it is believed that the steroid itself does not accumulate in the body and is substantially removed and / or inactivated within hours of administration. Therefore, for optimal effect, the patient to be treated should be treated at least almost daily. For reasons of convenience, the patient to be treated may be treated less frequently, such as daily or weekly, if less than the maximum treatment is acceptable. Each particular patient must be examined carefully and often, as the factors that affect dosing and dosage are clear, and dosing and / or dosing will vary based on the particular condition. Experimental Examples Example 1 Synthesis Δ5-Androstene-3β, 7α-diol-17-one (7- HydroxyDHEA) (Step 1) 2 l of three equipped with a magnetic stirrer and reflux condenser to form the first mixture. 1000 ml of hexane (boiling point 69-71 ° C.), 10 g (0.03 mol) of DHEA acetate and 13.6 g (0.16 mol) of NaHCO 3 were placed in a two-necked round bottom flask. The first mixture was placed under a N 2 atmosphere and then heated to reflux under constant stirring. To the first mixture at reflux was added 6.11 g (0.021 mol) of dibromantine (1,3-dibromo-5,5-dimethylhydantoin) as a brominating reagent to form a second solution. The second solution rapidly turned pale white / yellow and then gradually turned orange. The second solution was refluxed for 30 minutes, cooled to room temperature and then filtered through a sintered glass funnel. The residue was washed with 50 ml of dichloromethane and then the combined filtrate was subjected to rotary evaporation in order to dry at temperatures below 35 ° C. The dried filtrate (Δ5-androstene-3β-ol-7-bromo-17-one) was unstable for storage and then used immediately in the second step. (Step 2) The dried filtrate was redissolved in 80 ml of dichloromethane in a 1 l stoppered flask equipped with a magnetic stirrer and placed in an ice bath. To form a third solution, 8 g of anhydrous LiBr in 320 ml of ice-cold acetone was added into the redissolved filtrate. The third solution was shielded from light and then stirred continuously for 3 hours. The resulting solution containing predominantly Δ5-androstene-3β-ol-7α-bromo-17-one was warmed briefly and then used immediately in the third step. (Step 3) In order to form the first suspension, 320 ml of dichloromethane, 80 ml of glacial acetic acid and 26 g of silver acetate were placed in a 500 ml flask equipped with a magnetic stirrer. The first suspension was continuously stirred at room temperature for 20 minutes. To form the second suspension, the stirred first suspension was added under constant stirring to a solution consisting mainly of Δ5-androsten-3β-ol-7α-bromo-17-one. The second suspension was continuously stirred at room temperature for 30 minutes, after which the suspension was filtered through a sintered glass funnel in order to separate the solid fraction. The filtered solid fraction was washed with 100 ml of dichloromethane. The filtrate was extracted 3 times with 1000 ml of water, the residual acetic acid was neutralized with a 5% NaHCO 3 solution, and then the dichloromethane solution was extracted twice more with water. The organic solution containing Δ 5-androstene-3β, 17α-diol-17-one diacetate was then subjected to rotary evaporation for drying. Step 4 The dried extracted solids were redissolved in 500 ml of methanol in a 1 liter three neck flask equipped with a magnetic stirrer and reflux condenser to form a fourth solution. The fourth solution was placed under N 2 atmosphere and then heated under constant stirring to reflux. To the fourth solution was added 250 ml of a 5% aqueous solution of Na 2 CO 3 to form a fifth solution. The fifth solution was refluxed for 45 minutes under constant stirring. The methanol was removed by rotary evaporation, then the aqueous fifth solution was carefully brought to pH 7 with an appropriate amount of glacial acetic acid. The neutralized fifth solution was extracted with 100 ml of dichloromethane. A solution of Δ5-androstene-3β, 7α-diol-17-one in dichloromethane was rotary evaporated to near dryness, azeotropically dried with absolute ethanol, then co-evaporated twice with acetone. Boiled dry. Warm acetone was added to the dried extracted solids until the solids were completely dissolved to form a sixth solution. Hexane was added to the sixth solution until the solution began to turn cloudy, at which time crystals of Δ5-androstene-3β, 7α-diol-17-one began to form at room temperature. A second collection of Δ5-androstene-3β, 7α-diol-17-one crystals was obtained by cooling the remaining sixth solution. The product melted at about 187-189 ° C and, when recrystallized from acetone / hexane, at about 192-193 ° C. Example II Synthesis Δ5- Androstene 3β-7 (αβ) -diol- 17-one 7αβ-Hydroxy DHEA Δ5- Androstene 3β-7α-diol-17-one was removed from the dried filtrate from step 1 Prepared according to the method described in Example I except omitting step 2 by simply dissolving it in 80 ml of dichloromethane in the preparation for step 3. Example III Synthesis Δ5-Androstene 3β-ol-7,17-dione 7αβ-keto DHEA (Step 1) In a 50 ml flask equipped with a magnetic stirrer and water bath, acetic anhydride 6.5 g, acetic acid 23 ml, sodium acetate The first mixture was formed by adding 1.7 g and 2 g of DHEA acetate. To the first mixture, 2 g of chromium trioxide was added over 30 minutes to form the second mixture. The first mixture was kept at a constant temperature of 56-58 ° C. and continuously stirred during the addition of chromium trioxide. The second mixture was kept at 56-58 ° C. and continuously stirred for another hour, after which the second mixture was cooled and poured slowly into 600 ml of ice water with continuous stirring to form a precipitate. The wooly precipitate was filtered on a baked glass filter and washed with water until the green color disappeared. After drying under reduced pressure over P 2 O 5 , the product was dissolved in methanol and recrystallized to give substantially pure Δ5-androstene 3β-acetoxy-7,17-dione, mp ca. 191-192 ° C. Got (Step 2) The above precipitate redissolved in 500 ml of methanol was placed in a 1 liter three-necked round bottom flask equipped with a magnetic stirrer and a reflux condenser to form a third solution. The third solution was placed under N 2 atmosphere and heated to reflux with constant stirring. To the third solution was added 250 ml of a 5% solution of Na 2 CO 3 to form a fourth solution. The fourth solution is refluxed for 45 minutes with constant stirring. The methanol was distilled off on a rotary evaporator and the aqueous fourth solution was carefully brought to pH 7 with an appropriate amount of glacial acetic acid. The neutralized fourth solution was extracted twice with 100 ml of dichloromethane, and the extracts of the two times were combined, and dichloromethane was distilled off under reduced pressure. The extracted solid was then azeotropically dried first with absolute ethanol and twice with acetone. Methanol was added to the dried extracted solids until the solids were completely dissolved to form a fifth solution. Hexane was added until the solution became cloudy, at which point crystals of Δ5-androstene 3β-ol-7,17-dione formed at room temperature. The second obtained Δ5-androstene 3β-ol-7,17-dione crystal was obtained by cooling the remaining 6th solution. The product obtained has a melting point of about 235-238 ° C. Example IV Δ5-Androstene 3β-ol-7,17-dione (7-oxo DH EA) Immunomodulatory Effect Acclimatized and cultivated in Thoren -unit 30 month old Balb The / c mice were divided into 6 groups of 5 mice, and were cultivated retro-orbitally under anesthesia with Methofane to obtain pre-vaccination-serum. Treatments and dosages for all groups are listed in Table 1 below. The DHEA used in the test was obtained from Steraloids Inc., Wilton, NH. 7-oxo DHEA was synthesized by the procedure of Example III. Mice receiving two treatments (/ 2) received the first treatment 3 days before vaccination and the second treatment at the same time as vaccination. All other treatments were given at the same time as vaccination. The vaccine consisted of 0.17 ml of three influenza mixed vaccines (A / Taiwan / H3N2 / 868, A / Panama / HIN1 / 91, B / Bejing). Three weeks after vaccination, blood is collected from the mice to obtain one serum after vaccination. Pre-vaccination-serum and post-vaccination-measurement of influenza antibody concentration in serum was carried out by the Eliza method at dilution ratios of 1: 1000, 1: 4000 and 1: 16000 to determine the antibody concentration at which the increasing optical density increases. Measured by the antibody level obtained at the optical density shown at 405 nm. The optical density after vaccination for each group is shown in Table 2 (1: 1000), Table 3 (1: 4000) and Table 4 (1: 16000) according to the dilution ratio. Pre-vaccination-the serum optical density baseline averaged 0.08 and ranged from 0.00 to 0.25. The background of optical density is 0.1 on average. A Bonferroni / Dunn analysis was performed on the test results, and the antibody-bound antigen was compared after vaccination. The results of this analysis are shown in Table 2BD (1: 1000), Table 3BD (1: 4000) and Table 4BD (1: 1 6000). Conclusion DHEA and Δ5-androstene-3β-ol-7,17-cyon (7-oxoDHEA) did not clinically induce overt toxicity. The immune response to Taiwan A / H1N1 varied the least among the treatment groups. Healthy mice usually respond well to this pathogen. Thus, it became clear that treatment with Δ5-androstene-3β-ol-7,17-dione did not enhance the immune response when the normal immune response was usually the best immunity. Contralateral site in Jection of Δ5-androstene-3β-ol-7,17-dione produced the greatest response to A / Panama / HlNl / 91 and B / Beijing pathogens. . Healthy mice usually do not respond well to this pathogen. Therefore, it was revealed that the treatment with Δ5-androstene-3β-ol-1,17-dione enhances the immune response when the normal immune response is less than the best immunity.
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，
ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ
Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ
，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，
ＴＤ，ＴＧ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ，
ＣＨ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＨＵ，Ｊ
Ｐ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＵ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ
，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，
ＳＥ，ＳＫ，ＵＡ─────────────────────────────────────────────────── ───
Continued front page
(81) Designated countries EP (AT, BE, CH, DE,
DK, ES, FR, GB, GR, IE, IT, LU, M
C, NL, PT, SE), OA (BF, BJ, CF, CG
, CI, CM, GA, GN, ML, MR, NE, SN,
TD, TG), AT, AU, BB, BG, BR, CA,
CH, CZ, DE, DK, ES, FI, GB, HU, J
P, KP, KR, KZ, LK, LU, MG, MN, MW
, NL, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD,
SE, SK, UA