JPH08332077A - サンプルカップおよび生化学分析装置 - Google Patents
サンプルカップおよび生化学分析装置Info
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- JPH08332077A JPH08332077A JP7140299A JP14029995A JPH08332077A JP H08332077 A JPH08332077 A JP H08332077A JP 7140299 A JP7140299 A JP 7140299A JP 14029995 A JP14029995 A JP 14029995A JP H08332077 A JPH08332077 A JP H08332077A
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- cup
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Abstract
(57)【要約】
【構成】サンプルカップ１中に基質を直接または間接的
に固定し、試料３のサンプルカップ１への注入によって
サンプルカップ１中の基質と試料３中の酵素との反応を
開始させ、一試料につき反応時間の異なる２個の赤外吸
収スペクトルを得て、赤外吸収スペクトルから試料３中
の基質もしくは酵素反応生成物の単位時間当たりの濃度
変化を算出し、試料３中の酵素活性を測定する。 【効果】サンプルカップ中に基質を固定することにより
赤外分光法による酵素活性の測定が可能になった。
に固定し、試料３のサンプルカップ１への注入によって
サンプルカップ１中の基質と試料３中の酵素との反応を
開始させ、一試料につき反応時間の異なる２個の赤外吸
収スペクトルを得て、赤外吸収スペクトルから試料３中
の基質もしくは酵素反応生成物の単位時間当たりの濃度
変化を算出し、試料３中の酵素活性を測定する。 【効果】サンプルカップ中に基質を固定することにより
赤外分光法による酵素活性の測定が可能になった。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はサンプルカップおよび生
化学分析装置に関する。
化学分析装置に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来の自動分析計等で使用されている酵
素活性測定法のうち、例えば、アミラーゼの活性測定法
は、臨床検査法提要，金井泉原著（１９８３年），第７
７２頁から第７７７頁において述べられている。ここで
は血清中に基質である澱粉を加え、ある一定時間恒温で
反応させ、残った基質もしくは酵素−基質反応で生成し
た還元糖の量を比色法によって測定し、アミラーゼ活性
を算出する方法について述べられている。また赤外分光
法と減衰全反射法を用いた血液生化学分析法に関して
は、アプライド スペクトロスコピー（APPLIED SPECTR
OSCOPY）１９９４年，第４８巻，第８５頁から第９５頁
において論じられている。ここでは、ヒト血漿中のグル
コース，総蛋白質，総コレステロール，トリグリセリ
ド，尿素，尿酸の７成分の濃度を赤外分光法によって測
定している。また、赤外分光法による酵素活性の測定に
関しては、バイオキミカ バイオフィジカ アクタ（BI
OCHIMICABIOPHYSICA ACTA)１９９２年，第１１５９巻，
第２３７頁から第２４２頁において述べられている。こ
こではアルカリフォスファターゼの活性を、基質である
パラ−ニトロフェノールフォスフェートの赤外吸収ピー
クの強度測定によって相対的に測定している。
素活性測定法のうち、例えば、アミラーゼの活性測定法
は、臨床検査法提要，金井泉原著（１９８３年），第７
７２頁から第７７７頁において述べられている。ここで
は血清中に基質である澱粉を加え、ある一定時間恒温で
反応させ、残った基質もしくは酵素−基質反応で生成し
た還元糖の量を比色法によって測定し、アミラーゼ活性
を算出する方法について述べられている。また赤外分光
法と減衰全反射法を用いた血液生化学分析法に関して
は、アプライド スペクトロスコピー（APPLIED SPECTR
OSCOPY）１９９４年，第４８巻，第８５頁から第９５頁
において論じられている。ここでは、ヒト血漿中のグル
コース，総蛋白質，総コレステロール，トリグリセリ
ド，尿素，尿酸の７成分の濃度を赤外分光法によって測
定している。また、赤外分光法による酵素活性の測定に
関しては、バイオキミカ バイオフィジカ アクタ（BI
OCHIMICABIOPHYSICA ACTA)１９９２年，第１１５９巻，
第２３７頁から第２４２頁において述べられている。こ
こではアルカリフォスファターゼの活性を、基質である
パラ−ニトロフェノールフォスフェートの赤外吸収ピー
クの強度測定によって相対的に測定している。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】従来の比色法を用いた
酵素活性測定法は、基質及び基質もしくは酵素反応生成
物を発色させるための色素、あるいは基質と色素を結合
させた試薬等を用いるもので、試薬の混入，反応などの
操作が煩雑で測定のコストが高かった。また複数の酵素
を測定する場合、各々の酵素に対して特異的な試薬を用
いて個別に反応させねばならず、分析時間を要した。ま
た従来の赤外分光法による生化学分析は、試薬が不要
で、反応時間を要さず、測定コストが従来の自動分析計
に比較して安いものの、ハード構成に由来する感度不
足，一試料に対して一スペクトルを測定し、スペクトル
から目的成分濃度を測定する測定方式等のため、酵素の
活性を測定することは不可能であった。また従来の赤外
分光法による酵素活性の測定法では、酵素や酵素反応生
成物の赤外吸収ピークとの畳重が無い波長領域にピーク
を持つ基質が存在する酵素のみ活性測定が可能であっ
た。
酵素活性測定法は、基質及び基質もしくは酵素反応生成
物を発色させるための色素、あるいは基質と色素を結合
させた試薬等を用いるもので、試薬の混入，反応などの
操作が煩雑で測定のコストが高かった。また複数の酵素
を測定する場合、各々の酵素に対して特異的な試薬を用
いて個別に反応させねばならず、分析時間を要した。ま
た従来の赤外分光法による生化学分析は、試薬が不要
で、反応時間を要さず、測定コストが従来の自動分析計
に比較して安いものの、ハード構成に由来する感度不
足，一試料に対して一スペクトルを測定し、スペクトル
から目的成分濃度を測定する測定方式等のため、酵素の
活性を測定することは不可能であった。また従来の赤外
分光法による酵素活性の測定法では、酵素や酵素反応生
成物の赤外吸収ピークとの畳重が無い波長領域にピーク
を持つ基質が存在する酵素のみ活性測定が可能であっ
た。
【０００４】本発明の目的は、赤外分光法を用いて酵素
の活性を測定することにより、低コストで、短時間に酵
素活性を測定する生化学分析装置を提供することにあ
る。
の活性を測定することにより、低コストで、短時間に酵
素活性を測定する生化学分析装置を提供することにあ
る。
【０００５】
【課題を解決するための手段】上記課題を解決するため
に、基質を固定化した膜を設置するか、もしくは壁面に
直接基質を固定化したサンプルカップを恒温槽に設置
し、恒温に保持されたサンプルカップ中で試料中の酵素
と基質を反応させ、一試料について反応時間の異なる２
個以上の赤外吸収スペクトルを得、赤外吸収スペクトル
と反応時間差から単位時間当たりの基質もしくは酵素反
応生成物の濃度変化を求めることにより試料中の酵素活
性を測定する。
に、基質を固定化した膜を設置するか、もしくは壁面に
直接基質を固定化したサンプルカップを恒温槽に設置
し、恒温に保持されたサンプルカップ中で試料中の酵素
と基質を反応させ、一試料について反応時間の異なる２
個以上の赤外吸収スペクトルを得、赤外吸収スペクトル
と反応時間差から単位時間当たりの基質もしくは酵素反
応生成物の濃度変化を求めることにより試料中の酵素活
性を測定する。
【０００６】
【作用】サンプルカップに直接あるいは間接的に設置さ
れた酵素基質は、サンプルカップへの試料の注入によっ
て、試料中に含有される酵素との反応を開始する。サン
プルカップ中の試料は、恒温槽によって酵素の最適反応
条件に保たれ速やかな酵素−基質反応を生じ、短時間に
多量の基質が分解されることによって、短時間で酵素反
応による基質もしくは生成物の濃度変化を感度良く検出
できる。また複数の酵素を測定対象とする場合には、そ
れぞれの酵素に特異的な基質を全て一度の測定で反応さ
せることができるため、従来の酵素測定法に比較して分
析時間が大幅に短縮する。また基質もしくは酵素反応生
成物の濃度測定に赤外分光法を用いることにより、従来
の生化学分析計等で使用されていた色素などの試薬を使
うことなく短時間，低コストで酵素活性の測定を行うこ
とができる。
れた酵素基質は、サンプルカップへの試料の注入によっ
て、試料中に含有される酵素との反応を開始する。サン
プルカップ中の試料は、恒温槽によって酵素の最適反応
条件に保たれ速やかな酵素−基質反応を生じ、短時間に
多量の基質が分解されることによって、短時間で酵素反
応による基質もしくは生成物の濃度変化を感度良く検出
できる。また複数の酵素を測定対象とする場合には、そ
れぞれの酵素に特異的な基質を全て一度の測定で反応さ
せることができるため、従来の酵素測定法に比較して分
析時間が大幅に短縮する。また基質もしくは酵素反応生
成物の濃度測定に赤外分光法を用いることにより、従来
の生化学分析計等で使用されていた色素などの試薬を使
うことなく短時間，低コストで酵素活性の測定を行うこ
とができる。
【０００７】
【実施例】図１は本発明の第一の実施例であるサンプル
カップ及び恒温槽の断面図である。本実施例では、アミ
ラーゼ活性測定用のサンプルカップについて述べる。サ
ンプルカップ１には、アミラーゼの基質である澱粉を固
定化した膜２が設置されている。膜２への基質の固定化
は、澱粉溶液に膜２を浸漬し、溶媒を乾燥させることに
よって行う。試料３は膜２を浸す位置までピペットもし
くはシリンジなどによって注入される。試料の注入によ
って膜２内に保持される澱粉は試料中に溶出し、試料に
含有される酵素との反応を開始する。またサンプルカッ
プ１底面には、試料取り出し口４が設けられており、恒
温槽５に設置された試料取り出し用ノズル６にはめ込む
ようにサンプルカップ２を恒温槽５に設置する。
カップ及び恒温槽の断面図である。本実施例では、アミ
ラーゼ活性測定用のサンプルカップについて述べる。サ
ンプルカップ１には、アミラーゼの基質である澱粉を固
定化した膜２が設置されている。膜２への基質の固定化
は、澱粉溶液に膜２を浸漬し、溶媒を乾燥させることに
よって行う。試料３は膜２を浸す位置までピペットもし
くはシリンジなどによって注入される。試料の注入によ
って膜２内に保持される澱粉は試料中に溶出し、試料に
含有される酵素との反応を開始する。またサンプルカッ
プ１底面には、試料取り出し口４が設けられており、恒
温槽５に設置された試料取り出し用ノズル６にはめ込む
ようにサンプルカップ２を恒温槽５に設置する。
【０００８】図２は本発明の第二の実施例のサンプルカ
ップ及び恒温槽の断面図である。サンプルカップ１内の
壁面には、酵素反応の基質７が塗付乾燥によって吸着し
ており、試料３がサンプルカップ１に注入されると試料
中に基質７が溶出し、試料中の酵素との反応を開始す
る。試料を注入されたサンプルカップ１は恒温槽８に設
置される。恒温槽８には蓋９及びポンプ１０，コントロ
ーラ１１，圧力センサ１２が設置されている。蓋９を閉
じることによって密閉された恒温槽内では、ポンプ１０
によるガスの出入によって圧力を変化させることができ
る。恒温槽内の圧力は、圧力センサ１２によって検知さ
れ、コントローラ１１によって所定の圧力に調節され
る。酵素反応速度は、温度の他圧力にも影響を受ける。
迅速な反応を得るために、本実施例では恒温槽８内の圧
力を７kbarとし、温度を４０℃とした。
ップ及び恒温槽の断面図である。サンプルカップ１内の
壁面には、酵素反応の基質７が塗付乾燥によって吸着し
ており、試料３がサンプルカップ１に注入されると試料
中に基質７が溶出し、試料中の酵素との反応を開始す
る。試料を注入されたサンプルカップ１は恒温槽８に設
置される。恒温槽８には蓋９及びポンプ１０，コントロ
ーラ１１，圧力センサ１２が設置されている。蓋９を閉
じることによって密閉された恒温槽内では、ポンプ１０
によるガスの出入によって圧力を変化させることができ
る。恒温槽内の圧力は、圧力センサ１２によって検知さ
れ、コントローラ１１によって所定の圧力に調節され
る。酵素反応速度は、温度の他圧力にも影響を受ける。
迅速な反応を得るために、本実施例では恒温槽８内の圧
力を７kbarとし、温度を４０℃とした。
【０００９】図３は本発明の第三の実施例であるサンプ
ルカップの断面図である。本実施例のサンプルカップ
は、アミラーゼ及びアルカリフォスファターゼを分析す
るためのものである。サンプルカップ１中に設置された
膜１３にはアミラーゼの基質である澱粉が、膜１４には
アルカリフォスファターゼの基質であるパラ−ニトロフ
ェノールフォスフェートが固定化されている。サンプル
カップ１に試料４を注入すると、膜１３，１４に固定化
されていた基質が試料中に溶出し、試料に含有されるア
ミラーゼ，アルカリフォスファターゼとそれぞれ反応す
る。
ルカップの断面図である。本実施例のサンプルカップ
は、アミラーゼ及びアルカリフォスファターゼを分析す
るためのものである。サンプルカップ１中に設置された
膜１３にはアミラーゼの基質である澱粉が、膜１４には
アルカリフォスファターゼの基質であるパラ−ニトロフ
ェノールフォスフェートが固定化されている。サンプル
カップ１に試料４を注入すると、膜１３，１４に固定化
されていた基質が試料中に溶出し、試料に含有されるア
ミラーゼ，アルカリフォスファターゼとそれぞれ反応す
る。
【００１０】図４は本発明の一実施例の生化学分析装置
のブロック図である。本生化学分析装置は、サンプルカ
ップ１，恒温槽５，洗浄液ボトル１５，分光器部１６，
送液機構１７，廃液ボトル１８からなる測定部１９と測
定部１９の動作を制御部２０を介して指示するコンピュ
ータ部２１に大きく分けることができる。
のブロック図である。本生化学分析装置は、サンプルカ
ップ１，恒温槽５，洗浄液ボトル１５，分光器部１６，
送液機構１７，廃液ボトル１８からなる測定部１９と測
定部１９の動作を制御部２０を介して指示するコンピュ
ータ部２１に大きく分けることができる。
【００１１】分光器部１６は、フーリエ変換分光法によ
りスペクトルを測定する構成である。また試料セルには
減衰全反射プリズムセル２２が用いられている。測定者
は、サンプルカップ１に試料を一定量注入し、３７℃に
制御された恒温槽５に設置する。測定者はキーボード，
マウス等の操作部２３を通してコンピュータ２１に測定
開始を指示する。コンピュータ２１は制御部２０を介し
て、第１回目の試料３のセル２２への送液及びインター
フェログラムの測定を送液機構１７及び分光器部１６に
指示する。インターフェログラムの測定後セルの洗浄を
行い、所定の時間が経過したら２回目のセルへの試料の
送液及びインターフェログラムの測定が行われる。
りスペクトルを測定する構成である。また試料セルには
減衰全反射プリズムセル２２が用いられている。測定者
は、サンプルカップ１に試料を一定量注入し、３７℃に
制御された恒温槽５に設置する。測定者はキーボード，
マウス等の操作部２３を通してコンピュータ２１に測定
開始を指示する。コンピュータ２１は制御部２０を介し
て、第１回目の試料３のセル２２への送液及びインター
フェログラムの測定を送液機構１７及び分光器部１６に
指示する。インターフェログラムの測定後セルの洗浄を
行い、所定の時間が経過したら２回目のセルへの試料の
送液及びインターフェログラムの測定が行われる。
【００１２】２個のインターフェログラムは、それぞれ
ＡＤ変換器２４によってそれぞれデジタル信号に変換さ
れ、コンピュータ２１の演算部でフーリエ変換によりス
ペクトルに変換される。スペクトルは、コンピュータ２
１の主メモリに測定時刻とともに格納される。主メモリ
に格納された２個のスペクトルは、外部メモリ２５に記
憶されていた検量式に入力され、酵素活性が算出され
る。測定者は、ＣＲＴもしくはプリンタ等の表示部２６
に出力された酵素活性の値を読み取ることができる。
ＡＤ変換器２４によってそれぞれデジタル信号に変換さ
れ、コンピュータ２１の演算部でフーリエ変換によりス
ペクトルに変換される。スペクトルは、コンピュータ２
１の主メモリに測定時刻とともに格納される。主メモリ
に格納された２個のスペクトルは、外部メモリ２５に記
憶されていた検量式に入力され、酵素活性が算出され
る。測定者は、ＣＲＴもしくはプリンタ等の表示部２６
に出力された酵素活性の値を読み取ることができる。
【００１３】測定終了後サンプルカップ１は手動もしく
は機械的に恒温槽５から除去され、送液機構１７によっ
て洗浄液ボトル１５の洗浄液が減衰全反射プリズムセル
２２に送液され、試料流路及び減衰全反射プリズム表面
の洗浄が行われる。洗浄の終了後、洗浄液は、送液機構
１７によって廃液ボトル１８に送液される。
は機械的に恒温槽５から除去され、送液機構１７によっ
て洗浄液ボトル１５の洗浄液が減衰全反射プリズムセル
２２に送液され、試料流路及び減衰全反射プリズム表面
の洗浄が行われる。洗浄の終了後、洗浄液は、送液機構
１７によって廃液ボトル１８に送液される。
【００１４】図５は図４で示した生化学分析装置で一試
料について測定した反応時間の異なる２個の赤外吸収ス
ペクトルから酵素活性を測定するための校正方法のフロ
ーを示したものである。
料について測定した反応時間の異なる２個の赤外吸収ス
ペクトルから酵素活性を測定するための校正方法のフロ
ーを示したものである。
【００１５】ｎ個の測定対象物質２７に測定対象の酵素
に特異的な基質２８を添加して作成したｎ個の標準液か
らなる標準液群２９を構成する。本発明と同型の試料セ
ル及び分光器で各標準液の赤外吸収スペクトル３０を測
定し、他方各標準液中の基質濃度３１を比色法等で正確
に測定する。各標準液の赤外吸収スペクトルで、基質に
特異的なピークを持つ波数領域の吸光度を説明変数３
２，比色法によって測定した各標準液中の基質濃度を目
的変数３３として、重回帰分析、もしくは主成分分析、
もしくはパーシャル リースト スクエア(Partial Lea
st Squares）等の多変量解析を用いた検量法により校正
（３４）し、検量式３５を算出する。
に特異的な基質２８を添加して作成したｎ個の標準液か
らなる標準液群２９を構成する。本発明と同型の試料セ
ル及び分光器で各標準液の赤外吸収スペクトル３０を測
定し、他方各標準液中の基質濃度３１を比色法等で正確
に測定する。各標準液の赤外吸収スペクトルで、基質に
特異的なピークを持つ波数領域の吸光度を説明変数３
２，比色法によって測定した各標準液中の基質濃度を目
的変数３３として、重回帰分析、もしくは主成分分析、
もしくはパーシャル リースト スクエア(Partial Lea
st Squares）等の多変量解析を用いた検量法により校正
（３４）し、検量式３５を算出する。
【００１６】試料をサンプルカップに注入（３６）し、
恒温槽に設置し、すぐに試料セルに試料を送液し第一の
試料スペクトル３７を測定する。さらに第一スペクトル
３７の測定後ｍ分後に、試料をサンプルカップから新た
に送液し第二の赤外吸収スペクトル３８を測定する。３
７，３８の２個のスペクトルの上記校正（３４）に使用
した波数領域の吸光度を検量式３５に代入し、それぞれ
の測定時間での１〜ｑの基質濃度３９，４０を算出す
る。さらに２個の基質濃度の差とスペクトルの測定時間
の差から酵素活性４１を算出する。
恒温槽に設置し、すぐに試料セルに試料を送液し第一の
試料スペクトル３７を測定する。さらに第一スペクトル
３７の測定後ｍ分後に、試料をサンプルカップから新た
に送液し第二の赤外吸収スペクトル３８を測定する。３
７，３８の２個のスペクトルの上記校正（３４）に使用
した波数領域の吸光度を検量式３５に代入し、それぞれ
の測定時間での１〜ｑの基質濃度３９，４０を算出す
る。さらに２個の基質濃度の差とスペクトルの測定時間
の差から酵素活性４１を算出する。
【００１７】また基質添加２８で基質の代わりに酵素反
応生成物を添加し、酵素反応生成物の測定を行うための
標準液群を構成し、スペクトル３７，３８から酵素反応
生成物の濃度を測定することにより酵素活性を測定する
校正法も可能である。
応生成物を添加し、酵素反応生成物の測定を行うための
標準液群を構成し、スペクトル３７，３８から酵素反応
生成物の濃度を測定することにより酵素活性を測定する
校正法も可能である。
【００１８】図６は図４で示した生化学分析装置によ
り、一試料中の複数の酵素の活性を同時測定するため
の、校正方法のフローである。複数の酵素を同時測定す
るためには、第三の実施例に示したような各種の基質を
固定した膜を層状に重ねたものをサンプルカップに設置
して用いる。ｑ種類の酵素の活性を測定する場合、各酵
素に特異的なｑ種類の基質４２（基質１，基質２…，基
質ｑ）を混ぜたものをｎ個の測定対象物質２７にそれぞ
れ添加し、標準液群２９とする。
り、一試料中の複数の酵素の活性を同時測定するため
の、校正方法のフローである。複数の酵素を同時測定す
るためには、第三の実施例に示したような各種の基質を
固定した膜を層状に重ねたものをサンプルカップに設置
して用いる。ｑ種類の酵素の活性を測定する場合、各酵
素に特異的なｑ種類の基質４２（基質１，基質２…，基
質ｑ）を混ぜたものをｎ個の測定対象物質２７にそれぞ
れ添加し、標準液群２９とする。
【００１９】上記各標準液の赤外吸収スペクトル３０を
前記実施例と同型の試料セル及び分光器で測定する。一
方、各標準液中の基質１〜ｑの濃度を比色法等で正確に
測定（４３）する。
前記実施例と同型の試料セル及び分光器で測定する。一
方、各標準液中の基質１〜ｑの濃度を比色法等で正確に
測定（４３）する。
【００２０】各標準液の赤外吸収スペクトルにおいて、
基質１〜ｑに特異的なピークを持つ波数領域の吸光度を
説明変数４４（Ｘ１，Ｘ２…，Ｘｑ），比色法によって
測定した各標準液中の１〜ｑの基質濃度を目的変数４５
（ｙ１，ｙ２…，ｙｑ）として、重回帰分析、もしくは
主成分分析、もしくはPartial Least Squares 等の多変
量解析を用いた検量法により校正（３４）し、１〜ｑの
基質に関する検量式４６（ｆ１（ｘ），ｆ２（ｘ）…，
ｆｑ（ｘ））を算出する。
基質１〜ｑに特異的なピークを持つ波数領域の吸光度を
説明変数４４（Ｘ１，Ｘ２…，Ｘｑ），比色法によって
測定した各標準液中の１〜ｑの基質濃度を目的変数４５
（ｙ１，ｙ２…，ｙｑ）として、重回帰分析、もしくは
主成分分析、もしくはPartial Least Squares 等の多変
量解析を用いた検量法により校正（３４）し、１〜ｑの
基質に関する検量式４６（ｆ１（ｘ），ｆ２（ｘ）…，
ｆｑ（ｘ））を算出する。
【００２１】試料をサンプルカップに注入（３６）し、
恒温槽に設置し、すぐに試料セルに試料を送液し第一の
試料スペクトル３７を測定する。さらに第一スペクトル
３７の測定後ｍ分後に、試料をサンプルカップから新た
に送液し第二の赤外吸収スペクトル３８を測定する。３
７，３８の２個のスペクトルの上記校正に使用した波数
領域の吸光度を検量式４６に代入し、それぞれの測定時
間での１〜ｑの基質濃度４７，４８を算出する。さらに
各基質に対して２個算出された濃度の差とスペクトルの
測定時間の差から酵素活性４９が算出される。
恒温槽に設置し、すぐに試料セルに試料を送液し第一の
試料スペクトル３７を測定する。さらに第一スペクトル
３７の測定後ｍ分後に、試料をサンプルカップから新た
に送液し第二の赤外吸収スペクトル３８を測定する。３
７，３８の２個のスペクトルの上記校正に使用した波数
領域の吸光度を検量式４６に代入し、それぞれの測定時
間での１〜ｑの基質濃度４７，４８を算出する。さらに
各基質に対して２個算出された濃度の差とスペクトルの
測定時間の差から酵素活性４９が算出される。
【００２２】図７は本発明の図４で示した生化学分析装
置及び図５の校正方法を用いて血清中のアミラーゼ活性
を測定した結果を示したものである。基質として可溶性
澱粉をセルロース膜に固定化しサンプルカップ中に設置
した。赤外分光法によって試料中の澱粉濃度の単位当た
りの変化量を測定し、アミラーゼの活性に換算したもの
を縦軸とし、同じ試料を日立７２５０形自動分析装置で
測定した値を横軸とした。２個の赤外吸収スペクトルの
測定時間の差は５分とした。２法の相関係数は０.９９
と良好であり、本発明により血清中の酵素活性が色素な
どの試薬を使用することなく短時間で低コストで測定す
ることができた。
置及び図５の校正方法を用いて血清中のアミラーゼ活性
を測定した結果を示したものである。基質として可溶性
澱粉をセルロース膜に固定化しサンプルカップ中に設置
した。赤外分光法によって試料中の澱粉濃度の単位当た
りの変化量を測定し、アミラーゼの活性に換算したもの
を縦軸とし、同じ試料を日立７２５０形自動分析装置で
測定した値を横軸とした。２個の赤外吸収スペクトルの
測定時間の差は５分とした。２法の相関係数は０.９９
と良好であり、本発明により血清中の酵素活性が色素な
どの試薬を使用することなく短時間で低コストで測定す
ることができた。
【００２３】
【発明の効果】本発明によれば、従来の比色法を用いた
酵素活性測定法に比較して、短時間かつ低コストで酵素
活性を測定することができる。
酵素活性測定法に比較して、短時間かつ低コストで酵素
活性を測定することができる。
【図１】本発明の第一の実施例のサンプルカップ及び恒
温槽の断面図。
温槽の断面図。
【図２】本発明の第二の実施例のサンプルカップ及び恒
温槽の断面図。
温槽の断面図。
【図３】本発明の第三の実施例のサンプルカップの断面
図。
図。
【図４】本発明のサンプルカップを用いた生化学分析装
置のブロック図。
置のブロック図。
【図５】本発明のサンプルカップを用いた生化学分析装
置で使用する検量式の校正方法のフローチャート。
置で使用する検量式の校正方法のフローチャート。
【図６】本発明のサンプルカップを用いた生化学分析装
置で使用する検量式の校正方法のフローチャート。
置で使用する検量式の校正方法のフローチャート。
【図７】本発明の効果を表した測定図。
１…サンプルカップ、２…膜、３…試料、４…試料取り
出し口、５…恒温槽、６…試料取り出し用ノズル。
出し口、５…恒温槽、６…試料取り出し用ノズル。
Claims (9)
- 【請求項１】液体試料を入れるためのサンプルカップで
あって、前記サンプルカップ中に酵素反応の基質となる
物質を固定化した膜を保持することを特徴とするサンプ
ルカップ。 - 【請求項２】液体試料を入れるためのサンプルカップで
あって、前記サンプルカップの試料に接触する壁面に酵
素反応の基質となる物質を固定化したことを特徴とする
サンプルカップ。 - 【請求項３】１種類の酵素に対する基質を一枚の膜に固
定化し、複数の酵素に対応する各種の基質の膜を層状に
重ねてサンプルカップ中に設置したことを特徴とするサ
ンプルカップ。 - 【請求項４】恒温槽と前記恒温槽に着脱が可能な請求項
１または２に記載のサンプルカップを有する生化学分析
装置。 - 【請求項５】光源，試料送液機構，試料セル，検出器及
びデータ処理用のコンピュータを含む赤外分光計であっ
て、試料送液機構の先端あるいは中途に請求項３に記載
の前記恒温槽及び請求項１または２に記載の前記サンプ
ルカップを有する生化学分析装置。 - 【請求項６】請求項１に記載の前記膜は、セルロース，
ガラス繊維，合成高分子繊維から構成される繊維膜であ
るかもしくは孔径１.５μｍ 以上のメッシュであるサン
プルカップ。 - 【請求項７】請求項３に記載の前記恒温槽は、前記恒温
槽内の圧力を変化させる機構を備えた生化学分析装置。 - 【請求項８】請求項１，２または３に記載のサンプルカ
ップと、減衰全反射プリズムを有する試料セルと、サン
プルカップ中の試料液を上記試料セル中に導く送液手段
を有してなる生化学分析装置。 - 【請求項９】請求項７に記載の前記減衰全反射プリズム
セルは、減衰全反射プリズムの材質がセレン化亜鉛，ゲ
ルマニウム，シリコン，サファイアからなる生化学分析
装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7140299A JPH08332077A (ja) | 1995-06-07 | 1995-06-07 | サンプルカップおよび生化学分析装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7140299A JPH08332077A (ja) | 1995-06-07 | 1995-06-07 | サンプルカップおよび生化学分析装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08332077A true JPH08332077A (ja) | 1996-12-17 |
Family
ID=15265563
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7140299A Pending JPH08332077A (ja) | 1995-06-07 | 1995-06-07 | サンプルカップおよび生化学分析装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH08332077A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007044052A (ja) * | 2003-09-02 | 2007-02-22 | Expressive Constructs Inc | 合成チモーゲンを用いるシグナル増幅 |
-
1995
- 1995-06-07 JP JP7140299A patent/JPH08332077A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007044052A (ja) * | 2003-09-02 | 2007-02-22 | Expressive Constructs Inc | 合成チモーゲンを用いるシグナル増幅 |
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